TW202308703A - 用於降解免疫球蛋白及其他蛋白質之有效asgpr結合化合物 - Google Patents

用於降解免疫球蛋白及其他蛋白質之有效asgpr結合化合物 Download PDF

Info

Publication number
TW202308703A
TW202308703A TW111116735A TW111116735A TW202308703A TW 202308703 A TW202308703 A TW 202308703A TW 111116735 A TW111116735 A TW 111116735A TW 111116735 A TW111116735 A TW 111116735A TW 202308703 A TW202308703 A TW 202308703A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
alkyl
compound
compound according
seq
extracellular protein
Prior art date
Application number
TW111116735A
Other languages
English (en)
Inventor
馬克 喬治 蘇尼爾
陳景陽
司李妮維紗 卡拉
凱文 泰勒 史璞特
傑森 艾倫 威爾斯
索米雅 瑞
Original Assignee
美商亞維拉治療公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商亞維拉治療公司 filed Critical 美商亞維拉治療公司
Publication of TW202308703A publication Critical patent/TW202308703A/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

本發明提供胞外蛋白質降解劑及組合物，其具有有效去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)結合配體，該結合配體結合至胞外蛋白質靶向配體以用於在活體內使目標胞外蛋白質(例如免疫球蛋白)選擇性降解，從而治療由該胞外蛋白質介導之病症。

Description

用於降解免疫球蛋白及其他蛋白質之有效ASGPR結合化合物
本發明提供胞外蛋白質降解劑及組合物，其具有有效去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)結合配體，該結合配體結合至胞外蛋白質靶向配體以用於在活體內使目標胞外蛋白質(例如免疫球蛋白或其他胞外蛋白質)選擇性降解，從而治療由該蛋白質介導之病症。
以引用方式併入創建於2022年4月29日且大小為106.2 KB的命名為「19121-007WO1_SequenceListing_ST26」的文本文件之內容在此以全文引用之方式併入。
歷史上，用於抑制蛋白質之治療策略採用小分子抑制劑，其在酶口袋中或在異位位置處進行結合。彼等非酶蛋白質難以控制，且一些被視為「無藥可靶向」。然而，許多非酶蛋白質由於其在信號傳導路徑中之作用仍為藥物開發之重要目標。免疫球蛋白由於其在整個身體中信號傳導免疫反應之作用而代表重要的非酶藥物目標。
去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)為一種Ca 2+依賴性凝集素，其主要在實質肝細胞中表現。ASGPR之主要作用為藉由介導去唾液酸化糖蛋白之胞吞來幫助調節血清糖蛋白含量。受體與具有末端半乳糖或N-乙醯基半乳胺糖之配體結合。去唾液酸糖蛋白結合至ASGPR，且隨後藉由受體介導之胞吞經清除。受體及蛋白質在酸性胞內隔室中解離，且蛋白質最終由溶酶體降解。描述ASGPR機制之各種利用的公開案包括：讓與給Pfizer Inc.之美國專利第9,340,553號、第9,617,293號、第10,039,778號、第10,376,531號及第10,813,942號；Sanhueza等人( JACS, 2017, 139, 3528)；Petrov等人( Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2018, 28, 382)；讓與給Pfizer Inc.及Wave Life Sciences Ltd.之WO 2018/223073及WO2018/223081；讓與給Wave Sciences Ltd.之WO 2018/223056；Schmidt等人( Nucleic Acids Research, 2017, 45, 2294)；Huang等人( Bioconjugate Chem.2017, 28, 283)；讓與給耶魯大學(Yale University)之WO 2019/199621、WO 2019/199634、WO 2021/072246及WO 2021/072269；讓與給小利蘭斯坦福大學董事會(The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University)之WO2020/132100；Banik等人( Nature, 2020, 584, 291)；及發佈於自然化學生物學雜誌(journal Nature Chemical Biology)中的來自Bertozzi團隊之論文，其名稱為「LYTACs that engage the asialoglycoprotein receptor for targeted protein degradation」(Ahn等人Nat. Chem. Biol. (2021))。
儘管已在胞外蛋白質之靶向降解領域中取得一些進展，但仍需要用於使胞外蛋白質降解以治療由彼等蛋白質介導之病症的額外治療性化合物以及其使用及製造方法。
本文提供使目標胞外蛋白質(例如IgG、IgA、IgE、TNF-α、因子XIa、補體因子D、補體因子B或如下文所描述之其他蛋白質)降解的新穎胞外蛋白質降解劑及其醫藥學上可接受之鹽及其組合物，以及此類胞外蛋白質降解劑之起始物質及中間體，及其使用及製造方法。本發明之胞外蛋白質降解劑含有藉由連接子共價連接至胞外蛋白質靶向配體之ASGPR結合配體。用於本文所描述之降解劑中的ASGPR結合配體包括六碳吡喃糖部分之衍生物，特定言之半乳糖及塔羅糖(talose)。下方展示的此兩種糖僅在C 2取代基之立體化學方面不同。「向下」的C 2構型對應於半乳糖之立體化學，而呈「向上」構型之C 2取代基對應於塔羅糖之立體化學。已發現，此兩種糖之C 2位置處之某些取代基改良配體ASGPR之結合。
Figure 02_image001
在本發明之一些態樣中，胞外蛋白質靶向配體靶向免疫球蛋白，例如IgG、IgA或IgE。
本文所描述之免疫球蛋白降解化合物藉由經由特定連接基團將所選免疫球蛋白之配體連接至有效ASGPR結合劑而使目標免疫球蛋白(例如IgG或IgA)降解。在本發明之一個實施例中，所選免疫球蛋白降解劑使IgG降解。
在一些實施例中，其他胞外蛋白質可如下文進一步所描述降解。舉例而言，在非限制性的說明性實施例中，本文中一般所描述之所選胞外蛋白質可例如在相關時使用圖1至圖7之所選靶向配體或其他已知靶向配體來靶向。
在本發明之一些態樣中，胞外蛋白質降解劑使用3:1或2:1比率之ASGPR結合配體與胞外蛋白質靶向配體。藉由使用多個ASGPR結合配體，降解劑可更緊密地結合ASGPR且因此可具有增加之降解功效。
在本發明之其他態樣中，本發明之胞外蛋白質降解劑具有1:1比率之ASGPR結合配體與胞外蛋白質靶向配體。在一些態樣中，胞外蛋白質降解劑在C 2位置處包括對ASGPR具有高結合效率之雜芳基胺取代基。利用此等新近發現之取代基，配體具有足夠的ASGPR結合功效，使得能夠在1:1比率之ASGPR結合配體與胞外蛋白質靶向配體的情況下使分子降解。
雖然用以治療與胞外蛋白質相關之疾病的傳統醫學化學方法由於其胞外循環、尺寸及/或缺乏活性位點而失敗，但本發明之胞外蛋白質降解劑可藉由將目標胞外蛋白質運輸至肝細胞而使該蛋白質降解。在一些實施例中，此等免疫球蛋白降解劑之特徵為對ASGPR具有高結合親和力之所選ASGPR配體(參見表4A及4B之非限制性實例)。由於此高ASGPR結合親和力，相較於先前所揭示之免疫球蛋白降解劑，本發明之胞外蛋白質降解劑通常可以較低劑量投與，具有較少副作用、降低之副作用、增加之功效、較快治療效果、較長代謝穩定性及/或較長治療效益。
在本發明之一些態樣中，提供免疫球蛋白G (IgG)之選擇性降解劑。在某些實施例中，此等免疫球蛋白降解劑具有Fc結合肽，如Fc-III及Fc-BP2或其衍生物。Fc結合肽結合IgG之Fc部分且因此促進IgG選擇性募集至肝細胞以進行降解。舉例而言，在某些實施例中，免疫球蛋白降解劑為：
Figure 02_image003
或其醫藥學上可接受之鹽。
在其他實施例中，此等免疫球蛋白降解劑具有小分子或非肽IgG靶向配體。小分子IgG靶向配體之非限制性實例包括：
Figure 02_image005
。
在本發明之一些態樣中，本發明之IgG降解劑使用2:1比率之ASGPR結合配體與胞外蛋白質靶向配體。
在本發明之其他態樣中，本發明之IgG降解劑具有1:1比率之ASGPR結合配體與IgG結合配體。舉例而言，在某些實施例中，免疫球蛋白降解劑為：
Figure 02_image007
或其醫藥學上可接受之鹽。
當本發明用於治療已知主要由IgG引起之疾病，諸如甲狀腺眼病、重症肌無力、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、溫抗體型自體免疫溶血性貧血或1型自體免疫胰臟炎時，IgG之選擇性靶向可為特別有益的。
在某些態樣中，提供由IgG介導之病症之治療，其包含向患者投與有效量的IgG降解劑或其醫藥學上可接受之鹽。在某些實施例中，IgG病症係選自抗磷脂Ab症候群、Behcet症候群、橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis)、MGUS、壞死性黃肉芽腫、類風濕性關節炎、癌症(例如多發性骨髓瘤或外周多發性骨髓瘤)、副蛋白血症、慢性蕁麻疹、硬皮病、硬化性黏液水腫、血小板減少症(例如肝素誘導之血小板減少症)、冷球蛋白血症、肉芽腫病伴多血管炎(例如ANCA相關血管炎)、特發性血小板減少性紫癜症、血小板減少症、IgG4-RD、陣發性夜間血紅素尿症(PNH)、溫抗體型自體免疫溶血性貧血、橫紋肌溶解、狼瘡性腎炎、急性彌漫性腦脊髓炎、格巴二氏症候群(Guillaine-Barre syndrome)、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、米勒費雪症候群(Miller Fisher syndrome)、視神經脊髓炎譜系病症、斜視眼陣攣肌陣攣症候群、鏈球菌感染相關性兒童自體免疫神經精神障礙(PANDAS)、周邊神經病變、橫貫性脊髓炎、纖維化、IPF/纖維化及移植排斥反應。
在本發明之其他態樣中，提供一種免疫球蛋白A (IgA)之選擇性降解劑。在某些實施例中，免疫球蛋白降解劑具有來自Opt類別之肽的IgA靶向配體。Opt類別之配體對IgA具有高選擇性且因此促進IgA選擇性募集至肝細胞以進行降解。舉例而言，在某些實施例中，免疫球蛋白降解劑為：
Figure 02_image009
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明之一些態樣中，IgA降解劑使用2:1比率之ASGPR結合配體與IgA結合配體。
在本發明之其他態樣中，本發明之IgA降解劑具有1:1比率之ASGPR結合配體與IgA結合配體。舉例而言，在某些實施例中，免疫球蛋白降解劑為：
Figure 02_image011
當本發明用於治療已知主要由IgA引起之疾病，諸如Henoch-Schönlein二氏紫癜症(亦稱為IgA血管炎)時，IgA之選擇性靶向可為特別有益的。由IgA介導之額外病症包括冷球蛋白血症、肉芽腫病伴多血管炎、血小板減少症、周邊神經病變、MGUS、IgA腎病、Henoch Schönlein二氏紫癜症。
本文所描述之免疫球蛋白降解劑可用於治療由免疫球蛋白(例如IgG或IgA)介導之病症，包括(例如)自體免疫病症、其他免疫功能障礙、異常細胞增殖(諸如腫瘤及癌症)、血液學相關病症、腎臟病症、過敏性病況或肝臟病症。在本發明之某些態樣中，提供一種用於治療由免疫球蛋白介導之病症的方法，其包括向有需要之宿主投與有效量的本文所描述之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、N-氧化物，及/或視情況於醫藥學上可接受之載劑中的其醫藥學上可接受之組合物。
雖然用以治療與免疫球蛋白相關之疾病的傳統醫學化學方法由於其較大尺寸、胞外循環及/或缺乏活性位點而失敗，但本發明之免疫球蛋白降解劑可使經靶向之免疫球蛋白降解。在一些實施例中，此等免疫球蛋白降解劑之特徵為對ASGPR具有高結合親和力之新近發現的ASGPR配體(參見表4)。由於此高ASGPR結合親和力，相較於先前所揭示之免疫球蛋白降解劑，本發明之免疫球蛋白降解劑可以較低劑量投與，具有較少副作用、增加之功效、較快治療效果、較長代謝穩定性及/或降低之副作用。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物使TNF-α降解。舉例而言，在某些實施例中，本發明化合物為：
Figure 02_image013
在某些實施例中，TNF-α靶向配體係選自：
Figure 02_image015
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物使因子XIa降解。舉例而言，在某些實施例中，本發明化合物為：
Figure 02_image017
在某些實施例中，因子XIa靶向配體係選自：
Figure 02_image019
在另一態樣中，提供式I、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII或式VIII之ASGPR結合配體：
Figure 02_image021
Figure 02_image023
或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： R 1及R 5獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 3在每次出現時獨立地選自氫、烷基、雜烷基、鹵烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環、-OR 8及-NR 8R 9； R 6及R 7在每次出現時獨立地選自氫、雜烷基、烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、鹵烷基、雜芳基、雜環、-烷基-OR 8、-烷基-NR 8R 9、C(O)R 3、S(O)R 3、C(S)R 3及S(O) 2R 3； R 8及R 9在每次出現時獨立地選自氫、雜烷基、烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基及雜環； R 10係選自氫、烷基、雜烷基、鹵烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環、C(O)R 3、S(O)R 3、C(S)R 3及S(O) 2R 3； R 25係選自由以下組成之群：雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 65、R 66及R 67獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 68、R 69及R 70獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3、雜芳基、芳基及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代；且 當化合物「視情況經取代」時，其可在價數允許之情況下經一或多個選自以下之基團取代：烷基(包括C 1-C 4烷基)、烯基(包括C 2-C 4烯基)、炔基(包括C 2-C 4炔基)、鹵烷基(包括C 1-C 4鹵烷基)、-OR 6、F、Cl、Br、I、-NR 6R 7、雜烷基、雜環、雜芳基、芳基、氰基、硝基、羥基、疊氮基、醯胺、-SR 3、-S(O)(NR 6)R 3、-NR 8C(O)R 3、-C(O)NR 6R 7、-C(O)OR 3、-C(O)R 3、-SF 5、
Figure 02_image025
Figure 02_image027
，其中視情況選用之取代基經選擇以使得產生穩定化合物。
在某些實施例中，ASGPR結合配體係選自：
Figure 02_image029
或其醫藥學上可接受之鹽。
在替代態樣中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image031
； 或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，提供式IX、式X或式XI之胞外蛋白質降解化合物：
Figure 02_image033
其中 ASPGR結合配體為選自以下之化合物：
Figure 02_image035
其中R 1或R 5經連至連接子 A之鍵置換，且所有其他變數如本文所定義； 連接子 A為將連接子 B、連接子 C或連接子 D共價連接至ASGPR結合配體之鍵或部分； 連接子 B為將連接子 A共價連接至胞外蛋白質靶向配體之鍵或部分； 連接子 C為將各連接子 A連接至胞外蛋白質靶向配體之化學基團； 連接子 D為將各連接子 A連接至胞外蛋白質靶向配體之化學基團；且 胞外蛋白質靶向配體為結合至胞外蛋白質之配體。
在某些態樣中，提供式IX-A、式X-A或式XI-A之免疫球蛋白降解化合物：
Figure 02_image037
或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： 免疫球蛋白靶向配體為結合至免疫球蛋白(例如IgG或IgA)之配體。
在某些實施例中，ASGPR結合配體為選自以下之化合物：
Figure 02_image039
Figure 02_image041
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，本發明之胞外蛋白質降解劑以具有其量高於同位素之天然豐度的原子之至少一個所需同位素取代的同位素增濃胞外蛋白質降解劑(例如免疫球蛋白降解劑)之形式提供。舉例而言，氘可置換胞外蛋白質降解劑中之一或多個氫，且 13C可置換一或多個碳原子。在一個實施例中，同位素置換位於ASGPR配體之一或多個位置中。在另一實施例中，同位素置換位於分子之連接子部分之一或多個位置中。在另一實施例中，同位素置換位於分子之胞外蛋白質靶向配體部分之一或多個位置中。
本發明因此包括至少以下特徵： (i)    一種本文所描述之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、N-氧化物及/或如本文所描述之其醫藥組合物； (ii)   一種本文所描述之胞外蛋白質降解劑，其用於治療與免疫球蛋白相關之醫學病症，諸如自體免疫病症、其他免疫功能障礙、血液學相關病症、腎臟病症、過敏性病況或肝臟病症； (iii)  一種本文所描述之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、N-氧化物及/或醫藥組合物之同位素增濃衍生物； (iv)   一種用於製造藥劑之方法，該藥劑意欲用於治療或預防由胞外蛋白質介導之病症之治療用途，該方法之特徵在於在製造中使用本文所描述之胞外蛋白質降解劑； (v)    一種呈純或實質上純形式(例如至少90%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%或99.9%)的上文所描述之胞外蛋白質降解劑或如本文所描述之其鹽； (vi)   一種本文所描述之胞外蛋白質降解劑，其用以治療本文所描述之病症； (vii)  一種用於製造本文所描述之胞外蛋白質降解劑的方法； (viii) 一種本文所描述之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、N-氧化物及/或如本文所描述之其醫藥組合物； (ix)   一種本文所描述之免疫球蛋白降解劑，其用於治療與免疫球蛋白相關之醫學病症，諸如自體免疫病症、其他免疫功能障礙、血液學相關病症、腎臟病症、過敏性病況或肝臟病症； (x)    一種本文所描述之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、N-氧化物及/或醫藥組合物之同位素增濃衍生物； (xi)   一種用於製造藥劑之方法，該藥劑意欲用於治療或預防由免疫球蛋白介導之病症之治療用途，該方法之特徵在於在製造中使用本文所描述之免疫球蛋白降解劑； (xii)  一種呈純或實質上純形式(例如至少90%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%或99.9%)的上文所描述之免疫球蛋白降解劑或如本文所描述之其鹽； (xiii) 一種本文所描述之免疫球蛋白降解劑，其用以治療本文所描述之病症； (xiv) 一種用於製造本文所描述之免疫球蛋白降解劑的方法；及 (xv)  一種本文所描述之ASGPR結合配體。
相關申請案之交叉參考本申請案主張2022年4月15日提交之美國臨時申請案第63/331,592號、2021年12月23日提交之美國臨時申請案第63/293,447號、2021年7月31日提交之美國臨時申請案第63/228,067號及2021年5月3日提交之美國臨時申請案第63/183,450號的權益。此等申請案中之各者的全部內容出於所有目的在此以引用之方式併入。
提供了使目標胞外蛋白質(例如IgG)降解的新穎胞外蛋白質降解劑及其醫藥學上可接受之鹽及其組合物，以及此類胞外蛋白質降解劑之起始物質及中間體，及其使用及製造方法。此等胞外蛋白質降解劑為ASGPR及其各別胞外蛋白質目標之高度有效結合劑。一些本發明之胞外蛋白質降解劑使用高結合性的ASGPR結合配體。此針對ASGPR之結合親和力增加會產生相比於先前已知的胞外蛋白質降解劑具有各種優點的胞外蛋白質降解劑。舉例而言，當與其他胞外蛋白質降解劑相比時，本發明之胞外蛋白質降解劑可以較低劑量、較低頻率給藥，具有較小副作用及/或具有增加之效力。在一些實施例中，併有如本文所描述之高結合性ASGPR配體中之一者的胞外蛋白質降解劑在呈單牙化合物(亦即，治療性分子中胞外蛋白質配體與ASGPR配體為1:1)形式時可具有足夠的活性。
在某些實施例中，胞外蛋白質降解化合物使免疫球蛋白降解。本文所描述之免疫球蛋白降解劑藉由經由所選連接基團將所選免疫球蛋白之配體共價結合至有效ASGPR結合劑而使所選免疫球蛋白降解。根據本發明可靶向之免疫球蛋白包括(但不限於) IgA、IgG、IgD、IgE及IgM及其突變體。在本發明之某些態樣中，所選免疫球蛋白降解劑使IgG降解。
I. 化合物術語使用標準命名法來描述胞外蛋白質降解劑。除非另外定義，否則本文所用的所有技術及科學術語具有與熟習本發明所屬技術者通常所理解相同的含義。
除非上下文另外指明或另外排除，否則本文所描述之所有胞外蛋白質降解劑獨立地包括鏡像異構物、鏡像異構物混合物、非鏡像異構物、互變異構物、外消旋物及其他異構物，諸如旋轉異構物，如同各者經特定描述一般。
術語「一(a/an)」不表示數量之限制，而是表示存在所提項目中之至少一者。術語「或」意謂「及/或」。除非本文另外指明，否則數值範圍之敍述僅意欲充當個別提及屬於該範圍內之各獨立值之速記方法，且各獨立值併入本說明書中，如同其在本文中個別敍述一般。所有範圍之端點均包括於該範圍內且可獨立地組合。除非本文另外指示或另外與上下文明顯矛盾，否則本文所描述之所有方法均可以任何適合之次序進行。除非另外主張，否則實例或例示性語言(例如「諸如」)的使用僅旨在更好地說明本發明且對本發明之範疇不構成限制。除非另外定義，否則本文中所用之技術及科學術語均具有與熟習本發明所屬技術者通常所理解相同的含義。
本發明包括具有其量高於同位素之天然豐度(亦即增濃)的原子之至少一個所需同位素取代的胞外蛋白質降解劑。
可併入本發明之胞外蛋白質降解劑中的同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如 2H、 3H、 11C、 13C、 14C、 15N、 17O、 18O、 18F、 31P、 32P、 35S、 36Cl及 125I。在一個實施例中，經同位素標記之胞外蛋白質降解劑可用於代謝研究(使用例如 14C)；反應動力學研究(使用例如 2H或 3H)；偵測或成像技術，諸如正電子發射斷層攝影術(PET)或單光子發射電腦斷層攝影術(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析；或用於患者之放射性治療。經同位素標記的本發明之胞外蛋白質降解劑及其前藥通常可藉由實施下文所描述之流程中或實例及製備中所揭示之程序，藉由用可容易獲得的經同位素標記之試劑代替未經同位素標記之試劑來製備。
藉助於一般實例且不受其限制，可在所描述結構中達成所要結果之任何位置視情況使用氫同位素，例如氘( 2H)及氚( 3H)。替代地或另外，可使用碳同位素，例如 13C及 14C。在一個實施例中，同位素取代係藉由在分子上之一或多個位置處用氘置換氫來實現，從而改良藥物效能，例如藥效學、藥物動力學、生物分佈、半衰期、穩定性、AUC、T max、C max等。舉例而言，氘可在代謝期間在鍵斷裂之位置結合至碳(α-氘動力學同位素效應)或緊靠或靠近鍵斷裂位點處結合至碳(β-氘動力學同位素效應)。
同位素取代，例如氘取代可為部分的或完全的。部分同位素取代意謂至少一個氫經氘取代。在某些實施例中，在所關注之任何位置處的同位素中，該同位素增濃80%、85%、90%、95%或99%或更高。在某些實施例中，氘在所需位置增濃80%、85%、90%、95%或99%。除非另外說明，否則任一點處的增濃高於天然豐度，且在一實施例中，足以改變藥物在人體中之可偵測特性。
本發明之胞外蛋白質降解劑可與溶劑(包括水)形成溶劑合物。因此，在一個實施例中，本發明包括活性胞外蛋白質降解劑之溶劑化形式。術語「溶劑合物」係指本發明之胞外蛋白質降解劑(包括其鹽)與一或多個溶劑分子之分子複合物。溶劑之非限制性實例為水、乙醇、二甲亞碸、丙酮及其他常見有機溶劑。術語「水合物」係指包含本發明之胞外蛋白質降解劑及水的分子複合物。根據本發明之醫藥學上可接受之溶劑合物包括其中結晶之溶劑可經同位素取代之彼等溶劑合物，例如D 2O、d 6-丙酮、d 6-DMSO。溶劑合物可呈液體或固體形式。
「劑型」意謂活性劑之投與單元。劑型之實例包括錠劑、膠囊、注射液、懸浮液、液體、乳液、植入物、粒子、球粒、乳膏、軟膏、栓劑、可吸入形式、經皮形式、經頰、舌下、局部、凝膠、黏膜、植入物及其類似形式。
「醫藥組合物」為包含至少一種活性劑及至少一種其他物質(諸如載劑)的組合物。本發明包括所描述之胞外蛋白質降解劑之醫藥組合物。
「醫藥組合」為至少兩種活性劑之組合，該等活性劑可合併於單一劑型中或在各別劑型中一起提供。
「醫藥學上可接受之鹽」為所揭示之胞外蛋白質降解劑之衍生物，其中母體胞外蛋白質降解劑藉由製備其無機及有機的醫藥學上可接受之酸或鹼加成鹽而改性。本發明之胞外蛋白質降解劑之鹽可藉由習知化學方法由含有鹼性或酸性部分之母體胞外蛋白質降解劑合成。一般而言，此類鹽可藉由使此等胞外蛋白質降解劑之游離酸形式與化學計算量之適當鹼(諸如Na、Ca、Mg或K之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應，或藉由使此等胞外蛋白質降解劑之游離鹼形式與化學計算量之適當酸反應來製備。該等反應通常在水中或在有機溶劑中或在兩者之混合物中進行。本發明之胞外蛋白質降解劑之鹽進一步包括胞外蛋白質降解劑及胞外蛋白質降解劑鹽之溶劑合物。
醫藥學上可接受之鹽的實例包括(但不限於)鹼性殘基(諸如胺)之無機酸鹽或有機酸鹽；酸性殘基(諸如羧酸)之鹼金屬鹽或有機鹽；及其類似鹽。醫藥學上可接受之鹽包括人類食用可接受的鹽及例如由無機酸或有機酸形成之母體胞外蛋白質降解劑之四級銨鹽。該等鹽之實例包括衍生自無機酸的鹽及由有機酸或使用產生相同相對離子之酸製備的鹽，該等無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、胺磺酸、磷酸、硝酸及其類似酸；該等有機酸諸如乙酸、丙酸、丁二酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、順丁烯二酸、羥基順丁烯二酸、苯乙酸、麩胺酸、苯甲酸、水楊酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對胺基苯磺酸、2-乙醯氧基苯甲酸、反丁烯二酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙基磺酸、HOOC-(CH 2) 1-4-COOH及其類似酸。其他適合鹽之清單可見於例如 Remington's Pharmaceutical Sciences, 第17版, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 第1418頁(1985)。
應用於本發明之醫藥組合物/組合的術語「載劑」係指藉以提供活性胞外蛋白質降解劑之稀釋劑、賦形劑或媒劑。
「醫藥學上可接受之賦形劑」意謂適用於製備醫藥組合物/組合的賦形劑，其對於人類食用而言一般係安全、可接受的，且對於向宿主(通常為人類)投與而言既無生物學不當、亦無其他不當。在一個實施例中，使用獸醫學用途可接受的賦形劑。
「患者」或「宿主」或「個體」為需要治療或預防如本文特定描述之病症中之任一者的人類或非人類動物。通常，宿主、患者或個體為人類。「患者」或「宿主」或「個體」亦指例如哺乳動物、靈長類動物(例如人類)、牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠、鳥類及其類似動物。
本發明之胞外蛋白質降解劑、醫藥組合物或組合之「治療有效量」意謂在向宿主投與時提供諸如改善疾病症狀或減輕或減弱疾病自身之治療效益的量。
在一個實施例中，氫原子對氘原子之取代發生在任何可變基團中。舉例而言，當任何可變基團例如經由取代為或含有甲基、乙基或甲氧基時，烷基殘基可經氘化(在非限制性實施例中，CDH 2、CD 2H、CD 3、CD 2CD 3、CHDCH 2D、CH 2CD 3、CHDCHD 2、OCDH 2、OCD 2H或OCD 3等)。在某些其他實施例中，可變基團具有「'」或「a」標識，其在一個實施例中可經氘化。在某些其他實施例中，當中央核心環的兩個取代基組合而形成環丙基環時，未經取代之亞甲基碳可經氘化。
術語「免疫球蛋白」通常係指一種大型的Y形蛋白質(例如抗體)，其識別及中和外來化合物或外物，諸如病原體或疾病組織。免疫球蛋白蛋白質之非限制性實例包括IgA、IgD、IgE、IgG及IgM。如本文所使用之免疫球蛋白亦可包括如熟習此項技術者已知之結合片段。
不在兩個字母或符號之間的短劃(「-」)用於指示取代基之連接點。舉例而言，-(C=O)NH 2經由酮基(C=O)之碳連接。
如本文所使用，術語「取代」意謂指定原子或基團上之任何一或多個氫經選自指定基團之部分置換，其限制條件為不超過指定原子的正常價數且所得化合物係穩定的。舉例而言，當取代基為側氧基(亦即=O)時，則該原子上的兩個氫經置換。舉例而言，經側氧基取代之吡啶基為吡啶酮。取代基及/或變數之組合為容許的，只要該等組合產生穩定化合物或有用的合成中間體即可。
「烷基」為支鏈、直鏈或環狀飽和脂族烴基。在一個實施例中，烷基含有1至約12個碳原子，更一般而言，1至約6個碳原子、1至約4個碳原子或1至3個碳原子。在一個實施例中，烷基含有1至約8個碳原子。在某些實施例中，烷基為C 1-C 2、C 1-C 3、C 1-C 4、C 1-C 5或C 1-C 6。如本文所使用之指定範圍指示被認為明確揭示為個別物種之烷基，該範圍內之各成員經描述為獨特物種。舉例而言，如本文所使用之術語C 1-C 6烷基指示具有1、2、3、4、5或6個碳原子之直鏈或支鏈烷基，以及具有3、4、5或6個碳原子之碳環烷基，且意欲意謂將此等烷基中之各者描述為獨立物種。舉例而言，如本文所使用之術語C 1-C 4烷基指示具有1、2、3或4個碳原子之直鏈或支鏈烷基，且意欲意謂將此等烷基中之各者描述為獨立物種。當C 0-C n烷基在本文中與另一基團結合使用時，例如(C 3-C 7環烷基)C 0-C 4烷基或-C 0-C 4烷基(C 3-C 7環烷基)，指定基團(在此情況下為環烷基)係藉由單一共價鍵(C 0烷基)直接結合或利用烷基鏈(在此情況下為1、2、3或4個碳原子)連接。烷基亦可經由其他基團(諸如雜原子)連接，如在-O-C 0-C 4烷基(C 3-C 7環烷基)中。烷基之實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、異戊基、三級戊基、新戊基、正己基、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、2,2-二甲基丁烷、2,3-二甲基丁烷及己基。
除非上下文明確地排除，否則當使用包括「alk」之術語時，應理解「環烷基」或「碳環」可被視為定義之一部分。舉例而言而非限制，除非由上下文明確排除，否則術語烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷醯基、烯氧基、鹵烷基等可皆視為包括烷基的環狀形式。
「烯基」為具有一或多個碳-碳雙鍵之支鏈或直鏈脂族烴基，該等雙鍵可出現於沿著鏈的穩定點。非限制性實例為C 2-C 8烯基、C 2-C 7烯基、C 2-C 6烯基、C 2-C 5烯基及C 2-C 4烯基。如本文所用之指定範圍指示描述為獨立物種的具有該範圍內之各成員的烯基，如上文針對烷基部分所描述。烯基之實例包括(但不限於)乙烯基及丙烯基。
「炔基」為具有一或多個碳-碳參鍵的支鏈或直鏈脂族烴基，該等參鍵可出現於沿著鏈的任何穩定點，例如C 2-C 8炔基或C 2-C 6炔基。如本文所用之指定範圍指示描述為獨立物種的具有該範圍內之各成員的炔基，如上文針對烷基部分所描述。炔基之實例包括(但不限於)乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基及5-己炔基。
「烷氧基」為經由氧橋(-O-)共價結合的如上文所定義之烷基。烷氧基之實例包括(但不限於)甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、2-丁氧基、三級丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、正己氧基、2-己氧基、3-己氧基及3-甲基戊氧基。類似地，「烷硫基」或「硫烷基」為經由硫橋(-S-)共價結合的具有指定數目個碳原子的如上文所定義之烷基。在一個實施例中，烷氧基視情況如上文所描述經取代。
「鹵烷基」指示經1個或更多個鹵素原子(直多最大可允許數目個鹵素原子)取代之支鏈及直鏈烷基。鹵烷基之實例包括(但不限於)三氟甲基、單氟甲基、二氟甲基、2-氟乙基及五氟乙基。
「芳基」指示芳環中僅含有碳的芳族基團。在一個實施例中，芳基含有1至3個單獨環或稠環，且具有6至14或18個環原子，但無雜原子作為環成員。術語「芳基」包括其中飽和或部分不飽和碳環基團與芳環稠合之基團。術語「芳基」亦包括飽和或部分不飽和雜環基團與芳環稠合之基團，只要連接點為芳環即可。該等化合物可包括與4至7員或5至7員飽和或部分不飽和環狀基團稠合的芳基環，該環狀基團視情況含有1、2或3個獨立地選自N、O、B、P、Si及S之雜原子，以形成例如3,4-亞甲基二氧基苯基。芳基包括例如苯基及萘基，包括1-萘基及2-萘基。在一個實施例中，芳基為側接的。側接環之實例為經苯基取代之苯基。
術語「雜環」係指飽和及部分飽和的含雜原子環基，其中雜原子可選自N、S及O。術語「雜環」包括單環3至12員環以及雙環5至16員環系統(其可包括稠環、橋連環或螺環、雙環系統)。其不包括含有-O-O-或-S-S-部分之環。飽和雜環基團之實例包括含有1至4個氮原子之飽和4至7員單環基團[例如吡咯啶基、咪唑啶基、哌啶基、吡咯啉基、氮雜環丁烷基、哌𠯤基及吡唑啶基]；含有1至2個氧原子及1至3個氮原子之飽和4至6員單環基團[例如𠰌啉基]；含有1至2個硫原子及1至3個氮原子之飽和3至6員雜單環基團[例如噻唑啶基]。部分飽和雜環基團之實例包括(但不限於)二氫噻吩基、二氫哌喃基、二氫呋喃基及二氫噻唑基。部分飽和及飽和雜環基團之實例包括(但不限於)吡咯啶基、咪唑啶基、哌啶基、吡咯啉基、吡唑啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、四氫哌喃基、噻唑啶基、二氫噻吩基、2,3-二氫-苯并[l,4]二㗁烷基、吲哚啉基、異吲哚啉基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并呋喃基、異𠳭烷基、𠳭烷基、1,2-二氫喹啉基、1,2,3,4-四氫-異喹啉基、1,2,3,4-四氫-喹啉基、2,3,4,4a,9,9a-六氫-lH-3-氮雜-茀基、5,6,7-三氫-l,2,4-三唑并[3,4-a]異喹啉基、3,4-二氫-2H-苯并[l,4]㗁𠯤基、苯并[l,4]二㗁烷基、2,3-二氫-lH-lλ'-苯并[d]異噻唑-6-基、二氫哌喃基、二氫呋喃基及二氫噻唑基。「雙環雜環」包括其中雜環基團與芳基稠合之基團，其中連接點為雜環。「雙環雜環」亦包括與碳環基團稠合或橋連之雜環基團。舉例而言，含有1至5個氮原子之部分不飽和縮合雜環基團，例如吲哚啉、異吲哚啉；含有1至2個氧原子及1至3個氮原子之部分不飽和縮合雜環基團；含有1至2個硫原子及1至3個氮原子之部分不飽和縮合雜環基團；及含有1至2個氧原子或硫原子之飽和縮合雜環基團。
雙環雜環之非限制性實例包括：
Figure 02_image045
Figure 02_image047
。
除非另外繪製或自上下文顯而易見，否則術語「雙環雜環」包括順式及反式非鏡像異構物。對掌性雙環雜環之非限制性實例包括：
Figure 02_image049
。
在某些替代實施例中，術語「雜環」係指飽和及部分飽和的含雜原子環基，其中雜原子可選自N、S、O、B、Si及P。
「雜芳基」係指含有1至3個或在一些實施例中含有1、2或3個選自N、O、S、B或P (且通常選自N、O及S)之雜原子且其餘環原子為碳的穩定單環、雙環或多環芳環，或含有至少一個5、6或7員芳環(該芳環含有1至3個或在一些實施例中1至2個選自N、O、S、B或P之雜原子且其餘環原子為碳)的穩定雙環或三環系統。在一個實施例中，唯一雜原子為氮。在一個實施例中，唯一雜原子為氧。在一個實施例中，唯一雜原子為硫。單環雜芳基通常具有5或6個環原子。在一些實施例中，雙環雜芳基為8至10員雜芳基，亦即含有8或10個環原子之基團，其中一個5、6或7員芳環與第二芳環或非芳環稠合，其中連接點為芳環。當雜芳基中S及O原子之總數超過1時，此等雜原子互不相鄰。在一個實施例中，雜芳基中S及O原子之總數不超過2。在另一實施例中，芳族雜環中之S及O原子之總數不超過1。雜芳基之實例包括(但不限於)吡啶基(包括例如2-羥基吡啶基)、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基(包括例如4-羥基嘧啶基)、吡唑基、三唑基、吡𠯤基、呋喃基、噻吩基、異㗁唑基、噻唑基、㗁二唑基、㗁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、四氫異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、㖕啉基、吲唑基、吲哚𠯤基、呔𠯤基、嗒𠯤基、三𠯤基、異吲哚基、喋啶基、嘌呤基、㗁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋呫基、苯并呋呫基、苯并苯硫基、苯并噻唑基、苯并㗁唑基、喹唑啉基、喹喏啉基、㖠啶基、四氫呋喃基及呋喃并吡啶基。雜芳基視情況獨立地經一或多個本文所描述之取代基取代。「雜芳基氧基」為經由氧、-O-、連接子結合至其所取代之基團的如所描述之雜芳基。
「雜芳基烷基」為經如本文所描述之雜芳基取代的如本文所描述之烷基。
「芳基烷基」為經如本文所描述之芳基取代的如本文所描述之烷基。
「雜環烷基」為經如本文所描述之雜環基團取代的如本文所描述之烷基。
術語「雜烷基」係指如本文所定義之烷基、烯基、炔基或鹵烷基部分，其中CH 2基團經雜原子置換或碳原子經雜原子取代，例如胺、羰基、羧基、側氧基、硫基、磷酸酯、膦酸酯、氮、磷、矽或硼。在一個實施例中，唯一雜原子為氮。在一個實施例中，唯一雜原子為氧。在一個實施例中，唯一雜原子為硫。在一個實施例中，「雜烷基」用於指示具有1至20個碳原子之雜脂族基(環狀、非環狀、經取代、未經取代、支鏈或非支鏈)。雜烷基部分之非限制性實例為聚乙二醇、聚伸烷二醇、醯胺、聚醯胺、聚乳酸交酯(polylactide)、聚乙交酯、硫醚、醚、烷基-雜環-烷基、-O-烷基-O-烷基、烷基-O-鹵烷基等。
當化合物「視情況經取代」時，其可在價數允許之情況下經選自以下之基團取代：烷基(包括C 1-C 4烷基)、烯基(包括C 2-C 4烯基)、炔基(包括C 2-C 4炔基)、鹵烷基(包括C 1-C 4鹵烷基)、-OR 6、F、Cl、Br、I、-NR 6R 7、雜烷基、氰基、硝基、C(O)R 3、
Figure 02_image051
，其中視情況選用之取代基經選擇以使得產生穩定化合物。舉例而言，
Figure 02_image053
可經1或2個獨立地選自以下之基團取代：烷基、烯基、炔基、鹵烷基、-OR 6、F、Cl、Br、I、-NR 6R 7、雜烷基、氰基、硝基、C(O)R 3，只要產生穩定化合物；但僅經一個選自以下之基團取代：
Figure 02_image055
，只要產生穩定化合物。另一方面，
Figure 02_image057
可僅經1或2個選自
Figure 02_image059
Figure 02_image061
之基團取代。
視情況經取代之CH 2基團之非限制性實例包括：
Figure 02_image063
。
視情況經取代之-S-基團之非限制性實例包括：
Figure 02_image065
。
「烷基」之實施例在一個實施例中，「烷基」為C 1-C 10烷基、C 1-C 9烷基、C 1-C 8烷基、C 1-C 7烷基、C 1-C 6烷基、C 1-C 5烷基、C 1-C 4烷基、C 1-C 3烷基或C 1-C 2烷基。
在一個實施例中，「烷基」具有一個碳。
在一個實施例中，「烷基」具有兩個碳。
在一個實施例中，「烷基」具有三個碳。
在一個實施例中，「烷基」具有四個碳。
在一個實施例中，「烷基」具有五個碳。
在一個實施例中，「烷基」具有六個碳。
「烷基」之非限制性實例包括：甲基、乙基、丙基、丁基、戊基及己基。
「烷基」之額外非限制性實例包括：異丙基、異丁基、異戊基及異己基。
「烷基」之額外非限制性實例包括：二級丁基、二級戊基及二級己基。
「烷基」之額外非限制性實例包括：三級丁基、三級戊基及三級己基。
「烷基」之額外非限制性實例包括：新戊基、3-戊基及活性戊基。
在一替代實施例中，「烷基」視情況經取代。
在一替代實施例中，「烯基」視情況經取代。
在一替代實施例中，「炔基」視情況經取代。
「鹵烷基」之實施例在一個實施例中，「鹵烷基」為C 1-C 10鹵烷基、C 1-C 9鹵烷基、C 1-C 8鹵烷基、C 1-C 7鹵烷基、C 1-C 6鹵烷基、C 1-C 5鹵烷基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3鹵烷基及C 1-C 2鹵烷基。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有一個碳。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有一個碳及一個鹵素。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有一個碳及兩個鹵素。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有一個碳及三個鹵素。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有兩個碳。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有三個碳。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有四個碳。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有五個碳。
在一個實施例中，「鹵烷基」具有六個碳。
「鹵烷基」之非限制性實例包括：
Figure 02_image067
。
「鹵烷基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image069
Figure 02_image071
。
「鹵烷基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image073
。
「鹵烷基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image075
。
「雜芳基」之實施例5員「雜芳基」之非限制性實例包括吡咯、呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三唑、異㗁唑、㗁唑、㗁二唑、㗁三唑、異噻唑、噻唑、噻二唑及噻三唑。
5員「雜芳基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image077
Figure 02_image079
。
在一個實施例中，「雜芳基」為含有1、2或3個氮原子之6員芳族基團(亦即，吡啶基、嗒𠯤基、三𠯤基、嘧啶基及吡𠯤基)。
具有1或2個氮原子之6員「雜芳基」之非限制性實例包括：
Figure 02_image081
Figure 02_image083
。
在一個實施例中，「雜芳基」為含有1或2個選自氮、氧及硫之原子的9員雙環芳族基團。
雙環「雜芳基」之非限制性實例包括吲哚、苯并呋喃、異吲哚、吲唑、苯并咪唑、氮雜吲哚、氮雜吲唑、嘌呤、異苯并呋喃、苯并噻吩、苯并異㗁唑、苯并異噻唑、苯并㗁唑及苯并噻唑。
雙環「雜芳基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image085
。
雙環「雜芳基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image087
。
雙環「雜芳基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image089
。
在一個實施例中，「雜芳基」為含有1或2個選自氮、氧及硫之原子的10員雙環芳族基團。
雙環「雜芳基」之非限制性實例包括喹啉、異喹啉、喹喏啉、呔𠯤、喹唑啉、㖕啉及㖠啶。
雙環「雜芳基」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image091
。
「雜環」之實施例在一個實施例中，「雜環」係指具有一個氮及3、4、5、6、7或8個碳原子之環狀環。
在一個實施例中，「雜環」係指具有一個氮及一個氧及3、4、5、6、7或8個碳原子之環狀環。
在一個實施例中，「雜環」係指具有兩個氮及3、4、5、6、7或8個碳原子之環狀環。
在一個實施例中，「雜環」係指具有一個氧及3、4、5、6、7或8個碳原子之環狀環。
在一個實施例中，「雜環」係指具有一個硫及3、4、5、6、7或8個碳原子之環狀環。
「雜環」之非限制性實例包括氮丙啶、環氧乙烷、環硫乙烷、氮雜環丁烷、1,3-二氮雜環丁烷、氧雜環丁烷及硫雜環丁烷。
「雜環」之額外非限制性實例包括吡咯啶、3-吡咯啉、2-吡咯啉、吡唑啶及咪唑啶。
「雜環」之額外非限制性實例包括四氫呋喃、1,3-二氧雜環戊烷、四氫噻吩、1,2-氧硫雜環戊烷及1,3-氧硫雜環戊烷。
「雜環」之額外非限制性實例包括哌啶、哌𠯤、四氫哌喃、1,4-二㗁烷、噻烷、1,3-二噻烷、1,4-二噻烷、𠰌啉及硫代𠰌啉。
「雜環」之額外非限制性實例包括吲哚啉、四氫喹啉、四氫異喹啉及二氫苯并呋喃，其中各基團之連接點在雜環上。
舉例而言，
Figure 02_image093
為「雜環」基團。
然而，
Figure 02_image095
為「芳基」。
「雜環」之非限制性實例亦包括：
Figure 02_image097
。
「雜環」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image099
。
「雜環」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image101
。
「雜環」之非限制性實例亦包括：
Figure 02_image103
。
「雜環」之非限制性實例亦包括：
Figure 02_image105
。
「雜環」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image107
。
「雜環」之額外非限制性實例包括：
Figure 02_image109
。
芳基在一個實施例中，「芳基」為6碳芳族基團(苯基)。
在一個實施例中，「芳基」為10碳芳族基團(萘基)。
在一個實施例中，「芳基」為與雜環稠合之6碳芳族基團，其中連接點為芳環。「芳基」之非限制性實例包括吲哚啉、四氫喹啉、四氫異喹啉及二氫苯并呋喃，其中各基團之連接點在芳環上。
舉例而言，
Figure 02_image111
為「芳基」。
然而，
Figure 02_image113
為「雜環」基團。
「芳基烷基」之實施例「芳基烷基」之非限制性實例包括：
Figure 02_image115
。
在一個實施例中，「芳基烷基」為
Figure 02_image117
。
在一個實施例中，「芳基烷基」係指經芳基取代之2碳烷基。
「芳基烷基」之非限制性實例包括：
Figure 02_image119
。
II. 胞外蛋白質降解廣泛範圍之熟知及經表徵胞外蛋白質可活體內引起、調控或放大疾病，諸如異常細胞增殖，諸如腫瘤及癌症、自體免疫病症、炎症及衰老相關疾病。舉例而言，諸如生長因子、細胞介素及趨化因子之胞外蛋白質結合至細胞表面受體，常常在諸如癌症及炎症之多種疾病中引發異常信號傳導。
本文所描述之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之鹽及/或其醫藥學上可接受之組合物可用於治療由結合至胞外蛋白質靶向配體之目標胞外蛋白質介導的病症。所描述降解劑能夠靶向介導病理性病症之特定胞外蛋白質以進行溶酶體降解。目標胞外蛋白質可經由諸如改變生物路徑、致病性信號傳導或調控信號級聯或細胞進入的作用機制來調控人類之病症。在一個實施例中，目標胞外蛋白質為在傳統意義上無藥可靶向之蛋白質，因為該蛋白質不具有可受抑制或以其他方式結合且無法容易地異位控制之結合袋或活性位點。在另一實施例中，目標胞外蛋白質為在傳統意義上有藥可靶向之蛋白質，但出於治療目的，降解蛋白質比抑制更佳。目標胞外蛋白質藉由作為目標胞外蛋白質之配體的胞外蛋白質靶向配體募集。通常，胞外蛋白質靶向配體以非共價方式結合目標胞外蛋白質。在一替代實施例中，目標胞外蛋白質以不可逆或可逆的共價方式共價結合至胞外蛋白質靶向配體。
因此，在一些實施例中，提供一種治療患有由目標胞外蛋白質介導之病症之宿主的方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向宿主(通常人類)投與有效量的靶向該目標胞外蛋白質之降解劑。
目標胞外蛋白質可為包含胞外蛋白質靶向配體之降解劑可結合之任何胺基酸序列，該目標胞外蛋白質經由其降解產生有益治療效益。在一個實施例中，目標胞外蛋白質為非內源肽，諸如來自病原體或毒素之非內源肽。在另一實施例中，目標胞外蛋白質可為介導病症之內源蛋白。內源蛋白可為蛋白質之正常形式或異常形式。舉例而言，目標胞外蛋白質可為胞外突變蛋白或例如其中部分或完整的功能獲得或功能損失由核苷酸多型性編碼之蛋白質。在一些實施例中，降解劑靶向蛋白質之異常形式，且不靶向蛋白質之正常形式。
胞外蛋白質靶向配體為共價或非共價結合至目標胞外蛋白質之配體，該目標胞外蛋白質已經選擇進行溶酶體降解。在某些實施例中，胞外蛋白質靶向配體為結合至目標胞外蛋白質之小分子或部分(例如，肽、核苷酸、抗體片段、適體、生物分子或其他化學結構)，且其中該目標胞外蛋白質為宿主中之疾病介體，如下文詳細描述。例示性胞外蛋白質靶向配體提供於圖式中。
錨鍵胞外蛋白質靶向配體(「EPTL」)經由錨鍵(其為EPTL與連接子B、連接子C或連接子D之間的化學鍵)共價結合至結合ASGPR之胞外蛋白質降解劑化合物中之連接子。此鍵可位於配體上不會不可接受地破壞EPTL與目標胞外蛋白質之結合能力的任何位置處。錨鍵在圖式中之胞外蛋白質目標配體之非限制性實例中經描繪為：
Figure 02_image121
下文所描述之用於醫學療法之多種例示性目標胞外蛋白質在眾所周知的蛋白質資料庫(「PDB」)中具有特徵化結構資訊，該資料庫為大生物分子(諸如蛋白質及核酸)之三維結構資訊的資料庫。PDB包括全世界科學家提交之x射線結晶學及其他資訊，且可自由訪問。參見例如 www.rcsb.org； www.wwpdb.org；及 www.uniprot.org。使用例如在部分**或資料庫自身中所提供之PDB代碼以及本文所提供或以其他方式公開可用的技術參考，熟習此項技術者可確定可經由連至連接子B、連接子C或連接子D之錨鍵將EPTL連接至ASGPR結合部分的適當位置。對於此等蛋白質中之多種而言，公開之參考文獻描述一系列配體如何結合至目標胞外蛋白質，且吾人可根據此資訊確定適當的錨鍵位置。
舉例而言，熟習此項技術者可使用可獲得的可視化工具(包括PDB網站上可獲得的可視化工具)來確定胞外蛋白質靶向配體與目標胞外蛋白質對接之位置。熟習此項技術者亦可將晶體結構及所關注的所選胞外蛋白質靶向配體引入建模軟體(包括例如PyMOL、Glide、Maestro、RasMol、Visual Molecular Dynamics、Jmol及AutoDock)中以確定胞外蛋白質靶向配體之哪個部分結合至目標胞外蛋白質。ASGPR配體隨後在不會過度不利地影響與目標胞外蛋白質之結合的點處經由連接子及錨鍵結合。
視情況選用之取代基在某些實施例中，例如圖式中之一者中的本文所描述之胞外蛋白質靶向配體視情況經1、2、3或4個獨立地選自以下之視情況選用之取代基取代：烷基(包括C 1-C 4烷基)、烯基(包括C 2-C 4烯基)、炔基(包括C 2-C 4炔基)、鹵烷基(包括C 1-C 4鹵烷基)、-OR 6、F、Cl、Br、I、-NR 6R 7、雜烷基、氰基、硝基、C(O)R 3、
Figure 02_image123
，其中視情況選用之取代基經選擇以使得產生穩定化合物。
在某些實施例中，目標胞外蛋白質係選自IgA、IgG、IgE、TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IFN-γ、VEGF、TGF-β1、PCSK-9、CPB2、ChE、CCL2、因子VII、因子IX、CD40L、因子Xa、因子XI、因子XIa、因子XII、因子XIII、FGF1、FGF2、FN1、IL-5、IL-8、IL-10、IL-21、IL-22、激肽釋放素1、LPL、MMP1、MIF、GIF、L-多巴色素異構酶或苯丙酮酸互變異構酶、嗜中性球彈性蛋白酶、凝血酶原、KLKB1、PLG、PAI-1、內皮纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物、絲胺酸蛋白酶抑制蛋白E1、磷脂酶A2、PLA2、PA21B、PLA2G1B、PLA2-IB、PLA2、PLA2A、PA2IIA、PLA2G2A、PLA2-IIA、PGF、組織型纖維蛋白溶酶原活化因子(tPA、PLAT)、轉化生長因子β2 (TGF-β2、TGFB2)、凝血酶致敏蛋白1、尿激酶、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子、補體因子B、補體因子D、目標補體因子H及補體組分5。
在某些實施例中，當目標胞外蛋白質具有受體時，可使用該目標胞外蛋白質使該受體降解。
在某些實施例中，胞外蛋白質靶向配體係選自IgA、IgG、IgE、TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IFN-γ、VEGF、TGF-β1、PCSK-9、CPB2、ChE、CCL2、因子VII、因子IX、CD40L、因子Xa、因子XI、因子XIa、因子XII、因子XIII、FGF1、FGF2、FN1、IL-5、IL-8、IL-10、IL-21、IL-22、激肽釋放素1、LPL、MMP1、MIF、GIF、L-多巴色素異構酶或苯丙酮酸互變異構酶、嗜中性球彈性蛋白酶、凝血酶原、KLKB1、PLG、PAI-1、內皮纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物、絲胺酸蛋白酶抑制蛋白E1、磷脂酶A2、PLA2、PA21B、PLA2G1B、PLA2-IB、PLA2、PLA2A、PA2IIA、PLA2G2A、PLA2-IIA、PGF、組織型纖維蛋白溶酶原活化因子(tPA、PLAT)、轉化生長因子β2 (TGF-β2、TGFB2)、凝血酶致敏蛋白1、尿激酶、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子、補體因子B、補體因子D、目標補體因子H及補體組分5。
胺基酸在某些實施例中，胞外蛋白質靶向配體包含一或多個胺基酸。本發明涵蓋使用天然胺基酸、非天然胺基酸或其任何組合來達成所需靶向配體特性。
術語「天然胺基酸」係指選自丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、半胱胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸、甘胺酸、組胺酸、異白胺酸、白胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸之胺基酸。
在某些實施例中，天然胺基酸經對應的非天然胺基酸置換，例如用4-氯-苯丙胺酸取代苯丙胺酸。非天然胺基酸之非限制性實例包括：4-氯-苯丙胺酸、3-氟-苯丙胺酸、4-三氟甲基-苯并胺酸、3,4-二氯-苯丙胺酸、4-苯基-苯丙胺酸、N-甲基丙胺酸、N-甲基麩胺酸、N-甲基苯丙胺酸及高絲胺酸。
非天然胺基酸之額外實例包括：
Figure 02_image125
Figure 02_image127
在某些實施例中，胞外蛋白質靶向配體為胺基酸序列。在某些實施例中，該胺基酸序列藉由連至末端胺之鍵連接至分子之連接子部分。在某些實施例中，該胺基酸序列藉由連至末端羧酸(例如酯或醯胺)之鍵連接至分子之連接子部分。在某些實施例中，肽包括胺、羥基或羧酸側鏈，且連接子可結合至此等側鏈中之一者。
舉例而言，當胺基酸序列為SEQ ID NO: 1 MLKKIE時，肽可與連接子連接之位置之非限制性實例包括：
Figure 02_image129
Figure 02_image131
胺基酸序列可藉由本文所描述及此項技術中另外已知之化學方法連接至連接子。舉例而言，當所要連接基團為醯胺時，連接子可提供有胺、羧酸、酯或其他醯胺前驅體，且靶向配體可藉由醯胺偶合反應(諸如HATU或HBTU偶合反應)連接。
為胺基酸序列之胞外蛋白質靶向配體之非限制性實例包括適體、抗體及肽。在某些實施例中，序列表中列出之最左側胺基酸為C端。在其他實施例中，序列表中列出之最右側胺基酸為C端。
在某些實施例中，胺基酸序列係指無指定對掌性之序列。在其他實施例中，胺基酸序列全部為D-胺基酸，全部為L-胺基酸，或為D-胺基酸及L-胺基酸之混合物。
當肽由本文所繪製之結構中之胺基酸序列表示時，除非上下文排除，否則肽之左側通常為N端且右側通常為C端。舉例而言，PIESESLK中之脯胺酸經由N端之氮連接至以下結構中之連接子。
Figure 02_image133
為清楚起見，作為醯胺之一部分的NH為脯胺酸之一部分且CO為連接子之一部分。
當PIESESLK中之離胺酸經由C端之羰基連接至以下結構中之連接子時。
Figure 02_image135
為清楚起見，結合至離胺酸之NH為連接子之一部分，且離胺酸藉由作為C端之一部分的羰基結合至NH。
TNF-α (TNF-alpha)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類TNF-α (UniProtKB - P01375 (TNFA_HUMAN))。TNF-α在身體免疫反應及嚴重發炎性疾病中具有促發炎性細胞介素活性。TNF-α已涉及多種病症，包括(但不限於)類風濕性關節炎、發炎性腸病、移植物抗宿主疾病、僵直性脊椎炎、牛皮癬、化膿性汗腺炎、難治性哮喘、全身性紅斑狼瘡、糖尿病及惡病體質之誘發。
蛋白質資料庫網站提供6RMJ (Valentinis, B.等人, Int. J. Mol. Sci., 2019, 20)；5UUI (Carrington等人, Biophys J., 2017, 113 371-380)；6OOY、6OOZ及6OPO (O'Connell, J.等人, Nat. Commun., 2019, 10 5795-5795)；及5TSW (Cha, S. S., J Biol Chem., 1998, 273 2153-2160)可搜尋之TNF-α之晶體結構；以及結合至5YOY (Ono等人, Protein Sci., 2018, 27 1038-1046)；2AZ5 (He., M. M.等人, Science, 2005, 310: 1022-1025)；5WUX (Lee, J. U., Int J Mol Sci., 2017, 18)；5MU8 (Blevitt等人, J Med Chem., 2017, 60 3511-3517)；4Y6O (Feldman J. L.等人, Biochemistry, 2015, 54 3037-3050)；3WD5 (Hu, S.等人, J Biol Chem, 2013, 288 27059-27067)；及4G3Y (Liang, S. Y., J Biol Chem., 2013, 288 13799-13807)可搜尋之各種化合物的TNF-α之晶體結構。
代表性TNF-α靶向配體提供於圖1中。額外TNF-α靶向配體可見於例如美國專利8541572；J Chem Inf Model. 2017年5月22日; 57(5): 1101-1111；其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，TNF-α靶向配體係選自：
Figure 02_image137
在某些實施例中，TNF-α靶向配體係選自：
Figure 02_image139
。
TNFa降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image141
Figure 02_image143
Figure 02_image145
Figure 02_image147
Figure 02_image149
Figure 02_image151
IL-1在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-1 (IL-1) (UniProtKB - P01584 (IL1B_HUMAN))。IL-1為有效促發炎性細胞介素。最初發現為主要內源熱原質，誘導前列腺素合成、嗜中性球流入及活化、T細胞活化及細胞介素產生、B細胞活化及抗體產生以及纖維母細胞增殖及膠原蛋白產生。IL-1促進T細胞之Th17分化，且與IL12/介白素-12協同作用以誘導來自T-輔助1 (Th1)細胞之IFNG合成。IL-1已涉及多種自體發炎性及自體免疫病症，包括(但不限於) Blau症候群、隱熱蛋白相關週期性症候群、家族性地中海熱、瑪吉德症候群(Majeed syndrome)、甲羥戊酸激酶缺乏症候群、化膿性關節炎-壞疽性膿皮病-痤瘡症候群、腫瘤壞死因子受體相關週期性症候群、Behcet氏病、休格倫氏症候群(Sjogren's Syndrome)、痛風及軟骨鈣質沈著病、週期性發熱、口瘡性口炎、咽炎及子宮頸腺炎(或PFAPA)症候群、類風濕性關節炎、2型糖尿病、急性心包炎、慢性間質性肺病(ILD)、史迪爾氏病(Still's Disease)。
蛋白質資料庫網站提供9ILB (Yu, B.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 1999, 96 103-108)；1I1B (Finzel, B. C.等人, J Mol Biol., 1989, 209 779-791)；及3O4O (Wang等人, Nat.Immunol., 2010, 11: 905-911)可搜尋之IL-1之晶體結構；以及結合至4G6J (Blech, M.等人, J Mol Biol., 2013, 425 94-111)；5BVP (Rondeau等人, MAbs, 2015, 7 1151-1160)；及3LTQ (Barthelmes, K.等人, J Am Chem. Soc., 2011, 133 808-819)可搜尋之各種化合物的IL-1之晶體結構。另外，Guy等人提供對結合至1型介白素-1受體的小拮抗劑肽之晶體結構的深刻理解(Guy等人, The Journal of Biological Chemistry, 2000, 275, 36927-36933)。
潛在的IL-1直接或間接抑制劑描述於圖1中。額外IL-1靶向配體可見於例如美國專利9694015中，其中之各者以引用之方式併入本文中。額外結合配體包括利納西普(rilanocept)或其結合片段(J Rheumatol. 2012;39:720-727 (2012))；及卡那吉努單抗(Canakinumab)或其結合片段(J Rheumatol. 2004;31:1103-1111)。
在某些實施例中，IL-1靶向配體係選自
Figure 02_image153
IL-2在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-2 (IL-2) (UniProtKB - P60568 (IL2_HUMAN))。IL-2為有效促發炎性細胞介素。IL-2已涉及移植物抗宿主排斥反應及其他自體免疫病症。
蛋白質資料庫網站提供1M4C及1M47 (Arkin, M. R.等人, Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 2003, 100: 1603-1608)可搜尋之IL-2之晶體結構；以及結合至4NEJ及4NEM (Brenke, R.等人)；1QVN (Thanos, C. D.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2006, 103 15422-15427)；1PW6及1PY2 (Thanos, C. D.等人, J Am Chem Soc., 2003, 125 15280-15281)；1NBP (Hyde, J.等人, Biochemistry, 2003, 42 6475-6483)；及1M48、1M49、1M4A、1M4B及1M4C (Arkin, M. R.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2003, 100 1603-1608)可搜尋之各種化合物的IL-2之晶體結構。另外，Stauber, D. J.提供對IL-2信號傳導複合物之晶體結構的深刻理解：異三聚體細胞介素受體之範例(Stauber, D. J.等人, PNAS, 2006, 103(8), 2788-2793)。
代表性IL-2靶向配體提供於圖1中。額外IL-2靶向配體可見於例如美國專利8802721；美國專利9682976、美國專利9708268；Eur J Med Chem 83: 294-306 (2014)、J Med Chem 60: 6249-6272 (2017)；Nature 450: 1001-1009 (2007)中；其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，IL-2靶向配體係選自
Figure 02_image155
IL-6在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-6 (IL-6) (UniProtKB - P05231 (IL6_HUMAN))。IL-6為具有廣泛多種生物功能之細胞介素。其為急性期反應之有效誘導因子，且在B細胞最終分化為Ig分泌細胞中起重要作用。其亦涉及淋巴球及單核球分化。其亦作用於B細胞、T細胞、肝細胞、造血祖細胞及CNS細胞，且為生成T(H)17細胞所需的。IL-6已涉及多種發炎性疾病及癌症，包括(但不限於)卡斯爾曼氏病(Castleman's disease)、轉移性去勢相關性前列腺癌、腎細胞癌、大細胞肺癌、卵巢癌、類風濕性關節炎、哮喘。
蛋白質資料庫網站提供1P9M (Boulanger, M. J.等人, Science, 2003, 300: 2101-2104)；1ALU (Somers等人, EMBO J., 1997, 16, 989-997)；1IL6及2IL6 (Xu, G. Y.等人, J Mol Biol., 1997, 268 468-481)及1N26 (Varghese等人, Proc Natl Acad Sci U S A., 2002, 99 15959-15964)可搜尋之IL-6之晶體結構；以及結合至4CNI (Shaw, S.等人, Mabs, 2014, 6: 773)；及4NI7及4NI9 (Gelinas等人, J Biol Chem. 2014, 289(12), 8720-8734)可搜尋之各種化合物的IL-6之晶體結構。另外，Gelinas等人提供對介白素-6與經修飾之核酸配體之複合物的晶體結構的深刻理解(Gelinas, A. D.等人, J Biol Chem. 2014, 289(12), 8720-8734)；且Somers等人提供對介白素6之晶體結構的深刻理解：受體二聚合及信號傳導之新穎模式的影響。
潛在的IL-6直接或間接抑制劑提供於圖1中。額外的潛在IL-6直接或間接抑制劑可見於例如美國專利8901310；美國專利10189796；美國專利9694015中；其各自以引用之方式併入本文中。在另一實施例中，IL-6胞外靶向配體為AvimarC326或其結合片段，其描述於Nat Biotechnol 23, 1556-1561 (2005)中。
IFN-γ在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類干擾素-γ (IFN-γ) (UniProtKB - Q14609 (Q14609_HUMAN))。IFN-γ為免疫調節細胞介素。IFN-γ已涉及多種自體免疫病症，包括(但不限於)類風濕性關節炎、多發性硬化症(MS)、角膜移植排斥反應及各種自體免疫皮膚病，諸如牛皮癬、斑禿、白斑病、尋常性痤瘡(acne vulgaris)及其他疾病。
蛋白質資料庫網站提供1HIG (Ealick, S. E.等人, Science 252, 1991, 698-702)可搜尋之IFN-γ之晶體結構；以及結合至6E3K及6E3L (Mendoza, J. L.等人, Nature, 2019, 567 56-60)可搜尋之各種化合物的IFN-γ之晶體結構。另外，Randal等人提供對單體干擾素-γ之結構及活性的深刻理解：α鏈受體信號傳導複合物(Randal, M.等人, Structure, 2001, 9(2), 155-163)。
代表性IFN-γ靶向配體描述於圖1中。額外IFN-γ靶向配體可見於例如J Med Chem 57: 4511-20 (2014)中；其以引用之方式併入本文中。
血管上皮生長因子 (VEGF)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類血管上皮生長因子(VEGF) (UniProtKB - P15692 (VEGFA_HUMAN))。VEGF為在血管新生、血管生成及內皮細胞生長中具有活性之生長因子。VEGF誘導內皮細胞增殖，促進細胞遷移，抑制細胞凋亡，且誘導血管滲透。VEGF已涉及腫瘤之血管形成及血管新生。
蛋白質資料庫網站提供3QTK (Mandal, K.等人, Angew Chem Int Ed Engl., 2011, 50 8029-8033)；及4KZN (Shen等人)可搜尋之VEGF之晶體結構；以及結合至5O4E (Lobner, E.等人, MAbs, 2017, 9 1088-1104)；4QAF (Giese, T.等人,)；5DN2 (Tsai, Y.C.I.等人, FEBS, 2017, J 283 1921-1934)；4GLS (Mandal, K.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2012, 109 14779-14784)；及1KMX (Stauffer, M. E.等人, J Biomol NMR, 2002, 23 57-61)可搜尋之各種化合物的VEGF之晶體結構。另外，Mueller, Y. A.等人提供對VEGF之激酶域受體結合位點之晶體結構及功能性映射的深刻理解(Mueller, Y. A.等人, Proc Natl Acad Sci U S A., 1997年7月8日; 94(14): 7192-7197)。
代表性VEGF靶向配體提供於圖1中。額外VEGF靶向配體包括(但不限於) (所有引用皆以引用之方式併入本文中)肽VEPNCDIHVMWEWECFERL-NH 2(Biochemistry 1998, 37, 17754-177764)。額外VEGF靶向配體提供於例如J Med Chem 57: 3011-29 (2014)、美國專利9884843、美國專利9446026、J Med Chem 53: 1686-99 (2010)、J Med Chem 48: 8229-36 (2005)、J Nat Prod 76: 29-35 (2013)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
轉化生長因子 -β1 (TGF-β1)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類轉化生長因子-β1 (TGF-β1) (UniProtKB - P01137 (TGFB1_HUMAN))。TGF-β1為調節各種細胞類型之生長及分化且涉及各種過程，諸如正常發育、免疫功能、微神經膠質細胞功能及對神經退化之反應的多功能性蛋白質。TGF-β1可以濃度依賴性方式促進T-輔助17細胞(Th17)或調節性T細胞(Treg)譜系分化。腫瘤微環境中之TGF-β1表現已與不良預後相關，且經由T細胞排斥涉及TGF-β1介導之腫瘤抑制。TGF-β1表現亦已涉及血液惡性病及纖維化。
蛋白質資料庫網站提供5E8S、5E8T及5E8U (Tebben, A. J.等人, Acta Crystallogr D Struct Biol., 2016, 72 658-674)；2L5S (Zuniga, J. E.等人, J Mol Biol., 2011, 412 601-618)；及2PJY (Groppe, J.等人, Mol Cell, 2008, 29 157-168)可搜尋之TGF-β1之晶體結構；以及結合至5QIK、5QIL及5QIM (Zhang, Y.等人, ACS Med Chem Lett., 2018, 9 1117-1122)；6B8Y (Harikrishnan, L. S.等人, Bioorg Med Chem., 2018, 26 1026-1034)；5E8W、5E8X、5E8Z及5E90 (Tebben, A. J.等人, Acta Crystallogr D Struct Biol., 2016, 72 658-674)；3TZM (Ogunjimi, A.A.等人, Cell Signal, 2012, 24 476-483)；2X7O (Roth, G. J.等人, J Med Chem., 2010, 53 7287)；3KCF (Guckian, K.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20 326-329)；3FAA (Bonafoux, D.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2009, 19 912-916)；1VJY (Gellibert, F, J.等人, J Med Chem., 2004 47 4494-4506)；及1PY5 (Sawyer, J. S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2004, 14 3581-3584)可搜尋之各種化合物的TGF-β1之晶體結構。另外，Hinck等人提供對TGF-β及其受體之結構研究的深刻理解，且進一步提供對TGF-β超家族之演變的深刻理解(Hinck, A., FEBS, 2012, 586(14), 1860-1870)。
代表性TGF-β1靶向配體提供於圖1中。在一些實施例中，TGF-β1靶向配體為肽KRFK肽(J. Biol. Chem.第274卷(第19期)第13586-13593頁(1999) (以引用之方式併入本文中)。額外TGF-β1靶向配體提供於例如Bioorg Med Chem Lett 21: 5642-5 (2011)中，其以引用之方式併入本文中。
9 型前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶 / 克新 (PCSK-9)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類9型前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶/克新(PCSK-9) (UniProtKB - Q8NBP7 (PCSK9_HUMAN))。PCSK-9為調節血漿膽固醇穩態之重要參與者。PCSK-9結合至低密度脂質受體家族成員：低密度脂蛋白受體(LDLR)、極低密度脂蛋白受體(VLDLR)、脂蛋白元E受體(LRP1/APOER)及脂蛋白元受體2 (LRP8/APOER2)，且在酸性胞內隔室中促進其降解。其經由非蛋白水解機制起作用以增強肝LDLR經由網格蛋白LDLRAP1/ARH介導之路徑降解，且可防止LDLR自胞內體再循環至細胞表面，或將其引導至溶酶體以進行降解。PCSK-9已涉及高血膽固醇以及心血管疾病之發展。
蛋白質資料庫網站提供2P4E (Cunningham, D.等人, Nat Struct Mol Biol., 2007, 14 413-419)可搜尋之PCSK-9之晶體結構；以及結合至3BPS (Kwon, H. J.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2008, 105 1820-1825)；6U26、6U2N、6U2P、6U36、6U38及6U3X (Petrilli, W. L.等人, Cell Chem Biol., 2019, 27 32-40.e3)；5OCA (Gustafsen, C.等人, Nat Commun., 2017, 8 503-503)；4NE9 (Schroeder, C. I.等人, Chem Biol., 2014, 21 284-294)；4OV6 (Mitchell, T.等人, J Pharmacol Exp Ther., 2014, 350 412-424)；及4NMX (Zhang, Y.等人, J Biol Chem., 2014, 289 942-955)可搜尋之各種化合物的PCSK-9之晶體結構。另外，Piper等人提供對PCSK9之晶體結構的深刻理解(Piper, D. E.等人, Structure, 2007, 15(5), 545-52)。
代表性PCSK-9靶向配體提供於圖1中。在一些實施例中，PCSK-9靶向配體為肽TVFTSWEEYLDWV (J. Bio. Chem. 2014年1月; 289(2):942-955，其以引用之方式併入本文中)。額外PCSK-9靶向配體提供於例如美國專利9227956、J Biol Chem 289: 942-55 (2014)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，PCSK-9配體為WO2021/156792中所描述之任何PCSK-9配體，該文獻以引用之方式併入。
在某些實施例中，提供具有下式之化合物
Figure 02_image157
Figure 02_image159
或其醫藥學上可接受之鹽； 其中 ASGPR配體為本文所描述之ASGPR配體； PCSK-9靶向配體為WO2021/156792中所描述之任何PCSK-9配體。
可用於本發明之調配物中之任一者中的PCSK-9靶向配體之非限制性實例包括：
Figure 02_image161
Figure 02_image163
Figure 02_image165
Figure 02_image167
Figure 02_image169
； 其中L A1為鍵、NR 8或O。
在某些實施例中，PCSK9靶向配體為下式化合物：
Figure 02_image171
其中， R B1為H； R B2為(C 1-C 6)烷氧基、-L B1-或經-C(=O)OH取代之(C 1-C 6)烷基； R B3為H或(C 1-C 6)烷基； R B6為H、(C 1-C 6)烷基或L B1； R B7為H、(C 1-C 6)烷基或L B1； 或R B6及R B7與其所連接之碳原子一起形成(C 3-C 7)環烷基； R B9為H或視情況經一或多個R B27取代之(C 1-C 6)烷基； R B9'為H或(C 1-C 6)烷基； R B10為經OR B13取代且視情況經一或多個R B14取代之(C 6-C 10)芳基； R 11為(C 1-C 6)烷基或L B1； R B12為鹵素、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 1-C 6)鹵烷基、(C 1-C 6)鹵烷氧基、-OH或CN； R B13為經R B16取代之(C 6-C 10)芳基； 各R B14在每次出現時獨立地為鹵素、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 1-C 6)鹵烷基、(C 1-C 6)鹵烷氧基、側氧基、-OH或CN； R B16為視情況經一或多個R B26取代的包含1至3個選自N、O及S之雜原子的5至7員雜芳基； 各R B26在每次出現時獨立地為視情況經一或多個R B29取代之(C 1-C 6)烷基； 各R B27在每次出現時獨立地為(C 6-C 10)芳基； 各R B29在每次出現時獨立地為-NR B31R B32或包含1至3個選自N、O及S之雜原子的4至7員雜環基； 各R B31獨立地選自手性(C 1-C 6)烷基； 各R B32獨立地選自手性(C 1-C 6)烷基； L B1為-(CH 2) pNH-*，其中L B1之*指示與連接子(L A)之連接點，且其中R B11、R B6或R B7中之至少一者為-L B1-；且 n為1。
在某些實施例中，PCSK9靶向配體為下式化合物：
Figure 02_image173
其中， R C1為經-OR C10及一或多個R C11取代之(C 6-C 10)芳基； R C2為H、(C 1-C 6)烷基、-L C1或(C 3-C 9)碳環基，其中該烷基經一個R C18取代，且該碳環基經一或多個R C19取代； R C3為H或(C 1-C 6)烷基； R C4為H或(C 1-C 6)烷基；或 R C3及R C4與其所連接之原子一起形成包含1至3個選自N、O及S之雜原子的5至7員雜環基； R C5為H或(C 1-C 6)烷基； R C6為(C 1-C 6)烷基或-L C1，其中該烷基視情況經一或多個各自獨立地選自-OH或(C 1-C 6)烷氧基之取代基取代； R C8為H、(C 1-C 6)烷基或-L C1， R C9為鹵素； R C10為經一個R C22取代之(C 6-C 10)芳基； 各R C11在每次出現時獨立地為鹵素、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 1-C 6)鹵烷基、(C 1-C 6)鹵烷氧基、-OH或CN； R C18為(C 6-C 10)芳基； 各R C19在每次出現時獨立地為鹵素、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 1-C 6)鹵烷基、(C 1-C 6)鹵烷氧基、-OH或CN； R C22為經一或多個R C23取代的包含1至3個選自N、O及S之雜原子的5或6員雜芳基； 各R C23在每次出現時獨立地為視情況經-NR C24R C25取代之(C 1-C 6)烷基或包含1至3個選自N、O及S之雜原子的4至7員雜環基； R C24為H、(C 1-C 6)烷基； R C25為H、(C 1-C 6)烷基， L C1為-(CH 2) pNH-*，其中L C1之*指示與連接子(L A)之連接點，且其中R C2、R C6或R C8中之至少一者為-L C1；且 p為1、2、3、4、5或6。
在某些實施例中，可用於本發明之調配物中之任一者中的PCSK-9靶向配體包括：
Figure 02_image175
。
在某些實施例中，可用於本發明之調配物中之任一者中的PCSK-9靶向配體包括：
Figure 02_image177
。
在某些實施例中，本發明化合物係選自
Figure 02_image179
Figure 02_image181
Figure 02_image183
。
在某些實施例中，本發明化合物係選自
Figure 02_image185
Figure 02_image187
Figure 02_image189
。
在某些實施例中，PCSK9靶向配體係選自：
Figure 02_image191
Figure 02_image193
。
PCSK-9降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image195
FHR3人類補體因子H相關蛋白3 (FHR-3)屬於補體因子H (FH)家族。因子H (FH) (替代補體路徑活化之主要負調節因子)所屬之家族亦包括五個認為由非等位同源重組及基因座間基因轉化產生之其他相關家族成員，包括：補體因子H相關蛋白1 (FHR1)、補體因子H相關蛋白2 (FHR2)、補體因子H相關蛋白3 (FHR3)、補體因子H相關蛋白4同功型4A及4B (FHR4A及FHR4B)及補體因子H相關蛋白5 (FHR5)。
不同於因子H，FHR3缺乏補體滅活所必需的補體調節域且亦與因子H競爭，使得補體過度活化。因此，本發明提供用於調控補體因子H蛋白(特定言之FHR3)之濃度以移除因子H之競爭物且藉此恢復因子H介導之調節以治療由過度補體活化所引起之病症的化合物。
歸因於因子H在補體調節中所起之核心作用，存在許多由異常FH活性產生之臨床意義。因子H之功能損失型突變增加對腎病、非典型溶血性尿毒症候群(aHUS)及密度沈積病(ODD)之易感性，而補體因子H之多型性變異與重要人類疾病密切相關，包括年齡相關黃斑變性(AMO)及腦膜炎球菌敗血症( Clin Exp lmmunol 151(2):210-230 ； lmmunobiology 217(11):1034-1046)。
在某些實施例中，本發明提供在FHR3介導之疾病或病症之治療中的用途。
在某些實施例中，FHR3介導之疾病或病症為補體相關疾病、補體失調病症、自體免疫疾病、腎病、視網膜退化性疾病、風濕性疾病、相關退化性疾病、自體免疫腎病、密度沈積病(ODD)及全身性自體免疫疾病。
在某些實施例中，FHR3介導之疾病或病症之非限制性實例包括腎病變、年齡相關黃斑變性、非典型溶血性尿毒症候群(aHUS)、自體免疫形式之溶血性尿毒症候群、肝細胞癌(HCC)、C3腎絲球病變、陣發性夜間血紅素尿症、風濕性多肌痛、類風濕性關節炎、腦膜炎球菌敗血症及SLE (全身性紅斑狼瘡)。
在某些實施例中，本發明提供利用受體介導之胞吞自血漿消除補體因子H相關蛋白3 (FHR3)或降低其含量的化合物。
在某些實施例中，FHR3靶向配體係選自：
Figure 02_image197
Figure 02_image199
Figure 02_image201
。
在某些實施例中，FHR3化合物係選自：
Figure 02_image203
Figure 02_image205
Figure 02_image207
。
Tau 蛋白在一些實施例中，目標胞外蛋白質為tau蛋白。tau在腦中之積聚引起與阿茲海默氏病及其他tau蛋白病相關之聚集體。
Tau蛋白靶向配體之非限制性實例包括：
Figure 02_image209
。
IL-21在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-21 (IL-21) (UniProtKB - Q9HBE4 (IL21_HUMAN))。IL-21為免疫調節細胞介素。IL-21已涉及多種自體免疫病症，包括休格倫氏症候群(Sjögren's syndrome)、全身性紅斑狼瘡、1型糖尿病、多發性硬化症、類風濕性關節炎及發炎性腸病。
蛋白質資料庫網站提供2OQP (Bondensgaard, K.等人, J Biol Chem., 2007, 282 23326-23336)；及4NZD (Hamming等人)可搜尋之IL-21之晶體結構；以及結合至3TGX (Hamming, O. J.等人, J Biol Chem., 2012, 287(12), 9454-9460)可搜尋之各種化合物的IL-21之晶體結構。
代表性IL-21靶向配體描述於圖1中。額外IL-21靶向配體可見於例如美國專利9701663中，其以引用之方式併入本文中。
IL-22在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-22 (IL-22) (UniProtKB - Q9GZX6 (IL22_HUMAN))。IL-22為IL-10家族細胞介素之成員，其藉由多種不同類型之淋巴球產生，包括先天性及後天性免疫系統之淋巴球兩者。IL-22已涉及多種自體免疫病症，包括(但不限於)移植物抗宿主疾病(GVHD)、牛皮癬、類風濕性關節炎、異位性皮炎及哮喘。
蛋白質資料庫網站提供1M4R (Nagem, R.A.P.等人, Structure, 2002, 10 1051-1062)可搜尋之IL-22之晶體結構；以及結合至3DGC (Jones, B. C.等人, Structure, 2008, 16 1333-1344)可搜尋之各種化合物的IL-22之晶體結構。
代表性IL-22靶向配體描述於圖1中。額外IL-22靶向配體可見於例如美國專利9,701,663中，其以引用之方式併入本文中。
IL-10在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-10 (IL-10) (UniProtKB - P22301 (IL10_HUMAN))。IL-10為發炎性細胞介素。IL-10已涉及腫瘤存活及對細胞毒性化學治療藥物之保護。
蛋白質資料庫網站提供2ILK (Zdanov, A等人, Protein Sci., 1996, 5 1955-1962)；1ILK (Zdanov, A.等人, Structure, 1995, 3 591-601)；2H24 (Yoon, S. I.等人, J Biol Chem., 2006, 281 35088-35096)及3LQM (Yoon, S. I.等人, Structure, 2010, 18 638-648)可搜尋之IL-10之晶體結構。另外，Zdanov, A.等人提供對IL-10之晶體結構的深刻理解(Zdanov A., Current Pharmaceutical design, 2004, 10, 3873-3884)。
代表性IL-10靶向配體提供於圖1中。額外IL-10靶向配體可見於例如ACS Chem Biol 11: 2105-11 (2016)中，其以引用之方式併入本文中。
IL-5在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-5 (IL-5) (UniProtKB - P05113 (IL5_HUMAN))。IL-5為調節嗜伊紅性成熟、募集及存活之細胞介素。IL-5已涉及多種過敏性病症，包括(但不限於)哮喘、鼻息肉、異位性皮炎、嗜伊紅性食道炎、嗜伊紅性白血球增多症候群及查格-施特勞斯症候群(Churg-Strauss syndrome)。
蛋白質資料庫網站提供1HUL (Milburn, M. V., Nature, 1993, 363, 172-176)及3VA2 (Kusano等人, Protein Sci., 2012, 21(6), 850-864)可搜尋之IL-5之晶體結構；以及結合至1OBX及1OBZ (Kang, B. S.等人, Structure, 2003, 11, 845)可搜尋之各種化合物的IL-5之晶體結構。
代表性IL-5靶向配體提供於圖1中。額外IL-5靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem 18: 4441-5 (2010)；Bioorg Med Chem 18: 4625-9 (2011)；Bioorg Med Chem 21: 2543-50 (2013)；Eur J Med Chem 59: 31-8 (2013)；Bioorg Med Chem 23: 2498-504 (2015)；Bioorg Med Chem 20: 5757-62 (2012)中；其中之各者以引用之方式併入本文中。
IL8在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-8 (IL-8) (UniProtKB - P10145 (IL8_HUMAN))。IL-8為吸引嗜中性球、嗜鹼性球及T細胞但不吸引單核球之趨化因子。其亦涉及嗜中性球活化。其回應於發炎性刺激自若干細胞類型釋放。IL-8已涉及促進腫瘤惡化、免疫逃逸、上皮-間葉轉化及骨髓衍生之抑制細胞之募集。研究已證實，高血清IL-8含量與許多惡性腫瘤之不良預後相關。臨床前研究已表明，IL-8阻斷可減少腫瘤細胞中之間葉特點，使其對治療具有更低耐受性。
蛋白質資料庫網站提供3IL8 (Baldwin, E. T.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 1991, 88, 502-506)；及1IL8及2IL8 (Clore, G. M.等人, Biochemistry, 1990, 29, 1689-1696)可搜尋之IL-8之晶體結構；以及結合至1ILP及1ILQ (Skelton, N, J.等人, Structure, 1999, 7, 157-168)；及1ROD (Sticht, H.等人, Eur J Biochem., 1996, 235, 26-35)；4XDX (Ostrov等人)及5WDZ (Beckamp, S., J Biomol NMR, 2017, 69, 111-121)可搜尋之各種化合物的IL-8之晶體結構。
代表性IL-8靶向配體提供於圖1中。額外IL-8靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem Lett 19: 4026-30 (2009)中，其以引用之方式併入本文中。
膽鹼酯酶在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類膽鹼酯酶(UniProtKB - P06276 (CHLE_HUMAN))。膽鹼酯酶有助於神經傳遞質乙醯膽鹼之失活。膽鹼酯酶之抑制使得乙醯膽鹼在突觸間隙(兩個神經末梢之間的空間)中之含量增加。膽鹼酯酶抑制劑之主要用途為用於治療患有阿茲海默氏病之患者的癡呆。患有阿茲海默氏病之人的腦中之乙醯膽鹼之含量減少。膽鹼酯酶抑制劑已展示對諸如認知之癡呆症狀具有效果。
蛋白質資料庫網站提供1P0I及1P0Q (Nicolet, Y.等人, J Biol Chem., 2003, 278, 41141-41147)可搜尋之膽鹼酯酶之晶體結構；以及結合至1P0M及1P0P (Nicolet, Y.等人, J Biol Chem., 2003, 278, 41141-41147)；2J4C (Frasco, M. F.等人, FEBS J., 2007, 274 1849)；4BDT、4BDS (Nachon, F.等人, Biochem J, 2013, 453, 393-399)；1GQR及1GQS (Bar-on, P.等人, Biochemistry, 2002, 41, 3555)；3DJY及3DKK (Carletti, E.等人, J Am Chem Soc., 2008, 130, 16011-16020)；4AXB、4B0O、4B0P及4BBZ (Wandhammer, M.等人, Chem Biol Interact., 2013, 203, 19)；1DX6 (Greenblatt, H. M.等人, FEBS Lett., 1999, 463 321)；1GPK及1GPN (Dvir, H.等人, Biochemistry, 2002, 41, 10810)；6CQY (Bester, S. M.等人, Chem Res Toxicol., 2018, 31, 1405-1417 )；1XLV及1XLW (Nachon, F.等人, Biochemistry, 2005, 44, 1154-1162)；2Y1K (Carletti, E.等人, Chem Res Toxicol., 2011, 24, 797)；及2WIG、2WIJ、2WIK、2WIL及2WSL (Carletti, E.等人, Biochem J., 2009, 421, 97-106)可搜尋之各種化合物的膽鹼酯酶之晶體結構。另外，Ahmad等人提供對來自禿莖翠雀花(delphinium denudatum)之異塔拉定(isotalatizidine)水合物之分離、晶體結構測定及膽鹼酯酶抑制潛能的深刻理解(Ahmad H.等人, Journal Pharmaceutical Biology, 2016, 55(1), 680-686)。
代表性膽鹼酯酶靶向配體提供於圖1中。額外靶向配體可見於例如ACS Med Chem Lett 4: 1178-82 (2013)；J Med Chem 49: 3421-5 (2006)；Eur J Med Chem 55: 23-31 (2012)；J Med Chem 51: 3154-70 (2008)；J Med Chem 46: 1-4 (2002)；Eur J Med Chem 126: 652-668 (2017)；Biochemistry 52: 7486-99 (2013)；Bioorg Med Chem 23: 1321-40 (2015)中；其各自以引用之方式併入本文中。
C-C 模體趨化因子配體 2 (CCL2)Grygiel等人提供對人類CCL2之天然化學連接合成及晶體結構的深刻理解(Grygiel, T.L.等人, Biopolymers, 2010, 94(3), 350-9)。
在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類C-C模體趨化因子配體2 (CCL2) (UniProtKB - P13500 (CCL2_HUMAN))。CCL2充當C-C趨化因子受體CCR2之配體。CCL2經由CCR2之結合及活化傳導信號，且誘導強的趨化性反應及胞內鈣離子之移動。CCL2針對單核球及嗜鹼性球但不針對嗜中性球或嗜伊紅性呈現趨化性活性。
CCL2已涉及在動脈粥樣硬化之疾病過程期間單核球至動脈壁中之募集。
代表性CCL2靶向配體提供於圖1中。額外CCL2靶向配體可見於例如J Med Chem 56: 7706-14 (2013)中，其以引用之方式併入本文中。
羧肽酶 B2在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類羧肽酶B2 (UniProtKB - Q96IY4 (CBPB2_HUMAN))。羧肽酶B2亦稱為凝血酶啟動纖溶抑制物(TAFIa)，其在循環中自諸如激肽或過敏毒素之生物活性肽裂解C端精胺酸或離胺酸殘基，從而調節其活性。其藉由自已經部分地由纖維蛋白溶酶降解之纖維蛋白移除C端離胺酸殘基下調纖維蛋白溶解。羧肽酶B2已涉及且以抑制血栓形成為目標。
蛋白質資料庫網站提供3D66 (Marx, P. F.等人, Blood, 2008, 112, 2803-2809)；3DGV (Anand, K.等人, JBC, 2008, 283, 29416-29423)；及1KWM (Barbosa Pereira, P.J.等人, J Mol Biol., 2002, 321, 537-547)可搜尋之羧肽酶B2 (亦稱為凝血酶啟動纖溶抑制物(TAFI))之晶體結構；以及結合至3D67 (Marx, P. F.等人, Blood, 2008, 112, 2803-2809)；5HVF、5HVG、5HVH (Zhou, X.等人, J Thromb Haemost., 2016, 14, 1629-1638)；及3LMS (Sanglas, L.等人, J Thromb Haemost., 2010, 8, 1056-1065)可搜尋之各種化合物的TAFI之晶體結構。另外，Schreuder等人提供對TAFI與環形魚腥藻肽(anabaenopeptin) (一種TAFI之高效抑制物)之相互作用的深刻理解(Schreuder, H.等人, Sci Rep., 2016, 6, 32958)。
代表性羧肽酶B2靶向配體提供於圖1中。額外羧肽酶B2靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem Lett 20: 92-6 (2010)、J Med Chem 50: 6095-103 (2007)、Bioorg Med Chem Lett 14: 2141-5 (2004)、J Med Chem 58: 4839-44 (2015)、J Med Chem 55: 7696-705 (2012)、J Med Chem 59: 9567-9573 (2016)、Bioorg Med Chem Lett 17: 1349-54 (2007)、美國專利9662310、美國專利8609710、美國專利9688645、J Med Chem 46: 5294-7 (2003)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
嗜中性球彈性蛋白酶在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類嗜中性球彈性蛋白酶(UniProtKB - P08246 (ELNE_HUMAN))。嗜中性球彈性蛋白酶改變自然殺手細胞、單核球及顆粒球之功能。抑制C5a依賴性嗜中性球酶的釋放及趨化性。
嗜中性球彈性蛋白酶已涉及多種病症，包括肺病、慢性阻塞性肺病、肺炎、呼吸窘迫及急性肺損傷(ALI)及囊腫纖維化以及慢性腎病。
蛋白質資料庫網站提供結合至3Q76及3Q77 (Hansen, G.等人, J.Mol.Biol., 2011, 409, 681-691)；5ABW (Von Nussbaum等人, Bioorg Med Chem Lett., 2015, 25, 4370-4381)；1B0F (Cregge, R. J.等人, J Med Chem., 1998, 41, 2461-2480)；1H1B (Macdonald, S.J.F.等人, J Med Chem., 2002, 45, 3878)；2Z7F (Koizumi, M.等人, J Synchrotron Radiat., 2008, 15 308-311)；5A09、5A0A、5A0B及5A0C (Von Nussbaum, F.等人, Chem Med Chem., 2015, 10, 1163-1173)；5A8X、5A8Y及5A8Z (Von Nussbaum, F.等人, ChemMedChem., 2016, 11, 199-206)；1HNE (Navia, M. A.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 1989, 86, 7-11)；6F5M (Hochscherf, J.等人, Acta Crystallogr F Struct Biol Commun., 2018, 74, 480-489)；及4WVP (Lechtenberg, B. C.等人, ACS Chem Biol., 2015, 10, 945-951)可搜尋之各種化合物的人類嗜中性球彈性蛋白酶之晶體結構。
代表性嗜中性球彈性蛋白酶靶向配體提供於圖1中。額外靶向嗜中性球彈性蛋白酶之配位體可見於例如J Med Chem 53: 241-53 (2010)、J Med Chem 38: 739-44 (1995)、J Med Chem 37: 2623-6 (1994)、J Med Chem 38: 4687-92 (1995)、J Med Chem 45: 3878-90 (2002)、Bioorg Med Chem Lett 5: 105-109 (1995)、Bioorg Med Chem Lett 11: 243-6 (2001)、J Med Chem 40: 1906-18 (1997)、Bioorg Med Chem Lett 25: 4370-81 (2015)、美國專利8569314、美國專利9174997、美國專利9290457中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
因子 Xa在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類因子Xa (UniProtKB - P00742 (FA10_HUMAN))。因子Xa為維生素K依賴性糖蛋白，其在血液凝固期間在因子Va、鈣及磷脂存在之情況下將凝血酶原轉化為凝血酶。
因子X已涉及深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展，以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞的風險。
蛋白質資料庫網站提供結合至1G2L及1G2M (Nar, H.等人, Structure, 2001, 9, 29-38)；2PR3 (Nan huis, C. A.等人, Chem Biol Drug Des., 2007, 69, 444-450)；2UWP (Young, R. J.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2007, 17, 2927)；2VVC、2VVV、2VVU、2VWL、2VWM、2VWN及2VWO (Zbinden, K. G.等人, Eur J Med Chem., 2009, 44, 2787)；4Y6D、4Y71、4Y7A、4Y7B、4zh8、4ZHA (Convery, M.A.等人)；4Y76、4Y79、2J94及2J95 (Chan, C.等人, J Med Chem., 2007, 50 1546-1557)；1FAX (Brandstetter, H.等人, J Biol Chem., 1996, 271, 29988-29992)；2JKH (Salonen, L. M.等人, Angew Chem Int Ed Engl., 2009, 48, 811)；2PHB (Kohrt, J. T.等人, Chem Biol Drug Des., 2007, 70, 100-112)；2W26 (Roehrig, S.等人, J Med Chem., 2005, 48, 5900)；2Y5F、2Y5G及2Y5H (Salonen, L.M.等人, Chemistry, 2012, 18, 213)；3Q3K (Yoshikawa, K.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2011, 21, 2133-2140)；2BMG (Matter, K.等人, J Med Chem., 2005, 48, 3290)；2BOH、2BQ6、2BQ7及2BQW (Nazare, M.等人, J Med Chem., 2005, 48, 4511)；2CJI (Watson, N.S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 3784)；2J2U、2J34、2J38、2J41 (Senger, S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16 5731)；3IIT (Yoshikawa, K.等人, Bioorg Med Chem., 2009, 17 8221-8233)；1EZQ、1F0R及1F0S (Maignan, S.等人, J Med Chem., 2000, 43, 3226-3232)；1FJS (Adler, M.等人, Biochemistry, 2000, 39, 12534-12542)；1KSN (Guertin, K. R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2002, 12, 1671-1674)；1NFU、1NFW、1NFX及1NFY (Maignan, S.等人, J Med Chem., 2003, 46, 685-690)；2XBV、2XBW、2XBX、2XBY、2XC0、2XC4及2XC5 (Anselm, L.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, 5313)；4A7I (Nazare, M.等人, Angew Chem Int Ed Engl., 2012, 51, 905)；4BTI、4BTT及4BTU (Meneyrol, L.等人, J Med Chem., 2013, 56, 9441)；3FFG、3KQB、3KQC、3KQD及3KQE (Quan, M. L.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, 1373-1377)；2P93、2P94及2P95 (Qiao, J. X.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2007, 17, 4419-4427)；1V3X (Haginoya, N.等人, J Med Chem., 2004, 47, 5167-5182)；2P16 (Pinto, D.J.P.等人, J Med Chem., 2007, 50, 5339-5356)；2RA0 (Lee, Y.K.等人, J Med Chem., 2008, 51, 282-297)；3SW2 (Shi, Y.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2011, 21, 7516-7521)；2VH6 (Young, R.J.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2008, 18, 23)；2WYG及2WYJ (Kleanthous, S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, 618)；2Y7X (Watson, N.S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2011, 21, 1588)；2Y7Z、2Y80、2Y81及2Y82 (Young, R.J.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2011, 21, 1582)；3KL6 (Fujimoto, T.等人, J Med Chem., 2010, 53, 3517-3531)；3LIW (Meuller, M.M.等人, Biol.Chem., 2003, 383, 1185)；5K0H (Schweinitz, A.等人, Med Chem., 2006, 2, 349-361)；1XKA及1XKB (Kamata, K.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 1998, 95, 6630-6635)；2EI6及2EI7 (Nagata, T.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2007, 17, 4683-4688)；2P3T (Ye, B.等人, J Med Chem., 2007, 50, 2967-2980)；1MQ5及1MQ6 (Adler, M.等人, Biochemistry, 2002, 41, 15514-15523)；3K9X及3HPT (Shi, Y.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2009, 19, 6882-6889)；3CEN (Corte, J.R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2008, 18, 2845-2849)；2W3I及2W3K (Van Huis, C.A.等人, Bioorg Med Chem., 2009, 17, 2501)；2H9E (Murakami, M.T.等人, J Mol Biol., 2007, 366, 602-610)；1WU1及2D1J (Komoriya, S.等人, Bioorg Med Chem., 2005, 13, 3927-3954)；2G00 (Pinto, D.J.P.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 5584-5589)；3M36及3M37 (Pruitt, J.R.等人, J Med Chem., 2003, 46, 5298-5315)；3CS7 (Qiao, J.X.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2008, 18, 4118-4123)；1Z6E (Quan, M.L.等人, J Med Chem., 2005, 48, 1729-1744)；2FZZ (Pinto, D.J.P.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 4141-4147)；及3ENS (Shi, Y.等人, J Med Chem., 2008, 51, 7541-7551)可搜尋之各種化合物的因子Xa之晶體結構。
代表性因子Xa靶向配體提供於圖1中。額外因子Xa靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem Lett 20: 5313-9 (2010)、Bioorg Med Chem Lett 13: 679-83 (2003)、J Med Chem 44: 566-78 (2001)、J Med Chem 50: 2967-80 (2007)、J Med Chem 38: 1511-22 (1995)、Bioorg Med Chem Lett 18: 2845-9 (2008)、J Med Chem 53: 6243-74 (2010)、Bioorg Med Chem Lett 18: 2845-9 (2008)、Bioorg Med Chem 16: 1562-95 (2008)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
因子 XI在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類因子XI UniProtKB - P03951 (FA11_HUMAN)。因子XI藉由活化因子IX觸發血液凝結之內在路徑的中間階段。
因子XI已涉及深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展，以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞的風險。
蛋白質資料庫網站提供結合至1ZSL、1ZTJ、1ZTK及1ZTL (Nagafuji, P.等人)；1ZOM (Lin, J.等人, J Med Chem., 2006, 49, 7781-7791)；5EOK及5EOD (Wong, S.S.等人, Blood, 2016, 127, 2915-2923)；1ZHM、1ZHP及1ZHR (Jin, L.等人, Acta Crystallogr D Biol Crystallogr., 2005, 61, 1418-1425)；1ZMJ、1ZLR、1ZML及1ZMN (Lazarova, T.I., Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 5022-5027)；1ZRK、1ZSJ及1ZSK (Guo, Z.等人)；4CRA、4CRB、4CRC、4CRD、4CRE、4CRF及4CRG (Fjellstrom, O.等人, PLoS One, 2015, 10, 13705)；3SOR及3SOS (Fradera, X.等人, Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun., 2012, 68, 404-408)；1ZPB、1ZPC、2FDA (Deng, H.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 3049-3054)；5WB6 (Wang, C.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2017, 27, 4056-4060)；4NA7及4NA8 (Quan, M.L.等人, J Med Chem., 2014, 57, 955-969)；4WXI (Corte, J.R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2015, 25, 925-930)；5QTV、5QTW、5QTX及5QTY (Fang, T.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2020, 126949-126949)；6C0S (Hu, Z.等人, Bioorg Med Chem Lett., 28, 987-992)；5QQP及5QQO (Clark, C.G.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2019, 29, 126604-126604)；5Q0D、5Q0E、5Q0F、5Q0G及5Q0H (Corte, J.R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2017, 27, 3833-3839)；5QCK、5QCL、5QCM及5QCN (Pinto, D.J.P.等人, J Med Chem., 2017, 60, 9703-9723)；5TKS及5TKU (Corte, J.R.等人, J Med Chem., 2017, 60, 1060-1075)；1XXD及1XX9 (Jin, L.等人, J Biol Chem., 2005, 280, 4704-4712)；5QTT及5QTU (Corte, J. R.等人, J Med Chem., 2019, 63, 784-803)；4TY6、4TY7 (Hangeland, J.J.等人, J Med Chem., 2014, 57, 9915-9932)；4X6M、4X6N、4X6O及4X6P (Pinto, D.J.P.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2015, 25, 1635-1642)；及5EXM (Corte, J.R.等人, Bioorg Med Chem., 2016, 24, 2257-2272)可搜尋之各種化合物的因子XI之晶體結構。另外，Al-Horani等人提供對關於因子Xia抑制物之專利文獻之綜述的深刻理解(Al-Horani等人, Expert Opin Ther Pat. 2016; 26(3), 323-345)。
代表性因子XI靶向配體提供於圖1中。額外因子XI靶向配體可見於例如美國專利9783530、美國專利10143681、美國專利10214512、ACS Med Chem Lett 6: 590-5 (2015)、J Med Chem 60: 9703-9723 (2017)、J Med Chem 60: 9703-9723 (2017)、美國專利9453018 (2016)、J Med Chem 60: 1060-1075 (2017)、J Med Chem 57: 955-69 (2014)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，因子XI靶向配體係選自：
Figure 02_image211
Figure 02_image213
。
在某些實施例中，因子XI靶向配體描述於J Med Chem 61 (17), 7425-7447 (2018)或J Med Chem (2020) Structure-based design and pre-clinical characterization of selective and orally bioavailable Factor Xia inhibitors: demonstrating the power of an integrated S1 protease family approach中。
因子XI降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image215
Figure 02_image217
Figure 02_image219
Figure 02_image221
在某些非限制性實施例中，本發明之因子XI降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image223
Figure 02_image225
Figure 02_image227
Figure 02_image229
Figure 02_image231
或其醫藥學上可接受之鹽。
因子 XII在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類因子XII (UniProtKB - P00748 (FA12_HUMAN))。因子XII為參與引發血液凝結、纖維蛋白溶解以及舒緩肽及血管收縮素之生成的血清糖蛋白。前激肽釋放素由因子XII裂解以形成激肽釋放素，其隨後首先將因子XII裂解為α-因子XIIa，且隨後胰蛋白酶將其裂解為β-因子XIIa。α-因子XIIa將因子XI活化為因子XIa。
因子XII已涉及深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展，以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞的風險。
蛋白質資料庫網站提供結合至4XDE及4XE4 (Pathak, M.等人, J Thromb Haemost., 2015, 13(4), 580-591)；6GT6及6QF7 (Pathak, M.等人, Acta Crystallogr D Struct Biol., 2019, 75, 578-591)；及6B74及6B77 (Dementiev, A.A.等人, Blood Adv., 2018, 2, 549-558)可搜尋之各種化合物的因子XII之晶體結構。另外，Pathak等人提供對因子XII之晶體結構的深刻理解(Pathak, M.等人, J Thromb Haemost., 2015, 13(4), 580-591)。
代表性因子XII靶向配體提供於圖1中。額外因子XII靶向配體可見於例如J Med Chem 60: 1151-1158 (2017)、J Med Chem 48: 2906-15 (2005)、J Med Chem 50: 5727-34 (2007)、J Med Chem 50: 1876-85 (2007)、Chembiochem 18: 387-395 (2017)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
因子 XIII在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類因子XIII UniProtKB - P00488 (F13A_HUMAN)。因子XIII藉由凝血酶及鈣離子活化為轉麩醯胺酸酶，其催化在纖維蛋白鏈之間形成γ-麩胺醯基-ε-離胺酸交聯鍵，因此使纖維蛋白塊穩定。亦使α-2-纖維蛋白溶酶抑制物或纖維接合素與纖維蛋白之α鏈交聯。
因子XIII已涉及深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展，以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞的風險。
蛋白質資料庫網站提供1FIE (Yee, V.C.等人, Thromb Res., 1995, 78, 389-397)；及1F13 (Weiss, M.S.等人, FEBS Lett., 1998, 423, 291-296)可搜尋之因子XIII之晶體結構；以及結合至1DE7 (Sadasivan, C.等人, J Biol Chem., 2000, 275, 36942-36948)；及5MHL、5MHM、5MHN及5MHO (Stieler, M.等人)可搜尋之各種化合物的因子XIII之晶體結構。另外，Gupta等人自結構/功能觀點提供對凝血因子XIII活化及調節之機制的深刻理解(Gupta, S.等人, Sci Rep., 2016; 6, 30105)；且Komaromi等人提供對因子XIII之新穎結構及功能態樣的深刻理解(Komaromi, Z.等人, J Thromb Haemost 2011, 9, 9-20)。
代表性因子XIII靶向配體提供於圖1中。額外因子XIII靶向配體可見於例如Eur J Med Chem 98: 49-53 (2015)、J Med Chem 55: 1021-46 (2012)、J Med Chem 48: 2266-9 (2005)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
凝血酶原在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類凝血酶原(UniProtKB - P00734 (THRB_HUMAN))。使Arg及Lys後面的鍵裂解的凝血酶將纖維蛋白原轉化為纖維蛋白且活化因子V、VII、VIII、XIII並且與凝血酶調節素(thrombomodulin)蛋白C複合。該凝血酶在血液穩態、炎症及傷口癒合中起作用。
凝血酶涉及血凝塊形成以及動脈及靜脈血栓形成以及與心房震顫相關之血栓栓塞。
蛋白質資料庫網站提供3NXP (Chen, Z.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2010, 107, 19278-19283)可搜尋之凝血酶原之晶體結構；以及結合至2HPP及2HPQ (Arni, R.K.,等人, Biochemistry, 1993, 32, 4727-4737)；6BJR、6C2W (Chinnaraj, M.,等人, Sci Rep., 2018, 8, 2945-2945)；5EDK、5EDM (Pozzi, N.,等人, J Biol Chem., 2016, 291, 6071-6082)；3K65 (Adams, T.E.,等人, Biochimie, 2016, 122, 235-242)；及6BJR及6C2W (Chinnaraj, M.等人, Sci Rep., 2018, 8, 2945-2945)可搜尋之各種化合物的凝血酶原之晶體結構。另外，Pozzi等人提供對凝血酶原之晶體結構之機制及構形可撓性的深刻理解(Pozzi, N.等人, J Biol Chem., 2013, 288(31), 22734-22744)；且Zhiwei等人提供對凝血酶原-1之晶體結構的深刻理解(Zhiwei, C.等人, PNAS, 2010, 107(45), 19278-19283)。
凝血酶原轉化為凝血酶，因此蛋白質資料庫網站提供結合至1XMN (Carter, W.J.等人, J.Biol.Chem., 2005, 280, 2745-2749)；4CH2及4CH8 (Lechtenberg, B.C.等人, J Mol Biol., 2014, 426, 881)；3PO1 (Karle, M.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2012, 22, 4839-4843)；3DA9 (Nilsson, M.等人, J Med Chem., 2009, 52, 2708-2715)；2H9T及3BF6 (Lima, L.M.T.R.等人, Biochim Biophys Acta., 2009, 1794, 873-881)；3BEF及3BEI (Gandhi, P.S.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2008, 105, 1832-1837)；3BV9 (Nieman, M.T.等人, J Thromb Haemost., 2008, 6, 837-845)；2HWL (Pineda, A.O.等人, Biophys Chem., 2007, 125, 556-559)；2AFQ (Johnson, D.J.D.等人, Biochem J., 2005, 392, 21-28)；1SHH (Pineda, A.O.等人, J Biol Chem., 2004, 279, 31842-31853)；1JWT (Levesque, S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2001, 11, 3161-3164)；1G37 (Bachand, B.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2001, 11, 287-290)；1EOJ及1EOL (Slon-Usakiewicz, J.J.等人, Biochemistry, 2000, 39, 2384-2391)；1AWH (Weir, M.P.等人, Biochemistry, 1998, 37, 6645-6657)；1DIT (Krishnan, R.等人, Protein Sci., 1996, 5, 422-433)；1HAO及1HAP (Padmanabhan, K.等人, Acta Crystallogr D Biol Crystallogr., 1996, 52, 272-282)；及1HBT (Rehse, P.H.等人, Biochemistry, 1995, 34, 11537-11544)可搜尋之化合物的凝血酶之晶體結構。
代表性凝血酶原靶向配體提供於圖1中。額外凝血酶原靶向配體可見於例如J Med Chem 46: 3612-22 (2003)、Bioorg Med Chem Lett 12: 1017-22 (2002)、J Med Chem 40: 830-2 (1997)、Bioorg Med Chem Lett 15: 2771-5 (2005)、J Med Chem 42: 3109-15 (1999)、J Med Chem 47: 2995-3008 (2004)、Bioorg Med Chem 16: 1562-95 (2008)、J Med Chem 42: 3109-15 (1999)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
凝血因子 VII在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類凝血因子VII (UniProtKB - P08709 (FA7_HUMAN))。因子VII引發血液凝結之外在路徑。其為以酶原形式在血液中循環之絲胺酸蛋白酶。因子VII藉由次要蛋白水解利用因子Xa、因子XIIa、因子IXa或凝血酶轉化為因子VIIa。在組織因子及鈣離子存在之情況下，因子VIIa隨後藉由有限蛋白水解將因子X轉化為因子Xa。因子VIIa亦將在組織因子及鈣存在之情況下將因子IX轉化為因子IXa。
因子VII涉及血凝塊形成以及動脈及靜脈血栓形成以及與心房震顫相關之血栓栓塞。
蛋白質資料庫網站提供結合至2F9B (Rai, R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 2270-2273)；5U6J (Wurtz, N.R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2017, 27, 2650-2654)；5L2Y、5L2Z及5L30 (Ladziata, .U.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2016, 26, 5051-5057)；5I46 (Glunz, P. W.等人, J Med Chem., 2016, 59, 4007-4018)；4YLQ、4Z6A及4ZMA (Sorensen, A.B.等人, J Biol Chem., 2016, 291, 4671-4683)；4YT6及4YT7 (Glunz, P.W.等人, Bioorg Med Chem Lett, 2015, 25, 2169-2173)；4NA9 (Quan, M.L.等人, J Med Chem., 2014, 57, 955-969)；4NG9 (hang, X.等人, ACS Med Chem Lett., 2014, 5, 188-192)；4JZD、4JZE及4JZF (Bolton, S. A.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2013, 23, 5239-5243)；4JYU及4JYV (Glunz, P.W.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2013, 23, 5244-5248)；4ISH (Priestley, E.S.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2013, 23, 2432-2435)；4ISI (Zhang, X.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2013, 23, 1604-1607)；2ZZU (Shiraishi, T.等人, Chem Pharm Bull (Tokyo), 2010, 58, 38-44)；1WV7及1WUN (Kadono, S.等人, Biochem Biophys Res Commun., 2005, 327, 589-596)；2ZWL、2ZP0 (Kadono, S.等人)；2EC9 (Krishan, R.等人, Acta Crystallogr D Biol Crystallogr., 2007, 63, 689-697)；2PUQ (Larsen, K. S.等人, Biochem J., 2007, 405, 429-438)；2FLR (Riggs, J. R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 3197-3200)；2C4F (Kohrt, J.T.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2006, 16, 1060)；2AEI (Kohrt, J.T.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2005, 15, 4752-4756)；1WTG (Kadono, S.等人, Biochem Biophys Res Commun., 2005, 326, 859-865)；1WSS (Kadono, S.等人, Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun., 2005, 61, 169-173)；1W7X及1W8B (Zbinden, K.G.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2005, 15, 5344)；1WQV (Kadono, S.等人, Biochem Biophys Res Commun., 2004, 324, 1227-1233)；1Z6J (Schweitzer, B. A.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2005, 15, 3006-3011)；1YGC (Olivero, A. G.等人, J Biol Chem., 2005, 280, 9160-9169)；6R2W (Sorensen, A.B.等人, J Biol Chem., 2019, 295, 517-528)；5PA8、5PA9、5PAA、5PAB、5PAC、5PAE、5PAF、5PAG、5PAI、5PAJ、5PAK、5PAM、5PAN、5PAO、5PAQ、5PAR、5PAS、5PAT、5PAU、5PABV、5PAW、5PAX、5PAY、5PB0、5PB1、5PB2、5PB3、5PB4、5PB5及5PB6 (Mayweg, A.V.等人)；及5L0S (Li, Z.等人, Nat Commun., 2017, 8, 185-185)可搜尋之各種化合物的因子VII之晶體結構。另外，Kemball-Cook等人提供對活性位點受抑制之因子VIIa之晶體結構的深刻理解(Kemball-Cook, G.等人, J Struct Biol., 1999, 127(3), 213-23)。
代表性因子VII靶向配體提供於圖1中。額外因子VII靶向配體可見於例如美國專利9174974、Bioorg Med Chem Lett 26: 5051-5057 (2016)、Bioorg Med Chem Lett 11: 2253-6 (2001)、Bioorg Med Chem Lett 15: 3006-11 (2005)、Bioorg Med Chem Lett 12: 2883-6 (2002)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
凝血因子 IX在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類凝血因子IX (UniProtKB - P00740 (FA9_HUMAN))。因子IX為維生素K依賴性血漿蛋白，其藉由在Ca2+離子、磷脂及因子VIIIa存在之情況下將因子X轉化為其活性形式來參與血液凝結之內在路徑。
因子IX涉及血凝塊形成以及動脈及靜脈血栓形成以及與心房震顫相關之血栓栓塞。
蛋白質資料庫網站提供結合至6MV4 (Vadivel, K.等人, J Thromb Haemost., 2019, 17, 574-584)；4ZAE (Zhang, T.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2015, 25, 4945-4949)；4YZU及4Z0K (Parker, D.L.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2015, 25, 2321-2325)；5TNO及5TNT (Sakurada, I.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2017, 27, 2622-2628)；5JB8、5JB9、5JBA、5JBB及5JBC (Kristensen, L.H.等人, Biochem J., 2016, 473, 2395-2411)；3LC3 (Wang, S.等人, J Med Chem., 2010, 53, 1465-1472)；3LC5 (Wang, S.等人, J Med Chem., 2010, 53, 1473-1482)；3KCG (Johnson, D.J.D.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2010, 107, 645-650)；1NL0 (Huang, M.等人, J Biol Chem., 2004, 279, 14338-14346)；1RFN (Hopfner, K.P.等人, Structure, 1999, 7, 989-996)；及6RFK (Sendall, T.J.等人)可搜尋之各種化合物的因子IX之晶體結構。
代表性因子IX靶向配體提供於圖1中。額外因子IX靶向配體可見於例如美國專利9409908、Bioorg Med Chem Lett 25: 5437-43 (2015)、美國專利10189819中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
纖維母細胞生長因子 1 (FGF1)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類纖維母細胞生長因子1 (FGF1) (UniProtKB - P05230 (FGF1_HUMAN))。FGF1在調節細胞存活、細胞分裂、血管新生、細胞分化及細胞遷移中起重要作用。FGF1充當FGFR1及整合素之配體，且在肝素存在之情況下結合至FGFR1，從而經由對酪胺酸殘基進行連續自體磷酸化而引起FGFR1二聚合及活化，該等酪胺酸殘基用作相互作用蛋白質之對接位點，引起若干信號傳導級聯之活化。FGF1誘導FGFR1、FRS2、MAPK3/ERK1、MAPK1/ERK2及AKT1之磷酸化及活化。FGF1可誘導血管新生。FGF1已涉及瘤形成、癌細胞增殖、對抗癌療法之耐受性及新血管生成。
蛋白質資料庫網站提供2AFG (Blaber, M.等人, Biochemistry, 1996, 35, 2086-2094)；及1BAR (Zhu, X.等人, Science, 1991, 251, 90-93)可搜尋之FGF1之晶體結構；以及結合至1AFC (Zhu, X.等人, Structure, 1993, 1, 27-34)；1AXM及2AXM (DiGabriele, A. D.等人, Nature, 1998, 393, 812-817)；1EVT (Plotnikov, A.N.等人, Cell, 2000, 101, 413-424)；1E0O (Pellegrini, L.等人, Nature, 2000, 407, 1029)；及2ERM (Canales, A.等人, FEBS J, 2006, 273, 4716-4727)可搜尋之各種化合物的FGF1之晶體結構。
代表性FGF1靶向配體提供於圖1中。額外FGF1靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem Lett 18: 344-9 (2008)、Chembiochem 6: 1882-90 (2005)、J Med Chem 55: 3804-13 (2012)、J Med Chem 47: 1683-93 (2004)、J Med Chem 53: 1686-99 (2010)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
纖維母細胞生長因子 2 (FGF2)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類纖維母細胞生長因子2 (FGF2) (UniProtKB - P09038 (FGF2_HUMAN))。FGF2充當FGFR1、FGFR2、FGFR3及FGFR4之配體。FGF2亦充當FGF2信號傳導所需之整合素配體，且在調節細胞存活、細胞分裂、細胞分化及細胞遷移中起重要作用。FGF2亦誘導血管新生。FGF2已涉及瘤形成、癌細胞增殖、對抗癌療法之耐受性及新血管生成。
蛋白質資料庫網站提供結合至4OEE、4OEF及4OEG (Li, Y.C.等人, ACS Chem Biol., 2014, 9, 1712-1717)；1EV2 (Plotnikov, A.N.等人, Cell, 2000, 101, 413-424)；及5X1O (Tsao, Y.H.)可搜尋之各種化合物的FGF2之晶體結構。
代表性FGF2靶向配體提供於圖1中。額外FGF2靶向配體可見於例如美國專利8933099、Bioorg Med Chem Lett 12: 3287-90 (2002)、Chem Biol Drug Des 86: 1323-9 (2015)、Bioorg Med Chem Lett 25: 1552-5 (2015)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
纖維接合素- 1在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類纖維接合素1 (FN1) (UniProtKB - P02751 (FINC_HUMAN))。纖維接合素(FN)聚合為膠原蛋白基質沈積所必需的，且為心臟損傷之後心臟肌纖維母細胞(MF)之豐度增加的關鍵促成因素。干擾FN聚合可在缺血/再灌注(I/R)損傷之後緩解MF及纖維化且改善心臟功能。
蛋白質資料庫網站提供結合至3M7P (Graille, M.等人, Structure, 2010, 18, 710-718)；3MQL (Erat, M.C.等人, J Biol Chem., 2010, 285, 33764-33770)；及3EJH (Erat, M.C.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2009, 106, 4195-4200)可搜尋之各種化合物的纖維接合素-1之晶體結構。
代表性FN靶向配體提供於圖1中。額外FN靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem Lett 18: 2499-504 (2008)中，其以引用之方式併入本文中。
激肽釋放素 -1 (KLK1)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類激肽釋放素-1 (UniProtKB - P06870 (KLK1_HUMAN))。腺體激肽釋放素裂解激肽原中之Met-Lys及Arg-Ser鍵以釋放Lys-舒緩肽。激肽釋放素已涉及遺傳性血管水腫(HAE)中之不良反應。
蛋白質資料庫網站提供1SPJ (Laxmikanthan, G.等人, Proteins, 2005, 58, 802-814)可搜尋之KLK1之晶體結構；以及結合至5F8Z、5F8T、5F8X (Xu, M.等人)；及6A8O (Xu, M.等人, FEBS Lett., 2018, 592, 2658-2667)可搜尋之各種化合物的KLK1之晶體結構。另外，Katz等人提供對激肽釋放素之晶體結構的深刻理解(Katz, B.A.等人, Protein Sci., 1998, 7(4), 875-85)。
代表性激肽釋放素靶向配體提供於圖1中。額外激肽釋放素靶向配體可見於例如美國專利9783530、J Med Chem 38: 2521-3 (1995)、美國專利9234000、美國專利10221161、美國專利9687479、美國專利9670157、美國專利9834513、J Med Chem 38: 1511-22 (1995)、美國專利10214512中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
血漿激肽釋放素在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類血漿激肽釋放素(UniProtKB - P03952 (KLKB1_HUMAN))。血漿激肽釋放素裂解Lys-Arg及Arg-Ser鍵。其在與帶負電表面結合之後以逆反應活化因子XII。其亦自HMW激肽原釋放舒緩肽，且亦可藉由將腎素原轉化為腎素而在腎素-血管收縮素系統中起作用。血漿激肽釋放素已涉及視網膜功能異常、糖尿病性黃斑水腫及遺傳性血管水腫(HAE)之發展。
蛋白質資料庫網站提供結合至5TJX (Li, Z.等人, ACS Med Chem Lett., 2017, 8, 185-190)；6O1G及6O1S (Patridge, J. R.等人, J Struct Biol., 2019,  206, 170-182)；4OGX及4OGY (Kenniston, J. A.等人, J Biol Chem., 2014, 289, 23596-23608)；及5F8T、5F8X及5F8Z (Xu, M.等人)可搜尋之各種化合物的血漿激肽釋放素之晶體結構。
代表性血漿激肽釋放素靶向配體提供於圖1中。額外血漿激肽釋放素靶向配體可見於例如J Med Chem 61: 2823-2836 (2018)、J Med Chem 55: 1171-80 (2012)、美國專利8598206、美國專利9738655、Bioorg Med Chem Lett 16: 2034-6 (2006)、美國專利9409908、美國專利10144746、美國專利9290485中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
脂蛋白脂肪酶在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類脂蛋白脂肪酶(UniProtKB - P06858 (LIPL_HUMAN))。脂蛋白脂肪酶為三酸甘油酯代謝中關鍵的酶。其催化三酸甘油酯自循環乳糜微粒及極低密度脂蛋白(VLDL)水解，且因此在血流中之脂質清除率、脂質利用率及儲存中起重要作用。脂蛋白脂肪酶介導毛細管中富含三酸甘油酯之脂蛋白顆粒之趨邊現象。脂蛋白脂肪酶已涉及心血管疾病及肥胖症之發展。
蛋白質資料庫網站提供結合至6E7K (Birrane, G.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2018 116 1723-1732)可搜尋之各種化合物的脂蛋白脂肪酶之晶體結構。
代表性脂蛋白脂肪酶靶向配體提供於圖1中。額外脂蛋白脂肪酶靶向配體可見於例如J Med Chem 47: 400-10 (2004)中，其以引用之方式併入本文中。
基質金屬肽酶 1 ( MMP-1 )在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類基質金屬肽酶1 (MMP-1) (UniProtKB - P03956 (MMP1_HUMAN))。MMP-1在螺旋域中之一個位點處裂解I型、II型及III型膠原蛋白。其亦裂解VII型及X型膠原蛋白。MMP-1已涉及心血管疾病。
蛋白質資料庫網站提供3SHI (Bertini, I.等人, FEBS Lett., 2012, 586, 557-567)可搜尋之MMP-1之晶體結構；以及結合至4AUO (Manka, S. W.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2012, 109, 12461)；3MA2 (Grossman, M.等人, Biochemistry, 2010, 49, 6184-6192)；及2J0T (Iyer, S.等人, J.Biol.Chem., 2007, 282, 364)可搜尋之各種化合物的MMP-1之晶體結構。另外，Iyer等人提供對MMP-1 (Iyer, S.等人, J Mol Biol., 2006, 362(1), 78-88)之活性形式之晶體結構的深刻理解；且Lovejoy等人提供對MMP1之晶體結構及膠原蛋白酶抑制劑之選擇性的深刻理解(Lovejoy, B.等人, Nat Struct Mol Biol., 1999, 6, 217-221)。
代表性MMP-1靶向配體提供於圖1中。額外MMP-1靶向配體可見於例如Bioorg Med Chem Lett 5: 1415-1420 (1995)、Bioorg Med Chem Lett 16: 2632-6 (2006)、Bioorg Med Chem Lett 8: 837-42 (1999)、Eur J Med Chem 60: 89-100 (2013)、J Med Chem 54: 4350-64 (2011)、Bioorg Med Chem Lett 8: 3251-6 (1999)、J Med Chem 42: 4547-62 (1999)、J Med Chem 61: 2166-2210 (2018)、J Med Chem 41: 1209-17 (1998)中，其以引用之方式併入本文中。
巨噬細胞遷移抑制因子 (MIF)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類巨噬細胞遷移抑制因子(MIF) (UniProtKB - P14174 (MIF_HUMAN))。MIF為涉及對細菌病原體之先天性免疫反應的促發炎性細胞介素。MIF在炎症部位處之表現表明在調節巨噬細胞在宿主防禦中之功能中作為介體的作用。其抵消糖皮質激素之抗發炎活性。
MIF已涉及腫瘤惡化；全身性炎症；動脈粥樣硬化；類風濕性關節炎；及全身性紅斑狼瘡以及其他疾病。
蛋白質資料庫網站提供1MIF (Sun, H-W.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 1996, 93, 5191-5196)可搜尋之MIF之晶體結構；以及結合至6PEG (Cirillo, P.F.等人)；5XEJ (Fukushima, K)；6FVE及6FVH (Sokolov, A.V.等人, Biochemistry (Mosc), 2018, 83, 701-707)；6CB5、6CBF、6CBG及6CBH (Trivedi-Parmar, V.等人, ChemMedChem., 2018, 13, 1092-1097)；6B1C、6B1K、6B2C (Dawson, T.K.等人, ACS Med Chem Lett., 2017, 8, 1287-1291)；4Z15、4Z1T及4Z1U (Singh, A.K.等人, J Cell Mol Med., 2017, 21, 142-153)；5HVS及5HVT (Cisneros, J.A.等人, J Am Chem Soc., 2016, 138, 8630-8638)；4PKK (Pantouris, G.等人)；5J7P及5J7Q (Cisneros, J. A.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2016, 26, 2764-2767)；5B4O (Kimura, H.等人, Chem Biol., 2010, 17, 1282-1294)；4PLU、4TRF、4P0H及4P01 (Pantouris, G.等人, Chem Biol., 2015, 22, 1197-1205)；4WR8及4WRB (Dziedzic, P.等人, J Am Chem Soc., 2015, 137 2996-3003)；4K9G (Ioannou, K.等人, Int J Oncol., 2014, 45, 1457-1468)；4OSF、3WNR、3WNS及3WNT (Spencer, E.S.等人, Eur J Med Chem., 2015, 93, 501-510)；4OYQ (Spencer, E.S.等人)；3SMB及3SMC (Crichlow, G.V.等人, Biochemistry, 2012, 51, 7506-7514)；3U18 (Bai, F.等人, J Biol Chem., 2012, 287, 30653-30663)；4F2K (Tyndall, J.D.A.等人, Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun., 2012, 68, 999-1002)；3IJG及3IJJ (Cho, Y.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2010, 107, 11313-11318)；3L5P、3L5R、3L5S、3L5T、3L5U及3L5V (McLean, L.R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, 1821-1824)；3JSF、3JSG及3JTU (McLean, L.R.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2009, 19, 6717)；3HOF (Crawley, L.等人)；3CE4及3DJI (Crichlow G.V.等人, Biochemistry, 2009, 48, 132-139)；3B9S (Winner, M.等人, Cancer Res., 2008, 68, 7253-7257)；2OOH、2OOW及2OOZ (Crichlow, G.V.等人, J Biol Chem., 2007, 282, 23089-23095)；1GCZ及1GD0 (Orita, M.等人, J Med Chem., 2001, 44, 540-547)；及1CA7、1CGQ及1P1G (Lubetsky, J.B.等人, Biochemistry, 1999, 38, 7346-7354)可搜尋之各種化合物的MIF之晶體結構。另外，Sun等人提供對MIF之晶體結構的深刻理解(Proc Natl Acad Sci U S A., 1996, 28;93(11), 5191-6)。
代表性MIF靶向配體提供於圖1中。額外MIF靶向配體可見於例如ACS Med Chem Lett 8: 124-127 (2017)、J Med Chem 44: 540-7 (2001)、J Med Chem 52: 416-24 (2009)、J Med Chem 50: 1993-7 (2007)中，其以引用之方式併入本文中。
轉化生長因子 -β2 (TGF-β2)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類轉化生長因子-β2 (TGF-β2) (UniProtKB - P61812 (TGFB2_HUMAN))。TGF-β2為調節各種過程，諸如血管新生及心臟發育之多功能蛋白質。一旦在釋放LAP之後活化，則TGF-β-2藉由與轉導信號之TGF-β受體(TGFBR1及TGFBR2)結合起作用。腫瘤微環境中之TGF-β2表現已與不良預後相關，且經由T細胞排斥涉及TGF-β2介導之腫瘤抑制。TGF-β2表現亦已涉及血液惡性病及纖維化。
蛋白質資料庫網站提供6I9J (Del Amo-Maestro L.等人, Sci Rep. 2019, 9, 8660-8660)可搜尋之TGF-β2之晶體結構；以及結合至1M9Z (Boesen, C.C.等人Structure, 2002, 10, 913-919)；5QIN (Zhang, Y.等人, ACS Med Chem Lett., 2018, 9, 1117-1122)；5E8V、5E8Y、5E91及5E92 (Tebben, A.J.等人, Acta Crystallogr D Struct Biol., 2016, 72, 658-674)；4P7U (Wangkanont, K.等人, Protein Expr Purif., 2015, 115, 19-25)；4XJJ (Wangkanont等人)；及1KTZ (Hart, P.J.等人, Nat Struct Biol., 2002, 9, 203-208)可搜尋之各種化合物的TGF-β2之晶體結構。
代表性TGF-β2靶向配體提供於圖1中。
凝血酶致敏蛋白 -1 (TSP-1)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類凝血酶致敏蛋白-1 (TSP-1) (UniProtKB - P61812 (TGFB2_HUMAN))。TSP1藉由刺激內皮細胞凋亡、抑制內皮細胞遷移及增殖及調節血管內皮生長因子生物可用性及活性充當血管生成抑制物。TSP1影響腫瘤免疫反應、腫瘤細胞特性，包括黏附、侵襲、遷移、細胞凋亡及增殖。
TSP-1表現已涉及多種疾病，包括涉及促進某些癌症，諸如乳癌、前列腺癌、黑色素瘤、SCLC、骨肉瘤、皮膚鱗狀細胞癌、口腔鱗狀細胞癌、乳頭狀甲狀腺癌瘤、甲狀腺癌、髓母細胞瘤及纖維化病症，諸如糖尿病、肝纖維化，且涉及多發性骨髓瘤。
蛋白質資料庫網站提供1LSL (Tan, K.等人, J Cell Biol., 2002, 159, 373-382)；2ES3 (Tan, K.等人, J Biol Chem., 2008, 283, 3932-3941)；1Z78及2ERF (Tan, K.等人, Structure, 2006, 14, 33-42)；及3R6B (Klenotic, P.A.等人, Protein Expr Purif., 2011, 80, 253-259)可搜尋之TSP-1之晶體結構；以及結合至2OUH及2OUJ (Tan, K.等人, J Biol Chem., 2008, 283, 3932-3941)；及1ZA4 (Tan, K.等人, Structure, 2006, 14, 33-42)可搜尋之各種化合物的TSP-1之晶體結構。
代表性TSP-1靶向配體提供於圖1中。
CD40 配體 (CD40L)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類CD40配體(CD40L) (UniProtKB - P29965 (CD40L_HUMAN))。CD40L為充當CD40/TNFRSF5之配體的細胞介素。其協同刺激T細胞增殖及細胞介素產生。其在T細胞上之交聯產生協同刺激信號，該協同刺激信號與TCR/CD3接合及CD28協同刺激結合增強IL4及IL10之產生。CD40L誘導T細胞中NF-κ-B以及激酶MAPK8及PAK2之活化。其亦誘導CD28之同功異型物3之酪胺酸磷酸化。CD40L在協同刺激物不存在之情況下介導B細胞增殖，以及在IL4存在之情況下介導IgE產生，且涉及免疫球蛋白類別轉換。
蛋白質資料庫網站提供1ALY (Karpusas, M.等人, Structure, 1995, 3, 1031-1039)可搜尋之CD40L之晶體結構；以及結合至3QD6 (An, H.J.等人, J Biol Chem., 2011, 286, 11226-11235)；及6BRB (Karnell, J.L.等人, Sci Transl Med., 2019, 11(489), 6584)可搜尋之各種化合物的CD40L之晶體結構。
CD40L之表現已涉及HIV相關神經認知病症及心血管併發症。代表性CD40L靶向配體提供於圖1中。
尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子 (UPA)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子(UPA) (UniProtKB - P00749 (UROK_HUMAN))。尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子(uPA)為存在於血液中且存在於許多組織之胞外基質中之絲胺酸蛋白酶。此酶之主要生理受質為纖維蛋白溶酶原，其為絲胺酸蛋白酶纖維蛋白溶酶之非活性形式(酶原)。纖維蛋白溶酶之活化觸發蛋白水解級聯，其視生理環境而定參與血栓溶解或胞外基質降解。此級聯已涉及血管疾病及癌症惡化。纖維蛋白溶酶原活化系統之尿激酶及若干種其他組分之表現量升高經發現與腫瘤惡性病相關。
蛋白質資料庫網站提供結合至5ZA7、5ZAJ、5ZA8、5ZA9、5ZAE、5ZAF、5ZAG、5ZAH及5ZC5 (Buckley, B.J.等人, J Med Chem., 2018, 61, 8299-8320)；5LHP、5LHQ、5LHR及5LHS (Kromann-Hansen, T.等人, Sci Rep., 2017, 7, 3385-3385)；2VNT (Fish, P.V.等人 J Med Chem., 2007, 50, 2341)；1OWD、1OWE、1OWH、1OWI、1OWJ及1OWK (Wendt, M.D.等人, J Med Chem., 2004, 47, 303-324)；1SQA、1SQO及1SQT (Wendt, M.D.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2004, 14, 3063-3068)；1U6Q (Bruncko, M.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2005, 15, 93-98)；3OX7、3OY5及3OY6 (Jiang, L.G.等人, J Mol Biol., 2011, 412, 235-250)；4OS1、4OS2、4OS4、4OS5、4OS6及4OS7 (Chen, S.等人, Nat Chem., 2014, 6, 1009-1016)；3IG6 (West, C.W.等人, Bioorg Med Chem Lett., 2009, 19, 5712-5715)；4X0W及4X1P (Jiang, L.等人, Int J Biochem Cell Biol., 2015, 62, 88-92)；4X1N、4X1Q、4X1R及4X1S (Zhao, B.等人, PLoS One, 2014, 9, e115872-e115872)；5WXO及5WXP (Jiang, L.等人, Biochim Biophys Acta., 2018, 1862, 2017-2023)；4MNV、4MNW、4MNX及4MNY (Chen, S.等人, Angew Chem Int Ed Engl., 2014, 53, 1602-1606)；4GLY (Chen, S.等人, J Am Chem Soc., 2013, 135, 6562-6569)；4JK5及4JK5 (Chen, S.等人, Chembiochem., 2013, 14, 1316-1322)；3QN7 (Angelini, A.等人, ACS Chem Biol., 2012, 7, 817-821)；2NWN (Zhao, G.等人, J Struct Biol., 2007, 160, 1-10)；6NMB (Wu, G.等人, Blood Adv., 2019, 3, 729-733)；1W0Z、1W10、1W11、1W12、1W13及1W14 (Zeslawska, E.等人, J Mol Biol., 2003, 328, 109)；4DVA (Jiang, L等人, Biochem J., 2013, 449, 161-166)；6A8G、6A8N (Wang, D.等人, J Med Chem., 2019, 62, 2172-2183)；2VIN、2VIO、2VIP、2VIQ、2VIV及2VIW (Frederickson, M.等人, J Med Chem., 2008, 51, 183)；1EJN (Speri, S.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2000, 97, 5113-5118)；3PB1 (Lin, Z.等人, J Biol Chem., 2011, 286, 7027-7032)；3U73 (Xu, X.等人, J Mol Biol., 2012, 416, 629-641)；1C5W、1C5X、1C5Y及IC5Z (Katz, B.A.等人, Chem Biol., 2000, 7, 299-312)；5XG4 (Xue, G.等人, Food Funct., 2017, 8, 2437-2443)；5WXF (Jiang, L.等人, Biochim Biophys Acta., 2018, 1862, 2017-2023)；5WXS、4ZKS、5WXQ、5WXT、5YC6、5YC7、5Z1C (Jiang, L.等人)；4H42 (Yu, H.Y.等人)；6AG3及6AG9 (Buckley, B.等人)；3KGP、3KHV、3KID、3M61、3MHW及3MWI (Jiang, L.G.等人)；4ZKN、4ZKO及4ZKR (Jiang, L.等人)；2O8T、2O8U、2O8W (Zhao, G.等人)；及4FU7、4FU8、4FU9、4FUB、4FUC、4FUD、4FUE、4FUF、4FUG、4FUH、4FUI及4FUJ (Kang, Y.N.等人)可搜尋之各種化合物的UPA之晶體結構。
代表性UPA靶向配體提供於圖1中。額外UPA靶向配體提供於例如J Med Chem 38: 1511-22 (1995)、Bioorg Med Chem Lett 11: 2253-6 (2001)、Bioorg Med Chem Lett 14: 3063-8 (2004)、J Med Chem 52: 3159-65 (2009)、CSAR 1: (2012)、Bioorg Med Chem 22: 3187-203 (2014)、J Med Chem 50: 2341-51 (2007)、J Mol Biol 329: 93-120 (2003)、Bioorg Med Chem Lett2:1399-1404 (1992)、J Med Chem 35: 4297-305 (1992)、J Med Chem 35: 4150-9 (1992)、J Med Chem 49: 5785-93 (2006)、Bioorg Med Chem 23: 3696-704 (2015)、Bioorg Med Chem Lett 10: 983-7 (2000)、J Med Chem 49: 5785-93 (2006)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
組織型纖維蛋白溶酶原活化因子 (TPA)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類組織型纖維蛋白溶酶原活化因子(TPA) (UniProtKB - P00750 (TPA_HUMAN))。TPA藉由水解纖維蛋白溶酶原中之單個Arg-Val鍵將充足的但非活性的酶原纖維蛋白溶酶原轉化為纖維蛋白溶酶。藉由控制纖維蛋白溶酶介導之蛋白水解，TPA在組織重塑及降解中、在細胞遷移及許多其他生理病理事件中起重要作用。TPA在促進神經元遷移中起直接作用。PLA已展示在包括口腔惡性病之各種癌症中活化。
蛋白質資料庫網站提供1VR1 (Dekker, R.J.等人, J Mol Biol., 1999, 293, 613-627)可搜尋之TPA之晶體結構；以及結合至1RTF (Lamba, D.等人, J Mol Biol., 1996, 258, 117-135)；1A5H (Renatus, M.等人, J Biol Chem., 1997, 272, 21713-21719)；及1BDA (Renatus, M.等人, EMBO J., 1997, 16, 4797-4805)可搜尋之各種化合物的TPA之晶體結構。
代表性TPA靶向配體提供於圖1中。額外TPA靶向配體提供於例如Bioorg Med Chem Lett 15: 4411-6 (2005)、Bioorg Med Chem Lett 13: 2781-4 (2003)、Bioorg Med Chem Lett 6: 2913-2918 (1996)、J Med Chem 44: 2753-71 (2001)、J Med Chem 41: 5445-56 (1999)、Bioorg Med Chem Lett 12: 3183-6 (2002)、美國專利10118930、J Biol Chem 285: 7892-902 (2010)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
纖維蛋白溶酶原 (PLG)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類纖維蛋白溶酶原(PLG) (UniProtKB - P00747 (PLMN_HUMAN))。PLG使血凝塊之纖維蛋白溶解，且在包括胚胎發育、組織重塑、腫瘤侵襲及炎症之多種其他過程中充當蛋白水解因子。其活化尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化物、膠原蛋白酶及若干種補體酶原，諸如C1及C5。其在組織重塑及腫瘤侵襲中之作用可由CSPG4調控。
蛋白質資料庫網站提供1DDJ (Wang, X.等人, J.Mol.Biol., 2000, 295, 903-914)；及4DUR及4DUU (Law, R.H.P.等人, Cell Rep., 2012, 1, 185-190)可搜尋之PLG之晶體結構。
代表性PLG靶向配體提供於圖1中。額外PLG靶向配體提供於例如J Med Chem 35: 4297-305 (1992)、J Med Chem 38: 1511-22 (1995)、J Med Chem 56: 820-31 (2013)、美國專利8598206、美國專利8921319、J Med Chem 55: 1171-80 (2012)、Bioorg Med Chem Lett 12: 3183-6 (2002)、Bioorg Med Chem 23: 3696-704 (2015)、Bioorg Med Chem Lett 13: 723-8 (2003)、Bioorg Med Chem Lett 7: 331-336 (1997)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物 -1 (PAI-1)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物1 (PAI-1) (UniProtKB - P05121 (PAI1_HUMAN))。PAI-1為絲胺酸蛋白酶抑制物及組織型纖維蛋白溶酶原活化因子(PLAT)及尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子(PLAU)之主要抑制物。作為PLAT抑制物，其為纖維蛋白溶解下調所需的，且負責血凝塊之受控降解。作為PLAU抑制物，其獨立於其作為蛋白酶抑制物之作用涉及細胞黏附及擴散之調節，且充當細胞遷移之調節物。PAI-1之過表現會促進包括(但不限於)口腔癌及乳癌之腫瘤中的血管新生、癌細胞轉移及不良預後。
蛋白質資料庫網站提供3Q02及3Q03 (Jensen, J.K.等人, J Biol Chem., 2011, 286, 29709-29717)；1B3K (Sharp, A.M.等人, Structure, 1999, 7, 111-118)；1C5G (Tucker, H.M.等人, Nat Struct Biol., 1995, 2, 442-445)；1DVM (Stout, T.J.等人, Biochemistry, 2000, 39, 8460-8469)；及3UT3 (Lin, Z.H.等人)可搜尋之PAI-1之晶體結構；以及結合至4AQH (Fjellstrom, O.等人, J Biol Chem., 2013, 288, 873)；3R4L (Jankun, J.等人, Int J Mol Med., 2012, 29 61-64)；1A7C (Xue, Y.等人, Structure, 1998, 6, 627-636)；1OC0 (Zhou, A.等人, Nat Struct Biol., 2003, 10, 541)；6I8S (Vousden, K.A.等人, Sci Rep., 2019, 9, 1605-1605 )；4G8O及4G8R (Li, S.H.等人, Proc Natl Acad Sci U S A, 2013, 110, E4941-E4949)；6GWQ、6GWN及6GWP (Sillen, M.等人, J Thromb Haemost, 2019)；及4IC0 (Hong, Z.B.等人)可搜尋之各種化合物的PAI-1之晶體結構。
代表性PAI-1靶向配體提供於圖1中。額外PAI-1靶向配體提供於例如J Biol Chem 285: 7892-902 (2010)、美國專利9120744、Bioorg Med Chem Lett 13: 3361-5 (2003)、Bioorg Med Chem Lett 12: 1063-6 (2002)、Bioorg Med Chem Lett 13: 1705-8 (2003)、Bioorg Med Chem Lett 11: 2589-92 (2001)、美國專利9718760中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
胎盤生長因子 (PIGF)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類胎盤生長因子(PGF) (UniProtKB - P49763 (PLGF_HUMAN))。PGF為在血管新生及內皮細胞生長中具有活性，從而刺激其增殖及遷移的生長因子。其結合至受體FLT1/VEGFR-1。同功異型物PlGF-2以肝素依賴性方式結合NRP1/神經纖毛蛋白-1及NRP2/神經纖毛蛋白-2。PGF亦促進細胞腫瘤生長，且已涉及年齡相關黃斑變性(AMD)及脈絡膜新生血管(CNV)。
蛋白質資料庫網站提供1FZV (Iyer, S.等人, J Biol Chem., 2001, 276, 12153-12161)可搜尋之PIGF之晶體結構；以及結合至1RV6 (Christinger, H. W., J Biol Chem., 2004, 279, 10382-10388)可搜尋之各種化合物的PIGF之晶體結構。另外，De Falco提供對胎盤生長因子之發現及生物活性的深刻理解(De Falco, Exp Mol Med., 2012, 44, 1-9)。
代表性PGF靶向配體提供於圖1中。額外PGF靶向配體提供於例如J Med Chem 54: 1256-65 (2011)、J Nat Prod 76: 29-35 (2013)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
IB 組 磷脂酶 A2 (PA21B)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類IB組磷脂酶A2 (PA21B) (UniProtKB - P04054 (PA21B_HUMAN))。PA21B優先在sn-2位置處裂解磷脂，釋出游離脂肪酸及溶血磷脂。PA21B已涉及多種疾病，包括心血管疾病、動脈粥樣硬化、免疫病症及癌症。
蛋白質資料庫網站提供3FVJ及3FVI (Pan, Y.H.等人, Biochim.Biophys.Acta., 2010, 1804, 1443-1448)可搜尋之PA21B之晶體結構。
代表性PA21B靶向配體提供於圖1中。額外PA21B靶向配體提供於例如J Med Chem 39: 3636-58 (1996)、Chembiochem 4: 181-5 (2003)、J Med Chem 39: 5159-75 (1997)、J Med Chem 51: 4708-14 (2008)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
IIA 組 磷脂酶 A2 (PA2GA)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類IIA組磷脂酶A2 (PA2GA) (UniProtKB - P04054 (PA21B_HUMAN))。PA2GA在3-sn-甘油磷脂中催化2-醯基之鈣依賴性水解。其被認為參與調節生物膜中之磷脂代謝，包括類二十烷酸生物合成。獨立於其催化活性，其亦充當整合素之配體。PA2GA以整合素依賴性方式誘導細胞增殖。PA2GA已涉及多種疾病，包括心血管疾病、動脈粥樣硬化、免疫病症及癌症。
蛋白質資料庫網站提供結合至2ARM及1SV3 (Singh, N.等人, Proteins, 2006, 64, 89-100)；5G3M及5G3N (Giordanetto, F.等人ACS Med Chem Lett., 2016, 7, 884)；1KQU (Jansford, K.A.等人, Chembiochem., 2003, 4 ,181-185)；及1ZYX (Singh, N.等人)可搜尋之各種化合物的PA2GA之晶體結構。另外，Singh等人提供對IIA組磷脂酶A2與兩種天然消炎劑：大茴香酸(anisic acid)及阿托品(atropine)之複合物之晶體結構的深刻理解，揭示一種類似的結合模式(Singh, N.等人, Proteins, 2006, 64(1):89-100)；且Kitadokoro等人亦提供對人類分泌性磷脂酶A2-IIA與強效吲哚𠯤抑制物120-1032之複合物之晶體結構的深刻理解(Kitadokoro, K.等人, J Biochem., 1998, 123(4), 619-23)。
代表性PA2GA靶向配體提供於圖1中。額外PA2GA靶向配體提供於例如J Med Chem 48: 893-6 (2005)、J Med Chem 39: 5159-75 (1997)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
因子 B在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類補體因子B (UniProtKB - P00751 (CFAB_HUMAN))。補體因子B作為補體系統之替代路徑之一部分，由因子D裂解為2個片段：Ba及Bb。Bb為絲胺酸蛋白酶，隨後與補體因子3b組合以生成C3或C5轉化酶。其亦已涉及預活化B-淋巴球之增殖及分化、周邊血液單核球之快速擴散、淋巴球芽生之刺激及紅血球之裂解。Ba抑制預活化B-淋巴球之增殖。
蛋白質資料庫網站提供2OK5 (Milder, F.J.等人, Nat Struct Mol Bio 2007, 14, 224-228)可搜尋之補體因子B之晶體結構；以及結合至6QSW、6QSX及6RAV (Schubart, A.等人, Proc Natl Acad Sci 2019, 116, 7926-7931)；6T8U、6T8W及6T8V (Mainolfi, N.等人, J Med Chem 2020, 63, 5697-5722)；及7JTN (Xu, X.等人, J Immunol 2021, 206, 數位物件識別碼(doi):10.4049/jimmunol.2001260)可搜尋之各種化合物的補體因子B之晶體結構。
代表性補體因子B靶向配體提供於圖5中。額外補體因子B靶向配體提供於例如美國專利9682968B2、美國專利9475806B2、美國專利9452990B2、Proc Natl Acad Sci 116: 7926-7931 (2019)、J Med Chem 52: 6042-6052 (2009)及J Med Chem 63: 5697-5722 (2020)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，胞外靶向配體係選自：
Figure 02_image233
Figure 02_image235
Figure 02_image237
； 其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，因子B靶向配體係選自以下中所描述之配體：Mainolfi, N.等人Discovery of 4-((2 S ,4 S)-4-Ethoxy-1-((5-Methoxy-7-Methyl-1 H -Indol-4-Yl)Methyl)Piperidin-2-Yl)Benzoic Acid (LNP023), a Factor B Inhibitor Specifically Designed To Be Applicable to Treating a Diverse Array of Complement Mediated Diseases. J. Med. Chem. 2020, 63 (11), 5697-5722；WO2020/016749；WO2018/005552；WO2013/192345；或WO2015009616。
在某些實施例中，因子B靶向配體-連接子係選自：
Figure 02_image239
Figure 02_image241
。
在某些實施例中，本發明之化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image243
Figure 02_image245
。
因子 D在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類補體因子D (UniProtKB - P00746 (CFAD_HUMAN))。因子D在因子B與因子C3b複合，從而活化C3bbb複合物時裂解因子B，該C3bbb複合物隨後變為替代路徑之C3轉化酶。其功能與C1s在經典路徑中之功能同源。
蛋白質資料庫網站提供結合至6FTZ、6FUT、6FUH、6FUG、6FUJ及6FUI (Vulpetti, A.等人, ACS Med Chem Lett 2018, 9, 490-495)；5TCA及5TCC (Yang, C. Y.等人, ACS Med Chem Lett 2016, 7, 1092-1096)；5MT4 (Vulpetti, A.等人, J Med Chem 2017, 60, 1946-1958)；1DFP (Cole, L. B.等人, Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 1997, 53, 143-150)；1DIC (Cole, L. B.等人, Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 1998, 54, 711-717)；6QMR及6QMT (Karki, R.G.等人, J Med Chem 2019, 62, 4656-4668)可搜尋之各種化合物的補體因子D之晶體結構。
代表性補體因子D靶向配體提供於圖6中。額外補體因子D靶向配體提供於例如J Med Chem 60: 5717-5735 (2017)、Nat Chem Biol 12: 1105-1110 (2016)、美國專利9598446B2、美國專利9643986B2、美國專利US9663543B2、美國專利US9695205B2、美國專利9732103B2、美國專利9732104B2、美國專利9758537B2、美國專利9796741B2、美國專利9828396B2、美國專利10000516B2、美國專利10005802B2、美國專利10011612B2、美國專利10081645B2、美國專利10087203B2、美國專利10092584B2、美國專利10100072B2、美國專利10106563B2、美國專利10138225B2、美國專利10189869B2、美國專利10253053B2、美國專利10287301B2、美國專利10301336B2、美國專利10370394B2、美國專利10385097B2、美國專利10428094B2、美國專利10428095B2、美國專利10464956B2、美國專利10550140B2、美國專利10660876B2、美國專利10662175B2、美國專利10689409B2、美國專利10807952B2、美國專利10822352B2、美國專利9464081B2及Hematological 102: 466-475 (2017)中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，胞外靶向配體係選自：
Figure 02_image247
； 其中： R 21a、R 21b、R 21c、R 21d、R 21e、R 21f及R 21g在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、羥基、烷氧基、疊氮基、胺基、氰基、-NR 6R 7、-NR 8SO 2R 3、-NR 8S(O)R 3、鹵烷基、雜烷基、芳基、雜芳基、雜環基、-SR 3、-C(O)OR 3、-C(O)NR 6NR 7、-OR 3及雜環； R 201、R 202、R 202'及R 203獨立地選自氫、鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C 1-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6炔基、C 2-C 6烷醯基、C 1-C 6硫烷基、羥基C 1-C 6烷基、胺基C 1-C 6烷基、-C 0-C 4烷基NR 9R 10、-C(O)OR 9、-OC(O)R 9、-NR 9C(O)R 10、-C(O)NR 9R 10、-OC(O)NR 9R 10、-O(雜芳基)、-NR 9C(O)OR 10、C 1-C 2鹵烷基、-C 0-C 4烷基(C 3-C 7環烷基)及-O-C 0-C 4烷基(C 3-C 7環烷基)及C 1-C 2鹵烷氧基，其中R 209及R 210在每次出現時獨立地選自氫、C 1-C 6烷基及(C 3-C 7環烷基)C 0-C 4烷基； 或R 202及R 202'可連在一起以形成3至6員螺環，其視情況經1個或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、羥基、氰基、-COOH、C 1-C 4烷基(尤其包括甲基)、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、C 1-C 4烷氧基、C 2-C 4烷醯基、羥基C 1-C 4烷基、(單及二-C 1-C 4烷基胺基)C 0-C 4烷基、-C 0-C 4烷基(C 3-C 7環烷基)、-O-C 0-C 4烷基(C 3-C 7環烷基)、C 1-C 2鹵烷基及C 1-C 2鹵烷氧基； 或R 201及R 202可連在一起以形成3員碳環，其視情況經1、2或3個選自R 21之取代基取代； 或R 201及R 202可連在一起以形成4至6員碳環或含有1或2個獨立地選自N、O及S之雜原子的4至6員雜環，其視情況經1、2或3個選自R 21之取代基取代； R 202及R 203可連在一起以形成3至6員碳環或3至6員雜環，其視情況經1、2或3個選自R 21之取代基取代； L 100係選自
Figure 02_image249
，其中R 217為氫或C 1-C 6烷基，且R 218及R 218'獨立地選自氫、鹵素、羥甲基及甲基；且m為0、1、2或3； B 100為環烷基、具有1、2、3或4個獨立地選自N、O及S之雜原子的雜環基團、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-(C 0-C 4烷基)(芳基)、-(C 0-C 4烷基)(雜芳基)或-(C 0-C 4烷基)(聯二苯)，其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，胞外靶向配體係選自：
Figure 02_image251
Figure 02_image253
Figure 02_image255
Figure 02_image257
Figure 02_image259
Figure 02_image261
Figure 02_image263
Figure 02_image265
； 其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，因子D靶向配體係選自以下中所描述之配體：美國專利9,796,74；美國專利10,011,612；WO2018/160889；WO2019/195720；WO2019/057946；Karki, R. G.等人Design, Synthesis, and Preclinical Characterization of Selective Factor D Inhibitors Targeting the Alternative Complement Pathway. J. Med. Chem. 2019, 62 (9), 4656-4668；或Belanger, D. B.等人；WO2015/009977。
在某些實施例中，補體因子D靶向配體-連接子-係選自：
Figure 02_image267
Figure 02_image269
Figure 02_image271
Figure 02_image273
。
在某些實施例中，本發明之化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image275
Figure 02_image277
Figure 02_image279
Figure 02_image281
。
在某些實施例中，本發明之化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image283
Figure 02_image285
在某些實施例中，因子D靶向配體係選自：
Figure 02_image287
。
在某些非限制性實施例中，本發明之因子D降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image289
Figure 02_image291
Figure 02_image293
Figure 02_image295
補體因子D降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image297
Figure 02_image299
Figure 02_image301
因子 H在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類補體因子H (UniProtKB - P08603 (CFAH_HUMAN))。補體因子H為在藉由調控補體活化維持平衡良好的免疫反應中起重要作用的糖蛋白。充當補體之可溶性抑制物，其中其與自身標記(諸如聚醣結構)之結合阻止細胞表面上之補體活化及放大。補體因子H加快補體替代路徑(AP) C3轉化酶C3bBb之衰變，因此阻止局部形成更多C3b，亦即補體放大迴路之主要參與者。作為絲胺酸蛋白酶因子I之輔因子，CFH亦調節已經沈積之C3b的蛋白水解降解。另外，其經由與特定受體之相互作用介導若干種細胞反應。舉例而言，CFH與CR3/ITGAM受體相互作用，且因此介導人類嗜中性球與不同病原體之黏附。此等病原體繼而被吞噬及破壞。
蛋白質資料庫網站提供3KXV及3KZJ (Bhattacharjee, A.等人, Mol Immunol 2010, 47, 1686-1691)可搜尋之補體因子H的高度類似突變體之晶體結構；以及結合至2UWN (Prosser, B.E.等人, J Exp Med 2007, 204, 2277)；5WTB (Zhang, Y.等人, Biochem J 2017, 474, 1619-1631)；5O32及5O35 (Xue, X.等人, Nat Struct Mol Biol 2017, 24, 643-651)；4ONT (Blaum, B.S.等人, Nat Chem Biol 2015, 11, 77-82)；及4ZH1 (Blaum, B.S.等人, Glycobiology 2016, 26, 532-539)可搜尋之各種化合物的野生型補體因子H之晶體結構。
代表性補體因子H靶向配體提供於圖7中。額外補體因子H靶向配體提供於例如J Immunol 182: 6394-6400 (2009)、PLoS Pathogens 4: e1000250 (2008)、PLoS Pathogens 6: e1001027 (2010)、美國專利10865238B1、美國專利8962795B2、美國專利申請案20160317573A1及美國專利申請案20190315842A1中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
補體組分 5 (C5)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類補體組分5 (C5) (UniProtKB - P01031 (CO5_HUMAN))。C5轉化酶活化C5會引發遲補體組分C5-C9自發組裝為膜攻擊複合物。C5b具有針對C6之短暫結合位點。C5b-C6複合物為裂解複合物在其上組裝之基礎。
蛋白質資料庫網站提供3CU7 (Fredslund, F., Nat Immunol 2008, 9, 753-760)可搜尋之補體組分5之晶體結構；以及結合至5I5K (Schatz-Jakobsen, J.A.等人, J Immunol 2016, 197, 337-344)；3PVM及3PRX (Laursen, N.S.等人, EMBO J 2011, 30, 606-616)；及3KLS (Laursen, N. S.等人, Proc Natl Acad Sci 2010, 107, 3681-3686)可搜尋之各種化合物的補體組分5之晶體結構。
代表性補體組分5靶向配體提供於圖8中。額外補體組分5靶向配體提供於例如J Immunol 197: 337-344 (2016)、Ther Adv Hematol 10: 1-11 (2019)、BioDrugs 34: 149-158 (2020)、Blood 135: 884-885 (2020)、美國專利申請案20170342139A1及美國專利申請案20200095307A1中，其中之各者以引用之方式併入本文中。
在某些實施例中，胞外靶向配體係選自：
Figure 02_image303
Figure 02_image305
； 其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，補體C5靶向配體係選自以下中所描述之配體：Jendza, K.等人. A Small-Molecule Inhibitor of C5 Complement Protein. Nat Chem Biol 2019, 15 (7), 666-668；或Zhang, M.；Yang, X.-Y.；Tang, W.；Groeneveld, T. W. L.；He, P.-L.；Zhu, F.-H.；Li, J.；Lu, W.；Blom, A. M.；Zuo, J.-P.；Nan, F.-J. Discovery and Structural Modification of 1-Phenyl-3-(1-Phenylethyl)Urea Derivatives as Inhibitors of Complement. ACS Med. Chem. Lett. 2012, 3 (4), 317-321。
在某些實施例中，C5靶向配體係選自：
Figure 02_image307
。
在某些實施例中，C5靶向配體係選自：
Figure 02_image309
補體C5降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image311
補體 C1s在某些實施例中，胞外靶向配體為C1s靶向配體。
在某些實施例中，補體C1s靶向配體係選自WO2020/198062或美國專利6,683,055中所描述之配體。
在某些實施例中，本發明之化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image313
。
MASP在某些實施例中，胞外靶向配體為MASP靶向配體。
在某些實施例中，MASP靶向配體係選自以下中所描述之配體：Héja, D.等人. Monospecific Inhibitors Show That Both Mannan-Binding Lectin-Associated Serine Protease-1 (MASP-1) and -2 Are Essential for Lectin Pathway Activation and Reveal Structural Plasticity of MASP-2. Journal of Biological Chemistry 2012, 287 (24), 20290-20300；Dobó, J.；Kocsis, A.；Gál, P. Be on Target: Strategies of Targeting Alternative and Lectin Pathway Components in Complement-Mediated Diseases. Front. Immunol. 2018, 9, 1851；或WO 2014/144542。
在某些實施例中，MSAP-1靶向配體為經由N端或C端連接之SGMI-1肽。
在某些實施例中，MSAP-1靶向配體為經由N端或C端連接之SGMI-2肽。
在某些實施例中，MSAP-1靶向配體為經由N端或C端連接之TFMI-3肽。
因子 XIa在某些實施例中，胞外靶向配體為因子XIa靶向配體。
在某些實施例中，因子XIa靶向配體係選自以下中所描述之配體：Lorthiois, E.等人Structure-Based Design and Preclinical Characterization of Selective and Orally Bioavailable Factor XIa Inhibitors: Demonstrating the Power of an Integrated S1 Protease Family Approach. J. Med. Chem. 2020, 63 (15), 8088-8113。
在某些實施例中，因子XIa靶向配體係選自以下中所描述之配體：Quan, M. L.等人Factor XIa Inhibitors as New Anticoagulants. J. Med. Chem. 2018, 61 (17), 7425-7447。
在某些實施例中，因子XIa靶向配體係選自以下中所描述之配體：Yang, W.等人Discovery of a High Affinity, Orally Bioavailable Macrocyclic FXIa Inhibitor with Antithrombotic Activity in Preclinical Species. J. Med. Chem. 2020, 63 (13), 7226-7242。
在某些實施例中，因子XIa靶向配體-連接子為：
Figure 02_image315
在某些實施例中，本發明之化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image317
在某些實施例中，選擇因子Xia靶向配體，其中錨鍵在官能化存在或不存在之情況下置放於任何適合位置處。
Figure 02_image319
。
在某些實施例中，因子XIa靶向配體係選自：
Figure 02_image321
Figure 02_image323
免疫球蛋白降解免疫球蛋白(例如IgG)可活體內引起、調控或放大疾病，諸如異常細胞增殖，諸如腫瘤及癌症、自體免疫病症、炎症及衰老相關疾病。舉例而言，免疫球蛋白結合至細胞表面受體，常常在諸如癌症及炎症之多種疾病中引發異常信號傳導。
本文所描述之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之鹽及/或其醫藥學上可接受之組合物可用於治療由結合至免疫球蛋白靶向配體之免疫球蛋白介導之病症。所描述降解劑能夠靶向介導病理性病症之免疫球蛋白以進行溶酶體降解。所選免疫球蛋白可經由諸如改變生物路徑、致病性信號傳導或調控信號級聯或細胞進入的作用機制來調控人類之病症。免疫球蛋白藉由作為免疫球蛋白之配體的免疫球蛋白靶向配體募集。
因此，在一些實施例中，提供一種治療患有由免疫球蛋白介導之病症之宿主的方法，其包括向宿主(通常人類)投與有效量的本文所描述之靶向免疫球蛋白之降解劑或其醫藥學上可接受之鹽，視情況呈醫藥學上可接受之組合物形式。
免疫球蛋白可為蛋白質之正常形式或異常形式。舉例而言，免疫球蛋白可為突變蛋白或例如其中部分或完整的功能獲得或功能損失由核苷酸多型性編碼之蛋白質。
本發明經由使用特異性免疫球蛋白靶向配體來實現靶向特異性免疫球蛋白。本發明之目標免疫球蛋白可包括(但不限於)免疫球蛋白G (IgG)、免疫球蛋白A (IgA)及免疫球蛋白E (IgE)。此等免疫球蛋白介導可用有效量的本文所描述之所揭示之結合ASGPR之免疫球蛋白降解劑治療的一系列疾病。
免疫球蛋白 A (IgA)免疫球蛋白A (IgA)之異常表現介導一系列自體免疫及免疫介導之病症，包括IgA腎病變(亦稱為柏格氏病(Berger's disease))、乳糜瀉、克隆氏病、Henoch-Schönlein二氏紫癜症(HSP) (亦稱為IgA血管炎)、IgA天疱瘡、疱疹樣皮炎、發炎性腸病(IBD)、休格倫氏症候群、僵直性脊椎炎、酒精性肝硬化、後天免疫缺乏症候群、IgA多發性骨髓瘤、α鏈病、IgA單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、線性IgA大皰性皮膚病、類風濕性關節炎、潰瘍性結腸炎及原發性腎絲球腎炎以及其他病症。
IgA之特異性降解可經由使用IgA特異性免疫球蛋白靶向配體來實現。在某些實施例中，所用免疫球蛋白靶向配體為Opt肽。適用作IgA特異性免疫球蛋白靶向配體之IgA特異性Opt肽之變化形式及衍生物描述於Hatanaka等人 Journal of Biological Chemistry, 287(51) 43126-43136中。在某些實施例中，IgA特異性免疫球蛋白靶向配體為Opt-1。在某些實施例中，IgA特異性免疫球蛋白靶向配體為Opt-2。在某些實施例中，IgA特異性免疫球蛋白靶向配體為Opt-3。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image325
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image327
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image329
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白靶向配體為：
Figure 02_image331
。
蛋白質資料庫網站提供IgA之晶體結構；以及結合至5E8E (Baglin, T.P.等人, J. Thromb. Haemost., 2016, 14: 137-142)及2QTJ (Bonner, A.等人, J. Immunol., 2008, 180: 1008-1018)可搜尋之各種化合物的IgA之晶體結構。另外，Hatanaka T.等人提供對IgA對OPT-1肽之特異性及高結合親和力的深刻理解(J Biol Chem., 2012, 287(51), 43126-43136.)。
代表性IgA靶向配體提供於圖1中。
額外代表性IgA靶向配體包括： SEQ ID NO:1 MLKKIE (Jerlstrom等人 Infect. Immun. 1996年7月; 64(7):2787-2793； SEQ ID NO:2 Opt-1 - HMVCLAYRGRPVCFAL (Hatanaka等人 J. Biol. Chem. 第287卷, 第51期, 第43126-43136頁, 2012年12月14日) SEQ ID NO:3 Opt-2 - HMVCLSYRGRPVCFSL (Hatanaka等人 J. Biol. Chem. 第287卷, 第51期, 第43126-43136頁, 2012年12月14日) SEQ ID NO:4 Opt-3 - HQVCLSYRGRPVCFST (Hatanaka等人 J. Biol. Chem. 第287卷, 第51期, 第43126-43136頁, 2012年12月14日) SEQ ID NO:5 QMRCLSYKGRRVCLWL (美國專利9593147) SEQ ID NO:6 KRLCLQYKGSKVCFRL (美國專利9593147) SEQ ID NO:7 RMRCLTYRGRRVCLEL (美國專利9593147) SEQ ID NO:8 SMRCLQYRGSRVCLTL (美國專利9593147) SEQ ID NO:9 HLRCLRYKGTRVCFSL (美國專利9593147) SEQ ID NO:10 HVRCLSYKGREVCVQL (美國專利9593147) SEQ ID NO:11 PRMCLFIYKGRRVCIPY (美國專利9593147) SEQ ID NO:12 HMRCLHYKGRRVCFLL (美國專利9593147) SEQ ID NO:13 HKRCLHYRGRMVCFLI (美國專利9593147) SEQ ID NO:14 QKRCLKYKGSRVCFFL (美國專利9593147) SEQ ID NO:15 HVRCLRYRGKNVCFLL (美國專利9593147) SEQ ID NO:16 SDVCLRYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:17 RDVCLRYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:18 HDVCLRYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:19 SMVCLRYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:20 SAVCLRYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:21 SDVCLNYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:22 SDVCLHYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:23 SDVCLAYRGRPVCFQV (美國專利9593147) SEQ ID NO:24 SDVCLRYRGRPVCFAV (美國專利9593147) SEQ ID NO:25 SDVCLRYRGRPVCFQL (美國專利9593147) SEQ ID NO:26 SDVCLRYRGRPVCFQA (美國專利9593147) SEQ ID NO:27 HMVCLSYRGRPVCF (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:28 HMVCLSYRGRPVCFS (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:29 HQVCLSYRGQPVCFSL (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:30 HQVCLSYRGRPTCFSL (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:31 HQVCLSYRGRPVCYSL (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:32 HQVCLSYRGQPVCFST (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:33 HQVCLSYRGRPTCFST (美國公開案第20150044701號) SEQ ID NO:34 HQVCLSYRGQPTCFST (美國公開案第20150044701號)
在某些實施例中，IgA靶向配體為
Figure 02_image333
IgA降解化合物之非限制性實例包括
Figure 02_image335
Figure 02_image337
Figure 02_image339
Figure 02_image341
Figure 02_image343
Figure 02_image345
免疫球蛋白 G (IgG)免疫球蛋白G (IgG)介導一系列自體免疫、感染及代謝疾病，包括全身性纖維發炎性疾病。另外，IgG4之過度表現與通常包括多個器官之IgG4相關疾病相關聯，且該等病症包括1型自體免疫胰臟炎、間質性腎炎、立得氏甲狀腺炎(Riedel's thyroiditis)、渦紋樣纖維化、米庫利茲氏病(Mikulicz's disease)、庫特納氏腫瘤(Küttner's tumor)、發炎性假瘤(在身體之各個部位中)、縱隔纖維化、腹膜後纖維化(奧蒙德氏病(Ormond's disease))、主動脈炎及主動脈周炎、近端膽道狹窄、特發性補體結合不足性腎小管與組織間隙腎炎、多病灶性纖維硬化、硬腦膜炎、胰臟腫大、腫瘤樣病變、心包炎、類風濕性關節炎(RA)、發炎性腸病、多發性硬化症、重症肌無力、僵直性脊椎炎、原發性休格倫氏症候群、牛皮癬性關節炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、硬化性膽管炎、IgG單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、黑色素瘤、大皰性類天疱瘡、古巴士德氏病(Goodpasture disease)、腦炎、栓塞性血小板減少性紫癜症、免疫性血小板減少症、慢性發炎性多發性神經病變、邊緣腦炎、神經肌強直、Morvan氏症候群、落葉型天疱瘡、尋常天疱瘡、REM及非REM類睡症及膜性腎病變、多發性硬化症、甲狀腺機能亢進性葛瑞夫氏病(hyperthyroid Grave's disease)、後天性水皰性表皮鬆解症、妊娠期類天疱瘡、抗p200類天疱瘡及伴腫瘤性天疱瘡以及其他病症。
IgG之特異性降解可經由使用IgG特異性免疫球蛋白靶向配體來實現。在某些實施例中，免疫球蛋白靶向配體結合至IgG之Fc區。在某些實施例中，IgG特異性免疫球蛋白靶向配體為Fc結合肽。在某些實施例中，IgG特異性免疫球蛋白靶向配體為Fc-BP2。在某些實施例中，IgG特異性免疫球蛋白靶向配體為Fc-III。
在某些替代實施例中，在靶向配體中繪製的具有立體化學的本文所繪製之任何化合物在本文中亦在無立體化學的情況下加以描述。舉例而言，在某些實施例中：
Figure 02_image347
為
Figure 02_image349
Figure 02_image351
為
Figure 02_image353
。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image355
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image357
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image359
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image361
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image363
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image365
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image367
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image369
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image371
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image373
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image375
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image377
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image379
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image381
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image383
Figure 02_image385
Figure 02_image387
Figure 02_image389
Figure 02_image391
Figure 02_image393
Figure 02_image395
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image397
Figure 02_image399
Figure 02_image401
Figure 02_image403
Figure 02_image405
Figure 02_image407
Figure 02_image409
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image411
Figure 02_image413
Figure 02_image415
Figure 02_image417
Figure 02_image419
Figure 02_image421
Figure 02_image423
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白靶向配體為：
Figure 02_image425
。
在某些實施例中，免疫球蛋白靶向配體為：
Figure 02_image427
。
在某些實施例中，免疫球蛋白靶向配體為：
Figure 02_image429
。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image431
Figure 02_image433
Figure 02_image435
Figure 02_image437
Figure 02_image439
Figure 02_image441
Figure 02_image443
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image445
Figure 02_image447
Figure 02_image449
Figure 02_image451
Figure 02_image453
Figure 02_image455
Figure 02_image457
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image459
Figure 02_image461
Figure 02_image463
Figure 02_image465
Figure 02_image467
Figure 02_image469
Figure 02_image471
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image473
Figure 02_image475
Figure 02_image477
Figure 02_image479
Figure 02_image481
Figure 02_image483
Figure 02_image485
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image487
Figure 02_image489
Figure 02_image491
Figure 02_image493
Figure 02_image495
Figure 02_image497
Figure 02_image499
或其醫藥學上可接受之鹽。
蛋白質資料庫網站提供1H3X (Krapp, S.等人, J. Mol. Biol., 2003, 325: 979)；及5V43 (Lee, C.H.等人, Nat. Immunol., 2017, 18: 889-898)可搜尋之IgG之晶體結構；以及結合至5YC5 (Kiyoshi M.等人, Sci. Rep., 2018, 8: 3955-3955)；5XJE (Sakae Y.等人, Sci. Rep.,2017, 7: 13780-13780)；5GSQ (Chen, C. L.等人, ACS Chem. Biol., 2017, 12: 1335-1345)；及1HZH (Saphire E. O.等人, Science, 2001, 293: 1155-1159)可搜尋之各種化合物的IgG之晶體結構。另外，Kiyoshi, M.等人提供對人類IgG1與其高親和力人類受體FcγRI之結合之結構基礎的深刻理解(Kiyosi M.等人, Nat Commun., 2015, 6, 6866)。
代表性IgG靶向配體提供於圖1中。
額外代表性IgG靶向配體包括：
Figure 02_image501
其中X R為O、S、NH或N-C 1-C 3烷基；且 X M為O、S、NH或N-C 1-C 3烷基。
在其他實施例中，IgG靶向配體係選自：
Figure 02_image503
Figure 02_image505
及
Figure 02_image507
。
在一些實施例中，IgG靶向配體為根據以下化學結構之基團：
Figure 02_image509
其中R N02為視情況經由CH 2、S(O)、S(O) 2、-S(O) 2O、-OS(O) 2或OS(O) 2O連接之二硝基苯基。
在某些實施例中，IgG靶向配體係選自：
Figure 02_image511
其中X 100係選自O、CH 2、NH、N-C 1-C 3烷基、NC(O)C 1-C 3烷基、S(O)、S(O) 2、-S(O) 2O、-OS(O) 2或OS(O) 2O。
在一些實施例中，IgG靶向配體為根據以下化學結構之3-吲哚乙酸基：
Figure 02_image513
其中k""為1至4 (較佳為2至3，最常為3)，或IgG靶向配體為
Figure 02_image515
基團。
在一些實施例中，IgG靶向配體為肽。IgG靶向配體肽之非限制性實例包括： SEQ ID NO:35 PAM (RTY) 4K 2KG (Fassina等人, J. Mol. Recognit. 1996, 9, 564-569)
Figure 02_image517
； D-PAM，其中PAM序列之胺基酸均為D-胺基酸(Verdoliva等人, J. Immunol. Methods, 2002, 271, 77-88) SEQ ID NO:36 (RTY) 4K 2KG D-PAM-Φ，其中PAM序列之胺基酸均為具有其他修飾之D-胺基酸，其中四個N端精胺酸經苯乙酸乙醯化(Dinon等人 J. Mol. Recognit. 2011, 24, 1087-1094) SEQ ID NO:37 (RTY) 4K 2KG SEQ ID NO:38 TWKTSRISIF (Krook等人, J. Immunol. Methods 1998, 221, 151-157) SEQ ID NO:39 FGRLVSSIRY (Krook等人, J. Immunol. Methods 1998, 221, 151-157) SEQ ID NO:40 Fc-III (DCAWHLGELVWCT-NH2) (DeLano等人, Science 2000, 287, 1279-1283)
Figure 02_image519
； SEQ ID NO:41 FCBP-Ser DSAWHLGELWST (參見WO2014010813) SEQ ID NO:42 DCHKRSFWADNCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:43 DCRTQFRPNQTCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:44 DCQLCDFWRTRCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:45 DCFEDFNEQRTCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:46 DCLAKFLKGKDCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:47 DCWHRRTHKTFCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:48 DCRTIQTRSCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:49 DCIKLAQLHSVCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:50 DCWRHRNATEWCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:51 DCQNWIKDVHKCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:52 DCAWHLGELVWCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:53 DCAFHLGELVWCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:54 DCAYHLGELVWCT (參見WO2014010813) SEQ ID NO:55 FcBP- 1 PAWHLGELVWP (Kang等人, J. Chromatogr. A 2016, 1466, 105-1 12)
Figure 02_image521
； SEQ ID NO:56 FcBP-2 PDCAWHLGELVWCTP (Dias等人, J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 2726-2732)
Figure 02_image523
； SEQ ID NO:57 Fc-lll-4c CDCAWHLGELVWCTC (Gong等人, Bioconjug. Chem. 2016, 27, 1569-1573)
Figure 02_image525
； SEQ ID NO: 58 EPIHRSTLTALL (Ehrlich等人, J. Biochem. Biophys. Method 2001, 49, 443- 454) SEQ ID NO: 59 APAR (Camperi等人, Biotechnol. Lett. 2003, 25, 1545-1548) SEQ ID NO:60 FcRM (CFHH) 2KG (Fc受體模擬物，Verdoliva等人, ChemBioChem 2005, 6, 1242-1253)
Figure 02_image527
； SEQ ID NO: 61 HWRGWV (Yang等人, J Peptide Res. 2006, 66, 1 1 0-137) SEQ ID NO: 62 HYFKFD (Yang等人, J. Chromatogr. A 2009, 1216, 910-918) SEQ ID NO: 63 HFRRHL (Menegatti等人, J. Chromatogr. A 2016, 1445, 93-104) SEQ ID NO: 64 HWCitGWV (Menegatti等人, J. Chromatogr. A 2016, 1445, 93-104) SEQ ID NO:65 HWmetCitGWmetV (US10,266,566) SEQ ID NO:66 D 2AAG (小合成肽配體，Lund等人, J. Chromatogr. A 2012, 1225, 158- 167) SEQ ID NO:67 DAAG (小合成肽配體，Lund等人, J. Chromatogr. A 2012, 1225, 158- 167)； SEQ ID NO: 68 環[(Nα-Ac) S(A)-RWHYFK-Lact-E] (Menegatti等人, Anal. Chem. 2013, 85, 9229-9237)； SEQ ID NO: 69 環[(Nα-Ac)-Dap(A)-RWHYFK-Lact-E] (Menegatti等人, Anal. Chem. 2013, 85, 9229-9237)； SEQ ID NO: 70 環[Link M-WFRHYK] (Menegatti等人, Biotechnol. Bioeng. 2013, 110, 857-870)； SEQ ID NO: 71 NKFRGKYK (Sugita等人, Biochem. Eng. J. 2013, 79, 33-40)； SEQ ID NO: 72 NARKFYKG (Sugita等人, Biochem. Eng. J. 2013, 79, 33-40)； SEQ ID NO: 73 FYWHCLDE (Zhao等人, Biochem. Eng. J. 2014, 88, 1-11)； SEQ ID NO: 74 FYCHWALE (Zhao等人, J Chromatogr. A 2014, 1355, 107-114)； SEQ ID NO: 75 FYCHTIDE (Zhao等人, Z Chromatogr. A 2014, 1359, 100-111)； SEQ ID NO:76 雙1/3 (FYWHCLDE-FYCHTIDE) (Zhao等人, J. Chromatogr. A 2014, 1369, 64-72)； SEQ ID NO: 77 RRGW (Tsai等人, Anal. Chem. 2014, 86, 293 1-2938)； SEQ ID NO: 78 KHRFNKD (Yoo及Choi, BioChip J. 2015, 10, 88-94)； SEQ. ID NO: 79 CPSTHWK (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)； SEQ. ID NO: 80 NVQYFAV (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)； SEQ. ID NO: 81 ASHTQKS (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)； SEQ. ID NO: 82 QPQMSHM (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)； SEQ. ID NO: 83 TNIESLK (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)； SEQ. ID NO: 84 NCHKCWN (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)； SEQ. ID NO: 85 SHLSKNF (Sun等人 Polymers 2018, 10, 778)。
在一些實施例中，IgG靶向配體對IgG4具有特異性。
在一些實施例中，IgG4特異性靶向配體描述於Gunnarsson等人 Biomolecular Engineering 2006, 23, 111-117中。
在一些實施例中，IgG4特異性靶向配體係選自 SEQ ID NO:86 FDLLEHFY及 SEQ ID NO:87 DLLHHFDYF。
額外IgG靶向配體包括
Figure 02_image529
Figure 02_image531
Figure 02_image533
。
IgG降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image535
Figure 02_image537
Figure 02_image539
Figure 02_image541
Figure 02_image543
Figure 02_image545
Figure 02_image547
Figure 02_image549
Figure 02_image551
Figure 02_image553
Figure 02_image555
Figure 02_image557
Figure 02_image559
Figure 02_image561
Figure 02_image563
Figure 02_image565
免疫球蛋白 E (IgE)免疫球蛋白E (IgE)為過敏性疾病之強介體，包括(但不限於)異位性哮喘、過敏性鼻炎、異位性皮炎、皮膚接觸性過敏症、IgE介導之食物過敏、IgE介導之動物過敏、過敏性結膜炎、過敏性蕁麻疹、過敏性休克、鼻息肉、角膜結膜炎、肥大細胞增多症、嗜伊紅性胃腸道疾病、大皰性類天疱瘡、化療誘導之過敏反應、季節性過敏性鼻炎、間質性膀胱炎、嗜伊紅性食道炎、血管性水腫、急性間質性腎炎、異位性濕疹、嗜伊紅性支氣管炎、慢性阻塞性肺病、胃腸炎、高IgE症候群(賈伯斯氏症候群(Job's Syndrome))、IgE單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、尋常天疱瘡、黏液膜類天疱瘡、慢性蕁麻疹、自體免疫葡萄膜炎、類風濕性關節炎、自體免疫胰臟炎及過敏性鼻結膜炎以及其他病症。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image567
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image569
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image571
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image573
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image575
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白降解化合物為：
Figure 02_image577
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，免疫球蛋白靶向配體為：
Figure 02_image579
。
在某些實施例中，IgE靶向配體係選自
Figure 02_image581
Figure 02_image583
Figure 02_image585
IgE降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image587
Figure 02_image589
Figure 02_image591
Figure 02_image593
抗 MAG IgM 自體抗體在一些實施例中，目標胞外蛋白質為抗MAG IgM自體抗體。髓磷脂相關糖蛋白(MAG)為在神經系統中之神經膠質-軸突相互作用中起作用的跨膜糖蛋白。在一些患者中，IgM抗MAG抗體發育，引起神經病變。抗體含量可比正常高至四倍，引起潛在腎病變。降低抗MAG抗體之含量與多發性神經病變中之臨床反應相關。
結合至抗MAG IgM自體抗體之代表性靶向配體包括 HSO 3-3GlcAβ1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glcβ1-Cer； HSO 3-3GlcAβ1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glcβ1-Cer； HSO 3-3GlcAβ1-3Galβ1-4GlcNAc-X；
Figure 02_image595
Figure 02_image597
可用於本發明中之額外IgM自體抗體描述於Herrendorff, R.等人 2017 PNAS Early Edition, doi/10.1073/pnas.1619386114；及WO2018/167,230中。
IgM自體抗體降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image599
Figure 02_image601
Figure 02_image603
在某些非限制性實施例中，IgM自體抗體降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image605
Figure 02_image607
Figure 02_image609
或其醫藥學上可接受之鹽。
磷脂酶 A 2 受體 -1 (PLA2R) 自體抗體在一些實施例中，目標胞外蛋白質為結合PLA2R之自體抗體。磷脂酶A2受體-1 (PLA2R)為自體免疫膜性腎病變中之主要目標。膜性腎病變為腎病症候群之主要病因之一，其中大部分患者發展為末期腎病。利用抗CD20抗體之當前治療方案可能對產生完全緩解無效。PLA2R為具有富含半胱胺酸之N端胞外域的跨膜糖蛋白。此域含有自體抗體所結合之抗原決定基。減少自體抗體含量可為患者提供暫時緩解，且可需要完全消除自體抗體來產生持久緩解。
蛋白資料庫提供PLA2R之CTLD7域(自體抗體所結合之區域)之晶體結構(6JLI；Yu等人 J. Struct. Biol. 207, 295-300)。代表性PLA2R自體抗體結合配體包括(但不限於) SEQ ID NO:88 GIFVIQSESLKKC (Fresquet等人 J. Am. Soc. Nephrol 2015, 26, 302) SEQ. ID NO:89 SVLTLENCK (Fresquet等人 J. Am. Soc. Nephrol 2015, 26, 302) SEQ ID NO:90 SVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:91 SVLTLDNCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:92 SVLTEENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:93 SVLTEENS (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:94 SVLTDENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:95 SVLTDENS (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:96 PIQSESLKK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:97 VIDSESLKK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:98 PIDSESLKK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:99 VIQSESLKK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:100 PIESES-PEG-K-PEG-SVLTEENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:101 VIQSES-PEG-K-PEG-SVL TLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:102 VIQSES-PEG-K-PEG-SVL TEENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:103 PIDDES-PEG-K-PEG-SVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:104 PIDDES-PEG-KPEG-SVLTEENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:105 VIQSESLKKCKSVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:106 PIQSESLKKCKSVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:107 VIESESLKKCKSVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:108 VIDSESLKKCKSVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:109 PIESESLKKCKSVLTLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:110 VIQSESLKKCIQAGKLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:111 PIQSESLKKCIQAGKLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:112 VIESESLKKCIQAGKLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:113 VIDSESLKKCIQAGKLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:114 PIESESLKKCIQAGKLENC (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:115 PIQSESLKKCKSVLTLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:116 VIESESLKKCKSVLTLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:117 VIDSESLKKCKSVLTLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:118 PIESESLKKCKSVLTLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:119 VIQSESLKKCIQAGKLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:120 PIQSESLKKCIQAGKLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:121 VIESESLKKCIQAGKLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:122 VIDSESLKKCIQAGKLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:123 PIESESLKKCIQAGKLENK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:124 PIESESGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:125 PIESESGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:126 PIESESGGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:127 PIESESGGGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:128 PIESESGGGGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:129 VIQSESGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:130 VIQSESGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:131 VIQSESGGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:132 VIQSESGGGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:133 VIQSESGGGGGSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:134 KGCFVIQSESLKKSIQAGKSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:135 LKKCIQAGKSVLTLENCKQAN (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:136 WQDKGIFVIQSESLKKCIQAGK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:137 KGIFVIQSESLKKCIQAGKSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2019/081912) SEQ ID NO:138 GIFVIQSESLKKC (Brenchley等人 WO2015/185949) SEQ ID NO:139 WSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2015/185949) SEQ ID NO:140 WQDKGIFVIQSESLKKCIQAGKSVLTLENCK (Brenchley等人 WO2015/185949) SEQ ID NO: 141 YDWIPSSAW (Glee等人, the journal of immunology, 1999, 163:826-833) SEQ ID NO: 142 AGAIWQRDW SEQ ID NO: 143 AGAIWQKDW SEQ ID NO: 144 VIQSESLK SEQ ID NO: 145 PIQSESLK SEQ ID NO: 146 PIESESLK SEQ ID NO: 147 SVLTEENCK
在某些實施例中，提供具有下式之化合物
Figure 02_image611
Figure 02_image613
； 或其醫藥學上可接受之鹽； 其中 PLA2R自體抗體為WO2019/081912中所描述之任何PLA2R自體抗體。
在某些實施例中，PLA2R自體抗體具有下式： SEQ ID NO: 148：S-V-L-T-XH1-E-N-XH2； SEQ ID NO: 149：XH3-I-XH4-XH5-E-XH6； SEQ ID NO: 150：XH1-E-N-XH2-K； SEQ ID NO: 151：S-V-L-T-XH1-E-N-C-K； SEQ ID NO: 152：XH3-I­XH4-XH5-E-XH6-L-K；或 或經由連接子-B基團連接的SEQ ID No: 148、149、150、151或152之肽，在某些實施例中，所連接之序列為SEQ ID: 148及SEQ ID NO: 149或SEQ ID NO: 148及SEQ ID NO: 152； 其中XH1、XH2、XH3、XH4、XH5及XH6獨立地為任何天然胺基酸或本文所描述之其他胺基酸； 且其中序列在末端胺或羧酸處連接至本文所描述之連接子。
PLA2R降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image615
Figure 02_image617
Figure 02_image619
Figure 02_image621
Figure 02_image623
補體 C3在一些實施例中，目標胞外蛋白質為補體C3。補體C3為涉及補體反應之主要蛋白質之一，補體反應為先天性及後天性免疫中之重要因素。C3升高與陣發性夜間血紅素尿症(PNH)、免疫複合體性膜增生性腎絲球腎炎(IC-MPGN)、C3腎絲球病變(C3G)、地圖狀萎縮(GA)、年齡相關黃斑變性(AMD)、牙周炎、肌肉萎縮性側索硬化(ALS)、造血幹細胞移植相關血栓性微血管病變(HSCT-TMA)、冷凝集素病(CAD)及基因療法中之宿主攻擊相關。C3含量之減少可改善由此等發炎性疾病產生之一些症狀或併發症。
蛋白質資料庫網站提供2A73 (Janssen, B. J. Nature, 2005, 505-511)可搜尋之補體C3之晶體結構。結合至奈米抗體抑制劑之補體C3可用PDB寄存編號6EHG查詢(Jensen, R.K.等人 J Biol Chem, 2018, 293, 6269-6281)。補體C3結合配體之非限制性實例包括 SEQ ID NO:153 D-Tyr-Ile-[Cys-Val-1MeTrp-Gln-Asp-Trp-Sar-Ala-His-Arg-Cys]-meIle (Zhang, Y.等人 2015, Immunobiology, 220, 993-998) SEQ ID NO:154 I CVVQDWGHHR CTAGMANLTSHASAI, (Sahu, A.等人 The Journal of Immunology, 1996, 157, 884-891)。 SEQ ID NO:155 I CVVQDWGHHR CT (Sahu, A.等人 The Journal of Immunology, 1996, 157, 884-891)。 SEQ ID NO:156 CVVQDWGHHAC (Sahu, A.等人 The Journal of Immunology, 1996, 157, 884-891)。 SEQ ID NO:157 Ac-I CVVQDWGHHR CT-NH 2(Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:158 CVVQDWGHHR CT-NH 2(Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:159 CVVQDWGHHR C-NH 2(Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:160 Ac-I CVVGDWGHHR CT-NH2 (Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:161 Ac-I*CVVQPWGHHRC*T-NH2 (Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:162 生物素-KYSSI*CVVQDWGHHRC*T-NH2 (Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:163 Ac-I*CVVQDWGHHRC*TAGHMANLTSHASAK-生物素(Sahu, The Journal of Immunology, 2000, 165, 2491-2499)； SEQ ID NO:164 Ac-ICV(1mW)QDWGAHRCT (Risitano等人 Blood, 2014, 123, 2094) SEQ ID NO:165 yICV(1mW)QDW-Sar-AHRC-mI (Risitano等人 Blood, 2014, 123, 2094) SEQ ID NO:166 PEG-yICV(1mW)QDW-Sar-AHRC-mI (Risitano等人 Blood, 2014, 123, 2094)
Figure 02_image625
Figure 02_image627
SEQ ID NO:167 Ac-Ile-[Cys-Val-Trp-Gln-Asp-Trp-Gly-Ala-His-Arg-Cys]-Thr-NH 2(Qu, H.等人 Immunobiology (2012) http://dx.doi.org/10.1016/j.imbio.2012.06.003) SEQ ID NO:168 Ac-Ile-[Cys-Val-Trp(Me)-Gln-Asp-Trp-Sar-Ala-His-Arg-Cys]-Ile-NH 2(Qu, H.等人 Immunobiology (2012) http://dx.doi.org/10.1016/j.imbio.2012.06.003) SEQ ID NO:169 Ac-Ile-[Cys-Val-Trp(Me)-Gln-Asp-Trp-Sar-Ala-His-Arg-Cys]-mIle-NH 2(Qu, H.等人 Immunobiology (2012) http://dx.doi.org/10.1016/j.imbio.2012.06.003) SEQ ID NO:170 Ac-Ile-[Cys-Val-Trp(Me)-Gln-Asp-Trp-Gly-Ala-His-Arg-Cys]-Thr-NH 2) (Qu, H.等人 Molecular Immunology, 2011, 48, 481) SEQ ID NO:171 Ac-Xaa1-[Cys2-Val3-Xaa4-Gln5-Asp6-Trp7-Gly8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Cys12]-Thr13-NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:172 Ac-I[CVVQDWGHHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:173 Ac-I[CVVQDWGAHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:174 Ac-I[CVTQDWGHHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:175 Ac-I[CVSQDWGHHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:176 Ac-I[CVHQDWGHHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:177 Ac-I[CVFQDWGHHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:178 Ac-I[CVYQDWGAHRC]T- NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:179 Ac-I[CVWQDWGWHRC]T-NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:180 Ac-I[CVWQDWGHHRC]T-NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:181 Ac-I[CVWQDWGAHRC]T (Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:182 Ac-I[CVWQDWGAHRC]T-NH 2(Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:183 Ac-I[CVWQDWGAdHRC]T (Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:184 Ac-I[CVWQDWGdAHRC]T (Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:185 Ac-dI[CVWQDWGAHRC]T (Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:186 Ac-I[CVWQDWGAHRC]dT (Mallik等人 J. Med. Chem., 2005, 48, 274-286) SEQ ID NO:187 Ac-I[CVWQDWGAHRC]T-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:188 W[CVWQDWGTNRC]W-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:189 Ac-D[CVWQDWGTNKC]W-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:190 Q[CVWQDWGQNQC]W-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:191 Ac-I[CVWQDWGAHRC]W-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:192 Ac-W[CVWQDWGAHRC]T-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:193 Ac-W[CVWQDWGAHRC]W-NH 2(Lopez de Victoria, A.等人 Chem Biol Drug Des 2011, 77, 431-440) SEQ ID NO:194 Ac-Ile-[Ala-Val-Trp-Gln-Asp-Trp-Gly-Ala-His-Arg-Hcy]-Thr-NH 2(Knerr, P.等人 ACS Chem. Biol., 2011, 6, 753-760) SEQ ID NO:195 Ac-Ile-[Cys-Val-Trp-Gln-Asp-Trp-Gly-Ala-His-Arg-Cys]-(NMeIle)-NH 2(Knerr, P.等人 ACS Chem. Biol., 2011, 6, 753-760) SEQ ID NO:196 Ac-Ile-[Ala-Val-Trp-Gln-Asp-Trp-Gly-Ala-His-Arg-Hcy]-(NMeIle)-NH 2(Knerr, P.等人 ACS Chem. Biol., 2011, 6, 753-760) SEQ ID NO:197 Ac-ICV(5fW)QDWGAHRCT-NH2 (Katragadda等人 J. Med. Chem. 2006, 49, 4616-4622)。 SEQ ID NO:198 Ac-ICV(5MeW)QDWGAHRCT-NH2 (Katragadda等人 J. Med. Chem. 2006, 49, 4616-4622)。 SEQ ID NO:199 Ac-ICV(2Nal)QDWGAHRCT-NH2 (Katragadda等人 J. Med. Chem. 2006, 49, 4616-4622)。 SEQ ID NO:200 Ac-ICVWQD(5fW)GAHRCT-NH2 (Katragadda等人 J. Med. Chem. 2006, 49, 4616-4622)。 SEQ ID NO:201 Ac-ICVWQD(5MeW)GAHRCT-NH2 (Katragadda等人 J. Med. Chem. 2006, 49, 4616-4622)。 SEQ ID NO:202 Ac-ICVWQD(1MeW)GAHRCT-NH2 (Katragadda等人 J. Med. Chem. 2006, 49, 4616-4622)。 SEQ ID NO:203 Ac-ICVYQDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:204 Ac-ICVWQDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:205 Ac-ICVWQDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:206 Ac-ICVWQDWGAHRCdT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:207 Ac-ICV(2-Nal)QDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:208 Ac-ICV(2-Nal)QDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:209 Ac-ICV(1-Nal)QDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:210 Ac-ICV(2-lal)QDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:211 Ac-ICV(2-lal)QDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:212 Ac-ICVDhtQDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:213 Ac-ICV(Boa)QDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:214 Ac-ICV(Bpa)QDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:215 Ac-ICV(Bta)QDWGAHRCT-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:216 Ac-ICV(Bta)QDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:217 Ac-ICVWQDWG(2-Abu)HRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:218 H-GICVWQDWGAHRCTAN-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:219 Ac-ICV(5fW)QDWGAHRCT- CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:220 Ac-ICV(5-甲基-W)QDWGAHRCT- CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:221 Ac-ICV(1-甲基-W)QDWGAHRCT- CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:222 Ac-ICVWQD(5fW)GAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:223 Ac-ICV(5fW)QD(5fW)GAHRCT- CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:224 Ac-ICV(5-甲基-W)QD(5fW)GAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:225 Ac-ICV(1-甲基-W)QD(5fW)GAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:226 H-GICV(6fW)QD(6fW)GAHRCTN-COOH (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:227 Ac-ICV(1-甲醯基-W)QDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:228 Ac-ICV(1-甲氧基-W)QDWGAHRCT-CONH2 (WO 2021/007,111) SEQ ID NO:229 H-GICV(5fW)QD(5fW)GAHRCTN-COOH (WO 2021/007,111)
在某些實施例中，補體C3靶向配體為
Figure 02_image629
在某些實施例中，補體C3靶向配體係選自：
Figure 02_image631
Figure 02_image633
。
補體C3降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image635
Figure 02_image637
Figure 02_image639
在某些非限制性實施例中，本發明之補體C3降解化合物係選自以下化合物或其雙牙或三牙型式：
Figure 02_image641
Figure 02_image643
Figure 02_image645
Figure 02_image647
Figure 02_image649
Figure 02_image651
Figure 02_image653
補體 C1q在一些實施例中，目標胞外蛋白質為補體C1q。補體系統為先天性免疫系統之一部分且清除凋亡細胞及病原體。此路徑之活化始於C1複合物與已結合至抗原之免疫球蛋白之結合。C1複合物由C1q及蛋白酶(C1r及C1s)之四聚體組成。C1q介導補體與IgG或IgM之結合。在結合事件之後，蛋白酶經活化，且其裂解C4，其引起以調理作用結束之路徑之其餘部分。此路徑之過度活性可導致多種發炎性病變，包括同種異體移植排斥反應、視神經脊髓炎、廣泛性重症肌無力及冷凝集素病。C1q之降解可減少與此等發炎性疾病相關之症狀。
蛋白質資料庫網站提供2JG9 (Paidassi, H.等人, J. Immunol, 2008, 180, 2329-2338)、1PK6 (Gaboriaud, C., J. Biol. Chem, 2003, (278) 46974-46982)、5HZF (Moreau, C.等人, Front. Immunol, 2016, (7) 79)、2WNV及2WNU (Garlatti, V.等人, J. Immunol. 2010, (185), 808)可搜尋之補體C1q之晶體結構。PDB網站上亦提供了6Z67 (Laursen, N.等人 Front. Immunol., 2020, (11), 1504)可搜尋的與配體結合之補體C1q之結構。
補體C1q結合配體之非限制性實例包括 SEQ ID NO:230  Ac-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Lys-Ala-CONH2 (WO 88/07054) SEQ ID NO:231  IALILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:232  IALILEPICCQERAA-dPEG24 (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:233  dPEG24-IALILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:234  RALILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:235  IRLILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:236  IARILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:237  IALIREPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:238  IALILEPICCRERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:239  IALILEPICCQRRAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:240  IELILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:241  IAEILEPICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:242  IALILEPICCQEEAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:243  IALILEPICCQEREA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:244  IALILEEICCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:245  IALILEPECCQERAA (Sharp, J. A.等人 PLoS ONE 10(7), e0132446) SEQ ID NO:246  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTAIEACILL (Sharp, J. A.等人 Frontiers in Immunology (2014) 5, 406) SEQ ID NO:247 CEGPFGPRHDLTF CW (Roos, A.等人 The Journal of Immunology, 2001, 167, 7052) SEQ ID NO:248 XbEGPFGPRHDLTF CW (Roos, A.等人 The Journal of Immunology, 2001, 167, 7052) SEQ ID NO:249  QYYPFSX (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:250  NPFNLAR (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:251  QLQDMTSSPFWL (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:252  NPFVIGRWHPPH (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:253  SLAKFLNPFLYR (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:254  ASTPRFEPFQLD (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:255  SLHSQPYSPFML (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:256  NILSSWSSPFVF (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:257  NLPSSWTNPFYL (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:258  SPFMLHP (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:259  PSPFMLT (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:260  IGPFHLH (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:261  TNPFMLN (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:262  NTTFLYP (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:263  SHYTQYL (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:264  NHHPNYW (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:265  VHYPLSW (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:266  HHLKYSDTSPPI (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:267  SHMHERWDTSPPI (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:268  SHMHERWDTSYQ (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:269  SHIHSNAAWRIT (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:270  WHYPHWQ (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:271  SHYLYTQ (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:272  AHYSFTQ (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:273  THYPTFY (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:274  EHNTSFW (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:275  NHYKLTW (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:276  NHSPYFQ (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:277  SHYQHYQ (Messmer B.T.等人 Molecular Immunology, 2000, 37, 343) SEQ ID NO:278  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (Gronemus, J.Q.等人 Molecular immunology, 2010, 48, 305) SEQ ID NO:279  WLGLGGGYGW (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:280  FYGPFFLNDSLRGIW (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:281  LRFLNPFSLDGSGFW (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:282  HSPFCLGVLECFGLV (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:283  TCGAFYLYHDPFICG (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:284  MQHCLASHELYLPWC (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:285  FFVFGSGDAFAFSDM (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:286  PCVIIDTGSSRWCYL (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:287  HSPFCLGVLECFGLV (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:288  HAAFEPRGDVRHTLL (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:289  CRWDGSWGEVRC (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:290  CYWVGTWGEAVC (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:291  RWFPCPNKEGCCSISV (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:292  RSTYCNKNKDSCHIPE (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:293  QPPQCIKDGGFVICRV (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:294  KGKKCKPEEHPCNEPM (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:295  NKMTCSDDGKLCWEHL (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:296  PLGRPCPTCPLAPS (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:297  QRMRPCPSCPLAPW (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:298  WPSRPCPSCPEVPP (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) SEQ ID NO:299  SCTKDCPTCPLVPV (Lauvrak V., Biol. Chem. 1997, 378, 1509) C1qNb75奈米抗體(Laursen, N. S.等人 Frontiers in Immunology, 2020, 11, 1504) SEQ ID NO:300  IALILEPICCQERAA (USP 8,906,845) SEQ ID NO:301  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:302  PAIAQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:303  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEAAILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:304  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTAIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:305  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIAACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:306  PAICQRAEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:307  PAICQRAEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:308  PAIAQRAEIEAAILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:309  IALILEPICCQERAA (USP 8,906,845) SEQ ID NO:310  PAICQRATATLGTNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:311  PAICQRATATLSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:312  PAICQRATATTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:313  PAICQRAEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:314  AICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:315  ICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:316  CQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:317  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACIL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:318  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACI (USP 8,906,845) SEQ ID NO:319  PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEAC (USP 8,906,845) SEQ ID NO:320  Ac-IALILEPICCQERAA (USP 8,906,845) SEQ ID NO:321  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:322  Ac-PAIAQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:323  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEAAILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:324  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTAIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:325  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIAACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:326  Ac-PAICQRAEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:327  Ac-PAICQRAEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:328  Ac-PAIAQRAEIEAAILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:329  Ac-IALILEPICCQERAA (USP 8,906,845) SEQ ID NO:330  Ac-PAICQRATATLGTNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:331  Ac-PAICQRATATLSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:332  Ac-PAICQRATATTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:333  Ac-PAICQRAEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:334  Ac-AICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:335  Ac-ICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:336  Ac-CQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACILL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:337  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACIL (USP 8,906,845) SEQ ID NO:338  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEACI (USP 8,906,845) SEQ ID NO:339  Ac-PAICQRATATLGTVGSNTSGTTEIEAC (USP 8,906,845)
在某些實施例中，連接子經由胺基酸序列之C端結合，例如 SEQ ID NO:231
Figure 02_image655
在某些實施例中，連接子結合至N端，例如 SEQ ID NO:231
Figure 02_image657
補體C1q降解化合物之非限制性實例包括：
Figure 02_image659
Figure 02_image661
IL-17在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-17 (IL-17) (UniProtKB - Q16552 (IL17_HUMAN))。介白素-17為35 kDa之均二聚糖蛋白且為發炎反應之重要細胞介素。IL-17由介導組織發炎之獨特類別之輔助T細胞(稱為Th17細胞)分泌。IL-17產生之特性效應為嗜中性球之擴增，且在健康組織中其負責嗜中性球穩態。IL-17已涉及作為牛皮癬以及其他自體免疫疾病中之主要因素。其中IL-17療法可具有益處之其他疾病包括(但不限於)哮喘、類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎、克隆氏病及發炎性腸病。已證明IL-17引起之發炎妨礙中風後恢復。
蛋白質資料庫網站提供4NUX (Zhang, B.等人 (2014) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 70: 1476-1483)、4HSA (Liu, S.等人 (2013) Nat Commun 4: 1888-1888)、4QHU ( 未出版)、6WIR (Lieu, R.等人 (2020) PLoS One 15: e0232311-e0232311)、5VB9 (Ting, J.P.等人 (2018) PLoS One 13: e0190850-e0190850)、4NUX (Zhang等人 (2014) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 70: 1476-1483)、3JVF (Ely, L.K.等人 (2009) Nat Immunol 10: 1245-1251)、5N9B (未出版)、2VXS (Gerhardt, S.等人 (2009) J Mol Biol 394: 905)可搜尋之IL-17之晶體結構。
IL-17靶向配體之非限制性實例可見於例如WO2012101263A1、WO2020163554A1、WO2021055376A1、WO2020146194A1、WO2020127685A1、US20150005319、WO2014066726A2、WO2019223718A1、WO2020135872A1、WO2020146194A1、WO2021027721A1、WO2021027724、WO2021027729A1、WO2021067191A1、CN104069102A、CN105601617B、CN108299256B、Liu等人 「Binding site elucidation and structure guided design of macrocyclic IL-17A antagonists」 2016, Scientific Reports, 6:30859.、Liu等人「Inhibiting complex IL-17AA and IL-17RA interactions with a linear peptide」 2016, Scientific Reports 6:26071.、Wang, W.等人「Artificial macrocycles as IL-17A/IL-17RA antagonists」 Med. Chem. Comm. 2018, 9, 22.、Liu, C.等人「The flavonoid cyanidin blocks binding of the cytokine interleukin-17A to the IL-17RA subunit to alleviate inflammation in vivo」 Science Signaling 10, eaaf8823 (2017)中。
額外結合配體包括 SEQ ID NO:340  IVVTAPADLWDWIRA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:341  ITVTMPADLWDWIRA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:342  IVVTIPADLWDWIRA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:343  IVVTLPADLWDWIRA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:344  IVVTVPADLWDWIRA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:345  IVVTMPADLWDWIMA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:346  IVVTMPADLWDWINA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:347  IVVTMPADLWDWIQA (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:348  IHVTIPADLWDWINK (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071) SEQ ID NO:349  IHVTIPADLWDWIN (Liu等人 2016, Scientific Reports 6:26071)
Figure 02_image663
Figure 02_image665
Figure 02_image667
Figure 02_image669
Figure 02_image671
Figure 02_image673
； 其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，提供具有下式之化合物
Figure 02_image675
Figure 02_image677
； 或其醫藥學上可接受之鹽； 其中 IL-17靶向配體為WO2020/146,194；WO2020/163,554；WO2020/127,685；及WO2021/055,376中所描述之任何IL-17配體；其中之各者以引用之方式併入。
在某些實施例中，IL-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image679
其中， X D為CH或N； R D1為-CH 3、-CH 2F、-CHF 2、-CF 3、-CH 2CH 3、-CH 2CF 3、-CH(CH 3) 2、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、-CF(CH 3) 2、CF 2CH 3、-OCH 3、
Figure 02_image681
； R D2為-H或-CH 2OCH 3。
在某些實施例中，IL-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image683
其中， R E1為烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、芳基烷基、經取代之芳基烷基、雜芳基烷基、經取代之雜芳基烷基-OR E8或-NR E9R E10或F口袋取代基； R E2為烷基、經取代之烷基、雜環、經取代之雜環、芳基、經取代之芳基、稠合環烷基芳基、經取代之稠合環烷基芳基、雜芳基、經取代之雜芳基或D口袋取代基； 各R E3獨立地為氫、(C 1-C 7)烷基、(C 1-C 7)經取代之烷基或-OR E32； m E為0、1或2； 各R E4獨立地為氫、(C 1-C 7)烷基、(C 1-C 7)經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、雜環或經取代之雜環； k E為0或1； X E1、X E2、X E3及X E4獨立地為-N-或-CR E11-，其限制條件為X E1、X E2、X E3及X E4中不超過兩者為氮； 各R E5獨立地為氫、(C 1-C 7)烷基、(C 1-C 7)經取代之烷基、雜環、經取代之雜環、環烷基、經取代之環烷基、雜環烷基、經取代之雜環烷基、-NR E12R E13、-NR E14C(O)R E15、-NHSO 2R E31、OH或B口袋取代基； R E6為氫或烷基； R E7為雜環、經取代之雜環、-(CHR E16) oR E17或-(CHR E18) pR E19，或R E6及R E7與其所連接之氮原子一起形成哌𠯤、經取代之哌𠯤、雜環或經取代之雜環、
Figure 02_image685
Figure 02_image687
或A口袋取代基； R E8為(C 1-C 7)烷基、(C 1-C 7)經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基或經取代之雜芳基； 各R E11獨立地為氫、烷基、經取代之烷基、-OR E20、-N RE21R E22、鹵基、-CN、-CO 2R E23、-CONR E24R E25或-SR E26； n E為1、2或3； o E為1、2或3； p E為1、2或3； 各R E16獨立地為氫、(C 1-C 7)烷基或(C 1-C 7)經取代之烷基 R E17為
Figure 02_image689
； 各R E18獨立地為氫、(C 1-C 7)烷基或(C 1-C 7)經取代之烷基； R E19為-NR E27R E28； R E27及R E28與其所連接之氮原子一起形成雜環或經取代之雜環或
Figure 02_image691
R E9、R E10、R E12、R E13、R E14、R E15、R E18、R E19、R E20、R E21、R E22、R E23、R E24、R E25、R E26、R E30、R E31及R E32在各情況下獨立地選自氫、烷基、經取代之烷基、雜環、經取代之雜環、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基，或替代地，獨立地，R E9及R E10、R E21及R E22以及R E24及R E25與其所連接之原子一起形成環烷基、經取代之環烷基、環雜烷基或經取代之環雜烷基環； R E28為氫或烷基； A口袋取代基係選自由以下組成之群：
Figure 02_image693
Figure 02_image695
B口袋取代基係選自由以下組成之群：
Figure 02_image697
D口袋取代基係選自由以下組成之群：
Figure 02_image699
F口袋取代基係選自由以下組成之群：
Figure 02_image701
其中上式之各視情況選用之取代基獨立地選自鹵素、-OR F12、-SR F12、-N(R F12) 2、-C(O)R F12、-C(O)N(R F12) 2、N(R F12)C(O)R F12、-C(O)OR F12、-OC(O)R F12、-S(O)R F12、-S(O) 2R F12、-NO 2、=O、=S、=N(R F12)、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F12、-N(R F12) 2、-C(O)R F12、-C(O)N(R F12) 2、-N(R F12)C(O)R F12、-C(O)OR F12、-OC(O)R F12、-NO、=O、=N(R F11)及-CN。
在某些實施例中，I-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image703
Figure 02_image705
。
在某些實施例中，IL-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image707
其中，
Figure 02_image709
係選自視情況經取代之C 3- 12碳環及視情況經取代之3至12員雜環，其中環AF上之取代基在每次出現時獨立地選自： 鹵素、-OR F11、-SR F11、-N(R F11) 2、-C(O)R F11、-C(O)N(R F11) 2、N(R F11)C(O)R F11、-N(R F11)S(O) 2R F11、-C(O)OR F11、-OC(O)R F11、-S(O)R F11、-S(O) 2R F11、-NO 2、=O、=S、=N(R F11)、-CN；及 C 1- 10烷基、C 2- 10烯基、C 2- 10炔基，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F11、-SR F11、-N(R F11) 2、-C(O)R F11、-C(O)N(R F11) 2、N(R F11)C(O)R F11、-C(O)OR F11、-OC(O)R F11、-S(O)R F11、-S(O) 2R F11、-NO 2、=O、=S、=N(R F11)、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F11、-N(R F11) 2、-C(O)R F11、-C(O)N(R F11) 2、-N(R F11)C(O)R F11、-C(O)OR11、-OC(O)R11、-NO 2、=O、=N(R11及-CN；及 C 3- 12碳環及3至12員雜環，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F11、-SR F11、-N(R F11) 2、-C(O)R F11、-C(O)N(R F11) 2、N(R F11)C(O)R F11、-C(O)OR F11、-OC(O)R F11、-NO 2、-CN、C 1- 6烷基及C 1- 6鹵烷基；
Figure 02_image711
係選自視情況經取代之C 3- 10碳環及視情況經取代之3至12員雜環，環B上之各取代基在每次出現時獨立地選自： 鹵素、-ORF12、-SRF12、-N(RF12)2、-C(O)RF12、-C(O)N(RF12)2、-N(RF12)C(O)RF12、-C(O)ORF12、-OC(O)RF12、-S(O)RF12、-S(0)2RF12、-N02、=O、=S、=N(RF12)、-CN；及 C 1-10烷基、C 2-10烯基、C 2-10炔基，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F12、-SR F12、-N(R F12) 2、-C(O)R F12、-C(O)N(R F12) 2、N(R F12)C(O)R F12、-C(O)OR F12、-OC(O)R F12、-S(O)R F12、-S(O) 2R F12、-NO 2、=O、=S、=N(R F12)、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F12、-N(R F12) 2、-C(O)R F12、-C(O)N(R F12) 2、-N(R F12)C(O)R F12、-C(O)OR F12、-OC(O)R F12、-NO、=O、=N(R F11)及-CN； R F4係選自-C(O)N(R F23)(R F24)及C(O)雜環，其中雜環視情況經1、2、3或4個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F13、-SR F13、-N(R F13) 2、-C(O)R F13、-C(O)N(R F13) 2、-N(R F13)C(O)R F13、-C(O)OR F13、-OC(O)R F13、-S(O)R F13、-S(O) 2R F13、-NO 2、=O、=S、=N(R F13)、-CN；及 C 1-10烷基、C 2- 10烯基、C 2- 10炔基，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F13、-SR F13、-N(R F13) 2、-C(O)R F13、-C(O)N(R F13) 2、N(R F13)C(O)R F13、-C(O)OR F13、-OC(O)R F13、-S(O)R F13、-S(O) 2R F13、-NO 2、=O、=S、=N(R F13)、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環，其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F13,-N(R F13) 2、-C(O)R F13、-C(O)N(R F13) 2、-N(R F13)C(O)R F13、-C(O)OR F13、-OC(O)R F13、-NO 2、=O、=N(R F13)及-CN； L F為鍵或選自-O-及-NH-； R FA係選自氫、鹵素、-OR F14、-N(R F14) 2、-C(O)R F14、-C(O)N(R F14) 2、N(R F14)C(O)R F14、-C(O)O RF14、-OC(O)R F14、-NO 2、-CN及C 1- 6烷基，其中C 1- 6烷基視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、OR F14、-N(R F14) 2、-C(O)R F14、NO 2、=O及-CN； R FB係選自氫、鹵素、-OR F15、-N(R F15) 2、-C(O)R F15、-C(O)N(R F15) 2、N(R F15)C(O)R F15、-C(O)OR F15、-OC(O)R F15、-NO2、-CN及C 1- 6烷基，其中C 1- 6烷基視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、OR F15、-N(R F15) 2、-C(O)R F15、NO 2、=O及-CN，其中R A或R B中之至少一者不為氫； R F'及R F''獨立地選自：氫、鹵素、-OR F16及C 1- 6烷基；其中C 1- 6烷基視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F16、-N(R F16) 2、-C(O)R F16、-NO 2、=O及-CN； R F1係選自-OR F21、-N(R F21)(R F22)、-N(R F21)C(O)R F22、-N(R F21)C(O)O RF22、-N(R F21)C(O)N(R F21)(R F22)、-N(R F21)S(=O) 2N(R F21)(R F22)及-N(R F21)S(=O) 2(R F22)； 各R F2及R F3獨立地選自：氫、鹵素、-OR F17、C 1- 6烷基及C 3- 6環烷基；其中C 1- 6烷基及C 3- 6環烷基視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F17、-N(R F17) 2、-C(O) RF17、-NO 2、=O及-CN；或 結合至同一碳之R F2及R F3結合在一起形成C 3- 6環烷基，其視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F17、-N(R F17) 2、-C(O)R F17、-NO 2、=O及-CN； R F21在每次出現時獨立地選自氫及C 1-C 6烷基，其視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F17、-N(R F17) 2、-C(O)R F17、-NO 2、=O及-CN； R F22係選自：C 1- 10烷基、C 2- 10烯基、C 2- 10炔基，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F18、-SR F18、-N(R F18) 2、-C(O) RF18、-C(O)N(R F18) 2、-N(R F18)C(O)R F18、-C(O)OR F18、-OC(O)R F18、-S(O)R F18、-S(O) 2R F18、-NO 2、=O、=S、=N(R F18)、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F18、-N(R F18) 2、-C(O)R F18、-C(O)N(R F18) 2、N(R F18)C(O)R F18、-C(O)OR F18、-OC(O)R F18、-NO 2、=O、=N(R F18)及-CN；及C 3- 12碳環及3至I2員雜環，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代： 鹵素、-OR F18、-SR F18、-N(R F18) 2、-C(O)R F18、-C(O)N(R F18) 2、-N(R F18)C(O)R F18、-C(O)OR F18、-OC(O)R F18、-S(O)R F18、-S(O) 2R F18、-NO 2、=O、=S、=N(R F18)、-CN；及 C 1-10烷基、C 2-10烯基、C 2-10炔基，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F18、-SR F18、-N(R F18) 2、-C(O)R F18、-C(O)N(R F18) 2、-N(R F18)C(O)R F18、-C(O)OR F18、-OC(O)R F18、-S(O)R F18、-S(O) 2R F18、-NO 2、=O、=S、=N(R F18)、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F18、-N(R F18) 2、-C(O)R F18、-C(O)N(R F18) 2、-N(R F18)C(O)R F18、-C(O)OR F18、-OC(O)R F18、-NO、=O、=N(R F18)及-CN；及 C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F18、-N(R F18) 2、-C(O)R F18、-C(O)N(R F18) 2、N(R F18)C(O)R F18、-C(O)OR F18、-OC(O)R F18、-NO 2、=O、=N(R F18)及-CN； R F23係選自： C 1- 6烷基，其視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F19、-SR F19、-N(R F19) 2、-NO 2、-CN、C3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F19、-N(R F19) 2、=O、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵烷基及-CN；及 C 3- 12碳環及3至10員雜環，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F19、-N(R F19) 2、=O、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵烷基及-CN； R F24係選自氫及C 1- 6烷基，其視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OR F19、-SR F19、-N(R F19) 2、-NO 2、-CN、C 3- 6碳環及3至6員雜環； R F11、R F12、R F13、R F14、R F15、R F16、R F17、R F18及R F19在每次出現時獨立地選自 氫；及 C 1- 6烷基，其視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OH、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 1-C 6鹵烷基、-NH2、-NO2、=O、-CN、C 3- 10碳環及3至10員雜環；其中C 3- 10碳環及3至10員雜環各自視情況經一或多個選自以下之取代基取代：鹵素、-OH、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 1-C 6鹵烷基、-NH 2、-NO 2、=O及-CN；及 C 3- 12碳環及3至12員雜環，其中之各者視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代： 鹵素、-OH、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 1-C 6鹵烷基、-NH 2、-NO 2、=O、-CN；及 C 1- 6烷基，其視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、-OH、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 1-C 6鹵烷基、-NH 2、-NO 2、=O及-CN； n F係選自0及1；且 m F係選自0、1及2。
在某些實施例中，IL-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image713
Figure 02_image715
在某些實施例中，IL-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image717
其中， RG1係選自由以下組成之群：5員或6員雜芳基、9員或10員雙環雜芳基、苯基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 3-C 7)環烷氧基、(C 1-C 6)烷基、苯基-(C 1-C 4)烷基、(C 3-C 7)環烷基、4至6員雜環烷基及-NR GCR GD，其中該5員或6員雜芳基、9員或10員雙環雜芳基、苯基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 3-C 7)環烷氧基、(C 1-C 6)烷基、苯基-(C 1-C 4)烷基、(C 3-C 7)環烷基及4至6員雜環烷基視情況經一或多個獨立地選自R GA之取代基取代； R GA表示氘、鹵素、羥基、-NR GCR GD、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基羰基、(C 3-C 7)環烷基、苯基、5員或6員雜芳基或4至6員雜環烷基，其中該(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基羰基、(C 3-C 7)環烷基、苯基、5員或6員雜芳基或4至6員雜環烷基視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：氘、鹵素、羥基、氰基、(C 1-C 4)烷基、(C 3-C 7)環烷基、(C 1-C 4)烷氧基、-SO 2-(C 1-C 4)烷基及-NR GCR GD； R G2係選自由5員或6員雜芳基組成之群，其中該5員或6員雜芳基視情況經一或多個獨立地選自R GB之取代基取代，其中該5員或6員雜芳基可視情況含有-CO-作為環成員，且其中當該5員雜芳基含有氮作為環原子時，該氮可視情況經選自R G8之取代基取代； R GB表示氘、鹵素、氰基、羥基、-NR GCR GD、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷氧基、(C 1-C 6)烷基-CO-O-(CH 2) n-或(C 3-C 7)環烷基，其中n為1至4，且其中該(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷氧基或(C 3-C 7)環烷基視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：氘、鹵素、氰基、羥基、-NR GCR GD及(C 1-C 4)烷氧基； R GC及R GD各自獨立地選自由氫及(C 1-C 6)烷基組成之群，或R GC及R GD一起形成吡咯啶基或哌啶基，其中該(C 1-C 6)烷基、吡咯啶基或哌啶基視情況經一或多個獨立地選自鹵素、氰基及羥基之取代基取代； R G8係選自由以下組成之群：-L G-PO(OH) 2及-CHR GGO-(CO-A-NR GH)) 0 或 1)-CO-A-NR GHR GI； L G係選自由鍵或-CHR GGO-組成之群； 其中各-CO-A-NR GH-獨立地表示胺基酸殘基，其中該胺基酸殘基係選自呈D或L形式或呈D及L形式之混合物形式的天然胺基酸，且其中該胺基酸殘基可在a-胺基上經取代基R GH取代； R GG、R GH及R GI獨立地選自氫及(C 1-C 6)烷基； R G3係選自由氫、氘、羥基及鹵素組成之群； R G4係選自由氫、氘及鹵素組成之群； R G5係選自由-CHR G6R G7、(C 3-C 10)環烷基及GG組成之群，其中該(C 3-C 10)環烷基及GG視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：氘、鹵素、氰基、羥基、(C 1-C 4)烷基及鹵基(C 1-C 4)烷基； GG表示
Figure 02_image719
；且 R G6及R G7各自獨立地表示氫、苯基、(C 1-C 6)烷基或(C 3-C 7)環烷基，其中該苯基、(C 1-C 6)烷基或(C 3-C 7)環烷基視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、氰基、羥基及(C 1-C 4)烷基。
在某些實施例中，IL-17靶向配體具有下式：
Figure 02_image721
介白素 -6 (IL-6)在一些實施例中，目標胞外蛋白質為人類介白素-6 (IL-6) (UniProtKB - P05231 (IL6_HUMAN))。IL-6為具有廣泛多種生物功能之細胞介素。其為急性期反應之有效誘導因子，且在B細胞最終分化為Ig分泌細胞中起重要作用。其亦涉及淋巴球及單核球分化。其亦作用於B細胞、T細胞、肝細胞、造血祖細胞及CNS細胞，且為生成T(H)17細胞所需的。IL-6已涉及多種發炎性疾病及癌症，包括(但不限於)卡斯爾曼氏病、轉移性去勢相關性前列腺癌、腎細胞癌、大細胞肺癌、卵巢癌、類風濕性關節炎、哮喘。
蛋白質資料庫網站提供1P9M (Boulanger, M. J.等人, Science, 2003, 300: 2101-2104)；1ALU (Somers等人, EMBO J., 1997, 16, 989-997)；1IL6及2IL6 (Xu, G. Y.等人, J Mol Biol., 1997, 268 468-481)及1N26 (Varghese等人, Proc Natl Acad Sci U S A., 2002, 99 15959-15964)可搜尋之IL-6之晶體結構；以及結合至4CNI (Shaw, S.等人, Mabs, 2014, 6: 773)；及4NI7及4NI9 (Gelinas等人, J Biol Chem. 2014, 289(12), 8720-8734)可搜尋之各種化合物的IL-6之晶體結構。另外，Gelinas等人提供對介白素-6與經修飾之核酸配體之複合物的晶體結構的深刻理解(Gelinas, A. D.等人, J Biol Chem. 2014, 289(12), 8720-8734)；且Somers等人提供對介白素6之晶體結構的深刻理解：受體二聚合及信號傳導之新穎模式的影響。
IL-6直接或間接抑制劑之非限制性實例提供於圖1中。額外IL-6直接或間接抑制劑可見於例如美國專利8901310；美國專利10189796；美國專利9694015中；其各自以引用之方式併入本文中。在另一實施例中，IL-6胞外靶向配體為AvimarC326或其結合片段，其描述於Nat Biotechnol 23, 1556-1561 (2005)中。
在一些實施例中，目標胞外蛋白質為介白素-6。介白素-6 (IL-6)為細胞介素，其為急性期免疫反應之關鍵組分。IL-6配體結合至IL-6受體，且雜二聚體接著與IL6ST及gp130締合，從而刺激反應。在感染期間，來自病原體之某些分子結合至鐸樣受體，其活化巨噬細胞以產生IL-6。除了刺激B細胞及嗜中性球之分化以外，IL-6亦介導發熱反應。
IL-6已涉及許多發炎性疾病，包括多發性硬化症、視神經脊髓炎譜系病症、糖尿病、動脈粥樣硬化、抑鬱症、阿茲海默氏病、全身性紅斑狼瘡、多發性骨髓瘤、前列腺癌、Behcet氏病、類風濕性關節炎、全身性幼年特發性關節炎及卡斯爾曼氏病。
IL-6信號傳導對於肌肉骨骼系統亦為重要的。在骨骼中，其與VEGF相互作用，從而刺激血管新生。在肌肉細胞中，IL-6在運動期間大量產生。與其在刺激免疫系統方面之作用相比，在運動期間IL-6為消炎的。
蛋白質資料庫網站提供1ALU (Somers, W.S.等人 1.9 A crystal structure of interleukin 6: implications for a novel mode of receptor dimerization and signaling. (1997) EMBO J. 16: 989-997)、1IL6 (Xu, G. Y.等人 Solution structure of recombinant human interleukin-6 (1997) J Mol Biol 268: 468-481)可搜尋之介白素-6之晶體結構，以及結合於1P9M (Boulanger, M.J.等人 Hexameric Structure and Assembly of the Interleukin-6/IL-6-alpha-Receptor/gp130 Complex. (2003) Science 300: 2101-2104)可搜尋之活性六聚複合物中的IL-6之結構。
IL-6靶向配體之非限制性實例可見於例如USP 10633423、USP 10669314、US 2004/0092720及Ranganath, S.等人 Discovery and Characterization of a Potent Interleukin-6 Binding Peptide with Neutralizing Activity In Vivo. PLoS ONE 10(11):e0141330中。 SEQ ID NO:350  QSDChaDCIHRLLEAF(4-F)LDPNLTEEQRWEKIGlaKINDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:351  QSDChaDCIHRLLEAF(4-F)LDPNLTEEQRWERIGlaK(PEG30L)INDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:352   QSDChaDCIHRLLEAF(4-F)LDPNLTEEQRWERIGlaK(PEG20Br)INDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:353  QSDChaDCIHRLLEAF(4-F)LDPNLTEEQRWERIGlaK(PEG40Br)INDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:354  FDhLDCIHRLLEAFLDPNLTEQQRWEKIDKINDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:355  QSDChaDCIHRLLEAF(4-F)LDPNLTEEQRWERIGlaKINDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:356  SWQSDChaDCIHRLLEAFLDK-AcNLTEEQRWERIDKINDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330) SEQ ID NO:357  SWQSDChaDCIHRLLEAFLDK-PEG40BrNLTEEQRWERIDKINDECE (Ranganath, S.等人 PLoS ONE 10(11):e0141330)
在某些實施例中，IL-6靶向配體為SEQ ID NO:343，其經由聚乙二醇化離胺酸殘基結合至連接子。 SEQ ID NO:358 EEX 3X 4AWX 7EIHX 11LPNLX 16X 17X 18QX 20X 21AFIX 25X 26LX 28X 29(USP 10, 633,423) 其中，彼此獨立地， X 3係選自A、F、H、K、Q、R、S、W及Y； X 4係選自A、D、E、F、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V及Y； X 7係選自F、H、I、K、L、M、N、R、S、T、V、W及Y； X 11係選自A、I、K、L、M、N、R、S、T及V； X 16係選自N及T； X 17係選自A、I、T及V； X 18係選自D、E、G、H、K、N、Q、R、S及T； X 20係選自I、L、M、R、T及V； X 21係選自A、S、T及V； X 25係選自I、M、Q、S、T、V及W； X 26係選自K及S， X 28係選自F、L、M及Y；且 X 29係選自D及R； SEQ ID NO: 359 EEX 3X 4AWX 7EIHX 11LPNLX 16X 17X 18QX 20X 21AFIX 25X 26LX 28X 29(USP 10, 669,314) 其中，彼此獨立地， X 3係選自A、F、H、K、Q、R、S、W及Y； X 4係選自A、D、E、F、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V及Y； X 7係選自F、H、I、K、L、M、N、R、S、T、V、W及Y； X 11係選自A、I、K、L、M、N、R、S、T及V； X 16係選自N及T； X 17係選自A、I、T及V； X 18係選自D、E、G、H、K、N、Q、R、S及T； X 20係選自I、L、M、R、T及V； X 21係選自A、S、T及V； X 25係選自I、M、Q、S、T、V及W； X 26係選自K及S； X 28係選自F、L、M及Y；且 X 29係選自D及R。
在某些實施例中，用於治療IL-6介導之疾病的靶向配體結合至gp130。gp130靶向配體之非限制性實例可見於例如Ahn, S-H.等人 In vitroand in vivopharmacokinetic characterization of LMT-28 as a novel small molecular interleukin-6 inhibitor 2020 Asian-Australas J Anim Sci.33:670-677；Aqel, S.I. Novel small molecule IL-6 inhibitor suppresses autoreactive Th17 development and promotes Treg development. (2019) Clinical and Experimental Immunology, 196:215-225；Hong, S.-S.等人 A Novel Small-Molecule Inhibitor Targeting the IL-6 Receptor beta Subunit, Glycoprotein 130. 2015 J Immunol 195:237-245中。
在某些實施例中，結合gp130之靶向配體係選自
Figure 02_image723
Figure 02_image725
免疫球蛋白 A1 (IgA1)免疫球蛋白A為一類抗體，其通常發現於分泌物中，但亦存在於血清中。IgA含有呈二聚形式之四個重鏈及四個輕鏈。IgA以兩種同型存在：IgA1及IgA2。IgA1在鉸鏈區中含有更多重複序列且為血清中發現之主要形式。雖然IgA之產生維持強黏膜免疫性且抵禦病原體，但其可變為有毒的。IgA腎病變(亦稱為柏格氏病)為IgA抗體之病理性堆積，其降低腎功能。疾病之病因仍不明確，然而已表明鉸鏈區上之糖基化模式起作用。由於適當腎功能對於總體健康為重要的，因此IgA腎病變與全身性疾病相關，諸如肝臟衰竭、癌症、乳糜瀉、全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、心臟衰竭、反應性關節炎及僵直性脊椎炎。
蛋白質資料庫網站提供IgA1之晶體結構，且代表性實例包括PDB寄存編號1IGA (Boehm, M.K. 1999, J. Mol. Bio. 286 1421-1447)、2ESG (Almogren, A. 2006 J. Mol. Biol. 356, 413-431)、6XJA、7JGJ (Eisenmesser, E.Z. 2020, Nat. Commun, 11, 6063-6063)及3CHN (Bonner, A. 2009, Mucosal Immunol., 2, 74-84)。
直接或間接IgA1結合分子包括木菠蘿凝集素(jacalin)及 SEQ ID NO:360 YYALSDAKEEEPRYKALRGENQDLREKERKYQDKIKKLEEKEKNLEKKS。
連接子之實施例在非限制性實施例中，連接子 A及連接子 B獨立地選自：
Figure 02_image727
； 其中： R 11、R 12、R 13、R 14、R 15、R 16、R 17、R 18、R 19及R 20在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鍵、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO 2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR 6-、-NR 6C(O)-、-O-、-S-、-NR 6-、-C(R 21R 21)-、-P(O)(R 3)O-、-P(O)(R 3)-、天然或非天然胺基酸之二價殘基、烯基、炔基、鹵烷基、烷氧基、芳基、雜環、雜芳基、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-O-、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-NR 6-、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-、-[-(CH 2) 2-O-] n-、-[O-(CH 2) 2] n-、-[O-CH(CH 3)C(O)] n-、-[C(O)-CH(CH 3)-O] n-、-[O-CH 2C(O)] n-、-[C(O)-CH 2-O] n-、脂肪酸之二價殘基、不飽和或飽和單羧酸或二羧酸之二價殘基；其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代； n在各情況下獨立地選自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10； R 21在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、羥基、烷氧基、疊氮基、胺基、氰基、-NR 6R 7、-NR 8SO 2R 3、-NR 8S(O)R 3、鹵烷基、雜烷基、芳基、雜芳基及雜環； 且其餘變數如本文所定義。
在一個實施例中，連接子 A為鍵且連接子 B為
Figure 02_image729
。
在一個實施例中，連接子 B為鍵且連接子 A為
Figure 02_image731
。
在一個實施例中，胺基酸之二價殘基選自
Figure 02_image733
Figure 02_image735
Figure 02_image737
， 其中胺基酸可以任一方向定向，且其中胺基酸可呈L-形式或D-形式。
在一個實施例中，二羧酸之二價殘基由親核加成反應生成：
Figure 02_image739
。
由親核加成反應生成的二羧酸之二價殘基之非限制性實施例包括：
Figure 02_image741
Figure 02_image743
。
如本文實施例中所使用，xx獨立地選自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24及25。
如本文實施例中所使用，yy獨立地選自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24及25。
在一個實施例中，二羧酸之二價殘基由縮合反應生成：
Figure 02_image745
。
由縮合生成的二羧酸之二價殘基之非限制性實施例包括：
Figure 02_image747
Figure 02_image749
。
飽和二羧酸之二價殘基之非限制性實施例包括：
Figure 02_image751
。
飽和二羧酸之二價殘基之非限制性實施例包括：
Figure 02_image753
。
飽和單羧酸之二價殘基之非限制性實施例係選自丁酸(-OC(O)(CH 2) 2CH 2-)、己酸(-OC(O)(CH 2) 4CH 2-)、辛酸(-OC(O)(CH 2) 5CH 2-)、癸酸(-OC(O)(CH 2) 8CH 2-)、月桂酸(-OC(O)(CH 2) 10CH 2-)、肉豆蔻酸(-OC(O)(CH 2) 12CH 2-)、十五烷酸(-OC(O)(CH 2) 13CH 2-)、棕櫚酸(-OC(O)(CH 2) 14CH 2-)、硬脂酸(-OC(O)(CH 2) 16CH 2-)、二十二烷酸(-OC(O)(CH 2) 20CH 2-)及二十四烷酸(-OC(O)(CH 2) 22CH 2-)；
脂肪酸之二價殘基之非限制性實施例包括選自以下之殘基：亞麻油酸、棕櫚油酸、異油酸、二十烯酸、油酸、反油酸、巨頭鯨魷酸(gondoic acid)、鱈油酸(gadoleic acid)、神經酸、肉豆蔻油酸及芥子酸：
Figure 02_image755
Figure 02_image757
；
脂肪酸之二價殘基之非限制性實施例係選自亞麻油酸(-C(O)(CH 2) 7(CH) 2CH 2(CH) 2(CH 2) 4CH 2-)、二十二碳六烯酸(-C(O)(CH 2) 2(CHCHCH 2) 6CH 2-)、二十碳五烯酸(-C(O)(CH 2) 3(CHCHCH 2) 5CH 2-)、α-次亞麻油酸(-C(O)(CH 2) 7(CHCHCH 2) 3CH 2-)、十八碳四烯酸(-C(O)(CH 2) 4(CHCHCH 2) 4CH 2-)、y-次亞麻油酸(-C(O)(CH 2) 4(CHCHCH 2) 3(CH 2) 3CH 2-)、二十碳四烯酸(-C(O)(CH 2) 3,(CHCHCH 2) 4(CH 2) 4CH 2-)、二十二碳四烯酸(-C(O)(CH 2) 5(CHCHCH 2) 4(CH 2) 4CH 2-)、棕櫚油酸(-C(O)(CH 2) 7CHCH(CH 2) 5CH 2-)、牛油酸(-C(O)(CH 2) 9CHCH(CH 2) 5CH 2-)、二十烯酸(-C(O)(CH 2) 11CHCH(CH 2) 5CH 2-)、油酸(-C(O)(CH 2) 7CHCH(CH 2) 7CH 2-)、反油酸(-C(O)(CH 2) 7CHCH(CH 2) 7CH 2-)、巨頭鯨魷酸(-C(O)(CH 2) 9CHCH(CH 2) 7CH 2-)、鱈油酸(-C(O)(CH 2) 7CHCH(CH 2) 9CH 2-)、神經酸(-C(O)(CH 2) 13CHCH(CH 2) 7CH 2-)、二十碳三烯酸(-C(O)(CH2) 3(CHCHCH 2) 3(CH 2) 6CH 2-)、肉豆蔻油酸(-C(O)(CH 2) 7CHCH(CH 2) 3CH 2-)及芥子酸(-C(O)(CH 2) 11CHCH(CH 2) 7CH 2-)。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image759
， 其中： R 22在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：烷基、-C(O)N-、-NC(O)-、-N-、-C(R 21)-、-P(O)O-、-P(O)-、-P(O)(NR 6R 7)N-、烯基、鹵烷基、芳基、雜環及雜芳基，其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代； 且其餘變數如本文所定義。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image761
； 其中： R 32在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：烷基、N +X -、-C-、烯基、鹵烷基、芳基、雜環及雜芳基，其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代； X -為陰離子基團，例如Br -或Cl -；且 所有其他變數係如本文中所定義。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image763
Figure 02_image765
； 其中之各者視情況經1、2、3或4個如本文所定義之視情況選用之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image767
其中之各者視情況經1、2、3或4個如本文所定義之視情況選用之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image769
其中之各者視情況經1、2、3或4個如本文所定義之視情況選用之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image771
其中之各者視情況經1、2、3或4個如本文所定義之視情況選用之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image773
其中之各者視情況經1、2、3或4個如本文所定義之視情況選用之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image775
及
Figure 02_image777
其中之各者視情況經1、2、3或4個如本文所定義之視情況選用之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image779
Figure 02_image781
及
Figure 02_image783
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image785
Figure 02_image787
及
Figure 02_image789
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image791
Figure 02_image793
Figure 02_image795
及
Figure 02_image797
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image799
Figure 02_image801
及
Figure 02_image803
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image805
Figure 02_image807
Figure 02_image809
及
Figure 02_image811
。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image813
Figure 02_image815
Figure 02_image817
及
Figure 02_image819
， 其中tt獨立地選自1、2或3，且ss為3減去tt。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image821
Figure 02_image823
及
Figure 02_image825
， 其中tt及ss如本文所定義。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image827
Figure 02_image829
Figure 02_image831
Figure 02_image833
Figure 02_image835
Figure 02_image837
及
Figure 02_image839
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代；且tt及ss如本文所定義。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image841
Figure 02_image843
及
Figure 02_image845
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代；且tt及ss如本文所定義。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image847
及
Figure 02_image849
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代；且tt及ss如本文所定義。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image851
Figure 02_image853
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image855
Figure 02_image857
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image859
Figure 02_image861
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image863
Figure 02_image865
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image867
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image869
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image871
Figure 02_image873
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image875
Figure 02_image877
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image879
Figure 02_image881
Figure 02_image883
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image885
Figure 02_image887
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image889
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image891
Figure 02_image893
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image895
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image897
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image899
Figure 02_image901
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image903
Figure 02_image905
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image907
Figure 02_image909
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image911
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image913
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image915
Figure 02_image917
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image919
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image921
Figure 02_image923
。
在某些實施例中，連接子 D係選自：
Figure 02_image925
Figure 02_image927
Figure 02_image929
。
在某些實施例中，連接子 A係選自
Figure 02_image931
。
在某些實施例中，連接子 A係選自
Figure 02_image933
Figure 02_image935
。
在某些實施例中，連接子 A係選自
Figure 02_image937
Figure 02_image939
。
在某些實施例中，連接子 A係選自
Figure 02_image941
Figure 02_image943
Figure 02_image945
； 其中各者視情況經1、2、3或4個選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image947
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image949
Figure 02_image951
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image953
Figure 02_image955
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image957
Figure 02_image959
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image961
Figure 02_image963
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image965
Figure 02_image967
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image969
Figure 02_image971
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image973
Figure 02_image975
Figure 02_image977
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image979
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image981
Figure 02_image983
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image985
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image987
。
在某些實施例中，連接子 A係選自：
Figure 02_image989
。
在某些實施例中，連接子 B係選自
Figure 02_image991
。
在某些實施例中，連接子 B係選自
Figure 02_image993
。
在某些實施例中，連接子 B係選自
Figure 02_image995
Figure 02_image997
； 其中各者視情況經1、2、3或4個選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image999
Figure 02_image1001
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1003
Figure 02_image1005
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1007
Figure 02_image1009
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1011
Figure 02_image1013
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1015
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1017
Figure 02_image1019
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1021
Figure 02_image1023
Figure 02_image1025
。
在某些實施例中，連接子 B係選自：
Figure 02_image1027
。
在某些實施例中，連接子 B-連接子 A係選自：
Figure 02_image1029
。
在某些實施例中，連接子 B-連接子 A係選自：
Figure 02_image1031
Figure 02_image1033
。
在某些實施例中，連接子 C係選自
Figure 02_image1035
Figure 02_image1037
。
在某些實施例中，連接子 C係選自
Figure 02_image1039
。
在某些實施例中，連接子 C係選自
Figure 02_image1041
Figure 02_image1043
。
在某些實施例中，連接子 C係選自
Figure 02_image1045
Figure 02_image1047
。
在某些實施例中，連接子 C係選自
Figure 02_image1049
Figure 02_image1051
。
在某些實施例中，連接子 C係選自
Figure 02_image1053
Figure 02_image1055
Figure 02_image1057
； 其中各者視情況經1、2、3或4個選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1059
Figure 02_image1061
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1063
Figure 02_image1065
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1067
Figure 02_image1069
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1071
Figure 02_image1073
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1075
Figure 02_image1077
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1079
Figure 02_image1081
。
在某些實施例中，連接子 C係選自：
Figure 02_image1083
Figure 02_image1085
。
在某些實施例中，連接子 C-(連接子 A) 2係選自：
Figure 02_image1087
。
在某些實施例中，連接子 C-(連接子 A) 2係選自：
Figure 02_image1089
Figure 02_image1091
。
在某些實施例中，連接子 C-(連接子 A) 2係選自：
Figure 02_image1093
。
在某些實施例中，連接子 C-(連接子 A) 2係選自：
Figure 02_image1095
Figure 02_image1097
。
在某些實施例中，連接子 D係選自
Figure 02_image1099
Figure 02_image1101
。
在某些實施例中，連接子 D係選自
Figure 02_image1103
Figure 02_image1105
。
在某些實施例中，連接子 D係選自
Figure 02_image1107
Figure 02_image1109
； 其中各者視情況經1、2、3或4個選自R 21之取代基取代。
在某些實施例中，連接子 B-(連接子 A)係選自
Figure 02_image1111
。
在某些實施例中，連接子 C-(連接子 A)係選自
Figure 02_image1113
Figure 02_image1115
。
在某些實施例中，連接子 D-(連接子 A)係選自
Figure 02_image1117
。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image1119
及
Figure 02_image1121
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image1123
Figure 02_image1125
及
Figure 02_image1127
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代。
在某些實施例中，連接子 B、連接子 C或連接子 D係選自：
Figure 02_image1129
Figure 02_image1131
Figure 02_image1133
； 其中在價數允許之情況下，各雜芳基、雜環、環烷基及芳基可視情況經鹵素、烷基、鹵烷基、芳基、雜芳基、雜環或環烷基之任何組合中之1、2、3或4者取代。
ASGPR 結合配體之實施例在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1135
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1137
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1139
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1141
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1143
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1145
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1147
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1149
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1151
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1153
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5或R 1經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1155
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則連接子 A在C5位置處連接至氮。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1157
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則連接子 A在C5位置處連接至氧。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1159
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則連接子 A在C5位置處連接至氮。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1161
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則連接子 A在C5位置處連接至氮。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物具有下式
Figure 02_image1163
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物具有下式
Figure 02_image1165
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物具有下式
Figure 02_image1167
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物具有下式
Figure 02_image1169
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物具有下式
Figure 02_image1171
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，胞外蛋白質降解化合物具有下式
Figure 02_image1173
或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1175
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5經連至連接子 A之鍵置換；且 其中R*係選自：
Figure 02_image1177
Figure 02_image1179
。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1181
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5*經連至連接子 A之鍵置換；且 R 5*為烷基、C(O)R 3或氫。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式：
Figure 02_image1183
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 1或R 5經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，R *係選自：
Figure 02_image1185
。
R*之非限制性實例包括：
Figure 02_image1187
Figure 02_image1189
。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式
Figure 02_image1191
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體具有下式
Figure 02_image1193
Figure 02_image1195
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則R 5經連至連接子 A之鍵置換。
在某些實施例中，ASGPR結合配體係選自
Figure 02_image1197
或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則C1或C5位置處之取代基與連接子 A鍵結。
在某些實施例中，ASGPR結合配體係選自
Figure 02_image1199
及
Figure 02_image1201
； 或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則C1或C5位置處之取代基與連接子 A鍵結。
在某些實施例中，ASGPR結合配體係選自：
Figure 02_image1203
及
Figure 02_image1205
； 或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則C1或C5位置處之取代基與連接子 A鍵結。
在某些實施例中，ASGPR結合配體係選自：
Figure 02_image1207
Figure 02_image1209
； 或其醫藥學上可接受之鹽，其中若ASGPR結合配體為胞外蛋白質降解化合物之一部分，則C1或C5位置處之取代基與連接子 A鍵結。
在某些實施例中，胞外蛋白質降解化合物係選自：
Figure 02_image1211
Figure 02_image1213
及
Figure 02_image1215
。
R 1 之實施例在某些實施例中，R 1為氫。
在某些實施例中，R 1為
Figure 02_image1217
。
在某些實施例中，R 1為
Figure 02_image1219
。
在某些實施例中，R 1為
Figure 02_image1221
。
在某些實施例中，R 1為
Figure 02_image1223
。
在某些實施例中，R 1為
Figure 02_image1225
。
在某些實施例中，R 1為
Figure 02_image1227
。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜烷基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之C 0-C 6烷基-氰基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之烷基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之烯基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之炔基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之鹵烷基。
在某些實施例中，R 1為F。
在某些實施例中，R 1為Cl。
在某些實施例中，R 1為Br。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之芳基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之芳基烷基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜芳基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜芳基烷基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜環。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜環烷基。
在某些實施例中，R 1為視情況經1、2、3或4個取代基取代之鹵烷氧基。
在某些實施例中，R 1為-O-烯基、-O-炔基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3或C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代。
R 5 之實施例在某些實施例中，R 5為氫。
在某些實施例中，R 5為
Figure 02_image1229
。
在某些實施例中，R 5為
Figure 02_image1231
。
在某些實施例中，R 5為
Figure 02_image1233
。
在某些實施例中，R 5為
Figure 02_image1235
。
在某些實施例中，R 5為
Figure 02_image1237
。
在某些實施例中，R 5為
Figure 02_image1239
。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜烷基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之C 0-C 6烷基-氰基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之烷基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之烯基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之炔基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之鹵烷基。
在某些實施例中，R 5為F。
在某些實施例中，R 5為Cl。
在某些實施例中，R 5為Br。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之芳基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之芳基烷基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜芳基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜芳基烷基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜環。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜環烷基。
在某些實施例中，R 5為視情況經1、2、3或4個取代基取代之鹵烷氧基。
在某些實施例中，R 5為-O-烯基、-O-炔基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3或C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代。
R 10 之實施例在某些實施例中，R 10為氫。
在某些實施例中，R 10為烷基。
在某些實施例中，R 10為鹵烷基。
在某些實施例中，R 10為C(O)R 3。
R 25 之實施例在某些實施例中，R 25為氫。
在某些實施例中，R 25為
Figure 02_image1241
。
在某些實施例中，R 25為
Figure 02_image1231
。
在某些實施例中，R 25為
Figure 02_image1233
。
在某些實施例中，R 25為
Figure 02_image1235
。
在某些實施例中，R 25為
Figure 02_image1237
。
在某些實施例中，R 25為
Figure 02_image1239
。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜烷基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之C 0-C 6烷基-氰基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之烷基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之烯基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之炔基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之鹵烷基。
在某些實施例中，R 25為F。
在某些實施例中，R 25為Cl。
在某些實施例中，R 25為Br。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之芳基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之芳基烷基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜芳基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜芳基烷基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜環。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之雜環烷基。
在某些實施例中，R 25為視情況經1、2、3或4個取代基取代之鹵烷氧基。
R 65 、 R 66 及 R 67 之實施例1. 在某些實施例中，提供一種本發明之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65、R 66及R 67獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2或3個取代基取代。 2. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65未經視情況選用之取代基取代。 3. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65經1個視情況選用之取代基取代。 4. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65經2個視情況選用之取代基取代。 5. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65經3個視情況選用之取代基取代。 6. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為氫。 7. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為-CF 3。 8. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為氰基。 9. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為F。 10. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為Cl。 11. 如實施例1之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為Br。 12. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為鹵烷基。 13. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為雜環。 14. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為鹵烷氧基。 15. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-OR 6。 16. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-SR 6。 17. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。 18. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。 19. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-S(O)R 3。 20. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-C(S)R 3。 21. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3。 22. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。 23. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3。 24. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3。 25. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3。 26. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基N 3。 27. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-氰基。 28. 如實施例15至27中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 0烷基(亦即鍵)。 29. 如實施例15至27中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1烷基。 30. 如實施例15至27中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2烷基。 31. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為-N=S(O)(R 3) 2。 32. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為雜環烷基。 33. 如實施例1至5中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 65為雜烷基。 34. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66未經視情況選用之取代基取代。 35. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66經1個視情況選用之取代基取代。 36. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66經2個視情況選用之取代基取代。 37. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66經3個視情況選用之取代基取代。 38. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為氫。 39. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為-CF 3。 40. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為氰基。 41. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為F。 42. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為Cl。 43. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為Br。 44. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為鹵烷基。 45. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為雜環。 46. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為鹵烷氧基。 47. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-OR 6。 48. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-SR 6。 49. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。 50. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。 51. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-S(O)R 3。 52. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-C(S)R 3。 53. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3。 54. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。 55. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3。 56. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3。 57. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3。 58. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基N 3。 59. 如實施例1至37中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-氰基。 60. 如實施例47至59中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 0烷基(亦即鍵)。 61. 如實施例47至59中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1烷基。 62. 如實施例47至59中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2烷基。 63. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為-N=S(O)(R 3) 2。 64. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為雜環烷基。 65. 如實施例1至33中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 66為雜烷基。 66. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67未經視情況選用之取代基取代。 67. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67經1個視情況選用之取代基取代。 68. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67經2個視情況選用之取代基取代。 69. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67經3個視情況選用之取代基取代。 70. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為氫。 71. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為-CF 3。 72. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為氰基。 73. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為F。 74. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為Cl。 75. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為Br。 76. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為鹵烷基。 77. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為雜環。 78. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為鹵烷氧基。 79. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-OR 6。 80. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-SR 6。 81. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。 82. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。 83. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-S(O)R 3。 84. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-C(S)R 3。 85. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3。 86. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。 87. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3。 88. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3。 89. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3。 90. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基N 3。 91. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-氰基。 92. 如實施例79至91中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 0烷基(亦即鍵)。 93. 如實施例79至91中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1烷基。 94. 如實施例79至91中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2烷基。 95. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為-N=S(O)(R 3) 2。 96. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為雜環烷基。 97. 如實施例1至65中任一者之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 67為雜烷基。 98. 在某些實施例中，提供一種本發明之ASGPR結合配體或胞外蛋白質降解化合物，其中R 68、R 69及R 70獨立地選自如上文所描述之R 65、R 66及R 67，其中R 68、R 69及R 70不為氰基或CF 3。
在某些實施例中，R 65、R 66或R 67為芳基。
在某些實施例中，R 65、R 66或R 67為雜芳基。
在某些實施例中，R 65、R 66或R 67為雜環。
額外實施例1. 在某些實施例中，提供一種選自表1A或表1B之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 2. 如實施例1之化合物，其係選自：
Figure 02_image1246
Figure 02_image1248
Figure 02_image1250
Figure 02_image1252
Figure 02_image1254
Figure 02_image1256
Figure 02_image1258
Figure 02_image1260
或其醫藥學上可接受之鹽。 3. 如實施例1之化合物，其係選自：
Figure 02_image1262
Figure 02_image1264
Figure 02_image1266
或其醫藥學上可接受之鹽。 4. 如實施例1之化合物，其係選自：
Figure 02_image1268
Figure 02_image1270
5. 如實施例1之化合物，其係選自：
Figure 02_image1272
Figure 02_image1274
Figure 02_image1276
或其醫藥學上可接受之鹽。 6. 如實施例1之化合物，其係選自：
Figure 02_image1278
或其醫藥學上可接受之鹽。 7. 一種醫藥組合物，其包含如實施例1至6中任一者之化合物及醫藥學上可接受之賦形劑。 8. 一種治療由免疫球蛋白介導之病症的方法，其包含向有需要之患者投與有效量的如實施例1至6中任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如實施例7之醫藥組合物。 9. 如實施例8之方法，其中該病症係由免疫球蛋白G (IgG)介導。 10. 如實施例9之方法，其中該病症係選自1型自體免疫胰臟炎、間質性腎炎、立得氏甲狀腺炎、渦紋樣纖維化、米庫利茲氏病、庫特納氏腫瘤、發炎性假瘤、縱隔纖維化、腹膜後纖維化(奧蒙德氏病)、主動脈炎及主動脈周炎、近端膽道狹窄、特發性補體結合不足性腎小管與組織間隙腎炎、多病灶性纖維硬化、硬腦膜炎、胰臟腫大、腫瘤樣病變、心包炎、類風濕性關節炎(RA)、發炎性腸病、多發性硬化症、重症肌無力、甲狀腺眼病、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、溫抗體型自體免疫溶血性貧血、僵直性脊椎炎、原發性休格倫氏症候群、牛皮癬性關節炎及全身性紅斑狼瘡(SLE)、硬化性膽管炎及IgG單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)。 11. 如實施例8之方法，其中該病症係由免疫球蛋白A (IgA)介導。 12. 如實施例11之方法，其中該病症係選自IgA腎病變(柏格氏病)、乳糜瀉、克隆氏病、Henoch-Sconiein二氏紫癜症(HSP)、線性IgA大皰性皮膚病、IgA天疱瘡、疱疹樣皮炎、發炎性腸病(IBD)、休格倫氏症候群、僵直性脊椎炎、酒精性肝硬化、後天免疫缺乏症候群、IgA多發性骨髓瘤、α鏈病、IgA單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)及線性IgA大皰性皮膚病。 13. 如實施例8至12中任一者之方法，其中該患者為人類。 14. 在某些實施例中，提供一種表2A或表2B之化合物或其鹽。
III. 本發明之胞外蛋白質降解劑之醫藥組合物及劑型如本文所揭示之本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物或前藥可以純的化學物質形式投與，但更通常以包括對於需要此類治療之宿主(通常為人類)有效的量之醫藥組合物形式投與，以治療由如本文所描述之目標胞外蛋白質介導或對於該目標胞外蛋白質以其他方式所熟知之病症。
在某些實施例中，本發明提供醫藥組合物，其包含本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物(諸如氘化衍生物)或前藥，及醫藥學上可接受之賦形劑。在某些實施例中，胞外蛋白質降解劑係以有效量，例如治療有效量或預防有效量存在。
本發明之結合ASGPR之胞外蛋白質降解劑可以通常在血流中使降解劑結合至免疫球蛋白，且將其運載至肝臟上帶有ASGPR之肝細胞以進行胞吞及降解的任何方式進行投與。因此，遞送本發明之降解劑的方法之實例包括(但不限於)經口、靜脈內、舌下、皮下、非經腸、經頰、經直腸、主動脈內、顱內、真皮下或經鼻，或視需要藉由其他方式在含有一或多種習知醫藥學上可接受之載劑的劑量單位調配物中。
在某些實施例中，本發明之胞外蛋白質降解劑經靜脈內投與。通常，胞外蛋白質降解劑將以用於靜脈內注射之液體劑型形式調配，諸如緩衝溶液。用於靜脈內注射之溶液之非限制性實例包括磷酸鹽緩衝溶液及生理鹽水緩衝溶液。在某些實施例中，溶液用多種鹽緩衝。
在某些實施例中，本發明之胞外蛋白質降解劑經口投與。通常，胞外蛋白質降解劑將以用於經口投與之固體劑型形式或以含有凝膠之膠囊形式調配。固體劑型之非限制性實例包括膠囊、錠劑及粉末。
在某些實施例中，本發明之胞外蛋白質降解劑經皮下投與。通常，胞外蛋白質降解劑將以用於皮下注射之液體劑型形式調配，諸如緩衝溶液。用於皮下注射之溶液之非限制性實例包括磷酸鹽緩衝溶液及生理鹽水緩衝溶液。在某些實施例中，溶液用多種鹽緩衝。
因此，本發明提供包含有效量之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之鹽連同至少一種醫藥學上可接受之載劑一起的醫藥組合物以用於其任何適當用途。醫藥組合物可含有作為唯一活性劑之胞外蛋白質降解劑或鹽，或在一替代實施例中含有胞外蛋白質降解劑及至少一種額外活性劑。
在某些實施例中，術語醫藥學上可接受之鹽係指所描述胞外蛋白質降解劑之鹽，其在合理醫療判斷之範疇內適用於向諸如人類之宿主投與而無異常毒性、刺激、過敏反應及其類似者，滿足合理的效益/風險比，且對其預期用途有效。因此，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指本發明所揭示之胞外蛋白質降解劑之相對無毒的無機及有機酸加成鹽。此等鹽可在胞外蛋白質降解劑之最終分離及純化期間製備，或藉由單獨使呈游離形式之經純化胞外蛋白質降解劑與合適的有機或無機酸反應且接著分離由此形成之鹽而製備。鹼性胞外蛋白質降解劑能夠與各種無機及有機酸一起形成各種不同鹽。鹼性胞外蛋白質降解劑之酸加成鹽藉由以習知方式使游離鹼形式與足夠量之所需酸接觸以產生鹽來製備。游離鹼形式可藉由以習知方式使鹽形式與鹼接觸且分離游離鹼而再生。游離鹼形式可在某些物理特性，諸如在極性溶劑中之溶解度方面不同於其對應鹽形式。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可與金屬或胺形成，諸如鹼金屬及鹼土金屬氫氧化物或有機胺。用作陽離子之金屬之實例包括但不限於鈉、鉀、鎂、鈣及其類似物。適合之胺之實例包括(但不限於) N,N'-二苯甲基乙二胺、氯普魯卡因(chloroprocaine)、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基還原葡糖胺及普魯卡因(procaine)。酸性胞外蛋白質降解劑之鹼加成鹽藉由以習知方式使游離酸形式與足夠量之所需鹼接觸以產生鹽來製備。游離酸形式可藉由以習知方式使鹽形式與酸接觸且分離游離酸來再生。游離酸形式可在某些物理特性，諸如在極性溶劑中之溶解度方面不同於其各別鹽形式。
鹽可由無機酸硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、單氫磷酸鹽、二氫磷酸鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸、磷及其類似物製備。代表性鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、乙二酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、硼酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、丁二酸鹽、酒石酸鹽、萘二甲酸鹽、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基磺酸鹽及羥乙磺酸鹽及其類似鹽。鹽亦可由有機酸，諸如脂族單羧酸及二羧酸、經苯基取代之烷酸、羥基烷酸、烷二酸、芳族酸、脂族磺酸及芳族磺酸等及其類似酸製備。代表性鹽包括乙酸鹽、丙酸鹽、辛酸鹽、異丁酸鹽、乙二酸鹽、丙二酸鹽、丁二酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、杏仁酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯基乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、甲烷磺酸鹽及其類似鹽。醫藥學上可接受之鹽可包括基於以下之陽離子：鹼金屬及鹼土金屬，諸如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂及其類似金屬；以及無毒銨、四級銨及胺，包括但不限於銨、四甲銨、四乙銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺及其類似物。亦涵蓋胺基酸之鹽，諸如精胺酸鹽、葡糖酸鹽、半乳糖醛酸鹽及其類似鹽。參見例如Berge等人, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19，其以引用之方式併入本文中。
醫藥學上可接受之賦形劑包括惰性稀釋劑、分散劑及/或成粒劑、表面活性劑及/或乳化劑、崩解劑、黏合劑、防腐劑、緩衝劑、潤滑劑及/或油。額外可接受賦形劑包括可可脂及栓劑蠟、著色劑、包衣劑、甜味劑、調味劑、芳香劑等，及其組合。
例示性稀釋劑包括碳酸鈣、碳酸鈉、磷酸鈣、磷酸二鈣、硫酸鈣、磷酸氫鈣、磷酸鈉乳糖、蔗糖、纖維素、微晶纖維素、高嶺土、甘露糖醇、山梨糖醇、肌醇、氯化鈉、乾澱粉、玉米澱粉、糖粉等，及其組合。
例示性成粒劑及/或分散劑包括馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、木薯澱粉、羥基乙酸澱粉鈉、黏土、海藻酸、瓜爾膠、柑桔渣、瓊脂、膨潤土、纖維素及木製品、天然海綿、陽離子交換樹脂、碳酸鈣、矽酸鹽、碳酸鈉、交聯聚(乙烯基吡咯啶酮) (交聯聚維酮)、羧甲基澱粉鈉(羥基乙酸澱粉鈉)、羧甲基纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉(交聯羧甲纖維素)、甲基纖維素、預膠凝化澱粉(澱粉1500)、微晶澱粉、水不溶性澱粉、羧甲基纖維素鈣、矽酸鎂鋁(Veegum)、月桂基硫酸鈉、四級銨化合物等，及其組合。
例示性表面活性劑及/或乳化劑包括天然乳化劑(例如，阿拉伯膠、瓊脂、海藻酸、海藻酸鈉、黃蓍膠、交叉膠(chondrux)、膽固醇、三仙膠、果膠、明膠、蛋黃、酪蛋白、羊毛脂、膽固醇、蠟及卵磷脂)、膠質黏土(例如，膨潤土[矽酸鋁]及Veegum [矽酸鎂鋁])、長鏈胺基酸衍生物、高分子量醇(例如，硬脂醇、鯨蠟醇、油醇、三醋精單硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯、單硬脂酸甘油酯及丙二醇單硬脂酸酯、聚乙烯醇)、卡波姆(carbomer) (例如，羧基聚亞甲基、聚丙烯酸、丙烯酸聚合物及羧基乙烯基聚合物)、角叉菜膠、纖維素衍生物(例如，羧甲基纖維素鈉、粉末纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素)、山梨糖醇酐脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯[Tween 20]、聚氧乙烯山梨糖醇酐[Tween 60]、聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯[Tween 80]、山梨糖醇酐單棕櫚酸酯[Span 40]、山梨糖醇酐單硬脂酸酯[Span 60]、山梨糖醇酐三硬脂酸酯[Span 65]、單油酸甘油酯、山梨糖醇酐單油酸酯[Span 80])、聚氧乙烯酯(例如，聚氧乙烯單硬脂酸酯[Myrj 45]、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚乙氧基化蓖麻油、聚甲醛硬脂酸酯及Solutol)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如，Cremophor)、聚氧乙烯醚(例如，聚氧乙烯月桂基醚[Brij 30])、聚(乙烯基吡咯啶酮)、二甘醇單月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、油酸鈉、油酸鉀、油酸乙酯、油酸、月桂酸乙酯、月桂基硫酸鈉、Pluronic F 68、Poloxamer 188、溴化十六烷基三甲基銨、氯化鯨蠟基吡錠、苯紮氯銨、多庫酯鈉(docusate sodium)等，及/或其組合。
例示性黏合劑包括澱粉(例如，玉米澱粉及澱粉糊)、明膠、糖(例如，蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糊精、糖蜜、乳糖、乳糖醇、甘露糖醇等)、天然及合成膠(例如，阿拉伯膠、海藻酸鈉、角叉菜提取物、龐沃膠(panwar gum)、甘地膠(ghatti gum)、艾沙婆樹皮(isapol husks)膠漿、羧甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、微晶纖維素、乙酸纖維素、聚(乙烯基吡咯啶酮)、矽酸鎂鋁32 (Veegum)及落葉松阿拉伯半乳聚糖)、海藻酸鹽、聚氧化乙烯、聚乙二醇、無機鈣鹽、矽酸、聚甲基丙烯酸酯、蠟、水、乙醇等，及/或其組合。
例示性防腐劑包括抗氧化劑、螯合劑、抗微生物防腐劑、抗真菌防腐劑、醇防腐劑、酸性防腐劑等，及/或其組合。
例示性抗氧化劑包括α生育酚、抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸鹽、丁基化羥基大茴香醚、丁基化羥基甲苯、單硫代甘油、偏亞硫酸氫鉀、丙酸、沒食子酸丙酯、抗壞血酸鈉、亞硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉及亞硫酸鈉。
可使用達成所需結果之任何劑型。在某些實施例中，醫藥組合物呈一劑型，其在單位劑型中含有約0.1 mg至約1500 mg、約10 mg至約1000 mg、約100 mg至約800 mg或約200 mg至約600 mg活性胞外蛋白質降解劑及視情況存在之約0.1 mg至約1500 mg、約10 mg至約1000 mg、約100 mg至約800 mg或約200 mg至約600 mg額外活性劑。實例為具有至少約0.1、1、5、10、25、50、100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、850、900、950或1,000 mg活性胞外蛋白質降解劑或其鹽之劑型。在某些實施例中，劑型具有至多約0.1、1、5、10、25、50、100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、850、900、950或1,000 mg活性胞外蛋白質降解劑或其鹽。
在某些實施例中，劑量在約0.01-100 mg/kg患者體重之範圍內，例如約0.01 mg/kg、約0.05 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.5 mg/kg、約1 mg/kg、約1.5 mg/kg、約2 mg/kg、約2.5 mg/kg、約3 mg/kg、約3.5 mg/kg、約4 mg/kg、約4.5 mg/kg、約5 mg/kg、約10 mg/kg、約15 mg/kg、約20 mg/kg、約25 mg/kg、約30 mg/kg、約35 mg/kg、約40 mg/kg、約45 mg/kg、約50 mg/kg、約55 mg/kg、約60 mg/kg、約65 mg/kg、約70 mg/kg、約75 mg/kg、約80 mg/kg、約85 mg/kg、約90 mg/kg、約95 mg/kg或約100 mg/kg。
在一些實施例中，一天一次(QD)、一天兩次(BID)或一天三次(TID)投與本文所揭示或如所描述來使用之胞外蛋白質降解劑。在一些實施例中，一天至少一次投與本文所揭示或如所描述來使用之胞外蛋白質降解劑持續至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天、至少15天、至少16天、至少17天、至少18天、至少19天、至少20天、至少21天、至少22天、至少23天、至少24天、至少25天、至少26天、至少27天、至少28天、至少29天、至少30天、至少31天、至少35天、至少45天、至少60天、至少75天、至少90天、至少120天、至少150天、至少180天或更久。
在某些實施例中，一天一次、一天兩次、一天三次或一天四次投與本發明之胞外蛋白質降解劑。
醫藥組合物可經調配為任何醫藥學上適用之形式，例如藥丸、膠囊、錠劑、注射或輸注溶液、糖漿、吸入調配物、栓劑、經頰或舌下調配物、非經腸調配物或在醫療裝置中。一些劑型(諸如錠劑及膠囊)可細分成含有適當量之活性組分(例如達成所需目的之有效量)的適當尺寸化單位劑量。
載劑包括賦形劑及稀釋劑，且必須具有足夠高純度及足夠低毒性以使其適於向正在治療之患者投與。載劑可為惰性的或其本身可具有醫藥益處。結合胞外蛋白質降解劑使用之載劑之量足以為每單位劑量之胞外蛋白質降解劑之投與提供可行量之材料。若如以液體形式提供，則其可為溶液或懸浮液。
代表性載劑包括磷酸鹽緩衝鹽水、水、溶劑、稀釋劑、pH調節劑、防腐劑、抗氧化劑、懸浮劑、濕潤劑、黏度劑、張力劑、穩定劑及其組合。在一些實施例中，載劑為水性載劑。水性載劑之實例包括但不限於：水性溶液或懸浮液，諸如生理鹽水、血漿、骨髓抽出物；緩衝液，諸如漢克氏緩衝鹽溶液(Hank's Buffered Salt Solution；HBSS)、HEPES (4-(2-羥乙基)-1-哌𠯤乙磺酸)、林格氏緩衝液(Ringers buffer)、ProVisc®、稀釋ProVisc®、用PBS稀釋之Provisc®、克里勃氏緩衝液(Krebs buffer)、達爾伯克氏PBS (Dulbecco's PBS)、標準PBS、玻尿酸鈉溶液(HA，5 mg/mL於PBS中)、檸檬酸鹽緩衝液、模擬體液、血漿血小板濃縮物及組織培養基或包含有機溶劑之水性溶液或懸浮液。可接受之溶液包括例如水、林格氏溶液及等張氯化鈉溶液。調配物亦可為於無毒稀釋劑或溶劑(諸如1,3-丁二醇)中之無菌溶液、懸浮液或乳液。
可將黏度劑添加至醫藥組合物中以視需要增大組合物之黏度。適用黏度劑之實例包括但不限於玻尿酸、玻尿酸鈉、卡波姆(carbomer)、聚丙烯酸、纖維素衍生物、聚卡波非(polycarbophil)、聚乙烯吡咯啶酮、明膠、糊精、多醣、聚丙烯醯胺、聚乙烯醇(包括部分水解之聚乙酸乙烯酯)、聚乙酸乙烯酯、其衍生物及其混合物。
用於投與之溶液、懸浮液或乳液可用維持適合於選定投與之pH所必需的有效量進行緩衝。適合緩衝液為熟習此項技術者所熟知。適用緩衝液之一些實例為乙酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽及磷酸鹽緩衝液。用於局部，例如眼部投與之溶液、懸浮液或乳液亦可含有一或多種張力劑以調整調配物之等張範圍。適合張力劑為此項技術中所熟知。一些實例包括丙三醇、甘露糖醇、山梨糖醇、氯化鈉及其他電解質。
載劑類別包括(但不限於)黏合劑、緩衝劑、著色劑、稀釋劑、崩解劑、乳化劑、調味劑、滑動劑、潤滑劑、防腐劑、穩定劑、界面活性劑、製錠劑及濕潤劑。一些載劑可列入超過一種類別中，例如植物油可在一些調配物中用作潤滑劑且可在其他調配物中用作稀釋劑。例示性醫藥學上可接受之載劑包括糖、澱粉、纖維素、粉末狀黃蓍膠、麥芽、明膠、滑石及植物油。視情況選用之活性劑可包括在醫藥組合物中，該等活性劑不會實質上干擾本發明之胞外蛋白質降解劑之活性。
醫藥組合物/組合可經調配以用於經口投與。此等組合物可含有達成所需結果的任何量之活性胞外蛋白質降解劑，例如介於0.1與99重量% (wt.%)之間的胞外蛋白質降解劑且通常至少約5重量%的胞外蛋白質降解劑。一些實施例含有約25重量%至約50重量%或約5重量%至約75重量%的胞外蛋白質降解劑。包覆腸溶包衣口服錠劑亦可用以增強用於投與之經口途徑之胞外蛋白質降解劑的生物可用性。
適用於直腸投與之調配物通常以單位劑量栓劑呈遞。此等物可藉由將活性胞外蛋白質降解劑與一或多種習知固體載劑(例如可可脂)混合且接著使所得混合物成形來製備。
本發明之胞外蛋白質降解劑及其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥可調配成單位劑型以便於投與及劑量均一性。然而，應瞭解，包含如本文所描述之胞外蛋白質降解劑之組合物的每日總用量將由主治醫師在合理醫學判斷之範疇內來決定。用於任何特定個體或生物體之特定治療有效劑量將取決於各種因素，包括所治療之疾病、病症或病況及病症之嚴重程度；所採用之特定胞外蛋白質降解劑之活性；所採用之特定組合物；個體之年齡、體重、一般健康狀況、性別及飲食；投與時間、投與途徑及所採用之特定胞外蛋白質降解劑之排泄速率；治療持續時間；與所採用之特定胞外蛋白質降解劑組合使用或同時使用之藥物；及醫學技術中熟知之類似因素。
本文所提供之胞外蛋白質降解劑及組合物可藉由任何途徑投與，包含經腸(例如經口)、非經腸、靜脈內、肌肉內、動脈內、髓內、鞘內、皮下、心室內、經皮、皮內、經直腸、陰道內、腹膜內、局部(作為散劑、軟膏、乳膏及/或滴劑)、經黏膜、經鼻、經頰、舌下；藉由氣管內滴注、支氣管滴注及/或吸入；及/或呈經口噴霧、經鼻噴霧及/或氣溶膠形式。確切考慮的途徑為經口投與、靜脈內投與(例如全身性靜脈內注射)、經由血液及/或淋巴供應而區域性投與及/或直接投與至患病部位。一般而言，最適當的投與途徑將視多種因素而定，包括藥劑性質(例如其在胃腸道環境中的穩定性)、個體的狀況(例如個體是否能夠忍受經口投與)。
為達成有效量所需之胞外蛋白質降解劑之確切量將隨各個體而變化，取決於例如個體之物種、年齡及一般狀況；副作用或病症之嚴重程度；特定胞外蛋白質降解劑之身分；投與模式；及類似者。所需劑量可使用健康照護提供者確定適用的任何頻率遞送，包括一天三次、一天兩次、一天一次、每隔一天、每隔三天、每週、每兩週、每三週或每四週。在某些實施例中，所需劑量可使用多次投藥遞送(例如兩次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次、十一次、十二次、十三次、十四次或更多次投藥)。
亦應瞭解，如本文所描述之胞外蛋白質降解劑或組合物可與一或多種額外治療活性劑組合投與。胞外蛋白質降解劑或組合物可與提高其生物可用性、減少及/或改變其代謝、抑制其排泄及/或改變其在體內之分佈的額外治療活性劑組合投與。亦應瞭解，所採用之療法可達成對相同病症之所需作用(例如，胞外蛋白質降解劑可與消炎劑、抗癌劑、免疫抑制劑等組合投與)，及/或其可達成不同作用(例如，控制不良副作用，例如藉由止吐劑控制嘔吐)。
胞外蛋白質降解劑或組合物可與一或多種額外治療活性劑同時、在其之前或之後投與。一般而言，各藥劑將以根據彼藥劑所確定的劑量及/或時程來投與。另外應瞭解，此組合中所用之額外治療活性劑可在單一組合物中一起投與或在不同組合物中分開投與。在方案中採用之特定組合將考慮本發明胞外蛋白質降解劑與額外治療活性劑之相容性及/或待達成之所需治療作用。一般而言，預期組合中所用之額外治療活性劑的用量不超過其單獨使用時的量。在一些實施例中，組合中之用量將低於單獨使用之量。
例示性額外治療活性劑包括(但不限於)有機小分子，諸如藥物化合物(例如，美國聯邦法規(CFR)中所提供之經食品藥物管理局批准之化合物)、肽、蛋白質、碳水化合物、單糖、寡糖、多糖、核蛋白、黏蛋白、脂蛋白、合成多肽或蛋白質、連接於蛋白質之小分子、糖蛋白、類固醇、核酸、DNA、RNA、核苷酸、核苷、寡核苷酸、反義寡核苷酸、脂質、激素、維生素及細胞。在某些實施例中，額外治療活性劑為抗癌劑，例如輻射療法及/或一或多種化學治療劑。
在某些態樣中，提供一種治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合投與或交替投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物(諸如氘化衍生物)或前藥。可組合及/或交替投與以用於目標胞外蛋白質介導之病症之治療中的有益、附加或協同作用。
IV. 治療方法本發明之所靶向胞外蛋白質可包括(但不限於)免疫球蛋白、細胞介素、趨化因子、生長因子、凝血因子、胞外基質蛋白及涉及胞外基質之形成及/或降解的蛋白質、酯酶、脂肪酶、肽酶、轉化酶以及其他蛋白質。此等蛋白質介導可用有效量之本文所描述之所揭示之結合ASGPR之胞外蛋白質降解劑治療的一系列疾病。
免疫球蛋白介導之病症在某些態樣中，提供一種治療，其包含向患有免疫球蛋白介導之疾病的患者投與有效量的本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
免疫球蛋白 G IgG免疫球蛋白G (IgG)為所有體液(例如血液及胞外流體)中發現之主要類型的抗體且預防細菌及病毒感染。其表示人類中之大約75%之血清抗體，且因此為在循環中發現之最常見類型之抗體。IgG抗體在抗體反應之類別轉換及成熟之後產生，因此其主要參與二級免疫反應。(Vidarsson, Gestur等人, 「IgG subclasses and allotypes: from structure to effector functions」. Frontiers in Immunology, 2014, 5: 520)。
IgG可劃分為4種不同亞類(IgG1、IgG2、IgG3及IgG4)。在此兩種物種中之每一者內，IgG亞類在胺基酸層級上95%一致。相對較小差異具有重要的功能差異。IgG亞類轉換之演變係藉由與T細胞之相互作用調節且遵循單向方向(IgG3 → IgG1 → IgG2 → IgG4)。(Valenzuela等人, 「The Biology of IgG Subclasses and Their Clinical Relevance to Transplantation」, Transplantation, 2018年1月;102(1S增刊1):S7-S13)。差異主要在於鉸鏈區之大小及組態、糖基化位點及結構，以及影響與補體及Fc受體相互作用之能力的一些關鍵胺基酸變化。此等變化，尤其鉸鏈區之大小，對鉸鏈處抗體之可撓性具有影響。
IgG1及IgG3為單體的(2個重鏈及2個輕鏈)及二價的(2個可變區)。IgG2具有獨特的二硫鍵模式，其允許兩個單體IgG2抗體經由獨特的分子間二硫鍵形成二聚(及四價)結構。IgG4具有甚至更獨特的結構(再次由重鏈鏈內二硫鍵指定)。鏈內二硫鍵(存在兩個)可經還原，產生單價結構。另外，單價結構可重新形成二硫鍵，但可不為相同IgG4單價鏈；意謂所得IgG4將為二價單體但將具有兩個不同可變區。
藉由結合多種病原體，諸如病毒、細菌及真菌，IgG幫助保護身體免於感染。然而，異常IgG活性與多種病症相關，在此等病症中，當本發明用於治療已知主要由IgG引起之疾病，諸如甲狀腺眼病、重症肌無力、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、溫抗體型自體免疫溶血性貧血及1型自體免疫胰臟炎時，IgG之選擇性靶向可為特別有益的。
在某些態樣中，提供由IgG介導之病症之治療，其包含向患者投與有效量的IgG降解劑或其醫藥學上可接受之鹽。在某些實施例中，IgG病症係選自抗磷脂Ab症候群、Behcet症候群、橋本甲狀腺炎、MGUS、壞死性黃肉芽腫、類風濕性關節炎、癌症(例如多發性骨髓瘤或外周多發性骨髓瘤)、副蛋白血症、慢性蕁麻疹、硬皮病、硬化性黏液水腫、血小板減少症(例如肝素誘導之血小板減少症)、冷球蛋白血症、肉芽腫病伴多血管炎(例如ANCA相關血管炎)、特發性血小板減少性紫癜、血小板減少症、IgG4-RD、陣發性夜間血紅素尿症(PNH)、溫抗體型自體免疫溶血性貧血、橫紋肌溶解、狼瘡性腎炎、急性彌漫性腦脊髓炎、格巴二氏症候群、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、米勒費雪症候群、視神經脊髓炎譜系病症、斜視眼陣攣肌陣攣症候群、鏈球菌感染相關性兒童自體免疫神經精神障礙(PANDAS)、周邊神經病變、橫貫性脊髓炎、纖維化、IPF/纖維化及移植排斥反應。
在某些實施例中，疾病係由IgG介導。
免疫球蛋白G (IgG)介導一系列自體免疫、感染及代謝疾病，包括全身性纖維發炎性疾病。另外，IgG4之過度表現與通常包括多個器官之IgG4相關疾病相關聯，且該等病症包括1型自體免疫胰臟炎、間質性腎炎、立得氏甲狀腺炎、渦紋樣纖維化、米庫利茲氏病、庫特納氏腫瘤、發炎性假瘤(在身體之各個部位中)、縱隔纖維化、腹膜後纖維化(奧蒙德氏病)、主動脈炎及主動脈周炎、近端膽道狹窄、特發性補體結合不足性腎小管與組織間隙腎炎、多病灶性纖維硬化、硬腦膜炎、胰臟腫大、腫瘤樣病變、心包炎、類風濕性關節炎(RA)、發炎性腸病、多發性硬化症、重症肌無力、僵直性脊椎炎、原發性休格倫氏症候群、牛皮癬性關節炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、硬化性膽管炎、IgG單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、黑色素瘤、大皰性類天疱瘡、古巴士德氏病、腦炎、栓塞性血小板減少性紫癜症、慢性發炎性多發性神經病變、邊緣腦炎、神經肌強直、Morvan氏症候群、落葉型天疱瘡、尋常天疱瘡、REM及非REM類睡症及膜性腎病變、多發性硬化症、甲狀腺機能亢進性葛瑞夫氏病、後天性水皰性表皮鬆解症、妊娠期類天疱瘡、抗p200類天疱瘡及伴腫瘤性天疱瘡以及其他病症。
在某些實施例中，疾病係由IgA介導。
免疫球蛋白A (IgA)之異常表現介導一系列自體免疫及免疫介導之病症，包括IgA腎病變(亦稱為柏格氏病)、乳糜瀉、克隆氏病、Henoch-Schönlein二氏紫癜症(HSP) (亦稱為IgA血管炎)、IgA天疱瘡、疱疹樣皮炎、發炎性腸病(IBD)、休格倫氏症候群、僵直性脊椎炎、酒精性肝硬化、後天免疫缺乏症候群、IgA多發性骨髓瘤、α鏈病、IgA單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、線性IgA大皰性皮膚病、類風濕性關節炎、潰瘍性結腸炎及原發性腎絲球腎炎以及其他病症。
免疫球蛋白 E IgG在某些實施例中，疾病係由IgE介導。
免疫球蛋白E (IgE)為過敏性疾病之強介體，包括(但不限於)異位性哮喘、過敏性鼻炎、異位性皮炎、皮膚接觸性過敏症、IgE介導之食物過敏、IgE介導之動物過敏、過敏性結膜炎、過敏性蕁麻疹、過敏性休克、鼻息肉、角膜結膜炎、肥大細胞增多症、嗜伊紅性胃腸道疾病、大皰性類天疱瘡、化療誘導之過敏反應、季節性過敏性鼻炎、間質性膀胱炎、嗜伊紅性食道炎、血管性水腫、急性間質性腎炎、異位性濕疹、嗜伊紅性支氣管炎、慢性阻塞性肺病、胃腸炎、高IgE症候群(賈伯斯氏症候群)、IgE單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、尋常天疱瘡、黏液膜類天疱瘡、慢性蕁麻疹、自體免疫葡萄膜炎、類風濕性關節炎、自體免疫胰臟炎及過敏性鼻結膜炎以及其他病症。
額外免疫球蛋白病症在某些實施例中，疾病係由多種免疫球蛋白介導。
免疫球蛋白介導之疾病之非限制性實例包括：全身性纖維發炎性疾病、1型自體免疫胰臟炎、間質性腎炎、立得氏甲狀腺炎、渦紋樣纖維化、米庫利茲氏病、庫特納氏腫瘤、發炎性假瘤(在身體之各個部位中)、縱隔纖維化、腹膜後纖維化(奧蒙德氏病)、主動脈炎及主動脈周炎、近端膽道狹窄、特發性補體結合不足性腎小管與組織間隙腎炎、多病灶性纖維硬化、硬腦膜炎、胰臟腫大、腫瘤樣病變、心包炎、類風濕性關節炎(RA)、發炎性腸病、多發性硬化症、重症肌無力、僵直性脊椎炎、原發性休格倫氏症候群、牛皮癬性關節炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、硬化性膽管炎、IgG單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、黑色素瘤、大皰性類天疱瘡、古巴士德氏病、腦炎、栓塞性血小板減少性紫癜症、慢性發炎性多發性神經病變、邊緣腦炎、神經肌強直、Morvan氏症候群、落葉型天疱瘡、尋常天疱瘡、REM及非REM類睡症及膜性腎病變、多發性硬化症、甲狀腺機能亢進性葛瑞夫氏病、後天性水皰性表皮鬆解症、妊娠期類天疱瘡、抗p200類天疱瘡、伴腫瘤性天疱瘡、IgA腎病變(亦稱為柏格氏病)、乳糜瀉、克隆氏病、Henoch-Schönlein二氏紫癜症(HSP) (亦稱為IgA血管炎)、IgA天疱瘡、疱疹樣皮炎、發炎性腸病(IBD)、休格倫氏症候群、僵直性脊椎炎、酒精性肝硬化、後天免疫缺乏症候群、IgA多發性骨髓瘤、α鏈病、IgA單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、線性IgA大皰性皮膚病、類風濕性關節炎、潰瘍性結腸炎、原發性腎絲球腎炎、異位性哮喘、過敏性鼻炎、異位性皮炎、皮膚接觸性過敏症、IgE介導之食物過敏、IgE介導之動物過敏、過敏性結膜炎、過敏性蕁麻疹、過敏性休克、鼻息肉、角膜結膜炎、肥大細胞增多症、嗜伊紅性胃腸道疾病、大皰性類天疱瘡、化療誘導之過敏反應、季節性過敏性鼻炎、間質性膀胱炎、嗜伊紅性食道炎、血管性水腫、急性間質性腎炎、異位性濕疹、嗜伊紅性支氣管炎、慢性阻塞性肺病、胃腸炎、高IgE症候群(賈伯斯氏症候群)、IgE單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、尋常天疱瘡、黏液膜類天疱瘡、慢性蕁麻疹、自體免疫葡萄膜炎、類風濕性關節炎、自體免疫胰臟炎及過敏性鼻結膜炎，以及其他病症。
額外病症免疫球蛋白亦與各種複雜蛋白質信號傳導級聯(例如補體級聯)相關，且因此其降解可治療由此等蛋白質信號傳導級聯介導之疾病。可由本發明之化合物治療的病症之額外實例包括自體免疫、其他免疫功能障礙、補體介導之病症、異常細胞增殖、癌症、腫瘤、血液學相關病症、腎病及肝病。在某些實施例中，病症由除免疫球蛋白外之胞外蛋白質介導，且向有需要之患者投與使該胞外蛋白質降解之本發明化合物。
在某些實施例中，如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物用於治療自體免疫病症。在一些態樣中，胞外蛋白質為Ig，諸如IgA或IgG。IgG降解可治療例如甲狀腺眼病、重症肌無力、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變及溫抗體型自體免疫溶血性貧血。
自體免疫病症之非限制性實例包括：狼瘡、同種異體移植排斥反應、自體免疫甲狀腺病(諸如葛瑞夫氏病及橋本氏甲狀腺炎)、自體免疫性葡萄膜視網膜炎、巨大細胞動脈炎、發炎性腸病(包括克隆氏病、潰瘍性結腸炎、區域性腸炎、肉芽腫性腸炎、遠端回腸炎、區域性回腸炎及末端回腸炎)、糖尿病、多發性硬化症、惡性貧血、牛皮癬、類風濕性關節炎、類肉瘤病及硬皮病。
在一實施例中，如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物用於治療狼瘡。狼瘡之非限制性實例包括紅斑狼瘡、皮膚狼瘡、盤狀紅斑狼瘡、凍瘡紅斑狼瘡或紅斑狼瘡-扁平苔癬重疊症候群。紅斑狼瘡為一般疾病類別，其包括全身性與皮膚病症兩者。疾病之全身性形式可具有皮膚以及全身性表現。然而，亦存在僅受累皮膚、但無全身性受累之疾病形式。舉例而言，SLE為病源學未知之發炎性病症，其主要出現在女性中，且特徵為關節症狀、蝶形紅斑、復發性肋膜炎、心包炎、泛發性淋巴結腫大、脾腫大以及CNS受累及進行性腎衰竭。大部分患者(超過98%)之血清含有抗核抗體，包括抗DNA抗體。抗DNA抗體之高效價基本上對SLE具有特異性。此疾病之習知治療已為投與皮質類固醇或免疫抑制劑。
皮膚狼瘡存在三種形式：慢性皮膚狼瘡(亦稱為盤狀紅斑狼瘡或DLE)、亞急性皮膚狼瘡及急性皮膚狼瘡。DLE為主要影響皮膚之毀容慢性疾病，其具有尖銳環繞痣及斑，顯示紅斑、濾泡性堵塞、鱗屑、毛細管擴張症及萎縮。該病況通常因日曬而沈澱，且早期病變為紅斑性圓鱗屑丘疹，其直徑為5至10 mm且顯示濾泡性堵塞。DLE病變最常出現於面頰、鼻、頭皮及耳朵，但其亦可廣泛出現於軀幹上部、肢端之伸肌表面及口腔黏膜上。若不治療，則中心病變萎縮且留下疤痕。不同於SLE，針對雙股DNA之抗體(例如結合DNA之測試)在DLE中幾乎始終不存在。
多發性硬化症為自體免疫去髓鞘病症，咸信其具有T淋巴球依賴性。MS一般展現復發緩解過程或慢性進行性過程。然而MS病源學未知，病毒感染、遺傳傾向性、環境及自體免疫力似乎皆導致該病症。MS患者之病變含有主要為T淋巴球介導之小神經膠質細胞及浸潤性巨噬細胞的浸潤物。CD4+ T淋巴球為此等病變中存在之主要細胞類型。MS病變標誌為斑，亦即MRI掃描中所見之與普通白質分界明顯的去髓鞘區域。MS斑之組織學外觀因疾病之階段不同而變化。在活動性病變中，血-腦障壁受損，從而允許血清蛋白質外滲至胞外空間中。發炎細胞可見於血管周圍套膜及整個白質中。CD4+ T細胞(特別是Th1)在斑塊邊緣圍繞毛細血管後微靜脈積聚且亦散射於白質中。在活動性病變中，亦已觀測到黏附分子之上調以及淋巴球及單核球活化之標記，諸如IL2-R及CD26。活動性病變之去髓鞘未伴隨寡樹突神經膠質細胞之破壞。相比之下，在疾病之慢性階段期間，病變之特徵為寡樹突神經膠質細胞之損失，以及因此血液中髓鞘寡樹突神經膠質細胞醣蛋白(MOG)抗體之存在。
糖尿病可指1型或2型糖尿病。在一些實施例中，如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物以有效劑量提供以治療患有1型糖尿病之患者。在某些態樣中，如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物以有效劑量提供以治療患有2型糖尿病之患者。
1型糖尿病為自體免疫疾病。當對抗感染的身體系統(免疫系統)轉而針對身體的一部分時，產生自體免疫疾病。1型糖尿病常常在胰臟因免疫系統而受損時發生。受損之胰臟隨後產生極少或不產生胰島素。
作為實例，如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物適用於治療或預防選自以下之病症：自體免疫卵巢炎、子宮內膜異位、自體免疫睾丸炎、奧德氏甲狀腺炎(Ord's thyroiditis)、自體免疫腸病、乳糜瀉、橋本氏腦病變、抗磷脂症候群(APLS) (休斯氏症候群(Hughes syndrome))、再生不全性貧血、自體免疫淋巴增生症候群(加勒史密斯症候群(Canale-Smith syndrome))、自體免疫嗜中性球減少症、伊凡氏症候群(Evans syndrome)、惡性貧血、純紅血球發育不全、血小板減少症、痛性肥胖病(德康氏病(Dercum's disease))、成年發病型史迪爾氏病、僵直性脊椎炎、CREST症候群、藥物誘發之狼瘡、嗜伊紅性筋膜炎(肖曼氏症候群(Shulman's syndrome))、費爾蒂症候群(Felty syndrome)、IgG4相關疾病、混合型結締組織疾病(MCTD)、陣發性風濕症(亨奇羅森堡症候群(Hench-Rosenberg syndrome))、帕瑞隆伯格症候群(Parry-Romberg syndrome)、帕森吉-特納症候群(Parsonage-Turner syndrome)、復發性多軟骨炎(梅陽伯格艾瑟優靈格症候群(Meyenburg-Altherr-Uehlinger syndrome))、腹膜後纖維化、風濕熱、施尼茲勒症候群(Schnitzler syndrome)、肌肉纖維疼痛、神經肌強直(伊薩氏病(Isaac's disease))、副腫瘤退化症、自體免疫內耳疾病、梅尼爾氏病(Meniere's disease)、間質性膀胱炎、自體免疫胰臟炎、茲卡病毒(zika virus)相關病症、屈公病毒(chikungunya virus)相關病症、亞急性細菌性心內膜炎(SBE)、IgA腎病、IgA血管炎、風濕性多肌痛、類風濕性血管炎、斑禿、自體免疫孕酮皮炎、疱疹樣皮炎、結節性紅斑、妊娠期類天疱瘡、化膿性汗腺炎、硬化性苔癬、線性IgA疾病(LAD)、硬斑病、肌炎、急性苔蘚痘瘡樣糠疹(pityriasis lichenoides et varioliformis acuta)、白斑後心肌梗塞症候群(卓斯勒症候群(Dressler's syndrome))、心包膜切開後症候群、自體免疫視網膜病變、科岡症候群(Cogan syndrome)、葛瑞夫氏眼病變(Graves opthalmopathy)、木質結膜炎、穆倫氏潰瘍(Mooren's ulcer)、眼陣攣-肌陣攣症候群、視神經炎、視網膜耳蝸腦血管病變(蘇薩克氏症候群(Susac's syndrome))、交感神經眼炎、托洛薩亨特症候群(Tolosa-Hunt syndrome)、間質性肺病、抗合成酶症候群、阿狄森氏病(Addison's disease)、I型自體免疫多內分泌症候群(APS)、II型自體免疫多內分泌症候群(APS)、III型自體免疫多內分泌症候群(APS)、播散性硬化症(多發性硬化症，模式II)、急進性腎絲球腎炎(RPGN)、幼年型類風濕性關節炎、起止點炎相關關節炎、反應性關節炎(萊特爾氏症候群(Reiter's syndrome))、自體免疫肝炎或類狼瘡肝炎、原發性膽汁性肝硬化(PBS)、原發性硬化性膽管炎、顯微鏡下結腸炎、潛伏性狼瘡(未分化結締組織疾病(UCTD))、急性播散性腦脊髓炎(ADEM)、急性運動軸突神經病變、抗正甲基-D-天冬胺酸受體腦炎、巴洛同心硬化症(Balo concentric sclerosis) (希爾德氏病(Schilders disease))、比克塔夫氏腦炎(Bickerstaff's encephalitis)、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、特發性發炎性髓鞘脫失病、蘭伯特伊頓肌無力症候群(Lambert-Eaton mysathenic syndrome)、奧拓蘭症候群(Oshtoran syndrome)、與鏈球菌關聯之兒童自體免疫神經精神異常(PANDAS)、進行性發炎性神經病變、腿不寧症候群、僵體症候群、悉頓漢姆症候群(Sydenhem syndrome)、橫貫性脊髓炎、狼瘡血管炎、白血球破裂性血管炎、顯微多血管炎、多發性肌炎或眼睛之缺血再灌注損傷。
在一些態樣中，由如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療之病症係選自脂肪肝及源於脂肪肝之病況，諸如非酒精性脂性肝炎(NASH)、肝炎、肝硬化及肝衰竭。
在其他實施例中，如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物用於在手術或其他醫學程序之前或期間調控免疫反應。非限制性實例為結合急性或慢性移植物抗宿主疾病之用途，該疾病為同種異體組織移植所致之常見併發症，且亦可能因輸血而出現。
在某些實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防皮肌炎的方法。
在某些實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防肌肉萎縮性側索硬化的方法。
在某些實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防腹部主動脈瘤、血液透析併發症、溶血性貧血或血液透析的方法。
在某些實施例中，提供一種治療或預防宿主之響應於投與醫藥或生物治療劑(例如CAR T細胞療法或單株抗體療法)之細胞介素或發炎性反應的方法，其藉由投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。各種類型之細胞介素或發炎性反應可響應於多種因素，諸如生物治療劑之投與而出現。在某些態樣中，細胞介素或發炎性反應為細胞介素釋放症候群。在一個實施例中，細胞介素或發炎性反應為腫瘤裂解症候群(其亦導致細胞介素釋放)。細胞介素釋放症候群之症狀範圍為發熱、頭痛及皮膚皮疹至支氣管痙攣、低血壓及甚至心跳驟停。重度細胞介素釋放症候群描述為細胞介素風暴且可為致命的。
在另一實施例中，病症為上鞏膜炎、特發性上鞏膜炎、前上鞏膜炎或後上鞏膜炎。在一個實施例中，病症為特發性前眼色素層炎、HLA-B27相關眼色素層炎、疱疹性角膜眼色素層炎、青光眼睫狀體症候群(Posner Schlossman syndrome)、福斯氏異色虹膜睫狀體炎(Fuch's heterochromic iridocyclitis)或巨細胞病毒前眼色素層炎。
在另一實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防C3腎絲球病變的方法。在一個實施例中，病症選自密度沈積病(DDD)及C3腎絲球腎炎(C3GN)。
在又另一實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防IC-MPGN的方法。
在另一實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防陣發性夜間血紅素尿症(PNH)的方法。
在另一實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防年齡相關黃斑變性(AMD)的方法。
在一個實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防類風濕性關節炎的方法。
在一個實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防多發性硬化症的方法。
在一個實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防重症肌無力的方法。
在一個實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防非典型性溶血性尿毒性症候群(aHUS)的方法。
在一個實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防視神經脊髓炎(NMO)的方法。
在又其他實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體投與有效量之如本文所述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防如下文所述之病症的方法，該病症包括：例如：玻璃體炎、類肉瘤病、梅毒、肺結核或萊姆病(Lyme disease)；視網膜血管炎、伊爾斯氏病(Eales disease)、肺結核、梅毒或弓蟲病；視神經視網膜炎、病毒性視網膜炎或急性視網膜壞死；水痘帶狀疱疹病毒(varicella zoster virus)、單純疱疹病毒(herpes simplex virus)、巨細胞病毒、埃-巴二氏病毒(Epstein-Barr virus)、扁平苔癬或登革熱(Dengue)相關性疾病(例如出血性登革熱)；偽裝症候群(Masquerade syndrome)、接觸性皮炎、創傷誘發之炎症、UVB誘發之炎症、濕疹、環狀肉芽腫或痤瘡。
在額外實施例中，病症係選自：急性心肌梗塞、動脈瘤、心肺繞通、擴張型心肌症、心肺繞通手術期間的補體活化、冠狀動脈疾病、支架置入後的再狹窄，或經皮管內冠狀動脈血管成形術(PTCA)；抗體介導之移植排斥反應、過敏性休克、全身性過敏反應、同種異體移植、體液及血管移植排斥反應、移植物功能異常、移植物抗宿主疾病、葛瑞夫氏病、有害藥物反應或慢性移植物血管病變；過敏性支氣管肺麴黴病、過敏性神經炎、藥物過敏、輻射誘導性肺損傷、嗜伊紅性肺炎、放射照相顯影劑過敏、阻塞性細支氣管炎或間隙性肺炎；巴金森氏症-癡呆症複合症(parkinsonism-dementia complex)、偶發性額顳葉型癡呆症、額顳葉型癡呆症伴染色體17關聯巴金森氏症、額顳葉變性、唯纏結癡呆症、大腦澱粉樣蛋白血管病變、腦血管病症、額顳葉型癡呆症的某些形式、慢性創傷性腦病變(CTE)、PD伴癡呆症(PDD)、嗜銀顆粒癡呆症、拳擊員癡呆症、路易體癡呆(dementia with Lewy Bodies；DLB)或多梗塞性癡呆；庫賈氏病(Creutzfeldt-Jakob disease)、亨廷頓氏病(Huntington's disease)、多病灶性運動神經病變(MMN)、朊病毒蛋白質大腦澱粉樣蛋白血管病變、多發性肌炎、腦炎後巴金森氏症、亞急性硬化性全腦炎、非關島運動神經元疾病伴神經原纖維纏結、神經再生或彌漫性神經原纖維纏結伴鈣化。
在其他實施例中，病症係選自：異位性皮炎、皮炎、皮肌炎大皰性類天疱瘡、硬皮病、硬皮病性皮肌炎、牛皮癬性關節炎、尋常天疱瘡、盤狀紅斑狼瘡、皮膚狼瘡、凍瘡紅斑狼瘡或紅斑狼瘡-扁平苔癬重疊症候群；球蛋白性血管炎、腸系膜/腸血管病症、周邊血管病症、抗嗜中性球細胞質抗體(ANCA)相關血管炎(AAV)、IL-2誘導性血管滲漏症候群或免疫複合體性血管炎；血管性水腫、低血小板(HELLP)症候群、鐮狀細胞疾病、血小板輸注無效、紅血球管型(red cell cast)，或典型或感染性溶血性尿毒症症候群(tHUS)；血尿、出血性休克、藥物誘導之血小板減少症、自體免疫溶血性貧血(AIHA)、氮質血症、血管及/或淋巴管發炎、旋轉動脈粥樣硬塊切除或延遲性溶血性輸注反應；英國型澱粉樣蛋白血管病變、伯格氏病、大皰性類天疱瘡、C1q腎病變、癌症或劇症型抗磷脂症候群。
在其他實施例中，病症係選自：濕性(滲出性) AMD、乾性(非滲出性) AMD、視網膜脈絡膜變性、脈絡膜新生血管(CNV)、脈絡膜炎、RPE功能喪失、視力喪失(包括視敏度或視野喪失)、AMD所致之視力喪失、回應於曝光之視網膜損傷、視網膜變性、視網膜剝離、視網膜功能異常、視網膜新血管生成(RNV)、早產兒視網膜病、病理性近視或RPE變性；假晶狀體大皰性角膜病變、症狀性黃斑變性相關病症、視神經變性、感光體變性、錐變性、感光體細胞損失、睫狀體扁平部炎、鞏膜炎、增生性玻璃體視網膜病變，或眼脈絡膜小疣形成； 慢性蕁麻疹、查格-施特勞斯症候群、冷凝集素病(CAD)、皮質基底核退化症(CBD)、冷球蛋白血症、睫狀體炎、布魯赫膜(Bruch's membrane)損傷、德戈斯疾病(Degos disease)、糖尿病性血管病變、肝酶升高、內毒素血症、大皰性表皮鬆解症，或後天性水皰性表皮鬆解症；原發性混合型冷球蛋白血症、過度血尿素氮-BUN、病灶性節段腎小球硬化、格斯曼-斯托斯勒-謝恩克爾疾病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、巨大細胞動脈炎、痛風、霍勒沃頓-斯帕茲疾病(Hallervorden-Spatz disease)、橋本氏甲狀腺炎、Henoch-Schonlein氏紫癜腎炎，或異常泌尿沈積物；肝炎、A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎或人類免疫缺乏病毒(HIV)；病毒感染，更一般而言例如選自黃病毒科(Flaviviridae)、反轉錄病毒、冠狀病毒科(Coronaviridae)、痘病毒科(Poxviridae)、腺病毒科(Adenoviridae)、疱疹病毒科(Herpesviridae)、杯狀病毒科(Caliciviridae)、呼腸孤病毒科(Reoviridae)、小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)、披膜病毒科(Togaviridae)、正黏病毒科(Orthomyxoviridae)、彈狀病毒科(Rhabdoviridae)或肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)；腦膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis)、志賀樣毒素大腸桿菌相關溶血性尿毒症症候群(shiga toxin E. coli-related hemolytic uremic syndrome；STEC-HUS)、溶血性尿毒症症候群(HUS)；鏈球菌或鏈球菌感染後腎絲球腎炎。
在其他實施例中，病症係選自：高脂質血症、高血壓、低白蛋白血症、低血容性休克、低補體症血管炎蕁麻疹症候群、低磷酸酯酶症、低血容性休克、特發性肺炎症候群，或特發性肺纖維化；包涵體肌炎、腸缺血、虹膜睫狀體炎、虹膜炎、幼年型慢性關節炎、川崎氏病(Kawasaki's disease) (動脈炎)或脂尿症；膜增生性腎絲球腎炎(MPGN) I、顯微多血管炎、混合型冷球蛋白血症、A型鉬輔因子缺乏(MoCD)、胰臟炎、脂層炎、匹克病(Pick's disease)、結節性多動脈炎(PAN)、漸進性皮層下神經膠樣變性、蛋白尿、腎小球濾過率減小(GFR)，或腎血管病症；多重器官衰竭、多發性系統萎縮症(MSA)、肌緊張性營養不良、C型尼曼-匹克疾病(Niemann-Pick disease type C)、慢性去髓鞘疾病，或進行性核上麻痹；脊髓損傷、脊髓性肌萎縮、脊椎關節病、萊特爾氏症候群(Reiter's syndrome)、自發性流產、復發性流產、子癇前症、突觸核蛋白病、高安氏動脈炎(Takayasu's arteritis)、分娩後甲狀腺炎、甲狀腺炎、I型冷球蛋白血症、II型混合型冷球蛋白血症、III型混合型冷球蛋白血症、潰瘍性結腸炎、尿毒症、蕁麻疹、靜脈氣體血栓(VGE)或韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)；凡希培-林道氏病(von Hippel-Lindau disease)、眼部組織漿菌病、硬脈絡膜小疣、軟脈絡膜小疣、色素凝集，或感光體及/或視網膜色素上皮(RPE)損失。
可根據本文所揭示之組合物及方法治療的眼睛病症之實例包括阿米巴性角膜炎(amoebic keratitis)、真菌角膜炎、細菌角膜炎、病毒角膜炎、盤尾絲蟲屬角膜炎、細菌角膜結膜炎、病毒角膜結膜炎、角膜營養不良疾病、福赫氏內皮營養不良(Fuchs' endothelial dystrophy)、休格倫氏症候群、史蒂芬斯-強森症候群(Stevens-Johnson syndrome)、自體免疫乾眼病、環境乾眼病、角膜新血管生成疾病、角膜移植後排斥反應預防及治療、自體免疫眼色素層炎、感染性眼色素層炎、後眼色素層炎(包括弓蟲病)、泛眼色素層炎、玻璃體或視網膜之發炎性疾病、內眼炎預防及治療、黃斑水腫、黃斑變性、年齡相關性黃斑變性、增生性及非增生性糖尿病性視網膜病變、高血壓視網膜病變、視網膜自體免疫疾病、原發性及轉移性眼內黑色素瘤、其他眼內轉移性腫瘤、開角型青光眼、閉角型青光眼、色素青光眼及其組合。
在其他實施例中，該病症係選自青光眼、糖尿病性視網膜病變、水皰性皮膚病(包括大皰性類天疱瘡、天疱瘡及大皰性表皮鬆解症)、眼部瘢痕性類天疱瘡、葡萄膜炎、成人黃斑變性、糖尿病性視網膜病變色素性視網膜炎、黃斑水腫、糖尿病性黃斑水腫、Behcet氏眼色素層炎、多灶性脈絡膜炎、原田氏症候群(Vogt-Koyangi-Harada syndrome)、中間眼色素層炎、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜炎、交感神經眼炎、眼瘢痕性類天疱瘡、眼部天疱瘡、非動脈炎性缺血性視神經病變、手術後炎症及視網膜靜脈栓塞或中心性視網膜靜脈栓塞(CVRO)。
可藉由如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物治療或預防的病症亦包括(但不限於)：遺傳性血管水腫、毛細血管滲漏症候群、溶血性尿毒症症候群(HUS)、神經病症、格巴二氏症候群、中樞神經系統疾病及其他神經退化性病況、腎絲球腎炎(包括膜增生性腎絲球腎炎)、SLE腎炎、增生性腎炎、肝纖維化、組織再生及神經再生，或巴拉克-西蒙症候群(Barraquer-Simons Syndrome)；敗血症之發炎效應、全身性發炎反應症候群(SIRS)、不當或非所需補體活化之病症、在IL-2療法期間介白素-2誘導之毒性、發炎性病症、自體免疫疾病之發炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、狼瘡性腎炎、關節炎、免疫複合體病症及自體免疫疾病、全身性狼瘡或紅斑狼瘡；缺血/再灌注損傷(I/R損傷)、心肌梗塞、心肌炎、缺血後再灌注病況、球囊血管成形術、動脈粥樣硬化、心肺繞通或腎繞通術中之泵吸後症候群、腎缺血、主動脈重建之後的腸系膜動脈再灌注、抗磷脂症候群、自體免疫心臟病、缺血再灌注損傷、肥胖或糖尿病； 阿茲海默氏癡呆症、中風、精神分裂症、創傷性腦損傷、創傷、帕金森氏病、癲癇症、移植排斥反應、預防流產、生物材料反應(例如在血液透析、植入中)、超急性同種異體移植排斥反應、異種移植排斥反應、移植、牛皮癬、燒傷、熱損傷(包括燒傷或凍傷)或擠壓傷；哮喘、過敏、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、囊腫性纖維化、成人呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咯血、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺氣腫、肺栓塞及梗塞、肺炎、纖維發生性粉塵病、惰性粉塵及礦物質(例如矽、煤塵、鈹及石棉)、肺纖維化、有機粉塵疾病、化學損傷(由於刺激性氣體及化學物質，例如氯氣、光氣、二氧化硫、硫化氫、二氧化氮、氨氣及鹽酸)、煙霧損傷、熱損傷(例如燒傷、冷凍)、支氣管收縮、過敏性肺炎、寄生疾病、古巴士德氏症候群(抗腎絲球基底膜腎炎)、肺血管炎、少免疫性血管炎，或免疫複合體相關發炎。
在另一實施例中，提供治療宿主之鐮狀細胞的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。在一個實施例中，提供治療宿主之免疫性血小板減少性紫癜症(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜症(TTP)或特發性血小板減少性紫癜症(ITP)的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。在一個實施例中，提供治療宿主之ANCA血管炎的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。在一個實施例中，提供治療宿主之IgA腎病的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。在一個實施例中，提供治療宿主之急進性腎絲球腎炎(RPGN)的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。在一個實施例中，提供治療宿主之狼瘡性腎炎的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。在一個實施例中，提供治療宿主之出血性登革熱的方法，該方法包括投與有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物。
在其他態樣中，使用有效量之如本文所描述之降解劑或其鹽或組合物來治療異常增殖病症，諸如腫瘤或癌症。
可根據本發明治療之癌症的非限制性實例包括(但不限於)：聽神經瘤、腺癌、腎上腺癌、肛門癌、血管肉瘤(例如，淋巴管肉瘤、淋巴管內皮肉瘤、血管肉瘤)、闌尾癌、良性單株γ球蛋白症、膽道癌(例如，膽管癌瘤)、膀胱癌、乳癌(例如，乳房腺癌、乳房乳頭狀癌、乳腺癌、乳房髓質癌)、腦癌(例如，腦膜瘤；神經膠質瘤，例如星形細胞瘤、少突神經膠質瘤；神經管胚細胞瘤)、支氣管癌、類癌腫瘤、子宮頸癌(例如，子宮頸腺癌)、絨毛膜癌、脊索瘤、顱咽管瘤、大腸直腸癌(例如，大腸癌、直腸癌、大腸直腸腺癌)、上皮癌、室管膜瘤、內皮肉瘤(例如，卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、多發性特發性出血肉瘤)、子宮內膜癌(例如，子宮癌、子宮肉瘤)、食道癌(例如，食道腺癌、巴雷特氏腺癌(Barrett's adenocarinoma))、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、眼癌(例如，眼內黑色素瘤、視網膜母細胞瘤)、家族性嗜伊紅球過多、膽囊癌、胃癌(例如，胃腺癌)、胃腸基質腫瘤(GIST)、頭頸癌(例如，頭頸部鱗狀細胞癌、口腔癌(例如，口腔鱗狀細胞癌(OSCC)、咽喉癌(例如，喉癌、咽癌、鼻咽癌、口咽癌))、造血癌症(例如，白血病，諸如急性淋巴球性白血病(ALL) (亦稱為急性淋巴母細胞性白血病或急性淋巴性白血病) (例如B細胞ALL、T細胞ALL)、急性骨髓細胞性白血病(AML) (例如B細胞AML、T細胞AML)、慢性骨髓細胞性白血病(CML) (例如B細胞CML、T細胞CML)及慢性淋巴球性白血病(CLL) (例如B細胞CLL、T細胞CLL)；淋巴瘤，諸如霍奇金淋巴瘤(HL) (例如B細胞HL、T細胞HL)及非霍奇金淋巴瘤(NHL) (例如B細胞NHL，諸如彌漫性大細胞淋巴瘤(DLCL) (例如彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL))、濾泡性淋巴瘤、慢性淋巴球性白血病/小淋巴球性淋巴瘤(CLL/SLL)、套細胞淋巴瘤(MCL)、邊緣區B細胞淋巴瘤(例如黏膜相關淋巴組織(MALT)淋巴瘤、結邊緣區B細胞淋巴瘤、脾邊緣區B細胞淋巴瘤)、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、淋巴漿細胞淋巴瘤(亦即，「瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症(Waldenström's macroglobulinemia)」)、毛細胞白血病(HCL)、免疫母細胞性大細胞淋巴瘤、前驅體B淋巴母細胞性淋巴瘤及原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤；及T細胞NHL，諸如前驅體T淋巴母細胞性淋巴瘤/白血病、外周T細胞淋巴瘤(PTCL) (例如皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL) (例如蕈樣黴菌病、塞紮萊症候群(Sezary syndrome))、血管免疫母細胞性T細胞淋巴瘤、結外自然殺手T細胞淋巴瘤、腸病型T細胞淋巴瘤、皮下脂層炎狀T細胞淋巴瘤及多形性大細胞淋巴瘤)；如上文所描述之一或多種白血病/淋巴瘤之混合物；及多發性骨髓瘤(MM))、重鏈疾病(例如，α鏈疾病、γ鏈疾病、μ鏈疾病)、血管母細胞瘤、發炎性肌纖維母細胞瘤、免疫細胞澱粉樣變性、腎癌(例如，腎母細胞瘤(亦稱為威爾姆斯氏腫瘤(Wilms' tumor))、腎細胞癌)、肝癌(例如，肝細胞癌(HCC)、惡性肝細胞瘤)、肺癌(例如，支氣管癌、小細胞肺癌(SCLC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌)、平滑肌肉瘤(LMS)、肥大細胞增多症(例如，全身性肥大細胞增多症)、骨髓發育不良症候群(MDS)、間皮瘤、骨髓增生性病症(MPD) (例如，真性紅細胞增多症(PV)、原發性血小板增多症(ET)、原因不明性骨髓細胞化生(AMM) (亦稱為骨髓纖維化(MF))、慢性特發性骨髓纖維化、慢性骨髓細胞性白血病(CML)、慢性嗜中性球白血病(CNL)、嗜伊紅白血球增多症候群(HES))、神經母細胞瘤、神經纖維瘤(例如，1型或2型神經纖維瘤(NF)、許旺細胞瘤病(schwannomatosis))；神經內分泌癌(例如，胃腸胰臟神經內分泌腫瘤(GEP-NET)、類癌腫瘤)、骨肉瘤、卵巢癌(例如，囊腺癌、卵巢胚胎性癌、卵巢腺癌)、乳頭狀腺癌、胰臟癌(例如，胰臟腺癌、導管內乳頭狀黏液性贅瘤(IPMN)、胰島細胞瘤)、陰莖癌(例如，陰莖及陰囊之佩吉特氏病(Paget's disease))、松果體瘤、原始神經外胚層腫瘤(PNT)、前列腺癌(例如，前列腺癌)、直腸癌、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、皮膚癌(例如，鱗狀細胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底細胞癌(BCC))、小腸癌(例如，闌尾癌)、軟組織肉瘤(例如，惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、惡性周邊神經鞘腫瘤(MPNST)、軟骨肉瘤、纖維肉瘤、黏液肉瘤)、皮脂腺癌、汗腺癌、滑膜瘤、睪丸癌(例如，精原細胞瘤、睪丸胚胎性癌)、甲狀腺癌(例如，甲狀腺乳頭狀癌、乳頭狀甲狀腺癌(PTC)、甲狀腺髓質癌)、尿道癌、陰道癌及外陰癌(例如，外陰之佩吉特氏病)。
在另一個實施例中，病症為骨髓發育不良症候群(MDS)。
在某些實施例中，癌症為造血癌。在某些實施例中，造血癌為淋巴瘤。在某些實施例中，造血癌為白血病。在某些實施例中，白血病為急性骨髓細胞性白血病(AML)。
在某些實施例中，增生性病症為骨髓增生性腫瘤。在某些實施例中，骨髓增生性腫瘤(MPN)為原發性骨髓纖維化(PMF)。
在某些實施例中，癌症為實體腫瘤。如本文所用，實體腫瘤係指通常不含囊腫或液體區域之異常組織塊。不同類型之實體腫瘤以形成其之細胞類型而命名。如上文所述，實體腫瘤類別之實例包括但不限於肉瘤、癌瘤及淋巴瘤。實體腫瘤之額外實例包括但不限於鱗狀細胞癌、結腸癌、乳癌、前列腺癌、肺癌、肝癌、胰臟癌及黑色素瘤。
異常細胞增殖，尤其過度增殖可由於各種因素，包括基因突變、感染、暴露於毒素、自體免疫病症及良性或惡性腫瘤誘發而出現。
存在多種與細胞過度增殖相關聯之皮膚病症。舉例而言，牛皮癬為良性人類皮膚病，其特徵一般為由增厚鱗屑覆蓋之斑。該疾病由未知原因之表皮細胞的增殖增加引起。慢性濕疹亦與表皮之顯著過度增殖相關聯。由皮膚細胞過度增殖引起之其他疾病包括異位性皮炎、扁平苔癬、疣、尋常性天疱瘡、光化性角化症、基底細胞癌及鱗狀細胞癌。
其他過度增殖細胞病症包括血管增殖病症、纖維化病症、自體免疫病症、移植物抗宿主排斥反應、腫瘤及癌症。
血管增生性病症包括血管生成及血小管生成病症。平滑肌細胞在血管組織中之斑塊的發展過程中之增殖引起例如再狹窄、視網膜病變及動脈粥樣硬化。細胞遷移及細胞增殖兩者在動脈粥樣硬化病變形成中起作用。
纖維化病症通常歸因於胞外基質之形成異常。纖維化病症之實例包括肝硬化及腎小球膜增生性細胞病症。肝硬化之特徵在於胞外基質組分增加，導致形成肝臟疤痕。肝硬化(hepatic cirrhosis)會引起疾病，諸如肝硬化(cirrhosis of the liver)。胞外基質增加導致肝臟疤痕亦可由諸如肝炎之病毒感染引起。脂細胞似乎在肝硬化中起主要作用。
腎小球膜病症由腎小球膜細胞之增殖異常引起。腎小球膜過度增殖性細胞病症包括各種人類腎病，諸如腎絲球腎炎、糖尿病性腎病變、惡性腎硬化、血栓性微血管病變症候群、移植排斥反應及腎絲球病變。
具有增生性組分之另一種疾病為類風濕性關節炎。類風濕性關節炎一般被視為自體免疫疾病，其被認為與自體反應性T細胞之活性相關聯，且由針對膠原蛋白及IgE產生之自體抗體引起。
一般而言，可包括異常細胞增殖性組分之其他病症包括Bechet氏症候群、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、缺血性心臟病、透析後症候群、白血病、後天免疫缺乏症候群、血管炎、脂質組織細胞增多病、敗血性休克及炎症。
在某些實施例中，病況與免疫反應相關聯。
皮膚接觸性過敏症及哮喘恰好為可與相當大的發病率相關聯之免疫反應之兩個實例。其他疾病包括異位性皮炎、濕疹、休格倫氏症候群，包括繼發於休格倫氏症候群之乾性角膜結膜炎、斑禿、歸因於節肢動物叮咬反應之過敏反應、克隆氏病、口瘡潰瘍、虹膜炎、結膜炎、角膜結膜炎、潰瘍性結腸炎、皮膚紅斑狼瘡、硬皮病、陰道炎、直腸炎及藥疹。此等病況可導致以下症狀或病徵中之任一者或多者：發癢、腫脹、發紅、水皰、結痂、潰瘍、疼痛、起鱗屑、龜裂、脫髮、結疤或涉及皮膚、眼睛或黏膜之體液滲泌。
在異位性皮炎及濕疹中，一般而言，免疫介導之白血球浸潤(特定言之單核球、淋巴細胞、嗜中性球及嗜伊紅性浸潤)至皮膚中對此等疾病之發病機制有重要意義。慢性濕疹亦與表皮之顯著過度增殖相關聯。免疫介導之白血球浸潤亦在除皮膚外之部位，諸如在哮喘之氣管中及在乾燥性角膜結膜炎之眼睛之淚腺中發生。
在其他非限制性實施例中，本發明之降解劑用作治療接觸性皮炎、異位性皮炎、濕疹性皮炎、牛皮癬、休格倫氏症候群(包括繼發於休格倫氏症候群之乾性角膜結膜炎)、斑禿、歸因於節肢動物叮咬反應之過敏反應、克隆氏病、口瘡潰瘍、虹膜炎、結膜炎、角膜結膜炎、潰瘍性結腸炎、哮喘、過敏性哮喘、皮膚紅斑狼瘡、硬皮病、陰道炎、直腸炎及藥疹的局部藥劑。新穎方法亦可適用於在諸如蕈狀肉芽腫之疾病中減少惡性白血球浸潤皮膚。此等化合物亦可用於藉由向眼睛局部投與該化合物來治療罹患其之患者之缺水型乾眼狀態(諸如免疫介導之角膜結膜炎)。
可藉由單獨或與至少一種額外抗癌劑組合的本發明所揭示化合物治療的例示性癌症包括鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、肝細胞癌及腎細胞癌；膀胱癌、腸癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、食道癌、頭癌、腎癌、肝癌、肺癌、頸癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌及胃癌；白血病；良性及惡性淋巴瘤，尤其伯基特氏淋巴瘤及非霍奇金氏淋巴瘤；良性及惡性黑色素瘤；骨髓增生性疾病；肉瘤，包括尤文氏肉瘤、血管肉瘤、卡波西氏肉瘤、脂肪肉瘤、肌肉瘤、外周神經上皮瘤、滑膜肉瘤、神經膠質瘤、星形細胞瘤、寡樹突神經膠質瘤、室管膜瘤、神經膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、神經節細胞瘤、神經節神經膠質瘤、神經管胚細胞瘤、松果體細胞腫瘤、脊膜瘤、腦膜肉瘤、神經纖維瘤及神經鞘瘤；腸癌、乳癌、前列腺癌、子宮頸癌、子宮癌、肺癌、卵巢癌、睪丸癌、甲狀腺癌、星形細胞瘤、食道癌、胰臟癌、胃癌、肝癌、大腸癌、黑色素瘤；癌肉瘤、霍奇金氏病、威爾姆斯氏腫瘤及畸胎癌。可使用根據本發明之所揭示化合物治療的額外癌症包括例如急性顆粒球性白血病、急性淋巴球性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、腺癌、腺肉瘤、腎上腺癌、腎上腺皮質癌、肛門癌、多形性星形細胞瘤、血管肉瘤、闌尾癌、星形細胞瘤、基底細胞癌、B細胞淋巴瘤、膽管癌、膀胱癌、骨癌、骨髓癌、腸癌、腦癌、腦幹神經膠質瘤、乳癌、三(雌激素、孕酮及HER-2)陰性乳癌、二陰性乳癌(雌激素、孕酮及HER-2中之兩者為陰性的)、單陰性(雌激素、孕酮及HER-2中之一者為陰性的)、雌激素受體陽性、HER2陰性乳癌、雌激素受體陰性乳癌、雌激素受體陽性乳癌、轉移性乳癌、管腔A型乳癌、管腔B型乳癌、Her2陰性乳癌、HER2陽性或陰性乳癌、孕酮受體陰性乳癌、孕酮受體陽性乳癌、復發性乳癌、類癌腫瘤、子宮頸癌、膽管癌瘤、軟骨肉瘤、慢性淋巴球性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、大腸癌、大腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚淋巴瘤、皮膚黑色素瘤、彌漫性星形細胞瘤、乳腺管原位癌(DCIS)、子宮內膜癌、室管膜瘤、上皮樣肉瘤、食道癌、尤文氏肉瘤、肝外膽管癌、眼癌、輸卵管癌、纖維肉瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸癌、胃腸道類癌、胃腸道基質腫瘤(GIST)、生殖細胞腫瘤多形性膠質母細胞瘤(GBM)、神經膠質瘤、毛細胞白血病、頭頸癌、血管內皮瘤、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、浸潤性導管癌(IDC)、浸潤性小葉癌(ILC)、發炎性乳癌(IBC)、腸癌、肝內膽管癌、侵襲性/浸潤性乳癌、胰島細胞癌、頜癌、卡波西氏肉瘤、腎癌、喉癌、平滑肌肉瘤、軟腦膜轉移、白血病、唇癌、脂肪肉瘤、肝癌、小葉原位癌、低級星形細胞瘤、肺癌、淋巴結癌、淋巴瘤、男性乳癌、髓質癌、神經管胚細胞瘤、黑色素瘤、腦膜瘤、梅克爾細胞癌、間質軟骨肉瘤、間質瘤、間皮瘤轉移性乳癌、轉移性黑色素瘤、轉移性頸部鱗癌、混合型神經膠質瘤、單胚層畸胎瘤、口癌、黏液癌、黏膜黑色素瘤、多發性骨髓瘤、蕈樣黴菌病、骨髓發育不良症候群、鼻腔癌、鼻咽癌、頸癌、神經母細胞瘤、神經內分泌腫瘤(NET)、非霍奇金氏淋巴瘤、非小細胞肺癌(NSCLC)、燕麥細胞癌、眼癌、眼部黑色素瘤、寡樹突神經膠質瘤、口部癌、口腔癌、口咽癌、骨原性肉瘤、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮細胞癌、卵巢生殖細胞腫瘤、卵巢原發性腹膜癌、卵巢性索基質腫瘤、佩吉特氏病、胰臟癌、乳頭狀癌、鼻竇癌、副甲狀腺癌、骨盆癌、陰莖癌、外周神經癌、腹膜癌、咽癌、嗜鉻細胞瘤、毛細胞型星形細胞瘤、松果體區腫瘤、松果體母細胞瘤、腦垂腺癌、原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂癌、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、軟組織肉瘤、骨肉瘤、肉瘤、鼻竇癌、皮膚癌、小細胞肺癌(SCLC)、小腸癌、脊椎癌、脊柱癌、脊髓癌、鱗狀細胞癌、胃癌、滑膜肉瘤、T細胞淋巴瘤、睪丸癌、咽喉癌、胸腺瘤/胸腺癌、甲狀腺癌、舌癌、扁桃體癌、移行細胞癌、輸卵管癌、管狀癌、未確診癌症、輸尿管癌、尿道癌、子宮腺癌、子宮癌、子宮肉瘤、陰道癌、外陰癌、T細胞譜系急性淋巴母細胞性白血病(T-ALL)、T細胞譜系淋巴母細胞性淋巴瘤(T-LL)、外周T細胞淋巴瘤、成人T細胞白血病、前B ALL、前B淋巴瘤、大B細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、B細胞ALL、費城染色體(Philadelphia chromosome)陽性ALL、費城染色體陽性CML、幼年型骨髓單核細胞性白血病(JMML)、急性前髓細胞性白血病(AML之亞型)、大顆粒淋巴球性白血病、成人T細胞慢性白血病、彌漫性大B細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤；黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)、小細胞淋巴球性淋巴瘤、縱隔大B細胞淋巴瘤、結邊緣區B細胞淋巴瘤(NMZL)；脾邊緣區淋巴瘤(SMZL)；血管內大B細胞淋巴瘤；原發性滲出性淋巴瘤；或淋巴瘤樣肉芽腫病；B細胞前淋巴球性白血病；不可分類之脾淋巴瘤/白血病、脾彌漫性紅髓小B細胞淋巴瘤；淋巴漿細胞淋巴瘤； 重鏈疾病，例如α重鏈疾病、γ重鏈疾病、μ重鏈疾病，漿細胞骨髓瘤、骨骼孤立性漿細胞瘤；骨外漿細胞瘤；原發性皮膚濾泡中心淋巴瘤、富含T細胞/組織細胞之大B細胞淋巴瘤、與慢性發炎相關之DLBCL；老年之埃-巴二氏病毒(EBV) + DLBCL；原發性縱隔(胸腺)大B細胞淋巴瘤、原發性皮膚DLBCL (腿型)、ALK+大B細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤；由HHV8相關多中心卡斯爾曼氏病引起之大B細胞淋巴瘤；特徵介於彌漫性大B細胞淋巴瘤之間的不可分類之B細胞淋巴瘤，或特徵介於彌漫性大B細胞淋巴瘤與典型霍奇金淋巴瘤之間的不可分類之B細胞淋巴瘤。
由胞外蛋白質介導之病症之非限制性一般實例亦包括(但不限於)： AMD、黃斑水腫、DME、糖尿病性視網膜病變、mCNV；神經退化性病症、轉移性大腸直腸癌、非鱗狀非小細胞肺癌、GMB、轉移性腎細胞癌、子宮頸癌、AA澱粉樣變性、澱粉樣蛋白輕鏈(AL)澱粉樣變性、僵直性脊椎炎、抗磷脂Ab症候群、哮喘、寄生蟲曼氏吸血蟲(schistosoma mansoni)感染(IL-13)之惡化、ATTR澱粉樣變性、Behcet症候群、敗血症、發炎、類風濕性關節炎、動脈粥樣硬化、缺血/再灌注損傷； MGUS、壞死性黃肉芽腫、JIA、牛皮癬性關節炎、斑塊型牛皮癬、克隆氏病、潰瘍性結腸炎、化膿性汗腺炎葡萄膜炎；GvH疾病；卡索氏病(Castleman's disease)、肝纖維化、史迪爾氏病；皮膚病(包括異位性皮炎)、移植排斥反應、多發性骨髓瘤、骨硬化性多發性骨髓瘤伴周邊神經病變；胰臟腫瘤；副蛋白血症(NR)、前列腺、胃癌；多形性膠質母細胞瘤；急性冠狀動脈症候群；高脂質血症(罕見型/廣泛性)、慢性蕁麻疹、硬皮病、硬化性黏液水腫、遺傳性血管水腫、凝血障礙、肝素誘導之血小板減少症；獲得性馮威里氏病(Acquired Von Willebrand disease；AVWD)、抗磷脂抗體症候群(APS或APLS)；冷球蛋白血症；肉芽腫病伴多血管炎(韋格納氏) (ANCA相關血管炎之亞型)；特發性(免疫)；血小板減少性紫癜症；IgG4-RD；非IgM MGUS；X性聯低磷酸鹽血症；多發性系統萎縮症(MSA)、帕金森氏病、惡病質、肌肉減少症、偶發性包涵體肌炎、肌肉萎縮症、COPD；橫紋肌溶解症；透析相關澱粉樣變性；病灶性節段腎小球硬化(FSGS)；IgA腎病變(IgAN)及Henoch Schönlein二氏紫癜症(HSP)；急性播散性腦脊髓炎(ADEM)；急性發炎去髓鞘型多發性神經病變(AIDP)；格-巴二氏症候群；阿茲海默氏病及FTD；慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變(CIDP)；庫賈氏病(CJD)；亨廷頓氏症；米勒費雪症候群；視神經脊髓炎譜系病症(NMOSD)；斜視眼陣攣肌陣攣症候群；PANDAS症候群(與鏈球菌感染相關之兒童自體免疫神經精神病症)；橫貫性脊髓炎；肺氣腫、呼吸衰竭；炭疽病；肉毒中毒；敗血症；金黃色葡萄球菌毒性休克症候群；破傷風；移植；肢端肥大症；庫欣氏症(Cushing's disease)；朊病毒病；繼發性膜性腎病變；及血管炎。
由其他胞外蛋白質介導之病症在某些實施例中，本發明之胞外蛋白質降解化合物使除免疫球蛋白以外之蛋白質降解以治療上文所描述之病症。病症及胞外蛋白質之非限制性實例包括：
細胞介素 / 趨化因子1) TNF-α介導多種病症，包括但不限於類風濕性關節炎、發炎性腸病、移植物抗宿主疾病、僵直性脊椎炎、牛皮癬、化膿性汗腺炎、難治性哮喘、全身性紅斑狼瘡、糖尿病及惡病質之誘發。 2) IL-2介導移植中之宿主抗移植物排斥反應及自體免疫病症，包括但不限於多發性硬化症、特發性關節炎、虹膜炎、前眼色素層炎、IL-2誘發之低血壓、牛皮癬及其他自體免疫病症。 3) IL-1介導多種自體發炎性及自體免疫病症，包括但不限於Blau症候群、隱熱蛋白相關週期性症候群、家族性地中海熱、瑪吉德症候群(Majeed syndrome)；甲羥戊酸激酶缺乏症候群、化膿性關節炎-壞疽性膿皮病-痤瘡症候群、腫瘤壞死因子受體相關週期性症候群、Behcet氏病、休格倫氏症候群、痛風及軟骨鈣質沈著病、週期性發熱、口瘡性口炎、咽炎及子宮頸腺炎(或PFAPA)症候群、類風濕性關節炎、2型糖尿病、急性心包炎、慢性間質性肺病(ILD)及史迪爾氏病以及其他病症。 4) IFN-γ介導廣泛範圍之自體免疫病症，包括但不限於類風濕性關節炎、多發性硬化症(MS)、角膜移植排斥反應及各種自體免疫皮膚病，諸如牛皮癬、斑禿、白斑病、尋常性痤瘡及其他疾病。 5) IL-21介導多種自體免疫病症，包括休格倫氏症候群、全身性紅斑狼瘡、1型糖尿病、多發性硬化症、類風濕性關節炎及發炎性腸病。 6) IL-22介導多種自體免疫病症，包括但不限於移植物抗宿主疾病(GVHD)、牛皮癬、類風濕性關節炎、異位性皮炎及哮喘。 7) IL-10已涉及腫瘤存活及對細胞毒性化學治療藥物之保護。 8) IL-5已涉及多種過敏性病症，包括但不限於哮喘、鼻息肉、異位性皮炎、嗜伊紅性食道炎、嗜伊紅白血球增多症候群及查格-施特勞斯症候群。 9) IL-6已涉及多種發炎性疾病及癌症，包括但不限於卡斯爾曼氏病、轉移性去勢相關性前列腺癌、腎細胞癌、大細胞肺癌、卵巢癌、類風濕性關節炎、哮喘。 10) IL-8已涉及促進腫瘤惡化、免疫逃逸、上皮-間葉轉化及骨髓衍生之抑制細胞之募集。研究已證實，高血清IL-8含量與許多惡性腫瘤之不良預後相關。臨床前研究已表明，IL-8阻斷可減少腫瘤細胞中之間葉特點，使其對治療具有更低耐受性。 11) C-C模體趨化因子配體2 (CCL2)已涉及在動脈粥樣硬化之疾病過程期間將單核球募集至動脈壁中。 12) 巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)為腫瘤惡化；全身性炎症；動脈粥樣硬化；類風濕性關節炎；及全身性紅斑狼瘡以及其他疾病之介體。
生長因子1) 纖維母細胞生長因子1 (FGF1)可誘導血管新生。FGF1已涉及瘤形成、癌細胞增殖、對抗癌療法之耐受性及新血管生成。 2) 纖維母細胞生長因子2 (FGF2)已涉及瘤形成、癌細胞增殖、對抗癌療法之耐受性及血管新生。 3) 血管上皮生長因子(VEGF-A)已涉及腫瘤之血管形成及血管新生。 4) 腫瘤微環境中之轉化生長因子-β1 (TGF-β1)表現已與不良預後相關聯，且經由T細胞排斥涉及TGF-β1介導之腫瘤抑制。TGF-β1表現亦已涉及血液惡性病及纖維化。 5) 腫瘤微環境中之轉化生長因子-β2 (TGF-β2)表現已與不良預後相關聯，且經由T細胞排斥涉及TGF-β2介導之腫瘤抑制。TGF-β2表現亦已涉及血液惡性病及纖維化。 6) 胎盤生長因子(PGF)促進細胞腫瘤生長，且已涉及年齡相關黃斑變性(AMD)及脈絡膜新生血管(CNV)。
酯酶1) 膽鹼酯酶已涉及認知障礙，諸如癡呆及阿茲海默氏病。
凝血因子1) 羧肽酶B2已涉及且以抑制血栓形成為目標。 2) 凝血因子Xa為深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞之風險的介體。 3) 凝血因子XI為深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞之風險的介體。 4) 凝血因子XII已涉及深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展，以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞的風險。 5) 凝血因子XIII已涉及深層靜脈血栓及急性肺栓塞之發展，以及患有非瓣膜心房震顫之人中風及栓塞的風險。 6) 凝血酶原涉及與心房震顫相關聯之血凝塊形成以及動脈及靜脈血栓形成以及血栓栓塞。 7) 凝血因子VII涉及與心房震顫相關聯之血凝塊形成以及動脈及靜脈血栓形成以及血栓栓塞。 8) 凝血因子IX涉及與心房震顫相關聯之血凝塊形成以及動脈及靜脈血栓形成以及血栓栓塞。
胞外基質蛋白1) 嗜中性球彈性蛋白酶-嗜中性球彈性蛋白酶已涉及多種病症，包括肺病、慢性阻塞性肺病、肺炎、呼吸窘迫及急性肺損傷(ALI)及囊腫纖維化以及慢性腎病。 2) 纖維接合素-1 - 干擾FN聚合可在缺血/再灌注(I/R)損傷之後緩解肌纖維母細胞及纖維化，且改善心臟功能。 3) 凝血酶致敏蛋白-1 - TSP-1已涉及多種疾病，包括涉及促進某些癌症，諸如乳癌、前列腺癌、黑色素瘤、SCLC、骨肉瘤、皮膚鱗狀細胞癌、口腔鱗狀細胞癌、乳頭狀甲狀腺癌瘤、甲狀腺癌、髓母細胞瘤及纖維化病症，諸如糖尿病、肝纖維化，且涉及多發性骨髓瘤。 4) 尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子(UPA) - UPA已涉及血管疾病及癌症惡化。纖維蛋白溶酶原活化系統之尿激酶及若干種其他組分之表現量升高經發現與腫瘤惡性病相關。 5) 組織型纖維蛋白溶酶原活化因子(TPA) - PLA已展示在包括口腔惡性病之各種癌症中活化。 6) 纖維蛋白溶酶原(PLG) - PLG已涉及腫瘤侵襲及炎症。 7) 纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物-1 (PAI-1) - PAI-1已涉及包括但不限於口腔癌及乳癌之腫瘤中的血管新生、癌轉移及不良預後。
肽酶1) 激肽釋放素-1 - 激肽釋放素已涉及遺傳性血管水腫(HAE)中之不良反應。 2) 血漿激肽釋放素 - 血漿激肽釋放素已涉及視網膜功能異常、糖尿病性黃斑水腫及遺傳性血管水腫(HAE)之發展。 3) 基質金屬肽酶-1 - MMP-1已涉及心血管疾病、纖維化之發展及某些癌症(諸如膀胱癌)之生長。 4) IIA組磷脂酶A2 (PA2GA) - PA2GA已涉及多種疾病，包括心血管疾病、動脈粥樣硬化、免疫病症及癌症。
脂肪酶1) 脂蛋白脂肪酶 - 脂蛋白脂肪酶已涉及心血管疾病及肥胖症之發展。 2) IB組磷脂酶A2 (PA21B) - PA21B已涉及多種疾病，包括心血管疾病、動脈粥樣硬化、免疫病症及癌症。
轉化酶1) 9型前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶/克新(PCSK-9) - PCSK-9已涉及高血膽固醇以及心血管疾病之發展。
某些所靶向之胞外蛋白質包括但不限於：SAA (血清澱粉樣蛋白A)、澱粉樣蛋白輕鏈、抗克雷伯氏菌(Klebsiella)二肽酶蛋白之抗體；抗陰離子磷脂及β-2-糖蛋白-I之Ig抗體；IL-13；MIF；甲狀腺素運載蛋白(摺疊異常)、抗甲狀腺過氧化酶、甲狀腺球蛋白及TSH受體之IgG自體抗體；TNF-α；蛋白質精胺酸脫亞胺酶(PAD，PAD4)；抗瓜胺酸蛋白抗體之抗體(ACPA)；抗DNA抗體；IL-17；離胺醯氧化酶2 (LOXL2)；IL-18；Blys；B細胞活化因子(BAFF)；CD40 (可溶)；CXCL12；可溶性PSMA；基質金屬蛋白酶IX (MMP-9)；激素敏感性脂肪酶；脂蛋白相關磷脂酶A2；因子Xa；DPP4；凝血酶；PCSK9；ApoB-100；補體組分C3b；PKK (前激肽釋放素)；因子XI；PF4；抗vWF抗體；抗心脂抗體及狼瘡抗凝血劑；FGF23 (纖維母細胞生長因子23)；1型纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物(PAI-1)；胞外髓過氧化酶(MPO)；肌肉抑制素(Myostatin)；β2-m；suPAR (可溶性尿激酶纖維蛋白溶酶原活化因子受體)；抗神經節苷脂IgG；澱粉樣蛋白β；Tau；CJD締合之朊病毒；抗神經節苷脂IgG；HTT；抗神經節苷脂IgG；突觸核蛋白(synuclein)；彈性蛋白酶；PABA (炭疽芽孢桿菌之保護性抗原)；水腫因子；肉毒桿菌毒素(Botulinum toxin)；艱難梭菌毒素B (C. difficile toxin B)；溶血素(hemolysin)；破傷風毒素(tetanus toxin)；IL-2；生長激素及ACTH。
V. 組合治療在某些態樣中，提供一種治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與有效量的本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥，以用於治療由目標胞外蛋白質(例如免疫球蛋白)介導之病症。本文所揭示之組合及/或交替投與可用於胞外蛋白質介導之病症之治療中的有益、附加或協同作用。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgA腎病變之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為ACE抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為AT1R拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為血管收縮素受體阻斷劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為ω-3脂肪酸。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為士他汀(statin)。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為利尿劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自AVB-S6-500、伊普可泮(iptacopan)、阿塞西普(atacicept)、利妥昔單抗(rituximab)、BION-1301、黴酚酸、黴酚酸嗎啉乙酯、安樂普利諾(allopurinol)、布里莫德(blisibimod)、硼替佐米(bortezomib)、帕利骨化醇(paricalcitol)、他克莫司(tacrolimus)、阿力克倫(aliskiren)、依那普利(enalapril)、西姆地侖(cemdisiran)、依貝沙坦(irbesartan)、雷帕黴素、促鈣三醇、拉瓦利單抗(ravulizumab)。
在某些實施例中，提供一種用於治療乳糜瀉之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為銅補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為鋅補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為鐵補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為葉酸補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為維生素B12補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為維生素D補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為維生素K補充劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自硫唑嘌呤(azathioprine)、布地奈德(budesonide)及達普松(dapsone)。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgA血管炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為消炎劑。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgA天疱瘡之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類視黃素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自達普松、秋水仙鹼、黴酚酸嗎啉乙酯及阿達木單抗(adalimumab)。
在某些實施例中，提供一種用於治療疱疹樣皮炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為四環素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自達普松、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、磺胺吡啶(sulphapyridine)、磺胺甲氧基嗒嗪、環孢素A、硫唑嘌呤、秋水仙鹼、肝素、菸鹼醯胺、黴酚酸酯及利妥昔單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療發炎性腸病之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為胺基水楊酸鹽。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自美塞拉明(mesalamine)、巴柳氮(balsalazide)、奧沙拉嗪(olsalazine)、硫唑嘌呤、巰基嘌呤、甲胺喋呤(methotrexate)、英利昔單抗(infliximab)、阿達木單抗、戈利木單抗(golimumab)、賽妥珠單抗(certolizumab)、維多珠單抗(vedolizumab)及烏司奴單抗(ustekinumab)。
在某些實施例中，提供一種用於治療休格倫氏症候群之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自環孢靈(cyclosporine)、立他司特(lifitegrast)、匹魯卡品(pilocarpine)、西維美林(cevimeline)、羥基氯喹及甲胺喋呤。
在某些實施例中，提供一種用於治療僵直性脊椎炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為TNF阻斷劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為IL-17抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自萘普生(naproxen)、吲哚美辛(indomethacin)、阿達木單抗、聚乙二醇化賽妥珠單抗、依那西普(etanercept)、戈利木單抗、英利昔單抗、塞庫金單抗(secukinumab)、伊科奇單抗(ixekizumab)及托法替尼(tofacitinib)。
在某些實施例中，提供一種用於治療酒精性肝硬化之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為糖皮類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗氧化劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自配妥西菲林(pentoxifylline)及英利昔單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療後天免疫缺乏症候群之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非核苷反轉錄酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為核苷或核苷酸反轉錄酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為蛋白酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為整合酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為進入或融合抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自依法韋侖(efavirenz)、利匹韋林(rilpivirine)、多拉韋林(doravirine)、阿巴卡韋(abacavir)、替諾福韋(tenofovir)、恩曲他濱(emtricitabine)、拉米夫定(lamivudine)、齊多夫定(zidovudine)、阿紮那韋(atazanavir)、達盧那韋(darunavir)、洛匹那韋(lopinavir)、利托那韋(ritonavir)、比克替拉韋(bictegravir)、拉替拉韋(raltegravir)、多替拉韋(dolutegravir)、恩夫韋肽(enfuvirtide)及馬拉韋羅(maraviroc)。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgA多發性骨髓瘤之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為HDAC抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫調節藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗體藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為BCL2抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為蛋白酶體抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為核輸出之選擇性抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自普賴蘇(prednisone)、環磷醯胺、美法侖(melphalan)、長春新鹼(vincristine)、小紅莓(doxorubicin)、地塞米松(dexamethasone)、沙立度胺(thalidomide)、硼替佐米、來那度胺(lenalidomide)、卡非佐米(carfilzomib)、泊利度胺(pomalidomide)、達雷木單抗(daratumumab)、帕諾司他(Panobinostat)、埃羅妥珠單抗(elotuzumab)、依薩佐米(ixazomib)、艾薩妥昔單抗(isatuximab)、維奈托克(venetoclax)、馬瑞佐米(marizomib)、奧普洛佐米(oprozomib)及塞利尼索(Selinexor)。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgA重鏈疾病之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗生素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為化學治療藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自小紅莓、環磷醯胺、長春新鹼、普賴蘇、替尼泊苷(teniposide)、博萊黴素(bleomycin)、長春鹼(vinblastine)、丙卡巴肼(procarbazine)及普賴蘇穠(prednisolone)。
在某些實施例中，提供一種用於治療線性IgA大皰性皮膚病之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為四環素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫球蛋白。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自紅黴素(erythromycin)、磺胺吡啶、秋水仙鹼及黴酚酸嗎啉乙酯。
在某些實施例中，提供一種用於治療意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自阿侖膦酸鹽(alendronate)、利塞膦酸鹽(risedronate)、伊班膦酸鹽(ibandronate)及唑來膦酸(zoledronic acid)。
在某些實施例中，提供一種用於治療全身性纖維發炎性疾病之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為糖皮質激素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為鈣調神經磷酸酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自普賴蘇穠、甲胺喋呤、硫唑嘌呤、黴酚酸酯、黴酚酸嗎啉乙酯、6-巰基嘌呤、環磷醯胺及利妥昔單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療立得氏甲狀腺炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為糖皮質激素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自他莫昔芬(tamoxifen)、普賴蘇及黴酚酸嗎啉乙酯。
在某些實施例中，提供一種用於治療發炎性假瘤之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為環加氧酶2抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為消炎劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為沙立度胺。
在某些實施例中，提供一種用於治療縱隔纖維化之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為利妥昔單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療腹膜後纖維化之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自黴酚酸嗎啉乙酯、甲胺喋呤、硫唑嘌呤、環磷醯胺、他莫昔芬、普賴蘇及環孢素A。
在某些實施例中，提供一種用於治療主動脈炎或主動脈周炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為糖皮質激素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自普賴蘇、甲胺喋呤、托珠單抗(tocilizumab)、環磷醯胺、硫唑嘌呤及環孢素A。
在某些實施例中，提供一種用於治療近端膽道狹窄之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
在某些實施例中，提供一種用於治療胃腸炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgA單株γ球蛋白症之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgG單株γ球蛋白症之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
在某些實施例中，提供一種用於治療IgE單株γ球蛋白症之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
在某些實施例中，提供一種用於治療特發性補體結合不足性腎小管與組織間隙腎炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自普賴蘇、利妥昔單抗及黴酚酸。
在某些實施例中，提供一種用於治療多病灶性纖維硬化之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自環孢靈及普賴蘇穠。
在某些實施例中，提供一種用於治療硬腦膜炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自普賴蘇、硫唑嘌呤、環磷醯胺、甲胺喋呤及利妥昔單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療胰臟腫大之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。
在某些實施例中，提供一種用於治療腫瘤樣病變之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自利妥昔單抗及環磷醯胺。
在某些實施例中，提供一種用於治療類風濕性關節炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為改善疾病之抗風濕性藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為Janus相關激酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類鴉片。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自布洛芬(ibuprofen)、萘普生鈉、普賴蘇、甲胺喋呤、來氟米特(leflunomide)、羥基氯喹、柳氮磺胺吡啶、阿巴西普(abatacept)、阿達木單抗、阿那白滯素(anakinra)、巴瑞替尼(baricitinib)、賽妥珠單抗、依那西普、戈利木單抗、英利昔單抗、利妥昔單抗、沙瑞盧單抗(sarilumab)、托珠單抗、托法替尼、米諾環素(minocycline)、塞內昔布(celecoxib)、萘丁美酮(nabumetone)、吡羅昔康(piroxicam)、雙氯芬酸(diclofenac)、二氟尼柳(diflunisal)、吲哚美辛、酮基布洛芬、依託度酸(etodolac)、非諾洛芬(fenoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、酮咯酸(ketorolac)、甲氯芬那酸(meclofenamate)、甲芬那酸(mefenamic)、美洛昔康(meloxicam)、奧沙普嗪(oxaprozin)、舒林酸(sulindac)、雙水楊酸酯(salsalate)、托美丁(tolmetin)、可待因(codeine)、芬太尼(fentanyl)、氫可酮(hydrocodone)、氫嗎啡酮(hydromorphone)、嗎啡(morphine)、嘜啶(meperidine)、羥考酮(oxycodone)、曲馬多(tramadol)、倍他米松(betamethasone)、地塞米松、可的松(cortisone)、氫化可的松(hydrocortisone)、甲基普賴蘇穠及普賴蘇穠。
在某些實施例中，提供一種用於治療多發性硬化症之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為干擾素β藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為肌肉鬆弛劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自普賴蘇、甲基普賴蘇穠、奧克珠單抗(ocrelizumab)、乙酸格拉替雷(glatiramer acetate)、干擾素β-1a、干擾素β-1b、芬戈莫德(fingolimod)、反丁烯二酸二甲酯、反丁烯二酸地羅西美(diroximel fumarate)、特立氟胺(teriflunomide)、西尼莫德(siponimod)、克拉屈濱(cladribine)、奧克珠單抗、那他珠單抗(natalizumab)、阿侖單抗(alemtuzumab)、氯苯胺丁酸(baclofen)、替紮尼定(tizanidine)、環苯紮平(cyclobenzaprine)、三環癸胺(amantadine)、莫達非尼(modafinil)、哌醋甲酯(methylphenidate)及達方吡啶(dalfampridine)。
在某些實施例中，提供一種用於治療重症肌無力之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為膽鹼酯酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為單株抗體。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自吡啶斯的明(pyridostigmine)、新斯的明(neostigmine)、硫唑嘌呤、黴酚酸嗎啉乙酯、環孢靈、甲胺喋呤、他克莫司、利妥昔單抗及艾庫組單抗(eculizumab)。
在某些實施例中，提供一種用於治療牛皮癬性關節炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為改善疾病之抗風濕性藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自阿普司特(apremilast)、布洛芬、萘普生鈉、甲胺喋呤、來氟米特、柳氮磺胺吡啶、硫唑嘌呤、環孢靈、阿巴西普、阿達木單抗、賽妥珠單抗、依那西普、戈利木單抗、英利昔單抗、伊科奇單抗、塞庫金單抗、托法替尼及烏司奴單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療全身性紅斑狼瘡(SLE)之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗瘧疾藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自伏環孢素(voclosporin)、阿巴西普、阿尼富路單抗(anifrolumab)、萘普生鈉、布洛芬、羥基氯喹、甲基普賴蘇穠、硫唑嘌呤、黴酚酸酯、甲胺喋呤、環孢靈、來氟米特、貝利單抗(belimumab)及利妥昔單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療硬化性膽管炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為膽酸扣押劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗生素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類鴉片拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自熊去氧膽酸(ursodeoxycholic acid)、利福平(rifampin)、那曲酮(naltrexone)、消膽胺(cholestyramine)、考來替潑(colestipol)及考來維侖(colesevelam)。
在某些實施例中，提供一種用於治療異位性哮喘之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為支氣管擴張劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為白三烯調節劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為β促效劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自奧馬珠單抗(omalizumab)、氟替卡松(fluticasone)、布地奈德、莫米松(mometasone)、環索奈德(ciclesonide)、孟魯司特(montelukast)、紮魯司特(zafirlukast)、齊留通(zileuton)、沙美特羅(salmeterol)及福莫特羅(formoterol)。
在某些實施例中，提供一種用於治療皮膚接觸性過敏症之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。
在某些實施例中，提供一種用於治療過敏性結膜炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為色甘酸(cromolyn)。
在某些實施例中，提供一種用於治療過敏性蕁麻疹之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為組織胺阻斷劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗抑鬱劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為單株抗體。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自他克莫司、環孢靈、奧馬珠單抗、紮魯司特、孟魯司特、多慮平(doxepin)、普賴蘇、西咪替丁(cimetidine)、法莫替丁(famotidine)、洛拉他定(loratadine)、非索非那定(fexofenadine)、西替利嗪(cetirizine)及地氯雷他定(desloratadine)。
在某些實施例中，提供一種用於治療過敏性休克之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為β-促效劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自腎上腺素、可的松及沙丁胺醇(albuterol)。
在某些實施例中，提供一種用於治療鼻息肉之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自度匹魯單抗(dupilumab)、普賴蘇、氟替卡松、布地奈德、莫米松、曲安西龍(triamcinolone)、倍氯米松(beclomethasone)及環索奈德。
在某些實施例中，提供一種用於治療角膜結膜炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為肥大細胞穩定劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗病毒劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自西多福韋(cidofovir)、更昔洛韋(ganciclovir)、色甘酸鈉、奈多羅米(nedocromil)、鈉、洛度沙胺(lodoxamide)、環孢靈A、他克莫司、立他司特、多西環素(doxycycline)及維生素A。
在某些實施例中，提供一種用於治療肥大細胞增多症之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為白三烯調節劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為肥大細胞穩定劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為化學治療藥物。
在某些實施例中，提供一種用於治療嗜伊紅性胃腸道疾病之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為質子泵抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫調節劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為白三烯D4受體拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自孟魯司特、色甘酸鈉、奧美拉唑(omeprazole)、蘭索拉唑(lansoprazole)、右蘭索拉唑(dexlansoprazole)、埃索美拉唑(esomeprazole)、泮托拉唑(pantoprazole)、雷貝拉唑(rabeprazole)、艾普拉唑(ilaprazole)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、布地奈德、普賴蘇、硫唑嘌呤、6-巰基嘌呤、替馬蘭特(timapiprant)、美泊利單抗(mepolizumab)、德克單抗(dectrekumab)及申達奇單抗(cendakimab)。
在某些實施例中，提供一種用於治療大皰性類天疱瘡之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自硫唑嘌呤、黴酚酸嗎啉乙酯、利妥昔單抗、甲胺喋呤及四環素。
在某些實施例中，提供一種用於治療化療誘導之過敏反應之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為組織胺1拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為組織胺2拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗驚厥劑。
在某些實施例中，提供一種用於治療季節性過敏性鼻炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為解充血劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，其他治療劑中之至少一者為白三烯調節劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自非索非那定、苯海拉明(diphenhydramine)、地氯雷他定、洛拉他定、左旋西替利嗪(levocetirizine)、西替利嗪、氧美佐林(oxymetazoline)、假麻黃素(pseudoephedrine)、苯腎上腺素、色甘酸鈉、孟魯司特及異丙托銨(ipratropium)。
在某些實施例中，提供一種用於治療間質性膀胱炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為非類固醇消炎劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為三環抗抑鬱劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自戊聚糖聚硫酸鈉、洛拉他定、阿米曲替林(amitriptyline)、丙咪嗪(imipramine)、布洛芬、萘普生鈉、二甲亞碸及肝素。
在某些實施例中，提供一種用於治療嗜伊紅性食道炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為質子泵抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫調節劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為白三烯D4受體拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自孟魯司特、色甘酸鈉、奧美拉唑、蘭索拉唑、右蘭索拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、雷貝拉唑、艾普拉唑、丙酸氟替卡松、布地奈德、普賴蘇、硫唑嘌呤、6-巰基嘌呤、替馬蘭特、美泊利單抗、德克單抗及申達奇單抗。
在某些實施例中，提供一種用於治療血管性水腫之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗組織胺劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為免疫抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。
在某些實施例中，提供一種用於治療急性間質性腎炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自環磷醯胺、環孢靈及黴酚酸嗎啉乙酯。
在某些實施例中，提供一種用於治療異位性濕疹之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為鈣調神經磷酸酶抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為生物藥物。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自度匹魯單抗、普賴蘇、他克莫司及吡美莫司(pimecrolimus)。
在某些實施例中，提供一種用於治療嗜伊紅性支氣管炎之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為白三烯受體拮抗劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自布地奈德、氟替卡松及孟魯司特。
在某些實施例中，提供一種用於治療慢性阻塞性肺病之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之胞外蛋白質降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為支氣管擴張劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為磷酸二酯酶-4抑制劑。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗生素。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者係選自茶鹼(theophylline)、阿奇黴素(azithromycin)、羅氟司特(roflumilast)、氟替卡松、布地奈德、沙丁胺醇、異丙托銨、左旋沙丁胺醇(levalbuterol)、阿地銨(aclidinium)、阿福特羅(arformoterol)、福莫特羅(formoterol)、茚達特羅(indacaterol)、噻托銨(tiotropium)、沙美特羅及蕪地溴銨(umeclidinium)。
在某些實施例中，提供一種治療高IgE症候群(賈伯斯氏症候群)之治療方案，其包含與至少一種額外治療劑組合或交替地投與本發明之免疫球蛋白降解劑或其醫藥學上可接受之組合物、鹽、同位素類似物或前藥。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為皮質類固醇。在某些實施例中，額外治療劑中之至少一者為抗生素。
VI. 製造製程本發明之胞外蛋白質降解劑可根據以下工作實例中所描述或如專利或科學文獻中另外已知且適當時由普通工作人員之知識或公共常識支持的途徑製造。
本文所描述之胞外蛋白質降解劑中的一些碳以指定立體化學繪製。其他碳在無立體化學指定之情況下繪製。在無指定立體化學之情況下繪製時，該碳可呈達成所需目的之任何所需立體化學組態。熟習此項技術者將認識到，純鏡像異構物、鏡像異構性增濃化合物、外消旋物及非鏡像異構物可藉由此項技術中已知之方法如由本文所提供之資訊指導來製備。獲得光學活性材料之方法之實例至少包括以下： i) 對掌性液相層析 - 非鏡像異構物藉助於其與固定相之不同相互作用(包括經由對掌性HPLC)以液體移動相分離的技術。固定相可由對掌性物質製得或行動相可含有另一對掌性物質以引起不同相互作用； ii) 非鏡像異構物之非對掌性層析 - 通常，非鏡像異構物可使用標準非對掌性管柱條件分離； iii) 對掌性氣相層析 - 外消旋物揮發且鏡像異構物藉助於其在氣體移動相中與含有固定非外消旋對掌性吸附劑相之管柱之不同相互作用分離的技術； iv) 同時結晶 - 個別非鏡像異構物自溶液中單獨地結晶之技術； v) 酶促解析 - 藉助於與酶之反應速率不同而分離非鏡像異構物之部分或完全分離的技術； vi) 化學不對稱合成 - 在於產物中產生不對稱性(亦即對掌性)之條件下自非對掌性前驅體合成所需非鏡像異構物的合成技術，其可藉由對掌性催化劑或對掌性助劑達成； vii) 非鏡像異構物分離 - 使外消旋化合物與將個別鏡像異構物轉化為非鏡像異構物之鏡像異構性純的試劑(對掌性助劑)反應的技術。隨後所得非鏡像異構物藉由層析或結晶藉助於其現在更明顯之結構差異分離且稍後移除對掌性助劑，獲得所需鏡像異構物；及 viii) 用對掌性溶劑萃取 - 藉助於使非鏡像異構物優先溶解於特定對掌性溶劑中來分離非鏡像異構物的技術。
應用於合成之工作實例之通用程序：除非另外陳述，否則所有試劑購自商業供應商(Sigma-Aldrich、Alfa、Acros等)，且不經進一步純化即使用。THF連續地回流且在氮氣下自鈉及二苯甲酮新鮮蒸餾，二氯甲烷連續地回流且在氮氣下自CaH 2新鮮蒸餾。
反應經由TLC在矽膠60 HSGF254滲透板(0.15-0.2 mm SiO 2)上監測且使用UV光(254 nm或365 nm)觀測，及/或用磷鉬酸乙醇溶液(10 g於100 mL乙醇中)染色且隨後加熱或經由LCMS監測。
LCMS在SHIMADZU LCMS-2010EV (Chromolith SpeedROD，RP-18e，50×4.6 mm，移動相：溶劑A：CH 3CN/H 2O/HCOOH=10/90/0.05，溶劑B：CH 3CN/H 2O/HCOOH=90/10/0.05，10% B下0.8 min，2.7 min梯度(10-95% B)，隨後95% B下0.8 min，流動速率：3 mL/min，溫度：40℃)上進行。
製備型HPLC在 方法 A：SHIMADZU LC-8A (管柱：YMC Pack ODS-A (150*30 mm，10 μm))或 方法 B：LC-6AD (管柱：Shim=Pack PREP-ODS-H (250*20 mm，10 μm))上在藉由LC solution Chemstation軟體控制之UV偵測下進行。H 2O (0.1% HCOOH)及MeOH (MeCN)在經指示流動速率下作為移動相。
分析型HPLC在SHIMADZU LC-2010A (Chromolith SpeedROD，RP-18e，50×4.6 mm，移動相：溶劑A：CH 3CN/H 2O/HCOOH=10/90/0.05，溶劑B：CH 3CN/H 2O/HCOOH=90/10/0.05，10% B下0.8 min，2.7 min梯度(10-95% B)，隨後95% B下0.8 min，流動速率：3 mL/min，溫度：40℃)上進行。
對掌性HPLC在SHIMADZU LC-2010A (對掌性管柱，移動相：溶劑A：己烷(或含有0.1%二乙胺)，溶劑B：乙醇或異丙醇；流動速率：0.8 mL/min，溫度：30℃)上進行。
1H光譜在Bruker Avance II 400MHz上記錄，化學位移(δ)以相對於四甲基矽烷(δ = 0.000 ppm)之ppm報導，且光譜經校準成氯仿(δ = 7.26)、二甲亞碸(δ = 2.50)、甲醇(δ = 3.30)之殘餘溶劑信號。 1H NMR光譜之資料報導如下：化學位移(多重性，氫之數目)。縮寫描述如下：s (單重峰)、d (二重峰)、t (三重峰)、q (四重峰)、quant (五重峰)、m (多重峰)、br (寬峰)。
試劑OPT-炔烴具有以下結構：
Figure 02_image1280
試劑FC-III肽-炔烴具有以下結構：
Figure 02_image1282
通用合成方法本發明之胞外蛋白質降解化合物可使用熟習此項技術者已知之各種技術合成。舉例而言，以具有胺之胞外蛋白質靶向配體開始，可在肽偶合條件下安裝分子之連接子及ASGPR結合部分。
Figure 02_image1284
此技術可用於合成本發明之各種胞外蛋白質降解化合物，包括具有不同立構中心之彼等化合物。
Figure 02_image1286
靶向配體之合成 中間體 1 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-5,21- 二側氧基 -8,11,14,17- 四氧雜 -4,20- 二氮雜二十六碳 -25- 炔 -1- 酸之製備
Figure 02_image1288
Figure 02_image1290
步驟 1 ：固相肽合成：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1) 樹脂製備：將含AM樹脂(66.67 g，20.00 mmol，0.30 mmol/g)之DMF (600 mL)在15℃下在N 2鼓泡下混合30分鐘。用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (600 mL)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2) 偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Thr( tBu)-OH (23.82 g，60.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (21.60 g，57 mmol，2.85 eq)於DMF (300 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (22.11 mL，120 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗(ninhydrin test)監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。 3) 去保護：將含20%哌啶之DMF (600 mL)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4) 針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(下表中之2至15)。
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
2 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Gly-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Asp(O tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-Peg 4-OH (1.5 eq) HATU (1.425 eq)及DIEA (3.00 eq)
15 己-5-炔酸(1.5 eq) HATU (1.425 eq)及DIEA (3.00 eq)
步驟 2 ： 肽裂解及純化 ：1) 在室溫下將裂解緩衝液(92.5% TFA/2.5% TIS/2.5% H 2O/2.5% 3-巰基丙酸)添加至含有側鏈受保護之肽的燒瓶中，且攪拌2小時。 2) 用冷的異丙醚沈澱肽且離心(以3000 rpm離心3分鐘)。 3) 用異丙醚洗滌另外兩次。 4) 將粗肽真空乾燥2小時。 5) 將粗肽與MeCN (10 L)及H 2O (10 L)混合，將碘(0.1 M於AcOH中)逐滴添加至劇烈攪拌的肽溶液中，直至保持黃色。2分鐘後，逐滴添加硫代硫酸鈉(0.1 M於水中)，直至黃色消失。將混合物凍乾，得到粗物質粉末。 6) 粗肽藉由製備型HPLC (A：含0.075% TFA之H 2O，B：ACN)純化，得到呈白色固體狀之目標產物49 (5.9 g，95.1%純度，14.99%產率)。化學式：C 86H 123N 19O 24S 2；LCMS實驗值：[M+H] += 1871.00; [M+2H] 2+= 936.10; [M+3H] 3+= 624.38;
步驟 4 ： 純化條件。純化條件描述為下表。
分離條件
溶解條件 溶解於ACN/H 2O中
儀器 HANBON
移動相 A：H 2O (TFA 0.075%)
B：CH 3CN
梯度 20-50%-60 min。滯留時間：42 min
管柱 Luna 100*25 mm，C18，10 μm，100Å + Gemini® 150*30 mm，C18，5 μm，110Å
流動速率 20 mL/min
波長 220/254 nm
烘箱溫度 室溫
所得化合物表徵如下：
中間體編號 材料 結構及分析資料
中間體1 AM 樹脂 Fmoc 胺基酸
Figure 02_image1292
產率：5.9 g，14.99%，95.1%純度，白色固體。LCMS實驗值：[M+H] += 1871.00; [M+2H] 2+= 936.10; [M+3H] 3+= 624.38;
以下化合物係使用中間體1之相同程序合成
中間體編號 材料 結構及分析資料
中間體2 AM 樹脂 Fmoc 胺基酸
Figure 02_image1294
產率：367.2 mg，19.03%，95.5%純度，白色固體。LCMS實驗值：[M+H] += 1842.19; [M+2H] 2+= 921.55; [M+3H] 3+= 614.68;
中間體3 AM 樹脂 Fmoc 胺基酸
Figure 02_image1296
建構組元 ： 產率：750 mg，46.67%，89.0%純度，白色固體。LCMS實驗值：[M+H] += 715.24; 產率：259.3 mg，19.13%，95.2%純度，白色固體。LCMS實驗值：[M+H] += 1843.90; [M+2H] 2+= 921.98; [M+3H] 3+= 614.89;
中間體 4 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R, 42S,44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基 -46-(17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十二碳 -21- 炔醯胺基 ) 四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1298
Figure 02_image1300
Figure 02_image1302
Figure 02_image1304
步驟 1 ：用於製備 4-4 之 通用程序 固相肽合成：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1) 樹脂製備：向含有含CTC樹脂(61.70 g，50.00 mmol，0.81 mmol/g)及Fmoc-D-Pro-OH (16.87 g，50.00 mmol，1.00 eq)之DCM (500 mL)的容器中逐滴添加DIEA (34.60 mL，200.00 mmol，4.00 eq)，且在15℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (50.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (1 L) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (1 L)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (1 L) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2) 偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Thr( tBu)-OH (59.63 g，150.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (16.11 g，142.50 mmol，2.85 eq)於DMF (500 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (51.60 mL，300 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (1 L) *5洗滌樹脂。 3) 去保護：將含20%哌啶之DMF (1 L)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (1 L) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4) 針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-D-Pro-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Trp(Boc)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Gly-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-Asp(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
15 BOC-(2S,4S)-4-胺基-1-FMOC-吡咯啶-2-甲酸(1.00 eq) HATU (0.95 eq)及DIEA (2.00 eq)
肽裂解及純化 ：1) 將裂解緩衝液(20% HFIP/DCM，1.2 L)添加至含有側鏈受保護之粗肽的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌1小時且在過濾之後收集溶液。再重複一次裂解步驟。 2) 過濾後合併溶液。 3) 藉由旋轉蒸發濃縮溶液。 4) 將粗肽凍乾乾燥。 5) 獲得呈白色固體狀之 4-3(47.00 g，粗物質)。 6) 將 4-3(47.00 g，16.00 mmol，1.00 eq)、HOBT (6.49 g，48.00 mmol，3.00 eq)、DMAP (5.80 g，48.00 mmol，3.00 eq)及EDCI (9.17 g，48.00 mmol，3.00 eq)於DMF (16 L)中之混合物在25℃下攪拌72小時。 7) 過濾後合併溶液。 8) 將混合物添加至0.50 M HCl (冷，2 L)中且沈澱出白色固體。過濾後，將固體凍乾乾燥，得到呈白色固體狀之 4-4(50.00 g，粗物質)。化學式：C 159H 192N 20O 26S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1338.62;
步驟 2 ：用於製備中間體 5 之 通用程序將化合物 4-4(50.0 g，16.83 mmol，1.00 eq)於TFA/TIS/H 2O (95%/2.5%/2.5%，v/v/v，600 mL)中之混合物在20℃下攪拌1小時。用冷的異丙醚(3 L)沈澱混合物。過濾後，將固體真空乾燥2小時，得到3-5 (32.00 g)。將 3-5(32.00 g)溶於ACN/H 2O (1/1，v/v，17 L)中。在15℃下將I 2/HOAc (0.1 M)逐滴添加至混合物中直至保持淡黃色，接著用0.1 M Na 2S 2O 3逐滴淬滅混合物直至淡黃色消失。過濾後，濾液藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之中間體5 (5.00 g，2.15 mmol，10.00%產率，85%純度)。化學式：C 79H 108N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 1722.00, [M+2H] 2+= 861.61。
相關Fmoc胺基酸 中間體5
Figure 02_image1306
產率：5 g，4.93%，85.0%純度，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] 1+= 1722.00, [M+2H] 2+= 861.61。
步驟 3 ： 用於製備 4-2 之 通用程序將 4-1(8.00 g，22.25 mmol，1.00 eq)、2,3,5,6-四氟苯酚(11.08 g，66.75 mmol，4.00 eq)及EDCI (9.52 g，33.23 mmol，2.00 eq)於DMF (224 mL)中之混合物在25℃下攪拌16小時。LCMS顯示反應完成。混合物藉由急驟(Flash) (TFA條件)純化且凍乾，得到呈黃色油狀物之 4-2(9.00 g，17.73 mmol，79.69%產率)。化學式：C 23H 29F 4NO 7，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 508.15。
步驟 4 ： 用於製備中間體 4 之 通用程序將化合物 4-6(705.61 mg，0.4 mmol，1.00 eq)、化合物 4-2(416.12 mg，0.80 mmol，2.00 eq)及DIEA (0.725 ml，4 mmol，10.00 eq)於DMF (10 mL)中之混合物在0℃下攪拌8小時。LCMS顯示反應完成。將混合物調節至pH=5，且藉由製備型HPLC (TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 4(477.40 mg，0.23 mmol，57.50%產率，97.9%純度)。化學式：C 96H 135N 21O 26S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1032.14, [M+3H] 3+= 688.41。
步驟 5 ： 純化條件。純化條件描述為下表。
分離條件
溶解條件 溶解於ACN/H 2O中
儀器 GX-281
移動相 A：H 2O (TFA 0.075%)
B：CH 3CN
梯度 31-51%-51 min。滯留時間：22 min
管柱 Luna 100*25 mm，C18，10 μm，100Å + Gemini® 150*30 mm，C18，5 μm，110Å
流動速率 20 mL/min
波長 220/254 nm
烘箱溫度 室溫
化合物 中間體 6 、中間體 7 、中間體 8 及中間體 9係根據與 中間體 4相同的程序製備。
起始酸 中間體ID 結構及分析資料
相關Fmoc胺基酸 4
Figure 02_image1308
產率：477.4 mg，2.73%，97.9%純度，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：1032.14 [M+2H] 2+, 688.41 [M+3H] 3+
相關Fmoc胺基酸 6
Figure 02_image1310
產率：636.7 mg，2.37%，97.0%純度，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：988 [M+2H] 2+, 659 [M+3H] 3+。
相關Fmoc胺基酸 7
Figure 02_image1312
產率：363.1 mg，2.20%，95.1%純度，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：1931 [M+H] +966 [M+2H] 2+, 644 [M+3H] 3+。
相關Fmoc胺基酸 8
Figure 02_image1314
產率：312.8 mg，2.19%，96.1%純度，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：1815 [M] +, 908 [M+2H] 2+, 605 [M+3H] 3+。
相關Fmoc胺基酸 9
Figure 02_image1316
產率：296 mg，1.74%，95.1%純度，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：1010 [M+2H] 2+, 673 [M+3H] 3+。
中間體 10 ： 2-(2-(2-(2-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙酸之製備
Figure 02_image1318
步驟 1 ：在0℃下向2-(2-(2-胺基乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(5.0 g，33 mmol)於EtOH (60 mL)中之溶液中逐份添加TEA (61.5 mL，442 mmol)及二碳酸二三級丁酯(8.6 mL，40 mmol)。劇烈攪拌混合物且使其緩慢升溫至室溫後保持過夜(16小時)。將溶劑真空蒸發，且殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，溶劑梯度：DCM至1:9之MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之(2-(2-(2-羥乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯(4.5 g，55%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：250 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向呈無色油狀物之(2-(2-(2-羥乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯(72 g，288 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中逐份添加2-碘乙酸(160 g，866 mmol)及NaOH (69 g，1.7 mol)。將混合物在室溫下攪拌2天。真空移除溶劑，接著添加NaOH於水中之溶液。使用DCM來洗滌混合物。接著在劇烈攪拌下用3 N HCl溶液酸化水相，直至pH 4。用DCM萃取且濃縮，得到呈淡黃色油狀物之2,2-二甲基-4-側氧基-3,8,11,14-四氧雜-5-氮雜十六烷-16-酸(80 g，90%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：308 [M+H] +。
步驟 3 ：在0℃下向呈淡黃色油狀物之2,2-二甲基-4-側氧基-3,8,11,14-四氧雜-5-氮雜十六烷-16-酸(42 g，136 mmol)於DCM (250 mL)中之溶液中添加TFA (51 mL，683 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質2-(2-(2-(2-胺基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(28 g，99%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：208 [M+H] +。
步驟 4 ：在0℃下向2-(2-(2-(2-胺基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(28 g，135 mmol)於H 2O (300 mL)中之溶液中逐份添加NaHCO 3(34 g，405 mmol)及1-氯-2,4-二硝基苯(41 g，203 mmol)。將混合物在90℃下攪拌過夜。將混合物調節至pH 6，用DCM萃取，用鹽水洗滌，濃縮且藉由矽膠管柱純化，得到呈黃色油狀物之2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸( 中間體 10，20 g，40%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：374 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.03 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.28 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.81 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.75 - 3.61 (m, 10H)。
中間體 11 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-46- 胺基 -42-( 羧甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1320
Figure 02_image1322
Figure 02_image1324
步驟 1 ： 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 5) 樹脂製備：向含有含CTC樹脂(200.00 g，200.00 mmol，1.00 mmol/g)及Fmoc-D-Pro-OH (67.40 g，200.00 mmol，1.00 eq)之DCM (3 L)的容器中逐滴添加DIEA (139.46 mL，800.00 mmol，4.00 eq)，且在15℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (200.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (3 L) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (5 L)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (3 L) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 6) 偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Thr( tBu)-OH (238.20 g，600.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (216.03 g，570.00 mmol，2.85 eq)於DMF (500 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (209.18 mL，1200.00 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (3 L) *5洗滌樹脂。 7) 去保護：將含20%哌啶之DMF (5 L)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (3 L) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 8) 針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表X中之2至15)。 表X.
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-D-Pro-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Trp(Boc)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Gly-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-Asp(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
15 Boc-(2S,4S)-4-胺基-1-Fmoc-吡咯啶-2-甲酸(1.00 eq) HATU (0.95 eq)及DIEA (2.00 eq)
肽裂解及純化 ：1) 將裂解緩衝液(20% HFIP/DCM，8.0 L)添加至含有側鏈受保護之粗肽的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌1小時且在過濾之後收集溶液。再重複一次裂解步驟。 2) 過濾後合併溶液。 3) 藉由旋轉蒸發濃縮溶液。 4) 將粗肽凍乾乾燥。 5) 獲得呈白色固體狀之N-(N-((S)-5-(三級丁氧基)-2-(2-((S)-2-((S)-2-((S)-2-((S)-2-((R)-2-((S)-4-(三級丁氧基)-2-((2S,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-側氧基丁醯胺基)-3-(三苯甲基硫基)丙醯胺基)丙醯胺基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙醯胺基)-3-(1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)丙醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)乙醯胺基)-5-側氧基戊醯基)-L-白胺醯基-L-纈胺醯基-L-色胺醯基-S-三苯甲基-L-半胱胺醯基)-O-(三級丁基)-L-蘇胺醯基-D-脯胺酸(231.00 g，粗物質)。 6) 在25℃下向N-(N-((S)-5-(三級丁氧基)-2-(2-((S)-2-((S)-2-((S)-2-((S)-2-((R)-2-((S)-4-(三級丁氧基)-2-((2S,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-側氧基丁醯胺基)-3-(三苯甲基硫基)丙醯胺基)丙醯胺基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙醯胺基)-3-(1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)丙醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)乙醯胺基)-5-側氧基戊醯基)-L-白胺醯基-L-纈胺醯基-L-色胺醯基-S-三苯甲基-L-半胱胺醯基)-O-(三級丁基)-L-蘇胺醯基-D-脯胺酸(13.58 g，4.99 mmol，1.00 eq)、2,4,6-三甲基吡啶(3.62 g，29.98 mmol，6.00 eq)於DMF (5.0 L)中之混合物中添加HATU (2.84 g，7.49 mmol，1.50 eq)。接著將混合物在25℃下攪拌3小時。逐一製備總共17個批次。 7) 藉由旋轉蒸發濃縮溶液。 8) 將殘餘物添加至0.50 M HCl (冷，10 L)中且沈澱出白色固體。過濾後，將固體凍乾乾燥，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(2-(三級丁氧基)-2-側氧基乙基)-11-((R)-1-(三級丁氧基)乙基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-35-((1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-14,44-雙((三苯甲基硫基)甲基)四十八氫-5H-二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28, 31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸三級丁酯(245.00 g，粗物質，17個批次)。化學式：C 159H 192N 20O 26S 2，LCMS實驗值：[M+Na] 2+= 1370.88; [M+H-242] += 1239.42;
步驟 2 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(2-(三級丁氧基)-2-側氧基乙基)-11-((R)-1-(三級丁氧基)乙基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49-十五側氧基-35-((1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-14,44-雙((三苯甲基硫基)甲基)四十八氫-5H-二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸三級丁酯(245.00 g，粗物質)於TFA/TIS/H 2O/3-巰基丙酸(92.5%/2.5%/2.5%/2.5%，v/v/v，5 L)中之混合物在20℃下攪拌1.5小時。用冷的異丙醚(30 L)沈澱混合物。過濾後，將固體真空乾燥2小時，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-47-(2-(三級丁氧基)-2-側氧基乙基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-14,44-雙(巰基甲基)-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(170.50 g，粗物質)，將其溶解於MeCN/H 2O (1/1，v/v，100 L)中。在25℃下將0.1 M I 2/HOAc逐滴添加至混合物中直至保持淡黃色，接著用0.1 M Na 2S 2O 3逐滴淬滅混合物直至淡黃色消失。過濾後，濾液藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 11(21.10 g，6.15%產率，87.06%純度)。化學式：C 79H 108N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 1722.70, [M+2H] 2+= 861.50。
中間體 12 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S, 39R,42S,44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-46- 胺基 -6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36,42- 二甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1326
Figure 02_image1328
Figure 02_image1330
步驟 1 ： 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1) 樹脂製備：向含有含CTC樹脂(0.50 g，0.50 mmol，1.00 mmol/g)及Fmoc-Gly-OH (148.50 mg，0.50 mmol，1.00 eq)之DCM (10 mL)的容器中逐滴添加DIEA (348.64 mL，2.00 mmol，4.00 eq)，且在25℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (0.50 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (20 mL)，且將混合物在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2) 偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Glu(O tBu)-OH (637.5 mg，1.50 mmol，3.00 eq)、HBTU (540.07 mg，1.425 mmol，2.85 eq)於DMF (10 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (522.97 mL，3.00 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂。 3) 去保護：將含20%哌啶之DMF (20 mL)添加至樹脂中，且將混合物在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4) 針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表Y中之2至15)。 表Y.
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-Gly-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-D-Pro-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Boc-(2S,4S)-4-胺基-1-Fmoc-吡咯啶-2-甲酸(1.00 eq) HATU (0.95 eq)及DIEA (2.00 eq)
10 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-His(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
15 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
肽裂解及純化 ：1) 將裂解緩衝液(1% TFA/DCM，30 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌5分鐘且在過濾之後收集溶液。再重複一次裂解步驟。 2) 將合併之溶液用DCM稀釋至500 mL。 3) 添加TBTU (321.00 mg，1.00 mmol，2.00 eq)及HOBt (135.00 mg，1.00 mmol，2.00 eq)，且將混合物在25℃下攪拌2小時。 4) 反應混合物用1 M HCl (200 mL)、H 2O (200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-11-((R)-1-(三級丁氧基)乙基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41,47-二甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-35-((1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-14,44-雙((三苯甲基硫基)甲基)四十八氫-5H-二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸三級丁酯(1.20 g，粗物質)。化學式：C 148H 176N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+Na] 2+= 1320.77。
步驟 2 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-11-((R)-1-(三級丁氧基)乙基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41,47-二甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-35-((1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-14,44-雙((三苯甲基硫基)甲基)四十八氫-5H-二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸三級丁酯(1.20 g，粗物質)於TFA/TIS/H 2O/3-巰基丙酸(92.5%/2.5%/2.5%/2.5%，v/v/v，25 mL)中之混合物在25℃下攪拌1.5小時。用冷的異丙醚(150 mL)沈澱混合物且離心(以3000 rpm離心3分鐘)。將固體用異丙醚洗滌兩次，真空乾燥2小時，得到化合物3 (900.0 mg，粗物質)。接著將化合物3 (900.0 mg，粗物質)溶解於MeCN/H 2O (1/1，v/v，500 mL)中。在25℃下將I 2/HOAc (0.1 M)逐滴添加至混合物中直至保持淡黃色，接著用0.1 M Na 2S 2O 3逐滴淬滅混合物直至淡黃色消失。過濾後，濾液藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41,47-二甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 12 ，144.00 mg，16.64%產率，97.00%純度)。化學式：C 78H 108N 20O 18S 2，LCMS實驗值：[M+H]1+ = 1677.79, [M+2H]2+ = 839.39, [M+3H]3+ = 559.95。
中間體 13 - 中間體 28 如中間體 12 之 製備中所描述來製備
Figure 02_image1332
中間體 13 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R, 47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-(2- 胺基 -2- 側氧基乙基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：230.3 mg，97.5%純度，26.0%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1720.82, [M+2H] 2+=860.90, [M+3H] 3+=574.18。
Figure 02_image1334
中間體 14 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S, 44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-( 羧甲基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-41-( 羥甲基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：252 mg，95.4%純度，27.6%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1737.80, [M+2H] 2+=869.43, [M+3H] 3+=579.86。
Figure 02_image1336
中間體 15 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -11-((R)-1- 羥乙基 )-41-( 羥甲基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -47- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：144.7 mg，96.1%純度。16.4%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1693.80, [M+2H] 2+=847.42, [M+3H] 3+=565.19。
Figure 02_image1338
中間體 16 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-( 羧甲基 )-11,41- 雙 ((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：276.3 mg，96.9%純度，30.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1751.87, [M+2H] 2+=876.47, [M+3H] 3+=584.7。
Figure 02_image1340
中間體 17 ： 2-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -26,41- 二甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -47- 基 ) 乙酸產率：223.4 mg，95.0%純度，25.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1663.77, [M+2H] 2+=832.40, [M+3H] 3+=555.01。
Figure 02_image1342
中間體 18 ： 2-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -26-(3- 胺基 -3- 側氧基丙基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25, 28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -47- 基 ) 乙酸產率：230.5 mg，96.2%純度，25.7%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1720.89, [M+2H] 2+=861.00, [M+3H] 3+=574.29。
Figure 02_image1344
中間體 19 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-38-((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-( 羧甲基 )-17-((6- 氯 -1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：215.7 mg，95.1%純度，23.3%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1755.81, [M+2H] 2+=878.50。
Figure 02_image1346
中間體 20 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-38-((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-( 羧甲基 )-17-((5- 氯 -1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：161.7 mg，97.9%純度，18.0%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1756.80, [M+2H] 2+=878.41, [M+3H] 3+=585.97。
Figure 02_image1348
中間體 21 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-( 羧甲基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-41-(2- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34, 37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：163.7 mg，98.0%純度，18.3%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1751.81, [M+2H] 2+=876.41, [M+3H] 3+=584.62。
Figure 02_image1350
中間體 22 ： 2-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -26-(3-( 甲基胺基 )-3- 側氧基丙基 )-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -47- 基 ) 乙酸產率：153.3 mg，95.4%純度，16.8%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1734.80, [M+2H] 2+=867.92, [M+3H] 3+=578.99。
Figure 02_image1352
中間體 23 ： 2-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -26-(3-( 二甲基胺基 )-3- 側氧基丙基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25, 28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -47- 基 ) 乙酸產率：120.5 mg，96.2%純度，13.2%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1748.90, [M+2H] 2+=874.96, [M+3H] 3+=583.60
Figure 02_image1354
中間體 24 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17R,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-( 羧甲基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸產率：188.5 mg，95.6%純度，20.9%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1721.80, [M+2H] 2+=861.34, [M+3H] 3+=574.61。
Figure 02_image1356
中間體 25 ： (2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -26,41,47- 三甲基三十四氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五酮產率：163.5 mg，95.9%純度，19.1%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1619.60, [M+2H] 2+=810.50。
Figure 02_image1358
中間體 26 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41,47- 二甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'd][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 )-N,N- 二甲基丙醯胺產率：34.9 mg，94.4%純度，6.4%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1704.60, [M+2H] 2+=853.00。
Figure 02_image1360
中間體 27 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -47-(2- 胺基 -2- 側氧基乙基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 )-N,N- 二甲基丙醯胺產率：119 mg，96.9%純度，22.0%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1747.70, [M+2H] 2+=874.60。
Figure 02_image1362
中間體 28 ： 2-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-2- 胺基 -11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -26,41- 二甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -47- 基 ) 乙醯胺產率：159.8 mg，97.0%純度，18.6%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1662.60, [M+2H] 2+=832.10。
(4-( 異喹啉 -8- 基 )-3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯基 ) 甲醇之製備
Figure 02_image1364
2-(4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼戊環 -2- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 醇之製備
Figure 02_image1366
步驟 1 ：向 2-(4- 溴苯基 ) 乙 -1- 醇(30 g，149.21 mmol，20.83 mL，1當量)於二㗁烷(200 mL)中之溶液中添加BPD (45.47 g，179.05 mmol，1.2當量)、KOAc (29.29 g，298.42 mmol，2當量)及Pd(dppf)Cl 2(5.46 g，7.46 mmol，0.05當量)。將反應混合物在85℃下攪拌12小時。殘餘物用 水 (200mL)稀釋且用 EtOAc(300 mL × 2)萃取。經合併之有機層用 鹽水 (100mL)洗滌，接著經 Na 2SO 4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物不經純化即用於下一步驟反應。獲得呈黑色油狀物之(35 g，粗物質)。
2-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 醇之製備
Figure 02_image1368
步驟 1 ：向 2-(4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼戊環 -2- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 醇(35 g，141.06 mmol，1當量)及8-溴異喹啉(32.28 g，155.16 mmol，1.1當量)於二㗁烷(300 mL)中之溶液中添加碳酸銫(dicesium carbonate) (91.92 g，282.12 mmol，2當量)及Pd(dppf)Cl 2(2.06 g，2.82 mmol，0.02當量)。將混合物在95℃下攪拌2小時。將反應混合物用 水 (100mL)稀釋且用 EtOAc( 100mL × 3)萃取。合併之有機層用 鹽水 (100mL)洗滌，經 Na 2SO 4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由急驟矽膠層析 (ISCO® ； 220 g SepaFlash® 二氧化矽急驟管柱 ， 0~60% 乙酸乙酯 / 石油醚梯度之溶離劑 ， 80 mL/min)來純化。獲得呈白色固體狀之(13 g，52.14 mmol，36.97%產率)。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 9.33 (s, 1H), 8.55 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.81 (br s, 1H), 7.83 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.78 - 7.68 (m, 2H), 7.57 - 7.45 (m, 3H), 7.44 - 7.36 (m, 2H), 3.98 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.00 (t, J=6.6 Hz, 2H)。
4- 溴 -3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯甲酸甲酯之製備
Figure 02_image1370
步驟 1 ：在0℃下向2-(4-(異喹啉-8-基)苯基)乙-1-醇(12.0 g，48.13 mmol，1當量)、4-溴-3-羥基-苯甲酸甲酯(13.35 g，57.76 mmol，1.2當量)、三苯基磷雜環戊二烯(25.25 g，96.27 mmol，2當量)於THF (120 mL)中之混合物中添加DEAD (16.77 g，96.27 mmol，17.50 mL，2當量)，接著脫氣且用N 2吹掃3次。將混合物在N 2氛圍下在15℃下攪拌12小時。將反應混合物用 水(80 mL)稀釋且用 150mL EtOAc(50 mL × 3)萃取。合併之有機層用60 mL鹽水(20 mL × 3)洗滌，經 Na 2SO 4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由急驟矽膠層析 (ISCO® ； 120 g SepaFlash® 二氧化矽急驟管柱 ， 0~50% 乙酸乙酯 / 石油醚梯度之溶離劑 ， 50 mL/min)來純化。獲得呈白色固體狀之(16 g，34.61 mmol，71.90%產率)。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 9.34 (s, 1H), 8.55 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.87 - 7.80 (m, 1H), 7.78 - 7.68 (m, 2H), 7.66 - 7.60 (m, 1H), 7.59 - 7.47 (m, 7H), 4.32 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.92 (d, J=1.0 Hz, 3H), 3.30 (t, J=6.5 Hz, 2H)。
4-( 異喹啉 -8- 基 )-3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯甲酸乙酯之製備
Figure 02_image1372
步驟 1 ：將 4- 溴 -3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯甲酸 甲 酯(50 mg，108.15 µmol，1當量)、8-異喹啉基硼酸(28.06 mg，162.23 µmol，1.5當量)、Na 2CO 3(28.66 mg，270.38 µmol，2.5當量)、二環己基-[2-(2,6-二甲氧基苯基)苯基]磷烷(8.88 mg，21.63 µmol，0.2當量)及二乙醯氧基鈀(2.43 mg，10.82 µmol，0.1當量)於EtOH (4 mL)中之混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在95℃下攪拌12小時。將反應混合物用 1mL 水稀釋且用 20mL EtOAc( 10mL × 2)萃取。合併之有機層用 鹽水 (4mL)洗滌，經 Na 2SO 4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2， EtOAc)純化。獲得呈白色固體狀之(30 mg，58.76 µmol，54.33%產率)。
(4-( 異喹啉 -8- 基 )-3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯基 ) 甲醇之製備
Figure 02_image1374
步驟 1 ：在0℃下向4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲酸乙酯(20 mg，39.17 µmol，1當量)於THF (1 mL)中之混合物中添加LAH (2.97 mg，78.34 µmol，2當量)。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在20℃下攪拌1小時。藉由在0℃下添加0.04 mL MgSO 4之溶劑淬滅反應混合物，接著經由矽藻土墊過濾混合物，且濾液經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，EtOAc)純化，得到呈白色固體狀之 中間體 25(2 mg，3.81 µmol，9.73%產率，92%純度)。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 9.18 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.58 - 8.47 (m, 2H), 7.89 - 7.73 (m, 6H), 7.54 - 7.46 (m, 2H), 7.31 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.18 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.13 - 7.08 (m, 2H), 6.88 (d, J=7.5 Hz, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.32 - 4.14 (m, 2H), 2.91 - 2.78 (m, 2H), 2.91 - 2.78 (m, 1H)。
2-(2-(2-((4-( 異喹啉 -8- 基 )-3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙 -1- 胺之製備
Figure 02_image1376
步驟 1 ：在0℃下向 (2-(2-(2- 羥乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯(1 g，4.01 mmol，1 eq)於DCM (10 mL)中之溶液中添加MsCl (689.23 mg，6.02 mmol，465.69 µL，1.5 eq)及TEA (811.77 mg，8.02 mmol，1.12 mL，2 eq)。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在20℃下攪拌2小時。將反應混合物用5 mL NaHCO 3飽和溶液淬滅，接著用20 mL EtOAc (100 mL × 2)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到粗產物。粗產物不經純化即直接用於下一步驟。獲得呈淡黃色油狀物之 甲烷磺酸 2,2- 二甲基 -4- 側氧基 -3,8,11- 三氧雜 -5- 氮雜十三烷 -13- 基酯(1.1 g，3.36 mmol，83.76%產率)。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d)位移 = 4.92 (br s, 1H), 4.46 - 4.35 (m, 2H), 3.78 (dd, J=3.6, 5.4 Hz, 2H), 3.72 - 3.65 (m, 2H), 3.65 - 3.59 (m, 2H), 3.54 (t, J=5.2 Hz, 2H), 3.33 (br s, 2H), 3.08 (s, 3H), 1.46 (s, 9H)。
步驟 2 ：在0℃下向(4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯基)甲醇(100 mg，207.22 µmol，1 eq)及 甲烷磺酸 2,2- 二甲基 -4- 側氧基 -3,8,11- 三氧雜 -5- 氮雜十三烷 -13- 基酯(135.69 mg，414.44 µmol，2 eq)於DMF (1 mL)中之混合物溶液中添加NaH (33.15 mg，828.88 µmol，60%純度，4 eq)。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在20℃下攪拌12小時。反應混合物藉由在0℃下添加水(2 mL)淬滅，接著用水(4 mL)稀釋且用30 mL EtOAc (15 mL × 2)萃取。合併之有機層用鹽水(5 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，EtOAc= 1)純化。獲得呈黃色固體狀之標題(2-(2-(2-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯(80 mg，112.07 µmol，54.0%產率)。 1 H NMR(400 MHz, 氯仿-d) δ = 4.45 - 4.36 (m, 2H), 3.83 - 3.77 (m, 2H), 3.72 - 3.65 (m, 2H), 3.65 - 3.60 (m, 2H), 3.54 (t, J= 5.3 Hz, 2H), 3.39 - 3.28 (m, 2H), 3.08 (s, 3H), 1.46 (s, 9H)。 LCMS ：714.5。
步驟 3 ：向(2-(2-(2-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯(70 mg，98.06 µmol，1 eq)之溶液中添加TFA (4.62 g，40.52 mmol，3 mL，413.21 eq)。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在20℃下攪拌1小時。過濾反應混合物且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC純化。獲得呈白色固體狀之2-(2-(2-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(10 mg，16.29 µmol，16.6%產率)。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d)位移 = 9.36 - 9.36 (m, 1H), 9.36 - 9.34 (m, 1H), 9.36 - 9.34 (m, 1H), 9.42 - 9.29 (m, 1H), 8.65 (br d, J=6.3 Hz, 1H), 8.40 (br d, J=6.4 Hz, 1H), 8.25 - 8.06 (m, 7H), 7.85 (t, J=6.8 Hz, 2H), 7.34 - 7.29 (m, 2H), 7.18 (br d, J=7.6 Hz, 2H), 6.96 (br d, J=7.8 Hz, 2H), 4.73 - 4.61 (m, 2H), 4.47 - 4.38 (m, 1H), 4.43 (br d, J=8.3 Hz, 1H), 4.23 (br d, J=9.1 Hz, 1H), 3.79 (br d, J=9.8 Hz, 6H), 3.68 (br d, J=7.0 Hz, 4H), 3.17 (br s, 2H), 2.91 - 2.66 (m, 2H)。 LCMS：614.2。
8-(4-(2-(5-( 哌 𠯤 -1- 基甲基 )-2-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯氧基 ) 乙基 ) 苯基 ) 異喹啉之製備
Figure 02_image1378
步驟 1 ：將4-溴-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲酸甲酯(3 g，6.49 mmol，1當量)溶解於THF (30 mL)中之溶液冷卻至0℃，接著在0℃下添加LAH (1 M，7.14 mL，1.1當量)。將反應混合物在0℃下攪拌1小時。LC-MS上顯示若干新峰(ET44471-11-P1A1、ET44471-11-P1X1)，偵測到所需化合物。TLC (石油醚:乙酸乙酯=0:1，Rf = 0.32)。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚:乙酸乙酯=0:1)純化。獲得呈白色固體狀之(4-溴-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯基)甲醇(1.64 g，3.78 mmol，58.19%產率)。
步驟 2 ：在0℃下向(4-溴-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯基)甲醇(200 mg，460.49 µmol，1當量)於DCM (5 mL)中之溶液中添加SOCl 2(547.84 mg，4.60 mmol，334.05 µL，10當量)。將混合物在20℃下攪拌12小時。將殘餘物用5 mL H 2O稀釋且用DCM (5 mL × 3)萃取。將合併之有機層減壓濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之8-(4-(2-(2-溴-5-(氯甲基)苯氧基)乙基)苯基)異喹啉(200 mg，粗物質)。
步驟 3 ：向8-(4-(2-(2-溴-5-(氯甲基)苯氧基)乙基)苯基)異喹啉(200 mg，441.73 µmol，1當量)於二㗁烷(4 mL)中之溶液中添加哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(246.81 mg，1.33 mmol，3當量)。將混合物在80℃下攪拌12小時。將殘餘物用H 2O (10 mL)稀釋且用EtOAc (20 mL × 3)萃取。將合併之有機層減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，石油醚:乙酸乙酯= 0 :1，Rf = 0.28)純化。獲得呈黃色固體狀之4-(4-溴-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(200 mg，331.92 µmol，75.14%產率)。
步驟 4 ：將4-(4-溴-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(133 mg，220.72 µmol，1當量)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(113.96 mg，331.09 µmol，1.5當量)、二三級丁基(環戊基)磷烷;Pd(dtbpf)Cl 2(14.39 mg，22.07 µmol，0.1當量)、K 3PO 4(93.70 mg，441.45 µmol，2當量)於THF (4 mL)及H 2O (1 mL)中之混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在80℃下攪拌18小時。將反應混合物用H 2O (4 mL)稀釋且用EtOAc (10 mL × 3)萃取。將合併之有機層減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，石油醚:乙酸乙酯= 0:1，Rf = 0.47)純化。獲得呈黑棕色油狀物之3-(4-((4-(三級丁氧基羰基)哌𠯤-1-基)甲基)-2-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(160 mg，216.25 µmol，97.97%產率)。
步驟 5：將3-(4-((4-(三級丁氧基羰基)哌𠯤-1-基)甲基)-2-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸酯(150 mg，202.73 µmol，1當量)、TFA (69.35 mg，608.19 µmol，45.03 µL，3當量)於DCM (5 mL)中之混合物在20℃下攪拌12小時。處理且將合併之有機層減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (TFA條件(管柱：Phenomenex luna C18 100*40 mm*5 µm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：5%-35%，8 min))純化。獲得呈白色固體狀之8-(4-(2-(5-(哌𠯤-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯氧基)乙基)苯基)異喹啉(14.55 mg，22.26 µmol，10.98%產率，TFA)。 1 H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ = 13.18 (br s, 1H), 9.30 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.63 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.47 (d, J=6.6 Hz, 1H), 8.25 - 8.13 (m, 2H), 8.08 - 7.99 (m, 3H), 7.68 (dd, J=2.7, 7.1 Hz, 2H), 7.43 (t, J=7.9 Hz, 3H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 7.20 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.41 (br t, J=6.7 Hz, 2H), 4.22 (br s, 2H), 3.36 (br s, 3H), 3.27 - 3.07 (m, 5H), 1.33 - 1.18 (m, 1H)。
8-[4-[2-[5-[(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 甲基 ]-2-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯氧基 ] 乙基 ] 苯基 ] 異喹啉之製備
Figure 02_image1380
步驟 1 ：向8-[4-[2-[5-(哌𠯤-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯氧基]乙基]苯基]異喹啉(50 mg，92.65 µmol，1當量)於MeOH (1 mL)中之溶液中添加甲醛(3.34 mg，111.18 µmol，3.06 μL，1.2當量)，接著在0℃下添加NaBH 3CN (17.47 mg，277.95 µmol，3當量)及AcOH (5.56 mg，92.65 µmol，5.30 µL，1當量)。將混合物在20℃下攪拌12小時。處理反應混合物，且將合併之有機層減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC純化。獲得呈白色固體狀之8-[4-[2-[5-[(4-甲基哌𠯤-1-基)甲基]-2-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯氧基]乙基]苯基]異喹啉(10.81 mg，16.19 µmol，17.4%產率，TFA鹽)。 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 13.11 (br s, 1H), 9.31 (s, 1H), 9.19 (br s, 1H), 8.64 (br d, J=5.6 Hz, 1H), 8.48 (d, J=6.7 Hz, 1H), 8.20 (br d, J=5.1 Hz, 1H), 8.16 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.06 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.03 - 7.99 (m, 1H), 7.68 (br d, J=7.1 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.45 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 3H), 7.32 (s, 1H), 7.14 (br d, J=7.5 Hz, 1H), 4.42 (br t, J=6.5 Hz, 5H), 3.94 (br s, 2H), 3.15 (br t, J=6.5 Hz, 4H), 2.83 (s, 4H)。
額外胞外蛋白質靶向配體之合成
Figure 02_image1382
Figure 02_image1384
降解劑之合成 A1 ： (2R,3R,4R,5R)-2-( 羥甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1386
Figure 02_image1388
步驟 1 ：在0℃下向2,2'-氧基雙(乙-1-醇) (10.0 g，90 mmol)於吡啶(50 mL)中之溶液中添加DMAP (22.0 g，180.0 mmol)及TBSCl (1.35 g，9.0 mmol)。將混合物在N 2下在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙-1-醇(1.47 g，7%產率)，LC-MS (ESI)實驗值：221 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙-1-醇(1.47 g，6.7 mmol)於THF (50.0 mL)中之溶液中添加3-乙炔基苯酚(790.6 mg，6.7 mmol)、PPh 3(2.1 g，8.0 mmol)及DEAD (1.4 g，8.0 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到三級丁基(2-(2-(3-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)二甲基矽烷(1.2 g，60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：321 [M+H] +。
步驟 3 ：向三級丁基(2-(2-(3-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)二甲基矽烷(1.2 g，4.0 mmol)於MeOH (50 mL)中之溶液中添加N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(1.5 g，4.0 mmol)、CuSO 4(64.0 mg，0.4 mmol)、抗壞血酸鈉(72.0 mg，0.4 mmol)及THPTA (144.0 mg，0.4 mmol)。將混合物在N 2下在室溫下攪拌16小時。濃縮混合物，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(900.0 mg，32%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：701 [M+H] +。
步驟 4 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(900.0 mg，1.29 mmol)於THF (40.0 mL)中之溶液中添加TBAF (2.58 mL，1 M於THF中)，將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(60 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-羥乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(586 mg，77%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：587 [M+H] +。
步驟 5 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-羥乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(586.0 mg，1.0 mmol)於DCM (30.0 mL)中之溶液中添加TEA (303 mg，3.0 mmol)、DMAP (122.0 mg，1.0 mmol)及TsCl (229.0 mg，1.20 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(50 mL × 3)洗滌，將有機層減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到4-甲基苯磺酸2-(2-(3-(1-(((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-2,2-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯氧基)乙氧基)乙酯(584 mg，79%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：741 [M+H] +。
步驟 6 ：向4-甲基苯磺酸2-(2-(3-(1-(((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-2,2-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯氧基)乙氧基)乙酯(584 mg，0.79 mmol)於DMF (30.0 mL)中之溶液中添加NaN 3(513.0 mg，7.9 mmol)，將混合物在100℃下攪拌16小時。將混合物用乙酸乙酯(150.0 mL)稀釋且用水(100.0 mL × 3)洗滌，將有機層減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(427 mg，88%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：612 [M+H] +。
步驟 7 ：將N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(427.0 mg，0.70 mmol)於NH 3/MeOH (20 mL，7 M)中之溶液在80℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗物質(3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-胺(309 mg，85%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：516 [M+H] +。
步驟 8 ：向(3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-胺(30.9 mg，0.06 mmol)於 i-PrOH (30.0 mL)中之溶液中添加2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(10.9 mg，0.06 mmol)及DIEA (23.6 mg，1.8 mmol)。將混合物在100℃下攪拌16小時。濃縮混合物且藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(36.3 mg，93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：662 [M+H] +。
步驟 9 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(36.3 mg，0.056 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (2 mL，2 N於水中)。將混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮混合物且藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A1，3.0 mg，10%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：662 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.42 (dd, J = 10.7, 5.0 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.97 - 6.89 (m, 2H), 5.63 (m, 1H), 4.98 (dd, J = 27.9, 14.3 Hz, 3H), 4.74 - 4.66 (m, 3H), 4.30 (dd, J = 8.2, 4.5 Hz, 1H), 4.22 - 4.17 (m, 2H), 4.01 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 10.8, 3.1 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 5.4, 3.8 Hz, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 3H), 3.68 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.43 - 3.37 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.34 (s)。
A2 ： 3,3'-((2-(6- 疊氮基己醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1390
Figure 02_image1392
步驟 1 ：向(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(800 mg，2.6 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加咪唑(352 mg，5.2 mmol)及TBDPSCl (0.9 mL，3.5 mmol)。將反應物攪拌過夜，用水淬滅，用EA萃取三次。合併之有機層經乾燥且濃縮，藉由管柱用80% EA/PE純化，得到呈黃色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(613 mg，43%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：548 [M+H] +。
步驟 2 ：向(2R,3R,4R,5S)-2-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(613 mg，1.12 mmol)於2,2-二甲氧基丙烷(10 mL)中之溶液中添加對甲苯磺酸(20 mg，0.11 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物且藉由管柱用30% EA/PE純化，得到呈淡黃色油狀物之N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(570 mg，87%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：588 [M+H] +。
步驟 3 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(1.4 g，2.4 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加TBAF (3 mL，1 M於THF中)。將混合物在室溫下攪拌12小時。濃縮混合物且藉由層析(矽膠，0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈固體狀之((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇(750 mg，90%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：350 [M+H] +。
步驟 4 ：在0℃下向含((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇(750 mg，2.1 mmol)之DMF (10 mL)中添加NaH (126 mg，3.2 mmol，60重量%於礦物油中)。1小時後，向溶液中添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(962 mg，2.6 mmol)，將混合物在室溫下攪拌12小時。將混合物用H 2O淬滅且用EA萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾。濃縮濾液且藉由層析(矽膠，0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈固體狀之N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(200 mg，87%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：551 [M+H] +。
步驟 5 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(200 mg，0.4 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液中添加Pd/C (20 mg，10% wt，60%濕潤)。將混合物在H 2氣球下在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(191 mg，100%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：525 [M+H] +。
步驟 6 ：在0℃下向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(71 mg，0.2 mmol)、HATU (152 mg，0.4 mmol)及DIEA (77 mg，0.6 mmol)之溶液中添加N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(191 mg，0.4 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用H 2O淬滅且用EA萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾。濃縮濾液且藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (80 mg，29%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1387 [M+H] +。
步驟 7 ：向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (80 mg, 0.05 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中添加HCl (0.1 ml，1 M)，將混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物且藉由C18純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A2，60 mg, 80%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1307 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 4.33 (td, J = 10.6, 5.1 Hz, 2H), 4.13 - 4.04 (m, 3H), 3.92 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 3.74 - 3.58 (m, 36H), 3.55 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 3.48 (ddd, J = 19.2, 9.7, 5.5 Hz, 4H), 3.37 (dd, J = 11.1, 5.7 Hz, 4H), 3.28 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 2.45 (dd, J = 6.7, 5.5 Hz, 4H), 2.22 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.75 - 1.54 (m, 4H), 1.46 - 1.31 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.25。
A3 ： 1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸之製備
Figure 02_image1394
Figure 02_image1396
步驟 1 ：在室溫下向15-((2-羧乙氧基)甲基)-3,13-二側氧基-1-苯基-2,5,8,11,17-五氧雜-14-氮雜二十烷-20-酸(0.56 g，1.06 mmol)及HATU (1.2 g，3.18 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加DIPEA (0.54 g，4.24 mmol)及(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(1.07 g，2.2 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。分離所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(C18，0~80%，MeOH/H 2O)純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(1.1 g，73%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1463 [M+H] +。
步驟 2 ：向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(1.07 g，0.75 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加p-TsOH (0.03 g，0.14 mmol)及2,2-二甲氧基丙烷(1.56 g，15 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析(C18，0~80%，MeOH/H 2O)純化，得到呈白色固體狀之1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸甲酯(0.8 g, 72%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1467 [M+H] +。
步驟 3 ：向1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸甲酯(0.8 g, 0.54mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加單水合氫氧化鋰(20 mg，0.82 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物調節至pH 5且用乙酸乙酯(50 mL)稀釋，接著用水(50 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到呈白色固體狀之1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸( A3，0.6 g, 75%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1453 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 6.90 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 4.31 (s, 2H), 4.23 (dt, J = 6.2, 3.1 Hz, 2H), 4.21 - 4.15 (m, 2H), 4.13 (s, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.91 (dd, J = 10.9, 5.6 Hz, 4H), 3.78 - 3.59 (m, 41H), 3.52 (ddd, J = 13.4, 10.2, 4.6 Hz, 8H), 3.37 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 3.16 (t, J = 11.1 Hz, 2H), 2.45 (t, J = 6.2 Hz, 4H), 1.50 (s, 6H), 1.30 (d, J = 13.2 Hz, 6H)。
A5 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-( 烯丙氧基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1398
Figure 02_image1400
步驟 1 ：將THPTA (20 mg)及CuSO 4(3 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(50 mg，0.15 mmol)及乙炔基三甲基矽烷(29 mg，0.3 mmol)於MeOH (4 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(6 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg，61%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：439 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 0.09 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加TBAF (1 mL，1 M於THF中)。將混合物在40℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(25 mg, 76%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：367 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.01 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 5.67 (ddd, J = 22.5, 10.9, 5.9 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 22.9, 5.8 Hz, 2H), 4.86 (s, 3H), 4.69 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.32 (dd, J = 10.8, 3.7 Hz, 1H), 4.26 - 4.20 (m, 1H), 3.97 (dd, J = 10.9, 3.3 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 12.9, 6.2 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -77.01。
步驟 3 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(20 mg, 0.05 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 mol/L)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-胺基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 100%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：271 [M+H] +。
步驟 4 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-胺基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 0.05 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(18 mg，0.1 mmol)及DIEA (26 mg，0.2 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A5，8.8 mg, 42%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：417 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.64 (dd, J = 10.7, 5.7 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.71 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 1H), 4.01 - 3.88 (m, 2H), 3.75 - 3.52 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.35。
A6 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-6-( 烯丙氧基 )-2-( 疊氮基甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1402
步驟 1 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 0.11 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 mol/L)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(疊氮基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(28 mg, 100%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：245 [M+H] +。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(疊氮基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(28 mg，0.11 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(27 mg，0.15 mmol)及DIEA (26 mg，0.2 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18管柱層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A6，8.8 mg, 20%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：391 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.28 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.22 (ddt, J = 13.0, 5.0, 1.3 Hz, 1H), 4.08 - 3.97 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 10.8, 3.2 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 12.8, 8.7 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.35。
A7 ： 4-(((3S,4R,5R,6R)-4,5- 二羥基 -6-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 胺基 )-6-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 甲腈 之製備
Figure 02_image1404
步驟 1 ：在N 2下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇鹽酸鹽(500 mg，3.1 mmol)於i-PrOH (3.0 mL)中之混合物中添加2,4-二氯-6-(三氟甲基)嘧啶(0.84 mL，6.1 mmol)及DIEA (1.5 mL，9.2 mmol)。在室溫下攪拌過夜之後，濃縮混合物且藉由層析(矽膠，0-30%甲醇/DCM)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(160 mg, 15%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：344 [M+1] +。
步驟 2 ：在N 2下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(20 mg，0.058 mmol)於DMF (3.0 mL)中之混合物中添加Zn(CN) 2(4.1 mg，0.035 mmol)、dppf (16.2 mg，0.028 mmol)、Zn (3.3 mg，0.31 mmol)及Pd 2(dba) 3(26.6 mg，0.18 mmol)。在120℃下攪拌過夜之後，濃縮反應混合物且藉由製備型TLC純化，得到呈白色固體狀之4-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-甲腈( A7，2.4 mg, 12%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：333 [M-H] -。 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 6.97 (s, 1H), 4.57 - 4.48 (m, 1H), 4.08 (dd, J= 11.1, 5.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.76 (dd, J= 11.3, 7.1 Hz, 1H), 3.69 (dd, J= 11.4, 4.9 Hz, 1H), 3.62 (dd, J= 10.6, 3.1 Hz, 1H), 3.48 - 3.44 (m, 1H), 3.14 (t, J= 10.9 Hz, 1H)。
A8 ： (2R,3R,4R,5S)-5-((5- 氟 -6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基 )-2-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1406
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200.0 mg，0.462 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加6-氯-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶(91.9 mg，0.462 mmol)、Ruphos.Pd.G3 (38.0 mg，0.046 mmol)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)及Cs 2CO 3(450.5 mg，1.386 mmol)。將混合物在N 2下在70℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.1 mg, 36%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：597 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.1 mg, 0.168 mmol)於DCM (20.0 mL)中之溶液中添加BCl 3(1.68 mL，1 N於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5S)-5-((5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A8，6.0 mg, 11%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：327 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.40 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 9.2, 2.7 Hz, 1H), 4.30 - 4.11 (m, 2H), 3.90 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.75 (dd, J = 11.4, 7.1 Hz, 1H), 3.68 (dd, J = 11.4, 5.0 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 10.1, 3.2 Hz, 1H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 3.08 (dd, J = 15.1, 5.7 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -66.95 (d, J = 18.0 Hz), -141.07 - -145.72 (m)。
A9 ： (2R,3R,4R,5R)-2-( 羥甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1408
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200.0 mg，0.462 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加2-氯-6-(三氟甲基)吡𠯤(84.1 mg，0.462 mmol)、Ruphos.Pd.G3 (38.0 mg，0.046 mmol)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)及Cs 2CO 3(450.5 mg，1.386 mmol)。將混合物在N 2下在70℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3R,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(95 mg, 34%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：580 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3R,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(95 mg，0.168 mmol)於DCM (20.0 mL)中之溶液中添加BCl 3(1.68 mL，1 N於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5R)-2-(羥甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A9，2.0 mg, 4%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：310[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.14 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 4.33 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 12.0, 2.0 Hz, 1H), 3.98 - 3.90 (m, 1H), 3.86 (dd, J = 4.6, 3.2 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 11.5, 7.1 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 12.1, 1.7 Hz, 1H), 3.49 - 3.41 (m, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.42 (s)。
A10 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 羥甲基 )-4-((5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1410
步驟 1 ：將(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(20 mg，0.11 mmol)、2-氯-5-(三氟甲基)吡𠯤(19 mg，0.11 mmol)及DIPEA (20 mg，0.16 mmol)於NMP (1 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜。混合物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥甲基)-4-((5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇( A10，5.4 mg, 15%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：338 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.26 (s, 1H), 7.99 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 3.83 (dt, J = 10.6, 6.5 Hz, 3H), 3.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H)。
A11 ： 1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,2- 二甲基四氫 -4,7- 環氧基 [1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-d] 㗁呯 -4(5H)- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 醇之製備
Figure 02_image1412
步驟 1 ：在0℃下向((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲醇(100 mg, 0.29 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NaH (23 mg，0.58 mmol，60重量%於礦物油中)。在0℃下攪拌20分鐘之後，添加4-甲基苯磺酸2,2,3,3-四甲基-4,7,10,13-四氧雜-3-矽雜十五烷-15-基酯(145 mg，0.31 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著用EA及H 2O萃取。濃縮有機層，且殘餘物藉由急驟管柱純化，得到呈無色油狀物之3-氯-N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-4-(15,15,16,16-四甲基-2,5,8,11,14-五氧雜-15-矽雜十七烷基)六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(80 mg, 43%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：640 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向3-氯-N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-4-(15,15,16,16-四甲基-2,5,8,11,14-五氧雜-15-矽雜十七烷基)六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(80 mg, 0.12 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加TBAF (0.1 mL，1 N於THF中)。將混合物在0℃下攪拌1小時，接著濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-醇( A11，10.7 mg, 16%產率)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 5.38 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.22 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 3.92 (dd, J = 18.4, 9.0 Hz, 2H), 3.83 - 3.77 (m, 2H), 3.73 - 3.63 (m, 15H), 3.56 (dd, J = 6.2, 3.4 Hz, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.35 (s, 3H)。
A12 ： 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-( 苯胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1414
Figure 02_image1416
步驟 1 ：向2-(2-(2-(2-(甲苯磺醯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸三級丁酯(550 mg，1.32 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加苯胺(368 mg，3.95 mmol)及DIEA (0.87 mL，5.26 mmol)，且將反應物在100℃下攪拌16小時。用EA及水稀釋反應物。分離有機層且真空濃縮。使用矽膠管柱層析用乙酸乙酯/石油醚(40%)溶離來純化殘餘物。收集有機層，真空濃縮且乾燥，得到標題化合物2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸三級丁酯(380 mg, 85%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：340 [M+H] +。
步驟 2 ：向2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸三級丁酯(380 mg，1.12 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)，且將反應物在室溫下攪拌18小時。將反應物真空濃縮，得到標題化合物2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(300 mg, 95%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：284 [M+H] +。
步驟 3 ：向2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(300 mg，1.06 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加DIEA (0.5 mL，3.18 mmol)及HATU (483 mg，1.27 mmol)，且將反應物在0℃下攪拌30分鐘。添加3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸二三級丁酯(441 mg，1.27 mmol)，將反應物在室溫下攪拌16小時。用EA及水稀釋反應物。分離有機層且真空濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到13-((3-(三級丁氧基)-3-側氧基丙氧基)甲基)-11-側氧基-1-(苯胺基)-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸三級丁酯(400 mg, 62%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：613 [M+H] +。
步驟 4 ：向13-((3-(三級丁氧基)-3-側氧基丙氧基)甲基)-11-側氧基-1-(苯胺基)-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸三級丁酯(120 mg，0.20 mmol)於DCM (3 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL，13 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌18小時。將反應物真空濃縮，得到標題化合物13-((2-羧乙氧基)甲基)-11-側氧基-1-(苯胺基)-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸(98 mg, 99%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：501 [M+H] +。
步驟 5 ：向13-((2-羧乙氧基)甲基)-11-側氧基-1-(苯胺基)-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸(113 mg，0.226 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加HATU (197 mg，0.52 mmol)及DIEA (0.26 mL，1.58 mmol)，且將反應物在0℃下攪拌30分鐘。添加N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(250 mg, 0.50 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌18小時。用EA及水稀釋反應物。分離有機層且真空濃縮。使用矽膠管柱層析用(DCM:MEOH=20:1)溶離來純化殘餘物，得到標題化合物3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-8-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (110 mg, 30%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1470 [M+H] +。
步驟 6 ：向3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-8-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (100 mg, 0.068 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (1.5 mL，2 M於H 2O中)，且將反應物在室溫下攪拌18小時。真空濃縮反應物。殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到標題化合物3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(苯胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-4-(2,2,2-三氟乙醯胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A12，11 mg, 12%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1389[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 7.15 - 7.07 (m, 2H), 6.71 - 6.59 (m, 3H), 5.25 (d, J= 1.3 Hz, 2H), 4.20 (p, J= 5.6 Hz, 1H), 4.00 (dd, J= 11.9, 9.4 Hz, 6H), 3.90 (q, J= 4.0 Hz, 4H), 3.81 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 3.69 (dd, J= 9.0, 4.1 Hz, 18H), 3.66 - 3.59 (m, 24H), 3.56 - 3.48 (m, 8H), 3.37 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.28 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.44 (t, J= 6.2 Hz, 4H)。
A13 ： 3,3'-((2- 胺基丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1418
步驟 1 ：在室溫下向3,3'-((2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(0.72 g，1.96 mmol)及HATU (2.23 g，5.88 mmol)於DMF (20 mL)中之溶液中添加DIPEA (1.0 g，7.84 mmol)及(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(2.1 g，4.33 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。分離所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(C18，0~80%，MeOH/H 2O)純化，得到呈白色固體狀之(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)胺基甲酸苯甲酯(1.2 g, 48%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1303[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.50 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.41 - 7.25 (m, 5H), 6.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.43 - 4.27 (m, 2H), 4.08 (dd, J = 10.9, 5.2Hz, 2H), 3.91 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.72 - 3.55 (m, 36H), 3.55 - 3.42 (m, 8H), 3.35 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 3.15 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.43 (t, J = 6.1, 4H)。
步驟 2 ：在室溫下向(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)胺基甲酸苯甲酯(1.2 g, 0.92 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加Pd/C (120 mg，10% wt，60%濕潤)。將反應混合物在H 2氣球下在室溫下攪拌過夜。分離所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(C18，0~40%，MeOH/H 2O)純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (800 mg, 74%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1169[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.51 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 4.36 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 4.08 (dd, J = 11.0, 5.1 Hz, 2H), 3.89 (t, J = 17.0 Hz, 2H),3.79 - 3.52 (m, 40H), 3.46 (dt, J = 20.7, 10.3 Hz, 2H), 3.37 (td, J = 8.5, 4.9 Hz, 6H), 3.13 (dt, J = 10.3, 8.0 Hz, 3H), 2.46 (t, J = 6.0 Hz, 4H)。
A14 ： 3,3'-((2-(6- 疊氮基己醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1420
步驟 1 ：將3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(28 mg，0.08 mmol)及HATU (62.7 mg，0.17 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(98 mg, 0.19 mmol)及DIPEA (0.05 mL, 0.3 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (50 mg, 48%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1389 [M+H] +。
步驟 2 ：向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (50 mg, 0.04 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (1 mL，2 M於H 2O中)。將反應物在室溫下攪拌過夜。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (30 mg, 64%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1309 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 5.39 (s, 2H), 4.14 - 4.09 (m, 1H), 4.00 (d, J= 9.6 Hz, 2H), 3.93 (d, J= 4.1 Hz, 2H), 3.83 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 3.77 (dd, J= 9.6, 4.2 Hz, 2H), 3.73 - 3.60 (m, 35H), 3.56 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.52 - 3.45 (m, 4H), 3.39 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.28 (s, 1H), 2.46 (dd, J= 6.6, 5.4 Hz, 4H), 2.23 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.57 (m, 4H), 1.44 - 1.36 (m, 2H)。
A15 ： 6- 疊氮基 -N-(1,3- 雙 ((1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 甲氧基 ) 丙 -2- 基 ) 己醯胺之製備
Figure 02_image1422
Figure 02_image1424
步驟 1 ：向(1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)丙-2-基)胺基甲酸苯甲酯(80 mg，0.27 mmol)及(2R,3R,4R,5S)-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(300 mg，0.58 mmol)於MeOH (3 mL)中之溶液中添加含CuSO 4(4.2 mg，0.03 mmol)及THPTA (20 mg，0.004 mmol)之H 2O (0.5 mL)及含抗壞血酸鈉(11 mg，0.05 mmol)之H 2O (0.5 mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜且濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到呈無色油狀物之(1,3-雙((1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)丙-2-基)胺基甲酸苯甲酯(320 mg, 91%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1322 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.49 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 8.01 (s, 2H), 7.47 - 7.19 (m, 5H), 6.88 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.57 (dd, J= 9.5, 4.6 Hz, 8H), 4.35 (d, J= 5.1 Hz, 2H), 4.06 (dd, J= 10.9, 5.2 Hz, 2H), 3.95 - 3.85 (m, 7H), 3.69 - 3.63 (m, 6H), 3.62 - 3.51 (m, 30H), 3.13 (t, J= 10.9 Hz, 2H)。
步驟 2 ：將(1,3-雙((1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)丙-2-基)胺基甲酸苯甲酯(300 mg, 0.23 mmol)及Pd/C (30 mg，10% wt，60%濕潤)於MeOH (5 mL)中之溶液在H 2氣球下在室溫下攪拌過夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且濃縮濾液，得到呈無色油狀物之(2R,2'R,3R,3'R,4R,4'R,5S,5'S)-2,2'-(((((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(亞甲基))雙(1H-1,2,3-三唑-4,1-二基))雙(2,5,8,11-四氧雜十三烷-13,1-二基))雙(5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇) (160 mg, 60%產率)。C-MS (ESI)實驗值：1188 [M+H] +。
步驟 3 ：向6-疊氮基己酸(13 mg，0.08 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加HATU (35 mg，0.09 mmol)及DIPEA (22 mg，0.17 mmol)。在室溫下攪拌30分鐘之後，添加(2R,2'R,3R,3'R,4R,4'R,5S,5'S)-2,2'-(((((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(亞甲基))雙(1H-1,2,3-三唑-4,1-二基))雙(2,5,8,11-四氧雜十三烷-13,1-二基))雙(5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇) (147 mg, 0.12 mmol)。將混合物在N 2下在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到呈白色固體狀之6-疊氮基-N-(1,3-雙((1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)丙-2-基)己醯胺(36 mg, 33%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1327 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.50 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 8.02 (s, 2H), 6.89 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 4.67 - 4.53 (m, 8H), 4.35 (td, J= 10.4, 5.2 Hz, 2H), 4.19 (p, J= 5.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J= 10.9, 5.2 Hz, 2H), 3.89 (t, J= 4.9 Hz, 5H), 3.69 - 3.50 (m, 37H), 3.26 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.14 (t, J= 10.9 Hz, 2H), 2.21 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 1.66 - 1.52 (m, 4H), 1.45 - 1.27 (m, 2H)。
A18 ： 3,3'-((2-(6- 疊氮基己醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1426
步驟 1 ：將6-疊氮基己酸(0.54 g，3.45 mmol)及HATU (1.3 g，3.45 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸二三級丁酯(1 g，2.88 mmol)及DIPEA (0.95 mL，5.76 mmol)。將反應物攪拌過夜。所得混合物用DCM (100 mL)稀釋，用H 2O (50 mL × 2)及鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~80% EA/PE)純化，得到呈無色油狀物之3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸二三級丁酯(800 mg, 93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：487 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 6.28 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 4.19 - 4.11 (m, 1H), 3.74 - 3.62 (m, 4H), 3.58 (dd, J= 9.6, 4.0 Hz, 2H), 3.40 (dd, J= 9.6, 6.1 Hz, 2H), 3.26 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.52 - 2.38 (m, 4H), 2.20 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 1.67 - 1.63 (m, 4H), 1.47 - 1.37 (m, 20H)。
步驟 2 ：在0℃下向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸酯(800 mg，1.64 mmol)於DCM (6 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL，26.93 mmol)。將反應物在室溫下攪拌3小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗物質3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(470 mg，76%產率)不經進一步純化即用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：375 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ 12.14 (s, 2H), 7.64 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 4.00 - 3.86 (m, 1H), 3.57 (t, J= 6.3 Hz, 4H), 3.34 (d, J= 5.8 Hz, 4H), 3.29 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 2.43 (t, J= 6.3 Hz, 4H), 2.07 (t, J= 7.3 Hz, 2H), 1.56 - 1.43 (m, 4H), 1.33 - 1.23 (m, 2H)。
步驟 3 ：將3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(70 mg，0.19 mmol)及HATU (163 mg，0.43 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(208 mg, 0.43 mmol)及DIPEA (73 mg, 0.56 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (65 mg, 28%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：654 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.51 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 6.90 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 4.36 (td, J= 10.6, 5.3 Hz, 2H), 4.16 - 4.04 (m, 3H), 3.92 (d, J= 2.9 Hz, 2H), 3.73 - 3.60 (m, 36H), 3.56 (dt, J= 10.6, 3.0 Hz, 6H), 3.51 - 3.43 (m, 4H), 3.38 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.17 (t, J= 10.9 Hz, 2H), 2.45 (dd, J= 6.7, 5.4 Hz, 4H), 2.23 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 1.67 - 1.57 (m, 4H), 1.44 - 1.36 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, MeOD): δ -72.30 (s)。
A16 ： 1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 酸之製備
Figure 02_image1428
步驟 1 ：在室溫下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(2.7 g, 4.59 mmol)於DCM (50 mL)中之溶液中添加三乙胺(3.1 mL，22.97 mmol)及DMAP (0.56 g，4.59 mmol)。接著，向反應物中添加二碳酸二三級丁酯(4.91 mL，22.97 mmol)，且在室溫下攪拌18小時。TLC (PE/EA = 5/1)顯示起始物質耗盡，且偵測到一個主要斑點。濃縮反應物且藉由矽膠用PE/EA = 5/1純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2.4 g, 76%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：710 [M+Na] +。
步驟 2 ：在室溫下向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2.4 g, 3.48 mmol)於THF (50 mL)中之溶液中添加TBAF (8.4 mL，1 M於THF中)。將反應物在室溫下攪拌1小時。TLC顯示起始物質耗盡，且偵測到一個主要斑點。濃縮反應物且藉由矽膠用PE/EA = 1/1純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.3 g, 93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：472 [M+Na] +。
步驟 3 ：在0℃下向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯(200 mg, 0.44 mmol)於DMF (6 mL)中之溶液中添加NaH (35.6 mg，0.89 mmol，60重量%於礦物油中)。接著將反應物在0℃下攪拌30分鐘。接著添加2-(2-(2-(2-(甲苯磺醯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯(150.9 mg, 0.40 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時。LCMS顯示起始物質耗盡且偵測到所需質量。反應物接著用NH 4Cl淬滅且用EA萃取。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，且藉由矽膠用DCM/MeOH = 7/3純化，得到粗產物(60 mg)。接著粗物質藉由製備型HPLC純化，得到1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸( A16，18.5 mg, 7%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：540 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 8.60 (s, 1H), 7.96 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 4.10-4.17 (m, 3H), 3.50 - 3.80 (m, 17H), 3.00-3.20 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.25 (s, 3H)。
A17 ： 2-(4-((((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 ) 甲氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 ) 乙酸及 A19 ： 2-(4-((((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 ) 乙酸之製備
Figure 02_image1430
步驟 1 ：在室溫下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(4 g, 6.8 mmol)於DCM (40 mL)中之溶液中添加TEA (137 mg，13.6 mmol)、DMAP (83 mg，0.68 mmol)及Boc 2O (7.4 g，34 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基甲酸三級丁酯(4 g, 87%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：688 [M+H] +。
步驟 2 ：向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基甲酸三級丁酯(4 g, 5.8 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中添加TBAF (11.6 mL，1 M於THF中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈白色固體狀之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2 g, 77%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：450 [M+H] +。
步驟 3 ：在0℃下向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)(6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基甲酸三級丁酯(100 mg, 0.22 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加NaH (18 mg，0.45 mmol，60重量%於礦物油中)。1小時後，向溶液中添加2-(4-(溴甲基)苯氧基)乙酸甲酯(75 mg，0.29 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌12小時。將混合物用H 2O淬滅且用EA萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾。濃縮濾液且藉由C18純化，得到呈固體狀之2-(4-((((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲氧基)甲基)苯氧基)乙酸( A17，15 mg, 13%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：514 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.81 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.68 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 4.61 - 4.48 (m, 3H), 4.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 3.91 - 3.70 (m, 4H), 3.60 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.32 (s, 3H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -69.91。
步驟 4 ：向2-(4-((((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲氧基)甲基)苯氧基)乙酸(9.2 mg, 0.02 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (0.1 mL，2 N)。將混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物且藉由C18純化，得到呈白色固體狀之2-(4-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲氧基)甲基)苯氧基)乙酸( A19，5 mg, 57%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：474 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.24 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.24 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.93 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.97 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.89 (dd, J = 10.8, 5.0 Hz, 1H), 3.73 (dd, J = 11.4, 7.1 Hz, 1H), 3.66 (dd, J = 11.4, 4.9 Hz, 1H), 3.45 - 3.41 (m, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.04。
A20 ： 1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸之製備
Figure 02_image1432
Figure 02_image1434
步驟 1 ：在H 2氣球下在室溫下，向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(230 mg，0.42 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (20 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌0.5小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：525 [M+H] +。
步驟 2 ：將15-((2-羧乙氧基)甲基)-3,13-二側氧基-1-苯基-2,5,8,11,17-五氧雜-14-氮雜二十烷-20-酸(75 mg，0.14 mmol)、DIPEA (0.1 mL，0.57 mmol)及HATU (118.5 mg，0.31 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(163.4 mg, 0.31 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(120 mg, 55%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1543 [M+H] +。
步驟 3 ：在H 2氣球下在室溫下，向1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(120 mg, 0.08 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (12 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌2小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-15% MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(A20，50 mg, 44%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1453 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 2H), 8.02 (s, 2H), 4.33 - 4.25 (m, 4H), 4.22 - 4.18 (m, 1H), 4.14 (dd, J= 8.8, 5.0 Hz, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dd, J= 12.2, 6.5 Hz, 6H), 3.75 - 3.62 (m, 40H), 3.57 - 3.51 (m, 8H), 3.38 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.14 (t, J= 11.2 Hz, 2H), 2.46 (t, J= 6.1 Hz, 4H), 1.50 (s, 6H), 1.33 (s, 6H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.31 (s)。
A21 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(13- 疊氮基 -2,5,8,11- 四氧雜十三烷基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1436
步驟 1 ：在N 2氛圍下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(200 mg，0.55 mmol)及DIPEA (209 mg，1.65 mmol)於無水DMF (20 mL)中之溶液中添加2-氯-6-(三氟甲基)吡𠯤(199 mg，1.1 mmol)及CsF (166 mg，1.1 mmol)。在添加完成之後，將反應物在100℃下攪拌過夜。在起始物質耗盡(TLC監測)時，將反應容器冷卻至室溫。將混合物減壓濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A21，150 mg, 54%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：511 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.33 (td, J = 10.5, 5.1 Hz, 1H), 4.12 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.74 - 3.53 (m, 19H), 3.36 (dd, J = 9.4, 4.6 Hz, 2H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 1H)。
A22 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27- 七氧雜 -14,21- 二氮雜二十九烷 -29- 酸之製備
Figure 02_image1438
Figure 02_image1440
步驟 1 ：將2,2'-(乙烷-1,2-二基雙(氧基))二乙酸(1.0 g，5.62 mmol)及TEA (1.0 g，9.9 mmol)溶解於DMF (10 mL)中，且將混合物冷卻至0℃。向此溶液中添加溶解於DMF (10 mL)中之苯甲基溴(860 mg，5.03 mmol)。接著將混合物在室溫下攪拌16小時。移除溶劑，將殘餘物溶解於1 M HCl中且藉由EA萃取，經Na 2SO 4乾燥。殘餘物藉由矽膠(PE:EA = 1:2)純化，得到2-(2-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸(350 mg，26%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：269 [M+H] +。
步驟 2 ：向2-(2-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸(5.8 mg，0.02 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液中添加HATU (12.3 mg，0.03 mmol)及DIPEA (39.42 mg，0.06 mmol)。將混合物在0℃下攪拌0.5小時。接著添加含3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (21.2 mg, 0.02 mmol)之DMF (0.5 mL)。將混合物在室溫下攪拌16小時。反應混合物藉由製備型HPLC直接純化，得到1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸苯甲酯(10 mg, 39%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：710 [M+2H] 2+。
步驟 3 ：向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸苯甲酯(15 mg, 0.01 mmol)於THF/H 2O (3:1，4 mL)中之溶液中添加LiOH·H 2O (3 mg，0.07 mmol)。接著將混合物在室溫下攪拌2小時。移除溶劑，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸( A22，7.2 mg, 51%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：665 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 8.17 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 7.61 (s, 2H), 6.76 (s, 2H), 4.28 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 4.11 (d, J = 52.9 Hz, 9H), 3.81 - 3.51 (m, 43H), 3.44 (d, J = 26.8 Hz, 8H), 3.10 (t, J = 10.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.01 (s, 1H), 1.26 (s, 2H)。
A23 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸之製備
Figure 02_image1442
步驟 1 ：向1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(110 mg, 0.08 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (1 mL，2 N於H 2O中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(A23，53 mg, 51%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1373 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J= 4.5 Hz, 2H), 6.90 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 4.36 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 4.23 - 4.18 (m, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 4H), 4.01 (s, 2H), 3.92 (d, J= 2.5 Hz, 2H), 3.74 - 3.60 (m, 44H), 3.57 - 3.50 (m, 8H), 3.38 (t, J= 5.4 Hz, 4H), 3.17 (t, J= 10.9 Hz, 2H), 2.46 (t, J= 6.1 Hz, 4H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.30 (s)。
A24 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27- 七氧雜 -14,21- 二氮雜二十九烷 -29- 酸之製備
Figure 02_image1444
步驟 1 ：在室溫下向12-((2-羧乙氧基)甲基)-3,10-二側氧基-1-苯基-2,5,8,14-四氧雜-11-氮雜十七烷-17-酸(200 mg，0.41 mmol)及HATU (467 mg，1.23 mmol)於DMF (20 mL)中之溶液中添加DIPEA (209 mg，1.65 mmol)及(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(440 mg, 0.9 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。分離所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(C18，0~60%，MeOH/H 2O)純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸苯甲酯(400 mg, 68%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1419 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸苯甲酯(400 mg, 0.28 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中添加LiOH·H 2O (14 mg，0.56 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。分離所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(C18，0~40%，MeOH/H 2O)純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸( A24，300 mg, 80%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1329 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 4.33 (td, J = 10.8, 5.4 Hz, 2H), 4.19 (dd, J = 14.8, 9.5 Hz, 1H), 4.16 - 4.07 (m, 4H), 4.01 (s, 2H), 3.92 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 3.79 - 3.45 (m, 48H), 3.37 (t, J = 5.4 Hz, 4H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 2.45 (t, J = 6.1 Hz, 4H)。
A25 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 酸之製備
Figure 02_image1446
步驟 1 ：在室溫下向1-((2R,3R,4R,5S)-5-胺基-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(100 mg，0.28 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(52 mg，0.28 mmol)及DIEA (0.14 mL，0.85 mmol)。將反應物在室溫下攪拌18小時。直接濃縮反應物，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸( A25，10 mg, 7%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：450 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 4.31-4.41 (m, 1H), 4.07-4.10 (m, 3H), 3.91 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 3.55-3.75(m, 16H), 3.17 (t, J= 11.2, 1H)。
A26 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸之製備
Figure 02_image1448
Figure 02_image1450
步驟 1 ：在H 2氣球下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(300 mg，0.59 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加Pd/C (30 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌0.5小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：485 [M+H] +。
步驟 2 ：將15-((2-羧乙氧基)甲基)-3,13-二側氧基-1-苯基-2,5,8,11,17-五氧雜-14-氮雜二十烷-20-酸(125 mg，0.24 mmol)、DIPEA (0.16 mL，0.94 mmol)及HATU (197 mg，0.52 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(296 mg, 0.52 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(250 mg, 0.17 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：1463 [M+H] +。
步驟 3 ：在室溫下向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(250 mg, 0.17 mmol)於THF (5 mL)及H 2O (1.5 mL)中之溶液中添加LiOH (21.5 mg，0.51 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。用2 N HCl將反應物調節至酸性。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(A26，160 mg, 68%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1373 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ: 8.12 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 4.34 (td, J= 10.6, 5.1 Hz, 2H), 4.23 - 4.18 (m, 1H), 4.14 - 4.09 (m, 4H), 4.00 (s, 2H), 3.93 (d, J= 2.4 Hz, 2H), 3.73 - 3.61 (m, 44H), 3.57 - 3.50 (m, 8H), 3.38 (t, J= 5.4 Hz, 4H), 3.12 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 2.45 (t, J= 6.1 Hz, 4H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.26 (s)。
A27 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 酸之製備
Figure 02_image1452
步驟 1 ：在室溫下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(7 g，14.53 mmol)於DCM (70 mL)中之溶液中添加TEA (2.06 mL，14.83 mmol)、DMAP (0.12 g，0.98 mmol)及二碳酸二三級丁酯(3.17 mL，14.83 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之乙醯基((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(7 g, 83%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：584 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向乙醯基((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(7 g，11.9 mmol)於THF (70 mL)中之溶液中添加NaOH (40%，10 mL，59.9 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，緩慢添加水(20 mL)。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(20 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(6 g, 93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：542 [M+H] +。
步驟 3 ：向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(6 g, 11 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中添加TBAF溶液(22 mL，1 M於THF中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析(矽膠，0-10% DCM/MeOH)純化，得到呈白色固體狀之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(2.5 g, 76%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：304 [M+H] +。
步驟 4 ：在0℃下向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(2.5 g，8.2 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液中添加NaH (0.47 g，60重量%於礦物油中，12.3 mmol)及2-(2-(2-(2-(甲苯磺醯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯(2.6 g，7.38 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將反應容器再次冷卻至0℃，緩慢添加水(10 mL)，且攪拌反應混合物15分鐘。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(20 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之1-((3aR,4R,7S,7aR)-7-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(2.0 g, 51%)。LC-MS (ESI)實驗值：494 [M+H] +。
步驟 5 ：在室溫下向1-((3aR,4R,7S,7aR)-7-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(2.0 g，4.0 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4 mL，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物減壓濃縮，得到呈無色油狀物之粗物質1-((2R,3R,4R,5S)-5-胺基-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(1.0 g, 71%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：354 [M+H] +。
步驟 6 ：在N 2氛圍下在室溫下，向1-((2R,3R,4R,5S)-5-胺基-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(200 mg，0.55 mmol)及DIPEA (209 mg，1.65 mmol)於無水DMF (10 mL)中之溶液中添加2,4-二氯-6-甲氧基嘧啶(199 mg，1.1 mmol)。在添加完成之後，將反應物在100℃下攪拌過夜。在起始物質耗盡(TLC監測)時，將反應容器再次冷卻至室溫。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(20 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸( A27，10 mg, 3.5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：500 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.33 (td, J = 10.6, 5.2 Hz, 1H), 4.17 - 4.06 (m, 3H), 3.92 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.74 - 3.52 (m, 16H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 1H)。
A28 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24- 六氧雜 -14,21- 二氮雜二十六烷 -26- 酸之製備
Figure 02_image1454
Figure 02_image1456
步驟 1 ：將1,4-二㗁烷-2,6-二酮(4.0 g，34.5 mmol)溶解於DCM (40 mL)中且添加BnOH (3.7 g，34.5 mmol)，接著添加TEA (3.48 g，34.5 mmol)。接著將混合物在室溫下攪拌4小時。移除溶劑，且殘餘物藉由矽膠管柱純化，得到2-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基)乙酸(3.5 g，45%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：225 [M+H] +。
步驟 2 ：向2-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基)乙酸(42 mg，0.19 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中添加HATU (107 mg，0.28 mmol)及DIPEA (72 mg，0.56 mmol)。將混合物在0℃下攪拌0.5小時。接著添加含3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (200 mg, 0.17 mmol)之DMF (0.5 mL)。將混合物在室溫下攪拌16小時。反應混合物藉由C18管柱直接純化，得到1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸苯甲酯(140 mg, 60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1375 [M+H] +。
步驟 3 ：向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸苯甲酯(140 mg, 0.10 mmol)於THF/H 2O (3:1，4 mL)中之溶液中添加LiOH·H 2O (7 mg，0.17 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。移除溶劑，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸( A28，65 mg, 50%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1285 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 4.36 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 4.19 (d, J = 9.6 Hz, 3H), 4.13 - 4.03 (m, 4H), 3.92 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 3.75 - 3.49 (m, 44H), 3.37 (t, J = 5.3 Hz, 4H), 3.16 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.45 (t, J = 6.0 Hz, 4H)。
A29 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24- 六氧雜 -14,21- 二氮雜二十六烷 -26- 酸之製備
Figure 02_image1458
Figure 02_image1460
步驟 1 ：將2-[2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基]乙酸(50 mg，0.22 mmol)、DIPEA (0.1 mL，0.67 mmol)及HATU (101.8 mg，0.27 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (261 mg, 0.22 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由C18管柱純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸苯甲酯(160 mg, 0.12 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：1375 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸苯甲酯(160 mg, 0.12 mmol)於THF (4 mL)及H 2O (2 mL)中之溶液中添加LiOH·H 2O (15 mg，0.35 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。用2 N HCl將反應物調節至酸性。濃縮混合物，且粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸(A29，117 mg, 78%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1285 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.12 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 4.34 (td, J= 10.6, 5.1 Hz, 2H), 4.19 (d, J= 6.2 Hz, 3H), 4.14 - 4.08 (m, 4H), 3.93 (d, J= 2.9 Hz, 2H), 3.72 - 3.61 (m, 36H), 3.53 (dt, J= 12.2, 4.8 Hz, 8H), 3.37 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.12 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 2.45 (t, J= 6.1 Hz, 4H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.26 (s)。
A30 ： 2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙酸之製備
Figure 02_image1462
步驟 1 ：在室溫下向2-(2-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸(69 mg，0.26 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加HATU (148 mg，0.39 mmol)及DIPEA (33 mg，0.26 mmol)。在室溫下攪拌20分鐘之後，添加(2R,3R,4R,5S)-2-(胺基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(80 mg, 0.26 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到呈黃色油狀物之2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸苯甲酯(100 mg, 69%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：559 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸苯甲酯(100 mg, 0.18 mmol)於THF (2 mL)及H 2O (2 mL)中之溶液中添加LiOH·H 2O (15 mg，0.36 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著用HCl (1 N)酸化至pH = 3。濃縮混合物，且殘餘物藉由C18管柱純化，得到呈白色固體狀之2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸(A30，54 mg, 66%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：469 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.32 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 4.16 - 4.08 (m, 3H), 4.02 (s, 2H), 3.86 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 3.75 - 3.70 (m, 4H), 3.64 (dd, J= 10.6, 3.2 Hz, 1H), 3.55 (dd, J= 14.8, 8.4 Hz, 2H), 3.43 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 3.11 (d, J= 10.8 Hz, 1H)。
A31 ： (1,39- 雙 ((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15,25- 二側氧基 -2,5,8,11,18,22,29,32,35,38- 十氧雜 -14,26- 二氮雜三十九烷 -20- 基 ) 甘胺酸之製備
Figure 02_image1464
Figure 02_image1466
步驟 1 ：在N 2下在室溫下，向3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (1.1 g, 0.94 mmol)及2-側氧基乙酸乙酯(0.56 mL，2.83 mmol)於EtOH (8 mL)中之溶液中添加AcOH (0.03 mL，0.47 mmol)。將反應物在室溫下攪拌3小時。在0℃下添加NaBH(OAc) 3(595.9 mg, 2.83 mmol)。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)甘胺酸乙酯(850 mg, 72%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1255 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)甘胺酸乙酯(1 g, 0.8 mmol)於THF (6 mL)及H 2O (3 mL)中之溶液中添加LiOH·H 2O (0.1 g，2.4 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。用2 N HCl將反應物調節至pH = 6。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)甘胺酸( A31，600 mg, 62%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1227 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.13 (s, 2H), 7.99 (s, 2H), 4.33 (td, J = 10.5, 5.1 Hz, 2H), 4.12 (dd, J = 11.0, 5.1 Hz, 2H), 3.88 (dd, J = 38.8, 7.4 Hz, 2H), 3.79 - 3.49 (m, 43H), 3.44 - 3.35 (m, 4H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 2.49 (t, J = 5.8 Hz, 4H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.20 (s)。
A32 ： 3-((((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 胺基 )-3- 側氧基丙酸之製備
Figure 02_image1468
步驟 1 ：將3-(三級丁氧基)-3-側氧基丙酸(272.5 mg, 1.72 mmol)及HATU (818.7 mg，2.15 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌2小時。向上述混合物中添加N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(500 mg, 1.46 mmol)及DIEA (371.04 mg, 1.87 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應混合物。殘餘物藉由急驟層析(EA/PE = 1:1)純化，得到呈棕色油狀物之3-((((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)胺基)-3-側氧基丙酸三級丁酯(600 mg, 85%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：489 [M+H] +。
步驟 2 ：將3-((((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)胺基)-3-側氧基丙酸三級丁酯(800 mg, 1.64 mmol)及HCl水溶液(5 mL，2 N於H 2O中)於THF (3 mL)中之溶液在室溫下攪拌過夜。濃縮反應混合物。殘餘物藉由逆相急驟層析(5%至30%之MeOH/水)純化，得到3-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)-3-側氧基丙酸( A32，274 mg, 42%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：395 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.32 (td, J= 10.5, 5.1 Hz, 1H), 4.12 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.87 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.64 (dd, J= 10.6, 3.1 Hz, 1H), 3.59 - 3.50 (m, 2H), 3.37 - 3.33 (m, 1H), 3.29 (s, 2H), 3.10 (t, J= 10.8 Hz, 1H)。
A33 ： 3-((1,15- 雙 ((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-3,13- 二側氧基 -6,10- 二氧雜 -2,14- 二氮雜十五烷 -8- 基 ) 胺基 )-3- 側氧基丙酸之製備
Figure 02_image1470
Figure 02_image1472
步驟 1 ：在室溫下向3,3'-((2-(3-(苯甲氧基)-3-側氧基丙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(100 mg，0.24 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加HATU (277 mg，0.73 mmol)及DIPEA (125 mg，0.97 mmol)。在室溫下攪拌20分鐘之後，添加N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(186 mg, 0.54 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到呈白色固體狀之3-((1,15-雙((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-3,13-二側氧基-6,10-二氧雜-2,14-二氮雜十五烷-8-基)胺基)-3-側氧基丙酸苯甲酯(150 mg, 58%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1072 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向3-((1,15-雙((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-3,13-二側氧基-6,10-二氧雜-2,14-二氮雜十五烷-8-基)胺基)-3-側氧基丙酸苯甲酯(150 mg, 0.14 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (0.5 mL，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到呈白色固體狀之3-((1,15-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-3,13-二側氧基-6,10-二氧雜-2,14-二氮雜十五烷-8-基)胺基)-3-側氧基丙酸苯甲酯(100 mg, 72%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：992 [M+H] +。
步驟 3 ：將3-((1,15-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-3,13-二側氧基-6,10-二氧雜-2,14-二氮雜十五烷-8-基)胺基)-3-側氧基丙酸苯甲酯(100 mg, 0.10 mmol)、NH 4OH (0.1 mL)及Pd/C (10 mg，10重量%，60%濕潤)於MeOH (3 mL)中之溶液在H 2氣球下在室溫下攪拌30分鐘。經由矽藻土墊過濾混合物，且濃縮濾液，得到粗產物。粗產物藉由急驟純化，得到呈白色固體狀之3-((1,15-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-3,13-二側氧基-6,10-二氧雜-2,14-二氮雜十五烷-8-基)胺基)-3-側氧基丙酸( A33，27 mg, 30%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：902 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 2H), 7.98 (s, 2H), 4.32 (td, J= 10.6, 5.2 Hz, 2H), 4.16 - 4.06 (m, 3H), 3.86 (s, 2H), 3.76 - 3.64 (m, 7H), 3.52 (t, J= 7.0 Hz, 8H), 3.34 (s, 2H), 3.24 (s, 1H), 3.11 (s, 2H), 2.46 (d, J= 5.4 Hz, 4H)。
A34 ： 1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十四烷 -24- 酸之製備
Figure 02_image1474
Figure 02_image1476
步驟 1 ：將3-(苯甲氧基)-3-側氧基丙酸(2.3 g，11.8 mmol)、DIPEA (5.9 mL，35.5 mmol)及HATU (6.76 g，17.8 mmol)於DMF (25 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸二三級丁酯(4.12 g, 11.8 mmol)。將反應物在室溫下攪拌過夜。混合物用DCM (200 mL)稀釋，用H 2O (60 mL × 2)及鹽水(60 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。將混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-20% EA/PE)純化，得到呈無色油狀物之3,3'-((2-(3-(苯甲氧基)-3-側氧基丙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸二三級丁酯(850 mg, 14%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：525 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向3,3'-((2-(3-(苯甲氧基)-3-側氧基丙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸二三級丁酯(850 mg, 1.6 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中添加TFA (3 mL，40.4 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之3,3'-((2-(3-(苯甲氧基)-3-側氧基丙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(260 mg, 37%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：412 [M+H] +。
步驟 3 ：將3,3'-((2-(3-(苯甲氧基)-3-側氧基丙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))二丙酸(160 mg, 0.4 mmol)、DIPEA (0.321 mL，1.945 mmol)及HATU (443.6 mg，1.2 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(414.5 mg, 0.9 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十四烷-24-酸苯甲酯(210 mg, 50%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1345 [M+H] +。
步驟 4 ：在室溫下向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十四烷-24-酸苯甲酯(210 mg, 0.2 mmol)於THF (6 mL)及H 2O (2 mL)中之溶液中添加LiOH.H 2O (20 mg，0.5 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。用2 N HCl將反應物調節至酸性。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十四烷-24-酸( A34，96 mg, 49%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1255 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.12 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 4.34 (td, J= 10.4, 5.1 Hz, 2H), 4.12 (dd, J= 10.7, 5.0 Hz, 3H), 3.93 (d, J= 2.6 Hz, 2H), 3.74 - 3.59 (m, 38H), 3.57 - 3.47 (m, 8H), 3.38 (t, J= 5.3 Hz, 4H), 3.12 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 2.45 (t, J= 5.9 Hz, 4H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.26 (s)。
A35 ： 2-(4-((4-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 哌 𠯤 -1- 基 ) 甲基 ) 苯氧基 ) 乙酸之製備
Figure 02_image1478
步驟 1 ：向2-(4-(溴甲基)苯氧基)乙酸甲酯(300 mg，1.158 mmol)於CH 3CN (3 mL)中之溶液中添加哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(259 mg，1.389 mmol)及TEA (0.5 mL，3.597 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時且藉由LC-MS確保完成。接著將其濃縮且藉由10% MeOH/DCM純化，得到呈白色固體狀之4-(4-(2-甲氧基-2-側氧基乙氧基)苯甲基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(400 mg, 95%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：365 [M+H] +。
步驟 2 ：向4-(4-(2-甲氧基-2-側氧基乙氧基)苯甲基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(400 mg, 1.098 mmol)於DCM (4 mL)中之溶液中添加TFA (80 μL，1.077 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。接著將其濃縮，得到呈無色油狀物之粗物質2-(4-(哌𠯤-1-基甲基)苯氧基)乙酸甲酯(250 mg, 86%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：265 [M+H] +。
步驟 3 ：向2-(4-(哌𠯤-1-基甲基)苯氧基)乙酸甲酯(250 mg, 0.946 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(160 mg, 0.318 mmol)、K 2CO 3(44 mg, 0.318 mmol)及NaI (48 mg, 0.318 mmol)。將反應物在80℃下攪拌3天。移除溶劑，且殘餘物藉由50% MeOH/DCM純化，得到呈無色油狀物之2-(4-((4-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)苯氧基)乙酸(100 mg, 54%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：581 [M+H] +。
步驟 4 ：向2-(4-((4-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)苯氧基)乙酸(100 mg, 0.172 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (20 μL，2 N於H 2O中)。攪拌反應物2小時且藉由LCMS確保完成。接著將其濃縮，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之2-(4-((4-(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)苯氧基)乙酸( A35，45 mg, 48%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：541 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.30 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.95 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 4.32 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.14 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 2H), 3.87 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 3.86 (s, 1H), 3.70 (dd, J = 30.3, 18.1 Hz, 3H), 3.13 (t, J = 11.0 Hz, 3H), 2.92 (s, 8H)。
A36 ： 3-[[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-[[6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 胺基 ]-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ] 甲氧基 ] 乙氧基 ] 乙氧基 ] 乙氧基 ] 乙基胺基 ]-3- 側氧基 - 丙氧基 ]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-[[6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 胺基 ]-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ] 甲氧基 ] 乙氧基 ] 乙氧基 ] 乙氧基 ] 乙基胺基 ]-3- 側氧基 - 丙氧基 ] 甲基 ] 乙基 ] 胺基 ]-3- 側氧基 - 丙酸之製備
Figure 02_image1480
Figure 02_image1482
步驟 1 ：在20℃下將HATU (617.65 mg，1.62 mmol，3 eq)之溶液添加至3-[2-(苯甲氧羰基胺基)-3-(2-羧乙氧基)丙氧基]丙酸(200 mg，541.47 µmol，1 eq)、N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-[2-[2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基甲基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-7-基]-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(839.17 mg，1.25 mmol，82%純度，2.3 eq)及DIPEA (279.92 mg，2.17 mmol，377.25 µL，4 eq)於DMF (8 mL)中之混合物中，接著將混合物在20℃下攪拌1小時。LCMS顯示化合物1耗盡，且偵測到所需質量。混合物藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 200*40 mm*10 µm；移動相：[水(FA)-ACN]；B%：30%-70%，8 min)純化。獲得呈白色固體狀之N-[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基甲酸苯甲酯(250 mg, 173.80 μmol, 32.10%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：720.0 [M/2+H] +。
步驟 2 ：在N 2下向N-[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基甲酸苯甲酯(250 mg, 173.80 µmol, 1 eq)於MeOH (20 mL)中之溶液中添加Pd/C (100 mg，10%純度)。將懸浮液真空脫氣且用H 2吹掃若干次。將混合物在H 2(15 psi)下在20℃下攪拌4小時。過濾混合物且濃縮濾液。獲得呈白色固體狀之3-[2-胺基-3-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]丙氧基]-N-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基]丙醯胺(200 mg，粗物質)。LC-MS (ESI)實驗值：652.9 [M/2+H] +。
步驟 3 ：在20℃下將HATU (64.14 mg, 168.68 µmol, 2 eq)之溶液添加至3-[2-胺基-3-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]丙氧基]-N-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基]丙醯胺(110 mg, 84.34 µmol, 1 eq)、3-乙氧基-3-側氧基-丙酸(13.37 mg, 101.21 µmol, 1.2 eq)及DIEA (21.80 mg, 168.68 µmol, 29.38 µL, 2 eq)於DMF (2 mL)中之混合物中。接著將混合物在20℃下攪拌1小時。LCMS顯示化合物4耗盡且偵測到所需化合物。將水(10 ml)添加至混合物中，且用EtOAc (10 mL × 2)萃取。合併之有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥且過濾。將濾液減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，EtOAc:MeOH = 10:1)純化。獲得呈白色固體狀之3-[[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基]-3-側氧基-丙酸乙酯(100 mg, 70.50 µmol, 83.60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：710.0 [M/2+H] +。
步驟 4 ：在20℃下將NaOH/H 2O (1 M，112.80 µL，2 eq)之溶液添加至3-[[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基]-3-側氧基-丙酸乙酯(80 mg, 56.40 µmol, 1 eq)於THF (1 mL)中之溶液中，接著將混合物在20℃下攪拌1小時。3-[[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基]-3-側氧基-丙酸(78 mg，粗物質)於THF (1 mL)中之混合物(黃色液體)不經處理即直接用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：696.0 [M/2+H] +。
步驟 5 ：在20℃下將HCl (2 M，1 mL, 35.65 eq)之溶液添加至3-[[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-7-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0 2,6]十一烷-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基]-3-側氧基-丙酸(78 mg, 56.10 µmol, 1 eq)於THF (1 mL)中之溶液中，且攪拌2小時。混合物藉由製備型HPLC純化。獲得呈無色油狀物之3-[[2-[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-4-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]-1-[[3-[2-[2-[2-[2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-4-[[6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]胺基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基-丙氧基]甲基]乙基]胺基]-3-側氧基-丙酸( A36，32 mg, 22.48 µmol, 40.08%產率，92.06%純度)。 1H NMR (400 MHz, 甲醇- d 4) δ ppm 8.17 (s, 2 H) 8.01 (s, 2 H) 5.35 (d, J=1.22 Hz, 2 H) 4.20 (d, J=9.90 Hz, 2 H) 4.10 - 4.17 (m, 1 H) 4.01 (d, J=9.54 Hz, 2 H) 3.96 (d, J=4.28 Hz, 2 H) 3.81 - 3.87 (m, 4 H) 3.60 - 3.74 (m, 33 H) 3.46 - 3.58 (m, 8 H) 3.38 (t, J=5.38 Hz, 4 H) 2.45 (t, J=6.05 Hz, 4 H)。
A37 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 羥甲基 )-4-((3-( 三氟甲基 )-1H- 吡唑并 [3,4-d] 嘧啶 -6- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1484
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及6-氯-3-(三氟甲基)-2H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(174.62 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A37 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥甲基)-4-((3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：84 mg，43.1%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：378 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.86 (s, 1H), 5.47 (br s, 1H), 4.27 (br s, 1H), 4.02 - 3.81 (m, 6H), 3.74 (d, J=7.9 Hz, 1H)。
A38 ： 2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ] 胺基 ]-6- 甲基 - 嘧啶 -4- 甲腈之製備
Figure 02_image1486
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2-氯-6-甲基-嘧啶-4-甲腈(120.49 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙基酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A38 ：2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]胺基]-6-甲基-嘧啶-4-甲腈，產率：60.8 mg, 37.7%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：309 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 6.92 (br s, 1H), 5.37 (br s, 1H), 4.22 (br s, 2H), 4.04 - 3.65 (m, 7H), 2.40 (br s, 3H)。
A39 ： 3-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ] 胺基 ] 嗒 𠯤 -4- 甲腈之製備
Figure 02_image1488
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及3-氯嗒𠯤-4-甲腈(109.48 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A39 ：3-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]胺基]嗒𠯤-4-甲腈，產率：28.5 mg, 18.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：295 [M+H]+。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.67 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.74 (d, J=4.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.56 (dd, J=1.4, 9.9 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=4.3, 9.8 Hz, 1H), 4.01 - 3.95 (m, 2H), 3.91 - 3.85 (m, 2H), 3.76 (d, J=7.9 Hz, 1H)。
A40 ： 2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ] 胺基 ]-5- 氟 - 吡啶 -3- 甲腈及 A41 ： 2- 氯 -5-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ] 胺基 ] 吡啶 -3- 甲腈之製備
Figure 02_image1490
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2-氯-5-氟-吡啶-3-甲腈(122.82 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A40 ： 2-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ] 胺基 ]-5- 氟 - 吡啶 -3- 甲腈，產率：20.13 mg, 12.36%，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：312 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.23 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.78 (dd, J=3.1, 7.9 Hz, 1H), 5.40 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.34 (br d, J=8.1 Hz, 1H), 4.00 - 3.91 (m, 4H), 3.88 - 3.82 (m, 2H), 3.73 (d, J=8.0 Hz, 1H)。 A41 ： 2- 氯 -5-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ] 胺基 ] 吡啶 -3- 甲腈，產率：9.5 mg, 5.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：328 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.08 (d, J=3.1 Hz, 1H), 7.50 (d, J=3.1 Hz, 1H), 5.31 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.00 - 3.90 (m, 2H), 3.87 - 3.71 (m, 5H), 3.63 - 3.57 (m, 1H)。
A42 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-[[3- 氟 -4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 胺基 ]-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇及 A43 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-[[2- 氯 -4-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ] 胺基 ]-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1492
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2-氯-3-氟-4-(三氟甲基)吡啶(156.13 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。A116：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-[[3-氟-4-(三氟甲基)-2-吡啶基]胺基]-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：8 mg, 4.3%，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：355 [M+H]+。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.03 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J=5.1 Hz, 1H), 5.44 (d, J=1.1 Hz, 1H), 4.35 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 3.97 - 3.91 (m, 1H), 3.86 - 3.74 (m, 6H)。 A117 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-[[2-氯-4-(三氟甲基)-3-吡啶基]胺基]-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：20 mg, 10.3%，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：371 [M+H]+。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 7.98 (d, J=5.3 Hz, 1H), 6.76 (t, J=4.8 Hz, 1H), 5.40 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.34 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 3H), 3.88 - 3.82 (m, 2H), 3.73 (d, J=7.9 Hz, 1H)。
A44 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-[(2,5- 二氯 -3- 吡啶基 ) 胺基 ]-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1494
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2,5-二氯-3-氟-吡啶(130.23 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A44 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-[(2,5-二氯-3-吡啶基)胺基]-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇， 產率：12.9 mg, 7.3%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：337 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 7.62 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J=2.1 Hz, 1H), 5.32 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 3H), 3.89 - 3.83 (m, 4H), 3.76 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.72 - 3.66 (m, 1H)。
A45 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-( 苯并 [d] 㗁唑 -2- 基胺基 )-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1496
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2-氯-1,3-苯并㗁唑(120.49 mg，784.60 μmol，89.25 μL)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A45 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(苯并[d]㗁唑-2-基胺基)-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：38.13 mg, 23.65%產率，淺黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：309 [M+H] +。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 7.41 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.37 - 7.33 (m, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 1H), 7.24 - 7.18 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 2H), 3.92 (d, J=1.8 Hz, 2H), 3.89 - 3.83 (m, 2H), 3.76 (d, J=8.1 Hz, 1H)。
A46 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 羥甲基 )-4-((4- 甲氧基 -6-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1498
步 驟 1 ：將(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(50 mg，0.26 mmol)、2-氯-4-甲氧基-6-(三氟甲基)嘧啶(164 mg，0.78 mmol)及DIPEA (169 mg，1.3 mmol)於i-PrOH (1 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型TLC純化，得到呈黃色固體狀之(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥甲基)-4-((4-甲氧基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇( A46，12 mg, 13%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：368 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 6.34 (s, 1H), 5.40 (s, 1H), 4.20 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.04 - 3.89 (m, 5H), 3.87 - 3.77 (m, 3H), 3.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H)。
A47 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 羥甲基 )-4-((6- 甲氧基 -2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1500
步驟 1 ：將(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(50 mg，0.26 mmol)、2-氯-4-甲氧基-6-(三氟甲基)嘧啶(164 mg，0.78 mmol)及DIPEA (169 mg，1.3 mmol)於i-PrOH (1 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型TLC純化，得到呈黃色固體狀之(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥甲基)-4-((6-甲氧基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇( A47，6 mg, 7%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：368 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 5.97 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.24 (d, J = 21.2 Hz, 1H), 3.96 - 3.88 (m, 5H), 3.85 - 3.76 (m, 3H), 3.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H)。
A48 ： 2-(((3S,4R,5R,6R)-4,5- 二羥基 -6-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 胺基 )-6- 甲氧基嘧啶 -4- 羧醯亞胺酸甲酯之製備
Figure 02_image1502
步驟 1 ：在N 2氛圍下在室溫下，向2-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-6-甲氧基嘧啶-4-甲腈(30 mg，0.01 mol)於MeOH (5 mL)中之經攪拌溶液中添加CH 3ONa (36 mg，0.2 mmol)。在添加完成之後，將反應物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，真空濃縮混合物。粗產物藉由製備型HPLC在鹼性條件下直接純化，得到呈白色固體狀之2-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-6-甲氧基嘧啶-4-甲酸甲酯( A48，1.5 mg, 5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：329 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 6.43 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.13 (dd, J = 11.0, 5.3 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 23.7 Hz, 4H), 3.73 (ddd, J = 16.4, 11.4, 6.1 Hz, 2H), 3.63 (dd, J = 10.6, 3.2 Hz, 1H), 3.51 - 3.40 (m, 1H), 3.36 - 3.30 (m, 3H), 3.14 (dd, J = 12.8, 9.0 Hz, 1H)。
A49 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-( 吡咯并 [2,1-f][1,2,4] 三 𠯤 -4- 基胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1504
步驟 1 ：向(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三𠯤-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(50 mg，0.20 mmol)於甲醇(3 mL)中之溶液中添加Pd/C (5 mg，10% wt，60%濕潤)。將混合物在H 2氣球下在室溫下攪拌過夜。過濾之後，濃縮溶劑，且殘餘物藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-(吡咯并[2,1-f][1,2,4]三𠯤-4-基胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A49，7.1 mg, 16%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：281 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.80 (s, 1H), 7.49 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 6.87 (dd, J = 4.3, 1.2 Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 4.3, 2.7 Hz, 1H), 4.65 (td, J = 10.7, 5.2 Hz, 1H), 4.12 (dd, J = 11.0, 5.3 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.75 (dtd, J = 16.4, 11.4, 6.0 Hz, 3H), 3.58 - 3.44 (m, 1H), 3.26 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。
A50 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-5- 疊氮基 -2-( 羥甲基 )-6- 甲基四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1506
步驟 1 ：在0℃下向(2R,3R,4R)-3,4-雙(苯甲氧基)-2-((苯甲氧基)甲基)-3,4-二氫-2H-哌喃(5 g，12.00 mmol)及TMSN 3(4.14 g，36.01 mmol)於DCM (200 mL)中之經攪拌溶液中依序添加PhI(OCOCF 3) 2(10.32 g，24.00 mmol)、TEMPO (0.37 g，2.40 mmol)、Bu 4NHSO 4(0.81 g，2.40 mmol)及H 2O (10.81 mL，600.21 mmol)。添加完成後，將反應混合物在0℃溫度下攪拌35分鐘。在起始物質耗盡(TLC檢測，且反應混合物之猩紅色變為淺黃色)時，添加飽和NaHCO 3水溶液，且將反應混合物在0℃下進一步攪拌15分鐘。用CH 2Cl 2(3×50 mL)萃取反應物，且合併之有機萃取物用水(1×50 mL)及鹽水(1×50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且蒸發溶劑。粗產物藉由管柱層析純化，得到粗產物(3.3 g，37%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：498 [M+Na] +。
步驟 2 ：向(3R,4R,5R,6R)-3-疊氮基-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-2-醇(3.3 g，6.95 mmol)於DMSO (16 mL)中之溶液中添加Ac 2O (16 mL)。將反應物在室溫下攪拌18小時。用EA及水稀釋反應物。分離有機層，真空濃縮。使用矽膠管柱層析用[PE:EA=5:1]溶離來純化殘餘物，得到標題化合物(3R,4R,5R,6R)-3-疊氮基-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-2-醇(1.8 g，53%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：496 [M+Na] +。
步驟 3 ：將(3R,4R,5R,6R)-3-疊氮基-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-2-醇(1.77 g，3.74 mmol)於甲苯(10 mL)中之溶液冷卻至-78℃。在劇烈攪拌下逐滴添加MeLi (3.27 mL，1.6 M於THF中)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時，接著藉由添加飽和NH 4Cl溶液淬滅。用醚萃取混合物，且有機層經乾燥且濃縮，得到粗產物(1.8 g)。LC-MS (ESI)實驗值：490 [M+H] +。
步驟 4 ：在-40℃下向(2S,3S,4R,5R,6R)-3-疊氮基-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)-2-甲基四氫-2H-哌喃(1.82 g，3.72 mmol)於MeCN (40 mL)中之溶液中緩慢添加三乙基矽烷(2.16 g，18.60 mmol)。攪拌反應物5分鐘，接著添加BF 3OEt 2(3.17 g，22.33 mmol)。將混合物在室溫下攪拌18小時。用DCM及飽和NaHCO 3水溶液稀釋反應物。分離有機層，且真空濃縮。使用矽膠管柱層析用乙酸乙酯/石油醚溶離來純化殘餘物，得到標題化合物(1.37 g，78%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：496 [M+Na] +。
步驟 5 ：向(2S,3S,4R,5R,6R)-3-疊氮基-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)-2-甲基四氫-2H-哌喃(10 mg，0.021 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中添加BCl 3(7.93 mL，1 M於DCM中)。將反應物在0℃下攪拌3小時。用飽和Na 2CO 3水溶液稀釋反應物。用EA及水稀釋反應物。分離有機層且真空濃縮。使用矽膠管柱層析用甲醇/二氯甲烷溶離來純化殘餘物，得到標題化合物(2R,3R,4R,5R,6S)-5-疊氮基-2-(羥甲基)-6-甲基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A50，120 mg, 0.59 mmol, 74%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：226 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 3.83 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.67 (qd, J = 11.3, 6.1 Hz, 2H), 3.53 (dd, J = 9.5, 3.3 Hz, 1H), 3.42 (ddd, J = 6.6, 5.3, 1.0 Hz, 1H), 3.28 - 3.13 (m, 2H), 1.30 (d, J = 5.9 Hz, 3H)。
A51 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-5- 胺基 -2-( 羥甲基 )-6- 甲基㗁烷 -3,4- 二醇之製備：
Figure 02_image1508
步 驟 1 ：向(2R,3R,4R,5R,6S)-5-疊氮基-2-(羥甲基)-6-甲基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(120 mg，0.59 mmol)於MeOH (3 mL)中之溶液中添加Pd/C (12 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在H 2氣球下在室溫下攪拌1小時。過濾反應物。將殘餘物真空濃縮，得到標題化合物(2R,3R,4R,5R,6S)-5-胺基-2-(羥甲基)-6-甲基㗁烷-3,4-二醇( A51，70 mg, 66%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：178 [M+H] +。
A52 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-6-( 烯丙氧基 )-5- 胺基 -2-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇及 A53 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-6-( 烯丙氧基 )-5-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1510
Figure 02_image1512
步驟 1 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(200 mg，0.6 mmol)於NH 3/MeOH (6 mL，7 M)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18管柱純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A52 ，50 mg, 36%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：220 [M+H] +。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(30 mg，0.1 mmol)、3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(31 mg，0.2 mmol)及DIEA (39 mg，0.3 mmol)於異丙醇(3 mL)中之混合物在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由矽膠管柱(0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A53，1.1 mg, 2%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：338 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 5.93 (ddd, J = 21.9, 10.8, 5.7 Hz, 1H), 5.30 (dd, J = 17.2, 1.7 Hz, 1H), 5.16 (dd, J = 10.4, 1.6 Hz, 1H), 5.01 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.22 (dd, J = 13.1, 5.1 Hz, 2H), 4.02 (dd, J = 13.0, 6.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.89 - 3.83 (m, 2H), 3.78 - 3.68 (m, 2H)。
A54： 2-(((3S,4R,5R,6R)-4,5- 二羥基 -6-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 胺基 )-4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -5- 甲醯胺之製備
Figure 02_image1514
步驟 1 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(100 mg，0.60 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)噻唑-5-甲醯胺(206 mg，0.90 mmol)及DIEA (232 mg，1.8 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在試管中在120℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之2-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-甲醯胺( A54，1.7 mg, 1%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：358 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 4.15 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 4.05 (td, J = 10.4, 5.0 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.74 (dd, J = 11.4, 7.1 Hz, 1H), 3.67 (dd, J = 11.4, 5.0 Hz, 1H), 3.57 (dd, J = 10.3, 3.2 Hz, 1H), 3.43 (dd, J = 6.2, 5.2 Hz, 1H), 3.14 (t, J = 10.8 Hz, 1H)。
A55 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-2-( 羥甲基 )-6- 甲基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1516
步驟 1 ：在室溫下向(2R,3R,4R,5R,6S)-5-胺基-2-(羥甲基)-6-甲基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(35 mg，0.20 mmol)於i-PrOH (2 mL)中之溶液中添加2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(0.03 mL，0.24 mmol)及DIEA (0.10 mL，0.59 mmol)，且將混合物在120℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型TLC用10% MeOH/DCM純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-2-(羥甲基)-6-甲基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A55，10 mg, 16%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：324 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.49 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.90 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.78 - 3.69 (m, 2H), 3.72 (ddd, J = 16.5, 11.3, 6.1 Hz, 2H), 3.67 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 3.51 - 3.48 (m, 1H), 3.45 (dd, J = 12.4, 6.2 Hz, 1H), 1.22 (d, J = 6.2 Hz, 3H)。
A56 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-5-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2-( 羥甲基 )-6- 甲基四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1518
步驟 1 ：向(2R,3R,4R,5R,6S)-5-胺基-2-(羥甲基)-6-甲基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(35 mg，0.20 mmol)於i-PrOH (2 mL)中之溶液中添加二氯-1,2,4-噻二唑(0.02 mL，0.24 mmol)及DIEA (0.10 mL，0.59 mmol)，且將混合物在100℃下攪拌過夜。濃縮混合物以進行管柱層析，用40% MeOH/H 2O純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-5-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2-(羥甲基)-6-甲基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A56，6 mg, 11%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：296 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 3.88 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.73 (dd, J = 11.3, 6.9 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 22.4, 4.1 Hz, 1H), 3.59 - 3.53 (m, 1H), 3.48 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 3.44 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 1.26 (d, J = 5.9 Hz, 3H)。
A57 ： N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-( 烯丙氧基 )-4,5- 二羥基 -6-((4-(3- 甲氧基苯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 )-2,2,2- 三氟乙醯胺 之製備
Figure 02_image1520
步驟 1 ：在0℃下向N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(2.5 g，7.9 mmol)於2,2-二甲氧基丙烷(40 mL)中之溶液中添加TsOH (0.14 g，0.8 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時。剩餘TsOH藉由TEA中和。濃縮混合物，且殘餘物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈固體狀之N-((3aR,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(1.7 g, 60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：354 [M-H] -。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3aR,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(1.7 g, 4.8 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加TsCl (0.9 g，4.8 mmol)及TEA (2 mL，14.4 mmol)。將混合物在室溫下攪拌12小時。濃縮混合物，且殘餘物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈固體狀之4-甲基苯磺酸((3aR,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-2,2-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(1.8 g, 74%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：509 [M-H] -。
步驟 3 ：向4-甲基苯磺酸((3aR,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-2,2-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(1.8 g, 3.5 mmol)於DMSO (10 mL)中之溶液中添加含NaN 3(2.3 g，35 mmol)之H 2O (4 mL)。將混合物在100℃下攪拌36小時。混合物用H 2O稀釋，用EA萃取，藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈固體狀之N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(640 mg, 48%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：379 [M-H] -。
步驟 4 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(640 mg, 1.7 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加HCl (1 mL，2 M於H 2O中)，將混合物在室溫下攪拌12小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液中和，用EA萃取，經Na 2SO 4乾燥，藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(300 mg, 52%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：339 [M-H] -。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ 9.38 (s, 1H), 5.86 (dddd, J = 15.3, 10.5, 5.7, 4.8 Hz, 1H), 5.32 (ddd, J = 17.3, 3.5, 1.7 Hz, 1H), 5.17 (dd, J = 10.5, 1.7 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.83 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 4.19 - 4.05 (m, 2H), 4.02 - 3.95 (m, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.71 (s, 1H), 3.53 (dd, J = 12.8, 9.0 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 12.8, 3.6 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, DMSO- d 6): δ -73.84。
步驟 5 ：將THPTA (10 mg，0.020 mmol)及CuSO 4(1 mg，0.0040 mmol)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(20 mg，0.060 mmol)及1-乙炔基-3-甲氧基苯(12 mg，0.090 mmol)於MeOH (4 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2 mg，0.010 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺( A57，18 mg, 67%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：473 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.35 (s, 1H), 7.55 - 7.22 (m, 3H), 6.91 (ddd, J = 7.9, 2.5, 1.3 Hz, 1H), 5.65 (ddt, J = 16.6, 10.4, 5.8 Hz, 1H), 5.15 - 4.96 (m, 2H), 4.89 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 4.72 - 4.66 (m, 2H), 4.34 (dd, J = 10.5, 3.7 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 8.2, 4.8 Hz, 1H), 4.04 - 3.94 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.79 - 3.72 (m, 1H), 3.67 (dd, J = 13.0, 6.2 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -77.00。
A58 ： N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-( 烯丙氧基 )-4,5- 二羥基 -6-((4-(3- 甲氧基苯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 )-2,2,2- 三氟乙醯胺 之製備
Figure 02_image1522
步驟 1 ：向N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(15 mg, 0.030 mmol)於NH 3/MeOH溶液(3 mL, 7 M)中之溶液。將混合物在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-((4-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(12 mg)。LC-MS (ESI)實驗值：377 [M+H] +。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-((4-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(12 mg，0.030 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(9 mg，0.050 mmol)及DIEA (12 mg，0.10 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在120℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-((4-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A58，1.7 mg, 1%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：523 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.48 - 7.18 (m, 3H), 7.02 - 6.78 (m, 2H), 5.63 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.98 (dd, J = 28.5, 14.0 Hz, 3H), 4.74 - 4.69 (m, 2H), 4.56 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 8.2, 4.7 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 10.8, 3.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.74 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 3.66 (dd, J = 12.7, 5.9 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -72.34。
A59 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 疊氮基甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1524
步驟 1 ：在N 2氛圍下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(200 mg，0.65 mol)於吡啶(20 mL)中之經攪拌溶液中添加TsCl (123 mg，0.65 mmol)。在添加完成之後，將反應物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，真空濃縮混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之4-甲基苯磺酸(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(100 mg, 33%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：464 [M+H] +。
步驟 2 ：在N 2氛圍下在室溫下，向4-甲基苯磺酸(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(200 mg，0.22 mol)於DMF (2 mL)中之經攪拌溶液中添加NaN 3(140 mg，2.2 mmol)。在添加完成之後，將反應物在100℃下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將反應容器再次冷卻至室溫。過濾混合物且真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A59，10 mg, 14%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：335 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.36 (td, J = 10.6, 5.5 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.83 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 3.67 (dd, J = 10.5, 2.9 Hz, 1H), 3.63 - 3.52 (m, 2H), 3.34 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.26 - 3.08 (m, 1H)。
A60 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-( 甲基 (4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1526
步驟 1 ：向(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(1 g，3.2 mmol)於DMF (20 mL)中之溶液中添加咪唑(0.44 g，6.46 mmol)及TBDPSCl (1.26 g，4.85 mmol)。將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物用乙酸乙酯(150 mL)稀釋且用水(50 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由矽膠管柱純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(0.8 g, 45%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：548 [M+H] +。
步驟 2 ：向(2R,3R,4R,5S)-2-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(0.8 g，1.46 mmol)於2,2-二甲氧基丙烷(20 mL)中之溶液中添加TsOH (0.03 g，0.14 mmol)。將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由矽膠管柱純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(0.6 g, 70%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：588 [M+H] +。
步驟 3 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(100.0 mg，0.307 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加NaH (25.0 mg，0.614 mmol，60重量%於礦物油中)、MeI (52.0 mg，0.368 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-N-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(75 mg, 40%產率)，LC-MS (ESI)實驗值：602 [M+H] +。
步驟 4 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-N-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(75.1 mg, 0.125 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中添加TBAF (5 mL，1 N於THF中)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-(甲基(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇(36 mg, 80%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：364 [M+H] +。
步驟 5 ：向((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-(甲基(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇(36.3 mg, 0.100 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中添加HCl (5 mL，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-(甲基(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A60，5 mg, 15%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：324[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, D 2O): δ 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.12 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.84 (dd, J = 11.1, 5.2 Hz, 1H), 3.74 - 3.63 (m, 2H), 3.61 - 3.49 (m, 2H), 3.01 (s, 3H)。
A61 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(1-(3- 甲氧基苯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1528
Figure 02_image1530
步驟 1 ：將N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(300 mg，1.2 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用DMSO (0.6 mL，8.6 mmol)及Et 3N (345 mg，3.4 mmol)處理。將混合物冷卻至0℃。添加吡啶三氧化硫(584 mg，3.7 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌過夜。將反應物用鹽水淬滅且用DCM稀釋。用DCM萃取水相三次，且合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na 2SO 4)，過濾且蒸發，得到呈黃色油狀物之粗物質N-((3aR,4S,7S,7aR)-4-甲醯基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(160 mg, 54%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：244 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3aR,4S,7S,7aR)-4-甲醯基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(160 mg，0.66 mmol)於MeOH (3 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(109 mg，0.79 mmol)。在室溫下攪拌10分鐘之後，添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)磷酸二甲酯(189 mg，0.98 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由急驟管柱純化，得到呈無色油狀物之N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-乙炔基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(80 mg, 51%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：240 [M+H] +。
步驟 3 ：向N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-乙炔基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(80 mg，0.33 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加Et 3N (101 mg，1.0 mmol)、(Boc) 2O (0.715 mL，3.344 mmol)及DMAP (4.08 mg，0.033 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由急驟管柱純化，得到呈無色油狀物之乙醯基((3aS,4R,7S,7aR)-4-乙炔基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(80 mg, 70%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：340 [M+H] +。
步驟 4 ：向乙醯基((3aS,4R,7S,7aR)-4-乙炔基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(80 mg, 0.23 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加含NaOH (24 mg，0.59 mmol)之H 2O (1 mL)。將混合物在60℃下攪拌2小時，接著用EA及H 2O萃取。濃縮有機層，得到呈無色油狀物之粗物質((3aS,4R,7S,7aR)-4-乙炔基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(60 mg, 68%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：298 [M+H] +。
步驟 5 ：向((3aS,4R,7S,7aR)-4-乙炔基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(50 mg, 0.17 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (1 mL，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著濃縮，得到呈無色油狀物之粗物質((2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-乙炔基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg, 38%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：158 [M+H] +。
步驟 6 ：將(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-乙炔基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg，0.06 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(11 mg，0.06 mmol)及DIPEA (9 mg，0.07 mmol)於無水i-PrOH (2 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜，接著蒸發。殘餘物藉由急驟管柱純化，得到呈無色油狀物之(2R,3R,4R,5S)-2-乙炔基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg, 52%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：304 [M+H] +。
步驟 7 ：向(2R,3R,4R,5S)-2-乙炔基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg，0.03 mmol)及1-疊氮基-3-甲氧基苯(5 mg，0.03 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中添加CuSO 4(1 mg，0.003 mmol)、THPTA (7 mg，0.017 mmol)及抗壞血酸鈉(A61，1.3 mg，0.007 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著藉由C18管柱純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(1.8 mg, 12%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：453 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.57 (s, 2H), 7.48 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.06 (dd, J= 8.2, 1.5 Hz, 1H), 6.94 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 4.83 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.22 (dd, J= 11.9, 2.3 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.14 - 4.10 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.82 (d, J= 11.8 Hz, 1H)。
A62 ： (2R,3R,4R,5S)-2-((4-( 羥甲基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1532
Figure 02_image1534
步驟 1 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(2.2 g, 3.7 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加TBAF (5.6 mL，1 M於THF中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析(矽膠，0-10% DCM/MeOH)純化，得到呈白色固體狀之((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇(1.1 g, 85%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：350 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇(1.1 g, 3.1 mmol)於吡啶(100 mL)中之溶液中添加TsCl (0.83 g，4.6 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(1.1 g, 73%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：504 [M+H] +。
步驟 3 ：將4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(120 mg, 0.2 mmol)、1H-吡唑-4-甲醛(28 mg，0.3 mmol)及Cs 2CO 3(196 mg，0.6 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在100℃下攪拌過夜。將混合物用H 2O淬滅且用EA萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾。濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之1-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲醛(90 mg, 89%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：428 [M+H] +。
步驟 4 ：在0℃下向1-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲醛(80 mg, 0.19 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中添加NaBH 4(80 mg，0.19 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用H 2O淬滅且用EA萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾。濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之(1-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲醇(50 mg, 63%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：430 [M+H] +。
步驟 5 ：在0℃下向(1-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲醇(50 mg, 0.12 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中添加HCl (0.5 mL，2 M於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((4-(羥甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A62，2.5 mg, 5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：390 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.50 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.89 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.41 - 4.23 (m, 3H), 4.05 (dd, J = 11.1, 5.2 Hz, 1H), 3.82 - 3.73 (m, 2H), 3.66 (dd, J = 10.5, 3.0 Hz, 1H), 3.07 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -72.39。
A63 ： N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-( 烯丙氧基 )-4,5- 二羥基 -6-((4-( 羥甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 )-2,2,2- 三氟乙醯胺之製備
Figure 02_image1536
步 驟 1 ：將THPTA (10 mg)及CuSO 4(1 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(20 mg，0.06 mmol)及丙-2-炔-1-醇(5 mg，0.09 mmol)於MeOH (4 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(羥甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺( A63，18 mg, 78%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：397 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.92 (s, 1H), 5.77 - 5.59 (m, 1H), 5.14 (ddd, J = 17.3, 3.2, 1.6 Hz, 1H), 5.08 (ddd, J = 10.4, 2.8, 1.2 Hz, 1H), 4.87 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.65 - 4.62 (m, 2H), 4.32 (dd, J = 11.0, 3.7 Hz, 1H), 4.26 - 4.21 (m, 1H), 3.97 (dd, J = 11.0, 3.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.81 - 3.72 (m, 1H), 3.67 (ddt, J = 13.1, 6.2, 1.3 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD) δ -77.01。
A64 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-6-( 烯丙氧基 )-2-((4-( 羥甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1538
步驟 1 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(羥甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(15 mg，0.03 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 M於MeOH中)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-((4-(羥甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(11 mg)。LC-MS (ESI)實驗值：301 [M+H] +。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-((4-(羥甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(11 mg，0.03 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(9 mg，0.05 mmol)及DIEA (12 mg，0.1 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在120℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-((4-(羥甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A64，8.8 mg, 68%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：447 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.66 (s, 1H), 5.10 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 5.04 - 4.95 (m, 2H), 4.69 - 4.64 (m, 4H), 4.55 (s, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 1H), 3.97 - 3.91 (m, 2H), 3.74 (dd, J = 13.0, 5.1 Hz, 1H), 3.67 (d, J = 5.3 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.36。
A65 ： (2R,3R,4R,5S)-2-((4-(3- 甲氧基苯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1540
步驟 1 ：將THPTA (35 mg，0.081 mmol)及CuSO 4(4 mg，0.025 mmol)溶解於水(0.3 mL)中，接著添加至(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(25 mg，0.081 mmol)及1-乙炔基-3-甲氧基苯(13 mg，0.01 mmol)於MeOH (2.0 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(32 mg，0.162 mmol)於水(0.1 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，且殘餘物藉由管柱層析用20% MeOH/DCM純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((4-(3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A65，13 mg, 34%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：467 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.41 - 7.29 (m, 3H), 6.93 - 6.88 (m, 2H), 4.69 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.41 (td, J = 10.6, 4.9 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 11.1, 5.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.77 (s, 1H), 3.72 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 3.12 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。
A66 ： (2R,3R,4R,5S)-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 )-2-((4-( 三甲基矽基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇及 A67 ： (2R,3R,4R,5S)-2-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1542
步驟 1 ：將THPTA (5.20 mg，0.012 mmol)及CuSO 4(0.59 mg，0.006 mmol)溶解於水(0.1 mL)中，接著添加至(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(20 mg，0.060 mmol)及乙炔基三甲基矽烷(7.1 mg，0.072 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(5.94 mg，0.03 mmol)於水(0.1 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，且產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A66，6 mg, 26%產率)及(2R,3R,4R,5S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A67，3 mg, 13%產率)。 A66 ：LC-MS (ESI)實驗值：433 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.90 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.63 (t, J = 17.9 Hz, 2H), 4.39 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 4.07 (dd, J = 11.2, 5.3 Hz, 1H), 3.87 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.09 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 0.40 - 0.17 (m, 9H)。 A67 ：LC-MS (ESI)實驗值：361 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.90 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.40 (s, 1H), 4.07 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.93 - 3.79 (m, 2H), 3.69 (dd, J = 10.5, 3.2 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 19.9, 9.0 Hz, 1H)。
A68 ： 6-(((3S,4R,5R,6R)-4,5- 二羥基 -6-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 胺基 )-2- 甲氧基嘧啶 -4- 甲醯胺之製備
Figure 02_image1544
步驟 1 ：將THPTA (5.20 mg，0.012 mmol)及CuSO 4(0.59 mg，0.006 mmol)溶解於水(0.1 mL)中，接著添加至(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(20 mg，0.060 mmol)及丙-2-炔-1-醇(4.0 mg，0.072 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(5.94 mg，0.03 mmol)於水(0.1 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，且產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((4-(羥甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A68，10 mg, 43%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：391 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 6.90 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.63 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.39 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 4.06 (dd, J = 11.2, 5.2 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.85 (dd, J = 6.9, 5.9 Hz, 1H), 3.69 (dd, J = 10.5, 3.1 Hz, 1H), 3.08 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。
A69 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-( 烯丙氧基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1546
Figure 02_image1548
步驟 1 ：將THPTA (20 mg)及CuSO 4(3 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(50 mg，0.15 mmol)及乙炔基三甲基矽烷(29 mg，0.3 mmol)於MeOH (4 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(6 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 61%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：439 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 0.09 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加TBAF (1 mL，1 M於THF中)。將混合物在40℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(25 mg, 76%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：367 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.01 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 5.67 (ddd, J = 22.5, 10.9, 5.9 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 22.9, 5.8 Hz, 2H), 4.86 (s, 3H), 4.69 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.32 (dd, J = 10.8, 3.7 Hz, 1H), 4.26 - 4.20 (m, 1H), 3.97 (dd, J = 10.9, 3.3 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 12.9, 6.2 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -77.01。
步驟 3 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(20 mg, 0.05 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 mol/L)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-胺基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 100%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：271 [M+H] +。
步驟 4 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-胺基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 0.05 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(18 mg，0.1 mmol)及DIEA (26 mg，0.2 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A69，8.8 mg, 42%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：417 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.64 (dd, J = 10.7, 5.7 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.71 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 1H), 4.01 - 3.88 (m, 2H), 3.75 - 3.52 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.35。
A70 ： N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-2-( 烯丙氧基 )-4,5- 二羥基四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 )-2,2,2- 三氟乙醯胺及 A71 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-( 烯丙氧基 )-5- 胺基四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1550
步驟 1 ：將THPTA (20 mg)及CuSO 4(3 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(50 mg，0.15 mmol)及乙炔基三甲基矽烷(29 mg，0.3 mmol)於MeOH (4 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(6 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 61%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：439 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基-6-((4-(三甲基矽基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 0.09 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加TBAF (1 mL，1 M於THF中)。將混合物在40℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺( A70 ，25 mg, 76%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：367 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.01 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 5.67 (ddd, J = 22.5, 10.9, 5.9 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 22.9, 5.8 Hz, 2H), 4.86 (s, 3H), 4.69 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.32 (dd, J = 10.8, 3.7 Hz, 1H), 4.26 - 4.20 (m, 1H), 3.97 (dd, J = 10.9, 3.3 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 12.9, 6.2 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -77.01。
步驟 3 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-6-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2-(烯丙氧基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(20 mg, 0.05 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 mol/L)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-胺基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 100%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：271 [M+H] +。
步驟 4 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-胺基四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 0.05 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(18 mg，0.1 mmol)及DIEA (26 mg，0.2 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-2-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-6-(烯丙氧基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(8.8 mg, 42%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：417 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.64 (dd, J = 10.7, 5.7 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.71 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 1H), 4.01 - 3.88 (m, 2H), 3.75 - 3.52 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.35。
A72 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-6-( 烯丙氧基 )-2-( 疊氮基甲基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1552
步驟 1 ：將N-((2S,3R,4R,5R,6R)-2-(烯丙氧基)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(40 mg, 0.11 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 mol/L)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(疊氮基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(28 mg, 100%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：245 [M+H] +。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(疊氮基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(28 mg, 0.11 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(27 mg，0.15 mmol)及DIEA (26 mg，0.2 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18管柱層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A72，8.8 mg, 20%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：391 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.28 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.22 (ddt, J = 13.0, 5.0, 1.3 Hz, 1H), 4.08 - 3.97 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 10.8, 3.2 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 12.8, 8.7 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.35。
A73 ： 1-((3S,4R,5R,6R)-4,5- 雙 ( 苯甲氧基 )-6-(( 苯甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 胍之製備
Figure 02_image1554
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(400.0 mg, 0.923 mmol)於二㗁烷(10.0 mL)及H 2O (1.0 mL)中之溶液中添加N-({[(三級丁氧基)羰基]胺基}(三氟甲烷磺醯亞胺基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(360.9 mg，0.923 mmol)、TEA (932.2 mg，9.23 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-[(1Z)-{[(1S,2R,3S,4R)-2,3-雙(苯甲氧基)-4-[(苯甲氧基)甲基]環己基]胺基}({[(三級丁氧基)羰基]亞胺基})甲基]胺基甲酸三級丁酯(200.0 mg, 0.296 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：676[M+H] +。
步驟 2 ：向於燒瓶(50 mL)中之N-[(1Z)-{[(1S,2R,3S,4R)-2,3-雙(苯甲氧基)-4-[(苯甲氧基)甲基]環己基]胺基}({[(三級丁氧基)羰基]亞胺基})甲基]胺基甲酸三級丁酯(200.0 mg, 0.296 mmol)中添加HCl/二㗁烷(10 mL，1 M)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到1-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胍( A73，20.0 mg, 0.042 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：476 [M+H] +。 1HNMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ 9.03 (s, 1H), 7.60 (s, 3H), 7.43 - 7.17 (m, 15H), 4.77 (dd, J = 11.2, 3.9 Hz, 2H), 4.60 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.47 (dd, J = 18.7, 12.5 Hz, 3H), 4.06 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 3.92 - 3.75 (m, 2H), 3.71 - 3.58 (m, 2H), 3.52 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.11 (t, J = 10.3 Hz, 1H)。
A74 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 疊氮基甲基 )-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1556
步驟 1 ：將2,2,2-三氟-N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)乙醯胺(300 mg，0.92 mmol)於氨甲醇溶液(5 mL，7 M)中之溶液在60℃下攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗物質((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-胺基-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲醇(270 mg, 76%產率)不經進一步純化即用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：232 [M+H] +。
步驟 2 ：在N 2下在室溫下，向((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-胺基-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲醇(270 mg, 1.2 mmol)於i-PrOH (5 mL)中之溶液中添加DIPEA (0.4 mL，2.3 mmol)。將反應物在80℃下攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲醇(130 mg, 32%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：350 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 5.42 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.35 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 4.21 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 3.95 - 3.83 (m, 4H), 3.80 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.36 (s, 3H)。
步驟 3 ：在N 2氛圍下在0℃下，向((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲醇(120 mg，0.3 mmol)於TEA (0.1 mL，0.7 mmol)及無水DCM (5 mL)中之溶液中添加甲苯磺醯氯(85 mg，0.5 mmol)。將反應物在室溫下攪拌過夜。過濾所得混合物，且用DCM (50 mL)稀釋，用H 2O (10 mL × 2)及鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~80% EA/PE)純化，得到呈無色固體狀之4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲酯(120 mg, 70%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：504 [M+H] +。
步驟 4 ：在N 2下在室溫下，向4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)甲酯(120 mg, 0.24 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(0.1 mL，2.4 mmol)。將反應物在100℃下攪拌24小時。所得混合物用EA (100 mL)稀釋，用H 2O (30 mL × 2)及鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~80% EA/PE)純化，得到呈無色固體狀之N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(75 mg, 84%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：375 [M+H] +。
步驟 5 ：向N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(75 mg, 0.2 mmol)於THF (4 mL)中之溶液中添加HCl溶液(1 mL，2 M於H 2O中)。將反應物在室溫下攪拌過夜。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(疊氮基甲基)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(A74，40 mg, 60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：335 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 5.41 (s, 1H), 3.86 (d, J= 12.9 Hz, 2H), 3.82 - 3.76 (m, 3H), 3.69 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 3.64 (d, J= 12.9 Hz, 1H)。
A75 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-((4-( 三氟甲氧基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1558
步驟 1 ：向配備有磁攪拌棒之乾燥玻璃反應管中裝入2-(甲基硫基)嘧啶-4-醇(2.0 g，14.1 mmol)、1-(三氟甲基)-1l3-苯并[d][1,2]碘氧雜戊環-3(1H)-酮(1.5 g，4.7 mmol)及CH 3NO 2(20.0 mL)。接著將反應混合物在100℃下攪拌5小時。藉由TLC來監測反應。完成後，將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，並且用乙酸乙酯洗滌。將合併之有機溶劑真空濃縮。殘餘物藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈固體狀之2-(甲基硫基)-4-(三氟甲氧基)嘧啶(80 mg, 3%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：211 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向2-(甲基硫基)-4-(三氟甲氧基)嘧啶(40 mg，0.2 mmol)於DCM (8 mL)中之溶液中添加m-CPBA (69 mg，0.4 mmol)，將混合物在室溫下攪拌12小時。濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈固體狀之2-(甲基磺醯基)-4-(三氟甲氧基)嘧啶(40 mg, 87%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：243 [M+H] +。
步驟 3 ：將(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(50 mg，0.3 mmol)、2-(甲基磺醯基)-4-(三氟甲氧基)嘧啶(20 mg，0.1 mmol)及DIEA (39 mg，0.3 mmol)於異丙醇(3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((4-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A75，1.7 mg, 5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：326 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.27 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.28 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 28.4, 16.0 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 10.7, 5.3 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.75 (dd, J = 11.4, 7.1 Hz, 1H), 3.68 (dd, J = 11.4, 5.0 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.16 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -57.54。
A76 ： (2R,3R,4R,5R,6S)-2-( 羥甲基 )-6-( 環氧乙烷 -2- 基甲氧基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1560
步驟 1 ：向(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-(羥甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(200.0 mg, 0.548 mmol)於DCM (20.0 mL)中之溶液中添加m-CPBA (177.6 mg，1.096 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5R,6S)-2-(羥甲基)-6-(環氧乙烷-2-基甲氧基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A76 ，20.0 mg, 9%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：382[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.57 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.90 (m, 1H), 5.28 (dd, J = 17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.13 (dd, J = 10.5, 1.3 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 9.9, 3.6 Hz, 1H), 4.24 (dd, J = 13.1, 5.1 Hz, 1H), 4.07 - 3.96 (m, 3H), 3.91 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 3.79 - 3.69 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.68 (s)。
A77 ： (2R,3R,4R,5S)-5-((3- 氟 -6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基 )-2-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1562
Figure 02_image1564
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200.0 mg，0.462 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加2-溴-3-氟-6-(三氟甲基)吡啶(112.2 mg，0.462 mmol)、Ruphos.Pd.G3 (38.0 mg，0.046 mmol)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)、Cs 2CO 3(450.5 mg，1.386 mmol)。將混合物在N 2下在70℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-3-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.0 mg, 41%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：597[M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-3-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.0 mg, 0.168 mmol)於DCM (20.0 mL)中之溶液中添加BCl 3(1.68 mL，1 N於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5S)-5-((3-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A77，10.0 mg, 18%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：327[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.35 (dd, J = 10.7, 8.1 Hz, 1H), 6.94 (dd, J = 8.0, 2.9 Hz, 1H), 4.47 (td, J = 10.6, 5.2 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 10.9, 5.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.81 - 3.62 (m, 3H), 3.50 - 3.42 (m, 1H), 3.17 (t, J = 10.8 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -69.34 (s), -137.35 (s)。
A78 ： (2R,3R,4R,5S)-5-((2- 氯 -6-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 胺基 )-2-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇及 A79 ： 4-(((3S,4R,5R,6R)-4,5- 二羥基 -6-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 胺基 )-6-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 甲腈之製備
Figure 02_image1566
Figure 02_image1568
步驟 1 ：在N 2下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇鹽酸鹽(500 mg，3.1 mmol)於i-PrOH (3.0 mL)中之混合物中添加2,4-二氯-6-(三氟甲基)嘧啶(0.84 mL，6.1 mmol)及DIEA (1.5 mL，9.2 mmol)。在室溫下攪拌過夜之後，濃縮混合物且藉由層析(矽膠，0-30%甲醇/DCM)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(A78，160 mg, 15%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：344 [M+1] +。
步驟 2 ：在N 2下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(20 mg，0.058 mmol)於DMF (3.0 mL)中之混合物中添加Zn(CN) 2(4.1 mg，0.035 mmol)、dppf (16.2 mg，0.028 mmol)、Zn (3.3 mg，0.31 mmol)及Pd 2(dba) 3(26.6 mg，0.18 mmol)。在120℃下攪拌過夜之後，濃縮反應混合物且藉由製備型TLC純化，得到呈白色固體狀之4-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-甲腈(A79，2.4 mg, 12%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：333 [M-H] -。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 6.97 (s, 1H), 4.57 - 4.48 (m, 1H), 4.08 (dd, J= 11.1, 5.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.76 (dd, J= 11.3, 7.1 Hz, 1H), 3.69 (dd, J= 11.4, 4.9 Hz, 1H), 3.62 (dd, J= 10.6, 3.1 Hz, 1H), 3.48 - 3.44 (m, 1H), 3.14 (t, J= 10.9 Hz, 1H)。
A80 ： ((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 ) 甲醇之製備
Figure 02_image1570
步驟 1 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(50 mg, 0.085 mmol)於THF (1 mL)中之溶液中添加TBAF (108 μL，1 M於THF中)。將反應物在室溫下攪拌三小時且藉由LCMS確保完成。接著濃縮反應物，且藉由管柱層析用20%甲醇/DCM純化，得到呈白色固體狀之((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲醇( A80，18 mg, 61%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：350 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.28 - 4.11 (m, 2H), 3.91 (dt, J = 44.5, 22.2 Hz, 1H), 3.76 (dt, J = 13.7, 6.7 Hz, 3H), 3.16 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 1.50 (s, 2H), 1.32 (s, 2H)。
A79 ：4-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-甲腈 之製備
Figure 02_image1572
步驟 1 ：在N 2下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇鹽酸鹽(500 mg，3.1 mmol)於i-PrOH (3.0 mL)中之混合物中添加2,4-二氯-6-(三氟甲基)嘧啶(0.84 mL，6.1 mmol)及DIEA (1.5 mL，9.2 mmol)。在室溫下攪拌過夜之後，濃縮混合物，且藉由層析(矽膠，0-30%甲醇/DCM)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(160 mg, 15%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：344 [M+1] +。
步驟 2 ：在N 2下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-((2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(20 mg，0.058 mmol)於DMF (3.0 mL)中之混合物中添加Zn(CN) 2(4.1 mg，0.035 mmol)、dppf (16.2 mg，0.028 mmol)、Zn (3.3 mg，0.31 mmol)及Pd 2(dba) 3(26.6 mg，0.18 mmol)。在120℃下攪拌過夜之後，濃縮反應混合物且藉由製備型TLC純化，得到呈白色固體狀之4-(((3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)胺基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-甲腈(A81，2.4 mg, 12%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：333 [M-H] -。 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 6.97 (s, 1H), 4.57 - 4.48 (m, 1H), 4.08 (dd, J= 11.1, 5.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.76 (dd, J= 11.3, 7.1 Hz, 1H), 3.69 (dd, J= 11.4, 4.9 Hz, 1H), 3.62 (dd, J= 10.6, 3.1 Hz, 1H), 3.48 - 3.44 (m, 1H), 3.14 (t, J= 10.9 Hz, 1H)。
A82 ： (2R,3R,4R,5S)-5-((5- 氟 -6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基 )-2-( 羥甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1574
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200.0 mg，0.462 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加6-氯-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶(91.9 mg，0.462 mmol)、Ruphos.Pd.G3 (38.0 mg，0.046 mmol)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)及Cs 2CO 3(450.5 mg，1.386 mmol)。將混合物在N 2下在70℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.1 mg, 36%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：597 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.1 mg, 0.168 mmol)於DCM (20.0 mL)中之溶液中添加BCl 3(1.68 mL，1 N於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5S)-5-((5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺基)-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A82 ，6.0 mg, 11%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：327 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.40 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 9.2, 2.7 Hz, 1H), 4.30 - 4.11 (m, 2H), 3.90 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.75 (dd, J = 11.4, 7.1 Hz, 1H), 3.68 (dd, J = 11.4, 5.0 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 10.1, 3.2 Hz, 1H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 3.08 (dd, J = 15.1, 5.7 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -66.95 (d, J = 18.0 Hz), -141.07 - -145.72 (m)。
A83 ： (2R,3R,4R,5R)-2-( 羥甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1576
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200.0 mg，0.462 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加2-氯-6-(三氟甲基)吡𠯤(84.1 mg，0.462 mmol)、Ruphos.Pd.G3 (38.0 mg，0.046 mmol)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)及Cs 2CO 3(450.5 mg，1.386 mmol)。將混合物在N 2下在70℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3R,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(95 mg, 34%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：580 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3R,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(95 mg, 0.168 mmol)於DCM (20.0 mL)中之溶液中添加BCl 3(1.68 mL，1 N於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5R)-2-(羥甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A83，2.0 mg, 4%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：310[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.14 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 4.33 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 12.0, 2.0 Hz, 1H), 3.98 - 3.90 (m, 1H), 3.86 (dd, J = 4.6, 3.2 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 11.5, 7.1 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 12.1, 1.7 Hz, 1H), 3.49 - 3.41 (m, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.42 (s)。
A84 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 羥甲基 )-4-((5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1578
步驟 1 ：將(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(20 mg，0.11 mmol)、2-氯-5-(三氟甲基)吡𠯤(19 mg，0.11 mmol)及DIPEA (20 mg，0.16 mmol)於NMP (1 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜。混合物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥甲基)-4-((5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇( A84，5.4 mg, 15%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：338 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.26 (s, 1H), 7.99 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 3.83 (dt, J = 10.6, 6.5 Hz, 3H), 3.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H)。
A85 ： (2R,3R,4R,5R)-2-( 羥甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1580
Figure 02_image1582
Figure 02_image1584
步驟 1 ：在0℃下向2,2'-氧基雙(乙-1-醇) (10.0 g，90 mmol)於吡啶(50 mL)中之溶液中添加DMAP (22.0 g，180.0 mmol)及TBSCl (1.35 g，9.0 mmol)。將混合物在N 2下在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙-1-醇(1.47 g, 7%產率)，LC-MS (ESI)實驗值：221 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙-1-醇(1.47 g，6.7 mmol)於THF (50.0 mL)中之溶液中添加3-乙炔基苯酚(790.6 mg，6.7 mmol)、PPh 3(2.1 g，8.0 mmol)及DEAD (1.4 g，8.0 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到三級丁基(2-(2-(3-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)二甲基矽烷(1.2 g, 60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：321 [M+H] +。
步驟 3 ：向三級丁基(2-(2-(3-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)二甲基矽烷(1.2 g, 4.0 mmol)於MeOH (50 mL)中之溶液中添加N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(1.5 g, 4.0 mmol)、CuSO 4(64.0 mg，0.4 mmol)、抗壞血酸鈉(72.0 mg，0.4 mmol)及THPTA (144.0 mg，0.4 mmol)。將混合物在N 2下在室溫下攪拌16小時。濃縮混合物，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(900.0 mg, 32%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：701 [M+H] +。
步驟 4 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(900.0 mg, 1.29 mmol)於THF (40.0 mL)中之溶液中添加TBAF (2.58 mL，1 M於THF中)，將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(60 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-羥乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(586 mg, 77%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：587 [M+H] +。
步驟 5 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-羥乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(586.0 mg, 1.0 mmol)於DCM (30.0 mL)中之溶液中添加TEA (303 mg，3.0 mmol)、DMAP (122.0 mg，1.0 mmol)及TsCl (229.0 mg，1.20 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(50 mL × 3)洗滌，將有機層減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到4-甲基苯磺酸2-(2-(3-(1-(((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-2,2-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯氧基)乙氧基)乙酯(584 mg, 79%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：741 [M+H] +。
步驟 6 ：向4-甲基苯磺酸2-(2-(3-(1-(((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-2,2-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯氧基)乙氧基)乙酯(584 mg, 0.79 mmol)於DMF (30.0 mL)中之溶液中添加NaN 3(513.0 mg，7.9 mmol)，將混合物在100℃下攪拌16小時。混合物用乙酸乙酯(150.0 mL)稀釋且用水(100.0 mL × 3)洗滌，將有機層減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(427 mg, 88%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：612 [M+H] +。
步驟 7 ：將N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(427.0 mg，0.70 mmol)於NH 3/MeOH (20 mL，7 M)中之溶液在80℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗物質(3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-胺(309 mg, 85%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：516 [M+H] +。
步驟 8 ：向(3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-胺(30.9 mg, 0.06 mmol)於i-PrOH (30.0 mL)中之溶液中添加2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(10.9 mg，0.06 mmol)及DIEA (23.6 mg，1.8 mmol)。將混合物在100℃下攪拌16小時。濃縮混合物，且藉由管柱純化，得到N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(36.3 mg, 93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：662 [M+H] +。
步驟 9 ：向N-((3aS,4R,6S,7R,7aR)-6-(烯丙氧基)-4-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(36.3 mg, 0.056 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (2 mL，2 N於水中)。將混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮混合物，且藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-((4-(3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A85，3.0 mg, 10%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：662 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.42 (dd, J = 10.7, 5.0 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.97 - 6.89 (m, 2H), 5.63 (m, 1H), 4.98 (dd, J = 27.9, 14.3 Hz, 3H), 4.74 - 4.66 (m, 3H), 4.30 (dd, J = 8.2, 4.5 Hz, 1H), 4.22 - 4.17 (m, 2H), 4.01 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 10.8, 3.1 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 5.4, 3.8 Hz, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 3H), 3.68 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.43 - 3.37 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -72.34 (s)。
A86 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 疊氮基甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1586
步驟 1 ：在室溫下向(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(300 mg, 0.97 mmol)及TEA (196 mg，1.94 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加TsCl (276 mg，1.5 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之4-甲基苯磺酸苯甲基 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基) ((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(150 mg, 43%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：464 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向4-甲基苯磺酸苯甲基 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基) ((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(150 mg, 0.32 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加NaN 3(208 mg，3.2 mmol)。將反應混合物在120℃下攪拌過夜。過濾所得混合物，且藉由C18直接純化濾液。接著粗產物藉由製備型HPLC進一步純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A86，7 mg, 5.7%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：375 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.33 (td, J = 10.4, 4.9 Hz, 1H), 4.14 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.66 (dd, J = 10.6, 3.3 Hz, 1H), 3.58 (q, J = 5.4 Hz, 2H), 3.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 13.8, 7.8 Hz, 1H)。
A87 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-1-( 羥甲基 )-4-((6-( 三氟甲基吡啶 -2- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1588
步 驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，0.523 mmol)及2-溴-6-(三氟甲基)吡啶(177 mg，0.785 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加RuPhos Pd G3 (43 mg，0.05 mmol)、Ruphos (24 mg，0.052 mmol)及Cs 2CO 3(507 mg，1.59 mmol)。將反應物在70℃下攪拌18小時。經由矽藻土過濾反應混合物，且濃縮濾液並且藉由製備型HPLC純化，得到(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥甲基)-4-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇( A87，6 mg, 3%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：337 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (s, 1H), 7.53 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.41 (s, 1H), 4.18 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 11.8, 7.8 Hz, 2H), 3.87 - 3.76 (m, 3H), 3.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H)。
A88 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(( 二甲基胺基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1590
步驟 1 ：將4-甲基苯磺酸((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(200 mg, 0.43 mmol)於二甲胺(2 mL，2 M於THF中)中之溶液在80℃下攪拌2小時。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((二甲基胺基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A88，11 mg, 8%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：337 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.32 (td, J= 10.5, 5.1 Hz, 1H), 4.13 (dd, J= 11.0, 5.1 Hz, 1H), 3.82 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 3.63 (ddd, J= 10.2, 9.3, 2.6 Hz, 2H), 3.12 (t, J= 10.8 Hz, 1H), 2.87 (dd, J= 13.3, 8.3 Hz, 1H), 2.63 (dd, J= 13.3, 2.9 Hz, 1H), 2.40 (s, 6H)。
A89 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 胺基甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇及 A90 ： N-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺之製備
Figure 02_image1592
步驟 1 ：將(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg，0.03 mmol)及Pd/C (3 mg，10重量%，60%濕潤)於MeOH (3 mL)中之溶液在H 2氣球下在室溫下攪拌過夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且濃縮濾液，得到粗產物，其藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(胺基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A89，6 mg, 65%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：309 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.33 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 4.16 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.87 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 3.66 (dd, J= 10.5, 3.1 Hz, 1H), 3.44 (dd, J= 7.4, 4.2 Hz, 1H), 3.13 (t, J= 10.8 Hz, 1H), 3.02 (dd, J= 13.2, 7.9 Hz, 1H), 2.84 (dd, J= 13.2, 4.1 Hz, 1H)。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5S)-2-(胺基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(2.6 mg，0.008 mmol)、Et 3N (1.2 mg，0.01 mmol)及N-乙醯氧基丁二醯亞胺(2 mg，0.012 mmol)於MeOH (3 mL)中之溶液在室溫下攪拌過夜。混合物藉由製備型HPLC直接純化，得到呈白色固體狀之N-(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)乙醯胺( A90，1.2 mg, 41%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：351 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.31 (td, J= 10.6, 5.0 Hz, 1H), 4.12 (dd, J= 11.0, 5.1 Hz, 1H), 3.83 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.63 (dd, J= 10.5, 3.1 Hz, 1H), 3.49 (dd, J= 12.4, 7.6 Hz, 2H), 3.27 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 3.09 (t, J= 10.9 Hz, 1H), 1.95 (s, 3H)。
A91 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-( 吡啶 -2- 基胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1594
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200 mg，0.462 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加Ruphos.Pd.G3 (38.5 mg，0.046 mmol)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)、Cs 2CO 3(452 mg，1.386 mmol)。將混合物在N 2下在80℃下攪拌16小時。將混合物用乙酸乙酯(40 mL)稀釋且用水(50 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)吡啶-2-胺(50 mg, 21%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：511 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)吡啶-2-胺(50 mg，0.098 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加BCl 3(0.98 mL，1 M於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌1小時。用NH 3·H 2O (0.5 mL)淬滅混合物。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由製備型HPLC純化，得到(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-(吡啶-2-基胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A91，5 mg, 21%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：241 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.93 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.28 (td, J = 10.5, 5.2 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 11.0, 5.3 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.73 (m, 2H), 3.62 (dd, J = 10.5, 2.9 Hz, 1H), 3.50 - 3.42 (m, 1H), 3.13 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。
A92 ：苯甲基 (2R,3R,4R,5S)-2-((4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1596
步驟 1 ：將4-甲基苯磺酸((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(120 mg, 0.26 mmol)、1-甲基哌𠯤(78 mg，0.78 mmol)及TEA (101 mg，1 mmol)於THF (3 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。將混合物真空濃縮。粗產物藉由C18純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((4-甲基哌𠯤-1-基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A92，4 mg, 4%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：392 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.42 - 4.26 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 3.68 - 3.53 (m, 2H), 3.09 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.76 (dd, J = 13.6, 7.2 Hz, 2H), 2.68 - 2.49 (m, 8H), 2.29 (s, 3H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.34。
A93 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-((5-( 三氟甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1598
步驟 1 ：在室溫下向(4S,5S,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)二氫-2H-哌喃-3(4H)-酮(200 mg，0.46 mmol)於EtOH (5 mL)中之溶液中添加TFA (5.7 mg，0.05 mmol)、5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(83 mg，0.56 mmol)及NaBH 3CN (57 mg，0.92 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，緩慢添加水(5 mL)且攪拌反應混合物15分鐘。將混合物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋且用水(5 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(20 mg, 7.6%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：568 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(20 mg, 0.035 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加BCl 3(41 mg，0.35 mmol)。將反應物在0℃下攪拌1小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(6 mg, 60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：298 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 5.70 (s, 1H), 4.02 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.83 - 3.74 (m, 2H), 3.67 (dd, J = 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.58 - 3.47 (m, 2H), 3.44 - 3.39 (m, 1H)。
A94 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(6- 溴 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 )-5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1600
Figure 02_image1602
步驟 1 ：在室溫下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(2 g, 8.15 mmol)於DMF (25 mL)中之溶液中添加RuCl 3(0.17 g，0.81 mmol)及NaIO 4(3.6 g，16.3 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，濃縮混合物，且殘餘物藉由急驟純化，得到呈棕色油狀物之(3aR,4S,7S,7aR)-7-乙醯胺基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-甲酸(1 g, 47%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：260 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向(3aR,4S,7S,7aR)-7-乙醯胺基-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-甲酸(200 mg, 0.77 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中添加HATU (440 mg，1.16 mmol)及DIPEA (199 mg，1.54 mmol)。在室溫下攪拌20分鐘之後，添加4-溴苯-1,2-二胺(144 mg，0.77 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由急驟純化，得到呈黃色油狀物之(3aR,4S,7S,7aR)-7-乙醯胺基-N-(2-胺基-5-溴苯基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-甲醯胺(91 mg, 28%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：428及430 [M+H] +。
步驟 3 ：將(3aR,4S,7S,7aR)-7-乙醯胺基-N-(2-胺基-5-溴苯基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-甲醯胺(90 mg, 0.21 mmol)於AcOH (2 mL)中之溶液在90℃下攪拌2小時，接著濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到呈黃色油狀物之N-((3S,4R,5R,6R)-6-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)乙醯胺(30 mg, 39%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：370及372 [M+H] +。
步驟 4 ：將N-((3S,4R,5R,6R)-6-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)乙醯胺(30 mg, 0.08 mmol)於HCl (4 mL，4 N於H 2O中)中之溶液在100℃下攪拌2小時。濃縮混合物，得到呈黃色油狀物之粗物質(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg, 38%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：328及330 [M+H] +。
步驟 5 ：將(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg，0.03 mmol)、2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(8 mg，0.04 mmol)及DIPEA (8 mg，0.06 mmol)於i-PrOH (1 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A94，1.2 mg, 8%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：328及330 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.54 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.47 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.34 (dd, J= 8.6, 1.8 Hz, 1H), 6.92 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.31 (s, 2H), 3.92 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 3.40 (t, J= 11.0 Hz, 1H)。
A95 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(( 苯胺基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1604
步驟 1 ：將4-甲基苯磺酸((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(50 mg, 0.11 mmol)、苯胺(20 mg，0.22 mmol)及TEA (23 mg，0.22 mmol)於THF中之溶液在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((苯胺基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A95，1 mg, 2%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：385 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.11 (dd, J= 8.5, 7.4 Hz, 2H), 6.70 - 6.57 (m, 3H), 4.36 (td, J= 10.7, 5.3 Hz, 1H), 4.15 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.93 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 2H), 3.36 (dd, J= 6.3, 3.2 Hz, 2H), 3.11 (t, J= 10.8 Hz, 1H)。
A96 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 哌啶 -1- 基甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1606
步驟 1 ：向4-甲基苯磺酸((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲酯(70 mg, 0.08 mmol)於THF (1 mL)中之溶液中添加哌啶(80 μL，0.80 mmol)及TEA (115 μL，0.80 mmol)。將反應物在密封管中在80℃下攪拌過夜。將其濃縮且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(哌啶-1-基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A96，2 mg, 4%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：377 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (d, J = 27.8 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 4.34 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 3.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.72 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.50 - 3.40 (m, 2H), 3.22 (d, J = 10.7 Hz, 3H), 3.16 (s, 1H), 1.86 (s, 4H), 1.67 (s, 2H)。
A97 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 吡咯啶 -1- 基甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1608
步驟 1 ：在密封管中向4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(130 mg, 0.258 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加TEA (179 μL，1.290 mmol)及吡咯啶(106 μL，1.290 mmol)。將反應物在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈黃色油狀物之粗物質N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-(吡咯啶-1-基甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(100 mg, 96%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：403 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-(吡咯啶-1-基甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(100 mg, 0.248 mmol)於THF (1 mL)中之溶液中添加HCl (372 μL，2 N於H 2O中)。將反應物攪拌過夜且濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(吡咯啶-1-基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A97，75 mg, 84%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：363 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.35 - 4.23 (m, 1H), 4.16 (dd, J = 11.1, 5.1 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.67 (dd, J = 10.5, 3.3 Hz, 1H), 3.13 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 2.91 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 1.90 (s, 1H)。
A98 ：苯甲基 (2R,3R,4R,5S)-2-(( 甲基胺基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1610
步驟 1 ：將4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(100 mg, 0.2 mmol)、甲胺(1 mL，1 mmol，1 M於THF中)及TEA (101 mg，1 mmol)於THF (2 mL)中之溶液在密封管中在80℃下攪拌過夜。將混合物真空濃縮。粗產物藉由C18純化，得到呈白色固體狀之N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-((甲基胺基)甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(10 mg, 14%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：363 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-((甲基胺基)甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(10 mg, 0.03 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (0.1 mL，1 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((甲基胺基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A98，2.2 mg, 25%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：323 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.33 (td, J= 10.4, 5.0 Hz, 1H), 4.15 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.86 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 3.67 (dd, J= 10.6, 3.1 Hz, 1H), 3.60 (dd, J= 7.7, 3.2 Hz, 1H), 3.13 (t, J= 10.8 Hz, 1H), 3.04 (dd, J= 12.7, 8.2 Hz, 1H), 2.83 (dd, J= 12.7, 3.6 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.35。
A99 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(( 甲基 ( 苯基 ) 胺基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1612
步驟 1 ：將4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(100 mg, 0.2 mmol)、N-甲基苯胺(0.032 mL，0.3 mmol)、NaI (45 mg，0.3 mmol)及K 2CO 3(82.35 mg，0.6 mmol)於DMF (1 mL)中之懸浮液在100℃下攪拌過夜。將反應混合物冷卻，用水(2 mL)稀釋，且用DCM (2 mL × 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由製備型TLC (EA/PE = 1:1)純化，得到呈黃色油狀物之N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-((甲基(苯基)胺基)甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(40 mg, 46%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：439 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-((甲基(苯基)胺基)甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(40 mg, 0.09 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加稀HCl (0.5 mL，2 N於H 2O中)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。濃縮反應混合物，且藉由製備型TLC (MeOH/DCM = 1:10)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((甲基(苯基)胺基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A99，2.5 mg, 7%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：399 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.09 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.17 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 6.76 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 6.64 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.36 (td, J= 10.5, 5.2 Hz, 1H), 4.12 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.86 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.69 - 3.58 (m, 3H), 3.56 - 3.49 (m, 1H), 3.06 (t, J= 10.9 Hz, 1H), 2.99 (s, 3H)。
A100 ：苯甲基三級丁基 (2R,3R,4R,5R,6S)-6-( 烯丙氧基 )-2-( 羥甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1614
步驟 1 ：將(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(50 mg，0.22 mmol)、2-氯-6-(三氟甲基)吡𠯤(80 mg，0.44 mmol)及DIEA (85 mg，0.66 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液在密封管中在100℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6S)-6-(烯丙氧基)-2-(羥甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A100，31.8 mg, 40%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：366 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.18 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 5.88 (ddd, J= 22.2, 10.8, 5.6 Hz, 1H), 5.26 (d, J= 17.2 Hz, 1H), 5.10 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 5.03 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.50 (dd, J= 10.5, 3.6 Hz, 1H), 4.20 (dd, J= 13.2, 5.0 Hz, 1H), 3.93 (ddd, J= 16.1, 13.0, 6.0 Hz, 4H), 3.80 - 3.67 (m, 2H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.32。
A101 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-((3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1616
步驟 1 ：向(3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-胺(200 mg，0.462 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加2-氯-3-(三氟甲基)吡𠯤(84.1 mg，0.462 mmol)、Ruphos.Pd.G3 (38.4 mg)、Ruphos (21.5 mg，0.046 mmol)、Cs 2CO 3(1.35 g，4.158 mmol)。將混合物在N 2下在100℃下攪拌2小時。將混合物用乙酸乙酯(15 mL)稀釋且用水(15 mL × 3)洗滌。將有機層減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(70 mg, 26%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：580 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3S,4R,5R,6R)-4,5-雙(苯甲氧基)-6-((苯甲氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(70 mg, 0.121 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中添加BCl 3(1.2 mL，1 M於DCM中)。將混合物在室溫下攪拌3小時。藉由NH 3·H 2O (1 mL)淬滅混合物且濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A101，7 mg, 18%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：310 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.27 (s, 1H), 7.85 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.56 (td, J = 10.5, 5.2 Hz, 1H), 4.15 (dd, J = 10.9, 5.2 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.76 (dd, J = 14.3, 4.8 Hz, 2H), 3.69 (dd, J = 11.4, 5.0 Hz, 1H), 3.48 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 3.21 (t, J = 10.8 Hz, 1H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -68.82 (s)。
A102 ： N-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 雙環 [1.1.1] 戊烷 -1- 甲醯胺之製備
Figure 02_image1618
步驟 1 ：將雙環[1.1.1]戊烷-1-甲酸(4.83 mg，0.043 mmol)及HATU (24.56 mg，0.07 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液在室溫下攪拌2小時。向反應混合物中添加DIEA (11.1 mg，0.09 mmol)及N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(15 mg, 0.043 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應混合物。殘餘物藉由製備型TLC (EA/PE = 2:1)純化，得到呈無色油狀物之N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醯胺(15 mg, 79%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：433 [M+H] +。
步驟 2 ：將N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醯胺(20 mg, 0.045 mmol)及稀HCl水溶液(1 mL，2 N於H 2O中)於THF (2 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。濃縮反應混合物。殘餘物藉由逆相急驟層析(C18，10%至70%之MeOH/水)純化，得到呈白色固體狀之N-(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醯胺( A102，7.9 mg, 43%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：401 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.31 (td, J= 10.7, 5.2 Hz, 1H), 4.11 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.81 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 3.63 (dd, J= 10.6, 3.2 Hz, 1H), 3.52 - 3.44 (m, 2H), 3.30 - 3.24 (m, 2H), 3.08 (t, J= 10.8 Hz, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.05 (s, 6H)。
A103 ：苯甲基 4-((((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲醯基 ) 哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯之製備
Figure 02_image1620
步驟 1 ：向N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(疊氮基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(20 mg, 0.05 mmol)於MeOH (3 mL)中之溶液中添加Pd/C (4 mg，10重量%，60%濕潤)。將混合物在H 2氣球下在室溫下攪拌1小時。過濾混合物且濃縮，得到呈白色固體狀之粗物質N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(18 mg)。LC-MS (ESI)實驗值：349 [M+H] +。
步驟 2 ：在0℃下向三光氣(15 mg，0.05 mmol)及吡啶(7.9 mg，0.1 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(18 mg, 0.05 mmol)。1小時後，將哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(9 mg，0.05 mmol)添加至反應物中，將混合物在室溫下攪拌12小時。濃縮混合物，且藉由二氧化矽純化，得到呈固體狀之4-((((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)胺甲醯基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(15 mg, 54%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：561 [M+H] +。
步驟 3 ：向4-((((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)胺甲醯基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(15 mg, 0.03 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中添加HCl (一滴，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌4小時。將混合物用NH 3·H 2O中和，濃縮，且藉由C18純化，得到呈白色固體狀之4-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺甲醯基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯( A103，4.3 mg, 31%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：521 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.32 (td, J= 10.4, 5.1 Hz, 1H), 4.11 (dd, J= 10.9, 5.2 Hz, 1H), 3.84 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 3.63 (dd, J= 10.5, 3.1 Hz, 1H), 3.53 - 3.35 (m, 11H), 3.08 (t, J= 10.8 Hz, 1H), 1.46 (s, 9H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.33。
A104 ： N-((2R,3R,4R,5R,6R)-4,5- 二羥基 -6-( 羥甲基 )-2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 )-2,2,2- 三氟乙醯胺之製備
Figure 02_image1622
步驟 1 ：在0℃下向三乙酸(3R,4R,5R,6R)-6-(乙醯氧基甲基)-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-2H-哌喃-2,4,5-三酯(1 g，2.3 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加2-甲氧基乙-1-醇(515 mg，6.9 mmol)及四氯化錫(1.5 g，5.8 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物緩慢倒入冰冷的水中，且分離有機層並且用NaHCO 3洗滌，乾燥且濃縮，藉由二氧化矽純化，得到呈固體狀之二乙酸(2R,3R,4R,5R,6R)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-5-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二酯(500 mg, 47%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：458 [M-H] -。
步驟 2 ：在0℃下向二乙酸(2R,3R,4R,5R,6R)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-5-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二酯(500 mg, 1.1 mmol)於MeOH (10 ml)中之溶液中添加NaOMe (1 mL，5 M於MeOH中)。將混合物在室溫下攪拌3小時。混合物用Amberlite IR120 (H +)形式之離子交換樹脂酸化且濃縮，得到呈固體狀之粗物質N-((2R,3R,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)-2-(2-甲氧基乙氧基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺( A104，200 mg, 55%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：332 [M-H] -。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 4.50 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.96 (ddd, J= 14.0, 11.2, 7.5 Hz, 2H), 3.85 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.82 - 3.63 (m, 4H), 3.51 (dd, J= 9.9, 5.5 Hz, 3H), 3.32 (s, 3H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -77.31。
A105 ：苯甲基三級丁基 (2R,3R,4R,5R,6R)-2-( 羥甲基 )-6-(2- 甲氧基乙氧基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1624
步驟 1 ：將N-((2R,3R,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)-2-(2-甲氧基乙氧基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(150 mg, 0.45 mmol)於NH 3/MeOH (3 mL，7 M)中之溶液在試管中在80℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈白色固體狀之粗物質(2R,3R,4R,5R,6R)-5-胺基-2-(羥甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(107 mg)。LC-MS (ESI)實驗值：238 [M+H] +。
步驟 2 ：將(2R,3R,4R,5R,6R)-5-胺基-2-(羥甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(50 mg，0.21 mmol)、2-氯-6-(三氟甲基)吡𠯤(76 mg，0.42 mmol)及DIEA (81 mg，0.63 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液在試管中在100℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且藉由C18層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5R,6R)-2-(羥甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A105，5.7 mg, 7%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：384 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.53 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.93 (ddd, J= 16.9, 10.5, 3.1 Hz, 2H), 3.84 - 3.71 (m, 3H), 3.67 - 3.51 (m, 2H), 3.46 - 3.34 (m, 2H), 3.14 (s, 3H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.19。
A106 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(((3- 甲氧基苯基 )( 甲基 ) 胺基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1626
步驟 1 ：將4-甲基苯磺酸((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲酯(500 mg, 0.99 mmol)、3-甲氧基-N-甲基苯胺(204 mg，1.49 mmol)、K 2CO 3(411 mg，2.98 mmol)及NaI (224 mg，1.49 mmol)於DMF (5 mL)中之懸浮液在100℃下攪拌過夜。將反應混合物冷卻且濃縮。殘餘物藉由製備型TLC (MeOH/DCM = 1:10)純化，得到呈白色固體狀之N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(((3-甲氧基苯基)(甲基)胺基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(40 mg, 9%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：469 [M+H] +。
步驟 2 ：將N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(((3-甲氧基苯基)(甲基)胺基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(40 mg, 0.085 mmol)及稀HCl水溶液(1 mL，2 N於H 2O中)於THF (2 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。濃縮反應混合物。殘餘物藉由製備型TLC (MeOH/DCM = 1:10)及逆相急驟層析(C18，10%至80%之MeOH/水)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(((3-甲氧基苯基)(甲基)胺基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A106，0.8 mg, 2%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：439 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.09 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.08 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 6.38 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 6.32 - 6.19 (m, 2H), 4.36 (td, J= 10.4, 5.2 Hz, 1H), 4.12 (dd, J= 11.1, 5.1 Hz, 1H), 3.85 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.67 - 3.59 (m, 3H), 3.55 - 3.48 (m, 1H), 3.06 (t, J= 10.8 Hz, 1H), 2.98 (s, 3H)。
A107 ： (2R,3R,4R,5S)-2-(( 吡 𠯤 -2- 基胺基 ) 甲基 )-5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 - 2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1628
步驟1：將N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(50 mg, 0.14 mmol)、2-氟吡𠯤(21 mg，0.21 mmol)及DIPEA (37 mg，0.28 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液在100℃下攪拌過夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由急驟純化，得到呈黃色固體狀之N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-((吡𠯤-2-基胺基)甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(30 mg, 49%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：427 [M+H] +。
步驟2：在室溫下向N-((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-4-((吡𠯤-2-基胺基)甲基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(30 mg, 0.07 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (0.5 mL，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由急驟純化，得到呈黃色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-((吡𠯤-2-基胺基)甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A107，14.5 mg, 53%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：387 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.93 (d, J= 5.2 Hz, 2H), 7.64 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.14 (dd, J= 11.0, 5.3 Hz, 1H), 3.89 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.69 - 3.58 (m, 3H), 3.54 - 3.48 (m, 1H), 3.11 (t, J= 10.9 Hz, 1H)。
A108 ： (1R,2R)-N-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-2- 氟環丙烷 -1- 甲醯胺之製備
Figure 02_image1630
步驟 1 ：向N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(100 mg, 0.287 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中添加(1R,2R)-2-氟環丙烷-1-甲酸(60 mg，0.574 mmol)、HATU (131 mg，0.345 mmol)及DIEA (150 μL，0.861 mmol)。將溶液在室溫下攪拌過夜且濃縮，藉由5% MeOH/DCM純化，得到呈淡黃色油狀物之(1R,2R)-N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-2-氟環丙烷-1-甲醯胺(100 mg, 80%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：435 [M+H] +
步驟 2 ：向(1R,2R)-N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-2-氟環丙烷-1-甲醯胺(100 mg, 0.230 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (20 μL，2 N於H 2O中)。攪拌反應物2小時且藉由LC-MS確保反應完成。接著將其濃縮，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(1R,2R)-N-(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)-2-氟環丙烷-1-甲醯胺( A108，53 mg, 58%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：395 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.83 - 4.62 (m, 1H), 4.36 - 4.25 (m, 1H), 4.13 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 10.6, 3.0 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 13.4, 4.9 Hz, 1H), 3.54 - 3.49 (m, 1H), 3.35 (s, 1H), 3.10 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.80 (dt, J = 9.2, 6.9 Hz, 1H), 1.64 (dtd, J = 23.0, 7.1, 3.7 Hz, 1H), 1.14 - 1.01 (m, 1H)。
A109 ： (1S,2S)-N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 ) 甲基 )-2- 氟環丙烷 -1- 甲醯胺之製備
Figure 02_image1632
Figure 02_image1634
步驟 1 ：將(1S,2S)-2-氟環丙烷-1-甲酸(5.98 mg，0.06 mmol)及HATU (32.75 mg，0.08 mmol)於DMF (0.5 mL)中之溶液在室溫下攪拌2小時。向上述溶液中添加N-((3aS,4R,7S,7aR)-4-(胺基甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(20 mg，0.06 mmol)及DIEA (15 mg，0.12 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應物。殘餘物藉由製備型TLC (MeOH/DCM = 1:10)純化，得到呈無色油狀物之(1S,2S)-N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-2-氟環丙烷-1-甲醯胺(20 mg, 80%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：435 [M+H] +。
步驟 2 ：將(1S,2S)-N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-2-氟環丙烷-1-甲醯胺(20 mg, 0.046 mmol)及稀HCl水溶液(1 mL，2 N於H 2O中)於THF (2 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。濃縮反應混合物。殘餘物藉由逆相急驟層析(C18，10%至70%之MeOH/水)純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-(((3aS,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)甲基)-2-氟環丙烷-1-甲醯胺( A109，6.1 mg, 34%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：395 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.82 - 4.63 (m, 1H), 4.32 (td, J= 10.5, 5.1 Hz, 1H), 4.13 (dd, J= 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.84 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 3.50 - 3.47 (m, 1H), 3.34 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 3.09 (t, J= 10.9 Hz, 1H), 1.85 - 1.77 (m, 1H), 1.70 - 1.60 (m, 1H), 1.12 - 1.01 (m, 1H)。
A110 ： 4-(((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ) 胺基 )-2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 甲酸乙酯之製備
Figure 02_image1636
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 µmol，1 eq)於DMSO (1 mL)中之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 µL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 µmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。獲得呈白色固體狀之4-[[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]胺基]-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯( A110，74 mg，160.72 µmol，30.73%產率，88.9%純度)。LC-MS (ESI)實驗值：410 [M+H] +。HNMR (ET44412-94-P1P2) 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 8.93 (s, 1H), 8.48 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.32 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.38 (q, J=7.0 Hz, 3H), 4.34 - 4.23 (m, 2H), 3.87 - 3.78 (m, 3H), 3.74 (dd, J=4.2, 9.6 Hz, 1H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 1.35 (s, 3H)。
A111 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4- 胺基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1638
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2-氯-6-甲基-4-(三氟甲基)菸鹼腈(173.07 mg，784.60 μmol，1.5 eq)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A111 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：5.28 mg，2.69%產率，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：376 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 6.92 (s, 1H), 5.40 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.88 (s, 8H), 3.99 - 3.94 (m, 2H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.73 (d, J=7.9 Hz, 1H), 2.50 (s, 2H)。
A112 ： 6- 氯 -2-(((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 ) 胺基 ) 菸鹼酸乙酯之製備
Figure 02_image1640
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2,6-二氯菸鹼酸乙酯(172.65 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A112 ：6-氯-2-(((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)胺基)菸鹼酸乙酯，產率：11.31 mg，5.77%產率，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：375 [M+H] +。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.10 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.61 (d, J=8.1 Hz, 1H), 5.39 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.54 - 4.12 (m, 3H), 3.97 - 3.91 (m, 2H), 3.87 - 3.78 (m, 3H), 3.72 (d, J=7.9 Hz, 1H), 3.31 (s, 1H), 1.36 (t, J=7.1 Hz, 3H)。
A113 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4- 胺基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1642
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及5-氯-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(126.75 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A113 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：5.41 mg，3.27%產率，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：317 [M+H] +。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 7.91 (s, 1H), 5.44 (d, J=1.2 Hz, 1H), 3.97 - 3.92 (m, 1H), 3.91 - 3.87 (m, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 6H), 3.80 - 3.75 (m, 2H)。
A114 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-((2- 氯 -5-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 胺基 )-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇及 A115 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-((4- 氯 -5-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 )-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1644
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(170.24 mg，784.60 μmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。 A114 ：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-((2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：5.25 mg，2.7%產率，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：372 [M+H] +。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.48 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.42 - 5.28 (m, 1H), 4.23 (br t, J=9.5 Hz, 1H), 4.00 - 3.66 (m, 7H)。 A115：(1S,2R,3R,4R,5S)-4-((4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：19.99 mg，10.28%產率，黃色固體。LC-MS (ESI)實驗值：372 [M+H] +。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.35 (s, 1H), 5.37 (d, J=1.2 Hz, 1H), 4.51 (d, J=9.9 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=4.3, 9.9 Hz, 1H), 3.97 - 3.90 (m, 2H), 3.86 - 3.80 (m, 2H), 3.72 (d, J=7.9 Hz, 1H)。
(1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇及 A116 ： (1R,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-1-(((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 氧基 ) 甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1646
步驟 1 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(100 mg，523.06 μmol)及3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(243.23 mg，1.57 mmol)之溶液中添加DIPEA (162.24 mg，1.26 mmol，218.65 μL，2.4 eq)及4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯(199.75 mg，784.60 μmol，1.5 eq)，在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物。濾液藉由製備型HPLC (TFA條件；管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-45%，8 min)純化。(1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：11.1 mg，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：310 [M+H] +。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 5.49 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 3.96 - 3.89 (m, 2H), 3.84 (s, 1H), 3.82 - 3.75 (m, 2H), 3.74 - 3.70 (m, 1H)。 A116 ：(1R,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-1-(((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇，產率：8.8 mg，8.2%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：310 [M+H] +。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 5.44 (s, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.96 - 3.92 (m, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.85 - 3.79 (m, 2H)。
A117 ： (2R,3R,4R,5S)-2-( 羥甲基 )-5-((2-( 甲基磺醯基 )-6-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1648
步驟 1 ：向4-氯-2-(甲基磺醯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(330 mg，1.44 mmol)於AcOH (1 mL)中之溶液中添加H 2O 2(0.5 mL，30重量%於H 2O中)，且將溶液在100℃下加熱3小時。混合物用NaHCO 3淬滅且用EA萃取。合併之有機層經乾燥且濃縮，藉由管柱層析用20% EtOAc/己烷進一步純化，得到呈白色固體狀之4-氯-2-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)嘧啶(300 mg, 80%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：261 [M+H] +。
步驟 2 ：向(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇鹽酸鹽(50 mg，0.34 mmol)於i-PrOH (3 mL)中之溶液中添加4-氯-2-甲烷磺醯基-6-(三氟甲基)嘧啶(88 mg，0.34 mmol)及DIEA (0.17 mL，1.02 mmol)。將混合物攪拌且在120℃下加熱過夜。接著濃縮混合物，且藉由管柱層析用10% DCM/甲醇純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(羥甲基)-5-((2-(甲基磺醯基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( A117，7 mg, 5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：388 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 6.97 (s, 1H), 4.55 (td, J = 10.6, 5.1 Hz, 1H), 4.12 (dd, J = 11.0, 5.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 3.76 (dd, J = 11.3, 7.1 Hz, 1H), 3.69 (dd, J = 11.4, 5.0 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 10.6, 3.2 Hz, 1H), 3.48 - 3.44 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.16 (t, J = 10.9 Hz, 1H)。
化合物 1 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-23-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-20- 側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -4,19- 二氮雜二十三烷酸之製備
Figure 02_image1650
Figure 02_image1652
步驟 1 ：將THPTA (13 mg，0.03 mmol)及CuSO 4(0.38 mg，0.0015 mmol)溶解於水(0.1 mL)中，接著添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，20 mg, 0.015 mmol)及(S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(2-羧乙基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺甲醯基)-20-側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十五碳-24-炔酸( 中間體 3，27.6 mg, 0.015 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2.64 mg，0.015 mmol)於水(0.1 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，且產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(2-羧乙基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺甲醯基)-23-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-20-側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十三烷酸( 化合物 1，7 mg, 14.5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1052 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.69 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.49 - 7.38 (m, 2H), 7.34 - 7.26 (m, 2H), 7.08 (s, 2H), 6.98 (s, 3H), 5.38 (s, 2H), 3.99 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 3.93 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 3.81 (d, J = 8.2 Hz, 6H), 3.73 - 3.57 (m, 58H), 3.51 (d, J = 24.6 Hz, 20H), 3.36 (dd, J = 11.3, 5.8 Hz, 15H), 3.13 (s, 5H), 2.70 - 2.64 (m, 1H), 2.44 (s, 5H), 2.22 (d, J = 18.1 Hz, 4H), 2.02 - 1.82 (m, 5H), 1.66 - 1.53 (m, 6H), 1.29 (s, 4H), 1.23 (s, 3H), 1.15 (d, J = 6.3 Hz, 4H), 0.93 (dd, J = 18.0, 6.5 Hz, 18H)。
化合物 2 ： (S)-4-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(23-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-3,20- 二側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -4,19- 二氮雜二十三烷基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺基 )-3- 胺基 -4- 側氧基丁酸之製備
Figure 02_image1654
Figure 02_image1656
步驟 1 ：將THPTA (3.15 mg，0.007 mmol)及CuSO 4(1.16 mg，0.007 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (19 mg, 0.015 mmol)及(S)-4-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(3,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十五碳-24-炔-1-基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺基)-3-胺基-4-側氧基丁酸(30.0 mg, 0.015 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(1.44 mg，0.007 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌16小時。反應物藉由製備型HPLC純化，得到(S)-4-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(23-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十三烷基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺基)-3-胺基-4-側氧基丁酸( 化合物 2，15.1 mg, 33%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1051 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.71 (s, 1H), 8.50 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.46 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.07 - 6.86 (m, 8H), 4.51 (d, J = 30.6 Hz, 4H), 4.34 (dd, J = 12.8, 5.9 Hz, 7H), 4.17 (d, J = 16.7 Hz, 2H), 4.08 (dd, J = 10.0, 4.5 Hz, 3H), 3.91 (d, J = 3.0 Hz, 3H), 3.70 - 3.47 (m, 60H), 3.38 - 3.31 (m, 9H), 3.14 (dd, J = 20.4, 9.4 Hz, 7H), 2.93 (dd, J = 38.3, 12.3 Hz, 7H), 2.70 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 6.1 Hz, 4H), 2.30 - 2.17 (m, 7H), 2.08 (s, 1H), 2.00 - 1.76 (m, 6H), 1.72 - 1.42 (m, 9H), 1.30 (s, 3H), 1.20 (s, 6H), 0.98 - 0.80 (m, 15H), 0.74 (d, J = 5.4 Hz, 3H)。
化合物 3 ： (S)-4-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(23-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-3,20- 二側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -4,19- 二氮雜二十三烷基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺基 )-3- 胺基 -4- 側氧基丁酸之製備
Figure 02_image1658
Figure 02_image1660
步驟 1 ：將THPTA (3.15 mg，0.007 mmol)及CuSO 4(1.16 mg，0.007 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，19 mg, 0.015 mmol)及(S)-4-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(3,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十五碳-24-炔-1-基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺基)-3-胺基-4-側氧基丁酸(26.76 mg, 0.015 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(1.44 mg，0.007 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌24小時。反應物藉由製備型HPLC純化，得到(S)-4-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(23-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十三烷基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺基)-3-胺基-4-側氧基丁酸( 化合物 3，13.8 mg, 30%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1051 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.17 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 33.3, 7.8 Hz, 3H), 7.24 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.99-6.95 (m, 6H), 5.38 (s, 2H), 4.70 - 4.43 (m, 4H), 4.43 - 4.30 (m, 4H), 4.24 - 4.06 (m, 3H), 3.96 (dd, J = 23.4, 6.8 Hz, 7H), 3.84 - 3.74 (m, 5H), 3.73 - 3.41 (m, 60H), 3.36 (dd, J = 12.1, 6.3 Hz, 8H), 3.28 - 3.20 (m, 1H), 3.18 - 3.06 (m, 4H), 3.05 - 2.89 (m, 5H), 2.85 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 2.70 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.51 - 2.40 (m, 4H), 2.32 - 2.15 (m, 7H), 2.09 (s, 1H), 2.00 - 1.80 (m, 5H), 1.67 - 1.49 (m, 7H), 1.41 - 1.28 (m, 4H), 1.20 (d, J = 6.3 Hz, 6H), 0.98 - 0.69 (m, 18H)。
化合物 4 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1662
Figure 02_image1664
步驟 1 ：將THPTA (2 mg)及CuSO 4(1 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(15 mg)及3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A2，9 mg)於DMSO (3 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 4，5.2 mg, 37%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：843 [M+4H] 4+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.72 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.11 (s, 2H), 7.99 (s, 2H), 7.75 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.18 - 7.10 (m, 2H), 7.05 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 15.2, 7.4 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.81 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 4.69 - 4.57 (m, 3H), 4.48 (d, J = 21.3 Hz, 2H), 4.41 - 4.25 (m, 9H), 4.15 - 4.02 (m, 7H), 3.92 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 3.78 - 3.55 (m, 56H), 3.56 - 3.39 (m, 12H), 3.36 (t, J = 4.7 Hz, 7H), 3.27 - 3.15 (m, 4H), 3.12 (dd, J = 13.6, 8.0 Hz, 3H), 3.06 - 2.67 (m, 8H), 2.45 (dd, J = 13.8, 6.7 Hz, 8H), 2.22 (dt, J = 19.2, 7.5 Hz, 6H), 2.10 - 1.85 (m, 10H), 1.75 - 1.51 (m, 8H), 1.43 - 1.27 (m, 3H), 1.15 (dd, J = 11.4, 6.6 Hz, 6H), 1.05 - 0.78 (m, 18H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.21, -77.13, -77.18。
化合物 5 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(17-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-14- 側氧基 -4,7,10- 三氧雜 -13- 氮雜十七烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1666
步驟 1 ：將THPTA (1.94 mg，0.004 mmol)及CuSO 4(0.72 mg，0.004 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(疊氮基甲基)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(3 mg, 0.009 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十九碳-18-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 9，20.0 mg, 0.009 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.35 mg，0.002 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌24小時。蒸發溶劑，且粗物質藉由製備型HPLC (TFA/MeOH)純化，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(17-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十七烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 5，6 mg, 28%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1178 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.78 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.32 (dd, J = 17.8, 7.7 Hz, 2H), 7.18 - 7.10 (m, 2H), 7.05 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.94 - 6.82 (m, 3H), 5.38 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 5.5 Hz, 4H), 4.76 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 4.69 - 4.63 (m, 1H), 4.59 (dd, J = 8.8, 4.3 Hz, 1H), 4.48 (ddd, J = 14.5, 5.2, 3.2 Hz, 2H), 4.32 (ddd, J = 22.3, 11.5, 5.5 Hz, 5H), 4.13 - 4.02 (m, 2H), 3.90 (dd, J = 36.3, 5.6 Hz, 2H), 3.80 - 3.70 (m, 6H), 3.61 (dt, J = 7.6, 4.3 Hz, 11H), 3.54 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.46 (s, 1H), 3.36 (t, J = 5.3 Hz, 3H), 3.26 - 3.11 (m, 4H), 3.08 - 2.84 (m, 4H), 2.73 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 2.49 (dd, J = 24.6, 18.4 Hz, 6H), 2.25 (t, J = 7.4 Hz, 6H), 2.13 (dd, J = 13.2, 6.2 Hz, 1H), 2.04 - 1.89 (m, 7H), 1.85 - 1.71 (m, 3H), 1.69 - 1.54 (m, 2H), 1.29 (s, 2H), 1.19 - 1.10 (m, 6H), 1.00 - 0.90 (m, 15H), 0.85 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。
化合物 6 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S, 44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(3-(2-(4-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 ) 丙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1668
Figure 02_image1670
步驟 1 ：將THPTA (13 mg，0.03 mmol)及CuSO 4(0.38 mg，0.0015 mmol)溶解於水(0.1 mL)中，接著添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (20 mg, 0.015 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(己-5-炔醯胺基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 7，28.9 mg, 0.015 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2.64 mg，0.015 mmol)於水(0.1 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，且產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(4-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)丁醯胺基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 6，7 mg, 14.3%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1081 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.50 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 7.75 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 2H), 7.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.94 - 6.80 (m, 5H), 4.69 - 4.44 (m, 4H), 4.35 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 4.06 (d, J = 6.8 Hz, 5H), 3.91 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 3.76 - 3.50 (m, 49 H), 3.49 - 3.40 (m, 5H), 3.36 (t, J = 5.4 Hz, 9H), 3.20 - 3.11 (m, 4H), 3.09 - 2.78 (m, 5H), 2.72 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 2.44 (t, J = 6.0 Hz, 11H), 2.33 - 2.12 (m, 8H), 2.04 - 1.85 (m, 12 H), 1.63 (s, 4H), 1.30 (s, 6H), 1.20 - 1.09 (m, 6H), 0.94-0.90 (m, 18H)。
化合物 7 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(3-(2-(4-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 ) 丙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37, 40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1672
步驟 1 ：將THPTA (2 mg)及CuSO 4(1 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(己-5-炔醯胺基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 7，30 mg)及(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(疊氮基甲基)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(5 mg)於DMSO (3 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S, 20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(4-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)丁醯胺基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 7，5.2 mg, 37%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1133 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.72 (s, 1H), 8.20 (s, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.41 (t, J = 18.1 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.05 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 14.5, 6.8 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 5.51 (s, 1H), 5.35 (d, J = 24.0 Hz, 2H), 5.03 - 4.86 (m, 5H), 4.85 - 4.74 (m, 2H), 4.70 - 4.58 (m, 2H), 4.43 (d, J = 34.4 Hz, 4H), 4.26 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.16 - 3.99 (m, 2H), 3.89 (d, J = 32.2 Hz, 2H), 3.82 - 3.58 (m, 8H), 3.55 - 3.34 (m, 8H), 3.22 (dd, J = 14.9, 6.2 Hz, 4H), 3.08 - 2.63 (m, 8H), 2.58 - 2.38 (m, 6H), 2.27 (dd, J = 13.8, 6.4 Hz, 4H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 2.06 - 1.86 (m, 6H), 1.83 - 1.48 (m, 5H), 1.16 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.02 - 0.75 (m, 18H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -77.099 (s)。
化合物 8 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(17-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-14- 側氧基 -4,7,10- 三氧雜 -13- 氮雜十七烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1674
Figure 02_image1676
步驟 1 ：將THPTA (2 mg)及CuSO 4(1 mg)溶解於水(0.5 mL)中。將混合物添加至3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S, 26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十九碳-18-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸 ( 中間體 9，30 mg)及3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，20 mg)於DMSO (3 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(2 mg)於水(0.5 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(17-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十七烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 8，21.7 mg, 44%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：832 [M+4H] 4+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.73 (s, 2H), 8.20 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.44 (d, J = 19.0 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.05 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 2H), 5.81 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.89 (d, J = 1.7 Hz, 5H), 4.81 (d, J = 1.9 Hz, 5H), 4.69 - 4.19 (m, 11H), 4.08 (dd, J = 15.3, 9.9 Hz, 3H), 3.99 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 3.93 (d, J = 4.1 Hz, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.80 (dd, J = 12.3, 6.2 Hz, 3H), 3.74 (dd, J = 14.5, 5.3 Hz, 4H), 3.71 - 3.57 (m, 40H), 3.54 - 3.46 (m, 11H), 3.36 (dd, J = 10.2, 4.9 Hz, 7H), 3.28 - 3.20 (m, 2H), 3.14 - 2.62 (m, 8H), 2.45 (dd, J = 14.0, 7.6 Hz, 10H), 2.23 (dt, J = 19.8, 7.4 Hz, 8H), 2.04 - 1.47 (m, 16H), 1.31 (s, 2H), 1.16 (s, 5H), 0.92 (dd, J = 28.9, 22.5 Hz, 18H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -77.379 (s)。
化合物 9 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(3-(2-(4-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 ) 丙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28, 31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a: 1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25, 28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1678
Figure 02_image1680
步驟 1 ：向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，15 mg, 0.01 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(己-5-炔醯胺基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 7，25 mg, 0.01 mmol)於DMSO (2 mL)中之溶液中添加含CuSO 4(2 mg)、THPTA (3 mg)之H 2O (0.1 mL)及含抗壞血酸鈉(2 mg)之H 2O (0.1 mL)。將混合物在40℃下攪拌過夜。溶液藉由C18管柱直接純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(4-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)丁醯胺基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 9 ，10 mg, 25%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1080 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.75 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 7.21 - 6.76 (m, 7H), 5.38 (d, J = 1.3 Hz, 2H), 4.70 - 4.28 (m, 12H), 4.15 - 3.59 (m, 54H), 3.57 - 3.35 (m, 18H), 3.23 - 2.69 (m, 10H), 2.55 - 2.09 (m, 20H), 2.08 - 1.74 (m, 12H), 1.63 (s, 4H), 1.39 - 1.07 (m, 10H), 1.04 - 0.80 (m, 18H)。
化合物 10 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-23-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-20- 側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -4,19- 二氮雜二十三烷酸之製備
Figure 02_image1682
Figure 02_image1684
步驟 1 ：將THPTA (3.4 mg)及CuSO 4(0.3 mg)溶解於水(0.2 mL)中。將混合物添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (21 mg)及FC-III肽-炔烴(29.6 mg)於MeOH (5 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.6 mg)於水(0.2 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(2-羧乙基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺甲醯基)-23-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-20-側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4,19-二氮雜二十三烷酸( 化合物 10 ，11.8 mg, 23.2%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：788 [M+4H] 4+。 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 10.71 (s, 2H), 8.50 (d, J= 61.1 Hz, 8H), 8.05 (s, 2H), 7.89 (dd, J= 14.6, 8.9 Hz, 4H), 7.82 (s, 1H), 7.65 - 7.50 (m, 5H), 7.41 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 7.13 (t, J= 24.1 Hz, 4H), 7.03 - 6.97 (m, 2H), 6.95 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 6.91 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 6.81 (s, 1H), 4.56 (d, J= 82.6 Hz, 10H), 4.26 (t, J= 7.1 Hz, 5H), 4.07 (d, J= 23.3 Hz, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.69 (s, 2H), 3.58 - 3.46 (m, 54H), 3.38 (dd, J= 5.8, 3.1 Hz, 14H), 3.21 - 3.17 (m, 8H), 3.03 - 2.89 (m, 8H), 2.59 (dd, J= 28.4, 20.7 Hz, 4H), 2.31 (t, J= 6.5 Hz, 6H), 2.09 (dt, J= 14.1, 7.4 Hz, 7H), 1.88 - 1.70 (m, 7H), 1.55 - 1.32 (m, 8H), 1.24 - 1.11 (m, 6H), 1.03 (d, J= 6.1 Hz, 3H), 0.93 - 0.50 (m, 21H)。 19F NMR (377 MHz, DMSO): δ -69.47 (s), -73.41 (s)。
化合物 11 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(17-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-14- 側氧基 -4,7,10- 三氧雜 -13- 氮雜十七烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1686
Figure 02_image1688
步驟 1 ：將THPTA (1.99 mg，0.005 mmol)及CuSO 4(0.73 mg，0.005 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (12 mg, 0.009 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十九碳-18-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 9，20 mg, 0.009 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.69 mg，0.004 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌16小時。移除溶劑且藉由製備型HPLC純化，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R, 47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(17-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十七烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 11，4.3 mg, 13%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1110 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.50 (d, J = 4.6 Hz 2H), 8.39 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.33 - 7.53 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 7.10 - 6.91 (m, 6H), 6.88 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 4.62 (s, 3H), 4.49 (s, 4H), 4.40 - 4.31 (m, 6H), 4.13 - 4.02 (m, 6H), 3.91 (d, J = 2.6 Hz, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.67 (d, J = 7.9 Hz, 9H), 3.61 (dt, J = 13.4, 4.3 Hz, 39H), 3.52 (dd, J = 11.8, 6.4 Hz, 9H), 3.49 - 3.42 (m, 6H), 3.37 (d, J = 5.4 Hz, 6H), 3.19 - 3.11 (m, 6H), 2.74 - 2.67 (m, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.44 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 2.29 - 2.16 (m, 10H), 2.03 (d, J = 5.5 Hz, 5H), 1.97 - 1.84 (m, 8H), 1.60 (s, 9H), 1.21 (s, 6H), 0.92 - 0.72 (m, 18H)。
化合物 12 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(3-(2-(2-(4-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 丙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1690
Figure 02_image1692
步驟 1 ：向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (12.5 mg, 0.01 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R, 47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(2-(己-5-炔醯胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 6，20 mg, 0.01 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加含CuSO 4(2 mg)及THPTA (3 mg)之H 2O (0.1 mL)及含抗壞血酸鈉(2 mg)之H 2O (0.1 mL)。將混合物在35℃下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(2-(4-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)丁醯胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 12，10.8 mg, 33%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1095 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.50 (d, J= 5.2 Hz, 2H), 8.26 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.55 - 7.48 (m, 1H), 7.24 (s, 4H), 6.95 (s, 6H), 6.88 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.62 (s, 3H), 4.53 - 4.49 (m, 2H), 4.34 (t, J= 7.3 Hz, 6H), 4.08 (d, J= 9.2 Hz, 5H), 3.91 (d, J= 2.9 Hz, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.70 - 3.66 (m, 12H), 3.61 (dd, J= 11.3, 6.3 Hz, 36H), 3.54 (dd, J= 10.6, 5.1 Hz, 9H), 3.48 (d, J= 3.2 Hz, 2H), 3.46 - 3.42 (m, 3H), 3.36 (t, J= 5.4 Hz, 6H), 3.16 (d, J= 10.8 Hz, 3H), 3.13 (d, J= 1.8 Hz, 2H), 3.01 - 2.92 (m, 3H), 2.86 - 2.76 (m, 4H), 2.70 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 2.56 - 2.51 (m, 3H), 2.44 (t, J= 6.0 Hz, 6H), 2.23 (dt, J= 25.8, 7.4 Hz, 8H), 2.02 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 1.97 - 1.84 (m, 8H), 1.62 (s, 5H), 1.30 (s, 3H), 1.21 (s, 6H), 0.87 (s, 14H), 0.75 (s, 6H)。
化合物 13 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(3-(2-(2-(4-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 丙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1694
步驟 1 ：將THPTA (1.94 mg，0.004 mmol)及CuSO 4(0.14 mg，0.001 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(疊氮基甲基)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(3 mg, 0.009 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S, 23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(2-(己-5-炔醯胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28, 31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22, 25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 6，15 mg, 0.009 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.35 mg，0.002 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌12小時。蒸發溶劑，且粗物質藉由製備型HPLC純化，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(2-(4-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)丁醯胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25, 28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25, 28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 13 ，2.6 mg, 13%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1156 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.78 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.12 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.88 - 6.82 (m, 2H), 5.38 (s, 1H), 4.70 - 4.56 (m, 3H), 4.48 (s, 2H), 4.33 (d, J = 45.2 Hz, 6H), 4.07 (dd, J = 21.1, 9.4 Hz, 2H), 3.95 (s, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 8H), 3.66 (s, 1H), 3.62 (s, 5H), 3.54 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.50 - 3.42 (m, 2H), 3.13 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 2.94 (d, J = 65.8 Hz, 3H), 2.83 - 2.77 (m, 1H), 2.76 - 2.67 (m, 3H), 2.55 (s, 1H), 2.46 (t, J = 6.0 Hz, 5H), 2.28 - 2.12 (m, 6H), 2.06 - 1.88 (m, 9H), 1.70 (d, J = 81.3 Hz, 6H), 1.30 (s, 9H), 1.20 - 1.11 (m, 6H), 1.00 - 0.90 (m, 15H), 0.85 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。
化合物 14 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(20-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1696
Figure 02_image1698
步驟 1 ：將THPTA (1.52 mg，0.004 mmol)及CuSO 4(0.56 mg，0.004 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，9.5 mg, 0.007 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 4，15 mg, 0.007 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.69 mg，0.004 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌16小時。蒸發溶劑，且粗物質藉由製備型HPLC純化，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(20-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 14 ，1.7 mg, 6.9%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1125 [M+3H] 3+。
化合物 15 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S, 44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(20-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28, 31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28, 31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1700
Figure 02_image1702
步驟 1 ：將THPTA (3.25 mg，0.007 mmol)及CuSO 4(0.24 mg，0.002 mmol)溶解於水(0.5 mL)中，接著添加至(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(疊氮基甲基)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(5 mg, 0.015 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(30.80 mg, 0.015 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.59 mg，0.002 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌16小時。蒸發溶劑，且粗物質藉由製備型HPLC純化，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R, 47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(20-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37, 40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 15 ，4.7 mg, 13%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1200 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.78 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.30 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.19 - 7.09 (m, 2H), 7.05 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 4.95 - 4.86 (m, 5H), 4.77 (dd, J = 13.6, 2.6 Hz, 3H), 4.71 - 4.56 (m, 3H), 4.54 - 4.43 (m, 2H), 4.42 - 4.22 (m, 5H), 4.08 (t, J = 13.1 Hz, 2H), 3.93 (dd, J = 10.9, 6.0 Hz, 1H), 3.88 - 3.66 (m, 8H), 3.63 (s, 13H), 3.53 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 2H), 3.35 (t, J = 5.5 Hz, 3H), 3.29 - 3.10 (m, 6H), 3.07 - 2.89 (m, 3H), 2.87 - 2.69 (m, 4H), 2.63 - 2.05 (m, 14H), 2.03 - 1.90 (m, 6H), 1.88 - 1.49 (m, 6H), 1.15 (dd, J = 13.8, 7.2 Hz, 6H), 1.02 - 0.90 (m, 12H), 0.85 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
化合物 16 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸 之製備
Figure 02_image1704
Figure 02_image1706
步驟 1 ：向3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (15 mg, 0.01 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 中間體 4，25 mg, 0.01 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加含CuSO 4(2 mg)、THPTA (3 mg)之H 2O (0.1 mL)及含抗壞血酸鈉(2 mg)之H 2O (0.1 mL)。將混合物在35℃下攪拌過夜，接著濃縮。殘餘物藉由急驟管柱純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S, 23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25, 28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22, 25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 16 ，8.2 mg, 20%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1125 [M+3H] 3+。 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.72 (s, 1H), 8.69 - 8.64 (m, 1H), 8.50 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.17 - 7.10 (m, 2H), 7.04 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.35 (t, J = 7.1 Hz, 7H), 4.13 - 4.03 (m, 6H), 3.91 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 3.74 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.71 - 3.66 (m, 14H), 3.64 - 3.58 (m, 46H), 3.53 (t, J = 5.3 Hz, 7H), 3.45 (dd, J = 12.7, 6.9 Hz, 4H), 3.36 (t, J = 4.6 Hz, 8H), 3.18 - 3.12 (m, 4H), 2.70 (d, J = 9.9 Hz, 3H), 2.44 (t, J = 6.6 Hz, 9H), 2.23 (dt, J = 19.1, 7.5 Hz, 6H), 2.01 - 1.82 (m, 10H), 1.63 (s, 5H), 1.49 (s, 3H), 1.46 (d, J = 2.0 Hz, 9H), 1.31 (s, 5H), 1.14 (d, J = 6.1 Hz, 5H), 1.00 - 0.94 (m, 5H), 0.97 - 0.89 (m, 9H), 0.85 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。
化合物 17 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(3-(2-(2-(4-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 丙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1708
Figure 02_image1710
步驟 1 ：將THPTA (0.51 mg，0.01 mmol)及CuSO 4(0.04 mg，0.0002 mmol)溶解於水(0.5 mL)中。接著將混合物添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，3.1 mg, 0.002 mmol)及3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(2-(己-5-炔醯胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34, 37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(5 mg, 0.002 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.09 mg，0.0004 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液，且將反應混合物在35℃下攪拌16小時。蒸發溶劑，且粗物質藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S, 23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(3-(2-(2-(4-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)丁醯胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 17 ，4.7 mg, 60%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1642 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.75 (s, 1H), 7.69 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.94 - 6.83 (m, 3H), 5.38 (s, 2H), 4.66 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.59 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 4.49 (s, 1H), 4.36 (dd, J = 14.1, 7.0 Hz, 4H), 4.26 (s, 1H), 4.15 - 3.96 (m, 6H), 3.92 - 3.73 (m, 12H), 3.71 - 3.58 (m, 40H), 3.57 - 3.49 (m, 7H), 3.46 (dt, J = 9.7, 4.3 Hz, 5H), 3.36 (dd, J = 10.0, 4.9 Hz, 7H), 3.24 (d, J = 16.8 Hz, 4H), 3.03 (dd, J = 42.9, 32.9 Hz, 4H), 2.83 (s, 1H), 2.72 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 2.63 - 2.39 (m, 11H), 2.37 - 2.09 (m, 10H), 2.07 - 1.67 (m, 13H), 1.62 (dd, J = 15.5, 7.8 Hz, 4H), 1.38 - 1.26 (m, 4H), 1.15 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.01 - 0.80 (m, 18H)。
化合物 18 ： (S)-2-((S)-2-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-23-(1-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-4,20- 二側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -3,19- 二氮雜二十三烷醯胺基 )-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基 )-3- 羥基 -1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -3- 苯基丙 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-23,29- 雙 (3- 胍基丙基 )-20-(4- 羥苯甲基 )-17-( 羥甲基 )-14- 異丁基 -3- 異丙基 -1,4,12,15,18,21,24,27,30- 九側氧基三十氫 -1H,10H- 吡咯并 [2,1-j][1,2] 二硫雜 [5,8,11,14,17,20,23,26,29] 九氮雜環三十二烷 -11- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 戊二醯胺之製備
Figure 02_image1712
步驟 1 ：將THPTA (6.5 mg)及CuSO 4(0.5 mg)溶解於水(0.1 mL)中。將混合物添加至(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(10 mg)及OPT-炔烴(59 mg)於MeOH (3 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(1.2 mg)於水(0.1 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-2-((S)-2-((1H-咪唑-5-基)甲基)-23-(1-(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-3,19-二氮雜二十三烷醯胺基)-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)戊二醯胺( 化合物 18 ，8 mg, 11%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：632 [M+4H] 4+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 8.35 (s, 4H), 7.98 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.10 (dt, J= 13.3, 5.8 Hz, 8H), 6.90 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 6.74 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 5.79 (dd, J= 43.7, 10.3 Hz, 2H), 5.27 - 5.08 (m, 3H), 4.61 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.42 - 4.33 (m, 3H), 4.18 (d, J= 17.2 Hz, 1H), 4.10 - 4.05 (m, 1H), 3.95 - 3.67 (m, 11H), 3.62 - 3.50 (m, 17H), 3.24 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.15 - 2.81 (m, 12H), 2.70 (dd, J= 15.9, 8.7 Hz, 3H), 2.51 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 2.32 - 2.15 (m, 6H), 1.96 (ddd, J= 21.1, 13.1, 5.9 Hz, 12H), 1.74 (s, 6H), 1.36 - 1.19 (m, 8H), 0.97 (ddd, J= 46.2, 22.9, 5.2 Hz, 21H)。 19F NMR (377 MHz, CD3OD): δ -72.28 (s), -76.92 (s)。
化合物 19 ： (S)-2-((S)-2-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-23-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-4,20- 二側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -3,19- 二氮雜二十三烷醯胺基 )-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基 )-3- 羥基 -1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -3- 苯基丙 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-23,29- 雙 (3- 胍基丙基 )-20-(4- 羥苯甲基 )-17-( 羥甲基 )-14- 異丁基 -3- 異丙基 -1,4,12,15,18,21,24,27,30- 九側氧基三十氫 -1H,10H- 吡咯并 [2,1-j][1,2] 二硫雜 [5,8,11,14,17,20,23,26,29] 九氮雜環三十二烷 -11- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 戊二醯胺之製備
Figure 02_image1714
步驟 1 ：將THPTA (18.3 mg)及CuSO 4(1.3 mg)溶解於水(0.25 mL)中。將混合物添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，110 mg)及OPT-炔烴(140 mg)於MeOH (5 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(3.3 mg)於水(0.25 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-2-((S)-2-((1H-咪唑-5-基)甲基)-23-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-3,19-二氮雜二十三烷醯胺基)-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)戊二醯胺( 化合物 19 ，13 mg, 4%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：701 [M+5H] 5+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.48 (s, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.16 - 7.07 (m, 7H), 6.93 (s, 1H), 6.74 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 5.76 (d, J= 34.0 Hz, 2H), 5.39 (s, 2H), 5.24 - 5.06 (m, 3H), 4.94 (s, 2H), 4.75 (s, 6H), 4.44 - 4.33 (m, 6H), 4.29 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 9.6 Hz, 2H), 3.94 (d, J= 4.0 Hz, 2H), 3.83 (d, J= 8.1 Hz, 3H), 3.71 - 3.54 (m, 58H), 3.46 (dd, J= 9.6, 3.7 Hz, 4H), 3.37 (dd, J= 10.0, 5.3 Hz, 7H), 3.23 (s, 2H), 3.13 (d, J= 5.0 Hz, 4H), 2.98 (dd, J= 26.6, 11.0 Hz, 8H), 2.72 (s, 2H), 2.46 (dd, J= 13.9, 8.0 Hz, 6H), 2.22 (dt, J= 24.6, 7.5 Hz, 8H), 2.02 - 1.89 (m, 12H), 1.72 (s, 4H), 1.68 - 1.59 (m, 4H), 1.32 (s, 3H), 1.23 (d, J= 6.2 Hz, 4H), 1.03 - 0.94 (m, 12H), 0.87 (t, J= 5.9 Hz, 9H)。
化合物 20 ： (S)-2-((S)-34-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22,32- 三側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21,33- 三氮雜三十五烷 -35- 醯胺基 )-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基 )-3- 羥基 -1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -3- 苯基丙 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-23,29- 雙 (3- 胍基丙基 )-20-(4- 羥苯甲基 )-17-( 羥甲基 )-14- 異丁基 -3- 異丙基 -1,4,12,15,18,21,24,27,30- 九側氧基三十氫 -1H,10H- 吡咯并 [2,1-j][1,2] 二硫雜 [5,8,11,14,17,20,23,26,29] 九氮雜環三十二烷 -11- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 戊二醯胺之製備
Figure 02_image1716
Figure 02_image1718
Figure 02_image1720
步驟 1 ：在室溫下向(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)胺基甲酸苯甲酯(400 mg, 0.31 mmol)及CSA (7.0 mg，0.03 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加2,2-二甲氧基丙烷(161.1 mg，1.55 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。所得混合物用EA (20 mL)稀釋，用H 2O (5 mL × 2)及鹽水(5 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之(1,39-雙((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)胺基甲酸苯甲酯(300 mg, 71%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1382 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向(1,39-雙((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)胺基甲酸苯甲酯(200 mg, 0.15 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (20 mg，10重量%，60%濕潤)，且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。於減壓下過濾及濃縮該混合物以好得到粗產物。該粗產物藉由急驟層析(MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (150 mg, 83%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1247 [M+H] +。
步驟 3 ：在0℃下向(13S,16S,19S)-13-((1H-咪唑-5-基)甲基)-19-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺甲醯基)-16-(3-胺基-3-側氧基丙基)-20-甲基-11,14,17-三側氧基-3,6,9-三氧雜-12,15,18-三氮雜二十一烷酸(69 mg, 0.029 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中添加HATU (13 mg，0.035 mmol)、DIEA (0.029 mL，0.173 mmol)。將反應物在0℃下攪拌30分鐘。添加3,3'-((2-胺基丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (40 mg, 0.032 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌16小時。混合物藉由製備型HPLC純化，得到(S)-2-((S)-34-((1H-咪唑-5-基)甲基)-1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22,32-三側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21,33-三氮雜三十五烷-35-醯胺基)-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)戊二醯胺(25 mg, 26%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：822 [M+4H] 4+。
步驟 4 ：將(S)-2-((S)-34-((1H-咪唑-5-基)甲基)-1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22,32-三側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21,33-三氮雜三十五烷-35-醯胺基)-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)戊二醯胺(20 mg, 0.006 mmol)溶解於TFA/MeCN溶液(2 mL，1重量%)中。將反應物在室溫下攪拌18小時。將反應物真空濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到標題化合物(S)-2-((S)-34-((1H-咪唑-5-基)甲基)-1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22,32-三側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21,33-三氮雜三十五烷-35-醯胺基)-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S, 29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)戊二醯胺( 化合物 20 ，6 mg, 31%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：802 [M+4H] 4+。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.81 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.11 (ddd, J = 18.2, 14.7, 8.3 Hz, 7H), 6.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.74 (d, J = 28.6 Hz, 2H), 5.12 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 5.03 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.77 - 4.65 (m, 3H), 4.48 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 9.0 Hz, 4H), 4.29 - 4.16 (m, 3H), 4.14 - 3.98 (m, 6H), 3.91 (t, J = 6.4 Hz, 3H), 3.83 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 3.71 - 3.59 (m, 42H), 3.51 (ddd, J = 9.4, 8.1, 3.6 Hz, 11H), 3.37 (t, J = 5.5 Hz, 5H), 3.25 - 3.12 (m, 6H), 3.05 - 2.85 (m, 7H), 2.78 (t, J = 12.5 Hz, 2H), 2.67 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.45 (t, J = 6.1 Hz, 4H), 2.18 (dd, J = 29.7, 22.2 Hz, 4H), 2.07 - 1.84 (m, 9H), 1.69 (t, J = 27.4 Hz, 7H), 1.30 (s, 4H), 1.20 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 1.05 - 0.92 (m, 10H), 0.90 - 0.80 (m, 9H)。
化合物 21 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-24-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-5,21- 二側氧基 -8,11,14,17- 四氧雜 -4,20- 二氮雜二十四烷酸之製備
Figure 02_image1722
步驟 1 ：將THPTA (3.3 mg，0.0076 mmol)及CuSO 4(0.3 mg，0.0012 mmol)溶解於水(0.1 mL)中。將混合物添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( A14，20 mg, 0.015 mmol)及FC-III肽-炔烴(25.7 mg)於MeOH (2 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.6 mg，0.0030 mmol)於水(0.1 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(2-羧乙基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺甲醯基)-24-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-5,21-二側氧基-8,11,14,17-四氧雜-4,20-二氮雜二十四烷酸( 化合物 21 ，14 mg, 28%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1591 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.70 (s, 1H), 7.51 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.27 (s, 2H), 7.20 (s, 2H), 6.99 (d, J= 25.8 Hz, 7H), 5.38 (s, 2H), 4.34 (dd, J= 22.4, 15.1 Hz, 6H), 4.11 - 4.08 (m, 1H), 3.99 (d, J= 9.6 Hz, 2H), 3.92 (d, J= 4.1 Hz, 2H), 3.82 - 3.75 (m, 5H), 3.70 - 3.66 (m, 12H), 3.64 - 3.56 (m, 40H), 3.53 (t, J= 5.6 Hz, 6H), 3.49 (d, J= 5.7 Hz, 2H), 3.46 (d, J= 3.8 Hz, 2H), 3.37 (t, J= 5.5 Hz, 6H), 3.04 (ddd, J= 79.3, 27.9, 5.4 Hz, 14H), 2.68 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.44 (t, J= 6.1 Hz, 8H), 2.25 - 2.17 (m, 6H), 1.96 - 1.84 (m, 6H), 1.67 - 1.52 (m, 6H), 1.29 (s, 8H), 0.84 (s, 21H)。
化合物 22 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-24-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-5,21- 二側氧基 -8,11,14,17- 四氧雜 -4,20- 二氮雜二十四烷酸之製備
Figure 02_image1724
步驟 1 ：將THPTA (1.7 mg，0.0040 mmol)及CuSO 4(0.3 mg，0.0010 mmol)溶解於水(0.05 mL)中。將混合物添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (15 mg, 0.015 mmol)及FC-III肽-炔烴(10 mg)於MeOH (1 mL)中之溶液中。添加新製的抗壞血酸鈉(0.4 mg，0.0020 mmol)於水(0.05 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H-咪唑-5-基)甲基)-7,28-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-4-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺甲醯基)-16-(2-羧乙基)-13,22-二異丁基-10-異丙基-31-甲基-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十側氧基-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氮雜環三十五烷-34-基)胺甲醯基)-24-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-5,21-二側氧基-8,11,14,17-四氧雜-4,20-二氮雜二十四烷酸( 化合物 22 ，2.5 mg, 10%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：795 [M+4H] 4+。 1H NMR (400 MHz, D 2O): δ 8.42 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 8.37 (s, 14H), 7.55 (s, 1H), 7.41 (dd, J = 12.5, 8.8 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 8.3 Hz, 4H), 7.07 (d, J = 14.5 Hz, 4H), 6.98 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 6.94 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 4.27 - 4.12 (m, 4H), 4.06 - 3.93 (m, 4H), 3.90 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 3.77 - 3.45 (m, 70H), 3.38 (dd, J = 7.1, 1.7 Hz, 4H), 3.32 - 3.21 (m, 6H), 3.22 - 3.08 (m, 5H), 2.97 (d, J = 8.9 Hz, 4H), 2.82 (dd, J = 21.3, 9.1 Hz, 3H), 2.68 - 2.52 (m, 4H), 2.48 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 2.39 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 2.22 - 2.05 (m,5H), 1.87 - 1.76 (m, 3H), 1.71 (d, J = 11.9 Hz, 3H), 1.54 - 1.41 (m, 4H), 1.32 - 1.17 (m,6H), 1.16 - 1.04 (m, 7H), 0.79 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.75 - 0.65 (m, 10H), 0.63 - 0.57 (m, 5H)。 19F NMR (377 MHz, D 2O) δ -70.54, -75.60。
化合物 23 ： ((S)-2-((S)-2-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-23-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-4,20- 二側氧基 -7,10,13,16- 四氧雜 -3,19- 二氮雜二十三烷醯胺基 )-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基 )-3- 羥基 -1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -3- 苯基丙 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-23,29- 雙 (3- 胍基丙基 )-20-(4- 羥苯甲基 )-17-( 羥甲基 )-14- 異丁基 -3- 異丙基 -1,4,12,15,18,21,24,27,30- 九側氧基三十氫 -1H,10H- 吡咯并 [2,1-j][1,2] 二硫雜 [5,8,11,14,17,20,23,26,29] 九氮雜環三十二烷 -11- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 戊二醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1726
步驟 1 ：將THPTA (1.7 mg，0.0007 mmol)及CuSO 4(0.3 mg，0.002 mmol)溶解於水(0.05 mL)中。將混合物添加至3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (5 mg, 0.003 mmol)及OPT-炔烴(8.4 mg, 0.003 mmol)於MeOH (1 mL)中之溶液中。添加抗壞血酸鈉(0.4 mg，0.002 mmol)於水(0.05 mL)中之溶液。將反應物攪拌過夜。過濾所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到呈白色固體狀之(S)-2-((S)-2-((1H-咪唑-5-基)甲基)-23-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4,20-二側氧基-7,10,13,16-四氧雜-3,19-二氮雜二十三烷醯胺基)-N1-((S)-1-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((2S,3R)-1-胺基-3-羥基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)戊二醯胺( 化合物 23，2.5 mg, 18%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：701 [M+5H] 5+。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.55 (s, 1H), 8.51 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.16 - 7.07 (m, 7H), 6.89 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 6.74 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 5.75 (d, J= 48.2 Hz, 2H), 5.26 - 5.05 (m, 3H), 4.91 (d, J= 17.5 Hz, 2H), 4.76 (s, 6H), 4.58 (s, 2H), 4.45 - 4.28 (m, 9H), 4.16 (s, 1H), 4.08 (dd, J= 10.2, 4.6 Hz, 3H), 3.92 (d, J= 3.0 Hz, 2H), 3.69 - 3.53 (m, 58H), 3.48 - 3.43 (m, 4H), 3.38 - 3.33 (m, 7H), 3.22 (d, J= 6.7 Hz, 2H), 3.19 - 3.07 (m, 6H), 3.05 - 2.94 (m, 6H), 2.71 (s, 2H), 2.46 (dd, J= 14.5, 8.5 Hz, 6H), 2.22 (dt, J= 13.3, 7.0 Hz, 8H), 2.05 - 1.87 (m, 14H), 1.73 (d, J= 6.2 Hz, 4H), 1.66 - 1.57 (m, 4H), 1.35 - 1.28 (m, 4H), 1.23 (d, J= 6.4 Hz, 3H), 1.04 - 0.92 (m, 12H), 0.87 (t, J= 5.9 Hz, 9H)。 19F NMR (377 MHz, MeOD): δ -72.26 (s)。
化合物 24 ： (2R,3R,4R,5R)-5-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2-(13-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4- 二醇之製備
Figure 02_image1728
Figure 02_image1730
步驟 1 ：向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(100 mg，0.31 mmol)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加NaH (25.0 mg，0.61 mmol，60重量%於礦物油中)、2,2,2-三氟-N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(110 mg，0.37 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(80 mg, 0.13 mmol)，LC-MS (ESI)實驗值：641 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(80 mg, 0.13 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中添加HCl (2 N於水中) (5 mL)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由管柱純化，得到N-((3R,4R,5R,6R)-6-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺( 化合物 25，60 mg, 0.10 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：601 [M+H] +。
步驟 3 ：將N-((3R,4R,5R,6R)-6-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(60 mg, 0.10 mmol)及NH 3/MeOH (10 mL，7 N)之混合物在80℃下攪拌16小時。將混合物減壓濃縮，且殘餘物藉由管柱純化，得到(2R,3R,4R,5R)-5-胺基-2-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(40 mg, 0.079 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：505 [M+H] +。
步驟 4 ：向(2R,3R,4R,5R)-5-胺基-2-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(40 mg, 0.079 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加DIEA (31 mg，0.24 mmol)及3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(16 mg，0.10 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物減壓濃縮，且殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到(2R,3R,4R,5R)-5-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇( 化合物 24 ，5.0 mg, 10%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：623 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.04 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.93 - 3.86 (m, 2H), 3.81 (dd, J = 6.6, 3.7 Hz, 3H), 3.72 - 3.53 (m, 18H)。
化合物 27 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-1-(13-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1732
Figure 02_image1734
步驟 1 ：將NaH (49 mg，60重量%於礦物油中)添加至2,2,2-三氟-N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)乙醯胺(200 mg，0.61 mmol)於無水DMF (5 mL)中之懸浮液中。將混合物在室溫下攪拌1.5小時。接著向上述溶液中添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(267 mg，0.52 mmol)。將混合物在室溫下再攪拌16小時。向混合物中添加NH 4Cl (水溶液)且移除溶劑。接著殘餘物藉由急驟(DCM:MeOH = 15:1)純化，得到N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(215 mg, 53%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：670 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(215 mg, 0.322 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加HCl (1 mL，2 M於H 2O中)。將反應物在室溫下攪拌18小時。移除溶劑且藉由製備型HPLC (MEOH/水)純化，得到N-((1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(120 mg, 59%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：629 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.04 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.29 (dd, J= 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 5.22 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 3.98 (t, J= 9.7 Hz, 2H), 3.91 - 3.84 (m, 2H), 3.83 - 3.77 (m, 3H), 3.67 (ddd, J= 7.8, 4.1, 2.2 Hz, 8H), 3.65 - 3.60 (m, 8H)。
步驟 3 ：將N-((1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(100 mg, 0.159 mmol)於NH 3/MeOH溶液(5 mL，7 M)中之溶液，且將反應物在70℃下攪拌18小時。將反應物真空濃縮，得到(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(74 mg, 87%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：533 [M+H] +。
步驟 4 ：向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(74 mg, 0.139 mmol)於i-PrOH (3 mL)中之溶液中添加DIEA (0.14 mL，0.834 mmol)及二氯-1,2,4-噻二唑(108 mg，0.695 mmol)，且將反應物在80℃下攪拌18小時。將反應物真空濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到(1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-1-(13-((2,4-二硝基苯基)胺基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇( 化合物 27，36 mg, 40%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：651 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.03 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.28 (dd, J= 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 5.35 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 3.97 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.91 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 3.88 - 3.78 (m, 4H), 3.75 (dd, J= 9.6, 4.3 Hz, 1H), 3.71 - 3.65 (m, 9H), 3.64 - 3.60 (m, 7H)。
化合物 34 ： N-((1S,2R,3R,4R,5S)-1-(22-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 )-2,5,8,11,14,17,20- 七氧雜二十二烷基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -4- 基 )-2,2,2- 三氟乙醯胺及化合物 26 ： (1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-1-(22-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 )-2,5,8,11,14,17,20- 七氧雜二十二烷基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇之製備
Figure 02_image1736
Figure 02_image1738
使用4-甲基苯磺酸20-((2,4-二硝基苯基)胺基)-3,6,9,12,15,18-六氧雜二十烷基酯作為起始物質，根據與 化合物 27相同之程序來製備化合物。
化合物 34：LC-MS (ESI)實驗值：761 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.11 - 8.81 (m, 1H), 8.28 (dd, J= 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 5.23 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 3.99 (t, J= 9.2 Hz, 2H), 3.92 - 3.86 (m, 2H), 3.81 (dd, J= 6.4, 4.3 Hz, 3H), 3.70 - 3.64 (m, 10H), 3.61 (d, J= 2.4 Hz, 18H)。
化合物 26 ：LC-MS (ESI)實驗值：783 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.03 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.29 (dd, J= 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 5.37 (s, 1H), 3.99 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.92 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 3.81 (dd, J= 9.5, 4.6 Hz, 3H), 3.78 - 3.74 (m, 1H), 3.71 - 3.64 (m, 10H), 3.62 (d, J= 2.9 Hz, 19H)。
化合物 28 ： 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5R)-5-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-3,4- 二羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1740
Figure 02_image1742
步驟 1 ：在0℃下向N-((3R,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(2.8 g，10.8 mmol)於DMF (30 mL)中之溶液中添加咪唑(1.46 mL，21.6 mmol)及三級丁基氯二苯基矽烷(4.45 g，16.2 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。所得混合物用DCM (100 mL)稀釋，用H 2O (30 mL × 2)及鹽水(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~80% EA/PE)純化，得到呈無色油狀物之N-((3R,4R,5R,6R)-6-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(5.2 g, 96%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：520 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 8.17 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.72 - 7.62 (m, 4H), 7.49 - 7.36 (m, 6H), 4.28 (dd, J= 8.3, 4.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 4.16 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 4.06 - 3.91 (m, 3H), 3.80 (s, 1H), 3.51 (dd, J= 12.4, 1.5 Hz, 1H), 3.34 - 3.29 (m, 1H), 3.01 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 1.06 (s, 9H)。 19F NMR (377 MHz, CDCl 3): δ -76.16 (s)。
步驟 2 ：在N 2下在室溫下，向N-((3R,4R,5R,6R)-6-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(5.4 g, 10.9 mmol)於2,2-二甲氧基丙烷(20 mL，161.3 mmol)中之溶液中添加PTSA (0.19 g，1.1 mmol)。將反應物在室溫下攪拌過夜。所得混合物用DCM (150 mL)稀釋，用H 2O (50 mL × 2)及鹽水(30 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~80% EA/PE)純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(4.6 g, 78%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：538 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 7.72 - 7.64 (m, 4H), 7.46 - 7.35 (m, 6H), 6.69 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 4.42 - 4.36 (m, 2H), 4.35 - 4.28 (m, 1H), 3.92 - 3.77 (m, 4H), 3.54 (dd, J= 11.4, 2.9 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.05 (s, 9H)。
步驟 3 ：在室溫下向N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(4.6 g, 8.6 mmol)於THF (50 mL)中之溶液中添加TBAF (17 mL，1 M於THF中)，且攪拌3小時。所得混合物用DCM (100 mL)稀釋，用H 2O (30 mL × 2)及鹽水(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之2,2,2-三氟-N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(2.2 g, 85%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：300 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 9.05 (s, 1H), 4.71 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 4.48 (dd, J= 7.6, 3.6 Hz, 1H), 4.30 (ddd, J= 12.8, 8.3, 3.5 Hz, 2H), 3.81 (t, J= 9.7 Hz, 1H), 3.64 (ddd, J= 16.0, 8.4, 3.7 Hz, 2H), 3.44 (td, J= 6.2, 4.5 Hz, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。
步驟 4 ：在0℃下向2,2,2-三氟-N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(300 mg, 1 mmol)於DMF (8 mL)中之溶液中添加NaH (80 mg，2 mmol)，且在N 2下攪拌1小時。在0℃下添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(664 mg，2 mmol)，且在N 2下在室溫下攪拌2小時。用DCM (80 mL)及水(10 mL)稀釋所得混合物。用DCM (50 mL × 2)萃取水相。分離有機層，經Na 2SO 4乾燥且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(250 mg, 54%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：501 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 9.09 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 4.48 (dd, J= 7.5, 3.6 Hz, 1H), 4.36 - 4.25 (m, 2H), 3.88 - 3.76 (m, 2H), 3.65 (dd, J= 10.1, 5.8 Hz, 1H), 3.62 - 3.58 (m, 2H), 3.58 - 3.46 (m, 13H), 3.44 - 3.36 (m, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。
步驟 5 ：將N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(900 mg, 1.8 mmol)於氨甲醇溶液(6 mL，7 M於MeOH中)中之溶液在70℃下攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之(3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-胺(400 mg, 55%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：405 [M+H] +。
步驟 6 ：在N 2下在室溫下，向(3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-胺(420 mg, 1.0 mmol)及二氯-1,2,4-噻二唑(322 mg，2.1 mmol)於i-PrOH (6 mL)中之溶液中添加DIPEA (0.5 mL，3.1 mmol)。將反應物在80℃下攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(480 mg, 88%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：524 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 5.49 (s, 1H), 4.52 (dd, J= 6.8, 4.7 Hz, 1H), 4.36 - 4.19 (m, 2H), 3.95 (ddd, J= 7.2, 5.0, 2.3 Hz, 1H), 3.85 (dd, J= 10.9, 6.4 Hz, 1H), 3.75 (dd, J= 10.9, 4.0 Hz, 1H), 3.71 - 3.67 (m, 4H), 3.66 - 3.63 (m, 12H), 3.40 - 3.35 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.33 (s, 3H)。
步驟 7 ：向N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(480 mg, 0.92 mmol)於THF (9 mL)及H 2O (3 mL)中之溶液中添加PPh 3(481 mg，1.84 mmol)。將混合物在80℃下攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(330 mg, 72%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：497 [M+H] +。
步驟 8 ：將13-((2-羧乙氧基)甲基)-1-((2,4-二硝基苯基)胺基)-11-側氧基-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸(120 mg, 0.2 mmol)及HATU (170 mg，0.45 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。接著在室溫下添加N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(303 mg, 0.6 mmol)及DIPEA (0.12 mL, 0.7 mmol)。將反應物攪拌過夜。所得混合物用DCM (100 mL)稀釋，用H 2O (50 mL × 2)及鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥。分離有機層，且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈黃色油狀物之3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7R,7aR)-7-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (250 mg, 79%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：775 [M+2H] 2+。
步驟 9 ：向3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7R,7aR)-7-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (250 mg, 0.16 mmol)於THF (6 mL)中之溶液中添加HCl (3 mL，2 M於H 2O中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈黃色固體狀之3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5R)-5-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 28，105 mg, 44%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：735 [M+2H] 2+。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.04 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.30 (dd, J= 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.21 - 4.17 (m, 1H), 4.06 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.03 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.90 (d, J= 3.1 Hz, 2H), 3.85 - 3.80 (m, 4H), 3.75 - 3.46 (m, 56H), 3.36 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 2.44 (t, J= 6.2 Hz, 4H)。
化合物 29 ： (N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 )-3-((14-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 )-4- 側氧基 -6,9,12- 三氧雜 -3- 氮雜十四烷基 ) 氧基 ) 丙烯醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1744
Figure 02_image1746
步驟 1 ：將N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(100 mg, 0.19 mmol)於NH 3甲醇溶液(5 mL，7 M)中之溶液在70℃下攪拌過夜。濃縮混合物，得到呈無色油狀物之粗物質(3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-胺(70 mg, 86%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：341 [M+H] +。
步驟 2 ：將(3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-胺(70 mg, 0.16 mmol)、3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(35 mg，0.22 mmol)及DIPEA (48 mg，0.37 mmol)於 i-PrOH (2 mL)中之溶液在80℃下攪拌過夜，接著蒸發。殘餘物藉由製備型TLC純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(90 mg, 88%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：551 [M+H] +。
步驟 3 ：向N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(90 mg, 0.16 mmol)於THF (3 mL)及H 2O (1 mL)中之溶液中添加PPh 3(86 mg，0.33 mmol)。將混合物在70℃下攪拌過夜，接著蒸發。殘餘物藉由製備型TLC純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(70 mg, 82%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：525 [M+H] +。
步驟 4 ：將1-((2,4-二硝基苯基)胺基)-11-側氧基-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸(72 mg，0.15 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用HATU (158 mg，0.42 mmol)及DIPEA (52 mg，0.40 mmol)處理。將混合物冷卻至0℃後保持30分鐘。添加N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-3-氯-1,2,4-噻二唑-5-胺(70 mg, 0.13 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌過夜。混合物藉由製備型TLC純化，接著藉由C18純化，得到呈黃色油狀物之N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-3-((14-((2,4-二硝基苯基)胺基)-4-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十四烷基)氧基)丙醯胺(70 mg, 53%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：995 [M+H] +。
步驟 5 ：在室溫下向N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-8-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-3-((14-((2,4-二硝基苯基)胺基)-4-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十四烷基)氧基)丙醯胺(70 mg, 0.07 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (0.3 mL，2 M於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌過夜，混合物藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到呈黃色固體狀之N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-3-((14-((2,4-二硝基苯基)胺基)-4-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十四烷基)氧基)丙醯胺( 化合物 29，43 mg, 65%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：955 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.03 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 9.7 Hz, 3H), 3.92 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 6.6, 4.7 Hz, 3H), 3.76 (dd, J = 9.6, 4.2 Hz, 1H), 3.72 - 3.66 (m, 16H), 3.65 - 3.61 (m, 11H), 3.53 (dt, J = 10.9, 5.5 Hz, 4H), 3.38 (dt, J = 8.4, 5.5 Hz, 4H), 2.44 (t, J = 6.2 Hz, 2H)。
化合物 30 ： (3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3- 氯 -1,2,4- 噻二唑 -5- 基 ) 胺基 )-2,3- 二羥基 -6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 )) 之製備
Figure 02_image1748
步驟 1 ：向3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (20 mg, 0.016 mmol)於i-PrOH (3 mL)中之溶液中添加DIEA (0.003 mL，0.016 mmol)及3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(19 mg，0.124 mmol)。將反應物在80℃下攪拌18小時。將反應物真空濃縮。殘餘物藉由製備型TLC及製備型HPLC (方法A)純化，得到3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-((3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)胺基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 30，2.7 mg, 11%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1525 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.04 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.19 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.92 (d, J = 4.1 Hz, 2H), 3.82 (dd, J = 9.2, 3.1 Hz, 6H), 3.76 (dd, J = 9.6, 4.2 Hz, 2H), 3.68 (ddd, J = 6.4, 4.1, 1.5 Hz, 22H), 3.64 - 3.60 (m, 20H), 3.52 (ddd, J = 15.2, 10.4, 4.9 Hz, 8H), 3.37 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 2.44 (t, J = 6.2 Hz, 4H)。
化合物 31 ： (3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 )) 之製備
Figure 02_image1750
Figure 02_image1752
步驟 1 ：向13-((2-羧乙氧基)甲基)-1-((2,4-二硝基苯基)胺基)-11-側氧基-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸(914 mg, 1.548 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加HATU (1.5 g，3.869 mmol)及DIPEA (1.0 g，7.739 mmol)。將反應混合物在冰水下攪拌0.5小時。添加N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-8-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(1.7 g, 3.405 mmol)，將反應混合物在室溫下攪拌16小時。添加EA，用水洗滌混合物。分離有機相，濃縮，且藉由急驟(DCM:MeOH=20:1)純化，得到3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-8-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (600 mg, 25%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1560 [M+H] +。
步驟 2 ：將3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-8-(2,2,2-三氟乙醯胺基)四氫-4,7-環氧基[1,3]二氧雜環戊并[4,5-d]㗁呯-4(5H)-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (50 mg, 0.032 mmol)溶解於HCl (0.5 ml，2 M於H 2O中)與THF (1 mL)之混合物中。將混合物在室溫下攪拌14小時。蒸發溶劑，且將殘餘物與甲苯共蒸發兩次。粗物質藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-4-(2,2,2-三氟乙醯胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (30 mg, 63%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1480 [M+H] +。
步驟 3 ：將3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-4-(2,2,2-三氟乙醯胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (30 mg, 0.020 mmol)溶解於NH 3溶液(3 mL，7 M於MeOH中)中，且將反應物在70℃下攪拌18小時。將反應物真空濃縮，得到粗物質3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (26 mg, 99%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1288 [M+H] +。
步驟 4 ：向3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (20 mg, 0.016 mmol)於i-PrOH (3 mL)中之溶液中添加DIEA (0.021 mL，0.124 mmol)及2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(23 mg，0.124 mmol)。將反應物在80℃下攪拌18小時。將反應物真空濃縮。殘餘物藉由製備型TLC及製備型HPLC (方法A)純化，得到3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-4-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 31，3.1 mg, 13%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1580 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.03 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.28 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 5.36 (d, J = 1.3 Hz, 2H), 4.23 - 4.14 (m, 3H), 4.03 - 3.96 (m, 4H), 3.94 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 3.90 - 3.79 (m, 6H), 3.72 - 3.65 (m, 22H), 3.64 - 3.58 (m, 20H), 3.52 (ddd, J = 15.2, 10.3, 4.8 Hz, 8H), 3.36 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 2.44 (t, J = 6.2 Hz, 4H)。
化合物 32 ： (3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙烯醯胺 )) 之製備
Figure 02_image1754
Figure 02_image1756
步驟 1 ：向N-[(3S,4R,5R,6R)-4,5-二羥基-6-(羥甲基)㗁烷-3-基]乙醯胺(10 g，48.7 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液中添加咪唑(6.6 g，97.5 mmol)及TBDPS氯化物(19 g，73.1 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋且用水(100 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥且減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析(矽膠，0-10% DCM/MeOH)純化，得到呈白色固體狀之N-((3S,4R,5R,6R)-6-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)乙醯胺(15 g, 69%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：444 [M+H] +。
步驟 2 ：向N-((3S,4R,5R,6R)-6-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-4,5-二羥基四氫-2H-哌喃-3-基)乙醯胺(15 g，33.8 mmol)於2,2-二甲氧基丙烷(100 mL)中之溶液中添加TsOH (0.58 g，3.38 mmol)，且將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物減壓濃縮，得到呈黃色油狀物之粗產物N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(15 g, 93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：484 [M+H] +。
步驟 3 ：向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(15 g, 31 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中添加TBAF溶液(20 mL，2 M於THF中)，且將反應物在室溫下攪拌過夜。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析(矽膠，0-10% DCM/MeOH)純化，得到呈白色固體狀之N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(7 g, 92%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：246 [M+H] +。
步驟 4 ：在0℃下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(3.5 g，14.3 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液中添加NaH (0.68 g，60重量%於礦物油中)，接著將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將反應容器再次冷卻至0℃，緩慢添加水(10 mL)，且攪拌反應混合物15分鐘。將混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋且用水(200 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(3.5 g, 58%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：447 [M+H] +。
步驟 5 ：在0℃下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(4 g，14.5 mmol)於THF (200 mL)中之溶液中添加TEA (2.1 mL，14.8 mmol)、DMAP (0.12 g，0.98 mmol)及二碳酸二三級丁酯(3.2 mL，14.8 mmol)，接著將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將反應容器再次冷卻至0℃，緩慢添加水(20 mL)，且攪拌反應混合物15分鐘。將混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋且用水(200 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，且減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之乙醯基((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(4.0 g, 82%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：547 [M+H] +。
步驟 6 ：在室溫下向乙醯基((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(4 g, 8.9 mmol)於THF (200 mL)中之溶液中添加NaOH (40重量%於H 2O中，12 mL)，接著將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，緩慢添加水(20 mL)。將混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋且用水(200 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(3.2 g, 89%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：505 [M+H] +。
步驟 7 ：在室溫下向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(3.2 g, 6.9 mmol)於DCM (100 mL)中之溶液中添加TFA (10 mL)，接著將混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(1.5 g, 65%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：365 [M+H] +。
步驟 8 ：在N 2氛圍下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-5-胺基-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(200 mg，0.55 mmol)及DIPEA (209 mg，1.65 mmol)於無水i-PrOH (2 mL)中之溶液中添加2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(199 mg，1.1 mmol)。在添加完成之後，將反應物在80℃下攪拌過夜。在起始物質耗盡(TLC監測)時，將反應容器再次冷卻至室溫。將混合物減壓濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-10% MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之(2R,3R,4R,5S)-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(150 mg, 54%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：365 [M+H] +。
步驟 9 ：向(2R,3R,4R,5S)-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(14 mg, 0.027 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中添加Pd/C (4 mg，10% wt，60%濕潤)。將混合物在H 2氣球下在室溫下攪拌0.5小時。過濾混合物且濃縮，得到呈黃色油狀物之粗物質(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(13 mg, 97%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：459 [M+H] +。
步驟 10 ：在0℃下向(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(13.1 mg，0.027 mmol)及6-((2-羧乙氧基)甲基)-19-(2,4-二硝基苯基)-8-側氧基-4,10,13,16-四氧雜-7-氮雜十九烷酸(7.0 mg，0.012 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液中添加HATU (6.7 mg，0.018 mmol)及DIPEA (4.6 mg，0.036 mmol)。將混合物在室溫下攪拌12小時。濃縮混合物，且藉由HPLC (方法A)純化，得到呈黃色油狀物之3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 32，6.1 mg, 34%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1523 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.03 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 8.29 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 4.35 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 4.23 - 4.13 (m, 1H), 4.08 (dd, J = 10.9, 5.2 Hz, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.91 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 3.81 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.74 - 3.48 (m, 54H), 3.36 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 3.16 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 6.2 Hz, 4H)。
化合物 33 ： (3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4- 二硝基苯基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5R)-5- 乙醯胺基 -3,4- 二羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 )) 之製備
Figure 02_image1758
Figure 02_image1760
步驟 1 ：在0℃下向N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(120 mg，0.49 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NaH (23.5 mg，0.98 mmol)，且在N 2下攪拌1小時。接著在0℃下添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(274.04 mg，0.73 mmol)，且在N 2下在室溫下攪拌2小時。用DCM (30 mL)及水(10 mL)稀釋所得混合物。用DCM (10 mL × 2)萃取水相。分離有機層，經Na 2SO 4乾燥且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(90 mg, 45%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：447 [M+H] +。
步驟 2 ：在H 2氣球下在室溫下，向N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(90 mg，0.2 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (10 mg，10% wt，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌1.5小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(60 mg, 71%產率)不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS (ESI)實驗值：421 [M+H] +。
步驟 3 ：將13-((2-羧乙氧基)甲基)-1-((2,4-二硝基苯基)胺基)-11-側氧基-3,6,9,15-四氧雜-12-氮雜十八烷-18-酸(10 mg，0.02 mmol)及HATU (16.2 mg，0.043 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘，接著在室溫下添加N-((3aR,4R,7R,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-3aH-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(21.4 mg，0.05 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.01 mL，0.07 mmol)。將反應物攪拌過夜。殘餘物藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到呈黃色油狀物之3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7R,7aR)-7-乙醯胺基-2,2-二甲基四氫-3aH-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (15 mg, 64%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1396 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 9.12 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.27 (dd, J= 9.4, 2.6 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.07 (t, J= 5.3 Hz, 2H), 6.98 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 5.94 (dd, J= 8.2, 4.4 Hz, 2H), 4.38 (dd, J= 7.8, 3.0 Hz, 4H), 4.25 (dd, J= 7.1, 2.0 Hz, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.87 (d, J= 2.0 Hz, 2H), 3.82 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 3.70 (dd, J= 8.1, 4.5 Hz, 15H), 3.65 - 3.61 (m, 30H), 3.54 (dd, J= 6.8, 3.8 Hz, 6H), 3.46 - 3.40 (m, 6H), 2.43 (dd, J= 12.7, 6.7 Hz, 4H), 2.00 (s, 6H), 1.49 (s, 6H), 1.33 (s, 6H)。
步驟 4 ：向3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((3aR,4R,7R,7aR)-7-乙醯胺基-2,2-二甲基四氫-3aH-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (15 mg, 0.01 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加HCl (0.1 mL，1 M於H 2O中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。粗產物藉由製備型HPLC (方法A)純化，得到呈黃色油狀物之3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((2,4-二硝基苯基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5R)-5-乙醯胺基-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 33，2.9 mg, 21%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1316 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.05 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.31 (dd, J= 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.19 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 4.07 (d, J= 3.5 Hz, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.89 - 3.85 (m, 4H), 3.82 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 3.76 - 3.74 (m, 2H), 3.71 - 3.66 (m, 16H), 3.65 - 3.61 (m, 26H), 3.56 - 3.50 (m, 12H), 3.37 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 2.44 (t, J= 6.2 Hz, 4H), 2.00 (s, 6H)。
化合物 36 ： 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(4-(3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 )-4-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯甲基 ) 哌 𠯤 -1- 基 )-2- 側氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1762
步驟 1 ：接著向1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(20 mg, 13.77 µmol, 1當量)、8-[4-[2-[5-(哌𠯤-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯氧基]乙基]苯基]異喹啉(8.17 mg, 15.15 µmol, 1.1當量)及DIEA (3.56 mg, 27.54 µmol, 4.80 µL, 2當量)於DCM (1 mL)中之混合物中添加T 3P (13.14 mg，41.31 µmol，12.28 µL，3當量)，將混合物在20℃下攪拌10.5小時。處理，且將合併之有機層減壓濃縮，得到呈黃色油狀物之殘餘物3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(4-(3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)-4-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯甲基)哌𠯤-1-基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (25 mg，粗物質)。
步驟 2 ：將3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(4-(3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)-4-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯甲基)哌𠯤-1-基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (23 mg, 11.65 µmol, 1當量)於HCl (2 mL)中之混合物在20℃下攪拌3小時。將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件(管柱：Phenomenex Luna C18 150*30 mm*5 µm；移動相：[水(0.2% FA)-ACN]；B%：20%-60%，8 min))純化，獲得呈白色固體狀之3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(4-(3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)-4-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)苯甲基)哌𠯤-1-基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 36 ，1.5 mg, 7.92e-1 µmol，6.80%產率)。 1 H NMR (400MHz, 甲醇 -d4)δ = 8.89 (br s, 1H), 8.38 (br s, 3H), 8.03 - 7.60 (m, 6H), 7.43 (br s, 3H), 7.29 - 6.91 (m, 6H), 6.77 (br d, J=4.5 Hz, 2H), 4.26 (br s, 3H), 4.20 - 4.14 (m, 2H), 4.14 - 4.03 (m, 2H), 3.95 (br s, 3H), 3.88 (br s, 2H), 3.81 (br s, 3H), 3.58 (br d, J=5.6 Hz, 21H), 3.52 (br s, 27H), 3.41 (br d , J=5.0 Hz, 10H), 3.25 (br s, 7H), 3.10 - 2.98 (m, 3H), 2.33 (br s, 5H)。
化合物 37 ： 3-((4-( 異喹啉 -8- 基 )-3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 丙酸及 3,3'-((2-(3-((4-( 異喹啉 -8- 基 )-3-(4-( 異喹啉 -8- 基 ) 苯乙氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 丙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1764
步驟 1 ：向(4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯基)甲醇(200 mg，414.45 µmol，1 eq)及丙-2-烯酸三級丁酯(159.36 mg，1.24 mmol，180.47 µL，3 eq)於t-BuOH (5 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(270.07 mg，828.89 µmol，2 eq)。將混合物在55℃下攪拌5小時。將反應混合物用 10mL H 2O 稀釋且用 10mL* 3之 乙酸乙酯萃取。合併之有機層經 Na 2SO 4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，石油醚:乙酸乙酯= 1 :1)純化。獲得呈白色固體狀之3-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)丙酸三級丁酯(130 mg, 212.86 µmol, 51.36%產率)。
步驟 2 ：向3-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)丙酸三級丁酯(130 mg，212.86 µmol，1 eq)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (1.05 g，9.24 mmol，684.21 µL，43.42 eq)。將混合物在15℃下攪拌1小時。LCMS：將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由逆相HPLC (管柱：Waters Xbridge BEH C18 100*30 mm*10 µm；移動相：[水(0.05% NH 3H 2O+10 mM NH 4HCO 3)-ACN]；B%：15%-65%，8 min，100 mL/min)純化。獲得呈白色固體狀之3-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)丙酸(3.52 mg, 6.28 µmol, 2.95%產率，98.9%純度)。 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4) δ = 9.03 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.46 (br d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.35 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.96 - 7.79 (m, 6H), 7.52 (br d, J= 7.0 Hz, 1H), 7.48 (br d, J= 7.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.13 - 7.05 (m, 3H), 6.79 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.34 - 4.28 (m, 1H), 4.21 (br dd, J= 5.3, 7.8 Hz, 1H), 3.85 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.87 - 2.73 (m, 2H), 2.55 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 1.32 (br d, J= 6.6 Hz, 1H)。
步驟 3 ：向3-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)丙酸(6 mg, 10.82 µmol, 1 eq)於DCM (1 mL)中之溶液中添加DIEA (4.19 mg，32.45 µmol，5.65 µL，3 eq)及HATU (6.17 mg，16.23 µmol，1.5 eq)。接著添加3-[2-胺基-3-[3-[2-[2-[2-[2-[[(2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-[[4-(三氟甲基)嘧啶-2-基]胺基]四氫哌喃-2-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基胺基]-3-側氧基丙氧基]丙氧基]-N-[2-[2-[2-[2-[[(2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-[[4-(三氟甲基)嘧啶-2-基]胺基]四氫哌喃-2-基]甲氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙基]丙醯胺(16.43 mg, 14.06 µmol, 1.3 eq)，將混合物在15℃下攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由逆相HPLC (管柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；移動相：[水(0.1% TFA)-ACN]；B%：15%-50%，8 min，100 mL/min)純化。獲得呈白色固體狀之3,3'-((2-(3-((4-(異喹啉-8-基)-3-(4-(異喹啉-8-基)苯乙氧基)苯甲基)氧基)丙醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 37 ，3.13 mg, 1.67 µmol, 15.47%產率，91.12%純度)。 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4) δ = 9.31 - 9.21 (m, 1H), 9.18 - 9.06 (m, 1H), 8.65 - 8.43 (m, 4H), 8.40 - 8.31 (m, 2H), 8.27 - 8.09 (m, 3H), 7.89 - 7.70 (m, 1H), 7.46 - 7.32 (m, 1H), 7.31 - 7.09 (m, 3H), 6.97 - 6.77 (m, 3H), 4.72 - 4.60 (m, 4H), 4.46 - 3.97 (m, 13H), 3.95 - 3.81 (m, 7H), 3.74 - 3.54 (m, 45H), 3.20 - 2.78 (m, 8H), 2.66 - 2.33 (m, 7H)。
化合物 38 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1766
Figure 02_image1768
Figure 02_image1770
步驟 1 ：將2,3,5,6-四氟苯酚(45.74 mg, 275.40 µmol, 4.00 eq)、1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(100 mg, 68.85 µmol, 1 eq)於DMF (2.0 mL)中之混合物冷卻至0℃。接著在0℃下向混合物中添加EDCI (39.60 mg，206.55 µmol，3.00 eq)，且在0℃下攪拌2小時。反應混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈無色油狀物之TFP酯 1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸 2,3,5,6- 四氟苯酯 (50 mg, 31.24 μmol, 45.37%產率)。化學式：C 67H 95F 10N 9O 24，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 1600.70, [M+2H] 2+= 801.00, [M+3H] 3+= 534.40。
步驟 2 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-47-(2-(三級丁氧基)-2-側氧基乙基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37, 40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(53.7 mg, 31.24 µmol, 1.00 eq)、1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸2,3,5,6-四氟苯酯(50.0 mg, 31.24 µmol, 1.00 eq)、DIEA (16.1 mg, 124.96 µmol, 21.77 µL, 4.00 eq)於DMF (0.5 mL)中之混合物在25℃下攪拌1小時。反應混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(70.0 mg, 19.74 µmol, 63.1%產率，90.0%純度)。化學式：C 140H 201F 6N 29O 43S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1578.60, [M+3H] 3+= 1052.90, [M+4H] 4+= 727.00。
步驟 3 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(70.0 mg, 22.18 µmol, 1.00 eq)於HCl (0.1 M，0.7 mL，3.16 eq)及MeCN (0.7 mL)中之混合物在25℃下攪拌0.5小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之 化合物 38(57.0 mg, 99.3%純度，82.96%產率)。化學式：C 134H 193F 6N 29O 43S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1538.7, [M+H+Na] 2+= 1549.7, [M+3H] 3+= 1026.3, [M+4H] 4+= 769.6。
化合物 39 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,23- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24- 六氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1772
化合物 39係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 39之起始物質為1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,23-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-酸。產率：2.7 mg, 83.0%純度，9.0%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+=1502.10, [M+H+Na] 2+=1513.60, [M+3H] 3+=1002.00。
化合物 40 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1774
化合物 40係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 40之起始物質為1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸。產率：4.1 mg，95.8%純度，16.6%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2Na] 2+=1562.10, [M+H+Na] 2+=1550.50, [M+2H] 2+=1539.00, [M+3H] 3+=1026.70。
化合物 41 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27- 七氧雜 -14,21- 二氮雜二十九烷 -29- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1776
化合物 41係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 41之起始物質為1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸。產率：14.2 mg，98.2%純度，13.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+=1527.4, [M+2H] 2+=1516.3, [M+3H] 3+=1011.3。
化合物 42 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1778
化合物 42係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 42之起始物質為2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙酸。產率：17.9 mg，99.1%純度，33.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+= 1086.6, [M+3H] 3+=725.1。
化合物 43 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24- 六氧雜 -14,21- 二氮雜二十六烷 -26- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1780
化合物 43係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 43之起始物質為1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸。產率：19.7 mg，96.9%純度，30.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+= 1086.6, [M+3H] 3+=725.1。
化合物 44 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S, 35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(2-(4-((4-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 哌 𠯤 -1- 基 ) 甲基 ) 苯氧基 ) 乙醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1782
化合物 44係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 44之起始物質為2-(4-((4-(((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)苯氧基)乙酸。產率：7.7 mg, 96.6%純度，22.8%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+= 1134.7, [M+2H] 2+= 1123.1, [M+3H] 3+=749.1。
化合物 48 ： (3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-11-((S)-2-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3-(1H- 咪唑 -5- 基 ) 丙醯胺基 )-4-( 甲基硫基 ) 丁醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-N-((S)-1-(((S)-1-(((S)-1- 胺基 -4- 甲基 -1- 側氧基戊 -2- 基 ) 胺基 )-3- 羥基 -1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -3- 苯基丙 -2- 基 )-23,29- 雙 (3- 胍基丙基 )-20-(4- 羥苯甲基 )-17-( 羥甲基 )-14- 異丁基 -3- 異丙基 -1,4,12,15,18,21,24,27,30- 九側氧基三十二氫吡咯并 [2,1-j][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26,29] 二硫雜九氮雜環三十二烷 -6- 甲醯胺之製備
Figure 02_image1784
Figure 02_image1786
Figure 02_image1788
步驟 1 ： 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：將含有含AM樹脂(3.33 g，1.00 mmol，0.30 mmol/g)之DMF (30 mL)的容器在25℃下在N 2鼓泡下混合30分鐘。用DMF (30 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (30 mL)，且將混合物在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (30 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Leu-OH (1.06 g，3.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (1.08 g，2.85 mmol，2.85 eq)於DMF (15 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (1.05 mL，6.00 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (30 mL) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (30 mL)添加至樹脂中，且將混合物在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (30 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表Z中之2至16)。 表Z.
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
2 Fmoc-Ser( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Phe-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Pro-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Gly-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-Tyr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Ser( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
15 Fmoc-Met-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
16 Fmoc-His(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
步驟 2 ： 肽裂解及純化：7)在室溫(25℃)下將裂解緩衝液(92.5% TFA/2.5% TIS/2.5% H 2O/2.5% 3-巰基丙酸)添加至含有側鏈受保護之肽的燒瓶中，且攪拌2小時。 8)用冷的異丙醚沈澱肽且離心(以3000 rpm離心3分鐘)。 9)用異丙醚洗滌另外兩次。 10)將粗肽真空乾燥2小時。 11)將粗肽與MeCN (500 mL)及H 2O (500 mL)混合，將I 2(0.1 M於AcOH中)逐滴添加至劇烈攪拌的肽溶液中，直至保持黃色。2分鐘後，逐滴添加硫代硫酸鈉(0.1 M於水中)，直至黃色消失。將混合物凍乾，得到粗物質粉末。 12)粗肽藉由製備型HPLC (A：含0.075% TFA之H 2O，B：ACN)純化，得到呈白色固體狀之(3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-11-((S)-2-((S)-2-((S)-2-胺基-3-(1H-咪唑-5-基)丙醯胺基)-4-(甲基硫基)丁醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-N-((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-胺基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-6-甲醯胺(1.40 g, 91.4%純度，68.60%產率)。化學式：C 82H 129N 25O 19S 3；LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 933.17; [M+3H] 3+= 622.5。
步驟 3 ：在25℃下向(3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-11-((S)-2-((S)-2-((S)-2-胺基-3-(1H-咪唑-5-基)丙醯胺基)-4-(甲基硫基)丁醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-N-((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-胺基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-6-甲醯胺(520.0 mg, 278.78 μmol, 1.00 eq)及1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(382.58 mg, 278.78 μmol, 1.00 eq)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加HOBt (113.01 mg，836.35 μmol，3.00 eq)及EDCI (160.33 mg，836.35 μmol，3.00 eq)。將混合物在25℃下攪拌1小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈白色固體狀之3,3'-((2-((13S,16S,19S)-13-((1H-咪唑-5-基)甲基)-19-(((3S,6R,11R,14S,17S,20S,23S,29S,34aS)-6-(((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-胺基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基)-3-羥基-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺甲醯基)-23,29-雙(3-胍基丙基)-20-(4-羥苯甲基)-17-(羥甲基)-14-異丁基-3-異丙基-1,4,12,15,18,21,24,27,30-九側氧基三十氫-1H,10H-吡咯并[2,1-j][1,2]二硫雜[5,8,11,14,17,20,23,26,29]九氮雜環三十二烷-11-基)胺甲醯基)-20-甲基-16-(2-(甲基硫基)乙基)-11,14,17-三側氧基-3,6,9-三氧雜-12,15,18-三氮雜二十一烷醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) ( 化合物 48，388.1 mg, 96.5%純度，43.2%產率)。化學式：C 137H 214F 6N 34O 42S 3；LCMS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1621.3; [M+2H] 2+= 1609.7; [M+3H] 3+= 1074.0, [M+4H] 4+= 805.7。
化合物 49 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R, 42S,44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-46-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1790
Figure 02_image1792
Figure 02_image1794
步驟 1 ：將17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔酸(8.00 g，22.25 mmol，1.00 eq)、2,3,5,6-四氟苯酚(11.08 g，66.75 mmol，4.00 eq)及EDCI (9.52 g，33.23 mmol，2.00 eq)於DMF (224 mL)中之混合物在25℃下攪拌16小時。LCMS顯示反應物1完全耗盡，且一個主峰為所需MS。混合物藉由急驟(C18，TFA條件)純化且凍乾，得到呈黃色油狀物之17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔酸2,3,5,6-四氟苯酯(9.00 g, 17.73 mmol, 79.6%產率)。化學式：C 23H 29F 4NO 7，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 508.15。
步驟 2 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(3.00 g, 1.74 mmol, 1.00 eq)、17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔酸2,3,5,6-四氟苯酯(1.77 g, 3.48 mmol, 2.00 eq)及DIEA (3.03 mL, 17.42 mmol, 10.00 eq)於DMF (30 mL)中之溶液在0℃下攪拌8小時。將混合物調節至pH = 5，且藉由製備型HPLC (TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(1.30 g, 95.1%純度，34.3%產率)。化學式：C 96H 135N 21O 26S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1032.10, [M+3H] 3+= 688.40。
步驟 3 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基-2-(17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十二碳-21-炔醯胺基)四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(402.1 mg, 194.9 μmol, 1.00 eq)、3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺) (254.8 mg, 194.91 μmol, 1.00 eq)於DMF (8 mL)中之溶液冷卻至0℃，脫氣且用N 2吹掃3次。接著在0℃下將新製的CuSO 4(0.4 M，487.27 μL，1.00 eq)、抗壞血酸鈉(0.5 M、1.56 mL，4.00 eq)及THPTA (86.34 mg，194.91 μmol，1.00 eq)之混合物添加至反應混合物中。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，在N 2氛圍下在0℃下攪拌2小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化且凍乾，得到呈淡黃色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14,21-二氮雜二十七烷-27-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-17-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜二十烷醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(495.0 mg, 92.0%純度，71.70%產率)。化學式：C 149H 219F 6N 33O 45S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+=1686.80, [M+3H] 3+=1125.00, [M+4H] 4+=843.90, [M+5H] 5+=675.40。
化合物 53 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(4-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1796
化合物 53係根據 化合物 49之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 53之起始物質為3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺)，產率：49.1 mg, 97.5%純度，66.7%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+=1562.17, [M+3H] 3+= 1041.65, [M+4H] 4+=781.50, [M+5H] 5+= 625.30。
化合物 52 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(4-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1798
化合物 52係根據 化合物 49之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 52之起始物質為3,3'-((2-(6-疊氮基己醯胺基)丙烷-1,3-二基)雙(氧基))雙(N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)丙醯胺)，產率：7.6 mg, 90.9%純度，26.29%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+=1562.00, [M+3H] 3+= 1041.71, [M+4H] 4+= 781.49, [M+5H] 5+= 625.51。
化合物 51 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(4-(1-(((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1800
化合物 51係根據 化合物 49之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 51之起始物質為(2R,3R,4R,5S)-2-(疊氮基甲基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇，產率：38.7 mg, 98.5%純度，58.5%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+=1075.60, [M+3H] 3+= 717.45。
化合物 40 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1802
Figure 02_image1804
Figure 02_image1806
步驟 1 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S, 32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-47-(羧甲基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸(3.0 g, 87.0%純度)於HCl/MeOH (4 M，60 mL)中之溶液在25℃下攪拌2小時。減壓移除溶劑。殘餘物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S, 26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-47-(2-甲氧基-2-側氧基乙基)-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34, 37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸甲酯(1.5 g, 95.7%純度，53.8%產率)。化學式：C 81H 112N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 1749.88, [M+2H] 2+= 875.59。
步驟 2 ：將3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S, 26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-胺基-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-47-(2-甲氧基-2-側氧基乙基)-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31, 34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸甲酯(58.81 mg, 42.86 μmol, 1.00 eq)、EDCI (16.43 mg, 85.71 μmol, 2.00 eq)、HOBt (11.58 mg, 85.71 μmol, 2.00 eq)於DMF (0.5 mL)中之溶液在0℃下攪拌1小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-47-(2-甲氧基-2-側氧基乙基)-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34, 37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸甲酯(60.0 mg, 98.8%純度，44.5%產率)。化學式：C 136H 197F 6N 29O 43S 2，LCMS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1564.20, [M+2H] 2+= 1552.70, [M+3H] 3+= 1035.4, [M+4H] 4+= 777.00。
步驟 3 ：向3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S, 38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-47-(2-甲氧基-2-側氧基乙基)-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37, 40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸甲酯(55.0 mg, 17.72 μmol, 1.00 eq)於THF (0.5 mL)、H 2O (0.3 mL)中之溶液中添加LiOH.H 2O (1 M，70.87 μL，4.00 eq)，且將混合物在25℃下攪拌1小時。混合物藉由1 M HCl酸化至pH = 3，接著藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S,44R,47S,49aS)-35-((1H-咪唑-5-基)甲基)-17,38-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-47-(羧甲基)-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-醯胺基)-11-((R)-1-羥乙基)-23,32-二異丁基-20-異丙基-41-甲基-5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-十五側氧基四十八氫-5H-14,44-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-26-基)丙酸( 化合物 40，11.7 mg, 96.6%純度，20.7%產率)。化學式：C 134H 193F 6N 29O 43S 2，LCMS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1549.8, [M+2H] 2+= 1538.7, [M+3H] 3+= 1026.2, [M+4H] 4+= 769.8。
化合物 50 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十三烷 -23- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1808
化合物 50係根據上文所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 50之起始物質為(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)甘胺酸，產率：2.7 mg, 97.4%純度，20.5%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+= 1465.59, [M+3H] 3+= 977.25。
化合物 47 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S, 44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27- 七氧雜 -14,21- 二氮雜二十九烷 -29- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1810
化合物 47係根據上文所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 47之起始物質為1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27-七氧雜-14,21-二氮雜二十九烷-29-酸，產率：2.8 mg, 96.8%純度，23.4%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2Na] 2+=1562.10, [M+H+Na] 2+= 1550.50, [M+2H] 2+= 1539.00, [M+3H] 3+= 1026.70。
化合物 46 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S,41S, 44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24- 六氧雜 -14,21- 二氮雜二十六烷 -26- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1812
化合物 46係根據上文所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 46之起始物質為1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24-六氧雜-14,21-二氮雜二十六烷-26-酸，產率：5.8 mg, 93.2%純度，35.0%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+= 1505.7, [M+2H] 2+= 1494.7, [M+3H] 3+=9 96.7, [M+4H] 3+= 747.9。
化合物 45 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十三烷 -23- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1814
化合物 45係根據上文所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 45之起始物質為(1,39-雙((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15,25-二側氧基-2,5,8,11,18,22,29,32,35,38-十氧雜-14,26-二氮雜三十九烷-20-基)甘胺酸，產率：63.0 mg, 94.1%純度，66.5%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+= 1476.7, [M+2H] 2+= 1465.3, [M+3H] 3+= 977.3。
化合物 60 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1816
化合物 60係根據 化合物 38之製備中所描述之程序製備，其中用於製備 化合物 60之起始物質為1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸。產率：8.8 mg, 93.1%純度，59.7%，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+= 1550.50, [M+2H] 2+=1102.70, [M+3H] 3+= 735.80。
中間體 11 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-46- 胺基 -42-( 羧甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1818
Figure 02_image1820
Figure 02_image1822
固相肽合成：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(200.00 g，200.00 mmol，1.00 mmol/g)及Fmoc-D-Pro-OH (67.40 g，200.00 mmol，1.00 eq)之DCM (3 L)的容器中逐滴添加DIEA (139.46 mL，800.00 mmol，4.00 eq)，且在15℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (200.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (3 L) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (5 L)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (3 L) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Thr( tBu)-OH (238.20 g，600.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (216.03 g，570.00 mmol，2.85 eq)於DMF (500 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (209.18 mL，1200.00 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (3 L) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (5 L)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (3 L) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表1中之2至15)。 表1.
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-D-Pro-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Trp(Boc)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Gly-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-Asp(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
15 Boc-(2S,4S)-4-胺基-1-Fmoc-吡咯啶-2-甲酸(1.00 eq) HATU (0.95 eq)及DIEA (2.00 eq)
肽裂解及純化 ：1)將裂解緩衝液(20% HFIP/DCM，8.0 L)添加至含有側鏈受保護之粗肽的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌1小時且在過濾之後收集溶液。再重複一次裂解步驟。 2)過濾後合併溶液。 3) 藉由旋轉蒸發濃縮溶液。 4)將粗肽凍乾乾燥。 5)獲得呈白色固體狀之化合物 1(231.00 g，粗物質)。 6)在25℃下向化合物1 (13.58 g，4.99 mmol，1.00 eq)、2,4,6-三甲基吡啶(3.62 g，29.98 mmol，6.00 eq)於DMF (5.0 L)中之混合物中添加HATU (2.84 g，7.49 mmol，1.50 eq)。接著將混合物在25℃下攪拌3小時。逐一製備總共17個批次。 7)藉由旋轉蒸發濃縮溶液。 8)將殘餘物添加至0.50 M HCl (冷，10 L)中且沈澱出白色固體。過濾後，將固體凍乾乾燥，得到呈白色固體狀之化合物 2(245.00 g，粗物質，17個批次)。化學式：C 159H 192N 20O 26S 2，LCMS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1370.88; [M+2H-242] 2+= 1239.42;
步驟 3 至 4 ： 中間體 11 之製備
Figure 02_image1824
Figure 02_image1826
將化合物 2(245.00 g，粗物質)於TFA/TIS/H 2O/3-巰基丙酸(92.5%/2.5%/2.5%/2.5%，v/v/v，5 L)中之混合物在20℃下攪拌1.5小時。用冷的異丙醚(30 L)沈澱混合物。過濾後，將固體真空乾燥2小時，得到化合物 3(170.50 g，粗物質)。將化合物 3(170.50 g，粗物質)溶解於MeCN/H 2O (1/1，v/v，100 L)中。在25℃下將0.1 M I 2/HOAc逐滴添加至混合物中直至保持淡黃色，接著用0.1 M Na 2S 2O 3逐滴淬滅混合物直至淡黃色消失。過濾後，濾液藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 11(21.10 g, 6.15%產率，87.06%純度)。化學式：C 79H 108N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 1722.70, [M+2H] 2+= 861.50。
化合物 61 ： 3-((2S,5aR,11S,14R,17S,20S,23S,26S,32S,35S,38S, 41S,44R,47S,49aS)-35-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-17,38- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-47-( 羧甲基 )-2-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 醯胺基 )-11-((R)-1- 羥乙基 )-23,32- 二異丁基 -20- 異丙基 -41- 甲基 -5,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49- 十五側氧基四十八氫 -5H-14,44-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -26- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1828
步驟 1 ： TFP 酯 ( 化合物 4) 之製備：將2,3,5,6-四氟苯酚(105.50 mg, 639.44 μmol, 4.00 eq)、 2-(4-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 ) 苯氧基 ) 乙酸(80.0 mg, 159.86 μmol, 1.00 eq)於DMF (1.0 mL)中之混合物冷卻至0℃。接著在0℃下向混合物中添加EDCI (61.29 mg，319.73 μmol，2.00 eq)，且在0℃下攪拌2小時。反應混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈無色油狀物之TFP酯 4(15 mg, 23.13 μmol, 14.47%產率)。化學式：C 27H 23F 7N 4O 7，LCMS實驗值：[M+H] += 649.10。
步驟 2 ： 化合物 61 之製備：將 中間體 11(27.72 mg，16.10 μmol，1.20 eq)、化合物 4(8.7 mg，13.42 μmol，1.00 eq)、DIEA (5.20 mg，40.25 μmol，7.01 μL，3.00 eq)於DMF (0.3 mL)中之混合物在25℃下攪拌1小時。反應混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到呈白色固體狀之 化合物 61(14.6 mg, 6.55 μmol, 98.9%純度，48.8%產率)。化學式：C 100H 129F 3N 24O 26S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1103.1, [M+H+Na] 2+= 1114.5, [M+3H] 3+= 735.6
以下化合物係使用下表中所列之起始物質，根據與 化合物 61之程序相同的程序製備：化合物62 、化合物 63 、化合物 64 、化合物 65 、化合物 66 、化合物 67 、化合物 68 、化合物 69 、化合物 45 、化合物 70 、化合物 71 、化合物 72 、化合物 42 、化合物 73 、化合物 74 、化合物 75。
化合物 起始物質 分析資料
化合物62
Figure 02_image1830
 產率：30.0 mg, 96.0%純度，43.6%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1050.0, [M+H+Na] 2+=106.5, [M+3H] 3+=700.1。
化合物63
Figure 02_image1832
 產率：26.5 mg, 97.1%純度，39.3%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2Na] 2+=1128.2, [M+H+Na] 2+= 1117.5, [M+2H] 2+=1106.1, [M+3H] 3+=737.4。
化合物64
Figure 02_image1834
 產率：29.7 mg, 96.4%純度，42.5%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1132.6, [M+3H] 3+=755.4。
化合物65
Figure 02_image1836
 產率：3.5 mg, 97.1%純度，4.4%產率，白色固體。 LC-MS 實驗值：[M+H+Na] 2+=1300.7, [M+2H] 2+=1289.7, [M+3H] 3+=860.1
化合物66
Figure 02_image1838
 產率：33 mg, 96.4%純度，34.3%產率，白色固體。 LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1151.2, [M+3H] 3+=767.7
化合物67
Figure 02_image1840
 產率：74.3 mg, 98.7%純度，45.6%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1081.1, [M+3H] 3+=721.0。
化合物68
Figure 02_image1842
 產率：112 mg, 93.3%純度，18.45%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+2H] 2+=1150.3, [M+3H] 3+=767.6。
化合物69
Figure 02_image1844
 產率：26.4 mg, 97.1%純度，37.2%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1084.2, [M+3H] 3+=722.9。
化合物45
Figure 02_image1846
 產率：1.54 g, 95.6%純度，35.4%產率，白色固體。 LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+=1476.7, [M+2H] 2+= 1465.8, [M+3H] 3+=977.5。
化合物70
Figure 02_image1848
 產率：1.0 mg, 66.9%純度，7.65%產率，白色固體。 LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1044.6, [M+2H] 2+= 1036.0, [M+3H] 3+=690.8。
化合物71
Figure 02_image1850
 產率：17.0 mg, 95.2%純度，24.5%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[2M+3H] 3+=1975.8, [M+2Na] 2+= 1505.0, [M+H+Na] 2+= 1493.2, [M+2H] 2+= 1482.0, [M-糖+2H] 2+= 1328.5, [M+3H] 3+=988.2。
化合物72
Figure 02_image1852
 產率：39.0 mg, 95.6%純度，45.3%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+= 1118.9, [M+3H] 3+=746.5。
化合物42
Figure 02_image1854
 產率：2.6 g, 97.9%純度，60.1%產率，白色固體。 LC-MS實驗值：[M+2H] 2+= 1087.3, [M+3H] 3+=725.5。
化合物73
Figure 02_image1856
 產率：2.0 mg, 93.2%純度，5.95%產率，白色固體。 LC-MS實驗值：[M+2Na] 2+= 1516.5, [M+H+Na] 2+= 1505.2, [M+2H] 2+= 1494.1, [M+3H] 3+=996.5。
化合物74
Figure 02_image1858
 產率：21.0 mg, 99.0%純度，26.0%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1476.4, [M+2H] 2+= 1465.8, [M+3H] 3+= 977.2。
化合物75
Figure 02_image1860
 產率：25.9 mg, 98.8%純度，29.7%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1490.6, [M+2H] 2+= 1479.4, [M+3H] 3+= 986.6。
中間體 12 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-46- 胺基 -6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36,42- 二甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1862
Figure 02_image1864
步驟 1 ： (2) 之製備： 固相肽合成：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(0.50 g，0.50 mmol，1.00 mmol/g)及Fmoc-Gly-OH (148.50 mg，0.50 mmol，1.00 eq)之DCM (10 mL)的容器中逐滴添加DIEA (348.64 mL，2.00 mmol，4.00 eq)，且在25℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (0.50 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (20 mL)，且將混合物在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Glu(O tBu)-OH (637.5 mg，1.50 mmol，3.00 eq)、HBTU (540.07 mg，1.425 mmol，2.85 eq)於DMF (10 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (522.97 mL，3.00 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (20 mL)添加至樹脂中，且將混合物在25℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (20 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表2中之2至15)。 表2.
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-Gly-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-D-Pro-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Boc-(2S,4S)-4-胺基-1-Fmoc-吡咯啶-2-甲酸(1.00 eq) HATU (0.95 eq)及DIEA (2.00 eq)
10 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-His(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
15 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
肽裂解及純化 ：1)將裂解緩衝液(1% TFA/DCM，30 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌5分鐘且在過濾之後收集溶液。再重複一次裂解步驟。 2)將合併之溶液用DCM稀釋至500 mL。 3)添加TBTU (321.00 mg，1.00 mmol，2.00 eq)及HOBt (135.00 mg，1.00 mmol，2.00 eq)，且將混合物在25℃下攪拌2小時。 4)反應混合物用1 M HCl (200 mL)、H 2O (200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈白色固體狀之化合物 2(1.20 g，粗物質)。化學式：C 148H 176N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+Na] 2+= 1320.77;
中間體 12 之製備 ：將化合物 2(1.20 g，粗物質)於TFA/TIS/H 2O/3-巰基丙酸(92.5%/2.5%/2.5%/2.5%，v/v/v，25 mL)中之混合物在25℃下攪拌1.5小時。用冷的異丙醚(150 mL)沈澱混合物且離心(以3000 rpm離心3分鐘)。將固體用異丙醚洗滌兩次，真空乾燥2小時，得到化合物 3(900.0 mg，粗物質)。接著將化合物 3(900.0 mg，粗物質)溶解於MeCN/H 2O (1/1，v/v，500 mL)中。在25℃下將I 2/HOAc (0.1 M)逐滴添加至混合物中直至保持淡黃色，接著用0.1 M Na 2S 2O 3逐滴淬滅混合物直至淡黃色消失。過濾後，濾液藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 12(144.00 mg, 16.64%產率，97.00%純度)。化學式：C 78H 108N 20O 18S 2，LCMS實驗值：[M+H] 1+= 1677.79, [M+2H] 2+= 839.39, [M+3H] 3+= 559.95。
以下中間體係根據與 中間體 12之程序相同的程序製備： 中間體 13 至中間體 28。
化合物ID 結構 分析資料
中間體13
Figure 02_image1866
 產率：230.3 mg, 97.5%純度，26.0%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1720.82, [M+2H] 2+=860.90, [M+3H] 3+=574.18。
中間體14
Figure 02_image1868
 產率：252 mg, 95.4%純度，27.6%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1737.80, [M+2H] 2+=869.43, [M+3H] 3+=579.86。
中間體15
Figure 02_image1870
 產率：144.7 mg, 96.1%純度。16.4%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1693.80, [M+2H] 2+=847.42, [M+3H] 3+=565.19。
中間體16
Figure 02_image1872
 產率：276.3 mg, 96.9%純度，30.5%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1751.87, [M+2H] 2+=876.47, [M+3H] 3+=584.7。
中間體17
Figure 02_image1874
 產率：223.4 mg, 95.0%純度，25.5%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1663.77, [M+2H] 2+=832.40, [M+3H] 3+=555.01。
中間體18
Figure 02_image1876
 產率：230.5 mg, 96.2%純度，25.7%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1720.89, [M+2H] 2+=861.00, [M+3H] 3+=574.29。
中間體19
Figure 02_image1878
 產率：215.7 mg, 95.1%純度，23.3%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1755.81, [M+2H] 2+=878.50。
中間體20
Figure 02_image1880
 產率：161.7 mg, 97.9%純度，18.0%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1756.80, [M+2H] 2+=878.41, [M+3H] 3+=585.97。
中間體21
Figure 02_image1882
 產率：163.7 mg, 98.0%純度，18.3%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1751.81, [M+2H] 2+=876.41, [M+3H] 3+=584.62。
中間體22
Figure 02_image1884
 產率：153.3 mg, 95.4%純度，16.8%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1734.80, [M+2H] 2+=867.92, [M+3H] 3+=578.99。
中間體23
Figure 02_image1886
 產率：120.5 mg, 96.2%純度，13.2%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1748.90, [M+2H] 2+=874.96, [M+3H] 3+=583.60。
中間體24
Figure 02_image1888
 產率：188.5 mg, 95.6%純度，20.9%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1721.80, [M+2H] 2+=861.34, [M+3H] 3+=574.61。
中間體25
Figure 02_image1890
 產率：163.5 mg, 95.9%純度，19.1%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1619.60, [M+2H] 2+=810.50。
中間體26
Figure 02_image1892
 產率：34.9 mg, 94.4%純度，6.4%產率，白色固體632。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1704.60, [M+2H] 2+=853.00。
中間體27
Figure 02_image1894
 產率：119 mg, 96.9%純度，22.0%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1747.70, [M+2H] 2+=874.60。
中間體28
Figure 02_image1896
 產率：159.8 mg, 97.0%純度，18.6%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H] +=1662.60, [M+2H] 2+=832.10。
化合物 76 ： 3,3'-((2-((2-(((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S,44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -21,36,42- 三甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -46- 基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1898
化合物 76 之製備：在0℃向 中間體 25(50.0 mg，30.87 μmol，1.00 eq)、 A31(41.6 mg，33.95 μmol，1.10 eq)、HOBt (6.26 mg，46.30 μmol，1.50 eq)及DIEA (3.9 mg，30.87 μmol，5.38 μL，1.00 eq)於DMF (0.5 mL)中之經攪拌溶液中添加EDCI (8.8 mg，46.30 μmol，1.50 eq)。接著將混合物在0℃下攪拌2小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之化合物76 (38.4 mg, 95.2%純度，41.8%產率)。化學式：C 125H 181F 6N 29O 35S 2；LCMS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1426.3, [M+2H] 2+= 1415.1; [M+3H] 3+= 943.4。
以下化合物係根據與 化合物 76之程序相同的程序製備： 化合物 77 、化合物 78 、化合物 79。
化合物 起始物質_肽 分析資料
化合物77
Figure 02_image1900
中間體26 		產率：11.7 mg, 98%純度，29.8%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+=1468.5, [M+2H] 2+=1458.0, [M+3H] 3+=971.9。
化合物78
Figure 02_image1902
中間體27 		產率：44.3 mg, 97.5%純度，47.3%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+= 1490.8, [M+2H] 2+=1479.3, [M+3H] 3+=986.3。
化合物79
Figure 02_image1904
中間體28 		產率：69.0 mg, 68.0%純度，66.5%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1436.3, [M+3H] 3+=957.8
中間體 48 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-46-( 己 -5- 炔醯胺基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1906
步驟 1 ：己 -5- 炔酸 2,3,5,6- 四氟苯酯 ( 化合物 2) 之製備向化合物 1(2.00 g，17.84 mmol，1.94 mL，1.00 eq)及TFP (5.92 g，35.67 mmol，2.00 eq)於DMF (15.0 mL)中之混合物中添加EDCI (6.84 g，35.67 mmol，2.00 eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示化合物1完全耗盡，且一個主峰為所需MS。混合物藉由急驟(C18，TFA條件)純化且凍乾，得到呈無色油狀物之化合物 2(1.2 g, 24.1%產率)。化學式：C 12H 8F 4O 2，LCMS實驗值：[M+H] += 260.92。
步驟 2 ：中間體 48 之製備：將 中間體 5(5 g，2.90 mmol，1.00 eq)、化合物 2(1.13 g，4.36 mmol，1.50 eq)及DIEA (1.50 g，11.61 mmol，2.02 mL，4.00 eq)於DMF (50 mL)中之混合物在0℃下攪拌8小時。混合物藉由0.1 M HCl酸化至pH = 5且藉由製備型HPLC (TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 48(1.97 g, 97.8%純度，36.54%產率)。化學式：C 85H 114N 20O 21S 2，LCMS實驗值：[M+H] += 1817.1, [M+2H] 2+= 908.7。
3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S,44aS, 46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-46-(4-(1-(((2R,3R,4R,5R)-5- 乙醯胺基 -3,4- 二羥基 -6- 甲氧基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 )-42-( 羧甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41, 44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1908
Figure 02_image1910
將 中間體 48(97.7 mg，53.80 μmol，1.00 eq)、N-((3R,4R,5R,6R)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基-2-甲氧基四氫-2H-哌喃-3-基)乙醯胺(A146) (14.0 mg，53.80 μmol，1 eq)於DMF (0.5 mL)中之混合物冷卻至0℃，脫氣且用N 2吹掃3次。接著在0℃下將新製的CuSO 4(0.4 M，134.49 μL，1.00 eq)、抗壞血酸鈉(0.5 M、430.36 μL，4.00 eq)及THPTA (23.83 mg，53.80 μmol，1.00 eq)之混合物添加至反應混合物中。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，在N 2氛圍下在0℃下攪拌2小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化且凍乾，得到呈白色固體狀之 化合物 81(74.8 mg, 97.7%純度，66.8%產率)。化學式：C 94H 130N 24O 26S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+=1039.2, [M+3H] 3+=693.1。
以下化合物係根據與 化合物 81相同之程序，用下表中所列之起始物質代替N-((3R,4R,5R,6R)-6-(疊氮基甲基)-4,5-二羥基-2-甲氧基四氫-2H-哌喃-3-基)乙醯胺來製備： 化合物 53、 化合物 52、 化合物 51及 化合物 80。
化合物 起始物質 分析資料
化合物53
Figure 02_image1912
 產率：49.1 mg, 97.5%純度，66.7%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1562.17, [M+3H] 3+= 1041.65, [M+4H] 4+=781.50, [M+5H] 5+= 625.30
化合物52
Figure 02_image1914
 產率：7.6 mg, 90.9%純度，26.29%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1562.00, [M+3H] 3+= 1041.71, [M+4H] 4+= 781.49, [M+5H] 5+= 625.51
化合物51
Figure 02_image1916
 產率：38.7 mg, 98.5%純度，58.5%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1075.60, [M+3H] 3+= 717.45
化合物80
Figure 02_image1918
 產率：45.7 mg, 98.4%純度，75.9%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1075.8, [M+3H] 3+=718.0。
中間體 4 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S,44aS, 46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42- ( 羧甲基 )-46-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1920
Figure 02_image1922
步驟 1 ：化合物 1 之製備： 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 5)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(37.00 g，30.00 mmol，0.81 mmol/g)及Fmoc-NH 2-PEG 4-CH 2CH 2COOH (14.61 g，30.00 mmol，1.00 eq)之DCM (300 mL)的容器中逐滴添加DIEA (20.91 mL，120.00 mmol，4.00 eq)，且在15℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (30.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (600 mL)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 6)偶合：在N 2鼓泡下將己-5-炔酸(6.72 g，60.00 mmol，2.00 eq)、HBTU (21.94 g，57.00 mmol，1.90 eq)於DMF (300 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (20.91 mL，120.00 mmol，4.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。樹脂接著用DMF (600 mL) *5、MeOH (600 mL) *5洗滌，減壓乾燥。 表1.
編號 材料 偶合試劑
1 Fmoc-NH 2-PEG 4-CH 2CH 2COOH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 己-5-炔酸(2.00 eq) HBTU (1.90 eq)及DIEA (4.00 eq)
肽裂解及純化 ：1)將裂解緩衝液(20% HFIP/DCM，500 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌1小時且在過濾之後收集溶液。再重複一次裂解步驟。 2)過濾後合併溶液。 3)藉由旋轉蒸發濃縮溶液。 4)將粗肽凍乾，得到呈無色油狀物之化合物 1(8.00 g，粗物質)。化學式：C 17H 29NO 7，LCMS實驗值：[M+H] += 360.40;
步驟 2 ： 17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十二碳 -21- 炔酸 2,3,5,6- 四氟苯酯 ( 化合物 2) 之製備將化合物 1(8.00 g，22.25 mmol，1.00 eq)、2,3,5,6-四氟苯酚(11.08 g，66.75 mmol，4.00 eq)及EDCI (9.52 g，33.23 mmol，2.00 eq)於DMF (224 mL)中之混合物在25℃下攪拌16小時。LCMS顯示反應物1完全耗盡，且一個主峰為所需MS。混合物藉由急驟(C18，TFA條件)純化且凍乾，得到呈黃色油狀物之化合物 2(9.00 g, 17.73 mmol, 79.6%產率)。化學式：C 23H 29F 4NO 7，LCMS實驗值：[M+H] += 508.15。
步驟 3 ：中間體 4 之製備：將 中間體 5(3.00 g，1.74 mmol，1.00 eq)、化合物 2(1.77 g，3.48 mmol，2.00 eq)及DIEA (3.03 mL，17.42 mmol，10.00 eq)於DMF (30 mL)中之混合物在0℃下攪拌8小時。將混合物調節至pH = 5，且藉由製備型HPLC (TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 4(1.30 g, 95.1%純度，34.3%產率)。化學式：C 96H 135N 21O 26S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1032.10, [M+3H] 3+= 688.40。
化合物 4 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-46-(20-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1924
Figure 02_image1926
將 中間體 4(402.1 mg，194.9 μmol，1.00 eq)、 A2(254.8 mg，194.91 μmol，1.00 eq)於DMF (8 mL)中之混合物冷卻至0℃，脫氣且用N 2吹掃3次。接著在0℃下將新製的CuSO 4(0.4 M，487.27 μL，1.00 eq)、抗壞血酸鈉(0.5 M、1.56 mL，4.00 eq)及THPTA (86.34 mg，194.91 μmol，1.00 eq)之混合物添加至反應混合物中。將混合物脫氣且用N 2吹掃3次，在N 2氛圍下在0℃下攪拌2小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化且凍乾，得到呈淡黃色固體狀之 化合物 4(495.0 mg, 92.0%純度，71.70%產率)。化學式：C 149H 219F 6N 33O 45S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+=1686.80, [M+3H] 3+=1125.00, [M+4H] 4+=843.90, [M+5H] 5+=675.40。
以下化合物係使用下表中之起始物質，根據與 化合物 4相同之程序製備： 化合物 16、 化合物 82、 化合物 83、 化合物 84、 化合物 85及 化合物 86。
化合物 起始物質 分析資料
化合物16
Figure 02_image1928
 產率：798 mg, 95.8%純度，78.4%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1686.60, [M+3H] 3+=1124.70, [M+4H] 4+=843.80, [M+5H] 5+=675.30。
化合物82
Figure 02_image1930
 產率：34.4 mg, 98.3%純度，58.5%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+=1713.2, [M+2H] 2+=1702.2, [M+2H-糖] 2+=1548.6, [M+2H-2糖] 2+=1394.4, [M+3H] 3+=1135.2。
化合物83
Figure 02_image1932
 產率：34.8 mg, 97.3%純度，50.6%產率，白色固體。TOF實驗值：[M+H] +=1970.8, [M+2H] 2+=1314.1, [M+3H] 3+= 985.9。
化合物84
Figure 02_image1934
 產率：18.2 mg, 97.2%純度，27.4%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+=1609.7, [M+2H] 2+=1598.1, [M+2H-糖] 2+=1496.6, [M+2H-2糖] 2+=1394.5, [M+3H] 3+=1067.7。
化合物85
Figure 02_image1936
 產率：17.9 mg, 97.9%純度，49.2%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+H+Na] 2+=1849.4, [M+2H] 2+=1838.8, [M+2H-糖] 2+=1736.9, [M+2H-2糖] 2+=1635.3, [M+3H] 3+=1225.8。
化合物86
Figure 02_image1938
 產率：34.2 mg, 95.4%純度，53.9%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1970.2, [M+3H] 3+=1313.8。
中間體 1 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-24-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-5,21- 二側氧基 -8,11,14,17- 四氧雜 -4,20- 二氮雜二十四烷 -1- 酸之製備
Figure 02_image1940
Figure 02_image1942
步驟 1 ： 用於 製備中間體 1 之 通用程序 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：將含有含AM樹脂(66.67 g，20.00 mmol，0.30 mmol/g)之DMF (600 mL)的容器在15℃下在N 2鼓泡下混合30分鐘。用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (600 mL)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Thr( tBu)-OH (23.82 g，60.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (21.60 g，57 mmol，2.85 eq)於DMF (300 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (22.11 mL，120 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (600 mL)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (600 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表4中之2至15)。 表4.
編號 物質 偶合試劑
1 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
2 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Gly-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
11 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
13 Fmoc-Asp(O tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
14 Fmoc-Peg 4-OH (1.50 eq) HATU (1.42 eq)及DIEA (3.00 eq)
15 己-5-炔酸(1.50 eq) HATU (1.42 eq)及DIEA (3.00 eq)
肽裂解及純化 ：1)在室溫下將裂解緩衝液(TFA/TIS/H 2O/3-巰基丙酸，92.5/2.5/2.5/2.5，v/v/v/v，1 L)添加至含有側鏈受保護之肽的燒瓶中，且攪拌2小時。 2)用冷的異丙醚沈澱肽。 3)過濾後，將固體用異丙醚洗滌另外兩次。 4)將粗肽真空乾燥2小時。 5)將粗肽溶解於MeCN (10 L)及H 2O (10 L)中，接著將碘(0.1 M於AcOH中)逐滴添加至劇烈攪拌的混合物中直至保持黃色。2分鐘後，逐滴添加硫代硫酸鈉(0.1 M於水中)直至黃色消失。將混合物凍乾，得到粗物質粉末。 6)粗物質粉末藉由製備型HPLC (A：含0.075% TFA之H 2O，B：ACN)純化，得到呈白色固體狀之 中間體 1(5.90 g, 95.1%純度，14.9%產率)。化學式：C 86H 123N 19O 24S 2；LCMS實驗值：[M+H] += 1871.00, [M+2H] 2+= 936.10, [M+3H] 3+= 624.38。
化合物 中間體 32係根據與 中間體 1之程序相同的程序製備。
化合物 結構 分析資料
中間體32
Figure 02_image1944
 產率：3.40 g, 95.0%純度，23.4%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1096.12, [M+3H] 3+=731.11。
化合物 22 ： (S)-3-(((4R,7S,10S,13S,16S,22S,25S,28S,31S,34R)-25-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-7,28- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-4-(((2S,3R)-1- 胺基 -3- 羥基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺甲醯基 )-16-(2- 羧乙基 )-13,22- 二異丁基 -10- 異丙基 -31- 甲基 -6,9,12,15,18,21,24,27,30,33- 十側氧基 -1,2- 二硫雜 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十氮雜環三十五烷 -34- 基 ) 胺甲醯基 )-24-(1-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-5,21- 二側氧基 -8,11,14,17- 四氧雜 -4,20- 二氮雜二十四烷 -1- 酸之製備
Figure 02_image1946
Figure 02_image1948
將 中間體 1(3.53 g，1.79 mmol，1.00 eq)、 A18(2.34 g，1.79 mmol，1.00 eq)、抗壞血酸鈉(1.42 g，7.16 mmol，4.00 eq)、CuSO 4(0.40 M，4.47 mL，1.00 eq)及THPTA (792.95 mg，1.79 mmol，1.00 eq)於DMF (30 mL)中之混合物脫氣且用N 2 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在15℃下攪拌2小時。LCMS顯示 中間體 1完全耗盡，且一個主峰具有所需m/z。混合物藉由製備型HPLC (TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之 化合物 22(4.31 g, 97.3%純度，73.7%產率)。化學式：C 86H 123N 19O 24S 2；LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1590.0, [M+3H] 3+= 1060.4, [M+4H] 4+= 795.7。
以下化合物係根據與 化合物 22之程序相同的程序合成： 化合物 87、 化合物 88、 化合物 89、 化合物 90及 化合物 23。
化合物 起始物質 分析資料
化合物87
Figure 02_image1950
 產率：661.0 mg, 95.5%純度，72.0%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1558.0, [M+3H] 3+=1039.1, [M+4H] 4+=779.7。
化合物88
Figure 02_image1952
   		產率：141.0 mg, 96.7%純度，79.3%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1573.9, [M+3H] 3+=1049.6, [M+4H] 4+=787.5, [M+5H] 5+=630.0。
化合物89
Figure 02_image1954
 產率：23.0 mg, 99.6%純度，33.2%產率，白色固體。TOF實驗值：[M+H] +=3210.1, [M+2H] 2+=1605.71, [M+3H] 3+= 1070.47。
化合物90
Figure 02_image1956
 產率：31.5 mg, 97.2%純度，50.5%產率，白色固體。LC-MS (ESI)實驗值：[M+H+Na] 2+=1885.9, [M+2H] 2+=1874.5, [M+3H] 3+=1250.1, [M+4H] 4+=937.5
化合物23
Figure 02_image1958
   		產率：136.0 mg, 97.8%純度，49.7%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2H] 2+=1749.97, [M+3H] 3+=1167.00, [M+4H] 4+=875.42, [M+5H] 5+=700.50, [M+6H] 6+=583.87。
中間體 30 ： 3-[(1R,4S,7S,10S,13S,19S,22S,25S,28S,31R,34S,40R,44R, 46S,49S)-44- 胺基 -49-( 羧甲基 )-34-[(1R)-1- 羥乙基 ]-10-(1H- 咪唑 -5- 基甲基 )-7,28- 雙 (1H- 吲哚 -3- 基甲基 )-13,22- 二異丁基 -25- 異丙基 -4- 甲基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,41,47,50- 十五側氧基 -53,54- 二硫雜 -3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36,42,48,51- 十五氮雜四環 [29.20.4.036,40.042,46] 五十五烷 -19- 基 ] 丙酸之製備
Figure 02_image1960
Figure 02_image1962
步驟 1 ： (2) 之製備。 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(76.92 g，40.00 mmol，0.65 mmol/g)及Fmoc-Gly-OH (11.88 g，40.00 mmol，1.00 eq)之DCM (500 mL)的容器中逐滴添加DIEA (26.46 mL，160.00 mmol，4.00 eq)，且在15℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (76.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (1.00 L) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (1.00 L)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (1.00 L) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Leu-OH (42.36 g，120.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (43.32 g，114.00 mmol，2.85 eq)於DMF (500 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (39.69 mL，240 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (1 L) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (1 L)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (1 L) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表5中之2至15)。 表5.
編號 物質 偶合試劑
1 Fmoc-Gly-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
7 Fmoc-Asp(OtBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Boc-(2S,4R)-4-胺基-1-Fmoc-吡咯啶-2-甲酸(2.00 eq) HATU (1.85 eq)及DIEA (4.00 eq)
9 Fmoc-D-Pro-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
10 Fmoc-Thr(tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
11 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
12 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
13 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
14 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
15 Fmoc-Glu(OtBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
肽裂解及純化 ：1)將裂解溶液(1% TFA/DCM，300 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽(5.0 mmol)的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌5分鐘。 2)過濾後，收集溶液。 3)再重複一次步驟1至2。 4)合併溶液(含有化合物1)。 5)合併之溶液用DCM (4.50 L)稀釋，接著添加HOBT (1.35 g，10.0 mmol，2.00 eq)、TBTU (3.21 g，10.0 mmol，2.00 eq)，且藉由DIEA將pH調節至8。將混合物在15℃下攪拌2小時。 6)將混合物減壓濃縮以移除溶劑。 7)將殘餘物添加至0.50 M HCl (冷，2 L)中且沈澱出白色固體。過濾後，將固體凍乾乾燥，得到呈白色固體狀之化合物2 (9.37 g，粗物質)。化學式：C 153H 184N 20O 22S 2，LCMS實驗值：[M+H+Na]2+ = 1370.4; 8)注意：使用與步驟1至7相同之程序合成另外7個批次。總共8個批次得到呈白色固體狀之化合物 2(75.0 g，粗物質)。
步驟 2 至 3 ： 用於 製備中間體 30 之 通用程序。將化合物 2(75.0 g，27.58 mmol)於TFA/TIS/H 2O (95/2.5/2.5，v/v/v，1.5 L)中之混合物在15℃下攪拌2小時。用冷的異丙醚(15 L)沈澱混合物。過濾後，將固體真空乾燥2小時，得到化合物3 (51.72 g，粗物質)。將化合物 3(25.00 g，粗物質)溶解於MeCN/H 2O (1/1，v/v，5 L)中。在15℃下將I 2/HOAc (0.1 M)逐滴添加至混合物中直至保持淡黃色，且在15℃下攪拌5分鐘。接著用0.1 M Na 2S 2O 3逐滴淬滅混合物直至淡黃色消失。使用相同程序進行2個批次。過濾後，濾液藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 30(10.2 g, 91.06%純度，19.7%產率，2個批次)。化學式：C 79H 108N 20O 20S 2，LCMS實驗值：[M+H] += 1722.00, [M+2H] 2+= 861.61。
3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S,44aS,46R, 49aR)-30-((1H-咪唑-5-基)甲基)-12,33-雙((1H-吲哚-3-基)甲基)-42-(羧甲基)-46-(2-(2-(2-((((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)-2-側氧基乙氧基)乙氧基)乙醯胺基)-6-((R)-1-羥乙基)-18,27-二異丁基-15-異丙基-36-甲基-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49-十五側氧基四十八氫-1H-9,39-(橋亞甲基二硫代橋亞甲基)二吡咯并[1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43]十五氮雜環四十五烷-21-基)丙酸之製備
Figure 02_image1964
Figure 02_image1966
步驟 1 ： TFP 酯 ( 化合物 1) 之製備 ：將 A30(60.0 mg，128.10 μmol，1.00 eq)、2,3,5,6-四氟苯酚(85.1 mg，512.40 μmol，4.00 eq)於DMF (1.0 mL)中之混合物冷卻至0℃。接著在0℃下向混合物中添加EDCI (49.1 mg，256.20 μmol，2.00 eq)，且在0℃下攪拌2小時。反應混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化且凍乾，得到呈無色油狀物之TFP酯化合物 1(68.0 mg，約70%純度，含有2,3,5,6-四氟苯酚)。化學式：C 23H 23F 7N 4O 8，LCMS實驗值：[M+H] += 617.20。
步驟 2 ：化合物 91 之製備： 將 中間體 30(208.9 mg，121.34 μmol，1.10 eq)、化合物4 (68.0 mg，110.31 μmol，1.00 eq)、DIEA (57.0 mg，441.24 μmol，76.86 μL，4.00 eq)於DMF (3.00 mL)中之混合物在15℃下攪拌1小時。反應混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化且凍乾，得到呈白色固體狀之 化合物 91(125.2 mg, 99.5%純度，51.9%產率)。化學式：C 96H 129F 3N 24O 27S 2，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1086.8, [M+3H] 3+= 724.9。
化合物 92及 化合物 93係根據與 化合物 91之程序相同的程序製備。
名稱 起始物質 分析資料
化合物92
Figure 02_image1968
 產率：19.5 mg, 98.7%純度，40.27%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[M+2Na] 2+=1488.0, [M+H+Na] 2+=1477.0, [M+2H] 2+=1466.00, [M+3H] 3+=977.5, [M+4H] 4+=733.3。
化合物93
Figure 02_image1970
 產率：8.3 mg, 95.9%純度，22.36%產率，白色固體。LC-MS實驗值：[2M+3H] 3+=1533.5, [M+2H] 2+=1150.3, [M+3H] 3+=767.0。
中間體 31 ： 3-[(1R,4S,7S,10S,13S,19S,22S,25S,28S,31R,34S, 40R,44R,46S,49S)-44- 胺基 -49-( 羧甲基 )-34-[(1R)-1- 羥乙基 ]-10-(1H- 咪唑 -5- 基甲基 )-7,28- 雙 (1H- 吲哚 -3- 基甲基 )-13,22- 二異丁基 -25- 異丙基 -4- 甲基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,41,47,50- 十五側氧基 -53,54- 二硫雜 -3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36,42,48,51- 十五氮雜四環 [29.20.4.036,40.042,46] 五十五烷 -19- 基 ] 丙酸之製備
Figure 02_image1972
Figure 02_image1974
步驟 1 ： (2) 之製備。 固相肽合成：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(0.77 g，0.50 mmol，0.65 mmol/g)及Fmoc-Gly-OH (0.15 g，0.50 mmol，1.00 eq)之DCM (0.5 mL)的容器中逐滴添加DIEA (0.33 mL，2.00 mmol，4.00 eq)，且在15℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (0.50 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (10 mL)，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Leu-OH (0.53 g，1.50 mmol，3.00 eq)、HBTU (0.54 g，1.42 mmol，2.85 eq)於DMF (5 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (0.50 mL，3.0 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (10 mL)添加至樹脂中，且將混合物在15℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表5中之2至15)。 表5.
編號 物質 偶合試劑
1 Fmoc-Gly-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-His(Trt)-OH (2.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 (S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)己-5-烯酸(2.00 eq) HATU (1.90 eq)及DIEA (4.00 eq)
7 Fmoc-Asp(OtBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Pro-OH (2.00 eq) HATU (1.85 eq)及DIEA (4.00 eq)
9 Fmoc-D-Pro-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
10 Fmoc-Thr( tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
11 (S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)戊-4-烯酸(2.00 eq) HATU (1.90 eq)及DIEA (4.00 eq)
12 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
13 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
14 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
15 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HATU (2.85 eq)及DIEA (3.00 eq)
肽裂解及環化 ：1)將裂解溶液(20% HFIP/DCM，20 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽(0.5 mmol)的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌1小時。 2)過濾後，收集溶液。 3)再重複一次步驟1至2。 4)合併之溶液(含有0.5 mmol粗肽)用DCM (500 mL)稀釋，接著添加HOBT (135 mg，1.00 mmol，2.00 eq)、TBTU (321 mg，1.00 mmol，2.00 eq)，且藉由DIEA將pH調節至8。將混合物在15℃下攪拌2小時。 5)將混合物減壓濃縮以移除溶劑。 6)將殘餘物添加至0.50 M HCl (冷，50 mL)中且沈澱出白色固體。過濾後，將固體凍乾乾燥，得到呈白色固體狀之化合物 2(190.0 mg，粗物質)。化學式：C 111H 145N 19O 20，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1033.62;
步驟 2 ： (3) 之製備。將 (2)(190.0 mg，粗物質，1.00 eq)、Grubbs' 1 st(75.6 mg，1.00 eq)於無水DCM (50 mL)中之混合物在60℃下在微波下攪拌4小時。接著將混合物用0.5 M HCl、H 2O、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，減壓濃縮，得到呈棕色固體狀之化合物 3(160.5 mg，粗物質)。化學式：C 109H 141N 19O 20，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1019.35;
步驟 2 ： 中間體 31 之製備。將 (3)(160.0 mg，粗物質)於TFA/TIS/H 2O (95/2.5/2.5，v/v/v，5 mL)中之混合物在15℃下1小時。接著用異丙醚(50 mL)沈澱混合物且離心(以3000 rpm離心3分鐘)。固體用異丙醚洗滌兩次，真空乾燥2小時。殘餘物藉由製備型HPLC (TFA條件)純化，得到呈白色固體狀之 中間體 31(42.7 mg, 95.2%純度，總產率5.0%)。化學式：C 82H 111N 19O 20，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 1684.0, [M+2H] 2+= 843.2;
A134 ： 3,3'-((2-(6- 疊氮基己醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2- 二甲基 -8-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 ) 六氫 -4,7- 環氧基 [1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-d] 㗁呯 -4- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1976
Figure 02_image1978
步驟 1 ： ( 2) 之製備向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(5.00 g, 26.1 mmol, 1.00 eq)於MeOH (50.0 mL)中之溶液中添加化合物 1(48.30 g，339 mmol，46.9 mL，13.00 eq)。將混合物在40℃下攪拌36小時。TLC (二氯甲烷/甲醇=7/1)指示(1S,2R,3R,4R,5S)-4-胺基-1-(羥甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(Rf = 0)沒有剩餘，且偵測到一個主要新斑點(Rf = 0.30)。將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=1/0至0/1，二氯甲烷/甲醇=7/1，Rf = 0.30)直接純化，得到呈無色油狀物之化合物2 (4.50 g, 15.6 mmol, 59.9%產率)。化學式：C 9H 12F 3NO 6。 1HNMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:9.50 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 4.92 - 4.72 (m, 3H), 3.83 - 3.72 (m, 4H), 3.65 - 3.57 (m, 3H)。
步驟 2 ： ( 4) 之製備。向化合物 2(4.50 g，15.6 mmol，1.00 eq)於DMF (45.0 mL)中之溶液中添加CSA (1.96 g，7.83 mmol，0.50 eq)及化合物 3(8.16 g，78.35 mmol，9.60 mL，5.00 eq)。將混合物在80℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量(R t= 0.39 min)。將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=1/0至0/1，二氯甲烷:甲醇=7/1，R f= 0.66)純化。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=1/0至0/1，二氯甲烷/甲醇=7/1，R f= 0.66)純化，得到呈黃色油狀物之化合物 4(4.50 g, 13.7 mmol, 87.7%產率)。化學式：C 12H 16F 3NO 6，LCMS實驗值：[M+H] +=328.0。 1H NMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:9.72 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.16 - 5.13 (m, 1H), 4.41 - 4.38 (m, 1H), 4.32 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 3.81 - 3.66 (m, 5H), 1.40 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。
步驟 3 ： ( 5B) 之製備。向化合物 5A(5.00 g，22.8 mmol，1.00 eq)於DCM (50.0 mL)中之溶液中添加TEA (2.77 g，27.3 mmol，3.81 mL，1.20 eq)及甲烷磺酸甲基磺醯酯(5.16 g，29.6 mmol，1.30 eq)。將混合物在25℃下攪拌12小時。TLC (石油醚/乙酸乙酯=0/1)指示化合物5A (R f= 0.20)剩餘，且偵測到一個主要新斑點(Rf = 0.50)。反應混合物藉由添加H 2O (50.0 mL)淬滅，接著用DCM (30.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水(50.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至0/1，石油醚/乙酸乙酯=0/1，Rf = 0.50)純化，得到呈無色油狀物之化合物 5B(4.80 g, 16.1 mmol, 70.7%產率)。化學式：C 9H 19N 3O 6S。 1H NMR: 400 MHz, CDCl 3 δ:4.39 - 4.36 (m, 2H), 3.78 - 3.75 (m, 2H), 3.69 - 3.65 (m, 10H), 3.40 - 3.37 (m, 2H), 3.07 (s, 3H)。
步驟 4 ： (5) 之製備向化合物 4(2.00 g，6.11 mmol，1.00 eq)於DMF (20.0 mL)中之溶液中添加NaH (977 mg，24.4 mmol，60.0%純度，4.00 eq)。將混合物在25℃下攪拌1.5小時。接著添加化合物 5B(2.00 g，6.72 mmol，1.10 eq)及NaI (183 mg，1.22 mmol，0.200 eq)，且將混合物在60℃下攪拌14.5小時。LC-MS (EC492-348-P1A)顯示偵測到所需化合物(Rt = 0.64 min)。反應混合物藉由添加25.0 mL飽和NH 4Cl淬滅，接著用EtOAc (25.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(20.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=1/0至0/1，石油醚/乙酸乙酯=3/1，Rf = 0.50)純化，得到呈淡黃色油狀物之化合物5 (3.00 g, 5.68 mmol, 92.8%產率，100%純度)。化學式：C 20H 31F 3N 4O 9，LCMS實驗值：[M+Na] +=551.1； 1H NMR: 400 MHz, CDCl 3 δ:7.03 (s, 1H), 4.24 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.18 - 4.15 (m, 1H), 4.05 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 3.95 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.83 - 3.77 (m, 3H), 3.73 - 3.61 (m, 15H), 3.38 - 3.36 (m, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.34 (s, 3H)。
步驟 5 ： (6) 之製備。將化合物 5(2.50 g，4.73 mmol，1.00 eq)、Pd/C (250 mg，4.73 mmol，10.0%純度，1.00 eq)於MeOH (25.0 mL)中之混合物脫氣且用H 2吹掃3次，接著將混合物在H 2(15.0 psi)氛圍下在25℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量(R t= 0.50 min)。過濾反應混合物且減壓濃縮以移除MeOH，得到呈無色油狀物之化合物 6(1.60 g, 3.18 mmol, 67.3%產率)。化學式：C 20H 33F 3N 2O 9，LCMS實驗值：[M+H] +=503.1。 1H NMR: 400 MHz, CD 3OD δ:8.52 (s, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.92 (S, 1H), 4.37 - 4.30 (m, 2H), 3.95 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 3.88 (d, J= 8.4 Hz, 3H), 3.81 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 3.74 - 3.61 (m, 15H), 3.13 - 3.11 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.34 (s, 3H)。
步驟 6 ： (8) 之製備 。將化合物 7(3.87 g，42.4 mmol，1.00 eq)、化合物 7a(15.7 g，123 mmol，17.8 mL，2.90 eq)、NaOH (5.00 M，849 μL，0.100 eq)於DMSO (40.0 mL)中之混合物在20℃下攪拌12小時。TLC (二氯甲烷/甲醇=10/1)顯示化合物 7(R f= 0.050)完全耗盡，且形成一個主要新斑點(R f= 0.600)。混合物用H 2O (2.50 mL)洗滌且用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，二氯甲烷/甲醇=1/0至10/1，二氯甲烷/甲醇=10/1，R f= 0.600)純化，得到呈黃色固體狀之化合物 8(14.7 g，粗物質)。
步驟 7 ： (9) 之製備。向化合物 8a(1.00 g，6.36 mmol，1.00 eq)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加HATU (5.44 g，14.3 mmol，2.25 eq)。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。添加DIEA (3.29 g，25.4 mmol，4.43 mL，4.00 eq)及化合物 8(2.65 g，7.64 mmol，1.20 eq)。將混合物在20℃下攪拌1小時。LCMS顯示化合物 8a完全耗盡且偵測到所需質量(R t= 0.66 min)。將反應混合物用1 M HCl (10.0 Ml)洗滌且用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用H 2O (10.0 mL * 3)、鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=1/0至1/1，石油醚/乙酸乙酯=1/1，R f= 0.350)純化，得到呈黃色油狀物之化合物 9(2.58 g, 5.30 mmol, 83.3%產率)。化學式：C 23H 42N 4O 7，LCMS實驗值：[M+H] += 487.2。 1H NMR: 400 MHz, CDCl 3 δ:6.27(d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.19 - 4.14 (m, 1H), 3.73 - 3.63 (m, 4H), 3.61 - 3.57 (m, 2H), 3.42 - 3.38 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.53 - 2.41 (m, 4H), 2.22 - 2.19 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 1.71 - 1.58 (m, 5H), 1.46 (s, 18H)
步驟 8 ： (10) 之製備。向化合物 9(2.00 g，4.11 mmol，1.00 eq)之溶液中添加TFA (15.48 g，135 mmol，10.0 mL，33.0 eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示化合物 8完全耗盡及所需質量(R t= 0.50 min)。減壓濃縮混合物以移除TFA，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件)純化，得到呈黃色油狀物之化合物 10(84.0 mg, 220 μmol, 5.36%產率，98.2%純度)。化學式：C 15H 26N 4O 7，LCMS實驗值：[M+H] += 375.1。 1H NMR: 400 MHz, CDCl 3 δ:6.16(d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.22 - 4.20 (m, 1H), 3.75 - 3.73 (m, 4H), 3.61 - 3.58 (m, 2H), 3.48 - 3.44 (m, 2H), 3.30 - 3.27 (t, J= 12.0 Hz, 2H), 2.61 - 2.58 (m, 4H), 2.23 - 2.19 (t, J= 16.0 Hz, 2H), 1.70 - 1.59 (m, 4H), 1.46 - 1.37 (m, 2H)
步驟 9 ： A134 之製備向化合物 10(81.0 mg，212 μmol，98.2%純度，1.00 eq)於DMF (1.00 mL)中之溶液中添加HATU (181 mg，478 μmol，2.25 eq)。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。添加DIEA (109 mg，849 μmol，148 μL，4.00 eq)及化合物 6(241.0 mg，478 μmol，99.3%純度，2.25 eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示化合物10完全耗盡，且發現一個具有所需質量之主峰。藉由添加FA (0.500 mL)淬滅反應混合物。反應混合物藉由製備型HPLC (FA條件)純化，得到呈棕色油狀物之 A134(129.0 mg, 98.0%純度，44.3%產率)。化學式：C 55H 88F 6N 8O 23，LCMS實驗值：[M+H] += 1343.9。
化合物 94 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R, 42S,44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-46-(20-(1-(20-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十七烷 -27- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35, 38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1980
Figure 02_image1982
Figure 02_image1984
步驟 1 ：化合物 11 之製備。在N 2下在0℃下，向 中間體 4(20.0 mg，9.69 μmol，1.00 eq)、 A134(13.2 mg，9.69 μmol，98.0%純度，1.00 eq)於DMF (0.50 mL)中之溶液中添加CuSO 4(0.40 M，24.2 μL，1.00 eq)、抗壞血酸鈉(0.40 M，96.9 μL，4.00 eq)及THPTA (4.21 mg，9.69 μmol，1.00 eq)之新製溶液。將混合物在0℃下攪拌2小時。LCMS顯示一個主峰為所需質量。反應混合物藉由製備型HPLC (HCl條件)直接純化，得到呈白色固體狀之化合物 11(26.0 mg，粗物質)。化學式：C 151H 223F 6N 29O 49S 2，LCMS實驗值：[M+3H] 3+= 1136.3。
步驟 2 ： 化合物 94 之製備。將化合物 11(20.0 mg，5.87 μmol，1.00 eq)於HCl (1 M，2.00 mL，340.67 eq)中之溶液在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示化合物 11完全耗盡且發現一個具有所需質量之主峰。反應混合物藉由製備型HPLC (HCl條件)純化，得到呈棕色油狀物之化合物94 (10.0 mg, 2.93 μmol, 97.4%純度，49.8%產率)。化學式：C 145H 215F 6N 29O 49S 2，LCMS實驗值：[M+3H] 3+= 1109.6。 1H NMR: 400 MHz, MeOD δ:8.21 - 8.20 (m, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.49 - 6.89 (m, 10H), 5.29 - 5.25 (m, 2H), 4.66 - 4.55 (m, 3H), 4.50 - 4.41 (m, 2H), 4.40 - 4.32 (m, 3H), 4.26 - 4.19 (m, 2H), 4.14 - 3.97 (m, 8H), 3.92 - 3.88 (m, 4H), 3.81 - 3.79 (m, 3H), 3.77 - 3.58 (m, 52H), 3.55 - 3.51 (m, 7H), 3.48 - 3.42 (m, 5H), 3.38 - 3.34 (m, 11H), 3.27 - 3.12 (m, 4H), 3.04 - 2.83 (m, 4H), 2.75 - 2.69 (m, 2H), 2.60 - 2.38 (m, 11H), 2.35 - 2.18 (m, 7H), 2.15 - 2.06 (m, 2H), 2.05 - 1.55 (m, 16H), 1.35 - 1.16 (m, 8H), 1.06 - 0.79 (m, 18H)
A136 ： 3,3'-((2-(6- 疊氮基己醯胺基 )-2-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2- 二甲基 -8-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 ) 六氫 -4,7- 環氧基 [1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-d] 㗁呯 -4- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2- 二甲基 -8-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 ) 六氫 -4,7- 環氧基 [1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-d] 㗁呯 -4- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之製備
Figure 02_image1986
Figure 02_image1988
步驟 6 ：化合物 8 之製備。將化合物 7(10.0 g，82.5 mmol，11.9 mL，1.00 eq)、化合物 7a(47.6 g，371 mmol，53.9 mL，4.50 eq)及NaOH (5 M，1.65 mL，0.100 eq)於DMSO (25.0 mL)中之混合物在20℃下攪拌16小時。LCMS顯示偵測到所需質量(R t= 0.524 min)。反應混合物藉由添加H 2O (30.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(30.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至0/1，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf = 0.30)純化，得到呈無色油狀物之化合物 8(22.0 g, 43.5 mmol, 52.7%產率)。化學式：C 25H 47NO 9，LCMS實驗值：[M+H] +=506.2。 1H NMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:3.58 - 3.53 (m, 6H), 3.17 (s, 6H), 2.40 - 2.37 (s, 6H), 1.39 (s, 27H)。
步驟 7 ：化合物 9 之製備。向化合物 8a(300.0 mg，1.91 mmol，1.00 eq)於DCM (10.0 mL)中之溶液中添加HATU (2.25 g，5.92 mmol，3.10 eq)，且在20℃下攪拌0.5小時。接著添加DIEA (1.23 g，9.54 mmol，1.66 mL，5.00 eq)及化合物 8(1.16 g，2.29 mmol，1.20 eq)。將混合物在20℃下攪拌1.5小時。LCMS顯示一個主峰為所需化合物。反應混合物藉由添加1 N HCl (10.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(10 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=1/0至0/1，石油醚/乙酸乙酯=3/1，R f= 0.65)純化，得到呈無色油狀物之化合物 9(960.0 mg, 99.7%純度，76.1%產率)。化學式：C 31H 56N 4O 10，LCMS實驗值：[M+H] += 645.3
步驟 8 ：化合物 10 之製備。將化合物 9(960.0 mg，1.48 mmol，99.7%純度)於DCM (10.0 mL)及TFA (68.3 mg，1.48 mmol，56.0 μL，1.00 eq)中之溶液在20℃下攪拌12小時。LCMS顯示一個主峰為所需質量。將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件)純化且凍乾，得到呈無色油狀物之化合物 10(281.0 mg, 98.7%純度，39.2%產率)。化學式：C 19H 32N 4O 10，LCMS實驗值：[M+H] +=477.1。 1H NMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:6.94 (s, 1H), 3.57 - 3.53 (m, 12H), 3.31 - 3.28 (m, 2H), 2.43 - 2.40 (m, 6H), 2.07 - 2.03 (m, 2H), 1.55 - 1.42 (m, 4H), 1.31 - 1.23 (m, 2H)。
步驟 9 ： A136 之製備 。向化合物 10(190 mg，398 μmol，1.00 eq)於DCM (10.0 mL)中之溶液中添加DIEA (257 mg，1.99 mmol，347 μL，5.00 eq)且在20℃下攪拌10分鐘，接著添加HATU (470 mg，1.24 mmol，3.10 eq)及化合物 6(651 mg，1.30 mmol，3.25 eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示偵測到所需質量(Rt = 0.64 min)。反應混合物藉由添加1 M HCl (5.00 mL)淬滅，接著用DCM (5.00 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(5.00 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件)純化，得到呈棕色油狀物之化合物 A136(122.0 mg, 97.2%純度，15.41%產率)。化學式：C 79H 125F 9N 10O 34，LCMS實驗值：[M+H] += 1930.4。 1H NMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:9.72 (s, 2H), 7.91 - 7.88 (m, 3H), 7.00 (s, 1H), 4.41 - 4.38 (m, 3H), 4.31 (d, J= 5.6 Hz, 3H), 3.84 - 3.66 (m, 14H), 3.64 - 3.51 (m, 44H), 3.42 - 3.37 (m, 6H), 3.29 - 3.28 (m, 4H), 3.24 - 3.17 (m, 5H), 2.34 - 2.28 (m, 5H), 2.09 - 2.05 (m, 2H), 1.55 - 1.43 (m, 4H), 3.64 - 3.51 (m, 44H), 1.40 (s, 9H), 1.28 (s, 9H)。
化合物 95 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-46-(20-(1-(20,20- 雙 (1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-1-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14,21- 二氮雜二十六烷 -26- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜二十烷醯胺基 )-42-( 羧甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29, 32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1990
Figure 02_image1992
步驟 1 ：化合物 11 之製備。在N 2下在0℃下，向化合物 中間體 4(20.0 mg，9.69 μmol，1.00 eq)、 A136(19.25 mg，9.69 μmol，1.00 eq)於DMF (0.50 mL)中之溶液中添加CuSO 4(0.4 M，24.2 μL，1.00 eq)、抗壞血酸鈉(0.4 M，96.9 μL，4.00 eq)及THPTA (4.21 mg，9.69 μmol，1.00 eq)。將混合物在0℃下攪拌2小時。LCMS顯示一個主峰為所需質量。反應混合物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之化合物 11(13.0 mg, 2.63 μmol, 80.8%純度，27.1%產率)。化學式：C 175H 260F 9N 31O 60S 2，LCMS實驗值：[M+3H] 3+= 1331.6。
步驟 2 ：化合物 95 之製備。將化合物 11(11.0 mg，2.23 μmol，80.8%純度，1.00 eq)於HCl (1 M，0.2 mL)中之溶液在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示一個主峰為所需質量。反應混合物藉由製備型HPLC ( FA 條件)純化，得到呈棕色油狀物之 化合物 95(7.00 mg, 94.7%純度，81.2%產率)。化學式：C 166H 248F 9N 31O 60S 2，LCMS實驗值：[M+3H] 3+= 1291.6。
化合物 96 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39R,42S, 44aS,46S,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-46-(4-(1-(((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3- 二羥基 -4-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛 -1- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丁醯胺基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-9,39-( 橋亞甲基二硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1994
Figure 02_image1996
步驟 1 ：化合物 1 之製備。向 (1S,2R,3R,4R,5S)-4- 胺基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇 (500.0 mg, 1.64 mmol, 1.00 eq)於MeOH (5.00 mL)中之溶液中添加TEA (497 mg，4.91 mmol，684 μL，3.00 eq)及(Boc) 2O (536 mg，2.46 mmol，564 μL，1.50 eq)。將混合物在20℃下攪拌12小時。LC-MS顯示 (1S,2R,3R,4R,5S)-4- 胺基 -1-( 羥甲基 )-6,8- 二氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -2,3- 二醇耗盡，且一個主峰為所需質量。粗產物藉由製備型HPLC (TFA條件)純化，得到呈白色固體狀之化合物 1(300.0 mg，粗物質)。化學式：C 12H 21NO 7，LCMS實驗值：[M+Na] += 314.0。 1HNMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:6.73 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 3.75 - 3.72 (m, 1H), 3.65 (s, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 4H), 3.40 - 3.37 (m, 1H), 1.38 (s, 9H)。
步驟 2 ：化合物 3 之製備。向化合物 1(300.0 mg，1.03 mmol，1.00 eq)及化合物 2(536.0 mg，5.15 mmol，630 μL，5.00 eq)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加CAS： 5872-08-2(128.0 mg，514.0 μmol，0.50 eq)。將混合物在80℃下攪拌12小時。LC-MS顯示化合物 1耗盡，且偵測到所需質量(R t= 0.54 min)。粗產物藉由製備型HPLC (TFA條件)純化，得到呈黃色固體狀之化合物 3(300.0 mg, 87.91%產率)。化學式：C 15H 25NO 7，LCMS實驗值：[M + Na] += 354.1。 1H NMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:7.08 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 5.06 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 4.21 - 4.20 (m, 1H), 4.13 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.74 - 3.61 (m, 4H), 3.37 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 1.38 (s, 12H), 1.26 (s, 3H)。
步驟 3 ：化合物 4 之製備。向化合物 3(200.0 mg，603.0 μmol，1.00 eq)於DCM (0.50 mL)中之溶液中添加TEA (79.4 mg，784 μmol，109 μL，1.30 eq)及甲烷磺酸甲基磺醯酯(126.0 mg，724.0 μmol，1.20 eq)。將混合物在20℃下攪拌1小時。LC-MS顯示化合物 3耗盡，且偵測到所需質量。將混合物倒入H 2O (2.0 mL)中。用DCM (10.00 mL*3)萃取混合物水溶液，合併之有機層用鹽水(3.00 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.40)純化，得到呈白色固體狀之化合物 4(140 mg，粗物質)。化學式：C 16H 27NO 9S，LCMS實驗值：[M + Na] += 432.0。 1H NMR: 400 MHz, CDCl 3 δ:5.40 (s, 1H), 4.75 - 4.77 (m, 1H), 4.61 - 4.53 (m, 2H), 4.15 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.04 (t, J= 6.4 Hz, 1H), 3.86 - 3.84 (m, 1H), 3.79 - 3.77 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 1.56 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.36 (s, 3H)。
步驟 4 ：化合物 5 之製備。在N 2下在20℃下，向化合物 4(140 mg，341 μmol，粗物質純度，1.00 eq)於DMF (1.40 mL)中之溶液中添加NaN 3(70.0 mg，1.08 mmol，3.15 eq)。將混合物在N 2下在90℃下攪拌24小時。LC-MS顯示化合物 4剩餘，且偵測到所需質量。將混合物冷卻至20℃且倒入飽和Na 2CO 3(2.00 mL)中。用EtOAc (10.00 mL * 3)萃取混合物水溶液，合併之有機層用飽和Na 2CO 3(2.00 mL * 5)、鹽水(3.00 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型HPLC (FA條件)純化，得到呈白色固體狀之化合物 5(60.0 mg，粗物質)。化學式：C 15H 24N 4O 6，LCMS實驗值：[M + Na] +=379.1。 1H NMR: EC6537-20-P1B, 400 MHz, CDCl 3 δ:5.37 (s, 1H), 4.79 - 4.77 (m, 1H), 4.12 - 4.10 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.00 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 5H), 1.55 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.35 (s, 3H)。
步驟 5 ：化合物 6 之製備。將化合物 5(30.0 mg，84.1 μmol，1.00 eq)於DCM (0.01 mL)及TFA (1.50 mL)中之溶液在50℃下攪拌1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型HPLC (FA條件)純化，得到呈白色固體狀之化合物 6(16.0 mg，粗物質)。化學式：C 7H 12N 4O 4，LCMS實驗值：[M + Na] += 217.1。 1H NMR: 400 MHz, CD 3OD δ:5.48 (s, 1H), 3.89 - 3.82 (m, 4H), 3.74 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.62 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.19 (d, J= 8.8 Hz, 1H)。
步驟 6 ：化合物 8 之製備。向化合物 6(16.0 mg，74.0 μmol，1.00 eq)於MeOH (0.10 mL)中之溶液中添加化合物 7(31.5 mg，222 μmol，30.6 μL，3.00 eq)。將混合物在50℃下攪拌2小時。LC-MS顯示化合物 6耗盡且偵測到所需質量。減壓濃縮混合物，得到呈白色固體狀之化合物 8(10.0 mg, 43.28%產率)。化學式：C 9H 11F 3N 4O 5，LCMS實驗值：[M - 96] += 217.1。 1H NMR: 400 MHz, DMSO- d 6 δ:5.48 (s, 1H), 3.89 - 3.82 (m, 4H), 3.74 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.62 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.19 (d, J= 8.8 Hz, 1H)。
步驟 7 ：化合物 96 之製備。在N2下在0℃下，向化合物 8(5.00 mg，16.0 μmol，1.10 eq)及 中間體 48(12.6 mg，29.1 μmol，2.00 eq)於DMF (0.05 mL)中之溶液中添加CuSO 4(0.40 M，72.8 μL，2.00 eq)、抗壞血酸鈉(0.40 M，145 μL，4.00 eq)及THPTA (12.6 mg，29.1 μmol，2.00 eq)。將混合物在0℃下攪拌12小時。LC-MS顯示化合物 8耗盡，且偵測到所需質量。粗產物藉由製備型HPLC (FA條件)純化，得到呈白色固體狀之 化合物 96(15.0 mg, 98.2%純度，46.53%產率，FA)。化學式：C 94H 125F 3N 24O 26S 2，LCMS實驗值：[M - 96] += 1016.7。
中間體 32 ： 3-((6S,9R,12S,15S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,39S, 42S,44aS,49aR)-30-((1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-12,33- 雙 ((1H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-42-( 羧甲基 )-6-((R)-1- 羥乙基 )-18,27- 二異丁基 -15- 異丙基 -36- 甲基 -5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,49- 十五側氧基四十八氫 -1H-39,9-( 橋亞乙基硫代橋亞甲基 ) 二吡咯并 [1,2-a:1',2'-d][1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43] 十五氮雜環四十五烷 -21- 基 ) 丙酸之製備
Figure 02_image1998
Figure 02_image2000
Figure 02_image2002
步驟 1 ：化合物 2 之製備。將化合物 1(20.0 g，48.61 mmol，1.00 eq)、NMM (5.90 g，58.33 mmol，6.41 mL，1.20 eq)於THF (200 mL)中之溶液冷卻至0℃，接著在0℃下向混合物中逐滴添加IBCF (7.97 g，58.33 mmol，7.66 mL，1.20 eq)。將反應混合物在20℃下攪拌1小時。過濾混合物，且將濾液冷卻至0℃。接著緩慢添加NaBH 4(2.88 g，76.13 mmol，1.57 eq)於H 2O (20 mL)中之溶液。將反應混合物在0℃下攪拌0.5小時。將反應混合物減壓濃縮，且殘餘物用EtOAc (200 mL)稀釋，用1 M HCl (50 mL)、H 2O (50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，減壓濃縮，得到呈白色固體狀之化合物 2(16.53 g，粗物質)。化學式：C 23H 27NO 5，LCMS實驗值：[M + Na] += 420.2。
步驟 2 ：化合物 3 之製備。在0℃下向化合物 2(16.53 g，41.59 mmol，1.00 eq)、PPh 3(16.36 g，62.38 mmol，1.50 eq)及咪唑(4.25 g，62.38 mmol，1.50 eq)於THF (500 mL)中之溶液中逐滴添加I 2(15.83 g，62.38 mmol，12.57 mL，1.50 eq)於THF (200 mL)0中之溶液。接著將反應混合物升溫至20℃且攪拌4小時。LC-MS顯示化合物 2完全耗盡，且一個主峰為所需m/z。過濾混合物且減壓濃縮。殘餘物藉由管柱層析(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯=50/1至5/1)純化，得到呈白色固體狀之化合物 3(18.35 g, 86.96%產率)。化學式：C 23H 26INO 4，LCMS實驗值：[M + Na] += 530.09。
步驟 3 ：化合物 4 之製備。將化合物 3(1.20 g，2.37 mmol，1.00 eq)、Boc-Cys-OH (785.03 mg，3.55 mmol，1.50 eq)、NaOMe (5.4 M，875.99 μL，2.00 eq)於MeOH (50 mL)中之混合物在15℃下攪拌2小時。LCMS發現所需MS。混合物藉由1 M HCl酸化至pH = 5。接著混合物藉由急驟(C18，TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之化合物 4(1.10 g, 77.42%產率)。化學式：C 31H 40N 2O 8S，LCMS實驗值：[M + H - Boc] += 501.3, [M + H - Boc- tBu] += 445.2。
步驟 4 至 5 ：化合物 6 之製備。 固相肽合成 ：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(3.08 g，2.00 mmol，0.65 mmol/g)及Fmoc-Pro-OH (674.0 g，2.00 mmol，1.00 eq)之DCM (20.0 mL)的容器中逐滴添加DIEA (1.39 mL，8.00 mmol，4.00 eq)，且在20℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (2.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (40 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (40 mL)，且將混合物在20℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (400 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-D-Pro-OH (2.02 g，6.00 mmol，3.00 eq)、HBTU (2.19 g，5.70 mmol，2.85 eq)於DMF (20.0 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (2.09 mL，12.0 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在20℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (40 mL) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (40 mL)添加至樹脂中，且將混合物在20℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (40 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表5中之2至4)。 表5.
編號 物質 偶合試劑
1 Fmoc-Pro-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-D-Pro-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 化合物 4(2.00 eq) HATU (1.90 eq)及DIEA (4.00 eq)
4 Fmoc-Asp(OAll)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
肽裂解及環化 ：1)將裂解溶液(1% TFA/DCM，40 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽(2.00 mmol)的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌3分鐘。 2)過濾後，收集溶液。 3)再重複一次步驟1至2。 4)合併之溶液(含有2.00 mmol粗肽)用DCM (200 mL)稀釋，接著添加HOBT (540.0 mg，4.00 mmol，2.00 eq)、TBTU (1.28 g，4.00 mmol，2.00 eq)，且藉由DIEA將pH調節至8。將混合物在20℃下攪拌2小時。 5)混合物用1 M HCl (50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，且減壓濃縮，得到呈白色固體狀之化合物 6(1.78 g，粗物質)。化學式：C 41H 66N 6O 12S，LCMS實驗值：[M+H] += 868.03。
步驟 6 ：化合物 7 之製備。將化合物 6(1.78 g，粗物質)於TFA/H 2O (95/5，v/v，30 mL)中之混合物在20℃下攪拌2小時。接著減壓移除溶劑。將殘餘物溶解於THF (20 mL)、H 2O (10 mL)中，藉由飽和NaHCO 3水溶液鹼化至pH = 8，接著在20℃下向混合物中添加Fmoc-OSu (1.38 g，2.00 eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示化合物 6完全耗盡，且一個主峰為所需MS。減壓移除THF。殘餘物藉由1 M HCl酸化至pH = 5，用DCM (50 mL)萃取，用鹽水(10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，減壓濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC (TFA條件)純化，得到呈白色固體狀之化合物 7(716.0 mg, 90%純度，總產率40.8%)。化學式：C 43H 52N 6O 12S，LCMS實驗值：[M+H] += 877.53。
步驟 7 至 8 ：化合物 9 之製備。 固相肽合成：使用標準Fmoc化學方法來合成肽。 1)樹脂製備：向含有含CTC樹脂(0.77 g，0.50 mmol，0.65 mmol/g)及Fmoc-Gly-OH (148.0 mg，0.50 mmol，1.00 eq)之DCM (5.0 mL)的容器中逐滴添加DIEA (348.6 μL，2.00 mmol，4.00 eq)，且在20℃下在N 2鼓泡下混合2小時。接著添加MeOH (2.00 mL)且用N 2再鼓泡30分鐘。用DMF (40 mL) *5洗滌樹脂。接著添加含20%哌啶之DMF (100 mL)，且將混合物在20℃下用N 2鼓泡30分鐘。過濾混合物，得到樹脂。用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂，隨後進行至下一步驟。 2)偶合：在N 2鼓泡下將Fmoc-Leu-OH (529.5 mg，1.50 mmol，3.00 eq)、HBTU (548.6 mg，1.42 mmol，2.85 eq)於DMF (5.0 mL)中之溶液添加至樹脂中。接著將DIEA (0.53 mL，3.0 mmol，6.00 eq)逐滴添加至混合物中，且在20℃下用N 2鼓泡30分鐘。藉由寧海準試驗監測偶合反應，若其顯示無色，則偶合完成。接著用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂。 3)去保護：將含20%哌啶之DMF (10 mL)添加至樹脂中，且將混合物在20℃下用N 2鼓泡30分鐘。接著用DMF (10 mL) *5洗滌樹脂。藉由寧海準試驗監測去保護反應，若其顯示藍色或棕紅色，則反應完成。 4)針對所有其他胺基酸重複步驟2及3：(表5中之2至15)。 表5.
編號 物質 偶合試劑
1 Fmoc-Gly-OH (1.00 eq) DIEA (4.00 eq)
2 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
3 Fmoc-His(Trt)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
4 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
5 Fmoc-Ala-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
6 化合物 7(1.50 eq) HATU (1.42 eq)及DIEA (3.00 eq)
7 Fmoc-Trp-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
8 Fmoc-Val-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
9 Fmoc-Leu-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
10 Fmoc-Glu(O tBu)-OH (3.00 eq) HBTU (2.85 eq)及DIEA (6.00 eq)
肽裂解、環化及去保護 ：1)將裂解溶液(1% TFA/DCM，20 mL)添加至含有側鏈受保護之粗肽(0.50 mmol)的燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌3分鐘。 2)過濾後，收集溶液。 3)再重複一次步驟1至2。 4)合併之溶液(含有0.50 mmol粗肽)用DCM (50 mL)稀釋，接著添加HOBT (135.0 mg，1.00 mmol，2.00 eq)、TBTU (320 mg，1.00 mmol，2.00 eq)，且藉由DIEA將pH調節至8。將混合物在20℃攪拌2小時。 5)混合物用1 M HCl (20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，且減壓濃縮，得到呈白色固體狀之化合物 7(0.50 mmol，粗物質)。 6)將化合物 7(0.50 mmol，粗物質)於TFA/TIS/H 2O (95/2.5/2.5，20 mL)中之混合物在20℃下攪拌1小時。 7)用異丙醚(冷，100 mL)沈澱混合物且離心(以3000 rpm離心3分鐘)。固體用異丙醚洗滌兩次，真空乾燥2小時。 8)殘餘物藉由製備型HPLC (TFA條件)純化，得到化合物 9(53.0 mg，90%純度，總產率6.1%)。化學式：C 83H 113N 19O 20S，LCMS實驗值：[M+2H] 2+= 865.9。
步驟 9 ：化合物 中間體 32 之製備。將化合物 9(53.0 mg，30.65 μmol，1.00 eq)、Pd(PPh 3) 4(14.1 mg，12.26 μmol，0.40 eq)、苯基矽烷(66.3 mg，613.08 μmol，75.65 μL，20.00 eq)於DMF (0.50 mL)中之混合物脫氣且用N 2吹掃3次，接著將混合物在N 2氛圍下在20℃下攪拌1小時。混合物藉由製備型HPLC (TFA條件)直接純化，得到呈白色固體狀之 中間體 32(21.8 mg, 94.4%純度，42.1%產率)。化學式：C 83H 113N 19O 20S，LCMS實驗值：[M+H] += 1690.0, [M+2H] 2+= 845.6。
額外合成流程 化合物 97 ： N-((S)-1- 環庚基 -2-((4-((R)-1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 羰基 )-13- 側氧基 -2,5,8,11- 四氧雜 -14- 氮雜十六烷 -16- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 )-1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺之製備
Figure 02_image2004
1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 酸之製備
Figure 02_image2006
步驟 1 ：在室溫下向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)乙醯胺(7 g, 14.53 mmol)於DCM (70 mL)中之溶液中添加TEA (2.06 mL，14.83 mmol)、DMAP (0.12 g，0.98 mmol)及二碳酸二三級丁酯(3.17 mL，14.83 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之乙醯基((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(7 g, 83%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：584 [M+H] +。
步驟 2 ：在室溫下向乙醯基((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(7 g, 11.9 mmol)於THF (70 mL)中之溶液中添加NaOH (40%，10 mL，59.9 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，緩慢添加水(20 mL)。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(20 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(6 g, 93%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：542 [M+H] +。
步驟 3 ：向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(6 g, 11 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中添加TBAF溶液(22 mL，1 M於THF中)。將反應物在室溫下攪拌3小時。將混合物減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析(矽膠，0-10% DCM/MeOH)純化，得到呈白色固體狀之((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(2.5 g, 76%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：304 [M+H] +。
步驟 4 ：在0℃下向((3aR,4R,7S,7aR)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)胺基甲酸三級丁酯(2.5 g, 8.2 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液中添加NaH (0.47 g，60重量%於礦物油中，12.3 mmol)及2-(2-(2-(2-(甲苯磺醯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯(2.6 g, 7.38 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在起始物質耗盡(LCMS監測)時，將反應容器再次冷卻至0℃，緩慢添加水(10 mL)，且攪拌反應混合物15分鐘。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(20 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之1-((3aR,4R,7S,7aR)-7-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(2.0 g, 51%)。LC-MS (ESI)實驗值：494 [M+H] +。
步驟 5 ：在室溫下向1-((3aR,4R,7S,7aR)-7-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(2.0 g, 4.0 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4 mL，2 N於H 2O中)。將混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物減壓濃縮，得到呈無色油狀物之粗物質1-((2R,3R,4R,5S)-5-胺基-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(1.0 g, 71%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：354 [M+H] +。
步驟 6 ：在N 2氛圍下在室溫下，向1-((2R,3R,4R,5S)-5-胺基-3,4-二羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(200 mg，0.55 mmol)及DIPEA (209 mg，1.65 mmol)於無水DMF (10 mL)中之溶液中添加2,4-二氯-6-甲氧基嘧啶(199 mg，1.1 mmol)。在添加完成之後，將反應物在100℃下攪拌過夜。在起始物質耗盡(TLC監測)時，將反應容器再次冷卻至室溫。將混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋且用水(20 mL × 3)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗產物，其藉由急驟層析純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(10 mg, 3.5%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：500 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 4.33 (td, J = 10.6, 5.2 Hz, 1H), 4.17 - 4.06 (m, 3H), 3.92 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.74 - 3.52 (m, 16H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 1H)。
Figure 02_image2008
步驟 1 ： TFP 酯 ( 化合物 4) 之製備：將2,3,5,6-四氟苯酚、酸 1於DMF中之混合物冷卻至0℃。接著在0℃下向混合物中添加EDCI，且在0℃下攪拌2小時。反應混合物藉由製備型HPLC純化，得到TFP酯 2。
步驟2：中間體(3)之製備： (S)-2- 環庚基 -2-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺基 ) 乙酸甲酯向(S)-2-胺基-2-環庚基乙酸甲酯(1.0 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加1-乙基-1H-吡唑-5-甲酸(1.15 mmol，1.15 eq)。接下來，添加2 mmol DIPEA及1.2 mmol HATU。將反應物攪拌1小時，接著添加水。使用乙酸乙酯(3× 25 mL)自水層萃取產物，接著將有機物合併且濃縮。粗物質藉由二氧化矽層析(100%乙酸乙酯)純化且藉由UV觀測。
(S)-2- 環庚基 -2-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺基 ) 乙酸將(S)-2-環庚基-2-(1-乙基-1H-吡唑-5-甲醯胺基)乙酸甲酯(1 mmol)溶解於10 mL THF及10 mL水中。接下來，添加10 mmol氫氧化鋰，且在室溫下攪拌反應物直至起始物質耗盡(LC-MS)。反應物用1 M HCl酸化至pH 2，接著用乙酸乙酯萃取。將有機物合併且濃縮，接著不經進一步純化即用於下一步驟中。
(R)-(3-(4-( 苯甲基胺基 ) 苯基 )-1-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯向(R)-3-(4-(苯甲基胺基)苯基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸(1.0 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加N-甲基哌𠯤(1.15 mmol，1.15 eq)。接下來，添加2 mmol DIPEA及1.2 mmol HATU。將反應物攪拌1小時，接著添加水。使用乙酸乙酯(3× 25 mL)自水層萃取產物，接著將有機物合併且濃縮。粗物質藉由二氧化矽層析(100%乙酸乙酯)純化且藉由UV觀測。
(R)-(3-(4- 胺基苯基 )-1-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯向三頸圓底燒瓶中裝入(R)-(3-(4-(苯甲基胺基)苯基)-1-(4-甲基哌𠯤-1-基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1 mmol)、0.1 mmol鈀/碳(5%，Degussa)、5 mL乙醇及5 mL THF。接下來，將燒瓶之頂部空間抽真空且用氫氣再填充。將氫氣氣球安裝至燒瓶之一個頸。將反應物在氫氣下攪拌12小時，接著經由矽藻土過濾。藉由旋轉蒸發移除溶劑，且不經進一步純化即使用。
((R)-3-(4-((S)-2- 環庚基 -2-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺基 ) 乙醯胺基 ) 苯基 )-1-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯向(R)-(3-(4-胺基苯基)-1-(4-甲基哌𠯤-1-基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.0 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加(S)-2-環庚基-2-(1-乙基-1H-吡唑-5-甲醯胺基)乙酸(1.15 mmol, 1.15 eq)。接下來，添加2 mmol DIPEA及1.2 mmol HATU。將反應物攪拌1小時，接著添加水。使用乙酸乙酯(3× 25 mL)自水層萃取產物，接著將有機物合併且濃縮。粗物質藉由二氧化矽層析(100%乙酸乙酯)純化且藉由UV觀測。
N-((S)-2-((4-((R)-2- 胺基 -3-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-3- 側氧基丙基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 環庚基 -2- 側氧基乙基 )-1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺將((R)-3-(4-((S)-2-環庚基-2-(1-乙基-1H-吡唑-5-甲醯胺基)乙醯胺基)苯基)-1-(4-甲基哌𠯤-1-基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.0 mmol)溶解於10 mL DCM中，接著添加20 mmol三氟乙酸。將反應物在室溫下攪拌四小時，接著濃縮為粗固體。固體藉由HPLC純化，得到標題化合物。
Figure 02_image2010
步驟3：化合物97之製備：將胺基中間體 3、TFP酯 2、DIEA於DMF中之混合物在25℃下攪拌1小時。反應混合物藉由HPLC純化，得到標題化合物。
N-((S)-1- 環庚基 -2-((4-((R)-1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 羰基 )-13- 側氧基 -2,5,8,11- 四氧雜 -14- 氮雜十六烷 -16- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 )-1- 異丙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺 ( 化合物 98) 、 N-((S)-2-((4-((R)-2- 乙醯胺基 -3-(4-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 醯基 ) 哌 𠯤 -1- 基 )-3- 側氧基丙基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 環庚基 -2- 側氧基乙基 )-1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺 ( 化合物 99) 及 N-((S)-2-((4-((R)-2- 乙醯胺基 -3-(4-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 醯基 ) 哌 𠯤 -1- 基 )-3- 側氧基丙基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 環庚基 -2- 側氧基乙基 )-1- 異丙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺 ( 化合物 100) 之製備以下化合物 化合物 98、 化合物 99 及 化合物 100係根據與 化合物 97之程序相同的程序，使用酸中間體 1及以下對應胺基中間體來製備：N-((S)-2-((4-((R)-2-胺基-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-側氧基丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-異丙基-1H-吡唑-5-甲醯胺、(N-((S)-2-((4-((R)-2-乙醯胺基-3-側氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-乙基-1H-吡唑-5-甲醯胺及N-((S)-2-((4-((R)-2-乙醯胺基-3-側氧基-3-(4l2-哌𠯤-1-基)丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-異丙基-1H-吡唑-5-甲醯胺。
Figure 02_image2012
化合物 98
Figure 02_image2014
化合物 99
Figure 02_image2016
化合物 100
Figure 02_image2018
3,3'-((2-((R)-2-(4-((S)-2- 環庚基 -2-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺基 ) 乙醯胺基 ) 苯甲基 )-1-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-1,4- 二側氧基 -6,9,12- 三氧雜 -3- 氮雜十四烷 -14- 醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) ( 化合物 101) 之製備
Figure 02_image2020
1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 - 2H- 哌喃 -2- 基 )-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸之製備
Figure 02_image2022
Figure 02_image2024
步驟 1 ：在H 2氣球下在室溫下，向(2R,3R,4R,5S)-2-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(300 mg，0.59 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加Pd/C (30 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌0.5小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：485 [M+H] +。
步驟 2 ：將15-((2-羧乙氧基)甲基)-3,13-二側氧基-1-苯基-2,5,8,11,17-五氧雜-14-氮雜二十烷-20-酸(125 mg，0.24 mmol)、DIPEA (0.16 mL，0.94 mmol)及HATU (197 mg，0.52 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加(2R,3R,4R,5S)-2-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇(296 mg, 0.52 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(250 mg, 0.17 mmol)。LC-MS (ESI)實驗值：1463 [M+H] +。
步驟 3 ：在室溫下向1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(250 mg, 0.17 mmol)於THF (5 mL)及H 2O (1.5 mL)中之溶液中添加LiOH (21.5 mg，0.51 mmol)。將反應物在室溫下攪拌2小時。用2 N HCl將反應物調節至酸性。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-20-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4-二羥基-5-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-2-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(160 mg, 68%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1373 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ: 8.12 (s, 2H), 8.00 (s, 2H), 4.34 (td, J= 10.6, 5.1 Hz, 2H), 4.23 - 4.18 (m, 1H), 4.14 - 4.09 (m, 4H), 4.00 (s, 2H), 3.93 (d, J= 2.4 Hz, 2H), 3.73 - 3.61 (m, 44H), 3.57 - 3.50 (m, 8H), 3.38 (t, J= 5.4 Hz, 4H), 3.12 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 2.45 (t, J= 6.1 Hz, 4H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.26 (s)。
Figure 02_image2026
化合物 101 之製備將AVI-610、N-((S)-2-((4-((R)-2-胺基-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-側氧基丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-乙基-1H-吡唑-5-甲醯胺、EDCI、HOBt於DMF中之混合物在0℃下攪拌1小時。混合物藉由製備型HPLC (酸性條件，TFA)純化，得到Dice 5。
以下化合物 化合物 102、 化合物 103及 化合物 104係根據與 化合物 101之程序相同的程序，使用以下對應胺基中間體來製備：N-((S)-2-((4-((R)-2-胺基-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-側氧基丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-異丙基-1H-吡唑-5-甲醯胺、(N-((S)-2-((4-((R)-2-乙醯胺基-3-側氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-乙基-1H-吡唑-5-甲醯胺及N-((S)-2-((4-((R)-2-乙醯胺基-3-側氧基-3-(4l2-哌𠯤-1-基)丙基)苯基)胺基)-1-環庚基-2-側氧基乙基)-1-異丙基-1H-吡唑-5-甲醯胺。
Figure 02_image2028
化合物 102
Figure 02_image2030
化合物 103
Figure 02_image2032
化合物 104
化合物 105 ： N-((2S)-1,1- 二環丙基 -3-((4-(1-(1-((4R,7S)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 )-3,5- 二甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-3- 側氧基丙 -2- 基 )-1- 異丙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺之合成
Figure 02_image2034
化合物 106 ： 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-(4-(4-((S)-3,3- 二環丙基 -2-(1- 異丙基 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯基 )-3,5- 二甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之合成
Figure 02_image2036
化合物 107 ： N-((S)-(4,4- 二氟環己基 )(7-((S)-1-((S)-3-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 )-2- 側氧基 -4-( 三氟甲基 ) 咪唑啶 -1- 基 )-2- 甲氧基乙基 ) 咪唑并 [1,2-b] 嗒 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -1,2,5- 㗁二唑 -3- 甲醯胺之合成
Figure 02_image2038
Figure 02_image2040
化合物 108 ： 3,3'-((2-(2-(2-(2-(2-((S)-3-((S)-1-(2-((S)-(4,4- 二氟環己基 )(4- 甲基 -1,2,5- 㗁二唑 -3- 甲醯胺基 ) 甲基 ) 咪唑并 [1,2-b] 嗒 𠯤 -7- 基 )-2- 甲氧基乙基 )-2- 側氧基 -5-( 三氟甲基 ) 咪唑啶 -1- 基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙醯胺基 ) 丙烷 -1,3- 二基 ) 雙 ( 氧基 )) 雙 (N-(1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-2,5,8,11- 四氧雜十三烷 -13- 基 ) 丙醯胺 ) 之合成
Figure 02_image2042
Figure 02_image2044
化合物 109 ： N-((S)-(4,4- 二氟環己基 )(7-((S)-1-((2R,3R,4R,5S)-3,4- 二羥基 -5-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-16-((S)-2- 側氧基 -4-( 三氟甲基 ) 咪唑啶 -1- 基 )-2,5,8,11,14- 五氧雜十六烷 -16- 基 ) 咪唑并 [1,2-b] 嗒 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -1,2,5- 㗁二唑 -3- 甲醯胺
Figure 02_image2046
1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2- 二甲基 -7-((6-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 胺基 ) 四氫 -4H-[1,3] 二氧雜環戊并 [4,5-c] 哌喃 -4- 基 )-15- 側氧基 -2,5,8,11,18- 五氧雜 -14- 氮雜十九烷 -19- 基 )-15,22- 二側氧基 -2,5,8,11,18,24,27,30- 八氧雜 -14,21- 二氮雜三十二烷 -32- 酸之製備
Figure 02_image2048
Figure 02_image2050
步驟 1 ：在H 2氣球下在室溫下，向N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(230 mg，0.42 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (20 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌0.5小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。LC-MS (ESI)實驗值：525 [M+H] +。
步驟 2 ：將15-((2-羧乙氧基)甲基)-3,13-二側氧基-1-苯基-2,5,8,11,17-五氧雜-14-氮雜二十烷-20-酸(75 mg，0.14 mmol)、DIPEA (0.1 mL，0.57 mmol)及HATU (118.5 mg，0.31 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。在室溫下添加N-((3aR,4R,7S,7aR)-4-(13-胺基-2,5,8,11-四氧雜十三烷基)-2,2-二甲基四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-7-基)-6-(三氟甲基)吡𠯤-2-胺(163.4 mg, 0.31 mmol)。將反應物攪拌過夜。將所得混合物真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化，得到呈無色油狀物之1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(120 mg, 55%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1543 [M+H] +。
步驟 3 ：在H 2氣球下在室溫下，向1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸苯甲酯(120 mg, 0.08 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加Pd/C (12 mg，10重量%，60%濕潤)。將反應物在室溫下攪拌2小時。過濾所得混合物且真空濃縮。粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-15% MeOH/DCM)純化，得到呈白色固體狀之1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-20-(1-((3aR,4R,7S,7aR)-2,2-二甲基-7-((6-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)胺基)四氫-4H-[1,3]二氧雜環戊并[4,5-c]哌喃-4-基)-15-側氧基-2,5,8,11,18-五氧雜-14-氮雜十九烷-19-基)-15,22-二側氧基-2,5,8,11,18,24,27,30-八氧雜-14,21-二氮雜三十二烷-32-酸(50 mg，44%產率)。LC-MS (ESI)實驗值：1453 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.10 (s, 2H), 8.02 (s, 2H), 4.33 - 4.25 (m, 4H), 4.22 - 4.18 (m, 1H), 4.14 (dd, J= 8.8, 5.0 Hz, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dd, J= 12.2, 6.5 Hz, 6H), 3.75 - 3.62 (m, 40H), 3.57 - 3.51 (m, 8H), 3.38 (t, J= 5.5 Hz, 4H), 3.14 (t, J= 11.2 Hz, 2H), 2.46 (t, J= 6.1 Hz, 4H), 1.50 (s, 6H), 1.33 (s, 6H)。 19F NMR (377 MHz, CD 3OD): δ -70.31 (s)。
Figure 02_image2052
Figure 02_image2054
Figure 02_image2056
Figure 02_image2058
Figure 02_image2060
Figure 02_image2062
Figure 02_image2064
表 1A. 本發明之胞外蛋白質降解化合物
Figure 02_image2066
Figure 02_image2068
Figure 02_image2070
Figure 02_image2072
Figure 02_image2074
Figure 02_image2076
Figure 02_image2078
Figure 02_image2080
Figure 02_image2082
Figure 02_image2084
Figure 02_image2086
Figure 02_image2088
Figure 02_image2090
Figure 02_image2092
Figure 02_image2094
Figure 02_image2096
表 1B. 本發明之胞外蛋白質降解化合物
Figure 02_image2098
Figure 02_image2100
Figure 02_image2102
Figure 02_image2104
Figure 02_image2106
Figure 02_image2108
Figure 02_image2110
Figure 02_image2112
Figure 02_image2114
Figure 02_image2116
Figure 02_image2118
Figure 02_image2120
Figure 02_image2122
額外代表性免疫球蛋白降解劑
Figure 02_image2124
Figure 02_image2126
Figure 02_image2128
Figure 02_image2130
Figure 02_image2132
Figure 02_image2134
Figure 02_image2136
Figure 02_image2138
Figure 02_image2140
Figure 02_image2142
Figure 02_image2144
Figure 02_image2146
Figure 02_image2148
Figure 02_image2150
Figure 02_image2152
Figure 02_image2154
Figure 02_image2156
Figure 02_image2158
Figure 02_image2160
Figure 02_image2162
Figure 02_image2164
Figure 02_image2166
Figure 02_image2168
Figure 02_image2170
Figure 02_image2172
Figure 02_image2174
Figure 02_image2176
Figure 02_image2178
Figure 02_image2180
Figure 02_image2182
Figure 02_image2184
Figure 02_image2186
Figure 02_image2188
Figure 02_image2190
Figure 02_image2192
Figure 02_image2194
Figure 02_image2196
Figure 02_image2198
Figure 02_image2200
Figure 02_image2202
Figure 02_image2204
Figure 02_image2206
Figure 02_image2208
Figure 02_image2210
Figure 02_image2212
Figure 02_image2214
Figure 02_image2216
Figure 02_image2218
Figure 02_image2220
Figure 02_image2222
Figure 02_image2224
Figure 02_image2226
Figure 02_image2228
Figure 02_image2230
Figure 02_image2232
Figure 02_image2234
Figure 02_image2236
Figure 02_image2238
Figure 02_image2240
Figure 02_image2242
表 2A. 本發明之 ASGPR 配體
Figure 02_image2244
Figure 02_image2246
Figure 02_image2248
表 2B. 本發明之 ASGPR 配體
Figure 02_image2250
Figure 02_image2252
Figure 02_image2254
Figure 02_image2256
Figure 02_image2258
Figure 02_image2260
Figure 02_image2262
Figure 02_image2264
Figure 02_image2266
表 3A. 所 測試中間體
Figure 02_image2268
Figure 02_image2270
Figure 02_image2272
Figure 02_image2274
Figure 02_image2276
表 3B. 所 測試中間體
Figure 02_image2278
Figure 02_image2280
Figure 02_image2282
Figure 02_image2284
Figure 02_image2286
Figure 02_image2288
Figure 02_image2290
Figure 02_image2292
Figure 02_image2294
Figure 02_image2296
實例 1. 使用表面電漿子共振 (SPR) 量測的免疫球蛋白降解劑對 ASGPR 之親和力在25℃下使用Biacore 8K儀器(GE Healthcare)，藉由表面電漿子共振來量測本文所描述之化合物對ASGP受體之解離常數(Kd)。生物素化之ASGPR (20 µg/ml)以5 µl/min之流動速率固定於SA感測器晶片(GE Healthcare)上持續90秒，達到500至3000共振單位(RU)範圍內之固定化程度。操作緩衝液為50 mM HEPES pH 7.5、150 mM NaCl、50 mM CaCl 2、0.01% P20、3% DMSO。化合物之濃度視Kd值而在2 mM至5 nM之間變化。將化合物稀釋2倍或3倍，具有8個濃度點。對於各濃度，將含有連續稀釋之化合物的溶液以40 μL/min之流動速率注射150至300秒，隨後經歷90至300秒的解離階段。使用50 mM HEPES pH 7.5、150 mM NaCl、5 mM EDTA、0.01% P20、3% DMSO使表面再生。
使用Biacore 8K中之分析軟體處理資料以進行背景相減、雙重參照及溶劑校正。藉由使用以下等式擬合隨濃度([化合物])變化之穩態結合反應(RU)來測定表示為解離常數(Kd)之親和力之值：RU= RUmax/(KD+[化合物])，其中RU max為所計算之最大反應。適當時，使用動力學分析之1:1結合模型來擬合雙重參照資料。所獲得之資料概述於下表4中。此分析亦用於產生圖21中之資料。 表 4A. 所選 化合物之 ASGPR 結合
化合物編號 ASGPR SPR 結合K d(nM)
化合物6 ++++
化合物7 ++++
化合物8 ++++
化合物9 ++++
化合物10 ++++
化合物16 ++++
化合物17 ++++
化合物18 ++
化合物19 ++++
化合物20 ++++
化合物21 ++++
化合物22 ++++
化合物23 ++++
化合物24 ++++
化合物27 ++++
化合物28 ++++
化合物29 +++
化合物30 ++++
化合物31 ++++
化合物32 ++++
化合物38 ++++
化合物51 ++++
化合物56 ++++
化合物57 ++++
化合物58 +++
A2 ++++
A13 ++++
A14 +++
A15 ++++
A19 ++++
A21 +++
A23 ++++
A24 ++++
A25 +++
A26 ++++
A31 ++++
A33 ++++
A34 ++++
A130 ++++
A131 ++++
A132 ++++
在上表中，K d值＞= 1000 nM = +，＜1000 nM = ++，＜500 nM = +++，且＜100 nM = ++++ 表 4B. 額外 ASGPR 結合配體之 ASGPR 結合
Figure 02_image2298
Figure 02_image2300
Figure 02_image2302
Figure 02_image2304
Figure 02_image2306
Figure 02_image2308
Figure 02_image2310
Figure 02_image2312
Figure 02_image2314
Figure 02_image2316
Figure 02_image2318
Figure 02_image2320
Figure 02_image2322
Figure 02_image2324
在上表中，K d值＞= 100 μM = +，＜100 μM = ++，＜10 μM = +++，且＜1 μM = ++++ 表 4C. 所選化合物之 ASGPR 及 IgG 親和力
名稱 結構 ASGPR K D(nM) IgG K D(nM) TCF EC 50 攝取 EC 50
化合物61
Figure 02_image2326
 **** **** **** ****
化合物62
Figure 02_image2328
 **** **** **** ****
化合物63
Figure 02_image2330
 *** **** **** ****
化合物64
Figure 02_image2332
 **** **** **** ***
化合物65
Figure 02_image2334
 **** **** **** ****
化合物66
Figure 02_image2336
 **** **** **** ****
化合物67
Figure 02_image2338
 **** **** * *
化合物68
Figure 02_image2340
 **** **** **** ****
化合物69
Figure 02_image2342
 *** **** * *
化合物45
Figure 02_image2344
 **** **** **** ****
化合物70
Figure 02_image2346
            
化合物71
Figure 02_image2348
 ****    **** ****
化合物72
Figure 02_image2350
 **** **** ** ****
化合物42
Figure 02_image2352
 **** **** **** ****
化合物73
Figure 02_image2354
       **** **
化合物74
Figure 02_image2356
 **** **** **** ****
化合物75
Figure 02_image2358
 **** **** **** ****
中間體12
Figure 02_image2360
    ****      
中間體13
Figure 02_image2362
    ****         
中間體14
Figure 02_image2364
    ****      
中間體15
Figure 02_image2366
    ****      
中間體16
Figure 02_image2368
    ****      
中間體17
Figure 02_image2370
    ****      
中間體18
Figure 02_image2372
    ****      
中間體19
Figure 02_image2374
    ****      
中間體29
Figure 02_image2376
    ****      
中間體21
Figure 02_image2378
    ****      
中間體22
Figure 02_image2380
    ****      
中間體23
Figure 02_image2382
    ****      
中間體24
Figure 02_image2384
    ****      
中間體25
Figure 02_image2386
    ****         
中間體26
Figure 02_image2388
    ****         
中間體27
Figure 02_image2390
    ****         
中間體28
Figure 02_image2392
    ****         
化合物76
Figure 02_image2394
 **** **** **** ****
化合物77
Figure 02_image2396
 **** **** **** ****
化合物78
Figure 02_image2398
 **** **** **** ****
化合物79
Figure 02_image2400
 **** **** **** ****
中間體8
Figure 02_image2402
    ****         
化合物53
Figure 02_image2404
 **** **** **** ****
化合物32
Figure 02_image2406
    **** **** ****
化合物51
Figure 02_image2408
 **** **** **** ****
化合物80
Figure 02_image2410
 * ****      
化合物81
Figure 02_image2412
            
中間體4
Figure 02_image2414
    ****         
化合物4
Figure 02_image2416
 **** **** **** ****
化合物16
Figure 02_image2418
 **** **** **** ****
化合物82
Figure 02_image2420
       **** ****
化合物83
Figure 02_image2422
       **** ****
化合物84
Figure 02_image2424
 * **** * *
化合物85
Figure 02_image2426
 ** **** * *
化合物86
Figure 02_image2428
 **** **** **** ****
中間體1
Figure 02_image2430
    ****         
化合物22
Figure 02_image2432
 **** **** **** ****
化合物87
Figure 02_image2434
 *    * *
化合物88
Figure 02_image2436
 *    * *
化合物89
Figure 02_image2438
       **** ****
化合物90
Figure 02_image2440
 ****    **** ****
中間體30
Figure 02_image2442
    ****         
化合物91
Figure 02_image2444
    **** **** ****
化合物92
Figure 02_image2446
 **** **** **** ****
化合物93
Figure 02_image2448
       **** ****
中間體31
Figure 02_image2450
    ****      
A134
Figure 02_image2452
            
化合物94
Figure 02_image2454
 **** **** **** ****
A136
Figure 02_image2456
            
化合物95
Figure 02_image2458
 **** **** **** ****
化合物96
Figure 02_image2460
            
中間體32
Figure 02_image2462
            
在上表中，K d值＞= 1000 nM = *，＜1000 nM = **，＜500 nM = ***，且＜100 nM = ****
實例 2 使用表面電漿子共振 (SPR) 量測的化合物對 IgG 之親和力在25℃下使用Biacore 8K儀器(GE Healthcare)，藉由表面電漿子共振(SPR)來量測本文所描述之化合物對IgG之解離常數(Kd)。使用NHS/EDC化學方法在乙酸鈉(pH 5.5)中，將IgG (2 µg/ml)以5 µl/min之流動速率固定於CM5感測器晶片(GE Healthcare)上持續290秒。獲得1000至1300共振單位(RU)範圍內之固定化程度。操作緩衝液為10 mM HEPES pH 7.4、400 mM NaCl、0.005% P20、3% DMSO。化合物之濃度視K d值而在500 mM至100 nM之間變化。將化合物稀釋2倍或3倍，具有8個濃度點。對於各濃度，將含有連續稀釋之化合物的溶液以50 μL/min之流動速率注射90秒，隨後經歷500秒的解離階段。
使用Biacore 8K中之分析軟體處理資料以進行背景相減、雙重參照及溶劑校正。使用動力學分析之1:1結合模型，或使用以下等式使用隨濃度([化合物])變化之穩態結合反應(RU)來擬合雙重參照資料：RU= RUmax/(KD+[化合物])，其中RU max為所計算之最大反應。此分析亦用於產生圖22中之資料，且適用於產生圖23中之資料。 表 5 . 所選 化合物之 IgG 結合
化合物編號 IgG SPR 結合K d(nM)
化合物6 ++++
化合物7 ++++
化合物8 ++++
化合物9 ++++
化合物10 ++++
化合物15 ++++
化合物16 ++++
化合物17 ++++
化合物21 ++++
化合物22 ++++
化合物41 ++++
化合物52 ++++
化合物53 ++++
化合物60 ++++
中間體1 ++++
中間體2 ++++
中間體3 ++++
中間體4 ++++
中間體5 ++++
中間體6 ++++
中間體7 ++++
中間體9 ++++
中間體12 ++++
中間體13 ++++
中間體15 ++++
中間體16 ++++
中間體17 ++++
中間體18 ++++
中間體19 ++++
中間體21 ++++
中間體22 ++++
中間體23 ++++
中間體24 ++++
中間體25 ++++
中間體26 ++++
中間體27 ++++
中間體28 ++++
中間體29 ++++
在上表中，K d值＞= 1000 nM = +，＜1000 nM = ++，＜500 nM = +++，且＜100 nM = ++++
實例 3 三元複合物形成及 HepG2 細胞攝取 三元複合物形成分析三元複合物形成分析經設計以用於鑑別在降解劑、恆定濃度之螢光標記抗體與細胞表面上之ASGPR受體之間形成複合物所需的降解劑之濃度。峰值平均螢光強度(MFI)在三元複合物形成之理想降解劑濃度下產生。次最佳濃度之降解劑(過多或過少)使得形成較少複合物且產生降低之MFI。
遵循製造商說明書，使用Alexa Fluor™ 488蛋白質標記套組(Thermo Fisher，A10235)用Alexa Fluor 488對人類IgG (Sigma-Aldrich，I4506)進行共價標記。將HepG2細胞(ATCC，HB-8065)培養至約70%匯合且藉由胰蛋白酶消化進行收集。在96孔盤中，將HepG2細胞之單細胞懸浮液以1 × 10 5個細胞/孔塗鋪於細胞培養基(補充有10% FBS之DMEM)中，且將其置於4℃下。對於使用人類IgG之研究，將細胞與100 nM經AF488標記之抗人類IgG及基於IgG之降解劑之連續稀釋液一起在4℃下培育1小時。對於使用DNP之研究，將細胞與100 nM經AF488標記之多株兔抗二硝基苯基(DNP)抗體(ThermoFisher)及基於DNP之降解劑之連續稀釋液一起在4℃下培育1小時。在用含有0.1% BSA及0.1%疊氮化鈉之冰冷PBS洗滌一次之後，將細胞再懸浮於150 μL PBS + 0.1% BSA中，且使用iQue® Screener PLUS流式細胞儀(IntelliCyt)藉由流式細胞量測術來量測細胞締合之AF488螢光。資料顯示所量測之MFI。圖1顯示在 化合物 28之濃度遞增的情況下，HepG2細胞之細胞表面上所結合的經AF488標記之DNP抗體之三元複合物形成。EC 50經量測為就峰值MFI而言， 化合物 28之半最大濃度(0.0047 μM)。所測試化合物之EC 50結果概述於下表6中。此程序亦用於產生圖12 ( 化合物 4)及圖13 ( 化合物 4與非活性化合物)中之資料。非活性化合物不具有C3及C4羥基取代基。當用ASGPR基因敲除細胞重複該分析時，並未出現可評估濃度之三元複合物形成(參見圖15)。
Figure 02_image2464
非活性化合物
細胞攝取分析細胞攝取分析經設計以用於量測在與ASGPR受體進行三元複合物形成且整個複合物胞吞至細胞中之後，化合物介導的螢光標記抗體之細胞攝取。化合物之理想濃度將產生最大數目的具有胞內抗體之細胞，且表示為抗體陽性細胞相對於總細胞數目之峰值比率。如同三元複合物形成分析一樣，過多或過少的化合物將產生次最佳的複合物形成，且較少細胞將具有可量測之胞內螢光。
遵循製造商說明書，使用Alexa Fluor™ 488蛋白質標記套組(Thermo Fisher，A10235)用Alexa Fluor 488對人類IgG (Sigma-Aldrich，I4506)進行共價標記。在96孔微量滴定盤中，將HepG2細胞以5,000個細胞/孔塗鋪於補充有10% FBS之DMEM中，且在37℃/5% CO 2下培育大約18小時。對於使用人類IgG之研究，將100 nM經AF488標記之人類IgG抗體及基於IgG之降解劑之連續稀釋液(0.1% DMSO最終濃度)添加至細胞中，且將混合物在37℃下培育6小時。對於使用DNP之研究，將100 nM經AF488標記之DNP抗體及基於DNP之降解劑之連續稀釋液(0.1% DMSO最終濃度)添加至細胞中，且將混合物在37℃下培育6小時。將HepG2細胞在-20℃下在100%甲醇中固定20分鐘，用PBS洗滌3×，接著用DAPI (Thermo，Cat#H3570)染色。使用Operetta CLS高含量分析系統(PerkinElmer)針對DAPI及Alexa Fluor 488對HepG2細胞進行成像。資料以對於hIgG或DNP呈陽性之細胞數目(AF-488螢光)相對於總細胞數目(藉由DAPI來量測)之比率呈現。圖2展示在 化合物 28濃度遞增的情況下DNP-抗體之細胞攝取。EC 50經量測為就抗體陽性細胞之峰值比率而言， 化合物 28之半最大濃度(0.0038 μM)。所測試化合物之EC 50結果概述於下表6中。此程序用於產生圖12 ( 化合物 4)及圖14 ( 化合物 4與非活性化合物)中之資料。當用ASGPR基因敲除細胞重複該分析時，IgG攝取顯著減少(參見圖16)。 表 6. 所選 化合物之三元複合物形成及攝取
化合物編號 三元複合物 EC 50(nM) 攝取分析 EC 50(nM)
化合物1 ++++ ++++
化合物2 ++++ +++
化合物3 ++++ ++
化合物4 ++++ ++++
化合物5 ++++ ++++
化合物6 ++++ ++++
化合物7 ++++ +++
化合物8 ++++ ++++
化合物9 ++++ ++++
化合物10 ++++ ++++
化合物11 ++++ ++++
化合物12 ++++ ++++
化合物13 ++++ +++
化合物14 ++++ ++++
化合物15 +++ +++
化合物16 ++++ ++++
化合物17 ++++ ++++
化合物21 ++++ ++++
化合物22 ＞ 87 ++++
化合物26 ++++ ++++
化合物27 ++++ ++++
化合物28 ++++ ++++
化合物29 ++++ ++++
化合物30 ++++ ++++
化合物31 ++++ ++++
化合物32 ++++ ++++
化合物34 ＞ 10000 ＞ 10000
化合物35 ++++ ＞ 10000
化合物38 ++++ ++++
化合物40 ++++ ++++
化合物41 ++++ ++++
化合物42 ++++ ++++
化合物43 ++++ ++++
化合物45 ++++ ++++
化合物46 ++++ ++++
化合物47 ++++ ++++
化合物50 ++++ ++++
化合物51 ++++ ++++
化合物52 ++++ ++++
化合物53 ++++ ++++
化合物60 ++++   
A12 ＞ 10000   
在上表中，EC 50值＞= 1000 nM = +，＜1000 nM = ++，＜500 nM = +++，且＜100 nM = ++++
實例 4 細胞共定位研究為了確認DNP-IgG在由HepG2細胞攝取之後被轉運至溶酶體，將細胞用溶酶體標記物LAMP2進行染色，且藉由免疫螢光顯微法觀測經AF488標記之DNP-IgG之亞細胞位置。
將HepG2細胞塗鋪於補充有10% FBS之DMEM中，在37℃/5% CO 2下培育大約18小時。將AF488標記之DNP抗體(100 nM)與DMSO或100 nM 化合物 28添加至細胞中，且在37℃下再培育8小時。將細胞在-20℃下用100%甲醇固定20分鐘，接著與阻斷緩衝液(含有5%正常山羊血清及0.1% Triton X-100之1XPBS)在室溫下一起培育1小時。細胞在4℃下用抗LAMP2 (Abcam)染色約18小時，接著在室溫下用山羊抗小鼠IgG-AF647處理2小時。細胞核用DAPI染色。在Leica螢光顯微鏡上以40×放大率拍攝圖像。
在用DNP-IgG及100 nM化合物28處理之HepG2細胞中，DNP-IgG被攝取至細胞中且與溶酶體標記物LAMP2一起存在(圖4，化合物28，下圖)。相比之下，在不存在 化合物 28(DMSO)的情況下向HepG2細胞添加DNP-IgG並未顯示細胞攝取，因為在HepG2細胞中未偵測到AF488螢光(圖4，DMSO，上圖)。
實例 5 細胞降解分析 ：為了觀測細胞中IgG之降解，將螢光標記之DNP抗體及化合物之混合物添加至HepG2細胞中，且經16小時發生細胞攝取。隨後洗滌細胞以移除胞外抗體及化合物，且在攝取之後的各個時間點獲取樣品以偵測隨時間推移抗體重鏈及輕鏈之完整及/或蛋白水解片段的含量作為抗體降解之動力學量測結果。
將HepG2細胞以20,000個細胞/孔之最終量接種於12孔盤中補充有10% FBS之DMEM中。在培育約18小時之後，將1 µM抗DNP-AF488抗體及/或0.2 µM 化合物 28添加至細胞中且培育16小時。次日，將細胞用細胞培養基洗滌一次，且更換為不含抗DNP-AF488抗體或 化合物 28之細胞培養基，並且分別培育0、1、2、4及8小時。洗滌細胞，且將其溶解於含有蛋白酶抑制劑之RIPA緩衝液中。藉由SDS-PAGE分離細胞溶解物，且藉由iBright 1500凝膠讀取器(ThermoFisher)觀測螢光抗DNP-AF488抗體降解產物。所得資料展示於圖3中。在攝取至HepG2細胞中16小時之後觀測到DNP-IgG之胞內重鏈及輕鏈。分別在1小時及8小時之後觀測到完整重鏈及輕鏈之損失，其指示胞內DNP-IgG被HepG2細胞降解。
實例 6 額外 IgG 細胞降解分析將HepG2細胞以1 × 10 6個細胞/孔之最終量接種於6孔盤中補充有10% FBS之DMEM中。在培育約18小時之後，向細胞中添加1 mg/mL人類IgG及/或1 µM 化合物 21且培育0、1、4、8、16、24及48小時。用PBS洗滌細胞兩次，且將其溶解於含有蛋白酶抑制劑之RIPA緩衝液中。藉由SDS-PAGE分離細胞溶解物，且IgG降解產物使用抗人類IgG抗體藉由西方墨點觀測並且用LiCOR成像儀觀測。亦經由SDS-PAGE分離人類IgG (5及25 ng)作為全長IgG之陽性對照。此分析用於產生圖17中之資料。
實例 7 藉由免疫墨點偵測全長 IgG 及 IgG 降解產物將HepG2細胞以1 × 10 6個細胞/孔之最終量接種於6孔盤中補充有10% FBS之DMEM中。在培育約18小時之後，將1 mg/mL人類IgG及/或1 µM 化合物 21添加至細胞中且培育1小時。將細胞用細胞培養基洗滌一次且更換為新鮮細胞培養基，並且培育0、0.5、1、2或4小時。將細胞溶解於含有蛋白酶抑制劑之RIPA緩衝液中。藉由SDS-PAGE分離細胞溶解物，且IgG降解產物使用抗人類IgG抗體藉由西方墨點觀測並且用LiCOR成像儀觀測。亦經由SDS-PAGE分離人類IgG (5及25 ng)作為全長IgG之陽性對照。此分析用於產生圖18中之資料。
實例 8 大鼠肝細胞中之 IgG 降解將大鼠肝細胞以1 × 10 6個細胞/孔接種於經膠原蛋白塗佈之6孔盤中之OptiPlate培養基中。4小時後，將培養基更換為OptiCulture培養基。在培育約18小時之後，將100 nM人類IgG及/或20 nM 化合物 4添加至細胞中且培育1小時。將細胞用OptiCulture培養基洗滌一次且更換為新鮮培養基，並且培育0、1、2或4小時。用PBS洗滌細胞3次，且將其溶解於含有蛋白酶抑制劑之RIPA緩衝液中。巴弗洛黴素A (Bafilomycin A)處理之樣品：將肝細胞用150 nM巴弗洛黴素A預處理1小時，接著與20 nM 化合物 4+ 100 nM人類IgG及150 nM BafA一起培育1小時，洗滌細胞，培育4小時，接著將其溶解。藉由SDS-PAGE分離細胞溶解物，且IgG降解產物使用抗人類IgG抗體或肌動蛋白抗體或針對LC3之抗體藉由西方墨點觀測並且用LiCOR成像儀觀測。此分析用於產生圖19中之資料。
實例 9 額外細胞共定位研究為了確認IgG在由HepG2細胞攝取之後被轉運至溶酶體，將細胞用溶酶體標記物LAMP2進行染色，且藉由免疫螢光顯微法觀測經AF488標記之DNP-IgG之亞細胞位置。
將HepG2細胞以10,000個細胞/孔接種於經膠原蛋白塗佈之96孔黑色盤中。將細胞用30 nM BafA預處理1小時或不處理。將HepG2細胞與100 nM IgG、20 nM 化合物 4/DMSO一起培育1小時。用PBS洗滌細胞，接著將洗滌後T=0、1hr、2hr、4hr之樣品在室溫下用4% PFA固定15分鐘，接著針對IgG、DAPI、Lamp2 (內吞溶酶體標記物)進行染色。此分析用於產生圖20中之資料。
實例 10 TNF 細胞分析 TNF FP 分析將TNF (20 nM)及 化合物 36在47 mM HEPES pH 6.5、47 mM NaCl、0.9 mM EDTA、0.007% Triton X-100中在25℃下培育2小時。使用Envision讀取螢光資料且相對於 化合物 36濃度繪製，並且擬合於單一位點結合模型。此分析用於計算表7中之FP資料。
TNF 三元複合物分析將His標記之TNF (300 nM)、生物素化之ASGPR (25 nM)及測試化合物在50 mM Tris pH 7.5、150 mM NaCl、0.01% Tween-20中在25℃下培育4小時。接著添加鏈黴抗生物素蛋白-Tb穴狀化合物(PerkinElmer 610SATLA)及抗His-d2 (Perkin Elmer 61HISDLA)，且培育2小時或過夜。用Envision讀取螢光資料且相對於測試化合物濃度繪製655 nm/615 nm信號之比率。 表 7 - 化合物 36 生物化學及細胞屬性
生物化學/ 細胞屬性 化合物36
ASGPR K D(nM) ＜ 1
ASGPR k d(s -1) ＜ 10 × 10 -3
TNFα FP IC 50KD (nM) ＜ 500
實例 11 HepG2 細胞中 化合物 36 引起之 TNF 降解將 化合物 36及人類TNF在磷酸鹽緩衝鹽水(pH 7.4) (ThermoFisher 10010023)中預培育18小時以允許形成二元複合物。將 化合物 36/TNF複合物或單獨的TNF在HepG2細胞上培育2小時，該等HepG2細胞在達爾伯克氏改良伊格爾培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)中生長16至24小時至接近匯合。用達爾伯克氏改良伊格爾培養基、10%胎牛血清洗滌細胞。接著將細胞與不含試劑之細胞培養基一起培育0至3小時。使用含有RIPA (Sigma R0278)及蛋白酶抑制劑(ThermoScientific 1861279)之磷酸鹽緩衝鹽水洗滌細胞且使其溶解以進行西方墨點分析。樣品在4-20%梯度之SDS-PAGE凝膠(Biorad 5678094)上運行且轉移至PVDF，並且用LI-COR阻斷溶液阻斷1小時。分別用抗IgG及抗肌動蛋白抗體以及800cw結合之二級抗體來偵測TNF及肌動蛋白，且用LI-COR讀取。將 化合物 36及人類TNF預培育18小時以允許形成二元複合物。將 化合物 36/TNF複合物或單獨的TNF在HepG2細胞上培育2小時。將細胞洗滌，與不含試劑之細胞培養基一起培育0至24小時，且隨後洗滌且溶解以進行西方墨點分析。分別用抗IgG及抗肌動蛋白抗體以及800cw結合之二級抗體來偵測TNF及肌動蛋白。此分析用於產生圖24中之資料。
實例 12 HepG2 細胞中 化合物 36 引起之 ASGPR 介導之 TNF 攝取將 化合物 36及人類TNF在磷酸鹽緩衝鹽水(pH 7.4) (ThermoFisher 10010023)中預培育18小時以允許形成二元複合物。將 化合物 36/TNF複合物或單獨的TNF在HepG2細胞上培育0至3小時，該等HepG2細胞在達爾伯克氏改良伊格爾培養基中生長16至24小時至接近匯合。使用含有RIPA (Sigma R0278)及蛋白酶抑制劑(ThermoScientific 1861279)之磷酸鹽緩衝鹽水洗滌細胞且使其溶解以進行西方墨點分析。樣品在4-20%梯度之SDS-PAGE凝膠(Biorad 5678094)上運行且轉移至PVDF，並且用LI-COR阻斷溶液阻斷1小時。分別用抗IgG及抗肌動蛋白抗體以及800cw結合之二級抗體來偵測TNF及肌動蛋白，且用LI-COR讀取。分別用抗IgG及抗肌動蛋白抗體以及800cw結合之二級抗體來偵測TNF及肌動蛋白。
將0.5 µM 化合物 36及0.5 µM人類TNF預培育18小時以允許形成穩定複合物。將 化合物 36/TNF複合物或單獨的TNF在HepG2細胞上培育0至3小時。將細胞洗滌且溶解以進行西方墨點分析。分別用抗IgG及抗肌動蛋白抗體以及800cw結合之二級抗體來偵測TNF及肌動蛋白。此分析用於產生圖25中之資料。
本說明書中所引用之所有公開案及專利申請案以引用的方式併入本文中，就如同各個別公開案或專利申請案特定地且個別地指示以引用的方式併入一般。
儘管已出於清楚理解之目的藉由說明及實例相當詳細地描述前述發明，但根據本發明之教示，一般熟習此項技術者將顯而易知，可在不背離本發明之精神或範疇的情況下對其進行某些改變或修改。另外，熟習此項技術者將認識到或最多能夠使用常規實驗便能夠確定本文所描述之特定實施例及方法的許多等效物。該等等效物意欲由本申請案之範疇涵蓋。
胞外蛋白質目標配體(「EPTL」)經由錨鍵(其為EPTL與連接子B、連接子C或連接子D之間的化學鍵)共價結合至結合ASGPR之胞外蛋白質降解劑化合物中之連接子。此鍵可位於配體上不會不可接受地破壞EPTL與目標胞外蛋白質之結合能力的任何位置處。錨鍵在圖式中之胞外蛋白質目標配體之非限制性實例中經描繪為：
Figure 02_image043
圖1A提供靶向免疫球蛋白A (IgA)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1B提供靶向免疫球蛋白G (IgG)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1C至圖1G提供靶向免疫球蛋白E (IgE)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1H至圖1M提供靶向腫瘤壞死因子α (TNF-α)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1N提供靶向介白素-1 (IL-1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1O至圖1S提供靶向介白素-2 (IL-2)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1T至圖1W提供靶向介白素-6 (IL-6)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1X至圖1AA提供靶向干擾素γ (IFN-γ)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1BB至圖1KK提供靶向血管內皮生長因子(VEGF)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1LL提供靶向轉化生長因子β (TGF-β1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1MM至圖1PP提供靶向前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶克新9 (proprotein convertase subtilisin kexin 9；PCSK-9)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1QQ至圖1SS提供靶向羧肽酶B2 (CPB2)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1TT至圖1UU提供靶向膽鹼酯酶(ChE)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1VV至圖1WW提供靶向C-C模體趨化因子配體2 (CCL2)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1XX至圖1BBB提供靶向凝血因子VII (因子VII)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1CCC至圖1FFF提供靶向凝血因子IX (因子IX)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1GGG提供靶向CD40配體(CD40L)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1HHH至圖1JJJ提供靶向凝血因子Xa (因子Xa)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1KKK至圖1MMM提供靶向凝血因子XI (因子XI)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1NNN及圖1OOO提供靶向凝血因子XII (因子XII)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1PPP及圖1QQQ提供靶向凝血因子XIII (因子XIII)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1RRR至圖1UUU提供靶向纖維母細胞生長因子1 (FGF1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1VVV至圖1XXX提供靶向纖維母細胞生長因子2 (FGF2)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1YYY及圖1ZZZ提供靶向纖維接合素(FN1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1AAAA及圖1BBBB提供靶向介白素-5 (IL-5)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1CCCC提供靶向介白素-8 (IL-8)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1DDDD及圖1EEEE提供靶向介白素-10 (IL-10)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1FFFF及圖1GGGG提供靶向介白素-21 (IL-21)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1HHHH及圖1IIII提供靶向介白素-22 (IL-22)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1JJJJ至圖1NNNN提供靶向激肽釋放素1之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1OOOO提供靶向脂蛋白脂肪酶(LPL)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1PPPP及圖1QQQQ提供靶向基質金屬蛋白酶-1 (MMP1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1RRRR至圖1DDDDD提供靶向巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)，亦稱為糖基化抑制因子(GIF)、L-多巴色素異構酶(L-dopachrome isomerase)或苯丙酮酸互變異構酶之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1EEEEE至圖1GGGGG提供靶向嗜中性球彈性蛋白酶(NE)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1HHHHH及圖1IIIII提供靶向凝血酶原之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1JJJJJ至圖1NNNNN提供靶向血漿激肽釋放素(KLKB1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1OOOOO至圖1SSSSS提供靶向纖維蛋白溶酶原(PLG)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1TTTTT至圖1XXXXX提供靶向纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物-1 (PAI-1)、內皮纖維蛋白溶酶原活化因子抑制物或絲胺酸蛋白酶抑制蛋白E1之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1YYYYY至圖1AAAAAA提供靶向例如1B型或1B組磷脂酶A2 (PLA2、PA21B、PLA2G1B、PLA2-IB)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1BBBBBB至圖1DDDDDD提供靶向例如IIA型或IIA組磷脂酶A2 (PLA2、PLA2A、PA2IIA、PLA2G2A、PLA2-IIA)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1EEEEEE至圖1NNNNNN提供靶向胎盤生長因子(PGF)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1OOOOOO至圖1QQQQQQ提供靶向組織型纖維蛋白溶酶原活化因子(tPA、PLAT)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1RRRRRR提供靶向轉化生長因子β2 (TGF-β2、TGFB2)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1SSSSSS提供靶向凝血酶致敏蛋白1 (TSP1、TSP-1、THBS1)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖1TTTTTT至圖1XXXXXX提供靶向尿激酶或尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化因子(UPA、uPA)之胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖2提供靶向補體因子B之例示性胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖3A及圖3B提供靶向補體因子D之例示性胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖4提供靶向補體因子H之例示性胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖5提供靶向補體組分5之例示性胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖6提供靶向TNF-α之例示性胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖7提供靶向因子XI之例示性胞外蛋白質靶向配體之非限制性清單。 圖8為在各種濃度下 化合物 28之細胞攝取的曲線圖。y軸為平均螢光強度(MFI)，且x軸為以微莫耳為單位量測的 化合物 28之濃度。實驗程序描述於實例3中。 圖9為在 化合物 28之各種濃度下 化合物 28、IgG及ASGPR之三元複合物形成的曲線圖。y軸為三元複合物之比率，且x軸為以微莫耳為單位量測的 化合物 28之濃度。實驗程序描述於實例4中。 圖10為證明 化合物 28對IgG-AF488之降解的西方墨點。實驗程序描述於實例5中。 圖11為展示在 化合物 28存在下DNP-IgG之攝取的共定位影像。實驗程序描述於實例4中。 圖12為在 化合物 4之各種濃度下 化合物 4、IgG及ASGPR之三元複合物形成以及IgG之細胞攝取的曲線圖。y軸為藉由總平均螢光強度(MFI)展示的三元複合物形成之濃度(針對三元複合物形成)或為IgG+與總細胞之比率(針對攝取)，且x軸為以微莫耳為單位量測的 化合物 4之濃度。實驗程序描述於實例3中。 圖13為在 化合物 4或 非活性化合物之各種濃度下 化合物 4或 非活性化合物、IgG及ASGPR之三元複合物形成的曲線圖。y軸為藉由總平均螢光強度(MFI)展示的三元複合物形成之濃度，且x軸為以微莫耳為單位量測的 化合物 4或 非活性化合物之濃度。實驗程序描述於實例3中。 圖14為在 化合物 4或 非活性化合物之各種濃度下IgG之細胞攝取的曲線圖。y軸為IgG+與總細胞之比率，且x軸為以微莫耳為單位量測的 化合物 4或 非活性化合物之濃度。實驗程序描述於實例3中。 圖15為在野生型細胞及ASGPR基因敲除細胞的情況下，在存在或不存在 化合物 4下由 化合物 4、IgG及ASGPR之三元複合物形成所產生的表面IgG濃度之條形圖。y軸為藉由總平均螢光強度(MFI)展示的表面IgG之濃度，且x軸為 化合物 4之存在或不存在。實驗程序描述於實例3中。 圖16為在野生型細胞或ASGPR基因敲除細胞中在 化合物 4存在下隨時間推移之IgG細胞攝取之條形圖。y軸為藉由總平均螢光強度(MFI)展示的IgG之濃度，且x軸為以分鐘及小時為單位量測之時間。實驗程序描述於實例3中。 圖17為展示隨時間推移在 化合物 21存在下IgG降解產物之濃度的西方墨點。實驗程序描述於實例6中。 圖18為展示隨時間推移在 化合物 21存在下全長IgG之濃度的西方墨點。實驗程序描述於實例7中。 圖19為獲自大鼠肝細胞之溶解產物的西方墨點，其展示隨時間推移在 化合物 21存在下IgG之濃度。實驗程序描述於實例8中。 圖20為展示在 化合物 4存在下DNP-IgG之攝取的共定位影像。實驗程序描述於實例9中。 圖21為展示藉由SPR量測的 化合物 4之ASGPR結合的曲線圖，如實例1中所描述。y軸為以單位(unit)為單位量測的反應，且x軸為以秒為單位量測的時間。 圖22為展示藉由SPR量測的 化合物 4之IgG結合的曲線圖，如實例2中所描述。y軸為以單位(unit)為單位量測的反應，且x軸為以秒為單位量測的時間。 圖23為展示藉由SPR量測的 化合物 36之TNFa結合的曲線圖，如實例2中所描述。y軸為以單位(unit)為單位量測的反應，且x軸為以秒為單位量測的時間。 圖24為展示隨時間推移0.5 μM 化合物 36對TNF之降解的西方墨點。實驗程序描述於實例11中。 圖25為展示在 化合物 36存在下ASGPR介導之TNF攝取的西方墨點。實驗程序描述於實例12中。 圖26提供本發明之調配物之非限制性實例。 
序列表資訊：
          	DTD版本：V1_3
          	文件名稱：19121-007WO1_SequenceListing_XML.xml
          	軟體名稱：WIPO Sequence
          	軟體版本：1.1.0
          	製作日期：2022-04-29
          一般資訊：
          	當前申請/智慧財產局：US
          	當前申請/申請人文件參考：19121-007WO1
          	最早優先權申請/智慧財產局：US
          	最早優先權申請/申請編號：63/183,450
          	最早優先權申請/提交日期：2021-05-03
          	申請人名稱：美商亞維拉治療公司(Avilar Therapeutics, Inc.)
          	申請人名稱/語言：en
          	發明人姓名：馬克　喬治　蘇尼爾(Mark George Saulnier)
          	發明人姓名/語言：en
          	發明名稱：用於降解免疫球蛋白及其他蛋白質之有效ASGPR結合化合物
          	序列總數量：360
          序列：
          	序列編號(ID)：1
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..6
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]>
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	MLKKIE                                                                  6
          	序列編號(ID)：2
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HMVCLAYRGR  PVCFAL                                                      16
          	序列編號(ID)：3
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HMVCLSYRGR  PVCFSL                                                      16
          	序列編號(ID)：4
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGR  PVCFST                                                      16
          	序列編號(ID)：5
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QMRCLSYKGR  RVCLWL                                                      16
          	序列編號(ID)：6
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	KRLCLQYKGS  KVCFRL                                                      16
          	序列編號(ID)：7
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RMRCLTYRGR  RVCLEL                                                      16
          	序列編號(ID)：8
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SMRCLQYRGS  RVCLTL                                                      16
          	序列編號(ID)：9
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HLRCLRYKGT  RVCFSL                                                      16
          	序列編號(ID)：10
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HVRCLSYKGR  EVCVQL                                                      16
          	序列編號(ID)：11
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PRMCLFIYKG  RRVCIP                                                      16
          	序列編號(ID)：12
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HMRCLHYKGR  RVCFLL                                                      16
          	序列編號(ID)：13
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HKRCLHYRGR  MVCFLI                                                      16
          	序列編號(ID)：14
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QKRCLKYKGS  RVCFFL                                                      16
          	序列編號(ID)：15
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HVRCLRYRGK  NVCFLL                                                      16
          	序列編號(ID)：16
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	殘基：
          	SDVCLRYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：17
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> ]]&gt;<![CDATA[MOL_TYPE，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RDVCLRYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：18
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HDVCLRYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：19
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SMVCLRYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：20
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SAVCLRYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：21
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SDVCLNYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：22
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SDVCLHYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：23
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SDVCLAYRGR  PVCFQV                                                      16
          	序列編號(ID)：24
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SDVCLRYRGR  PVCFAV                                                      16
          	序列編號(ID)：25
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SDVCLRYRGR  PVCFQL                                                      16
          	序列編號(ID)：26
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SDVCLRYRGR  PVCFQA                                                      16
          	序列編號(ID)：27
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HMVCLSYRGR  PVCF                                                        14
          	序列編號(ID)：28
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HMVCLSYRGR  PVCFS                                                       15
          	序列編號(ID)：29
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGQ  PVCFSL                                                      16
          	序列編號(ID)：30
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGR  PTCFSL                                                      16
          	序列編號(ID)：31
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGR  PVCYSL                                                      16
          	序列編號(ID)：32
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGQ  PVCFST                                                      16
          	序列編號(ID)：33
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGR  PTCFST                                                      16
          	序列編號(ID)：34
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HQVCLSYRGQ  PTCFST                                                      16
          	序列編號(ID)：35
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，3..7
          			> 註釋，Tyr-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，7..12
          			> 註釋，Lys-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，11..16
          			> 註釋，Lys-Tyr]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RTYRTYKRTY  KKGRTY                                                      16
          	序列編號(ID)：36
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，1..16
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，3..7
          			> 註釋，Tyr-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，11..16
          			> 註釋，Lys-Tyr]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，7..12
          			> 註釋，Lys-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RTYRTYKRTY  KKGRTY                                                      16
          	序列編號(ID)：37
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，1..16
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，3..7
          			> 註釋，Tyr-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，11..16
          			> 註釋，Lys-Tyr]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，7..12
          			> 註釋，Lys-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，苯乙酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，苯乙酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，8
          			> 註釋，苯乙酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，14
          			> 註釋，苯乙酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RTYRTYKRTY  KKGRTY                                                      16
          	序列編號(ID)：38
          	長度：10
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..10
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	TWKTSRISIF                                                              10
          	序列編號(ID)：39
          	長度：10
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..10
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FGRLVSSIRY                                                              10
          	序列編號(ID)：40
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCAWHLGELV  WCT                                                         13
          	序列編號(ID)：41
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DSAWHLGELW  ST                                                          12
          	序列編號(ID)：42
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCHKRSFWAD  NCT                                                         13
          	序列編號(ID)：43
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCRTQFRPNQ  TCT                                                         13
          	序列編號(ID)：44
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCQLCDFWRT  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：45
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCFEDFNEQR  TCT                                                         13
          	序列編號(ID)：46
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCLAKFLKGK  DCT                                                         13
          	序列編號(ID)：47
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCWHRRTHKT  FCT                                                         13
          	序列編號(ID)：48
          	長度：11
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..11
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCRTIQTRSC  T                                                           11
          	序列編號(ID)：49
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCIKLAQLHS  VCT                                                         13
          	序列編號(ID)：50
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCWRHRNATE  WCT                                                         13
          	序列編號(ID)：51
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_]]&gt;<![CDATA[TYPE，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCQNWIKDVH  KCT                                                         13
          	序列編號(ID)：52
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCAWHLGELV  WCT                                                         13
          	序列編號(ID)：53
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCAFHLGELV  WCT                                                         13
          	序列編號(ID)：54
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCAYHLGELV  WCT                                                         13
          	序列編號(ID)：55
          	長度：11
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..11
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..11
          			> 註釋，Pro-Pro]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，11
          			> 註釋，D-苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAWHLGELVW  P                                                           11
          	序列編號(ID)：56
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..15
          			> 註釋，Pro-Pro]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，3..13
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，15
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PDCAWHLGEL  VWCTP                                                       15
          	序列編號(ID)：57
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，3..13
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..15
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CDCAWHLGEL  VWCTC                                                       15
          	序列編號(ID)：58
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	EPIHRSTLTA  LL                                                          12
          	序列編號(ID)：59
          	長度：4
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..4
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	APAR                                                                    4
          	序列編號(ID)：60
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..6
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 重複序列，1..4
          			> 註釋，重複兩次]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，4..5
          			> 註釋，His-Ly]]&gt;<![CDATA[s
          		- 交聯，1
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CFHHKG                                                                  6
          	序列編號(ID)：61
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..6
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HWRGWV                                                                  6
          	序列編號(ID)：62
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..6
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HYFKFD                                                                  6
          	序列編號(ID)：63
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	殘基：
          	HFRRHL                                                                  6
          	序列編號(ID)：64
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..6
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 3
          			> 註釋，瓜胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HWXGWV                                                                  6
          	序列編號(ID)：65
          	長度：6
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..6
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 3
          			> 註釋，瓜胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，2
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，5
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HWXGWV                                                                  6
          	序列編號(ID)：66
          	長度：4
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..4
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 重複序列，1
          			> 註釋，重複兩次]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..2
          			> 註釋，Asp-Ala]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DAAG                                                                    4
          	序列編號(ID)：67
          	長度：4
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..4
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DAAG                                                                    4
          	序列編號(ID)：68
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 1
          			> 註釋，(Nα-Ac)-S(A)]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 8
          			> 註釋，Lact-E]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..8
          			> 註釋，Nα-Ac-Lact-E]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	XRWHYFKX                                                                8
          	序列編號(ID)：69
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..8
          			> 註釋，Nα-Ac-Lact-E]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 1
          			> 註釋，(Nα-Ac)-Dap(A)]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 8
          			> 註釋，Lact-E]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	XRWHYFKX                                                                8
          	序列編號(ID)：70
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，1..7
          			> 註釋，連接子M-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- NON_STD, 1
          			> 註釋，連接子M]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	XWFRHYK                                                                 7
          	序列編號(ID)：71
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NKFRGKYK                                                                8
          	序列編號(ID)：72
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NARKFYKG                                                                8
          	序列編號(ID)：73
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FYWHCLDE                                                                8
          	序列編號(ID)：74
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FYCHWALE                                                                8
          	序列編號(ID)：75
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MO]]&gt;<![CDATA[L_TYPE，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FYCHTIDE                                                                8
          	序列編號(ID)：76
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FYWHCLDEFY  CHTIDE                                                      16
          	序列編號(ID)：77
          	長度：4
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..4
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RRGW                                                                    4
          	序列編號(ID)：78
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	KHRFNKD                                                                 7
          	序列編號(ID)：79
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CPSTHWK                                                                 7
          	序列編號(ID)：80
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NVQYFAV                                                                 7
          	序列編號(ID)：81
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ASHTQKS                                                                 7
          	序列編號(ID)：82
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QPQMSHM                                                                 7
          	序列編號(ID)：83
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	TNIESLK                                                                 7
          	序列編號(ID)：84
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NCHKCWN                                                                 7
          	序列編號(ID)：85
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHLSKNF                                                                 7
          	序列編號(ID)：86
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FDLLEHFY                                                                8
          	序列編號(ID)：87
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DLLHHFDYF                                                               9
          	序列編號(ID)：88
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	GIFVIQSESL  KKC                                                         13
          	序列編號(ID)：89
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合]]&gt;<![CDATA[成構築體
          	殘基：
          	SVLTLENCK                                                               9
          	序列編號(ID)：90
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTLENC                                                                8
          	序列編號(ID)：91
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTLDNCK                                                               9
          	序列編號(ID)：92
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTEENC                                                                8
          	序列編號(ID)：93
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTEENS                                                                8
          	序列編號(ID)：94
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTDENC                                                                8
          	序列編號(ID)：95
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTDENS                                                                8
          	序列編號(ID)：96
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYP]]&gt;<![CDATA[E，蛋白質
          			> 生物體，未]]&gt;<![CDATA[識別
          	殘基：
          	PIQSESLKK                                                               9
          	序列編號(ID)：97
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIDSESLKK                                                               9
          	序列編號(ID)：98
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIDSESLKK                                                               9
          	序列編號(ID)：99
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESLKK                                                               9
          	序列編號(ID)：100
          	長度：21
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..21
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESPEGK  PEGSVLTEEN  C                                               21
          	序列編號(ID)：101
          	長度：21
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..21
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESPEGK  PEGSVLTLEN  C                                               21
          	序列編號(ID)：102
          	長度：21
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..21
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESPEGK  PEGSVLTEEN  C                                               21
          	序列編號(ID)：103
          	長度：21
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..21
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIDDESPEGK  PEGSVLTLEN  C                                               21
          	序列編號(ID)：104
          	長度：21
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..21
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIDDESPEGK  PEGSVLTEEN  C                                               21
          	序列編號(ID)：105
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESLKKC  KSVLTLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：106
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIQSESLKKC  KSVLTLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：107
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIESESLKKC  KSVLTLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：108
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIDSESLKKC  KSVLTLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：109
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESLKKC  KSVLTLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：110
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESLKKC  IQAGKLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：111
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIQSESLKKC  IQAGKLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：112
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIESESLKKC  IQAGKLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：113
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIDSESLKKC  IQAGKLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：114
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESLKKC  IQAGKLENC                                                   19
          	序列編號(ID)：115
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIQSESLKKC  KSVLTLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：116
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIESESLKKC  KSVLTLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：117
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIDSESLKKC  KSVLTLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：118
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESLKKC  KSVLTLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：119
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESLKKC  IQAGKLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：120
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIQSESLKKC  IQAGKLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：121
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIESESLKKC  IQAGKLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：122
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIDSESLKKC  IQAGKLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：123
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESLKKC  IQAGKLENK                                                   19
          	序列編號(ID)：124
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESGSVL  TLENCK                                                      16
          	序列編號(ID)：125
          	長度：17
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..17
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESGGSV  LTLENCK                                                     17
          	序列編號(ID)：126
          	長度：18
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..18
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESGGGS  VLTLENCK                                                    18
          	序列編號(ID)：127
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESGGGG  SVLTLENCK                                                   19
          	序列編號(ID)：128
          	長度：20
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..20
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESGGGG  GSVLTLENCK                                                  20
          	序列編號(ID)：129
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESGSVL  TLENCK                                                      16
          	序列編號(ID)：130
          	長度：17
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..17
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESGGSV  LTLENCK                                                     17
          	序列編號(ID)：131
          	長度：18
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..18
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESGGGS  VLTLENCK                                                    18
          	序列編號(ID)：132
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESGGGG  SVLTLENCK                                                   19
          	序列編號(ID)：133
          	長度：20
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..20
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESGGGG  GSVLTLENCK                                                  20
          	序列編號(ID)：134
          	長度：28
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..28
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	KGCFVIQSES  LKKSIQAGKS  VLTLENCK                                        28
          	序列編號(ID)：135
          	長度：21
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..21
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	LKKCIQAGKS  VLTLENCKQA  N                                               21
          	序列編號(ID)：136
          	長度：22
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..22
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WQDKGIFVIQ  SESLKKCIQA  GK                                              22
          	序列編號(ID)：137
          	長度：28
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..28
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	KGIFVIQSES  LKKCIQAGKS  VLTLENCK                                        28
          	序列編號(ID)：138
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	GIFVIQSESL  KKC                                                         13
          	序列編號(ID)：139
          	長度：10
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..10
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構]]&gt;<![CDATA[築體
          	殘基：
          	WSVLTLENCK                                                              10
          	序列編號(ID)：140
          	長度：31
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..31
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WQDKGIFVIQ  SESLKKCIQA  GKSVLTLENC  K                                   31
          	序列編號(ID)：141
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	YDWIPSSAW                                                               9
          	序列編號(ID)：142
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	AGAIWQRDW                                                               9
          	序列編號(ID)：143
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	AGAIWQKDW                                                               9
          	序列編號(ID)：144
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VIQSESLK                                                                8
          	序列編號(ID)：145
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIQSESLK                                                                8
          	序列編號(ID)：146
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PIESESLK                                                                8
          	序列編號(ID)：147
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTEENCK                                                               9
          	序列編號(ID)：148
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，5
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，8
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTXENX                                                                8
          	序列編號(ID)：149
          	殘基：
          	000
          	序列編號(ID)：150
          	殘基：
          	000
          	序列編號(ID)：151
          	長度：9
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..9
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，5
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SVLTXENCK                                                               9
          	序列編號(ID)：152
          	長度：8
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..8
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，1
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，3
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，6
          			> 註釋，任何天然存在之胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	XIXXEXLK                                                                8
          	序列編號(ID)：153
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，5
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，14
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，3..13
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，1
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，9
          			> 註釋，MeGly]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	YICVWQDWGA  HRCI                                                        14
          	序列編號(ID)：154
          	長度：26
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..26
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQDWGHH  RCTAGMANLT  SHASAI                                          26
          	序列編號(ID)：155
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：156
          	長度：11
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..11
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，1..11
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CVVQDWGHHA  C                                                           11
          	序列編號(ID)：157
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：158
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，1..11
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CVVQDWGHHR  CT                                                          12
          	序列編號(ID)：159
          	長度：11
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..11
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，1..11
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CVVQDWGHHR  C                                                           11
          	序列編號(ID)：160
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVGDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：161
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQPWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：162
          	長度：17
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..17
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，6..16
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	KYSSICVVQD  WGHHRCT                                                     17
          	序列編號(ID)：163
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQDWGHH  RCTAGHMANL  TSHASAK                                         27
          	序列編號(ID)：164
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：165
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，vIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，8
          			> 註釋，MeGly]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，13
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCI                                                         13
          	序列編號(ID)：166
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，vIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，8
          			> 註釋，MeGly]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，13
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCI                                                         13
          	序列編號(ID)：167
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：168
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，8
          			> 註釋，MeGly]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCI                                                         13
          	序列編號(ID)：169
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，8
          			> 註釋，MeGly]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，13
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCI                                                         13
          	序列編號(ID)：170
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，]]&gt;<![CDATA[Cys-Cys
          		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：171
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..13
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcXaa]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	XCVXQDWGXX  XCT                                                         13
          	序列編號(ID)：172
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：173
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVVQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：174
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVTQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：175
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVSQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：176
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVHQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：177
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVFQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：178
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，未識別]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVYQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：179
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGWH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：180
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋]]&gt;<![CDATA[，AcIle
          		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGHH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：181
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：182
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：183
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，C]]&gt;<![CDATA[ys-Cys
          		- 位點，10
          			> 註釋，D-胺]]&gt;<![CDATA[基酸
          	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：184
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，9
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：185
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，1
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：186
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，13
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：187
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，Ac-Ile]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：188
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WCVWQDWGTN  RCW                                                         13
          	序列編號(ID)：189
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，Ac-Asp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	DCVWQDWGTN  KCW                                                         13
          	序列編號(ID)：190
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_T]]&gt;<![CDATA[YPE，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QCVWQDWGQN  QCW                                                         13
          	序列編號(ID)：191
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCW                                                         13
          	序列編號(ID)：192
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WCVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：193
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WCVWQDWGAH  RCW                                                         13
          	序列編號(ID)：194
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，12
          			> 註釋，高半胱胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 交聯，2..12
          			> 註釋，Ala-Hcy]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IAVWQDWGAH  RXT                                                         13
          	序列編號(ID)：195
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，13
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCI                                                         13
          	序列編號(ID)：196
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，2..12
          			> 註釋，Ala-Hcy]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，13
          			> 註釋，MeIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，12
          			> 註釋，高半胱胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IAVWQDWGAH  RXI                                                         13
          	序列編號(ID)：197
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：198
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，m5Trp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：199
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，萘丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：200
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：201
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，m5Trp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：202
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：203
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVYQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：204
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：205
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：206
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，13
          			> 註釋，D-胺基酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：207
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，萘丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：208
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，萘丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：209
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，萘丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：210
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，離丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：211
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，離丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：212
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，5
          			> 註釋，htQ]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVDQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：213
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，Boa]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：214
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋]]&gt;<![CDATA[白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，4-苯甲醯基苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：215
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，L-3-苯并噻吩丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：216
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，L-3-苯并噻吩丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVXQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：217
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，9
          			> 註釋，Abu]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGXH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：218
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，H-Gly]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	GICVWQDWGA  HRCTAN                                                      16
          	序列編號(ID)：219
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：220
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，m5Trp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：221
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> ]]&gt;<![CDATA[註釋，MeTrp
          	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：222
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：223
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：224
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，m5Trp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：225
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，MeTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：226
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，H-Gly]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，6fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，6fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	GICVWQDWGA  HRCTN                                                       15
          	序列編號(ID)：227
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，1-甲醯基Trp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：228
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，4
          			> 註釋，1-甲氧基Trp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICVWQDWGAH  RCT                                                         13
          	序列編號(ID)：229
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，H-Gly]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，5
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，7
          			> 註釋，5fTrp]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	GICVWQDWGA  HRCTN                                                       15
          	序列編號(ID)：230
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcA]]&gt;<![CDATA[la
          	殘基：
          	AEAKAKA                                                                 7
          	序列編號(ID)：231
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：232
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：233
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：234
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：235
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IRLILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：236
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IARILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：237
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALIREPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：238
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  RERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：239
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QRRAA                                                       15
          	序列編號(ID)：240
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IELILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：241
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IAEILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：242
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QEEAA                                                       15
          	序列編號(ID)：243
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QEREA                                                       15
          	序列編號(ID)：244
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，]]&gt;<![CDATA[合成構築體
          	殘基：
          	IALILEEICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：245
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPECC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：246
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTAIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：247
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，1..12
          			> 註釋，Cys-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CEGPFGPRHD  LTFCW                                                       15
          	序列編號(ID)：248
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，1
          			> 註釋，Xb]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 二硫化物，1..12
          			> 註釋，Xb-Cys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	XEGPFGPRHD  LTFCW                                                       15
          	序列編號(ID)：249
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QYYPFSX                                                                 7
          	序列編號(ID)：250
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NPFNLAR                                                                 7
          	序列編號(ID)：251
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QLQDMTSSPF  WL                                                          12
          	序列編號(ID)：252
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NPFVIGRWHP  PH                                                          12
          	序列編號(ID)：253
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SLAKFLNPFL  YR                                                          12
          	序列編號(ID)：254
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ASTPRFEPFQ  LD                                                          12
          	序列編號(ID)：255
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SLHSQPYSPF  ML                                                          12
          	序列編號(ID)：256
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NILSSWSSPF  VF                                                          12
          	序列編號(ID)：257
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NLPSSWTNPF  YL                                                          12
          	序列編號(ID)：258
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SPFMLHP                                                                 7
          	序列編號(ID)：259
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE]]&gt;<![CDATA[，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PSPFMLT                                                                 7
          	序列編號(ID)：260
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IGPFHLH                                                                 7
          	序列編號(ID)：261
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	TNPFMLN                                                                 7
          	序列編號(ID)：262
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NTTFLYP                                                                 7
          	序列編號(ID)：263
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHYTQYL                                                                 7
          	序列編號(ID)：264
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NHHPNYW                                                                 7
          	序列編號(ID)：265
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	VHYPLSW                                                                 7
          	序列編號(ID)：266
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HHLKYSDTSP  PI                                                          12
          	序列編號(ID)：267
          	長度：13
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..13
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHMHERWDTS  PPI                                                         13
          	序列編號(ID)：268
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHMHERWDTS  YQ                                                          12
          	序列編號(ID)：269
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHIHSNAAWR  IT                                                          12
          	序列編號(ID)：270
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WHYPHWQ                                                                 7
          	序列編號(ID)：271
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHYLYTQ                                                                 7
          	序列編號(ID)：272
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	AHYSFTQ                                                                 7
          	序列編號(ID)：273
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	THYPTFY                                                                 7
          	序列編號(ID)：274
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	EHNTSFW                                                                 7
          	序列編號(ID)：275
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NHYKLTW                                                                 7
          	序列編號(ID)：276
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NHSPYFQ                                                                 7
          	序列編號(ID)：277
          	長度：7
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..7
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SHYQHYQ                                                                 7
          	序列編號(ID)：278
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：279
          	長度：10
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..10
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WLGLGGGYGW                                                              10
          	序列編號(ID)：280
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FYGPFFLNDS  LRGIW                                                       15
          	序列編號(ID)：281
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	LRFLNPFSLD  GSGFW                                                       15
          	序列編號(ID)：282
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HSPFCLGVLE  CFGLV                                                       15
          	序列編號(ID)：283
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	TCGAFYLYHD  PFICG                                                       15
          	序列編號(ID)：284
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	MQHCLASHEL  YLPWC                                                       15
          	序列編號(ID)：285
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FFVFGSGDAF  AFSDM                                                       15
          	序列編號(ID)：286
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PCVIIDTGSS  RWCYL                                                       15
          	序列編號(ID)：287
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HSPFCLGVLE  CFGLV                                                       15
          	序列編號(ID)：288
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	HAAFEPRGDV  RHTLL                                                       15
          	序列編號(ID)：289
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CRWDGSWGEV  RC                                                          12
          	序列編號(ID)：290
          	長度：12
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..12
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CYWVGTWGEA  VC                                                          12
          	序列編號(ID)：291
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RWFPCPNKEG  CCSISV                                                      16
          	序列編號(ID)：292
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	RSTYCNKNKD  SCHIPE                                                      16
          	序列編號(ID)：293
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE]]&gt;<![CDATA[，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QPPQCIKDGG  FVICRV                                                      16
          	序列編號(ID)：294
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	KGKKCKPEEH  PCNEPM                                                      16
          	序列編號(ID)：295
          	長度：16
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..16
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	NKMTCSDDGK  LCWEHL                                                      16
          	序列編號(ID)：296
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PLGRPCPTCP  LAPS                                                        14
          	序列編號(ID)：297
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QRMRPCPSCP  LAPW                                                        14
          	序列編號(ID)：298
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	WPSRPCPSCP  EVPP                                                        14
          	序列編號(ID)：299
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SCTKDCPTCP  LVPV                                                        14
          	序列編號(ID)：300
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：301
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：302
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAIAQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：303
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEAAILL                                      30
          	序列編號(ID)：304
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTAIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：305
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIAACILL                                      30
          	序列編號(ID)：306
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRAEIE  ACILL                                                       15
          	序列編號(ID)：307
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRAEIE  ACILL                                                       15
          	序列編號(ID)：308
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAIAQRAEIE  AAILL                                                       15
          	序列編號(ID)：309
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：310
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTNTSGTTE  IEACILL                                         27
          	序列編號(ID)：311
          	長度：23
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..23
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LSGTTEIEAC  ILL                                             23
          	序列編號(ID)：312
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  TEIEACILL                                                   19
          	序列編號(ID)：313
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRAEIE  ACILL                                                       15
          	序列編號(ID)：314
          	長度：29
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..29
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	AICQRATATL  GTVGSNTSGT  TEIEACILL                                       29
          	序列編號(ID)：315
          	長度：28
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..28
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICQRATATLG  TVGSNTSGTT  EIEACILL                                        28
          	序列編號(ID)：316
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CQRATATLGT  VGSNTSGTTE  IEACILL                                         27
          	序列編號(ID)：317
          	長度：29
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..29
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACIL                                       29
          	序列編號(ID)：318
          	長度：28
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..28
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACI                                        28
          	序列編號(ID)：319
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEAC                                         27
          	序列編號(ID)：320
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：321
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：322
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAIAQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：323
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEAAILL                                      30
          	序列編號(ID)：324
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTAIEACILL                                      30
          	序列編號(ID)：325
          	長度：30
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..30
          			> MOL_TYPE，]]&gt;<![CDATA[蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIAACILL                                      30
          	序列編號(ID)：326
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRAEIE  ACILL                                                       15
          	序列編號(ID)：327
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRAEIE  ACILL                                                       15
          	序列編號(ID)：328
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAIAQRAEIE  AAILL                                                       15
          	序列編號(ID)：329
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IALILEPICC  QERAA                                                       15
          	序列編號(ID)：330
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTNTSGTTE  IEACILL                                         27
          	序列編號(ID)：331
          	長度：23
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..23
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LSGTTEIEAC  ILL                                             23
          	序列編號(ID)：332
          	長度：19
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..19
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  TEIEACILL                                                   19
          	序列編號(ID)：333
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRAEIE  ACILL                                                       15
          	序列編號(ID)：334
          	長度：29
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..29
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcAla]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	AICQRATATL  GTVGSNTSGT  TEIEACILL                                       29
          	序列編號(ID)：335
          	長度：28
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..28
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcIle]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ICQRATATLG  TVGSNTSGTT  EIEACILL                                        28
          	序列編號(ID)：336
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcCys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	CQRATATLGT  VGSNTSGTTE  IEACILL                                         27
          	序列編號(ID)：337
          	長度：29
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..29
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACIL                                       29
          	序列編號(ID)：338
          	長度：28
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..28
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEACI                                        28
          	序列編號(ID)：339
          	長度：27
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..27
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，1
          			> 註釋，AcPro]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	PAICQRATAT  LGTVGSNTSG  TTEIEAC                                         27
          	序列編號(ID)：340
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTAPADLW  DWIRA                                                       15
          	序列編號(ID)：341
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	ITVTMPADLW  DWIRA                                                       15
          	序列編號(ID)：342
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTIPADLW  DWIRA                                                       15
          	序列編號(ID)：343
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTLPADLW  DWIRA                                                       15
          	序列編號(ID)：344
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTVPADLW  DWIRA                                                       15
          	序列編號(ID)：345
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTMPADLW  DWIMA                                                       15
          	序列編號(ID)：346
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTMPADLW  DWINA                                                       15
          	序列編號(ID)：347
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IVVTMPADLW  DWIQA                                                       15
          	序列編號(ID)：348
          	長度：15
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..15
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IHVTIPADLW  DWINK                                                       15
          	序列編號(ID)：349
          	長度：14
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..14
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	IHVTIPADLW  DWIN                                                        14
          	序列編號(ID)：350
          	長度：36
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..36
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，14
          			> 註釋，4-氟-L-苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，γ-羧基麩胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QSDXDCIHRL  LEAXLDPNLT  EEQRWEKIXK  INDECE                              36
          	序列編號(ID)：351
          	長度：37
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..37
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，14
          			> 註釋，4-氟-L-苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，γ-羧基麩胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，31
          			> 註釋，PEG30L]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QSDXDCIHRL  LEAXLDPNLT  EEQRWERIXK  XINDECE                             37
          	序列編號(ID)：352
          	長度：37
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..37
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，14
          			> 註釋，4-氟-L-苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，γ-羧基麩胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，31
          			> 註釋，PEG20Br]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QSDXDCIHRL  LEAXLDPNLT  EEQRWERIXK  XINDECE                             37
          	序列編號(ID)：353
          	長度：37
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..37
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，14
          			> 註釋，4-氟-L-苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，γ-羧基麩胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，31
          			> 註釋，PEG40Br]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QSDXDCIHRL  LEAXLDPNLT  EEQRWERIXK  XINDECE                             37
          	序列編號(ID)：354
          	長度：35
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..35
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，3
          			> 註釋，高白胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	FDXDCIHRLL  EAFLDPNLTE  QQRWEKIDKI  NDECE                               35
          	序列編號(ID)：355
          	長度：36
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..36
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，14
          			> 註釋，4-氟-L-苯丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，γ-羧基麩胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	QSDXDCIHRL  LEAXLDPNLT  EEQRWERIXK  INDECE                              36
          	序列編號(ID)：356
          	長度：38
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..38
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，6
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，19
          			> 註釋，N-ε-乙醯基-L-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SWQSDXDCIH  RLLEAFLDXN  LTEEQRWERI  DKINDECE                            38
          	序列編號(ID)：357
          	長度：38
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..38
          			> MOL_TYPE，蛋]]&gt;<![CDATA[白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，6
          			> 註釋，環己基-L-丙胺酸]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- MOD_RES，19
          			> 註釋，40 kDa支鏈PEG-Lys]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	SWQSDXDCIH  RLLEAFLDKN  LTEEQRWERI  DKINDECE                            38
          	序列編號(ID)：358
          	長度：29
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..29
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，3
          			> 註釋，選自A、F、H、K、Q、R、S、W及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，選自A、D、E、F、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，7
          			> 註釋，選自F、H、I、K、L、M、N、R、S、T、V、W及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，11
          			> 註釋，選自A、I、K、L、M、N、R、S、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，16
          			> 註釋，選自N及T]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，17
          			> 註釋，選自A、I、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，18
          			> 註釋，選自D、E、G、H、K、N、Q、R、S及T]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，20
          			> 註釋，選自I、L、M、R、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，21
          			> 註釋，選自A、S、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，25
          			> 註釋，選自I、M、Q、S、T、V及W]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，26
          			> 註釋，選自K及S]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，28
          			> 註釋，選自F、L、M及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，選自D及R]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	EEXXAWXEIH  XLPNLXXXQX  XAFIXXLXX                                       29
          	序列編號(ID)：359
          	長度：29
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..29
          			> M]]&gt;<![CDATA[OL_TYPE，蛋白質
          			> 生物體，合成構築體]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，3
          			> 註釋，選自A、F、H、K、Q、R、S、W及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，4
          			> 註釋，選自A、D、E、F、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，7
          			> 註釋，選自F、H、I、K、L、M、N、R、S、T、V、W及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，11
          			> 註釋，選自A、I、K、L、M、N、R、S、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，16
          			> 註釋，選自N及T]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，17
          			> 註釋，選自A、I、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，18
          			> 註釋，選自D、E、G、H、K、N、Q、R、S及T]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，20
          			> 註釋，選自I、L、M、R、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，21
          			> 註釋，選自A、S、T及V]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，25
          			> 註釋，選自I、M、Q、S、T、V及W]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，26
          			> 註釋，選自K及S]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，28
          			> 註釋，選自F、L、M及Y]]&gt;
          <br/><![CDATA[		- 位點，29
          			> 註釋，選自D及R]]&gt;
          <br/><![CDATA[	殘基：
          	EEXXAWXEIH  XLPNLXXXQX  XAFIXXLXX                                       29
          	序列編號(ID)：360
          	長度：49
          	分子類型：AA
          	特徵位置/限定詞：
          		- 來源，1..49
          			> MOL_TYPE，蛋白質]]&gt;
          <br/><![CDATA[			> 生物體，合成構]]&gt;<![CDATA[築體
          	殘基：
          	YYALSDAKEE  EPRYKALRGE  NQDLREKERK  YQDKIKKLEE  KEKNLEKKS               49
          結束
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 12_A0101_SEQ_0008
Figure 12_A0101_SEQ_0009
Figure 12_A0101_SEQ_0010
Figure 12_A0101_SEQ_0011
Figure 12_A0101_SEQ_0012
Figure 12_A0101_SEQ_0013
Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 12_A0101_SEQ_0015
Figure 12_A0101_SEQ_0016
Figure 12_A0101_SEQ_0017
Figure 12_A0101_SEQ_0018
Figure 12_A0101_SEQ_0019
Figure 12_A0101_SEQ_0020
Figure 12_A0101_SEQ_0021
Figure 12_A0101_SEQ_0022
Figure 12_A0101_SEQ_0023
Figure 12_A0101_SEQ_0024
Figure 12_A0101_SEQ_0025
Figure 12_A0101_SEQ_0026
Figure 12_A0101_SEQ_0027
Figure 12_A0101_SEQ_0028
Figure 12_A0101_SEQ_0029
Figure 12_A0101_SEQ_0030
Figure 12_A0101_SEQ_0031
Figure 12_A0101_SEQ_0032
Figure 12_A0101_SEQ_0033
Figure 12_A0101_SEQ_0034
Figure 12_A0101_SEQ_0035
Figure 12_A0101_SEQ_0036
Figure 12_A0101_SEQ_0037
Figure 12_A0101_SEQ_0038
Figure 12_A0101_SEQ_0039
Figure 12_A0101_SEQ_0040
Figure 12_A0101_SEQ_0041
Figure 12_A0101_SEQ_0042
Figure 12_A0101_SEQ_0043
Figure 12_A0101_SEQ_0044
Figure 12_A0101_SEQ_0045
Figure 12_A0101_SEQ_0046
Figure 12_A0101_SEQ_0047
Figure 12_A0101_SEQ_0048
Figure 12_A0101_SEQ_0049
Figure 12_A0101_SEQ_0050
Figure 12_A0101_SEQ_0051
Figure 12_A0101_SEQ_0052
Figure 12_A0101_SEQ_0053
Figure 12_A0101_SEQ_0054
Figure 12_A0101_SEQ_0055
Figure 12_A0101_SEQ_0056
Figure 12_A0101_SEQ_0057
Figure 12_A0101_SEQ_0058
Figure 12_A0101_SEQ_0059
Figure 12_A0101_SEQ_0060
Figure 12_A0101_SEQ_0061
Figure 12_A0101_SEQ_0062
Figure 12_A0101_SEQ_0063
Figure 12_A0101_SEQ_0064
Figure 12_A0101_SEQ_0065
Figure 12_A0101_SEQ_0066
Figure 12_A0101_SEQ_0067
Figure 12_A0101_SEQ_0068
Figure 12_A0101_SEQ_0069
Figure 12_A0101_SEQ_0070
Figure 12_A0101_SEQ_0071
Figure 12_A0101_SEQ_0072
Figure 12_A0101_SEQ_0073
Figure 12_A0101_SEQ_0074
Figure 12_A0101_SEQ_0075
Figure 12_A0101_SEQ_0076
Figure 12_A0101_SEQ_0077
Figure 12_A0101_SEQ_0078
Figure 12_A0101_SEQ_0079
Figure 12_A0101_SEQ_0080
Figure 12_A0101_SEQ_0081
Figure 12_A0101_SEQ_0082
Figure 12_A0101_SEQ_0083
Figure 12_A0101_SEQ_0084

Claims (212)

  1. 一種結合ASGPR之胞外蛋白質降解劑化合物，其具有下式：
    Figure 03_image2466
    其中 ASGPR結合配體為選自以下之化合物：
    Figure 03_image2468
    Figure 03_image2470
    或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： R 1或R 5經連至連接子 A之鍵置換； 若R 1經連至連接子 A之鍵置換，則R 5獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； 若R 5經連至連接子 A之鍵置換，則R 1獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 3在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基、雜烷基、鹵烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環、-OR 8及-NR 8R 9； R 6及R 7在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、雜烷基、烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、鹵烷基、雜芳基、雜環、-烷基-OR 8、-烷基-NR 8R 9、C(O)R 3、S(O)R 3、C(S)R 3及S(O) 2R 3； R 8及R 9在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、雜烷基、烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基及雜環； R 10為氫、烷基、雜烷基、鹵烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環、C(O)R 3、S(O)R 3、C(S)R 3或S(O) 2R 3； R 65、R 66及R 67獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； 胞外蛋白質靶向配體為結合至胞外蛋白質之配體； 連接子 A為將連接子 B、連接子 C或連接子 D共價連接至該ASGPR結合配體之鍵或部分； 連接子 B為將連接子 A共價連接至胞外蛋白質靶向配體之鍵或部分； 連接子 C為將各連接子 A連接至該胞外蛋白質靶向配體之化學基團； 連接子 D為將各連接子 A連接至該胞外蛋白質靶向配體之化學基團；且 在價數允許之情況下，視情況選用之取代基各自獨立地選自由以下組成之群：烷基、烯基、炔基、鹵烷基、-OR 6、F、Cl、Br、I、-NR 6R 7、雜烷基、雜環、雜芳基、芳基、氰基、硝基、羥基、疊氮基、醯胺、-SR 3、-S(O)(NR 6)R 3、-NR 8C(O)R 3、-C(O)NR 6R 7、-C(O)OR 3、-C(O)R 3、-SF 5、
    Figure 03_image2472
    ，且其中視情況選用之取代基經選擇以使得產生穩定化合物。
  2. 如請求項1之化合物，其中R 65、R 66及R 67獨立地選自氫、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基及鹵烷氧基。
  3. 如請求項1或2之化合物，其中R 67為CF 3。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中R 65為氫。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物，其中R 66為氫。
  6. 如請求項1之化合物，其中R 65未經視情況選用之取代基取代。
  7. 如請求項1之化合物，其中R 65經1個視情況選用之取代基取代。
  8. 如請求項1之化合物，其中R 65為氫。
  9. 如請求項1之化合物，其中R 65為-CF 3。
  10. 如請求項1之化合物，其中R 65為氰基。
  11. 如請求項1之化合物，其中R 65為F。
  12. 如請求項1之化合物，其中R 65為Cl。
  13. 如請求項1之化合物，其中R 65為Br。
  14. 如請求項1之化合物，其中R 65為鹵烷基。
  15. 如請求項1之化合物，其中R 65為雜環。
  16. 如請求項1之化合物，其中R 65為鹵烷氧基。
  17. 如請求項1之化合物，其中R 65為雜環烷基。
  18. 如請求項1之化合物，其中R 65為雜烷基。
  19. 如請求項1之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-OR 6。
  20. 如請求項1之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-SR 6。
  21. 如請求項1之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。
  22. 如請求項1之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。
  23. 如請求項1之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。
  24. 如請求項19至23中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為鍵。
  25. 如請求項19至23中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1。
  26. 如請求項19至23中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2。
  27. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66未經視情況選用之取代基取代。
  28. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66經1個視情況選用之取代基取代。
  29. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為氫。
  30. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為-CF 3。
  31. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為氰基。
  32. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為F。
  33. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為Cl。
  34. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為Br。
  35. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為鹵烷基。
  36. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為雜環。
  37. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為鹵烷氧基。
  38. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為雜環烷基。
  39. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為雜烷基。
  40. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-OR 6。
  41. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-SR 6。
  42. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。
  43. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。
  44. 如請求項6至26中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。
  45. 如請求項40至44中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為鍵。
  46. 如請求項40至44中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1。
  47. 如請求項40至44中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2。
  48. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67未經視情況選用之取代基取代。
  49. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67經1個視情況選用之取代基取代。
  50. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為氫。
  51. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為-CF 3。
  52. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為氰基。
  53. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為F。
  54. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為Cl。
  55. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為Br。
  56. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為鹵烷基。
  57. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為雜環。
  58. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為鹵烷氧基。
  59. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為雜環烷基。
  60. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為雜烷基。
  61. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-OR 6。
  62. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-SR 6。
  63. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。
  64. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。
  65. 如請求項6至47中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。
  66. 如請求項61至65中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為鍵。
  67. 如請求項61至65中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1。
  68. 如請求項61至65中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2。
  69. 如請求項1至68中任一項之化合物，其中R 10為氫、烷基、雜烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環、C(O)R 3、S(O)R 3或S(O) 2R 3。
  70. 如請求項1至68中任一項之化合物，其中R 10為氫。
  71. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2474
    。
  72. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2476
    。
  73. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2478
    。
  74. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2480
    。
  75. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2482
    。
  76. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2484
    。
  77. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2486
    。
  78. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2488
    。
  79. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2490
    。
  80. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2492
    。
  81. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2494
    。
  82. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2496
    。
  83. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2498
    。
  84. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2500
    。
  85. 如請求項1至70中任一項之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2502
    。
  86. 如請求項1之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2504
    。
  87. 如請求項1之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2506
    。
  88. 如請求項1之化合物，其中該ASGPR結合配體為
    Figure 03_image2508
    。
  89. 如請求項1至88中任一項之化合物，其中R 1不結合至連接子 A，且係選自氫、雜烷基、烷基、烯基、炔基、芳基烷基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6及C 0-C 6烷基-NR 6R 7，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代。
  90. 如請求項1至88中任一項之化合物，其中R 5不結合至連接子 A，且係選自氫、雜烷基、烷基、烯基、炔基、芳基烷基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6及C 0-C 6烷基-NR 6R 7，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代。
  91. 如請求項1至90中任一項之化合物，其中連接子 A及連接子 B在各情況下獨立地為：
    Figure 03_image2510
    ； 其中： R 11、R 12、R 13、R 14、R 15、R 16、R 17、R 18、R 19及R 20在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鍵、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO 2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR 6-、-NR 6C(O)-、-O-、-S-、-NR 6-、-C(R 21R 21)-、-P(O)(R 3)O-、-P(O)(R 3)-、天然或非天然胺基酸之二價殘基、烯基、炔基、鹵烷基、烷氧基、芳基、雜環、雜芳基、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-O-、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-NR 6-、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-、-[-(CH 2) 2-O-] n-、-[O-(CH 2) 2] n-、-[O-CH(CH 3)C(O)] n-、-[C(O)-CH(CH 3)-O] n-、-[O-CH 2C(O)] n-、-[C(O)-CH 2-O] n-、脂肪酸之二價殘基及不飽和或飽和單羧酸或二羧酸之二價殘基；其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代； n在各情況下獨立地選自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10； R 21在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、羥基、烷氧基、疊氮基、胺基、氰基、-NR 6R 7、-NR 8SO 2R 3、-NR 8S(O)R 3、鹵烷基、雜烷基、芳基、雜芳基及雜環。
  92. 如請求項1至91中任一項之化合物，其中連接子 A係選自：
    Figure 03_image2512
    Figure 03_image2514
    及
    Figure 03_image2516
    ； 其中xx為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
  93. 如請求項1至91中任一項之化合物，其中連接子 A係選自：
    Figure 03_image2518
    Figure 03_image2520
    及
    Figure 03_image2522
    其中之各者視情況經1、2、3或4個如請求項1中所定義之視情況選用之取代基取代。
  94. 如請求項1至91中任一項之化合物，其中連接子 A係選自：
    Figure 03_image2524
    Figure 03_image2526
    Figure 03_image2528
    。
  95. 如請求項1至94中任一項之化合物，其中該化合物具有下式：
    Figure 03_image2530
    ； 或其醫藥學上可接受之鹽。
  96. 如請求項1至94中任一項之化合物，其中該化合物具有下式：
    Figure 03_image2532
    ； 或其醫藥學上可接受之鹽。
  97. 如請求項96之化合物，其中連接子 C為：
    Figure 03_image2534
    ； 其中： R 11、R 12、R 13、R 14、R 15、R 16、R 17、R 18、R 19及R 20在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鍵、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO 2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR 6-、-NR 6C(O)-、-O-、-S-、-NR 6-、-C(R 21R 21)-、-P(O)(R 3)O-、-P(O)(R 3)-、天然或非天然胺基酸之二價殘基、烯基、炔基、鹵烷基、烷氧基、芳基、雜環、雜芳基、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-O-、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-NR 6-、-CH 2CH 2-[O-(CH 2) 2] n-、-[-(CH 2) 2-O-] n-、-[O-(CH 2) 2] n-、-[O-CH(CH 3)C(O)] n-、-[C(O)-CH(CH 3)-O] n-、-[O-CH 2C(O)] n-、-[C(O)-CH 2-O] n-、脂肪酸之二價殘基、不飽和或飽和單羧酸或二羧酸之二價殘基；其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代； n在各情況下獨立地選自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； R 21在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、羥基、烷氧基、疊氮基、胺基、氰基、-NR 6R 7、-NR 8SO 2R 3、-NR 8S(O)R 3、鹵烷基、雜烷基、芳基、雜芳基及雜環；且 R 22在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：烷基、-C(O)N-、-NC(O)-、-N-、-C(R 21)-、-P(O)O-、-P(O)-、-P(O)(NR 6R 7)N-、烯基、鹵烷基、芳基、雜環及雜芳基，其中之各者視情況經1、2、3或4個獨立地選自R 21之取代基取代。
  98. 如請求項96之化合物，其中連接子 C係選自：
    Figure 03_image2536
    Figure 03_image2538
    。
  99. 如請求項1至94中任一項之化合物，其中該化合物具有下式：
    Figure 03_image2540
    。
  100. 如請求項99之化合物，其中連接子 D係選自：
    Figure 03_image2542
    Figure 03_image2544
    Figure 03_image2546
    。
  101. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合IgG。
  102. 如請求項101之化合物，其中該靶向IgG之胞外蛋白質靶向配體為Fc-BP-2。
  103. 如請求項101之化合物，其中該靶向IgG之胞外蛋白質靶向配體為Fc-III。
  104. 如請求項1及91至94中任一項之化合物，其中該化合物具有下式：
    Figure 03_image2548
    Figure 03_image2550
    Figure 03_image2552
    Figure 03_image2554
    Figure 03_image2556
    Figure 03_image2558
    Figure 03_image2560
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  105. 如請求項1及91至94中任一項之化合物，其中該化合物具有下式：
    Figure 03_image2562
    Figure 03_image2564
    Figure 03_image2566
    Figure 03_image2568
    Figure 03_image2570
    Figure 03_image2572
    Figure 03_image2574
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  106. 一種化合物，其係選自：
    Figure 03_image2576
    Figure 03_image2578
    Figure 03_image2580
    Figure 03_image2582
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  107. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合IgA。
  108. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合IgM。
  109. 如請求項108之化合物，其中該IgM蛋白為抗髓磷脂相關之糖蛋白抗體。
  110. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合IgG4。
  111. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合IgE。
  112. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合TNF-α。
  113. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合介白素-1。
  114. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合介白素-2。
  115. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合介白素-6。
  116. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合介白素-17。
  117. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合血管內皮生長因子(VEGF)。
  118. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合轉化生長因子β (TGF-β1)。
  119. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶克新9 (proprotein convertase subtilisin kexin 9；PCSK-9)。
  120. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合凝血因子VII (因子VII)。
  121. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合凝血因子IX (因子IX)。
  122. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合凝血因子XI (因子XI)。
  123. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合補體因子B。
  124. 如請求項1至100中任一項之化合物，其中該胞外蛋白質靶向配體結合補體因子D。
  125. 一種具有以下結構之化合物：
    Figure 03_image2584
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  126. 一種具有以下結構之化合物：
    Figure 03_image2586
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  127. 一種具有以下結構之化合物：
    Figure 03_image2588
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  128. 一種具有以下結構之化合物：
    Figure 03_image2590
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  129. 一種具有以下結構之化合物：
    Figure 03_image2592
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  130. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至129中任一項之化合物及醫藥學上可接受之載劑。
  131. 如請求項130之醫藥組合物，其中該化合物為：
    Figure 03_image2594
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  132. 如請求項130之醫藥組合物，其中該化合物為：
    Figure 03_image2596
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  133. 如請求項130之醫藥組合物，其中該化合物為：
    Figure 03_image2598
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  134. 如請求項130之醫藥組合物，其中該化合物為：
    Figure 03_image2600
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  135. 如請求項130之醫藥組合物，其中該化合物為：
    Figure 03_image2602
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  136. 一種治療由胞外蛋白質介導之病症的方法，其包含向有需要之患者投與有效量的包括結合至該胞外蛋白質之胞外蛋白質靶向配體的如請求項1至129中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。
  137. 如請求項136之方法，其中該胞外蛋白質為IgG，且該病症係選自抗磷脂Ab症候群、Behcet症候群、橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis)、MGUS、壞死性黃肉芽腫、類風濕性關節炎、癌症(例如多發性骨髓瘤或外周多發性骨髓瘤)、副蛋白血症、慢性蕁麻疹、硬皮病、硬化性黏液水腫、血小板減少症(例如肝素誘導之血小板減少症)、冷球蛋白血症、肉芽腫病伴多血管炎(例如ANCA相關血管炎)、特發性血小板減少性紫癜症、血小板減少症、IgG4-RD、陣發性夜間血紅素尿症(PNH)、溫抗體型自體免疫溶血性貧血、橫紋肌溶解、狼瘡性腎炎、急性彌漫性腦脊髓炎、格巴二氏症候群(Guillaine-Barre syndrome)、慢性發炎去髓鞘型多發性神經病變、米勒費雪症候群(Miller Fisher syndrome)、視神經脊髓炎譜系病症、斜視眼陣攣肌陣攣症候群、鏈球菌感染相關性兒童自體免疫神經精神障礙(PANDAS)、周邊神經病變、橫貫性脊髓炎、纖維化、IPF/纖維化及移植排斥反應。
  138. 如請求項136或137之方法，其中該化合物為
    Figure 03_image2604
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  139. 如請求項136或137之方法，其中該化合物為
    Figure 03_image2606
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  140. 如請求項136或137之方法，其中該化合物為
    Figure 03_image2608
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  141. 如請求項136或137之方法，其中該化合物為
    Figure 03_image2610
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  142. 如請求項136之方法，其中該胞外蛋白質為IgG4，且該病症係選自1型自體免疫胰臟炎、間質性腎炎、立得氏甲狀腺炎(Riedel's thyroiditis)、渦紋樣纖維化、米庫利茲氏病(Mikulicz's disease)、庫特納氏腫瘤(Küttner's tumor)、發炎性假瘤(在身體之各個部位中)、縱隔纖維化、腹膜後纖維化(奧蒙德氏病(Ormond's disease))、主動脈炎及主動脈周炎、近端膽道狹窄、特發性補體結合不足性腎小管與組織間隙腎炎、多病灶性纖維硬化、硬腦膜炎、胰臟腫大、腫瘤樣病變、心包炎、類風濕性關節炎(RA)、發炎性腸病、多發性硬化症、重症肌無力、僵直性脊椎炎、原發性休格倫氏症候群(primary Sjögren's syndrome)、牛皮癬性關節炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、硬化性膽管炎、IgG單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、黑色素瘤、大皰性類天疱瘡、古巴士德氏病(Goodpasture disease)、腦炎、栓塞性血小板減少性紫癜症、慢性發炎性多發性神經病變、邊緣腦炎、神經肌強直、Morvan氏症候群、落葉型天疱瘡、尋常天疱瘡、REM及非REM類睡症及膜性腎病變、多發性硬化症、甲狀腺機能亢進性葛瑞夫氏病(hyperthyroid Grave's disease)、後天性水皰性表皮鬆解症、妊娠期類天疱瘡、抗p200類天疱瘡及伴腫瘤性天疱瘡。
  143. 如請求項136之方法，其中該胞外蛋白質為IgA，且該病症係選自IgA腎病變(亦稱為柏格氏病(Berger's disease))、乳糜瀉、克隆氏病(Crohn's disease)、Henoch-Schönlein二氏紫癜症(HSP) (亦稱為IgA血管炎)、IgA天疱瘡、疱疹樣皮炎、發炎性腸病(IBD)、休格倫氏症候群、僵直性脊椎炎、酒精性肝硬化、後天免疫缺乏症候群、IgA多發性骨髓瘤、α鏈病、IgA單株γ球蛋白症、意義不明單株γ球蛋白症(MGUS)、線性IgA大皰性皮膚病、類風濕性關節炎、潰瘍性結腸炎及原發性腎絲球腎炎。
  144. 一種下式化合物：
    Figure 03_image2612
    Figure 03_image2614
    ； 或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： R 1及R 5獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 3在每次出現時獨立地選自氫、烷基、雜烷基、鹵烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環、-OR 8及-NR 8R 9； R 6及R 7在每次出現時獨立地選自氫、雜烷基、烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、鹵烷基、雜芳基、雜環、-烷基-OR 8、-烷基-NR 8R 9、C(O)R 3、S(O)R 3、C(S)R 3及S(O) 2R 3； R 8及R 9在每次出現時獨立地選自氫、雜烷基、烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基及雜環； R 10係選自氫、烷基、雜烷基、鹵烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環、C(O)R 3、S(O)R 3、C(S)R 3及S(O) 2R 3； R 25係選自由以下組成之群：雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 65、R 66及R 67獨立地選自氫、雜烷基、C 0-C 6烷基-氰基、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代； R 68、R 69及R 70獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、雜環、雜環烷基、鹵烷氧基、C 0-C 6烷基-OR 6、C 0-C 6烷基-SR 6、C 0-C 6烷基-NR 6R 7、C 0-C 6烷基-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(S)R 3、C 0-C 6烷基-N(R 8)-S(O) 2R 3、C 0-C 6烷基-O-C(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-S(O)R 3、C 0-C 6烷基-O-C(S)R 3、-N=S(O)(R 3) 2、C 0-C 6烷基N 3、雜芳基、芳基及C 0-C 6烷基-O-S(O) 2R 3，其中之各者視情況經1、2、3或4個取代基取代；且 在價數允許之情況下，視情況選用之取代基係選自烷基、烯基、炔基、鹵烷基、-OR 6、F、Cl、Br、I、-NR 6R 7、雜烷基、雜環、雜芳基、芳基、氰基、硝基、羥基、疊氮基、醯胺、-SR 3、-S(O)(NR 6)R 3、-NR 8C(O)R 3、-C(O)NR 6R 7、-C(O)OR 3、-C(O)R 3、-SF 5、
    Figure 03_image2616
    Figure 03_image2618
    ，且其中視情況選用之取代基經選擇以使得產生穩定化合物。
  145. 如請求項144之化合物，其中R 65未經視情況選用之取代基取代。
  146. 如請求項144之化合物，其中R 65經1個視情況選用之取代基取代。
  147. 如請求項144之化合物，其中R 65為氫。
  148. 如請求項144之化合物，其中R 65為-CF 3。
  149. 如請求項144之化合物，其中R 65為氰基。
  150. 如請求項144之化合物，其中R 65為F。
  151. 如請求項144之化合物，其中R 65為Cl。
  152. 如請求項144之化合物，其中R 65為Br。
  153. 如請求項144之化合物，其中R 65為鹵烷基。
  154. 如請求項144之化合物，其中R 65為雜環。
  155. 如請求項144之化合物，其中R 65為鹵烷氧基。
  156. 如請求項144之化合物，其中R 65為雜環烷基。
  157. 如請求項144之化合物，其中R 65為雜烷基。
  158. 如請求項144之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-OR 6。
  159. 如請求項144之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-SR 6。
  160. 如請求項144之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。
  161. 如請求項144之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。
  162. 如請求項144之化合物，其中R 65為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。
  163. 如請求項158至162中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為鍵。
  164. 如請求項158至162中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1。
  165. 如請求項158至162中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2。
  166. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66未經視情況選用之取代基取代。
  167. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66經1個視情況選用之取代基取代。
  168. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為氫。
  169. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為-CF 3。
  170. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為氰基。
  171. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為F。
  172. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為Cl。
  173. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為Br。
  174. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為鹵烷基。
  175. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為雜環。
  176. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為鹵烷氧基。
  177. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為雜環烷基。
  178. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為雜烷基。
  179. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-OR 6。
  180. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-SR 6。
  181. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。
  182. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。
  183. 如請求項144至165中任一項之化合物，其中R 66為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。
  184. 如請求項179至183中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為鍵。
  185. 如請求項179至183中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1。
  186. 如請求項179至183中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2。
  187. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67未經視情況選用之取代基取代。
  188. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67經1個視情況選用之取代基取代。
  189. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為氫。
  190. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為-CF 3。
  191. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為氰基。
  192. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為F。
  193. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為Cl。
  194. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為Br。
  195. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為鹵烷基。
  196. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為雜環。
  197. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為鹵烷氧基。
  198. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為雜環烷基。
  199. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為雜烷基。
  200. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-OR 6。
  201. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-SR 6。
  202. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-NR 6R 7。
  203. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-C(O)R 3。
  204. 如請求項144至186中任一項之化合物，其中R 67為C 0-C 6烷基-N(R 8)-C(O)R 3。
  205. 如請求項200至204中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為鍵。
  206. 如請求項200至204中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 1。
  207. 如請求項200至204中任一項之化合物，其中C 0-C 6烷基為C 2。
  208. 如請求項144至207中任一項之化合物，其中R 10為氫、烷基、雜烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環、C(O)R 3、S(O)R 3或S(O) 2R 3。
  209. 如請求項144至207中任一項之化合物，其中R 10為氫。
  210. 如請求項144之化合物，其中該化合物係選自：
    Figure 03_image2620
    Figure 03_image2622
    Figure 03_image2624
    Figure 03_image2626
    Figure 03_image2628
    Figure 03_image2630
    Figure 03_image2632
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  211. 一種醫藥組合物，其包含如請求項144至210中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑。
  212. 一種治療由ASGPR介導之病症的方法，其包含向有需要之患者投與有效量的如請求項144至210中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
TW111116735A 2021-05-03 2022-05-03 用於降解免疫球蛋白及其他蛋白質之有效asgpr結合化合物 TW202308703A (zh)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163183450P 2021-05-03 2021-05-03
US63/183,450 2021-05-03
US202163228067P 2021-07-31 2021-07-31
US63/228,067 2021-07-31
US202163293447P 2021-12-23 2021-12-23
US63/293,447 2021-12-23
US202263331592P 2022-04-15 2022-04-15
US63/331,592 2022-04-15

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202308703A true TW202308703A (zh) 2023-03-01

Family

ID=83933023

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW111116735A TW202308703A (zh) 2021-05-03 2022-05-03 用於降解免疫球蛋白及其他蛋白質之有效asgpr結合化合物

Country Status (7)

Country Link
US (2) US20240101539A1 (zh)
EP (1) EP4334360A2 (zh)
JP (1) JP2024517812A (zh)
KR (1) KR20240017423A (zh)
AU (1) AU2022268925A1 (zh)
TW (1) TW202308703A (zh)
WO (1) WO2022235699A2 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024138286A1 (en) * 2022-12-26 2024-07-04 Usynova Pharmaceuticals, Ltd. Il-17a modulators
WO2024147113A1 (en) * 2023-01-05 2024-07-11 Glycoera Ag Glycoengineered polypeptides targeting anti-podocyte autoantibodies and uses thereof

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0023075A1 (en) * 1979-07-13 1981-01-28 Imperial Chemical Industries Plc Process for the preparation of cyclopropane carboxylic acid esters
CA2900840C (en) 2013-03-14 2023-03-28 Panoptica, Inc. Ocular formulations for drug-delivery to the posterior segment of the eye
US9884843B2 (en) 2013-12-16 2018-02-06 Peloton Therapeutics, Inc. Cyclic sulfone and sulfoximine analogs and uses thereof
CN113301925A (zh) * 2018-12-19 2021-08-24 小利兰·斯坦福大学理事会 用于溶酶体靶向的双官能分子以及相关的组合物和方法
EP4041262A4 (en) * 2019-10-10 2024-03-13 Yale University TARGETED BIFUNCTIONAL DEGRADATION PRODUCTS
CN115066438A (zh) * 2020-01-31 2022-09-16 阿维拉治疗公司 用于降解胞外蛋白的asgpr结合化合物

Also Published As

Publication number Publication date
WO2022235699A2 (en) 2022-11-10
AU2022268925A1 (en) 2023-11-16
US20240279209A1 (en) 2024-08-22
KR20240017423A (ko) 2024-02-07
US20240101539A1 (en) 2024-03-28
JP2024517812A (ja) 2024-04-23
WO2022235699A3 (en) 2022-12-08
EP4334360A2 (en) 2024-03-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2021200639B2 (en) PD-1/PD-L1 inhibitors
AU2022202403B2 (en) Aryl, Heteroary, And Heterocyclic Pharmaceutical Compounds For Treatment Of Medicinal Disorders
US11819551B2 (en) ASGPR-binding compounds for the degradation of extracellular proteins
CN111954525B (zh) 稠合双环C5aR拮抗剂的前药
US20240279209A1 (en) Potent asgpr-binding compounds for the degradation of immunoglobulins and other proteins
US12042495B2 (en) MAP4K1 inhibitors
ES2974026T3 (es) Inhibidores de la interacción proteína-proteína entre KEAP1-Nrf2
US20230002388A1 (en) Piperidinyl-methyl-purineamines as nsd2 inhibitors and anti-cancer agents
KR20180058741A (ko) 이소퀴놀리논의 고체형, 그의 제조 방법, 이를 포함하는 조성물 및 이를 사용하는 방법
ES2910071T3 (es) Compuestos de aminopirazina diol como inhibidores de PI3K-Y
CN113616656A (zh) 用于治疗PI3K-γ介导的障碍的杂环化合物
JP7395730B2 (ja) ヘテロ環式ｒｉｐ１阻害化合物
US10550100B2 (en) 5-[3-[piperzin-1-yl]-3-oxo-propyl]-imidazolidine-2,4-dione derivatives as ADAMTS 4 and 5 inhibitors for treating E.G. osteoarthritis
CN114728958A (zh) Rip1抑制性化合物和制备与使用其的方法
JP6837072B2 (ja) ６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［５，１−ｂ］［１，３］オキサジン−２−カルボキサミド化合物
CA3174145A1 (en) Potent asgpr-binding compounds for the degradation of immunoglobulins and other proteins
US20220227787A1 (en) Inhibitors of peptidylarginine deiminases
CN117677399A (zh) 用于降解免疫球蛋白和其他蛋白质的有效asgpr结合化合物
WO2022035997A1 (en) In vivo assembly of asgpr binding therapeutics
WO2024098039A2 (en) Potent asgpr-binding heterobifunctional compounds for the degradation of immunoglobulins and other proteins
US20240239828A1 (en) Mannose 6-phosphate or asgpr receptor binding compounds for the degradation of extracellular proteins
JP2024113083A (ja) Ｎｌｒｐ活性に関連する病態を治療するための化合物及び組成物