TW202224699A - 紅肉蘋果和櫻桃李組合物及其在抗血栓方面的應用 - Google Patents
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Abstract
本發明涉及食品和藥品領域,特別涉及具有抗血栓功效的紅肉蘋果和櫻桃李組合物,所述的紅肉蘋果和櫻桃李的重量比為1:10-10:1。斑馬魚和小鼠動物實驗表明,紅肉蘋果和櫻桃李組合物在抗血栓功效方面具有協同增效作用,組合物的抗血栓功效優於單獨使用紅肉蘋果或櫻桃李。紅肉蘋果和櫻桃李組合物的產品形式包括果汁、果醬、凍乾粉、口服液產品、膠囊、片劑等。紅肉蘋果和櫻桃李組合物與藥物聯用也有一定的協同增效效果。
Description
本發明涉及食品和藥品領域,具體涉及紅肉蘋果和櫻桃李組合物及其在抗血栓方面的應用。
血栓是血流在心血管系統血管內面剝落處或修補處的表面所形成的小塊。血栓由不溶性纖維蛋白、沉積的血小板、積聚的白細胞和陷入的紅細胞組成。血栓性疾病是指由血管內形成血栓和血栓栓塞影響血液流動所引起的疾病,包括心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等。
血栓的形成是誘發心血管疾病的主要原因。臨床上用於預防和治療血栓性疾病的藥物主要有抗凝血藥物,溶血栓藥物和抗血小板聚集藥物,主要包括:阿斯匹靈、氯吡格雷、肝素、華法林等。但這些藥物通常存在著出血的風險。阿斯匹靈主要是預防血小板的聚集,對胃腸道有刺激作用,長期使用會使胃黏膜受損,引起胃潰瘍甚至胃出血。氯吡格雷比阿斯匹靈的機率偏低一些,但是也有出血的風險。華法林和肝素有抗凝血酶的作用,常見的不良反應也有出血的風險。因此有必要尋找效果好且無副作用的天然資源,以用於血栓性疾病的防治。
紅肉蘋果(
Malus neidzwetzkyanaDieck)是薔薇科(Rosaceae)蘋果屬(Malus Mill)植物,其果實的果肉呈紅色,果實的顏色主要是由花色苷的積累造成的。目前世界各地有眾多紅肉蘋果品種,例如中國新疆的洪勳系列、美國的Robert Crab、日本的紅寶石甜、瑞士的紅色之愛(Redlove)等。紅肉蘋果各品種的花、枝葉顏色、果實大小、著色程度、口感風味等各不相同。新疆的紅肉蘋果在紅果肉蘋果屬植物起源中有著重要的地位。
櫻桃李(
Prunus cerasiferaEhrhart),俗稱野酸梅,薔薇科李屬,是世界上極為珍貴和罕見並瀕危滅絕的原始野生林果。據《中國樹木志》的記載和國家野生植物研究院的考證,野生櫻桃李僅發現在新疆天山山脈西部及高加索、小亞細亞山地生存,野生資源極為稀少。櫻桃李果實在我國新疆地區有著悠久的食用歷史,居住在天山大西溝的哈薩克族、蒙古族牧民飲食以牛羊肉為主,其人群中患高血脂、高血壓的人卻很少,這與牧民長期採摘野生櫻桃李製作果醬或將果實曬乾泡茶的使用習慣有關。櫻桃李包括多個品種,按照顏色分主要有黑果、紅果、紫果、紫黑果、黃果等。
紅肉蘋果和櫻桃李富含多種氨基酸、維生素、礦物質,以及花色苷、多酚、類黃酮等功能成分,具有較高的開發價值。但目前的研究仍較有限,主要集中在化學成分及抗氧化方面,還處於初步研究階段。
本申請發明人經過大量的實驗研究後發現,紅肉蘋果(或紅肉蘋果萃取物)和櫻桃李(或櫻桃李萃取物)的組合在抗血栓方面具有協同增效作用。
為此,在本發明的第一方面,本發明提供了組合物在製備藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品中的用途,該藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品用於抗血栓或者用於預防和/或治療血栓性疾病,其中,該組合物包含:
第一組分,該第一組分為紅肉蘋果或紅肉蘋果萃取物;和
第二組分,該第二組分為櫻桃李或櫻桃李萃取物。
在一些實施方案中,該血栓性疾病選自心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等因血栓引起的相關疾病。
在一些實施方案中,該第一組分和該第二組分的重量比為1:10-10:1(如1:5-10:1,1:2-10:1,1:1-10:1,1:10-5:1,1:5-5:1,1:2-5:1,1:1-5:1,1:10-2:1,1:5-2:1,1:2-2:1,1:1-2:1,1:10-1:1,1:5-1:1,1:2-1:1,1:10-5:1,1:10-2:1,1:10-1:1,1:5-10:1,1:5-5:1,1:5-2:1,1:5-1:1,1:2-10:1,1:2-5:1,1:2-2:1,1:2-1:1,1:1-10:1,1:1-5:1,1:1-2:1,具體如1:5,1:2,1:1,2:1,5:1)。
在一些實施方案中,該紅肉蘋果萃取物藉由以下萃取方式之一獲得:浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取、次臨界萃取或其他萃取方式。
在一些實施方案中,該櫻桃李萃取物藉由以下萃取方式之一獲得:浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取、次臨界萃取或其他萃取方式。
在一些實施方案中,該組合物是以鮮果、果汁、果醬、果粉(如凍乾粉)、糖果(如壓片糖果)、口服液、膠囊、片劑、果乾、果脯、果酒或糕點等形式存在的。換句話說,該組合物的產品形式可以是鮮果、果汁、果醬、果粉(如凍乾粉)、糖果(如壓片糖果)、口服液、膠囊、片劑、果乾、果脯、果酒或糕點等。也就是說,該組合物可以製成鮮果、果汁、果醬、果粉(如凍乾粉)、糖果(如壓片糖果)、口服液、膠囊、片劑、果乾、果脯、果酒或糕點等。
在一些實施方案中,該紅肉蘋果是指果肉為紅色的薔薇科蘋果屬植物的果實。
在一些實施方案中,該紅肉蘋果選自:洪勳1號(紅勳1號)、洪勳3號(紅勳3號)、洪勳6號(紅勳6號)、夏紅肉、黛紅、紅色之愛、Roberts Crab、紅之夢、紅寶石甜等。
在一些實施方案中,該櫻桃李選自櫻桃李紅果、櫻桃李黑果、櫻桃李紫果、櫻桃李紫黑果、櫻桃李黃果等。
在本發明的第二方面,本發明提供了組合產品,其包括:
第一產品,該第一產品為前述的組合物;
第二產品,該第二產品為預防和/或治療血栓性疾病的藥物。
在一些實施方案中,該血栓性疾病選自心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等因血栓引起的相關疾病。
在一些實施方案中,該預防和/或治療血栓性疾病的藥物選自阿斯匹靈、氯吡格雷、肝素、華法林等。
在一些實施方案中,該第一產品和該第二產品(如氯吡格雷或阿斯匹靈)的重量比為1000:2-1000:0.25(如1000:2、1000:1.5、1000:1、1000:0.9、1000:0.8、1000:0.7、1000:0.6、1000:0.5、1000:0.25;或者如1000:1-1000:0.5,具體如1000:1、1000:0.9、1000:0.8、1000:0.7、1000:0.6、1000:0.5)。
在本發明的第三方面,本發明提供了前述的組合產品在製備藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品中的用途,該藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品用於抗血栓,或者用於預防和/或治療血栓性疾病。
在本發明的第四方面,本發明提供了前述的組合物或前述的組合產品,其用於抗血栓,或者用於預防和/或治療血栓性疾病。
在本發明的第五方面,本發明提供了抗血栓,或者預防和/或治療血栓性疾病的方法,其包括給有此需要的個體服用前述的組合物或前述的組合產品。
在一些實施方案中,上述血栓性疾病選自心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等因血栓引起的相關疾病。
另外,本發明還揭露了抗血栓的紅肉蘋果和櫻桃李組合產品及其製備方法,包括鮮果、果汁、果醬、凍乾粉、壓片糖果、口服液、膠囊等產品形式。動物實驗表明,該系列產品具有很好的協同抗血栓效果。在某些實施例中,本發明的組合物還可用於製備中藥、中成藥等藥物。
另外,在一個方面,本申請還提供了一種組合產品,其包含獨立包裝的第一產品和第二產品,該第一產品為紅肉蘋果和櫻桃李組合產品,該第二產品為抗血栓藥物(例如阿斯匹靈、氯吡格雷、肝素、華法林等)。
本發明中,“個體”包括人或非人動物。示例性人個體包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人個體(稱為患者)或正常個體。本發明中“非人動物”包括所有脊椎動物,例如非哺乳動物(例如魚類、鳥類、兩棲動物、爬行動物)和哺乳動物,例如非人靈長類、家畜和/或馴化動物(例如鼠、綿羊、犬、貓、乳牛、豬等)。
本發明中,“櫻桃李萃取物”或者“紅肉蘋果萃取物”是指以櫻桃李或紅肉蘋果為原料,經過物理和/或化學萃取分離過程,獲取和富集櫻桃李或紅肉蘋果中的一種或多種有效成分而形成的產物,其可以作為食品(例如普通食品或保健食品)或藥品的原料或輔料。示例性的萃取方式包括但不限於:浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取和次臨界萃取。
以下提供示例性的製備紅肉蘋果和櫻桃李萃取物的方法。
浸提萃取
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由浸提萃取(例如水浸提萃取或醇浸提萃取)得到。
在某些實施方案中,該浸提萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者分離出果汁和果渣;在某些實施方案中,利用紗布(例如100-300目紗布,例如200目紗布)過濾分離出果汁和果渣;
步驟2:將果漿或者果渣與萃取介質(例如水或乙醇)混合,在常溫或加熱(例如,10-100℃,例如50℃)條件下萃取(例如萃取30-100min,例如60min),過濾得到果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,果漿或果渣與萃取介質以1:(2-10)(例如1:5)的重量比混合;在某些實施方案中,該乙醇為50%-95%的乙醇;
步驟3:將果漿萃取液或者果汁與果渣萃取液的合併液進行濃縮,得到紅肉蘋果和櫻桃李的浸提萃取物;在某些實施方案中,藉由旋轉蒸發進行濃縮;在某些實施方案中,旋轉蒸發的溫度為30-60℃,例如50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由水浸提萃取得到,在某些實施方案中,該水浸提萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數選取200目;
步驟2:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或者果渣按料液比1:(2-10)與水混合,10-100℃浸提萃取30-100min,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,該料液比選取1:5;在某些實施方案中,浸提萃取溫度選取50℃;在某些實施方案中,萃取時間選取60min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李水浸提萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李水浸提萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由醇浸提萃取得到,在某些實施方案中,該醇浸提萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數選取200目;
步驟2:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或者果渣按料液比1:(2-10)與50%-95%的乙醇混合,10-100℃浸提萃取30-100min,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,該料液比選取1:5;在某些實施方案中,所使用的乙醇的濃度為50%;在某些實施方案中,浸提萃取溫度選取50℃;在某些實施方案中,萃取時間選取60min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,果漿萃取液直接濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李醇浸提萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;任選地,對萃取物進行揮乾處理以除去其中殘留的乙醇;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李醇浸提萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
酶解超音波萃取
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由酶解超音波萃取(例如酶解超音波水萃取或酶解超音波醇萃取)得到。
在某些實施方案中,該酶解超音波萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者分離出果汁和果渣;在某些實施方案中,利用紗布(例如100-300目紗布,例如200目紗布)過濾分離出果汁和果渣;
步驟2:將果漿或果渣與萃取介質(例如水或乙醇)和纖維素酶混合,在加熱條件(例如30-50℃,例如45℃)下萃取(例如萃取30-100min,例如60min),繼而在超音波條件(例如100-500W的超音波功率)下超音波(例如超音波20-60min,例如超音波30min),過濾得到果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,纖維素酶的添加量(以果渣或果漿重量為基準)為0.2%-1%(例如0.5%);在某些實施方案中,果漿或果渣與萃取介質以1:(2-10)(例如1:5)的重量比混合;在某些實施方案中,該乙醇為50%-95%的乙醇;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液進行濃縮,得到紅肉蘋果和櫻桃李的酶解超音波萃取物;在某些實施方案中,藉由旋轉蒸發進行濃縮;在某些實施方案中,旋轉蒸發的溫度為30-60℃,例如50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由酶解超音波水萃取得到,在某些實施方案中,該酶解超音波水萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數選取200目;
步驟2:將紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果渣按料液比1:(2-10)與水混合,添加0.2%-1%(以果渣或果漿重量為基準)的纖維素酶,30-50℃水浴萃取30-100min,100-500W超音波20-60min,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,料液比選取1:5;在某些實施方案中,纖維素酶添加量為0.5%;在某些實施方案中,水浴溫度為45℃;在某些實施方案中,萃取時間選取60min;在某些實施方案中,超音波功率為500W;在某些實施方案中,超音波時間為30min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波萃取水萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波水萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由酶解超音波醇萃取得到,在某些實施方案中,該酶解超音波醇萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數選取200目;
步驟2:將紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果渣按料液比1:(2-10)與50%-95%的乙醇混合,添加0.2%-1%(以果渣或果漿重量為基準)的纖維素酶,30-50℃水浴萃取30-100min,100-500W超音波20-60min,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,料液比選取1:5;在某些實施方案中,所使用的乙醇的濃度為50%;在某些實施方案中,纖維素酶添加量為0.5%;在某些實施方案中,水浴溫度為45℃;在某些實施方案中,萃取時間選取60min;在某些實施方案中,超音波功率為500W;在某些實施方案中,超音波時間為30min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波萃取醇萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;任選地,對萃取物進行揮乾處理以除去其中殘留的乙醇;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波醇萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
超高壓萃取
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由超高壓萃取(例如超高壓水萃取或超高壓醇萃取)得到。如本文中使用的,“超高壓”指的是壓強超過100 MPa(相當於1000個大氣壓)。
在某些實施方案中,該超高壓萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者分離出果汁和果渣;在某些實施方案中,利用紗布(例如100-300目紗布,例如200目紗布)過濾分離出果汁和果渣;
步驟2:將果漿或果渣與萃取介質(例如水或乙醇)混合,在超高壓(例如200-600MPa,例如400MPa)條件下處理(例如處理3-10min,例如處理5min),過濾得到果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,果漿或果渣與萃取介質以1:(2-10)(例如1:5)的重量比混合;在某些實施方案中,該乙醇為50%-95%的乙醇;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果汁與果渣萃取液的合併液進行濃縮,得到紅肉蘋果和櫻桃李的超高壓萃取物;在某些實施方案中,藉由旋轉蒸發進行濃縮;在某些實施方案中,旋轉蒸發的溫度為30-60℃,例如50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李超高壓萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由超高壓水萃取得到,在某些實施方案中,該超高壓水萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數選取200目;
步驟2:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果渣按料液比1:(2-10)與水混合,超高壓200-600MPa處理3-10min,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,料液比選取1:5;在某些實施方案中,超高壓壓力為400MPa;在某些實施方案中,超高壓處理時間選取5min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李超高壓萃取水萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李超高壓水萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由超高壓醇萃取得到,在某些實施方案中,該超高壓醇萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數選取200目;
步驟2:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果渣按料液比1:(2-10)與50%-95%的乙醇混合,超高壓200-600MPa處理3-10min,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,料液比選取1:5;在某些實施方案中,超高壓壓力為400MPa;在某些實施方案中,超高壓處理時間選取5min;在某些實施方案中,該乙醇為50%的乙醇;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李超高壓萃取醇萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;任選地,對萃取物進行揮乾處理以除去其中殘留的乙醇;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李超高壓醇萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
次臨界萃取(又稱“次臨界萃取”)
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由次臨界萃取(例如次臨界水萃取或次臨界醇萃取)得到。
在某些實施方案中,該次臨界萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者分離出果汁和果渣;在某些實施方案中,利用紗布(例如100-300目紗布,例如200目紗布)過濾分離出果汁和果渣;
步驟2:將果漿或果渣與萃取介質(例如水或乙醇)混合,進行次臨界萃取處理(例如處理10-50min例如30min),過濾得到果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,果漿或果渣與萃取介質以1:(2-10)(例如1:5)的重量比混合;在某些實施方案中,該乙醇為50%-95%的乙醇;在某些實施方案中,次臨界萃取的處理溫度為100-150℃(例如110℃);
步驟3:將果漿或果汁與果渣萃取液的合併液進行濃縮,得到紅肉蘋果和櫻桃李的次臨界萃取物;在某些實施方案中,藉由旋轉蒸發進行濃縮;在某些實施方案中,旋轉蒸發的溫度為30-60℃,例如50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李次臨界萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由次臨界水萃取得到,在某些實施方案中,該次臨界水萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟2:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果渣按料液比1:(2-10)與水混合,次臨界萃取10-50min,處理溫度為100-150℃,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,料液比選取1:5;在某些實施方案中,處理溫度為110℃;在某些實施方案中,處理時間為30min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李次臨界萃取水萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李次臨界水萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
在某些實施方案中,本發明的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物藉由次臨界醇萃取得到,在某些實施方案中,該次臨界醇萃取包括以下步驟:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,直接獲得果漿,或者用100-300目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁,分離果汁和果渣;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟2:紅肉蘋果和櫻桃李果漿或果渣按料液比1:(2-10)與50%-95%的乙醇混合,次臨界萃取10-50min,處理溫度為100-150℃,過濾製得果漿或果渣萃取液;在某些實施方案中,料液比選取1:5;在某些實施方案中,處理溫度為110℃;在某些實施方案中,處理時間為30min;
步驟3:紅肉蘋果和櫻桃李果漿萃取液或果汁與果渣萃取液的合併液,在30-60℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李次臨界萃取醇萃取物;在某些實施方案中,旋轉蒸發溫度選取50℃;任選地,對萃取物進行揮乾處理以除去其中殘留的乙醇;
步驟4:將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李次臨界醇萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行萃取。
如前所述,本發明的組合物的產品形式可以是鮮果、果汁、果醬、果粉(如凍乾粉)、糖果(如壓片糖果)、口服液、膠囊、片劑、果乾、果脯、果酒或糕點。另外,本發明的組合物的產品形式可以是藥品、普通食品或保健食品。在一些實施方案中,果汁、果醬、果粉(如凍乾粉)、糖果(如壓片糖果)、口服液、膠囊、片劑、果乾、果脯、果酒或糕點等產品形式中,本發明的組合物可以作為主要原料,例如,占總原料的30wt%以上、40wt%以上、50wt%以上、60wt%以上、70wt%以上、80wt%以上、90wt%以上或100wt%;任選地,該產品還可以包含例如水、甜味物質等其他成分,或其他種類水果或其萃取物。
以下提供示例性的製備紅肉蘋果和櫻桃李產品(例如鮮果、果汁、果醬、凍乾粉、壓片糖果、口服液、膠囊)的方法。
鮮果
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李鮮果可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:在成熟前1個月至完全成熟時採收紅肉蘋果和櫻桃李,採果時優先選擇晴天採果;
步驟2:挑選並去除爛果或顏色較差的果;
步驟3:採後冷藏存放;
步驟4:將紅肉蘋果和櫻桃李鮮果按照不同比例(重量比)組合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)。
獲得的紅肉蘋果和櫻桃李鮮果可供直接食用。
果汁
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李果汁可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:對漿料進行過濾(例如用100-300目紗布過濾),製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁濁汁;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李濁汁按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備果汁。
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李果汁還可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:對漿料進行過濾(例如用100-300目紗布過濾),加果膠酶酶解過濾;製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁清汁;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李清汁按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備果汁。
果醬
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李果醬可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:將果漿水煮加熱濃縮製成紅肉蘋果和櫻桃李果醬;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李果醬按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備果醬。
凍乾粉
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿,
步驟2:將果漿冷凍乾燥製成果漿凍乾粉;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備凍乾粉。
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉還可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:對漿料進行過濾(例如用100-300目紗布過濾),製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟3:將果汁冷凍乾燥製成果汁凍乾粉;
步驟4:將紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備凍乾粉。
壓片糖果
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李壓片糖果可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:將果漿冷凍乾燥製成果漿凍乾粉;
步驟3:對果漿凍乾粉和輔料進行壓片製成壓片糖果;
步驟4:將紅肉蘋果和櫻桃李壓片糖果按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備壓片糖果。
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李壓片糖果還可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:對漿料進行過濾(例如用100-300目紗布過濾),製得紅肉蘋果果汁;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟3:將果汁冷凍乾燥製成果汁凍乾粉;
步驟4:對果汁凍乾粉和輔料進行壓片製成壓片糖果。
步驟5:將紅肉蘋果和櫻桃李壓片糖果按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備壓片糖果。
口服液
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李口服液可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:製備不同比例(重量比)(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物(例如,藉由浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取或次臨界萃取製得,步驟同上文);
步驟2:對紅肉蘋果和櫻桃李萃取物進行滅菌製得紅肉蘋果口服液。
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李口服液還可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:製備不同比例(重量比)(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物(例如,藉由浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取或次臨界萃取製得,步驟同上文);
步驟2:加果膠酶酶解過濾製備清汁萃取物組合物;
步驟3:對紅肉蘋果和櫻桃李清汁萃取物進行滅菌製得紅肉蘋果口服液。
膠囊
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李膠囊可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:將果漿冷凍乾燥製成果漿凍乾粉;
步驟3:將紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備凍乾粉;
步驟4:將果漿凍乾粉裝入膠囊殼,製成膠囊。
在某些實施方案中,紅肉蘋果和櫻桃李膠囊還可以藉由包含以下步驟的方法得到:
步驟1:分別將紅肉蘋果和櫻桃李去籽或去核後打漿;
步驟2:對漿料進行過濾(例如用100-300目紗布過濾),製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁;在某些實施方案中,該紗布的目數為200目;
步驟3:將果汁冷凍乾燥製成果汁凍乾粉;
步驟4:將紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者在步驟1先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備凍乾粉;
步驟5:將果汁凍乾粉裝入膠囊殼,製成膠囊。
有益效果
本發明選用天然紅肉蘋果和櫻桃李,製備的紅肉蘋果和櫻桃李組合產品具有很好的抗血栓作用,兩種複配的效果優於單獨使用紅肉蘋果或櫻桃李,具有協同增效作用。另外,組合物與藥物聯用的效果優於組合物或藥物單獨使用的效果,有一定的協同增效作用。
下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述,但是本領域技術人員將會理解,下列實施例僅用於說明本發明,而不應視為限定本發明的範圍。
實施例1:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李鮮果。
紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)在成熟前1個月至完全成熟時採收,採果時優先選擇晴天採果,挑選並去除爛果或顏色較差的果,採後冷藏存放。獲得的紅肉蘋果和櫻桃李按照不同比例(重量比)組合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1),鮮果可供直接食用。
實施例2:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李果汁濁汁。
紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)採收後去籽或去核後打漿,用200目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁濁汁。將紅肉蘋果和櫻桃李濁汁按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備果汁。
實施例3:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李果汁清汁。
紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)採收後去籽或去核後打漿,用200目紗布過濾果汁,製得紅肉蘋果和櫻桃李果汁濁汁。加果膠酶酶解過濾得清汁。將紅肉蘋果和櫻桃李清汁按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備果汁。
實施例4:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李果醬。
紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,水煮加熱製成較稠的果醬。將紅肉蘋果和櫻桃李果醬按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備果醬。
實施例5:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉。
紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,冷凍乾燥製成果漿凍乾粉。將紅肉蘋果和櫻桃李凍乾粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備凍乾粉。
實施例6:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李壓片糖果。
紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,冷凍乾燥製成果漿凍乾粉,對果漿凍乾粉和輔料進行壓片製成壓片糖果。將紅肉蘋果和櫻桃李壓片糖果按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物,或者先按前述不同比例混合紅肉蘋果和櫻桃李原料,再進行打漿製備壓片糖果。
實施例7:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李水浸提萃取口服液。
(1)紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,製得紅肉蘋果和櫻桃李果漿。
(2)紅肉蘋果和櫻桃李果漿按料液比1:5加水,50℃水浸提萃取60min,過濾製得果漿萃取液。
(3)萃取液在50℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李水浸提萃取物。
(4)將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物。
(5)對紅肉蘋果和櫻桃李組合萃取物進行滅菌製得口服液。
實施例8:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果(紅色之愛)和櫻桃李(紅果)水浸提萃取口服液。製備步驟同實施例7。
實施例9:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)醇浸提萃取口服液。
參照實施例7的(1)-(5)步驟處理,其中果漿按料液比1:5加50%乙醇。醇萃取物進行揮乾乙醇處理。
實施例10:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波水萃取口服液。
(1)紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,製得紅肉蘋果和櫻桃李果漿。
(2)紅肉蘋果和櫻桃李果漿按料液比1:5加水,添加0.5%(以果漿重量為基準)的纖維素酶,45℃水浴萃取60min,500W超音波30min,過濾製得果漿萃取液。
(3)萃取液在50℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李酶解超音波水萃取物。
(4)將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物。
(5)對紅肉蘋果和櫻桃李組合萃取物進行滅菌製得口服液。
實施例11:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果(洪勳3號)和櫻桃李(紅果)酶解超音波水萃取口服液。製備步驟同實施例10。
實施例12:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)酶解超音波醇萃取口服液。
參照實施例10的(1)-(5)步驟處理,其中果漿按料液比1:5加50%。醇萃取物進行揮乾乙醇處理。
實施例13:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李超高壓水萃取口服液。
(1)紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,製得紅肉蘋果和櫻桃李果漿。
(2)紅肉蘋果和櫻桃李果漿按料液比1:5加水,超高壓400Mpa處理5min,過濾製得果漿萃取液。
(3)萃取液在50℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李超高壓水萃取物。
(4)將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物。
(5)對紅肉蘋果和櫻桃李組合萃取物進行滅菌製得口服液。
實施例14:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果(洪勳6號)和櫻桃李(紅果)超高壓水萃取口服液。製備步驟同實施例13。
實施例15:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)超高壓醇萃取口服液。
參照實施例13的(1)-(5)步驟處理,其中果漿按料液比1:5加50%。醇萃取物進行揮乾乙醇處理。
實施例16:
本實施例所述的紅肉蘋果和櫻桃李產品指紅肉蘋果和櫻桃李次臨界水萃取口服液。
(1)紅肉蘋果(洪勳1號)和櫻桃李(黑果)去籽或去核後打漿,製得紅肉蘋果和櫻桃李果漿。
(2)紅肉蘋果和櫻桃李果漿按料液比1:5加水,次臨界萃取30min,處理溫度為110℃,過濾製得果漿萃取液。
(3)萃取液在50℃旋轉蒸發濃縮,製得紅肉蘋果和櫻桃李次臨界水萃取物。
(4)將萃取得到的紅肉蘋果和櫻桃李萃取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1)製備成組合物。
(5)對紅肉蘋果和櫻桃李組合萃取物進行滅菌製得口服液。
實施例產品的抗血栓效果評價:
實驗例1:斑馬魚抗血栓效果評價
(1)試驗方法
選取胚胎發育時相為2dpf的斑馬魚幼魚,分為模型組、空白組(水)、溶劑對照組、陽性藥組(氯吡格雷)和樣品組。模型組、溶劑對照組、陽性藥組和樣品組的斑馬魚加三氯化鐵建模(200μmol/L)。陽性藥物組給予氯吡格雷,樣品組給予待測樣品。給予後將各組斑馬魚胚胎放入28℃恒溫箱中繼續培養。藥物作用24h後,對各組斑馬魚紅細胞進行染色後拍照。使用圖像分析軟體IPP分析心臟紅細胞染色強度,記錄其IOD值,並按照公式計算相應藥物的血栓抑制率:
血栓抑制率(%)=(IOD藥物組-IOD模型組)/(IOD溶劑組-IOD模型組)×100
(2)試驗結果
試驗結果如下表1所示。下表1中,單獨紅肉蘋果組和單獨櫻桃李組的樣品分別為實施例10步驟(3)製得的紅肉蘋果酶解超音波水萃取物和櫻桃李酶解超音波水萃取物。紅肉蘋果和櫻桃李組合物組的樣品為實施例10步驟(4)製得的各重量比的組合物。另外,各組對應的給予濃度用單底線示出,其中:20μg/mL或10μg/mL表示陽性藥分散在水中的濃度;0.002%表示紅肉蘋果酶解超音波水萃取物、或者櫻桃李酶解超音波水萃取物、或者不同重量比的由紅肉蘋果酶解超音波水萃取物和櫻桃李酶解超音波水萃取物組成的組合物分散在水中的濃度。
之後,參照《CN104127427B一種抗癌增效組合物》和文獻《薑黃素與阿黴素聯合應用抗腫瘤的協同作用》,計算相互作用係數q=E(A+B)/(EA+(1-EA)×EB)。其中E( A + B) 為兩藥合用的抑制率,EA和EB分別為兩藥單用的抑制率。q為0.85-1.15表示作用相加,q>1.15表示作用增強,有協同作用,q < 0. 85 表示兩藥作用拮抗。計算結果如下表1所示。
表1 紅肉蘋果和櫻桃李組合物(實施例10)斑馬魚抗血栓效果
顯著性均與模型組比較;* p<0.05,** p<0.01,*** p<0.001
樣品 | 血栓抑制率% | q值 |
陽性藥(氯吡格雷) 20μg/mL | 68.70*** | / |
陽性藥(氯吡格雷)10μg/mL | 28.84* | / |
紅肉蘋果0.002% | 42.28** | / |
櫻桃李0.002% | 38.03** | / |
紅肉蘋果:櫻桃李 10:1(0.002%) | 75.31*** | 1.17 |
紅肉蘋果:櫻桃李 5:1(0.002%) | 77.26*** | 1.2 |
紅肉蘋果:櫻桃李 2:1(0.002%) | 80.31*** | 1.25 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:1(0.002%) | 80.48*** | 1.25 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:2(0.002%) | 82.62*** | 1.29 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:5(0.002%) | 79.56*** | 1.24 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:10(0.002%) | 76.75*** | 1.19 |
紅肉蘋果+櫻桃李1:1(0.002%)+氯吡格雷20μg/mL | 91.81*** | 0.98 |
紅肉蘋果+櫻桃李1:1(0.002%)+氯吡格雷10μg/mL | 88.76*** | 1.03 |
由上表1可知,紅肉蘋果和櫻桃李組合物(10:1-1:10)的血栓抑制率高於單獨使用時的數值,計算q值均大於1.15,說明具有協同增效作用。另外,紅肉蘋果和櫻桃李組合物與陽性藥複配使用時具有相加的作用(0.85<q<1.15),抗血栓的效果優於單獨使用時的效果。
實驗例2:小鼠抗血栓效果評價
(1)試驗方法
選取健康雄性ICR小鼠,體重 25-30g,用5%角叉菜膠注射小鼠的右腳掌皮下誘導血栓造模。將小鼠隨機分為4組:樣品組,正常組,模型組,陽性藥組,每組20隻。樣品組、模型組、陽性藥組灌胃7天後造模。造模後樣品組、陽性藥組繼續灌胃給予,陽性藥組給予氯吡格雷,樣品組給予待測樣品。各組給予量為0.5ml,各組按照20mg/kg劑量給予。模型組和正常組予水處理,不給予任何陽性藥或待測樣品。48h後藉由小鼠尾部形成的血栓長度比例(黑尾率為黑尾長度與全尾長比值)來評價樣品對於血栓形成的抑制作用。
血栓抑制率(%)=(模型組黑尾率-藥物組黑尾率)/模型組黑尾率×100
(2)試驗結果
試驗結果如下表2所示。下表2中,單獨紅肉蘋果組和單獨櫻桃李組的樣品分別為實施例10步驟(3)製得的紅肉蘋果酶解超音波水萃取物和櫻桃李酶解超音波水萃取物。紅肉蘋果和櫻桃李組合物組的樣品為實施例10步驟(4)製得的各重量比的組合物。另外,各組對應的給予劑量用單底線示出。
之後,計算相互作用係數,計算方法參照實驗例1。計算結果如下表2所示。
表2 紅肉蘋果和櫻桃李組合物(實施例10)小鼠抗血栓效果
顯著性均與模型組比較;* p<0.05,** p<0.01,*** p<0.001
樣品 | 48h黑尾率 | 血栓抑制率% | q值 |
模型組 | 0.826 | / | / |
陽性藥(氯吡格雷) 20mg/kg | 0.403*** | 51.21 | / |
陽性藥(氯吡格雷)10mg/kg | 0.682* | 17.43 | / |
陽性藥(阿斯匹靈) 20mg/kg | 0.489** | 40.80 | |
陽性藥(阿斯匹靈)10 mg/kg | 0.697 | 15.62 | |
紅肉蘋果20g/kg | 0.610** | 26.15 | / |
櫻桃李20g/kg | 0.586** | 29.06 | / |
紅肉蘋果:櫻桃李 10:1 20g/kg | 0.371*** | 55.08 | 1.16 |
紅肉蘋果:櫻桃李 5:1 20g/kg | 0.373*** | 54.84 | 1.15 |
紅肉蘋果:櫻桃李 2:1 20g/kg | 0.349*** | 57.75 | 1.21 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:1 20g/kg | 0.355*** | 57.02 | 1.20 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:2 20g/kg | 0.318*** | 61.50 | 1.29 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:5 20g/kg | 0.364*** | 55.93 | 1.17 |
紅肉蘋果:櫻桃李 1:10 20g/kg | 0.370*** | 55.21 | 1.16 |
紅肉蘋果+櫻桃李1:1(20g/kg)+氯吡格雷20mg/kg | 0.180*** | 78.21 | 0.99 |
紅肉蘋果+櫻桃李1:1(20g/kg)+氯吡格雷10mg/kg | 0.191*** | 76.88 | 1.19 |
紅肉蘋果+櫻桃李1:1(20g/kg)+阿斯匹靈20mg/kg | 0.201*** | 75.67 | 1.01 |
紅肉蘋果+櫻桃李1:1(20g/kg)+阿斯匹靈10mg/kg | 0.203*** | 75.06 | 1.18 |
由上表2可知,紅肉蘋果和櫻桃李組合物(10:1-1:10)的血栓抑制率高於單獨使用時的數值,計算相互作用q值大於1.15,說明具有協同增效作用。
另外,紅肉蘋果和櫻桃李組合物與正常劑量的陽性藥複配使用時具有相加的作用(0.85<q<1.15)。低劑量的陽性藥抗血栓效果一般,紅肉蘋果和櫻桃李組合物與低劑量的陽性藥複配使用時,q值大於1.15,具有協同作用。藥物一般存在副作用,紅肉蘋果和櫻桃李組合物與藥物聯用,其效果更佳,同時可以降低藥物用量,減輕藥物的毒副作用。
以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非限制,對本發明的技術方案進行修改或者等同替換,而不脫離本發明技術方案的宗旨和範圍的,其均應涵蓋在本發明的保護範圍之內。
Claims (10)
- 一種一組合物在製備一藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品中的用途,該藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品用於抗血栓或者用於預防和/或治療一血栓性疾病,其中,該組合物包含: 一第一組分,該第一組分為一紅肉蘋果或一紅肉蘋果萃取物;和 一第二組分,該第二組分為一櫻桃李或一櫻桃李萃取物; 較佳地,該血栓性疾病選自心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等因血栓引起的相關疾病。
- 如請求項1所述的用途,其中,該第一組分和該第二組分的重量比為1:10-10:1(如1:5-10:1,1:2-10:1,1:1-10:1,1:10-5:1,1:5-5:1,1:2-5:1,1:1-5:1,1:10-2:1,1:5-2:1,1:2-2:1,1:1-2:1,1:10-1:1,1:5-1:1,1:2-1:1,1:10-5:1,1:10-2:1,1:10-1:1,1:5-10:1,1:5-5:1,1:5-2:1,1:5-1:1,1:2-10:1,1:2-5:1,1:2-2:1,1:2-1:1,1:1-10:1,1:1-5:1,1:1-2:1,具體如1:5,1:2,1:1,2:1,5:1)。
- 如請求項1所述的用途,其中,該紅肉蘋果萃取物藉由以下萃取方式之一獲得:浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取、次臨界萃取或其他萃取方式; 或者,該櫻桃李萃取物藉由以下萃取方式之一獲得:浸提萃取、酶解超音波萃取、超高壓萃取、次臨界萃取或其他萃取方式。
- 如請求項1所述的用途,其中,該組合物是以鮮果、果汁、果醬、果粉(如凍乾粉)、糖果(如壓片糖果)、口服液、膠囊、片劑、果乾、果脯、果酒或糕點等形式存在的。
- 如請求項1所述的用途,其中,該紅肉蘋果是指果肉為紅色的薔薇科蘋果屬植物的果實,較佳地,該紅肉蘋果選自:洪勳1號(紅勳1號)、洪勳3號(紅勳3號)、洪勳6號(紅勳6號)、夏紅肉、黛紅、紅色之愛、Roberts Crab、紅之夢、紅寶石甜等; 或者,該櫻桃李選自櫻桃李紅果、櫻桃李黑果、櫻桃李紫果、櫻桃李紫黑果、櫻桃李黃果等。
- 一種組合產品,其包括: 一第一產品,該第一產品為如請求項1至請求項5中任一項所限定的組合物; 一第二產品,該第二產品為預防和/或治療一血栓性疾病的藥物。
- 如請求項6所述的組合產品,其中,該血栓性疾病選自心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等因血栓引起的相關疾病; 或者,該預防和/或治療血栓性疾病的藥物選自阿斯匹靈、氯吡格雷、肝素、華法林等。
- 如請求項6所述的組合產品,其中,該第一產品和該第二產品的重量比為1000:2-1000:0.25。
- 如請求項6至請求項8中任一項所述的組合產品在製備一藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品中的用途,該藥物(如中藥、中成藥等)、普通食品或保健食品用於抗血栓或者用於預防和/或治療血栓性疾病。
- 如請求項9所述的用途,其中,該血栓性疾病選自心肌梗塞、缺血性腦中風和靜脈栓塞等因血栓引起的相關疾病。
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