CN108947957A - 一种樱桃李皮花青素的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种樱桃李皮花青素的提取方法。该提取方法包括如下步骤：S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末；S2.花青素提取：将S1中的预处理粉末进行花青素提取得到樱桃李皮花青素粗提取液，过滤浓缩得到花青素粗提物，纯化即得樱桃李皮花青素。本发明的提取方法得到的花青素提取物嗯嗯提取率在3%以上，花青素提取物中的有效成分含量高、杂质少，樱桃李皮提取物中的黄酮含量高达40～70，具有较好的抗氧化效果和抑制酪氨酸酶活性，总抗氧化值在1.2mmol以上，抑制酪氨酸酶活性达到85%以上，提取物安全可靠，可广泛应用于化妆品制备领域。
Description
技术领域
本发明涉及花青素提取技术领域，更具体地，涉及一种樱桃李皮花青素的提取方法。
背景技术
樱桃李(Prunus cerasifera Ehrh.)，又被叫为酸梅(P.myrobalan loisel)或樱李，属于蔷薇科(Rosaceae)李亚科(Prunoideae)李属(Prunus)植物。樱桃李花色绚丽，果实鲜艳，营养价值很高，既可供观赏，又可生食和加工，自古就被新疆少数民族誉为“雪域圣果”，果肉柔软多汁，属小果类型。多数株系的果实为圆形，少数为椭圆形、卵圆形、卵形和宽卵形，果实颜色有黄色、红色、紫红色和黑色等4种类型。樱桃李果实营养成分种类齐全，含量丰富，是难得的天然保健食品，含可溶性固形物13.6％～16.8％，总糖和果胶含量分别为22.40％、9.97％，核仁中脂肪和蛋白质含量分别为43.08％、30.72％，果汁有机酸含量和表观糖度进行了测定，其果汁表观糖度含量为13.0°BX，属中等水平，有机酸含量为2.923g/100m L，比其他水果含量高许多。除以上营养物质，樱桃李果实还有有机酸、氨基酸、花青素、多酚、微量元素等活性物，樱桃李果实中尤其以樱桃李皮中的花青素含量最高。
花青素，属于黄酮类物质，是广泛存在于植物界中的一种天然水溶性色素。研究表明花青素具有很多生理活性，如抗氧化，可预防由氧化损伤所引起的糖尿病，心脑血管疾病，保护肝脏，抑制肿瘤细胞生长、抑制炎症过敏等活性，因此长期摄入适量花青素的食品被认为是对细胞起促进作用的。此外，由于花青素分布广泛，在自然界中含量丰富，因此在食品天然色素、化妆品、医药等方面有着巨大的应用潜力，引起了人们广泛的研究兴趣。
目前有关樱桃李皮樱花青素的提取工艺较少有报道。花青素的稳定性较差，它受pH、温度、光照、化学结构、金属离子、辅色剂等的影响，采取有效的提取工艺以从樱桃李中提取制备具有高活性的花青素具有较好的发展应用前景，对充分开发樱桃李皮资源具有重要意义。
发明内容
本发明旨在克服现有技术中樱桃李皮中花青素提取研究的缺陷和不足，提供一种樱桃李皮花青素的提取方法，本发明提供的提取工艺具有较高的提取率，所得樱桃李皮樱桃李皮花青素提取物中的有效成分含量高、杂质少，具有较好的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-70℃～-80℃，时间为40h～60h，真空压15Pa～25Pa；
S2.花青素提取：将S1中的预处理粉末进行花青素提取得到樱桃李皮花青素粗提取液，过滤浓缩得到花青素粗提物，纯化即得樱桃李皮花青素。
为最大程度的保护樱桃李皮中的功效成分不被破坏，本发明选用冷冻干燥技术来处理樱桃李皮，发明人发现冷冻干燥技术中的冷冻温度和真空度对樱桃李皮中有效成分的提取和提取率的影响较大，当冷冻干燥的工艺条件为冷冻温度-70℃～-80℃、冷冻时间40h～60h、真空压15Pa～25Pa时，冷冻干燥处理后的樱桃李皮不仅具有较高的提取率，且所提取得到的樱桃李皮花青素提取物还具有较高的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性。真空度过低会使樱桃李皮中的水分升华不彻底，冻干效果较差，而真空度过高则对仪器要求高，能耗大并会缩短仪器的使用寿命。冷冻温度过高会造成樱桃李皮样品冷冻不彻底，干燥效果较差，冷冻温度过高或过低均会对仪器有较大损耗，并且冷冻温度过低会造成能耗升高。
本发明对樱桃李皮冷冻干燥后再提取能够最大程度的保护樱桃李皮中的有效成分，并提高樱桃李皮花青素的提取率，使最终得到的樱桃李皮花青素提取物具有较好的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性，樱桃李皮提取物中的黄酮含量高达40％～70％，总抗氧化值在1.2mmol以上，抑制酪氨酸酶活性达到85％以上。
优选地，S1中所述真空冷冻干燥温度为-70℃～-78℃，真空度为15Pa～20Pa，干燥时间为40h～48h。
优选地，S1中所述真空冷冻干燥温度为-78℃，真空度为20Pa，干燥时间为48h。
优选地，所述打浆为在250W条件下打浆5min。
优选地，S1中所述粉碎为粉碎至颗粒为40～80目。
优选地，S2中所述纯化采用大孔树脂纯化，所述大孔树脂为ADS-17、D101、D3520或DA201-C。更优选为DA201-C大孔树脂。
ADS-17、D101、D3520或DA201-C大孔树脂可以使樱桃李皮花青素粗提物中的黄酮类化合物能够与杂质更好、更快的分离，DA201-C大孔树脂来纯化樱桃李皮花青素粗提物时可以最大限度的除去粗提物中的杂质，并富集樱桃李皮花青素的含量，采用DA201-C大孔树脂纯化得到的樱桃李皮花青素提取物中黄酮含量高，且纯化时间短，相对于其他树脂材料，纯化时间缩短了50％，而选用其它大孔树脂的分离时间长且分离效果不佳。
优选地，所述大孔树脂纯化的洗脱液为体积分数为30％～90％的乙醇溶液。
更优选地，所述大孔树脂纯化的洗脱液为体积分数为75％的乙醇溶液。采用乙醇作为洗脱液，可在得到纯度较高的樱桃李皮花青素化合物同时最大限度避免其它有机溶剂对目标产物的污染，保证了其使用到化妆品的安全性。
优选地，所述大孔树脂纯化的条件为：所述大孔树脂纯化的条件为：粗提物与大孔树脂柱体积之比为1:3～1:20，洗脱流速为1.0mL/min～5.0mL/min，洗脱3～7个柱体积。
优选地，S2中所述提取为水浴提取、超声提取或微波提取。
优选地，S2中所述提取为超声提取。超声波提取的理论依据是利用超声波热学机理、超声波机械机制和空化作用，使植物细胞壁破裂而将目标产物释放到提取液中。超声波提取与水浴提、微波提取相比，其提取速率更快，处理量更高，且提取液中的杂质较传统方法低。
优选地，S2中所述超声提的条件为：取液为酸化乙醇溶液，料液比为1:5～1:40，提取温度30℃～80℃，提取时间30min～150min，超声功率200w～800w，酸化乙醇溶液的乙醇浓度为20％～80％，盐酸浓度为0.05％～1.00％。
优选地，酸化乙醇溶液的乙醇浓度为40％～80％。
优选地，S2中所述过滤为真空抽滤，真空度为-0.1MPa、滤纸孔径为15um～20um。
优选地，S2中所述浓缩为在-0.1MPa真空、旋转速度为115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下浓缩。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提供了一种樱桃李皮花青素的提取方法，通过对樱桃李皮进行冷冻干燥后再提取，提取液经过滤、减压浓缩后，再采用大孔树脂进行纯化，得到的花青素提取物提取率在3％以上，花青素提取物中的有效成分含量高、杂质少，樱桃李皮提取物中的黄酮含量高达40％～70％，具有较好的抗氧化效果和抑制酪氨酸酶活性，总抗氧化值在1.2mmol以上，抑制酪氨酸酶活性达到85％以上，提取物安全可靠，可广泛应用于化妆品制备领域。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非另有说明，本发明实施例采用的原料试剂为常规购买的原料试剂。
实施例1
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-78℃，时间为48h，真空压20Pa，粉碎至粒径为60目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在超声功率600W，料液比1：30，乙醇浓度80％，提取时间为60min，提取温度60℃、盐酸浓度0.1％的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过DA201-C大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
实施例2
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-70℃，时间为40h，真空压15Pa，粉碎至粒径为40目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在超声功率500W，料液比1：20，乙醇浓度50％，提取时间为100min，提取温度70℃、盐酸浓度0.05％的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过大孔树脂ADS-17，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
实施例3
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-80℃，时间为60h，真空压25Pa，粉碎至粒径为80目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在微波功率400W，料液比1：30，乙醇浓度80％，提取时间为60min，提取温度60℃的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物液；
将樱桃李皮花青素粗提取物过大孔树脂D101大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
实施例4
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-80℃，时间为60h，真空压25Pa，粉碎至粒径为40目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮烘干样，在超声功率400W，料液比1：30，乙醇浓度40％，提取时间为100min、提取温度50℃的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过大孔树脂D3520大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
实施例5
一种樱桃李皮花青素的提取方法，与实施例1基本相同，区别在于，其中真空冷冻干燥温度为-80℃。
实施例6
一种樱桃李皮花青素的提取方法，与实施例1基本相同，区别在于，其中真空冷冻干燥温度为-70℃。
实施例7
一种樱桃李皮花青素的提取方法，与实施例1基本相同，区别在于，其中真空冷冻干燥时间为45h。
实施例8
一种樱桃李皮花青素的提取方法，与实施例1基本相同，区别在于，其中真空冷冻干燥真空压为15Pa。
对比例1
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮进行打浆处理；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在超声功率600W，料液比1：30，乙醇浓度80％，提取时间为60min，提取温度60℃、盐酸浓度0.1％的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过DA201-C大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
对比例2
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮进行打浆处理将新鲜樱桃李皮放入60℃烘箱烘72h，得到含水量为8.75％樱桃李皮干样，高速粉碎机粉碎，粉碎至粒径为X目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在超声功率600W，料液比1：30，乙醇浓度80％，提取时间为60min，提取温度60℃、盐酸浓度0.1％的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过DA201-C大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
对比例3
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-58℃，时间为48h，真空压20Pa，粉碎至粒径为60目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在超声功率600W，料液比1：30，乙醇浓度80％，提取时间为60min，提取温度60℃、盐酸浓度0.1％的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过DA201-C大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
对比例4
一种樱桃李皮花青素的提取方法，包括如下步骤：
S1.樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-88℃，时间为48h，真空压30Pa，粉碎至粒径为60目；
S2.花青素提取：称取3.00g樱桃李皮粉末，在超声功率600W，料液比1：30，乙醇浓度80％，提取时间为60min，提取温度60℃、盐酸浓度0.1％的条件下提取，得樱桃李皮花青素粗提取液；
将樱桃李皮花青素粗提取液在-0.1MPa真空、孔径15～20um双层滤纸条件下过滤，然后在-0.1MPa的真空、旋转速度115rpm/min，蒸发温度45℃，循环冷凝温度2℃的条件下减压浓缩得到樱桃李皮花青素粗提物；
将樱桃李皮花青素粗提取物过DA201-C大孔树脂，樱桃李花青素粗提液与大孔树脂柱体积之比为1:5，，采用体积分数为75％的乙醇溶液作为洗脱液，洗脱流速为3.0mL/min，洗脱3～7个柱体积，即得樱桃李皮花青素提取物。
对比例5
一种樱桃李皮花青素的提取方法，与实施例1基本相同，其区别在于真空干燥时间为38h。
对比例6
一种樱桃李皮花青素的提取方法，与实施例1基本相同，其区别在于真空干燥真空压为10Pa。
结果检测
对实施例1～8和对比例1～6的提取物中花青素含量，抗氧化值和抑制络氨酸酶活性进行检测，检测结果见表2。
(1)提取率
提取率是指得到的樱桃李花青素提取物经冷冻干燥后中测定其花青素含量，花青素含量与3.00g樱桃李粉末的比值即为花青素的提取率。
(2)花青素含量
总花青素含量的测定采用的是HPLC法，检测条件如下：
色谱柱：Agilent XDB C18柱(4.6×250mm，5μm)；
流动相：A～乙腈，B～2％甲酸水溶液；
0～20min，6％～16％A；
20～30min，16％～23.5％A；
30～40min，23.5％～50％A；
40～45min，50％A；
45～46min，50％～6％A；
流速：0.8mL/min；柱温：28℃；进样量：10μL；检测波长：520nm。已花青素作为标准品使用以上方法得到峰面积(Y)与花青素浓度(A)的线性回归方程为Y＝11092.44A－39.44(r＝0.9997)，根据标准曲线计算花青素含量。
(3)抗氧化活性
DPPH清除率测定
准确称取20mgDPPH，用甲醇定容至500mL，得0.04mg/mL母液，取0.2mL适当浓度样品液于20mL试管中，加入7.8mL上述DPPH溶液，在避光条件下反应30min后，在517nm条件下测吸光值。另配置不同浓度的DPPH梯度溶液，取8mL于20mL试管中在上述条件下反应测定，得到以进样浓度(c)对吸光度(A)的线性回归方程为A＝20.536c－0.0106(r＝0.9999)。根据标准曲线计算反应后样品中DPPH浓度。依据公式Y＝(S-N)/S*100计算样品中DPPH的清除率。(S为空白样中DPP浓度，N为样品中DPPH浓度。)
FRAP法测总抗氧化值
FRAP工作液现用现配：由25mL 300mmol/L PH3.6的醋酸盐缓冲液，2.5mL 10mmol/LTPTZ溶液，2.5mL 20mmol/LFeCl3溶液混合而成。
分别吸取一定梯度浓度的FeSO4标准液0.1mL，加入3mLFRAP工作液，再加入0.3mL超纯水，混均，准确反应5min，于593nm处测定其吸光值，用超纯水调零，绘制标准曲线，由上述方法以进样浓度(c)对吸光度(A)的线性回归方程为A＝0.5975c+0.0311(r＝0.9999)。
样品的测定：量取0.1mL的样品溶液，在以上条件下测定样品的总抗氧化值。样品的抗氧化活性(FRAP值)以达到相同吸光度所需FeSO4的毫摩尔数来表示。
还原力的测定
采用Oyaiaz方法测定样品的还原力：
0.5mL样品溶液中分别加入0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.6)2.5mL和1％铁氰化钾溶液2.5mL，混合均匀后置于50℃水中反应20min然后加入10％三氯乙酸溶液2.5mL，3000r/min离心10min，取2.5mL上清液，依次加入2.5mL蒸馏水和0.5mL0.1％三氯化铁溶液，充分混合，700nmchu测定样品的吸光值，吸光值越高，还原能力越强。
(4)抑制酪氨酸酶活性
用微量移液器分别按入如下表1的体积准确吸取T1、T2、T3、T4中的L-酪氨酸、PBS缓冲液及样品的反应液分别置于4个PE管中，混匀，37℃恒温10min，然后在T2、T4中分别加入1mL的酪氨酸酶，反应10min，快速用紫外分光光度计在475nm处测定其吸光度AT1、AT2、AT3、AT4。按以下公式计算样品抑制酪氨酸酶的活性：酪氨酸酶活性抑制率＝[1-(AT4-AT3)/(AT2-AT1)]×100％其中，AT1：未加样品且未加酪氨酸酶的反应液在475nm处测得的吸光度AT2：未加样品加酪氨酸酶的反应液在475nm处的吸光度AT3：加样品而未加酪氨酸酶的反应液在475nm处测得的吸光度AT4：加样品和加酪氨酸酶的反应液在475nm处测得的吸光。
表1反应液组成
表2樱桃李皮花青素提取物的性能测试
从上表数据可以看出，本发明的实施例的提取率在3％以上，DPPH清除率80％左右，总抗氧化值也均在1mmol/Fe2+以上，抑制络氨酸酶活性在85％左右，均高于对比例，可见只有在本发明的特定条件下的真空冷冻干燥预处理才能够很好的提高樱桃李皮花青素的提取率，才能对提取物的抗氧化性能和抑制络氨酸酶活性性能有很好的提升效果，本发明的预处理方法及其预处理条件都是极其重要的。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种樱桃李皮花青素的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1. 樱桃李皮预处理：将樱桃李皮经过打浆、真空冷冻干燥、粉碎预处理，得到樱桃李皮预处理粉末，其中真空冷冻干燥温度为-70℃～-80℃，时间为40h～60h，真空压15Pa～25Pa；
S2. 花青素提取：将S1中的预处理粉末进行花青素提取得到樱桃李皮花青素粗提取液，过滤浓缩得到花青素粗提物，纯化即得樱桃李皮花青素。
2.如权利要求1所述提取方法，其特征在于，S1中所述真空冷冻干燥温度为-70℃~-78℃，真空度为15Pa~20Pa，干燥时间为40h~48h。
3.如权利要求1所述提取方法，其特征在于，S1中所述真空冷冻干燥温度为-78℃，真空度为20Pa，干燥时间为48h。
4.如权利要求1~3任一项所述提取方法，其特征在于，S1中所述粉碎为粉碎至颗粒为40~80目。
5.如权利要求1~3任一项所述提取方法，其特征在于，S2中所述纯化采用大孔树脂纯化，所述大孔树脂为ADS-17、D101、D3520或DA201-C。
6.如权利要求5所述提取方法，其特征在于，所述大孔树脂纯化的洗脱液为体积分数为30%～90%的乙醇溶液。
7.如权利要求5所述提取方法，其特征在于，所述大孔树脂纯化的条件为：粗提物与大孔树脂柱体积之比为1:3～1:20，洗脱流速为1.0 mL/min～5.0mL/min，洗脱3～7个柱体积。
8.如权利要求1~3任一项所述提取方法，其特征在于，S2中所述提取为水浴提取、超声提取或微波提取。
9.如权利要求8所述提取方法，其特征在于，S2中所述超声提取的提取液为酸化乙醇溶液，酸化乙醇溶液的乙醇浓度为20%~80%，盐酸浓度为0.05%~1.00%。
10.如权利要求8所述提取方法，其特征在于，S2中所述超声提取的条件为：料液比为1:5~1:40，提取温度30℃~80℃，提取时间30min~150min，超声功率200w~800w。
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114532528A (zh) * | 2020-11-26 | 2022-05-27 | 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 | 红肉苹果和樱桃李组合物及其在抗血栓方面的应用 |
| CN114532466A (zh) * | 2020-11-26 | 2022-05-27 | 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 | 红肉苹果和樱桃李组合物及其在降血糖方面的应用 |
| CN114632038A (zh) * | 2022-02-17 | 2022-06-17 | 广州丸美生物科技有限公司 | 美白防晒护肤基质及其制备方法和化妆品及其制备方法 |
| CN114642625A (zh) * | 2022-02-17 | 2022-06-21 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种美白保湿中药组合物及其制备方法和应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106420521A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-02-22 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种金线莲黄酮的提取工艺及其在护肤产品中的应用 |
| CN107032994A (zh) * | 2017-04-14 | 2017-08-11 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种迷迭香酸的提取工艺 |
| CN107510629A (zh) * | 2017-09-01 | 2017-12-26 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 射干提取物的提取工艺、射干提取物及其应用以及润肤膏霜 |
-
2018
- 2018-08-16 CN CN201810935257.4A patent/CN108947957A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106420521A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-02-22 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种金线莲黄酮的提取工艺及其在护肤产品中的应用 |
| CN107032994A (zh) * | 2017-04-14 | 2017-08-11 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种迷迭香酸的提取工艺 |
| CN107510629A (zh) * | 2017-09-01 | 2017-12-26 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 射干提取物的提取工艺、射干提取物及其应用以及润肤膏霜 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 刘伟等: "响应面优化野生樱桃李叶总黄酮的超声辅助提取工艺", 《天然产物研究与开发》 * |
| 王春梅等: "野生樱桃李营养成分及抗氧化功能研究进展", 《物生物技术》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114532528A (zh) * | 2020-11-26 | 2022-05-27 | 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 | 红肉苹果和樱桃李组合物及其在抗血栓方面的应用 |
| CN114532466A (zh) * | 2020-11-26 | 2022-05-27 | 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 | 红肉苹果和樱桃李组合物及其在降血糖方面的应用 |
| CN114532466B (zh) * | 2020-11-26 | 2023-12-12 | 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 | 红肉苹果和樱桃李组合物及其在降血糖方面的应用 |
| CN114532528B (zh) * | 2020-11-26 | 2023-12-12 | 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 | 红肉苹果和樱桃李组合物及其在抗血栓方面的应用 |
| CN114632038A (zh) * | 2022-02-17 | 2022-06-17 | 广州丸美生物科技有限公司 | 美白防晒护肤基质及其制备方法和化妆品及其制备方法 |
| CN114642625A (zh) * | 2022-02-17 | 2022-06-21 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种美白保湿中药组合物及其制备方法和应用 |
| CN114642625B (zh) * | 2022-02-17 | 2023-06-27 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种美白保湿中药组合物及其制备方法和应用 |
| CN114632038B (zh) * | 2022-02-17 | 2023-12-29 | 广州丸美生物科技有限公司 | 美白防晒护肤基质及其制备方法和化妆品及其制备方法 |
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