TW202220680A - 抑制血管新生的組合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本揭露提供一種包含奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌體或其活性物質的組合物及其抑制血管新生的用途。本揭露有潛力應用在對於癌症的化學療法。

Description

抑制血管新生的組合物及其用途

本揭露關於一種用於抑制血管新生的組合物及其用途；更明確地說，係關於一種以包含奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌體或其活性物質的組合物，並藉由施予該組合物以用於抑制血管新生。

血管新生（Angiogenesis）是指在生理上由原來已存在的血管分化新的血管而發展成一個血流供應系統的過程。血管增生分為四個主要過程：（1）利用基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）溶解原有血管之基底膜；（2）內皮細胞的分裂；（3）血管增生因子誘導內皮細胞移動；（4）最後利用細胞的黏附因子形成血管。在胚胎的發展、組織的生長、傷口的癒合、女性生殖循環系統（如排卵、月經及胎盤發展）血管增生均扮演重要的角色（Folkman, 1995）。然而，在腫瘤生長中，腫瘤細胞能夠產生誘導血管新生的血管生成因子，促進血管內皮細胞進行血管增生作用，新生的血管可以為腫瘤的生長帶來養份和氧氣，使腫瘤細胞快速生長及侵襲其他組織，造成遠端轉移。腫瘤細胞若無進行血管增生作用，則無法得到必要的氧氣及養份，所以腫瘤體積只能維持1-2平方公釐（mm ²）的大小。另外，癌症在血管增生臨床研究與應用上，指出癌症治療的二個重要方向：（1）定量血管新生作用來診斷癌症及作為預後指標；（2）藉由抑制血管新生作用來抑制腫瘤生長與轉移。至目前為止，抑制腫瘤細胞的血管增生一直被認為是治療癌症重要的方向，相關研究已受到全世界科學家的重視。

抗腫瘤血管新生療法主要以發展標的治療（targeted therapy）藥物為首要目標，目前在臨床上的治療策略以合併數種血管新生抑制因子療法、合併化學療法及放射療法合併使用等為主。然而，不論單一以抗血管新生藥物或合併其他療法均會產生許多副作用，這些副作用也是導致癌症病人無法順利完成整個療程及合併其他併發症而死亡的主要原因之一。例如，第一個美國FDA核准上市的抗血管新生藥物-癌思停（Avastin®; Bevacizumab）。接受治療的病人會形成血栓、高血壓、腸胃穿孔及傷口癒合異常等（Pavlidis et al., 2013）。益生菌已被美國食品藥物管理局定義為普遍公認為安全食品（Generally Recognized as Safe Foods）。與目前已知抗血管新生藥物相比，益生菌的用於癌症治療有以下優點，（1）對於人體產生的副作用少，未來不論單一給予治療或合併抗血管新生藥物作為佐劑，均可能可提升治療效果及降低治癌藥物的副作用。（2）抗血管新生藥物目前生產大部以單株抗體合成，相較於益生菌的生產成本高出許多，導致終端產品售價亦高。（3）癌症患者在長期的使用許多抗癌藥物治療的過程中，可能會對於藥物產生抗藥性（drug resistance），導致患者復發或癌轉移，然而益生菌應無產生抗藥性之疑慮。另外，臨床研究顯示，多種益生菌能降低術後感染率，增強免疫反應，減輕全身術後發炎反應，改善腸道微生物環境等。此外，名為Prohep的新型混合物益生菌能減弱了肝腫瘤中的血管生成，並抑制腫瘤生長（Li et al., 2016）。由此可知益生菌對於癌症患者不論在手術前、手術後或治療過程中都可提供相當多的助益。因此，

本揭露提供一種抑制血管新生之組合物，其包含一奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌體或一奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質。

較佳地，其中該奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質以下列方法製備： （a）取該菌種接種於固體培養基以進行固態培養以形成菌落； （b）將步驟（a）培養的菌落（colony）接種於液體培養基進行液態培養以得含菌體之液態培養基； （c）將步驟（b）含菌體之液態培養基接種於發酵槽進行液態放大以得菌液； （d）將步驟（c）的該菌液冷凍乾燥作為菌粉；及 （e）將步驟（d）的該菌粉以一醇類作為溶劑進行萃取以得醇萃物。

較佳地，步驟（c）與步驟（d）之間進一步包含將步驟（c）的菌液離心以得菌泥，並將該菌泥冷凍乾燥作為菌粉的步驟。

較佳地，該奇異球菌屬為選自由 Deinococcus grandis（BCRC 17376）、 Deinococcus radiodurans（BCRC 12827）、 Deinococcus indicus（BCRC 17379）、 Deinococcus proteolyticus（BCRC 17377）、 Deinococcus ficus（BCRC 17568）、 Deinococcus deserti（BCRC 17541）、 Deinococcus geothermalis（BCRC 17378）所構成的群組中的一種或其組合。

較佳地，該冷凍乾燥的溫度為-196至-40℃。

較佳地，該醇類為甲醇、乙醇、異丙醇或其組合。

較佳地，該醇類所添加的量為菌粉體積的約9至11倍體積。

較佳地，該萃取係超音波震盪萃取約0.5至1.5小時。

較佳地，如前述的任一組合物，其包含一種選自下列群組的添加劑：賦型劑、防腐劑、稀釋劑、填充劑、吸收促進劑、甜味劑或其組合。

較佳地，如前述的任一組合物，其為一藥品、飼料、飲料、營養補充品、乳製品、食品或保健食品。

較佳地，如前述的任一組合物，其形態為粉劑、錠劑、造粒、栓劑、微膠囊、安瓶、液劑噴劑或塞劑。

本揭露再提供一種用於製備抑制血管新生之醫藥組合物的用途，其中該醫藥組合物包含一奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌體。

本揭露更提供一種用於製備抑制血管新生之醫藥組合物的用途，其中該醫藥組合物包含一奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質。

較佳地，如前述的用途，其中該奇異球菌屬為選自由 Deinococcus grandis（BCRC 17376）、 Deinococcus radiodurans（BCRC 12827）、 Deinococcus indicus（BCRC 17379）、 Deinococcus proteolyticus（BCRC 17377）、 Deinococcus geothermalis（BCRC 17378）、 Deinococcus ficus（BCRC 17568）、 Deinococcus deserti（BCRC 17541）所構成的群組中的一種或其組合。

較佳地，該奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質是以前述任一方法所製備。

較佳地，該血管新生為新生的血管長度或密度。

較佳地，抑制該血管新生為，相對於未施予該組合物所新生的血管長度，施予該組合物所新生的血管長度為小於60%。

較佳地，抑制該血管新生為，相對於未施予該組合物所新生的血管長度，施予該組合物所新生的血管長度的抑制率為大於40%。

菌種來源

本揭露的實施例中用以製備試驗物質所使用的菌種，購自食品工業發展研究所生物資源保存與研究中心。該等菌種的名稱、寄存編號如下表1，並為於本揭露的說明書中方便引述，根據其對應編號稱為幾號菌，例如編號1號的菌種就稱為1號菌。但本揭露所述的菌種不限於由此管道取得，所屬技術領域中具有通常知識者亦可由其他微生物菌株保存單位取得該等奇異球菌屬的菌種。

表1：菌種

編號	名稱	寄存編號
1	Deinococcus grandis	BCRC 17376
2	Deinococcus radiodurans	BCRC 12827
3	Deinococcus indicus	BCRC 17379
4	Deinococcus proteolyticus	BCRC 17377
5	Deinococcus ficus	BCRC 17568
6	Deinococcus deserti	BCRC 17541
7	Deinococcus geothermalis	BCRC 17378
8	Deinococcus grandis	BCRC 17376

菌種培養

將如上表所購入的奇異球菌屬的菌種，勾取奇異球菌屬的菌種接種於固態培養基上，以進行固態培養來活化菌種並形成菌落（colony）。在一較佳的實施態樣中，該固態培養的溫度為30至55℃，更佳為32至45℃。在一較佳的實施態樣中，該固態培養的時間為2至10天，更佳為5至7天。在一較佳的實施態樣中，該固態培養基為MRS agar。待固態培養基上的菌落生長完成後，將該菌落連同固態培養基接種於錐形瓶中的液態培養基，以進行液態培養來獲得含菌體的液態培養基。在一較佳的實施態樣中，液態培養的溫度為30至55℃，更佳為32至45℃。在一較佳的實施態樣中，液態培養的酸鹼值為pH5.0至8.0，更佳為pH6.0至7.0。在一較佳的實施態樣中，於通氣量0至1vvm氮氣或二氧化碳、速率10至100rpm的條件下液態培養。在一較佳的實施態樣中，液態培養的時間為16至28小時，更佳為22小時。在一較佳的實施態樣中，液態培養基為MRS液態培養基。在一較佳的實施態樣中，液態培養基的配方如下表2所示。待液態培養基中的菌體生長完成後，將該菌體連同液態培養基接種於發酵槽中，以進行液態放大來獲得含菌液。在一較佳的實施態樣中，發酵槽培養的溫度為30至55℃，更佳為32至45℃。在一較佳的實施態樣中，發酵槽培養的時間為20至26小時，更佳為22小時。

表2

成分	比例（重量百分比）
碳源	0至10%
豆漿	0.1~5%
氮源	0.1~5%
離子	0.01~2%
水	剩餘部分

菌粉製備

待菌種於液態培養完成生長後，收集包含有菌體之液態培養基的菌液。於另一實施態樣中，將該菌液進行離心、去除用於發酵的液態培養基以獲得菌泥。在一較佳的實施態樣中，包含有菌體之液態培養基的離心速率為1000至15000rpm。將取得之菌液或菌泥與保護劑（保護劑為6-30%的脫脂奶粉）混合後冷凍乾燥製得菌粉，凍乾後之菌粉置於低溫保存。在一較佳的實施態樣中，冷凍乾燥的溫度設定於-196至-40℃。在一較佳的實施態樣中，冷凍乾燥時間為16至72小時。在一較佳的實施態樣中，保存溫度為-30℃至0℃。保存之菌粉作為活性物質以備用於以下動物實驗的試驗物質。在一較佳的實施態樣中，1至7號菌的菌粉來自於將菌液進行冷凍乾燥而得，而8號菌的菌粉則是採用1號菌的菌液，經離心後的菌泥再進行冷凍乾燥而得。

本發明之奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質用於製備試驗物質在不影響活性的前提下，不限於前述菌粉的型態，亦包含前述將菌體進行液態培養後所得含菌體之液態培養基（菌液）狀態。

試驗物質

將菌種的菌粉加入萃取用的溶劑中溶解。在一較佳的實施態樣中，該溶劑為醇類、酯類、烷類、鹵烷類或其組合。在一較佳的實施態樣中，該溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇或其組合。在一較佳的實施態樣中，該甲醇的添加量較佳為相對於菌粉的9至11倍體積，更佳為10倍體積。溶劑中溶解有菌粉的萃取液進行震盪萃取。在一較佳的實施態樣中，該震盪萃取為超音波震盪萃取。在一較佳的實施態樣中，該震盪萃取時間較佳為0.5至1.5小時，更佳為1小時。將經震盪萃取後的萃取液以濾紙過濾後取上清液，經減壓濃縮得到菌種萃取物以作為本發明之試驗物質，供後續實驗之用。

試驗動物

試驗動物由樂斯科生物科技公司 （BioLASCO Taiwan Co., Ltd., Taiwan） 訂購18隻8週齡，且體重介於201-225g之雄性SD大白鼠。將動物飼養於不銹鋼鼠籠，動物房溫度控制在22±2℃，濕度控制在60-80%，光照與黑暗各十二小時 （07:00-19:00為光照期；19:00-07:00為黑暗期）。試驗期間，大鼠自由攝食飼料和蒸餾水。

主動脈環試驗（Aortic ring assay）

研究血管增生方式主要分為體內（in vivo）、離體（ex vivo）與體外（in vitro）模式，三者分別有各自的利弊之處。動物體內模式試驗模擬自然的體內血管增生過程，但可能會受宿主體內自體免疫反易干擾。細胞體外模式培養環境控制性好、個體差異小，但僅能觀察細胞的增生與轉移。然而，大鼠動脈環模式（離體模式）則是結合了體內與體外模式的優點，可在管控的環境生長並具有體內血管細胞分化的步驟。

本實驗採用Iqbal等人（2017）之方法，並稍作修正，方法詳述如下。將雄性Sprague Dawley （SD）大鼠昏迷後，於無菌操作檯內取下大鼠主動脈後，放置1倍冰的PBS中，並去除主動脈周圍結締組織後，將主動脈橫切成1 mm主動脈環。取Matrigel 200 μL/well加入12孔盤後，將12孔盤放置37℃、5% CO ₂培養30分鐘，待Matrigel凝固後，將大鼠主動脈環放置裡面，再加入Matrigel 300 μL/well放置37℃、5% CO ₂培養30分鐘，待上層Matrigel凝固後加入EBM-2 1 mL於37℃、5% CO ₂下培養24小時後，去除EGM-2培養基，加1 mL EBM （含2% FBS、1% penicillin streptomycin）及試驗物質（0.05或0.5 mg/mL的奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的萃取物、40 μM CUM），於37℃、5% CO ₂下培養，兩天換一次培養基及試驗物質。培養7天後，將放置顯微鏡（Nikon, TYO, JP）倍率40倍視野以拍攝影像（Canon, TYO, JP），並以image J 1.49v軟體分析血管增生長度。

試驗結果

圖一顯示主動脈環的試驗中，未施予試驗物質的控制組和施予試驗物質（1號菌至4號菌）的實驗組，兩組的主動脈環所新生的血管於顯微鏡下的影像。從作為實驗動物的大鼠所取下的主動脈環，其橫切口朝向顯微鏡的觀察方向，並配置於顯微鏡下的左側，故顯微鏡影像中僅顯示出主動脈環的右半部。從該主動脈環的右半部，可觀察到由細微的線所構成的絲狀或網狀的構造，其向該主動脈環的相反方向延伸、擴展。顯微鏡下影像中構成絲狀或網狀的構造，即從主動脈環所新生長出的血管。控制組中的主動脈環上佈滿血管長度較長且血管間隙較密的新生血管，甚至超過了顯微鏡畫面的中線。相對於此，實驗組中施予0.05mg/mL或0.5mg/mL試驗物質的1號菌的主動脈環上，皆未見明顯的血管新生。實驗組中施予0.05mg/mL試驗物質的2號菌的主動脈環上，觀察到新生血管，但長度或密度不及於控制組；0.5mg/mL試驗物質的2號菌的主動脈環上，則未見明顯的血管新生。實驗組中施予0.05mg/mL試驗物質的3號菌的主動脈環上，未觀察到新生血管，；0.5mg/mL試驗物質的3號菌的主動脈環上，觀察到血管新生，但其血管長度明顯短於控制組。實驗組中施予0.05mg/mL或0.5mg/mL試驗物質的4號菌的主動脈環上，皆觀察到血管新生，但其血管長度短於控制組、血管分布集中、密度也較低。

圖二顯示圖一的主動脈環上所新生的血管經imageJ軟體分析血管長度所製得的長條圖。以控制組所新生的血管長度作為基準（100%），實驗組中的新生血管長度的比例，和從新生血管長度的比例反推出抑制血管新生的抑制率，例如，新生血管比例為2%，其抑制率則為98%（100%-2%=98%）。意即，新生血管%越低，抑制率越高，顯示如下表3：

表3：新生血管比例與抑制率

菌種編號	試驗物質濃度	新生血管（%）	抑制率（%）
1	0.05mg/mL	2	98
0.5mg/mL	0	100
2	0.05mg/mL	48	52
0.5mg/mL	0	100
3	0.05mg/mL	0	100
0.5mg/mL	17	83
4	0.05mg/mL	55	45
0.5mg/mL	26	74

圖三顯示主動脈環的試驗中，未施予試驗物質的控制組和施予試驗物質（5號菌至8號菌）的實驗組，兩組的主動脈環所新生的血管於顯微鏡下的影像。從作為實驗動物的大鼠所取下的主動脈環，其橫切口朝向顯微鏡的觀察方向，並配置於顯微鏡下的左側，故顯微鏡影像中僅顯示出主動脈環的右半部。從該主動脈環的右半部，可觀察到由細微的線所構成的絲狀或網狀的構造，其向該主動脈環的相反方向延伸、擴展。顯微鏡下影像中構成絲狀或網狀的構造，即從主動脈環所新生長出的血管。控制組中的主動脈環上佈滿血管長度較長且血管間隙較密的新生血管，甚至超過了顯微鏡畫面的中線。相對於此，實驗組中施予0.05mg/mL試驗物質的5號菌的主動脈環上，血管新生的長度接近顯微鏡下畫面的中線；0.5mg/mL試驗物質的5號菌的主動脈環上，有觀察到血管新生，但其血管長度及密度相較於控制組明顯短及少許多。實驗組中施予0.05mg/mL試驗物質的6號菌的主動脈環上，觀察到新生血管分布在突出的主動脈環上，但長度或密度不及於控制組；0.5mg/mL試驗物質的6號菌的主動脈環上，所觀察到的血管新生的長度長於同菌種低濃度（0.05mg/mL）所新生的血管，0.5mg/mL試驗物質的6號菌的血管分布密度也較同菌種低濃度（0.05mg/mL）來得高。實驗組中施予0.05mg/mL或0.5mg/mL試驗物質的7號菌的主動脈環上，皆觀察到新生血管，同菌種低濃度（0.05mg/mL）所新生的血管的長度和密度都高於同菌種高濃度（0.5mg/mL）所新生的血管。實驗組中施予0.05mg/mL或0.5mg/mL的8號菌的主動脈環上，皆未見血管新生。

圖四顯示圖三的主動脈環上所新生的血管經imageJ軟體分析血管長度所製得的長條圖。以控制組所新生的血管長度作為基準（100%），實驗組中的新生血管長度的比例，和從新生血管長度的比例反推出抑制血管新生的抑制率，顯示如下表4：

表4：新生血管比例與抑制率

菌種編號	試驗物質濃度	新生血管（%）	抑制率（%）
5	0.05mg/mL	43	57
0.5mg/mL	5	95
6	0.05mg/mL	18	82
0.5mg/mL	57	43
7	0.05mg/mL	39	61
0.5mg/mL	9	91
8	0.05mg/mL	0	100
0.5mg/mL	0	100

從上述的實驗結果可知，本揭露所提供的6種菌種的活性物質，在施予試驗動物的主動脈環後，相對於未施予該等菌種的活性物質的主動脈環，其由主動脈環所新生的血管在長度上短且密度上低，皆小於60%。此外，由新生血管的長度的比例，計算出抑制血管新生的抑制率。從上述的表3與表4來看，本揭露所提供的6種菌種的活性物質，在施予試驗動物的主動脈環後，相對於未施予該等菌種的活性物質的主動脈環，可達到大於40%的血管新生抑制率，甚至沒有血管新生而使抑制率高達100%。此實驗結果顯示，奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種或其活性物質能有效地抑制血管新生。

於一較佳的實施例中，抑制該血管新生為，相對於未施予該組合物所新生的血管長度，施予該組合物所新生的血管長度為小於60%、50%、40%、30%、20%、10%。於一較佳的實施例中，抑制該血管新生為，相對於未施予該組合物所新生的血管長度，施予該組合物所新生的血管長度的抑制率為大於40%、50%、60%、70%、80%、90%。

本揭露提供一組合物，其包含一奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌體或一奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質，該組合物具有抑制血管新生的功效。於一較佳的實施例中，該奇異球菌屬為選自由 Deinococcus grandis（BCRC 17376）、 Deinococcus radiodurans（BCRC 12827）、 Deinococcus indicus（BCRC 17379）、 Deinococcus proteolyticus（BCRC 17377）、 Deinococcus ficus（BCRC 17568）、 Deinococcus deserti（BCRC 17541）、 Deinococcus geothermalis（BCRC 17378）所構成的群組中的一種或其組合。

該組合物進一步包含添加劑。在一較佳的實施態樣中，該添加劑可為賦型劑、防腐劑、稀釋劑、填充劑、吸收促進劑、甜味劑、或其組合。該賦型劑可選自檸檬酸鈉、碳酸鈣、磷酸鈣、蔗糖或其組合。該防腐劑可延長醫藥組合物的儲藏期限，例如苯甲醇、對羥基苯甲酸（parabens）。稀釋劑可選自水、乙醇、丙二醇、甘油或其組合。填充劑可選自乳糖、牛乳糖、高分子量舉乙二醇或其組合。吸收促進劑可選自二甲基亞碸（DMSO）、月桂氮卓酮、丙二醇、甘油、聚乙二醇或其組合。甜味劑可選自安塞甜（Acesulfame K）、阿斯巴甜（aspartame）、糖精（saccharin）、三氯蔗糖／蔗糖素（sucralose）、紐甜（neotame）或其組合。除上述所列舉的添加劑以外，在不影響組合物的醫藥效果前提下，可依需求選用適合的其他添加劑。

該組合物於醫藥領域中可開發為不同商品。在一較佳實施態樣中，該組合物為一藥品、飼料、飲料、營養補充品、乳製品、食品或保健食品。

該組合物可根據受施予者之需要，而採用不同形態。在一較佳實施態樣中，該組合物的形態為粉劑、錠劑、造粒、栓劑、微膠囊、安瓶（ampoule/ampule）、液劑噴劑或塞劑。

本揭露的組合物可使用於動物或是人類。在不影響菌體或活性物質發揮效果的前提下，包含奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌體或奇異球菌屬（ Deinococcus）的菌種的活性物質的組合物可製為任何藥物型態，並根據藥物型態以適用的途徑施予該動物或人類。

組合物製備

本揭露之菌種若應用於食品用途，則以下組合物1至3之態樣作為例示性實例。

組合物1：取 Deinococcus grandis（BCRC 17376）的菌粉（20 wt%），與作為防腐劑之苯甲醇（8wt%）、作為稀釋劑之甘油（7 wt%）充分混合，並溶於純水（65 wt%）中，存放於4℃備用。前述wt%係指各成分佔組合物總重之比例。

組合物2、3：將組合物1的 Deinococcus grandis（BCRC 17376）的菌粉分別替換為 Deinococcus radiodurans（BCRC 12827）和 Deinococcus proteolyticus（BCRC 17377）的菌粉（20 wt%），其餘組成與組合物1相同。

本揭露之菌種若以液體劑型應用於醫藥用途，則以下組合物4至6之態樣作為例示性實例。

組合物4：取 Deinococcus geothermalis（BCRC 17378）、的菌粉（20 wt%），與作為防腐劑之苯甲醇（8wt%）、作為稀釋劑之甘油（7 wt%）、作為稀釋劑之蔗糖（10 wt%）充分混合，並溶於純水（55 wt%）中，存放於4℃備用。前述wt%係指各成分佔組合物總重之比例。

組合物5、6：將組合物4的 Deinococcus geothermalis（BCRC 17378）分別替換為 Deinococcus ficus（BCRC 17568）和 Deinococcus deserti（BCRC 17541）的菌粉（20 wt%），其餘組成與組合物4相同。

無

圖一顯示控制組與實驗組1號菌至4號菌的大鼠主動脈環分別施予或未施予本發明試驗物質培養後的顯微鏡下所拍攝的影像。

圖二顯示圖一經imageJ軟體分析後的血管長度長條圖。

圖三顯示控制組與實驗組5號菌至8號菌的大鼠主動脈環分別施予或未施予本發明試驗物質培養後的顯微鏡下所拍攝的影像。

圖四顯示圖三經imageJ軟體分析後的血管長度長條圖。

Deinococcus grandis（BCRC 17376）

Deinococcus radiodurans（BCRC 12827）

Deinococcus indicus（BCRC 17379）

Deinococcus proteolyticus（BCRC 17377）

Deinococcus ficus（BCRC 17568）

Deinococcus deserti（BCRC 17541）

Deinococcus geothermalis（BCRC 17378）

Claims (9)

1. 一種抑制血管新生之組合物，其包含一奇異球菌屬（Deinococcus）的菌體或一奇異球菌屬（Deinococcus）的菌種的活性物質； 其中該抑制血管新生係相對於未施予菌體或活性物質之受施者，施予菌體或活性物質之受施者之血管新生受到抑制； 其中該奇異球菌屬（Deinococcus）的菌種的活性物質係以下列方法製備： （a）取該菌種接種於固態培養基以進行固態培養以形成菌落； （b）將步驟（a）培養的菌落（colony）接種於液體培養基進行液態培養以得含菌體之液態培養基； （c）將步驟（b）含菌體之液態培養基接種於發酵槽進行液態放大以得菌液； （d）將步驟（c）的該菌液冷凍乾燥作為菌粉；及 （e）將步驟（d）的該菌粉以一醇類作為溶劑進行萃取以得醇萃物； 其中該奇異球菌屬為Deinococcus indicus（BCRC 17379）、Deinococcus deserti（BCRC 17541）或其組合。
2. 如請求項1所述之組合物，其中步驟（c）與步驟（d）之間進一步包含將步驟（c）的菌液離心以得菌泥，並將該菌泥冷凍乾燥作為菌粉的步驟。
3. 如請求項1所述之組合物，其中該冷凍乾燥的溫度為-196至-40℃。
4. 如請求項1所述之組合物，其中該醇類為甲醇、乙醇、異丙醇或其組合。
5. 如請求項1所述之組合物，其中該醇類所添加的量為菌粉體積的9至11倍體積。
6. 如請求項1所述之組合物，其中該萃取係超音波震盪萃取0.5至1.5小時。
7. 如請求項1至6中任一項所述之組合物，其包含一種選自下列群組的添加劑：賦型劑、防腐劑、稀釋劑、填充劑、吸收促進劑、甜味劑或其組合。
8. 如請求項1至6中任一項所述之組合物，其為一藥品、飼料、飲料、營養補充品、乳製品、食品或保健食品。
9. 如請求項1至6中任一項所述之組合物，其形態為粉劑、錠劑、造粒、栓劑、微膠囊、安瓶、液劑噴劑或塞劑。

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