TW202206423A - 用於突變體ras降解之化合物 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種式(I)化合物：
RB─連接子─ULM (I)，
該化合物結合野生型及突變體RAS蛋白且經由募集E3泛素連接酶來促進降解。亦提供包含該化合物的醫藥組合物及其用途。
Description
本發明大體上係關於雙官能化合物，相較於結合野生型RAS蛋白，該等雙官能化合物優先結合至突變體RAS蛋白(例如KRAS、NRAS及HRAS)且經由募集E3泛素連接酶來促進降解；及該等化合物治療RAS突變相關疾病的用途。
蛋白水解靶向嵌合體(pro
teolysistar
getingc
himera，PROTAC)技術首次描述於2001年(Sakamoto等人, 「Protacs: chimeric molecules that target proteins to the Skp1-Cullin-F box complex for ubiquitination and degradation,」Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
.98
(15): 8554-9)。PROTAC為雙頭異雙官能分子，其能夠藉由誘導選擇性的細胞內蛋白質水解而移除非所需的蛋白質。PROTAC係由兩種蛋白質結合部分組成：一者用於結合E3泛素連接酶且另一者用於結合目標蛋白。PROTAC藉由結合兩種蛋白質而將目標蛋白帶到E3連接酶，引起目標蛋白發生泛素化，以便隨後藉由蛋白酶體降解(Bondeson等人, 「Lessons in PROTAC design from selective degradation with a promiscuous warhead.」 Cell Chem Biol. 25(1): 78-87, 2018)。PROTAC技術已用於若干目標：AR、ER、STAT3、BTK、FLT-3、EGFR、BCR-ABL、BET、BRD7/9、CDK4/6、CK2、ALK、PI3K、MCL-1、PARP1及c-MET。
RAS蛋白係原癌基因且由三種RAS
基因編碼：HRAS
、KRAS
及NRAS
。RAS蛋白在信號轉導路徑中發揮的作用是作為二元開關控制細胞生長及分化，從而使非活性GDP結合狀態轉變為活性GTP結合狀態。突變通常發生於密碼子12、13及61，其引起RAS蛋白之固有GTP酶活性減弱，或阻止GAP結合，活化下游信號傳導路徑且導致腫瘤形成及維持。(Chang等人, 「Detection of N-, H-, and KRAS codons 12, 13, and 61 mutations with universal RAS primer multiplex PCR and N-, H-, and KRAS-specific primer extension」 Clin Biochem. 43(3):296-301, 2010.) RAS基因突變通常發現於多種惡性疾病中，包括胰臟癌(90%)、大腸癌(45%)及肺癌(35%)。在細胞及動物模型中，許多腫瘤類型已顯示與致癌突變體RAS的持續表現相關。由於RAS對GTP及GDP的皮莫耳級親和力，且由於RAS缺乏界限分明的囊袋供小分子高親和力結合用，因此在藥理學上難以靶向RAS，因此通常稱其「難成藥性」(Cox等人, 「Drugging the undruggable Ras: mission possible?」 Nat Rev Drug Discov. 13(11): 828-851, 2014.)。
RASG12C
突變體中的半胱胺酸殘基已被用於設計具有有前景之臨床前活性的共價抑制劑。迄今為止，可利用的RASG12C
共價抑制劑已促成以下各者的開發：ARS-853 (Lito等人, 「Allele-specific inhibitors inactivate mutant KRAS G12C by a trapping mechanism.」 Science. 351(6273): 604-608, 2016)；ARS-1620、AMG-510 (Canon等人, 「The clinical KRAS(G12C) inhibitor AMG 510 drives anti-tumor immunity.」 Nature. 575: 217-223, 2019)及MRTX-849 (Christensen等人, 「The KRASG12C Inhibitor, MRTX849, Provides Insight Toward Therapeutic Susceptibility of KRAS Mutant Cancers in Mouse Models and Patients.」 Cancer Discov. 10(1):54-71, 2020)。RASG12C
抑制劑為致癌RASG12C
之不可逆抑制劑。其藉由傾覆有利於GDP而非GTP的原生核苷酸偏好而以異位方式控制GTP親和力。然而，RASG12C
抑制劑不適用於其他類型的RAS突變，諸如RASG12D
、RASG12V
、RASG12S
、RASG12R
、RASG13D
、RASQ61H
、RASQ61R
等。
為了克服RASG12C
抑制劑僅可靶向RASG12C
的侷限性，RAS上其他若干小分子結合位點也被用於RAS抑制劑的開發上。泛RAS抑制劑，諸如化合物3144 (Brent R. Stockwell等人, Cell 168, 878-889, 2017)，經設計可結合多個位點，從而能夠達成足夠的親和力及選擇性用於藥理學RAS抑制。化合物3144據報導可結合KRAS G12D蛋白上靠近D38、A59及Y32位點的多個鄰近位點(圍繞SW1、SW2及核苷酸結合袋)(Xu, Ke等人, 「Small molecule KRAS agonist for mutant KRAS Cancer therapy.」 Molecular cancer 18(1): 85, 2019)。然而，化合物3144衍生物未展現足以推進臨床試驗的效能。
PROTAC所依賴的策略係將目標蛋白募集至E3泛素連接酶且隨後誘導蛋白酶體介導目標蛋白降解。PROTAC誘導的降解係一種催化過程，在促進所關注之蛋白質發生聚泛素化之後，PROTAC會成功地脫離，從而得到允許PROTAC在極低劑量下發揮作用的極大潛力。因此，藉由PROTAC技術可改善抑制劑如可結合在RAS蛋白之開關I及II區域的化合物3144的效能。在本發明中，吾等展現對RAS降解劑的設計、合成及生物學評價，該等RAS降解劑係基於化合物3144衍生物經由不同種類之連接子與E3連接酶配位體泊利度胺(pomalidomide)/VHL結合。若干種化合物展示出誘導突變體KRAS蛋白降解的活性，且因此具有治療RAS突變相關疾病的潛力。
在一個態樣中，本發明描述一種式(I)之雙官能化合物：
RB─連接子─ULM (I)
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、立體異構體、溶劑合物、水合物、多晶型物、同位素增濃之衍生物或前藥。式(I)之雙官能化合物可誘導RAS蛋白發生泛素化且促進其在細胞中降解。本文所提供之式(I)之雙官能化合物的優勢在於可具有廣泛範圍的藥理學活性，從而降解/抑制幾乎任何蛋白質類別或家族的靶多肽。
在另一態樣中，本發明提供醫藥組合物，其包含有效量之如本文所述的雙官能化合物及醫藥學上可接受之載劑。
在另一態樣中，本發明提供一種使細胞中之目標蛋白發生泛素化且降解的方法，包含使目標蛋白與如本文所述之雙官能化合物接觸。
在另一態樣中，本發明提供一種用於預防、緩解及/或治療有需要之個體之RAS突變相關疾病的方法，包含向該個體投與治療有效量之如本文所述的式(I)之雙官能化合物。
定義
為了使本發明被充分理解，闡述以下實施方式。在說明書中使用以下術語：
必須注意，除非上下文另外明確規定，否則如本文所用，單數形式「一(a/an)」及「該」包括複數個提及物。因此，除非上下文另外需要，否則單數術語應包括複數且複數術語應包括單數。
通常，範圍在本文中用「約」一個特定值及/或至「約」另一個特定值表示。當表示此類範圍時，一個實施例包括一個特定值及/或至另一特定值的範圍。類似地，當使用詞語「約」近似表示數值時，應瞭解特定值形成另一個實施例。進一步應瞭解，各範圍的端點相對於另一端點且獨立於其他端點而言均為顯著的。如本文所用，術語「約」係指±20%、較佳±10%且甚至更佳±5%。
術語「及/或」用於指兩種事物或所提及之兩種事物中之任一者。
術語「治療(treatment)」、「治療(treating)」及「治療(treat)」通常係指獲得所需的藥理學及/或生理學效果。該效果就完全或部分地預防疾病、病症或其症狀而言可為預防性的，且就部分或完全地治癒疾病、病症及/或歸因於其之症狀而言可為治療性的。本文所用之「治療」涵蓋對哺乳動物(較佳人類)之疾病的任何治療，且包括(1)抑制個體之疾病、病症或其症狀的發展，或(2)減輕或緩解個體之疾病、病症或其症狀。
術語「預防(preventing)」或「預防(prevention)」在此項技術中已被認知，且當結合病狀使用時，其包括在該病狀發作之前投與藥劑，相對於未接受該藥劑的個體而言，該藥劑降低個體之醫學病狀之症狀發作頻率或嚴重度或延遲其發作。
術語「個體(individual)」、「個體(subject)」及「患者」可互換使用且係指需要接受診斷、治療或療法的任何哺乳動物個體。
如本文所提供之活性成分的「有效量」術語意謂足以使所需功能得到所需調控的該成分之量。如下文將指出，所需精確量將因個體而異，此視個體之疾病狀態、身體狀況、年齡、性別、物種及體重、組合物之具體特性及配方等而定。可調整劑量方案以誘導最佳治療反應。舉例而言，可每天投與若干個分次劑量，或可如治療情形之緊急狀態所指示按比例減少劑量。因此，無法指定精確的「有效量」。然而，一般技術者僅利用常規實驗便可確定適當有效量。
除非另外說明，否則如本文所用，術語「烷基」係指含有1至12個碳原子之單價飽和直鏈或分支鏈烴基。烷基較佳為C1
-C8
烷基。烷基更佳為C1
-C6
烷基。烷基可經取代或未經取代。C1
-C6
烷基之實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、戊基(包括所有異構形式)及己基(包括所有異構形式)、庚基(包括所有異構形式)及辛基(包括所有異構形式)。
如本文所用，術語「鹵烷基」係指部分或完全鹵化的直鏈或分支鏈烷基。烷基部分如上文所定義。鹵烷基的代表性實例包括(但不限於)氟甲基、氯甲基、溴甲基、二氟甲基、二氯甲基、二溴甲基、三氟甲基、三氯甲基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2,2,2-三氟乙基、3-氟丙基、3-氯丙基、3-溴丙基及其類似基團。
如本文所用，術語「鹵烷氧基」係指另外經由鹵基鍵聯連接的如上文所定義之烷氧基。舉例而言，C1-6
鹵烷氧基係指另外經由鹵基鍵聯連接之具有1-6個碳原子或1-3個碳原子的烷氧基。較佳的鹵烷氧基包括(但不限於) -OCH2
Cl、-OCHCl2
及其類似基團。
除非另外說明，否則如本文所用，術語「伸烷基」係指含有1至12個碳原子且具有兩個單價基團中心之飽和分支鏈或直鏈烴基，該兩個單價基團中心係藉由自親本烷烴之同一個或兩個不同碳原子上移除兩個氫原子而衍生。伸烷基之實例包括(但不限於)：亞甲基(-CH2
-)、1,2-伸乙基(-CH2
CH2
-)、1,3-伸丙基(-CH2
CH2
CH2
-)及1,4-伸丁基(-CH2
CH2
CH2
CH2
-)。
為了得到「伸雜烷基」基團，伸烷基中可存在雜原子，諸如氧、硫及氮(呈三級胺部分的形式)。伸雜烷基之實例包括(但不限於) -CH2
CH2
N(CH3
)2
及-CH2
CH2
OCH2
CH3
。
除非另外說明，否則如本文所用，術語「伸烯基」係指具有至少一個碳碳雙鍵、包含2至12個碳原子且具有兩個單價基團中心的不飽和直鏈或分支鏈烴基，該兩個單價基團中心係藉由自親本烯烴之同一個或兩個不同碳原子移除兩個氫原子而衍生。伸烯基較佳為C2
-C8
伸烯基。伸烯基更佳為C2
-C6
伸烯基。伸烯基基團之實例包括(但不限於)伸乙烯基、伸丙烯基及伸丁烯基。
除非另外說明，否則本文所用的術語「伸炔基」係指具有至少一個碳碳參鍵、包含2至12個碳原子且具有兩個單價基團中心的不飽和直鏈或分支鏈烴基，該兩個單價基團中心係藉由自親本炔烴之同一個或兩個不同碳原子上移除兩個氫原子而衍生。伸炔基較佳為C2
-C8
伸炔基。伸炔基更佳為C2
-C6
伸炔基。伸炔基基團之實例包括(但不限於)伸乙炔基、伸丙炔基及伸丁炔基。
除非另外說明，否則如本文所用，術語「烷氧基」係指通式-O-(烷基)之基團，其中烷基如上文所定義。例示性烷氧基包括(但不限於)甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、二級丁氧基、三級丁氧基、正戊氧基及正己氧基。
如本文所用，術語「碳環基」係指具有環狀組態之單價烴基，包括單環、雙環、三環及更高多環烷基(且當為多環時，包括稠合及橋連的雙環及螺環部分)，其中各環狀部分具有3至12個碳原子。術語「碳環基」包括「芳基」及「環烷基」。
如本文所用，術語「芳基」係指具有共軛π電子系統的全碳單環或稠合環多環芳族基團。芳基在環中可具有6至14個碳原子。例示性芳基包括(但不限於)苯基、聯苯及萘基。
如本文所用，術語「環烷基」係指全碳單環或稠合環(亦即，共享一對相鄰碳原子的環)基團，其中一或多個環不具有完全共軛的π電子系統。例示性環烷基包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、金剛烷基、1-甲基環丙基、2-甲基環戊基及2-甲基環辛基。
如本文所用，術語「伸碳環基」係指具有環狀組態的烴基，包括單環、雙環、三環及更高多環烷基(且當為多環時，包括稠合及橋連的雙環及螺環部分)，其中各環狀部分具有3至12個碳原子且該基團具有兩個單價基團中心，該兩個單價基團中心係藉由自親本基團之同一個或兩個不同碳原子上移除兩個氫原子而衍生。術語「伸碳環基」包括「伸芳基」及「伸環烷基」。例示性伸芳基包括(但不限於)伸苯基、伸聯苯基、伸萘基及其類似基團。例示性伸環烷基包括(但不限於)伸環丙基、伸環丁基、伸環戊基、伸環己基、伸環庚基、伸環辛基、1-甲基伸環丙基、2-甲基伸環戊基及2-甲基伸環辛基。
如本文所用，術語「雜環」與「雜環基」可互換使用。術語「雜環」或「雜環基」係指具有3至14個原子、或者3至12個原子、或者3至10個原子、或者3至8個原子、或者4至7個原子、或者5或6個原子的單環、雙環或多環結構；其中一或多個原子，例如1、2或3個原子，獨立地選自由N、O及S組成之群，其餘環組成原子為碳原子。環結構可為飽和或不飽和的，但不為芳族。例示性雜環包括(但不限於)咪唑基、咪唑啉醯基、咪唑啶基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、吲唑基、吲唑啉基、全氫嗒𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯啶基、吡唑基、吡𠯤基、喹喏啉基、哌啶基、哌喃基、吡唑啉基、哌𠯤基、嘧啶基、嗒𠯤基、嗎啉基、噻嗎啉基、呋喃基、噻吩基、三唑基、噻唑基、咔啉基、四唑基、噻唑啶基、苯并呋喃醯基、噻嗎啉基碸、㗁唑基、苯并㗁唑基、側氧基哌啶基、側氧基吡咯啶基、側氧基氮呯基、氮呯基、異㗁唑基、異噻唑基、呋呫基、四氫哌喃基、四氫呋喃基、噻唑基、噻二唑基、二氧雜環戊烯基、二氧雜環己烯基、氧硫雜環戊烯基、苯并二氧雜環戊烯基、二硫雜環戊烯基、噻吩基、四氫噻吩基、環丁碸基、二㗁烷基、二氧雜環戊烷基、四氫呋喃并二氫呋喃基、四氫哌喃并二氫呋喃基、二氫哌喃基、四氫呋喃并呋喃基，及四氫哌喃并呋喃基。
如本文所用，術語「雜芳基」係指含有1至4個選自S、N及O之雜原子的單環、雙環或三環芳基，且包括具有藉由共價鍵直接連接之兩個此類單環或一個此類單環與一個單環芳環的基團。雜芳基可具有5至14個成環原子，包括1至13個成環碳原子及1至8個各獨立地選自O、S及N之成環雜原子。例示性雜芳基包括(但不限於)噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、異噻唑基、苯并異噻唑基、吡唑基、㗁唑基、苯并㗁唑基、異㗁唑基、苯并異㗁唑基、異噻唑基、三唑基、苯并三唑基、噻二唑基、㗁二唑基、吡啶基、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、吲哚基及吲唑基。
如本文所用，術語「雜環烷基」係指單環或多環(包括2個或更多個稠合在一起的環，包括螺接、稠合或橋連的系統，例如雙環系統)飽和或不飽和非芳族4員至15員環系統，包括1至14個成環碳原子及1至10個各獨立地選自O、S及N的成環雜原子。雜環烷基之實例包括(但不限於)氮雜環丁基、四氫呋喃、二氫呋喃、二㗁烷、嗎啉等。
如本文所用，術語「鹵素」與「鹵基」可互換使用且包括氟、氯、溴及碘。化合物
本文提供結合RAS蛋白且募集E3連接酶以促進RAS蛋白降解的雙官能化合物。在一個態樣中，本發明提供式(I)之雙官能化合物，
RB─連接子─ULM (I)
或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、多晶型物、互變異構體、立體異構體、同位素增濃之衍生物或前藥，
其中：
RB為RAS蛋白結合部分；
ULM為E3泛素連接酶結合部分；且
連接子為共價結合至RB及ULM部分的基團。
本文所述之雙官能化合物與RAS蛋白及E3泛素連接酶發生相互作用。如本文所述，治療作用可為本文所述之化合物降解、調節、結合或修飾RAS蛋白的結果。在不希望受任何特定理論束縛的情況下，治療作用可為本文所述之化合物調節、靶向、結合或修飾E3泛素連接酶的結果。治療作用可為化合物調節、靶向、結合或修飾E3泛素連接酶而將E3泛素連接酶募集至泛素化RAS蛋白且將其標記以用於蛋白酶體降解的結果。特定而言，式(I)之雙官能化合物適用於治療及/或預防有需要之個體的RAS突變相關疾病。RB
在某些實施例中，RB用式RB-I表示：
，
其中：
Ar1
為經一或多個選自由以下組成之群之取代基取代的伸苯基：C1~4
烷基、C1~4
烷氧基、OH、NH2
、CN、OCF3
及鹵素；
Ar2
為經一至三個選自由以下組成之群之基團取代的芳基：H、C1~4
烷基、C1~4
烷氧基、OH、NH2
、CN、OCF3
及鹵素；
R1
為一鍵、C1-6
伸烷基、C3-8
伸環烷基，或包含1至3個選自O及S之雜原子的C1-6
伸雜烷基；
R2
為H或C1-4
烷基；
為空缺、胺、
；
t為整數1～10；
R3
為H、鹵素或CH3
；且
虛線表示連至連接子的連接點。
較佳地，在式RB-I中，其中
Ar1
為經一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代的伸苯基：OMe、NH2
、OCF3
、F或Cl；
Ar2
為經一至三個選自由以下組成之群之基團取代的芳基：H、CH3
、OMe、NH2
、CN、F或Cl；
R1
為C2-4
伸烷基、C3-6
伸環烷基，或包含選自O及S之雜原子的C1-4
伸雜烷基；
R2
為H或C1-3
烷基；
為,
；
t為1~4；
R3
為H、F或CH3
；且
虛線表示連至連接子的連接點。
在某些實施例中，式RB-I選自由以下組成之群：
；
其中虛線表示連至連接子的連接點。
在某些實施例中，RB結合部分以小於約100 μM、小於約50 μM、小於約10 μM、小於約5 μM、小於約1 μM、小於約500 nM、小於約100 nM或小於約50 nM的KD
值結合RAS蛋白。
在某些實施例中，RB結合部分選擇性地結合突變體RAS蛋白而非野生型RAS蛋白。在一些實施例中，式(I)化合物選擇性地結合突變體RAS蛋白而非野生型RAS蛋白。在某些實施例中，選擇性係在約2倍與約5倍之間。在某些實施例中，選擇性係在約5倍與約10倍之間。在某些實施例中，選擇性係在約10倍與約20倍之間。連接子
連接子為連接RB與ULM的二價部分；較佳地，連接子使RB與ULM共價偶合。在某些實施例中，連接子為-A1
…Aq
-，其中：
A1
至Aq
各自獨立地選自由以下組成之群：一鍵、CRL1
RL2
、O、S、S=O、S(=O)2
、NRL3
、C(=O)、C(=O)NRL3
、NRL3
C(=O)、C≡C、視情況經0-6個選自由RL1
及RL2
組成之群之取代基取代的C3-11
環烷基、視情況經0-6個選自由RL1
及RL2
組成之群之取代基取代的C3-11
雜環基、視情況經0-6個選自由RL1
及RL2
組成之群之取代基取代的芳基，及視情況經0-6個選自由RL1
及RL2
組成之群之取代基取代的雜芳基，其中：
RL1
及RL2
可各自獨立地連接至另一A1
至Aq
以形成環烷基或雜環基部分，該環烷基或雜環基部分可視情況進一步經0-4個RL5
基團取代；
RL1
、RL2
、RL3
、RL4
及RL5
各自獨立地選自由以下組成之群：H、C1-8
烷基、O(C1-8
烷基)、S(C1-8
烷基)、NH(C1-8
烷基)、N(C1-8
烷基)2
、C3-11
環烷基、芳基、雜芳基、C3-11
雜環基、O(C1-8
環烷基)、S(C1-8
環烷基)、NH(C1-8
環烷基)、N(C1-8
環烷基)2
、OH、NH2
、SH、C≡CH、CO2
H、鹵素、CN、CF3
、CHF2
、CH2
F及NO2
；且
q為大於或等於1之整數。
在某些實施例中，除氫原子之外，連接子包含至多30個原子。在某些實施例中，除氫原子之外，連接子包含至多20個原子。在某些實施例中，除氫原子之外，連接子包含至多15個原子。在某些實施例中，除氫原子之外，連接子包含至多10個原子。在某些實施例中，除氫原子之外，L包含至多5個原子。在某些實施例中，連接子中的任一個碳原子可經取代。
在某些實施例中，連接子選自由以下組成之群：
；
其中：
k為整數0或1；
m為選自0至12之整數；
n為選自0至8之整數；且
虛線分別表示連至RB及ULM的連接點。
在某些實施例中，連接子選自由以下組成之群：
，
其中虛線分別表示連至RB及ULM的連接點。ULM
ULM為E3泛素連接酶結合部分，且可為羥腦苷脂E3泛素連接酶結合部分(CLM)、凡希培-林道(VHL) E3泛素連接酶結合部分(VLM)、DDB1相關及CUL4相關因子16 (DCAF16) E3泛素連接酶結合部分(DLM)、IAP E3泛素連接酶結合部分(ILM)，或小鼠雙微體2 (MDM2)同源物E3泛素連接酶結合部分(MLM)，或凱奇樣(Kelch-like) ECH相關蛋白-1 (KEAP1) E3泛素連接酶結合部分，或DCAF15 E3泛素連接酶結合部分，或RNF4 E3泛素連接酶結合部分，或RNF114 E3泛素連接酶結合部分，或芳烴受體(AhR) E3泛素連接酶結合部分，或SLAS Discovery, 1-19, 2020中所述的其他E3泛素連接酶結合部分。ULM包括結合、可結合或與任何E3泛素連接酶形成共價鍵的所有部分。舉例而言，在某些實施例中，ULM能夠結合E3泛素連接酶，諸如羥腦苷脂(Cereblon)或凡希培-林道(von Hippel-Lindau，VHL)。在某些實施例中，ULM能夠與E3泛素連接酶(諸如DCAF16)形成共價鍵。在某些實施例中，ULM能夠結合至多種不同的E3泛素連接酶。在某些實施例中，ULM結合至羥腦苷脂。在某些實施例中，ULM結合至VHL。在某些實施例中，ULM與DCAF16形成共價鍵。
羥腦苷脂為E3泛素連接酶，且其與受損的DNA結合蛋白1 (DDB1)、滯蛋白-4A (CUL4A)及滯蛋白調控因子1 (ROC1)形成E3泛素連接酶複合物。此複合物使多種蛋白質發生泛素化。
在某些實施例中，ULM為羥腦苷脂E3連接酶結合部分(CLM)，其選自由沙立度胺、來那度胺、泊利度胺、其類似物、其電子等排體或其衍生物組成之群，較佳具有下式：
其中：
W係選自CH2
及C=O；且
Q1
、Q2
、Q3
及Q4
各自獨立地為C或N，且
其中Q1
、Q2
、Q3
及Q4
之一共價連接至連接子。
在某些實施例中，ULM為
；
其中虛線表示連至連接子的連接點。
凡希培-林道(VHL)為E3泛素連接酶。VHL包含包括伸蛋白B及C的受質識別亞單元/E3泛素連接酶複合物VCB，以及包括滯蛋白-2及Rbxl的複合物。VHL之主要受質為低氧誘導因子l (HIF-la)，一種上調基因之轉錄因子，諸如促血管生成生長因子VEGF，及紅血細胞響應於低氧水準誘導的細胞介素：紅血球生成素。VCB為癌症、慢性貧血及局部缺血中之已知目標。在一個實施例中，ULM為VHL E3泛素連接酶結合部分，且可為羥基脯胺酸或其衍生物。
在某些實施例中，ULM包含肽主鏈結構。在某些實施例中，ULM具有由下式表示的化學結構：
，
其中：
R4
為H、乙基、異丙基、三級丁基、二級丁基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基；
R5
為H、鹵烷基、經取代或未經取代之烷基，或經取代或未經取代之環烷基；
R6
選自由以下組成之群：H、鹵素、CN、OH、經取代或未經取代之雜芳基、經取代或未經取代之芳基、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經取代之鹵烷基、經取代或未經取代之鹵烷氧基、經取代或未經取代之環烷基，及經取代或未經取代之雜環烷基；且
虛線表示連至連接子的連接點。
在一個較佳實施例中，R4
為異丙基、三級丁基、環丙基或環丁基。在另一個較佳實施例中，R5
為H、甲基、氟甲基或環丙基。
在某些實施例中，ULM具有下式：
。
在某些實施例中，ULM具有下式：
。
如Xiaoyu Zhang等人, Nature Chemical Biology, 第15卷, 2019, p73791og中所述，DDB1相關及CUL4相關因子16 (DCAF16)為CUL4-DDB1 E3泛素連接酶之未充分表徵的受質識別組分。DCAF16蛋白具有八個半胱胺酸殘基，且可在半胱胺酸殘基共價結合至異雙官能降解劑的DCAF16結合部分且接著促進蛋白質降解。
在某些實施例中，ULM為DCAF16連接酶結合部分(DLM)，且具有由下式表示的化學結構：
其中：
R7
為H、鹵素、C1-4
烷基、C1-4
烷氧基；
Y為O或S或NH；
Rm
為共價親電體，且係選自以下基團：
；且
連接至Y的虛線表示連至連接子的連接點。
在某些實施例中，DCAF16連接酶結合部分具有下式：
。
在某些實施例中，E3連接酶結合部分以小於約10,000 nM、小於約5,000 nM、小於約1,000 nM、小於約500 nM、小於約100 nM、小於約50 nM的KD
值結合E3泛素連接酶。
在某些實施例中，E3連接酶結合部分以小於約50 μM、小於約10,000 nM、小於約5,000 nM、小於約1,000 nM、小於約500 nM、小於約100 nM、小於約50 nM的KD
值結合羥腦苷脂。
在某些實施例中，E3連接酶結合部分以小於約50 μM、小於約10,000 nM、小於約5,000 nM、小於約1,000 nM、小於約500 nM、小於約100 nM、小於約50 nM的KD
值結合VHL。
RB基團及ULM基團可經由適當且對於連接子之化學性質穩定的任何基團與連接基團共價連接。在本發明的例示性態樣中，連接子在某些實施例中獨立地經由醯胺、酯、硫酯、酮基團、胺基甲酸酯(胺甲酸酯)、碳或醚共價鍵結至RB基團及ULM基團，該等基團各自可插入RB基團及ULM基團上的任何位置，以使得泛素連接酶上之ULM基團與待降解之目標蛋白上之RB基團產生最高的結合。
如本文所用，片語「經取代或未經取代」意謂取代為任擇的。在需要取代之情況下，則此類取代意謂指定原子上之任何數目個氫經選自指定基團之選項置換，其限制條件為不超過指定原子之正常價，且取代產生穩定化合物。舉例而言，當取代基為酮(亦即，=O)時，則原子上之2個氫被置換。「經取代」之基團的取代基實例為本文所揭示之例示性化合物及實施例中所發現的取代基，且可包括例如鹵素、-OH、-CF3
、-CN、-NO2
、烷基、烯基、炔基、環烷基、烷氧基、鹵烷基、烷基胺基、胺基烷基、二烷基胺基、羥基烷基、烷氧基烷基、羥基烷氧基、烷氧基烷氧基、胺基烷氧基、烷基胺基烷氧基、烷基胺基烷基，及芳基，及其類似基團。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指以衍生自無機或有機酸及鹼之鹽形式使用的本發明之化合物。酸式鹽包括例如以下：乙酸鹽、己二酸鹽褐藻酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、氟庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、丁二酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。衍生自適當鹼的鹽包括鹼金屬(例如鈉)、鹼土金屬(例如鎂)、銨及NW4+
(其中W為C1-4
烷基)。
如本文所用，「前藥」意欲包括任何共價鍵結的載體，當將此類前藥投與個體時，其經由活體內生理作用(諸如水解、代謝及類似作用)釋放根據式I之活性親本藥物。一般熟習此項技術者已熟知涉及製備及使用前藥的適合性及技術。式(I)化合物(親本化合物)的前藥可以藉由修飾化合物中存在的官能基來製備，以使得該修飾在常規操作時或在活體內裂解為親本化合物。「前藥」包括其中羥基、胺基或硫氫基鍵結至任何基團的式(I)化合物，當前藥投與個體時，該基團裂解而分別形成游離羥基、游離胺基或游離硫氫基。前藥實例包括(但不限於)式(I)化合物之衍生物及代謝物，其包括可生物水解部分，諸如可生物水解醯胺、可生物水解酯、可生物水解胺基甲酸酯、可生物水解碳酸酯、可生物水解醯脲及可生物水解磷酸酯類似物。在某些實施例中，具有羧基官能基之式(I)化合物的前藥係羧酸之低碳烷基(例如C1
-C6
)酯。羧酸酯宜藉由使存在於分子上的任一羧酸部分發生酯化而形成。
本發明化合物可以溶劑合物形式存在。如本文所用且除非另外指明，否則術語「溶劑合物」意謂式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽進一步包括藉由非共價分子間力結合之化學計量或非化學計量之量的溶劑。若溶劑係水，則溶劑合物可宜稱為「水合物，」例如半水合物、單水合物、倍半水合物、二水合物、三水合物等。
如本文所用，術語「互變異構體」係指其結構因原子排列而顯著不同、但容易且快速達成平衡的化合物，且應瞭解本文所提供的化合物可描繪為不同的互變異構體，且當化合物具有互變異構形式時，所有互變異構形式意欲屬於本發明的範圍內，且化合物命名不排除任何互變異構體。例示性互變異構化包括(但不限於)醯胺與醯亞胺；烯胺與亞胺；烯胺與(不同)烯胺互變異構化；以及酮基與烯醇。
術語「立體異構體」係指具有相同化學構成，但原子或基團在空間中之排列不同的化合物。立體異構體包括非對映異構體、對映異構體、構象異構體及其類似物。
術語「多晶型物」係指化合物(或其鹽、水合物或溶劑合物)之結晶形式。所有多晶型物具有相同的元素組成。不同的結晶形式通常具有不同的X射線繞射圖案、紅外光譜、熔點、密度、硬度、晶體形狀、光學及電學特性、穩定性及溶解性。再結晶溶劑、結晶速率、儲存溫度及其他因素可以使一種晶體形式占主導。化合物之各種多晶型物可以藉由在不同條件下結晶來製備。
如本文所用，「同位素增濃之衍生物」係指所含至少一種原子具有除彼原子之天然同位素組成之外之同位素組成的化合物。「同位素增濃」可依據一定量之特定同位素在分子中之指定原子處併入的百分比表示，而非依據該原子的天然同位素豐度表示。
本發明之雙官能化合物可以一或多種特定幾何、光學、對映異構體、非對映異構體、差向異構體、滯轉異構體、立體異構體、互變異構體、構形異構體或變旋異構體形式存在，包括(但不限於)順式及反式；E-及Z-形式；c-、t-及r-形式；內-及外-形式；R-、S-及內消旋-形式；D-及L-形式；d-及I-形式；(+)及(-)形式；酮-、烯醇-及烯醇化物-形式；順向-及反向-形式；向斜-及背斜-形式；α-及β-形式；軸向及赤道形式；舟-、椅-、扭轉-、包膜-及半椅-形式；及其組合。
在某些實施例中，雙官能化合物係選自表1中的化合物，包括：
在某些實施例中，雙官能化合物係選自表1中的化合物，包括：
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(12-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-12-側氧基十二烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物1)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物2)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(4-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)氧基)乙醯胺基)丁醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物3)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物4)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物5)；
4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物6)；
4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物7)；
4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物8)；
4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12,15-五氧雜十八烷-18-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物9)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-苯基-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物10)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12,15-五氧雜十八烷-18-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物11)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-4-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯胺基)哌啶-4-甲醯胺(化合物12)；
N-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺基)-4-側氧基丁基)-14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯胺(化合物13)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-3-甲醯胺(化合物14)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物15)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物16)；
4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((R)-18-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物17)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((R)-18-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物18)；
N-(3-(5-((4-((2,6-二氯苯甲基)胺基)哌啶-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物19)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)-2-甲基哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物20)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-2-甲醯胺(化合物21)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)吡咯啶-2-甲醯胺(化合物22)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)-4-甲基哌啶-4-甲醯胺(化合物23)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-4-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌𠯤-2-甲醯胺(化合物24)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷-1-醯基)哌啶-3-甲醯胺(化合物25)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷-1-醯基)哌啶-2-甲醯胺(化合物26)；
N-(3-(6-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物27)；
N-(3-(7-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物28)；
N-(3-(6-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物29)；
N1-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺基)-4-側氧基丁基)-N16-((R)-1-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)-4,7,10,13-四氧雜十六烷二醯胺(化合物30)；
N-(3-(7-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物31)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(9-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)壬醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物32)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(12-(((R)-1-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-12-側氧基十二烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物33)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4- (三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-14-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-15,15-二甲基-12-側氧基-3,6,9-三氧雜-13-氮雜十六烷基)哌啶-4-甲醯胺(化合物34)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-側氧基丙氧基)乙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物35)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(4-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-2-側氧基乙基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物36)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-5-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物37)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-5-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物38)；
N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物39)；
4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物40)；
1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15-四氧雜-3-氮雜十八烷-18-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物41)；
1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15,18-五氧雜-3-氮雜二十一烷-21-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物42)；
4-胺基-1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15-四氧雜-3-氮雜十八烷-18-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物43)；
1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十五烷-15-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物44)；
4-胺基-1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十五烷-15-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物45)；及
4-胺基-1-(2-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)乙醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物46)；
或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、多晶型物、互變異構體、立體異構體及同位素增濃之衍生物、前藥。
在某些實施例中，如本文中所述的雙官能化合物以小於約100 μM、小於約50 μM、小於約10 μM、小於約5 μM、小於約1 μM、小於約500 nM、小於約100 nM或小於約50 nM的KD
值結合RAS蛋白。
在某些實施例中，如本文中所述的雙官能化合物選擇性地結合突變體RAS蛋白而非野生型RAS蛋白。在一些實施例中，式I
化合物選擇性地結合突變體RAS蛋白而非野生型RAS蛋白。在某些實施例中，選擇性係在約2倍與約5倍之間。在某些實施例中，選擇性係在約5倍與約10倍之間。在某些實施例中，選擇性係在約10倍與約20倍之間。
在某些實施例中，如本文中所述的雙官能化合物以小於約50 μM、小於約10,000 nM、小於約5,000 nM、小於約1,000 nM、小於約500 nM、小於約100 nM、小於約50 nM的KD
值結合E3泛素連接酶。
在某些實施例中，如本文中所述的雙官能化合物在20 μM或更小、10 μM或更小、5 μM或更小、1,000 nM或更小、500 nM或更小、100 nM或更小、50 nM或更小、10 nM或更小之濃度下促進多達10%、多達20%、多達30%、多達40%、多達50%、多達60%、多達70%、多達80%、多達90%、多達100%的突變體RAS蛋白降解。醫藥組合物及用途
如本文中所述的雙官能化合物可以純化學物質形式治療性投與，但以醫藥組合物或調配物形式投與化合物可為有用的。因此，本發明提供一種醫藥組合物，其包含治療有效量之如本文中所述的雙官能化合物或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、立體異構體、溶劑合物、水合物、多晶型物、同位素增濃之衍生物或前藥，及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。
醫藥組合物可以多種劑型投與，包括(但不限於)固體劑型或液體劑型、口服劑型、非經腸劑型、鼻內劑型、栓劑、口含錠、糖衣錠、口頰錠、控制釋放劑型、脈衝釋放劑型、速釋劑型、靜脈內溶液、懸浮液，或其組合。醫藥組合物可例如藉由經口或非經腸途徑投與，包括靜脈內、肌肉內、腹膜內、皮下、經皮、呼吸道(氣溶膠)、直腸、陰道及體表(包括頰內及舌下)投藥。
「賦形劑」通常係指添加至藥理學組合物中或另外用作媒劑以進一步促進化合物投與的物質，常常為惰性物質。賦形劑之實例包括(但不限於)惰性稀釋劑、崩解劑、黏合劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、著色劑、防腐劑、發泡混合物及吸附劑。適合的惰性稀釋劑包括(但不限於)碳酸鈉及碳酸鈣、磷酸鈉及磷酸鈣、乳糖及其類似物。適合崩解劑包括(但不限於)澱粉(諸如玉米澱粉)、交聯聚乙烯吡咯啶酮、瓊脂、褐藻酸或其鹽(諸如褐藻酸鈉)，及其類似物。黏合劑可以包括(但不限於)矽酸鎂鋁、澱粉(諸如玉米、小麥或稻米澱粉)、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯啶酮及其類似物。潤滑劑若存在，則通常將為硬脂酸鎂及硬脂酸鈣、硬脂酸、滑石或氫化植物油。必要時，錠劑可用諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯之材料包覆包衣以延遲胃腸道中之吸收。組合物亦可調配為咀嚼錠，例如在調配物中使用諸如甘露醇之物質。
術語「治療有效量」係指如本文中所述之雙官能化合物單獨或與抗癌劑組合以單次或多次劑量投與個體後，在治療的個體中提供所需作用的量。
如本文中所述的雙官能化合物有效治療或緩解RAS突變相關疾病。當目標蛋白鄰近E3泛素連接酶定位時，將發生目標蛋白的降解，從而使目標蛋白降解/抑制目標蛋白作用及控制蛋白質水準。藉由本發明達成的蛋白質水準之控制提供疾病狀態或病狀之治療，該疾病狀態或病狀係經由目標蛋白、藉由降低該蛋白質在患者之細胞中的水準來調節。「RAS突變相關疾病」可為癌症、自體免疫疾病、感染性疾病或血管增生性病症。癌症可為肺癌(例如非小細胞肺癌)、大腸癌、大腸直腸癌、乳癌、前列腺癌、肝癌、胰臟癌、膀胱癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌、子宮頸癌、口腔癌、皮膚癌、腦癌、淋巴瘤、白血病、膽道惡性腫瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌或骨髓性白血病。
如本文中所述的雙官能化合物可作為唯一活性劑投與，或與一或多種其他抗癌劑分開、依序或一起投與。除非另外說明，否則如本文所用，術語「抗癌劑」係指能夠抑制或預防贅瘤生長或檢查惡性(癌)細胞成熟及增殖的藥劑。適合與式(I)化合物組合使用的抗癌劑包括(但不限於)靶向癌症藥物，諸如曲妥珠單抗(trastuzumab)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、維莫德吉(vismodegib)、索尼得吉(sonidegib)、貝伐單抗(bevacizumab)、依維莫司(everolimus)、他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、氟維司群(fulvestrant)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、拉帕替尼(lapatinib)、來曲唑(letrozole)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、曲妥珠單抗-美坦新偶聯物(ado-trastuzumab emtansine)、帕博西尼(palbociclib)、西妥昔單抗(cetuximab)、帕尼單抗(panitumumab)、塞維-阿柏西普(ziv-aflibercept)、瑞戈非尼(regorafenib)、甲磺酸嗎替尼(lmatinib mesylate)、乙酸蘭瑞肽(lanreotide acetate)、舒尼替尼(sunitinib)、瑞戈非尼(regorafenib)、地諾單抗(denosumab)、亞利崔托寧(alitretinoin)、索拉非尼(sorafenib)、帕唑帕尼(pazopanib)、坦西莫司(temsirolimus)、依維莫司(everolimus)、維甲酸(tretinoin)、達沙替尼(dasatinib)、尼羅替尼(nilotinib)、伯舒替尼(bosutinib)、利妥昔單抗(rituximab)、阿侖單抗(alemtuzumab)、奧伐木單抗(ofatumumab)、奧必塗單抗(obinutuxumab)、依魯替尼(ibrutinib)、艾德昔布(idelalisib)、博納吐單抗(blinatumomab)、索拉吉利(soragenib)、克卓替尼(crizotinib)、埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、二順丁烯二酸阿法替尼(afatinib dimaleate)、賽瑞尼布(ceritnib)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、尼沃單抗(nivolumab)、派立珠單抗(pembrolizumab)、奧希替尼(osimertinib)及萊西單抗(necitumumab)；烷基化劑，諸如白消安(busulfan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、異環磷醯胺(iphosphamide)、美法侖(melphalan)、氮芥(nitrogen mustard)、鏈脲菌素(streptozocin)、噻替派(thiotepa)、尿嘧啶氮芥(uracil nitrogen mustard)、三伸乙基蜜胺(triethylenemelamine)、替莫唑胺(temozolomide)，2-氯乙基-3-肌胺酸醯胺-1-亞硝基脲(SarCNU)；抗生素或植物生物鹼，諸如放射菌素-D (actinomycin-D)、博萊黴素(bleomycin)、念珠藻素(cryptophycins)、道諾黴素(daunorubicin)、小紅莓(doxorubicin)、艾達黴素(idarubicin)、伊立替康(irinotecan)、L-天冬醯胺酶(L-asparaginase)、絲裂黴素-C (mitomycin-C)、光神黴素(mitramycin)、溫諾平(navelbine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西他賽(docetaxel)、拓朴替康(topotecan)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、替尼泊苷(teniposide) (VM-26)，及依託泊苷(etoposide)(VP-16)；激素或類固醇，諸如5α-還原酶抑制劑、胺魯米特(aminoglutethimide)、阿那曲唑(anastrozole)、比卡魯胺(bicalutamide)、氯烯雌醚(chlorotrianisene)、己烯雌酚(diethylstilbestrol) (DES)、屈他雄酮(dromostanolone)、雌氮芥(estramustine)、乙烯雌二醇(ethinyl estradiol)、氟他胺(flutamide)、氟羥甲基睪酮(fluoxymesterone)、戈舍瑞林(goserelin)、羥基孕酮(hydroxyprogesterone)、來曲唑(letrozole)、亮丙立德(leuprolide)、乙酸甲羥孕酮(medroxyprogesterone acetate)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、甲基普賴蘇穠(methyl prednisolone)、甲基睪固酮(methyltestosterone)、米托坦(mitotane)、尼魯米特(nilutamide)、普賴蘇穠(prednisolone)、阿佐昔芬(arzoxifene) (SERM-3)、他莫昔芬(tamoxifen)、睪內酯(testolactone)、睪固酮(testosterone)、去炎松(triamicnolone)，及諾雷德(zoladex)；合成藥物，諸如全反式視黃酸、卡莫司汀(carmustine) (BCNU)、卡鉑(carboplatin) (CBDCA)、洛莫司汀(lomustine) (CCNU)、順-二胺二氯鉑(順鉑)、達卡巴𠯤(dacarbazine)、戈利德爾(gliadel)、六甲蜜胺(hexamethylmelamine)、羥脲(hydroxyurea)、左旋咪唑(levamisole)、米托蒽醌(mitoxantrone)、o,p'-二氯二苯基二氯乙烷(o,p'-DDD)(亦稱為離索准(lysodren)或米托坦(mitotane))、奧沙利鉑(oxaliplatin)、卟吩姆鈉(porfimer sodium)、丙卡巴肼(procarbazine)，及甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)(Gleevec®
)；抗代謝物，諸如氯去氧腺苷(chlorodeoxyadenosine)、胞嘧啶阿拉伯糖苷(cytosine arabinoside)、2'-去氧助間型黴素(2'-deoxycoformycin)、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、5-氟-2'-去氧尿苷(5-FUdR)、吉西他濱(gemcitabine)、喜樹鹼(camptothecin)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)、甲胺喋呤(methotrexate)、4-甲基硫代安非他命(4-methylthioamphetamine) (4-MTA)，及硫鳥嘌呤(thioguanine)；以及生物製劑，諸如α干擾素、BCG (卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin))、顆粒球群落刺激因子(G-CSF)、顆粒球-巨噬細胞群落刺激因子(GM-CSF)、介白素-2，及赫賽汀(herceptin)。
另外，本發明提供一種預防、緩解及/或治療有需要之個體之RAS突變相關疾病的方法，包含將如本文中所述的雙官能化合物或包含其之醫藥組合物投與該個體。
另外，本發明提供治療有效量之雙官能化合物，其用於製造供預防、緩解及/或治療有需要之個體之RAS突變相關疾病的藥劑。
在另一態樣中，本發明提供一種藉由使目標蛋白與如本文所述之式(I)之雙官能化合物接觸而使細胞中之目標蛋白發生泛素化且降解的方法。
為了更全面地理解本文所述之本發明，闡述以下實例。本申請案中所述之實例是為了說明本文所提供之化合物、醫藥組合物及方法而提供，且不應解釋為以任何方式限制其範疇。實例 實例 1
式(I
)化合物可利用下文詳細描述的合成流程及程序製備。合成中間物的製備 
合成4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H
-吲哚-1-基)丙基)胺甲醯基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(B)
將N,N-
二異丙基乙胺(DIPEA，294 μL，1.69 mmol，2 eq)添加至1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-甲酸(184 mg，0.8 mmol，0.95 eq)及六氟磷酸(2-(1H
-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基
之溶液(HBTU，385 mg，0.39 mmol，1.2 eq)於DMF (8 ml)中之溶液中且攪拌30分鐘。添加3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H
-吲哚-1-基)丙-1-胺(化合物A，依Cell
,2017
, 168, 878-889中所述的程序製備)(0.5 g，0.85 mmol，1 eq)且再攪拌4小時。完成後，反應物用NaHCO3
飽和水溶液淬滅且用EtOAc萃取3次。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO4
乾燥，濃縮，且粗物質藉由矽膠層析(0至5% MeOH/CH2
Cl2
)純化，產生4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H
-吲哚-1-基)丙基)胺甲醯基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(564 mg，83%)。1
H NMR (600 MHz, CDCl3
) δ 7.78 (s, 1H), 7.63 (d,J
= 8.7 Hz, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.33 (m, 6H), 7.16 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 4.00 (m, 4H), 3.80 (s, 2H), 3.5(m, 2H), 3.32 (m, 2H), 2.70 (m, 9H), 2.12 (m, 3H), 1.66 (m, 4H), 1.4 (s, 9H)。LC-MS (m/z): [M]+
C41
H48
Cl2
F3
N5
O4
計算值802.76, 實驗值803.2
合成N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H
-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(RB-1)
向化合物B (564 mg，0.7 mmol)於CH2
Cl2
(1.5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL，14 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時。混合物用NaHCO3 (sat)
中和且用CH2
Cl2
稀釋。CH2
Cl2
經MgSO4
乾燥，濃縮，且粗物質藉由矽膠層析(0至30% MeOH/DCM)純化，產生N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H
-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(0.4 g，81%)。1
H NMR (600 MHz, DMSO) δ 9.52 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.05 (d,J
= 9.0 Hz, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.79 (d,J
= 8.64 Hz,2H), 7.65 (d,J
= 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d,J
= 8.0 Hz, 2H), 7.46 (d,J
= 8.28 Hz, , 2H), 7.37 (t,J
= 8.04 Hz, 1H), 7.32(d,J
= 8.46 Hz, 1H),4.44 (d,J
= 4.8 Hz, 2H), 4.26 (t,J
= 6.69 Hz, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.3 (m, 4H), 3.06 (m, 2H), 3.0 (m, 2H), 2.89(m, 4H), 2.53 (m, 2H), 2.41 (m, 1H), 1.93 (m, 2H), 1.83 (m,2H). 1.70 (m, 2H)。LC-MS (m/z): [M]+
C36
H40
Cl2
F3
N5
O2
計算值702.64, 實驗值702.6
使用相應物質，以類似於化合物RB-1的方式，製備RB-4、5、6、7、8、9、10、11、12。例示性化合物的製備 
合成N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(5)
將DIPEA (50 μL，0.28 mmol，2 eq)添加至14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷酸(74 mg，0.15 mmol，1 eq)及HBTU (62 mg，0.16 mmol，1.2 eq)於DMF (1.5 ml)中之溶液中且攪拌30分鐘。添加N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(RB-1)(100 mg，0.14 mmol)且再攪拌1小時。完成後，反應物用NaHCO3(aq)
淬滅且用EtOAc萃取3次。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO4
乾燥，濃縮，且粗物質藉由矽膠層析(0至10% MeOH/CH2
Cl2
)純化，產生化合物5 (100 mg，59%)。1
H NMR (600 MHz, DMSO-d 6
) δ 11.11 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.92 (t,J
= 5.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.81 - 7.76 (m, 1H), 7.63 (d,J
= 8.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.55 (m, 1H), 7.47 (dd,J
= 14.7, 8.1 Hz, 3H), 7.38 - 7.34 (m, 1H), 7.31 (d,J
= 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d,J
= 8.6 Hz, 1H), 7.04 (d,J
= 7.0 Hz, 1H), 6.60 (t,J
= 5.9 Hz, 1H), 5.06 (dd,J
= 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.32 - 4.22 (m, 2H), 3.76 (d,J
= 14.0 Hz, 2H), 3.61 (t,J
= 5.5 Hz, 1H), 3.57 - 3.44 (m, 10H), 3.08 - 2.84 (m, 6H), 2.34 (tt,J
= 11.4, 3.8 Hz, 1H), 2.02 (ddq,J
= 10.9, 5.3, 2.7, 2.2 Hz, 1H), 1.93 (p,J
= 6.9 Hz, 1H), 1.68 (d,J
= 13.1 Hz, 1H), 1.50 (q,J
= 11.9 Hz, 1H), 1.36 (p,J
= 10.0 Hz, 1H)。LC-MS (m/z): [M]+
C59
H67
Cl2
F3
N8
O11
計算值1192.13, 實驗值1193.47。
使用相應的胺起始物質(如RB-1)及羧酸(如L)，依類似於化合物5的方式，製備實例化合物1-4、6-16、19-24、27-28、32、37-40。
實例 2
| 編號 | 結構及化學名稱 | 質量/NMR |
| 1 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C61 H69 Cl2 F3 N8 O8 計算值1170.17, 實驗值1170.36.1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.64 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.78 (m, 3H), 7.69 (s, 1H), 7.59 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 7.42 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.36 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.34 (q,J = 3.4 Hz, 1H), 7.30 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 5.15 (q,J = 6.1 Hz, 1H), 4.51 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.33 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 3.98 (d,J = 13.7 Hz, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.44 (m, 2H), 3.23 (m, 2H), 3.08 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.63 (m, 2H), 2.49 (t,J = 7.5 Hz, 2H), 2.37 (m, 2H), 2.1 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 1.81 (s, 1H), 1.74 (m, 3H), 1.59 (m, 3H), 1.34 (m, 12H). |
| 2 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C57 H65 Cl2 F3 N8 O9 計算值1134.09, 實驗值1133.74;1 H NMR (600 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.05 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.76 (m, 2H), 7.68 (d,J = 14.3 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.48 (dd,J = 8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.42 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.39 - 7.33 (m, 3H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 7.05 - 6.98 (m, 2H), 5.06 (dd,J = 12.6, 5.5 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.30 (t,J = 7.0 Hz, 2H), 3.90 (s, 2H), 3.82 - 3.79 (m, 2H), 3.74 - 3.64 (m, 12H), 3.49 (t,J = 5.2 Hz, 2H), 3.46 - 3.40 (m, 2H), 3.38 (d,J = 10.2 Hz, 1H), 3.30 (t,J = 5.0 Hz, 2H), 3.23 - 3.19 (m, 2H), 3.10 (m, 4H), 3.01 - 2.94 (m, 2H), 2.85 (ddd,J = 17.0, 13.7, 5.3 Hz, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 4H), 2.46 (dq,J = 11.6, 6.0, 4.5 Hz, 1H), 2.07 (td,J = 14.3, 13.3, 6.3 Hz, 4H), 2.03 - 1.92 (m, 4H). |
| 3 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C55 H57 Cl2 F3 N8 O9 計算值1102.00, 實驗值1102.45;1 H NMR (600 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 3H), 7.70 (s, 1H), 7.59 (dd,J = 8.6, 2.0 Hz, 1H), 7.53 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 7.44 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.42 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.38 - 7.35 (m, 2H), 7.34 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.30 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 5.14 (dd,J = 18.7, 6.2 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.49 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.32 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 3.96 (d,J = 13.9 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.46 - 3.37 (m, 5H), 3.24 - 3.20 (m, 3H), 3.17 - 3.03 (m, 5H), 2.91 - 2.83 (m, 2H), 2.76 - 2.71 (m, 2H), 2.63 (t,J = 12.6 Hz, 3H), 2.47 (t,J = 7.3 Hz, 2H), 2.15 - 2.06 (m, 4H), 1.88 (p,J = 7.3 Hz, 2H), 1.75 (t,J = 13.7 Hz, 2H), 1.58 (q,J = 12.4 Hz, 2H), 1.49 - 1.41 (m, 2H), 1.35 - 1.30 (m, 2H). |
| 4 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C56 H61 Cl2 F3 N8 O9 計算值1118.05, 實驗值1118.00;1 H NMR (600 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.76 (m, 2H), 7.69 (s, 1H), 7.58 (dd,J = 8.5, 3.1 Hz, 1H), 7.47 (ddd,J = 8.8, 7.0, 1.9 Hz, 1H), 7.42 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.37 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 2H), 7.00 (dd,J = 12.5, 7.8 Hz, 2H), 5.04 (ddd,J = 12.7, 5.5, 2.1 Hz, 1H), 4.46 (m, 4H), 4.31 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 3.99 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.80 - 3.62 (m, 9H), 3.17 - 3.01 (m, 6H), 2.87 - 2.80 (m, 2H), 2.75 - 2.50 (m, 9H), 2.37 (t,J = 11.9 Hz, 2H), 2.08 (td,J = 11.8, 10.7, 5.4 Hz, 3H), 1.72 (d,J = 12.3 Hz, 3H), 1.58 (dt,J = 12.9, 6.3 Hz, 2H), 1.37 (dq,J = 13.6, 9.1, 6.4 Hz, 2H). |
| 6 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C59 H68 Cl2 F3 N9 O11 計算值1207.14, 實驗值1209.25;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 8.47 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 8.44 - 8.38 (m, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.79 - 7.76 (m, 2H), 7.64 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (dd,J = 8.6, 7.0 Hz, 1H), 7.51 - 7.44 (m, 3H), 7.37 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.34 - 7.30 (m, 1H), 7.21 - 7.01 (m, 3H), 6.60 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.06 (dd,J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.26 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 4.23 - 4.06 (m, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.69 (d,J = 13.9 Hz, 1H), 3.61 (t,J = 5.5 Hz, 2H), 3.56 - 3.48 (m, 9H), 3.46 (q,J = 5.6 Hz, 2H), 3.18 (q,J = 6.7 Hz, 2H), 3.09 - 2.96 (m, 3H), 2.95 - 2.84 (m, 3H), 2.13 (dd,J = 24.9, 12.4 Hz, 2H), 2.05 - 1.95 (m, 3H), 1.75 (d,J = 12.9 Hz, 2H). |
| 7 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H70 Cl2 F3 N9 O11 計算值1221.17, 實驗值1223.07;1 H NMR (600 MHz, MeOD) δ 7.73 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.39 (ddd,J = 8.3, 7.1, 0.8 Hz, 1H), 7.33 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.23 - 7.20 (m, 2H), 7.15 - 7.09 (m, 2H), 6.92 (t,J = 8.1 Hz, 2H), 4.91 (dd,J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 4.51 (s, 4H), 4.16 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 4.07 - 4.02 (m, 1H), 3.99 (q,J = 7.1 Hz, 1H), 3.67 (s, 2H), 3.65 - 3.62 (m, 1H), 3.60 (td,J = 6.3, 1.8 Hz, 2H), 3.58 - 3.53 (m, 4H), 3.49 (s, 4H), 3.46 (tq,J = 8.3, 3.1, 2.2 Hz, 7H), 3.33 (t,J = 5.3 Hz, 2H), 3.16 - 3.11 (m, 2H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.71 (ddd,J = 17.4, 13.9, 5.3 Hz, 1H), 2.58 (dddd,J = 28.5, 14.3, 8.3, 5.6 Hz, 7H), 2.49 - 2.41 (m, 3H), 2.01 - 1.92 (m, 3H), 1.91 (s, 1H), 1.86 (ddd,J = 13.5, 11.6, 4.4 Hz, 1H), 1.80 - 1.72 (m, 1H), 1.27 - 1.17 (m, 3H). |
| 8 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H66 Cl2 F3 N9 O10 計算值1177.11, 實驗值1176.73;1 H NMR (600 MHz, MeOD) δ 7.89 (s, 1H), 7.79 - 7.70 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 7.37 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.35 - 7.31 (m, 2H), 7.27 - 7.21 (m, 2H), 7.01 (dd,J = 7.7, 2.2 Hz, 2H), 5.02 (ddd,J = 12.7, 5.6, 1.7 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.27 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 4.16 - 4.05 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.77 - 3.67 (m, 3H), 3.64 (t,J = 5.2 Hz, 2H), 3.62 - 3.56 (m, 6H), 3.41 (q,J = 6.2, 5.7 Hz, 2H), 3.39 - 3.34 (m, 1H), 3.25 (td,J = 6.7, 2.9 Hz, 2H), 3.07 (ddd,J = 13.9, 11.5, 3.3 Hz, 1H), 2.82 (ddd,J = 18.1, 13.8, 5.3 Hz, 2H), 2.77 - 2.59 (m, 8H), 2.54 (dt,J = 15.1, 6.0 Hz, 1H), 2.08 (tt,J = 11.9, 6.1 Hz, 3H), 2.01 (s, 1H), 1.99 - 1.92 (m, 1H), 1.87 - 1.78 (m, 1H), 1.40 - 1.27 (m, 3H), 1.24 (t,J = 7.1 Hz, 1H). |
| 9 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H66 Cl2 F3 N9 O10 計算值1265.22, 實驗值1265.61; 1H NMR (600 MHz, MeOD) δ 7.88 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.80 - 7.75 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.52 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.28 - 7.23 (m, 2H), 7.05 (dd, J = 9.5, 7.8 Hz, 2H), 5.04 (dd, J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.29 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 4.16 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.81 (s, 2H), 3.78 - 3.71 (m, 4H), 3.69 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.60 (ddd, J = 10.9, 5.5, 2.8 Hz, 6H), 3.58 (d, J = 3.1 Hz, 4H), 3.46 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.27 (td, J = 6.8, 2.1 Hz, 2H), 3.14 - 3.07 (m, 1H), 2.84 (ddd, J = 17.3, 13.8, 5.3 Hz, 1H), 2.74 (dd, J = 4.3, 2.6 Hz, 1H), 2.72 - 2.63 (m, 6H), 2.62 - 2.56 (m, 2H), 2.09 (ddt, J = 18.6, 13.5, 6.5 Hz, 4H), 1.99 (ddd, J = 13.3, 11.4, 4.4 Hz, 1H), 1.91 - 1.84 (m, 1H), 1.62 (s, 1H), 1.43 - 1.27 (m, 8H), 0.91 (q, J = 9.8, 8.2 Hz, 2H). |
| 10 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H68 Cl2 N8 O10 計算值1108.13, 實驗值1107.7;1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.71 - 7.68 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.56 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.52 (dd,J = 8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 5H), 7.29 (m, 3H), 7.04 (t,J = 7.6 Hz, 2H), 5.04 (dd,J = 12.4, 5.4 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.41 (d,J = 11.4 Hz, 3H), 4.31 (q,J = 6.4 Hz, 2H), 4.17 (d,J = 12.7 Hz, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.84 (d,J = 14.3 Hz, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 14H), 3.46 (t,J = 5.1 Hz, 2H), 3.25 (t,J = 6.6 Hz, 2H), 3.01 (s, 1H), 2.88 (d,J = 0.7 Hz, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.75 - 2.59 (m, 6H), 2.40 - 2.33 (m, 2H), 2.10 (m, 3H), 1.74 (m, 13.4 Hz, 3H), 1.51 (m, 2H), 1.41 - 1.37 (m, 2H), 1.33 (m, 2H). |
| 11 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C62 H73 Cl2 F3 N8 O12 計算值1250.21, 實驗值1249.83;1 H NMR (600 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.04 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.80 - 7.77 (m, 2H), 7.69 (s, 1H), 7.58 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.52 (dd,J = 8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.41 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.38 - 7.35 (m, 2H), 7.33 (dd,J = 8.5, 1.7 Hz, 1H), 7.30 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.07 - 7.02 (m, 2H), 5.05 (dd,J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.48 (d,J = 13.3 Hz, 1H), 4.46 - 4.39 (m, 2H), 4.32 (td,J = 6.8, 2.0 Hz, 2H), 4.00 (d,J = 13.7 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 5H), 3.65 - 3.56 (m, 17H), 3.19 - 3.01 (m, 5H), 2.89 - 2.81 (m, 2H), 2.76 - 2.54 (m, 8H), 2.39 (tt,J = 11.6, 3.9 Hz, 1H), 2.09 (q,J = 6.9 Hz, 3H), 1.81 - 1.70 (m, 2H), 1.56 (qd,J = 12.3, 4.1 Hz, 1H), 1.41 - 1.30 (m, 2H). |
| 12 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C59 H68 Cl2 F3 N9 O11 計算值1207.14, 實驗值1206.97;1 H NMR (500 MHz, DMSO) δ 11.09 (s, 1H), 9.50 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.97 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.77 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.67 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (dd,J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.47 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.43 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.29 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.11 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.03 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 6.57 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 5.04 (dd,J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.20 (t,J = 7.1 Hz, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.65 - 3.55 (m, 3H), 3.55 - 3.48 (m, 4H), 3.47 (s, 3H), 3.44 (q,J = 5.7 Hz, 2H), 3.21 (d,J = 12.1 Hz, 2H), 3.17 (s, 1H), 3.09 (d,J = 6.1 Hz, 2H), 3.00 (d,J = 11.8 Hz, 3H), 2.94 - 2.82 (m, 3H), 2.61 - 2.56 (m, 1H), 2.22 - 2.05 (m, 4H), 2.06 - 1.95 (m, 1H), 1.89 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 1.23 (s, 1H), 1.15 (s, 1H). |
| 13 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C57 H65 Cl2 F3 N8 O11 計算值1166.09, 實驗值1165.54;1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.10 (s, 1H), 7.99 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.91 (dd,J = 10.7, 5.0 Hz, 2H), 7.80 - 7.77 (m, 2H), 7.71 (t,J = 6.3 Hz, 1H), 7.63 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.57 (dd,J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.47 (dd,J = 14.4, 8.2 Hz, 4H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.30 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 6.59 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 4.26 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 4.10 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 3.85 (s, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.61 (t,J = 5.4 Hz, 2H), 3.58 - 3.50 (m, 11H), 3.45 (q,J = 5.6 Hz, 2H), 3.18 (d,J = 4.4 Hz, 3H), 3.08 (dq,J = 23.7, 6.6 Hz, 5H), 2.88 (ddd,J = 16.8, 13.7, 5.4 Hz, 2H), 2.08 (t,J = 7.4 Hz, 2H), 2.05 - 1.99 (m, 1H), 1.93 (p,J = 6.9 Hz, 2H), 1.65 (p,J = 7.3 Hz, 2H). |
| 14 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C59 H67 Cl2 F3 N8 O11 計算值1192.13, 實驗值1191.71;1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.09 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.79 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.64 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.57 (t,J = 8.3 Hz, 1H), 7.47 (dd,J = 12.7, 8.1 Hz, 4H), 7.36 (dd,J = 8.6, 7.4 Hz, 1H), 7.31 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.05 (dd,J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.26 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 4.19 - 4.06 (m, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.61 (q,J = 5.4 Hz, 2H), 3.58 - 3.43 (m, 12H), 3.18 (s, 1H), 3.11 - 2.83 (m, 8H), 2.30 (s, 1H), 2.19 (s, 1H), 2.01 (s, 1H), 1.94 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 1.83 (m, 2H), 1.70 - 1.54 (m, 3H), 1.39 (m, 1H), 1.26 (t,J = 6.8 Hz, 1H). |
| 15 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H65 Cl2 F3 N8 O10 計算值1162.1, 實驗值1161.7;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 7.99 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 7.91 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.81 - 7.76 (m, 2H), 7.62 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.59 - 7.56 (m, 1H), 7.50 - 7.40 (m, 4H), 7.36 (dd,J = 8.6, 7.6 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.14 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.60 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.32 (m, 3H), 4.25 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 3.87 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.63 - 3.43 (m, 18H), 3.05 (q,J = 6.8 Hz, 2H), 2.97 (t,J = 12.5 Hz, 2H), 2.92 - 2.83 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 1.99 (m, 3H), 1.93 (p,J = 6.8 Hz, 2H), 1.67 (m, 1H), 1.50 - 1.44 (m, 1H), 1.38 - 1.27 (m, 2H), 1.24 (d,J = 4.2 Hz, 3H). |
| 16 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1205.44.1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.09 (s, 1H), 8.00 (d,J = 19.2 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 6.9 Hz, 2H), 7.80 - 7.78 (m, 2H), 7.63 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.58 (dd,J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.46 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.38 - 7.34 (m, 1H), 7.31 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.60 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 4.35 (d,J = 12.9 Hz, 1H), 4.25 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 3.87 (d,J = 13.0 Hz, 1H), 3.76 - 3.72 (m, 2H), 3.63 - 3.58 (m, 4H), 3.56 (dd,J = 5.8, 3.3 Hz, 2H), 3.53 (dd,J = 4.3, 1.8 Hz, 2H), 3.51 - 3.45 (m, 10H), 3.06 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 2.36 - 2.30 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.93 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 1.67 (m, 2H), 1.47 (m, 1H), 1.34 (m, 1H), 1.24 (s, 2H). |
| 19 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1206.9;1 H NMR (600 MHz, MeOD) δ 8.07 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.82 - 7.76 (m, 2H), 7.70 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 7.58 - 7.57 (d, 1H), 7.53(s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.50 - 7.45(m, 2H), 7.37 (ddd,J = 8.4, 3.3, 1.4 Hz, 3H), 7.05 (ddd,J = 17.7, 7.8, 1.9 Hz, 2H), 5.05 (dd,J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.52 (d,J = 13.0 Hz, 1H), 4.48 (d,J = 13.1 Hz, 1H), 4.42 (d,J = 13.3 Hz, 1H), 4.38 - 4.28 (m, 2H), 4.22 (s, 1H), 4.18 (d,J = 14.1 Hz, 1H), 3.86 - 3.81 (m, 1H), 3.71 (d,J = 5.2 Hz, 2H), 3.70 - 3.61 (m, 12H), 3.50 (t,J = 5.2 Hz, 2H), 3.25 (p,J = 6.9 Hz, 2H), 3.20 (s, 1H), 3.07 - 2.99 (m, 1H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.79 - 2.67 (m, 2H), 2.64 (td,J = 13.1, 3.1 Hz, 1H), 2.56 - 2.49 (m, 2H), 2.40 (tt,J = 11.7, 3.8 Hz, 1H), 2.15 - 2.06 (m, 4H), 1.79 (d,J = 13.5 Hz, 1H), 1.72 (d,J = 13.3 Hz, 1H), 1.55 (qd,J = 12.5, 4.2 Hz, 1H), 1.42 - 1.29 (m, 2H). |
| 20 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1207.75;1 H NMR (600 MHz, MeOD) δ 7.83 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.78 - 7.74 (m, 2H), 7.56 (s, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 1H), 7.44 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.30 (m, 4H), 7.27 - 7.20 (m, 2H), 7.07 - 6.99 (m, 2H), 5.03 (dd,J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.45 (d,J = 13.2 Hz, 1H), 4.29 - 4.23 (m, 3H), 4.17 (d,J = 13.8 Hz, 1H), 3.91 (d,J = 13.6 Hz, 1H), 3.64 (d,J = 2.0 Hz, 4H), 3.64 - 3.61 (m, 7H), 3.51 (q,J = 7.0 Hz, 1H), 3.46 (td,J = 5.2, 1.9 Hz, 2H), 3.26 - 3.20 (m, 2H), 3.02 (td,J = 12.6, 2.5 Hz, 1H), 2.87 - 2.77 (m, 2H), 2.75 - 2.62 (m, 5H), 2.53 (s, 1H), 2.43 - 2.34 (m, 2H), 2.26 (dt,J = 35.4, 13.5 Hz, 2H), 2.12 - 2.04 (m, 3H), 1.79 - 1.72 (m, 2H), 1.65 - 1.60 (m, 1H), 1.54 - 1.48 (m, 1H). |
| 21 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C59 H67 Cl2 F3 N8 O11 計算值1192.13, 實驗值1191.66;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 7.99 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.89 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.79 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.59 - 7.55 (m, 1H), 7.50 - 7.40 (m, 4H), 7.36 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.13 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.33 (td,J = 4.5, 2.2 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.91 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.31 - 4.22 (m, 3H), 4.09 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.60 (dq,J = 8.5, 4.7, 4.0 Hz, 3H), 3.58 - 3.46 (m, 12H), 3.46 - 3.42 (m, 3H), 3.20 - 3.15 (m, 1H), 3.15 - 3.06 (m, 3H), 2.99 - 2.83 (m, 3H), 2.12 (d,J = 13.8 Hz, 1H), 2.09 (s, 1H), 2.05 - 1.90 (m, 5H), 1.56 (d,J = 11.6 Hz, 2H), 1.46 (m, 1H), 1.24 (m, 10H), 0.88 - 0.83 (m, 1H). |
| 22 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H65 Cl2 F3 N8 O11 計算值1178.1, 實驗值1177.93;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 8.01 - 7.94 (m, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.78 (dd,J = 9.0, 2.6 Hz, 2H), 7.73 (dt,J = 8.3, 1.0 Hz, 1H), 7.67 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 2H), 7.46 (dd,J = 18.8, 8.0 Hz, 4H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.03 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.59 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 5.36 - 5.30 (m, 2H), 5.05 (dd,J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.27 - 4.21 (m, 3H), 4.13 (s, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.61 - 3.44 (m, 17H), 3.07 (q,J = 6.5 Hz, 2H), 2.87 (ddd,J = 17.1, 13.9, 5.4 Hz, 3H), 2.03 (d,J = 6.2 Hz, 2H), 2.01 - 1.94 (m, 6H), 1.94 - 1.91 (m, 1H), 1.91 - 1.82 (m, 3H), 1.76 (m, 2H), 1.46 (p,J = 6.2, 5.2 Hz, 3H), 1.34 (s, 1H), 1.29 (m, 3H), 1.28 - 1.22 (m, 21H), 0.88 - 0.83 (m, 3H). |
| 23 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1208.1;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 7.99 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.80 - 7.77 (m, 2H), 7.74 - 7.71 (m, 1H), 7.61 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.59 - 7.56 (m, 1H), 7.48 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.45 (d,J = 7.7 Hz, 2H), 7.36 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.13 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.60 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 12.9, 5.5 Hz, 1H), 4.24 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 4.10 (q,J = 13.7 Hz, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.61 (t,J = 5.5 Hz, 2H), 3.56 - 3.53 (m, 2H), 3.53 - 3.44 (m, 14H), 3.12 (m, 3H), 2.97 - 2.83 (m, 4H), 2.05 - 1.91 (m, 6H), 1.35 - 1.26 (m, 3H), 1.24 (s, 4H), 1.09 (s, 3H), 0.88 - 0.83 (m, 1H). |
| 24 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H66 Cl2 F3 N9 O11 計算值1193.11, 實驗值1192.4;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.79 - 7.75 (m, 2H), 7.57 (m, 1H), 7.45 (dd,J = 10.5, 8.0 Hz, 4H), 7.34 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.21 (m, 2H), 7.13 (t,J = 8.9 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.33 (ddd,J = 5.7, 4.4, 1.1 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.22 (m, 4H), 3.70 (s, 2H), 3.63 - 3.57 (m, 4H), 3.57 - 3.46 (m, 16H), 3.14 (s, 1H), 2.88 (m, 1H), 1.98 (m, 6H), 1.46 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 1.33 - 1.20 (m, 13H), 0.88 - 0.83 (m, 2H). |
| 27 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1208.3;1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.64 - 7.59 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.38 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 4H), 7.19 (ddd,J = 8.4, 7.6, 1.0 Hz, 1H), 7.05 - 6.99 (m, 2H), 6.92 (dd,J = 8.6, 3.4 Hz, 1H), 6.48 (m, 2H), 4.96 - 4.91 (m, 1H), 4.59 (d,J = 13.3 Hz, 1H), 4.25 (m, 4H), 3.91 - 3.58 (m, 20H), 3.53 (d,J = 6.3 Hz, 2H), 3.30 (m, 3H), 3.10 (t,J = 12.8 Hz, 2H), 2.93 - 2.52 (m, 12H), 2.10 (m, 4H), 1.95 - 1.55 (m, 20H), 1.30 - 1.26 (m, 1H). |
| 28 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1208.3.1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.10 (s, 1H), 7.90 (t,J = 5.58 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 1.34, 7.76 Hz, 1H), 7.74-7.71 (m, 3H), 7.56 (dd,J = 7.20, 8.50 Hz, 1H), 7.45 (d,J = 8.04 Hz, 2H), 7.43 (d,J = 7.98 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 1H), 7.13 (d,J = 8.61 Hz, 1H), 7.05-7.00 (m, 3H), 6.60 (t,J = 5.75 Hz, 1H), 5.05 (dd,J = 5.44, 12.86 Hz, 1H), 4.51 (t,J = 7.03 Hz, 2H), 4.34 (d,J = 13.17 Hz, 1H), 3.87 (d,J = 13.32 Hz, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.64 (s, 2H), 3.61-3.58 (m, 4H), 3.55-3.54 (m, 2H), 3.52-3.50 (m, 2H), 3.48-3.46 (m, 10H), 3.13 (q,J = 6.21 Hz, 2H), 2.98-2.94 (m, 1H), 2.90-2.84 (m, 1H), 2.33-2.30 (m, 2H), 2.03-2.01 (m, 1H), 1.92 (t,J = 6.72 Hz, 2H), 1.70-1.65 (m, 2H), 1.51-1.45 (m, 1H), 1.37-1.32 (m, 1H), 1.23 (s, 1H). |
| 32 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H65 Cl2 F3 N8 O7 計算值1114.10, 實驗值1113.8; 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ 11.10 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.81 - 7.67 (m, 4H), 7.56 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 18.1, 6.4 Hz, 4H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 7.17 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 5.04 (dd, J = 12.9, 5.5 Hz, 1H), 4.51 - 4.38 (m, 1H), 4.35 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.84 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.27 (dd, J = 13.2, 6.9 Hz, 3H), 3.05 (dd, J = 12.4, 6.3 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 11.9 Hz, 2H), 2.92 - 2.82 (m, 2H), 2.58 (ddd, J = 5.8, 3.6, 2.7 Hz, 1H), 2.37 - 2.29 (m, 3H), 2.25 (dt, J = 14.7, 7.1 Hz, 3H), 2.05 - 1.98 (m, 1H), 1.95 - 1.87 (m, 2H), 1.67 (t, J = 13.4 Hz, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 2H), 1.51 - 1.38 (m, 3H), 1.38 - 1.19 (m, 10H). |
| 37 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H65 Cl2 F3 N8 O10 計算值1162.1, 實驗值1161.39.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.81 (s, 1H), 7.68 - 7.63 (m, 2H), 7.58 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.4-7.29 (m, 7H), 7.15 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 7.01 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.79 (dd,J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 5.96 (s, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.89 (ddd,J = 12.6, 5.4, 3.5 Hz, 1H),4.50 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 4.23 (t,J = 6.6 Hz, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.74 (t,J = 5.0 Hz, 2H), 3.69 - 3.64 (m, 8H), 3.37 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 2.93 - 2.49 (m, 14H), 2.13 - 2.08 (m, 4H). |
| 38 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H69 Cl2 F3 N8 O11 計算值1206.15, 實驗值1205.73.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.80 (s, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 2H), 7.58 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 6H), 7.15 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 7.02 - 7.00 (m, 1H), 6.79 (ddd,J = 8.4, 4.3, 2.2 Hz, 1H), 6.17 (d,J = 19.3 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H), 4.88 (ddd,J = 12.5, 7.1, 5.3 Hz, 1H), 4.48 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 4.22 (t,J = 6.7 Hz, 2H), 3.83-3.74 (m, 7H), 3.67 (m, 10H), 3.39 (m, 2H), 3.29 (p,J = 6.8 Hz, 2H), 2.89 - 2.48 (m, 14H), 2.10 (q,J = 6.5 Hz, 4H) |
| 39 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H71 Cl2 F3 N8 O10 計算值1192.17, 實驗值1191.48.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.79 (s, 1H), 7.66 - 7.63 (m, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 8H), 7.24 (d,J = 7.4 Hz, 1H), 7.15 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (dd,J = 8.0, 5.5 Hz, 1H), 5.76 (s, 1H), 5.19 (ddd,J = 13.3, 8.1, 5.1 Hz, 1H), 4.54 - 4.48 (m, 1H), 4.34 (d,J = 15.9 Hz, 1H), 4.26 - 4.20 (m, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.79 - 3.73 (m, 6H), 3.68 - 3.59 (m, 12H), 3.40 (p,J = 4.9 Hz, 2H), 3.35 - 3.27 (m, 2H), 2.91 - 2.84 (m, 2H), 2.80 - 2.32 (m, 12H), 2.21 - 2.06 (m, 4H). |
| 40 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C60 H72 Cl2 F3 N9 O10 計算值1207.18, found1208.91.1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.07 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 7.80 - 7.71 (m, 3H), 7.48 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.44 (t,J = 7.5 Hz, 3H), 7.32 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 2H), 6.92 (dd,J = 7.4, 0.9 Hz, 1H), 6.80 (dd,J = 7.9, 0.9 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.35 - 5.31 (m, 1H), 5.19 (dd,J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 4.22 - 4.18 (m, 2H), 4.09 - 4.03 (m, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.67 - 3.54 (m, 6H), 3.51 - 3.42 (m, 10H), 3.17 (d,J = 5.3 Hz, 8H), 3.11 (q,J = 6.5 Hz, 2H), 3.03 - 2.93 (m, 2H), 2.81 - 2.74 (m, 1H), 2.33 - 2.23 (m, 2H), 2.05 - 1.91 (m, 6H), 1.78 (dtd,J = 74.4, 12.8, 4.5 Hz, 3H), 1.49 - 1.43 (m, 1H), 1.32 - 1.26 (m, 4H). |
合成化合物17
RB-在0℃下，2 (44 mg，0.063 mmol)用DMF (4 mL)中的HBTU (40 mg，0.10 mmol)處理。添加DIPEA (24 μL，0.14 mmol)之後，在室溫下攪拌溶液30分鐘。添加化合物M ((R)-18-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷酸)(50 mg，0.070 mmol)，所得混合物接著在室溫下攪拌2小時。將水添加至溶液中且用EA萃取溶液。收集有機層，經MgSO4
乾燥，接著濃縮。粗產物藉由管柱層析(CH2
Cl2
: MeOH，100:0至90:10)純化，產生呈白色固體狀的化合物17 (4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((R)-18-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺)(20 mg，23%)。LC-MS (m/z): [M]+
C70
H89
Cl2
F3
N10
O11
S計算值1406.50, 實驗值1406.64;1
H NMR (600 MHz, DMSO) δ 8.97 (s, 1H), 8.56 (t,J
= 6.0 Hz, 1H), 7.90 (d,J
= 9.4 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.75 (d,J
= 8.6 Hz, 3H), 7.48 (d,J
= 8.1 Hz, 1H), 7.45 - 7.39 (m, 6H), 7.38 (d,J
= 8.2 Hz, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 5.14 - 5.11 (m, 1H), 4.54 (d,J
= 9.4 Hz, 2H), 4.43 (td,J
= 8.3, 7.5, 4.1 Hz, 3H), 4.34 (s, 2H), 4.21 (q,J
= 7.7, 6.7 Hz, 4H), 4.10 (q,J
= 5.2 Hz, 2H), 3.66 (s, 4H), 3.64 - 3.57 (m, 6H), 3.47 (t,J
= 3.8 Hz, 12H), 3.17 (d,J
= 5.2 Hz, 2H), 3.12 (d,J
= 6.3 Hz, 3H), 3.00 (s, 2H), 2.55 (d,J
= 6.6 Hz, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.05 - 1.85 (m, 8H), 1.23 (s, 2H), 0.92 (s, 9H)。實例 3
合成34.
步驟1
將3-(2-(2-(2-(甲苯磺醯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸三級丁酯(135 mg，0.3 mmol，化合物O)及RB-1 (20 mg，0.3 mmol)溶解於DMF (2 mL)中之後，添加碳酸銫(185 mg，0.57 mmol)，且在室溫下攪拌混合物16小時。完成後，反應物用水淬滅且用EtOAc萃取3次。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO4
乾燥，濃縮，且粗物質藉由矽膠層析(0至10% MeOH/CH2
Cl2
)純化，產生3-(2-(2-(2-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺甲醯基)哌啶-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸三級丁酯(90 mg，33%)。1
H NMR (600 MHz, 氯仿-d
) δ 7.77 (dd,J
= 1.5, 0.7 Hz, 1H), 7.67 - 7.64 (m, 2H), 7.34 - 7.29 (m, 7H), 7.14 (dd,J
= 8.4, 7.7 Hz, 1H), 5.44 (s, 1H), 4.23 (t,J
= 6.7 Hz, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.72 (t,J
= 6.6 Hz, 2H), 3.67 - 3.59 (m, 12H), 3.33 (q,J
= 6.5 Hz, 2H), 2.98 - 2.93 (m, 2H), 2.65 (bs, 4H), 2.58 (t,J
= 5.9 Hz, 2H), 2.52 (t,J
= 6.6 Hz, 3H), 2.20 (s, 10H), 2.11 (p,J
= 6.7 Hz, 2H), 2.03 - 1.91 (m, 3H), 1.89 - 1.58 (m, 11H), 1.46 (s, 9H)。LC-MS (m/z): [M]+
C49
H64
Cl2
F3
N5
O7
計算值 962.97, 實驗值964.07。
步驟2
向化合物3-(2-(2-(2-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺甲醯基)哌啶-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸三級丁酯(106 mg，0.1 mmol)於CH2
Cl2
(0.5 mL)中之溶液中添加TFA (0.5 mL，6.6 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時。混合物用NaHCO3(aq)
中和且用CH2
Cl2
稀釋。CH2
Cl2
相經MgSO4
乾燥，濃縮，得到產物3-(2-(2-(2-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺甲醯基)哌啶-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸(化合物N，100 mg)，其不經純化即用於下一步驟。LC-MS (m/z): [M]+
C45
H56
Cl2
F3
N5
O7
計算值 906.87, 實驗值906.7
步驟3
在0℃下，用DMF (4 mL)中的HBTU (28 mg，0.074 mmol)處理3-(2-(2-(2-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺甲醯基)哌啶-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸(67 mg，0.074 mmol)。添加DIPEA (23 μL，0.13 mmol)之後，在室溫下攪拌溶液30分鐘。添加VHL.HCl (29 mg，0.067 mmol)，所得混合物接著在室溫下攪拌2小時。將水添加至溶液中且用EA萃取溶液。收集有機層，經MgSO4
乾燥，接著濃縮。粗產物藉由管柱層析(CH2
Cl2
: MeOH，100:0至90:10)純化，產生化合物34，N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-14-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-15,15-二甲基-12-側氧基-3,6,9-三氧雜-13-氮雜十六烷基)哌啶-4-甲醯胺(27 mg，28%)。1
H NMR (600 MHz, DMSO-d 6
) δ 8.98 (s, 1H), 8.59 (t,J
= 6.1 Hz, 1H), 7.93 (d,J
= 9.4 Hz, 1H), 7.82 (t,J
= 5.6 Hz, 1H), 7.79 - 7.73 (m, 3H), 7.72 (d,J
= 1.5 Hz, 1H), 7.50 - 7.36 (m, 10H), 7.32 (dd,J
= 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.17 (dd,J
= 8.5, 1.5 Hz, 1H), 5.15 (d,J
= 3.5 Hz, 1H), 4.55 (d,J
= 9.4 Hz, 1H), 4.47 - 4.40 (m, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.21 (td,J
= 8.7, 7.3, 4.0 Hz, 3H), 3.70 - 3.54 (m, 9H), 3.53 - 3.44 (m, 11H), 3.05 (q,J
= 6.5 Hz, 2H), 2.89 (d,J
= 10.8 Hz, 2H), 2.44 (s, 6H), 2.35 (dt,J
= 14.6, 6.1 Hz, 3H), 2.08 - 2.01 (m, 2H), 1.95 - 1.87 (m, 4H), 1.62 (d,J
= 11.2 Hz, 2H), 1.59 - 1.50 (m, 2H), 0.93 (s, 9H)。LC-MS (m/z): [M]+
C67
H84
Cl2
F3
N9
O9
S計算值1319.42, 實驗值1319.44。
使用相應的胺起始物質(如RB-1或RB-2)及羧酸(如化合物M)，或甲苯磺醯氧基三級丁酯，如化合物O，依類似於化合物17
或34
的方式製備實例化合物18、25-26、29-31、33、35。
實例 4
| 編號 | 結構及化學名稱 | 質量/NMR |
| 18 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C70 H88 Cl2 F3 N9 O11 S計算值1391.48, 實驗值1392.06;1 H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.97 (s, 1H), 8.56 (t,J = 6.1 Hz, 2H), 7.91 (d,J = 9.5 Hz, 3H), 7.77 (s, 3H), 7.46 - 7.35 (m, 9H), 7.33 (s, 1H), 5.13 (d,J = 3.6 Hz, 2H), 4.54 (d,J = 9.4 Hz, 2H), 4.46 - 4.39 (m, 4H), 4.34 (s, 2H), 4.25 - 4.17 (m, 4H), 3.87 (d,J = 13.6 Hz, 2H), 3.70 - 3.64 (m, 3H), 3.58 (ddd,J = 25.9, 11.2, 6.6 Hz, 9H), 3.49 - 3.42 (m, 14H), 3.05 (d,J = 6.4 Hz, 2H), 2.44 (s, 5H), 2.01 (d,J = 8.7 Hz, 2H), 1.93 - 1.86 (m, 3H), 1.67 (s, 2H), 1.48 (s, 1H), 1.32 (s, 1H), 1.23 (s, 2H), 0.92 (s, 9H). |
| 25 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C70 H88 Cl2 F3 N9 O11 S計算值1391.48, 實驗值1390.96;1 H NMR (600 MHz, DMSO) δ 9.27 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.57 (t,J = 6.1 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 8.00 - 7.95 (m, 1H), 7.93 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.78 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 7.64 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (dd,J = 14.9, 8.3 Hz, 3H), 7.41 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.39 - 7.34 (m, 3H), 7.31 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 5.13 (d,J = 3.5 Hz, 1H), 4.55 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.39 (m, 3H), 4.38 - 4.32 (m, 2H), 4.29 - 4.23 (m, 2H), 4.21 (dd,J = 15.8, 5.5 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 3.77 - 3.70 (m, 2H), 3.69 - 3.52 (m, 7H), 3.47 (dd,J = 7.2, 4.7 Hz, 10H), 3.29 (s, 1H), 3.05 (dq,J = 29.6, 11.8, 8.9 Hz, 4H), 2.94 - 2.88 (m, 2H), 2.57 (dd,J = 11.1, 4.6 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.36 - 2.31 (m, 1H), 2.27 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 2.21 - 2.13 (m, 1H), 2.06 - 1.99 (m, 1H), 1.97 - 1.86 (m, 3H), 1.84 - 1.76 (m, 1H), 1.67 (d,J = 13.2 Hz, 1H), 1.58 (dt,J = 25.4, 12.0 Hz, 2H), 1.50 (q,J = 7.3 Hz, 1H), 1.31 (s, 1H), 1.26 (d,J = 29.4 Hz, 2H), 1.19 - 1.14 (m, 1H), 0.92 (s, 9H). |
| 26 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C70 H88 Cl2 F3 N9 O11 S計算值1391.47, 實驗值1390.88;1 H NMR (600 MHz, DMSO) δ 8.98 (s, 1H), 8.57 (t,J = 6.1 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 7.80 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 7.78 - 7.72 (m, 3H), 7.71 (s, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.44 - 7.39 (m, 5H), 7.39 - 7.35 (m, 2H), 7.31 (dd,J = 8.5, 7.6 Hz, 1H), 7.17 (dd,J = 8.6, 1.4 Hz, 1H), 5.13 (d,J = 3.5 Hz, 1H), 4.98 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 4.55 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 4.43 (q,J = 7.5 Hz, 2H), 4.33 (d,J = 17.1 Hz, 2H), 4.22 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 4.19 (t,J = 6.2 Hz, 2H), 3.76 (d,J = 13.1 Hz, 1H), 3.69 - 3.62 (m, 4H), 3.60 (dd,J = 5.8, 2.1 Hz, 2H), 3.59 - 3.55 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.47 (q,J = 2.3, 1.7 Hz, 8H), 3.45 (d,J = 2.9 Hz, 4H), 3.18 - 3.05 (m, 3H), 2.72 - 2.61 (m, 3H), 2.61 - 2.54 (m, 3H), 2.44 (s, 4H), 2.34 (dq,J = 17.4, 5.6 Hz, 3H), 2.12 (d,J = 13.6 Hz, 2H), 2.03 (t,J = 10.3 Hz, 1H), 1.97 - 1.86 (m, 3H), 1.55 (d,J = 12.8 Hz, 2H), 1.43 (d,J = 13.1 Hz, 1H), 1.30 - 1.21 (m, 2H), 0.92 (s, 9H). |
| 29 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C70H88Cl2F3N9O11S計算值1391.48, 實驗值1393.3.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 8.68 (s, 1H), 7.83 (m, 2H), 7.62 (tt,J = 6.9, 1.6 Hz, 3H), 7.37 (s, 4H), 7.35 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 7.31 - 7.29 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.21 - 7.14 (m, 2H), 7.05 (dd,J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.72 (td,J = 8.1, 5.9 Hz, 1H), 4.62 - 4.45 (m, 4H), 4.36 (dt,J = 15.0, 5.6 Hz, 1H), 4.18 (t,J = 7.0 Hz, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.82 - 3.57 (m, 22H), 3.28 - 3.22 (m, 2H), 2.84 (bs, 2H), 2.74 - 2.41 (m, 18H), 2.21 - 2.14 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 1.66 - 1.42 (m, 4H), 1.27 (s, 1H), 0.96 (d,J = 3.2 Hz, 9H). |
| 30 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C68 H86 Cl2 F3 N9 O11 S計算值1365.44, 實驗值1368.0;1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 8.69 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.63 - 7.60 (m, 2H), 7.49 - 7.45 (m, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.38 - 7.33 (m, 5H), 7.29 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.26 - 7.23 (m, 2H), 7.14 (dd,J = 8.4, 7.6 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 4.73 (t,J = 8.1 Hz, 1H), 4.60 - 4.49 (m, 3H), 4.35 (dd,J = 15.0, 5.3 Hz, 1H), 4.24 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 4.09 (dt,J = 11.6, 1.6 Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.72 (m, 3H), 3.63 - 3.59 (m, 12H), 3.28 (p,J = 6.6 Hz, 4H), 2.72 (s, 5H), 2.52 (s, 3H), 2.50 - 2.46 (m, 4H), 2.19 (m, 4H), 2.10 (p,J = 6.8 Hz, 4H), 1.82 - 1.76 (m, 2H), 1.27 (t,J = 1.9 Hz, 2H), 0.96 (s, 9H). |
| 31 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C70 H88 Cl2 F3 N9 O11 S計算值1391.48, 實驗值1391.42;1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 8.69 (s, 1H), 7.83 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.64 (d,J = 8.3 Hz, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.39 - 7.35 (m, 4H), 7.33 - 7.29 (m, 4H), 7.16 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 7.07 (m, 3H), 4.73 (q,J = 8.4 Hz, 1H), 4.69 - 4.63 (m, 2H), 4.59 (dd,J = 15.0, 6.7 Hz, 1H), 4.55 - 4.45 (m, 4H), 4.35 (ddd,J = 14.9, 5.2, 2.5 Hz, 2H), 4.12 (t,J = 12.0 Hz, 1H), 3.85 (d,J = 13.6 Hz, 1H), 3.80 - 3.69 (m, 9H), 3.66 - 3.59 (m, 13H), 3.57 (dd,J = 11.2, 3.4 Hz, 1H), 3.38 (s, 2H), 2.91 (t,J = 12.8 Hz, 2H), 2.67 - 2.40 (m, 16H), 2.18 - 2.12 (m, 1H), 2.08 (s, 2H), 2.01 (s, 2H), 1.28 (s, 1H), 0.95 (s, 9H). |
| 33 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C70 H88 Cl2 F3 N9 O7 S計算值1326.59, 實驗值1326.77;1 H NMR (600 MHz, DMSO) δ 8.97 (s, 1H), 8.56-8.58 (t,J = 6.5 Hz, 1H), 7.87-7.89 (t,J = 5.4 Hz, 1H), 7.83-7.85 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 7.45 - 7.53 (d,J = 3.1 Hz, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.45 - 7.47 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.40-7.42 (m, 5H), 7.36-7.38 (dd,J = 8.6, 1.8 Hz, 2H), 7.29-7.31 (t,J = 8.1 Hz, 1H), 7.15-7.17 (dd,J = 8.7, 1.16 Hz, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.10-5.15 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.52-4.53 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 4.39-4.44 (m,2 H), 4.34 (d,J = 3.3, Hz, 2H), 34.18-4.22 (m,3 H), 3.8 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 3.64-3.65 (m,5 H), 3.53 (s, 3H), 3.03-3.06 (q,J = 7.0 Hz, 2H), 2.93-2.97 (t,J = 12.8Hz, 1H), 2.43-.2.46 (m,6 H), 2.28-2.34 (m, 3H), 2.23-2.27 (m, 3H), 2.06-2.11 (m, 1H), 2.00-2.03 (t,J = 11.2 Hz, 1H), 1.86-1.93 (m, 3H), 1.63-1.68 (t,J = 14.7 Hz, 2H), 1.41-1.48 (m,5 H), 1.03-1.32 (m, 1H), 1.21-1.23 (3,14 H), 0.91 (s, 9H). |
| 35 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C63 H76 Cl2 F3 N9 O7 S計算值1231.31, 實驗值1231.86;1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.98 (s, 1H), 8.61 (t,J = 6.2 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.80 (s, 2H), 7.47 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.45 - 7.41 (m, 3H), 7.39 (d,J = 14.2 Hz, 3H), 7.37 - 7.33 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.34 - 5.32 (m, 1H), 5.17 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 4.58 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 4.43 (q,J = 7.3 Hz, 2H), 4.34 (s, 1H), 4.27 - 4.19 (m, 3H), 4.12 (q,J = 5.3 Hz, 1H), 3.76 - 3.59 (m, 9H), 3.17 (d,J = 5.2 Hz, 2H), 3.07 (d,J = 6.6 Hz, 3H), 2.90 (s, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.03 - 1.85 (m, 14H), 1.46 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 1.32 - 1.20 (m, 18H), 0.93 (s, 9H), 0.87 - 0.84 (m, 2H). |
合成化合物43
向1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15-四氧雜-3-氮雜十八烷-18-酸(化合物P，依Nature Chemical Biology
, 第15卷,2019
, 7379 15所述的程序製備)(108 mg，0.204 mmol)中添加HBTU (89 mg，0.3234 mmol)、DMF (2.0 mL)及DIPEA (40 mg，0.306 mmol)，且在Ar氛圍下、在25℃下攪拌溶液15分鐘。接著添加RB-2 (146 mg，0.204 mmol)，所得混合物接著在25℃下攪拌2小時。反應混合物用乙腈稀釋至10 mL且經由製備型HPLC純化且凍乾，得到呈白色TFA鹽形式之標題化合物(61.0 mg，24%)。LC-MS (m/z): [M]+
C60
H74
Cl3
F3
N8
O10
計算值1230.64, 實驗值1229.63。1
H NMR (600 MHz, DMSO-d 6
) δ 9.65 (s, 1H), 8.47 (t,J
= 5.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 3H), 8.07 (t,J
= 6.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.80 - 7.74 (m, 2H), 7.63 (d,J
= 8.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J
= 8.0 Hz, 2H), 7.45 (d,J
= 8.2 Hz, 2H), 7.39 - 7.33 (m, 1H), 7.31 (d,J
= 8.0 Hz, 1H), 6.78 (m, 2H), 4.44 (m, 5H), 4.26 (t,J
= 6.9 Hz, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.79 - 3.72 (m, 12H), 3.67 - 3.59 (m, 10H), 3.43 (t,J
= 6.0 Hz, 3H), 3.28 (m, 4H), 3.17 (q,J
= 6.6 Hz, 2H), 3.01 (m, 3H), 2.92 (m, 2H), 2.66 (m, 3H), 2.16 - 2.09 (m, 1H), 2.08 - 2.03 (m, 1H), 1.97 (p,J
= 6.9 Hz, 2H), 1.87 (s, 2H), 1.73 (t,J
= 15.1 Hz, 2H)。
使用相應的胺起始物質(如RB-2)及羧酸(如化合物P)，依類似於化合物43的方式製備實例化合物41、42、44、45、47。
實例 5
生物活性
| 編號 | 結構及化學名稱 | 質量/NMR |
| 41 |  | LC-MS (m/z): [M+H]+ C60 H74 Cl3 F3 N7 O10 計算值1216.63, 實驗值1216.57.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.92 (s, 1H), 7.65 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 7.54 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (dd,J = 17.1, 8.1 Hz, 5H), 7.23 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 4.49 (s, 3H), 4.37 - 4.15 (m, 7H), 3.94 (d,J = 12.8 Hz, 2H),3.81 (s, 3H), 3.74 - 3.53 (m, 18H), 3.45 (s, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.11 (s, 4H), 2.90 (t,J = 13.3 Hz, 2H), 2.72 (s, 2H), 2.45 (d,J = 15.9 Hz, 2H), 2.34 (s, 2H), 2.20 (dd,J = 17.0, 10.3 Hz, 4H), 1.98 (s, 3H), 1.81 (d,J = 13.5 Hz, 2H). |
| 42 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C62 H77 Cl3 F3 N7 O11 計算值1259.68, 實驗值1259.88.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.82 (s, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 2H), 7.38 - 7.35 (m, 1H), 7.33 (d,J = 9.6 Hz, 2H), 7.30 (d,J = 8.0 Hz, 3H), 7.24 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 7.15 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 6.80 (t,J = 10.1 Hz, 2H), 4.55 (d,J = 13.1 Hz, 1H), 4.49 (d,J = 2.4 Hz, 2H), 4.27 - 4.19 (m, 4H), 3.89 (d,J = 13.9 Hz, 8H), 3.68 - 3.54 (m, 22H), 3.32 (q,J = 6.5 Hz, 2H), 2.97 (t,J = 12.8 Hz, 1H), 2.84 - 2.52 (m, 11H), 2.19 - 2.08 (m, 3H), 2.01 (d,J = 25.6 Hz, 2H), 1.76 (d,J = 14.3 Hz, 2H), 1.60 - 1.44 (m, 3H). |
| 44 |  | LC-MS (m/z): [M+H]+ C58 H70 Cl3 F3 N7 O9 計算值1172.58, 實驗值1172.79.1 H NMR (600 MHz, 氯仿-d ) δ 7.86 (s, 1H), 7.68 - 7.64 (m, 2H), 7.41 - 7.29 (m, 6H), 7.15 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.8 Hz, 2H), 4.87 (s, 1H), 4.58 - 4.43 (m, 3H), 4.29 - 4.18 (m, 3H), 4.05 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 3.91 - 3.75 (m, 6H), 3.67 - 3.53 (m, 10H), 3.33 (dd,J = 9.8, 6.3 Hz, 2H), 3.01 - 2.53 (m, 12H), 2.23 - 1.92 (m, 6H), 1.77 (d,J = 13.8 Hz, 2H), 1.49 (qd,J = 12.3, 4.3 Hz, 2H). |
| 45 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C58 H70 Cl3 F3 N8 O9 計算值1186.58, 實驗值1188.64.1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.46 (s, 1H), 8.45 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 8.38 (s, 3H), 8.07 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.77 (d,J = 8.7 Hz, 2H), 7.64 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.48 (m, 4H), 7.36 (m, 1H), 7.31 (dd,J = 8.5, 1.6 Hz, 1H), 6.78 (m, 2H), 4.45 (m, 5H), 4.26 (t,J = 6.9 Hz, 3H), 4.17 (d,J = 13.8 Hz, 2H), 3.81 (d,J = 14.1 Hz, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.65 (m, 4H), 3.48 (m, 8H), 3.43 (m, 2H), 3.28 (m, 5H), 3.17 (q,J = 6.6 Hz, 2H), 3.05 - 2.90 (m, 5H), 2.72 - 2.62 (m, 3H), 2.15 - 2.02 (m, 2H), 1.97 (p,J = 6.9 Hz, 2H), 1.87 (s, 2H), 1.73 (t,J = 14.2 Hz, 2H). |
| 46 |  | LC-MS (m/z): [M]+ C49 H53 Cl3 F3 N7 O5 計算值983.35, 實驗值982.57.1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.50 (s, 1H), 8.49 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 8.43 (s, 3H), 8.03 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.81 - 7.73 (m, 2H), 7.65 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (m, 4H), 7.36 (m, 1H), 7.31 (dd,J = 8.5, 1.6 Hz, 1H), 6.78 (m, 2H), 4.88 (m, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.27 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 3.75 (m, 4H), 3.66 (m, 4H), 3.40 (t,J = 12.7 Hz, 2H), 3.28 (d,J = 12.0 Hz, 2H), 3.18 (q,J = 6.5 Hz, 2H), 3.10 (m, 1H), 3.00 (m, 2H), 2.92 (d,J = 12.5 Hz, 2H), 2.67 (s, 2H), 2.26 - 2.18 (m, 1H), 2.12 (m, 1H), 2.03 - 1.95 (m, 2H), 1.87 (s, 2H), 1.77 (m, 2H). |
測試多種RAS-PROTAC使目標蛋白降解的特異性及能力。下文描述不同分析的簡要說明。
評價RAS-PROTAC在KRAS蛋白降解方面之細胞效能的西方墨點法
RAS
基因(KRAS
、NRAS
及HRAS
)為人類癌症中最頻繁突變的致癌基因。所有人類癌症中約30%存在其功能獲得型突變。作為最頻繁突變的RAS同功異型物，90%胰管腺癌、30%肺腺癌及40%大腸直腸腺癌正出現突變的KRAS。此等高量存在使得KRAS成為藥物開發中最重要的腫瘤學目標之一。
RAS為小GTP酶轉導蛋白，其起始下游信號傳導分子活化，從而允許轉導信號自細胞表面傳輸至細胞核，且在基本的細胞過程(諸如細胞分化、生長、趨化性及細胞凋亡)中起關鍵作用。RASG12C
突變體中的半胱胺酸殘基已被利用於設計共價抑制劑。臨床前資料已展示KRASG12C
抑制劑阻斷G12C KRAS基因突變的腫瘤生長。此使得KRAS成為癌症治療中有前景的治療目標。然而，KRASG12C
抑制劑無法阻斷其他G12及G13 KRAS基因突變的腫瘤生長。
在本發明中，RAS-PROTAC係指包括RAS蛋白之目標結合劑的PROTAC。經由西方墨點法分析測試RAS-PROTAC之不同化合物的細胞RAS蛋白降解。下文利用RAS-PROTAC說明本發明之實施例的益處。
在西方墨點法實驗中，在具有10% FBS之DMEM培養基中培養BT-474 (KRASWT
)及MIA PaCa-2 (KRASG12C
)細胞。在具有10% FBS之RPMI-1640培養基中培養BxPC3 (KRASWT
)及KLM-1 (KRASG12D
)細胞。在具有10% FBS之L15培養基中培養MDA-MB-231 (KRASG13D
)細胞。BT-474、MIA PaCa-2、BxPC3及MDA-MB-231已自美國菌種保藏中心(American Type Culture Collection)建立。KLM-1已自ExPASy建立。分析當天，用各種測試化合物將二十萬個細胞預處理24小時。24小時之後，藉由添加2× SDS樣品緩衝液來收集全細胞溶解物。藉由SDS-PAGE電泳分離蛋白質且轉移至PVDF膜上。使用各種初級抗體及二級抗體，利用免疫墨點法，依循標準方案偵測蛋白質表現。針對KRAS的抗體係購自Abcam (Cambridge, UK)。抗兔IgG、HRP連接的二級抗體係購自Cell Signaling Technology (Danvers, MA)。針對肌動蛋白的抗體係購自Millipore (Burlington, MA)。藉由化學發光(SuperSignal™ West Femto最高靈敏度受質，Thermo Fisher, Waltham, MA)顯示免疫墨點且藉由ChemiDocTM
MP成像系統(Bio-Rad, Hercules, CA)偵測。亦藉由ChemiDocTM
MP成像系統定量西方墨點之色帶強度。將對應於藥物治療組之色帶的相對強度與未治療組的強度進行比較。
圖1展示分析結果。化合物5、10、11、12及16為異雙官能分子，其包含連接至羥腦苷脂E3連接酶結合部分的RAS結合部分。如圖1A中所示，化合物5、11、12及16有效地促進乳癌細胞株MDA-MB-231 (KRASG13D
)中之KRASG13D
降解。圖1B展示化合物5、11、12及16有效地促進胰臟癌細胞株KLM-1 (KRASG12D
)中之KRASG12D
降解。
圖2表明化合物5在具有突變KRAS基因之癌細胞株(諸如MDA-MB-231、KLM-1及MiaPaCa-2)中展現特異性KRAS突變蛋白降解活性，而在不含突變KRAS基因之細胞株(諸如BT474及BxPC-3)中則不然。相較於KRASG12C
，共價抑制劑僅可靶向KRASG12C
，且化合物5不僅可促進MiaPaCa-2細胞中之KRASG12C
降解，而且可促進KLM-1細胞中之KRASG12D
及MDA-MB-231細胞中之KRASG13D
降解。化合物5不引起AKT蛋白或肌動蛋白降解。
圖3A表明化合物7在癌細胞株Calu-1 (KRASG12C
)及MiA PaCa-2 (KRASG12C
)中展現特異性KRAS突變蛋白質降解活性，而在不含突變KRAS基因之細胞株(諸如BT474 (KRASWT
))中則不然。圖3B表明化合物43在癌細胞株MDA-MB-231 (KRASG13D
)、KLM-1 (KRASG12D
)、Calu-1 (KRASG12C
)及MiA PaCa-2 (KRASG12C
)中展現特異性KRAS突變蛋白質降解活性，而在不含突變KRAS基因之細胞株(諸如BT474 (KRASWT
))中則不然。
對雙官能化合物1-46使MDA-MB-231細胞株中之KRAS蛋白降解的初步篩選情況如表2中所示，其在上述條件下測試，且其中一些在1 μM及0.3 μM下接受進一步降解測試，如表3中所示。表4展示化合物在KLM-1細胞株中的降解作用，且表5展示1 μM及0.3 μM下的降解作用。表6展示化合物在MIA PaCa-2細胞株中的降解作用，且表7展示化合物在Calu-1細胞株中的降解作用。在表2及7中，「ND」意謂未測定，「A」意謂≥70%，B意謂在35至70%範圍內，C意謂≤35%，「━」意謂不降解，「*」意謂肌動蛋白殘餘＜70%。
比較實例 ：
| 表2：化合物1至46在MDA-MB-231細胞株中的降解初步篩選 | |||||
| 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | ||
| MDA-MB-231 (μM, KRASG13D ) | MDA-MB-231 (μM, KRASG13D ) | ||||
| 10 | 3 | 10 | 3 | ||
| 1 | C | C | 25 | A* | C |
| 2 | A* | C | 26 | A* | C |
| 3 | C | ━ | 27 | C | C |
| 4 | C | ━ | 28 | C | C |
| 5 | A | C | 29 | C | C |
| 6 | B | C | 30 | B* | C |
| 7 | A* | C | 31 | C | C |
| 8 | B* | C | 32 | C | ━ |
| 9 | A* | C | 33 | C | ━ |
| 10 | B | C | 34 | C | C |
| 11 | B | C | 35 | C | C |
| 12 | B* | ━ | 36 | C | C |
| 13 | B | C | 37 | B* | B* |
| 14 | B | C | 38 | A* | B* |
| 15 | B | C | 39 | A* | B |
| 16 | B | C | 40 | A* | C |
| 17 | A* | C | 41 | A* | A* |
| 18 | A* | ━ | 42 | A* | A* |
| 19 | C | ━ | 43 | A* | A |
| 20 | C | C | 44 | A* | ━ |
| 21 | C | C | 45 | A* | B |
| 22 | B | C | 46 | A* | B |
| 23 | B | C | |||
| 24 | B* | C |
| 表3：1.0 μM及0.3 μM之化合物在MDA-MB-231細胞株中的降解作用 | |||||
| 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | ||
| MDA-MB-231 (μM, KRASG13D ) | MDA-MB-231 (μM, KRASG13D ) | ||||
| 1 | 0.3 | 1 | 0.3 | ||
| 29 | C | C | 40 | C | ND |
| 30 | C | ND | 41 | B | ND |
| 37 | B | ND | 42 | B | ND |
| 38 | C | ND | 43 | B | B |
| 39 | B | ND | 46 | C | ━ |
| 表4：化合物在KLM-1細胞株中的降解篩選 | |||||
| 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | ||
| KLM-1 (μM, KRASG12D ) | KLM-1 (μM, KRASG12D ) | ||||
| 10 | 3 | 10 | 3 | ||
| 5 | B | C | 24 | A* | C |
| 8 | B* | C | 25 | A* | C |
| 10 | C | C | 26 | A* | B |
| 11 | B* | C | 27 | C | C |
| 12 | A* | C | 28 | C | C |
| 13 | B | C | 29 | ━ | ━ |
| 14 | C | ━ | 30 | A* | A* |
| 15 | C | C | 31 | ━ | C |
| 16 | B | C | 32 | C | ━ |
| 17 | A* | C | 33 | C | ━ |
| 18 | A* | C | 34 | C | C |
| 19 | C | ━ | 35 | C | C |
| 20 | C | ━ | 36 | C | C |
| 21 | C | ━ | 39 | B | ━ |
| 22 | B | C | 43 | A* | C |
| 23 | B | C | 46 | A* | B |
| 表5：1.0 μM及0.3 μM之化合物在KLM-1細胞株中的降解作用 | |||||
| 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | ||
| KLM-1 (μM, KRASG13D ) | KLM-1 (μM, KRASG13D ) | ||||
| 1 | 0.3 | 1 | 0.3 | ||
| 29 | C | C | 43 | C | C |
| 30 | A* | B | 46 | C | C |
| 39 | C | C |
| 表6：化合物在MIA PaCa-2細胞株中的降解作用 | ||||
| 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | |||
| MIA PaCa-2 (μM, KRASG12C ) | ||||
| 10 | 3 | 1 | 0.3 | |
| 5 | B | C | ND | ND |
| 7 | A* | C | C | ND |
| 29 | C | C | C | ND |
| 34 | B | C | ND | ND |
| 35 | C | ━ | ND | ND |
| 37 | B* | B* | ND | ND |
| 39 | A* | C | ND | ND |
| 41 | A* | B* | ND | ND |
| 43 | ND | A* | B | C |
| 46 | A* | A* | B* | C |
| 表7：化合物在Calu-1細胞株中的降解作用 | ||||
| 化合物編號 | 誘導濃度下的降解百分比 | |||
| Calu-1 (μM, KRASG12C ) | ||||
| 10 | 3 | 1 | 0.3 | |
| 5 | C | C | C | ND |
| 7 | B* | C | ND | ND |
| 29 | ━ | ━ | C | ND |
| 34 | A* | C | ND | ND |
| 35 | B* | C | ND | ND |
| 37 | ND | C | C | ND |
| 39 | ND | ND | C | C |
| 41 | ND | ND | C | C |
| 43 | ND | A* | C | C |
| 46 | ND | A* | C | C |
兩種RAS結合劑abd-7及CH2分別報導於NATURE COMMUNICATIONS (2018) 9:3169, 1~12及PNAS, 2019, 第116卷, 第7期, 2545-2550中。作為比較實例1至4，將此兩種結合劑與連接子-E3連接酶配位體結合而形成PROTAC分子。另外，量測比較實例1至4在Calu-1細胞株中的降解作用且結果展示於下表8中，其幾乎不展示降解作用。此表明並非如WO2018092723A1所揭露，所有的由任一種RAS結合劑形成之PROTAC分子可有效地使RAS蛋白降解，。
比較實例1
比較實例2
比較實例3
比較實例4
實例 6
抗增殖活性
| 表8 | |||
| 比較實例 | 誘導濃度下的降解百分比 | ||
| Calu-1 (μM, KRASG12C ) | |||
| 10 | 3 | 1 | |
| 1 | ━ | ━ | ━ |
| 2 | ━ | ━ | ━ |
| 3 | ━ | ━ | ━ |
| 4 | ━ | ━ | ━ |
如上文所提及，本發明之RAS-PROTAC可用於治療含有特異性RAS突變的疾病或病症。該等疾病可為癌症、自體免疫疾病、感染性疾病或血管增生性病症。癌症可為肺癌(例如非小細胞肺癌)、大腸癌、大腸直腸癌、乳癌、前列腺癌、肝癌、胰臟癌、膀胱癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌、子宮頸癌、口腔癌、皮膚癌、腦癌、淋巴瘤、白血病、膽道惡性腫瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌或骨髓性白血病。本發明之RAS-PROTAC對細胞生長的抑制係使用CellTiterTM
-96分析來量測。評價RAS-PROTAC對具有不同RAS突變之肺癌細胞株、乳癌細胞株及胰臟癌細胞株的細胞毒性。表9中所示的結果表明本發明的RAS-PROTAC對具有KRAS突變之癌細胞的毒性更大。表10展示化合物5、7、30、37、39、41、43、46在Calu-1、MIA PaCa-2及HCT-116細胞株中的IC50
。
表9
表10
實例 7 Ras-PROTAC 的 異種移植模型 ( 肺癌 )
| 化合物 | MDA-MB-231 KRASG13D (IC50 , μM) | BxPC3 KRASWT (IC50 , μM) |
| 5 | 5.3 | 6.7 |
| 7 | 4.3 | 5.7 |
| 11 | 4.1 | ＞10 |
| 30 | 4.4 | 9.2 |
| 37 | 3.4 | ＞10 |
| 39 | 2.9 | 9.2 |
| 41 | 1.1 | 3.3 |
| 43 | 0.9 | 3.1 |
| 46 | 1.6 | 7.3 |
| 化合物 | Calu-1 KRASG12C (IC50 , μM) | MIA PaCa-2 KRASG12C (IC50 , μM) | HCT116 KRASG12D (IC50 , μM) |
| 5 | ND | 2.7 | 4.6 |
| 7 | 3.6 | ND | ND |
| 30 | 4.4 | 4.0 | ND |
| 37 | 7.5 | 4.6 | 3.6 |
| 39 | 6.9 | 3.8 | 5.1 |
| 41 | 1.5 | 1.2 | 1.5 |
| 43 | 0.4 | ND | 1.3 |
| 46 | 1.8 | 3.0 | 1.3 |
此研究的目標係評估Ras-PROTAC對雄性NOD SCID小鼠中之Calu-1人類肺癌異種移植模型的活體內抗腫瘤功效。
調配測試物化合物5、化合物7、化合物39及相應媒劑且腫瘤內(IT)注射給與小鼠，每天一次，連續14天。將Calu-1細胞培養在補充有10%胎牛血清之RPMI-1640培養基中，在37℃下，含有5% CO2
之空氣氛圍中作為單層細胞之體外培養。腫瘤細胞以常規方式藉由胰蛋白酶-EDTA處理繼代培養，每週兩次。收集處於指數生長期之生長細胞且計數以用於腫瘤接種。6-7週齡之雄性NOD SCID小鼠係購自BioLasco Taiwan Co., LTD.且適應環境一週。各籠中圈養五隻小鼠。所有動物均安置於19-25℃，12小時亮/12小時暗循環之動物設施中。動物自由獲取嚙齒動物顆粒狀食物且隨意飲水。將Calu-1細胞皮下(SC)植入雄性NOD SCID小鼠之右側腹中(每隻小鼠0.1 mL含5×106
個細胞之1:1 PBS/基質膠混合物)。當平均腫瘤體積已達到170 mm3
時，將小鼠隨機分為5組(每組N=5-7隻)。腫瘤內(IT)注射給與媒劑、化合物5 (10 mg/kg)、化合物7 (10 mg/kg)及化合物39 (10 mg/kg)，每天一次，連續14天。每週三次監測且記錄腫瘤體積、體重、死亡率及明顯毒性跡象，持續28天。每週三次使用卡尺量測腫瘤體積(mm3
)且根據下式計算：腫瘤體積= (w 2
×l
)/2，其中w
= 腫瘤寬度且l
= 腫瘤直徑長度(mm)。腫瘤生長抑制(TGI)百分比係使用下式計算：%TGI = [1 - (T/C)] × 100%，其中T及C分別表示處理組及對照組之平均腫瘤體積。應用單向ANOVA，隨後進行鄧尼特檢驗，以便在媒劑組與測試物處理組之間作出比較。*P＜0.05時，差異視為顯著。動物每週稱重三次，直至研究完成。體重變化係依相較於初始體重之體重增加百分比計算。
圖4A展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的腫瘤生長曲線。小鼠腫瘤內(IT)注射給與測試物化合物5 (10 mg/kg)、化合物7 (10 mg/kg)及化合物39 (10 mg/kg)，每天一次，連續14天。應用單向ANOVA，隨後進行鄧尼特檢驗，以便在媒劑組與測試物處理組之間作出比較。*P＜0.05時，視為顯著差異。10 mg/kg的化合物5顯示低抗腫瘤活性，其TGI值為25% (D28)。10 mg/kg的化合物7使第8天至第28天的Calu-1腫瘤生長顯著減少，其TGI值範圍為38%至55%，且對於Calu-1異種移植而言，視為中等有效的。10 mg/kg的化合物39使第8天至第28天的Calu-1腫瘤生長顯著減少，其TGI值範圍為23%至52%，且對於Calu-1異種移植而言，視為中等有效的。
圖4B展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的體重變化。小鼠腫瘤內(IT)注射給與測試物化合物5 (10 mg/kg)、化合物7 (10 mg/kg)及化合物39 (10 mg/kg)，每天一次，連續14天。整個實驗期間未觀測到體重減輕。實例 8
此研究的目標係評估Ras-PROTAC對雄性NOD SCID小鼠中之Calu-1人類肺癌異種移植模型的活體內抗腫瘤功效。調配測試物化合物7 (3 mg/kg及10 mg/kg)、化合物43 (10 mg/kg)及相應媒劑且腫瘤內(IT)注射給與小鼠，每天一次，連續28天。小鼠腫瘤內(IT)注射給與5 mg/kg的化合物37，每天一次，連續14天。將Calu-1細胞培養在補充有10%胎牛血清之RPMI-1640培養基中，在37℃下、含有5% CO2
之空氣氛圍中作為單層細胞體外培養。腫瘤細胞以常規方式藉由胰蛋白酶-EDTA處理繼代培養，每週兩次。收集處於指數生長期之生長細胞且計數以用於腫瘤接種。6-7週齡之雄性NOD SCID小鼠係購自BioLasco Taiwan Co., LTD.且適應環境一週。各籠中圈養五隻小鼠。所有動物均安置於19-25℃，12小時亮/12小時暗循環之動物設施中。動物自由獲取嚙齒動物顆粒狀食物且隨意飲水。將Calu-1細胞皮下(SC)植入雄性NOD SCID小鼠之右側腹中(每隻小鼠0.1 mL含5×106
個細胞之1:1 PBS/基質膠混合物)。當平均腫瘤體積已達到160 mm3
時，將小鼠隨機分為5組(每組N=5-6隻)。腫瘤內(IT)注射給與媒劑、化合物7 (3 mg/kg及10 mg/kg)、化合物43 (10 mg/kg)，每天一次，連續28天。腫瘤內(IT)注射給與5 mg/kg的化合物37，每天一次，連續14天。每週三次監測且記錄腫瘤體積、體重、死亡率及明顯毒性跡象，持續28天。每週三次使用卡尺量測腫瘤體積且根據下式計算：腫瘤體積= (w 2
×l
)/2，其中w
= 腫瘤寬度且l
= 腫瘤直徑長度(mm)。腫瘤生長抑制(TGI)百分比係使用下式計算：%TGI = [1 - (T/C)] × 100%，其中T及C分別表示處理組及對照組之平均腫瘤體積。應用單向ANOVA，隨後進行鄧尼特檢驗，以便在媒劑組與測試物處理組之間作出比較。*P＜0.05時，視為顯著差異。動物每週稱重三次，直至研究完成。體重變化係依相較於初始體重之體重增加百分比計算。
圖5A展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的腫瘤生長曲線。小鼠腫瘤內注射給與測試物化合物7 (3及10 mg/kg)及化合物43 (10 mg/kg)，每天一次，連續28天。小鼠腫瘤內注射給與5 mg/kg的化合物37，每天一次，連續14天。應用單向ANOVA，隨後進行鄧尼特檢驗，以便在媒劑組與測試物處理組之間作出比較。*P＜0.05時，視為顯著差異。3 mg/kg的化合物7展示低抗腫瘤活性，其TGI值為24% (D28)。10 mg/kg的化合物7使Calu-1腫瘤生長顯著減少，其TGI值為51% (D28)。5 mg/kg的化合物37對Calu-1異種移植物展示低抗腫瘤活性，其TGI值為37% (D28)。10 mg/kg的化合物43使第2天至第28天的Calu-1腫瘤生長顯著減少，其TGI值範圍為50%至86%，且對於Calu-1異種移植而言，視為明顯有效的。
圖5B展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的體重變化。小鼠腫瘤內注射給與測試物化合物7 (3及10 mg/kg)及化合物43 (10 mg/kg)，每天一次，連續28天。小鼠腫瘤內注射給與5 mg/kg的化合物37，每天一次，連續14天。在處理組中未觀測到體重減輕。
對於具有RAS突變之癌症患者而言，本發明之RAS-PROTAC為有前景的新穎治療劑。
本申請案提及多項已頒予之專利、公開之專利申請案、期刊論文及其他出版物，該等文獻皆以引用之方式併入本文中。若所併入之任一參考文獻與本說明書之間存在衝突，則以本說明書為準。另外，本發明之屬於先前技術之任何特定實施例可明確地自申請專利範圍中之任一或多項排除。由於此類實施例被認為是一般熟習此項技術者已知的，因此可將其排除，即使本文中未明確闡述排除。本發明之任何特定實施例可出於任何原因自任何申請專利範圍排除，無論與先前技術之存在是否相關。
熟習此項技術者將認識到，或僅使用常規實驗便能夠確定本文所述之特定實施例的許多等效物。本文所述之本發明實施例的範疇不希望侷限於以上描述，而是如隨附申請專利範圍中所闡述。一般技術者將瞭解，可在不脫離如以下申請專利範圍所定義之本發明精神或範疇的情況下對本說明書進行各種變更及潤飾。
圖1A為一系列西方墨點染色圖，其展示在24小時處理之後，例示性化合物對MDA-MB-231 (KRASG13D
)細胞中之KRAS蛋白含量的影響。圖1B為一系列西方墨點染色圖，其展示在24小時處理之後，例示性化合物對KLM-1 (KRASG12D
)細胞中之KRAS蛋白含量的影響。此等圖式表明例示性化合物具有顯著的KRAS降低作用。
圖2為一系列西方墨點染色圖，其展示在24小時處理之後，化合物5對不同人類癌症細胞株中之KRAS蛋白含量的影響。此等圖式表明化合物5具有顯著的KRAS降低作用。
圖3A為一系列西方墨點染色圖，其展示出在24小時處理之後，例示性化合物7對Calu-1 (KRASG12C
)、MIA PaCa-2 (KRASG12C
)及BT-474 (KRASWT
)細胞中之KRAS蛋白含量的影響。圖3B為一系列西方墨點染色圖，其展示在24小時處理之後，例示性化合物43對Calu-1 (KRASG12C
)、MIA PaCa-2 (KRASG12C
)、KLM-1 (KRASG12D
)、MDA-MB-231 (KRASG13D
)及BT-474 (KRASWT
)細胞中之KRAS蛋白含量的影響。
圖4A展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的腫瘤生長曲線。小鼠腫瘤內(IT)注射給與測試物化合物5 (10 mg/kg)、化合物7 (10 mg/kg)及化合物39 (10 mg/kg)，每天一次，連續14天。應用單向ANOVA，隨後進行鄧尼特檢驗(Dunnett's test)，以便在媒劑組與測試物處理組之間作出比較。*P＜0.05時，差異視為顯著。圖4B展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的體重變化。小鼠腫瘤內(IT)注射給與測試物化合物5 (10 mg/kg)、化合物7 (10 mg/kg)及化合物39 (10 mg/kg)，每天一次，連續14天。
圖5A展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的腫瘤生長曲線。小鼠腫瘤內注射給與測試物化合物7 (3及10 mg/kg)及化合物43 (10 mg/kg)，每天一次，連續28天。小鼠腫瘤內注射給與5 mg/kg的化合物37，每天一次，連續14天。應用單向ANOVA，隨後進行鄧尼特檢驗，以便在媒劑組與測試物處理組之間作出比較。*P＜0.05時，差異視為顯著。圖5B展示Calu-1植入之雄性NOD SCID小鼠的體重變化。小鼠腫瘤內注射給與測試物化合物7 (3及10 mg/kg)及化合物43 (10 mg/kg)，每天一次，連續28天。小鼠腫瘤內注射給與5 mg/kg的化合物37，每天一次，連續14天。
Claims (22)
- 一種式(I)之雙官能化合物， RB─連接子─ULM (I) 或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、多晶型物、互變異構體、立體異構體、同位素增濃之衍生物、前藥， 其中： RB為RAS蛋白結合部分； ULM為E3泛素連接酶結合部分；且 連接子為共價結合至該RB及ULM部分的基團； 其中RB由式RB-I表示：其中： Ar1 為經一或多個選自由以下組成之群之取代基取代的伸苯基：C1~4 烷基、C1~4 烷氧基、OH、NH2 、CN、OCF3 及鹵素； Ar2 為經一至三個選自由以下組成之群之基團取代的芳基：H、C1~4 烷基、C1~4 烷氧基、OH、NH2 、CN、OCF3 及鹵素； R1 為一鍵、C1-6 伸烷基、C3-8 伸環烷基，或包含1至3個選自O及S之雜原子的C1-6 伸雜烷基； R2 為H或C1-4 烷基；
係選自由以下組成之群：空缺、胺、
； t為整數1～10； R3 為H、鹵素或CH3 ；且 虛線表示連至連接子的連接點。
- 如請求項1之雙官能化合物，其中在RB-I之式中： Ar1 為經一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代的伸苯基：OMe、NH2 、OCF3 、F或Cl； Ar2 為經一至三個選自由以下組成之群之基團取代的芳基：H、CH3 、OMe、NH2 、CN、F或Cl； R1 為C2-4 伸烷基、C3-6 伸環烷基，或包含選自O及S之雜原子的C1-4 伸雜烷基； R2 為H或C1-3 烷基；為
； t為1～4； R3 為H、F或CH3 ；且 虛線表示連至連接子的連接點。
- 如請求項1之雙官能化合物，其中該式RB-I選自由以下組成之群：
； 其中虛線表示連至連接子的連接點。
- 如請求項1之雙官能化合物，其中ULM為羥腦苷脂E3泛素連接酶結合部分(CLM)、凡希培-林道(Von Hippel-Lindau，VHL) E3泛素連接酶結合部分(VLM)、DDB1相關及CUL4相關因子16 (DCAF16) E3泛素連接酶結合部分(DLM)、IAP E3泛素連接酶結合部分(ILM)，或小鼠雙微體2 (MDM2)同源物E3泛素連接酶結合部分(MLM)，或凱奇樣(Kelch-like) ECH相關蛋白-1 (KEAP1) E3泛素連接酶結合部分，或DCAF15 E3泛素連接酶結合部分，或RNF4 E3泛素連接酶結合部分，或RNF114 E3泛素連接酶結合部分，或芳烴受體(AhR) E3泛素連接酶結合部分。
- 如請求項4之雙官能化合物，其中ULM為選自由以下組成之群的該CLM：沙立度胺(thalidomide)、來那度胺(lenalidomide)、泊利度胺(pomalidomide)、其類似物，或其衍生物。
- 如請求項4之雙官能化合物，其中該CLM具有由下式表示的化學結構：其中： W係選自CH2 及C=O；且 Q1 、Q2 、Q3 及Q4 各自獨立地為C或N，且 其中Q1 、Q2 、Q3 及Q4 之一共價連接至連接子。
- 如請求項6之雙官能化合物，其中該CLM選自由以下組成之群：； 其中虛線表示連至連接子的連接點。
- 如請求項4之雙官能化合物，其中ULM為具有如下所示之化學結構的該VLM：， 其中： R4 為H、乙基、異丙基、三級丁基、二級丁基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基； R5 為H、鹵烷基、經取代或未經取代之烷基，或經取代或未經取代之環烷基； R6 選自由以下組成之群：H、鹵素、CN、OH、經取代或未經取代之雜芳基、經取代或未經取代之芳基、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經取代之鹵烷基、經取代或未經取代之鹵烷氧基、經取代或未經取代之環烷基，及經取代或未經取代之雜環烷基；且 虛線表示連至連接子的連接點。
- 如請求項8之雙官能化合物，其中： R4 為異丙基、三級丁基、環丙基，或環丁基。
- 如請求項8之雙官能化合物，其中： R5 為H、甲基、氟甲基，或環丙基。
- 如請求項4之雙官能化合物，其中ULM為具有如下所示之化學結構的該DLM：其中： R7 為H、鹵素、C1-4 烷基，或C1-4 烷氧基； Y為O或S或NH； Rm 為共價親電體，且係選自
；且 連接至Y的虛線表示連至連接子的連接點。
- 如請求項1之雙官能化合物，其中連接子使RB與ULM共價偶合。
- 如請求項1之雙官能化合物，其中連接子為-A1 …Aq -； A1 至Aq 各自獨立地選自由以下組成之群：一鍵、CRL1 RL2 、O、S、S=O、S(=O)2 、NRL3 、C(=O)、C(=O)NRL3 、NRL3 C(=O)、C≡C、經0-6個選自由RL1 及RL2 組成之群之取代基取代的C3-11 環烷基、經0-6個選自由RL1 及RL2 組成之群之取代基取代的C3-11 雜環基、經0-6個選自由RL1 及RL2 組成之群之取代基取代的芳基，及經0-6個選自由RL1 及RL2 組成之群之取代基取代的雜芳基，其中： RL1 及RL2 各自獨立地連接至另一A1 至Aq 而形成經0-4個RL5 基團取代的環烷基或雜環基部分； RL1 、RL2 、RL3 、RL4 及RL5 各自獨立地選自由以下組成之群：H、C1-8 烷基、O(C1-8 烷基)、S(C1-8 烷基)、NH(C1-8 烷基)、N(C1-8 烷基)2 、C3-11 環烷基、芳基、雜芳基、C3-11 雜環基、O(C1-8 環烷基)、S(C1-8 環烷基)、NH(C1-8 環烷基)、N(C1-8 環烷基)2 、OH、NH2 、SH、C≡CH、CO2 H、鹵素、CN、CF3 、CHF2 、CH2 F及NO2 ；且 q為大於或等於1之整數。
- 如請求項1之雙官能化合物，其中連接子選自由以下組成之群：
； 其中： k為整數0或1； m為選自0至12之整數； n為選自0至8之整數；且 虛線分別表示連至RB及ULM的連接點。
- 一種雙官能化合物，其選自由以下組成之群： N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(12-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-12-側氧基十二烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物1)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物2)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(4-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)氧基)乙醯胺基)丁醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物3)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物4)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物5)； 4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物6)； 4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物7)； 4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物8)； 4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12,15-五氧雜十八烷-18-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物9)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-苯基-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物10)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12,15-五氧雜十八烷-18-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物11)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-4-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯胺基)哌啶-4-甲醯胺(化合物12)； N-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺基)-4-側氧基丁基)-14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯胺(化合物13)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-3-甲醯胺(化合物14)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物15)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物16)； 4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((R)-18-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物17)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((R)-18-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物18)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)-2-甲基哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物20)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌啶-2-甲醯胺(化合物21)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)吡咯啶-2-甲醯胺(化合物22)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)-4-甲基哌啶-4-甲醯胺(化合物23)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-4-(14-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十四烷醯基)哌𠯤-2-甲醯胺(化合物24)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷-1-醯基)哌啶-3-甲醯胺(化合物25)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷-1-醯基)哌啶-2-甲醯胺(化合物26)； N-(3-(6-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物27)； N-(3-(7-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物28)； N-(3-(6-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物29)； N1-(4-((3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)胺基)-4-側氧基丁基)-N16-((R)-1-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)-4,7,10,13-四氧雜十六烷二醯胺(化合物30)； N-(3-(7-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-18-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-19,19-二甲基-16-側氧基-4,7,10,13-四氧雜-17-氮雜二十烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物31)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(9-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)壬醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物32)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(12-(((R)-1-((2R,4S)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-12-側氧基十二烷醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物33)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4- (三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-((S)-14-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羰基)-15,15-二甲基-12-側氧基-3,6,9-三氧雜-13-氮雜十六烷基)哌啶-4-甲醯胺(化合物34)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-3-側氧基丙氧基)乙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物35)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(4-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-2-側氧基乙基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物36)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-5-基)胺基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物37)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1,3-二側氧基異吲哚啉-5-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物38)； N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物39)； 4-胺基-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)-1-(1-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異吲哚啉-4-基)胺基)-3,6,9,12-四氧雜十五烷-15-醯基)哌啶-4-甲醯胺(化合物40)； 1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15-四氧雜-3-氮雜十八烷-18-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物41)； 1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15,18-五氧雜-3-氮雜二十一烷-21-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物42)； 4-胺基-1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12,15-四氧雜-3-氮雜十八烷-18-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物43)； 1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十五烷-15-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物44)； 4-胺基-1-(1-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)-2-側氧基-6,9,12-三氧雜-3-氮雜十五烷-15-醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物45)；及 4-胺基-1-(2-((1-(2-氯乙醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)氧基)乙醯基)-N-(3-(5-((4-(2,6-二氯苯甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吲哚-1-基)丙基)哌啶-4-甲醯胺(化合物46)； 或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、多晶型物、互變異構體、立體異構體、同位素增濃之衍生物，或前藥。
- 一種醫藥組合物，其包含有效量的如請求項1至15中任一項之雙官能化合物及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。
- 一種治療有效量之如請求項1至15中任一項之雙官能化合物的用途，其用於製造供預防、緩解及/或治療有需要之個體之RAS突變相關疾病的藥劑。
- 如請求項17之用途，其中該雙官能化合物與一或多種其他抗癌劑分開、依序或一起投與。
- 如請求項18之用途，其中該等其他抗癌劑選自由以下組成之群：曲妥珠單抗(trastuzumab)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、維莫德吉(vismodegib)、索尼得吉(sonidegib)、貝伐單抗(bevacizumab)、依維莫司(everolimus)、他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、氟維司群(fulvestrant)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、拉帕替尼(lapatinib)、來曲唑(letrozole)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、曲妥珠單抗-美坦新偶聯物(ado-trastuzumab emtansine)、帕博西尼(palbociclib)、西妥昔單抗(cetuximab)、帕尼單抗(panitumumab)、塞維-阿柏西普(ziv-aflibercept)、瑞戈非尼(regorafenib)、甲磺酸嗎替尼(lmatinib mesylate)、乙酸蘭瑞肽(lanreotide acetate)、舒尼替尼(sunitinib)、瑞戈非尼、地諾單抗(denosumab)、亞利崔托寧(alitretinoin)、索拉非尼(sorafenib)、帕唑帕尼(pazopanib)、坦西莫司(temsirolimus)、依維莫司(everolimus)、維甲酸(tretinoin)、達沙替尼(dasatinib)、尼羅替尼(nilotinib)、伯舒替尼(bosutinib)、利妥昔單抗(rituximab)、阿侖單抗(alemtuzumab)、奧伐木單抗(ofatumumab)、奧必塗單抗(obinutuxumab)、依魯替尼(ibrutinib)、艾德昔布(idelalisib)、博納吐單抗(blinatumomab)、索拉吉利(soragenib)、克卓替尼(crizotinib)、埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、二順丁烯二酸阿法替尼(afatinib dimaleate)、賽瑞尼布(ceritnib)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、尼沃單抗(nivolumab)、派立珠單抗(pembrolizumab)、奧希替尼(osimertinib)、萊西單抗(necitumumab)、白消安(busulfan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、異環磷醯胺(iphosphamide)、美法侖(melphalan)、氮芥(nitrogen mustard)、鏈脲菌素(streptozocin)、噻替派(thiotepa)、尿嘧啶氮芥(uracil nitrogen mustard)、三伸乙基蜜胺(triethylenemelamine)、替莫唑胺(temozolomide)、2-氯乙基-3-肌胺酸醯胺-1-亞硝基脲(SarCNU)、放射菌素-D (actinomycin-D)、博萊黴素(bleomycin)、念珠藻素(cryptophycins)、道諾黴素(daunorubicin)、小紅莓(doxorubicin)、艾達黴素(idarubicin)、伊立替康(irinotecan)、L-天冬醯胺酶(L-asparaginase)、絲裂黴素-C (mitomycin-C)、光神黴素(mitramycin)、溫諾平(navelbine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西他賽(docetaxel)、拓朴替康(topotecan)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、替尼泊苷(teniposide) (VM-26)、依託泊苷(etoposide)(VP-16)、5α-還原酶抑制劑、胺魯米特(aminoglutethimide)、阿那曲唑(anastrozole)、比卡魯胺(bicalutamide)、氯烯雌醚(chlorotrianisene)、己烯雌酚(diethylstilbestrol) (DES)、屈他雄酮(dromostanolone)、雌氮芥(estramustine)、乙烯雌二醇(ethinyl estradiol)、氟他胺(flutamide)、氟羥甲基睪酮(fluoxymesterone)、戈舍瑞林(goserelin)、羥基孕酮(hydroxyprogesterone)、來曲唑(letrozole)、亮丙立德(leuprolide)、乙酸甲羥孕酮(medroxyprogesterone acetate)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、甲基普賴蘇穠(methyl prednisolone)、甲基睪固酮(methyltestosterone)、米托坦(mitotane)、尼魯米特(nilutamide)、普賴蘇穠(prednisolone)、阿佐昔芬(arzoxifene) (SERM-3)、他莫昔芬(tamoxifen)、睪內酯(testolactone)、睪固酮(testosterone)、去炎松(triamicnolone)、諾雷德(zoladex)、全反式視黃酸、卡莫司汀(carmustine) (BCNU)、卡鉑(carboplatin) (CBDCA)、洛莫司汀(lomustine) (CCNU)、順-二胺二氯鉑(順鉑)、達卡巴𠯤(dacarbazine)、戈利德爾(gliadel)、六甲蜜胺(hexamethylmelamine)、羥脲(hydroxyurea)、左旋咪唑(levamisole)、米托蒽醌(mitoxantrone)、o,p'-二氯二苯基二氯乙烷(o,p'-DDD)(亦稱為離索准(lysodren)或米托坦(mitotane))、奧沙利鉑(oxaliplatin)、卟吩姆鈉(porfimer sodium)、丙卡巴肼(procarbazine)、甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)、氯去氧腺苷(chlorodeoxyadenosine)、胞嘧啶阿拉伯糖苷(cytosine arabinoside)、2'-去氧助間型黴素(2'-deoxycoformycin)、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、5-氟-2'-去氧尿苷(5-FUdR)、吉西他濱(gemcitabine)、喜樹鹼(camptothecin)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)、甲胺喋呤(methotrexate)、4-甲基硫代安非他命(4-methylthioamphetamine) (4-MTA)、硫鳥嘌呤(thioguanine)、α干擾素、BCG (卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin))、顆粒球群落刺激因子(G-CSF)、顆粒球-巨噬細胞群落刺激因子(GM-CSF)、介白素-2，及赫賽汀(herceptin)。
- 如請求項17之用途，其中該疾病為癌症、自體免疫疾病、感染性疾病，或血管增生性病症。
- 如請求項20之用途，其中該癌症選自由以下組成之群：肺癌、大腸癌、大腸直腸癌、乳癌、前列腺癌、肝癌、胰臟癌、膀胱癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌症、子宮頸癌、口腔癌、皮膚癌、腦癌、淋巴瘤、白血病、膽道惡性腫瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌，及骨髓性白血病。
- 如請求項21之用途，其中該癌症為胰臟癌、大腸癌、肺癌，或非小細胞肺癌。
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