TW202116334A - 預防或改善胃部疾病的組成物及其用途 - Google Patents

Abstract

本發明提供一種預防或改善胃部疾病的組成物，包含牛蒡濃縮物、褐藻醣膠、以及含有乳酸菌的益生菌添加物，及其用於製備預防或改善胃部疾病的醫藥組合物的用途。

Description

預防或改善胃部疾病的組成物及其用途

本發明係關於一種包含天然物中的牛蒡及褐藻醣膠及益生菌之組成物，及其用於製備預防、改善胃部疾病的醫藥組合物的用途。

消化系統疾病是一種現代人最為常見的疾病，包括急性胃炎、慢性胃炎、消化道潰瘍或功能性消化不良。以胃食道逆流來說，台灣每四人就有一人罹患胃部疾病，而台灣的胃潰瘍盛行率比起歐洲國家更是高出整整兩倍，因此，目前對於如何針對胃部疾病，達到有效、低副作用、低成本的預防及治療，有著迫切的需求。

現行治療方法以服用西藥的即時治療為主，然而，西藥往往伴隨副作用，長期劑量累積將影響身體健康，因此，服用無副作用之天然物或益生菌，逐漸成為胃部保健的選擇；然而，現今對於宣稱具有胃部保護功效的天然物或益生菌，是否確實具有實驗數據佐證功效、是否具有組合功 效、合適搭配比例為何，探討仍較為有限。

因此，如何提供一種新穎無副作用並具有良好胃部疾病改善功效之天然組成物，是急需解決的問題。

有鑑於此，本揭示內容之一目的在於提出一種預防或改善胃部疾病的組成物，及其可用於製備預防或改善胃部疾病的醫藥組合物的用途。

為了達到上述目的，本揭示內容的組成物，包含牛蒡濃縮物、褐藻醣膠(Fucoidan)、以及益生菌添加物，其中，益生菌添加物包含乳酸菌。

根據前述之組成物，其中乳酸菌包括約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)。

根據前述之組成物，其中乳酸菌為死菌。

根據前述之組成物，其中牛蒡濃縮物重量份介於3至300之間、褐藻醣膠重量份介於10至150、及益生菌重量份介於1至10之間。

根據前述之組成物，其中牛蒡濃縮物係經由水萃法或超臨界流體法萃取而得。

根據前述之組成物，其中褐藻醣膠係經由冷水、高溫或有機溶劑萃取而得。

根據前述之組成物，其應用形式包括粉末、膠囊、錠片、晶凍、或飲品。

為了達到上述目的，本揭示內容提供一種利用 前述組成物用於製備預防或改善胃部疾病的醫藥組合物的用途。

根據前述之用途，其中胃部疾病係包括胃發炎、胃潰瘍、或胃食道逆流。

在本揭示內容的實驗數據中證實，本案組成物可回復胃黏膜細胞活性(或稱存活率)，而三種添加物間具有協同效應，優於個別單獨使用，並進一步證實並非添加物濃度越高越好，三者具有最適作用比例範圍。

本揭示內容所提供的組成物，為首度包含此三種添加物的組成物，可用於預防、改善胃部疾病。三者間具有協同功效，無須大量添加，在特定比例下即可取得較佳效果，可節省生產成本，另外，益生菌添加物可適用於死菌的型式，不僅可降低汙染風險，且更可提升保存時間。

上述發明內容旨在提供本揭示內容的簡化摘要，以使閱讀者對本揭示內容具備基本的理解。此發明內容並非本揭示內容的完整概述，且其用意並非在指出本發明實施例的重要/關鍵特徵或界定本發明的範圍。

為讓本揭示內容之上述和其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之說明如下：

第1圖為本揭示內容之驗證實驗中單一添加物對胃黏膜 細胞保護效果比較圖。

第2圖為本揭示內容之驗證實驗中不同配方對胃黏膜細 胞保護效果對比圖。

第3圖為本揭示內容之驗證實驗中約氏乳桿菌對於配方的影響圖。

第4圖為本揭示內容之驗證實驗中牛蒡濃縮物對於配方的影響圖。

於本文中通篇所使用之詞彙一般代表其通常的意涵，至於一些特殊詞彙會在下文中具體定義，以提供實踐者額外的指引。為了方便起見，某些詞彙可能被特別標示，例如使用斜體與/或引號。不論它是否被特別標示，其詞彙之範圍和含義不受任何影響，與平常詞彙的範圍和含義是相同的。相同的事情可以被一種以上的方式所描述是可以被理解的。因此，用於一個或多個的術語的替代語言與同義詞可能會在本文中所使用，而其不是要闡述一個詞彙在本文所論述的內容有其任何特殊的意義。某些詞彙的同義詞將被使用，重複的使用一個或多個同義詞，並不會排除使用其他同義詞。本說明書內所討論的任何例證只用來作解說的用途，並不會以任何方式限制的本揭示內容或其例證之範圍和意義。同樣地，本揭示內容並不受限於本說明書中所提出的各種實施例。

於本文中，除非內文中對於冠詞有所特別限定，否則『一』與『該』可泛指單一個或多個。將進一步理解的是，本文中所使用之『包含』、『包括』、『具有』及 相似詞彙，指明其所記載的特徵、整數、步驟、與/或操作，但不排除其所述或額外的其一個或多個其它特徵、整數、步驟、與/或操作。

關於本文中所使用之『約』一般通常係指數值之誤差或範圍約百分之二十以內，較好地是約百分之十以內，而更佳地則是約百分之五以內。文中若無明確說明，其所提及的數值皆視作為近似值，即如『約』所表示的誤差或範圍。

於本文中，「益生菌」指食入後對宿主有正面效益的細菌或真菌，例如：乳酸菌或酵母菌。

於本文中，「食品添加物」為食品著色、調味、防腐、漂白、乳化、增加香味、安定品質、促進發酵、增加稠度、強化營養、防止氧化或其他必要目的，加入、接觸於食品之單方或複方物質。

於本文中，「晶凍」為透過水凝膠體作為活性物質的分散劑，所製備而得的可食性果凍膠。

為了使本揭示內容的敘述更加詳盡與完備，下文針對了本揭示內容的實施態樣與具體實施例提出了說明性的描述；但這並非實施或運用本發明具體實施例的唯一形式。以下所揭露的各實施例，在有益的情形下可相互組合或取代，也可在一實施例中附加其他的實施例，而無須進一步的記載或說明。

本揭示內容提供一種預防或改善胃部疾病的組成物，包含牛蒡濃縮物、褐藻醣膠(Fucoidan)、以及益生 菌添加物。

在本揭示內容的一些實施例中，牛蒡濃縮物重量份介於3至300之間、褐藻醣膠重量份介於10至150之間、及益生菌添加物重量份介於1至10之間。

在本揭示內容的一些實施例中，牛蒡濃縮物重量份介於3至250之間、介於3至200之間、介於3至100之間、介於3至50之間、介於3至40之間、介於20至35之間、介於25至35之間、或介於27.5至32.5之間。

在本揭示內容的一些實施例中，褐藻醣膠重量份介於100至150之間、介於10至100之間、介於10至90之間、介於10至80之間、介於10至70之間、介於10至60之間、介於10至50之間、介於10至40之間、介於10至30之間、介於10至20之間、介於10至17.5之間、介於12.5至20之間、或介於12.5至17.5之間。

在本揭示內容的一些實施例中，益生菌添加物重量份介於5至10之間、介於7至9之間、介於2.5至7.5之間、介於4至6之間、介於1至5之間、介於2至4之間、或介於1至3之間。

在本揭示內容的一些實施例中，益生菌添加物包含一種或多種乳酸菌。

在本揭示內容的一些實施例中，乳酸菌可抑制胃幽門螺旋桿菌或改善胃部細胞(例如：胃黏膜細胞)的存活率；在一些實施例中，乳酸菌包括雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、或鏈球 菌屬(Streptococcus)；在一些實施例中，乳酸菌包括約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)。

在本揭示內容的一些實施例中，乳酸菌為死菌；在一實施例中，死菌係經過熱滅殺處理而得。

在本揭示內容的一些實施例中，乳酸菌在益生菌添加物中，含量介於1x10³個/克至1x10¹⁰個/克之間或1x10⁴個/克至1x10⁷個/克之間。

本領域具通常知識者可由以上所揭露乳酸菌之含量與重量份，換算出等效的比例與含量組合，或是以常規手段對乳酸菌進行處理取得含量改變但功效相近之益生菌添加物，任何源於以上有效重量份或含量所衍伸之等效換算範圍，均應涵括於本案的申請專利範圍之內。

牛蒡為一種植物，富含多種養分，具有抑菌、降血糖、降血脂(特別是膽固醇)、降血壓、抗氧化、抗突變性、降尿酸、抗發炎、提高人體免疫力等功效。牛蒡所含的寡糖及膳食纖維可健胃整腸及消脹氣，改善便祕。牛蒡根部含有人體必需的各種胺基酸，特別是具有特殊藥理作用的胺基酸(例如具有健腦作用的天門冬胺酸、精氨酸)，莖葉含有揮髮油、鞣質、咖啡酸、綠原酸、異綠原酸等。果實含有牛蒡甙、脂肪油、牛蒡酚等多種化學成分。牛蒡中的主要成分木酚素具有抑制血小板活化因子對於血小板的結合作用，而牛蒡甙和牛蒡酚有抗腎炎、抗癌的活性。

在本揭示內容的一些實施例中，該牛蒡濃縮物即為牛蒡萃取物中；在本揭示內容的一些實施例中，牛蒡濃 縮物係經由水萃法或超臨界流體法萃取而得；在一實施例中，牛蒡濃縮物係經由水萃法萃取而得。

褐藻醣膠為一種富含硫酸基的多醣類物質，主要存在於褐藻、綠藻等藻類的細胞外間質，也是一些海洋無脊椎動物(例如：海膽和海參)的組成成分之一，其中褐藻醣膠具有抗菌、抗氧化劑、抗凝血、抗病毒、抗腫瘤、或抗發炎等多種生物活性。

在本揭示內容的一些實施例中，褐藻醣膠由該領域具通常知識者經由常規手段由褐藻或海洋無脊椎動物提煉而得；在一些實施例中，褐藻醣膠由冷水萃取而得；在一些實施例中，褐藻醣膠由高溫法(例如高溫乾燥)提煉而得；在一些實施例中，褐藻醣膠由有機溶劑萃取而得。

該領域具通常知識者可由本案實施例例示條件，推算出哺乳動物(特別是人類)的最適服用劑量，並適度添加其他機能性成分(例如：非乳酸菌之益生菌或其他天然物中的有益成分)、或食品添加物至組成物中。

在本揭示內容的一些實施例中，牛蒡濃縮物、褐藻醣膠、以及益生菌添加物可以分別製備為固態或液態待混合物，於服用時再合併為組成物，或是在製備時便混合而成。

在本揭示內容的一些實施例中，組成物的應用形式包括粉末、膠囊、錠片、晶凍、或飲品。

本揭示內容更提供該組成物用於製備預防或改善胃部疾病的醫藥組合物的用途。

在本揭示內容的一些實施例中，該醫藥組合物劑型包含顆粒、膠囊、粉末、液態製劑或其組合；在某些實施例中，尚包含藥學上可接受之稀釋劑、賦形劑或載劑。

在本揭示內容的一些實施例中，胃部疾病係包括胃黏膜過度損害相關之疾病，包括但不限於：胃發炎、胃潰瘍、或胃食道逆流；在某些實施例中，預防或改善胃部疾病係包括保護或修復胃黏膜、抑制胃幽門螺旋桿菌、或提升腸胃道益生菌；在一實施例中，預防或改善胃部疾病係包括提升胃黏膜細胞存活率。

在以下描述中，將詳細敘述許多特定細節以使讀者能夠充分理解以下的實施例。然而，可在無此等特定細節之情況下實踐本揭示內容之實施例。

約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)屬於乳酸菌中的乳桿菌屬(Lactobacillus)，具有舒緩過敏、減少膽固醇、提升免疫力、改善腸道環境等功能。此外，針對胃部保健，約氏乳桿菌與雙歧桿菌屬及鏈球菌屬類似，均可抑制胃幽門螺旋桿菌，然而，目前還尚未有關於約氏乳桿菌可直接改善胃部細胞存活率的記載。在一些實施方式中，約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)包括但不限於約氏乳桿菌N6.2、約氏乳桿菌456、約氏乳桿菌BS15、或約氏乳桿菌No.1088(Microbiologyopen.2015 Jun；4(3)：465-474)，以上菌株均為發明所屬技術領域中具有通常知識者易於獲得。

目前，天然物改善胃部健康的研究方面，記載 牛蒡中存在活性成分可改善胃潰瘍，以及褐藻醣膠存在於胃部保健的複方中。然而，儘管天然物組合琳瑯滿目，卻尚未有關於包含牛蒡濃縮物及褐藻醣膠的組成，用於預防或改善胃部疾病的研究與公開，且亦無探討益生菌與前述兩種天然物的搭配，是否具有功效的相關研究。

因此，本案發明人以下述胃黏膜細胞活性實驗，對比牛蒡濃縮物、褐藻醣膠、及乳酸菌在各比例搭配下的胃黏膜活性改善效果，驗證本案組成物之功效，其中乳酸菌實驗菌株，則是採用約氏乳桿菌No.1088。

實施例1、胃黏膜細胞損傷模式建立

首先，建立胃黏膜細胞損傷模式，胃黏膜細胞使用大鼠胃黏膜細胞株RGM1(日本RIKEN BRC CELL BANK的細胞編號為RCB0876)，可透過該領域具通常知識者之常規手段培養繼代後，以5x10⁵cell/mL培養於適當培養基中，並添加會導致消化性潰瘍的吲哚美辛(Indomethacin，縮寫為IND)2mM作用16小時，以誘發胃黏膜細胞損傷。

前述經IND處理之RGM1細胞再透過Methylthiazoletetrazolium(MTT)試驗，測定胃黏膜細胞的活性(存活率)，確認相較於未添加IND之對照組(細胞活性定義為100%)，RGM1細胞活性確實顯著降低至小於5%，成功建立胃黏膜細胞損傷模式。

實施例2、單一添加物之胃黏膜細胞保護效果

為了測定牛蒡濃縮物、褐藻醣膠、以及約氏乳 桿菌是否具有胃黏膜細胞保護效果，及其合適濃度區間，首先進行待測物的製備。牛蒡濃縮物係藉由牛蒡濃縮處理而得，褐藻醣膠係由褐藻萃取而得，約氏乳桿菌則使用約氏乳桿菌No.1088，並透過熱滅殺方式製備為死菌型式的粉末，以降低操作過程的汙染風險、並提升保存時間，粉末中菌株的含量比例約為1.0x10⁴個/克。

此三單一添加物以水為溶劑，根據表1的濃度配製，並以水作為未添加任何配方的控制組。各組分別與2mMIND共添加至已培養RGM1細胞的DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)/Hams F-12培養基中，培養基含有20%胎牛血清(Fetal Bovine Serum，FBS)，共同作用16小時後，再以MTT試驗(培養基置換為含有0.5mg/mL的MTT，作用4小時)，測定活細胞數，以未處理IND的細胞作為對照組，換算為細胞活性(以對照組作為100%，計算相對百分比)，結果見於第1圖。

表1

第1圖結果顯示，約氏乳桿菌在測定濃度區間(0.1ppm至10ppm)內，並未表現出胃黏膜細胞的保護功效，細胞活性均低於10%；而褐藻醣膠及牛蒡濃縮物則具有劑量效應，即細胞活性與濃度呈現顯著正相關，然而僅在10X濃度組中，褐藻醣膠方能呈現約50%(150ppm)、牛蒡 濃縮物約30%-40%(300ppm)的細胞活性回復，顯示高濃度區間才具有細胞保護作用。

實施例3、不同配方下之胃黏膜細胞保護效果

為了解牛蒡濃縮物、褐藻醣膠、以及約氏乳桿菌是否具有組合功效及合適劑量區間，將三者以單一添加物測定的濃度範圍(表1)設計三種配方(配方A、配方B、及配方C)；其中，配方B中的褐藻醣膠及牛蒡濃縮物係為配方A的10倍，而配方C中的約氏乳桿菌及褐藻醣膠係為配方A的10倍，各配方包含三種等倍率變化(0.1X、1X、10X)，共九組不同組合的添加物濃度，以表2表示。

表2

各配方及濃度組合分別與2mM IND共添加至含有20% FBS，已培養RGM1細胞的DMEM/Hams F-12培養基中，共同作用16小時，再以前述MTT試驗測定細胞活性，結果見於第2圖。

第2圖與各配方添加物濃度比對，結果呈現，10X配方A(133.6%)及10X配方C(142.8%)具有胃黏膜細 胞保護功效，均可使細胞活性回復、甚至高於對照組(未添加IND的細胞，細胞活性為100%)的活性，而其中，配方A的三添加物濃度均為最低。10X配方C的約氏乳桿菌與褐藻醣膠為10X配方A的10倍，細胞活性回復程度則是稍高於配方A。另外，10X配方B的褐藻醣膠與牛蒡濃縮物為10X配方A的10倍，卻未有如配方A的細胞活性回復效果，顯示褐藻醣膠(配方A：15ppm，配方B：150ppm)與牛蒡濃縮物(配方A：150ppm，配方B：300ppm)並非添加越多越有效。

為對比是否組合中具有協同效應，將10X配方A、10X配方B、10X配方C與實施例2的同濃度下單一添加物所達成的效果對照，結果請見表3，其中，符號「O」表示配方所添加的濃度。

表3

表3分析結果顯示，三者在單一添加物的1X組別(約氏乳桿菌(簡寫為菌)1ppm、褐藻醣膠(簡寫為褐)15ppm、牛蒡濃縮物(簡寫為牛)30ppm)時，單獨均未能回復細胞活性至20%以上，但在同時包含三者的10X配方A中， 則可回復細胞活性至133.6%，超過100%(單一添加時的細胞活性分別為：菌0.2%、褐15.8%、牛14.1%)，顯示約氏乳桿菌、牛蒡濃縮物及褐藻醣膠之間具有內部協同效應。10X配方C的細胞活性可回復至142.8%，也同樣觀察到協同效應(單一添加時的細胞活性分別為：菌5.6%、褐50.4%、牛14.1%)。然而在10X配方B中，即使共添加約氏乳桿菌、褐藻醣膠、及牛蒡濃縮物，且褐藻醣膠及牛蒡濃縮物的濃度在單一添加物測試時可回復細胞活性(單一添加時的細胞活性分別為：菌0.2%、褐50.4%、牛33.4%)，10X配方B的細胞活性則僅為8.8%，並未達單一添加牛蒡濃縮物或是褐藻醣膠的回復程度，也未能達到10X配方A與10X配方C的細胞活性回復程度。顯示在特定比例下方可發揮較佳的協同效應。

實施例4、添加物對於配方之影響

根據表2的濃度組合，分析當牛蒡濃縮物(30ppm)與褐藻醣膠(15ppm)濃度固定的情形下，約氏乳桿菌相差10倍時的10X配方A(1ppm)與1X配方B(0.1ppm)之間細胞活性的差異，結果見於第3圖。

在第3圖中，可觀察到約氏乳桿菌濃度為1ppm以下時，隨著約氏乳桿菌濃度提升，細胞活性回復效果越佳，顯示在特定牛蒡濃縮物(30ppm)及褐藻醣膠(15ppm)濃度下，約氏乳桿菌含量的增加，在配方組合所調控的細胞活性回復扮演重要角色。

另一方面，同樣根據表2的濃度組合，分析約氏 乳桿菌(1ppm)與褐藻醣膠(15ppm)濃度固定的情形下，牛蒡濃縮物相差10倍的10X配方A(30ppm)與1X配方C(3ppm)之間細胞活性的差異，結果見於第4圖。

在第4圖中，可觀察到當牛蒡濃縮物濃度為30ppm以下時，隨著牛蒡濃縮物濃度提升，細胞活性回復效果越佳，顯示在特定約氏乳桿菌(1ppm)及褐藻醣膠(15ppm)濃度下，牛蒡濃縮物的添加，在配方組合調控下的細胞活性回復也扮演重要角色。

本揭示內容之配方組成的優勢，包括但不限於以下特點：

1.本揭示內容的組合為首度提出

不同於市面上常見的各式複方、單方，本揭示內容為第一次發現含有益生菌、褐藻醣膠、牛蒡濃縮物的組合具有針對胃黏膜細胞保護的協同效應，無法由個別添加物的功效而聯想預期。

2.最適添加比例

本揭示內容證實此組合並非添加物濃度越高越好，而是在特定比例下才能具有最佳效果，透過適當比例的應用，有助於降低製備成本，並優化實施功效。

3.對人體無害且同步達成多重保健應用

本揭示內容中使用之牛蒡、褐藻醣膠、乳酸菌中的約氏乳桿菌，同時具有其他益生優勢，合併使用不僅對人體無害，且可同步發揮包括胃部保護外的其他保健效應。

Claims (9)

1. 一種預防或改善胃部疾病的組成物，包含一牛蒡濃縮物、一褐藻醣膠(Fucoidan)、以及一益生菌添加物，其中，該益生菌添加物包含一乳酸菌。
2. 如請求項1所述之組成物，其中該乳酸菌包括約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)。
3. 如請求項1所述之組成物，其中該乳酸菌為死菌。
4. 如請求項1、2、或3所述之組成物，其中該牛蒡濃縮物重量份介於3至300之間、該褐藻醣膠重量份介於10至150之間、及該益生菌添加物重量份介於1至10之間。
5. 如請求項4所述之組成物，其中該牛蒡濃縮物係經由水萃法或超臨界流體法萃取而得。
6. 如請求項1所述之組成物，其中該褐藻醣膠係經由冷水、高溫或有機溶劑萃取而得。
7. 如請求項1所述之組成物，其應用形式包括粉末、膠囊、錠片、晶凍、或飲品。
8. 一種如請求項1所述之組成物用於製備預防或改善胃部疾病的醫藥組合物的用途。
9. 如請求項8所述之用途，其中該胃部疾病係包括胃發炎、胃潰瘍、或胃食道逆流。

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