TW202113081A - 用於治療α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法 - Google Patents
用於治療α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202113081A TW202113081A TW109119068A TW109119068A TW202113081A TW 202113081 A TW202113081 A TW 202113081A TW 109119068 A TW109119068 A TW 109119068A TW 109119068 A TW109119068 A TW 109119068A TW 202113081 A TW202113081 A TW 202113081A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- aat
- drug substance
- dose
- aat rnai
- pharmaceutical composition
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/322—2'-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/33—Chemical structure of the base
- C12N2310/332—Abasic residue
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/343—Spatial arrangement of the modifications having patterns, e.g. ==--==--==--
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/344—Position-specific modifications, e.g. on every purine, at the 3'-end
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/352—Nature of the modification linked to the nucleic acid via a carbon atom
- C12N2310/3521—Methyl
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/353—Nature of the modification linked to the nucleic acid via an atom other than carbon
- C12N2310/3533—Halogen
Abstract
本發明描述使用包含AAT RNAi劑之醫藥組合物治療需要治療的人類患者之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法。本文所揭示的包含AAT RNAi劑之醫藥組合物在投與有此需要的人類患者時可治療與AAT缺乏症相關之肝病,諸如慢性肝炎、肝硬化、肝細胞癌風險增加、轉胺酶升高(transaminitis)、膽汁鬱積、纖維化、暴發性肝衰竭及其他肝臟相關疾病。
Description
本文揭示使用包含抑制α-1抗胰蛋白酶基因表現之RNA干擾(RNAi)劑之醫藥組合物治療人類個體的α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)(包括治療由AATD引起之症狀及疾病)的方法。
α-1抗胰蛋白酶(AAT、α1-抗胰蛋白酶或A1AT)係屬於人類中由SERPINA1
基因編碼之絲胺酸蛋白酶抑制蛋白(serpin)超家族之蛋白酶抑制劑。正常AAT蛋白質係主要在肝臟中由肝細胞合成並分泌至血液中之循環糖蛋白蛋白酶抑制劑。AAT之已知生理功能係抑制嗜中性粒細胞蛋白酶,其可用來保護發炎期期間宿主組織免於非特異性損傷。
α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)係導致低循環濃度之AAT且引起成年早期肺病及兒童及成年肝病之常染色體、共顯性遺傳病症。AAT缺乏症(AATD)之流行範圍為每1,500至5,000個個體中約1個個體且最通常影響具有歐洲血統的人。
AATD之臨床上最顯著形式係由Z突變體引起。Z突變體對偶基因藉由單點突變使突變體Z形式AAT蛋白質(「Z-AAT蛋白質」)趨於異常折疊,從而引起細胞內滯留在肝細胞之內質網(ER)中。其他罕見突變亦導致累積在肝細胞中之蛋白質錯折疊。突變體Z-AAT蛋白質單體能夠聚集成聚合物聚集體,其有時稱為「小球」。聚合物小球團對ER產生應力並觸發連續肝細胞損傷及癒合之循環,從而導致纖維化、肝硬化、及肝癌風險之增加。此外,缺乏循環之抗蛋白酶活性使肺容易受到嗜中性粒細胞彈性蛋白酶損害,特別是在肺發炎之情況下,導致呼吸併發症(諸如肺氣腫)或其他肺病之發展。
具有純合子PiZZ基因型之個體具有重度功能性AAT缺乏症。每週使用AAT增強療法(使用純化的人類AAT)有助於防止受侵襲個體之肺損壞。此類當前市售產品包括例如Prolastin®-C、Prolastin®、GlassiaTM
、Aralast® NP及Zemaira®。然而,儘管純化的AAT之投與可緩解或幫助防止由於內源性分泌的AAT之缺乏或低濃度引起之肺損壞,但AATD患者(具有致聚合物形成之AAT突變)仍易患由於過度異常折疊之AAT蛋白質之沉積及積聚引起之內質網肝貯積病。肝細胞中「小球」構形之積聚Z-AAT蛋白質係AATD肝病之熟知組織學特性且咸信會導致造成引起肝損傷(包括肝細胞損壞及死亡及罹患AATD的個體之慢性肝損傷)結果之蛋白毒性效應(參見,例
如,D. Lindblad等人,Hepatology 2007, 46: 1228-1235)。已報導,不產生AAT之無效/無效患者會發展重度肺病但具有正常肝臟形態,提供突變體AAT積聚而不缺乏循環AAT會導致肝病之證據(Feldman, G.等人,The Ultrastructure of Hepatocytes in alpha-1 antitrypsin deficiency with genotype Pi_
,Gut.
1975;16:796-799)。
AATD使個體易患兒童及成年肝病及易患成年早期發作型肺氣腫。罹患AATD的患者通常會發展肝病,該肝病即使在嬰儿期亦可是嚴重或致命的。雖然有些罹患AATD的患者最初避開偵測,但最終纖維化會積聚並導致臨床上明顯之肝病。肝臟損傷之臨床特徵包括慢性肝炎、肝硬化、肝細胞癌風險增加、轉胺酶升高(transaminitis)、膽汁鬱積、纖維化及甚至暴發性肝衰竭。
肝細胞中Z-AAT蛋白質小球積聚已被明確確定為AATD患者進行性肝病之原因。消除肝細胞中突變體蛋白積聚可阻止肝病之進展。去除突變體蛋白損害亦可使已經存在的纖維化消退。目前尚無臨床批准的治療來預防由AATD引起之肝病發作,減緩由AATD引起之肝病進展,或以其他方式治療由AATD引起之肝病。
RNAi劑已成為用於治療AATD患者之有前景的途徑。給藥策略係利用RNAi劑治療AATD之重要考量。患者注重較少頻率地給藥,導致順服性增加,及較小給藥量可對藥物之整體安全性有利。因此,需要用於治療AATD之低劑量、非頻繁方法。
本文描述治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法。在一個態樣中,該等方法包括對人類個體投與醫藥組合物,該醫藥組合物包含描述於表2中之組合物(亦即,AAT RNAi藥物物質,本文中亦稱為ADS-001),其劑量係在約5 mg與約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下投與且兩次給藥之間間隔至少約一個月(亦即,至少每月給藥)。在一些實施例中,用於本文所揭示的方法中之醫藥組合物包含如描述於表3中之調配的AAT RNAi藥物物質(本文中亦稱為ADS-001-1),由其組成,或基本上由其組成。
另外,本文描述治療有此需要的人類個體之AATD的方法,該等方法包括對人類個體投與包含如描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(亦即,ADS-001)之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg與約200 mg之間,其中該醫藥組合物係經皮下投與及兩次劑量投藥之間間隔至少約一個月(亦即,每月給藥)。
此外,本文描述治療有此需要的人類個體之AATD的方法,該等方法包括對人類個體投與包含如描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(亦即,ADS-001)之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg與約300 mg之間,其中該醫藥組合物係經皮下投與及兩次劑量投藥之間間隔約三個月(亦即,每季度給藥)。
本文亦描述治療有此需要的人類個體之AATD的方法,該等方法包括對人類個體投與包含如描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(亦即,ADS-001)之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg與約200 mg之間,其中該醫藥組合物係經皮下投與及兩次劑量投藥之間間隔約三個月(亦即,每季度給藥)。
本文描述治療有此需要的人類個體之AATD的方法,該等方法包括對人類個體投與包含如描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(亦即,ADS-001)之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg與約300 mg之間,其中該醫藥組合物係經皮下投與,且其中該初始劑量之後係約一個月後的第二劑量,及此後對於隨後劑量,兩次劑量投藥之間間隔約三個月。
本文描述治療有此需要的人類個體之AATD的方法,該等方法包括對人類個體投與包含如描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(亦即,ADS-001)之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg與約200 mg之間,其中該醫藥組合物係經皮下投與,且其中該初始劑量之後係約一個月後的第二劑量,及此後對於隨後劑量,兩次劑量投藥之間間隔約三個月。
在一些實施例中,以各劑量投與的AAT RNAi藥物物質之劑量係在約25 mg與約200 mg之間。在一些實施例中,以各劑量投與的AAT RNAi藥物物質之劑量係在約100 mg與約200 mg之間。在一些實施例中,在以各劑量投與的AAT RNAi藥物物質之劑量為約100 mg。在一些實施例中,以各劑量投與的AAT RNAi藥物物質之劑量為約200 mg。在一些實施例中,以各劑量投與的AAT RNAi藥物物質之劑量為不大於200 mg。
本文所揭示的治療方法可減慢或阻止患有AATD的人類個體之肝病之進展,此可允許纖維化組織修復。在一些實施例中,本文所揭示的方法可治療AATD肝病,包括纖維化、肝硬化、肝細胞癌風險增加、慢性肝炎、轉胺酶升高、膽汁鬱積、暴發性肝衰竭及由AATD引起之其他肝臟相關病狀及疾病。
可對人類個體投與本文所揭示的包含AAT RNAi劑之醫藥組合物以抑制該個體中α-1抗胰蛋白酶基因之表現。在一些實施例中,該個體係先前已經診斷為患有AATD的人類。
本發明之另一個態樣提供一種描述於表2中之AAT RNAi藥物物質於治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)之用途,其中該用途包括對患者投與包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下注射每月投與一次。
本發明之另一個態樣提供一種描述於表2中之AAT RNAi藥物物質於治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)之用途,其中該用途包括對患者投與包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下注射每三個月投與一次。
從以下詳細描述、附圖及從申請專利範圍,當可明瞭本發明之其他目標、特徵、態樣及優點。
序列表
本申請案包含序列表,其已以ASCII格式提交且以全文引入之方式併入本文中。ASCII副本名為30674_WO1_SequenceListing.txt及大小為6 kb。RNAi 劑
本文所述的方法包括對人類個體投與醫藥組合物,其中該醫藥組合物包括包含能夠抑制AAT基因之表現之RNA干擾(RNAi)劑(在本文及此項技術中稱為RNAi劑或RNAi觸發劑)之組合物。在一些實施例中,本文所述的方法包括對人類個體投與醫藥組合物,其中該醫藥組合物包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(亦稱為ADS-001)。適用於本文所揭示的方法中之組合物包含抑制人類個體中AAT基因之表現之RNAi劑及靶向部分或靶向基團。在一些實施例中,該RNAi劑包含提供於表1A及1B中之核苷酸序列,及該RNAi劑之有義股係進一步連接或共軛至包含三個N-乙醯基-半乳糖胺靶向部分之靶向基團(參見,例如,表B)。抑制人類個體中AAT基因之表現之RNAi劑稱為「AAT RNAi劑」。
一般而言,AAT RNAi劑包含經退火以形成雙鏈體(duplex)之有義股(亦稱為過客股(passenger strand))及反義股(亦稱為導引股)。本文所揭示的AAT RNAi劑包括能夠以序列特異性方式降解或抑制AAT mRNA之信使RNA(mRNA)轉錄本之轉譯之RNA或RNA樣(例如,經化學修飾之RNA)寡核苷酸分子。本文所揭示的AAT RNAi劑可透過RNA干擾機制(亦即,透過與哺乳動物細胞之RNA干擾途徑機制(RNA誘導之沉默複合物或RISC)相互作用來誘導RNA干擾),或藉由任何替代機制或途徑來起作用。儘管據信如本文所使用的該術語,AAT RNAi劑主要透過RNA干擾機制起作用,但所揭示的RNAi劑不受任何特定途徑或作用機制約束或限制。一般而言,RNAi劑包含長度各為16至49個核苷酸之有義股及反義股,且包括但不限於:短或小干擾RNA(siRNA)、雙股RNA(dsRNA)、微型RNA(miRNA)、短髮夾RNA(shRNA)及切丁酶(dicer)受質。
AAT RNAi劑有義股通常為16至49個核苷酸長度,及AAT RNAi劑反義股通常為18至49個核苷酸長度。在一些實施例中,該有義股及反義股獨立地為17至26個核苷酸長度。在一些實施例中,該有義股及反義股獨立地為21至26個核苷酸長度。在一些實施例中,該有義股及反義股獨立地為21至24個核苷酸長度。在一些實施例中,該有義股及/或反義股獨立地為16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個核苷酸長度。在一些實施例中,該有義股及反義股均為21個核苷酸長度。該有義股及反義股可係相同長度或不同長度。該有義股及反義股亦可在AAT RNAi劑的一端或兩端形成突出的核苷酸。
AAT RNAi劑抑制、沉默或敲低AAT基因表現。如本文所用,在提及AAT之表現時,術語「沉默」、「減少」、「抑制」、「下調」或「敲低」意指基因之表現(如藉由自基因轉錄之RNA之濃度或自其中基因經轉錄之細胞、細胞組、組織、器官或個體中mRNA轉譯之多肽、蛋白質或蛋白質亞單元之濃度來衡量)在用RNAi劑處理細胞、細胞組、組織、器官或個體時與未經如此處理之第二細胞、細胞組、組織、器官或個體相比減小。在一些情況下,基因表現之降低係藉由將人類個體中在投與包含AAT RNAi劑之組合物之前之AAT mRNA或AAT蛋白質之基線濃度與在投與治療劑之後之AAT mRNA或AAT蛋白質濃度進行比較來衡量。
AAT基因抑制、沉默或敲低可藉由此項技術中已知的任何適宜檢定或方法來測量。本文所述的非限制性實例、以及在國際專利申請公開案第WO 2018/132432號(專利申請案第PCT/US2018/013102號)(該案之全文係以引入之方式併入本文中)中所述的實例提供用於測量AAT基因表現抑制之適宜檢定之某些實例。正常人類之參考AAT mRNA基因轉錄本(SERPINA1)(稱為轉錄本變體1;GenBank NM_000295.4)可參見SEQ ID NO:1。
適用於本文所揭示的方法之AAT RNAi劑可共價連接或共軛至包含一或多個N-乙醯基-半乳糖胺部分之靶向基團。在實施例中,將適用於本文所揭示的方法中之AAT RNAi劑共價連接或共軛至包含一或多個N-乙醯基-半乳糖胺部分之靶向基團從而形成描述於表2中之AAT RNAi藥物物質。在一些實施例中,本文所述的方法包括投與描述於表2中之AAT RNAi藥物物質。描述於表2中之AAT RNAi藥物物質包含顯示於表1A(反義股)及表1B(有義股)中之AAT RNAi劑。N-乙醯基-半乳糖胺部分有助於將AAT RNAi劑靶向容易存在於肝細胞之表面上之去唾液酸糖蛋白受體(ASGPr),此導致AAT RNAi劑藉由內吞作用或其他手段內化。
可適用於本文所揭示的方法中之AAT RNAi劑包含反義股,該反義股具有與AAT mRNA之至少一部分互補之區域。適用於所揭示的方法中之AAT RNAi劑及AAT RNAi藥物物質描述於國際專利申請公開案第WO 2018/132432號(專利申請案第PCT/US2018/013102號)中,該案如前所述以全文引入之方式併入本文中。
如本文所用,術語「序列」及「核苷酸序列」意指核苷鹼基或核苷酸之連續或順序,使用標準命名法用連續字母來描述。如本文所用,術語「核苷鹼基」及「核苷酸」具有如此項技術中通常所瞭解的相同含義。
如本文所用,術語「互補」在用於描述第一核苷酸序列(例如,RNAi劑反義股)與第二核苷酸序列(例如,RNAi劑有義股或靶向mRNA序列)之關聯時意指包含第一核苷酸序列之寡核苷酸與包含第二核苷酸序列之寡核苷酸雜交(在哺乳動物生理條件(或其他適宜條件)下形成鹼基對氫鍵及在某些標準條件下形成雙鏈體或雙螺旋結構)之能力。一般技術者將能夠選擇最適於雜交測試之條件組。互補序列包含Watson-Crick鹼基對或非Watson-Crick鹼基對且至少在滿足以上雜交要求之程度上包含天然或經修飾之核苷酸或核苷酸模擬物。序列同一性或互補性與修飾無關。例如,出於確定同一性或互補性之目的,如本文所定義的a及Af與U(或T)互補且與A相同。
如本文所用,「完美互補(perfectly complementary)」或「完全互補(fully complementary)」意指第一寡核苷酸之連續序列中的所有(100%)鹼基將與第二寡核苷酸之連續序列中之相同數目之核苷酸雜交。連續序列可包含第一或第二核苷酸序列之全部或一部分。
如本文所用,「部分互補」意指在核苷酸序列之雜交對中,第一寡核苷酸之連續序列中之至少70%(但非全部)鹼基將與第二多核苷酸之連續序列中之相同數目之鹼基雜交。
如本文所用,「實質上互補」意指在核苷酸序列之雜交對中,第一寡核苷酸之連續序列中之至少85%(但非全部)鹼基將與第二多核苷酸之連續序列中之相同數目之鹼基雜交。關於RNAi劑之有義股與反義股之間、或RNAi劑之反義股與AAT mRNA之序列之間的核苷酸匹配,使用本文術語「互補」、「完全互補」、「部分互補」及「實質上互補」。
如本文所用,如應用於核酸序列之術語「實質上相同」或「實質上同一性」意指核酸序列包含與參考序列相比具有至少約85%序列同一性或更多同一性(例如,至少90%、至少95%、或至少99%)之序列。序列同一性之百分比係藉由在比較窗口中比較兩個最佳比對的序列來確定。百分比係藉由確定兩個序列中出現相同核酸鹼基的位置數以產生匹配位置數,將匹配位置數除以比較窗口中的位置總數,然後將結果乘以100以得到序列同一性之百分比來計算得。本文所揭示的發明涵蓋與彼等本文所揭示者實質上相同之核苷酸序列。經修飾之核苷酸及經修飾之核苷間鍵
本文所揭示的AAT RNAi劑可包含經修飾之核苷酸,該等經修飾之核苷酸可保留RNAi劑之活性而同時增加血清穩定性,以及最小化活化人類中干擾素活性之可能性。如本文所用,「經修飾之核苷酸」係除核糖核苷酸(2′-羥基核苷酸)以外的核苷酸。在一些實施例中,至少50%(例如,至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%)之核苷酸係經修飾之核苷酸。如本文所用,經修飾之核苷酸包括此項技術中已知的任何已知的經修飾之核苷酸,包括但不限於脫氧核糖核苷酸、核苷酸模擬物、2′-修飾之核苷酸、反向核苷酸、包含經修飾之鹼基之核苷酸、橋接核苷酸、肽核酸(PNA)、2′,3′-閉聯核苷酸模擬物(未鎖定之核苷鹼基類似物)、鎖定之核苷酸、3′-O-甲氧基(2′核苷間連接之)核苷酸、2'-F-阿拉伯(arabino)核苷酸、5'-Me、2'-氟核苷酸、嗎啉基核苷酸、包含膦酸乙烯酯之核苷酸及包含膦酸環丙酯之核苷酸。在一些實施例中,AAT RNAi劑之經修飾之核苷酸係2′-修飾之核苷酸(亦即在五員糖環的2′位置具有除羥基以外的基團之核苷酸)。2′-修飾之核苷酸包括但不限於2′-O-甲基核苷酸、2′-脫氧-2′-氟核苷酸(通常簡稱為2’-氟核苷酸)、2′-脫氧核苷酸、2′-甲氧基乙基(2′-O-2-甲氧基乙基)核苷酸、2′-胺基核苷酸及2′-烷基核苷酸。另外,2’-修飾之核苷酸係此項技術中已知的。給定RNAi劑中之所有核苷酸不必均一地修飾。另外,可在單個AAT RNAi劑中或甚至在其單個核苷酸中併入超過一種修飾。AAT RNAi劑有義股及反義股可藉由此項技術中已知的方法來合成及/或修飾。一個核苷酸上的修飾係獨立於另一核苷酸上的修飾。
在一些實施例中,可修飾核苷鹼基(通常簡稱為「鹼基」)。如此項技術中通常所用,天然核苷鹼基包括一級嘌呤鹼基腺嘌呤及鳥嘌呤、及一級嘧啶鹼基胞嘧啶、胸腺嘧啶及尿嘧啶。核苷鹼基可經修飾為包括但不限於通用鹼基、疏水性鹼基、混雜鹼基、尺寸擴大之鹼基及氟化鹼基。(參見,例如,Modified Nucleosides in Biochemistry, Biotechnology and Medicine,Herdewijn, P.編 Wiley-VCH,2008)。此類經修飾之核苷鹼基(包括包含經修飾之核苷鹼基之亞磷醯胺化合物)之合成係此項技術中已知的。
經修飾之核苷鹼基包括(例如)5-取代之嘧啶、6-氮雜嘧啶及N-2、N-6及O-6取代之嘌呤(例如,2-胺基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶或5-丙炔基胞嘧啶)、5-甲基胞嘧啶(5-me-C)、5-羥基甲基胞嘧啶、肌苷、黃嘌呤、次黃嘌呤、2-胺基腺嘌呤、腺嘌呤及鳥嘌呤之6-烷基(例如,6-甲基、6-乙基、6-異丙基或6-正丁基)衍生物、腺嘌呤及鳥嘌呤之2-烷基(例如,2-甲基、2-乙基、2-異丙基或2-正丁基)及其他烷基衍生物、2-硫基尿嘧啶、2-硫基胸腺嘧啶、2-硫基胞嘧啶、5-鹵基尿嘧啶、胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、6-偶氮尿嘧啶、6-偶氮胞嘧啶、6-偶氮胸腺嘧啶、5-尿嘧啶(假尿嘧啶)、4-硫基尿嘧啶、8-鹵基、8-胺基、8-硫氫基、8-硫基烷基、8-羥基及其他8-取代之腺嘌呤及鳥嘌呤、5-鹵基(例如5-溴)、5-三氟甲基及其他5-取代之尿嘧啶及胞嘧啶、7-甲基鳥嘌呤及7-甲基腺嘌呤、8-氮雜鳥嘌呤及8-氮雜腺嘌呤、7-氮雜鳥嘌呤、7-氮雜腺嘌呤、3-去氮雜鳥嘌呤及3-去氮雜腺嘌呤。
在一些實施例中,AAT RNAi劑之所有或實質上所有核苷酸係經修飾之核苷酸。如本文所用,其中實質上所有存在的核苷酸均係經修飾之核苷酸之RNAi劑係在有義股及反義股中均具有四個或更少(亦即,0、1、2、3或4個)核苷酸且反義股係核糖核苷酸(亦即,未經修飾)之RNAi劑。如本文所用,其中實質上所有存在的核苷酸均係經修飾之核苷酸之有義股係在為核糖核苷酸之有義義股中具有兩個或更少(亦即,0、1,或2個)核苷酸之有義股。如本文所用,其中實質上所有存在的核苷酸均係經修飾之核苷酸之反義股係在為核糖核苷酸之有義股中具有兩個或更少(亦即,0、1,或2個)核苷酸之反義股。
在一些實施例中,AAT RNAi劑之一或多個核苷酸係藉由非標準鍵或主鏈(亦即,經修飾之核苷間鍵或經修飾之主鏈)連接。經修飾之核苷間鍵或主鏈包括但不限於硫代磷酸酯基、對掌性硫代磷酸酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酸三酯、胺基烷基-磷酸三酯、烷基膦酸酯(例如,甲基膦酸酯或3′-伸烷基膦酸酯)、對掌性膦酸酯、次膦酸酯、磷醯胺酯(例如,3′-胺基磷醯胺酯、胺基烷基磷醯胺酯或硫代磷醯胺酯)、硫基烷基-膦酸酯、硫基烷基磷酸三酸酯、嗎啉基鍵、具有正常3′-5′鍵之硼酸磷酸酯、硼酸磷酸酯之2′-5′鍵接類似物、或具有相反極性之其中相鄰核苷單元對係經3′-5′連接至5′-3′或經2′-5′連接至5′-2′之硼酸磷酸酯。在一些實施例中,經修飾之核苷間鍵或主鏈缺少磷原子。缺少磷原子之經修飾之核苷間鍵包括但不限於短鏈烷基或環烷基糖間鍵、混合雜原子及烷基或環烷基糖間鍵、或一或多個短鏈雜原子或雜環糖間鍵。在一些實施例中,經修飾之核苷間主鏈包括但不限於矽氧烷主鏈、硫化物主鏈、亞碸主鏈、碸主鏈、甲乙醯基及硫基甲乙醯基主鏈、亞甲基甲乙醯基及硫基甲乙醯基主鏈、包含烯烴之主鏈、胺基磺酸酯主鏈、亞甲基亞胺基及亞甲基肼基主鏈、磺酸酯及磺醯胺主鏈、醯胺主鏈及具有混合的N、O、S及CH2
成分之其他主鏈。
在一些實施例中,AAT RNAi劑之有義股可包含1、2、3、4、5或6個硫代磷酸酯鍵,AAT RNAi劑之反義股可包含1、2、3、4、5或6個硫代磷酸酯鍵,或有義股及反義股均可獨立地包含1、2、3、4、5或6個硫代磷酸酯鍵。在一些實施例中,AAT RNAi劑之有義股可包含1、2、3或4個硫代磷酸酯鍵,AAT RNAi劑之反義股可包含1、2、3或4個硫代磷酸酯鍵,或有義股及反義股均可獨立地包含1、2、3或4個硫代磷酸酯鍵。
在一些實施例中,AAT RNAi劑有義股包含至少兩個硫代磷酸酯核苷間鍵。在一些實施例中,該至少兩個硫代磷酸酯核苷間鍵係在自有義股的3′端起的位置1至3的核苷酸之間。在一些實施例中,該至少兩個硫代磷酸酯核苷間鍵係在自有義股的5'端起的位置1至3、2至4、3至5、4至6、4至5、或6至8的核苷酸之間。在一些實施例中,硫代磷酸酯核苷間鍵係用於將有義股中的末端核苷酸連接至存在於核苷酸序列的5’端、3’端或5’端及3’端的封端殘基。在一些實施例中,硫代磷酸酯核苷間鍵係用於將靶向基團連接至有義股。
在一些實施例中,AAT RNAi劑反義股包含三個或四個硫代磷酸酯核苷間鍵。在一些實施例中,AAT RNAi劑反義股包含三個硫代磷酸酯核苷間鍵。在一些實施例中,該三個硫代磷酸酯核苷間鍵係在自反義股的5′端起的位置1至3的核苷酸之間及在自5′端起的位置19至21、20至22、21至23、22至24、23至25、或24至26的核苷酸之間。在一些實施例中,AAT RNAi劑在有義股中包含至少兩個硫代磷酸酯核苷間鍵及在反義股中包含三個或四個硫代磷酸酯核苷間鍵。
在一些實施例中,AAT RNAi劑包含一或多個經修飾之核苷酸及一或多個經修飾之核苷間鍵。在一些實施例中,將2′修飾之核苷與經修飾之核苷間鍵組合。封端殘基或部分
在一些實施例中,有義股可包含一或多個封端殘基或部分,在此項技術中有時稱為「帽(cap)」、「端帽(terminal cap)」或「封端殘基」。如本文所用,「封端殘基」係非核苷酸化合物或可併在本文所揭示的RNAi劑之核苷酸序列的一或多個末端之其他部分。在一些情況下,封端殘基可為RNAi劑提供某些有益性質,諸如,例如,防止核酸外切酶降解。在一些實施例中,添加反向無鹼基殘基(invAb)(在此項技術中亦稱為「反向無鹼基位點」)作為封端殘基(參見表A)。(參見,例如,F. Czauderna,Nucleic Acids Res.,2003,31(11),2705-16)。封端殘基係此項技術中一般已知的,且包括(例如)反向無鹼基殘基以及碳鏈,諸如末端C3
H7
(丙基)、C6
H13
(己基)、或C12
H25
(十二烷基)基團。在一些實施例中,封端殘基係存在於有義股的5′末端、3′末端、或5′末端及3′末端兩端。在一些實施例中,有義股的5’端及/或3′端可包含超過一個反向無鹼基脫氧核糖部分作為封端殘基。
在一些實施例中,將一或多個反向無鹼基殘基(invAb)添加至有義股的3′端。在一些實施例中,將一或多個反向無鹼基殘基(invAb)添加至有義股的5′端。在一些實施例中,將一或多個反向無鹼基殘基或反向無鹼基位點插入靶向配體與RNAi劑之有義股之核苷酸序列之間。在一些實施例中,在RNAi劑之有義股的末端或附近包含一或多個反向無鹼基殘基或反向無鹼基位點可增強RNAi劑之活性或其他所需性質。
在一些實施例中,將一或多個反向無鹼基殘基(invAb)添加至有義股的5′端。在一些實施例中,可將一或多個反向無鹼基殘基插入靶向配體與RNAi劑之有義股之核苷酸序列之間。反向無鹼基殘基可藉由磷酸酯、硫代磷酸酯(例如,本文中顯示為(invAb)s))或其他核苷間鍵連接。反向無鹼基脫氧核糖殘基之化學結構顯示於下表A中、以及顯示於圖1A至1E及圖2A至2E中之化學結構。
AAT RNAi劑可共軛至一或多個非核苷酸基團,包括但不限於靶向部分或靶向基團。靶向部分或靶向基團可增強RNAi劑之靶向或遞送。靶向部分及靶向基團之實例係此項技術中已知的。表B中提供描述於本文表2中之用於AAT RNAi 藥物物質中之(NAG37)s靶向基團之特定實例,其包含三個N-乙醯基-半乳糖胺靶向部分。靶向部分或靶向基團可共價連接至有義股及/或反義股的3′及/或5′端。在一些實施例中,AAT RNAi劑包含連接至有義股的3′及/或5′端之靶向基團。在一些實施例中,靶向基團係連接至AAT RNAi劑有義股的5′端。在一些實施例中,靶向基團包含結構(NAG37)s,基本上由其組成,或由其組成,且係連接至AAT RNAi劑有義股的5′端。靶向基團可經連接子/連接基團直接或間接地連接至RNAi劑。在一些實施例中,靶向基團係經不穩定、可裂解或可逆之鍵或連接子連接至RNAi劑。在一些實施例中,靶向基團係在有義股的5’端連接至反向無鹼基殘基。
靶向基團或靶向部分可增強其等所連接的共軛物或RNAi劑之藥物動力學或生物分佈特性以改良共軛物或RNAi劑之細胞特異性分佈及細胞特異性吸收。在一些實施例中,靶向基團增強RNAi劑之內吞作用。靶向基團可係單價、二價、三價、四價,或對於其所針對的靶標具有更高化合價。代表性靶向基團包括但不限於對細胞表面分子具有親和力之化合物、細胞受體配體、半抗原、抗體、單株抗體、抗體片段及對細胞表面分子具有親和力之抗體模擬物。
在一些實施例中,靶向基團包含去唾液酸糖蛋白受體配體。在一些實施例中,去唾液酸糖蛋白受體配體包含一或多種半乳糖衍生物或由其組成。如本文所用,術語半乳糖衍生物包括對脫唾液酸糖蛋白受體之親和力等於或大於半乳糖之親和力之半乳糖及半乳糖之衍生物。半乳糖衍生物包括但不限於:半乳糖、半乳糖胺、N-甲醯基半乳糖胺、N-乙醯基-半乳糖胺、N-丙醯基-半乳糖胺、N-n-丁醯基-半乳糖胺及N-異丁醯基-半乳糖胺(參見(例如):S.T. Iobst及K. Drickamer,J.B.C.,1996,271,6686)。可用於將寡核苷酸及其他分子活體內靶向肝臟之半乳糖衍生物及半乳糖衍生物簇係此項技術中已知的(參見,例如,Baenziger及Fiete,1980,Cell,22,611-620;Connolly等人,1982,J. Biol. Chem.,257,939-945)。
半乳糖衍生物已透過其結合至表現於肝細胞之表面上之去唾液酸糖蛋白受體用於將分子活體內靶向肝細胞。去唾液酸糖蛋白受體配體結合至去唾液酸糖蛋白受體促進對肝細胞之細胞特異性靶向及分子內吞至肝細胞中。去唾液酸糖蛋白受體配體可係單體的(例如,具有單個半乳糖衍生物)或多聚的(例如,具有多個半乳糖衍生物)。可使用此項技術中已知的方法將半乳糖衍生物或半乳糖衍生物「簇」連接至RNAi劑之有義股或反義股的3′或5′端。
在一些實施例中,靶向基團包括半乳糖衍生物簇。如本文所用,半乳糖衍生物簇包含具有兩個至四個末端半乳糖衍生物之分子。末端半乳糖衍生物係經其C-1碳連接至分子。在一些實施例中,半乳糖衍生物簇係半乳糖衍生物三聚物(亦稱為三觸角半乳糖衍生物或三價半乳糖衍生物)。在一些實施例中,半乳糖衍生物簇包含N-乙醯基-半乳糖胺。在一些實施例中,半乳糖衍生物簇包含三個N-乙醯基-半乳糖胺。在一些實施例中,半乳糖衍生物簇係半乳糖衍生物四聚物(亦稱為四觸角半乳糖衍生物或四價半乳糖衍生物)。在一些實施例中,半乳糖衍生物簇包含四個N-乙醯基-半乳糖胺。
如本文所用,半乳糖衍生物三聚物包含三個半乳糖衍生物,每個半乳糖衍生物係連接至中心分支點。如本文所用,半乳糖衍生物四聚物包含四個半乳糖衍生物,每個半乳糖衍生物係連接至中心分支點。半乳糖衍生物可經醣之C-1碳連接至中心分支點。在一些實施例中,半乳糖衍生物係經連接子或間隔子連接至分支點。在一些實施例中,該連接子或間隔子係撓性親水性間隔子,諸如PEG基(參見,例如,美國專利案第5,885,968號;Biessen等人J. Med. Chem. 1995 第39卷第1538-1546頁)。分支點可係允許連接三個半乳糖衍生物及進一步允許分支點連接至RNAi劑之任何小分子。分支點基團之一個實例係二離胺酸或二麩胺酸。使分支點連接至RNAi試劑可經連接子或間隔子發生。在一些實施例中,該連接子或間隔子包含撓性親水性間隔子,諸如但不限於PEG間隔子。在一些實施例中,該連接子包含剛性連接子,諸如環狀基團。在一些實施例中,半乳糖衍生物包含N-乙醯基-半乳糖胺或由其組成。在一些實施例中,半乳糖衍生物簇係由半乳糖衍生物四聚物組成,其可係(例如)N-乙醯基-半乳糖胺四聚物。
靶向基團(諸如包含N-乙醯基-半乳糖胺之半乳糖衍生物簇)之製備描述於例如國際專利申請公開案第WO 2018/044350號(專利申請案第PCT/US2017/021147號)及國際專利申請公開案第WO 2017/156012號(專利申請案第PCT/US2017/021175號),該兩案之全文係以引入之方式併入本文中。
例如,共軛至描述於表1A及1B中之AAT RNAi劑之靶向配體具有(NAG37)s之化學結構,如下表B中所顯示。
在一些實施例中,用於本文所揭示的方法中之AAT RNAi劑具有顯示於表2中之AAT RNAi藥物物質(ADS-001)之核苷酸序列。在AAT RNAi藥物物質中發現的AAT RNAi劑之核苷酸序列包含如下表1A中陳述的反義股核苷酸序列及如下表1B中陳述的有義股核苷酸序列。
表 1A.
AAT
RNAi劑反義股序列
SEQ ID NO. | 反義序列 ( 經修改 ) (5' → 3') | SEQ ID NO. | 基礎鹼基序列 (5' → 3') |
2 | usGfsuUfaAfacaugCfcUfaAfaCfgCfsu | 3 | UGUUAAACAUGCCUAAACGCU |
表 1B.
AAT
RNAi劑有義股核苷酸序列(顯示為AAT RNAi藥物物質中不存在反向無鹼基殘基或NAG靶向基團之經修飾形式)
SEQ ID NO. | 有義序列 ( 經修飾 ) (5' → 3') | SEQ ID NO. | 基礎鹼基序列 (5' → 3') |
4 | agcguuuaGfGfCfauguuuaaca | 5 | AGCGUUUAGGCAUGUUUAACA |
如本文表1A、1B及2中所使用,以下表示法係用於指示經修飾之核苷酸、靶向基團及連接基團: A、G、C及U表示腺苷、胞苷、鳥苷或尿苷;a、c、g及u分別表示2′-O-甲基腺苷、胞苷、鳥苷或尿苷;Af、Cf、Gf及Uf分別表示2′-氟腺苷、胞苷、鳥苷或尿苷;s表示硫代磷酸酯鍵;(invAb)表示反向無鹼基脫氧核糖殘基(參見表A);及(NAG37)s表示顯示於以上表B中之結構。
如一般技術者將容易瞭解,除非以序列(諸如,例如,經硫代磷酸酯鍵「s」)另作指示,否則當存在於股中時,單體係經5’-3’-磷酸二酯鍵相互連接。如一般技術者將清楚地瞭解,包含如以本文所揭示的經修飾之核苷酸序列所顯示之硫代磷酸酯鍵替代通常存在於寡核苷酸中之磷酸二酯鍵。另外,一般技術者將容易瞭解,給定寡核苷酸序列的3’端的末端核苷酸將通常在給定單體的相應3’位置具有羥基(-OH)而不是離體磷酸酯部分。另外,對於本文所揭示的實施例,當觀察相應的股5’ à 3’時,插入反向無鹼基殘基,使得脫氧核糖的3’位置在相應股上的先前單體的3’端連接。此外,如一般技術者將容易瞭解並明瞭,儘管本文所描繪的硫代磷酸酯化學結構通常顯示硫原子上之陰離子,但本文所揭示的發明涵蓋所有硫代磷酸酯互變異構體(例如,其中該硫原子具有雙鍵及該陰離子係在氧原子上)。除非本文另外明確指出,否則當描述AAT RNAi劑及包含本文所揭示的AAT RNAi劑之組合物時,使用一般技術者的此種理解。
每個有義股及/或反義股可具有以上所列出的任何靶向基團或連接基團、以及共軛至序列的5′及/或3′端之其他靶向或連接基團。
AAT RNAi劑反義股序列係設計以靶向來自正常AAT基因及突變體AAT基因二者之mRNA轉錄本,從而對於罹患AATD的人類個體使用RNA干擾機制沉默突變體Z-AAT蛋白質之轉譯。
在一些實施例中,本文所揭示的方法使用下陳述於下表2中之AAT RNAi藥物物質:
表 2.
AAT
RNAi藥物物質(ADS-001)
有義 股 及反義股 ( 有義股及反義股係經退火以形成雙鏈體): | ||
有義股(經修改之序列)(5' → 3'): | (NAG37)s(invAb)sagcguuuaGfGfCfauguuuaacas(invAb) | (SEQ ID NO:6) |
反義股(經修改之序列)(5' → 3'): | usGfsuUfaAfacaugCfcUfaAfaCfgCfsu | (SEQ ID NO:2) |
化學式: | C493H610F11N163Na43O312P43S6 (Na+ form) | |
C493H653F11N163O312P43S6 (H+ form) | ||
分子量: | 16532.9 Da (Na+形式) | |
15587.6 Da (H+形式) | ||
物理外觀: | 白色至灰白色粉末 |
AAT
RNAi藥物物質(ADS-001)之概視圖顯示於圖3中,及完整化學結構表示顯示於圖1A至1E(鈉鹽形式)及圖2A至2E(游離酸形式)中。在一些實施例中,將AAT RNAi藥物物質製備或提供為鹽、混合鹽或游離酸。在較佳實施例中,該形式係鈉鹽。醫藥組合物及調配物
適用於本文所揭示的方法中之AAT RNAi劑可製備為適於投與人類個體之醫藥組合物或調配物。該等醫藥組合物可用於治療患有將受益於AAT mRNA之表現之抑制或AAT蛋白質濃度之降低之疾病或病症的個體,諸如患有AATD的人類個體。在一些實施例中,該等方法包括對需要治療的個體投與連接至如本文所述的靶向基團或靶向配體之AAT RNAi劑。在一些實施例中,將一或多種醫藥上可接受之賦形劑(包括媒劑、載劑、稀釋劑及/或遞送聚合物)添加至包含AAT RNAi劑之醫藥組合物,從而形成適於活體內遞送至人類個體之醫藥組合物。
當使用本文所揭示的方法投與人類個體時,包含AAT RNAi劑之醫藥組合物降低個體中AAT mRNA之濃度。
在一些實施例中,所描述的包含AAT RNAi劑之醫藥組合物係用於治療或管理罹患AATD的個體之臨床表現,諸如慢性肝炎、肝硬化、肝細胞癌風險增加、轉胺酶升高、膽汁鬱積、纖維化及甚至暴發性肝衰竭。在一些實施例中,將治療或預防有效量之一或多種醫藥組合物投與需要此種治療的個體。在一些實施例中,任何所揭示的AAT RNAi劑之投與可用於減少個體中疾病之症狀之數量、嚴重度及/或頻率。
所描述的包含AAT RNAi劑之醫藥組合物可用於治療患有將受益於AAT mRNA之表現之降低或抑制之疾病或病症的個體之至少一種症狀。在一些實施例中,將治療有效量之一或多種包含AAT RNAi劑之醫藥組合物投與個體從而治療症狀。在其他實施例中,將預防有效量之一或多種AAT RNAi劑投與個體從而預防至少一種症狀。
本文所揭示的AAT RNAi劑可以適宜地針對特定途徑定製的製劑經由任何適宜途徑投與。因此,本文所述的醫藥組合物可藉由注射(例如,靜脈內或皮下)來投與。在一些實施例中,本文所述的醫藥組合物係經由皮下注射投與。
如本文所用,醫藥組合物或藥物包含藥理學有效量之至少一種AAT RNAi劑及一或多種醫藥上可接受之賦形劑。醫藥上可接受之賦形劑係有意包含在藥物遞送系統中之除活性醫藥成分(API、治療產品,例如AAT RNAi劑)以外的物質。賦形劑不以所欲劑量發揮治療效應或不意欲以所欲劑量發揮治療效應。賦形劑可用於:a)在製造期間幫助藥物輸送系統之處理;b)保護、支持或增強API之穩定性、生物可利用性或患者可接受性;c)幫助產品識別;及/或d)增強儲藏或使用期間的API之整體安全性、有效性及遞送之任何其他屬性。醫藥上可接受之賦形劑可係或可不係惰性物質。
賦形劑可包括但不限於:吸收增強劑、抗黏著劑、消泡劑、抗氧化劑、黏合劑、緩衝劑、載劑、包衣劑、色素、遞送增強劑、遞送聚合物、聚葡萄糖、右旋糖、稀釋劑、崩解劑、乳化劑、增積劑、填充劑、矯味劑、滑動劑、保濕劑、潤滑劑、油、聚合物、防腐劑、鹽水、鹽、溶劑、糖、懸浮劑、持續釋放型基質、甜味劑、增稠劑、滲透劑、媒劑、拒水劑及潤濕劑。
適於注射用途之醫藥組合物包含無菌水溶液(在水溶性之情況下)。對於皮下或靜脈內投藥,適宜載劑可包含生理鹽水、抑菌水、Cremophor® ELTM (BASF,Parsippany,NJ)或磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)。其在製造及儲藏條件下應係穩定的且應經保存以防微生物(諸如細菌及真菌)之污染作用。載劑可係溶劑或分散介質,其包含(例如)水、乙醇、多元醇(例如,甘油、丙二醇及液體聚乙二醇)及其適宜混合物。
無菌注射溶液可藉由將活性化合物以所需量與視需要的一種以上所列舉的成分或成分之組合併入適宜溶劑中,然後藉由過濾滅菌來製備。一般而言,分散液係藉由將活性化合物併入至無菌媒劑中來製備,該無菌媒劑包含基本分散液介質及來自彼等以上所列舉者之所需其他成分。
在一些實施例中,適用於本文所揭示的方法中之醫藥組合物包含以提供於下表3中之經調配之AAT RNAi藥物物質識別的組分。
可將AAT RNAi劑調配成劑量單位形式之組合物以便於投藥及劑量均勻。劑量單位形式係指適用作待治療的個體之單位劑量之物理上離散單位;每個單位包含經計算以產生所需治療效應之預定量之活性化合物及所需醫藥載劑。在一些實施例中,該劑量單位為約5 mg至約300 mg之AAT RNAi藥物物質。在一些實施例中,該劑量單位為約25 mg至約200 mg之AAT RNAi藥物物質。在一些實施例中,該劑量單位為約100 mg至約200 mg之AAT RNAi藥物物質。在一些實施例中,該劑量單位為約100 mg AAT RNAi藥物物質。在一些實施例中,該劑量單位為約200 mg AAT RNAi藥物物質。
醫藥組合物可包含在醫藥組合物中常見的其他額外組分。此類額外組分包括但不限於:止癢藥、收斂劑、局部麻醉藥或抗發炎藥(例如,抗組織胺、苯海拉明(diphenhydramine)等)。
如本文所用,「藥理學有效量」、「治療有效量」或「簡單有效量」係指產生藥理學、治療或預防結果之RNAi劑的量。
所描述的醫藥上可接受之調配物可經包裝成套組、容器、包裝或分配器。本文所描述的醫藥組合物可經包裝在預填充之注射器或小瓶中。經調配之 AAT RNAi 藥物物質
在一些實施例中,將如提供於表2中之AAT RNAi藥物物質(ADS-001)與一或多種醫藥上可接受之賦形劑調配以形成適於投與人類個體之醫藥組合物。在一些實施例中,描述於表2中之AAT RNAi藥物物質係在水性磷酸鈉緩衝液(0.5 mM磷酸二氫鈉、0.5 mM磷酸氫二鈉)中調配為230 mg/mL,形成顯示於表3中之經調配之AAT RNAi藥物物質(ADS-001-1):
表 3.
經調配之AAT
RNAi藥物物質之組合物/1.0 mL
組分 | 功能 | 品質/等級 | 濃度 |
ADS-001 | 活性成分 | 內部 | 230 mg |
磷酸二氫鈉,單水合物 | 懸浮劑 | USP,Ph.Eur | 0.061 mg |
磷酸氫二鈉,無水 | 懸浮劑 | USP,Ph.Eur | 0.062 mg |
注射用水(WFI) | 媒劑 | USP,Ph.Eur | 879.2 mg |
根據表3調配的AAT RNAi藥物物質係經製備為無菌調配物。在一些實施例中,將調配的AAT RNAi藥物物質係包裝在容器(例如玻璃小瓶)中。在一些實施例中,將調配的AAT RNAi藥物物質包裝在具有約1.1 mL之填充體積之玻璃小瓶中,及可基於意欲投與的所需劑量來計算所需投藥體積。
在一些實施例中,使用本文所揭示的方法將陳述於表3中之調配的AAT RNAi藥物物質投與人類個體。具有 AATD 及 AATD 診斷之人類個體
本文所揭示的方法包括使用包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD),包括治療人類個體之由AATD引起之症狀及疾病。在一些實施例中,在投藥之前,人類個體經診斷患有AATD。如本文所述,AATD係由導致AAT蛋白質之突變體形式之轉譯之基因轉錄本中的突變引起之遺傳性病症,對於該等突變體形式,趨於異常折疊之一些突變體形式導致細胞內滯留在肝細胞中。雖然已識別SERPINA1
基因之各種突變,但AATD之最常見且最嚴重之形式PiZZ基因型係由單個鹼基對取代引起。在具有PiZZ基因型之個體中,經常報告循環AAT濃度通常為低於正常人類濃度之15%。在許多情況下,患者最初經診斷患有COPD、哮喘或其他肺病,而沒有識別根本原因。隨時間的推移,由於錯誤折疊的(「Z-AAT」)蛋白質之細胞內滯留及無法自肝細胞正確分泌蛋白質,肝病(諸如肝纖維化及肝硬化)會發展。兒童患者通常表現肝病之臨床症狀,其可包括無症狀慢性肝炎、成長不良(failure to thrive)、進食不良、或肝腫大及脾腫大。可透過來自個體之血液樣本之標準基因分型來診斷及確認AATD。給藥及 AAT 基因表現之抑制
一般而言,AAT RNAi劑之有效量將在約0.1至約10 mg/kg體重/天,例如,約0.25至約5 mg/kg體重/天之範圍內。在一些實施例中,AAT RNAi劑之有效量將在每次給藥約0.5至約4 mg/kg體重之範圍內。在一些實施例中,該有效量係固定劑量。在一些實施例中,在5 mg至300 mg AAT RNAi藥物物質之間的固定劑量係有效劑量。在一些實施例中,在25 mg至200 mg AAT RNAi藥物物質之間的固定劑量係有效劑量。所投與的量將極有可能取決於諸如以下的此類變數:患者之總體年齡及健康狀況、所遞送的化合物之相對生物學效力、藥物之調配物、調配物中賦形劑之存在及類型、及投藥途徑。在一些實施例中,約10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、120、140、160、180、200、220、240、260或280 mg至約15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280或300 mg之固定劑量係有效劑量。在一些實施例中,約25 mg、約100 mg或約200 mg之固定劑量係有效劑量。
此外,應瞭解,所投與的初始劑量可在一些情況下增加超過以上上限濃度以迅速達成所需血液濃度或組織濃度,或初始劑量可在一些情況下小於最佳。例如,在一些實施例中,投與約25 mg至約200 mg AAT RNAi藥物物質之初始劑量,隨後係約1個月後的約25至200 mg AAT RNAi藥物物質之第二劑量,及此後,每三個月一次(亦即,每季度一次)投與額外劑量(類似於「維持劑量」之概念)。
為治療疾病或為形成用於治療疾病之藥物或組合物,本文所述的包含AAT RNAi劑之醫藥組合物可與賦形劑或與第二治療劑或治療(包括但不限於:第二或其他RNAi劑、小分子藥物、抗體、抗體片段、肽及/或適體)組合使用。
在一些實施例中,在投與所描述的AAT RNAi劑的個體中,相對於投與AAT RNAi劑之前的個體或未接受AAT RNAi劑的個體,AAT基因之基因表現程度及/或mRNA濃度降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、95%、96%、97%、98%、99%、或大於99%。在個體之細胞、細胞之組及/或組織中,個體中之基因表現程度及/或mRNA濃度降低。
在一些實施例中,在已投與所描述的AAT RNAi劑的個體中,相對於投與AAT RNAi劑之前的個體或未接受AAT RNAi劑的個體,AAT之蛋白質濃度降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、或大於99%。在個體之細胞、細胞之組、組織、血液及/或其他流體中,個體之蛋白質濃度降低。
在一些實施例中,在已投與所描述的AAT RNAi劑的患有AATD的個體中,相對於投與AAT RNAi劑之前的個體或未接受AAT RNAi劑的個體,Z-AAT聚合物蛋白質濃度降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、或大於99%。在一些實施例中,在已投與所描述的AAT RNAi劑的個體中,相對於投與AAT RNAi劑之前的個體或未接受AAT RNAi劑的個體,Z-AAT聚合物蛋白質濃度降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、或大於99%。
AAT基因表現、AAT mRNA或AAT蛋白質濃度之降低可藉由此項技術中已知的一般方法來評定及定量。本文所揭示的實例描述用於評估AAT基因表現之抑制及AAT蛋白質濃度降低之一般已知的方法。AAT mRNA水平及/或蛋白質濃度(包括Z-AAT聚合物及/或單體)之降低或減少在本文中統稱為AAT之降低或減少或抑制或降低AAT之表現。
如本文所用,術語「治療(treat)」、「治療(treatment)」及類似者意指為提供個體之疾病之一或多種症狀之數量、嚴重度及/或頻率之緩解或減輕所採取的方法或步驟。如本文所用,「治療(treat)」及「治療(treatment)」可包括預防、管理、預防性治療及/或抑制個體之疾病之一或多種症狀之數量、嚴重度及/或頻率。
如本文所用,「每月給藥」或「每月投藥」意指每28天。如本文所用,「每季給藥」或「每季投藥」意指每84天。術語「約」在與每月給藥搭配使用時意指每月給藥+/-3天。術語「約」在與每季給藥搭配使用時意指每季給藥+/-9天。
如本文所用,當提及RNAi劑時,片語「引入至細胞中」意指功能性地將RNAi劑遞送至細胞中。片語「功能性遞送」意指以使RNAi劑具有預期生物學活性(例如,基因表現之序列特異性抑制)之方式將RNAi劑遞送至細胞。
如本文所用,除非在結構中被特異性識別為具有特定構形,否則對於其中存在不對稱中心且因此引起對映異構體、非對映異構體或其他立體異構構型之每個結構,本文所揭示的每個結構意欲表示所有此類可能異構體,包括其光學上純且外消旋之形式。例如,本文所揭示的結構意欲涵蓋非對映異構體以及單一立體異構體之混合物。
如本文申請專利範圍中所使用,片語「由…組成」排除申請專利範圍中未指定的任何要素、步驟或成分。當在本文申請專利範圍中使用時,片語「基本上由…組成」將申請專利範圍之範疇限制為指定材料或步驟及彼等實質上不影響所主張發明之基本及新穎特徵之材料或步驟。
一般技術者將容易瞭解及知曉,取決於化合物或組合物所處的環境,本文所揭示的化合物及組合物可具有處在質子化或去質子化狀態中之某些原子(例如,N、O或S原子)。因此,如本文所用,本文所揭示的結構設想某些官能基(諸如(例如)OH、SH或NH)可經質子化或去質子化。如一般技術者將容易瞭解,本文揭示內容意欲涵蓋所揭示的化合物及組合物,而不考慮其基於環境(諸如pH)之質子化狀態。
除非另有定義,否則本文所使用的所有技術及科學術語具有與一般技術者通常所瞭解相同的含義。儘管類似或等效於彼等本文所述的方法及材料的方法及材料可用於本發明之實踐或測試,但以下描述適宜方法及材料。本文提及的所有公開案、專利申請案、專利案及其他參考文獻係以全文引用之方式併入本文中。在發生衝突之情況下,以本說明書(包括定義)為準。另外,材料、方法及實例僅係例示性而非意欲具限制性。
現利用以下非限制性實例來說明以上提供的實施例及項目。實例 實例 1. AAT RNAi 藥物 (ADS-001) 之合成及調配
適用於本文所揭示的方法中之AAT RNAi藥物物質可如此項技術中已知使用基於固相寡核苷酸合成之標準亞磷醯胺技術來合成。可使用市售寡核苷酸合成儀(例如,MerMade96E® (Bioautomation)或MerMade12® (Bioautomation))。合成可在由受控孔玻璃(CPG,500 Å或600Å,獲自Prime Synthesis,Aston,PA,USA)製成的固體支撐物上進行。可將位於相應股的3’端的單體連接至固體支撐物為合成的起點。所有RNA、2′-修飾之RNA亞磷醯胺及反向無鹼基亞磷醯胺均可商購。可合成適於添加至有義股的5’端的含靶向基團之亞磷醯胺。如此項技術中已知,可利用標準裂解、脫保護、純化及退火步驟。與AAT RNAi劑之合成有關之其他描述可參見例如國際專利申請公開案第WO 2018/132432號(申請案第PCT/US2018/013102號)及WO 2018/044350 (PCT/US2017/021147),該等案之各者係以全文引用之方式併入本文中。然後,AAT RNAi藥物物質可藉由溶解在此項技術中大體上已知的標準醫藥上可接受之賦形劑中進行調配。例如,表3顯示適用於本文所揭示的方法中之調配的AAT RNAi藥物物質。實例 2. AAT RNAi 藥物物質 (ADS-001) 在正常健康人類志願者 (NHV) 中之 I 期臨床試驗。
實施1期單次及多次劑量遞增劑量研究以評估健康志願者(NHV)中AAT RNAi藥物物質(ADS-001)於血清AAT濃度之安全性、耐受性、藥物動力學及效應。研究個體群體包括BMI在19.0 kg/m²與35.0 kg/m²之間的18至52歲的健康成年男性及女性。
NHV個體分為總共七個群組。將群組1至4隨機分組,以呈皮下注射液投與的單次遞增劑量35 mg(群組1)及多次遞增劑量100 mg(群組2)、200 mg(群組3)及300 mg(群組4)接受AAT RNAi藥物物質或安慰劑(4組活性劑:4組安慰劑)。群組1至4係雙盲的。群組2b、3b及4b係由接受單次劑量100、200及300 mg AAT RNAi藥物物質之4個個體組成之開放標籤。總共44個個體完成該研究。圖4顯示I期臨床試驗之最終研究設計。研究參數概述於下表4中。
表4. I期臨床研究參數
開發階段 | 階段1:人類第一 |
研究目標 | 主要目標: ● 使用遞增單次劑量及遞增多次劑量確定在正常健康人類志願者(NHV)中可能或極有可能與治療相關之不良事件之發病率及頻率作為AAT RNAi藥物物質(ADS-001)之安全性及耐受性之量度。 次要目標: ● 為評估AAT RNAi藥物物質在NHV中之單次劑量及多次劑量藥物動力學。 ● 為確定對AAT RNAi藥物物質有所反應之血清AAT減少作為藥物活性之量度。 探索目標: ● 為評估單次劑量之AAT RNAi藥物物質對NHV中細胞介素之效應(細胞介素小圖A:介白素6[IL-6]、單核細胞趨化蛋白質-1[MCP-1]、腫瘤壞死因子-α[TNF-α]、介白素-8[IL-8]、介白素-1β[IL-1β]、干擾素α[IFNα]、IL-10、IL-12[p40]、IL-12[p70]、巨噬細胞發炎性蛋白質-1α[Mip-1α)。 ● 為評估單次遞增劑量之AAT RNAi藥物物質對NHV中補體因子Bb、CH50、C5a、C4a及C3a之效應。 ● 為收集NHV中之血漿樣本以用於隨後的代謝產物識別(報告於該研究之外的另一個報告中)。 ● 為收集NHV中之尿液樣本以用於隨後確定尿液排泄及代謝產物識別(報告於該研究之外的另一個報告中)。 |
研究設計 | 群組1至4:隨機化,雙盲,安慰劑對照 群組2b、3b及4b:開放標籤 |
研究群體 | 該研究係在年齡18至52歲且BMI介於19.0 kg/m²與35.0 kg/m²之間的NHV成年男性及女性中實施。 |
研究產品 | AAT RNAi藥物物質(ADS-001)(參見表2),呈調配的AAT RNAi藥物物質投與(參見表3) |
劑量及頻率 | 群組1:隨機分組以呈單次皮下注射液投與之單次劑量35 mg接受AAT RNAi藥物物質(ADS-001)或安慰劑(4組活性劑:4組安慰劑)。 群組2至4:隨機分組以接受每月三次(亦即,第1天、第29天及第57天)劑量之100 mg(群組2)、200 mg(群組3)或300 mg(群組4) AAT RNAi藥物物質或安慰劑(4組活性劑:4組安慰劑),經由皮下注射。 群組2b、3b及4b:入選接受呈單次皮下注射液投與之單次劑量之100 mg(群組2b)、200 mg(群組3b)或300 mg(群組4b) AAT RNAi藥物物質(4組活性劑)。 |
參考調配物 | 安慰劑(PBO):生理鹽水(0.9%),以匹配體積皮下投與。 |
安全性評估標準 | ● 安全性係藉由不良事件、嚴重不良事件、身體檢查、生命體徵測量(血壓、心率、體溫及呼吸率)、靜息ECG測量、臨床實驗室測試、合併用藥/療法、注射部位反應(ISR)、治療中斷原因及第29天後90天(第1組)及第113天後90天(所有其他群組)的妊娠隨訪來評定。 |
藥物動力學評估 | 在第1劑量(群組1)後及在第1劑量及第3劑量(群組2、3及4)後,將從每個個體採集血液樣本以進行藥物動力學分析。 |
數據分析 | 篩選、順服性、耐受性及安全性數據: 將進行安全性分析,且藉由群組概述結果。不良事件(AE)、嚴重不良事件(SAE)、相關AE、相關SAE及導致停藥之AE之發病率及頻率將藉由群組按SOC、PT及嚴重度進行概述。其他安全性參數將在每個計劃時間進行概述。 藥物動力學(僅NHV個體): AAT RNAi藥物物質成分之血漿濃度將用於計算以下PK參數:最大觀察血漿濃度(Cmax)、時間0至24小時之血漿濃度時間曲線下面積(AUC)(AUC0至24)、自時間0外推至無窮大之AUC(AUCinf)及最終消除半衰期(t½)。藥物動力學參數將使用非房室方法來確定。PK參數之描述性統計將包括平均值、標準偏差(SD)、變異係數、中位數、最小值及最大值。將分析PK結果之劑量比例及性別差異。 |
該研究之血清AAT降低結果顯示與安慰劑相比,以35至300 mg之劑量投與AAT RNAi藥物物質導致血清AAT大大降低。最初,提出一個群組作為每劑量400 mg AAT RNAi藥物物質之臨床試驗方案之一部分。然而,有鑑於在35、100、200及300 mg劑量下之出乎意料的效力,因此從研究方案移除400 mg群組。在I期研究中,在多次給藥後,35 mg、100 mg及200 mg之劑量得到實質的血清AAT降低,而100 mg及200 mg均達成約90%平均血清AAT降低。圖5至11報告I期研究中各個群組之血清AAT降低。
在所有劑量上均無明確劑量依賴性反應,因為,令人驚訝且出乎意料地,100 mg及200 mg之劑量產生實質(達成約90%)且與較高300 mg劑量相似之敲低。儘管35 mg之最低劑量仍舊很具活性,但其活性不如以單次劑量投與的100 mg,指示劑量反應之程度。
35 mg之單次劑量之血清AAT降低(>58%)之持續時間比最初所預期長,直至劑量投藥後16週,隨後恢復至基線。例如,在35 mg單次劑量後的第三十四週,一位個體的血清AAT濃度已恢復至超過90 mg/dL,而第二位個體的血清AAT保持在40 mg/dL(自基線降低60.4%)。100 mg至300 mg AAT RNAi藥物物質之單次劑量之反應之持續時間沒有顯著差異,在單次劑量後第8週至第16週之間開始恢復至基線。
一般而言,多次劑量之AAT RNAi藥物物質維持血清AAT大大降低之持續時間長於單次劑量。此等數據表明在第29天(亦即,自初始劑量起的一個月後)接受第二劑量可進一步降低血清AAT濃度或維持降低,及隨後的劑量可經每12週(亦即,每季)投與以維持最大血清AAT降低。
在I期研究中,沒有死亡,沒有嚴重不良事件(SAE),及沒有等級為強度嚴重之不良事件(AE)。在接受AAT RNAi藥物物質的個體中,兩位個體報告強度中等之三種AE(上呼吸道感染、鼻漏、一般胸痛)。在接受安慰劑之個體中,三位個體報告強度中等之三種AE(2位-胃腸炎、肌肉骨骼性胸痛-左側)。已報告所有其他AE為輕度。大多數個體報告與研究治療無關的AE。儘管個體基於研究繼續進行隨訪,但在接受AAT之個體中發生一種AE,此導致療法之提前中斷。在接受至少單次劑量之調配的AAT RNAi藥物物質之28位個體中報告九十四種AE。在接受安慰劑之17位個體中報告四十六種AE。隨著劑量增加,尚無明顯的AE之頻率或強度增加之形態。
在所有調配的AAT RNAi藥物物質群組中,在6位個體中在註射部位發生6種AE,該等AE均發生在接受藥物之個體中。在安慰劑個體中,沒有註射部位AE。報告的注射部位反應包括注射部位瘀傷、紅斑及疼痛。接受調配的AAT RNAi藥物物質之個體之21.4%報告注射部位之此等合併的AE。調配的AAT RNAi藥物物質之50次注射中有6次導致注射部位AE或12%。單個個體中沒有超過一次地報告注射部位AE。所有註射部位AE均被視作輕度強度。其他實施例
應瞭解,儘管已結合本發明之詳細描述描述本發明,但前述描述意欲例示性而不是限制本發明之範疇,本發明之範疇係由隨附申請專利範圍之範疇限定。其他態樣、優點及修改係在隨後申請專利範圍之範疇內。
圖1A至1E. 以鈉鹽形式顯示的描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(本文中稱為ADS-001;亦即,在有義股的5’末端共軛至三齒N-乙醯基-半乳糖胺靶向基團之AAT RNAi劑)之化學結構表示。
圖2A至2E. 以游離酸形式顯示的描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之化學結構特徵。
圖3. 描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之經修飾有義股及反義股之示意圖(本文中稱為ADS-001;亦即在有義股的5’末端共軛至三齒N-乙醯基-半乳糖胺靶向基團之AAT RNAi劑)。圖3中使用以下縮寫:a、c、g及u係經2′-O-甲基修飾之核苷酸;Af、Cf、Gf及Uf係2′-氟(此項技術中亦稱為2’-去氧-2’-氟)修飾之核苷酸;o為磷酸二酯鍵;s為硫代磷酸酯鍵;invAb係反向無鹼基殘基或亞單元;及(NAG37)s係具有以下化學結構之三齒N-乙醯基-半乳糖胺靶向配體:
(以鈉鹽形式顯示),
(以游離酸形式顯示)。
圖4. 描述於實例2中之I期臨床研究之最終I期研究設計及劑量遞增時間表。
圖5. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或35 mg AAT RNAi藥物物質(群組1)之正常健康人類志願者(NHV)之血清AAT濃度的圖。如圖5至11中所顯示,「活性劑」係指描述於表2中之AAT RNAi藥物物質(呈如描述於表3中之調配的AAT RNAi藥物物質投與)。
圖6. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或單次100 mg劑量之AAT RNAi藥物物質(群組2b)之NHV中之血清AAT濃度的圖。
圖7. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或單次200 mg劑量之AAT RNAi藥物物質(群組3b)之NHV中之血清AAT濃度的圖。
圖8. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或單次300 mg劑量之AAT RNAi藥物物質(群組4b)之NHV中之血清AAT濃度的圖。
圖9. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或每月投與的三次100 mg劑量之AAT RNAi藥物物質(群組2)之NHV中之血清AAT濃度的圖。
圖10. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或每月投與的三次200 mg劑量之AAT RNAi藥物物質(群組3)之NHV中之血清AAT濃度的圖。
圖11. 顯示描述於實例2中之I期臨床研究之經投與安慰劑(所有群組)或每月投與的三次300 mg劑量之AAT RNAi藥物物質(群組4)之NHV中之血清AAT濃度的圖。
Claims (23)
- 一種治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法,該方法包括對患者投與包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下注射每月投與一次。
- 一種治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法,該方法包括對患者投與包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下注射每三個月投與一次。
- 一種治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法,該方法包括: a. 藉由皮下投藥對該個體投與初始劑量之包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量係在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間。 b. 在該初始劑量後約一個月對該個體投與第二劑量之該醫藥組合物,及 c. 在該第二劑量後約三個月對該個體投與第三劑量之該醫藥組合物。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量係在約25 mg至約300 mg之間。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量係在約25 mg至約200 mg之間。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量係在約100 mg至約200 mg之間。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量為約25 mg。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量為約35 mg.。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量為約100 mg。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量為約200 mg。
- 如請求項1至3中任一項的方法,其中該AAT RNAi藥物物質之劑量為約200 mg或更小。
- 如請求項1至11中任一項的方法,其中該由AATD引起之病狀或疾病係肝病。
- 如請求項12的方法,其中該肝病係慢性肝炎、肝硬化、肝細胞癌風險增加、轉胺酶升高(transaminitis)、膽汁鬱積、纖維化或暴發性肝衰竭。
- 如請求項1至13中任一項的方法,其中該個體係經進一步投與用於治療AATD之一種額外治療劑。
- 如請求項1至14中任一項的方法,其中該個體係經進一步投與用於治療由內源性分泌的AAT蛋白質之缺乏引起之肺損壞、肺氣腫或其他肺部疾病或病症之治療劑。
- 如請求項15的方法,其中該額外治療劑包括人類AAT蛋白質、純化之人類α-1蛋白酶抑制劑或重組AAT蛋白質。
- 如請求項1至16中任一項的方法,其中該醫藥組合物係經包裝在套組、容器、包裝、分配器、預填充之注射器或小瓶中。
- 如請求項1至17中任一項的方法,其中該醫藥組合物包含描述於表3中之調配的AAT RNAi藥物物質,由其組成,或基本上由其組成。
- 如請求項3的方法,該方法進一步包括在該第三劑量之後投與額外劑量,其中該等額外劑量係間隔約三個月投與。
- 如請求項1至19中任一項的方法,其中該醫藥組合物之一或多次劑量之投與係藉由該個體進行。
- 如請求項1至19中任一項的方法,其中該醫藥組合物之一或多次劑量之投與係藉由醫療專業人員進行。
- 一種描述於表2中之AAT RNAi藥物物質於治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)之用途,其中該用途包括對患者投與包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下注射每月投與一次。
- 一種描述於表2中之AAT RNAi藥物物質於治療有此需要的人類個體之α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)之用途,其中該用途包括對患者投與包含描述於表2中之AAT RNAi藥物物質之醫藥組合物,其劑量在約5 mg至約300 mg AAT RNAi藥物物質之間,其中該醫藥組合物係經皮下注射每三個月投與一次。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201962858059P | 2019-06-06 | 2019-06-06 | |
US62/858,059 | 2019-06-06 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202113081A true TW202113081A (zh) | 2021-04-01 |
Family
ID=73652297
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW109119068A TW202113081A (zh) | 2019-06-06 | 2020-06-05 | 用於治療α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20220305046A1 (zh) |
EP (1) | EP3980540A4 (zh) |
JP (1) | JP2022535127A (zh) |
KR (1) | KR20220019255A (zh) |
CN (1) | CN114222820A (zh) |
AU (1) | AU2020286462A1 (zh) |
BR (1) | BR112021024534A2 (zh) |
CA (1) | CA3141762A1 (zh) |
CO (1) | CO2022000016A2 (zh) |
MX (1) | MX2021015003A (zh) |
TW (1) | TW202113081A (zh) |
WO (1) | WO2020247774A1 (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR112019014282A2 (pt) | 2017-01-10 | 2020-03-03 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | Agentes de rnai de antitripsina (aat) alfa-1, composições incluindo agentes de rnai de aat, e métodos de uso |
BR112023004756A2 (pt) * | 2020-09-15 | 2024-02-06 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | Métodos para a redução de níveis de proteína z-aat |
TW202308660A (zh) * | 2021-08-25 | 2023-03-01 | 美商戴瑟納製藥股份有限公司 | 用於抑制α-1抗胰蛋白酶表現之組合物及方法 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20050137153A1 (en) * | 2002-02-20 | 2005-06-23 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of alpha-1 antitrypsin (AAT) gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
ES2392449T3 (es) * | 2004-10-20 | 2012-12-10 | Antisense Therapeutics Ltd | Modulación antisentido de la expresión de la integrina alfa-4 |
TW201620526A (zh) * | 2014-06-17 | 2016-06-16 | 愛羅海德研究公司 | 用於抑制α-1抗胰蛋白酶基因表現之組合物及方法 |
WO2017139616A1 (en) * | 2016-02-10 | 2017-08-17 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treatment for alpha-1 antitrypsin deficiency |
EP3469083A1 (en) * | 2016-06-10 | 2019-04-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | COMPLEMENT COMPONENT C5 iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF FOR TREATING PAROXYSMAL NOCTURNAL HEMOGLOBINURIA (PNH) |
BR112019014282A2 (pt) * | 2017-01-10 | 2020-03-03 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | Agentes de rnai de antitripsina (aat) alfa-1, composições incluindo agentes de rnai de aat, e métodos de uso |
SE540888C2 (en) * | 2017-06-19 | 2018-12-11 | Hepgene Medical Ab | Novel nucleic acid molecules and their use in therapy |
-
2020
- 2020-06-05 US US17/616,292 patent/US20220305046A1/en active Pending
- 2020-06-05 MX MX2021015003A patent/MX2021015003A/es unknown
- 2020-06-05 BR BR112021024534A patent/BR112021024534A2/pt unknown
- 2020-06-05 CN CN202080041338.5A patent/CN114222820A/zh active Pending
- 2020-06-05 JP JP2021572103A patent/JP2022535127A/ja active Pending
- 2020-06-05 EP EP20818171.9A patent/EP3980540A4/en active Pending
- 2020-06-05 KR KR1020227000043A patent/KR20220019255A/ko unknown
- 2020-06-05 CA CA3141762A patent/CA3141762A1/en active Pending
- 2020-06-05 WO PCT/US2020/036359 patent/WO2020247774A1/en active Application Filing
- 2020-06-05 AU AU2020286462A patent/AU2020286462A1/en active Pending
- 2020-06-05 TW TW109119068A patent/TW202113081A/zh unknown
-
2022
- 2022-01-04 CO CONC2022/0000016A patent/CO2022000016A2/es unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2022535127A (ja) | 2022-08-04 |
AU2020286462A1 (en) | 2022-01-27 |
MX2021015003A (es) | 2022-01-24 |
WO2020247774A1 (en) | 2020-12-10 |
CN114222820A (zh) | 2022-03-22 |
US20220305046A1 (en) | 2022-09-29 |
CO2022000016A2 (es) | 2022-04-08 |
EP3980540A4 (en) | 2023-11-01 |
EP3980540A1 (en) | 2022-04-13 |
BR112021024534A2 (pt) | 2022-02-08 |
CA3141762A1 (en) | 2020-12-10 |
KR20220019255A (ko) | 2022-02-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI823866B (zh) | 用於抑制類血管生成素蛋白-3(ANGPTL3)表現的RNAi藥劑及組合物及使用方法 | |
TWI811238B (zh) | 用於抑制脂蛋白元C-III(APOC3)表現之RNAi試劑及組合物 | |
TWI826365B (zh) | α-1抗胰蛋白酶 (AAT) RNAi 藥劑、包含AAT RNAi 藥劑之組合物及使用方法 | |
JP2022501040A (ja) | 17β−HSD13型(HSD17B13)の発現を阻害するためのRNAi剤、その組成物、および使用方法 | |
TW202113081A (zh) | 用於治療α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的方法 | |
TWI769197B (zh) | 用於治療多囊腎病之組成物 | |
TW202202153A (zh) | 用於抑制PNPLA3表現之RNAi劑、其醫藥組成物及使用方法 | |
US20220152079A1 (en) | Methods For The Treatment Of APOC3-Related Diseases And Disorders | |
JP2020537653A (ja) | アシアロ糖タンパク質受容体1の発現を阻害するためのRNAi剤および組成物 | |
US20230348905A1 (en) | Methods for the reduction of z-aat protein levels | |
JP2023519501A (ja) | プレカリクレイン関連の状態を治療及び予防するための組成物及び方法 | |
CN116670278A (zh) | 用于降低z-aat蛋白水平的方法 | |
WO2023196941A1 (en) | Treatment of a non-alcoholic fatty liver disease |