TW202108601A

TW202108601A - 胜肽、組成物、以及飢餓肽分泌促進劑

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Publication number: TW202108601A
Application number: TW109113788A
Authority: TW
Inventors: 大日向耕作; 徳山雄基; 中戸絢也; 岩倉浩; 金子賢太朗; 尾高清乃; 佐藤大; 伊藤彰; 樋口裕樹; 中山諒子; 鈴木　秀幸
Original assignee: 國立大學法人京都大學; 公益財團法人上總Ｄｎａ研究所; 日商龜田製菓股份有限公司
Priority date: 2019-04-26
Filing date: 2020-04-24
Publication date: 2021-03-01
Also published as: CN113748120A; JP7318897B2; WO2020218450A1; JPWO2020218450A1

Abstract

本發明的課題為提供一種可治療、預防或改善食慾不振之新穎胜肽。本發明提供一種以下（1）至（3）中任一所載之胜肽。（1）由序列編號1所載之胺基酸序列中的4個以上且9個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（2）由序列編號2所載之胺基酸序列中的4個以上且12個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（3）由與序列編號2所載之胺基酸序列具有90%以上的同一性的胺基酸序列所構成之胜肽。

Description

胜肽、組成物、以及飢餓肽分泌促進劑

本發明關於一種胜肽、組成物、以及飢餓肽分泌促進劑。

各種疾病等、或壓力帶來的症狀之一已知有食慾不振。在經過長期食慾不振持續的情況下，營養狀態惡化，可能導致疾病等的重症化。此外，在高齡者即使沒有發生疾病而認為有食慾不振，也可能造成生活品質（QOL）的下降。

舉例而言，在專利文獻1，記載以預防及治療食慾不振等的飢餓肽（ghrelin）分泌相關的症狀為目的之含有預定化合物的飢餓肽分泌促進劑。

［先前技術文獻］［專利文獻］［專利文獻1］日本特開2013-227309號公報

［本發明欲解決的課題］然而，仍需要進一步針對可治療、預防或改善食慾不振的機能性素材。

本發明有鑑於上述狀況而完成者，其目的在於提供一種可治療、預防或改善食慾不振的新穎胜肽。

［解決課題的技術手段］本發明者們，發現若由特定胺基酸序列所構成的胜肽則可解決上述課題之要點，而臻至完成本發明。具體而言，本發明提供如下者。

＜1＞一種以下（1）至（3）中任一所載之胜肽：（1）由序列編號1所載之胺基酸序列中的4個以上且9個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（2）由序列編號2所載之胺基酸序列中的4個以上且12個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（3）由與序列編號2所載之胺基酸序列具有90%以上的同一性的胺基酸序列所構成之胜肽。

＜2＞如＜1＞所載之胜肽，為由序列編號3至7中任一個所載之胺基酸序列所構成。

＜3＞如＜1＞所載之胜肽，為由序列編號1或2所載之胺基酸序列所構成，且為枯草桿菌蛋白酶（subtilisin）消化物。

＜4＞一種用於食慾不振之治療、預防或改善的組成物，其含有如＜1＞至＜3＞中任一項所載之胜肽、或含有包含將上述胜肽作為胺基酸序列的一部份的蛋白質。

＜5＞如＜4＞所載之組成物，其中上述食慾不振為由飢餓肽分泌下降所導致之食慾不振。

＜6＞如＜4＞或＜5＞所載之組成物，其為醫藥品。

＜7＞如＜4＞或＜5＞所載之組成物，其為飲食品。

＜8＞一種治療、預防或改善食慾不振之方法，其包含投予如＜4＞至＜7＞中任一項所載之組成物。

＜9＞一種飢餓肽分泌促進劑，其包含以下（1）至（3）中任一所載之胜肽：（1）由序列編號1所載之胺基酸序列中的4個以上且9個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（2）由序列編號2所載之胺基酸序列中的4個以上且12個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（3）由與序列編號2所載之胺基酸序列具有90%以上的同一性的胺基酸序列所構成之胜肽。

［發明效果］根據本發明，提供一種可治療、預防或改善食慾不振之新穎胜肽。

下文，將針對本發明的實施形態進行詳細地說明。又，本發明不限於以下的實施形態。

＜本發明之胜肽＞本發明之胜肽為以下（1）至（3）中任一所載之胜肽。又，以下的胺基酸序列是將N端置於左端，以N端至C端的方式記載。（1）由序列編號1所載之胺基酸序列（QAFEPIRSV）中的4個以上且9個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（2）由序列編號2所載之胺基酸序列（TNPWHSPRQGSF）中的4個以上且12個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（3）由與序列編號2所載之胺基酸序列具有90%以上的同一性的胺基酸序列所構成之胜肽。

在本發明中，「由序列編號1（或2）所載的胺基酸序列中的n個的連續胺基酸殘基所構成之胜肽」，係指由n個胺基酸殘基所構成的胜肽，該n個胺基酸殘基是自序列編號1（或2）所載的胺基酸序列，以維持該序列中的順序的方式選擇。舉例而言，作為「由序列編號1所載的胺基酸序列中的4個的連續胺基酸殘基所構成之胜肽」，可舉出由「QAFE」所構成的胜肽、由「AFEP」所構成的胜肽、由「FEPI」所構成的胜肽等。

本發明者們，基於各種胜肽混合物的同步分析資訊、及於影響食慾不振之已知胜肽的結構-活性相關資訊，進行研究的結果，發現了顯示對於食慾不振的治療等有效果之新穎胜肽，亦即，上述胜肽。又，序列編號1及2所載之胺基酸序列，皆為藉由「枯草桿菌蛋白酶（subtilisin）」（亦稱為枯草菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酵素）的米胚乳蛋白質的酵素消化物。

本發明之胜肽可為由序列編號1或2所載之胺基酸序列所構成之胜肽，也可為其部分胜肽。

本發明之胜肽為由序列編號1所載之胺基酸序列所構成之胜肽的部分胜肽的情況，較佳為由序列編號1所載之胺基酸序列中，以4個以上且8個以下為佳、以4個以上且5個以下更佳的連續的胺基酸殘基所構成之胜肽。

本發明之胜肽為由序列編號2所載之胺基酸序列所構成之胜肽的部分胜肽的情況，較佳為由序列編號2所載之胺基酸序列中，以4個以上且10個以下為佳、以4個以上且8個以下更佳的連續的胺基酸殘基所構成之胜肽。

本發明之胜肽為由序列編號1所載之胺基酸序列所構成之胜肽的部分胜肽的情況，較佳序列可舉出如下：由序列編號3表示之胺基酸序列（QAFE）所構成之胜肽，由序列編號4表示之胺基酸序列（PIRSV）所構成之胜肽。

本發明之胜肽為由序列編號2所載之胺基酸序列所構成之胜肽的部分胜肽的情況，較佳序列可舉出如下：由序列編號5表示之胺基酸序列（TNPW）所構成之胜肽，由序列編號6表示之胺基酸序列（HSPR）所構成之胜肽，由序列編號7表示之胺基酸序列（QGSF）所構成之胜肽。

本發明之胜肽可為由序列編號1或2所載之胺基酸序列所構成，且為枯草桿菌蛋白酶消化物。

本發明者們進一步研究的結果，發現本發明之胜肽是藉由促進飢餓肽分泌，而具有提升食慾效果，可達到治療或預防食慾不振之效果。

本發明之胜肽，可藉由化學合成、天然的蛋白質（米胚乳蛋白質）或聚胜肽的加水分解而獲得。

作為化學合成的方法，能夠舉出習知的胜肽合成法。具體而言，可舉出通常用於胜肽合成方法之液相法或固相法。更具體而言，可舉出Fmoc法、Boc法。合成胜肽亦可進行純化。作為純化方法，例如可舉出使用離子交換層析、逆相液相層析、親和性層析等方法。

作為加水分解的方法，可舉出使用加水分解酵素的方法，使用強酸或強鹼的方法等。

使用加水分解酵素的方法中，能夠使用源自動物、植物或微生物之加水分解酵素（枯草桿菌蛋白酶等）。作為加水分解酵素，亦可使用能夠作為食品使用的微生物（例如，麵包酵母、啤酒酵母等的食用酵母）等。

使用加水分解酵素的加水分解條件，雖未特別限定，亦可依照所使用的酵素調整pH為適當的值，在30~40℃程度的溫度下使其反應約30分鐘~48小時。亦可從所獲得的反應液中純化本發明之胜肽。加水分解的對象為食品素材的情況時，可直接、或添加其他食品素材作為食品而提供。

使用強酸的方法中，可使用例如鹽酸、硝酸、硫酸等。使用強鹼的方法中，可使用例如鹼金屬氫氧化物（氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰等）、鹼金屬碳酸鹽（碳酸鈉、碳酸鉀等）、鹼金屬碳酸氫鹽（碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等）。

作為使用強酸或強鹼的加水分解條件，雖未特別限定，但可在強酸或強鹼的存在下，在水中、以1~100℃的溫度下使其反應30分鐘~48小時。加水分解的反應生成物在調整pH後，可直接使用，亦可藉由純化分離本發明之胜肽而使用。

由各種方法所得到的胜肽的胺基酸序列，可藉由艾德曼降解技術（Edman degradation technique）、從C端讀取胺基酸序列的蛋白質測序儀、GC-MS等進行分析。

＜本發明之組成物＞本發明之組成物至少包含本發明之胜肽。本發明之組成物亦可為由本發明之胜肽所構成者，亦可含有其他成分。本發明之組成物中所包含的胜肽亦可為含有將本發明之胜肽作為胺基酸序列的一部分的蛋白質。

藉由攝取本發明之胜肽，可治療、預防或改善食慾不振。因此，本發明之組成物可較佳使用於食慾不振之治療、預防或改善。

在本發明中，「食慾不振」是指食慾的減少或攝食量的減少。根據本發明，特別是可良好地治療、預防或改善因飢餓肽分泌的降低所致的食慾不振。

在本發明中，「治療」是指，例如食慾不振的治癒等。「預防」是指，例如食慾不振的抑制或延遲等。「改善」是指，例如食慾不振的緩和、減輕等。

本發明之組成物能夠調配成任意的形態，亦可調配作為醫藥品或飲食品。

本發明之組成物調配作為醫藥品時，可調配作為經口投予劑或非經口投予劑。本發明之組成物，例如可以本發明之胜肽單獨、或與載體、稀釋劑或賦形劑一起調配作為以下之製劑；錠（素錠、糖衣錠、發泡錠、膜衣錠、咀嚼錠等）、膠囊、口含錠（troche）、粉末、細粒劑、顆粒劑、液劑、懸浮液、乳濁液、糊、乳劑、注射劑（包含調配於胺基酸輸液、電解質輸液等的輸液的情況）、腸溶性的錠劑、膠囊劑、緩釋性製劑等。

作為載體、稀釋劑或賦形劑，可使用製劑領域常用、且不與本發明之胜肽反應之物質。舉例而言，可舉出以下者；乳糖、葡萄糖、甘露糖醇（mannite）、糊精、環糊精、澱粉、蔗糖、偏矽酸鋁酸鎂（magnesium aluminometasilicate）、合成矽酸鋁、羧甲基纖維素鈉、羥丙基澱粉、羧甲基纖維素鈣、離子交換樹脂、甲基纖維素、明膠、阿拉伯膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、聚乙烯醇、輕質無水矽酸、硬脂酸鎂、滑石、黃蓍膠（tragacanth）、膨潤土、矽酸鎂鋁（veegum）、氧化鈦、山梨糖醇酐脂肪酸酯、月桂基硫酸鈉、甘油、脂肪酸甘油酯、精製羊毛脂、甘油明膠、聚山梨醇酯、聚乙烯二醇（macrogol）、植物油、蠟、液態石蠟、白軟石蠟（white vaseline）、氟碳、非離子性界面活性劑、丙二醇、水等。

將本發明之組成物調配作為飲食品的情況時，可調配成任意的型態，例如可舉出如下；飲料類（咖啡、可可、果汁、清涼飲料、電解質飲料、茶飲料、綠茶、紅茶、烏龍茶、乳飲、乳酸菌飲料、優酪乳、碳酸飲料等）、口香糖、軟糖、果凍、糖果、餅乾（cookie）、脆餅（cracker）、軟餅（biscuit）、冰品（冰淇淋、冰棒、雪酪、剉冰等）、即食食品（retort food）、果凍狀食品（果凍、寒天、果凍狀飲料等）等。

本發明之飲食品亦可調配作為所謂的健康食品、機能性食品、營養補助食品、補充劑、特殊保健用食品、機能性表示食品、患者用食品・患者用組合食品（日本厚生勞動省，特別用途食品之一種）或高齡者用食品（日本厚生勞動省，特別用途食品之一種）。

本發明之組成物中，本發明之胜肽的量可依照所欲得到的效果適當設定。舉例而言，相對於組成物，將本發明之胜肽以較佳為0.01質量%以上、更佳為1.00質量%以上調配。再者，相對於組成物，將本發明之胜肽以較佳為100質量%以下、更佳為90質量%以下調配。又，在本發明之組成物中含有本發明之胜肽以外的胜肽的情況，上述的值是以本發明之胜肽的量換算之值。

本發明之組成物中，本發明之胜肽以外的成分的量可依照該成分的種類、組成物的形態、所欲得到的效果等適當設定。

本發明之組成物的投予方法並未特別限定，經口投予、或非經口投予（注射等）的任一皆可。從容易發揮本發明之效果的觀點而言，本發明之組成物以經口投予為佳。

本發明之組成物的投予量，依照投予方法、投予對象的狀態、年齡等而不同，例如換算為本發明之胜肽的量，成人每1日較佳為0.01mg/kg~500mg/kg、更佳為0.05mg/kg~100mg/kg、進一步更佳為0.1~30mg/kg。在上述範圍內，具有投予量越多，越容易達到本發明之效果的傾向。

作為本發明之組成物的製造方法，可依照所欲得的形態，採用習知的方法。

＜治療、預防或改善食慾不振之方法＞藉由將本發明之組成物投予至對象，可治療、預防或改善食慾不振。

投予方法可依照組成物的形態適當選擇。

投予次數、投予間隔、投予量，可依照投予對象的狀態（症狀、年齡、體重等）適當選擇。

投予對象並未特別限定，可列出人類、人類以外的哺乳類（狗、貓、家畜（牛、豬、綿羊、山羊等）等）等。

＜飢餓肽分泌促進劑＞如上所述，本發明之胜肽具有飢餓肽分泌促進効果。因此，本發明之胜肽作為飢餓肽分泌促進劑是有效的。

本發明之飢餓肽分泌促進劑至少包含本發明之胜肽，可由本發明之胜肽所構成者，或也可含有其他成分。在含有其他成分的情況，只要不阻礙本發明之胜肽的作用，則可調配任意的成分。舉例而言，可調配在上述＜本發明之組成物＞的部分所舉出的成分。

［實施例］下文示出實施例將具體說明本發明，惟，本發明並不限於該等實施例。

＜試驗1＞（胜肽的製作-1）將經純化的米胚乳蛋白質、以及各種消化酵素溶解於水，以成為米胚乳蛋白質：酵素的質量比＝ 100：1，且米胚乳蛋白質的最終濃度為20 mg/ml的方式混合，並進行酵素反應，獲得胜肽為各種酵素消化物。

使用的消化酵素、以及反應條件如下。經過下述反應時間後，煮沸各試料（100℃，10分鐘），停止酵素反應。（1）枯草桿菌蛋白酶（商品名稱「T1426」，Sigma-Aldrich公司製）：反應溫度37℃，反應時間5小時，反應pH 7.5 （2）Sumizyme（商品名稱「Sumizyme FP」，新日本化學公司製）：反應溫度50℃，反應時間5小時，反應pH 7.5 （3）嗜熱菌蛋白酶（thermolysin）（商品名稱「thermolysin」，Seikagaku公司製）：反應溫度37℃，反應時間5小時，反應pH 7.0~7.5

（飢餓肽分泌活性的評估-1）在上述（胜肽的製作-1）所得到的胜肽供以下試驗，以評估各胜肽對於飢餓肽分泌的影響。藉由胜肽投予越能促進飢餓肽分泌，則表示該胜肽食欲促進效果越高。

將飢餓肽分泌細胞（MGN3-1）以1×10⁵ 細胞/孔植入至96孔盤，在辛酸鈉/DMEM培養基中，於37℃培養24小時。培養後，以DPBS清洗細胞。作為緩衝溶液調配的各胜肽100μL（胜肽濃度1或10 mg/mL）添加至細胞，接著於37℃培養4小時。此外，作為緩衝溶液，使用DMEM中50μM的辛酸鈉。

此外，在以下所有試驗中，只要未特別記載，則除了僅添加緩衝液而不添加胜肽之外，準備與上述相同的培養物作為對照。

培養後，回收培養基試料並藉由離心處理得到上清液。將10μL的1N HCl添加至上清液，直到進行下述飢餓肽濃度測定的實施為止，保存於-80℃。

各培養基試料中的飢餓肽濃度使用ELISA套組（商品名稱「Ghrelin (Acylated) EIAKit A05117」，Bertin Pharma公司製）進行測定。該結果示於第1圖。此外，第1圖的結果，顯示相對於對照的測定值之相對值。

如第1圖所示，可知枯草桿菌蛋白酶消化物、Sumizyme消化物、以及嗜熱菌蛋白酶消化物分別具有飢餓肽分泌促進效果。特別是，可知枯草桿菌蛋白酶消化物以及Sumizyme消化物具有濃度依賴性的顯著飢餓肽分泌促進効果。

＜試驗2＞（胜肽的製作-2）依據上述（飢餓肽分泌活性的評估-1）的結果，篩選具有飢餓肽分泌促進効果的枯草桿菌蛋白酶消化物中的胜肽，並特定以下2種胜肽作為候補。在此，該等胜肽以Fmoc法合成，接著以逆相HPLC純化而製作。此外，下文中，「由序列編號n表示之胺基酸序列所構成之胜肽」亦可僅稱為「序列編號n的胜肽」。（1）由序列編號1表示之胺基酸序列（QAFEPIRSV）所構成之胜肽（2）由序列編號2表示之胺基酸序列（TNPWHSPRQGSF）所構成之胜肽

（飢餓肽分泌活性的評估-2）使用上述2種胜肽，以與上述（飢餓肽分泌活性的評估-1）同樣的方法評估各胜肽對飢餓肽分泌給予的影響。該結果示於第2圖（n＝4）。此外，在本例中，使用胜肽濃度為0.01、0.1或1 mM的胜肽溶液。

如第2圖所示，可知序列編號1或2的胜肽皆具有飢餓肽分泌促進效果。特別是，胜肽濃度為1 mM以上時，其效果顯著。

＜試驗3＞使用在上述（胜肽的製作-2）製作的序列編號1之胜肽，檢驗飢餓肽分泌促進効果的作用。具體而言，檢驗序列編號1之胜肽的投予對於細胞內外的飢餓肽濃度帶來的影響、以及對於飢餓肽合成相關基因表現帶來的影響。

（飢餓肽分泌活性的評估-3）使用序列編號1之胜肽，以與上述（飢餓肽分泌活性的評估-1）同樣的方法評估胜肽對飢餓肽分泌（細胞內的飢餓肽濃度）給予的影響。該結果示於第3A圖（n＝4~5）。

（飢餓肽合成相關基因表現的評估）上述（飢餓肽分泌活性的評估-1）中培養完後的細胞中，關於飢餓肽合成的3種基因（Preproghrelin、GOAT、以及PC3）以以下方法測定。首先，使用「RNeasy Mini Kit」（QIA-GEN公司製）、以及「Takara PrimeScript RT Master Mix」（Takara Bio公司製）自細胞抽出mRNA。接著，使用「LightCycler 96 System」（Roche Diagnostic公司製）、以及「THUNDERBIRD qPCR Mix」（東洋紡公司製），擴增cDNA，並測定mRNA表現量。該結果示於第3B圖（Preproghrelin）、第3C圖（GOAT）、第3D圖（PC3）（分別為n＝4~5）。

如第3A圖所示，藉由序列編號1之胜肽的投予，細胞內的飢餓肽濃度有減少的傾向。此外，藉由序列編號1之胜肽的投予，細胞外的飢餓肽濃度增加（未示出數據）。

如第3B~3D圖所示，飢餓肽合成相關基因的表現量皆不因序列編號1之胜肽的投予而變化。

自以上結果可知，序列編號1之胜肽並非促進飢餓肽合成，而是促進飢餓肽分泌至細胞外，因而達到飢餓肽分泌促進効果。

＜試驗4＞依據上述（試驗3）的結果，檢驗由序列編號1之胜肽所致的飢餓肽分泌促進効果的作用。具體而言，檢驗序列編號1之胜肽的投予對於細胞內cAMP濃度及細胞內鈣離子（Ca²⁺ ）濃度給予的影響。

此外，已知正腎上腺素（noradrenalin）透過細胞內的cAMP濃度及細胞內鈣離子濃度的增加，促進飢餓肽的分泌。在此，以下的試驗中，也準備使用正腎上腺素作為陽性對照。

（細胞內cAMP濃度的評估）將飢餓肽分泌細胞（MGN3-1）溶解於含有0.5 mM IBMX的Krebs-Ringer-HEPES緩衝液，於37℃培養30分鐘後，使用「HitHunter cAMP Assay for small molecules」（DiscoveRx公司製）定量細胞內的cAMP。該結果示於第4圖。

（細胞內鈣離子濃度的評估）使用「Calcium Kit II-Fluo 4」（同仁化學研究所），使用多功能培養盤判讀儀（multi plate reader）（BMG LABTECH GmbH公司製，λex=485nm，λem=520nm）進行測定。

如第4圖所示，序列編號1之胜肽不帶給細胞內cAMP濃度的影響。又，序列編號1之胜肽不帶給細胞內鈣離子濃度（未示出數據）的影響。其表示序列編號1之胜肽是透過與正腎上腺素不同的路徑促進飢餓肽分泌。

＜試驗5＞將序列編號1之胜肽投予至小鼠，以檢驗體內（in vivo）中的效果。具體言而，檢驗序列編號1之胜肽的投予對於小鼠的攝食行為、以及血清中飢餓肽濃度帶來的影響。

（小鼠攝食行為的評估-1）對小鼠（ddY小鼠，11週齡的雄性），單次經口投予溶解於生理食鹽水的序列編號1之胜肽（1 mg/kg）。接著，使其攝食預先秤重的飼料（商品名稱「CE-2」，CLEA Japan公司製），攝食4小時後測定剩餘的飼料重量。又，除了以生理食鹽水替代序列編號1之胜肽來進行單次經口投予之外，以與上述同樣的試驗進行作為對照試驗。餵予小鼠的飼料重量與攝食4小時後剩餘的飼料重量之差被指定為攝食量（g/4小時）。該結果示於第5A圖（n＝10~11）。

（小鼠血清中飢餓肽濃度的評估）對小鼠（ddY小鼠，11週齡的雄性），投予溶解於生理食鹽水的序列編號1之胜肽（0.3 mg/kg）。接著，投予1小時後自小鼠的眼窩靜脈採血，以1120×g，10分鐘，4℃進行離心，將上清液以1N HCl酸化之後，使用醯化飢餓肽酵素免疫測定套組測定血清中飢餓肽濃度（pg/ml）。該結果示於第5B圖（n＝5~7）。

如第5A圖所示，序列編號1之胜肽使小鼠的攝食量增加，顯示有食慾促進效果。又，如第5B圖所示，藉由投予序列編號1之胜肽，使血清中飢餓肽濃度增加。

＜試驗6＞在上述（胜肽的製作-2）製作的序列編號1及2之胜肽，以及其部分胜肽（序列編號3~7之胜肽）以Fmoc法合成，接著以逆相HPLC純化而製作。接著，將該等的各胜肽投予小鼠，以檢驗體內（in vivo）中的效果。具體而言，檢驗各胜肽的投予對於小鼠的攝食行為帶來的影響。

本實施例使用的胜肽為以下7種：（1）由序列編號1表示之胺基酸序列（QAFEPIRSV）所構成之胜肽（2）由序列編號2表示之胺基酸序列（TNPWHSPRQGSF）所構成之胜肽（3）由序列編號3表示之胺基酸序列（QAFE）所構成之胜肽（4）由序列編號4表示之胺基酸序列（PIRSV）所構成之胜肽（5）由序列編號5表示之胺基酸序列（TNPW）所構成之胜肽（6）由序列編號6表示之胺基酸序列（HSPR）所構成之胜肽（7）由序列編號7表示之胺基酸序列（QGSF）所構成之胜肽

（小鼠攝食行為的評估-2）對小鼠（ddY小鼠，購入7週齡的雄性並經1週以上馴化使用），單次經口投予溶解於生理食鹽水的各胜肽（1 mg/kg）。接著，使其攝食預先秤重的飼料（商品名稱「CE-2」，CLEA Japan公司製），攝食2小時後測定剩餘的飼料重量。又，除了以生理食鹽水替代各胜肽來進行單次經口投予之外，以與上述同樣的試驗進行作為對照試驗。餵予小鼠的飼料重量與攝食2小時後剩餘的飼料重量之差被指定為攝食量（g/2小時）。基於該結果，各群組的攝取量是以對照的攝取量設為「100」時的相對值計算。該結果示於第6圖（n＝7~18，*為相對於對照P＜0.05）。

如第6圖所示，所有胜肽皆使小鼠的攝食量增加，顯示有食慾促進效果。不僅在由序列編號1或2表示之胺基酸序列所構成之胜肽，而且在其部分胜肽中亦觀察到如此的效果。特別是，由序列編號3、5、6或7表示之胺基酸序列所構成之胜肽，與對照相比，飼料攝取量顯著地增加。

無。

［第1圖］顯示米胚乳蛋白質的酵素消化物對飢餓肽分泌活性的影響之圖表。［第2圖］顯示本發明之胜肽對飢餓肽分泌活性的影響之圖表。［第3圖］顯示本發明之胜肽對飢餓肽分泌活性及飢餓肽合成相關基因表現的影響之圖表。［第4圖］顯示本發明之胜肽對細胞內cAMP濃度的影響之圖表。［第5圖］顯示本發明之胜肽對小鼠的攝食行為、以及血清中飢餓肽濃度的影響之圖表。［第6圖］顯示本發明之胜肽對小鼠的攝食行為的影響之圖表。

Claims

一種以下（1）至（3）中任一所載之胜肽，（1）由序列編號1所載之胺基酸序列中的4個以上且9個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（2）由序列編號2所載之胺基酸序列中的4個以上且12個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（3）由與序列編號2所載之胺基酸序列具有90%以上的同一性的胺基酸序列所構成之胜肽。
如請求項1所述之胜肽，為由序列編號3至7中任一個所載之胺基酸序列所構成。
如請求項1所述之胜肽，為由序列編號1或2所載之胺基酸序列所構成，且為枯草桿菌蛋白酶消化物。
一種用於食慾不振之治療、預防或改善的組成物，其含有如請求項1至3中任一項所述之胜肽、或含有包含將上述胜肽作為胺基酸序列的一部份的蛋白質。
如請求項4所述之組成物，其中上述食慾不振為由飢餓肽分泌下降所導致之食慾不振。
如請求項4或5所述之組成物，其為醫藥品。
如請求項4或5所述之組成物，其為飲食品。
預防或改善食慾不振之方法，其包含投予如請求項4至7中任一項所述之組成物。
一種飢餓肽分泌促進劑，其包含以下（1）至（3）中任一所載之胜肽：（1）由序列編號1所載之胺基酸序列中的4個以上且9個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（2）由序列編號2所載之胺基酸序列中的4個以上且12個以下的連續胺基酸殘基所構成之胜肽，（3）由與序列編號2所載之胺基酸序列具有90%以上的同一性的胺基酸序列所構成之胜肽。