TW202035694A - 用於治療及預防肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之組合物及方法 - Google Patents

用於治療及預防肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之組合物及方法 Download PDF

Info

Publication number
TW202035694A
TW202035694A TW108144617A TW108144617A TW202035694A TW 202035694 A TW202035694 A TW 202035694A TW 108144617 A TW108144617 A TW 108144617A TW 108144617 A TW108144617 A TW 108144617A TW 202035694 A TW202035694 A TW 202035694A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
antisense oligonucleotide
administered
dose
sod1
pharmaceutical composition
Prior art date
Application number
TW108144617A
Other languages
English (en)
Inventor
伊凡 亞歷山德羅夫 內斯托羅夫
托比 弗格森
丹尼爾 Ａ 諾里斯
Original Assignee
美商百健Ｍａ公司
美商Ionis製藥公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商百健Ｍａ公司, 美商Ionis製藥公司 filed Critical 美商百健Ｍａ公司
Publication of TW202035694A publication Critical patent/TW202035694A/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0089—Oxidoreductases (1.) acting on superoxide as acceptor (1.15)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/11—Antisense
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/322—2'-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/33—Chemical structure of the base
    • C12N2310/334—Modified C
    • C12N2310/3341—5-Methylcytosine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/352—Nature of the modification linked to the nucleic acid via a carbon atom
    • C12N2310/3525—MOE, methoxyethoxy
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/35—Special therapeutic applications based on a specific dosage / administration regimen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y115/00—Oxidoreductases acting on superoxide as acceptor (1.15)
    • C12Y115/01—Oxidoreductases acting on superoxide as acceptor (1.15) with NAD or NADP as acceptor (1.15.1)
    • C12Y115/01001—Superoxide dismutase (1.15.1.1)

Abstract

提供了SOD1靶向反義寡核苷酸及其鹽之給藥方案。此等給藥方案應用於治療患有肌肉萎縮性脊髓側索硬化症或處於發展肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之風險下的個體。

Description

用於治療及預防肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之組合物及方法
本申請案大體上係關於減少超氧化物歧化酶1 (SOD1)之表現的反義寡核苷酸或其鹽在有需要之人類個體，例如具有經確認之人類SOD1基因突變的患有肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)之成人中之臨床使用的給藥方案。此類方法適用於藉由抑制SOD1之表現治療、預防或改善ALS。
可溶性SOD1酶(亦稱為Cu/Zn超氧化物歧化酶)為超氧化物歧化酶之一，其藉由催化超氧化物歧化為過氧化氫(H2 O2 )來防禦生物分子之氧化性損傷(Fridovich,Annu. Rev. Biochem ., 64:97-112 (1995))。超氧化物陰離子(O2- )為主要由粒線體中之氧化磷酸化錯誤產生的潛在有害之細胞副產物(Turrens, J. Physiol. , 552:335-344 (2003))。
肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS，亦稱為路格里克氏病(Lou Gehrig's disease))為在任何給定時間影響多達30,000名美國人之毀滅性進行性神經退化疾病。SOD1基因中之突變與ALS之顯性遺傳形式，一種以上下運動神經元之選擇性退化為特徵之病症相關聯(Rowland,N. Engl. J. Med ., 2001, 344:1688-1700 (2001))。在家族性ALS與SOD1基因中之誤義突變之間存在緊密的基因連鎖(Rosen,Nature , 362:59-62 (1993))。
據信突變體SOD1之毒性由初始誤摺疊(功能獲得)降低對抗活性酶之核保護(核中之功能損失)而產生，一種可能涉及於ALS發病機制中之過程(Sau,Hum. Mol. Genet ., 16:1604-1618 (2007))。ALS中運動神經元之進行性退化最終導致其死亡。當運動神經元死亡時，腦啟動及控制肌肉運動之能力喪失。在隨意肌動作進行性地受影響下，處於疾病較晚期之患者可能變得完全癱瘓。
當前缺乏可接受之選項用於治療此類神經退化疾病。因此，本文之目的在於提供治療此類疾病之方法。
本揭示案一部分係關於減少超氧化物歧化酶1 (SOD1)之表現的反義寡核苷酸之給藥方案及此類反義寡核苷酸或其鹽之用途，其係用於抑制SOD1之表現及治療、預防或改善在SOD1基因中具有突變之人類個體的ALS。
在第一個態樣中，本揭示案係關於一種治療或預防有需要之人類個體的與人類超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及以足以遞送約100 mg或100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量向人類個體投與(例如藉由鞘內投藥)醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第二個態樣中，本揭示案係關於一種治療或預防有需要之人類個體的與人類SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及以足以遞送約60 mg或60 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量向人類個體投與(例如藉由鞘內投藥)醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第三個態樣中，本揭示案係關於一種治療或預防有需要之人類個體的與人類SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及以足以遞送約40 mg或40 mg固定劑量之反義寡核苷酸的量向人類個體投與(例如藉由鞘內投藥)醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第四個態樣中，本揭示案係關於一種治療或預防有需要之人類個體的與人類SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及以足以遞送約20 mg或20 mg固定劑量之反義寡核苷酸的量向人類個體投與(例如藉由鞘內投藥)醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第五個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及以足以遞送約100 mg或100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向人類個體投與醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第六個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及以足以遞送約60 mg或60 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向人類個體投與醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第七個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及以足以遞送約40 mg或40 mg固定劑量之反義寡核苷酸的量藉由鞘內投藥向人類個體投與醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在第八個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及以足以遞送約20 mg或20 mg固定劑量之反義寡核苷酸的量藉由鞘內投藥向人類個體投與醫藥組合物，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
在上述態樣之一些實施方案中，SOD1基因中之突變為A4V、H46R、G93S、A4T、G141X、D133A、V148G、N139K、G85R、G93A、V14G、C6S、I113T、D49K、G37R、A89V、E100G、D90A、T137A、E100K、G41A、G41D、G41S、G13R、G72S、L8V、F20C、Q22L、H48R、T54R、S591、V87A、T88δTAD、A89T、V97M、S105δSL、V118L、D124G、L114F、D90A、G12R或G147R。在一個實施方案中，SOD1基因中之突變為A4V。在另一個實施方案中，SOD1基因中之突變為H46R。在又一個實施方案中，SOD1基因中之突變為G93S。
在一些實施方案中，藉由基因測試鑑別人類SOD1基因中之突變。
在某些實施方案中，上述方法進一步涉及藉由基因測試鑑別人類SOD1基因中之突變。
在一些實施方案中，在四個月之過程中至少5次(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24次)向人類個體投與醫藥組合物。
在某些實施方案中，向人類個體投與醫藥組合物之一或多個負載劑量，繼之以一或多個維持劑量。在一些情況下，投與三個負載劑量，其中在第一負載劑量之後約兩週或之後兩週投與第二負載劑量，且在第二負載劑量之後約兩週或之後兩週投與第三負載劑量(例如第1天、第15天及第29天投與負載劑量)。在一些情況下，在第三負載劑量之後4週開始約每4週或4週投與維持劑量(例如持續1個月、2個月、三個月、四個月、五個月、六個月、七個月、八個月、九個月、十個月)。
在某些實施方案中，向人類個體投與醫藥組合物之三個負載劑量，繼之以至少一個(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12個)維持劑量。在一些情況下，相隔約兩週或兩週投與三個負載劑量。在一些情況下，相隔約14天或14天投與三個負載劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後約4週或4週開始投與一或多個維持劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後一個月開始每個月投與一或多個維持劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後28天開始每28天投與一或多個維持劑量。
在某些實施方案中，如下向人類個體投與醫藥組合物之負載劑量及維持劑量： (i)   醫藥組合物之第一負載劑量； (ii)  在第一負載劑量之後14天投與的醫藥組合物之第二負載劑量； (iii) 在第一負載劑量之後28天投與的醫藥組合物之第三負載劑量；及 (iv) 在第三負載劑量之後28天或1個月投與的醫藥組合物之第一維持劑量。
在某些實施方案中，如下向人類個體投與醫藥組合物之負載劑量及維持劑量： (i)   呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第一負載劑量； (ii)  呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第二負載劑量，其中在第一負載劑量之後14天投與第二負載劑量； (iii) 呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第三負載劑量，其中在第一負載劑量之後28天投與第三負載劑量；及 (iv) 呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第一維持劑量，其中在第三負載劑量之後28天投與第一維持劑量。
在某些實施方案中，如下向人類個體投與醫藥組合物之負載劑量及維持劑量： (i)   呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第一負載劑量； (ii)  呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第二負載劑量，其中在第一負載劑量之後14天投與第二負載劑量； (iii) 呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第三負載劑量，其中在第一負載劑量之後28天投與第三負載劑量；及 (iv) 呈足以遞送100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量的第一維持劑量，其中在第三負載劑量之後1個月投與第一維持劑量。
在第九個態樣中，本揭示案提供一種治療或預防有需要之人類個體的與SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於100 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。105.9 mg化合物A (亦即，ISIS 666853之十九鈉鹽)等效於100 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十個態樣中，本揭示案提供一種治療或預防有需要之人類個體的與SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於60 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。63.5 mg化合物A等效於60 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十一個態樣中，本揭示案提供一種治療或預防有需要之人類個體的與SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於40 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。42.3 mg化合物A等效於40 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十二個態樣中，本揭示案提供一種治療或預防有需要之人類個體的與SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於20 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。21.2 mg化合物A等效於20 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十三個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於100 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。105.9 mg化合物A等效於100 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十四個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於60 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。63.5 mg化合物A等效於60 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十五個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於40 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。42.3 mg化合物A等效於40 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在第十六個態樣中，本揭示案提供一種減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成或人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
， 且其中以等效於20 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。21.2 mg化合物A等效於20 mg反義寡核苷酸。所投與之醫藥組合物可包含反義寡核苷酸、反義寡核苷酸之一或多種鹽，或其混合物。
在一些實施方案中，向人類個體投與反義寡核苷酸之鹽。在一些實施方案中，鹽為鈉鹽。在一些實施方案中，反義寡核苷酸之鹽具有以下結構：
Figure 02_image005
。
在上述態樣之一些實施方案中，SOD1基因中之突變為A4V、H46R、G93S、A4T、G141X、D133A、V148G、N139K、G85R、G93A、V14G、C6S、I113T、D49K、G37R、A89V、E100G、D90A、T137A、E100K、G41A、G41D、G41S、G13R、G72S、L8V、F20C、Q22L、H48R、T54R、S591、V87A、T88δTAD、A89T、V97M、S105δSL、V118L、D124G、L114F、D90A、G12R或G147R。在一個實施方案中，SOD1基因中之突變為A4V。在另一個實施方案中，SOD1基因中之突變為H46R。在又一個實施方案中，SOD1基因中之突變為G93S。
在一些實施方案中，藉由基因測試鑑別人類SOD1基因中之突變。
在某些實施方案中，上述方法進一步涉及藉由基因測試鑑別人類SOD1基因中之突變。
在一些實施方案中，在四個月之過程中至少5次向人類個體投與醫藥組合物。
在某些實施方案中，向人類個體投與醫藥組合物之一或多個負載劑量，繼之以一或多個維持劑量。在一些情況下，投與三個負載劑量，其中負載劑量間隔兩週，例如第1天、第15天及第29天。在一些情況下，在第三負載劑量之後4週開始每4週投與維持劑量(例如持續1個月、2個月、三個月、四個月、五個月、六個月、七個月、八個月、九個月、十個月)。
在某些實施方案中，向人類個體投與醫藥組合物之三個負載劑量，繼之以至少一個(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12個)維持劑量。在一些情況下，相隔兩週投與三個負載劑量。在一些情況下，相隔14天投與三個負載劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後4週開始每4週投與一或多個維持劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後一個月開始每個月投與一或多個維持劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後28天開始每28天投與一或多個維持劑量。
在某些實施方案中，如下向人類個體投與醫藥組合物之負載劑量及維持劑量： (i)   醫藥組合物之第一負載劑量； (ii)  在第一負載劑量之後14天投與的醫藥組合物之第二負載劑量； (iii) 在第一負載劑量之後28天投與的醫藥組合物之第三負載劑量；及 (iv) 在第三負載劑量之後28天或1個月投與的醫藥組合物之第一維持劑量。
在某些實施方案中，如下向人類個體投與醫藥組合物之負載劑量及維持劑量： (i)   等效於100 mg反義寡核苷酸之第一負載劑量； (ii)  等效於100 mg反義寡核苷酸之第二負載劑量，其中在第一負載劑量之後14天投與第二負載劑量； (iii) 等效於100 mg反義寡核苷酸之第三負載劑量，其中在第一負載劑量之後28天投與第三負載劑量；及 (iv) 等效於100 mg反義寡核苷酸之第一維持劑量，其中在第三負載劑量之後28天投與第一維持劑量。
在某些實施方案中，如下向人類個體投與醫藥組合物之負載劑量及維持劑量： (i)   等效於100 mg反義寡核苷酸之第一負載劑量； (ii)  等效於100 mg反義寡核苷酸之第二負載劑量，其中在第一負載劑量之後14天投與第二負載劑量； (iii) 等效於100 mg反義寡核苷酸之第三負載劑量，其中在第一負載劑量之後28天投與第三負載劑量；及 (iv) 等效於100 mg反義寡核苷酸之第一維持劑量，其中在第三負載劑量之後1個月投與第一維持劑量。
在另一個態樣中，本揭示案係關於一種包含反義寡核苷酸之無菌製劑的注射器或泵。注射器或泵適於以20 mg、40 mg、60 mg或100 mg之固定劑量鞘內投與反義寡核苷酸。反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
除非另有規定，否則本文所用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解之含義相同的含義。儘管類似或等效於本文所述之彼等的方法及材料可用於本發明之實施或測試，但下文描述例示性方法及材料。本文所提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻以全文引用之方式併入。在相矛盾之情況下，將以本申請案，包括定義為準。材料、方法及實例僅為說明性的且不欲具限制性。
本發明之其他特徵及優點將自以下[實施方式]及自申請專利範圍顯而易見。
相關申請案之交叉引用
本申請案主張2018年12月14日申請之美國臨時申請案第62/779,916號、2019年2月19日申請之美國臨時申請案第62/807,603號及2019年4月30日申請之美國臨時申請案第62/840,879號的優先權益，所有該等申請案之內容以全文引用之方式併入本文中。
本揭示案係關於減少超氧化物歧化酶1 (SOD1)之表現的反義寡核苷酸或其鹽之給藥方案及此類反義寡核苷酸或其鹽之用途，其係用於治療、預防或改善在人類SOD1基因中具有突變之成人的肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)。定義
「2'-O-甲氧基乙基」 (亦為2'-MOE及2'-OCH2 CH2 -OCH3 及MOE)係指呋喃糖環之2'位的O-甲氧基-乙基修飾。2'-O-甲氧基乙基修飾之糖為經修飾之糖。
「2'-MOE核苷」 (亦為2'-O-甲氧基乙基核苷)意指包含MOE修飾之糖部分之核苷。
「5-甲基胞嘧啶」意指經附接至5'位之甲基修飾之胞嘧啶。5-甲基胞嘧啶為經修飾之核鹼基。
「硫代磷酸酯鍵」意指核苷之間的鍵，其中藉由用硫原子置換非橋連氧原子之一來修飾磷酸二酯鍵。硫代磷酸酯鍵為經修飾之核苷間鍵。
「約」在物質量之情形中意指所指示之值+/- 10%。因此，約100 mg反義寡核苷酸包括90 mg至110 mg反義寡核苷酸。在時間單位，例如約10天或約1週之情形中，「約」意指+/- 3天。
「鞘內或IT」意指在覆蓋腦及脊髓之蛛網膜下方投與至腦脊髓液中。
「負載劑量」意指在起始投藥且達到藥物(例如反義寡核苷酸)之穩態濃度之給藥期期間投與之劑量。
「維持劑量」意指在已達到藥物(例如反義寡核苷酸)之穩態濃度之後的給藥期期間投與之劑量。
「固定劑量」係指意欲在個體中達到所需治療濃度(例如穩態濃度)或作用之反義寡核苷酸之預定量(例如20 mg、40 mg、60 mg、100 mg)。 肌肉萎縮性脊髓側索硬化症
肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)為由皮層、腦幹及脊髓內運動神經元之損失引起的罕見神經退化疾病。患者遭受延髓肌、呼吸肌及隨意肌之肌肉質量、強度及功能的進行性損失。衰退為不可避免的，並且在診斷之後平均2至5年發生典型地因呼吸衰竭所致之死亡。儘管大多數患者罹患散發性ALS，但較小部分患者(約2%)患有由超氧化物歧化酶1 (SOD1)中之多種突變引起之遺傳性或家族性形式之ALS。自最初在1993年發現以來，已報導超過180種SOD1突變引起此種形式之ALS (稱作SOD1 ALS)。肌肉萎縮性脊髓側索硬化症線上基因資料庫(ALSoD)。Institute of Psychiatry, Psychology & Neuroscience. 2015年公佈；Rosen,Nature , 364(6435):362 (1993)。個別突變之疾病進展為可變的，在最嚴重突變下存活期小於15個月。儘管突變引起SOD1 ALS之機制未知，但令人信服之資料表明毒性功能獲得而非SOD1活性損失為起始導致運動神經元死亡之事件級聯的起因(Bruijn等人,Science , 281(5384):1851-4 (1998))。
獲准用於ALS之治療為利魯唑(riluzole) (Rilutek®)及依達拉奉(edaravone) (Radicava™)。利魯唑提供存活期之適度增加(2至3個月)而未證明強度或失能之改善。依達拉奉減輕如由肌肉萎縮性脊髓側索硬化症功能評分量表-修訂版(ALSFRS-R)量測之功能衰退。依達拉奉對存活期之影響未知。不存在可用之SOD1特異性ALS治療。 超氧化物歧化酶1
超氧化物歧化酶[Cu-Zn]，亦稱為超氧化物歧化酶1 (SOD1)，為在人類中由位於染色體21上之SOD1基因編碼的酶。
SOD1為形成β桶且在各次單元中含有分子內二硫鍵及雙核Cu/Zn位點之32 kDa同源二聚體。此Cu/Zn位點保留銅及鋅離子且負責催化超氧化物歧化為過氧化氫及雙氧。
SOD1為負責破壞體內游離超氧自由基之三種超氧化物歧化酶之一。經編碼之同功酶為可溶性細胞質及粒線體膜間腔蛋白質，其充當同源二聚體以使天然存在但有害之超氧自由基轉化為分子氧及過氧化氫。過氧化氫接著可由另一種稱為過氧化氫酶之酶分解。
SOD1基因中之至少180種突變已與家族性ALS有關(Conwit RA,J Neurol Sci ., .251 (1-2):1-2 (2006)；Al-Chalabi A, Leigh PN,Curr.Opin. in Neurol ., 13(4):397-405 (2000)；Redler RL, Dokholyan NV,Progress in Molecular Biology and Translational Science , 107:215-62 (2012))。然而，野生型SOD1在細胞應力條件下亦已牽涉於代表90%之ALS患者的一大部分散發性ALS病例中。人類SOD1中之最頻繁突變在美國為A4V；在日本為H46R；且在冰島為G93S。其他熟知之人類SOD1突變包括：A4T、G141X、D133A、V148G、N139K、G85R、G93A、V14G、C6S、I113T、D49K、G37R、A89V、E100G、D90A、T137A、E100K、G41A、G41D、G41S、G13R、G72S、L8V、F20C、Q22L、H48R、T54R、S591、V87A、T88δTAD、A89T、V97M、S105δSL、V118L、D124G、L114F、D90A、G12R及G147R。在基於SOD1突變之疾病持續時間中存在顯著異質性(參見圖 1 )。幾乎所有已知的引起ALS之SOD1突變皆以顯性方式起作用；SOD1基因之單一突變體複本足以引起該疾病。
人類SOD1之胺基酸序列可按UniProt P00441及GENBANK寄存編號NP_000445找到，且提供如下： MATKAVCVLK GDGPVQGIIN FEQKESNGPV KVWGSIKGLT EGLHGFHVHE FGDNTAGCTS AGPHFNPLSR KHGGPKDEER HVGDLGNVTA DKDGVADVSI EDSVISLSGD HCIIGRTLVV HEKADDLGKG GNEESTKTGN AGSRLACGVI GIAQ (SEQ ID NO:2 )
編碼人類SOD1之核苷酸序列按GENBANK寄存編號NM_000454.4提供，且亦提供如下(由本揭示案之反義寡核苷酸識別之區域加下劃線)：
Figure 02_image007
ISIS 666853
ISIS 666853為具有序列(自5'至3') CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1 )之5-10-5 MOE嵌合體(gapmer)，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。ISIS 666853係由以下化學記法描述：mCes Aeo Ges Geo Aes Tds Ads mCds Ads Tds Tds Tds mCds Tds Ads mCeo Aes Geo mCes Te；其中， A = 腺嘌呤， mC = 5-甲基胞嘧啶， G = 鳥嘌呤， T = 胸腺嘧啶， e = 2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之糖， d = 2'-去氧核糖， s = 硫代磷酸酯核苷間鍵，及 o = 磷酸二酯核苷間鍵。
ISIS 666853序列亦可簡寫如下： 5' -Me CA P=O GG P=O A TAMe CATTTMe CTAMe C P=O AG P=O Me C Me U - 3'
加下劃線之殘基為2'-MOE核苷。P=O註解反映磷酸二酯鍵之位置。
ISIS 666853係由以下化學結構描繪：
Figure 02_image001
。
應瞭解，在溶液中，反義寡核苷酸可依游離酸形式、鹽形式或其混合物存在。 ISIS 666853之十九鈉鹽(「化合物A」)
化合物A為ISIS 666853之十九鈉鹽，其為降低患有SOD1 ALS之個體中之SOD1蛋白質水準的SOD1信使核糖核酸(mRNA)之反義寡核苷酸抑制劑。減少SOD1 mRNA且隨後減少毒性SOD1蛋白質可為患有SOD1 ALS之個體提供治療效益。
化合物A之結構提供如下：
Figure 02_image005
。
化合物A之分子式為：C230 H298 N72 Na19 O123 P19 S15 ，其分子量 = 7545.59 amu。
化合物A與人類SOD1之mRNA之3'非轉譯區(3'UTR)的一部分互補，藉由瓦生克立克鹼基配對(Watson Crick base pairing)而結合。化合物A與同源mRNA之雜交(結合)引起SOD1之mRNA的RNase-H1介導之降解，且由此減少SOD1蛋白質合成之量。RNase H為廣泛表現之酶(核酸酶)，其識別去氧核糖核酸-核糖核酸(DNA-RNA)異源雙鏈體且使雙鏈體之RNA鏈裂解。藉由結合至SOD1 mRNA之3'-UTR區，化合物A使RNase H1選擇性地靶向SOD1 mRNA且促進其裂解，使得SOD1之野生型與突變型變異體之表現減少。
化合物A顯著增加SOD1 G93A轉殖基因小鼠之中位數存活期(Mantel-Cox，p＜0.01)。化合物A亦促成對神經肌肉功能之劑量依賴性保護，如由SOD1 G93A轉殖基因小鼠中之複合肌肉動作電位所量測。 經接合之反義寡核苷酸
本揭示案之反義寡核苷酸可共價連接至增強所得反義寡核苷酸之活性、細胞分佈或細胞攝取之一或多個部分或接合物。典型接合基團包括膽固醇部分及脂質部分。額外接合基團包括碳水化合物、磷脂、生物素、啡嗪(phenazine)、葉酸、啡啶(phenanthridine)、蒽醌、吖啶、螢光素、玫瑰紅(rhodamine)、香豆素及染料。反義寡核苷酸亦可經修飾以具有一或多個穩定基團，該一或多個穩定基團一般附接至反義寡核苷酸之一端或兩端以增強諸如核酸酶穩定性之特性。穩定基團中包括帽結構。此等末端修飾保護具有末端核酸之反義寡核苷酸免於核酸外切酶降解，且可幫助在細胞內遞送及/或定位。帽可存在於5'端(5'帽)或3'端(3'帽)，或可存在於兩端。帽結構在此項技術中為熟知的且包括例如反向去氧無鹼基帽。可用於將反義寡核苷酸之一端或兩端封帽以賦予核酸酶穩定性之其他3'及5'穩定基團包括WO 03/004602中所揭示之彼等。 用於調配醫藥組合物之組合物及方法
本揭示案之反義寡核苷酸或其鹽可與醫藥學上可接受之活性或惰性物質混合用於製備醫藥組合物或調配物。用於調配醫藥組合物之組合物及方法視許多準則而定，包括但不限於投藥途徑、疾病程度或將投與之劑量。
靶向SOD1核酸之反義寡核苷酸或其鹽可藉由將反義寡核苷酸或其鹽與適合醫藥學上可接受之稀釋劑或載劑組合而用於醫藥組合物中。醫藥學上可接受之稀釋劑包括磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)。PBS為適合用於將非經腸遞送之組合物中之稀釋劑。因此，在一個實施方案中，本文所述之方法中採用包含靶向SOD1核酸之反義寡核苷酸或其鹽及醫藥學上可接受之稀釋劑的醫藥組合物。
本文所述之反義寡核苷酸或其鹽可調配成用於向個體鞘內投與之醫藥組合物。
包含本揭示案之反義寡核苷酸之醫藥組合物涵蓋任何醫藥學上可接受之鹽、酯或此類酯之鹽或任何其他寡核苷酸，其在向包括人類之動物投與後，能夠提供(直接或間接)生物活性代謝物或其殘餘物。因此，舉例而言，本揭示案亦涉及反義寡核苷酸之醫藥學上可接受之鹽及其他生物等效物。適合之醫藥學上可接受之鹽包括但不限於鈉鹽及鉀鹽。 治療方法
本揭示案係關於治療或預防有需要之人類個體的與人類SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與固定劑量之反義寡核苷酸，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。在某些情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約100 mg或100 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約60 mg或60 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約40 mg或40 mg。在一些其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約20 mg或20 mg。在某些情況下，反義寡核苷酸之鈉鹽之固定劑量為約105.9 mg或105.9 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之鈉鹽之固定劑量為約63.5 mg或63.5 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之鈉鹽之固定劑量為約42.3 mg或42.3 mg。在一些其他情況下，反義寡核苷酸之鈉鹽之固定劑量為約21.2 mg或21.2 mg。
亦提供減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與固定劑量之反義寡核苷酸，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。在某些情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約100 mg或100 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約60 mg或60 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約40 mg或40 mg。在一些其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約20 mg或20 mg。
亦提供降低在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1 mRNA水準的方法。該方法涉及藉由鞘內投藥向人類個體投與固定劑量之反義寡核苷酸，其中反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。在某些情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約100 mg或100 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約60 mg或60 mg。在其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約40 mg或40 mg。在一些其他情況下，反義寡核苷酸之固定劑量為約20 mg或20 mg。
亦提供治療或預防有需要之人類個體的與SOD1基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，其中該方法需要藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
。在某些情況下，以等效於約100 mg或100 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約60 mg或60 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約40 mg或40 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約20 mg或20 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。
亦提供減少在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1蛋白質合成的方法，其中該方法需要藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
。在某些情況下，以等效於約100 mg或100 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約60 mg或60 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約40 mg或40 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約20 mg或20 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。
亦提供降低在人類SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之人類SOD1 mRNA水準的方法，其中該方法需要藉由鞘內投藥向人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中反義寡核苷酸具有以下結構：
Figure 02_image001
。在某些情況下，以等效於約100 mg或100 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約60 mg或60 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約40 mg或40 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。在其他情況下，以等效於約20 mg或20 mg反義寡核苷酸之劑量投與反義寡核苷酸或其鹽。
在一些情況下，每週一次、每兩週一次、每三週一次或每四週一次向人類個體投與上述固定劑量之反義寡核苷酸或其鹽。
在一些情況下，作為醫藥組合物之一部分向人類個體投與本文所述之反義寡核苷酸。在某些實施方案中，以足以遞送約20 mg固定劑量(亦即，等效於約20 mg)之反義寡核苷酸之量向人類個體投與醫藥組合物。在某些實施方案中，以足以遞送約40 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量向人類個體投與醫藥組合物。在某些實施方案中，以足以遞送約60 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量向人類個體投與醫藥組合物。在某些實施方案中，以足以遞送約100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量向人類個體投與醫藥組合物。
在某些實施方案中，作為一或多個負載劑量投與上述固定劑量之反義寡核苷酸或其鹽。在一些實施方案中，作為一或多個維持劑量投與上述固定劑量之反義寡核苷酸。在某些情況下，作為一或多個負載劑量且繼之以一或多個維持劑量投與上述固定劑量之反義寡核苷酸。可例如每週、每兩週、每三週或每四週投與一或多個負載劑量。在最後一個負載劑量之後，可例如每週、每兩週、每三週或每四週投與一或多個維持劑量。在一些情況下，每個月投與一或多個維持劑量。
在某些實施方案中，向人類個體投與反義寡核苷酸或其鹽之三個負載劑量，繼之以至少一個(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12個或更多個)維持劑量。在一些情況下，相隔兩週投與三個負載劑量。在一些情況下，相隔14天投與三個負載劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後4週開始投與一或多個維持劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後開始每個月投與一或多個維持劑量。在一些情況下，在第三負載劑量之後開始每28天投與一或多個維持劑量。
SOD1中之突變可為人類SOD1基因中與ALS有關之任何突變。在一些情況下，突變為緩慢進展ALS疾病突變。在其他情況下，突變為快速進展ALS疾病突變。在某些情況下，人類SOD1基因中之突變為以下一或多者：A4V、H46R、G93S、A4T、G141X、D133A、V148G、N139K、G85R、G93A、V14G、C6S、I113T、D49K、G37R、A89V、E100G、D90A、T137A、E100K、G41A、G41D、G41S、G13R、G72S、L8V、F20C、Q22L、H48R、T54R、S591、V87A、T88δTAD、A89T、V97M、S105δSL、V118L、D124G、L114F、D90A、G12R或G147R。在一個特定實施方案中，人類個體具有人類SOD1基因中之A4V突變。在另一個特定實施方案中，人類個體具有人類SOD1基因中之H46R突變。在又一個特定實施方案中，人類個體具有人類SOD1基因中之G93S突變。
在某些情況下，藉由基因測試鑑別SOD1基因中之突變。
在一些情況下，上文所述之方法涉及藉由基因測試鑑別SOD1基因中之突變。
在某些實施方案中，治療有效量之反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)向人類個體之投藥伴隨監測人類個體中之SOD1水準，以確定人類個體對反義寡核苷酸或其鹽之投藥的反應。人類個體對反義寡核苷酸或其鹽之投藥的反應可由醫師用於確定治療性干預之量及持續時間。在某些實施方案中，監測CSF中之人類SOD1水準。在某些實施方案中，監測血漿中之人類SOD1水準。
在某些實施方案中，反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)之投藥使得SOD1蛋白質表現減少。在某些實施方案中，反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)之投藥使得SOD1蛋白質表現減少至少10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%，或由此等值中之任兩者界定之範圍。在某些實施方案中，SOD1蛋白質表現之減少為CSF中之減少。在某些實施方案中，SOD1蛋白質表現之減少為血漿中之減少。
在某些實施方案中，反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)之投藥使得人類個體之運動功能及呼吸改善。在某些實施方案中，反義寡核苷酸或其鹽之投藥使運動功能及呼吸改善至少10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%，或由此等值中之任兩者界定之範圍。
在某些實施方案中，包含反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)之醫藥組合物用於製備用以治療罹患或易患ALS之人類個體(例如在SOD1中具有與ALS有關之突變之人類個體)的藥劑。 遞送裝置
在某些實施方案中，使用供鞘內遞送之注射器向人類個體投與反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)。在另一個實施方案中，使用供鞘內遞送之泵向人類個體投與反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)。因此，本揭示案亦提供一種包含反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)之無菌製劑的泵或注射器。注射器或泵可適於鞘內投與反義寡核苷酸或其鹽。在一些情況下，注射器或泵遞送一或多個固定劑量(例如約20 mg或20 mg、約40 mg或40 mg、約60 mg或60 mg，或約100 mg或100 mg)之反義寡核苷酸。本揭示案亦提供一種包含含有反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)之醫藥組合物之無菌製劑的泵或注射器。注射器或泵可適於鞘內投於醫藥組合物。在一些情況下，注射器或泵遞送一或多個固定劑量(例如約20 mg或20 mg、約40 mg或40 mg、約60 mg或60 mg，或約100 mg或100 mg)之反義寡核苷酸的醫藥組合物。在特定實施方案中，泵或注射器包含反義寡核苷酸或其鹽之無菌製劑，其中注射器或泵適於以20 mg、40 mg、60 mg或100 mg反義寡核苷酸之固定劑量鞘內投與反義寡核苷酸或其鹽(例如化合物A)。 檢定RNA 分離
可對總細胞RNA或聚(A)+ mRNA進行RNA分析。根據製造商推薦之方案，使用此項技術中所熟知之方法，例如使用TRIZOL試劑(Invitrogen, Carlsbad, CA)製備RNA。標靶水準或表現之抑制的分析
可按此項技術中已知之多種方式檢定SOD1核酸水準或表現之抑制。舉例而言，可藉由例如北方墨點分析、競爭聚合酶鏈反應(PCR)或定量即時PCR來定量標靶核酸水準。可對總細胞RNA或聚(A)+ mRNA進行RNA分析。RNA分離方法在此項技術中為熟知的。北方墨點分析在此項技術中亦為常規的。可使用可獲自PE-Applied Biosystems, Foster City, CA且根據製造商之說明書使用的可商購ABI PRISM 7600、7700或7900序列偵測系統便利地實現定量即時PCR。標靶 RNA 水準之定量即時 PCR 分析
可藉由定量即時PCR使用ABI PRISM 7600、7700或7900序列偵測系統(PE-Applied Biosystems, Foster City, CA)根據製造商之說明書實現SOD1 RNA水準之定量。定量即時PCR之方法在此項技術中為熟知的。
在即時PCR之前，對經分離之RNA進行反轉錄酶(RT)反應，產生互補DNA (cDNA)，其接著用作即時PCR擴增之受質。RT及即時PCR反應在同一樣品孔中依序進行。RT及即時PCR試劑獲自Invitrogen (Carlsbad, CA)。藉由熟習此項技術者所熟知之方法進行RT即時PCR反應。
使用表現恆定之基因，諸如親環素A的表現水準，或藉由使用RIBOGREEN (Invitrogen, Inc. Carlsbad, CA)定量總RNA來正規化藉由即時PCR獲得之基因(或RNA)標靶量。藉由即時PCR，藉由與標靶同時、多工或獨立運作來定量親環素A表現。使用RIBOGREEN RNA定量試劑(Invitrogen, Inc. Eugene, OR)來定量總RNA。由RIBOGREEN進行RNA定量之方法在Jones, L.J.等人(Analytical Biochemistry, 1998, 265, 368-374)中教示。CYTOFLUOR 4000儀器(PE Applied Biosystems)用於量測RIBOGREEN螢光。
探針及引子經設計以雜交至SOD1核酸。設計即時PCR探針及引子之方法在此項技術中為熟知的，且可包括使用軟體，諸如PRIMER EXPRESS軟體(Applied Biosystems, Foster City, CA)。蛋白質水準之分析
可藉由量測SOD1蛋白質水準來評定SOD1核酸之反義抑制。可按此項技術中所熟知之多種方式，諸如免疫沈澱、西方墨點分析(免疫墨點法)、酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、定量蛋白質檢定、蛋白質活性檢定(例如半胱天冬酶活性檢定)、免疫組織化學、免疫細胞化學或螢光活化細胞分選(FACS)來評估或定量SOD1之蛋白質水準。針對標靶之抗體可自多種來源，諸如MSRS抗體目錄(Aerie Corporation, Birmingham, MI)鑑別及獲得，或可經由此項技術中所熟知之習用單株或多株抗體產生方法來製備。適用於偵測人類SOD1之抗體可商購。用於 SOD1 突變之測試
關於ALS之一種潛在基因原因為人類SOD1 基因中之一或多個突變。因此，可藉由使用此項技術中已知之檢定，諸如基因定序對個體之SOD1 基因的基因測試來進行罹患或易患ALS之個體的鑑別。在此項技術中已知人類SOD1中之至少180種突變與ALS有關。
亦可藉由分析個體之ALS家族史來進行個體對ALS疾病之易感性的分析。家族史分析可包括文件記載ALS之三代譜系、醫療記錄之查閱及家族成員之屍檢研究，以及SOD1突變之體染色體顯性模式的鑑別。
以下實施例不應解釋為以任何方式限制本發明之範疇。實施例 實施例 1 ：試驗設計
化合物A處於進行中之臨床試驗的研究下。試驗涉及SOD1 ALS患者中之隨機化、安慰劑對照、單遞增劑量(SAD)及多遞增劑量(MAD)研究。在MAD部分中，參與者經約3個月接受研究藥物之5個劑量。將五十名參與者隨機化(每個群組3:1)以接受20 mg、40 mg、60 mg或100 mg化合物A，或安慰劑。在1與4之間，每個群組之經化合物A處理之參與者具有先驗判定為快速進展之文件記載之SOD1突變(主要為A4V)。實施例 2 ：安全性型態
在試驗中，70名患者中之66名(94%)經歷至少1個不良事件(AE)，其中大多數分級為輕度或中度。在≥ 3名接受化合物A之參與者中發生之最常見AE為頭痛(n = 16)、程序性疼痛(n=14)及腰椎穿剌後症候群(n = 13)。七名患者經歷嚴重不良事件(SAE)，其中3個為致命事件。在最高劑量組(化合物A 100 mg)中無SAE報告。六名個體具有評定為與化合物A無關且感覺與ALS或合併症相關之SAE。所有致命事件皆評定為無關。一名患者具有評定為與化合物A相關之CSF白血球增加及CSF蛋白質增加之SAE。不管化合物A之持續給藥，彼等實驗室異常消退，且患者完成研究。在所測試之最高劑量100 mg中無嚴重不良時間報告。實施例 3 ：藥物動力學及藥效學
在SAD (未示出)及MAD群組(圖 2 )中觀測到化合物A血漿(未示出)及CSF濃度之劑量依賴性增加。第1天及第85天量測之化合物A之血漿濃度與劑量成比例，而化合物A在CSF中之暴露顯示小於劑量成比例之反應。在40 mg多劑量水準及更高水準(亦即，60 mg及100 mg)下觀測到CSF SOD1濃度自基線之降低，該降低隨劑量而增大，在100 mg多劑量組中最大平均降低36% (圖 3 )。在100 mg劑量組中之所有參與者中觀測到CSF SOD1自基線之降低。在最後一個劑量時或之後立即觀測到最大SOD1降低，指示超過5個劑量之連續給藥可引起進一步降低。基於臨床前資料之模型化表明化合物A 100 mg有效地使脊髓中之SOD1水準降低＞99%且皮層中降低約25-30%。實施例 4 ：臨床觀測
在多個時間點處在包括肌肉萎縮性脊髓側索硬化症功能評分量表-修訂版(ALFSFRS-R)、慢肺活量(SVC)及手持式測力計(HHD)標度之若干標度上評定功效。在所有群組中，經化合物A處理之組與經安慰劑處理之組相比具有較高，亦即較佳得分(圖 4A 至 4C )。在100 mg劑量組(N=10)中經化合物A處理之參與者之ALSFRS-R得分自基線至第85天之平均變化為-1.1對比經安慰劑處理之參與者(N=12)之-5.6；4.4個點之差異。在具有已知快速進展之SOD1突變，例如A4V之參與者中，在100 mg劑量組中之經化合物A處理之參與者與經安慰劑處理之參與者之間觀測到明顯差異。在此等快速進展之參與者中，ALSFRS-R自基線至第85天之變化的平均差異接近10個點(圖 5 )。在快速進展(圖 5 )與非快速進展之參與者(圖 6 )中，處理效果跨越多個臨床標度及CSF SOD1降低似乎為一致的。作為參考框架，在ALS之依達拉奉關鍵性試驗中6個月時之ALSFRS-R差異為2.5個點。
總之，試驗已證明化合物A對於患有SOD1 ALS之個體為安全且有效之治療。此係由經化合物A處理之具有快速進展突變亞型(主要為A4V)之個體中，尤其100 mg劑量組中的結果最強有力地支持，在不存在有效治療之情況下將預期該等個體快速衰退。如上文所指出，在多個時間點處在包括肌肉萎縮性脊髓側索硬化症功能評分量表-修訂版(ALSFRS-R)、慢肺活量(SVC)及手持式測力計(HHD)之若干標度上評定功效。結果顯示在化合物A 100 mg劑量組中3個臨床功能終點中之每一者與安慰劑組相比小得多的衰退。實施例 5 ： CSF 磷酸化神經絲重鏈 (pNFH) 水準
在具有快速進展SOD1突變之患者中，用化合物A處理與安慰劑相比使得CSF pNFH水準降低及臨床衰退減緩。與具有其他SOD1突變之患者(圖 8 )相比，在具有快速進展SOD1突變之患者(圖 7 )中觀測到第85天在化合物A 100 mg與安慰劑組之間pNFH水準的較大差異。 其他實施方案
儘管本發明已結合其[實施方式]描述，但前述描述欲說明且不限制本發明之範疇，該範疇係由隨附申請專利範圍之範疇界定。其他態樣、優點及修改處於以下申請專利範圍之範疇內。
圖 1 為具有不同人類SOD1突變之患者之平均疾病持續時間(自症狀發作之年數)的圖形化描繪。
圖 2 描繪多遞增劑量(MAD)群組中所觀測之化合物A腦脊髓液(CSF)濃度的劑量依賴性增加。最上方摺線代表100 mg劑量；下面兩個摺線代表60 mg及40 mg劑量；且最下方摺線代表20 mg劑量。
圖 3 描繪MAD群組中所觀測之CSF SOD1濃度的劑量依賴性降低。在研究第85天，最上方圓圈對應於20 mg；下面一個圓圈對應於安慰劑；下面一個圓圈對應於60 mg；下面一個圓圈對應於40 mg；且最下方圓圈對應於100 mg化合物A。
圖 4A 為在MAD群組之患者中肌肉萎縮性脊髓側索硬化症功能評分量表-修訂版(ALFSFRS-R)自基線之LS平均變化的圖。在研究第85天，最上方圓圈對應於40 mg化合物A；下面一個圓圈對應於100 mg化合物A；下面一個圓圈對應於60 mg化合物A；下面一個圓圈對應於20 mg化合物A；且最下方圓圈對應於安慰劑。
圖 4B 為在MAD群組之患者中百分比預測慢肺活量(SVC)自基線之LS平均變化(90% CI)的圖。在研究第85天，最上方圓圈對應於60 mg化合物A；下面一個圓圈對應於40 mg化合物A；下面一個圓圈對應於100 mg化合物A；下面一個圓圈對應於20 mg化合物A；且最下方圓圈對應於安慰劑。
圖 4C 為在MAD群組之患者中手持式測力計(HHD)總百萬得分自基線之LS平均變化(90% CI)的圖。在研究第92天，最上方圓圈對應於40 mg化合物A；下面一個圓圈對應於100 mg化合物A；下面一個圓圈對應於60 mg化合物A；下面一個圓圈對應於20 mg化合物A；且最下方圓圈對應於安慰劑。
圖 5 圖解在接受安慰劑或100 mg化合物A的具有快速進展突變之患者中ALSFRS-R、SVC、HHD百萬得分及CSF SOD1水準自基線至第85天之變化。
圖 6 圖解在接受安慰劑或100 mg化合物A的具有緩慢進展突變之患者中ALSFRS-R、SVC、HHD百萬得分及CSF SOD1水準自基線至第85天之變化。
圖 7 描繪在具有快速進展SOD1突變之患者中100 mg化合物A處理對自基線至第85天之pNFH水準的影響。
圖 8 描繪在具有緩慢進展SOD1突變之患者中100 mg化合物A處理對自基線至第85天之pNFH水準的影響。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 01_image001

Claims (41)

  1. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括以足以遞送約100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  2. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括以足以遞送約60 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  3. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括以足以遞送約40 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  4. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括以足以遞送約20 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  5. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括以足以遞送約100 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  6. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括以足以遞送約60 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  7. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括以足以遞送約40 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  8. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括以足以遞送約20 mg固定劑量之反義寡核苷酸之量藉由鞘內投藥向該人類個體投與醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  9. 如申請專利範圍第1項至第8項中任一項之方法，其中該SOD1基因中之該突變為A4V。
  10. 如申請專利範圍第1項至第8項中任一項之方法，其中該SOD1基因中之該突變為A4V、H46R、G93S、A4T、G141X、D133A、V148G、N139K、G85R、G93A、V14G、C6S、I113T、D49K、G37R、A89V、E100G、D90A、T137A、E100K、G41A、G41D、G41S、G13R、G72S、L8V、F20C、Q22L、H48R、T54R、S591、V87A、T88δTAD、A89T、V97M、S105δSL、V118L、D124G、L114F、D90A、G12R或G147R。
  11. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之方法，其中藉由基因測試鑑別該SOD1基因中之該突變。
  12. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之方法，該方法包括藉由基因測試鑑別該SOD1基因中之該突變。
  13. 如申請專利範圍第1項至第12項中任一項之方法，其中在四個月之過程中至少5次向該人類個體投與該醫藥組合物。
  14. 如申請專利範圍第1項至第13項中任一項之方法，其中向該人類個體投與該醫藥組合物之負載劑量，繼之以該醫藥組合物之維持劑量。
  15. 如申請專利範圍第14項之方法，其中向該人類個體投與三個負載劑量，且其中相隔兩週投與該等負載劑量。
  16. 如申請專利範圍第14項之方法，其中在該第三負載劑量之後4週開始每4週投與該等維持劑量。
  17. 如申請專利範圍第14項之方法，其中如下向該人類個體投與該醫藥組合物之該等負載劑量及維持劑量： (i) 該醫藥組合物之第一負載劑量； (ii) 在該第一負載劑量之後14天投與的該醫藥組合物之第二負載劑量； (iii) 在該第一負載劑量之後28天投與的該醫藥組合物之第三負載劑量；及 (iv) 在該第三負載劑量之後28天或1個月投與的該醫藥組合物之第一維持劑量。
  18. 如申請專利範圍第14項之方法，其中如下向該人類個體投與該醫藥組合物之該等負載劑量及維持劑量： (i) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第一負載劑量； (ii) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第二負載劑量，其中在該第一負載劑量之後14天投與該第二負載劑量； (iii) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第三負載劑量，其中在該第一負載劑量之後28天投與該第三負載劑量；及 (iv) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第一維持劑量，其中在該第三負載劑量之後28天投與該第一維持劑量。
  19. 如申請專利範圍第14項之方法，其中如下向該人類個體投與該醫藥組合物之該等負載劑量及維持劑量： (i) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第一負載劑量； (ii) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第二負載劑量，其中在該第一負載劑量之後14天投與該第二負載劑量； (iii) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第三負載劑量，其中在該第一負載劑量之後28天投與該第三負載劑量；及 (iv) 呈足以遞送約100 mg固定劑量之該反義寡核苷酸之量的第一維持劑量，其中在該第三負載劑量之後1個月投與該第一維持劑量。
  20. 一種包含反義寡核苷酸之無菌製劑的注射器或泵，其中該注射器或泵適於以約20 mg、約40 mg、約60 mg或約100 mg之固定劑量鞘內投與該反義寡核苷酸，其中該反義寡核苷酸之核鹼基序列由CAGGATACATTTCTACAGCT (SEQ ID NO:1)組成，其中核苷1-5及16-20中之每一者為2'-O-甲氧基乙基核糖修飾之核苷，且核苷6-15中之每一者為2'-去氧核苷，其中核苷2至3、4至5、16至17及18至19之間的核苷間鍵為磷酸二酯鍵且核苷1至2、3至4、5至6、6至7、7至8、8至9、9至10、10至11、11至12、12至13、13至14、14至15、15至16、17至18及19至20之間的核苷間鍵為硫代磷酸酯鍵，且其中各胞嘧啶為5-甲基胞嘧啶。
  21. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約100 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  22. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約60 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  23. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約40 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  24. 一種治療或預防有需要之人類個體的與超氧化物歧化酶1 (SOD1)基因中之突變相關聯之肌肉萎縮性脊髓側索硬化症的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約20 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  25. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約100 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  26. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約60 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  27. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約40 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  28. 一種減少在SOD1基因中具有與肌肉萎縮性脊髓側索硬化症相關聯之突變的人類個體中之超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白質合成的方法，該方法包括藉由鞘內投藥向該人類個體投與包含反義寡核苷酸或其鹽之醫藥組合物，其中該反義寡核苷酸具有以下結構：
    Figure 03_image001
    ， 且其中以等效於約20 mg該反義寡核苷酸之劑量投與該反義寡核苷酸或其鹽。
  29. 如申請專利範圍第21項至第28項中任一項之方法，其中該SOD1基因中之該突變為A4V。
  30. 如申請專利範圍第21項至第28項中任一項之方法，其中該SOD1基因中之該突變為A4V、H46R、G93S、A4T、G141X、D133A、V148G、N139K、G85R、G93A、V14G、C6S、I113T、D49K、G37R、A89V、E100G、D90A、T137A、E100K、G41A、G41D、G41S、G13R、G72S、L8V、F20C、Q22L、H48R、T54R、S591、V87A、T88δTAD、A89T、V97M、S105δSL、V118L、D124G、L114F、D90A、G12R或G147R。
  31. 如申請專利範圍第21項至第30項中任一項之方法，其中藉由基因測試鑑別該SOD1基因中之該突變。
  32. 如申請專利範圍第21項至第30項中任一項之方法，該方法包括藉由基因測試鑑別該SOD1基因中之該突變。
  33. 如申請專利範圍第21項至第32項中任一項之方法，其中向該人類個體投與該反義寡核苷酸之鹽。
  34. 如申請專利範圍第33項之方法，其中該鹽為鈉鹽。
  35. 如申請專利範圍第33項之方法，其中該反義寡核苷酸之該鹽具有以下結構：
    Figure 03_image005
    。
  36. 如申請專利範圍第21項至第35項中任一項之方法，其中向該人類個體投與該醫藥組合物之負載劑量，繼之以該醫藥組合物之維持劑量。
  37. 如申請專利範圍第36項之方法，其中向該人類個體投與三個負載劑量，且其中相隔兩週投與該等負載劑量。
  38. 如申請專利範圍第36項之方法，其中在該第三負載劑量之後4週開始每4週投與該等維持劑量。
  39. 如申請專利範圍第36項之方法，其中如下向該人類個體投與該醫藥組合物之該等負載劑量及維持劑量： (i) 該醫藥組合物之第一負載劑量； (ii) 在該第一負載劑量之後14天投與的該醫藥組合物之第二負載劑量； (iii) 在該第一負載劑量之後28天投與的該醫藥組合物之第三負載劑量；及 (iv) 在該第三負載劑量之後28天或1個月投與的該醫藥組合物之第一維持劑量。
  40. 如申請專利範圍第36項之方法，其中如下向該人類個體投與該醫藥組合物之該等負載劑量及維持劑量： (i) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第一負載劑量； (ii) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第二負載劑量，其中在該第一負載劑量之後14天投與該第二負載劑量； (iii) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第三負載劑量，其中在該第一負載劑量之後28天投與該第三負載劑量；及 (iv) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第一維持劑量，其中在該第三負載劑量之後28天投與該第一維持劑量。
  41. 如申請專利範圍第36項之方法，其中如下向該人類個體投與該醫藥組合物之該等負載劑量及維持劑量： (i) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第一負載劑量； (ii) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第二負載劑量，其中在該第一負載劑量之後14天投與該第二負載劑量； (iii) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第三負載劑量，其中在該第一負載劑量之後28天投與該第三負載劑量；及 (iv) 等效於約100 mg該反義寡核苷酸之第一維持劑量，其中在該第三負載劑量之後1個月投與該第一維持劑量。
TW108144617A 2018-12-14 2019-12-06 用於治療及預防肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之組合物及方法 TW202035694A (zh)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862779916P 2018-12-14 2018-12-14
US62/779,916 2018-12-14
US201962807603P 2019-02-19 2019-02-19
US62/807,603 2019-02-19
US201962840879P 2019-04-30 2019-04-30
US62/840,879 2019-04-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202035694A true TW202035694A (zh) 2020-10-01

Family

ID=69160351

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW108144617A TW202035694A (zh) 2018-12-14 2019-12-06 用於治療及預防肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之組合物及方法

Country Status (19)

Country Link
US (1) US20220073930A1 (zh)
EP (1) EP3894557A1 (zh)
JP (1) JP2022513597A (zh)
KR (1) KR20210131992A (zh)
CN (1) CN113330116A (zh)
AU (1) AU2019396522A1 (zh)
BR (1) BR112021011334A2 (zh)
CA (1) CA3115549A1 (zh)
CL (1) CL2021001136A1 (zh)
CO (1) CO2021008187A2 (zh)
CR (1) CR20210384A (zh)
IL (1) IL283833A (zh)
JO (1) JOP20210143A1 (zh)
MX (1) MX2021005086A (zh)
PH (1) PH12021551365A1 (zh)
SG (1) SG11202103415WA (zh)
TW (1) TW202035694A (zh)
UY (1) UY38506A (zh)
WO (1) WO2020123783A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11202006677XA (en) 2018-01-25 2020-08-28 Biogen Ma Inc Methods of treating spinal muscular atrophy
JP2024511767A (ja) * 2021-03-31 2024-03-15 バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッド 筋萎縮性側索硬化症の治療

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005504020A (ja) 2001-07-03 2005-02-10 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド ヌクレアーゼ耐性キメラオリゴヌクレオチド
WO2013134403A1 (en) * 2012-03-06 2013-09-12 The Washington University Method of treating neurodegenerative diseases with microrna regulators
SG10201808063PA (en) * 2014-03-19 2018-10-30 Ionis Pharmaceuticals Inc Compositions for modulating ataxin 2 expression
US10385341B2 (en) * 2014-04-01 2019-08-20 Biogen Ma Inc. Compositions for modulating SOD-1 expression
US11603542B2 (en) * 2017-05-05 2023-03-14 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods of treating amyotrophic lateral sclerosis (ALS)
US20210172963A1 (en) * 2017-05-26 2021-06-10 University Of Miami Determining onset of amyotrophic lateral sclerosis

Also Published As

Publication number Publication date
UY38506A (es) 2020-06-30
IL283833A (en) 2021-07-29
PH12021551365A1 (en) 2021-11-22
CR20210384A (es) 2021-12-20
CA3115549A1 (en) 2020-06-18
CL2021001136A1 (es) 2022-01-14
WO2020123783A1 (en) 2020-06-18
US20220073930A1 (en) 2022-03-10
EP3894557A1 (en) 2021-10-20
AU2019396522A1 (en) 2021-05-06
SG11202103415WA (en) 2021-06-29
JOP20210143A1 (ar) 2023-01-30
KR20210131992A (ko) 2021-11-03
CO2021008187A2 (es) 2021-09-09
MX2021005086A (es) 2021-08-16
CN113330116A (zh) 2021-08-31
BR112021011334A2 (pt) 2021-09-08
JP2022513597A (ja) 2022-02-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6924242B2 (ja) Ｃ９ｏｒｆ７２発現を調節するための組成物
CN106459972B (zh) 用于调节sod-1表达的组合物
TWI702046B (zh) 用於調節τ蛋白表現之組合物
US7622455B2 (en) Methods for slowing familial ALS disease progression
CN104968783B (zh) 用于调节c9orf72表达的组合物
JP6902869B2 (ja) アタキシン２の発現を調節するための組成物
US20040180847A1 (en) Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
CN103167883A (zh) 肌强直性营养障碍蛋白激酶(dmpk)表达的调节
CN115227710A (zh) 用于在对象中调节smn2剪接的组合物和方法
HUE031909T2 (en) Modification of transtetine expression
US20100151470A1 (en) Methods and compositions for locating snp heterozygosity for allele specific diagnosis and therapy
AU2017234678A1 (en) Methods of modulating KEAP1
CN112041446B (zh) 用于减少fxi表达的化合物和方法
KR20210093970A (ko) 프리온 발현을 감소시키기 위한 화합물 및 방법
TW202035694A (zh) 用於治療及預防肌肉萎縮性脊髓側索硬化症之組合物及方法
JP2021525084A (ja) Ａｐｏｌ１発現のモジュレーター
KR20140023344A (ko) Ｐｔｐｉｂ 발현의 안티센스 조절
RU2793459C2 (ru) Композиции и способы модуляции smn2 сплайсинга у субъекта
JP2024511767A (ja) 筋萎縮性側索硬化症の治療
TW202216171A (zh) Ｉｒｆ５反義寡核苷酸之安全投予之方法
EP3194597B1 (en) Allele-specific therapy for huntington disease haplotypes
KR20140014365A (ko) 인자 ｘｉ에 의한 염증 반응의 조정