TW202031631A

TW202031631A - 具有抗菌及抗病毒活性之萘醌化合物及其醫藥用途

Info

Publication number: TW202031631A
Application number: TW108135765A
Authority: TW
Inventors: 飯田彰; 山下光明; 福田陽一
Original assignee: 日商日本塔希寶股份有限公司; 學校法人近畿大學
Priority date: 2019-02-06
Filing date: 2019-10-02
Publication date: 2020-09-01
Also published as: WO2020161959A1

Abstract

本發明提供一種顯示出對各種真菌及細菌之抗菌活性及抗病毒活性之萘醌化合物。其係一種式(I)[式中，R¹ 為氫或OR，R為氫、C_1-6 烷基或C_1-6 烷基-CO]所示之化合物或其製藥學上所容許之鹽。

Description

具有抗菌及抗病毒活性之萘醌化合物及其醫藥用途

本發明係關於一種具有抗菌及抗病毒活性之萘醌化合物及其醫藥用途。

已知作為紫薇科風鈴木屬植物之天然紫杉(Tabebuia avellanedae)中包含之式： [化1]

所示之2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(以下，亦稱為「化合物A」)對各種癌細胞顯示出增殖抑制作用(專利文獻1)。亦已知該萘醌化合物對一部分真菌及細菌顯示出中等程度之抗菌活性，但對革蘭氏陰性菌不顯示活性(非專利文獻1)。

非專利文獻1中揭示，化合物A藉由阻礙EB病毒之初始抗原活化而表現出癌症預防活性，顯示出抗病毒活性。

專利文獻2中未揭示一種對一些萘醌化合物試驗抗病毒活性及抗菌活性，但未對真菌及革蘭氏陰性菌兩者均顯示活性之化合物。 [先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]日本專利特開平6-145162號公報 [專利文獻2]日本專利特開平9-249560號公報 [專利文獻3]日本專利特開2012-092083號公報 [專利文獻4]日本專利特開2006-290871號公報

[非專利文獻] [非專利文獻1]M. Yamashita et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry 17 (2009) 6286-6291

[發明所欲解決之問題]

本發明所欲解決之問題之一為提供一種顯示出對各種真菌、細菌及病毒之抗菌及抗病毒活性之萘醌化合物。 [解決問題之技術手段]

本發明人等為了解決上述問題而反覆認真研究，結果發現，於縮合呋喃環部分具有氟烷基之三環式萘醌化合物不僅對真菌及革蘭氏陽性菌顯示出抗菌活性，亦對革蘭氏陰性菌顯示出抗菌活性，又，可顯示抗病毒活性，從而完成本發明。

即，於某態樣中，提供一種式(I)： [化2]

[式中，R¹ 為氫或OR， R為氫、C_1-6 烷基或C_1-6 烷基-CO] 所示之化合物或其製藥學上所容許之鹽(以下，亦稱為「化合物(I)」)。 [發明之效果]

化合物(I)不僅可對各種真菌及革蘭氏陽性菌顯示出良好之抗菌活性，亦可對革蘭氏陰性菌顯示出良好之抗菌活性。又，化合物(I)可顯示出良好之病毒不活化效果。

本發明之具體態樣如以下所例示。 [項1] 一種式(I)： [化3]

[式中，R¹ 為氫或OR， R為氫、C_1-6 烷基或C_1-6 烷基-CO] 所示之化合物或其製藥學上所容許之鹽。

[項2] 如項1之化合物或其製藥學上所容許之鹽，其中R¹ 為OH。

[項3] 一種抗菌劑或抗病毒劑，其含有如項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽及製藥學上所容許之載體。

[項4] 一種醫藥組合物，其含有如項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽及製藥學上所容許之載體，用以治療及/或預防選自由機會性感染症、仙人掌桿菌感染症、腸管出血性大腸桿菌感染症、細菌性胃腸炎、腦膜炎、肺炎、敗血症、感染性心內膜炎、尿路感染症、腹膜炎、膽道感染症、膽囊炎、病毒性呼吸器官感染症、病毒性胃腸炎及惡性腫瘤所組成之群之疾病。

[項5] 一種用以治療及/或預防選自由機會性感染症、仙人掌桿菌感染症、腸管出血性大腸桿菌感染症、細菌性胃腸炎、腦膜炎、肺炎、敗血症、感染性心內膜炎、尿路感染症、腹膜炎、膽道感染症、膽囊炎、病毒性呼吸器官感染症、病毒性胃腸炎及惡性腫瘤所組成之群之疾病之方法，其包括向對象投予治療有效量之如項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽。

[項6] 如項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽，其用作抗菌劑或抗病毒劑。

[項7] 如項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽，其用以製造抗菌劑或抗病毒劑。

於本說明書中，用語「C_1-6 烷基」係指具有1～6個碳數之直鏈或支鏈之飽和烴基。作為「C_1-6 烷基」，例如可列舉：甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、戊基、異戊基、新戊基、1-乙基丙基、己基、異己基、1,1-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、2-乙基丁基。較佳為甲基、乙基或異丙基。

[製造方法] 包含式(I)之化合物之式(I')之化合物可藉由以下例示之方法製造。於各步驟中獲得之化合物可適當藉由蒸餾、再結晶、管柱層析法等該領域中通常使用之公知之方法進行單離及精製，或者，亦可不進行單離或精製而進入以下步驟。 [化4]

式中，R¹ 為氫或OR，R為氫、C_1-6 烷基或C_1-6 烷基-CO，X為氟、氯或溴。

上述製法中之步驟1～步驟5可按照公知之方法進行，亦可按照例如專利文獻3及4中記載之方法進行。

於步驟6中，化合物(I')可藉由將化合物(II)脫氧氟化或氯化或者溴化而製造。 (脫氧氟化) 藉由用脫氧氟化劑將化合物(II)氟化，可製造X為氟之化合物(I')。作為脫氧氟化劑，例如可列舉：二乙胺基三氟化硫(DAST)、雙(2-甲氧基乙基)胺基三氟化硫(Deoxo-Fluor(註冊商標))。較佳為雙(2-甲氧基乙基)胺基三氟化硫。作為溶劑，例如可列舉二氯甲烷等無極性溶劑。於使用光學活性物質作為起始物質在添加劑之存在下進行脫氧氟化之情形時，可獲得化合物(I')之光學活性物質。作為添加劑，若為抑制伴隨氟化之產物之消旋化之試劑，則無特別限定，例如可列舉胺。作為該胺，例如可列舉：嗎啉、N-(三甲基矽烷基)嗎啉、吡咯啶、N-甲基吡咯啶。較佳為N-(三甲基矽烷基)嗎啉。

R¹ 為C_1-6 烷基-O或C_1-6 烷基-COO之化合物(I')亦可藉由按照該領域中通常使用之公知之方法對R¹ 為OH之化合物(I')進行處理而製造。例如R¹ 為OAc之化合物(I')可藉由在胺之存在下用乙醯化劑對R¹ 為OH之化合物(I')進行處理而製造。作為胺，例如可列舉三乙胺、N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)、三異丙胺。較佳為DIPEA。作為乙醯化劑，例如可列舉乙醯氯、乙酸酐。較佳為乙醯氯。作為溶劑，例如可列舉N,N-二甲基甲醯胺等非質子性極性溶劑。

(氯化) 藉由在鹼基之存在下用氯化劑將化合物(II)氯化，可製造X為氯之化合物(I')。作為鹼基，例如可列舉吡啶。作為氯化劑，例如可列舉亞硫醯氯。作為溶劑，例如可列舉二氯甲烷等無極性溶劑。

(溴化) 藉由用溴化劑將化合物(II)溴化，可製造X為溴之化合物(I')。作為溴化劑，例如可列舉三溴化磷。作為溶劑，例如可列舉二氯甲烷等無極性溶劑。

[抗菌劑] 於本說明書中，用語「抗菌劑」中包含抗真菌劑及抗細菌劑(於本說明書中，亦稱為「抗生素」)。作為真菌，例如可列舉：白色念珠菌、白色隱球酵母孢菌、出芽酵母菌、麴菌類(薰煙色麴菌等)、青黴菌類(Penicillium expansum等)、擬青黴菌(Paecilomyces variotii等)。作為細菌，例如可列舉革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌。作為革蘭氏陽性菌，例如可列舉：枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、耐二甲氧苯青黴素性金黃色葡萄球菌(MRSA)、仙人掌桿菌。作為革蘭氏陰性菌，例如可列舉：大腸桿菌、綠膿桿菌、沙門氏菌。較佳之革蘭氏陰性菌為大腸桿菌及沙門氏菌。

作為化合物(I)之抗菌活性，可列舉對上述真菌及細菌之殺菌活性及抑菌活性。作為抗菌劑，可列舉殺菌性抗菌劑及抑菌性抗菌劑。於某態樣中，化合物(I)顯示出殺菌活性，可有效用作殺菌性抗菌劑。於另一態樣中，化合物(I)顯示出抑菌活性，可有效用作抑菌性抗菌劑。

作為包含化合物(I)之抗菌劑所靶向之疾病，只要是上述真菌及細菌參與而引起之疾病即可，並無特別限定，例如可列舉：機會性感染症(包含念珠菌症、隱球菌症、麴菌症等真菌性機會性感染症；及MRSA感染症、綠膿桿菌感染症等細菌性機會性感染症)、仙人掌桿菌感染症、腸管出血性大腸桿菌感染症(O157感染症等)、細菌性胃腸炎(沙門氏菌感染症等)、腦膜炎(細菌性腦膜炎、隱球菌腦膜炎等)、肺炎(黴漿菌肺炎、院內感染型肺炎等)、敗血症、感染性心內膜炎、尿路感染症(膀胱炎、腎盂腎炎等)、腹膜炎(一次性腹膜炎、特發性細菌性腹膜炎、續發性腹膜炎等)、膽道感染症、膽囊炎。

[抗病毒劑] 於本說明書中，用語「抗病毒劑」中包含對DNA病毒及RNA病毒中之任一者或兩者有效之薬劑，化合物(I)可對該等病毒顯示出抗病毒活性。DNA病毒中包含單股DNA病毒、雙股直鏈型DNA病毒及環狀雙股DNA病毒，例如可列舉：小病毒、乳突多瘤空泡病毒(乳突病毒等)、嗜肝DNA病毒(B型肝炎病毒等)、腺病毒、疱疹病毒(EB病毒等)及痘病毒。RNA病毒中包含雙股RNA病毒、(+)單股RNA病毒及(-)單股RNA病毒，例如可列舉：杯狀病毒(諾羅病毒、諾瓦克病毒、沙波病毒等)、里奧病毒(輪狀病毒等)、小核糖核酸病毒(脊髓灰質炎病毒、A型肝炎病毒等)、披膜病毒(風疹病毒等)、黃病毒(登革熱病毒、C型肝炎病毒等)、正黏液病毒(流感病毒等)、副黏液病毒(麻疹病毒等)。於某態樣中，化合物(I)可顯示出抗RNA病毒活性。於另一態樣中，化合物(I)可顯示出抗DNA病毒活性。

作為包含化合物(I)之抗病毒劑所靶向之疾病，只要是上述病毒參與而引起之疾病即可，並無特別限定，例如可列舉DNA病毒感染症、RNA病毒感染症。具體而言，可列舉：病毒性呼吸器官感染症(感冒、流行性感冒(A型、B型、C型)、急性及慢性支氣管炎、結核、病毒性肺炎等)、病毒性胃腸炎(輪狀病毒感染症、諾羅病毒感染症、食物中毒等)、病毒性肝炎(A型、B型、C型等)、口內炎、手足口症、水痘、風疹、麻疹、流行性腮腺炎、惡性腫瘤(淋巴瘤、上咽頭癌、胃癌、乳癌等)。於某態樣中，該疾病為RNA病毒感染症。於另一態樣中，該疾病為病毒性呼吸器官感染症或病毒性胃腸炎。於又一態樣中，該疾病為惡性腫瘤。

[醫藥組合物] 化合物(I)可按照該領域中通常使用之公知之方法，與1種以上之製藥學上所容許之載體一同製劑化。該製劑(於本說明書中，亦稱為「醫藥組合物」)中之化合物(I)之含量因劑型、投予量、投予對象等條件而有所不同，例如為製劑整體之0.1～100重量%。作為「製藥學上所容許之載體」，例如可列舉：賦形劑、崩解劑、結合劑、塑化劑、潤滑劑、溶劑、溶解劑、增溶劑、懸浮劑、等張劑、緩衝劑、基劑、乳化劑、濕潤劑、穩定劑、穩定劑、分散劑、塑化劑、pH調節劑、吸附促進劑、膠化劑、防腐劑、填充劑、抗氧化劑、著色劑等該領域中通常使用之添加成分。該製劑之劑型亦可為固形劑及液劑中之任一者，又，經口及非經口劑型中之任一者。作為該劑型，例如可列舉：錠劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、細粒劑、口含劑、糖漿劑、懸浮劑、外用劑、注射劑、經肺劑。該製劑之投予量(於本說明書中，亦稱為「治療有效量」)例如為每日約0.01～500 mg/體重kg之範圍之化合物(I)，亦可1次或數次分開投予。 [實施例]

以下，列舉實施例、參考例及試驗例，更詳細地對本發明進行說明，但本發明並不限定於該等。實施例等中使用之分析裝置及測定機器之測定條件等如下所示。 (NMR)BioSpin AVANCEIII 400 MHz(Bruker公司製造) 除無特別記載之情形以外，測定溶劑使用CDCl₃ 。 (IR)傅立葉轉換紅外線分光光度計(IRAffinty-1S：島津製作所股份有限公司製造) 油狀試樣藉由液膜法進行測定，固體試樣藉由溴化鉀(KBr)錠劑法進行測定。 (HRMS)四極-飛行時間型質譜儀(MICROMASS Q-Tof PREMIER：Waters公司製造) 測定試樣於甲醇中溶解後進行測定。高解析質量分析藉由不使用管柱，直接注射測定試樣進行測定。 (HPLC)Prominence(島津製作所股份有限公司製造) (HPLC手性管柱) CHIRALPAK AD-H(Daicel股份有限公司製造) 溶離條件：己烷：2-丙醇＝9：11.0 mL/min CHIRALFLASH IA(Daicel股份有限公司製造) 溶離條件：己烷：乙酸乙酯＝2：124.0 mL/min (旋光度)P-2200(日本分光股份有限公司製造) 除特別記載之情形以外，測定溶劑使用氯仿。

[實施例] (實施例1) 2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化5]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(100 mg，0.39 mmol)溶解於無水二氯甲烷(5 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(82 μL，0.47 mmol)並攪拌。使反應液回至室溫並攪拌3小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(78.6 mg，78%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.46.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.80 (dd, J = 6.7 Hz, 23.2 Hz, 3H), 5.75 (dq, J = 6.6 Hz, 13.1 Hz, 47.6 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 1.2 Hz, 8.5 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 8.5 Hz, 7.5 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.2 Hz, 7.5 Hz, 1H), 12.17 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 19.2 (d, J = 23.9 Hz, CH₃ ), 83.1 (d, J = 168.9 Hz, CH), 105.7 (d, J = 4.4 Hz, CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.6 (d, J = 1.7 Hz, C), 132.6 (C), 136.4 (CH), 152.5 (d, J = 1.6 Hz, C), 160.0 (d, J = 24.1 Hz, C), 162.4 (C), 172.7 (C), 186.2 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -169.6 (s, 1F) IR (KBr): 704.02, 831.32, 1035.77, 1228.66, 1319.31, 1336.67, 1450.47, 1539.20, 1641.42, 1674.21 cm^-1 HRMS (ESI) m/z: [M+Na]⁺ calcd for [C₁₄ H₉ F₁ Na]⁺ , 267.0433; Found, 267.0439

(實施例2) 2-(1-氟乙基)萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化6]

將以與專利文獻3中記載之方法相同之方式獲得之2-(1-羥乙基)萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(50 mg，0.2 mmol)溶解於無水二氯甲烷(4.0 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(43.5 μL，0.25 mmol)並攪拌。使反應液回至室溫並攪拌3小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝4：1)進行精製，則獲得標題化合物(36.3 mg，74.4%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝4/1)＝0.33.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.31 (dd, J = 6.6 Hz, 23.2 Hz, 3H), 5.73 (dq J = 6.7 Hz, 47.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.75-7.78 (m, 2H), 8.18-8.24 (m, 2H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 19.2 (d, J = 24.1 Hz, CH₃ ), 83.2 (d, J = 168.7 Hz, CH), 106.1 (d, J = 4.7 Hz, CH), 127.0 (CH), 127.1 (CH), 130.9 (C), 132.4 (C), 133.0 (C), 134.0 (CH), 134.0 (CH), 152.4 (C), 159.8 (d, J = 24.6 Hz, C), 173.5 (C), 180.3 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -169.2 (s, 1F) IR (KBr): 717.52, 842.89, 943.19, 956.69, 1064.71, 1197.79, 1220.94, 1340.53, 1541.12, 1593.20, 1672.28 cm^-1 HRMS (ESI) m/z: [M+Na]⁺ calcd for [C₁₄ H₉ F₁ Na]⁺ , 267.0433; Found, 267.0439

(實施例3) 2-(1-氯乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化7]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(50 mg，0.19 mmol)溶解於無水二氯甲烷(10 ml)溶液後，於0℃下滴加亞硫醯氯(70 μL，0.97 mmol)並攪拌。攪拌2小時後，加入吡啶(156.1 μL，1.9 mmol)，返回至室溫並攪拌0.5小時。其後，將反應液減壓蒸餾，若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(39.9 mg，75%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.5.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.96 (d, J = 6.99 Hz, 3H), 5.17 (dq, J = 0.56, 6.99 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 0.56, 1H), 7.28 (dd, J = 1.17, 8.49 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.50, 8.49, 1H), 7.77 (dd, J = 1.17, 7.50 Hz, 1H), 12.15 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 23.0 (CH₃ ), 48.6 (CH), 105.1 (CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.8 (C), 132.7 (C), 136.4 (CH), 152.3 (C), 161.7 (C), 162.4 (C), 172.6 (C), 186.2 (C)

(實施例4) 2-(1-溴乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化8]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(50 mg，0.19 mmol)溶解於無水二氯甲烷(10 ml)溶液後，於室溫下滴加PBr₃ (22 μL，0.23 mmol)並攪拌。攪拌0.5小時後，將反應液減壓蒸餾，若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝1：1)進行精製，則獲得標題化合物(18 mg，90%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝1/1)＝0.7.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 2.12 (d, J = 7.03 Hz, 3H), 5.24 (q, J = 7.03 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 7.28 (dd, J = 1.16, 8.51 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.46, 8.51 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 1.16, 7.46 Hz, 1H), 12.15 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 23.5 (CH₃ ), 36.4 (CH), 104.8 (CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.9 (C), 132.7 (C), 136.4 (CH), 152.1 (C), 162.2 (C), 162.4 (C), 172.6 (C), 186.1 (C)

(實施例5) 2-(1-氟乙基)-4,9-二側氧-4,9-二氫萘并[2,3-b]呋喃-5-基乙酸酯 [化9]

將實施例1之化合物(38.6 mg，0.14 mmol)溶解於DMF(dimethylformamide，二甲基甲醯胺)(10 ml)溶液後，於0℃下加入DIPEA(61 μL，0.35 mmol)與乙醯氯(20 μL，0.28 mmol)。將反應液攪拌1小時後，用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(18 mg，90%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.67.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.79 (dd, J = 6.78, 23.2 Hz, 3H), 5.71 (dq, J = 1.25, 8.12 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 2.52 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 1.25, 8.12 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 7.67, 8.12 Hz, 1H), 8.20 (dd, J = 1.25, 7.67 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 19.2 (d, J = 24.0 Hz, CH₃ ), 21.1 (CH₃ ), 83.1 (d, J = 169.0 Hz, CH), 106.2 (d, J = 4.51 Hz, CH), 124.1 (C), 125.6 (CH), 130.3 (CH), 131.7 (d, J = 1.81 Hz, C), 134.4 (C), 134.9 (CH), 150.4 (C), 151.2 (C), 160.1 (d, J = 24.2 Hz, C), 169.5 (C), 172.5 (C), 179.2(C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -169.7 (s, 1F)

(實施例6) (+)-2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及(-)-2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化10]

於-78℃條件下，於Deoxo-Fluor(註冊商標)之二氯甲烷溶液中滴加N-(三甲基矽烷基)嗎啉，返回至室溫，並且攪拌2.5小時。使反應液再次返回至-78℃，藉由滴加利用專利文獻3中記載之方法獲得之(-)-2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮進行脫氧氟化，獲得(+)-2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮。藉由HPLC手性管柱(CHIRALPAK AD-H)測定該化合物之光學純度。於在室溫下進行脫氧氟化之情形時，顯示出90%ee之光學純度。於在-20℃下進行脫氧氟化之情形時，為92%ee之光學純度。結果如以下之表所示。光學純粹之(+)-2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮係藉由用製備用HPLC手性管柱(DAICEL，CHIRALFLASH IA)分離精製以上述方式獲得之化合物而獲得(Hex：EtOAc＝2：1)。比旋光度：[α]^D ₂₅ ＋10.9(c 0.5，CHCl₃ ) [表1]

脫氧氟化劑 (溫度、時間)	產率	光學純度(%ee)
DAST (rt，1.5 h)	87%	86%ee
Deoxo-Fluor (rt，1.5 h)	89%	90%ee
Deoxo-Fluor (0℃，1.5 h)	88%	90%ee
Deoxo-Fluor (-20℃，1 d)	88%	92%ee

又，(-)-2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之(+)-2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮作為起始原料，使用上述方法進行合成。比旋光度：[α]^D ₂₅ －10.5(c 0.5，CHCl₃ )

[參考例] (參考例1) 2-(1,1-二氟乙基)-5-羥基-2,3-二氫萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化11]

將藉由專利文獻4中記載之方法獲得之2-乙醯基-2,3-二氫-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(200 mg，0.78 mmol)溶解於無水二氯甲烷(8 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(408 μL，2.33 mmol)並攪拌。使反應液返回至室溫並攪拌3小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Rf＝0.5，己烷：乙酸乙酯＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(174.5 mg，80%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.5.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.81 (t, J = 18.9 Hz, 3H), 3.26-3.40 (m, 2H), 4.98-5.08 (m, 1H), 7.28 (dd, J = 1.1 Hz, 8.4 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 7.5 Hz, 8.4 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 1.1 Hz, 7.5 Hz, 1H), 12.11 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 20.2 (dd, J = 25.8 Hz, 25.6 Hz, CH₃ ), 27.2 (dd, J = 2.5 Hz, 4.0 Hz, CH₂ ), 84.4 (dd, J = 29.1 Hz, 37.4 Hz, CH), 114.7 (C), 119.6 (CH), 120.7 (dd, J = 239.1 Hz, 245.4 Hz, C), 123.9 (C), 125.9 (CH), 131.7 (C), 135.4 (CH), 160.2 (C), 161.3 (C), 176.2 (C), 187.6 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -109.9 (d, J = 257.7 Hz, 1F), -101.9 (d, J = 257.7 Hz, 1F) IR (KBr): 758, 1037, 1159, 1219, 1238, 1340, 1452, 1618, 1651, 1681 cm^-1 HRMS (ESI) m/z: [M+H]⁺ calcd for [C₁₄ H₁₁ F₂ ]⁺ , 281.0625; Found, 281.0617

(參考例2) 2-(1,1-二氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化12]

將參考例1之化合物(168 mg，0.6 mmol)及活化二氧化錳(1.3 g，15 mmol)加入甲苯(20 mL)溶液，於130℃下加熱回流3小時。將反應液冷卻至室溫後，進行矽藻土過濾，並減壓濃縮。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝5：1)進行精製，則獲得標題化合物(50 mg，30%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝5/1)＝0.23.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 2.09 (t, J = 18.4 Hz, 3H), 7.14 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 1.2 Hz, 8.5 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 7.5 Hz, 8.5 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.2 Hz, 7.5 Hz, 1H), 12.11 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 23.2 (t, J = 26.9 Hz, CH₃ ), 106.2 (t, J = 3.1 Hz, CH), 115.2 (C), 116.1 (t, J = 237.1 Hz, C), 120.3 (CH), 125.7 (CH), 130.2 (C), 132.5 (C), 136.5 (CH), 152.7 (C), 155.2 (t, J = 37.9 Hz, C), 162.5 (C), 172.7(C), 185.8 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -89.0 (s, 2F) IR (KBr): 756.1, 1228.66, 1276.88, 1641.42, 1670.35 cm^-1 HRMS (ESI) m/z: [M+H]⁺ calcd for [C₁₄ H₉ F₂ ]⁺ , 279.0469; Found, 279.0457

(參考例3) 2-(1,1-二氟乙基)-2,3-二氫萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化13]

將以與專利文獻4中記載之方法相同之方式獲得之2-乙醯基-2,3-二氫萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(200 mg，0.83 mmol)溶解於無水二氯甲烷(8 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(435.3 μL，2.48 mmol)並攪拌。使反應液返回至室溫並攪拌3小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(176.2 mg，81%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.42.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.81 (t, J = 18.9 Hz, 3H), 3.28-3.41 (m, 2H), 5.00-5.06 (m, 1H), 7.70 (ddd, J = 1.6 Hz, 7.5 Hz, 14.2 Hz, 1H), 7.75 (ddd, J = 1.6 Hz, 7.5 Hz, 14.2 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 1.5 Hz, 4.8 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 1.5 Hz, 4.8 Hz, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 20.2 (dd, J = 25.8 Hz, 52.1 Hz, CH₃ ), 27.7 (dd, J = 2.2 Hz, 4.5 Hz, CH₂ ), 84.1 (dd, J = 29.2 Hz, 37.2 Hz, CH), 120.9 (dd, J = 239.8 Hz, 245.5 Hz, C), 124.3 (C), 126.2 (CH), 126.4 (CH), 131.5 (C), 132.8 (C), 133.2 (CH), 134.3 (CH), 159.4 (C), 177.0 (C), 181.8 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -109.7 (d, J = 256.1 1F), -101.8 (d, J = 256.1 1F) IR (KBr): 418.55, 723.31, 916.19, 989.48, 1112.93, 1163.08, 1195.87, 1207.44, 1246.02, 1294.24, 1357.89, 1386.82, 1633.71, 1656.85, 1683.86 cm^-1 HRMS (ESI) m/z: [M+Na]⁺ calcd for [C₁₄ H₁₀ F₂ Na]⁺ , 287.0496; Found, 287.0503

(參考例4) 2-(1,1-二氟乙基)萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化14]

將參考例3之化合物(39.8 mg，0.15 mmol)及活化二氧化錳(327.7 mg，3.77 mmol)加入甲苯(3 mL)溶液，於130℃下加熱回流3小時。將反應液冷卻至室溫後，進行矽藻土過濾，並減壓濃縮。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(23.7 mg，60%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.5.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 2.09 (t, J = 18.3 Hz, 3H), 7.16 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78-7.80 (m, 2H), 8.20-8.26 (m, 2H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 23.2 (t, J = 27.0 Hz, CH₃ ), 106.5 (t, J = 3.2 Hz, CH), 116.2 (t, J = 236.7 Hz, C), 127.1 (CH), 127.2 (CH), 130.4 (C), 132.3 (C), 133.0 (C), 134.2 (CH), 134.2 (CH), 152.6 (C), 155.0 (t, J = 37.6 Hz, C), 173.5 (C), 178.0 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -89.0 (s, 2F) IR (KBr): 418.55, 717.52, 894.97, 964.41, 1128.36, 1188.15, 1234.44, 1273.02, 1290.38, 1369.46, 1593.20, 1681.93 cm^-1 HRMS (ESI) m/z: [M+Na]⁺ calcd for [C₁₄ H₈ F₂ Na]⁺ , 285.0339; Found, 285.0347

(參考例5) 5-羥基-2-(羥基(苯基)甲基)萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化15]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2,5-羥基-3-碘萘-1,4-二酮(100 mg，0.3 mmol)添加至DMF及吡啶(5：4)溶液中(9 ml)，進而加入氧化銅(I)(45.2 mg，0.3 mmol)、1-苯基-2-丙炔-1-醇(77 μL，0.6 mmol)、及乙酸鈀(2.2 mg，0.01 mmol)，於80℃下加熱攪拌1小時。將反應液冷卻至室溫後，用氯仿進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝1：1)進行精製，則獲得標題化合物(48.6 mg，48%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝1/1)＝0.67.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 2.80 (d, J = 4.23 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 3.65 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 0.82 Hz 1H), 7.25 (dd, J = 1.19, 8.31 Hz, 1H), 7.35-7.49 (m, 5H), 7.60 (dd, J = 7.64, 8.32 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 1.17, 7.46 Hz, 1H), 12.14 (s, 1H)

(參考例6) 2-(氟(苯基)甲基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化16]

將參考例5之化合物(48.6 mg，0.15 mmol)溶解於無水二氯甲烷(4.0 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(32 μL，0.18 mmol)並攪拌。使反應液返回至室溫並攪拌0.5小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝3：1)進行精製，則獲得標題化合物(43.4 mg，90%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝3/1)＝0.43.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 6.53 (d, J = 46.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 2.47 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 1.14, 8.40 Hz, 1H), 7.49-7.45 (m, 5H), 7.62 (dd, J = 7.52, 8.40 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.14, 7.52 Hz), 12.12 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 87.1 (d, J = 173.8 Hz, CH), 107.5 (d, J = 4.15 Hz, CH), 115.1 (C), 120.2 (CH), 125.5 (CH), 126.5 (CH), 126.6 (CH), 129.0 (CH), 129.0 (CH), 129.8 (d, J = 1.68, CH), 130.5 (C), 132.6 (C), 135.1 (d, J = 21.9 Hz, C), 136.4 (CH), 153.0 (C), 159.2 (d, J = 27.4 Hz, C), 162.4 (C), 172.8 (C), 186.1 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -169.7 (s, 1F)

(參考例7) 5-羥基-2-(1-羥丁基)萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化17]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2,5-羥基-3-碘萘-1,4-二酮(100 mg，0.3 mmol)添加至DMF及吡啶(5：4)溶液中(9 ml)，進而加入氧化銅(I)(45.3 mg，0.3 mmol)、1-己炔-3-醇(70.6 μL，0.6 mmol)、及乙酸鈀(2.2 mg，0.01 mmol)，於100℃下加熱攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫後，用氯仿進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝1：1)進行精製，則獲得標題化合物(54.1 mg，60%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝1/1)＝0.6.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 0.99 (t, J = 7.41 Hz, 3H), 1.39-1.58 (m, 2H), 1.85-1.99 (m, 2H), 2.28 (s, 1H), 4.87 (dd, J = 5.46, 7.40 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 7.26 (dd, J = 0.99, 8.32 Hz, 1H), 7.60 (dd, J =7.74, 8.32 Hz, 1H), 7.75 (dd, J =0.99, 7.74 Hz, 1H), 12.16 (s, 1H)

(參考例8) 2-(1-氟丁基)-5-羥基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 [化18]

將參考例7之化合物(20 mg，0.07 mmol)溶解於無水二氯甲烷(4.0 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(18.4 μL，0.1 mmol)並攪拌。使反應液返回至室溫並攪拌0.5小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝2：1)進行精製，則獲得標題化合物(18 mg，90%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝2/1)＝0.67.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.01 (t, J = 7.44, 3H), 1.43-1.61 (m, 2H), 1.93-2.21 (m, 2H), 5.56 (ddd, J = 5.16, 8.35, 47.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 2.20 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 1.10, 8.49 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 7.51, 8.49 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.10, 7.51 Hz, 1H), 12.14 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 13.6 (CH₃ ), 18.0 (d, J = 4.05 Hz, CH₂ ), 35.3 (d, J = 22.4 Hz, CH₂ ), 86.6 (d, J = 171.7 Hz, CH₂ ), 105.9 (d, J = 4.5 Hz, CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.7 (d, J = 1.6 Hz, C), 132.6 (C), 136.4 (CH), 152.5 (d, J = 1.5 Hz, C), 159.8 (d, J = 25.7 Hz, C), 162.4 (C), 172.7 (C), 186.2 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -177.5 (s, 1F)

(參考例9) 2-(1-氟乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]噻吩-4,9-二酮 [化19]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2-(1-羥乙基)-5-羥基萘并[2,3-b]噻吩-4,9-二酮(20 mg，0.08 mmol)溶解於無水二氯甲烷(4.0 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(21 μL，0.12 mmol)並攪拌。使反應液返回至室溫並攪拌0.5小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝1：1)進行精製，則獲得標題化合物(19.6 mg，97%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝1/1)＝0.67.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.81 (dd, J = 6.49, 23.4 Hz, 3H), 5.89 (ddq, 0.70, 6.41, 47.7 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 1.17, 8.50 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 0.70, 2.23, 1H), 7.64 (dd, J = 7.50, 8.50 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 0.70, 7.50 Hz, 1H), 12.3 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 22.6 (d, J = 24.0 Hz, CH), 86.3 (d, J = 170.6 Hz, CH), 115.6 (C), 120.0 (CH), 123.0 (d, J = 5.72, CH), 125.0 (CH), 133.7 (C), 136.3 (CH), 142.1 (C), 145.4 (C), 153.8 (d, J = 22.1, C), 162.7 (C), 177.3 (C), 184.8 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -158.0 (s, 1F)

(參考例10) 2-(1-氟乙基)-6-羥基萘并[1,2-b]呋喃-4,5-二酮 [化20]

將藉由專利文獻3中記載之方法獲得之2-(1-羥乙基)-6-羥基萘并[1,2-b]呋喃-4,5-二酮(20 mg，0.08 mmol)溶解於無水二氯甲烷(4.0 mL)溶液後，於0℃下滴加Deoxo-Fluor(註冊商標)(21 μL，0.12 mmol)並攪拌。使反應液返回至室溫並攪拌0.5小時後，用水進行淬滅，並用乙酸乙酯進行萃取。用水及鹽水洗淨有機層，用硫酸鈉乾燥後，進行過濾，繼而進行減壓蒸餾。若藉由矽膠管柱層析法(Hex：EtOAc＝1：1)進行精製，則獲得標題化合物(14.6 mg，73%)。黃色固體. Rf (己烷/EtOAc＝1/1)＝0.67.¹ H-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 1.78 (dd, J = 6.60, 22.4 Hz, 3H), 5.65 (dq, J = 6.60, 48.6 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 4.00, 1H), 7.06 (dd, J = 0.72, 8.62 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 0.72, 7.39 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 7.39, 8.62 Hz, 1H), 12.01 (s, 1H)¹³ C-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ 18.7 (d, J = 24.3 Hz, CH), 82.7 (d, J = 166.7 Hz, CH), 106.7 (d, J = 5.70 Hz, CH), 112.4 (C), 115.4 (CH), 121.5 (d, J = 2.01 Hz, C), 121.8 (CH), 127.6 (C), 138.8 (CH), 156.1 (d, J = 20.6 Hz, C), 160.0 (C), 165.8 (C), 174.0 (C), 184.0 (C)¹⁹ F-NMR (CDCl₃ , 400MHz): δ -165.0 (s, 1F)

[試驗例] (試驗例1：對細菌及真菌之抗菌活性試驗) 關於受檢化合物，按照以下方法進行對6種細菌(枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、仙人掌桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌及沙門氏菌)及6種真菌(白色念珠菌、白色隱球酵母孢菌、出芽酵母菌、薰煙色麴菌、青黴菌及擬青黴菌)之抗菌活性試驗，測定最低抑菌濃度(MIC)。作為陽性對照，使用具有對革蘭氏陽性菌之抗菌活性之萬古黴素、具有對革蘭氏陰性菌之抗菌活性之塞浦佛洒辛、及具有對真菌之抗菌活性之兩性黴素B。

(MIC之測定：細菌) (1)細菌接種於Mueller Hinton平面培養基，於37℃下增菌培養18小時。 (2)藉由滅菌0.85%生理食鹽水製作生菌數濃度為10⁶ 個/ml之菌液。首先，於滅菌小試管加入0.85%滅菌生理食鹽水3 ml，用鉑絲對群落進行釣菌並懸浮。此時，藉由麥克法蘭(McFarland)濁度標準溶液No. 0.5將懸浮液調整為1.5×10⁸ CFU/ml之濁度。將其稀釋100倍，製作1.5×10⁶ CFU/ml之菌液。此處，生菌數濃度亦可為1.0～5.0×10⁶ 個/ml之範圍內。 (3)將化合物溶解於DMSO(濃度：2000 μg/ml)。藉由96孔盤製作化合物之2倍階段稀釋系列(0.1～100 μg/ml)。細菌藉由Mueller Hinton液體培養基製作稀釋系列。僅一個孔於培養基190 μl中加入化合物溶解DMSO液10 μl(成為DMSO濃度5%)。其他孔(第2～11號)添加100 μl培養基，進行階段稀釋。作為對照，製作於培養基95 μl僅添加5 μl之DMSO者，確認菌於5% DMSO添加培養基中亦生長。 (4)分別添加5 μl各菌液(細菌)。 (5)細菌於37℃下培養18小時，判定菌之生長之有無。 (6)將未生長之最小之濃度設為MIC。

(MIC之測定：真菌) (1)真菌接種於PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)斜面培養基，於28℃下對酵母類培養3日，或對黴類培養5日。 (2)藉由滅菌0.05% Tween80液製作孢子數濃度為1.0～2.0×10⁵ 個/ml之菌液。首先，於滅菌小試管加入滅菌0.05% Tween80液2～3 ml。於真菌生長之PDA斜面用巴斯德吸管加入適量(約3 ml)滅菌0.05% Tween80液，進行移液。將少量該液加入滅菌小試管之0.05% Tween80液。Tween80液輕微混濁之程度為10⁶ 個/ml，藉由血球計確認。將其稀釋10倍，製作10⁵ 個/ml之孢子液。 (3)將化合物溶解於DMSO(濃度：2000 μg/ml)。藉由24孔盤製作化合物之2倍階段稀釋系列(0.1～100 μg/ml)。真菌藉由PD培養液製作稀釋系列。僅一個孔於培養基1.9 ml中加入化合物溶解DMSO液0.1 ml(DMSO濃度5%)。其他孔添加培養基1 ml，進行階段稀釋。作為對照，製作於培養基僅添加DMSO者，確認菌於5% DMSO添加培養基中亦生長。 (4)分別添加50 μl各孢子液(真菌)。 (5)於28℃下，對酵母類培養3日，或對黴類培養5日，判定菌之生長之有無。 (6)將未生長之最小之濃度視為MIC。

結果如以下之表所示。 [表2]

	MIC (μg/mL)
實施例2	實施例3	實施例4	實施例5
枯草桿菌 (Bacillus subtilis)	6.25	1.56	3.13	0.2
金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)	3.13	1.56	6.25	0.39
仙人掌桿菌 (Bacillus cereus)	1.56	0.78	1.56	0.2
大腸桿菌 (Escherichia coli)	＞100	＞100	100	0.78
綠膿桿菌 (Pseudomonas aeruginosa)	＞100	＞100	＞100	＞100
沙門氏菌 (Salmonella enterica)	＞100	＞100	＞100	1.56
白色念珠菌 (Candida albicans)	＞100	12.5	50	50
白色隱球酵母孢菌 (Cryptococcus albidus)	25	3.13	6.25	6.25
出芽酵母菌 (Saccharomyce cerevisiae)	6.25	3.13	6.25	6.25
薰煙色麴菌 (Aspergillus fumigatus)	50	12.5	25	25
青黴菌 (Penicillium expansum)	12.5	25	25	12.5
擬青黴菌 (Paecilomyces variotii)	100	3.13	12.5	12.5

	MIC (μg/mL)
實施例6 (+)	實施例6 (-)	塞浦佛洒辛	兩性黴素B	萬古黴素
枯草桿菌 (Bacillus subtilis)	0.2	0.2	0.03	NT	0.39
金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)	0.2	0.2	0.2	NT	0.78
仙人掌桿菌 (Bacillus cereus)	0.2	0.2	0.2	NT	0.78
大腸桿菌 (Escherichia coli)	3.13	3.13	0.006	NT	＞100
綠膿桿菌 (Pseudomonas aeruginosa)	＞100	＞100	0.03	NT	＞100
沙門氏菌 (Salmonella enterica)	6.25	6.25	0.006	NT	＞100
白色念珠菌 (Candida albicans)	1.56	1.56	NT	1.56	NT
白色隱球酵母孢菌 (Cryptococcus albidus)	0.39	0.39	NT	1.56	NT
出芽酵母菌 (Saccharomyce cerevisiae)	0.78	0.78	NT	0.78	NT
薰煙色麴菌 (Aspergillus fumigatus)	1.56	1.56	NT	1.56	NT
青黴菌 (Penicillium expansum)	1.56	1.56	NT	1.56	NT
擬青黴菌 (Paecilomyces variotii)	0.78	0.78	NT	0.78	NT
NT：not tested

亦對參考例化合物進行相同之試驗，測定MIC。結果如以下之表所示。 [表3]

	MIC (μg/mL)
參考例1	參考例2	參考例3	參考例4
枯草桿菌 (Bacillus subtilis)	6.25	1.56	12.5	3.13
金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)	6.25	1.56	25	3.13
仙人掌桿菌 (Bacillus cereus)	3.13	0.78	12.5	50
大腸桿菌 (Escherichia coli)	＞100	＞100	＞100	＞100
綠膿桿菌 (Pseudomonas aeruginosa)	＞100	＞100	＞100	＞100
沙門氏菌 (Salmonella enterica)	＞100	＞100	＞100	＞100
白色念珠菌 (Candida albicans)	＞100	＞100	100	＞100
白色隱球酵母孢菌 (Cryptococcus albidus)	3.13	＞100	50	＞100
出芽酵母菌(Saccharomyce cerevisiae)	6.25	0.39	25	＞100
薰煙色麴菌 (Aspergillus fumigatus)	＞100	＞100	＞100	＞100
青黴菌 (Penicillium expansum)	＞100	＞100	＞100	＞100
擬青黴菌 (Paecilomyces variotii)	＞100	＞100	＞100	＞100

	MIC (μg/mL)
參考例6	參考例8	參考例9	參考例10
枯草桿菌 (Bacillus subtilis)	1.56	0.39	0.2	3.13
金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)	3.13	0.39	0.39	3.13
仙人掌桿菌 (Bacillus cereus)	1.56	0.39	0.2	3.13
大腸桿菌 (Escherichia coli)	＞100	＞100	100	100
綠膿桿菌 (Pseudomonas aeruginosa)	＞100	＞100	＞100	100
沙門氏菌 (Salmonella enterica)	＞100	＞100	＞100	100
白色念珠菌 (Candida albicans)	＞100	＞100	＞100	100
白色隱球酵母孢菌 (Cryptococcus albidus)	25	50	25	50
出芽酵母菌 (Saccharomyce cerevisiae)	50	100	0.78	25
薰煙色麴菌 (Aspergillus fumigatus)	＞100	＞100	＞100	100
青黴菌 (Penicillium expansum)	＞100	＞100	＞100	100
擬青黴菌 (Paecilomyces variotii)	＞100	＞100	＞100	50

(試驗例2：對MRSA之抗菌活性試驗) 關於受檢化合物，按照以下方法進行對耐二甲氧苯青黴素性金黃色葡萄球菌(MRSA)之抗菌活性試驗，測定最低抑菌濃度(MIC)。作為陽性對照，使用具有對MRSA之抗菌活性之萬古黴素。於96孔微量盤分注檢體稀釋液100 μL後，接種試驗菌液5 μL。於37℃±1℃下培養18～24小時後，將阻止菌之生長之最低濃度設為最低抑菌濃度。試驗條件如下。 [表4]

試驗菌液	試驗菌	MRSA
預培養：Muller Hinton Agar(Difco)，37℃±1℃，18小時菌液製備溶液：生理食鹽水菌數：1.0×10⁶ ～5.0×10⁶ /mL
檢體稀釋液	將檢體之有效濃度設為2000 μg/mL。使用Muller Hinton Broth(Difco)製備檢體之5.0、2.5、1.25、0.63、0.31、0.16、0.08、0.04、0.02及0.01 μg/mL溶液。

結果如以下之表所示。 [表5]

檢體	MIC(μg/mL)
實施例1	0.16
萬古黴素	0.31

(試驗例3：最小殺菌時間(Time-Kill assay)) A.菌數測定之預備實驗將少量Mueller Hinton瓊脂平板上之群落(使用鉑絲)接種於Mueller Hinton液體培養基10 ml，於37℃下培養20小時。繼而，將0.5 ml之菌液加入4.5 ml之0.1%蛋白腖加生理食鹽水進行階段稀釋。將各稀釋階段之菌液0.1 ml分別接種於預先乾燥之2塊Mueller Hinton瓊脂培養基之表面，用滅菌Conradi棒塗抹於培養基整個面。於37℃下培養24小時後，測定菌數。採用30～300個平板之菌數(2塊之平均值)。將該平均值設為培養20小時後之菌數之預測值。 B.最小殺菌時間 (1)於試驗前日，將少量Mueller Hinton瓊脂平板上之群落(使用鉑絲)接種於Mueller Hinton液體培養基10 ml，於37℃下培養20小時。 (2)於試驗當日，基於上述預備實驗中獲得之預測值，以使菌量成為5×10⁶ 個/ml之方式稀釋培養液並添加至試驗液a～c。 (3)預先製作之試驗液如下： a：對照(僅Mueller Hinton液體培養基) b：添加萬古黴素(於Mueller Hinton液體培養基加入MIC之16倍濃度之萬古黴素) c：添加受檢化合物(於Mueller Hinton液體培養基加入MIC之16倍濃度之受檢化合物) (4)試驗液分別以使Mueller Hinton液體培養基之最終量成為50 ml之方式調整。於添加菌之前，預先將培養基在37℃下保溫。 (5)將試驗液裝入37℃之恆溫槽。 (6)分別測定0、2、4、6、(8)、24小時後之菌數。測定方法以與上述預備實驗相同之方式進行。 (7)反覆3次實驗，確認再現性。使用實施例1化合物作為受檢化合物之結果如圖1所示。

(試驗例4：病毒不活化效果試驗) 如下所述般確認與受檢化合物之病毒之反應之病毒不活化效果。試驗例4按照該領域中通常使用之「病毒實驗學總論改訂二版(丸善股份有限公司)病毒中和試驗法」中記載之方法進行。 A.試驗樣品作為試驗樣品，將受檢化合物溶解於少量DMSO後，用純化水定容，製作3 ppm之試驗溶液。 B.供試微生物供試微生物使用以下者：流感病毒：Swine influenza virus H1N1 IOWA株培養細胞：MDCK細胞(犬腎臟源性培養細胞株) 貓杯狀病毒：Feline calicivirus F9株培養細胞：CRFK細胞(貓腎臟源性培養細胞株) C.區之設定 [表6]

區	處理	敏化時間^a)
試驗區	於試驗樣品1 mL中添加病毒液0.1 mL	試驗開始後(0分鐘)及60分鐘
對照區	於磷酸鹽緩衝液1 mL中添加病毒液0.1 mL	試驗開始後0分鐘及60分鐘
a)試驗區之試驗開始後0分鐘之數值使用對照區之數值。

D.試驗順序 (1)預備試驗於試驗前，調查試驗樣品對培養細胞造成之影響(細胞毒性)。用磷酸鹽緩衝液將試驗樣品階段稀釋10倍後，接種於培養細胞，確認顯示培養後之細胞之正常狀態之最高濃度，確定試驗中使用之病毒濃度。其結果，關於細胞毒性，於MDCK細胞之情形時，稀釋10倍之前觀察到細胞之生長不良。於CRFK細胞中，未確認原液中細胞之生長不良。因此，於試驗時，將流感病毒之病毒添加濃度設為10⁶ TCID₅₀ /0.1 mL以上，將貓杯狀病毒之病毒添加濃度設為10⁵ TCID₅₀ /0.1 mL以上。 (2)正式試驗：試驗液混合按照試驗區分，分別取各1 mL試驗樣品及磷酸鹽緩衝液，添加病毒液至預備試驗中確定之濃度。添加病毒液後，以混合液之形式於室溫(25℃)下靜置特定時間。 (3)正式試驗：細胞接種及菌數測定按各試驗區分將敏化結束之混合液分別稀釋10倍左右，於在96孔板培養之細胞各培養100 μL。判定係於37℃、二氧化碳培養(5%)下培養5日後，於流感病毒之情形時，回收各孔內之培養上清液，藉由紅血球凝集反應確認病毒之增殖之有無，並算出其濃度。於貓杯狀病毒之情形時，顯微鏡觀察培養細胞，利用培養細胞中出現之CPE(細胞改性)確認病毒增殖之有無，並算出其濃度。

E.結果 (1)流感病毒實施例1化合物之對流感病毒之試驗結果如以下之表及圖2所示。試驗中使用之病毒濃度為10^9.3 TCID₅₀ /0.1 mL。於對照區中，在試驗開始後至試驗開始後60分鐘之間幾乎未觀察到病毒量之變化。於試驗區中，在試驗開始後60分鐘成為10^8.1 TCID₅₀ /0.1 mL(減少35%)。 [表7]

流感病毒試驗結果(TCID₅₀ /0.1 mL)
區	試驗開始時	開始後60分鐘
對照區	10^8.5	10^8.3
(200000000)
試驗區	10^8.1
(130000000)

(2)貓杯狀病毒實施例1化合物之對貓杯狀病毒之試驗結果如以下之表及圖3所示。試驗中使用之病毒濃度為10^8.0 TCID₅₀ /0.1 mL。於對照區中，在試驗開始後至試驗開始後60分鐘之間幾乎未觀察到病毒量之變化。於試驗區中，在試驗開始後60分鐘成為10^6.3 TCID₅₀ /0.1 mL(減少60%)。 [表8]

貓杯狀病毒試驗結果(TCID₅₀ /0.1 mL)
區	試驗開始時	開始後60分鐘
對照區	10^7.1	10^8.7
(50000000)
試驗區	10^8.3
(20000000)

[產業上之可利用性]

化合物(I)不僅對各種真菌及革蘭氏陽性菌顯示出良好之抗菌活性，亦對革蘭氏陰性菌顯示出良好之抗菌活性，又，顯示出良好之病毒不活化效果，因此，可作為抗菌劑及抗病毒劑廣泛應用於各種疾病。

圖1表示試驗例3之Time-kill assay之結果。圖中，■表示對照，▲表示最低抑菌濃度(MIC)之16倍濃度之萬古黴素，●表示MIC之16倍濃度之實施例1化合物之結果。圖2表示試驗例4之對流感病毒之試驗結果。圖中，實線表示對照區，虛線表示試驗區。圖3表示試驗例4之對貓杯狀病毒之試驗結果。圖中，實線表示對照區，虛線表示試驗區。

Claims

一種化合物或其製藥學上所容許之鹽，其係式(I)： [化1]
[式中，R¹ 為氫或OR， R為氫、C_1-6 烷基或C_1-6 烷基-CO] 所示。
如請求項1之化合物或其製藥學上所容許之鹽，其中R¹ 為OH。
一種抗菌劑或抗病毒劑，其含有如請求項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽及製藥學上所容許之載體。
一種醫藥組合物，其含有如請求項1或2之化合物或其製藥學上所容許之鹽及製藥學上所容許之載體，用以治療及/或預防選自由機會性感染症、仙人掌桿菌感染症、腸管出血性大腸桿菌感染症、細菌性胃腸炎、腦膜炎、肺炎、敗血症、感染性心內膜炎、尿路感染症、腹膜炎、膽道感染症、膽囊炎、病毒性呼吸器官感染症、病毒性胃腸炎及惡性腫瘤所組成之群之疾病。