WO2020161959A1 - 抗菌及び抗ウイルス活性を有するナフトキノン化合物及びその医薬用途 - Google Patents

抗菌及び抗ウイルス活性を有するナフトキノン化合物及びその医薬用途 Download PDF

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WO2020161959A1
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compound
test
cdcl
pharmaceutically acceptable
nmr
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PCT/JP2019/038602
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飯田　彰
光明 山下
陽一 福田
Original Assignee
タヒボジャパン株式会社
学校法人近畿大学
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    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P31/04—Antibacterial agents
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    • C07D307/92—Naphthofurans; Hydrogenated naphthofurans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/56—Loganiaceae (Logania family), e.g. trumpetflower or pinkroot

Definitions

  • the present invention relates to a naphthoquinone compound having antibacterial and antiviral activity and its pharmaceutical use.
  • Non-Patent Document 1 discloses that Compound A exhibits a cancer preventive activity by inhibiting the initial antigen activation of EB virus and exhibits antiviral activity.
  • Patent Document 2 tests antiviral activity and antibacterial activity of some naphthoquinone compounds, but does not disclose a compound showing activity against both fungi and Gram-negative bacteria.
  • JP-A-6-145162 Japanese Patent Laid-Open No. 9-249560 Japanese Patent Laid-Open No. 2012-092083 JP, 2006-290871, A
  • One of the problems to be solved by the present invention is to provide a naphthoquinone compound showing antibacterial and antiviral activity against various fungi, bacteria and viruses.
  • the present inventors have conducted extensive studies to solve the above-mentioned problems, and as a result, the tricyclic naphthoquinone compound having a fluoroalkyl group in the condensed furan ring part is antibacterial to not only fungi and Gram-positive bacteria but also Gram-negative bacteria.
  • the present invention has been completed based on the finding that they exhibit activity and may exhibit antiviral activity.
  • formula (I) [Wherein R 1 is hydrogen or OR, R is hydrogen, C 1-6 alkyl or C 1-6 alkyl-CO] Or a pharmaceutically acceptable salt thereof (hereinafter, also referred to as “compound (I)”).
  • Compound (I) may show good antibacterial activity not only against various fungi and Gram-positive bacteria but also against Gram-negative bacteria. Compound (I) may also show a good virus inactivating effect.
  • FIG. 1 shows the results of Time-kill assay in Test Example 3.
  • ⁇ indicates the control results
  • ⁇ indicates the vancomycin concentration 16 times the minimum inhibitory concentration (MIC)
  • ⁇ indicates the compound of Example 1 at the concentration 16 times the MIC.
  • FIG. 2 shows the test results for the influenza virus of Test Example 4.
  • the solid line shows the control plot and the dotted line shows the test plot.
  • FIG. 3 shows the test results for the feline calicivirus of Test Example 4.
  • the solid line shows the control plot and the dotted line shows the test plot.
  • An antibacterial drug or an antiviral drug comprising the compound according to item 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • [Item 5] Opportunistic infections, Bacillus cereus infections, enterohemorrhagic Escherichia coli infections, bacterial infections comprising administering to a subject a therapeutically effective amount of the compound of Item 1 or 2 or a pharmaceutically acceptable salt thereof. From the group consisting of gastroenteritis, meningitis, pneumonia, sepsis, infective endocarditis, urinary tract infection, peritonitis, biliary tract infection, cholecystitis, viral respiratory infection, viral gastroenteritis and malignancy A method for treating and/or preventing a selected disease.
  • Item 3 The compound according to Item 1 or 2 or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the production of an antibacterial drug or an antiviral drug.
  • C 1-6 alkyl means a straight or branched chain saturated hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms.
  • C 1-6 alkyl is, for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, 1-ethylpropyl, hexyl, isohexyl, 1,1- Examples thereof include dimethylbutyl, 2,2-dimethylbutyl, 3,3-dimethylbutyl and 2-ethylbutyl. Preferred is methyl, ethyl or isopropyl.
  • the compound of the formula (I′) including the compound of the formula (I) can be produced by the method exemplified below.
  • the compound obtained in each step may be appropriately isolated and purified by a known method commonly used in the art such as distillation, recrystallization, column chromatography, or the like, or the next step without isolation or purification. You may proceed to.
  • R 1 is hydrogen or OR
  • R is hydrogen, C 1-6 alkyl or C 1-6 alkyl-CO
  • X is fluorine, chlorine or bromine.
  • Steps 1 to 5 in the above production method can be performed according to known methods, for example, the methods described in Patent Documents 3 and 4 may be performed.
  • compound (I′) can be produced by subjecting compound (II) to deoxygenative fluorination or chlorination or bromination.
  • deoxygenative fluorination By fluorinating the compound (II) with a deoxidizing fluorinating agent, a compound (I′) in which X is fluorine can be produced.
  • the deoxygenating fluorinating agent include diethylaminosulfur trifluoride (DAST) and bis(2-methoxyethyl)aminosulfur trifluoride (Deoxo-Fluor (registered trademark)). Preferred is bis(2-methoxyethyl)aminosulfur trifluoride.
  • the solvent examples include nonpolar solvents such as dichloromethane.
  • an optically active substance of compound (I′) can be obtained.
  • the additive is not particularly limited as long as it is a reagent that suppresses racemization of a product associated with fluorination, and examples thereof include amine.
  • the amine include morpholine, N-(trimethylsilyl)morpholine, pyrrolidine, and N-methylpyrrolidine. Preferred is N-(trimethylsilyl)morpholine.
  • the compound (I′) in which R 1 is C 1-6 alkyl-O or C 1-6 alkyl-COO is prepared by treating the compound (I′) in which R 1 is OH according to a known method commonly used in the art. You may manufacture by doing.
  • the compound (I′) in which R 1 is OAc can be produced by treating the compound (I′) in which R 1 is OH with an acetylating agent in the presence of an amine.
  • amines include triethylamine, N,N-diisopropylethylamine (DIPEA), and triisopropylamine.
  • DIPEA triethylamine
  • the acetylating agent include acetyl chloride and acetic anhydride. Acetyl chloride is preferred.
  • the solvent include aprotic polar solvents such as N,N-dimethylformamide.
  • brominating agent examples include phosphorus tribromide.
  • solvent examples include nonpolar solvents such as dichloromethane.
  • antibacterial drug includes antifungal and antibacterial agents (also referred to herein as "antibiotics”).
  • the fungi include Candida albicans, Cryptococcus albicans, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus (Aspergillus fumigatus, etc.), Blue molds (Penicillium expansum, etc.), Pecilomyces variotii, etc.
  • bacteria include gram-positive bacteria and gram-negative bacteria.
  • Gram-positive bacteria include Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), and Bacillus cereus.
  • Gram-negative bacteria include Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Salmonella.
  • Preferred Gram-negative bacteria are E. coli and Salmonella.
  • the antibacterial activity of compound (I) includes bactericidal activity and bacteriostatic activity against the above fungi and bacteria.
  • Antibacterial agents include bactericidal and bacteriostatic antibacterial agents.
  • compound (I) exhibits bactericidal activity and may be useful as a bactericidal antibacterial agent.
  • compound (I) exhibits bacteriostatic activity and may be useful as a bacteriostatic antibacterial agent.
  • the disease targeted by the antibacterial drug containing the compound (I) is not particularly limited as long as it is a disease caused by involvement of the above-mentioned fungi and bacteria, and examples thereof include opportunistic infections (candidiasis, cryptococcosis, aspergillosis, etc.).
  • Fungal opportunistic infections; and MRSA infections including bacterial opportunistic infections such as Pseudomonas aeruginosa infections), cereus infections, enterohemorrhagic Escherichia coli infections (O157 infections, etc.), bacterial gastroenteritis ( Salmonella infection, etc.), meningitis (bacterial meningitis, cryptococcal meningitis, etc.), pneumonia (Mycoplasma pneumonia, nosocomial pneumonia, etc.), sepsis, infective endocarditis, urinary tract infection (cystitis, Pyelonephritis), peritonitis (primary peritonitis, idiopathic bacterial peritonitis, secondary peritonitis, etc.), biliary tract infection, and cholecystitis.
  • bacterial opportunistic infections such as Pseudomonas aeruginosa infections), cereus infections, enterohemorrhagic
  • DNA viruses include single-stranded DNA viruses, double-stranded linear DNA viruses, and circular double-stranded DNA viruses, such as parvovirus, papovavirus (papillomavirus, etc.), hepadnavirus (hepatitis B virus, etc.). ), adenovirus, herpes virus (EB virus etc.) and pox virus.
  • RNA viruses include double-stranded RNA viruses, (+) single-stranded RNA viruses, and ( ⁇ ) single-stranded RNA viruses, such as calicivirus (Norovirus, Norwalk virus, Sapovirus, etc.), reovirus ( Rotavirus etc.), Picornavirus (Poliovirus, Hepatitis A virus etc.), Togavirus (Rubella virus etc.), Flavivirus (Dengue fever virus, Hepatitis C virus etc.), Orthomyxovirus (Influenza virus etc.), Para A myxovirus (measles virus etc.) is mentioned.
  • compound (I) may exhibit anti-RNA viral activity.
  • Compound (I) may exhibit anti-DNA viral activity.
  • the disease targeted by the antiviral drug containing the compound (I) is not particularly limited as long as it is a disease caused by the involvement of the above virus, and examples thereof include DNA virus infection and RNA virus infection.
  • viral respiratory infections cold, influenza (A, B, C), acute and chronic bronchitis, tuberculosis, viral pneumonia, etc.
  • viral gastroenteritis rotavirus infection, Norovirus infection, food poisoning, etc.
  • viral hepatitis A, B, C, etc.
  • stomatitis hand-foot-and-mouth disease, chicken pox, rubella, measles, mumps, malignant tumors (lymphoma, nasopharyngeal cancer, gastric cancer, breast cancer, etc.)
  • the disease is an RNA virus infection.
  • the disease is viral respiratory infection or viral gastroenteritis.
  • the disease is a malignancy.
  • Compound (I) can be formulated with one or more pharmaceutically acceptable carriers according to known methods commonly used in the art.
  • the content of the compound (I) in the preparation (also referred to as “pharmaceutical composition” in the present specification) varies depending on conditions such as dosage form, dose, administration subject, and the like, but is, for example, 0.1 to 100% by weight of the whole preparation. %.
  • the "pharmaceutically acceptable carrier” include excipients, disintegrants, binders, fluidizing agents, lubricants, solvents, solubilizers, solubilizing agents, suspending agents, isotonic agents.
  • the dosage form of the preparation may be either a solid dosage form or a liquid dosage form, and may be an oral or parenteral dosage form.
  • Examples of the dosage form include tablets, capsules, granules, powders, fine granules, troches, syrups, suspensions, external preparations, injections and transpulmonary preparations.
  • the dose of the preparation (also referred to as “therapeutically effective amount” in the present specification) is, for example, in the range of about 0.01 to 500 mg/kg body weight per day as compound (I), and may be administered once or several times. You may administer in divided doses.
  • Example 1 2-(1-Fluoroethyl)-5-hydroxynaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione 2-(1-Hydroxyethyl)-5-hydroxynaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione (100 mg, 0.39 mmol) obtained by the method described in Patent Document 3 was added to anhydrous dichloromethane (5 (mL) solution, Deoxo-Fluor (registered trademark) (82 ⁇ L, 0.47 mmol) was added dropwise at 0° C., and the mixture was stirred.
  • Example 5 2-(1-Fluoroethyl)-4,9-dioxo-4,9-dihydronaphtho[2,3-b]furan-5-yl acetate
  • the compound of Example 1 38.6 mg, 0.14 mmol
  • DIPEA 61 ⁇ L, 0.35 mmol
  • acetyl chloride 20 ⁇ L, 0.28 mmol
  • the reaction solution was stirred for 1 hour and then extracted with ethyl acetate.
  • the organic layer was washed with water and brine, dried over sodium sulfate, filtered and distilled under reduced pressure.
  • (+)-2-(1-Fluoroethyl)-5-hydroxynaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione and ( ⁇ )-2-(1-fluoroethyl)-5-hydroxynaphtho[ 2,3-b] Furan-4,9-dione N-(trimethylsilyl)morpholine was dropped into a dichloromethane solution of Deoxo-Fluor (registered trademark) at -78°C, and the mixture was stirred for 2.5 hours while returning to room temperature. The reaction solution was returned to ⁇ 78° C.
  • Test Example 1 Antibacterial activity test against bacteria and fungi
  • 6 kinds of bacteria Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Salmonella
  • 6 kinds of fungi Candida albicans, Cryptococcus albicans, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus fumigatus, Penicillium and Pecilomyces
  • MIC minimum inhibitory concentration
  • the viable cell count concentration may be in the range of 1.0 to 5.0 ⁇ 10 6 cells/ml.
  • the compound was dissolved in DMSO (concentration: 2000 ⁇ g/ml). Two-fold serial dilutions of compounds were made in 96-well plates (0.1-100 ⁇ g/ml). Bacteria were made in dilution series in Mueller Hinton liquid medium. 10 ⁇ l of a compound-dissolved DMSO solution was added to 190 ⁇ l of the medium in only one hole (DMSO concentration becomes 5%). 100 ⁇ l medium was added to the other holes (the 2nd to 11th holes) and serial dilution was performed.
  • a medium in which only 5 ⁇ l of DMSO was added to 95 ⁇ l of the medium was prepared, and it was confirmed that the bacteria grew even in the medium containing 5% DMSO.
  • 5 ⁇ l of each bacterial solution (bacteria) was added.
  • the bacteria were cultured at 37° C. for 18 hours, and the presence or absence of growth of the bacteria was determined.
  • the minimum concentration that did not develop was defined as MIC.
  • Tween 80 solution An appropriate amount (about 3 ml) of sterilized 0.05% Tween 80 solution was added to the slope of the PDA on which the fungus had grown using a Pasteur pipette, and pipetting was performed. A small amount of the solution was added to 0.05% Tween 80 solution in a sterile small test tube. The Tween 80 solution was slightly turbid to 10 6 cells/ml, which was confirmed by a hemocytometer. It was diluted 10 times to prepare 10 5 cells/ml of spore fluid. (3) The compound was dissolved in DMSO (concentration: 2000 ⁇ g/ml). Two-fold serial dilution series of compounds were made in 24-well plates (0.1-100 ⁇ g/ml).
  • the fungus made a dilution series in PD broth. Only one hole was added with 0.1 ml of the compound-dissolved DMSO solution to 1.9 ml of the medium (DMSO concentration 5%). For the other holes, 1 ml of medium was added and serial dilution was performed. As a control, a medium in which only DMSO was added was prepared, and it was confirmed that the bacteria grew even in the medium containing 5% DMSO. (4) 50 ⁇ l of each spore fluid (fungus) was added. (5) At 28° C., the yeasts were cultured for 3 days or the molds for 5 days, and the presence or absence of growth of the bacteria was determined. (6) The minimum concentration that did not develop was defined as MIC.
  • Test Example 2 MRSA antibacterial activity test
  • MRSA methicillin-resistant Staphylococcus aureus
  • MIC minimum inhibitory concentration
  • vancomycin having antibacterial activity against MRSA was used as a positive control.
  • the test conditions are as follows. The results are shown in the table below.
  • Test Example 3 Minimum sterilization time (Time-Kill assay)
  • a small amount of colonies (using platinum wire) on a Mueller Hinton agar plate was inoculated into 10 ml of Mueller Hinton liquid medium and cultured at 37°C for 20 hours. Then, 0.5 ml of the bacterial solution was added to 4.5 ml of 0.1% peptone-containing physiological saline to perform serial dilution. 0.1 ml of the bacterial solution at each dilution step was inoculated on the surface of two pieces of Mueller Hinton agar medium which had been dried in advance, and the whole surface of the medium was smeared with a sterile conradi stick.
  • the test liquid prepared in advance is as follows: a: Control (Muller Hinton liquid medium only) b: Addition of vancomycin (Muller Hinton liquid medium added with vancomycin at 16 times the concentration of MIC) c: test compound added (test compound at a concentration 16 times that of MIC was added to Mueller Hinton liquid medium) (4) The test solutions were adjusted so that the final volume of the Mueller-Hinton liquid medium was 50 ml. The medium was kept warm at 37° C. before the addition of the bacteria. (5) The test solution was placed in a constant temperature bath at 37°C. (6) The number of bacteria after 0, 2, 4, 6, (8), and 24 hours was measured, respectively. The measurement method was the same as in the preliminary experiment. (7) The reproducibility was confirmed by repeating the experiment three times. The results of using the compound of Example 1 as the test compound are shown in FIG.
  • Test Example 4 Virus inactivating effect test
  • Test Example 4 was carried out in accordance with the method described in "Virus Experimental Science, General Revision, Second Edition (Maruzen Co., Ltd.), Virus Neutralization Test Method", which is commonly used in this field.
  • A. Test sample As a test sample, a test compound was dissolved in a small amount of DMSO, and then the volume was adjusted with purified water to prepare a 3 ppm test solution.
  • Test microorganisms The test microorganisms used were: Influenza virus: Swine influenza virus H1N1 IOWA cell line Cultured cell: MDCK cell (dog kidney derived cell line) Feline calicivirus: Feline calicivirus F9 cultured cells: CRFK cells (cat kidney-derived cell line) C. Ward setting D. Test procedure (1) Preliminary test Prior to the test, the effect of the test sample on the cultured cells (cytotoxicity) was investigated. After the test sample was serially diluted 10-fold with a phosphate buffer, the cultured cells were inoculated, the highest concentration showing the normal state of the cultured cells was confirmed, and the virus concentration used in the test was determined.
  • test liquid mixture According to the test category, 1 mL each of the test sample and the phosphate buffer was separately collected, and the virus liquid was added to the concentration determined in the preliminary test. After adding the virus solution, the mixture was allowed to stand at room temperature (25° C.) for a predetermined time.
  • Influenza virus The test results of the compound of Example 1 against influenza virus are shown in the following table and FIG. The virus concentration used in the test was 10 9.3 TCID 50 /0.1 mL. In the control group, there was almost no change in the viral load between the start of the test and 60 minutes after the start of the test. In the test section, it became 10 8.1 TCID 50 /0.1 mL (35% decrease) 60 minutes after the start of the test.
  • Feline calicivirus The test results of the compound of Example 1 against feline calicivirus are shown in the following table and FIG. The virus concentration used in the test was 10 8.0 TCID 50 /0.1 mL.
  • the concentration was 10 6.3 TCID 50 /0.1 mL (60% decrease) 60 minutes after the start of the test.
  • Compound (I) exhibits good antibacterial activity not only against various fungi and Gram-positive bacteria but also against Gram-negative bacteria, and also exhibits a good virus-inactivating effect, and therefore is useful as an antibacterial and antiviral agent. It can be widely applied to various diseases.

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Abstract

種々の真菌及び細菌に対する抗菌活性並びに抗ウイルス活性を示すナフトキノン化合物が提供される。式（Ｉ）［式中、Ｒ１は水素又はＯＲであり、Ｒは水素、Ｃ１－６アルキル又はＣ１－６アルキル－ＣＯである］で示される化合物又はその製薬学的に許容される塩。

Description

抗菌及び抗ウイルス活性を有するナフトキノン化合物及びその医薬用途
　本発明は、抗菌及び抗ウイルス活性を有するナフトキノン化合物及びその医薬用途に関する。
　ノウゼンカズラ科タベブイア属の植物であるタヒボ（Tabebuia avellanedae）に含まれる式：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
 で示される２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（以下、「化合物Ａ」ともいう）は、種々のがん細胞に対して増殖抑制作用を示すことが知られている（特許文献１）。当該ナフトキノン化合物は、一部の真菌及び細菌に対して中程度の抗菌活性を示すことも知られているが、グラム陰性菌に対しては活性を示さない（非特許文献１）。
　非特許文献１には、化合物ＡがＥＢウイルスの初期抗原活性化を阻害することによりがん予防活性を発現し、抗ウイルス活性を示すことが開示されている。
　特許文献２には、いくつかのナフトキノン化合物について抗ウイルス活性及び抗菌活性が試験されているが、真菌及びグラム陰性菌の両方に対して活性を示す化合物は開示されていない。
特開平６－１４５１６２号公報 特開平９－２４９５６０号公報 特開２０１２－０９２０８３号公報 特開２００６－２９０８７１号公報
M. Yamashita et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry 17 (2009) 6286-6291
　本発明が解決しようとする課題の一つは、種々の真菌、細菌及びウイルスに対する抗菌及び抗ウイルス活性を示すナフトキノン化合物を提供することである。
　本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、縮合フラン環部分にフルオロアルキル基を有する三環式ナフトキノン化合物が真菌及びグラム陽性菌だけでなく、グラム陰性菌にも抗菌活性を示し、また、抗ウイルス活性を示しうることを見出し、本発明を完成した。
　すなわち、ある態様において、式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
 ［式中、Ｒ１は水素又はＯＲであり、
　Ｒは水素、Ｃ１－６アルキル又はＣ１－６アルキル－ＣＯである］
で示される化合物又はその製薬学的に許容される塩（以下、「化合物（Ｉ）」ともいう）が提供される。
　化合物（Ｉ）は、種々の真菌及びグラム陽性菌だけでなく、グラム陰性菌に対しても良好な抗菌活性を示しうる。化合物（Ｉ）はまた、良好なウイルス不活化効果を示しうる。
図１は、試験例３のTime-kill assayの結果を示す。図中、■はコントロール、▲は最小発育阻止濃度（MIC）の１６倍濃度のバンコマイシン、●はMICの１６倍濃度の実施例１化合物、それぞれの結果を示す。 図２は、試験例４のインフルエンザウイルスに対する試験結果を示す。図中、実線は対照区を示し、点線は試験区を示す。 図３は、試験例４のネコカリシウイルスに対する試験結果を示す。図中、実線は対照区を示し、点線は試験区を示す。
　本発明の具体的態様を以下に例示する。
［項１］
　式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
 ［式中、Ｒ１は水素又はＯＲであり、
　Ｒは水素、Ｃ１－６アルキル又はＣ１－６アルキル－ＣＯである］
で示される化合物又はその製薬学的に許容される塩。
［項２］
　Ｒ１がＯＨである、項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
［項３］
　項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩及び製薬学的に許容される担体を含有する抗菌薬又は抗ウイルス薬。
［項４］
　項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩及び製薬学的に許容される担体を含有する、日和見感染症、セレウス菌感染症、腸管出血性大腸菌感染症、細菌性胃腸炎、髄膜炎、肺炎、敗血症、感染性心内膜炎、尿路感染症、腹膜炎、胆道感染症、胆嚢炎、ウイルス性呼吸器感染症、ウイルス性胃腸炎及び悪性腫瘍からなる群から選択される疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物。
［項５］
　治療的有効量の項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む、日和見感染症、セレウス菌感染症、腸管出血性大腸菌感染症、細菌性胃腸炎、髄膜炎、肺炎、敗血症、感染性心内膜炎、尿路感染症、腹膜炎、胆道感染症、胆嚢炎、ウイルス性呼吸器感染症、ウイルス性胃腸炎及び悪性腫瘍からなる群から選択される疾患の治療及び／又は予防方法。
［項６］
　抗菌薬又は抗ウイルス薬として用いるための項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
［項７］
　抗菌薬又は抗ウイルス薬の製造における使用のための項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
　本明細書において用語「Ｃ１－６アルキル」は、炭素数１～６個を有する直鎖又は分枝鎖の飽和炭化水素基を意味する。「Ｃ１－６アルキル」としては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１－エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１－ジメチルブチル、２，２－ジメチルブチル、３，３－ジメチルブチル、２－エチルブチルが挙げられる。好ましくは、メチル、エチル又はイソプロピルである。
［製造方法］
　式（Ｉ）の化合物を含む式（Ｉ’）の化合物は、以下に例示する方法により製造することができる。各工程で得られる化合物は、適宜、蒸留、再結晶、カラムクロマトグラフィー等の当分野で通常用いられる公知の方法により単離及び精製してもよく、あるいは、単離又は精製せず次の工程に進んでもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
 　式中、Ｒ１は水素又はＯＲであり、Ｒは水素、Ｃ１－６アルキル又はＣ１－６アルキル－ＣＯであり、Ｘはフッ素、塩素又は臭素である。
　上記製法における工程１～工程５は、公知の方法に従って行うことができ、例えば特許文献３及び４に記載の方法に従い行ってもよい。
　工程６において、化合物（Ｉ’）は、化合物（ＩＩ）を脱酸素的フッ素化又は塩素化もしくは臭素化することにより製造することができる。
（脱酸素的フッ素化）
　化合物（ＩＩ）を脱酸素的フッ素化剤でフッ素化することにより、Ｘがフッ素である化合物（Ｉ’）を製造することができる。
　脱酸素的フッ素化剤としては、例えば三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）、ビス（２－メトキシエチル）アミノ硫黄トリフルオリド（Deoxo-Fluor（登録商標））が挙げられる。好ましくは、ビス（２－メトキシエチル）アミノ硫黄トリフルオリドである。
　溶媒としては、例えばジクロロメタン等の無極性溶媒が挙げられる。
　出発物質として光学活性体を用いて脱酸素的フッ素化を添加剤存在下で行った場合には、化合物（Ｉ’）の光学活性体を得ることができる。
　添加剤としては、フッ素化に伴う生成物のラセミ化を抑制する試薬であれば特に限定されないが、例えばアミンが挙げられる。当該アミンとしては、例えばモルホリン、Ｎ－（トリメチルシリル）モルホリン、ピロリジン、Ｎ－メチルピロリジンが挙げられる。好ましくは、Ｎ－（トリメチルシリル）モルホリンである。
　Ｒ１がＣ１－６アルキル－Ｏ又はＣ１－６アルキル－ＣＯＯである化合物（Ｉ’）は、Ｒ１がＯＨである化合物（Ｉ’）を当分野において通常用いられる公知の方法に従って処理することにより製造してもよい。
　例えばＲ１がＯＡｃである化合物（Ｉ’）は、Ｒ１がＯＨである化合物（Ｉ’）をアミン存在下、アセチル化剤で処理することにより製造することができる。
　アミンとしては、例えばトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、トリイソプロピルアミンが挙げられる。好ましくは、ＤＩＰＥＡである。
　アセチル化剤としては、例えば塩化アセチル、無水酢酸が挙げられる。好ましくは、塩化アセチルである。
　溶媒としては、例えばＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等の非プロトン性極性溶媒が挙げられる。
（塩素化）
　化合物（ＩＩ）を塩基存在下、塩素化剤で塩素化することにより、Ｘが塩素である化合物（Ｉ’）を製造することができる。
　塩基としては、例えばピリジンが挙げられる。
　塩素化剤としては、例えば塩化チオニルが挙げられる。
　溶媒としては、例えばジクロロメタン等の無極性溶媒が挙げられる。
（臭素化）
　化合物（ＩＩ）を、臭素化剤で臭素化することにより、Ｘが臭素である化合物（Ｉ’）を製造することができる。
　臭素化剤としては、例えば三臭化リンが挙げられる。
　溶媒としては、例えばジクロロメタン等の無極性溶媒が挙げられる。
［抗菌薬］
　本明細書において用語「抗菌薬」には、抗真菌薬及び抗細菌薬（本明細書において「抗生物質」ともいう）が含まれる。
　真菌としては、例えばカンジダ・アルビカンス、クリプトコッカス・アルビカンス、出芽酵母、コウジカビ類（アスペルギルス・フミガーツス等）、アオカビ類（Penicillium expansum等）、ペシロマイセス（Paecilomyces variotii等）が挙げられる。
　細菌としては、例えばグラム陽性菌、グラム陰性菌が挙げられる。グラム陽性菌としては、例えば枯草菌、黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、セレウス菌が挙げられる。グラム陰性菌としては、例えば大腸菌、緑膿菌、サルモネラ菌が挙げられる。好ましいグラム陰性菌は大腸菌及びサルモネラ菌である。
　化合物（Ｉ）の抗菌活性としては、上記真菌及び細菌に対する殺菌活性及び静菌活性が挙げられる。抗菌薬としては、殺菌性抗菌薬及び静菌性抗菌薬が挙げられる。ある態様において、化合物（Ｉ）は殺菌活性を示し、殺菌性抗菌薬として有用であり得る。別の態様において、化合物（Ｉ）は静菌活性を示し、静菌性抗菌薬として有用であり得る。
　化合物（Ｉ）を含む抗菌薬が対象とする疾患としては、上記真菌及び細菌が関与して引き起こされる疾患であれば特に限定されないが、例えば日和見感染症（カンジダ症、クリプトコッカス症、アスペルギルス症等の真菌性日和見感染症；及びＭＲＳＡ感染症、緑膿菌感染症等の細菌性日和見感染症を含む）、セレウス菌感染症、腸管出血性大腸菌感染症（Ｏ１５７感染症等）、細菌性胃腸炎（サルモネラ感染症等）、髄膜炎（細菌性髄膜炎、クリプトコッカス髄膜炎等）、肺炎（マイコプラズマ肺炎、院内肺炎等）、敗血症、感染性心内膜炎、尿路感染症（膀胱炎、腎盂腎炎等）、腹膜炎（一次性腹膜炎、特発性細菌性腹膜炎、続発性腹膜炎等）、胆道感染症、胆嚢炎が挙げられる。
［抗ウイルス薬］
　本明細書において用語「抗ウイルス薬」には、ＤＮＡウイルス及びＲＮＡウイルスのいずれか又は両方に対して有効な薬剤が含まれ、化合物（Ｉ）はこれらのウイルスに対して抗ウイルス活性を示しうる。ＤＮＡウイルスには、一本鎖ＤＮＡウイルス、二本鎖直鎖型ＤＮＡウイルス及び環状二本鎖ＤＮＡウイルスが含まれ、例えばパルボウイルス、パポバウイルス（パピローマウイルス等）、ヘパドナウイルス（Ｂ型肝炎ウイルス等）、アデノウイルス、ヘルペスウイルス（ＥＢウイルス等）及びポックスウイルスが挙げられる。ＲＮＡウイルスには、二本鎖ＲＮＡウイルス、（＋）一本鎖ＲＮＡウイルス及び（－）一本鎖ＲＮＡウイルスが含まれ、例えばカリシウイルス（ノロウイルス、ノーウォークウイルス、サポウイルス等）、レオウイルス（ロタウイルス等）、ピコルナウイルス（ポリオウイルス、Ａ型肝炎ウイルス等）、トガウイルス（風疹ウイルス等）、フラビウイルス（デング熱ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス等）、オルトミクソウイルス（インフルエンザウイルス等）、パラミクソウイルス（麻疹ウイルス等）が挙げられる。ある態様において、化合物（Ｉ）は抗ＲＮＡウイルス活性を示しうる。別の態様において、化合物（Ｉ）は抗ＤＮＡウイルス活性を示しうる。
　化合物（Ｉ）を含む抗ウイルス薬が対象とする疾患としては、上記ウイルスが関与して引き起こされる疾患であれば特に限定されないが、例えばＤＮＡウイルス感染症、ＲＮＡウイルス感染症が挙げられる。具体的には、ウイルス性呼吸器感染症（風邪、インフルエンザ（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型）、急性及び慢性気管支炎、結核、ウイルス性肺炎等）、ウイルス性胃腸炎（ロタウイルス感染症、ノロウイルス感染症、食中毒等）、ウイルス性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型等）、口内炎、手足口病、水疱瘡、風疹、麻疹、おたふくかぜ、悪性腫瘍（リンパ腫、上咽頭癌、胃癌、乳癌等）が挙げられる。ある態様において、当該疾患は、ＲＮＡウイルス感染症である。別の態様において、当該疾患は、ウイルス性呼吸器感染症又はウイルス性胃腸炎である。さらに別の態様において、当該疾患は、悪性腫瘍である。
［医薬組成物］
　化合物（Ｉ）は、当分野において通常用いられる公知の方法に従い、１種以上の製薬学的に許容される担体とともに製剤化することができる。該製剤（本明細書において「医薬組成物」ともいう）中の化合物（Ｉ）の含量は、剤形、投与量、投与対象等の条件により異なるが、例えば製剤全体の０．１～１００重量％である。
　「製薬学的に許容される担体」としては、例えば賦形剤、崩壊剤、結合剤、流動化剤、滑沢剤、溶剤、溶解剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、基剤、乳化剤、湿潤剤、安定剤、安定化剤、分散剤、可塑剤、ｐＨ調節剤、吸収促進剤、ゲル化剤、防腐剤、充填剤、抗酸化剤、着色剤等の当分野において通常用いられる添加成分が挙げられる。
　該製剤の剤形は、固形剤及び液剤のいずれであってもよく、また、経口及び非経口剤形のいずれであってもよい。該剤形としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、トローチ剤、シロップ剤、懸濁剤、外用剤、注射剤、経肺剤が挙げられる。
　該製剤の投与量（本明細書において「治療的有効量」ともいう）は、例えば化合物（Ｉ）として１日あたり約０．０１～５００ｍｇ／体重ｋｇの範囲であり、１回で又は数回に分けて投与してもよい。
　以下に実施例、参考例及び試験例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　実施例等で用いた分析装置及び測定機器の測定条件等を以下に示す。
（ＮＭＲ）BioSpin AVANCEIII 400 MHz（Bruker社製）
　測定溶媒は特に記載がない場合を除き，CDCl3を用いた。
（ＩＲ）フーリエ変換赤外分光光度計（IRAffinty-1S：株式会社島津製作所製）
　油状試料は液膜法にて，固体試料は臭化カリウム（KBr）錠剤法にて測定した。
（ＨＲＭＳ）四重極－飛行時間型質量分析計（MICROMASS Q-Tof PREMIER：Waters社製））
　測定試料はメタノールに溶解させた後に測定した。高分解能質量分析はカラムを用いず，測定試料をダイレクトインジェクションすることにより測定した。
（ＨＰＬＣ）Prominence（株式会社島津製作所製）
（ＨＰＬＣキラルカラム）
　CHIRALPAK AD-H（株式会社ダイセル製）
　溶離条件：ヘキサン：２－プロパノール＝９：１　１．０ｍＬ／ｍｉｎ
　CHIRALFLASH IA（株式会社ダイセル製）
　溶離条件：ヘキサン：酢酸エチル＝２：１　２４.０ｍＬ／ｍｉｎ
（旋光度）P-2200（日本分光株式会社製）
　測定溶媒は特に記載がある場合を除き，クロロホルムを用いた。
［実施例］
（実施例１）
２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
 　特許文献３に記載の方法で得られた２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（100 mg, 0.39 mmol）を無水ジクロロメタン（5 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（82μL, 0.47 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し3時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 2:1）により精製すると，標題化合物（78.6 mg, 78%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.46.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.80 (dd, J = 6.7 Hz, 23.2 Hz, 3H), 5.75 (dq, J = 6.6 Hz, 13.1 Hz, 47.6 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 1.2 Hz, 8.5 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 8.5 Hz, 7.5 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.2 Hz, 7.5 Hz, 1H), 12.17 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 19.2 (d, J = 23.9 Hz, CH3), 83.1 (d, J = 168.9 Hz, CH), 105.7 (d, J = 4.4 Hz, CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.6 (d, J = 1.7 Hz, C), 132.6 (C), 136.4 (CH), 152.5 (d, J = 1.6 Hz, C), 160.0 (d, J = 24.1 Hz, C), 162.4 (C), 172.7 (C), 186.2 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -169.6 (s, 1F)
IR (KBr): 704.02, 831.32, 1035.77, 1228.66, 1319.31, 1336.67, 1450.47, 1539.20, 1641.42, 1674.21 cm-1
HRMS (ESI) m/z: [M+Na]+ calcd for [C14H9F1Na]+, 267.0433; Found, 267.0439
（実施例２）
２－（１－フルオロエチル）ナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
 　特許文献３に記載の方法と同様にして得られた２－（１－ヒドロキシエチル）ナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（50 mg, 0.2 mmol）を無水ジクロロメタン（4.0 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（43.5μL, 0.25 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し3時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 4:1）により精製すると，標題化合物（36.3 mg, 74.4%）を得た。
黄色固体, Rf (ヘキサン/EtOAc = 4/1) = 0.33.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.31 (dd, J = 6.6 Hz, 23.2 Hz, 3H), 5.73 (dq J = 6.7 Hz, 47.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.75-7.78 (m, 2H), 8.18-8.24 (m, 2H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 19.2 (d, J = 24.1 Hz, CH3), 83.2 (d, J = 168.7 Hz, CH), 106.1 (d, J = 4.7 Hz, CH), 127.0 (CH), 127.1 (CH), 130.9 (C), 132.4 (C), 133.0 (C), 134.0 (CH), 134.0 (CH), 152.4 (C), 159.8 (d, J = 24.6 Hz, C), 173.5 (C), 180.3 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -169.2 (s, 1F)
IR (KBr): 717.52, 842.89, 943.19, 956.69, 1064.71, 1197.79, 1220.94, 1340.53, 1541.12, 1593.20, 1672.28 cm-1
HRMS (ESI) m/z: [M+Na]+ calcd for [C14H9F1Na]+, 267.0433; Found, 267.0439
（実施例３）
２－（１－クロロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
 　特許文献３に記載の方法で得られた２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（50 mg, 0.19 mmol）を無水ジクロロメタン（10 ml）溶液に溶かした後，0℃にて塩化チオニル（70μL, 0.97 mmol）を滴下し撹拌した。2時間撹拌後，ピリジン（156.1μL, 1.9 mmol）を加え，室温に戻し0.5時間撹拌した。その後，反応液を減圧蒸留し，シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 2:1）により精製すると，標題化合物（39.9 mg, 75%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.5.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.96 (d, J = 6.99 Hz, 3H), 5.17 (dq, J = 0.56, 6.99 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 0.56, 1H), 7.28 (dd, J = 1.17, 8.49 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.50, 8.49, 1H), 7.77 (dd, J = 1.17, 7.50 Hz, 1H), 12.15 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 23.0 (CH3), 48.6 (CH), 105.1 (CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.8 (C), 132.7 (C), 136.4 (CH), 152.3 (C), 161.7 (C), 162.4 (C), 172.6 (C), 186.2 (C)
（実施例４）
２－（１－ブロモエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
 　特許文献３に記載の方法で得られた２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（50 mg, 0.19 mmol）を無水ジクロロメタン（10 ml）溶液に溶かした後，室温にてPBr3（22μL, 0.23 mmol）を滴下し撹拌した。0.5時間撹拌後，反応液を減圧蒸留し，シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 1:1）により精製すると，標題化合物（18 mg, 90%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 1/1) = 0.7.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 2.12 (d, J = 7.03 Hz, 3H), 5.24 (q, J = 7.03 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 7.28 (dd, J = 1.16, 8.51 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.46, 8.51 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 1.16, 7.46 Hz, 1H), 12.15 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 23.5 (CH3), 36.4 (CH), 104.8 (CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.9 (C), 132.7 (C), 136.4 (CH), 152.1 (C), 162.2 (C), 162.4 (C), 172.6 (C), 186.1 (C)
（実施例５）
２－（１－フルオロエチル）－４，９－ジオキソ－４，９－ジヒドロナフト［２，３－ｂ］フラン－５－イルアセテート
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
 　実施例１の化合物（38.6 mg, 0.14 mmol）をDMF（10 ml）溶液に溶かした後，0℃にてDIPEA（61μL, 0.35 mmol）と塩化アセチル（20μL, 0.28 mmol）を加えた。反応液を1時間撹拌後，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 2:1）により精製すると，標題化合物（18 mg, 90%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.67.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.79 (dd, J = 6.78, 23.2 Hz, 3H), 5.71 (dq, J = 1.25, 8.12 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 2.52 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 1.25, 8.12 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 7.67, 8.12 Hz, 1H), 8.20 (dd, J = 1.25, 7.67 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 19.2 (d, J = 24.0 Hz, CH3), 21.1 (CH3), 83.1 (d, J = 169.0 Hz, CH), 106.2 (d, J = 4.51 Hz, CH), 124.1 (C), 125.6 (CH), 130.3 (CH), 131.7 (d, J = 1.81 Hz, C), 134.4 (C), 134.9 (CH), 150.4 (C), 151.2 (C), 160.1 (d, J = 24.2 Hz, C), 169.5 (C), 172.5 (C), 179.2(C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -169.7 (s, 1F)
（実施例６）
（＋）－２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン及び（－）－２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
 　-78℃条件下，Deoxo-Fluor（登録商標）のジクロロメタン溶液中にＮ－（トリメチルシリル）モルホリンを滴下し，室温に戻しながら，2.5時間撹拌した。反応液を再度-78℃に戻し，特許文献３に記載の方法で得られた（－）－２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオンを滴下することで脱酸素的フッ素化を行い、（＋）－２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオンを得た。当該化合物の光学純度をHPLCキラルカラム（CHIRALPAK AD-H）で測定した。脱酸素的フッ素化を室温で行った場合には，90%eeの光学純度を示した。脱酸素的フッ素化を-20℃で行った場合には，92%eeの光学純度であった。結果を以下の表に示す。光学的に純粋な（＋）－２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオンは上記のようにして得られた化合物を分取用HPLCキラルカラム（DAICEL, CHIRALFLASH IA）で分離精製することで得た（Hex:EtOAc = 2:1）。
比旋光度：[α]D 25 +10.9 (c 0.5, CHCl3)
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000012

　また、（－）－２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオンは、特許文献３に記載の方法で得られた（＋）－２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオンを出発原料とし、上記の方法を用いて合成した。
比旋光度：[α]D 25 -10.5 (c 0.5, CHCl3)
[参考例]
（参考例１）
２－（１，１－ジフルオロエチル）－５－ヒドロキシ－２，３－ジヒドロナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
 　特許文献４に記載の方法で得られた２－アセチル－２，３－ジヒドロ－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（200 mg, 0.78 mmol）を無水ジクロロメタン（8 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（408μL, 2.33 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し3時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Rf = 0.5, ヘキサン：酢酸エチル = 2:1）により精製すると，標題化合物（174.5 mg, 80%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.5.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.81 (t, J = 18.9 Hz, 3H), 3.26-3.40 (m, 2H), 4.98-5.08 (m, 1H), 7.28 (dd, J = 1.1 Hz, 8.4 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 7.5 Hz, 8.4 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 1.1 Hz, 7.5 Hz, 1H), 12.11 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 20.2 (dd, J = 25.8 Hz, 25.6 Hz, CH3), 27.2 (dd, J = 2.5 Hz, 4.0 Hz, CH2), 84.4 (dd, J = 29.1 Hz, 37.4 Hz, CH), 114.7 (C), 119.6 (CH), 120.7 (dd, J = 239.1 Hz, 245.4 Hz, C), 123.9 (C), 125.9 (CH), 131.7 (C), 135.4 (CH), 160.2 (C), 161.3 (C), 176.2 (C), 187.6 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -109.9 (d, J = 257.7 Hz, 1F), -101.9 (d, J = 257.7 Hz, 1F)
IR (KBr): 758, 1037, 1159, 1219, 1238, 1340, 1452, 1618, 1651, 1681 cm-1
HRMS (ESI) m/z: [M+H]+ calcd for [C14H11F2]+, 281.0625; Found, 281.0617
（参考例２）
２－（１，１－ジフルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
 　参考例１の化合物（168 mg, 0.6 mmol）及び活性化二酸化マンガン（1.3 g, 15 mmol）をトルエン（20 mL）溶液に加え，130℃にて3時間，加熱還流した。反応液を室温まで冷却後，セライト濾過を行い，減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex：EtOAc＝5:1）により精製すると，標題化合物（50 mg, 30%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 5/1) = 0.23.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 2.09 (t, J = 18.4 Hz, 3H), 7.14 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 1.2 Hz, 8.5 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 7.5 Hz, 8.5 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.2 Hz, 7.5 Hz, 1H), 12.11 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 23.2 (t, J = 26.9 Hz, CH3), 106.2 (t, J = 3.1 Hz, CH), 115.2 (C), 116.1 (t, J = 237.1 Hz, C), 120.3 (CH), 125.7 (CH), 130.2 (C), 132.5 (C), 136.5 (CH), 152.7 (C), 155.2 (t, J = 37.9 Hz, C), 162.5 (C), 172.7(C), 185.8 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -89.0 (s, 2F)
IR (KBr): 756.1, 1228.66, 1276.88, 1641.42, 1670.35 cm-1
HRMS (ESI) m/z: [M+H]+ calcd for [C14H9F2]+, 279.0469; Found, 279.0457
（参考例３）
２－（１，１－ジフルオロエチル）－２，３－ジヒドロナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
 　特許文献４に記載の方法と同様にして得られた２－アセチル－２，３－ジヒドロナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン（200 mg, 0.83 mmol）を無水のジクロロメタン（8 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（435.3μL, 2.48 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し3時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 2:1）により精製すると，標題化合物（176.2 mg, 81%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.42.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.81 (t, J = 18.9 Hz, 3H), 3.28-3.41 (m, 2H), 5.00-5.06 (m, 1H), 7.70 (ddd, J = 1.6 Hz, 7.5 Hz, 14.2 Hz, 1H), 7.75 (ddd, J = 1.6 Hz, 7.5 Hz, 14.2 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 1.5 Hz, 4.8 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 1.5 Hz, 4.8 Hz, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 20.2 (dd, J = 25.8 Hz, 52.1 Hz, CH3), 27.7 (dd, J = 2.2 Hz, 4.5 Hz, CH2), 84.1 (dd, J = 29.2 Hz, 37.2 Hz, CH), 120.9 (dd, J = 239.8 Hz, 245.5 Hz, C), 124.3 (C), 126.2 (CH), 126.4 (CH), 131.5 (C), 132.8 (C), 133.2 (CH), 134.3 (CH), 159.4 (C), 177.0 (C), 181.8 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -109.7 (d, J = 256.1 1F), -101.8 (d, J = 256.1 1F)
IR (KBr): 418.55, 723.31, 916.19, 989.48, 1112.93, 1163.08, 1195.87, 1207.44, 1246.02, 1294.24, 1357.89, 1386.82, 1633.71, 1656.85, 1683.86 cm-1
HRMS (ESI) m/z: [M+Na]+ calcd for [C14H10F2Na]+, 287.0496; Found, 287.0503
（参考例４）
２－（１，１－ジフルオロエチル）ナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
 　参考例３の化合物（39.8 mg, 0.15 mmol）及び活性化二酸化マンガン（327.7 mg, 3.77 mmol）をトルエン（3 mL）溶液に加え，130℃にて3時間，加熱還流した。反応液を室温まで冷却後，セライト濾過を行い，減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex：EtOAc ＝2:1）により精製すると，標題化合物（23.7 mg, 60%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.5.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 2.09 (t, J = 18.3 Hz, 3H), 7.16 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78-7.80 (m, 2H), 8.20-8.26 (m, 2H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 23.2 (t, J = 27.0 Hz, CH3), 106.5 (t, J = 3.2 Hz, CH), 116.2 (t, J = 236.7 Hz, C), 127.1 (CH), 127.2 (CH), 130.4 (C), 132.3 (C), 133.0 (C), 134.2 (CH), 134.2 (CH), 152.6 (C), 155.0 (t, J = 37.6 Hz, C), 173.5 (C), 178.0 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -89.0 (s, 2F)
IR (KBr): 418.55, 717.52, 894.97, 964.41, 1128.36, 1188.15, 1234.44, 1273.02, 1290.38, 1369.46, 1593.20, 1681.93 cm-1
HRMS (ESI) m/z: [M+Na]+ calcd for [C14H8F2Na]+, 285.0339; Found, 285.0347
（参考例５）
５－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシ（フェニル）メチル）ナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
 　特許文献３に記載の方法で得られた２，５－ヒドロキシ－３－ヨードナフタレン－１，４－ジオン（100 mg, 0.3 mmol）をDMF及びピリジン（5:4）溶液中(9 ml)に添加し，さらに酸化銅（I）（45.2mg, 0.3mmol）と１－フェニル－２－プロピン－１－オール（77μL, 0.6 mmol），酢酸パラジウム（2.2 mg, 0.01 mmol）を加え，80℃で1時間，加熱攪拌した。反応液を室温まで冷却後，クロロホルムにて抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 1:1）により精製すると，標題化合物（48.6 mg, 48%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 1/1) = 0.67.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 2.80 (d, J = 4.23 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 3.65 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 0.82 Hz 1H), 7.25 (dd, J = 1.19, 8.31 Hz, 1H), 7.35-7.49 (m, 5H), 7.60 (dd, J = 7.64, 8.32 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 1.17, 7.46 Hz, 1H), 12.14 (s, 1H)
（参考例６）
２－（フルオロ（フェニル）メチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
 　参考例５の化合物（48.6 mg, 0.15 mmol）を無水のジクロロメタン（4.0 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（32μL, 0.18 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し0.5時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 3:1）により精製すると，標題化合物（43.4 mg, 90%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 3/1) = 0.43.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 6.53 (d, J = 46.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 2.47 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 1.14, 8.40 Hz, 1H), 7.49-7.45 (m, 5H), 7.62 (dd, J = 7.52, 8.40 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.14, 7.52 Hz), 12.12 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 87.1 (d, J = 173.8 Hz, CH), 107.5 (d, J = 4.15 Hz, CH), 115.1 (C), 120.2 (CH), 125.5 (CH), 126.5 (CH), 126.6 (CH), 129.0 (CH), 129.0 (CH), 129.8 (d, J = 1.68, CH), 130.5 (C), 132.6 (C), 135.1 (d, J = 21.9 Hz, C), 136.4 (CH), 153.0 (C), 159.2 (d, J = 27.4 Hz, C), 162.4 (C), 172.8 (C), 186.1 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -169.7 (s, 1F)
（参考例７）
５－ヒドロキシ－２－（１－ヒドロキシブチル）ナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
 　特許文献３に記載の方法で得られた２，５－ヒドロキシ－３－ヨードナフタレン－１，４－ジオン（100 mg, 0.3 mmol）をDMF及びピリジン（5:4）溶液中(9 ml)に添加し，さらに酸化銅（I）（45.3 mg, 0.3 mmol）と１－ヘキシン－３－オール（70.6μL, 0.6 mmol），酢酸パラジウム（2.2 mg, 0.01 mmol）を加え，100℃で2時間，加熱攪拌した。反応液を室温まで冷却後，クロロホルムにて抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 1:1）により精製すると，標題化合物（54.1 mg, 60%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 1/1) = 0.6.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 0.99 (t, J = 7.41 Hz, 3H), 1.39-1.58 (m, 2H), 1.85-1.99 (m, 2H), 2.28 (s, 1H), 4.87 (dd, J = 5.46, 7.40 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 7.26 (dd, J = 0.99, 8.32 Hz, 1H), 7.60 (dd, J =7.74, 8.32 Hz, 1H), 7.75 (dd, J =0.99, 7.74 Hz, 1H), 12.16 (s, 1H)
（参考例８）
２－（１－フルオロブチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］フラン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
 　参考例７の化合物（20 mg, 0.07 mmol）を無水のジクロロメタン（4.0 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（18.4μL, 0.1 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し0.5時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 2:1）により精製すると，標題化合物（18 mg, 90%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 2/1) = 0.67.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.01 (t, J = 7.44, 3H), 1.43-1.61 (m, 2H), 1.93-2.21 (m, 2H), 5.56 (ddd, J = 5.16, 8.35, 47.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 2.20 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 1.10, 8.49 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 7.51, 8.49 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.10, 7.51 Hz, 1H), 12.14 (s, 1H) 
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 13.6 (CH3), 18.0 (d, J = 4.05 Hz, CH2), 35.3 (d, J = 22.4 Hz, CH2), 86.6 (d, J = 171.7 Hz, CH2), 105.9 (d, J = 4.5 Hz, CH), 115.2 (C), 120.1 (CH), 125.4 (CH), 130.7 (d, J = 1.6 Hz, C), 132.6 (C), 136.4 (CH), 152.5 (d, J = 1.5 Hz, C), 159.8 (d, J = 25.7 Hz, C), 162.4 (C), 172.7 (C), 186.2 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -177.5 (s, 1F)
（参考例９）
２－（１－フルオロエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］チオフェン－４，９－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
 　特許文献３に記載の方法で得られた２－（１－ヒドロキシエチル）－５－ヒドロキシナフト［２，３－ｂ］チオフェン－４，９－ジオン（20 mg, 0.08 mmol）を無水ジクロロメタン（4.0 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（21μL, 0.12 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し0.5時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 1:1）により精製すると，標題化合物（19.6 mg, 97%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 1/1) = 0.67.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.81 (dd, J = 6.49, 23.4 Hz, 3H), 5.89 (ddq, 0.70, 6.41, 47.7 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 1.17, 8.50 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 0.70, 2.23, 1H), 7.64 (dd, J = 7.50, 8.50 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 0.70, 7.50 Hz, 1H), 12.3 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 22.6 (d, J = 24.0 Hz, CH), 86.3 (d, J = 170.6 Hz, CH), 115.6 (C), 120.0 (CH), 123.0 (d, J = 5.72, CH), 125.0 (CH), 133.7 (C), 136.3 (CH), 142.1 (C), 145.4 (C), 153.8 (d, J = 22.1, C), 162.7 (C), 177.3 (C), 184.8 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -158.0 (s, 1F)
（参考例１０）
２－（１－フルオロエチル）－６－ヒドロキシナフト［１，２－ｂ］フラン－４，５－ジオン
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
 　特許文献３に記載の方法で得られた２－（１－ヒドロキシエチル）－６－ヒドロキシナフト［１，２－ｂ］フラン－４，５－ジオン（20 mg, 0.08 mmol）を無水ジクロロメタン（4.0 mL）溶液に溶かした後，0℃にてDeoxo-Fluor（登録商標）（21μL, 0.12 mmol）を滴下し撹拌した。反応液を室温に戻し0.5時間撹拌後，水にてクエンチを行い，酢酸エチルで抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥後，濾過し，そして減圧蒸留した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hex:EtOAc = 1:1）により精製すると，標題化合物（14.6 mg, 73%）を得た。
黄色固体. Rf (ヘキサン/EtOAc = 1/1) = 0.67.
1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 1.78 (dd, J = 6.60, 22.4 Hz, 3H), 5.65 (dq, J = 6.60, 48.6 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 4.00, 1H), 7.06 (dd, J = 0.72, 8.62 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 0.72, 7.39 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 7.39, 8.62 Hz, 1H), 12.01 (s, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 18.7 (d, J = 24.3 Hz, CH), 82.7 (d, J = 166.7 Hz, CH), 106.7 (d, J = 5.70 Hz, CH), 112.4 (C), 115.4 (CH), 121.5 (d, J = 2.01 Hz, C), 121.8 (CH), 127.6 (C), 138.8 (CH), 156.1 (d, J = 20.6 Hz, C), 160.0 (C), 165.8 (C), 174.0 (C), 184.0 (C)
19F-NMR (CDCl3, 400MHz): δ -165.0 (s, 1F)
［試験例］
（試験例１：細菌及び真菌に対する抗菌活性試験）
　被検化合物について、細菌６種（枯草菌、黄色ブドウ球菌、セレウス菌、大腸菌、緑膿菌及びサルモネラ菌）及び真菌６種（カンジダ・アルビカンス、クリプトコッカス・アルビカンス、出芽酵母、アスペルギルス・フミガーツス、ペニシリウム及びペシロマイセス）に対する抗菌活性試験を以下の方法に従って行い、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を測定した。陽性対照として、グラム陽性菌に対する抗菌活性を有するバンコマイシン、グラム陰性菌に対する抗菌活性を有するシプロフロキサシン及び真菌に対する抗菌活性を有するアムホテリシンＢを用いた。
（ＭＩＣの測定：細菌）
（１）細菌はミューラーヒントン平面培地に接種して３７℃、１８時間増菌培養した。
（２）滅菌０．８５％生理食塩水で生菌数濃度１０６個／ｍｌの菌液を作製した。まず、滅菌小試験管に０．８５％滅菌生理食塩水３ｍｌを加え、白金線でコロニーを釣菌して懸濁した。その際、懸濁液をマクファーランド濁度標準液Ｎｏ．０．５で１．５×１０８ＣＦＵ／ｍｌの濁度になるように調整した。それを１００倍希釈し、１．５×１０６ＣＦＵ／ｍｌの菌液を作製した。ここで、生菌数濃度は、１．０～５．０×１０６個／ｍｌの範囲内であってもよい。
（３）化合物をＤＭＳＯに溶解した（濃度：２０００μｇ／ｍｌ）。９６穴プレートで化合物の２倍階段希釈系列を作製した（０．１～１００μｇ／ｍｌ）。細菌はミューラーヒントン液体培地で希釈系列を作製した。一つの穴のみ、培地１９０μｌに化合物溶解ＤＭＳＯ液を１０μｌ加えた（ＤＭＳＯ濃度５％となる）。その他の穴（２～１１番目）は１００μｌ培地を添加し、階段希釈を行った。コントロールとして、培地９５μｌにＤＭＳＯ５μｌのみ添加したものを作製し、５％ＤＭＳＯ添加培地でも菌が発育することを確認した。
（４）各菌液（細菌）を５μｌずつ添加した。
（５）細菌は３７℃、１８時間培養し、菌の発育の有無を判定した。
（６）発育しなかった最小の濃度を、ＭＩＣとした。
（ＭＩＣの測定：真菌）
（１）真菌はＰＤＡ（ポテトデキストロース寒天）斜面培地に接種し、２８℃で酵母類について３日間又はカビ類について５日間培養した。
（２）滅菌０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０液で胞子数濃度１．０～２．０×１０５個／ｍｌの菌液を作製した。まず、滅菌小試験管に滅菌０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０液２～３ｍｌを加えた。真菌が発育したＰＤＡ斜面にパスツールピペットで滅菌０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０液を適量（約３ｍｌ）加え、ピペッティングした。その液の少量を滅菌小試験管の０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０液に加えた。Ｔｗｅｅｎ８０液がうっすらと濁る程度で１０６個／ｍｌとなり、血球計算盤で確認した。それを１０倍希釈し、１０５個／ｍｌの胞子液を作製した。
（３）化合物をＤＭＳＯに溶解した（濃度：２０００μｇ／ｍｌ）。２４穴プレートで化合物の２倍階段希釈系列を作製した（０．１～１００μｇ／ｍｌ）。真菌はＰＤブロスで希釈系列を作製した。一つの穴のみ、培地１．９ｍｌに化合物溶解ＤＭＳＯ液を０．１ｍｌ加えた（ＤＭＳＯ濃度５％）。その他の穴は培地１ｍｌを添加し、階段希釈を行った。コントロールとして、培地にＤＭＳＯのみ添加したものを作製し、５％ＤＭＳＯ添加培地でも菌が発育することを確認した。
（４）各胞子液（真菌）を５０μｌずつ添加した。
（５）２８℃にて，酵母類について３日間又はカビ類について５日間培養し、菌の発育の有無を判定した。
（６）発育しなかった最小の濃度を、ＭＩＣとした。
　結果を以下の表に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000023

Figure JPOXMLDOC01-appb-I000024

　参考例化合物についても同様の試験を行い、ＭＩＣを測定した。結果を以下の表に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000025

Figure JPOXMLDOC01-appb-I000026

（試験例２：ＭＲＳＡに対する抗菌活性試験）
　被検化合物について、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）に対する抗菌活性試験を以下の方法に従って行い、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を測定した。陽性対照として、ＭＲＳＡに対する抗菌活性を有するバンコマイシンを用いた。
　９６穴マイクロプレートに検体希釈液１００μＬを分注後、試験菌液５μＬを接種した。３７℃±１℃で１８～２４時間培養後、菌の発育が阻止された最低濃度を最小発育阻止濃度とした。試験条件は以下のとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000027

　結果を以下の表に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000028
（試験例３：最小殺菌時間（Time-Kill assay））
Ａ．菌数測定の予備実験
　ミューラーヒントン寒天平板上のコロニー少量（白金線使用）をミューラーヒントン液体培地10 mlに接種し、37℃20時間培養した。そして、0.5 mlの菌液を4.5 mlの0.1%ペプトン加生理食塩水に加えて階段希釈した。各希釈段階の菌液0.1 mlをあらかじめ乾かしたミューラーヒントン寒天培地2枚の表面にそれぞれ接種し、滅菌コンラージ棒で培地全面に塗抹した。37℃24時間培養後、菌数を測定した。30～300個の平板の菌数を採用した(2枚の平均値)。当該平均値を20時間培養後の菌数の予測値とした。
Ｂ．Time-kill assay
（１）試験前日に、ミューラーヒントン寒天平板上のコロニー少量（白金線使用）をミューラーヒントン液体培地１０ｍｌに接種し、３７℃２０時間培養した。
（２）試験当日、上記予備実験で得た予測値に基づき、菌量が５×１０６個／ｍｌになるように培養液を希釈して試験液ａ～ｃに加えた。
（３）あらかじめ作製した試験液は以下のとおりである：
　ａ：コントロール（ミューラーヒントン液体培地のみ）
　ｂ：バンコマイシン添加（ミューラーヒントン液体培地にＭＩＣの16倍濃度のバンコマイシンを加えた）
　ｃ：被検化合物添加（ミューラーヒントン液体培地にＭＩＣの16倍濃度の被検化合物を加えた）
（４）試験液はそれぞれミューラーヒントン液体培地の最終量が５０ｍｌになるように調整した。菌を添加する前にあらかじめ培地を３７℃で保温しておいた。
（５）試験液を３７℃の恒温槽に入れた。
（６）それぞれ、０，２，４，６，（８），２４時間後の菌数を測定した。測定方法は上記予備実験と同様に行った。
（７）実験を３回繰り返して再現性を確認した。
　被検化合物として実施例１化合物を用いた結果を図１に示す。
（試験例４：ウイルス不活化効果試験）
　被検化合物のウイルスとの反応におけるウイルス不活化効果を以下のとおり確認した。試験例４は当分野において通常用いられる「ウイルス実験学　総論　改訂二版（丸善株式会社）ウイルス中和試験法」に記載の方法に従い行った。
Ａ．試験サンプル
　試験サンプルとして、被検化合物を少量のＤＭＳＯで溶解した後、精製水で定容して3 ppmの試験溶液を作成した。
Ｂ．供試微生物
　供試微生物は以下を用いた：
　インフルエンザウイルス：Swine influenza virus H1N1 IOWA株
　培養細胞：ＭＤＣＫ細胞（イヌ腎臓由来株化細胞）
　ネコカリシウイルス：Feline calicivirus F9株
　培養細胞：ＣＲＦＫ細胞（ネコ腎臓由来株化細胞）
Ｃ．区の設定
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000029

Ｄ．試験手順
（１）予備試験
　試験に先立って、試験サンプルが培養細胞に与える影響（細胞毒性）を調査した。試験サンプルをリン酸緩衝液で１０倍段階希釈した後、培養細胞に接種し、培養後の細胞の正常な状態を示す最高濃度を確認し、試験に使用するウイルス濃度を決定した。その結果、細胞毒性について、ＭＤＣＫ細胞の場合は１０倍希釈まで細胞の発育不良がみられた。ＣＲＦＫ細胞では原液において細胞の発育不良は確認されなかった。このため試験に際し、ウイルス添加濃度をインフルエンザウイルスは106 TCID50/0.1 mL以上、ネコカリシウイルスは105 TCID50/0.1 mL以上とした。
（２）本試験：試験液混合
　試験区分に従い、試験サンプル及びリン酸緩衝液の各1 mLをそれぞれ分取し、予備試験で決定した濃度にウイルス液を添加した。ウイルス液添加後、混合液として室温（２５℃）にて所定の時間静置した。
（３）本試験：細胞接種及び菌数測定
　試験区分ごとに感作が終了した混合液をそれぞれ１０倍段階希釈し、９６ウェルプレートに培養した細胞に１００μＬずつ培養した。判定は、３７℃、炭酸ガス培養（５％）で５日間培養した後、インフルエンザウイルスの場合は、各ウェル内の培養上清を回収し、赤血球凝集反応によりウイルスの増殖の有無を確認し、その濃度を算出した。ネコカリシウイルスの場合は、培養細胞を顕微鏡観察し、培養細胞に現れるＣＰＥ（細胞変性）をもってウイルス増殖の有無を確認し、その濃度を算出した。
Ｅ．結果
（１）インフルエンザウイルス
　実施例１化合物のインフルエンザウイルスに対する試験結果を以下の表及び図２に示す。
　試験に使用したウイルス濃度は109.3 TCID50/0.1 mLであった。対照区では試験開始後から、試験開始後６０分までの間にウイルス量の変化はほぼみられなかった。試験区では試験開始後６０分で108.1 TCID50/0.1 mL（３５％減少）となった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000030

（２）ネコカリシウイルス
　実施例１化合物のネコカリシウイルスに対する試験結果を以下の表及び図３に示す。
　試験に使用したウイルス濃度は108.0 TCID50/0.1 mLであった。対照区では試験開始後から、試験開始後６０分までの間にウイルス量の変化はほぼみられなかった。試験区では試験開始後６０分で106.3 TCID50/0.1 mL（６０％減少）となった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000031
　化合物（Ｉ）は、種々の真菌及びグラム陽性菌だけでなく、グラム陰性菌に対しても良好な抗菌活性を示し、また、良好なウイルス不活化効果を示すため、抗菌薬及び抗ウイルス薬として種々の疾患に対する幅広い応用が可能である。

Claims (4)

  1. 　式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     ［式中、Ｒ１は水素又はＯＲであり、
    　Ｒは水素、Ｃ１－６アルキル又はＣ１－６アルキル－ＣＯである］
    で示される化合物又はその製薬学的に許容される塩。
  2. 　Ｒ１がＯＨである、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
  3. 　請求項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩及び製薬学的に許容される担体を含有する抗菌薬又は抗ウイルス薬。
  4. 　請求項１又は２に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩及び製薬学的に許容される担体を含有する、日和見感染症、セレウス菌感染症、腸管出血性大腸菌感染症、細菌性胃腸炎、髄膜炎、肺炎、敗血症、感染性心内膜炎、尿路感染症、腹膜炎、胆道感染症、胆嚢炎、ウイルス性呼吸器感染症、ウイルス性胃腸炎及び悪性腫瘍からなる群から選択される疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物。
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