TW202016087A - 環戊烷化合物 - Google Patents

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Abstract

本發明涉及具有式 (I) 之環戊烷化合物、其物理形式、其生產方法及其在藥物中之用途。

Description

環戊烷化合物
本公開涉及抑制經典的瞬態受體電位通道TRPC6和TRPC3之經取代的環戊烷化合物及其藥學上可接受的鹽。本公開還涉及該等化合物及其藥學上可接受的鹽，在醫學，例如在治療其中TRPC6或TRPC3功能的抑制具有治療意義的疾病中的用途。本公開還涉及使用根據本公開的化合物之治療方法和生產藥物之方法。
瞬態受體電位通道（TRP通道）係主要位於某些哺乳動物細胞的質膜上的一組離子通道。TRP通道通常調節質膜中的離子進入驅動力以及Ca2+ 和Mg2+ 轉運機制。七個經典的瞬態受體電位通道（TRPC通道）係由磷脂酶C（PLC）-偶聯受體活化的電位陽離子通道，並且可以細分為四個亞組：第1組（TRPC1）、第2組（TRPC2）、第3組（TRPC3、TRPC6和TRPC7）和第4組（TRPC4和TRPC5）。其中，第3組TRPC（即TRPC3、TRPC6和TRPC7）在物理上相互作用，並且在共表現時共組裝以形成功能性四聚體通道。TRPC 3、6和7之間的序列同源性接近75%。
TRPC6係經典的瞬態受體電位（TRPC）亞家族的成員，係在足細胞上表現的非選擇性Ca2+ 通道，其在維持腎小球障壁功能方面具有重要作用。TRPC6的活化導致Ca2+ 流入並調節足細胞形態和運動性。已經觀察到TRPC6傳訊的上調引起足細胞的損傷，導致嚴重的蛋白尿。
局灶性節段性腎小球硬化（FSGS）係兒童和成人中類固醇抗性腎病綜合症的最常見原因。未經治療的FSGS患者的預後較差，超過60%的未經治療的患者進展為終末期腎病（ESRD），通常也稱為腎衰竭，這進而是慢性腎病的最後階段。典型地，從FSGS診斷到ESRD的時間為10年左右。然而，進展到ESRD可能更快，例如在6個月內。文獻報告表明，多達20%的ESRD患者最初出現FSGS。
在家族型或散發型FSGS中，用蛋白尿表型和對類固醇治療（FSGS的標準護理）的抗性來鑒定TRPC6功能獲得性突變。類固醇治療抗性的發展可能進而最終導致慢性腎病（CKD）。大量患有FSGS的患者出現瞬態受體電位經典6（TRPC6）的突變，其導致功能獲得（Winn等人, Science. [科學] 2005, 308 (5729): 1801-4）。因此，FSGS中TRPC6功能獲得性突變的存在具有預後意義。因此，TRPC6的抑制可能為治療FSGS提供新的治療干預機會，尤其對於具有TRPC6功能獲得性突變的患者。
TRPC通道功能也與許多其他障礙相關（已經在肌營養不良中觀察到TRPC3上調）並且與肌纖維變性相關（Millay等人 PNAS [美國國家科學院院刊], 2009, 106(45): 19023-19028）。與TRPC3相關的其他病症包括心臟肥大（Kiyonaka等人, PNAS [美國國家科學院院刊] 2009 106(13) 5400-5405）。除FSGS外，TRPC6還與一系列病症相關，如心肌梗死（Varga-Szabo等人, J. Thromb. and Haemost. [血栓形成和止血雜誌] 2009, 7, 1057-1066），其中TRPC6功能的喪失與以下各項有關：體內模型中心肌梗死後的心臟的心功能障礙和心臟重塑進展減緩（Gross等人, Circulation Research [循環研究] 2016, 119: A296）；肺動脈高壓（Yu等人, Circulation [循環] 2009, 119, 2313-22）；骨骼肌功能障礙（Millay等人，同前）；以及癌細胞增殖（Ding等人, J Natl Cancer Inst [美國國立癌症研究所雜誌] (2010) 102 (14): 1052-1068）。因此，TRPC6和TRPC3抑制劑可能具有廣泛的治療應用。
據我們所知，迄今為止還沒有經批准用於臨床使用的TRPC6或TRPC3的抑制劑，也沒有TRPC6和TRPC3的雙重抑制劑。因此，需要具有適於臨床使用的藥理學和藥學特徵的TRPC6和/或TRPC3的新抑制劑。
本說明書的一個目的是提供抑制TRPC6和TRPC3之新化合物，其適合用作治療劑。
現在我們驚奇地發現，本文所述的環戊烷衍生物能夠抑制TRPC6和TRPC3，並且因此可用於治療其中TRPC6和TRPC3功能具有藥理學意義的病症。
在一個方面，提供了具有式I 之化合物，
Figure 02_image005
式I 其中： X係a) O，並且R1 係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基或嗒𠯤基的6-員芳香族環或雜芳香族環，該6-員芳香族環或雜芳香族環視需要被獨立地選自以下的一個或兩個取代基Y取代：F、Cl、Br、CN、OH、OC1-3 烷基、OCF3 、C1-3 烷基、C(O)NH2 、CF3 或環丙基；或b) NR2 ，並且其中N、R1 和R2 一起形成5-員芳香族雜環，該5-員芳香族雜環視需要被獨立地選自以下的一個或兩個取代基Y取代：F、Cl、CN、或Me； R3 獨立地選自F、Cl、CN、甲基、甲氧基、羥基和乙炔基； R4 獨立地選自附接至哌啶環的C2、C4或C5的F或Cl；並且 整數a和b獨立地選自0、1或2； 或其藥學上可接受的鹽。
在一個另外的方面，提供了藥物組成物，該藥物組成物包含治療有效量的具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及至少一種藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或惰性載體。
在一個另外的方面，提供了具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療或預防其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病和病症。
在實施方式中，本說明書提供了具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在腎臟疾病的治療中使用。在實施方式中，該腎臟疾病係局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。在實施方式中，該腎臟疾病係具有TRPC6功能獲得性突變的局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。
在一個另外的方面，提供了治療其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病或病症之方法，該方法包括向對其有需要的患者給予有效量的具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽。在一個實施方式中，所述疾病或病症係腎臟疾病。在實施方式中，該腎臟疾病係局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。在實施方式中，該腎臟疾病係具有TRPC6功能獲得性突變的局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。
在一個另外的方面，提供了具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製備藥物，該藥物用於治療其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病或病症。在一個實施方式中，所述疾病或病症係腎臟疾病。在另一個實施方式中，該腎臟疾病係局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。在實施方式中，該腎臟疾病係具有TRPC6功能獲得性突變的局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。
在一個另外的方面，提供了具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在藥物中使用。
在一個另外的方面，提供了用於製備具有式I 之化合物以及其製備中使用的中間體的方法。
在一個另外的方面，具有式I 之化合物係(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺。在實施方式中，(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺係以結晶形式提供，例如如本文進一步描述的單結晶多晶形式物形式A。
在下文更加詳細地描述了本申請的該等和其他方面。
具有式I 之化合物具有多個不對稱碳，例如，當b = 1時，在哌啶環上在C3和C5處存在兩個不對稱碳，並且在環戊烷環上在C1、C2和C4處存在三個不對稱碳。本說明書涵蓋具有式I 之化合物的所有可能的鏡像異構物和非鏡像異構物。
出於本說明書的目的，術語“5-員芳香族雜環”意指包含1至4個氮原子的5-員芳香族環。合適的5-員芳香族雜環的實例包括吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基和四唑基。
為免存疑，當本說明書中提及哌啶環上的位置C2至C5時，它係關於如下標記的哌啶環上的位置；
Figure 02_image007
。
在實施方式中，該具有式I 之化合物係具有式Ia 之化合物，其中在哌啶基團的C3處的不對稱碳處於(R)-組態。
Figure 02_image009
式Ia
例如，具有式Ia 之化合物可以是具有式Iai 之化合物，其中在哌啶基團的C3和C5處的不對稱碳處於(R)-組態，即具有式Ia 之化合物係如下所示的(3R,5R)-5-氟-1-[4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺。
Figure 02_image011
式Iai
具有式I 和Ia 的化合物的實施方式包括具有式Ib 之化合物，其中基團XR1 和哌啶基團彼此為反式。
Figure 02_image013
具有式Ib 的非鏡像異構物
因此，在其中未指定哌啶環上的基團的立體化學的情況下，該化合物可以是具有式Ibi 之化合物，即如下所示的5-氟-1-[(1R,2R)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺或5-氟-1-[(1S,2S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺。
Figure 02_image015
具有式Ibi 的非鏡像異構物
具有式I 、Ia 以及Ib 的化合物的實施方式包括具有式Ic 之化合物，其中哌啶和苯基基團彼此為順式。
Figure 02_image017
具有式Ic 之非鏡像異構物
因此，在其中未指定哌啶環上的基團的立體化學的情況下，具有式Ic 之化合物可以是具有式Ici 之化合物，即如下所示的5-氟-1-[(1R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺或5-氟-1-[(1S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺。
Figure 02_image019
具有式Ici 之非鏡像異構物
具有式I 、Ia 、Ib 和Ic 之化合物的實施方式包括具有式Id 之化合物，其中哌啶和苯基基團彼此為順式，並且哌啶和XR1 基團彼此為反式。
Figure 02_image021
具有式Id之非鏡像異構物
因此，在其中未指定哌啶環上的基團的立體化學的情況下，具有式Id 之化合物可以是具有式Idi 之化合物，即5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺或5-氟-1-[(1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺。
Figure 02_image023
具有式Idi之非鏡像異構物
在其中哌啶基團係5-氟-(3R,5R)-哌啶-3-胺基團的具有式Id之實施方式中，具有式Id 之化合物可以是如下所示的(3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺或(3R,5R)-5-氟-1-[(1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺。
Figure 02_image025
在一個實施方式中，具有式I之化合物係(3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺。
Figure 02_image027
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 或Id 之化合物係具有式Ie 之化合物，其中基團X係O，並且R1 係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基或嗒𠯤基的6-員芳香族環或雜芳香族環，該6-員芳香族環或雜芳香族環視需要被獨立地選自以下的一個或兩個取代基Y取代：F、Cl、Br、CN、OH、OC1-3 烷基、OCF3 、C1-3 烷基、C(O)NH2 、CF3 或環丙基。
在實施方式中，具有式Ie 之化合物係具有式If 之化合物，其中在6-員芳香族環或雜芳香族環R1 上的至少一個取代基選自Me、Cl、F和CN。
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 或Id 之化合物係具有式Ig 之化合物，其中基團XR1 係NR2 ，並且其中N、R1 和R2 一起形成5-員芳香族雜環，該5-員芳香族雜環視需要被獨立地選自以下的一個或兩個取代基Y取代：F、Cl、CN、或Me。
在實施方式中，具有式Ig 之化合物係具有式Ih 之化合物，其中在5-員芳香族雜環上的至少一個取代基選自Me、Cl、F和CN。
在實施方式中，具有式Ig 之化合物係具有式Ii 之化合物，其中5-員芳香族雜環係未經取代的。
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 、Id 、Ie 、If 、Ig 、Ih 或Ii 之化合物係具有式Ij 之化合物，其中至少一個取代基R3 與環戊烷環的鍵係對位。
在實施方式中，具有式Ij 之化合物係具有式Ik 之化合物，其中取代基R3 係F且a = 1。
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 、Id 、Ie 、If 、Ig 、Ih 、Ii 、Ij 或Ik 之化合物係具有式Il 之化合物，其中至少一個基團R4 係F。
在實施方式中，具有式Il 之化合物係具有式Im 之化合物，其中b = 1。
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 、Id 、Ie 、If 、Ig 、Ih 、Ii 、Ij 、Ik 、Il 或lm 之化合物係具有式In 之化合物，其中R4 獨立地選自附接至哌啶環的C4或C5的F或Cl。
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 、Id 、Ie 、If 、Ig 、Ih 、Ii 、Ij 、Ik 、 Il 或lm 之化合物係具有式Io 之化合物，其中R4 係附接至哌啶環的C4或C5的F。
在實施方式中，具有式I 、Ia 、Ib 、Ic 或Id 之化合物選自：1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 三唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 ； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -3- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡咯 -3- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 三唑 -4- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 吡唑 -1- 基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 吡唑 -1- 基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 甲腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟 -3- 羥基 - 苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟 -3- 甲氧基 - 苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈 ； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(3- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-3- 氯 - 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(5- 胺基 -3,3- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-2- 氟 - 苄腈； 2-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4- 苯基 - 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4- 苯基 - 環戊氧基 ]-3- 氯 - 苄腈； 6-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-5- 甲基 - 嗒 𠯤 -3- 甲腈； 1-[2-(4- 氯嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 -4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 6-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嗒 𠯤 -3- 甲腈； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2-(5- 氟嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 ； 6-(2-((R)-3- 胺基哌啶 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基氧基 ) 菸鹼甲腈； 6-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 吡啶 -3- 甲腈； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 嗒 𠯤 -3- 基氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 嘧啶 -4- 基氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 2-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嘧啶 -5- 甲腈； 5-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 吡 𠯤 -2- 甲腈；和 5-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嘧啶 -2- 甲腈； 或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，提供了藥物組成物，該藥物組成物包含治療有效量的具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及至少一種藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或惰性載體。在一個實施方式中，該藥物組成物包含呈游離鹼形式I 之具有式I 之化合物。
在一個實施方式中，提供了具有式I之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療或預防其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病和病症。在一個實施方式中，該用途係用於治療腎臟疾病。在一個實施方式中，該腎臟疾病係局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。在一個實施方式中，該腎臟疾病係具有TRPC6功能獲得性突變的局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS），如Winn等人, Science. [科學] 2005, 308 (5729): 1801-4中所述。
在一個實施方式中，提供了具有式I之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製備藥物，該藥物用於治療其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病或病症。在一個實施方式中，所述疾病或病症係腎臟疾病。在一個實施方式中，該腎臟疾病係局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS），例如具有TRPC6功能獲得性突變的FSGS。
在一個實施方式中，提供了治療其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病或病症之方法，該方法包括向對其有需要的患者給予有效量的具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽。在一個實施方式中，所述疾病或病症係腎臟疾病。在一個實施方式中，該腎臟疾病係局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS），例如具有功能獲得性突變的FSGS。
在一個實施方式中，提供了具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用作藥物。
在一個實施方式中，提供了用於製備具有式I 之化合物以及其製備中使用的中間體的方法。
在一個實施方式中，用於製備具有式I 之化合物之方法涉及以下步驟
Figure 02_image029
其中P係合適的氮保護基團。P可以是胺基甲酸酯保護基團，例如三級丁氧基羰基或Boc基團。該胺基哌啶基團可以按單個鏡像異構物或非鏡像異構物形式提供。該胺基哌啶基團可以按 ＞ 95%的e.e.、＞ 95%的d.e.或 ＞ 95%的e.e.和 ＞ 95%的d.e提供。
已經發現(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺（本文也稱為化合物10 ）可作為結晶形式“化合物10 形式A”或簡單地“形式A”存在。(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的一種結晶形式（即化合物10 形式A）提供了基本上如圖1所示的X射線粉末繞射圖。
一個方面提供了(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的一種結晶形式。
另一個方面提供了(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺，即形式A，其展現使用CuKα輻射的、如下表1所示的特徵性X射線粉末繞射峰（以度數2θ表示）。
(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺（形式A）的特徵在於提供使用CuKα輻射測量的以下2θ值中的至少一個：17.1°和20.2°。(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺（形式A）的特徵在於提供基本上如圖A所示的X射線粉末繞射圖。十三個最顯著的峰示於表1中：
[表 1 ] 化合物10（形式A）的十三個最顯著的X射線粉末繞射峰
Figure 108115491-A0304-0001
 w = 弱，m = 中等，s = 強，vs = 非常強（也參見下表3）
根據本說明書的一個實施方式，提供了(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，其X射線粉末繞射圖在約2-θ = 17.1°處具有至少一個特異峰。
根據本說明書的一個實施方式，提供了(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，其X射線粉末繞射圖在約2-θ = 20.2°處具有至少一個特異峰。
根據本說明書的一個實施方式，提供了(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，其X射線粉末繞射圖在約2-θ = 17.1°和20.2°處具有至少兩個特異峰。
根據本說明書的一個實施方式，提供了 (3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，其X射線粉末繞射圖在約2-θ = 12.3°、13.4°、13.6°、17.1°、18.9°、20.2°、20.9°、21.3°、21.8°、22.2°、24.5°、25.3°和27.0°處具有特異峰。
根據本說明書的一個實施方式，提供了 (3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，其具有與圖1所示的X射線粉末繞射圖基本上相同的X射線粉末繞射圖。
根據本說明書的一個實施方式，提供了(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，其中所述形式I之X射線粉末繞射圖在2-θ = 17.1° ± 0.5° 2-θ處具有至少一個特異峰。
根據本說明書的一個實施方式，提供了一種結晶形式，形式A，其中所述形式I之X射線粉末繞射圖在2-θ = 20.2° ± 0.5° 2-θ處具有至少一個特異峰。
根據本說明書的一個實施方式，提供了一種結晶形式，形式A，其中所述形式I之X射線粉末繞射圖在2-θ = 17.1°和20.2°處具有至少兩個特異峰，其中所述值可以加或減0.5° 2-θ。
根據本說明書的一個實施方式，提供了一種結晶形式，形式A，其中所述形式I之X射線粉末繞射圖在2-θ = 12.3°、13.4°、13.6°、17.1°、18.9°、20.2°、20.9°、21.3°、21.8°、22.2°、24.5°、25.3°和27.0°處具有特異峰，其中所述值可以加或減0.5° 2-θ。
當闡述本說明書的實施方式涉及(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式時，結晶度合宜地大於約60%，更合宜地大於約80%，較佳的是大於約90%，並且更較佳的是大於約95%。最較佳的是，結晶度大於約98%。
(3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的結晶形式，形式A，提供與圖1所示的X射線粉末繞射圖基本上相同的X射線粉末繞射圖，並且基本上具有表1所示的十三個最顯著的峰（角度2-θ值）。將理解的是X射線粉末繞射圖的2-θ值從一台機器到另一台機器或從一個樣品到另一個樣品可以輕微變化，因此該等引證的值並不被解釋為係絕對的。
在本說明書中，除非另外說明，否則如本文使用的術語“藥學上可接受的”係指在合理醫學判斷範圍內，適合用於與人類和動物組織接觸使用而沒有過多的毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症（與合理的益處/風險比相稱）的那些化合物、材料、組成物和/或劑型。
在本說明書中，除非另外說明，否則短語“有效量”意指化合物或組成物足夠顯著地並且有利地改變所治療的症狀和/或病症（例如，提供陽性臨床反應）的量。用於藥物組成物中的活性成分的有效量將隨所治療的具體病症、病症的嚴重程度、治療的持續時間、同步治療的特性、所利用的一種或多種具體成分、所利用的一種或多種具體藥學上可接受的賦形劑/載體、以及處於主治醫生的知識和專業知識範圍內的類似因素而變化。
除非另有指示，否則如本文使用的術語“治療”係指逆轉、緩解或預防此術語所適用的障礙或病症或者此障礙或病症的一個或多個症狀，抑制其進展，延遲其進展，延遲其發作。除非另有指示，如本文使用的術語“治療”係指按照如上所定義的“治療”進行治療的行為。術語“治療”還包括受試者的輔助治療和新輔助治療。為免存疑，本文提及的“治療”包括提及治癒性、姑息性和預防性治療以及用於這種治療的藥物的給予。
具有式I之化合物可以形成穩定的藥學上可接受的酸或鹼的鹽，並且在此類情況下給予作為鹽的化合物可能是適當的。酸加成鹽的實例包括乙酸鹽、己二酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、膽鹼、檸檬酸鹽、環己基胺基磺酸鹽、二伸乙基二胺、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、麩胺酸鹽、乙醇酸鹽、半硫酸鹽、2-羥乙基磺酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基馬來酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、葡甲胺、2-萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、過硫酸鹽、苯乙酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、奎尼酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、胺基磺酸鹽、胺基苯磺酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽（對甲苯磺酸鹽）、三氟乙酸鹽、以及十一烷酸鹽。非毒性生理上可接受的鹽係較佳的，儘管其他鹽可以是有用的，如在分離或純化產物中是有用的。
該等鹽可以是藉由常規手段形成的，例如藉由使該產物的游離鹼形式與一個或多個當量的適當的酸在溶劑或介質（其中該等鹽係不可溶的）、或在溶劑（如水，其係在真空中或藉由冷凍乾燥或藉由在合適的離子交換樹脂上將現有的鹽的陰離子交換為另一種陰離子而去除）進行反應。
具有式I 之化合物具有超過一個手性中心，並且應理解該申請涵蓋所有個體立體異構物、鏡像異構物和非鏡像異構物及其混合物。因而，應當理解的是，在具有式I 之化合物可憑藉一個或多個不對稱碳原子而以光學活性形式或外消旋形式存在的情況下，本申請包括了在其定義中任何這類具有上述活性的光學活性形式或外消旋形式。本申請涵蓋了所有這類具有本文定義的活性的立體異構物。
光學活性形式I 之合成可以藉由本領域熟知的有機化學的標準技術來進行，例如藉由從光學活性起始材料的合成或藉由拆分外消旋形式。可使用已知的程序（參見例如，Advanced Organic Chemistry [高等有機化學]: 第3版: 作者J. March, 第104-107頁）將外消旋體分離成單獨的鏡像異構物。合適的方法涉及藉由使外消旋物質與手性助劑反應形成非鏡像異構物衍生物，隨後例如藉由層析法進行分離非鏡像異構物，並且然後裂解輔助物。類似地，可以使用下文中指出的標準實驗室技術評價上述活性。
因此，貫穿本說明書，提及具有式I 之化合物時，應理解該術語化合物包括作為TRPC6和TRCP3抑制劑的非鏡像異構物、非鏡像異構物的混合物以及鏡像異構物。
立體異構物可以使用常規技術，例如層析或分步結晶進行分離。可以藉由分離外消旋體（例如藉由分步結晶、拆分或HPLC或SFC）分離鏡像異構物。非鏡像異構物可以藉由借助於非鏡像異構物的不同物理特性的分離，例如藉由分步結晶、HPLC或快速層析而分離。可替代地，特定的立體異構物可以從手性起始材料在不引起外消旋作用或差向異構的條件下藉由手性合成、或藉由衍生化用手性試劑製成。
當提供特定的立體異構物時（無論是藉由分離、藉由手性合成、或藉由其他方法提供），它有利地被提供為基本上與相同化合物的其他立體異構物分離的。在一個方面，包含具有式I 之化合物的具體立體異構物的混合物可以包含按重量計小於30%，特別地小於20%，並且更特別地小於10%的同一化合物的其他立體異構物。在另一個方面，包含具有式I 之化合物的具體立體異構物的混合物可以包含按重量計小於6%，特別地小於3%，並且更特別地小於2%的該化合物的其他立體異構物。在另一個方面，包含具有式I 之化合物的具體立體異構物的混合物可以包含按重量計小於1%，特別地小於0.5%，並且更特別地小於0.3%，並且仍更特別地小於0.1%的該化合物的其他立體異構物。
還應理解的是某些具有式I 之化合物及其藥用鹽能以溶劑化連同非溶劑化形式（例如像，水合形式和無水形式）存在。應當理解的是，本文的化合物涵蓋所有這類溶劑化形式。為了清楚起見，這包括化合物的游離形式I 之溶劑化（例如，水合的）形式以及化合物的鹽的溶劑化（例如，水合的）形式二者。
如本文所述的式I 旨在涵蓋其組成原子的所有同位素。例如，H（或氫）包括氫的任何同位素形式，包括1 H、2 H（D）、以及3 H（T）；C包括碳的任何同位素形式，包括12 C、13 C、以及14 C；O包括氧的任何同位素形式，包括16 O、17 O、以及18 O；N包括氮的任何同位素形式，包括13 N、14 N、以及15 N；F包括氟的任何同位素形式，包括19 F以及18F；等。在一個方面，具有式I 之化合物包括此處涵蓋的原子的同位素，其量對應於是它們天然存在的豐度。然而，在某些情況下，可能希望的是富集呈具體同位素形式I 之一種或多種原子，該具體同位素通常會以較低豐度存在。例如，1 H通常以大於99.98%的豐度存在；然而，在一個方面，具有本文提出的任何式I 之化合物可以在H存在的一個或多個位置處富集2 H或3 H。在另一個方面，當具有本文提出的任何式I 之化合物富集一種放射性同位素（例如，3 H以及14 C）時，該化合物可以用於藥物和/或底物組織分佈測定。應當理解的是，本申請涵蓋了所有這類同位素形式。
提供了治療其中需要抑制TRPC6和/或TRPC3的病症之方法，該方法包括向患有或易患有這種病症的人給予治療有效量的具有式I 之化合物、或其藥學上可接受的鹽。
具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽通常會經由口服途徑以如下藥物製劑形式給予，該等藥物製劑包含活性成分或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物、或這樣的鹽的溶劑化物，呈藥學上可接受的劑型。取決於待治療的障礙和患者，組成物可以按不同劑量給予。
以上所述的具有式I 之化合物的藥物配製物可被製備用於口服給予，具體地呈片劑或膠囊形式，並且尤其涉及目的在於提供靶向結腸的藥物釋放的技術（Patel, M. M. Expert Opin. Drug Deliv. [關於藥物遞送的專家意見] 2011, 8 (10), 1247-1258）。
上以上所述的具有式I 之化合物的藥物配製物可以方便地以單位劑型給予，並且可以藉由製藥領域中熟知的任何方法，例如如Remington's Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學], 第17版, Mack Publishing Company, Easton, PA. [馬克出版公司, 伊斯頓, 賓夕法尼亞州], (1985) 中所述的製備。
適於口服給予的藥物配製物可以包含一種或多種生理上相容的載體和/或賦形劑，並且可以呈固體或液體形式。片劑和膠囊可以用粘合劑、填充劑、潤滑劑和/或表面活性劑（如十二烷基硫酸鈉）製備。液體組成物可以含有常規添加劑，如懸浮劑、乳化劑和/或防腐劑。液體組成物可以包封在例如明膠中以提供單位劑型。固體口服劑型包括片劑、兩件式硬殼膠囊和軟彈性明膠（SEG）膠囊。這種兩件式硬殼膠囊可以例如藉由將具有式 (I) 之化合物填充到明膠或羥丙基甲基纖維素（HPMC）殼中來製備。
乾殼配製物典型地包含約40%至60% w/w濃度的明膠、約20%至30%濃度的增塑劑（如甘油、山梨糖醇或丙二醇）和約30%至40%濃度的水。也可以存在其他材料，如防腐劑、染料、遮光劑和調味劑。液體填充材料包括已經溶解、增溶或分散（使用懸浮劑進行，如蜂蠟、氫化蓖麻油或聚乙二醇4000）的固體藥物或在一種運載體或多種運載體（如礦物油、植物油、甘油三酯、二醇、多元醇和表面活性試劑）的組合中的液體藥物。
在治療性治療人類時，具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽的合適的每日劑量係約0.0001-100 mg/kg體重。
口服配製物係較佳的，特別是片劑或膠囊，其可以藉由熟悉該項技術者已知的方法配製，以提供0.1 mg至1000 mg範圍內的活性化合物的劑量。
根據一個另外的方面，因此提供了藥物組成物，該藥物組成物包含具有式I 之化合物或其藥學上可接受的鹽與至少一種藥學上可接受的佐劑、稀釋劑和/或載體的混合物。生物學測定
可以採用以下測試程序來確定本文所述化合物的抑制性質。
TRPC3和TRPC6通道開放引起主要為鈣和鈉陽離子的流入，這種鈣和鈉陽離子的流入導致跨細胞膜的電位的變化。可以使用膜電位染料在以下FLIPRTM （螢光成像讀板儀）測定中監測膜電位的這種變化。TRPC6 的抑制 - FLIPR TM 測定
TRPC6-HEK293購自珀金埃爾默公司（PerkinElmer）（珀金埃爾默公司，產品編號：AX-012-C），使用含有人TRPC6離子通道編碼序列的pcDNA3.1（+）表現載體轉染HEK293細胞。使用的編碼序列與GenBank NM_004621的編碼序列相同，除了2個同義變異（t1683c和c2529t）。使細胞在作為培養基的DMEM + 10%胎牛血清（FBS）+ 0.5 mg/mL遺傳黴素（離子通道表現選擇）中生長。
將TRPC6細胞以10K個細胞/孔鋪板到384孔聚苯乙烯板中，並且然後使其在37°C加5% CO2 下生長24小時。在此之後，使用Tecan洗板機吸出培養基，並且然後用40 μL染料加樣緩衝液（130 mM NaCI，5 mM KCI，0.15 mM CaCI2 ，1 mM MgCI2 ，20 mM HEPES（(4-(2-羥基乙基)-1-哌𠯤乙磺酸)），5 mM NaHCO3 ）替換。對於TRPC6，使用0.5x的終濃度。然後在開始實驗之前，將細胞與膜電位染料在室溫下一起孵育30分鐘。
為了測試化合物對TRPC6活性的影響，首先將化合物在100% DMSO中稀釋至最終濃度的3倍，以用於實驗中。典型的劑量-反應實驗範圍為10 μM（最高濃度）至0.5 nM（最低濃度）。將十微升的在0.5% DMSO中的5x化合物添加到40 μL的與膜電位染料一起孵育的細胞中。在FLIPRTetra或FLIPR 384（MDS分析技術（MDS Analytical Technologies），分子儀器公司（Molecular Devices），森尼維耳（Sunnyvale），加利福尼亞州，94089，美國）上進行化合物添加。在與化合物一起孵育400秒後，以5倍EC80 （TRPC6的典型的EC80 = 最終3 μM）添加12.5 μL OAG（1-油醯基-2-乙醯基-sn-甘油（OAG），西格瑪公司（Sigma），吉林厄姆（Gillingham），多塞特（Dorset），SP8 4XT目錄號O6754-10MG）。OAG激發旨在測量化合物對受體操縱的TRPC6活化的抑制活性。
將所有數據標準化為低對照（僅緩衝液）或高對照（OAG EC100 ）。使用XC50 曲線擬合模組分析數據並報告為plC50 或IC50 值。針對至少2次實驗，將該等值進行平均以確定平均值。TRPC3 的抑制 - FLIPR TM 測定
使用含有人TRPC3離子通道編碼序列的PLVX-puro慢病毒載體轉染AD293細胞。藉由用2 μg/mL嘌呤黴素處理兩周來選擇嘌呤黴素抗性細胞。藉由有限稀釋獲得單株細胞，並在膜電位測定中比較它們對OAG的響應。使細胞在作為培養基的DMEM + 10%胎牛血清（FBS）+ 1 μg/mL嘌呤黴素中生長。
將TRPC3細胞以9K個/孔鋪板到384孔聚苯乙烯板中。使細胞在37°C加5% C02 下生長24小時，在此之後使用Tecan洗板機吸出培養基，並且用40 μL染料加樣緩衝液（130 mM NaCI，5 mM KCI，0.15 mM CaCI2 ，1 mM MgCI2 ，20 mM HEPES（(4-(2-羥基乙基)-1-哌𠯤乙磺酸)），5 mM NaHCO3）替換。對於TRPC3，使用0.5x膜電位染料（分子儀器藍膜（Molecular Devices Membrane Blue），FLIPR膜電位測定試劑盒（大包裝），產品編號R8034（BLUE），分子儀器公司（Molecular Devices），森尼維耳，加利福尼亞州，94089，美國）的終濃度。然後在開始實驗之前，將細胞與膜電位染料在室溫下一起孵育30分鐘。
為了測試化合物對TRPC3活性的影響，首先將化合物在100% DMSO中稀釋至最終濃度的3倍，以用於實驗中。典型的劑量-反應實驗範圍為10 μM（最高濃度）至0.5 nM（最低濃度）。將十微升的在0.5% DMSO中的5x化合物添加到40 μL的與膜電位染料一起孵育的細胞中。在FLIPRTetra或FLIPR 384（MDS分析技術）上進行化合物添加。在與化合物一起孵育400秒後，以5倍EC80 （TRPC3的典型的EC80 = 最終2 μM）添加12.5 μL OAG。OAG激發旨在測量化合物對受體操縱的TRPC3活化的抑制活性。
將所有數據標準化為低對照（僅緩衝液）或高對照（OAG EC100 ）。使用XC50 曲線擬合模組分析數據並報告為plC50 或IC50 值。針對至少2次實驗，將該等值進行平均以確定平均值。TRPC6 和 TRPC3 活化的電生理學測定
TRPC6和TRPC3通道活化產生離子電流，其可以使用全細胞膜片鉗技術測量（參見Estacion等人,J Physiol . [生理學雜誌] 2006年4月15日; 572(Pt 2): 359-377和Washburn等人,Bioorg Med Chem Lett . [生物有機化學與醫藥化學快報] 2013年9月1日; 23(17): 4979-84）。10 μM OAG（OAG係TRPC6和TRPC3通道的直接活化劑）用於分別活化TRPC6轉導的HEK293細胞或TRPC3轉導的AD293細胞中的人TRPC6或TRPC3電流。將TRPC6或TRPC3轉導的細胞在37°C和5% CO2 下孵育。然後使用胰蛋白酶溶液（0.25%胰蛋白酶 + 0.1% EDTA（乙二胺四乙酸））使轉導的細胞從燒瓶脫離，然後在5小時內儲存在用於膜片鉗實驗的培養基中。將細胞置於小室中，並使用RSC-200灌注系統（生物科學儀器公司（Science Instruments, BioLogic））用外部溶液（約3 mL/min）連續灌注。所有目前記錄均在室溫（約22°C）下進行。電極由玻璃毛細管製成，並且當填充相應的內部溶液時，電阻為2-4 MΩ。
對於TRPC6電流記錄，細胞內溶液含有（以mM計）：120 CsOH，120 天冬胺酸鹽，20 CsCl，2 MgCl2 ，0.4 CaCl2 ，10 HEPES，2 Na2 ATP，0.1 Na3 GTP，10 葡萄糖，1 EGTA（pH 7.2-7.25，用CsOH調節）。細胞外溶液含有（以mM計）：145 NaCl，5 KCl，1 CaCl2 ，1 MgCl2 ，10 HEPES，10 葡萄糖（pH 7.4，用NaOH調節）。
對於TRPC3電流記錄，細胞內溶液含有（以mM計）：130 CsCl，5 HEPES，5 EGTA，5 Na2 ATP，0.1 Na3 GTP，5.5 MgCl2 （pH 7.2-7.25，用CsOH調節）。細胞外溶液含有（以mM計）：140 NaCl，4 KCl，1 MgCl2 ，10 HEPES，0.2 CaCl2 ，10 葡萄糖，2 Na4 EDTA（pH 7.4，用NaOH調節）。
細胞膜和電極之間進行密封。在建立全細胞組態後，細胞膜電容被電子抵消，並且串聯電阻被補償約70%。在-60 mV保持電位下，每5秒藉由300 ms電壓斜線上升方案（從+100 mV至-100 mV）誘導TRPC6或TRPC3電流。一旦對照電流達到穩定，就用含有測試化合物的外部溶液灌注記錄室。在每種藥物濃度下，允許進行足夠的時間使藥物作用達到穩態。
測量TRPC6或TRPC3電流為 + 100 mV下的平均電流。繪製了整個實驗的電流時程。TRPC6或TRPC3的抑制百分比（%I）由以下公式計算：%I = 100 x (1 - lD /lc )，其中lD 係在特定藥物濃度結束時測量的電流振幅，並且lc係施用藥物前測量的對照電流振幅。在OAG活化TRPC6或TRPC3電流之前的最開始設置零電流（背景）水平。將具有Digidata 1440介面的MultiClamp 700B放大器和pCLAMP軟體（AXON儀器，分子儀器公司，森尼維耳，加利福尼亞州，94089，美國）用於數據獲取和分析。首先計算每種藥物濃度下的平均抑制百分比。然後，使用Prism 6軟體將平均數據擬合成邏輯函數以計算IC50 值。
[表 2 ]：如藉由FLIPRTM 測定而評價的對TRPC6和hTRPC3的抑制
Figure 108115491-A0304-0002
 *呈現了每種化合物的最有效的分離異構物的數據。
從上表中可以看出，本公開的化合物係TRPC6和TRPC3兩者的高活性抑制劑，在低於30 nM範圍內使用的測定中具有抑制活性。這種抑制TRPC6和TRPC3兩者的能力可具有治療重要性，因為相對於該等第3組經典的瞬態受體電位通道中的任一種的選擇性抑制劑，該選擇性程度可提供增強的治療功效。如上所述，TRPC3和TRPC6具有高序列同源性，並且屬於第3組經典的瞬態受體電位通道分組。因此，本公開的化合物具有作為用於治療或預防其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病和病症的治療劑的前景，該等疾病和病症例如係腎臟疾病，並且特別是局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。製備化合物的方法
本說明書的化合物可如下所述製備。例如，化合物10可由1-(環戊-3-烯基)-4-氟苯起始材料製備，該起始材料本身可從1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)苯的烯烴複分解得到。用任何合適的氧化劑如m-CPBA或過氧化氫在甲酸中氧化環戊烯提供了環氧化物中間體，其可以用哌啶親核試劑進行親核開環，以提供環戊醇衍生物。然後可藉由光延反應（Mitsunobu reaction）轉化環戊醇衍生物以給出1H -1,2,4-三唑-1-基衍生物。然後藉由在酸性條件下進行Boc去保護獲得終產物。以下提供了最終化合物的一種合成的全部細節。可以將在每個合成步驟中獲得的不同可能異構物產物藉由層析法（例如製備型HPLC，如製備型手性HPLC或SFC）分離。下面提供了用於該等標準技術的合適的柱和相應的洗脫液系統。實例
現在將藉由參考以下非限制性實例來進一步解釋本申請的化合物。
1H NMR測量在Bruker Avance光譜儀上進行，分別在300和400 MHz的1 H頻率下操作。通常在25°C記錄實驗。用溶劑作為內標，給出以ppm計的化學位移。HPLC通常在與DAD檢測器、ELSD檢測器和2020EV MS偶聯的Shimadzu UHPLC上或與DAD檢測器、ELSD檢測器和2020EV MS偶聯的Shimadzu UFLC上進行。使用在來自BiotageTM 的SP1TM 純化系統上的、利用正相二氧化矽FLASH+TM （40 M、25 M或12 M）或SNAPTM KP-Sil筒（340、100、50或10）、利用C18-快速柱的直相快速層析法，或使用標準快速層析法來進行快速層析法。通常，所有使用的溶劑都是可商購的並且是分析級的。無水溶劑常規用於反應。在該等實例中使用的相分離器係ISOLUTE®相分離柱。使用來自先進化學發展股份有限公司（Advanced Chemistry Development, Inc.）（ACD/實驗室）的ACD/名稱12.01來命名以下命名的中間體和實例。起始材料係從商業來源獲得的或藉由文獻路線製備的。例如，三級丁基((3R,5R)-5-氟哌啶-3-基)胺基甲酸酯購自中國南京高新區學府路10號藥石公司（PharmaBlock Inc, 10 Xuefu Road, Nanjing Hi-Tech Zone, China）。
使用了以下縮寫：AcOH = 乙酸；aq = 水性；Boc2 O = 二碳酸二三級丁酯；Boc = 三級丁氧基羰基；br = 寬峰；CDCl3 = 氘代氯仿；CD3 OD = 氘代甲醇；CH3 NO2 = 硝基甲烷；d = 二重峰；δ = 相對於四甲基矽烷的NMR的化學位移；DCE = 1,2-二氯乙烷；DCM = 二氯甲烷；DEA = 二乙胺；DEAD = 偶氮二甲酸二乙酯；DIPEA =N,N -二異丙基乙胺；DMAP = 2,6-二甲基胺基吡啶；DMF =N,N- 二甲基甲醯胺；DMSO = 二甲亞碸；DMSO-d6 = 氘代二甲亞碸；DPPA = 疊氮磷酸二苯酯；dppf = 1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵；DIAD = 二-異丙基 (E)-二氮烯-1,2-二甲酸酯；DSC = 差示掃描量熱法；DTAD = 二-三級丁基 (E)-二氮烯-1,2-二甲酸酯；ee = 鏡像異構物過量；eq.= 當量；ESI = 電噴霧電離；Et2 O = 二乙醚；EtOAc或EA = 乙酸乙酯；EtOH = 乙醇；FA = 甲酸；格拉布斯（Grubbs）催化劑 (1,3-二三甲苯基咪唑啉-2-亞基)(三環己基膦)二氯化釕；h = 小時；HATU = (二甲基胺基)-N ,N -二甲基(3-氧化-1H -[1,2,3]三唑并[4,5-b ]吡啶基)甲亞胺離子六氟磷酸鹽；HCl = 鹽酸；H2 O2 = 過氧化氫；HP = 高壓；IPA = 異丙醇；LC = 液相層析；LiClO4 = 過氯酸鋰；m = 多重峰；Mmol = 毫莫耳；mCPBA = 間氯過氧苯甲酸；MeOH = 甲醇；min = 分鐘；MeCN = 乙腈；MeNO2 = 硝基甲烷；MS = 質譜；NMP =N -甲基-2-吡咯啶酮；NMR = 核磁共振；Pd2 dba3 = 三(二苯亞甲基丙酮)二鈀 (0)；Pd(dppf)Cl2 = 1,1'-雙(二-三級丁基膦基)二茂鐵二氯化鈀；PE     = 石油醚；PPh3 = 三苯基膦；q = 四重峰；rt = 室溫；Rt或RT = 保留時間；s = 單峰；sat = 飽和的；SFC = 超臨界流體層析法；t = 三重峰；T3P = 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷 2,4,6-三氧化物；TBTU = 2-(1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓四氟硼酸鹽；TFA = 三氟乙酸；THF = 四氫呋喃；TLC = 薄層層析法；TMS = 三甲基矽基；Xantphos = 4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫噸。起始材料和中間體的合成 庚-1,6-二烯-4-基苯D1
Figure 02_image031
在-60°C，將CH3 NO2 （25.8 g）於DCM（400 mL）中的溶液用TiCl4 溶液（151 mL，151 mmol，於DCM中1.0 M）處理，然後用DCM（50 mL）中的苯甲醛（10 g，94.2 mmol）處理。將該反應在-60°C攪拌0.5小時，然後冷卻至-78°C，之後逐滴添加於DCM（50 mL）中的烯丙基三甲基矽烷（32 g，282 mmol）。將該反應混合物在-78°C攪拌2小時且在-60°C攪拌6小時，然後傾倒至飽和NH4 Cl溶液（500 mL）中，並且用二氯甲烷（300 mL x 2）萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚）純化，以給出呈無色油的庚-1,6-二烯-4-基苯D1 （13.7 g，84%產率）。 1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)苯D2
在N2 氣氛下，在-78°C，經20分鐘的時間段，將TiCl4 （ 56.9 mL，0.516 mol）添加到於DCM（1.5 L）中的MeNO2 （69.5 mL，1.29 mol）中。將所得混合物攪拌20分鐘，並且然後經20分鐘的時間段以逐滴方式用4-氟苯甲醛（40 g，0.322 mol）處理。將所得混合物在-70°C攪拌1小時，然後經0.5小時的時間段用烯丙基三甲基矽烷（110 g，0.967 mol）處理。將所得混合物在-70°C攪拌3小時，並且然後升溫至25°C。將該反應混合物用冰/水（1 L）淬滅，用DCM（3 x 400 mL）萃取，並且將合併的有機層乾燥（Na2 SO4 ），過濾並且蒸發以提供淡黃色油。矽膠快速層析法（於戊烷中0至5% EtOAc）給出呈無色油的1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)苯（55.0 g，90%）。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 7.14 (2H, m), 6.98 (2H, m), 5.65 (2H, ddt), 5.01 - 4.83 (4H, m), 2.72 (1H, tt), 2.51 - 2.18 (4H,m)。 1-氟-3-(庚-1,6-二烯-4-基)苯D3
在-78°C，如關於合成D1所述，使於DCM（1500 mL）中的TiCl4 （56.9 mL，515.65 mmol）、MeNO2 （69.5 mL，1289.13 mmol）與3-氟苯甲醛（40 g，322.28 mmol）和烯丙基三甲基矽烷（110 g，966.85 mmol）反應。後處理之後，層析法（二氧化矽，於戊烷中0至5% EtOAc）提供呈無色油的1-氟-3-(庚-1,6-二烯-4-基)苯D3 ，將其不經進一步純化而使用。 1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)-2-甲氧基苯D4
如關於合成D1所述，使於DCM（80 mL）中的硝基甲烷（5.7 g，4.5 eq.）和TiCl4 （33.3 mL，1.6 eq.，於DCM中1 M）的溶液與於20 mL DCM中的4-氟-3-甲氧基苯甲醛（3.5 g，1.0 eq.）反應，然後與烯丙基三甲基矽烷（7.2 g，3.0 eq.）反應。柱層析法（矽膠，石油醚）提供呈黃色油的1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)-2-甲氧基苯D4 （6.5 g，98%產率）。1H NMR (CDCl3 400MHz) δ 7.00 (1H, dd), 6.76 (1H, dd), 6.73-6.67 (1H, m), 5.71-5.65 (2H, m), 5.02-4.95 (4H, m), 3.91 (3H, s), 2.72-2.67 (1H, m), 2.44-2.33 (4H, m)。 環戊-3-烯基苯C1
Figure 02_image033
向D1 （13.7 g）於DCM（100 mL）中的溶液中添加格拉布斯催化劑（1.0 g，0.015 eq）。將該混合物在氮氣下在室溫攪拌過夜，此時分級TLC指示沒有剩餘起始材料。然後將該反應混合物用水（200 mL）、鹽水（200 mL）洗滌，然後乾燥並且蒸發。矽膠柱層析法（正庚烷）給出呈無色油的環戊-3-烯基苯C1 （6.1 g，55%產率）。 1-(環戊-3-烯基)-4-氟苯C2
在氮氣下，在0°C，經20分鐘的時間段，將格拉布斯催化劑（2.68 g，3.15 mmol）添加到於DCM（500 mL）中的1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)苯（50 g，0.263 mol）中。將所得混合物在25°C攪拌15小時。在減壓下去除溶劑並將殘餘物藉由柱層析法純化（於石油醚中0至5% EtOAc），以提供呈無色液體的1-(環戊-3-烯-1-基)-4-氟苯C2 （30.0 g，70.4%）。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 7.24 (2 H, m), 6.97 (2 H, m), 5.78 (2 H, d), 3.46 (1 H, tt), 2.81 (2 H, m), 2.40 (2 H, m)。 1-(環戊-3-烯基)-3-氟苯C3
如關於合成C1所述，使於DCM（40 mL）中的1-氟-3-(庚-1,6-二烯-4-基)苯（3.5 g）與格拉布斯催化劑（230 mg，0.015 eq）反應。柱層析法（正庚烷）給出呈無色油的C3 （2.1 g，70%）。1H NMR (CDCl3 , 400MHz) δ 7.26-7.24 (1H, m), 7.04-6.88 (3H, m), 5.80-5.75 (2H, m), 3.49-3.45 (1H, m), 2.87-2.81 (2H, m), 2.48-2.41 (2H, m)。 4-(環戊-3-烯基)-1-氟-2-甲氧基苯C4
如關於合成C1所述，使於50 mL DCM中的1-氟-4-(庚-1,6-二烯-4-基)-2-甲氧基苯D4 （4.5 g，1.0 eq.）與格拉布斯催化劑（450 mg，0.025 eq.）反應。矽膠柱層析法（石油醚）給出呈棕色油的4-(環戊-3-烯基)-1-氟-2-甲氧基苯（3.1 g，79%產率）。1H NMR (CDCl3 , 400MHz) δ 6.99-6.94 (1H, m), 6.85 (1H, dd), 6.76-6.62 (1H, m), 5.78 (2H, s), 3.88 (3H, s), 3.44-3.38 (1H, m), 2.82 (2H, dd), 2.45-2.38 (2H, m)。 3-苯基-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E1
Figure 02_image035
在0°C，以分批方式向環戊-3-烯基苯C1 （6.1 g，42.3 mmol）於DCM（80 mL）中的溶液中添加mCPBA（12.8 g，1.5 eq，85%）。將該混合物在室溫下攪拌過夜。然後添加飽和NaHSO3 溶液（400 mL）並將懸浮液在室溫攪拌30分鐘。然後將懸浮液用水（200 mL）稀釋，用二氯甲烷（200 mL）萃取並且將有機層用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並且蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法純化（石油醚/EtOAc 20 : 1），以提供呈無色油的3-苯基-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E1 （4.9 g，73%產率）。 反式-3-(4-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E2
Figure 02_image037
在空氣下，經1小時的時間段，將甲酸（88%）（392 mL，9.15 mol）逐滴添加到冷卻至0°C的H2 O2 （30%）（262 mL，2.62 mol）中。然後，在空氣下，在0°C，經3小時的時間段，添加於DCM（250 mL）中的1-(環戊-3-烯-1-基)-4-氟苯C2 （20 g，0.123 mol）。然後將所得混合物在環境溫度攪拌12小時，之後則在減壓下去除溶劑。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法純化（於石油醚中0至10% EtOAc），以提供呈無色油的反式-3-(4-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E2 （12.00 g，54.6%）。1H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 7.15 (2H, m), 6.99 (2 H, m), 3.60 (2H, s), 2.98 (1H, tt), 2.46 (2H, dd), 1.71 (2H, dd)。 3-(3-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E3
如關於合成E1 所述，使於DCM（50 mL）中的1-(環戊-3-烯基)-3-氟苯C2 （2.1 g）與mCPBA（3.3 g，1.5 eq，85%）反應。矽膠層析法（石油醚/EtOAc = 20:1）給出呈無色油的E3 （1.1 g，47%）。 3-(4-氟-3-甲氧基苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E4
如關於合成E1 所述，使於50 mL二氯甲烷中的mCPBA（5.57 g，2.0 eq.）和4-(環戊-3-烯基)-1-氟-2-甲氧基苯C4 （3.1 g，1.0 eq.）反應。柱層析法給出呈無色油的作為反式異構物（1.3 g，47%產率）和順式異構物（300 mg，9%產率）的E4 。反式-E4 1H NMR (CDCl3 , 400MHz) δ 7.00-6.95 (1H, m), 6.77 (1H, dd), 6.72-6.66 (1H, m), 3.87 (3H, s), 3.58 (2H, s), 2.98-2.91 (1H, m), 2.47-2.41 (2H, m), 1.71 (2H, dd)。順式-E4 1H NMR (CDCl3 , 400MHz) δ 6.99 (1H, dd), 6.92 (1H, dd), 6.75-6.73 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.57 (2H, s), 3.45-3.39 (1H, s), 2.33 (2H, dd), 2.08 (2H, dd)。三級丁基 (3R)-1-(2- 羥基 -4- 苯基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯 F1
Figure 02_image039
向3-苯基-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E1 （1.5 g）於CH3 CN（20 mL）中的溶液中添加 (R)-三級丁基 哌啶-3-基胺基甲酸酯（2.2 g，1.2 eq）和LiCIO4 （2.0 g，2.0 eq）。將所得懸浮液回流過夜，然後冷卻並過濾。蒸發濾液，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法純化（石油醚/EtOAc 1 : 1），以給出呈黃色固體的三級丁基 (3R)-1-(2-羥基-4-苯基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F1 （1.97 g，59%），將其不經進一步純化而使用。三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟苯基 )-2- 羥基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯 F2a
在25°C，將於甲苯（50 mL）中的 (R)-1,1'-聯-2-萘酚（1.607 g，5.61 mmol）用二丁基鎂（7.29 mL，1.0 M，於正庚烷中7.29 mmol）處理。攪拌0.5小時後，將該反應冷卻至0°C，並且然後添加於甲苯（150 mL）中的反式-3-(4-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E2 （10 g，56.11 mmol）和三級丁基 (R)-哌啶-3-基胺基甲酸酯（11.24 g，56.11 mmol）。攪拌過夜之後，將該反應混合物傾倒至碎冰中，將該混合物在DCM和水之間分配。將水層再次用DCM萃取並將合併的有機層用飽和NaHCO3 和鹽水洗滌，然後乾燥（硫酸鈉）並且蒸發。快速二氧化矽層析法（於DCM中0至10% MeOH）給出呈黃色油的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2b （12.00 g，56.5%）。1H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 7.20 (2H, ddt), 6.94 - 7.07 (2H, m), 4.94 (1H, s), 4.32 (1H, t), 3.78 (1H, s), 3.31 (1H, dtd), 2.72 (2H, dd), 2.53 (2H, s), 2.24 (1H, dt), 1.96 - 2.10 (2H, m), 1.52 - 1.86 (4H, m), 1.47 (10H, d)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 379。三級丁基 N-[(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1R,2R,4S)-4-(4- 氟苯基 )-2- 羥基 - 環戊基 ]-3- 哌啶基 ] 胺基甲酸酯和三級丁基 N-[(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1S,2S,4R)-4-(4- 氟苯基 )-2- 羥基 - 環戊基 ]-3- 哌啶基 ] 胺基甲酸酯 F2b
Figure 02_image041
在室溫，將反式-3-(4-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E2 （1.225 g，6.87 mmol）添加到於EtOH（10 mL）中的三級丁基 ((3R,5R)-5-氟哌啶-3-基)胺基甲酸酯（1 g，4.58 mmol）和Na2 CO3 （1.457 g，13.74 mmol）中。將所得混合物在90°C攪拌12小時。然後在減壓下去除溶劑，並將粗產物藉由矽膠快速柱層析法純化（於DCM中0至10% MeOH），以給出以上命名的立體異構物的混合物F2b （1.030 g，56.7%，呈黃色油）。LCMS：m/z (ES+)，[M+H]+ = 397。三級丁基 4,4- 二氟 -1-(4-(4- 氟苯基 )-2- 羥基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯 F2c
將反式3-(4-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E2 （450 mg，1.2 eq.）、三級丁基 4,4-二氟哌啶-3-基胺基甲酸酯（500 mg，1.0 eq.）以及Na2 CO3 （450 mg，2.0 eq.）於乙醇（8 mL）中的混合物在微波條件下攪拌：130°C，16小時。將該混合物用二氯甲烷稀釋並且過濾，將濾液濃縮並將殘餘物藉由矽膠快速柱層析法純化（石油醚/EtOAc 90 : 10至60 : 40），以給出呈淺黃色稠油的三級丁基 4,4-二氟-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2c （250 mg，28%產率）。三級丁基 (3R)-5,5- 二氟 -1-(4-(4- 氟苯基 )-2- 羥基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯 F2d
在密封小瓶中，向(1R,3S,5S)-3-(4-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷（反式環氧化物）E2 （300 mg，1.0 eq.）於是10 mL無水乙醇中的溶液中添加(R)-三級丁基 5,5-二氟哌啶-3-基胺基甲酸酯（398 mg，1.0 eq.）和碳酸鈉（357 mg，2.0 eq.）。將懸浮液在130°C微波中照射7小時。將懸浮液過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱純化（石油醚/EtOAc，0至10%梯度，然後於DCM中的20% EtOAc），以提供呈白色固體的化合物三級丁基 (3R)-5,5-二氟-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2d （290 mg，42%產率）。三級丁基 (3R)-1-(4-(3- 氟苯基 )-2- 羥基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯 F3
向3-(3-氟苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E3 （300 mg）於CH3 CN（10 mL）中的溶液添加(R)-三級丁基 哌啶-3-基胺基甲酸酯（404 mg，1.2 eq）、LiClO4 （358 mg，2.0 eq）。將該反應混合物回流過夜。TLC顯示起始材料被完全消耗。將該混合物濃縮並將殘餘物添加到乙酸乙酯（50 mL）和水（50 mL）。將該混合物用乙酸乙酯萃取。將有機層經Na2 SO4 乾燥，濃縮，並藉由矽膠柱層析法純化，用乙酸乙酯洗脫，以給出三級丁基 (3R)-1-(4-(3-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F3 （580 mg，90%）。三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟 -3- 甲氧基苯基 )-2- 羥基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯 F4
在密封小瓶中，向3-(4-氟-3-甲氧基苯基)-6-氧雜二環[3.1.0]己烷E4 （100 mg，1.0 eq.）於是3 mL無水乙醇中的溶液中添加(R)-三級丁基 哌啶-3-基胺基甲酸酯（115 mg，1.2 eq.）和碳酸鈉（101 mg，2.0 eq.）。將懸浮液在130°C微波中照射6小時。將懸浮液過濾並濃縮。對殘餘物進行柱層析法（矽膠DCM/甲醇，0至3%甲醇）給出呈無色固體的F4 （140 mg，71%產率）。1H NMR (CDCl3 400MHz) δ 6.99 (1H, dd), 6.86 (1H, dd), 6.75-6.71 (1H, m), 4.92 (1H, br s), 4.27-4.21 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.75 (1H, br s), 3.10-3.06 (2H, m), 2.88-2.75 (2H, m), 2.53 (2H, m), 2.41-2.35 (2H, m), 2.15-2.05 (1H, m), 1.90-1.66 (6H, m), 1.40 (9H, d)。化合物 1 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟苯基 )-2-(2H-1,2,3- 三唑 -2- 基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
將反式三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2a （600 mg，1.59 mmol）、1H-1,2,3-三唑（219 mg，3.17 mmol）、DIAD（0.401 mL，2.06 mmol）以及PPh3 （541 mg，2.06 mmol）於DCM（20 mL）中的溶液在室溫攪拌2小時。在減壓下去除溶劑，並將殘餘物藉由矽膠快速柱層析法純化（於是水中10%至50% MeCN），以提供呈白色固體的標題化合物（450 mg，66.1%）。將粗產物在沃特世（Waters）SFC 350製備型系統上分離[柱：CHIRALART直鏈澱粉-SA，2 x 25 cm，5 μm；流動相A：CO2 ：80，流動相B：MeOH（2 mM NH3 -MeOH）：20；流速：40 mL/min；220 nm]。獲得呈白色固體的兩種級分：級分1（300 mg，66.7%，RT1：3.03）和級分2（100 mg，22.22%，RT2：4.58）。
將級分1進一步在沃特世SFC 350製備型系統上分離，柱：(R,R)-WHELK-O1-Kromasil，5 cm x 25 cm（5 μm）；流動相A：CO2 ：85，流動相B：MeOH（2mM NH3 -MeOH）：15；流速：40 mL/min；220 nm；RT1：2.31；RT2：2.71。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的異構物1（120 mg，40%，100% ee）和異構物2（120 mg，40%，98.4% ee）。LCMS m/z (ESI), [M+H]+ = 430。步驟 2.1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 三唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 1
Figure 02_image043
將步驟1中獲得的異構物1（120 mg，0.28 mmol）於TFA（1 mL）和DCM（5 mL）中的溶液在室溫攪拌1小時。然後在減壓下去除溶劑，並將粗產物藉由製備型HPLC純化[柱：XBridge Prep OBD C18柱30 × 150 mm 5 μm；流動相A：水（含有10 mmol/L NH4 HCO3 + 0.1%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：8分鐘內25% B至54% B；254/220 nm；Rt：6.87分鐘]，以提供呈白色固體的化合物 1 （70.0 mg，76%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 330；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 7.71 (2H, s), 7.31 (2H, ddd), 7.10 - 6.96 (m, 2H), 5.23 (1H, ddd), 3.58 (2H, ddt), 3.08 - 2.72 (3H, m), 2.52 - 2.17 (3H, m), 1.86 (4H, ddd), 1.75 - 1.45 (2H, m), 1.11 (1H, qd)。19F NMR (300MHz, CD3 OD, 24°C) δ -118.73 (s, 1F)。化合物 2 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(4- 氰基 -1H- 吡唑 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
向三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2a （5 g，13.21 mmol）、1H-吡唑-4-甲腈（1.230 g，13.21 mmol）、PPh3 （5.20 g，19.82 mmol）於DCM（100 mL）中的混合物中添加DTAD（4.56 g，19.82 mmol）。將該反應物在25°C攪拌16小時。將所得溶液用飽和NaHCO3 和鹽水洗滌。將有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾，然後濃縮至乾燥。將殘餘物藉由C18快速柱層析法純化（洗脫梯度為於是水（含有0.2%氨）中的40%至55% MeCN），以提供呈黃色油的所希望的產物。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 454。藉由製備型手性-HPLC [Chiralpak IA，2 x 25 cm，5 μm；流動相A：己烷-HPLC，流動相B：IPA-HPLC；流速：20 mL/min；梯度：A : B = 70:30，17.5分鐘] 進行的分離給出呈黃色油的標題化合物（異構物1，2.60 g，47.3%）。步驟 2.1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈 化合物 2
Figure 02_image045
向步驟1中獲得的異構物1（2.6 g，5.73 mmol）中添加於二㗁𠮿中的HCl（50 mL，200 mmol）。將所得混合物在20°C攪拌4小時，然後濃縮至乾燥。將殘餘物用Et2 O/MeOH（10/1）處理，並且收集所得固體，然後處理，用飽和Na2 CO3 稀釋並且然後萃取到EtOAc中。將有機層經Na2 SO4 乾燥並且濃縮至乾燥，以給出呈淺黃色固體的化合物 2 （1.358 g，67.0%）。1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.74 (1 H, s), 8.11 (1 H, s), 7.30 - 7.43 (2 H, m), 7.05 - 7.20 (2 H, m), 4.87 - 5.00 (1 H, m), 3.26 - 3.41 (2 H, m), 2.79 (1 H, d), 2.50 - 2.72 (2 H, m), 2.09 - 2.32 (3 H, m), 1.96 (1 H, dd), 1.50 - 1.79 (4 H, m), 1.37 (3 H, d), 0.83 - 1.02 (1 H, m)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 354。化合物 3 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(3- 氰基 -1H- 吡唑 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，在0°C，將DTAD（243 mg，1.06 mmol）逐滴添加到於DCM（15 mL）中的F2a （200 mg，0.53 mmol）、1H-吡唑-3-甲腈（49.2 mg，0.53 mmol）以及PPh3 （277 mg，1.06 mmol）中。將所得混合物在25°C攪拌3小時。將有機層用水性NaHCO3 洗滌並在減壓下去除溶劑。將粗產物藉由反相層析法純化（C18柱），使用水（含有0.1% NH3 ）和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的三級丁基 (3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（240 mg，100%）。將此固體藉由製備型TLC純化（DCM : MeOH = 40 : 1），以提供呈黃色固體的三級丁基 ((3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯級分1（90 mg，37.5%）和呈黃色固體的三級丁基 ((3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯級分2（70.0 mg，29.2%）。針對兩種級分的LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 454；將級分1（90 mg，0.20 mmol）藉由製備型手性-HPLC純化 [Chiralpak IE柱，用在己烷（用0.1% DEA改性）中的5% IPA作為洗脫液進行等度洗脫]，以提供呈黃色固體的三級丁基 ((3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯異構物1（35.0 mg，38.9%，異構物1，99.3% ee）和呈黃色固體的異構物2（30.0 mg，33.3%，異構物2，99% ee）。LCMS：（異構物1）m/z (ESI), [M+H]+ = 454; （異構物2）m/z (ESI), [M+H]+ = 454。步驟 2.1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -3- 甲腈 化合物 3
Figure 02_image047
將TFA（0.5 mL，6.49 mmol）添加到於DCM（3 mL）中的以上三級丁基 ((3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯異構物1（20 mg，0.04 mmol）中。將所得混合物在25°C攪拌2小時。製備型HPLC柱 [X Select CSH Prep C18 OBD柱，5 μm，19*150 mm；流動相A：沃特世（0.05% TFA），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：7分鐘內12% B至32% B；254；220 nm] 給出呈白色固體的化合物 3 ，異構物1（17.00 mg，51.8%）。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 7.75 (dd, 1H), 7.28 - 7.42 (m, 2H), 6.96 - 7.14 (m, 3H), 5.17 (ddd, 1H), 3.81 (dt, 1H), 3.60 (s, 1H), 3.41 (dt, 2H), 3.14 (d, 1H), 2.67 (s, 1H), 2.29 - 2.63 (m, 5H), 1.90 (dt, 2H), 1.44 - 1.74 (m, 2H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ - 77.287(m, 10F), -118.609 (s, 1F)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 354。化合物 4 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(3- 氰基 -1H- 吡咯 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
如以上關於合成化合物3所述，使三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2a （250 mg，0.66 mmol）、1H-吡咯-3-甲腈（60.8 mg，0.66 mmol）、PPh3 （346 mg，1.32 mmol）於DCM（15 mL）中的溶液與DTAD（304 mg，1.32 mmol）反應。C18快速柱層析法（洗脫梯度為於是水（含有0.3% NH3 H2 O）中的20%至60% MeCN）給出呈無色油的三級丁基 (3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡咯-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（180 mg，60.2%）。製備型手性-HPLC [Phenomenex Lux 5u纖維素-4，填充AXIA，250*21.2 mm，5 μm；流動相A：己烷--HPLC，流動相B：IPA--HPLC；流速：20 mL/min；梯度：A:B = 在21分鐘內80:20；254/220 nm；RT1：12.5；RT2：17.2] 提供呈黃色油的三級丁基 (3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡咯-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（70.0 mg，38.9%，異構物1）和呈黃色油的三級丁基 (3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡咯-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物2（70.0 mg，38.9%，異構物2）。針對兩種異構物的LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 453。 步驟2.1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡咯 -3- 甲腈 化合物 4
Figure 02_image049
將TFA（1 mL，12.98 mmol）添加到於DCM（5 mL）中的以上三級丁基 (3R)-1-(2-(3-氰基-1H-吡咯-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物2（70 mg，0.18 mmol）中。將所得混合物在25°C攪拌2小時。標準後處理，然後製備型HPLC [XBridge Prep OBD C18柱30 × 150 mm 5 μm；流動相A：沃特世（10 mmoL/L NH4 HCO3 ），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：35分鐘內35% B至39% B；254/220 nm] 給出呈白色固體的化合物 4 ，異構物2（20.00 mg，24.25%）。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.36 (dtd, 2H), 1.50 - 1.93 (m, 3H), 2.13 - 2.45 (m, 5H), 2.63 (dt, 1H), 2.86 - 2.97 (m, 1H), 3.05 (dq, 1H), 3.33 - 3.56 (m, 2H), 4.71 (ddt, 1H), 6.48 (dd, 1H), 6.98 - 7.12 (m, 3H), 7.27 - 7.40 (m, 2H), 7.66 (t, 1H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ -76.962 (m, 3F), -119.017 (s, 1F)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 353。化合物 5 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(4- 氰基 -1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) -4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
如以上關於合成化合物3所述進行於DCM（15 mL）中的F2a （350 mg，0.92 mmol）、1H-1,2,3-三唑-4-甲腈（87 mg，0.92 mmol）、PPh3 （485 mg，1.85 mmol）以及DTAD（426 mg，1.85 mmol）的光延反應。快速C18柱層析法 [洗脫梯度為於是水（含有0.3%水性NH3 ）中的20%至60% MeCN] 給出無色油（220 mg，52.3%）。
對此油進行的製備型手性-HPLC [Phenomenex Lux 5u纖維素-4，填充AXIA，250*21.2 mm，5 μm；流動相A：己烷--HPLC，流動相B：IPA--HPLC；流速：20 mL/min；梯度：12分鐘內30 B至30 B；254/220 nm；RT1：6.2；RT2：8.4] 給出呈無色油的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（95 mg，43.2%，級分1）和呈無色油的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（95 mg，43.2%，級分2）。針對兩種異構物的LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 455。步驟 2.1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 三唑 -4- 甲腈 化合物 5
Figure 02_image051
將TFA（1 mL，12.98 mmol）添加到於DCM（5 mL）中的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯 級分1（60 mg，0.13 mmol）中。將所得混合物在25°C攪拌2小時，並且然後在減壓下去除溶劑。藉由製備型HPLC進行的純化（柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19*150 mm；流動相A：沃特世（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：7分鐘內20% B至47% B；254/220 nm）給出呈白色固體的化合物 5 ，異構物1（73.0 mg，56.4%）。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.58 - 1.71 (m, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.97 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.74 (br s, 2H), 2.95 (m, 1H), 3.22 (m, 1H), 3.46 (m, 1H), 3.61 - 3.72 (m, 1H), 3.92 (br.s, 1H), 5.53 (s, 1H), 7.01 - 7.15 (m, 2H), 7.31 - 7.42 (m, 2H), 8.34 (dd, 1H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ -77.222 (m, 16F), -118.395 (s, 1F), LCMS: m/z (ESI), [M+H]+ = 355。化合物 6 步驟 1. 三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(4- 氰基 -1H- 吡唑 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-5- 氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯的合成
在室溫在DCM（20 mL）中進行DIAD（235 mg，1.16 mmol）、PPh3 （305 mg，1.16 mmol）、1H-吡唑-4-甲腈（64.9 mg，0.70 mmol）以及F2b （220 mg，0.58 mmol）的光延反應。將來自後處理的粗產物藉由C18快速柱層析法純化，洗脫梯度為於是水（含有0.3% NH4 HCO3 ）中的0至48% MeCN。將純級分蒸發至乾燥，以提供淡黃色固體（220 mg，80%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 472。將粗產物進一步藉由製備型手性-HPLC純化 [Chiralpak IA柱，用在己烷（用0.1%DEA改性）中的30% EtOH作為洗脫液進行等度洗脫]，以給出呈淡黃色固體的三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(4-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-5-氟哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（100 mg，45.5%，100% ee）和呈白色固體的三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(4-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-5-氟哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物2（98 mg，44.5%，異構物2，100% ee）。針對兩種異構物的LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 472。 步驟2.1-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈 化合物 6
Figure 02_image053
在0°C，用在DCM（20 mL）中的TFA（3 mL，38.94 mmol）進行三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(4-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-5-氟哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（100 mg，0.21 mmol）的Boc-去保護。在標準後處理之後，藉由製備型HPLC [（XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長），使用水（含有0.05% TFA）和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液] 來純化粗產物。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的化合物 6 ，即呈TFA鹽的異構物1（68.0 mg，37.1%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 372。1H NMR (400 MHz, CD3 OD) 8.52 - 8.44 (1 H, d), 8.03 - 7.96 (1 H, s), 7.41 - 7.29 (2 H, m), 7.13 - 7.00 (2 H, m), 5.06 - 4.95 (1.5 H, m),4.81 (0.5H, s) 3.79 - 3.64 (1 H, dt), 3.66 - 3.49 (2 H, m), 3.14 - 3.03 (1 H, d), 3.03 - 2.89 (1 H, q), 2.79 - 2.60 (1 H, dd), 2.49 - 2.29 (4 H, ddd), 2.26 - 2.15 (1 H, d), 1.97 - 1.74 (2 H, m)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -77.36, -118.84, -185.37。化合物 7 步驟 1. 三級丁基 1-(2-(4- 氰基 -1H- 吡唑 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-4,4- 二氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下在5°C在DCM（10 mL）中進行的二-三級丁基 (E)-二氮烯-1,2-二甲酸酯（220 mg，0.21 mmol）、F2c （220 mg，0.53 mmol）、1H-吡唑-4-甲腈（10 mg，0.11 mmol）以及PPh3 （56.4 mg，0.21 mmol）的光延反應在標準後處理和快速氧化鋁層析法（洗脫梯度為於是水中的0至60% MeCN）之後給出呈無色油的三級丁基 1-(2-(4-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-4,4-二氟哌啶-3-基胺基甲酸酯（120 mg，46%）。將粗產物進一步藉由製備型手性-HPLC純化 [（柱：Phenomenex Lux 5u纖維素-4，填充AXIA，2.12*25 cm，5 μm；流動相A：己烷-HPLC，流動相B：EtOH-HPLC；流速：20 mL/min；梯度：A : B = 在40分鐘內80 : 20；254/220 nm；RT1：10.664；RT2：13.923）]，以提供3種異構物（所有白色固體和m/z (ESI), [M+H]+ = 490.4）：異構物1（50.0 mg，41.7%，98% ee），異構物2（40.0 mg，33.3%，98% ee）以及異構物3（30.0 mg，25.00%，100% ee）；針對所有異構物的LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 490。 EA步驟 2. 1-[2-(3- 胺基 -4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈 化合物 7
Figure 02_image055
在25°C用TFA（47.5 mg，0.49 mmol）進行的於DCM（3 mL）中的三級丁基 1-(2-(4-氰基-1H-吡唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-4,4-二氟哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物2（40 mg，0.08 mmol）的Boc去保護在製備型HPLC（柱：XBridge Prep C18 OBD柱19 × 150 mm 5 μm；流動相A：水（10 mmol/L NH4 HCO3 ），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：7分鐘內46% B至47% B；254/220 nm；Rt：6.05分鐘）之後給出呈黃色固體的化合物 7 （15.00 mg，47.1%）。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.70 - 2.03 (2 H, m), 2.05 - 2.24 (1 H, m), 2.25 - 2.45 (4 H, m), 2.61 (2 H, dddd), 2.80 - 3.11 (2 H, m), 3.45 - 3.87 (2 H, m), 4.94 - 5.03 (1 H, m), 6.97 - 7.16 (2 H, m), 7.26 - 7.45 (2 H, m), 7.97 (1 H, s), 8.46 (1 H, s)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -119.11 - -118.71 (m), -107.36, -106.52。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 390。化合物 8 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟苯基 )-2-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下在0°C進行於DCM（1.5 L）中的F2a （10 g，26.42 mmol）、1H-吡唑（18 g，264.40 mmol）、PPh3 （14 g，53.38 mmol）以及DTAD（12 g，52.11 mmol）的光延反應。標準後處理之後，C18快速柱層析法（於是水中的0至100% MeCN）給出呈黃色油的粗產物（9.80 g，87%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 429；1H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.47 (9 H, d), 1.52 - 1.82 (6 H, m), 2.20 - 2.55 (6 H, m), 2.66 (1 H, d), 3.53 - 3.81 (2 H, m), 4.75 (2 H, s), 6.27 (1 H, dt), 7.01 (2 H, t), 7.23 (2 H, td), 7.48 - 7.59 (2 H, m)。將粗產物（4.5 g）藉由沃特世SFC 350製備型系統純化 [Phenomenex Lux 5u纖維素-3，5 cm x 25 cm，5 μm；流動相A：CO2 ：80%，流動相B：MeOH（0.1%異丙胺）：20%；流速：160 mL/min；220 nm；RT1：3.93；RT2：4.58]，以提供呈黃色固體的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-(1H-吡唑-1-基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（2.000 g，44.4%，98.7% ee，異構物1）。步驟 2. 1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 吡唑 -1- 基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 8
Figure 02_image057
如上所述用TFA（6.0 mL）進行於DCM（30.0 mL）中的三級丁基 ((R)-1-((1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-吡唑-1-基)環戊基) 哌啶-3-基) 胺基甲酸酯異構物1（2.0 g，4.667 mmol）的Boc-去保護。快速二氧化矽層析法（於DCM中的0至10% MeOH，使用於DCM中的2%氫氧化銨來鹼化二氧化矽柱）給出呈白色固體的化合物 8 （1.400 g，91%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 329；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.10 (1 H, dtd), 1.48 - 2.08 (6 H, m), 2.13 - 2.49 (3 H, m), 2.77 (2 H, ddt), 2.89 - 3.02 (1 H, m), 3.54 (2 H, ddt), 4.91 (1 H, td), 6.31 (1 H, t), 7.03 (2 H, ddt), 7.28 - 7.39 (2 H, m), 7.53 (1 H, d), 7.79 (1 H, dd)。19F NMR (376 MHz, CD3 OD) δ -119.16。化合物 9 步驟1.三級丁基 (3R ， 5R)-5- 氟 -1-(4-(4- 氟苯基 )-2-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，經5分鐘的時間段，將DTAD（1.742 g，7.57 mmol）添加到冷卻至0°C的於DCM（50 mL）中的F2b （1.0 g，2.52 mmol）、1H-吡唑（0.859 g，12.61 mmol）和PPh3 （1.985 g，7.57 mmol）中。將所得混合物在室溫攪拌3小時。將粗產物藉由製備型HPLC純化 [XBridge Prep OBD C18柱19*250 mm，5 μm；流動相A：水（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：7分鐘內40% B至50% B；220,254 nm；RT：6.48分鐘]，以提供呈白色固體的三級丁基 (3R,5R)-5-氟-1-(4-(4-氟苯基)-2-(1H-吡唑-1-基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（0.700 g，62.2%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 447.3；1H NMR (CDCl3 ) δ 7.58 (d, 1H), 7.51 (t, 1H), 7.24 (ddd, 2H), 7.11 - 6.94 (m, 2H), 6.29 (q, 1H), 4.73 (d, 2H), 3.68 - 3.46 (m, 3H), 2.83 (s, 1H), 2.74 - 2.52 (m, 2H), 2.39 (t, 3H), 2.34 - 2.19 (m, 1H), 2.00 (s, 1H), 1.78 (dt, 2H), 1.63 (s, 1H), 1.48 (d, 9H)。在沃特世SFC 350製備型系統上進行的製備型SFC [Chiralpak AS-H，5*25 cm，5 μm；流動相A：CO2 ：70%，流動相B：MeOH-製備型：30%；流速：150 mL/min；220 nm；RT1：4.2；RT2：5.31] 給出作為異構物1（330 mg，47,1%，白色固體）和異構物2（335 mg，47.9%，黃色膠）的所希望的產物。步驟 2. 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 吡唑 -1- 基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 9
Figure 02_image059
將TFA（2.0 mL）添加到於DCM（8 mL）中的三級丁基 ((3R,5S)-5-氟-1-((1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-吡唑-1-基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯異構物1（328 mg，0.73 mmol）中。將所得混合物在室溫攪拌2小時。製備型HPLC [XBridge Prep OBD C18柱30 × 150 mm，5 μm；流動相A：水（0.05% NH3 H2 O），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：7分鐘內25% B至50% B；254/220 nm；Rt：5.40分鐘] 給出呈白色固體的化合物 9 （120 mg，47.2%，異構物1）。m/z (ESI), [M+H]+ = 347.1；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 7.81 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.43 - 7.25 (m, 2H), 7.12 - 6.97 (m, 2H), 6.32 (t, 1H), 5.01 - 4.88 (m, 1H), 4.75 - 4.64 (m, 1H), 3.67 - 3.45 (m, 2H), 3.17 - 2.83 (m, 3H), 2.49 - 2.15 (m, 4H), 2.14 - 1.74 (m, 3H), 1.43 (dddd, 1H)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -119.15, -183.33。化合物 10 步驟1.三級丁基 N-[(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1R,2R,4S)-4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ]-3- 哌啶基 ] 胺基甲酸酯和三級丁基 N-[(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1S,2S,4R)-4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ]-3- 哌啶基 ] 胺基甲酸酯
Figure 02_image061
將三級丁基 N-[(3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-羥基-環戊基]-3-哌啶基]胺基甲酸酯和三級丁基 N-[(3R,5R)-5-氟-1-[(1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-羥基-環戊基]-3-哌啶基]胺基甲酸酯的1 : 1混合物（F2b ）（12 g，30.27 mmol）、1H-1,2,4-三唑（3.14 g，45.40 mmol）以及PPh3 （11.91 g，45.40 mmol）於THF（150 mL）中的0°C溶液用偶氮二甲酸二異丙酯（9.18 g，45.40 mmol）處理。在25°C 3小時後，在減壓下去除溶劑。對殘餘物進行C18快速柱層析法（於是水（含有0.2% TFA）中的10%至28% MeCN），以給出呈淺黃色油的所希望的光延產物（12.00 g，89%）。
Figure 02_image063
將來自以上所述的一系列反應的非鏡像異構物（即三級丁基 N-[(3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1,2,4-三唑-1-基)環戊基]-3-哌啶基]胺基甲酸酯和三級丁基 N-[(3R,5R)-5-氟-1-[(1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(1,2,4-三唑-1-基)環戊基]-3-哌啶基]胺基甲酸酯）的混合物（694 g，1.55 mol）藉由手性-SFC分離 [柱：CelluCoat，50 x 250 mm，10 μm；流動相：在CO2 中的17% MeOH；流速：450 mL/min；260 nm；RT1：2.25分鐘；RT2：2.88分鐘]，以給出呈白色固體的三級丁基 N-[(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1R,2R,4S)-4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ]-3- 哌啶基 ] 胺基甲酸酯 （異構物1）（335.3 g，48.3%，99.8% ee/de），1H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.44 (9 H, s), 1.73 - 1.93 (3 H, m), 2.17 - 2.44 (4 H, m), 2.55 (1 H, s), 2.62 - 2.9 (2 H, m), 3.54 (2 H, dt), 3.94 (1 H, s), 4.79 (3 H, ddd), 6.9 - 7.07 (2 H, m), 7.20 (2 H, ddd), 7.97 (1 H, s), 8.19 (1 H, s); LCMS：m/z (ES+), [M+H]+ = 448；和呈白色固體的三級丁基 N-[(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1S,2S,4R)-4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ]-3- 哌啶基 ] 胺基甲酸酯 （異構物2）（343 g，49.4%，98.1% ee/de），1H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.45 (9 H, s), 1.74 (3 H, q), 2.18 - 2.46 (4 H, m), 2.56 - 2.82 (3 H, m), 3.53 (2 H, dtd), 3.97 (1 H, s), 4.80 (3 H, ddd), 6.93 - 7.06 (2 H, m), 7.20 (2 H, ddd), 7.97 (1 H, s), 8.16 (1 H, s); LCMS：m/z (ES+)，[M+H]+ = 448。步驟 2.(3R,5R)-5- 氟 -1-[(1R,2R,4S)-4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 10
Figure 02_image065
藉由在20°C添加3.8 M HCl（水性1.18 L，4.5 mol，6 eq.），然後在50°C攪拌15小時，在氮氣氛下在異丙醇（1.32 L）中進行三級丁基 N-[(3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1,2,4-三唑-1-基)環戊基]-3-哌啶基]胺基甲酸酯異構物1（335 g，0.75 mol）的Boc -去保護。藉由真空去除溶劑並將殘餘物用DCM（2.5 L）稀釋，冷卻至約10°C並用1.5 M Na2 CO3 鹼化至pH 10-11（需要約2.5 L）。將有機層分離並將水層用DCM（1.5 L）反萃取。將合併的有機層用水（1 L）洗滌並且經Na2 SO4 乾燥。在精過濾並蒸發溶劑之後，獲得呈白色無定形固體的260 g (3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺（定量產率）。
結晶為所希望的多晶型物（以上稱為化合物10 形式A或形式A）係藉由將乙酸異丙酯（450 mL）添加到(3R,5R)-5-氟-1-[(1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1,2,4-三唑-1-基)環戊基]哌啶-3-胺（280 g，804 mmol）中並在30分鐘內在70°C加熱（直至產生均質溶液）來進行。然後在20-30分鐘內以分批方式添加庚烷（450 mL）。在70°C攪拌30分鐘之後，溫度逐步降低並繼續在約20°C攪拌過夜（約16小時）。對於XRPD分析，將所得固體形式A藉由過濾分離，並且然後用冷庚烷（150-200 mL）洗滌。在真空中在40°C乾燥過夜產生269 g（96.4%產率，＞99.9% ee/de）呈白色結晶固體的化合物10形式A。1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.31 (1 H, m), 1.71 (1 H, q), 1.85 (2 H, m), 1.91 (1H, d), 2.20 (2 H, d), 2.24 (2 H, m), 2.33 (1 H, dd), 2.81 (1 H, d), 2.84 (1H, s), 2.89 (1 H, s), 3.38 (1 H, m), 3.49 (1 H, m), 4.78 (1 H, d), 5.01 (1 H, s), 7.12 (2 H, t), 7.37 (2 H, dd), 8.01 (1 H, s), 8.67 (1 H, s); LCMS：m/z (ES+), [M+H]+ = 348。結晶學數據參見上文，例如表1和圖1。化合物 11 步驟 1. 三級丁基 (3R,5R)-5- 氟 -1-(4-(4- 氟苯基 )-2-(2H- 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，在0°C，將偶氮二甲酸二三級丁酯（437 mg，1.90 mmol）添加到於DCM（30 mL）中的F2b （376 mg，0.95 mmol）、2H-四唑（100 mg，1.42 mmol）以及Ph3 P（497 mg，1.90 mmol）中。將所得混合物在25°C下攪拌8小時，並且然後在減壓下去除溶劑。將粗產物藉由快速C18-快速層析法純化（於是水中的0%至40% MeCN）。將純級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的反式三級丁基 (3R,5R)-5-氟-1-(4-(4-氟苯基)-2-(2H-四唑-2-基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（253 mg，59.5%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 449.5。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.78 (s, 1H), 7.38 (dd, 2H), 7.06 (t, 2H), 5.68 - 5.55 (m, 1H), 4.74 (s, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.73 - 3.57 (m, 2H), 3.10 - 2.92 (m, 2H), 2.51 - 2.35 (m, 4H), 2.12 - 1.86 (m, 4H), 1.45 (d, 9H)。將粗產物藉由在Chiralpak IA柱上的製備型手性-HPLC純化，用於己烷（0.1% DEA）中的20% EtOH作為洗脫液進行等度洗脫。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供異構物1（114 mg，45.1%，異構物1，100% ee）和級分2（18.00 mg，7.11%，混合物（異構物2和異構物3））以及異構物4（89 mg，35.2%，95.5% ee），呈白色固體。 步驟2.5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 11
Figure 02_image067
在25°C，將TFA（1 mL，12.98 mmol）添加到於DCM（4 mL）中的前述異構物1（112 mg，0.25 mmol）中以去除Boc基團。將所得混合物在25°C攪拌2小時，並且然後在減壓下去除溶劑。將粗產物藉由製備型HPLC純化 [（XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長度），使用水（包含0.05% NH3 H2 O）和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液]。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的化合物 11 （40.0 mg，46.0%，異構物1）。這被證明係最有效的異構物。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 349.5。DSC：溫度：272.86°C；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.79 (s, 1H), 7.52 - 7.31 (m, 2H), 7.18 - 6.98 (m, 2H), 5.59 (ddd, 1H), 4.75 (s, 1H), 3.66 (ddt, 2H), 3.20 - 2.94 (m, 3H), 2.59 - 2.26 (m, 4H), 2.28 - 1.86 (m, 3H), 1.62 - 1.23 (m, 1H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ -118.88-118.76 (1F, s), 184.37-183.48 (1F, s)。化合物 12 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟苯基 )-2-(2H- 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，在0°C，經5分鐘的時間段，將二-三級丁基 (E)-二氮烯-1,2-二甲酸酯（122 mg，0.53 mmol）添加到於DCM（10 mL）中的F2a （200 mg，0.53 mmol）、2H-四唑（37.0 mg，0.53 mmol）以及三苯基膦（139 mg，0.53 mmol）中。將所得混合物在室溫攪拌15小時。在減壓下去除溶劑。氧化鋁快速柱層析法（於是水中的0至70% MeCN）給出白色固體（155 mg，68%）（LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 431.15；TFA, HPLC Rt =  0.729分鐘）。製備型手性-HPLC [（柱：CHIRAL ART纖維素-SB，2x25 cm，5 μm；流動相A：己烷（0.1% TFA），流動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：A : B = 在15分鐘內85 : 15；254/220 nm；RT1：11.2；RT2：13.32）] 給出呈無色油的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-(2H-四唑-2-基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（70.0 mg，45.1%，100% ee）和呈無色油的異構物2（70.0 mg，45.1%，100% ee）。 步驟2.1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 12
Figure 02_image069
在室溫，將TFA（96 mg，0.98 mmol）添加到於DCM（5 mL）中的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-(2H-四唑-2-基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（70 mg，0.16 mmol）中。在室溫攪拌1小時後，在減壓下去除溶劑。將粗產物藉由製備型HPLC純化 [柱：XBridge Prep OBD C18柱19 x 250 mm，5 μm；流動相A：水（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：7分鐘內36% B至46% B；220,254 nm；Rt：5.79分鐘] 以給出呈白色固體的化合物 12 （25.00 mg，46.5%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 331.5；TFA, HPLC Rt =  1.129分鐘；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.17 (1 H, dtd), 1.50 - 1.64 (1 H, m), 1.73 (1 H, ddd), 1.83 - 2.19 (4 H, m), 2.34 - 2.56 (3 H, m), 2.77 - 3.02 (3 H, m), 3.50 - 3.80 (2 H, m), 5.59 (1 H, ddd), 7.00 - 7.13 (2 H, m), 7.31 - 7.43 (2 H, m), 8.77 (1 H, s)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -118.65, -76.86。DSC：溫度：281.89°C。化合物 13 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(3- 氰基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，在25°C，將偶氮二甲酸二三級丁酯（426 mg，1.85 mmol）添加到於DCM（10 mL）中的F2a （350 mg，0.92 mmol）、1H-1,2,4-三唑-3-甲腈（104 mg，1.11 mmol）以及Ph3 P（485 mg，1.85 mmol）中，然後在25°C攪拌3小時。標準後處理之後，C18快速柱層析法（於是水（含有0.3% NH3 OH）中的0至40% MeCN）給出白色固體（350 mg）。製備型TLC（石油醚 : EtOAc = 2 : 1）提供呈白色固體的級分1（110 mg，26%）和級分2（230 mg，55%）。將級分1藉由在Chiralpak IA柱上的製備型手性-HPLC進一步分離，用EtOH中的己烷作為洗脫液進行等度洗脫，以給出異構物1三級丁基 (3R)-1-(2-(3-氰基-1H-1,2,4-三唑-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（31.0 mg，28%，100% ee）和異構物2（37.0 mg，34%，100% ee），呈白色固體。 步驟2. 1-[2-(3-胺基-1-哌啶基)-4-(4-氟苯基)環戊基]-1,2,4-三唑-3-甲腈化合物 13
Figure 02_image071
在25°C，將TFA（1.0 mL）添加到於DCM（5 mL）中的在步驟1中獲得的異構物1（31 mg，0.07 mmol）中。將所得混合物在25°C攪拌2小時，濃縮，並且然後藉由製備型HPLC純化（XBridge Prep C18 OBD柱，5 µ二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長），使用水（含有0.05% TFA）和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液，以給出呈白色固體的化合物 13 （24.3 mg，46%）；LCMS：m/z (ESI) [M+H]+ = 355.5；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.35 (dd, 2H), 7.06 (t, 2H), 5.44 (q, 1H), 4.04 (dt, 1H), 3.72-3.37 (m, 3H), 3.03-2.87 (m, 1H), 2.82 - 2.67 (m, 2H), 2.50 (ddd, 3H), 2.13-1.87 (m, 3H), 1.85-1.48 (m, 2H)。化合物 14 和化合物 15 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟 -3- 甲氧基苯基 )-2- 羥基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在密封小瓶中，向F4 （100 mg，1.0 eq.）於是3 mL無水乙醇中的溶液中添加 (R)-三級丁基 哌啶-3-基胺基甲酸酯（115 mg，1.2 eq.）和碳酸鈉（101 mg，2.0 eq.）。將懸浮液在130°C微波中照射6小時，然後過濾並濃縮。矽膠柱層析法（於DCM中的0至3%甲醇）給出呈無色固體的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟-3-甲氧基苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（140 mg，71%產率）。1H NMR (CDCl3 400MHz) δ 6.99 (dd, 1H), 3.86 (dd, 1H), 6.75-6.71 (m, 1H), 4.92 (br. s, 1H), 4.27-4.21 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.75 (br. s, 1H), 3.10-3.06 (m, 2H), 2.88-2.75 (m, 2H), 2.53 (br. s, 2H), 2.41-2.35 (m, 2H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.90-1.66 (m, 6H), 1.40 (d, 9H)。步驟 2. 三級丁基 (3R)-1-(2-(4- 氰基苯氧基 )-4-(4- 氟 -3- 甲氧基苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
將三級丁基 (3R)-1-(2-(4-氰基苯氧基)-4-(4-氟-3-甲氧基苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（140 mg，1.0 eq.）於是3 mL無水THF中的溶液進行攪拌，並用NaH（35 mg，2.5 eq.）處理。0.5小時後，將4-氟苄腈（50 mg，1.2 eq.）添加到該反應，然後將該反應在室溫攪拌18小時，並且然後在45°C攪拌18小時。然後將該反應混合物傾倒至5 mL NH4 Cl飽和溶液中，用EtOAc（5 mL x 3）萃取，乾燥，並藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH = 20/1）純化，以提供所希望的4-氰基苯氧基化合物（80 mg，46%產率）。使用沃特世SFC 350製備型系統進行的純化 [柱：AS（250 mm*30 mm*5 μm），條件：水性NH3 中的25% IPA，60 mL/min] 給出三級丁基 (3R)-1-(2-(4-氰基苯氧基)-4-(4-氟-3-甲氧基苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（30 mg，37%產率）和異構物2（35 mg，43%產率）；異構物1在5-95AB_1.5分鐘層析法中顯示LCMS Rt =0.892分鐘，MS (ESI) m/z = 510.3 [M+H]+ 。1H NMR (CDCl3 400MHz) δ 7.84 (dd, 1H), 7.60 (dd, 2H) 7.16-7.11 (m, 1H), 6.99-6.96 (m, 1H), 6.84-6.82 (m, 1H), 6.77-6.73 (m, 1H), 4.79-4.77 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.73 (br. s, 1H), 3.25-3.19 (m, 2H), 2.69-2.63 (m, 2H), 2.47-2.19 (m, 4H), 2.04-1.95 (m, 1H), 1.88-1.82 (m, 2H), 1.68-1.64 (m, 3H), 1.43 (d, 9H)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 510。 步驟3.4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟 -3- 羥基 - 苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈 （化合物 14 ）和4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟 -3- 甲氧基 - 苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈 （化合物 15 ）
Figure 02_image073
在-78°C，向以上所述的胺基甲酸酯的異構物1（30 mg）於DCM（2 mL）中的溶液中添加BBr3 （0.5 mL）。將該混合物在-78°C下攪拌1小時。將該混合物傾倒至水性NH4 Cl（20 mL）中，藉由使用水性NaHCO3 調節至pH = 10，然後用DCM（2 x 20 mL）萃取。將有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮，並藉由製備型HPLC純化 [（方法：柱：Durashell C18 150*25 mm*5 μm，梯度：43%-73% B（A = 水/0.05%氨，B = 乙腈），流速：25 mL/min）]，以給出化合物 14 （1.3 mg，5.6%產率）和化合物 15 （1.0 mg，4.1%產率）。
化合物 14 ：LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 396。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.65 (d, 2H), 7.15 (d, 2H), 6.93 (dd, 1H), 6.82 (d, 1H), 6.70-6.64 (m, 1H), 5.00-4.98 (m, 1H), 3.26-3.18 (m, 2H), 3.05 -2.95 (m, 1H), 2.93-2.63 (m, 3H), 2.30-2.14 (m, 2H), 2.10-1.95 (m, 2H), 1.90-1.65 (m, 3H), 1.63-1.49 (m, 1H), 1.24-1.10 (m, 1H)。
化合物 15 ：LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 410。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.66 (d, 2H), 7.15 (d, 2H), 7.00-6.96 (m, 2H), 6.83-6.75 (m, 1H), 4.72-4.65 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H), 3.05-2.95 (m, 1H), 2.90-2.65 (m, 3H), 2.35-2.15 (m, 2H), 2.14-1.95 (m, 2H), 1.91-1.68 (m, 3H), 1.62 -1.49 (m, 1H), 1.25-1.13 (m, 1H)。化合物 16 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(2- 氯 -4- 氰基苯氧基 )-4-(3- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在0°C，向F3 （580 mg）於THF（8 mL）中的溶液中分批添加NaH（184 mg，3.0 eq）。在相同溫度下攪拌30分鐘後，分批添加溶解於THF（2 mL）中的3-氯-4-氟苄腈（285 mg，1.2 eq）。將該反應混合物在室溫攪拌過夜，然後用水性NH4 Cl（20 mL）淬滅，用水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（50 mL x 3）萃取，經Na2 SO4 乾燥。將合併的有機層濃縮，以給出呈黃色油的所希望的醚（920 mg）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 514。 步驟2.4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(3- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-3- 氯 - 苄腈 化合物 16
Figure 02_image075
將以上Boc保護的化合物（920 mg）於HCl/二㗁𠮿（10 mL）中的溶液在室溫攪拌2小時，然後濃縮，以給出固體。將固體用乙酸乙酯（3 x 20 mL）洗滌，然後乾燥，以給出殘餘物（350 mg，47%），將其藉由沃特世SFC 350製備型系統分離 [柱：AD（250 x 30 mm，5 μm），條件：30%乙醇/氨，流速：60 mL/min]，以給出異構物1化合物 16 （95.7 mg）和相同化合物的第二異構物2（125.1 mg）。
異構物1（化合物 16 ）：LCMS：m/z (ESI) [M+H]+ = 414。最有效的異構物：1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.81-7.80 (1H, m), 7.68-7.65 (1H, m), 7.31-7.28 (2H, m), 7.15-6.94 (3H, m), 5.06-4.92 (1H, m), 3.40-3.25 (2H, m), 3.05-2.95 (1H, m), 2.92-2.72 (2H, m), 2.45-2.36 (1H, m), 2.32-2.00 (4H, m), 1.90-1.51 (4H, m), 1.24-1.19 (1H, m)。
異構物2：LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 414。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.83-7.82 (1H, m), 7.68-7.67 (1H, m), 7.32-7.27 (3H, m), 7.05-7.01 (2H, m), 5.05-4.97 (1H, m), 3.43-3.35 (2H, m), 3.10-2.95 (1H, m), 2.95-2.75 (2H, m), 2.47-2.39 (1H, m), 2.35-2.05 (4H, m), 1.95-1.56 (4H, m), 1.28-1.22 (1H, m)。化合物 17 步驟 1. 三級丁基 1-(2-(4- 氰基苯氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-4,4- 二氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，在0°C，向三級丁基 4,4-二氟-1-(4-(4-氟苯基)-2-羥基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯F2c （250 mg，1.0 eq.）、4-羥基苄腈（86 mg，1.2 eq.）以及Ph3 P（470 mg，3.0 eq.）於是無水THF（10 mL）中的溶液中逐滴添加DIAD（485 mg，4.0 eq.）。將所得混合物在14°C-22°C攪拌20小時。標準後處理之後，快速層析法（石油醚/EA = 90/10至80/20）給出呈黃色稠油的異構物產物混合物（220 mg，71%產率）。藉由沃特世SFC 350製備型系統進行的分離（柱：OJ 250 mm*30 mm*5 μm，條件：鹼-甲醇，流速：60 mL/min）給出純異構物1（20 mg，峰1）和異構物2（15 mg，峰2）以及兩種異構物的混合物（50 mg，峰3+4），將該混合物進一步藉由沃特世SFC 350製備型系統分離（柱：IC 250 mm*30 mm *10 um，條件：鹼-甲醇，流速：70 mL/min），以給出異構物3（15 mg，第二次分離中的峰1）和異構物4（10 mg，第二次分離中的峰2）。獲得呈無色油的所有異構物。針對異構物1的LCMS：m/z (ESI) [M+H]+ = 516。步驟 2. 4-[2-(3- 胺基 -4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈 化合物 17
Figure 02_image077
向以上異構物1（20 mg，1.0 eq.）於是無水二氯甲烷（5 mL）中的溶液中添加TFA（1 mL）。將所得混合物在16°C-23°C攪拌1小時。將該混合物傾倒至飽和NaHCO3 溶液（50 mL）中，用DCM（30 mL x 3）萃取，經無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（柱：Durashell 150*25 mm*5 μm，梯度：70%-95%B（A= 0.05%氨/水，B = 甲醇），流速：25 mL/min），以在凍乾後給出呈白色固體的化合物 17 （2.9 mg，18%產率）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 416。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.68 (d, 2H), 7.33-7.29 (dd, 2H), 7.12 (d, 2H), 7.03 (t, 2H), 4.90-4.85 (m, 1H), 3.35-3.32 (m, 1H), 3.30-3.28 (m, 1H), 3.15-3.05 (m, 1H), 2.98-2.87 (m, 1H), 2.82-2.71 (m, 1H), 2.66-2.55 (m, 1H), 2.52-2.32 (m, 2H), 2.27-2.08 (m, 3H), 2.07-1.92 (m, 1H), 1.81-1.75 (m, 1H)。化合物 18 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(4- 氰基苯氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-5,5- 二氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，向PPh3 （569 mg，3.0 eq.）和4-羥基苄腈（129 mg，1.5 eq.）的混合物中添加F2d （290 mg，1.0 eq.）和DIAD（439 mg，3.0 eq.）於是3 mL無水THF中的溶液。將該黃色溶液在17°C-27°C攪拌18小時。將溶液濃縮，並藉由矽膠柱純化（石油醚/EtOAc，0至20% EA），用碳酸鉀飽和溶液（3 x 10 mL）洗滌並濃縮，以提供呈白色固體的三級丁基 (3R)-1-(2-(4-氰基苯氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-5,5-二氟哌啶-3-基胺基甲酸酯（328 mg，88%產率）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 516。步驟 2. 4-[2-(5- 胺基 -3,3- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈 化合物 18
Figure 02_image079
向以上Boc保護的化合物（328 mg，1.0 eq.）於5 mL DCM中的溶液中添加2 mL TFA。將該溶液在室溫攪拌1小時，然後濃縮。將殘餘物用水性HCl稀釋並用石油醚/EtOAc（1 : 1）（20 mL x 3）萃取以去除雜質。將水層用碳酸氫鈉鹼化並用二氯甲烷（10 mL x 3）萃取。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並且濃縮，以提供黃色固體（50 mg，產率19%），將其藉由Berger MG-II SFC製備型系統分離 [ChiralPak AD 250 × 30 mm I.D.，5 um；流動相：CO2 /MeOH（0.1%水性NH3 ）= 70/30，60 mL/min]，以提供呈白色固體的化合物 18 （5.2 mg，10%）。也分離了第二異構物（此處未報告數據）。
化合物 18 顯示：LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 416。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.68 (d, 2H), 7.32 (dd, 2H), 7.15 (d, 2H), 7.04 (t, 2H), 4.89-4.84 (m, 1H), 3.38-3.36 (m, 1H), 3.18 (br. s, 1H), 2.96-2.92 (m, 2H), 2.79-2.73 (m, 1H), 2.39-2.15 (m, 6H), 1.84-1.78 (m, 2H)。化合物 19
步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(4- 氰基 -3- 氟苯氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在0°C，向F2a （200 mg）、2-氟-4-羥基苄腈（108 mg，1.5 eq）和PPh3 （272 mg，2.0 eq）於THF（4 mL）中的溶液中添加於THF（1 mL）中的DIAD（180 mg，2.0 eq）。將該混合物在25°C攪拌3天。將該混合物用水（20 mL）稀釋，用EA（2 x 20 mL）萃取。將有機層經鈉乾燥，濃縮，並藉由矽膠層析柱純化（石油醚/EA = 5/1），以給出產物（200 mg，76%產率），將其藉由沃特世SFC 350製備型系統分離 [柱：AD（300 mm*50 mm，10 μm），條件：35% IPA + 水性NH3 ，80 mL/min]，以給出異構物1（77 mg，38%產率，Rt = 8.21分鐘）和異構物2（76 mg，38%產率，Rt = 9.64分鐘）。針對兩種異構物的LCMS，m/z (ESI), [M+Na]+ = 520。步驟 2. 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-2- 氟 - 苄腈 化合物 19
Figure 02_image081
將以上直接獲得的異構物1（77 mg）於DCM（2 mL）和TFA（1 mL）中的溶液在27°C攪拌30分鐘。將該混合物濃縮並藉由製備型HPLC純化（方法：柱：沃特世Xbridge C18 150*20 mm*5 μm，梯度：65%-95% B（A = 水/0.05%氨，B = 甲醇），流速：25 mL/min），以給出化合物 19 （13.5 mg，20%產率）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 398。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 7.65 (t, 1H), 7.32-7.25 (m, 2H), 7.07-6.98 (m, 3H), 6.94 (dd, 1H), 4.84-4.80 (m, 1H), 3.30-3.24 (m, 1H), 3.20-3.14 (m, 1H), 3.03-2.94 (m, 1H), 2.89-2.73 (m, 2H), 2.38-2.32 (m, 1H), 2.25-2.07 (m, 3H), 1.99 (t, 1H), 1.92-1.84 (m, 1H), 1.81-1.66 (m, 2H), 1.64-1.48 (m, 1H), 1.21-1.11 (m, 1H)。化合物 20 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(2-(2- 氰基苯氧基 )-4- 苯基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在0°C，向F1 （400 mg）於DMF（3 mL）中的攪拌溶液中分批添加NaH（133 mg，3.0 eq），然後30分鐘後，逐滴引入溶解於DMF（2 mL）中的2-氟苄腈（148 mg，1.1 eq），並將該反應在室溫攪拌過夜。標準後處理之後，將該反應藉由層析柱純化（石油醚/EtOAc 1 : 1），以給出粗三級丁基 (3R)-1-(2-(2-氰基苯氧基)-4-苯基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（210 mg，41%產率）。LCMS：m/z (ESI) [M+H]+ = 462。 步驟2.2-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4- 苯基 - 環戊氧基 ] 苄腈 化合物 20
Figure 02_image083
在室溫，向前述實驗的產物（210 mg）於二氯甲烷（3 mL）中的攪拌溶液中添加HCl/二㗁𠮿（2 mL，4 M）。然後將該混合物在室溫攪拌2小時，然後用二氯甲烷（15 mL x 3）萃取，並且然後藉由添加NaHCO3 飽和溶液將水層調節至pH 8。將水層用二氯甲烷（20 mL x 3）萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並濃縮，以給出粗2-(2-((R)-3-胺基哌啶-1-基)-4-苯基環戊基氧基)苄腈（93 mg，56%產率）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 362。使用沃特世SFC 350製備型系統對此粗產物進行的純化 [柱：OJ（250 nm*30 nm*5 μm），條件：30%乙醇/氨，流速：60 ml/min] 給出化合物 20 （23.2 mg，異構物1）和第二較小效力的異構物（10.5 mg，異構物2）。
化合物 20 （異構物1）：LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 361。1H NMR (CD3 OD, 400MHz) δ 7.64-7.60 (m, 2H), 7.30-7.28 (m, 4H), 7.20-7.18 (m, 2H), 7.10-7.06 (m, 1H), 3,38-3.35 (m, 1H), 3.35-3.33 (m, 1H), 2.86-2.81 (m, 3H), 2.40-1.60 (m, 9H), 1.22-1.16 (m, 1H)。異構物2 LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 362。1H NMR (CD3 OD, 400MHz) δ 7.64-7.60 (m, 2H), 7.30-7.28 (m, 4H), 7.21-7.17 (m, 2H), 7.10-7.07 (m, 1H), 3,37-3.34 (m, 1H), 3.25-3.23 (m, 1H), 3.01-2.81 (m, 3H), 2.41-1.63 (m, 9H), 1.21-1.13 (m, 1H)。化合物 21 1.三級丁基 (3R)-1-(2-(2- 氯 -4- 氰基苯氧基 )-4- 苯基環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，在0°C，向NaH（1.1 g，2.5 eq.）於是無水THF（20 mL）中的混合物中逐滴添加F1（4.0 g，1.0 eq.，11.1 mmol）於THF（30 mL）中的溶液。攪拌0.5小時之後，將3-氯-4-氟苄腈（2.0 g，1.2 eq.）於THF（10 mL）中的溶液添加到該反應中。在17°C-21°C再攪拌18小時之後，將該混合物傾倒至水（200 mL）中並且用乙酸乙酯（3 x 100 mL）萃取。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。矽膠柱層析法（於石油醚中的0至30%乙酸乙酯）提供三級丁基 (3R)-1-(2-(2-氯-4-氰基苯氧基)-4-苯基環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（460 mg，8.3%產率）、以及其他產物的混合物。異構物1係從TLC觀察到的極性最小的產物。1H NMR (CDCl3 400MHz) δ 1.45 (9H, s), 1.61-1.85 (4H, m), 2.05-2.46 (4H, m), 2.48 (2H, br. s), 2.73 (1H, br. s), 3.15-3.25 (1H, m), 3.34-3.42 (1H, m), 3.75 (1H, br. s), 4.75 (1H, br. s), 4.85 (1H, br. s), 7.08-7.15 (1H, m), 7.23-7.26 (3H, m), 7.29-7.32 (2H, m), 7.52-7.55 (1H, m), 7.66-7.67 (1H, m)。步驟 2. 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4- 苯基 - 環戊氧基 ]-3- 氯 - 苄腈 化合物 21
Figure 02_image085
向前述實驗中獲得的異構物1（610 mg，1.0 eq.，1.23 mmol）於二氯甲烷（5 mL）中的溶液中添加TFA（3 mL）。將所得溶液在7°C-17°C攪拌0.5小時。然後將該溶液濃縮，用水（10 mL）稀釋，用氨鹼化並用DCM（15 mL x 3）萃取。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物用水稀釋，然後乾燥（凍乾），以提供呈白色固體的最終產物化合物 21 （348.6 mg，71%產率）。LCMS：在4.0分鐘層析法中Rt = 1.633，LCMS: m/z (ESI), [M+H]+ = 396。1H NMR (CD3 OD 400MHz) δ 1.13-1.26 (1H, m), 1.53-1.66 (1H, m), 1.70-1.77 (1H, m), 1.77-1.85 (1H, m), 1.86-1.94 (1H, m), 2.01-2.07 (1H, m), 2.09-2.17 (1H, m), 2.18-2.29 (2H, m), 2.36-2.45 (1H, m), 2.76-2.83 (1H, m), 2.84-2.92 (1H, m), 2.98-3.05 (1H, m), 3.22-3.39 (2H, m), 4.91-4.95 (1H, m), 7.16-7.22 (1H, m), 7.24-7.33 (5H, m), 7.66 (1H, dd), 7.80 (1H, d)。化合物 22 步驟 1. 三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(6- 氯 -4- 甲基嗒 𠯤 -3- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-5- 氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，經5分鐘的時間段，將F2b （950 mg，2.40 mmol）添加到於冷卻至0°C的DMF（8 mL）中的NaH（115 mg，4.79 mmol）、3,6-二氯-4-甲基嗒𠯤（586 mg，3.59 mmol）中。將所得溶液在室溫攪拌2小時。將殘餘物藉由製備型TLC純化（石油醚 : EtOAc = 2 : 1），以提供呈黃色油的產物（450 mg，35.9%）；LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 523；1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.89 - 7.58 (m, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.11 (td, 2H), 6.79 (dd, 1H), 5.48 (t, 1H), 4.85 (d, 1H), 3.67 (s, 1H), 3.34 (s, 2H), 3.17 (d, 1H), 2.51 (m, 4H), 2.36 - 2.08 (m, 4H), 2.13 - 1.79 (m, 2H), 1.76 - 1.47 (m, 2H), 1.43 - 1.26 (m, 21H)。 步驟2.三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(6- 氰基 -4- 甲基嗒 𠯤 -3- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-5- 氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在氮氣下，將以上獲得的6-氯-4-甲基嗒𠯤-3-基氧基化合物（150 mg，0.29 mmol）添加到於THF（5 mL）中的氰化鋅（67.3 mg，0.57 mmol）和2-二-三級丁基膦基-2',4',6'-三-異丙基-1,1'-聯苯（18.27 mg，0.04 mmol）中。將所得混合物在80°C攪拌1小時，然後蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC純化（石油醚 : EtOAc = 2 : 1），以提供呈黃色油的粗產物（120 mg，81%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 514；鹼性，HPLC Rt = 1.371分鐘。製備型手性-HPLC [CHIRALPAK IE，2 cm x 25cm，5 μm；流動相A：己烷（0.1% DE）-HPLC，流動相B：EtOH-HPLC；流速：20 mL/min；梯度：A : B = 在31分鐘內70 : 30；220/254 nm] 提供8種級分，各自具有 ＞ 98%的ee；呈白色固體的級分1（RT1：9.37分鐘，10.00 mg，6.67%）。呈白色固體的異構物2（RT2：12.16分鐘；15.00 mg，10.00%）。呈白色固體的異構物3（RT3：14.92分鐘；10.00 mg，6.67 %）。呈白色固體的異構物4（RT4：17.38分鐘；10.00 mg，6.67%）。呈白色固體的異構物5（RT5：18.6分鐘；5.00 mg，3.33 %）。呈白色固體的異構物6（RT6：21.8分鐘；20.00 mg，13.33 %）。呈白色固體的異構物7（RT7：23.6分鐘；15.00 mg，10.00%）。呈白色固體的異構物8（RT8：28分鐘；10.00 mg，6.67 %）。步驟 3. 6-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-5- 甲基 - 嗒 𠯤 -3- 甲腈 化合物 22
Figure 02_image087
將TFA（0.1 mL，0.02 mmol）添加到於DCM（1 mL）中的以上獲得的異構物4（8 mg，0.02 mmol）中。將所得溶液在室溫攪拌30分鐘。在減壓下去除溶劑。將該混合物用水性NH3 調節至pH = 8。將粗產物藉由製備型HPLC純化 [（XBridge Prep OBD C18柱30 × 150 mm 5 μm；流動相A：水（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：55 mL/min；梯度：7分鐘內35% B至55% B；254/220 nm；Rt：6.15分鐘）]。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的化合物 22 （4.40 mg，68.3%），其被證明為有效異構物。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 414；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 7.89 (s, 1H), 7.30 - 7.30 (m, 2H), 7.07 - 7.0 (m, 2H), 5.82 (br s, 1H), 5.02 (br s, 1H), 3.58 (br s, 2H), 3.34 (m, 1H), 3.18 (m, 2H), 2.90 (m, 2H), 2.47 (m, 1H), 2.38 - 2.13 (m, 6H), 1.85 (m, 2H)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -118.834, -185.169。化合物 23 步驟 1. ((3R)-1-(2-((4- 氯嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基 ) 胺基甲酸酯
在氮氣下，在0°C，經5分鐘的時間段，將F2 （500 mg，1.32 mmol）添加到於DCM（8 mL）中的PPh3 （520 mg，1.98 mmol）和4-氯嗒𠯤-3(2H)-酮（207 mg，1.59 mmol）中。然後以逐滴方式引入DEAD（0.314 mL，1.98 mmol）。使所得混合物升溫至室溫並且攪拌2小時。然後在減壓下去除溶劑，並將殘餘物藉由矽膠快速柱層析法純化，洗脫梯度為於石油醚中的0至50% EtOAc，以提供黃色油（1000.0 mg，154%）。將粗產物藉由沃特世SFC 350製備型系統純化 [(柱：(R,R)WHELK-01 5/100 Kromasil，2.11 cm*25 cm（5 μm）；流動相A：CO2 ：65%，流動相B：EtOH-HPLC：35%；流速：45 mL/min；220 nm；RT1：4.06；RT2：4.85）]，以提供呈黃色固體的三級丁基 ((3R)-1-(2-((4-氯嗒𠯤-3-基)氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯異構物1（220 mg，36.7%，100% ee）和呈黃色固體的異構物2（240 mg，40.0%，96.1% ee）。
異構物1 LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 491；1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.40 - 7.31 (m, 2H), 7.17 - 7.07 (m, 2H), 6.59 (d, 1H), 3.47 (dq, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.17 (d, 1H), 2.75 (d, 1H), 2.62 (s, 1H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 2.03 (d, 2H), 1.94 (d, 2H), 1.82 - 1.71 (m, 1H), 1.62 (s, 1H), 1.53 (s, 1H), 1.37 (s, 9H)。
異構物2 LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 491；1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 7.11 (t, 2H), 6.60 (d, 1H), 3.44 (d3H), 3.17 (m, 1H), 2.52 (s, 5H), 2.36 - 2.14 (m, 2H), 2.00 (s, 1H), 1.89 (s, 1H), 1.84 - 1.70 (m, 2H), 1.67 (d, 1H), 1.55 (s, 1H), 1.36 (s, 9H)。步驟 2. 1-[2-(4- 氯嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 -4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 23
Figure 02_image089
向異構物2（240 mg，0.49 mmol）於DCM（10 mL）中的溶液中添加TFA（1 mL，0.49 mmol）。將所得溶液在室溫攪拌30分鐘，並且然後蒸發溶劑。將該混合物用NH3 .H2 O調節至pH = 8。製備型HPLC [XBridge Prep OBD C18柱30 × 150 mm 5 μm；流動相A：水（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：55 mL/min；梯度：7分鐘內35% B至40% B；254/220 nm；Rt：5.53分鐘] 給出呈白色固體的化合物 23 （128 mg，67.0%），其被證明為更有效的異構物。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 391；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.00 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.38 - 7.24 (m, 2H), 7.10 - 6.95 (m, 2H), 5.71 (ddd, 1H), 3.56 (dt, 2H), 2.98 (d, 1H), 2.81 (t, 2H), 2.47 - 2.00 (m, 4H), 1.94 - 1.34 (m, 5H), 1.11 (d, 1H)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -119.158。化合物 24 步驟 1. 三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(6- 氰基嗒 𠯤 -3- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 )-5- 氟哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
將F2b （26 g，65.58 mmol）於THF（300 mL）中的溶液冷卻至0°C，然後用氫化鈉（4.72 g，196.73 mmol）處理，並在10分鐘之後，用6-氯嗒𠯤-3-甲腈（10.98 g，78.69 mmol）處理。將所得混合物在0°C攪拌30分鐘，並且在室溫攪拌30分鐘。標準後處理之後，將粗產物藉由快速C18-快速層析法純化（於是水（0.5% TFA）中的0至40% MeCN）。獲得呈白色固體的三級丁基 (3R,5R)-1-(2-(6-氰基嗒𠯤-3-基氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)-5-氟哌啶-3-基胺基甲酸酯（20.00 g，61,1%）。將產物進一步藉由沃特世SFC 350製備型系統純化 [（柱：Lux 5um纖維素-4，5*25 cm，5 μm；流動相A：CO2 ：60%，流動相B：MeOH：40%；流速：150 mL/min；230 nm；RT1：6.52；RT2：7.27）]，以提供呈白色固體的異構物1：（7.00 g，96.8% ee）和異構物2：（10.00 g，95.5% ee）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 500。步驟 2. 6-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嗒 𠯤 -3- 甲腈 化合物 24
Figure 02_image091
在25°C，將二甲基硫烷（30 mL，391.94 mmol）和TFA（30 mL，392.03 mmol）按批次逐滴添加到於DCM（100 mL）中的在前述實驗中獲得的異構物2（10 g，20.02 mmol）。將所得混合物在25°C攪拌2小時，並且然後在減壓下去除溶劑。C18-快速層析法（於是水（0.05% TFA）中的10%至30% MeCN）提供呈白色固體的化合物 24 （9.00 g，82%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 400；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.03 (d, 1H), 7.46 - 7.23 (m, 3H), 7.14 - 6.97 (m, 2H), 5.87 (d, 1H), 5.07 (s, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.51 - 3.36 (m, 1H), 3.31 (d, 2H), 3.08 - 2.83 (m, 1H), 2.73 (d, 1H), 2.50 (s, 1H), 2.29 (tt, 3H), 1.93 (dq, 2H)。19F NMR (376 MHz, CD3 OD) δ -77.3, -118.76, -185.06。化合物 25 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(2-(5- 氯嗒 𠯤 -3- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
將DTAD（487 mg，2.11 mmol）添加到於DCM（20 mL）中的5-氯嗒𠯤-3(2H)-酮（207 mg，1.59 mmol）、F2a （400 mg，1,06 mmol）以及PPh3 （554 mg，2.11 mmol）中。將所得混合物在30°C攪拌2小時，並且然後在減壓下去除溶劑。C18快速柱層析法（於是水（用0.1%水性NH3 改性）中的40%至42% MeCN）給出呈黃色固體的所希望的產物（450 mg，87%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 492；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.20 - 1.32 (m, 1H), 1.44 (d, 10H), 1.49 (d, 1H), 1.62 - 1.94 (m, 4H), 1.95 - 2.17 (m, 3H), 2.16 - 2.46 (m, 2H), 2.68 - 2.98 (m, 2H), 3.55 (dt, 3H), 5.64 (tt, 1H), 6.97 - 7.15 (m, 3H), 7.26 - 7.37 (m, 2H), 8.12 (t, 1H)。步驟 2. 三級丁基 (3R)-1-(4-(4- 氟苯基 )-2-(5- 氟嗒 𠯤 -3- 基氧基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
將KF（237 mg，4.07 mmol）添加到於DMSO（10 mL）中的前述哌啶-3-基胺基甲酸酯化合物（400 mg，0.81 mmol）中。將所得混合物在100°C攪拌72小時，然後用DCM（20 mL）稀釋，並且用水（25 mL x 3）洗滌。將有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並蒸發，以提供粗產物。製備型HPLC [XBridge Prep OBD C18柱19*250 mm，5 μm；流動相A：水（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：8分鐘內66% B至66% B；220,254 nm；Rt：6.57-7.18分鐘] 給出呈黃色固體的三級丁基 (3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-(5-氟嗒𠯤-3-基氧基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（60.0 mg，15.52%）。 LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 475。步驟 3. 1-[4-(4- 氟苯基 )-2-(5- 氟嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 25
Figure 02_image093
將TFA（3 mL，0.13 mmol）添加到於DCM（15 mL）中的以上獲得的胺基甲酸酯（60 mg，0.13 mmol）。將所得溶液在25°C下攪拌2小時，並且在減壓下去除溶劑。製備型HPLC [柱XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5 μm，19*150 mm；流動相A：水（0.05% TFA），流動相B：MeCN；流速：25 mL/min；梯度：7分鐘內15% B至25% B；254;220 nm；Rt：4.42分鐘] 給出呈無色油的化合物 25 ，(R)-1-((1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(5-氟嗒𠯤-3-基氧基)環戊基)哌啶-3-胺（20.00 mg，42.2%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 375；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.23 (d, 1H), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.01-7.07 (m, 2H), 6.77 (d, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.08-3.58 (m, 4H), 2.89-2.91 (m, 2H), 2.59 (s, 1H), 2.32-2.36 (m, 1H), 2.17-2.27 (m, 1H), 1.85-2.03 (m, 3H), 1.79-1.82 (m, 1H), 1.63-1.66 (m, 1H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ -77.16, -111.97。化合物 26 步驟 1. 三級丁基 (3R)-1-(2-(5- 氰基吡啶 -2- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
向F2a （360 mg，0.95 mmol）、6-羥基菸鹼甲腈（114 mg，0.95 mmol）、PPh3 （499 mg，1.90 mmol）於THF（25 mL）中的混合物添加DTAD（438 mg，1.90 mmol）。攪拌16小時後，蒸發溶劑。將殘餘物藉由製備型TLC純化（EtOAc : 石油醚 = 1 : 2），以提供呈黃色油的三級丁基產物（280 mg，61.3%）。Prep-HPLC提供呈白色固體的級分1（120 mg，33.8%）和呈白色固體的級分2（70.0 mg，19.69%）。
級分1：1H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 8.67 - 8.76, 8.13 (1 H, s), 7.61 - 7.71 (1 H, m), 7.28 - 7.40 (2 H, m), 7.12 (2 H, t), 6.61 (1 H, s), 6.48 (1 H, dd), 5.33 (1 H, s), 3.54 (2 H, d), 3.26 (2 H, s), 2.77 (1 H, s), 2.15 (4 H, s), 1.61 (7 H, s), 1.35 (9 H, s), 1.20(1 H, m)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 481。
級分2：1H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 1.33 (9 H, d), 1.75 (4 H, s), 2.13 (3 H, s), 5.69 (1 H, s), 6.99 - 7.19 (3 H, m), 7.29 - 7.40 (2 H, m), 8.17 (2 H, d), 8.72 (1 H, s); LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 481。 步驟2.6-(2-((R)-3- 胺基哌啶 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基氧基 ) 菸鹼甲腈 化合物 26
Figure 02_image095
向以上級分2（70 mg，0.15 mmol）於DCM（15 mL）中的溶液添加TFA（0.15 mL，1.95 mmol）。將該反應混合物在25°C攪拌1小時，並且濃縮至乾燥。將殘餘物藉由製備型HPLC純化 [水（含有0.05% NH3 ）和MeCN梯度]，以給出白色固體（50.0 mg，90%），將其進一步藉由製備型手性-HPLC純化，以提供呈白色固體的6-(2-((R)-3-胺基哌啶-1-基)-4-(4-氟苯基)環戊基氧基)菸鹼甲腈異構物1化合物 26 （22.70 mg，32.4%）和異構物2（15.50 mg，22.14%）。化合物 26 顯示：1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.24 (1 H, t), 1.49 - 1.81 (3 H, m), 1.89 (1 H, dq), 2.02 - 2.29 (4 H, m), 2.34 - 2.49 (1 H, m), 2.79 - 2.93 (2 H, m), 3.01 (1 H, d), 3.11 - 3.41 (2 H, m), 5.60 (1 H, ddd), 6.88 - 7.09 (3 H, m), 7.22 - 7.36 (2 H, m), 7.98 (1 H, dd), 8.56 (1 H, dd)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 381。
異構物2：1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.17 (1 H, td), 1.53 - 2.28 (9 H, m), 2.32 - 2.47 (1 H, m), 2.78 - 2.93 (2 H, m), 3.01 (1 H, d), 3.09 - 3.39 (1 H, m), 5.58 (1 H, d), 6.89 - 7.07 (3 H, m), 7.28 (2 H, dd), 7.97 (1 H, dt), 8.55 (1 H, d)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 381。化合物 27 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(2-(6- 氰基吡啶 -3- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在0°C，使於DCM（10 mL）中的F2a （226.8 mg，0.60 mmol）、5-羥基吡啶甲腈（86 mg，0.72 mmol）以及Ph3 P（393 mg，1.50 mmol）與DTAD（276 mg，1.20 mmol）反應。使該反應在2小時內升溫至室溫。標準後處理之後，C18快速柱層析法（於是水（0.1 M水性NH3 ）中的0至45% MeCN）給出呈淺紅色固體的三級丁基 (3R)-1-(2-(6-氰基吡啶-3-基氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯（160 mg，55.6%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 481.30。製備型手性-HPLC [（柱：Chiralpak IA，2*25 cm，5 μm；流動相：相A：己烷-HPLC，相B：EtOH-HPLC梯度；流速：20 mL/min；梯度：A : B = 在12.5分鐘內90 : 10；254/220 nm；RT1：11.13；RT2：14.44）] 提供含有呈白色固體的異構物1（30 mg，0.06 mmol）和異構物2（30 mg，0.06 mmol）的兩種級分。步驟 2. 6-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 吡啶 -3- 甲腈 化合物 27
Figure 02_image097
在室溫，向異構物1（30 mg，0.06 mmol）於DCM（2 mL）中的攪拌溶液中添加TFA（0,66 mL），持續16小時。藉由製備型HPLC進行的純化（XBridge Prep C18 OBD柱，5 µ二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長，水（含有0.05% TFA）/MeCN梯度）給出呈白色固體的化合物 27 （24.00 mg，90%），其被證明為最有效的異構物。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 381；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.43 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.32 (dd, 2H), 7.16 - 6.97 (m, 2H), 4.92 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.93 (d, 1H), 2.61 (d, 3H), 2.38 (dt, 1H), 2.21 (t, 2H), 2.05 - 1.76 (m, 3H), 1.77 - 1.48 (m, 2H)。化合物 28 步驟 1. 三級丁基 1-((1R)-4-(4- 氟苯基 )-2-( 嗒 𠯤 -3- 基氧基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在標準光延條件下，使DIAD（427 mg，2,11 mmol）、PPh3 （554 mg，2.11 mmol）、嗒𠯤-3(2H)-酮（152 mg，1.59 mmol）以及F2a （400 mg，1.06 mmol）在DCM（10 mL）中發生反應。在室溫下2小時後，在減壓下去除溶劑。C18快速柱層析法（於是水（用0.1水性NH3 改性）中的45%至50% MeCN）給出呈黃色固體的三級丁基 ((3R)-1-(4-(4-氟苯基)-2-(嗒𠯤-3-基氧基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯（400 mg，83%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 457；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.17 - 1.33 (m, 1H), 1.45 (d, 9H), 1.51 - 2.14 (m, 4H), 2.18 - 2.50 (m, 2H), 2.66 - 2.90 (m, 1H), 2.94 (d, 1H), 3.38 (s, 2H), 3.49 - 3.66 (m, 3H), 5.64 - 5.79 (m, 1H), 6.93 - 7.12 (m, 3H), 7.26 - 7.49 (m, 3H), 8.09 (ddd, 1H)。製備型手性-HPLC [Chiralpak IB，用己烷（用0.1% DEA改性）中的40% IPA作為洗脫液進行等度洗脫] 提供呈黃色固體的三級丁基 1-((1R)-4-(4-氟苯基)-2-(嗒𠯤-3-基氧基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（180 mg，45.0%，99.5% ee）和呈黃色固體的異構物2（180 mg，45.0%，99.5% ee）。LCMS（對於兩種異構物）m/z (ESI), [M+H]+ = 457。步驟 2. 1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 嗒 𠯤 -3- 基氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 28
Figure 02_image099
將TFA（2 mL，25.96 mmol）添加到於DCM（10 mL）中的以上獲得的異構物1（180 mg，0.39 mmol）中。將所得混合物在25°C攪拌2小時。然後在減壓下去除溶劑，並將粗產物藉由製備型HPLC純化 [X select CSH OBD柱30*150 mm 5 μm；流動相A：水（0.05% TFA），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：7分鐘內11% B至21% B；254；220 nm；Rt：5.57分鐘]，以提供呈白色固體的化合物 28 （240 mg，70.7 %）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 357；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.56 - 1.75 (m, 1H), 1.82 - 2.31 (m, 5H), 2.47 (ddd, 1H), 2.65 - 2.80 (m, 1H), 2.93 (t, 1H), 3.08 (t, 1H), 3.66 (dtd, 4H), 4.32 (dt, 1H), 5.99 (ddd, 1H), 6.99 - 7.14 (m, 3H), 7.29 - 7.42 (m, 2H), 7.48 (dd, 1H), 8.14 (dd, 1H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ -77.173 (m, 13F), -118.211 (s, 1F)。化合物 29 步驟 1. 三級丁基 (3R,5R)-5- 氟 -1-(4-(4- 氟苯基 )-2-( 嘧啶 -4- 基氧基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在0°C，經5分鐘的時間段，將DTAD（581 mg，2,52 mmol）添加到於DCM（15 mL）中的F2b （500 mg，1,26 mmol）、嘧啶-4-醇（145 mg，1,51 mmol）以及PPh3 （827 mg，3,15 mmol）中。將所得的溶液在25°C攪拌2小時。在減壓下去除溶劑。C18快速柱層析法（於MeCN中的40%至50%水）給出呈無色油的級分1（前峰：200 mg，33.4%）和呈白色固體的級分2（後峰：300 mg，50.1%）。將級分2進一步藉由在CHIRALPAK IA-3柱上的製備型手性-HPLC分離並純化，用在石油醚（用二乙胺改性）中的50% IPA作為洗脫液進行等度洗脫。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供呈白色固體的異構物1三級丁基((3S,5R)-5-氟-1-((1S,2S,4R)-4-(4-氟苯基)-2-(嘧啶-4-基氧基)環戊基)哌啶-3-基)胺基甲酸酯（160 mg，41%，100% ee）和呈白色固體的異構物2（110 mg，28.2%，99.6% ee）。針對兩種異構物的LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 475。 步驟2.5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 嘧啶 -4- 基氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺 化合物 29
Figure 02_image101
將TFA（3 mL，0,34 mmol）添加到於DCM（15 mL）中的以上異構物1（160 mg，0.34 mmol）中。將所得的溶液在25°C攪拌2小時。製備型HPLC [XBridge Prep OBD C18柱30 × 150 mm 5 um；流動相A：水（0.05%水性NH3 ），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：7分鐘內28% B至40% B；254/220 nm；Rt：5.95分鐘] 給出呈白色固體的化合物 29 （75.0 mg，59.0%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 375；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.75 (dd, 1H), 8.46 (dd, 1H), 7.38 - 7.24 (m, 2H), 7.09 - 6.89 (m, 3H), 5.62 (ddd, 1H), 4.90 (d, 0.5H), 4.76 (s, 0.5H), 3.35 (s, 1H), 3.30 - 3.01 (m, 4H), 2.51 - 1.96 (m, 6H), 1.77 (td, 1H), 1.44 (dt, 1H)。19F NMR (300 MHz, CD3 OD) δ -183.07, -119.12化合物 30 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(2-(5- 溴嘧啶 -2- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在室溫，向F2a （900 mg，2.38 mmol）於DMF（6 mL）中的溶液中添加NaH（190 mg，4.76 mmol）。將該混合物攪拌3分鐘，然後5-溴-2-氯嘧啶（690 mg，3.57 mmol）。8小時後，將該反應混合物用飽和（水性）NH4 Cl（30 mL）淬滅，並用DCM（2 x 20mL）萃取，將有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且蒸發以給出粗產物。製備型TLC（EtOAc : 石油 醚 = 1 : 2）給出呈白色固體的產物（500 mg，39.3%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 379。 步驟2.三級丁基 (3R)- 1-(2-(5- 氰基嘧啶 -2- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在室溫，向以上胺基甲酸酯（330 mg，0.62 mmol）於DMF（5 mL）中的溶液中添加Zn(CN)2 （145 mg，1.23 mmol）和鋅（4.03 mg，0.06 mmol）。然後添加Pd2 dba3 （106.8 mg，0.12 mmol）和dppf（137 mg，0.25 mmol）並將該反應在120°C攪拌3小時。在用EtOAc（20 mL）稀釋並且洗滌（水（10 mL x 2）、飽和鹽水（10 mL））之後，將合併的有機物乾燥並進行蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM : MeOH = 50 : 1）進行純化，以提供呈黃色固體的粗產物（200 mg，67.4 %）。製備型手性-HPLC（柱：CHIRAL纖維素-SB尺寸：0.46*15 cm；3 μm.流動相：己烷（0.1% DEA）: IPA=80 : 20；流速：1.0 mL/min；檢測器：UV-254 nm；RT1：7.353；RT2：8.710）提供呈白色固體的三級丁基 (R)-1-((1S,2S,4R)-2-(5-氰基嘧啶-2-基氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（120 mg，57.1%，100% ee）和異構物2（50.0 mg，23.81%，98.7% ee）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 482。 步驟3.2-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嘧啶 -5- 甲腈 化合物 30
Figure 02_image103
在室溫，向以上異構物1（120 mg，0.25 mmol）於DCM（2 mL）中的溶液中添加TFA（0.66 mL）。在攪拌16小時和標準後處理之後，將粗產物藉由製備型HPLC純化（柱：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5 μm，19*150 mm；流動相A：沃特世（0.1% FA），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：7分鐘內2% B至27% B；220,254 nm），以提供呈白色固體的化合物 30 （100 mg，93%），其被證明為有效的異構物。1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.98 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.04 (t, 2H), 5.59 (d, 1H), 3.42 (br s, 1H), 3.26 (s, 1H), 2.96 (d, 1H), 2.85 - 2.67 (m, 1H), 2.67 - 2.51 (m, 2H), 2.43 (d, 1H), 2.23 (d, 2H), 2.05 - 1.46 (m, 5H)。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 382。化合物 31 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(2-(5- 溴嘧啶 -2- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在室溫，向F2a （900 mg，2.38 mmol）於DMF（6 mL）中的溶液中添加NaH（190 mg，4.76 mmol）。將該混合物攪拌3分鐘，然後引入5-溴-2-氯嘧啶（690 mg，3.57 mmol）。8小時攪拌之後對該反應進行後處理。藉由製備型TLC純化，以給出呈白色固體的產物（500 mg，39.3%）。將此粗產物進一步藉由製備型手性-HPLC純化 [（CHIRALPAK IC-3尺寸：0.46*10 cm；3 μm.流動相：己烷（0.1%DEA）: EtOH=80 : 20；流速：1 mL/min；檢測器：254 nm；RT1：4.759；RT2：5.595），以提供呈白色固體的三級丁基 (3R)-1-(2-(5-氰基吡𠯤-2-基氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（100 mg，55.6%，99.9% ee）和異構物2（50.0 mg，27.8%，100% ee）。步驟 2. 5-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 吡 𠯤 -2- 甲腈 化合物 31
Figure 02_image105
在室溫，向以上獲得的異構物2（50 mg，0.10 mmol）於DCM（2 mL）中的溶液中添加TFA（0.5 mL，6.5 mmol）。將該反應攪拌2小時，然後進行標準後處理。將粗產物藉由製備型HPLC純化 [XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm,19*150 mm；流動相A：沃特世（10 mmol/L NH4 HCO3 ），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：20分鐘內20% B至33% B；254/220 nm]，以給出呈白色固體的化合物 31 （30.0 mg，76%），LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 382.4；1H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.64 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.30 (dd, 2H), 7.04 (t, 2H), 5.65 - 5.53 (m, 1H), 3.51 - 3.35 (m, 3H), 2.93 (d, 1H), 2.71 (d, 1H), 2.57 (d, 2H), 2.42 (s, 1H), 2.20 (dd, 2H), 2.02 - 1.89 (m, 1H), 1.89 - 1.72 (m, 2H), 1.65 (d, 2H)。化合物 32 步驟1.三級丁基 (3R)-1-(2-(2- 氰基嘧啶 -5- 基氧基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ) 哌啶 -3- 基胺基甲酸酯
在0°C，向F2a （260 mg，0.69 mmol）、5-羥基嘧啶-2-甲腈（100 mg，0.82 mmol）以及Ph3 P（270 mg，1.03 mmol）於DCM（10 mL）中的溶液中添加DTAD（237 mg，1.03 mmol）。將該混合物在25°C攪拌2小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3 （100 mL）淬滅，用DCM（2 x 50 mL）萃取，然後乾燥並且蒸發，以提供橙色膠狀物。製備型HPLC（XBridge Prep C18 OBD柱，5 µm二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長，水（含有0.05% NH3 ）/MeCN梯度）給出呈白色固體的產物（190 mg，57.4%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 482。製備型手性-HPLC [柱：CHIRALPAK IC，2.0 cm I.D*25 cm L；流動相A：己烷-HPLC，流動相B：EtOH-HPLC；流速：20 mL/min；梯度：A:B = 在24分鐘內85:15]給出三級丁基 (3R)-1-(2-(2-氰基嘧啶-5-基氧基)-4-(4-氟苯基)環戊基)哌啶-3-基胺基甲酸酯異構物1（第一級分；95 mg，50.0%，100% ee）和異構物2（第二級分；100 mg，52.6%，88.6% ee）。 步驟2.5-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嘧啶 -2- 甲腈 化合物 32
Figure 02_image107
在25°C，向以上獲得的異構物2（100 mg，0.21 mmol）於DCM（10 mL）中的溶液中添加TFA（0.66 mL）。將該反應混合物攪拌16小時，然後進行後處理。將粗產物藉由製備型HPLC純化（柱：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5 μm，19 mm x 150 mm；流動相A：沃特世（0.05% TFA），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：7分鐘內10% B至32% B；254；220 nm），以給出呈白色固體的化合物 32 （80 mg，51.6%）。LCMS：m/z (ESI), [M+H]+ = 382；1H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 8.63 (s, 2H), 7.42 - 7.26 (m, 2H), 7.13 - 6.97 (m, 2H), 5.57 - 5.40 (m, 1H), 4.08 (ddd, 1H), 3.76 - 3.36 (m, 5H), 3.11 (q, 2H), 2.63 (ddd, 1H), 2.35 (dtd, 2H), 2.23 - 2.01 (m, 3H), 2.01 - 1.81 (m, 1H), 1.70 (dd, 1H)。19F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -77.14, -118.01。化合物 10 （形式 A ）的 X 射線結晶學研究。
將如上所述獲得的化合物10的樣品安放在單晶矽（SSC）晶圓固定件上，並且用θ-θ PANalytical X’Pert PRO記錄粉末X射線繞射（X射線的波長為1.5418Å，鎳過濾的銅輻射，電壓為45 kV，燈絲發射40 mA）。使用自動可變發散和防散射狹縫，並且使該等樣品在測量期間旋轉。使用PIXCEL探測器（有效長度3.35° 2θ），使用0.013°步長和233秒步長測量時間從2°-50° 2θ掃描樣品。
化合物10（形式A）的13個最顯著的X射線粉末繞射峰報導在上表1中。表1的相對強度值係根據下表3的定義進行賦值的。 [表3]
Figure 108115491-A0304-0003
 *  相對強度來自於用固定狹縫測量的繞射圖
無
無
無
Figure 108115491-A0101-11-0002-3

Claims (22)

  1. 一種具有式I 之化合物
    Figure 03_image109
    式I 其中： X係a) O，並且R1 係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基或嗒𠯤基的6-員芳香族環或雜芳香族環，其中R1 視需要被獨立地選自以下的一個或兩個取代基Y取代：F、Cl、Br、CN、OH、OC1-3 烷基、OCF3 、C1-3 烷基、C(O)NH2 、CF3 或環丙基；或b) NR2 ，並且其中N、R1 和R2 一起形成5-員芳香族雜環，該5-員芳香族雜環視需要被獨立地選自以下的一個或兩個取代基Y取代：F、Cl、CN、或Me； R3 獨立地選自F、Cl、CN、甲基、甲氧基、羥基和乙炔基； R4 獨立地選自附接至哌啶環的C2、C4或C5的F或Cl；並且 整數a和b獨立地選自0、1或2； 或其藥學上可接受的鹽。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中該哌啶基團和基團XR1 處於反式-組態。
  3. 如申請專利範圍第1項或申請專利範圍第2項所述之化合物，其中該哌啶和該苯基基團處於順式組態。
  4. 如任一前述申請專利範圍所述之化合物，其中取代基R3 位於環戊烷環的鍵的對位。
  5. 如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中該取代基R3 係F且a = 1。
  6. 如任一前述申請專利範圍所述之化合物，其中X係O。
  7. 如申請專利範圍第6項所述之化合物，其中該6-員芳香族環或雜芳香族環R1 選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基或嗒𠯤基，並且其中R1 被選自以下的至少一個取代基Y取代：Me、Cl、F和CN。
  8. 如申請專利範圍第1至5項中任一項所述之化合物，其中X係NR2 。
  9. 如申請專利範圍第8項所述之化合物，其中包含NR1 R2 的該5-員芳香族雜環係未經取代的。
  10. 如申請專利範圍第8項或申請專利範圍第9項所述之化合物，其中包含NR1 R2 的該5-員芳香族雜環選自吡咯、咪唑、吡唑和1,2,4-三唑。
  11. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，該化合物選自：1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 三唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -3- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡咯 -3- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 三唑 -4- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈； 1-[2-(3- 胺基 -4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 吡唑 -4- 甲腈； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 吡唑 -1- 基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 吡唑 -1- 基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2-(1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2-( 四唑 -2- 基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 1-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 甲腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟 -3- 羥基 - 苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟 -3- 甲氧基 - 苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(3- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-3- 氯 - 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(5- 胺基 -3,3- 二氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-2- 氟 - 苄腈； 2-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4- 苯基 - 環戊氧基 ] 苄腈； 4-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4- 苯基 - 環戊氧基 ]-3- 氯 - 苄腈； 6-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ]-5- 甲基 - 嗒 𠯤 -3- 甲腈； 1-[2-(4- 氯嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 -4-(4- 氟苯基 ) 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 6-[2-(3- 胺基 -5- 氟 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嗒 𠯤 -3- 甲腈； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2-(5- 氟嗒 𠯤 -3- 基 ) 氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 6-(2-((R)-3- 胺基哌啶 -1- 基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊基氧基 ) 菸鹼甲腈； 6-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 吡啶 -3- 甲腈； 1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 嗒 𠯤 -3- 基氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 5- 氟 -1-[4-(4- 氟苯基 )-2- 嘧啶 -4- 基氧基 - 環戊基 ] 哌啶 -3- 胺； 2-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嘧啶 -5- 甲腈； 5-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 吡 𠯤 -2- 甲腈；和 5-[2-(3- 胺基 -1- 哌啶基 )-4-(4- 氟苯基 ) 環戊氧基 ] 嘧啶 -2- 甲腈； 或其藥學上可接受的鹽。
  12. (3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺或其藥學上可接受的鹽。
  13. (3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的一種結晶形式。
  14. (3R,5R)-5-氟-1-((1R,2R,4S)-4-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)環戊基)哌啶-3-胺的物理形式A。
  15. 一種藥物組成物，該藥物組成物包含如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽或物理形式，以及至少一種藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或惰性載體。
  16. 如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽或物理形式，用於製造藥物，視需要其中該藥物係用於治療腎臟疾病。
  17. 如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽或物理形式，用於用作藥物。
  18. 如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽或物理形式，用於治療或預防其中TRPC6和/或TRPC3的抑制係有益的疾病或病症。
  19. 如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽或物理形式，用於治療腎臟疾病，視需要其中該疾病係具有TRPC6功能獲得性突變的局灶性節段性腎小球硬化症（FSGS）。
  20. 治療方法，該治療方法包括向對其有需要的患者給予治療有效量的如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽或物理形式。
  21. 如申請專利範圍第20項所述之治療方法，其中該有需要的患者患有腎臟疾病，視需要其中該疾病係具有TRPC6功能獲得性突變的局灶性節段性腎小球硬化症。
  22. 用於製備具有式I 之化合物之方法，該方法涉及以下步驟，
    Figure 03_image029
    其中P係保護基團，並且其餘基團係如在申請專利範圍第1項中定義的。
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ATE523499T1 (de) * 2006-07-06 2011-09-15 Array Biopharma Inc Cyclopenta [d]-pyrimidine als akt-proteinkinasehemmer
PE20091315A1 (es) * 2008-01-09 2009-09-21 Array Biopharma Inc Ciclopentanos de pirimidilo como inhibidores de la proteina cinasa akt
SI2370442T1 (sl) * 2008-11-26 2013-06-28 Pfizer Inc. 3-aminociklopentankarboksiamidi kot modulatorji kemokinskega receptorja
US7893099B2 (en) * 2009-06-11 2011-02-22 Hoffman-La Roche Inc. Cyclopentane derivatives
EP2368876A1 (en) * 2010-03-01 2011-09-28 Sanofi Derivatives of aminoindanes, their preparation and their application in therapeutics
BR112015029619A2 (pt) * 2013-06-21 2017-07-25 Merck Patent Gmbh derivados de 1,3-diaminociclopentano carboxamida
WO2015014446A1 (en) * 2013-07-29 2015-02-05 Merck Patent Gmbh 1,3-disubstituted cyclopentane derivatives

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