TW201912158A - 在基於5-氟尿嘧啶的化療中[6r]-亞甲基四氫葉酸的多次推注施用 - Google Patents

在基於5-氟尿嘧啶的化療中[6r]-亞甲基四氫葉酸的多次推注施用 Download PDF

Info

Publication number
TW201912158A
TW201912158A TW107100835A TW107100835A TW201912158A TW 201912158 A TW201912158 A TW 201912158A TW 107100835 A TW107100835 A TW 107100835A TW 107100835 A TW107100835 A TW 107100835A TW 201912158 A TW201912158 A TW 201912158A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
methylenetetrahydrofolate
treatment
cancer
day
solid tumors
Prior art date
Application number
TW107100835A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI772354B (zh
Inventor
佩爾 倫納特 林德柏格
安德斯 維丹
貢內爾 伊莉莎白 森頓
班特 古斯塔夫松
Original Assignee
瑞典商伊索弗爾醫藥公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 瑞典商伊索弗爾醫藥公司 filed Critical 瑞典商伊索弗爾醫藥公司
Publication of TW201912158A publication Critical patent/TW201912158A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI772354B publication Critical patent/TWI772354B/zh

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57419—Specifically defined cancers of colon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/28—Compounds containing heavy metals
    • A61K31/282—Platinum compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/525—Isoalloxazines, e.g. riboflavins, vitamin B2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)

Abstract

本發明關於人類固態腫瘤（如癌症，特別是大腸直腸癌）的治療，其涉及在基於5-氟尿嘧啶化療中施用非鏡像異構物純葉酸佐劑[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸的多次推注。

Description

在基於5-氟尿嘧啶的化療中[6R]-亞甲基四氫葉酸的多次推注施用
本發明係有關於人類固態癌症（例如癌症）之治療，其涉及基於5-氟尿嘧啶的化療結合施用[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸（[6R]‐5,10‐methylenetetrahydrofolate, [6R]‐MTHF）之多次推注。
5-氟尿嘧啶（5‐fluorouracil, 5‐FU）第一次引進於1957年，且仍為廣泛的固態腫瘤（如乳房腫瘤（breast tumors）、頭頸部腫瘤及胃腸腫瘤（gastrointestinal tumors））治療的重要部分。
5‐FU為合理設計的抗癌劑的例子。觀察尿嘧啶在大鼠肝臟腫瘤中的利用表明此種核鹼基的利用在腫瘤中比非惡性組織更明顯（RNA核酸中有四種核鹼基）[Berg JM; Tymoczko JL; Stryer L （2002）.Biochemistry （5th ed.）, WH Freeman and Company. pp. 118–19, 781–808. ISBN 0‐7167‐4684‐0. OCLC 179705944]。這暗示了尿嘧啶利用的酶途徑在惡性細胞和正常細胞之間是不同[Rutman RJ et al. Studies in 2-acetylaminofluorene carcinogenesis. III. The utilization of uracil 2-14 C by preneoplastic rat liver and rat hepatoma. Cancer Res 1954; 14: 119-123]。5‐FU接著合成為一抗代謝藥[Heidelberger C et al.Fluorinated pyrimidines, a new class of tumor‐inhibitory compounds. Nature 1967; 179:663‐666]。在5‐FU中，尿嘧啶位置5的氫原子被替換為類似尺寸的氟原子，且5‐FU被設計為佔用酶的活化位置，阻斷惡性細胞的代謝作用。
單獨使用5‐FU的整體緩解率是相當有限的，達到10‐15 %的水平[Johnston P.G., Kaye S. Capcetabine; a novel agent for the treatment of solid tumors. Anticancer Drugs 2001, 12: 639‐646]且已發展提高5‐FU抗癌活性的調控策略。最廣泛使用的策略之一為甲醯四氫葉酸（Leucovorin，葉酸的鈣鹽）的共同施用。甲醯四氫葉酸（LV）扮演三元錯合物的安定劑，一種由1) 5,10‐亞甲基‐四氫葉酸（LV的活化代謝物）、2) FdUMP（5‐FU活化代謝物）及3) 胸苷酸合成酶（Thymidylate synthase）所形成的結構。此三元錯合物抑制胸苷酸合成酶（一種DNA合成所需的酶）[Longley D.B. et al. 5‐Fluorouracil. Mechanisms of action and clinical strategies, Nat Rev Cancer. 2003 May; 3（5）:330‐8. Review]。藉由添加LV到5-FU，整體緩解率提升至20%以上[Longley D.B. et al. 2003 ibid.]。
乳癌為最常被診斷的癌症並且導致全世界女性癌症相關死亡的主要原因1 。儘管在早期發現的益處，在美國高達5%被診斷出乳癌的女性在第一表現時間有轉移性疾病。此外，高達30%在早期診斷為非轉移性乳癌的女性將發生遠端轉移疾病[Early Breast Cancer Trialists' Collaborative Group （EBCTCG）. Effects of chemotherapy andhormonal therapy for early breast cancer on recurrence and 15‐year survival: an overview ofthe randomised trials. Lancet 2005; 365:1687]。雖然轉移性乳癌是不可治癒的，但已看到在存活上具有意義的改善，與較新的系統性療法的導入相一致，參見[Chia S.K., Speers C.H., D'yachkova Y. et al. The impact of new chemotherapeutic and hormone agents on survival in a population‐basedcohort of women with metastatic breast cancer. Cancer 2007; 110:973]及[Gennari A.,Conte P., Rosso R. et al. Survival of metastatic breast carcinoma patients over a 20‐yearperiod: a retrospective analysis based on individual patient data from six consecutive studies. Cancer 2005; 104:1742]及[Dafni U., Grimani I., Xyrafas A. et al. Fifteen‐year trends inmetastatic breast cancer survival in Greece. Breast Cancer Res Treat 2010; 119:621]。
轉移性乳癌的治療目標是透過減少癌症相關的症狀以延長存活期與改善生活品質。細胞毒性化療（包含使用5-FU）特別適用於激素受體陰性的患者、有症狀的激素受體且疾病進展迅速或涉及內臟臟器腫瘤負擔大的患者[Wilcken N., Hornbuckle J., Ghersi D.;Chemotherapy alone versus endocrine therapy alone for metastatic breast cancer. CochraneDatabase Syst Rev 2003; :CD002747]。5-FU通常與環磷醯胺（cyclophosphamide）及胺甲葉酸（CMF）組合。緩解率約為20％且整體存活率（overall survival, OS）約為20個月[Stockler M.R., Harvey V.J., Francis P.A. et al. Capecitabine versus classical cyclophosphamide, methotrexate, and fluorouracil as first‐line chemotherapy for advanced breast cancer. J Clin Oncol 2011; 29:4498]。
5-FU亦用於治療晚期及復發性頭頸部鱗狀細胞癌。此患者組的預後（prognosis）通常較差，在多數研究中的中位存活時間為6-9個月。5-FU主要用於與鉑化合物組合治療。緩解率約30%，但存活時間仍低，約6個月，參見[Clavel M., Vermorken J.B., Cognetti F. et al. Randomizedcomparison of cisplatin, methotrexate, bleomycin and vincristine （CABO） versus cisplatinand 5‐fluorouracil （CF） versus cisplatin （C） in recurrent or metastatic squamous cellcarcinoma of the head and neck. A phase III study of the EORTC Head and Neck Cancer Cooperative Group. Ann Oncol 1994; 5:521]及[Forastiere A.A., Metch B., Schuller D.E. etal. Randomized comparison of cisplatin plus fluorouracil and carboplatin plus 5‐fluorouracilversus methotrexate in advanced squamous‐cell carcinoma of the head and neck: a Southwest Oncology Group study. J Clin Oncol 1992; 10:1245]。
但在胃腸腫瘤中，5-FU為基礎的方案是最廣泛使用的。在2012年期間，全世界報導超過1.3百萬例（746 000男性及614000女性）中，大腸直腸癌（Colorectal cancer （CRC））為男性中第三常見（10%）及女性中第二常見（9.2%）的癌症。CRC的地理發病率在世界各地差別很大，且男性與女性的地理型態非常類似。世界各地兩性的發病率差異十倍，最高評估率為在澳洲/紐西蘭（每100,000人中男性及女性的年齡標準化發生率（age-standardized rate, ASR）分別是44.8及32.2），且最低在西非（每100,000人為4.5及3.8）。發病率隨年齡增加且在老年人群中最高，即每100 000人，60‐64歲：67.4；65‐69歲：95.1；70‐74歲：127.8；及≥ 75 years：196.2[Ferlay J, Soerjomataram I, Ervik M, Dikshit R,Eser S, Mathers C, Rebelo M, Parkin DM, Forman D, Bray, F. GLOBOCAN 2012 v1.0, CancerIncidence and Mortality Worldwide: IARC CancerBase No. 11. Lyon, France: InternationalAgency for Research on Cancer; 2013]。
約40-50%受影響的患者發生轉移性疾病且每年報導超過50萬例因CRC而死亡[Jemal A,Bray F, Center MM, Ferlay J, Ward E, Forman D. Global cancer statistics. CA Cancer J Clin.2011 Mar‐Apr;61（2）:69‐90]。確實CRC在2012年期間占了全球694000例的死亡（總數的8.5%）[Ferlay J, Soerjomataram I, Ervik M, Dikshit R, Eser S, MathersC, Rebelo M, Parkin DM, Forman D, Bray, F. GLOBOCAN 2012 v1.0, Cancer Incidence andMortality Worldwide: IARC CancerBase No. 11 [Internet]. Lyon, France: International Agencyfor Research on Cancer; 2013]。
CRC患者通常以手術治療，且在多數情況中，具有治癒目的。手術事實上仍為下消化道惡性腫瘤治療的主要方式，且標準切除為早期癌症唯一所需的治療[Nelson H, Petrelli N, Carlin A, Couture J, Fleshman J, Guillem J, et al. Guidelines 2000 for colon and rectal cancer surgery. J Natl Cancer Inst. 2001 Apr 18;93（8）:583‐96]。隨著腫瘤的進展，就滲透深度及淋巴結介入而言，僅以手術治癒的機會減少且局部復發率增加。在此情況下，手術可與輔助性療法（adjuvant treatment）組合，或僅進行症狀的姑息性控制（palliative control）。
輔助性療法已顯示改善在轉移性CRC中具有延長存活期的治療效果[Cunningham D, Atkin W, Lenz HJ, Lynch HT, MinskyB, Nordlinger B, et al. Colorectal cancer. Lancet. 2010 Mar 20;375（9719）:1030‐47]。標準的CRC一線輔助性療法包含單獨以及與藥物5-氟尿嘧啶（5-FU）組合的合併性化學治療（combination chemotherapy）[Cunningham D （2010）]。以5-FU治療時通常會與高劑量的葉酸（或甲醯四氫葉酸，LV）組合使用，顯著增加5-FU在轉移性大腸直腸癌中的治療效果。事實上，在轉移性疾病中以LV調控5-FU已顯示延長疾病的進展時間（time‐to‐progression （TTP））[Petrelli N, Douglass HO Jr, Herrera L, Russell D, Stablein DM, Bruckner HW, et al.The modulation of fluorouracil with leucovorin in metastatic colorectal carcinoma: a prospective randomized phase III trial. Gastrointestinal Tumor Study Group. J Clin Oncol.1989 Oct;7（10）:1419‐26]。
對於大腸直腸腫瘤，以5-FU單獨治療的原始緩解率僅約10%。透過添加甲醯四氫葉酸（LV），緩解率可提高至21%[Thirion P, Michiels S, Pignon JP, Buyse M, Braud AC, Carlson RW, O’Connell M, Sargent P, Piedbois P （2004） Modulation of fluorouracil by leucovorin in patients with advanced colorectal cancer: an updated meta‐analysis. J Clin Oncol 22（18）:3766–3775]。然而，LV需轉化成活性代謝物[6R]‐5,10‐亞甲基四氫葉酸（亞甲基THF（methyleneTHF）），其接著與去氧尿苷單磷酸（deoxyuridinemonophosphate （dUMP））及目標酶胸苷酸合成酶（TS）在dUMP轉化成dTMP的反應中形成一三元錯合物[Jarmula A, Cieplak P, Montfort WR （2005） 5,10‐Methylene‐5,6,7,8‐tetrahydrofolate conformational transitions upon binding to thymidylatesynthase: molecular mechanics and continuum solvent studies. J Comput Aided Mol Des19（2）:123–136]。當5-FU氟化代謝物「FdUMP」結合此錯合物而非dUMP時，此反應被抑制[Parker WB, Cheng YC （1990） Metabolism and mechanism of action of 5‐fluorouracil. Pharmacol Ther 48（3）:381–395]。因此，LV並沒有抗腫瘤效果，而是透過提供大量的亞甲基THF穩定三元錯合物，增強5-FU的效果[Porcelli L, Assaraf YG, Azzariti A, ParadisoA, Jansen G, Peters GJ （2011） The impact of folate status on the efficacy of colorectal cancer treatment. Curr Drug Metab 12（10）:975–984]。抑制作用對較大增殖率的細胞最具影響，如腫瘤上皮細胞。此又導致抑制細胞內的DNA合成，其可能透過細胞凋亡導致細胞死亡。
LV進入亞甲基THF所需的代謝活性很可能導致個體差異，其可能為以5-FU單獨治療的緩解率僅提高至21%的原因。
還原葉酸「fotrexorin calcium （CoFactor® ）」（（dl ）‐5,10,‐亞甲基蝶醯單谷氨酸鈣鹽（（dl ）‐5,10,‐methylenepteroylmonoglutamatecalcium salt）或[6R,S]‐5,10‐亞甲基‐THF鈣鹽），也被稱為外消旋亞甲基THF，在基於直接施用還原葉酸「亞甲基THF」代替LV在臨床活性方面可提供顯著優勢的假設，已建議作為LV的替代物。CoFactor® 為兩個非鏡像異構物的1:1混合物[Odin, E., Carlsson, G., Frösing, R., Gustavsson, B., Spears, C.P., Larsson, P.A., 1998. Chemical stability and human plasma pharmacokinetics of reduced folates. Cancer Invest. 16, 447–455]。由於[6R]-異構物為TS的直接活性輔受質（co‐substrate），關於臨床安全性及有效性兩者，因患者間及患者內的差異性較低，預期施用CoFactor® 而非甲醯四氫葉酸會來得有利。
確實，在先前未治療的轉移性大腸直腸癌中的第II期試驗中，CoFactor® 的緩解率為35%[Saif, M.W, Merritt, J, Robbins J, Stewart J., Schupp, J, 2006. Phase III Multicenter Randomized Clinical Trial to Evaluate the Safety and Efficacy of CoFactor® /5‐Fluorouracil/Bevacizumab Versus Leucovorin/5‐Fluorouracil/Bevacizumab as Initial Treatment for Metastatic Colorectal Carcinoma Clinical Colorectal Cancer, Vol. 6, No. 3, 229‐234, 2006]，且在其他第I/II期臨床試驗中證實CoFactor® 組合5-FU在40%的患者中顯示在胰腺癌的臨床益處，定義為疾病穩定或腫瘤緩解[Saif, M.W., Makrilia N., Syrigos K., 2010. CoFactor: Folate Requirement for Optimization of 5‐Fluouracil Activity in Anticancer Chemotherapy. Journal of Oncology Vol. 1‐5]。然而，除了呈現不必要的肝臟解毒負擔，對於作為TS的輔受質效果，非自然的（6S）-異構物為自然的[6R]-異構物的部分競爭抑制劑[Leary, R.P., Gaumont, Y., Kisliuk, R.L., 1974. Effects of the diastereoisomers of methylenetetrahydrofolate on the reaction catalyzed by thymidylate synthetase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 56, 484–488]。再者，在第IIb期研究中，由於不論功效或安全性在研究組之間沒有發現顯著差異，CoFactor® 並未證明在大腸直腸癌中比甲醯四氫葉酸更有效，且在完成之前中斷了計畫的第III期研究大腸直腸癌[Press release: ADVENTRX Provides Update on Cofactor Program. Nov 2, 2007]。因此仍有改進的葉酸增強5-FU治療方案的需求，透過此方案穩定三元錯合物並增強TS抑制作用超過甲醯四氫葉酸目前可實現的水平。
定義
在此所使用的術語「Leucovorin® 」或「葉酸」應都意指5-甲醯基四氫葉酸（5‐formyl tetrahydrofolic acid），即四氫葉酸的5-甲醯基衍生物。葉酸含有2個非對稱中心。市售甲醯四氫葉酸（leucovorin （LV））為由右旋與左旋非鏡像異構體（分別為（d ‐leucovorin （d ‐LV, （6R,2'S）‐configuration） 及l ‐leucovorin （l ‐LV, （6S,2'S）‐configuration））的1:1混合物所組成，且亦可表示為（d,l ‐LV）。
在此所使用的術語「左旋亞葉酸（Levoleucovorin）」應意指僅含有醫藥活性左旋異構物l ‐LV（或LLV）的市售產品。體外試驗中，已證實l ‐LV可快速轉化為生物可用的甲基四氫葉酸形式，而右旋形式的d ‐LV（DLV）緩慢地被腎臟排泄。然而甲醯四氫葉酸與左旋亞葉酸已顯示在藥物動力學上相同，且可互換使用，在功效或副作用上差異有限（Kovoor et al, Clin Colorectal Cancer 8 200‐6 （2009））。
在此所使用的術語「MTHF」或「亞甲基THF（methyleneTHF）」應都意指5,10‐亞甲基‐5,6,7,8‐四氫葉酸（5,10‐Methylene‐5,6,7,8‐tetrahydrofolate）。
在此所使用的術語「外消旋亞甲基THF」、「CoFactor® 」或「[6R,S]‐5,10‐亞甲基THF（ [6R,S]‐5,10‐methyleneTHF）」應都意指1:1非鏡像異構物混合物[6R,S]‐5,10‐亞甲基‐5,6,7,8‐四氫葉酸。
在此所使用的術語「[6R]‐5,10‐MTHF」應意指單獨的非鏡像異構物，[6R]‐5,10‐亞甲基四氫葉酸（[6R]‐5,10‐methylenetetrahydrofolate）。其為包含甲醯四氫葉酸及左旋亞葉酸的今日所有臨床上使用葉酸類藥物的關鍵活性代謝物，因此不需代謝活化。
在此所使用的術語「IV」或「i.v.」應都意指靜脈注射。
在此所使用的術語「DLT」應意指劑量限制毒性（dose‐limiting toxicity）。劑量限制毒性（DLT）為被評估為至少可能與藥品（即一或多種的化療劑）相關的醫療事件且足以嚴重到防止進一步增加治療劑劑量或強度，或防止在任何劑量水平下繼續治療。
在此所使用的術語「ORR」應意指「客觀緩解率（Objective Response Rate）」，即減少預定量的腫瘤負荷的患者比例。應如下計算：根據RECIST 1.1（一套定義當癌症患者治療期間的腫瘤進展的發佈規則），ORR =部分有效加上完全有效，緩解如下所定義： 完全有效（Complete Response （CR））： l 所有的目標病灶消失。任何病理性淋巴結（無論是目標或非目標）在短軸必須減少至＜10 mm。 部分有效（Partial Response （PR））： l 目標病灶的直徑總和減少至少30%，以基線直徑總和作為參考。 疾病進展（Progressive Disease （PD））： l 目標病灶的直徑總和減少至少20%，以研究上的最小總和作為參考（若研究上基線總和為最小，則包含在內）。 l 除了相對增加20%，總和亦必須表現出至少5 mm的絕對增加。（註：一個以上新的病灶的顯現亦被認為是進展）。 疾病穩定（Stable Disease （SD））： l 既沒有明顯的收縮以量化為PR，亦沒有顯著增加以量化為PD，以研究時的最小總和直徑做為參考。（Eisenhauer EA, Therasse P, Bogaerts J, Schwartz LH, Sargent D, Ford R, et al. New response evaluation criteria in solid tumors: revised RECIST guideline （version 1.1）. Eur J Cancer. 2009 Jan; 45（2）:228‐47）
在此所使用的術語「dU」應意指去氧尿苷（deoxyuridine）。
在此所使用的術語「BSA」應意指體表面積（Body Surface Area）。
在此所使用的術語「增生性疾病（proliferative diseases）」應意指細胞過度增生及細胞基質更新對幾種疾病的發病機制有顯著貢獻的統一概念，包含癌症、動脈粥狀硬化（atherosclerosis）、類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis）、牛皮癬（psoriasis）、特發性肺纖維化（idiopathic pulmonary fibrosis）、硬皮病（scleroderma）、肝硬化（cirrhosis of the liver）、克羅恩氏病（Crohn’s disease）和潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis）。
發明聲明
近期已發展一[6R]‐5,10‐亞甲基四氫葉酸（[6R]‐5,10‐methylenetetrahydrofolate（[6R]‐5,10‐MTHF））的穩定配方，其為自然發生的MTHF非鏡像異構物。如前所述，[6R]‐ MTHF亦為甲醯四氫葉酸（LV）的代謝物。不同於LV，[6R]‐MTHF不需進一步的代謝，且可直接參與FdUMP‐TS三元錯合物的形成。
根據本發明，令人驚訝地發現透過根據各種化療方案（涉及開始施用5-FU，接著每次推注間的間隔期為約10-60分鐘的多次[6R]‐MTHF靜脈推注）治療大腸直腸癌患者，可實現60‐85%的ORRs（客觀緩解率）。
亦令人驚訝地發現當與5-FU共同施用時，相較於施用等莫耳濃度的LV，施用[6R]‐MTHF提高2′‐去氧尿苷（2′‐deoxyuridine （dUrd））的血漿水平。dUrd的提高為TS抑制的標記（Ford et al. （2002） Clinical Cancer Research, 8（1）: 103‐109）。
據此，在本發明第一態樣中，[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸提供於人類固態腫瘤（如癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
在本發明第二態樣中提供一種治療被診斷出固態腫瘤（如癌症）的人的方法，該方法包括： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
令人驚訝地發現根據本發明第一或第二態樣施用[6R]‐MTHF及5‐FU歷時至少8周的治療周期導致防止或阻止人類固態腫瘤進展，且在初始化治療後8周及16周之間未觀察到所述固態腫瘤具有統計上顯著的進展。
於本發明第三態樣中，[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸被提供於人類固態腫瘤（包括癌症）預防或阻斷病程之用途，其包括在至少8周之總治療期中執行及重複根據本發明第一態樣之步驟a）至e）。
本發明第四態樣提供一種被診斷出固態腫瘤（如癌症）的人之預防或阻斷病程之方法，其包括在至少8周之總治療期中執行及重複根據本發明第二態樣之步驟a）至e）。
5-氟尿嘧啶（5-FU）可能是世上最廣泛使用之抗癌藥物。Spears等人（Spears et al., Cancer Res. 42:450 ‐ 56 （1982））發現5-FU抗小鼠大腸癌之治療機制為DNA酶「胸苷酸合成酶（thymidylate synthase （TS））」之完全抑制或TS活性之終止。如上所述，葉酸（特別是四氫葉酸）作為嘌呤及嘧啶脫氧胸苷單磷酸酯（pyrimidine deoxythymidine monophosphate （dTMP））合成中的一個碳供體且可用以調控5-FU之作用；如圖1所示。
已發展出幾種基於5-FU之癌症治療方法，其中，同時或通過其他方式給予「葉酸」作為治療之一部分。多數的治療方法為一種名為FOLFOX法之聯合化療方案之變化。其亦稱為「Gramont的奧沙利鉑（Oxaliplatin de Gramont）」或OxMdG，其意指Gramont改性奧沙利鉑。其由該些藥物組成： FOL – 亞葉酸（Folinic acid，典型為甲醯四氫葉酸（leucovorin）或甲四氫葉酸鈣（calcium folinate）） F –氟尿嘧啶（5‐FU） OX –奧沙利鉑
在一線或二線轉移性CRC中常用的化療劑例子包含5‐FU/葉酸、卡培他濱（Capecitabine）、愛萊諾迪肯（Irinotecan）、奧沙利鉑（Oxaliplatin）、貝伐單抗（Bevacizumab）、西妥昔單抗（Cetuximab）、及帕尼單抗（Panitumamab），其單獨或組合使用，例如FOLFOX （即LV/5‐FU/奧沙利鉑）、FOLFIRI （即LV/5‐FU/伊立替康）、FOLFOX/貝伐單抗、與5‐FULV/貝伐單抗及/或伊立替康。
作為一具體例子可提及FOLFOX4方案，其中，在第一天及第二天5-FU（5‐FU 400 mg/m2 靜脈推注，然後600 mg/m2 靜脈連續供液22小時，第一天及第二天）之前，靜脈內施用200 mg/m2 的甲醯四氫葉酸2小時。該方案包含在第一天靜脈內施用85 mg/m2 的奧沙利鉑（益樂鉑，Eloxatin），且該治療進行Q2w x 12個週期（參見Goldberg RM et al. Pooled analysis of safety and efficacy of oxaliplatin plus 5‐fluorouracil/leucovorin administrated bimonthly in elderly patients with colorectal cancer. J Clin Oncol 2006; 24:4085）。
作為一具體例子可提及FOLFOX6方案，其中，在第一天5-FU之前靜脈內施用400 mg/m2 的甲醯四氫葉酸2小時，接著靜脈內施用2400 mg/m2 46小時。該方案包含在第一天靜脈內施用100 mg/m2 的奧沙利鉑（益樂鉑，Eloxatin）2小時，且該治療進行Q2w x 12個週期（參見Tournigand, C et al. FOLFIRI followed by FOLFOX6 or the reverse sequence in advanced colorectal cancer: A randomized GERCOR study. J Clin Oncol 2004; 22:229）。
作為另一例子可提及ROSWELL PARK方案，其中，在開始2小時內甲醯四氫葉酸（500 mg/m2 靜脈注射）之連續輸液施用之後，5-FU以500 mg/m2 BSA靜脈推注1小時。該治療每8周進行Qw x 6個週期（一周一次，進行6周），進行3-4個循環（參見Lembersky BC et al. Oral uracil and tegafur plus leucovorin compared with iv 5‐FU and leucovorin in stage II and III carcinoma of the colon: results from national surgical adjuvant breast and bowel project protocol C‐06. J Clin Oncol 2006; 24:2059）。
作為又另一例子可提及作為計畫的CoFactor® 三期研究的研究設計（Saif 2006, 前述），其中，CoFactor® 在2-3分鐘內以60 mg/m2 的劑量靜脈推注，接著在20分鐘後，通過施用5-FU作為一推注2-3分鐘，以每周劑量為500 mg/m2 持續6周，每8周重複。在此研究中，奧沙利鉑被貝伐單抗取代以施用，每兩周以5 mg/kg的劑量連續靜脈注射超過90分鐘。
一般而言，在如前述引用的現今採用的治療方案中，5-FU總是在葉酸佐劑（如甲醯四氫葉酸）「之後」施用，而本發明治療方法為通過施用5-FU推注開始。如前所述，採用此方案所達到的最高緩解率（highest response rates，ORRs）已約為35‐40%。
根據本發明，令人驚訝地發現根據涉及5-FU的初始給藥的多種血液治療方案治療大腸直腸癌患者，然後以每次推注間之間隔時間約為10-60分鐘之[6R]‐MTHF多次靜脈推注，可實現60‐85%的客觀緩解率（ORRs （objective response rates）。
據此，在本發明之一第一態樣中，[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（如癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
在本發明第一態樣之實施態樣中，在步驟a）之前，在第一天以靜脈推注或連續輸液施用抗癌藥1至4小時。
在另一實施態樣中，提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於根據本發明第一態樣之治療，其中，在步驟a）之前，在第一天以靜脈推注或連續輸液施用抗癌藥1至4小時。
本發明一第二態樣係提供一種治療被診斷為固態腫瘤（如癌症）的人的方法，該方法包括： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
在目前（2017年12月）持續的臨床研究期間，亦令人驚訝地發現，在至少八周的治療期內，根據本發明第一或第二態樣之[6R]‐MTHF及5‐FU之投藥導致了人類固態腫瘤之預防或阻斷病程。在初始化治療之後的8周至16周之間未觀察到所述固態腫瘤在統計學顯著發展。
在本發明一第三態樣中，[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸因而被提供於人類固態腫瘤（如癌症）預防或阻斷病程之用途，其包括在至少8周之總治療期中執行及重複根據本發明第一態樣之步驟a）至e）。
在第三態樣之較佳實施態樣中，[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤之預防或阻斷病程，在至少16周之總治療期中執行及重複根據本發明第一態樣之步驟a）至e），且在初始化治療後8至16周之間未觀察到所述固態腫瘤在統計學顯著進展。
本發明第四態樣係提供一種人類固態腫瘤（如癌症）之預防或阻斷病程之方法，其包括在至少8周之總治療期中執行及重複根據本發明第二態樣之步驟a）至e）。
第四態樣之較佳實施態樣係提供一種用於被診斷為固態腫瘤（如癌症）的人的預防或阻斷病程之方法，其包括：在至少8周之總治療期中執行及重複根據本發明第二態樣之步驟a）至e）。在初始化治療之後的8周至16周之間未觀察到所述固態腫瘤在統計學顯著發展。
本發明之一具體實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，給予一施用400 mg/m2 （體表面積）之5-FU（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注，在30分鐘後；接著， b）　給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用30 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　給予一靜脈注射液以進行5-FU（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　在第二天，給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用30 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟a）至d）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明一較佳實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，給予一施用400 mg/m2 （體表面積）之5-FU（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注，在30分鐘後；接著， b）　給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用60 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　給予一靜脈注射液以進行5-FU（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　在第二天，給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用60 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟a）至d）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明另一具體實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，給予一施用400 mg/m2 （體表面積）之5-FU（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注，在30分鐘後；接著， b）　給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用120 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　給予一靜脈注射液以進行5-FU（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　在第二天，給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用120 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟a）至d）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明另一具體實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，給予一施用400 mg/m2 （體表面積）之5-FU（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注，在30分鐘後；接著， b）　給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用30 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　給予一靜脈注射液以進行5-FU（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， 其中，步驟a）至c）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明一較佳實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，給予一施用400 mg/m2 （體表面積）之5-FU（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注，在30分鐘後；接著， b）　給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用60 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　給予一靜脈注射液以進行5-FU（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， 其中，步驟a）至c）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明另一具體實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，該治療包括以下步驟： a）　在第一天，給予一施用400 mg/m2 （體表面積）之5-FU（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注，在30分鐘後；接著， b）　給予兩次靜脈推注，間隔時間為30分鐘，每次施用120 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　給予一靜脈注射液以進行5-FU（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， 其中，步驟a）至c）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明另一具體實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於一用以減少5-氟尿嘧啶（5-FU）毒性及/或增進其療效之藥物製備之用途，其中，所述藥物係與5-氟尿嘧啶（5-FU）共同投藥以治療如癌症之固態腫瘤，其根據以下方案： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明另一具體實施態樣係提供一種醫藥組成物，用以治療如癌症之固態腫瘤，包括[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸，其中，所述組成物通過以下劑量方案與5-氟尿嘧啶（5-FU）共同投藥： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明又另一具體實施態樣係提供一種醫藥組成物，用以治療如癌症之固態腫瘤，包括5-氟尿嘧啶（5-FU），其中，所述組成物通過以下劑量方案與[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸共同投藥： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
本發明另一具體實施態樣係提供[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸於一用以治療如癌症之固態腫瘤之藥物製備之用途，其中，該藥物根據以下方案與5-氟尿嘧啶（5-FU）共同投藥： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用兩次以上之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
於本發明任一態樣之較佳實施態樣中，一靜脈推注[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸含有30、60或120 mg/m2 （體表面積）的[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸。
於本發明任一態樣之較佳實施態樣中，在第一天施用之兩次或以上之靜脈推注含有20 - 250 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸，例如30-240 mg/m2 、30-120 mg/m2 、或約30 mg/m2 或約60 mg/m2 或約120 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸。
於本發明任一態樣之另一較佳實施態樣中，在第一天及第二天總共施用60 ‐ 120 mg/m2 的[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸，選擇性地作為兩次個別的推注，即介於2x30 mg/m2 [6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸至2 x 60 mg/m2 [6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸。
於本發明任一態樣之另一較佳實施態樣中，在第一天施用兩次[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸，且第二天不施用。
於本發明任一態樣之另一較佳實施態樣中，在步驟a）之前，在第一天以靜脈推注或連續輸液施用一或多種的抗癌藥1至4小時。在個別的實施態樣中，該抗癌藥可為一或多種選自由鉑類藥物（Platinum Drugs，如順鉑（cisplatin，CDDP）、卡鉑（carboplatin，CBDCA）及奧沙利鉑 （益樂鉑））、抗代謝藥物（Antimetabolites，如5-氟尿嘧啶（5‐FU）、卡培他濱（截瘤達，Xeloda）、吉西他濱（gemcitabine，健澤（Gemzar））、胺甲葉酸（methotrexate）及培美曲塞（pemetrexed，愛寧達（Alimta））、抗腫瘤抗生素（Anti‐tumor antibiotics，如艾黴素（doxorubicin，多柔比星（Adriamycin）、道諾黴素（daunorubicin）、放線菌素-D（actinomycin‐D）及絲裂黴素-C（mitomycin‐C，MTC））、拓樸異構脢抑制劑（Topoisomerase Inhibitors，如愛萊諾迪肯（irinotecan，CPT‐11）、拓普替康（topotecan，癌康定（hycamtin））及伊妥普賽（etoposide，VP‐16））、有絲分裂抑制劑（Mitotic Inhibitors，如紫杉醇（paclitaxel，泰克索（Taxol））、歐洲紫杉醇（docetaxel，（剋癌易（Taxotere））及長春新鹼（vincristine，敏克瘤（Oncovin））、皮質類固醇（Corticosteroids，如培尼皮質松（prednisone）、甲基培尼皮質松（methylprednisolone，舒汝美卓佑（Solumedrol））及地塞米松（dexamethasone，特佳錠（Decadron））），或可選自由包含單株抗體（MABs，如西妥昔單抗（cetuximab，爾必得舒（Erbitux））、利妥昔單抗（rituximab，莫須瘤（Rituxan）及貝伐單抗（bevacizumab，癌思停（Avastin）））或小分子EGFR抑制劑（Small Molecular EGFR Inhibitors，如吉非替尼（gefitinib，艾瑞莎（Iressa）））之標靶治療，或可選自由荷爾蒙治療（Hormone Therapies，如泰莫西芬（tamoxifen，諾瓦得士錠（Nolvadex））及白卡羅他邁（bicalutamide，可蘇多錠（Casodex））），或可選自由包含單株抗體之癌症免疫治療劑（Cancer Immunotherapy Agents）、或免疫檢查點抑制劑（Immune Check Point Inhibitors，如包含派姆單抗（pembrolizumab，吉舒達（Keytruda））與納武單抗（nivolumab，保疾伏（Opdivo））之PD‐1抑制劑、或包含阿特株單抗（atezolizumab，癌自禦（Tecentriq））PD‐L1抑制劑、或癌症疫苗（Cancer Vaccines）之藥物。
於本發明任一態樣之實施態樣中，在第一天施用之一或多種抗癌藥為奧沙利鉑 （益樂鉑）。
於本發明任一態樣之另一實施態樣中，在第一天施用之一或多種抗癌藥為奧沙利鉑 （益樂鉑）與貝伐單抗（癌思停）之組合。
於本發明任一態樣之另一實施態樣中，所施用之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸為一單一的非鏡像異構物，其具有＞90% d.e.的非鏡像異構物過量（diastereomeric excess （d.e.）），如＞93% d.e.、如＞95% d.e.、如＞98% d.e.、如＞99% d.e.、如＞99.5% d.e.或如＞99.9% d.e.。於一較佳實施態樣中，所施用之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸為具有＞98% d.e.的非鏡像異構物過量的單一的非鏡像異構物。
於本發明任一態樣之另一實施態樣中，該固態腫瘤選自由包含大腸癌（colon cancer）、胃癌（stomach cancer）、乳癌（breast cancer）、腸癌（bowel cancer）、膽囊癌（gallbladder cancer）、肺癌（lung cancer，特別是肺腺癌（adenocarcinoma））、包含轉移性大腸直腸癌（metastatic CRC）之大腸直腸癌（colorectal cancer，CRC）、頭頸部癌（head and neck cancer）、肝癌（liver cancer）、胰臟癌（pancreatic cancer）及骨癌（osteosarcoma）之各種腫瘤形式。
於本發明任一態樣之具體實施態樣中，該固態腫瘤選自由大腸癌及大腸直腸癌。
於本發明另一實施態樣中，該5-FU類似物或前驅藥係選自於氟化嘧啶鹼基，例如卡培他濱（capecitabine，（截瘤達，Xeloda），即N4-戊氧基羰基-5'-脫氧-5-氟胞苷（N4-pentyloxycarbonyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine））、替加氟（tegafur）、5-氟-嘧啶酮（5-fluoro-pyrimidinone）、尿嘧啶-替加氟（UFT）、脫氧氟尿苷（doxifluridine）、2'-脫氧-5-氟尿苷（2'-deoxy-5 fluorouridine）、5'-脫氧-5-氟尿苷（5'-deoxy-5-fluorouridine）、1-（2'-氧代丙基）-5-氟尿嘧啶（1-（2'-oxopropyl）-5-FU）、及烷基-羰基-5-氟尿嘧啶（alkyl-carbonyl-5-FU）、乙嘧替氟（BOF-A2）、呋氟尿嘧啶（ftorafur（TS-1））、及S-1。
於一實施態樣中，[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸（[6R]‐MTHF）以可溶於水之固體形式使用，例如一凍乾物或一鹽類，選擇性透過一或多種合適的賦形劑及/或抗氧化劑（例如檸檬酸或抗壞血酸或其鹽類形式）穩定。
於一實施態樣中，以一或多次的靜脈推注施用[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸（[6R]‐MTHF），每次推注含有5 – 1000 mg/m2 BSA，如5 mg/m2 BSA，如7 mg/m2 BSA，如10 mg/m2 BSA，如15 mg/m2 BSA，如30 mg/m2 BSA，如60 mg/m2 BSA，如120 mg/m2 BSA，如240 mg/m2 BSA，如480 mg/m2 BSA，如720 mg/m2 BSA或如960 mg/m2 BSA。
於又一實施態樣，在第一天施用[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸至多四次，所施用之每次推注之間的間隔時間為20至30分鐘。
於另一實施態樣，在第二天施用[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸至多四次，所施用之每次推注之間的間隔時間為20至30分鐘。
於又另一實施態樣，在第一天及第二天施用[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸至多四次，所施用之每次推注之間的間隔時間為20至30分鐘。
於一實施態樣，以一或多次的靜脈推注施用5-氟尿嘧啶（5-FU），每次推注含有10‐1000 mg/m2 BSA，如300 mg/m2 BSA，如400 mg/m2 BSA，如500 mg/m2 BSA，如600 mg/m2 BSA，如700 mg/m2 BSA，如800 mg/m2 BSA，如900 mg/m2 BSA或如1000 mg/m2 BSA。
於本發明任一態樣之一實施態樣中，一治療週期包括兩天。此方案可選擇性地每兩周重複四個週期，即總共8周。
於本發明任一態樣之一較佳實施態樣中，一治療週期包括兩天。此方案可選擇性地每兩周重複至多八個週期，即總共16周。
於本發明任一態樣之一另一實施態樣中，例如為了監測目的，治療週期的第一天及第二天分開1-5天的時間。
於本發明任一態樣之一另一實施態樣中，該治療週期在第一天及第二天之後延長1-5天的時間。
實施例
在患有四期大腸直腸癌的患者中，於一開放式作業（open‐label）、多點（multiple‐site）、第I期/第II期劑量世代試驗（Phase I/II Dose Cohort Trial （ISO‐CC‐005 ））中結合固定劑量的5-氟尿嘧啶（5-FU）單獨使用或與固定劑量的貝伐單抗、奧沙利鉑或愛萊諾迪肯一起使用，以分析[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸（[6R]‐MTHF）之安全性及功效。計畫加入本研究符合一線、二線或三線治療的最多63例第IV期CRC患者如下：根據以下研究設計，每一治療組中，每一劑量世代3至6名患者，且一劑量世代中有三名額外的患者（表1）。 表1：化療劑（貝伐單抗、奧沙利鉑或愛萊諾迪肯及/或5-FU）與本研究藥物（[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸）之初始劑量 縮寫：N/A：不適用；SP2D：選擇第2期劑量。 ¶　如有需要，奧沙利鉑施用的時間點窗口將被擴展以允許輸液時間長達120分鐘。 #如有需要，愛萊諾迪肯施用的時間點窗口將被擴展以允許輸液時間長達90分鐘。 §不論體表面積，所施用的5-FU推注劑量應不超過1000 mg的最大推薦每日劑量。 *已刪除原本包含於此臨床研究方案早期版本的試驗世代3、試驗世代10及試驗世代11。 a在試驗組4（試驗世代12、13及14）與試驗組5（試驗世代15）中，其各自的[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸的總劑量將分為兩次靜脈推注，分配在5-FU推注施用（0分鐘）後約30及60分鐘。施用[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸的第二次注射時將暫停5-FU的連續輸液。 b試驗組4中的[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸的劑量作為用於以下調查具有最有利的概貌的劑量。
[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸（[6R]‐MTHF）配制為一每小瓶含有100 mg（以游離酸計算）的凍乾粉末。給藥：在本研究所有的劑量世代的每次試驗週期（即不論治療組）中，將在第一天及第二天施用5-FU之後約30分鐘施用，以30、60、120或240 mg/m2 的固定劑量快速靜脈推注。該方案將每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
5-FU（5-氟尿嘧啶）配制為注射溶液。給藥：在每個試驗週期的第一天及第二天，以靜脈推注施用5-FU。在本研究的組2與組3中，分別將在開始施用奧沙利鉑或愛萊諾迪肯之後約60分鐘，施用5-FU（參見下述）。該治療將每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
奧沙利鉑配制為一濃縮的輸液溶液。給藥：在本研究治療組2（即試驗世代4、5、10及11）的每次治療週期的第一天，將以靜脈輸液施用奧沙利鉑15-120分鐘並且每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。應注意有關於可能影響輸液速率的給藥的毒性（如等級≤2的過敏、喉咽感覺遲鈍、喉痙攣）。在這些情況中，根據臨床實踐建議，應在以下週期中延長奧沙利鉑給藥的速率。
愛萊諾迪肯配制為一濃縮的輸液溶液。給藥：在本研究治療組3（即試驗世代6及7）的每次治療週期的第一天，將以靜脈輸液施用愛萊諾迪肯30-90分鐘並且每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。應注意有關於施用愛萊諾迪肯的早期毒性（24小時內），即急性膽鹼能症候群（acute cholinergic syndrome），其特徵為早期腹瀉（early diarrhoea）、嘔吐（emesis）、出汗（diaphoresis）、腹部痙攣（abdominal cramping）、及較少見的高度炎症（hyperlacrimation）和鼻漏（rhinorrhoea）。在這些情況中，根據臨床實踐建議的抗膽鹼劑（anticholinergics）的使用是有需要的。
癌思停（貝伐單抗）配制為一濃縮的輸液溶液。給藥：在本研究治療組5（即試驗世代15）的每次治療週期的第一天，將以靜脈輸液施用貝伐單抗30-90分鐘並且每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
貝伐單抗有關的毒性：基於來自臨床試驗的數據，其中患者主要以貝伐單抗組合化療來治療，以下可被辨識為貝伐單抗有關的毒性：最常見的嚴重不良反應：胃腸穿孔（gastrointestinal perforations）、出血（包括肺出血（pulmonary haemorrhage）/咯血（haemoptysis））和動脈血栓栓塞（arterial thromboembolism）; 最常見的不良反應：高血壓（hypertension）、疲勞（fatigue）或虛弱（asthenia）、腹瀉（diarrhoea）、及腹痛（abdominal pain）。
結果
ISO‐CC‐005為一開放式臨床第I期/第II期耐受性及劑量定義研究，旨在評估安全性及定義用於持續發展[6R]‐MTHF劑量。其利用4種不同的方案在患有轉移性大腸直腸癌的患者中評估與5-FU組合的[6R]‐MTHF的四種劑量（具有或不具有愛萊諾迪肯、奧沙利鉑或貝伐單抗的不同組合）： l MOD+5‐FU: [6R]‐MTHF只組合5‐FU，類似Nordic FLV方案 l MOD+FLIRI: [6R]‐MTHF組合5‐FU與愛萊諾迪肯，類似Nordic FLIRI方案 l MOD+FLOX: [6R]‐MTHF組合5‐FU與奧沙利鉑，類似Nordic FLOX方案 l MOFOX: [6R]‐MTHF組合5‐FU與奧沙利鉑，類似FOLFOX‐6方案 患者屬於從一線至三且甚至五線不等的若干治療線。 患者屬於從一線至三且甚至五線不等的若干治療線。 定期評估研究結果，且已分析來自先前（在2017年8月）與現在再次（2017年12月）接受一線（1st line）治療的患者組及部分接受二線（2nd line）、三線（3rd line）及五線（5th line）治療的患者組。該臨床研究仍在進行。
在該些治療方案中的一者（MOFOX）中，[6R]‐MTHF的總劑量分為兩次靜脈注射分別分配在5-FU推注開始施用（0分鐘）後約30及60分鐘。
當前12例一線患者已進入治療並已有根據RECIST 1.1準則評估八個治療周後的他們的初始腫瘤大小評估，6例患者顯現部分有效（partial response （PR））且6例患者顯現疾病穩定（stable disease）。一名根據MOFOX方案進行治療的二線患者亦在八個治療周後進行分析並顯現部分有效。在此時間點總共三例患者已根據MOFOX方案進行治療。
八周治療的結果如圖2所示。
2017年8月總共分析了13例患者，其中7例患者顯現部分有效且6例患者顯現疾病穩定（參見圖2），對應54%的ORR（objective response rate，客觀緩解率）（12例一線患者組為50%）。再者，在經至少60 mg/m2 的[6R]‐MTHF治療的組中，7名患者中有5名（71%）為部分有效（PR）。到目前為止12例一線患者中沒有一例顯現疾病進展（progressive disease （PD））且與研究中其他患者或歷史對照組相比，沒有安全性受損的跡象。
再者，以基線總和直徑作為參考，根據MOFOX方案進行治療的所有患者（2例一線+1例二線患者）經歷在目標病灶直徑總和減少至少30%（平均值減少42%）。
到2017年9月，已分析總共37例患者的胃腸副作用（gastrointestinal （GI） adverse effects （AEs））。37例患者中，僅2例患者有3級或以上的GI副作用（定義為噁心（nausea）、嘔吐（vomiting）及/或脫水（dehydration））。
到2017年12月，在16周治療後再次評估一線患者2 。治療16周的結果如圖7所示。4例一線患者因研究方案協議不能進行額外的8周治療，且此時沒有進一步分析一線患者。
剩下的8例一線患者中，沒有患者在8周至16周之間顯現腫瘤進展，且在8周的評估中顯現部分有效的所有患者在開始治療後16周保持部分有效。8例患者中，5例顯現部分有效及3例顯現疾病穩定，即ORR為63%。
應當注意的是，根據MOFOX方案治療並在8周治療後顯現部分有效的3名患者（兩例一線與一例二線）在8周治療後仍顯現部分有效，且在MOFOX治療上的該單獨的二線患者為「唯一」在16周MOFOX治療之後顯現部分有效的二線患者。
非常高的ORRs（同時在8周及16周觀察到）與不良事件（Adverse Events （AEs））的低發生率（在8周分析）是令人驚訝的，考慮到CoFactor，其為1:1非鏡像異構物[6R,S]‐MTHF，在一第IIb期研究中顯示，比較CoFactor與甲醯四氫葉酸（每一者與5-FU組合）在一線患者，證明7.7%CoFactor患者被報導至少一例3級或以上的AE，而甲醯四氫葉酸為3.3 %，進一步地，CoFactor與甲醯四氫葉酸的ORRs分別為10.7%與13.3%（2007年10月1日的Adventrx 新聞稿，圖8）。
不受理論束縛，發明人推測CoFactor與[6R]‐MTHF之間的差異（如通過在與甲醯四氫葉酸比較研究中其之功效與AE中的差異評估），可歸因於CoFactor中存在50％的[6S]‐MTHF，即[6R]‐MTHF的相對非鏡像異構物。CoFactor幾年前被放棄，其不可能在臨床上直接解決此問題，但眾所周知，對於許多醫藥活性化合物，當比較純的鏡像異構物與消旋物或當比較幾何異構物（如順式及反式異構物）時，在預期效果及副作用兩者上存在很大的差異。在目前非鏡像異構物情況中，關於其作為胸苷酸合成酶輔受質（cosubstrate）的作用，非自然的[6S]-異構物已證明為自然的[6R]‐異構物 [6R]‐MTHF的部分競爭抑制劑[Leary, R.P., Gaumont, Y., Kisliuk, R.L., 1974. Effects of the diastereoisomers of methylenetetrahydrofolate on the reaction catalyzed by thymidylate synthetase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 56, 484–488]。
在開始ISO‐CC‐005研究的同時，進行一歷史組比較研究，其中從5-FU 通過2'-去氧尿苷（2′‐deoxyuridine，dUrd）的血漿濃度反映，發現等莫耳劑量的[6R]‐MTHF相較於LV導致更高水平的全球胸苷酸合成酶（TS）-抑制。血漿2'-脫氧尿苷（dUrd）的升高為TS抑制的標記。（Ford et al. （2002） Clinical Cancer Research,8（1）: 103‐109）。
歷史組比較研究如下： 所有患者經一標準劑量的500 mg的5‐FU（以推注給予）加上分別的葉酸[6R]‐MTHF或LV（亦以推注給予）進行治療。 在哥德堡（瑞典），已將近20年，已在地區大學醫院（Östra sjukhuset ‐Sahlgrenska Universitetssjukhuset）收集所有具有CRC的患者的臨床、治療及結果數據。血漿與組織樣本已在適當的長期儲存生理條件下儲存於生物銀行。資料庫與生物銀行在相關道德與監管許可的主持下操作。經標準5-FU劑量（500 mg/m2 ）加上靜脈推注LV（60 mg/m2 ）治療的患者隨機從資料庫中抽取。對於所有的患者，儲存的血漿樣本用於dUrd的測定。
經LV治療的患者
從資料庫隨機抽取24名經5-FU加上60 mg/m2 的LV治療的具有轉移性大腸直腸癌（mCRC）的患者並從每位患者的兩次治療周期測定在t0 及t24 的dUrd水平且以相同方式對[6R]-MTHF患者計算t24 及t0 之間的差異的平均值及標準差。由於LV為「消旋的」自然物（S-甲醯四氫葉酸（S-formyl-tetrahydrofolate））與非自然物（R-甲醯四氫葉酸（R-formyl-tetrahydrofolate））異構物的50:50混合物，活性異構物構成給予的消旋LV劑量的一半。LV與[6R]-MTHF的分子量非常相似，因而可認為60 mg的LV與30 mg的[6R]-MTHF等莫耳。
經[6R]-MTHF治療的患者
所有的患者都參加了ISO-CC-005研究並在兩個5-FU連續治療周期間進行測量。在注射5-FU之前（t0 ）及24小時（t24 ）之後立即測量dUrd值。為患者在每個30及60 mg/m2 的劑量水平分別計算t0 與t24 之間差異的平均值及標準差。
統計方法
通過Friedman雙因子變異量分析（Friedman two-way analysis of variance）測定所有三個組之間的差異，隨後通過Mann-Whitney 無母數檢定測定兩個等莫耳組LV 60 mg/m2 及6R-MTHF 30 mg/m2 之間的差異。P值小於0.05被認為顯著。
血漿dUrd的檢測
藉由概述如下的包含液相層析法接著串聯質譜法的方法檢測血漿dUrd。從-80°C冷凍庫取出血漿樣本，添加三氯乙酸至血漿中，混合並離心該些樣本。在10 kDa分子量截止膜濾器中過濾上清液並再度離心30分鐘。在管底部的溶液接著準備用於LC-MS/MS分析。利用空白血漿樣本及不同的內部標準濃度以相同方式準備校正樣本。注射進LC-MS/MS的注射體積為40 µl。以電霧陰性噴灑模式離子化去氧尿苷（Deoxyuridine）和氯去氧尿苷（chlorodeoxyuridine）。對所有葉酸的最大反應進行MS參數最佳化。採用MS/MS採集法（多反應監測）。
TS抑制的檢測
所有三個組之間的差異為顯著（p = 0.04）且兩個等莫耳組LV 60 mg/m2 及[6R]-MTHF 30 mg/m2 之間的差異亦為顯著（p = 0.03）。等莫耳的[6R]-MTHF與5-FU一起產生顯著高於用LV的dUrd水平。再者，增加[6R]-MTHF劑量與提高TS抑制水平（如提高血漿dUrd水平）之間似乎具有劑量反應關係（dose-response relationship）（參見表1及圖3）。
表1 在推注5-FU加LV或[6R]-MTHF後24小時增加的dUrd
此比較研究證明以5-FU與[6R]-MTHF而非LV進行的生物調控導致較高的血漿dUrd並提高TS抑制。該研究亦已呈現相較於LV，等莫耳劑量的[6R]-5,10-MTHF產生更高水平的來自5-FU的全球TS抑制，如dUrd的血漿濃度（pdUrd）所反映。
透過在增加[6R]-MTHF劑量後的TS劑量依賴抑制，進一步支持此觀察。來自固定劑量5-FU所增加的TS抑制為劑量依賴性且在非常高劑量的[6R]-5,10-MTHF變平。此基於來自ISO-CC-005研究的120 mg 對 240 mg的dUrd測量。
60 mg/m2 的LV推注劑量為用於廣泛使用於斯堪地那維亞（Scandinavia）中被稱為Nordic治療方案中的標準劑量。臨床結果類似於當LV以輸液施用（常為400 mg歷時2小時）的其他方案所獲得的結果。（Gustavsson et al., （2015） Clinical Colorectal Cancer, 14: 1-10）。值得注意的是在[6R]-MTHF施用後的更高的TS抑制（圖4）。
ISO-CC-005研究更支持[6R]-MTHF組合5-FU在大腸直腸癌呈現的臨床效益，如在＞90%的經治療的患者中，疾病穩定或部分有效所定義，且透過施用[6R]-MTHF的多次推注可實現非常高60-80%的ORRs。
該研究結果更支持[6R]-MTHF與不同形式的細胞抑制劑的組合可以是安全的，且[6R] -MTHF對於重症患者可能是有效和安全的。在癌症治療中使用的細胞抑制劑的劑量限制毒性（Dose Limiting Toxicity（DLT））通常防止進一步治療劑的劑量或強度的增加，或防止以當前劑量水平繼續治療。從而DLT常嚴重限制能給予患者的細胞抑制劑的劑量。目前為止實現的ISO-CC-005研究結果指出相較於5-FU與其他葉酸輔劑組合，當與[6R]-MTHF組合時，5-FU的毒性是下降的。前述討論的比較性研究建議此效果可能為[6R]-MTHF比甲醯四氫葉酸實現更高水平的來自5-FU的全球胸苷酸合成酶（TS）抑制，如透過2'-去氧尿苷（2′-deoxyuridine （dUrd））血漿濃度所反映。此可能允許5-FU較高劑量的使用而不會導致劑量限制副作用。
[注釋]1 乳癌， http://www.cancerresearchuk.org/cancer‐info/cancerstats/world/breastcancer‐world/2 根據ESMO（European Society for Medical Oncology）的臨床實踐指南，16週被認為是癌症治療的標準時間表
圖1（Wettergren Y, Taflin H, Odin E, Kodeda K, Derwinger K; Cancer Chemother Pharmacol （2015） 75:37–47）為葉酸代謝作用的簡化概述。在細胞中，[6R]‐MTHF（[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸）可用於直接作為從dUMP合成dTMP中的甲基供體。透過酶胸苷酸合成酶（TS）催化反應。此外，Isovorin® （左旋-甲醯四氫葉酸（levo‐leucovorin，5‐formylTHF））需在兩步驟中轉化成亞甲基THF（methyleneTHF）。以5-FU治療通過結合TS的FdUMP的生成抑制dTMP合成。DHF：二氫葉酸（dihydrofolate）；DHFR：二氫葉酸還原酶（dihydrofolate reductase）；SHMT1：絲氨酸羥甲基轉移酶1（serine hydroxymethyltransferase 1）；MTHFR：亞甲基四氫葉酸還原酶（methylenetetrahydrofolate reductase）；MTHFD：亞甲基四氫葉酸脫氫酶（methylenetetrahydrofolate dehydrogenase）；MTHFS：次甲基四氫葉酸合成酶（methenyltetrahydrofolate synthetase）。 圖2顯示ISO‐CC‐005研究中經8周治療後的結果：根據RECIST 1.1在12例一線患者及1例二線患者中的緩解率。 圖3顯示相較於施用作為60 mg/m2 含有50%醫藥活性左旋異構物l ‐LV的甲醯四氫葉酸（LV）的30 mg/m2 LLV（表示為「LLV 30」），施用5-FU與30及60 mg/m2 [6R]‐MTHF（表示為「6R 30」及「6R 60」）伴隨升高的TS抑制。 圖4顯示施用5-FU與30及60 mg/m2 [6R]‐MTHF（表示為「6R 30」及「6R 60」）後，相對於30 mg/m2 LLV （施用作為60 mg/m2 含有50%醫藥活性左旋異構物l ‐LV的甲醯四氫葉酸（LV））的血漿dUrd水平。 圖5顯示LV與[6R]‐MTHF的等莫耳比較表示在推注施用500 mg/m2 的5‐FU與：1) 60 mg/m2 含有50%醫藥活性左旋異構物l ‐LV的甲醯四氫葉酸（LV）（表示為 「LV 30」）及2) 30 mg/m2 的[6R]‐MTHF（表示為「M30」）之後24小時增加的血漿dUrd水平。LV周期（n = 48）與[6R]‐MTHF周期（n = 18）在24小時（t24 ）的dUrd血漿濃度減去注射前即刻的血漿dUrd濃度（t0 ）之間的個別差異已計算為此增量。[6R]‐MTHF與l ‐LV的分子量作為等莫耳比較的基礎是足夠類似的。以Mann-Whitney U檢定測定組別間的差異（p ＜ 0.05）。 圖6顯示在推注施用500 mg/m2 的5‐FU與：1) 60 mg/m2 含有50%醫藥活性左旋異構物l ‐LV的甲醯四氫葉酸（LV）（表示為 「LV 30」），及2) 30 mg/m2 的[6R]‐MTHF（表示為「M30」），及3) 60 mg/m2 的[6R]‐MTHF（表示為「M60」）之後24小時增加的血漿dUrd水平的[6R]‐MTHF劑量依賴性增加。l ‐LV周期（30 mg/m2 ，n = 48）與[6R]‐MTHF周期（30 mg/m2 ，n = 18；60 mg/m2 ，n = 16）在24小時（t24 ）的dUrd血漿濃度減去注射前即刻的血漿dUrd濃度（t0 ）之間的個別差異已計算為此增量。組別間的差異為顯著且經Friedman雙因子變異量分析測定 （p ＜ 0.05）。 圖7顯示ISO‐CC‐005研究中經16周治療後的結果：根據RECIST 1.1的8例一線患者的緩解率。 圖8摘自公開於2007年10月1日的Adventrx新聞稿顯示比較甲醯四氫葉酸與CoFactor（即[6R,S]‐5,10‐ 亞甲基THF（[6R,S]‐5,10‐methyleneTHF））的第IIB期研究結果。

Claims (16)

  1. 一種[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤（包含癌症）治療之用途，其包括以下步驟： a）　在第一天，施用一含有10-1000 mg/m2 （體表面積）之5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之靜脈推注；同時或在10分鐘至4小時後，接著， b）　施用兩次或以上的靜脈推注，間隔時間為10至60分鐘，每次含有5-1000 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸；接著， c）　施用一5-氟尿嘧啶（或其類似物或前驅藥）之連續輸液歷時46小時或直到第二天結束；接著， d）　於第一天結束之前選擇性施用一含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之靜脈推注；接著， e）　在第二天，選擇性施用一或多次之靜脈推注，每次靜脈推注含有5-1000 mg/m2 （體表面積）之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸； 其中，步驟b）係選擇性在第一天重複，至多四次，每次重複之間隔期為10分鐘至4小時；且步驟e）係選擇性在第二天重複，至多四次，施用之每次推注間之間隔期為10分鐘至60分鐘；且步驟a）至e）係選擇性每兩周重複，至多8個週期，即至多16周。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，該固態腫瘤係選自於大腸癌、胃癌、乳癌、腸癌、膽囊癌、肺癌（特別是肺腺癌）、包含轉移性大腸直腸癌之大腸直腸癌、頭頸部癌、肝癌、骨癌及胰臟癌之一腫瘤形式。
  3. 如申請專利範圍第1或2項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，在第一天施用之兩次或以上之靜脈推注含有20 - 250 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸，例如30-240 mg/m2 、30-120 mg/m2 、或約30 mg/m2 或約60 mg/m2 或約120 mg/m2 之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸。
  4. 如申請專利範圍第1至3項任一項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，該固態腫瘤係為一包含轉移性大腸直腸癌之大腸直腸癌。
  5. 如申請專利範圍第1至4項任一項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，在步驟a）之前，在第一天以靜脈推注或連續輸液施用一或多種的抗癌藥1至4小時。
  6. 如申請專利範圍第4或5項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，該抗癌藥係選自於奧沙利鉑、愛萊諾迪肯及貝伐單抗。
  7. 如申請專利範圍第4或5項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，在第一天施用之該一或多種之抗癌藥係為奧沙利鉑。
  8. 如申請專利範圍第4或5項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，在第一天施用之該一或多種之抗癌藥係為奧沙利鉑及貝伐單抗之組合。
  9. 如前述申請專利範圍任一項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，在步驟e）中，在第二天施用至少兩次[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸推注。
  10. 如申請專利範圍第8項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，施用至多四次[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸推注，每次推注間之間隔期為20-30分鐘。
  11. 如申請專利範圍第9項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，施用至多四次[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸推注，每次推注間之間隔期為20-30分鐘。
  12. 如前述申請專利範圍任一項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，該[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸以可溶於水之固體形式使用，例如一凍乾物或一鹽類，選擇性透過一或多種合適的賦形劑及/或抗氧化劑（例如檸檬酸或抗壞血酸或其鹽類形式）穩定。
  13. 如前述申請專利範圍任一項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，該[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸之非鏡像異構物純度為＞98% d.e.。
  14. 如前述申請專利範圍任一項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤治療之用途，其中，該5-氟尿嘧啶類似物或前驅藥係選自於氟化嘧啶鹼基，例如卡培他濱，即N4-戊氧基羰基-5'-脫氧-5-氟胞苷、替加氟、5-氟-嘧啶酮、尿嘧啶-替加氟、脫氧氟尿苷、2'-脫氧-5-氟尿苷、5'-脫氧-5-氟尿苷、1-（2'-氧代丙基）-5-氟尿嘧啶、及烷基-羰基-5-氟尿嘧啶、乙嘧替氟、呋氟尿嘧啶、及S-1。
  15. 一種[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤（包含癌症）預防或阻斷病程之用途，其包括在至少8周之總治療期中執行及重複如申請專利範圍第1至14項任一項所述之步驟a）至e）。
  16. 如申請專利範圍第15項所述之[6R]-5,10-亞甲基四氫葉酸用於人類固態腫瘤（包含癌症）預防或阻斷病程之用途，其中，在至少16周之總治療期中執行及重複如申請專利範圍第1至13項任一項所述之步驟a）至e），且在初始化治療後8至16周之間未觀察到所述固態腫瘤在統計學顯著進展。
TW107100835A 2017-08-24 2018-01-09 在基於5-氟尿嘧啶的化療中[6r]-亞甲基四氫葉酸的多次推注施用 TWI772354B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17187682.4 2017-08-24
??17187682.4 2017-08-24
EP17187682.4A EP3446703A1 (en) 2017-08-24 2017-08-24 6r]-mthf multiple bolus administration in 5-fluorouracil based chemotherapy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201912158A true TW201912158A (zh) 2019-04-01
TWI772354B TWI772354B (zh) 2022-08-01

Family

ID=59702572

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW107100835A TWI772354B (zh) 2017-08-24 2018-01-09 在基於5-氟尿嘧啶的化療中[6r]-亞甲基四氫葉酸的多次推注施用

Country Status (19)

Country Link
US (2) US10328079B2 (zh)
EP (4) EP3446703A1 (zh)
JP (3) JP2020531492A (zh)
KR (1) KR102227451B1 (zh)
CN (1) CN110214023A (zh)
AU (1) AU2018319671A1 (zh)
BR (1) BR112020003604A2 (zh)
CA (2) CA3073608C (zh)
DK (1) DK3446706T3 (zh)
ES (1) ES2889573T3 (zh)
HU (1) HUE056275T2 (zh)
IL (1) IL272876B (zh)
MX (1) MX2020002075A (zh)
PL (1) PL3446706T3 (zh)
PT (1) PT3446706T (zh)
RU (1) RU2762596C2 (zh)
SG (2) SG11202001371YA (zh)
TW (1) TWI772354B (zh)
WO (1) WO2019037899A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018150264A1 (en) 2017-02-14 2018-08-23 Isofol Medical Ab METHODS FOR INCREASING BLOOD PLASMA 2'-DEOXYURIDINE (dUrd) AND THYMIDYLATE SYNTHASE INHIBITION
WO2023046305A1 (en) * 2021-09-27 2023-03-30 Isofol Medical Ab [6r]-mthf in 5-fu based chemotherapy of left-sided colorectal cancer
WO2023046307A1 (en) * 2021-09-27 2023-03-30 Isofol Medical Ab [6r]-mthf in 5-fu based chemotherapy of right-sided colorectal cancer
WO2023046304A1 (en) * 2021-09-27 2023-03-30 Isofol Medical Ab [6r]-mthf in 5-fu based chemotherapy of braf- or kras-mutated colorectal cancer

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5376658A (en) * 1990-05-11 1994-12-27 University Of Southern California 5,10-methylene-tetrahydrofolate as a modulator of a chemotherapeutic agent
US7135575B2 (en) * 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
CN1942189A (zh) * 2004-04-02 2007-04-04 阿德文特克斯药物有限公司 5,10－亚甲基四氢叶酸在癌症治疗中的用途
WO2005097086A2 (en) * 2004-04-02 2005-10-20 Adventrx Pharmaceuticals, Inc. Use of 5,10-methylene tetrahydrofolate for the treatment of cancer
CA2631755A1 (en) * 2005-12-02 2007-06-07 Adventrx Pharmaceuticals, Inc. Stable pharmaceutical compositions of 5,10 methylenetetrahydrofolate
WO2008109349A1 (en) 2007-03-06 2008-09-12 Adventrx Pharmaceuticals, Inc. Improved regimen for treating cancer with 5-fluorouracil, 5,10-methylenetetrahydrofolate and capecitabine
EP2617421A1 (en) * 2012-01-20 2013-07-24 Isofol Medical AB Tetrahydrofolates in combination with EGFR-inhibitors in the use of treating cancer
EP2837631A1 (en) * 2013-08-14 2015-02-18 Merck & Cie New stable salt of 5,10-methylene-(6R)-tetrahydrofolic acid
EP3305318A1 (en) 2016-10-05 2018-04-11 Isofol Medical AB [6r]-5,10-methylenetetrahydrofolate in 5-fluorouracil based chemotherapy

Also Published As

Publication number Publication date
US20190212341A1 (en) 2019-07-11
KR102227451B1 (ko) 2021-03-12
AU2018319671A1 (en) 2020-03-05
JP2020531492A (ja) 2020-11-05
PT3446706T (pt) 2021-09-15
CN110214023A (zh) 2019-09-06
PL3446706T3 (pl) 2021-11-08
EP3854399A1 (en) 2021-07-28
CA3073608C (en) 2022-02-01
EP3446706B1 (en) 2021-06-02
EP3446703A1 (en) 2019-02-27
HUE056275T2 (hu) 2022-02-28
MX2020002075A (es) 2020-08-13
US10328079B2 (en) 2019-06-25
SG11202001371YA (en) 2020-03-30
ES2889573T3 (es) 2022-01-12
JP2020169208A (ja) 2020-10-15
TWI772354B (zh) 2022-08-01
JP6734308B2 (ja) 2020-08-05
DK3446706T3 (da) 2021-09-13
EP3446706A1 (en) 2019-02-27
RU2020109122A3 (zh) 2021-09-24
US20190060315A1 (en) 2019-02-28
CA3073608A1 (en) 2019-02-28
SG10201800203SA (en) 2019-03-28
KR20190022269A (ko) 2019-03-06
IL272876A (en) 2020-04-30
WO2019037899A1 (en) 2019-02-28
BR112020003604A2 (pt) 2020-09-01
IL272876B (en) 2021-12-01
CA2991361A1 (en) 2019-02-24
JP2019038796A (ja) 2019-03-14
RU2020109122A (ru) 2021-09-24
EP3672624A1 (en) 2020-07-01
RU2762596C2 (ru) 2021-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI772354B (zh) 在基於5-氟尿嘧啶的化療中[6r]-亞甲基四氫葉酸的多次推注施用
EP3305318A1 (en) [6r]-5,10-methylenetetrahydrofolate in 5-fluorouracil based chemotherapy
WO2018065445A1 (en) [6r]-mthf multiple bolus administration in 5-fluorouracil based chemotherapy
WO2018065446A1 (en) [6r]-mthf - an efficient folate alternative in 5-fluorouracil based chemotherapy
JP7356411B2 (ja) ５－フルオロウラシルに基づく化学療法における［６ｒ］－ｍｔｈｆ、有効な葉酸代替物