TW201840304A - 使用皮膚化妝品溶液製備化妝品組合物的方法 - Google Patents

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Abstract

本發明關於一種利用可用於皮膚護理的皮膚化妝品溶液萃取植物的方法。與使用傳統溶劑的萃取方法相比，此方法允許進一部提高製程的效率並更有效地萃取有用的成分。因此，有可能提高客戶滿意度並促進相關產業的發展。

Description

使用皮膚化妝品溶液製備化妝品組合物的方法
本發明關於利用皮膚化妝品溶液的化妝品組成物製備方法以及由皮膚化妝品溶液所組成的萃取溶劑，萃取溶劑用於製備包含植物萃取物的化妝品組成物中的植物萃取。再者，本發明關於萃取物與利用萃取物之化妝品組成物。
萃取是一種藉由主要使用液體溶劑而僅從固體或液體混合物中溶解和分離特定成分的製程。它是一種不僅在化學和生物實驗中而且在工業上都很重要的分離方法。它可以使用化學反應如酸鹼反應或螯合物形成反應，或僅使用溶解度差異。萃取自固體稱為固體-液體萃取，而萃取自液體稱為液體-液體萃取。固體-液體萃取有時被稱為浸出。
在多種萃取中，溶劑萃取是指使用溶劑從固體或液體樣品中溶解和分離一種（有時為兩種或多種）成分。在化學分析或混合物的使用中，存在這樣的情況，其中測試材料的成分很好地溶解在特定的溶劑中，而其它成分不溶解在溶劑中。
萃取溶劑是指用於自固體混合物或液體混合物溶解和分離特定物質的液體溶劑。她包括水、醇、醚、石油醚、苯、乙酸乙酯、氯仿、水銀等等。近年來，使用超臨界流體（SCF）作為溶劑的萃取方法也被廣泛使用。
如上所述，可僅使用溶劑來執行萃取。然而，也可以藉由化學反應如混合物中的酸鹼反應或螯合物形成來執行萃取。Soxhlet萃取器被用於使用溶劑萃取固體混合物，而分液漏斗被用來萃取液體混合物。
為了從植物中萃取或分離成分，通常最好在收集植物後立即使用植物。最常用的方法是在收集後立即將植物浸入熱水、熱甲醇或熱乙醇中。可以在從植物中萃取成分之前乾燥植物。在此情況中，應注意使植物組織中的成分在乾燥過程中不發生變化。因此，建議儘快在低溫或通風良好的地方乾燥植物材料。一旦植物材料乾燥後，即使其長期保存也不會大幅干擾其成分的研究。事實上，即使乾燥數年後，類黃酮、生物鹼和萜類等植物物質也不會發生顯著變化。
消費者對含有植物萃取物的產品的需求日益增加，特別是在製備化妝品方面。因此，正在研究有效且安全的萃取方法和萃取溶劑。
引文列表 [專利文獻] [專利文獻1] 韓國第10-2009-0114513號專利申請案
[技術問題]
在一個態樣中，本發明的目的是提供一種有效且安全的萃取溶劑、使用該萃取溶劑的萃取方法和使用該萃取溶劑的化妝品組成物。
[解決問題的方法]
為了實現上述目的，本發明提供了含有植物萃取物的化妝品組成物的製備方法，包括下列步驟：利用皮膚化妝品溶液自植物萃取萃取物；並在上述步驟萃取的萃取物中加入附加成分以製備化妝品組成物。
再者，本發明提供一種由皮膚化妝品溶液組成的萃取溶劑，可用於包含植物萃取物的化妝品組成物的製備中之植物萃取。
再者，本發明提供包括萃取溶劑與藉此自植物萃取的成分的萃取物。
再者，本發明提供包括萃取物的化妝品組成物。
[發明的有益效果]
與使用傳統溶劑的萃取方法相比，根據本發明的一態樣的製備方法允許進一步提高製程的效率。
根據本發明的一態樣包括利用萃取溶劑萃取的萃取物的化妝品組成物具有萃取的高活性成分含量與皮膚上的優異效果。
本文所用的詞彙「皮膚化妝品溶液」指的是為了各種美容目的可以施用於皮膚的流體組成物。皮膚化妝品溶液主要包括液體或精華配方，諸如軟化乳液、滋潤乳液和乳液。皮膚化妝品溶液也可包括乳膠、增溶劑、保濕劑、水和其他化學品。
本文所用的詞彙「萃取物」包括不管萃取方法、萃取溶劑、萃取的成分或萃取物的形式如何，所有藉由萃取天然產物的成分而獲得的物質。萃取物也涵蓋可以通過使用另一種方法處理或處置通過萃取天然產物的成分獲得的材料而獲得的所有材料。明確地說，處理或處置可為萃取物的額外發酵或酵素處理。因此，本文所用的萃取物涵蓋發酵產物、濃縮物與乾燥產物。
本文所用的詞彙「甘油衍生物」指的是藉由化學改變甘油的部分而取得且相似於甘油的化合物。這是指通過用另一個原子或原子團取代甘油中的氫原子或特定原子團而獲得的化合物。
藉由利用廣泛使用的一般萃取方法萃取植物、將所得物還原並將藉此獲得的產物引入化妝品組成物中來製備包括植物萃取物的傳統化妝品組成物。在一般萃取方法中，利用有機溶劑、水或上述之混合物作為溶劑執行萃取、藉由自萃取的液體相蒸發溶劑來移除溶劑、然後將所得物再加工成可用於化妝品的形式，然後將其用於化妝品。採用一般溶劑的萃取方法在成本和時間方面是有效的。然而，它們可能具有的缺點是，在原材料的多種成分中，僅部分萃取在特定溶劑中具有溶解性的成分或在萃取後蒸發或附加處理期間可能損失成分。此外，有可能殘留少量用過的有機溶劑，這對皮膚造成不良影響。
在一個態樣中，本發明關於直接使用可用作皮膚化妝品溶液的原料組合萃取植物的方法。此方法可避免萃取成分的損失，因為它不需要如溶劑去除的額外處理過程。再者，它不具有傳統溶劑的毒性。因此，本發明可克服上方提及的所有缺點。
在一個態樣中，本發明關於含有植物萃取物的化妝品組成物的製備方法，包括下列步驟：利用皮膚化妝品溶液自植物萃取萃取物；並在上述步驟萃取的萃取物中加入附加成分以製備化妝品組成物。並無使用皮膚化妝品溶液本身自植物獲得萃取物的已知方法。本發明的一態樣包括新組成並藉此達成上述效果。
在一個實施例中，植物可以為可接受利用皮膚化妝品溶液萃取的任何植物並可為任何部分，諸如葉、莖、果實、花和根。然而，植物較佳為茶葉。
在另一個實施例中，植物可為發酵的茶葉。發酵可以包括天然發酵和通過微生物接種發酵兩者。然而，發酵較佳可為天然發酵。
在另一個實施例中，萃取可為(但不限於)超音波萃取、室溫萃取、冷萃取或回流冷卻萃取。
在另一個實施例中，萃取可執行在10至50℃下。舉例而言，萃取可執行在10℃或更高、20℃或更高、25℃或更高、30℃或更高、40℃或更高、45℃或更高。再者，萃取可執行在50℃或更低、45℃或更低、40℃或更低、30℃或更低、25℃或更低、20℃或更低、15℃或更低。
在另一個實施例中，萃取可執行持續3至30小時。舉例而言，萃取時間可為3小時或更多、5小時或更多、8小時或更多、10小時或更多、12小時或更多、14小時或更多、16小時或更多、18小時或更多、20小時或更多、25小時或更多、28小時或更多。此外，萃取時間可為30小時或更少、25小時或更少、20小時或更少、18小時或更少、16小時或更少、14小時或更少、12小時或更少、10小時或更少、8小時或更少、5小時或更少。
在另一個實施例中，萃取可執行在5至100 rpm下。舉例而言，rpm可為5或更多、7或更多、9或更多、10或更多、12或更多、15或更多、20或更多、30或更多、40或更多、50或更多、60或更多、70或更多、80或更多、90或更多。此外，rpm可為100或更少、90或更少、80或更少、70或更少、60或更少、50或更少、40或更少、30或更少、20或更少、15或更少、12或更少、10或更少、9或更少、7或更少。
根據本發明的另一態樣，萃取步驟可進一步包括過濾步驟。在一個實施例中，過濾可為過濾作用，更加為離心後的過濾作用。
在另一態樣中，本發明可關於由皮膚化妝品溶液所構成之萃取溶劑，可用於包含植物萃取物的化妝品組成物的製備中之植物萃取。
在一個實施例中，皮膚化妝品溶液可包括選自C2 至C20 二羥基醇與C2 至C20 三羥基醇所構成之群組的一者或多者。
在另一個實施例中，二羥基醇可為選自丁二醇、丙二醇與己二醇所構成之群組的一者或多者。此外，三羥基醇可為甘油與甘油衍生物的一者或多者。
在另一個實施例中，丁二醇可為1,3-丁二醇，丙二醇可為1,3-丙二醇，而己二醇可為1,2-己二醇。
在另一個實施例中，甘油衍生物可為乙基己基甘油。
在另一個實施例中，皮膚化妝品溶液可包括甘油、丁二醇、丙二醇、己二醇與乙基己基甘油。
在一個實施例中，基於萃取溶劑的總重量，丁二醇的含量可為10至25重量%。若含量超過25重量%，由於黏度的增加、過濾作用的不可能性等原因，不可能使用它。若含量少於10重量%，萃取效果顯著降低。在一個態樣中，基於萃取溶劑的總重量，丁二醇的含量可為10重量%或更多、12重量%或更多、14重量%或更多、16重量%或更多、18重量%或更多、20重量%或更多、22重量%或更多、24重量%或更多。此外，含量可為25重量%或更少、22重量%或更少、20重量%或更少、18重量%或更少、16重量%或更少、14重量%或更少、12重量%或更少。
在另一個實施例中，基於萃取溶劑的總重量，丙二醇的含量可為1至20重量%。若含量超過20重量%，由於黏度的增加、過濾作用的不可能性等原因，不可能使用它。若含量少於1重量%，萃取效果顯著降低。在一個態樣中，含量可為1重量%或更多、4重量%或更多、6重量%或更多、8重量%或更多、10重量%或更多、12重量%或更多、14重量%或更多、16重量%或更多、18重量%或更多。此外，含量可為20重量%或更少、18重量%或更少、16重量%或更少、14重量%或更少、12重量%或更少、10重量%或更少、8重量%或更少、6重量%或更少、4重量%或更少、2重量%或更少。
在另一個實施例中，基於萃取溶劑的總重量，己二醇的含量可為0.1至5重量%。若含量超過5重量%，由於黏度的增加、過濾作用的不可能性等原因，不可能使用它。若含量少於0.1重量%，萃取效果顯著降低。在一個態樣中，含量可為0.1重量%或更多、0.4重量%或更多、0.6重量%或更多、0.8重量%或更多、1重量%或更多、1.2重量%或更多、1.5重量%或更多、2重量%或更多、2.5重量%或更多、3重量%或更多、3.5重量%或更多、4重量%或更多、4.5重量%或更多。此外，含量可為5重量%或更少、4.5重量%或更少、4重量%或更少、3.5重量%或更少、3重量%或更少、2.5重量%或更少、2重量%或更少、1.5重量%或更少、1.2重量%或更少、1重量%或更少、0.8重量%或更少、0.6重量%或更少、0.4重量%或更少、0.2重量%或更少。
在另一個實施例中，基於萃取溶劑的總重量，甘油的含量可為5至20重量%。若含量超過20重量%，由於黏度的增加、過濾作用的不可能性等原因，不可能使用它。若含量少於5重量%，萃取效果顯著降低。在一個態樣中，含量可為5重量%或更多、7重量%或更多、9重量%或更多、11重量%或更多、13重量%或更多、15重量%或更多、17重量%或更多、19重量%或更多。此外，含量可為20重量%或更少、18重量%或更少、16重量%或更少、14重量%或更少、12重量%或更少、10重量%或更少、8重量%或更少、6重量%或更少。
在另一個實施例中，基於萃取溶劑的總重量，甘油衍生物的含量可為0.01至10重量%。若含量超過10重量%，由於黏度的增加、過濾作用的不可能性等原因，不可能使用它。若含量少於0.01重量%，萃取效果顯著降低。在一個態樣中，含量可為0.01重量%或更多、0.05重量%或更多、0.08重量%或更多、0.1重量%或更多、0.12重量%或更多、0.14重量%或更多、0.2重量%或更多、0.4重量%或更多、0.6重量%或更多、0.8重量%或更多、1重量%或更多、4重量%或更多、6重量%或更多、8重量%或更多。此外，含量可為8重量%或更少、6重量%或更少、4重量%或更少、1重量%或更少、0.8重量%或更少、0.6重量%或更少、0.4重量%或更少、0.2重量%或更少、0.14重量%或更少、0.12重量%或更少、0.1重量%或更少、0.08重量%或更少、0.05重量%或更少、0.02重量%或更少。
根據本發明的一態樣，甘油：丁二醇的重量比例可為1：0.5至5。在一個態樣中，比例可為1：0.5或更多、1：0.7或更多、1：0.9或更多、1：1.0或更多、1：1.2或更多、1：1.4或更多、1：1.6或更多、1：1.8或更多、1：2或更多、1：2.5或更多、1：2.8或更多、1：3或更多、1：3.5或更多、1：4或更多、1：4.5或更多。此外，比例可為1：5或更少、1：4.5或更少、1：4或更少、1：3.5或更少、1：3或更少、1：2.5或更少、1：2或更少、1：1.5或更少、1：1.2或更少、1：1或更少、1：0.8或更少、1：0.6或更少。
在一個實施例中，丁二醇：丙二醇的重量比例可為1：0.04至2。在一個態樣中，比例可為1：0.04或更多、1：0.06或更多、1：0.08或更多、1：0.1或更多、1：0.2或更多、1：0.4或更多、1：0.6或更多、1：0.8或更多、1：1或更多、1：1.2或更多、1：1.4或更多、1：1.6或更多、1：1.8或更多。此外，比例可為1：2或更少、1：1.8或更少、1：1.6或更少、1：1.4或更少、1：1.2或更少、1：1或更少、1：0.8或更少、1：0.6或更少、1：0.4或更少、1：0.2或更少、1：0.1或更少、1：0.08或更少、1：0.06或更少。
在另一個實施例中，丙二醇：己二醇的重量比例可為1：0.005至5。在一個態樣中，比例可為1：0.005或更多、1：0.01或更多、1：0.05或更多、1：0.1或更多、1：0.5或更多、1：1或更多、1：2或更多、1：3或更多、1：4或更多。此外，比例可為1：5或更少、1：4或更少、1：3或更少、1：2或更少、1：1或更少、1：0.5或更少、1：0.1或更少、1：0.05或更少、1：0.01或更少、1：0.008或更少。
在另一個實施例中，己二醇：甘油衍生物的重量比例可為1：0.002至100。在一個態樣中，比例可為1：0.002或更多、1：0.005或更多、1：0.01或更多、1：0.05或更多、1：0.1或更多、1：0.5或更多、1：1或更多、1：5或更多、1：10或更多、1：20或更多、1：30或更多、1：40或更多、1：50或更多、1：80或更多。此外，比例可為1：100或更少、1：80或更少、1：60或更少、1：40或更少、1：30或更少、1：20或更少、1：10或更少、1：5或更少、1：1或更少、1：0.5或更少、1：0.1或更少、1：0.05或更少、1：0.01或更少、1：0.005或更少。
在另一態樣中，本發明可關於包括萃取溶劑與藉此自植物萃取的成分的萃取物。
在一個實施例中，萃取物可為其中相對於1g的被萃取植物(或100 g包括萃取溶劑(或皮膚化妝品溶液)與藉此自植物萃取的成分的萃取物)而言表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的含量為20至60 mg的萃取物。在一個態樣中，EGCG的含量可為20mg或更多、25mg或更多、30mg或更多、35mg或更多、40mg或更多、45mg或更多、50mg或更多、55mg或更多。此外，含量可為60mg或更少、55mg或更少、50mg或更少、45mg或更少、40mg或更少、35mg或更少、30mg或更少、25mg或更少。
在另一態樣中，本發明可關於包括萃取物的化妝品組成物。
在另一態樣中，本發明可關於由皮膚化妝品溶液所構成之萃取溶劑的用途，可用於包含植物萃取物的化妝品組成物的製備中之植物萃取。
在另一態樣中，本發明可關於植物萃取物的製備方法，包括下列步驟：利用由皮膚化妝品溶液所構成之萃取溶劑自植物萃取萃取物。
在另一態樣中，本發明可關於用於減少皮膚粗糙度、皮膚保溼、皮膚彈性增強、皮膚透明度改善、皮膚抗氧化、皮膚抗發炎或皮膚抗衰老之包括萃取物的化妝品組成物。
在另一態樣中，本發明可關於包括由皮膚化妝品溶液所構成之萃取溶劑自植物萃取之成分的萃取物的用途，用於製備用於減少皮膚粗糙度、皮膚保溼、皮膚彈性增強、皮膚透明度改善、皮膚抗氧化、皮膚抗發炎或皮膚抗衰老的化妝品組成物。
在另一態樣中，本發明可關於包括由皮膚化妝品溶液所構成之萃取溶劑自植物萃取之成分的萃取物的用途，用於減少皮膚粗糙度、皮膚保溼、皮膚彈性增強、皮膚透明度改善、皮膚抗氧化、皮膚抗發炎或皮膚抗衰老。
在另一態樣中，本發明可關於用於減少皮膚粗糙度、皮膚保溼、皮膚彈性增強、皮膚透明度改善、皮膚抗氧化、皮膚抗發炎或皮膚抗衰老的方法，包括將包括植物萃取物之化妝品組成物施加至需要其之個體的步驟。
以下，將通過製備實施例、實施例和測試實施例更詳細地描述本發明的一態樣的構成和效果。然而，提供以下實施例僅是為了便於理解本發明的說明性目的，並且本發明的範圍不限於此。
製備實施例：發酵綠茶的製備
準備發酵綠茶以執行本發明的一個實施例。
明確地說，綠茶茶葉的收穫方式與普通的綠茶茶葉收穫方法相同，並且在沒有單獨的微生物接種的情況下進行50天的自然發酵。發酵條件為45 ± 5℃與30%的溼度。接著，熟成發酵的綠茶茶葉持續50天。
實施例：皮膚化妝品溶液(萃取溶劑)的製備
為了製備可作為萃取溶劑的皮膚化妝品溶液，首先考量可構成溶劑的成分的條件。首先，成分僅限於那些可以應用於皮膚的成分以及那些可以構成可作為化妝品之組成的成分。此外，選擇對活的生物體安全且在提取過程中可提取足夠量的有用成分的成分。再者，選擇可用於任何植物作為原料(待萃取的原料)的成分，而不論植物的部分(葉、莖、根、花、果實等等)為何。在綠茶上執行實驗作為一個實施例。然而，證實了可以用本發明的萃取溶劑萃取的任何植物都可以用來作為要萃取的原料，而不論植物的部分為何。
藉由斑貼試驗來證實溶劑的成分的皮膚安全性。
明確地說，在32個平均年齡36.36的健康成年女性(在試驗前排除具有牛皮癬、痤瘡、濕疹或其他皮膚疾病的那些女性、懷孕或哺乳的那些女性與服用避孕藥、抗組織胺等的那些女性)上執行各個成分的密封斑貼試驗(在背上)。在施用24小時後，觀察她們持續24小時。根據Frosch & Kligman與CTFA指南來評估皮膚反應。
符合上述條件的候選材料為淨化水、甘油、1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇、乙基己基甘油、D-葡萄糖與甜菜鹼。將這些材料以合適的重量和比例混合以製備萃取溶劑。
此外，乙醇、乙酸乙酯與己烷為一般萃取方法常用的溶劑並選擇用來作為比較成分。
比較萃取效率的萃取方法如下所述：
明確地說，將根據製備實施例的發酵綠茶茶葉乾燥以製備粉末(0.001至5重量%)。接著，以藉由組合安全性證實的候選材料取得的皮膚化妝品溶液(5至75重量%)混合粉末，接著藉由淨化水(20至94.999重量%)混合。隨後，以Agi混合在10℃至50℃(尤其，25℃較佳，但整個實驗執行於此溫度範圍中)與5至100rpm (尤其，10rpm較佳，但整個實驗執行於此rpm範圍中)下持續3至20小時(尤其，12小時較佳，但整個實驗執行於此時間範圍中)來執行萃取。接著過濾所得物(依序以300篩網過濾器(尼龍製)、3微米過濾器(孔狀濾紙)與0.45微米過濾器(孔狀濾紙)來過濾)以製備萃取物。由候選材料之組合取得的萃取物分析如下：
藉由HPLC分析(流動相A：B = 7：3，A：0.5%甲酸於水中，B：0.5%甲酸於甲醇中，1.0毫升/分，分析管柱：Phenomenex Gemini 5u C18 110A (4.6 x 150毫米，5微米)，室溫，280奈米下偵測)來比較EGCG(綠茶代表成分)的萃取產率。也評估其他成分且其產率相似於EGCG的產率。EGCG僅僅是確認萃取效率的示例性材料。
結果顯示當使用在下方表1中的實施例1與實施例2的比例下組合的成分作為萃取溶劑時獲得最高的萃取效率。 表1 (表1中的數值單位為重量%)
在下方表2中顯示實施例1、實施例2、比較實施例1與比較實施例2對EGCG的萃取效率。 表2
此處，EGCG只是可以在萃取的多種活性成分中容易分析的指標物質之一。因此，結果並不意味著根據實施例等的高萃取效率僅針對EGCG。可以看出，對於任何可以從綠茶或發酵綠茶萃取的成分，根據本發明的一態樣的實施例等的萃取效率都很高。
實施例的萃取溶劑為可做為化妝品的材料的組合。萃取溶劑本身可做為皮膚化妝品溶液(化妝品)等。此外，發現到與諸如乙醇、乙酸乙酯與己烷的有機溶劑不同，實施例的萃取溶劑可直接用作化妝品而無需溶劑去除或附加處理，因為實施例的萃取溶劑不刺激皮膚因此對皮膚安全。可以看出，實施例1與實施例2在使用性方面顯著優於使用傳統溶劑的比較實施例，因為萃取的萃取物可直接施加至皮膚而無需附加處理。此外，當使用實施例1與實施例2時，可更有效率地萃取原料的有用成分且亦可最小化處理時間。因此，可以理解的是，比起使用傳統溶劑的比較實施例，實施例1和實施例2明顯更佳地保存萃取的成分。
測試實施例1：萃取物功效的確認
利用根據實施例的實施例1與實施例2的皮膚化妝品溶液(溶劑)製備綠茶萃取物並施加至皮膚以評估功效。
明確地說，在下方表3中所示的條件下評估功效。結果圖示於圖1至圖5中。 表3
利用三維成像裝置來測量肌理。明確地說，利用PRIMOS® premium (GFMesstechnik GmbH，德國)來測量肌理。在每個測量時間點拍攝相同位置的影像並比較。使用粗糙度參數或皺紋分析參數進行分析。
通過使用電容的皮膚濕度測量來決定皮膚濕度。在每個時間點利用Corneometer® CM 825(C+K，德國)測量面頰區域的濕度含量三次並分析平均數值。
藉由利用Cutometer® MPA580 (C+K，德國)的抽吸方法來測量皮膚彈性。藉由以2.0秒的間隔打開和關閉450毫巴的負壓進行抽吸3次後分析皮膚彈性。
利用擴散反射來測量皮膚透明度。利用Radioscan™ (True系統，韓國)在60°的角度下測量臉頰皮膚區域的擴散反射數值。
藉由測量皮膚角蛋白的抗氧化指數(過氧化氫酶活性)來測量皮膚的抗氧化水平。利用D-squame disc® (Cuderm，美國)來收集前臂的角蛋白並利用SquameScan® 850 (Wetzlar，德國)在850奈米下執行光吸收分析以量化蛋白質的數量。接著，利用Catalase Activity Colorimetric/Fluorometric Assay套組(biovision, Inc.，美國)來測量與分析角蛋白的過氧化氫酶活性。
結果表明，由本發明的實施例獲得的萃取物具有高萃取效率。此外，發現因為用可直接用作皮膚化妝品溶液的成分萃取萃取物，而不需要溶劑去除等附加處理，因而可以有效地保存各種萃取的成分。還發現，當萃取物直接施加至皮膚時，它們對肌理、皮膚濕度、皮膚彈性、皮膚透明度與皮膚抗氧化水平產生顯著影響(圖1至圖5)。
測試實施例2：根據實施例與比較實施例的萃取物之間細胞毒性的比較
利用Cell Proliferation & Toxicity Assay (CCk-8)來評估細胞毒性。明確地說，以1.2x104 細胞/200微升的濃度將HEKn細胞植入48孔盤中，培養24小時，以具有預設濃度的各個樣本(藉由利用實施例與比較實施例取得的萃取物)處理。在24小時後，以包含8%的CCK-8溶液(Dojindo #CK04)的培養基取代培養基，接著為37℃下持續2至3小時的另一個培養。最終，在450奈米下測量吸光度並藉由比較結果與對照(「CON」)來計算細胞增殖或細胞毒性。
發現到，藉由利用實施例1與實施例2獲得的萃取物(25、50、100、200與400 ppm重量)在細胞毒性方面比起藉由利用比較實施例1獲得的萃取物來得安全(圖6中的「CON」代表未由萃取物處理的群組)。
測試實施例3：實施例與比較實施例的萃取物的抗發炎作用、抗氧化作用與抗老化作用的比較
在實施例與比較實施例的萃取物之間比較抗發炎作用、抗氧化作用與抗老化作用。
明確地說，藉由定量PCR(包括RNA萃取與PCR分析)來評估IL-1α (介白素-1α)、COX2 (細胞色素c氧化酶次單元2)、DCF-DA (二氯熒光素二乙酸酯)、NF-E2-相關因子-2 (Nrf2)、Keap-1 (Kelch-類ECH相關蛋白1)等的表現。將2×105 HEKn細胞植入6孔盤中並培養24小時。以預設濃度的各個樣本(利用實施例與比較實施例獲得的萃取物)處理細胞。在24小時後，以Trizol執行細胞裂解且分離RNA。在量化RNA後，合成cDNA。接著，使用Taqman探針對每個基因進行即時PCR。使用RPLP0基因作為內部對照基因。最終，利用Ct數值量化相對基因表現數值(使用細塵樣品作為誘發炎症的刺激物，並使用抗壞血酸鈉作為DCF-DA的陽性對照)。
藉由MMP-1 (基質金屬蛋白酶-1) ELISA來評估抗老化。以3.6x104 細胞/600微升的濃度將 Hs68細胞植入24孔盤中並培養24小時。在以無血清培養基替換培養基後，再培養細胞另一個4小時並接著以35mJ/cm2 下的UVB刺激。接著以各個濃度的兩種類型樣本(利用實施例與比較實施例獲得的萃取物)與陽性對照(視網酸(RA)，代表性MMP-1表現抑制劑)來處理細胞。以樣本處理48小時後，收集培養基溶液並藉由ELISA來測量MMP-1的數量。
發現到，使用實施例1和實施例2獲得的萃取物以濃度依賴性方式降低IL-1α和DCF-DA的表現。尤其是，IL-1α與DCF-DA的表現遠低於使用比較實施例(使用傳統溶劑)獲得的萃取物中的表現。因此，發現到，使用實施例1與實施例2獲得的萃取物比起使用傳統溶劑獲得的萃取物在抗發炎與抗氧化作用中更為有效(參見圖7；圖7的左圖中的「CON」代表用刺激物處理以誘導發炎且未用實施例或比較實施例的萃取物處理的對照組；圖7的右圖中的左「CON」代表不受處理的組；圖7的右圖中的右「CON」代表僅用紫外線處理的組；而X-軸的單位為μM)。
此外，發現到，使用實施例1與實施例2獲得的萃取物以濃度依賴性方式降低MMP-1濃度與COX2表現、提高Nrf2表現並降低Keap-1表現(Keap1蛋白在氧化壓力條件下分解以穩定Nrf2，而Nrf2進入細胞核並充當轉錄因子以增加諸如NQO1、HO-1與GCLC的抗氧化劑基因的表現)，並因而具有優異的抗老化、抗發炎與抗氧化作用(參見圖8；左上方圖中的第一個「CON」代表不受處理的組；左上方圖中的第二個「CON」代表僅用紫外線處理的組；右上方圖中的「CON」代表未以由利用實施例或比較實施例獲得的萃取物處理的組；圖中的ppm意指以重量計的ppm；而「cz120」是在COX2表現測試中誘導發炎的細塵樣品的名稱)。
配方實施例1：滋潤乳液
利用根據本發明的一態樣的實施例1萃取1重量%的發酵綠茶。添加適當數量的芳香物與5重量%(基於萃取物的總重)的鯊烷至所得到的萃取物以製備滋潤乳液。
配方實施例2：軟化乳液
利用根據本發明的一態樣的實施例1萃取5重量%的發酵綠茶。添加適當數量的芳香物、0.5重量% (基於萃取物的總重)的液體石蠟、5重量%的辛酸/癸酸三酸甘油酯、1.5重量%的聚山梨醇酯60、5重量%的鯊烷與4重量%的蜂蠟至所得到的萃取物以製備軟化乳液。
配方實施例3：面膜
利用根據本發明的一態樣的實施例1萃取3重量%的發酵綠茶。添加0.3重量% (基於萃取物的總重)的PEG 12壬基苯基醚、0.1重量%的尿囊素、13重量%的聚乙烯醇至所得到的萃取物，並將因此得到的產物施加至面膜的表面以製備面膜。
根據本發明的一態樣的製備方法比起利用傳統溶劑的方法而言達成遠遠較高的製程效率。此外，以藉由使用根據本發明的一態樣的萃取溶劑獲得的萃取物製備的化妝品組成具有大量萃取的活性成分並且對皮膚顯示出非常優異的效果。
儘管已經參照特定實施例來描述本發明，熟悉技術人士將清楚得知可在不悖離發明的精神與範圍的情況下做出多個改變與修飾，而發明的精神與範圍由下方的申請專利範圍所界定。
無
圖1圖示當使用根據本發明的一態樣萃取的萃取物時皮膚粗糙度的降低；
圖2圖示當使用根據本發明的一態樣萃取的萃取物時皮膚保濕作用的改善；
圖3圖示當使用根據本發明的一態樣萃取的萃取物時皮膚彈性的增強；
圖4圖示當使用根據本發明的一態樣萃取的萃取物時皮膚透明度的改善；
圖5圖示根據本發明的一態樣萃取的萃取物的使用增強皮膚角蛋白中抗氧化酶(過氧化氫酶)的活性，導致皮膚上的抗氧化作用；
圖6圖示利用根據本發明的一態樣的實施例1與比較實施例1各自的皮膚化妝品溶液(溶劑)萃取的萃取物的細胞毒性比較結果；
圖7圖示當使用根據本發明的一態樣的實施例1與比較實施例1各自的皮膚化妝品溶液(溶劑)萃取的萃取物時IL-1α與DCF-DA的表達程度的測量結果；及
圖8圖示當使用根據本發明的一態樣的實施例的皮膚化妝品溶液(溶劑)萃取的萃取物時MMP-1、COX2、Nrf2與Keap-1的評估結果。
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Claims (19)

  1. 一種包含一植物萃取物的一化妝品組成物的製備方法，包括下列步驟： 使用一皮膚化妝品溶液自一植物萃取一萃取物；及 對在上述步驟萃取的該萃取物添加一額外成分以製備一化妝品組成物。
  2. 如請求項1所述之製備方法，其中該植物係一茶葉。
  3. 如請求項1所述之製備方法，其中該植物係一發酵的茶葉。
  4. 如請求項1所述之製備方法，其中該萃取係超音波萃取、室溫萃取、冷萃取或回流冷卻萃取。
  5. 如請求項1所述之製備方法，其中該萃取係執行在10至50℃下。
  6. 如請求項1所述之製備方法，其中該萃取係執行持續3至30小時。
  7. 如請求項1所述之製備方法，其中該萃取係執行在5至100 rpm下。
  8. 如請求項1所述之製備方法，其中該萃取步驟進一步包括一過濾步驟。
  9. 一種由一皮膚化妝品溶液所構成之萃取溶劑，用於一包含一植物萃取物的化妝品組成物的製備中之植物萃取。
  10. 如請求項9所述之萃取溶劑，其中該皮膚化妝品溶液包括選自由甘油與一甘油衍生物的一者或多者、丁二醇、丙二醇與己二醇所構成之群組的一者或多者。
  11. 如請求項10所述之萃取溶劑，其中該丁二醇係1,3-丁二醇，該丙二醇係1,3-丙二醇，而該己二醇係1,2-己二醇。
  12. 如請求項10所述之萃取溶劑，其中該甘油衍生物係乙基己基甘油。
  13. 如請求項9所述之萃取溶劑，其中該皮膚化妝品溶液包括甘油、丁二醇、丙二醇、己二醇與乙基己基甘油。
  14. 如請求項10所述之萃取溶劑，其中 該丁二醇的含量基於該萃取溶劑的總重量係10至25重量%； 該丙二醇的含量基於該萃取溶劑的總重量係1至20重量%；或 該己二醇的含量基於該萃取溶劑的總重量係0.1至5重量%。
  15. 如請求項10所述之萃取溶劑，其中 該甘油的含量基於該萃取溶劑的總重量係5至20重量%；或 該甘油衍生物的含量基於該萃取溶劑的總重量係0.01至10重量%。
  16. 如請求項10所述之萃取溶劑，其中 該甘油：該丁二醇的重量比例係1：0.5至5； 該丁二醇：該丙二醇的重量比例係1：0.04至2； 該丙二醇：該己二醇的重量比例係1：0.005至5；或 該己二醇：該甘油衍生物的重量比例係1：0.002至100。
  17. 一種萃取物，包括如請求項9至16任一項所述之萃取溶劑以及一藉由該萃取溶劑自一植物萃取的成分。
  18. 如請求項17所述之萃取物，其中該萃取物中表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的含量相對於1g的該植物係20至60 mg。
  19. 一種化妝品組成物，包括如請求項17所述之萃取物。
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