TW201834648A - 包含異黃腐酚(isoxanthohumol)之脂質代謝促進用組成物 - Google Patents
包含異黃腐酚(isoxanthohumol)之脂質代謝促進用組成物 Download PDFInfo
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Abstract
本發明係以提供對熱安定、具有適度的水溶性之性質,且以具有促進脂質代謝作用的物質為有效成分之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物等為目的。 本發明係有關包含異黃腐酚(isoxanthohumol)之脂質代謝促進用組成物。
Description
本發明係關於脂質代謝促進用組成物以及脂肪蓄積抑制用組成物。本發明亦關於抗肥滿用組成物。本發明另外係有關促進脂質代謝之方法、抑制脂肪蓄積之方法以及預防或改善肥滿之方法。本發明進而係有關為了促進脂質代謝、為了抑制脂肪蓄積、或是為了預防或改善肥滿之異黃腐酚(isoxanthohumol)的使用等。
因高卡路里飲食、運動不足等原因,在全身或局部部位蓄積過剩的脂肪而造成肥滿。肥滿已然成為各種生活習慣疾病的原因,也是社會的一大隱憂。因此,目前正專注於進行探索關於有效預防或改善肥滿,應用於醫藥品、特定保健用食品、功能性食品等可能的成份之研究。
目前已知黃腐酚(xanthohumol)係大麻科之植物且使用為啤酒原料的啤酒花(學名:Humulus lupulus)中所含成分。黃腐酚係以分子式C21
H22
O5
表示之一種多酚,於多酚中特別被分類為「異戊烯基查耳酮」。黃腐酚的生理活性已報告有抑制發癌作用、抗發炎作用、抗肥滿作用、抑制骨蝕作用等。
非專利文件1記載對高脂肪飲食負荷模型小鼠反覆投予30 mg/kg/day之黃腐酚時,抑制了體重上升等。專利文件1中使用添加濃度為1%黃腐酚的飼料來飼育II型糖尿病模型小鼠時,對體重增加有抑制的傾向,及腎周圍脂肪等的重量降低之記載。
伴隨加熱,黃腐酚將不可逆地構造變換為異黃腐酚。已有文獻報告指出特別是在啤酒製造過程其大部分變化為異黃腐酚。
非專利文件2已報告於小鼠巨噬細胞由來細胞(J774. 1)中添加異黃腐酚進行培養時,脂肪分解促進因子AIM(Apotosis Inhibitor of Macrophage)的表現被增強。然而非專利文件2中記載使用不會對小鼠脂肪前驅細胞(3T3-L1)造成細胞毒性濃度之異黃腐酚進行處理時,由於不會抑制朝向脂肪細胞的分化,與無法確認作為表現系的脂肪小滴(Lipid Droplet)的減少效果,實際上異黃腐酚是否可使脂肪小滴減少尚屬不明。
雖然黃腐酚與異黃腐酚均具有異戊烯基,但已有報告指出前者具有查耳酮骨架,後者則含有黃烷酮骨架作為部份構造,顯示各自具有相異的物理化學性質及生理活性。專利文件2記載有關抗癌作用,黃腐酚非常有效,但異黃腐酚則非常少。因此以黃腐酚生理活性的相關資訊為基礎來類推異黃腐酚的生理活性,並非一件易事。 [先前技術文獻] [專利文獻]
專利文件1:特開2006-306800號公報 專利文件2:特開2007-289185號公報 [非專利文獻]
非專利文件1:Arch Biochem Biophys. 2016 Jun 1; 599:22-30。 非專利文件2:細谷孝博,“以脂肪分解促進因子AIM為標的之多酚成分的探索研究”,食生活科學‧文化及環境相關研究助成研究紀要28, 21-28, 2013朝日啤酒學術振興財團
[發明欲解決之課題]
根據專利文件1及非專利文件1,雖然黃腐酚顯示有抑制體重上升作用等,但報告是在動物實驗的階段。然而,關於黃腐酚伴隨加熱而不可逆地構造變換結果生成的異黃腐酚,並無報告顯示具有相同的抗肥滿作用。非專利文件2中雖記載異黃腐酚增強了小鼠巨噬細胞由來細胞中的脂肪分解促進因子AIM的表現,但亦記載實際上異黃腐酚是否可使脂肪小滴減少尚屬不明。 另外,例如製造飲料時必須依據食品衛生法為基礎的殺菌條件進行加熱,由於摻混於飲料中的成分要求要具有水溶性的性質,製造摻混一定量以上的缺乏熱安定性與水溶性的黃腐酚之飲料,是一難題。因此,目前正尋求對熱具有安定性,且具有適度的水溶性性質,並且有助於預防或改善肥滿的物質。
本發明係以提供對熱安定、具有適度的水溶性之性質,且以具有促進脂質代謝作用的物質為有效成分之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物等為目的。 [解決課題之手段]
本發明團隊為解決上述課題進行專心檢討後,率先發現異黃腐酚顯示具有脂肪蓄積抑制作用。將異黃腐酚與使用作為功能性食品素材的兒茶素類相比,顯示具有優異的脂肪蓄積抑制作用。本發明團隊亦藉由調查肝臟以及褐色脂肪組織中的脂質代謝關連基因的表現等,發現異黃腐酚可促進脂肪燃燒,具有促進脂質代謝作用。而與脂質代謝促進相關連的研究方法,可舉出抑制脂肪合成之方法、促進蓄積的脂肪分解之方法、將脂肪酸變換為能量之促進脂肪燃燒(脂肪消耗)之方法等。例如,脂肪分解係指使三酸甘油酯水解為甘油與游離脂肪酸的反應過程,藉由脂肪組織內的脂肪酶的作用而使反應進行。脂肪燃燒係指藉由脂肪分解等將生成的脂肪酸轉換為熱與ATP等型態的能量之過程,可以藉由局部存在於細胞內胞器之粒線體或過氧化小體中的各種酵素之反應,掌握為反應進行的程度。因此,舉例而言,促進蓄積的脂肪的分解,與促進脂肪燃燒,係相異的作用機轉。異黃腐酚具有促進脂肪燃燒後促進脂質代謝之作用,藉此達到脂肪蓄積抑制效果、抗肥滿效果實屬驚人發現。另外,本發明團隊確認異黃腐酚與黃腐酚相比,具有較優異的水溶性,自異黃腐酚與黃腐酚相比在飲料適性的觀點較為優異,設想可應用於各種飲料等,遂完成本發明。 異黃腐酚係啤酒花(Humulus lupulus)中微量含有的物質,顯示具有脂質代謝促進作用等,且具有優異的飲料適性。因此藉由摻混異黃腐酚,可開發安全性高,且可對維持、增進健康有所助益的功能性飲料等。
亦即,本發明係有關下述之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物等。 本發明之脂質代謝促進用組成物係含有異黃腐酚。 其中一實施方式,本發明之脂質代謝促進用組成物,以藉由促進脂肪燃燒而促進脂質代謝之脂質代謝促進用組成物為佳。本發明之一實施方式藉由氧化脂肪酸β或促進熱產生而促進脂質代謝之脂質代謝促進用組成物。另外,本發明之一實施方式,係藉由使粒線體功能活化而促進脂質代謝之脂質代謝促進用組成物。 本發明之脂質代謝促進用組成物,係以飲食品為佳。 其中一實施方式,本發明之脂質代謝促進用組成物,以飲料為佳,飲料係茶系飲料、咖啡飲料、酒精飲料、無酒精啤酒、碳酸飲料、功能性飲料、果實‧蔬菜系飲料、乳性飲料、豆漿飲料或風味水(Flavored water)為佳。
本發明之脂質代謝促進用組成物,亦可為附有「抗肥滿」、「預防肥滿」、「改善肥滿」、「減低腰圍尺寸」、「維持腰圍尺寸」、「維持苗條身形」、「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「抑制肝臟中之脂肪蓄積」、「減低肝臟中之脂肪」、「減少體重」、「減量」、「節食」、「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」、「脂質代謝」、「粒線體功能」、「產生熱」、「基礎代謝」、「代謝功能」、「代謝力」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示者。
本發明之脂肪蓄積抑制用組成物係含有異黃腐酚。 其中一實施方式,本發明之脂肪蓄積抑制用組成物,可使用於目的為抑制內臟脂肪或肝臟中的脂肪蓄積。 本發明之一實施方式,藉由促進脂肪燃燒以抑制脂肪蓄積之脂肪蓄積抑制用組成物。 本發明之脂肪蓄積抑制用組成物,係以飲食品為佳。 其中一實施方式,本發明之脂肪蓄積抑制用組成物,以飲料為佳。本發明之脂肪蓄積抑制用組成物為飲料時,飲料係茶系飲料、咖啡飲料、酒精飲料、無酒精啤酒、碳酸飲料、功能性飲料、果實‧蔬菜系飲料、乳性飲料、豆漿飲料或風味水(Flavored water)為佳。 本發明之脂肪蓄積抑制用組成物,亦可為附有「抗肥滿」、「預防肥滿」、「改善肥滿」、「減低腰圍尺寸」、「維持腰圍尺寸」、「維持苗條身形」、「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「抑制肝臟中之脂肪蓄積」、「減低肝臟中之脂肪」、「減少體重」、「減量」、「節食」、「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」、「脂質代謝」、「粒線體功能」、「產生熱」、「基礎代謝」、「代謝功能」、「代謝力」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示者。 本發明之脂肪蓄積抑制用組成物,亦可為附有「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示者。
本發明之抗肥滿用組成物,其係含有異黃腐酚,目的係促進脂質代謝以預防或改善肥滿之抗肥滿用組成物。 其中一實施方式,抗肥滿用組成物,以藉由促進脂肪燃燒而促進脂質代謝之抗肥滿用組成物為佳。 本發明之抗肥滿用組成物,係以飲食品為佳。 其中一實施方式,本發明之抗肥滿用組成物,以飲料為佳。本發明之抗肥滿用組成物為飲料時,飲料係茶系飲料、咖啡飲料、酒精飲料、無酒精啤酒、碳酸飲料、功能性飲料、果實‧蔬菜系飲料、乳性飲料、豆漿飲料或風味水(Flavored water)為佳。 本發明之抗肥滿用組成物,亦可為附有「抗肥滿」、「預防肥滿」、「改善肥滿」、「減低腰圍尺寸」、「維持腰圍尺寸」、「維持苗條身形」、「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「抑制肝臟中之脂肪蓄積」、「減低肝臟中之脂肪」、「減少體重」、「減量」、「節食」、「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」、「脂質代謝」、「粒線體功能」、「產生熱」、「基礎代謝」、「代謝功能」、「代謝力」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示者。
本發明係包含下述方法及使用。 藉由投予異黃腐酚,促進脂質代謝之方法。 藉由投予異黃腐酚,抑制脂肪蓄積之方法。 藉由投予異黃腐酚促進脂質代謝,預防或改善肥滿之方法。 為了促進脂質代謝之異黃腐酚之使用。 為了抑制脂肪蓄積之異黃腐酚之使用。 為了促進脂質代謝,預防或改善肥滿的異黃腐酚之使用。 [發明效果]
利用本發明,可提供對熱安定、具有適度的水溶性,且以具有促進脂質代謝作用物質為有效成分之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物等。
本發明之脂質代謝促進用組成物,脂肪蓄積抑制用組成物及抗肥滿用組成物,係含有異黃腐酚。 異黃腐酚顯示具有促進脂質代謝作用。另外異黃腐酚顯示具有脂肪蓄積抑制作用、預防或改善肥滿之抗肥滿作用。並且,異黃腐酚顯示抑制體重上升(體重增加)作用。因此,異黃腐酚可適用作為促進脂質代謝組成物、脂肪蓄積抑制用組成物及抗肥滿用組成物之有效成分。本發明之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物及抗肥滿用組成物,藉由含有異黃腐酚作為有效成分,而達到脂質代謝促進效果、脂肪蓄積抑制效果、預防或改善肥滿之效果。以下,將本發明之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物及抗肥滿用組成物,統稱為本發明之脂質代謝促進用組成物等。其中一實施方式,本發明之脂質代謝促進用組成物等係亦可使用作為抑制體重上升用組成物。
異黃腐酚例如可自啤酒花(Humulus lupulus)萃取物經由加熱等工序而調製。藉由加熱啤酒花萃取物,可使該萃取物中生成異黃腐酚。啤酒花萃取物一般利用溶媒萃取啤酒花的毬花,再因應需要介由與純化相關工序進行調製,利用周知的啤酒花萃取物調製方法可獲得。萃取方法可舉出例如可使用釀造啤酒時可用的啤酒花萃取物的調製法、利用乙醇溶媒之萃取法。市面販售有啤酒花萃取物,亦可使用市售的啤酒花萃取物。為了使異黃腐酚生成而對啤酒花萃取物進行的加熱,以80~140℃(更佳係85~100℃),15分鐘~5小時(更佳係20分鐘~3小時)為佳。為了調製異黃腐酚而對啤酒花萃取物的純化,可使用周知的方法實施。純化方法可舉出例如HPLC或吸附管柱等的使用,利用溶解度變化的析出等方法。另外,異黃腐酚可利用加熱黃腐酚而製造。此時加熱溫度較佳可採用80~140℃(更佳係85~100℃),15分鐘~5小時(更佳係20分鐘~3小時)。
已有報告指出異黃腐酚例如即使在100℃高温條件亦呈現安定。食品衛生法規定有清涼飲料水製造標準的殺菌條件,例如pH4.0以上的飲料必須以85℃加熱30分鐘。考量於該等殺菌過程中成分變換的情況,與缺乏熱安定性的黃腐酚相比,認為異黃腐酚的飲料適性更高。進而,由於異黃腐酚與黃腐酚相比水溶性較高,例如亦具有容易摻混於飲料此一優點。因此,根據本發明,得以實現提供具有脂質代謝促進作用、脂肪蓄積抑制作用及抗肥滿作用,安全性高、有助於維持、增進健康等各種功能的功能性飲料。
本發明中,脂質代謝促進以促進脂肪燃燒(促進脂肪消費)的促進脂質代謝為佳。 脂肪蓄積抑制係包含預防脂肪蓄積及減低脂肪蓄積之任一方或是二者。本發明中,脂肪係體脂肪,可為內臟脂肪、肝臟中的脂肪及皮下脂肪之任一個或是二種以上,但較佳係包含內臟脂肪、肝臟中的脂肪。本發明其中一實施方式,為了抑制脂肪蓄積而使用本發明脂質代謝促進用組成物等時,較佳以使用作為了抑制內臟脂肪蓄積或抑制肝臟中脂肪蓄積。抑制肝臟中的脂肪蓄積,對預防或改善脂肪肝有效。 本說明書中,預防係包含發症的防止、延遲、或是降低發症率。改善係減輕症狀、抑制症狀進行及治癒或緩解。 異黃腐酚可摻混於飲食品、醫藥品、準醫藥品、飼料、飼料添加劑等,使用為為了促進脂質代謝、為了抑制脂肪蓄積、為了預防或改善肥滿的有效成分。預防或改善肥滿的程度,例如可使用體脂肪的量或體重作為指標而評價。其中一實施方式,異黃腐酚,可使用為為了抑制體重上升的有效成分。
如後述實施例所述,使攝取高脂肪飲食的小鼠攝取異黃腐酚時,與未攝取異黃腐酚的小鼠相比,其脂肪蓄積受到抑制。另外藉由攝取異黃腐酚,與未攝取的小鼠相比顯示體重上升被抑制。因此,異黃腐酚係有效於例如抑制因高脂肪飲食引起的脂肪蓄積(例如預防脂肪蓄積)、預防或改善肥滿、抑制體重上升等。
另外,目前已知與脂質代謝有關的基因有Cpt1基因(編碼肉鹼結合酵素1型的基因)、Acox1基因(編碼乙醯CoA氧化酵素的基因)、Ucp1基因(編碼粒線體去偶合蛋白質的基因)、Pgc-1α基因(編碼過氧化小體增殖因子活化受體γ共軛因子的基因)等。
粒線體係真核生物具有的細胞內胞器之一。粒線體的主要功能是提供能量。 脂肪酸β氧化,係為了自粒線體及過氧化小體中的脂肪酸取出能量的重要代謝路徑之一。特別係指在粒線體,氧化脂肪酸後生成乙醯CoA,再取出乙醯CoA的代謝路徑。 肉酸棕櫚醯轉移酶1型(carnitine O- palmitoyltransferase type I ; Cpt1)係扮演藉由使乙醯CoA與肉酸素(carnitine)結合而使其通過粒線體內膜的角色。Cpt1,在脂肪酸β氧化中,乙醯CoA通過粒線體時擔任律速階段的酵素,藉由活化Cpt1使脂肪酸進行β氧化,進而使脂肪燃燒亢進(Bulletin of Hiroshima Jogakuin University 61:139-153)。過氧化小體中乙醯CoA氧化酵素(acyl-CoA oxidase;Acox、ACO或FAO)是脂肪酸β氧化中初始氧化反應的觸媒。因此,藉由促進Cpt1a基因及Acox1基因的表現可促進脂肪酸β氧化,促進脂肪燃燒。
如後述實施例所示,攝取異黃腐酚的動物,肝臟中Cpt1a基因及Acox1基因的表現量增加。自該結果可知,異黃腐酚顯示具有促進脂肪酸β氧化,促進脂肪燃燒之功用。
粒線體去偶合蛋白質(uncoupling protein;UCP)係使於細胞內胞器粒線體內膜進行的氧化的磷酸化反應去偶合,並具有使能量以熱能形式而逸散功能之蛋白質。目前持續進行針對位於褐色脂肪組織(BAT)的粒線體內膜上表現的UCP1,特別是其功能分析,已報告其擔負因寒冷或攝取食物所誘導的促進熱能產生功能(J Biol Chem. 2006 Oct 20;281(42):31894-908)。脂肪酸係於褐色脂肪組織內被分解,再受到UCP1的作用而被轉換為熱能。根據迄今的報告,已知肥滿動物其UCP1功能降低之外,人為使UCP1表現降低的小鼠呈現肥滿,大量表現的小鼠則變瘦等事實(第124次日本醫學會研討會,齊藤昌之,4. 能量代謝調節機轉-以UCP為中心)。綜上所述,藉由提高Ucp1基因的表現量,促進熱能產生,促進脂肪燃燒。藉由促進脂肪燃燒,可獲得抑制脂肪蓄積效果、抗肥滿效果。
過氧化小體增殖因子活化受體γ共軛因子(peroxisome proliferator-activated receptor c coactivator 1;PGC-1α)係藉由交感神經活動的亢進而被誘導,對粒線體合成為正向控制的轉錄活性輔助因子,同時在脂肪組織中對Ucp1基因的表現有正向控制,顯示具有脂質代謝調節功能(PLoS One. 2013;8(5):e64123.)。因此,藉由促進褐色脂肪組織中Pgc-1α基因的表現,使Ucp1基因的表現被促進,並促進脂肪燃燒。
如後述實施例所示,攝取異黃腐酚的動物,其褐色脂肪組織中Ucp1基因及Pgc-1α基因的表現量增加。自此結果可知藉由攝取異黃腐酚,與產生熱能相關的基因表現發生變動,其結果暗示促進脂肪燃燒。 另外,粒線體中Cpt1基因、Ucp1基因等基因的表現促進,係活化粒線體的功能。因此,異黃腐酚具有活化粒線體功能之作用。
因此,異黃腐酚可適用作促進脂肪燃燒。異黃腐酚可促進脂肪燃燒,促進脂質代謝。含異黃腐酚之本發明的脂質代謝促進用組成物等,係可使用在為了促進脂肪燃燒。 異黃腐酚可促進脂肪酸β氧化,藉此,可促進脂肪燃燒。脂肪酸β氧化的促進係可藉由促進Cpt1基因或Acox基因表現而獲得。含異黃腐酚之本發明的脂質代謝促進用組成物等,係可使用在為了藉由促進脂肪酸β氧化而促進脂質代謝。 另外,異黃腐酚促進熱能產生,且藉此作用可促進脂質代謝。例如在褐色脂肪組織中藉由促進熱能產生,可促進脂肪燃燒。褐色脂肪組織中的熱能產生,可藉由例如促進褐色脂肪組織中Ucp1基因或Pgc-1α基因的表現而獲得。本發明之一實施方式係脂質代謝促進用組成物等,可使用為為了在褐色脂肪組織中藉由促進熱能產生,促進脂質代謝。 另外,異黃腐酚可藉由活化粒線體功能,促進脂肪燃燒。因此本發明之脂質代謝促進用組成物等,可使用為為了藉由活化粒線體功能,促進脂質代謝。 本發明之一實施方式,脂質代謝促進用組成物等,可為例如藉由促進脂肪酸β氧化或促進熱產生,而促進脂質代謝之脂質代謝促進用組成物等。另外,本發明之一實施方式,脂質代謝促進用組成物等,係藉由活化粒線體功能而促進脂質代謝之脂質代謝促進用組成物。
異黃腐酚具有脂質代謝促進作用,藉由該作用抑制脂肪蓄積,並可達成預防或改善肥滿之效果。因此本發明之一實施方式係為了促進脂質代謝(較佳係藉由促進脂肪燃燒而促進脂質代謝),預防或改善肥滿之抗肥滿用組成物。前述之抗肥滿組成物,亦可為藉由促進脂肪燃燒而預防或改善肥滿者。另外,本發明之一實施方式為為了藉由促進脂肪燃燒而抑制脂肪蓄積之脂肪蓄積抑制用組成物。本發明之一實施方式係為了藉由促進脂質代謝而抑制脂肪蓄積之脂質代謝促進用組成物;亦為為了藉由促進脂質代謝而預防或改善肥滿之脂質代謝促進用組成物。本發明之一實施方式,亦包含藉由促進脂質代謝而達到抑制體重上升之體重上升抑制用組成物。
本發明之脂質代謝促進用組成物等係含有異黃腐酚,可使用為為了促進脂質代謝、抑制脂肪蓄積。本發明之脂質代謝促進用組成物等,係顯示具有脂質代謝促進作用,可使用為為了預防或改善肥滿、抑制體重上升。本發明之脂質代謝促進用組成物等亦適用於治療用途(醫療用途)或非治療用途(非醫療用途)之任一種。 本發明之脂質代謝促進用組成物等,可製成例如飲食品(飲食品組成物)、醫藥品(醫藥品組成物)、準醫藥品(準醫藥品組成物)、飼料(飼料組成物)、飼料用添加劑等型態。本發明之脂質代謝促進用組成物等以作為經口攝取用之組成物為佳,作為飲食品而使用則更佳。本發明之脂質代謝促進用組成物等,係為了促進脂質代謝、抑制脂肪蓄積、預防或改善肥滿或抑制體重上升,適用作為飲食品、醫藥品、準醫藥品、飼料、飼料用添加劑等。本發明之脂質代謝促進用組成物等,其本身,可為為了該目的而被使用於飲食品、醫藥品、準醫藥品、飼料、飼料用添加劑等,亦可與該等摻混後被使用的原料或製劑。本發明之脂質代謝促進用組成物等,其中一例可以製劑型態提供,但未被限制於本形態。該當製劑可直接用作組成物,或者,亦可提供為含該製劑的的組成物。
本發明之脂質代謝促進用組成物等,於不損及本發明效果的範圍內,除了異黃腐酚之外,亦可摻混其他成分。其他成分可舉出例如後述之可使用於飲食品、醫藥品、準醫藥品、飼料、飼料用添加劑等之成分。飲食品、醫藥品、準醫藥品、飼料、飼料用添加劑等,可因應摻混成分依據常法製造。 並未特別限制本發明之脂質代謝促進用組成物等的形態,可為粉末狀、顆粒狀、膏狀、固體狀、液狀等任一種。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等製作為飲食品時,並未特別限制飲食品。例如可舉出一般的飲食品、健康食品、標示功能性食品、特定保健用食品、患者用飲食品、食品添加劑等。前述健康食品,標示功能性食品可製作為例如細粒劑、錠劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑、口嚼劑、糖漿劑、液劑、流動食等各種製劑形態而使用。 將脂質代謝促進用組成物等製作為飲食品時,可將異黃腐酚與一般製造飲食品時摻混的物質(例如任一種飲食品原料)組合後使用。
並未特別限制飲食品的形態,可製作為各種形態,例如可舉出飲料、菓子類、營養補充品等。 本發明之脂質代謝促進用組成物等較佳的實施形態的一例,可舉例如飲料。飲料可為無酒精飲料、酒精飲料之任一種。無酒精飲料可舉例如茶系飲料、咖啡飲料、無酒精啤酒、碳酸飲料、功能性飲料、果實‧蔬菜系飲料、乳性飲料、豆漿飲料或風味水等。
本發明之脂質代謝促進用組成物等為飲料時,以茶系飲料、咖啡飲料、酒精飲料、無酒精啤酒、碳酸飲料、功能性飲料、果實‧蔬菜系飲料、乳性飲料、豆漿飲料或風味水為佳。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為茶系飲料時,以紅茶飲料或無糖茶飲料為佳。無糖茶飲料可舉出例如綠茶飲料、烏龍茶飲料、麥茶飲料、玄米茶飲料、薏仁麥茶飲料、無糖的紅茶飲料等。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為咖啡飲料時,以容器包裝咖啡或液態咖啡為佳。
酒精飲料可舉出例如啤酒、啤酒系飲料、啤酒及啤酒系飲料以外的酒精飲料。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為啤酒系飲料時,以發泡酒或第三類啤酒(new genre)為佳。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為啤酒及啤酒系飲料以外的酒精飲料時,以燒酌、秋海(chu-hi)、利口酒(liquear)、雞尾酒、烈酒(spirits)、威士忌為佳。
本說明書中「無酒精啤酒」係意指具有啤酒風味的碳酸飲料,係非發酵的無酒精形式,實質上未含有酒精。此處無酒精啤酒並未排除含有無法檢測程度的極微量酒精之飲料。
本發明之脂質代謝促進用組成物等為碳酸飲料時,以可樂風味飲料、透明碳酸飲料、薑汁汽水、果汁系碳酸飲料、加入乳類的碳酸飲料或無糖碳酸飲料為佳。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為功能性飲料時,以運動飲料、能量飲料、健康維持飲料或軟鋁箔果凍飲料為佳。
本發明之脂質代謝促進用組成物等為果實‧蔬菜系飲料時,以100%果實飲料、添加果實的飲料、加入少量果汁之清涼飲料、含果粒果實飲料或果肉飲料為佳。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為乳性飲料時,以牛乳、可飲用優格、乳酸菌飲料或加入乳類之清涼飲料為佳。 本發明之脂質代謝促進用組成物等為豆漿飲料時,以豆漿或大豆飲料為佳。
未特別限制飲料的形態,可製成容器包裝飲料。亦未特別限制容器包裝飲料之容器,可使用各種形態及材質的容器,例如鋁罐、鋼罐等金屬製容器;寶特瓶等樹脂製容器;紙盒等紙容器;玻璃瓶等玻璃製容器;樽等木製容器等一般所使用的容器之任一種。藉由將飲料填充及密閉於容器中,可獲得容器包裝飲料。
飲食品係例如可將異黃腐酚與製造飲食品時使用的物質(例如任一種飲食品原料)摻混後調製。另外,製造飲食品時摻混啤酒花萃取物,藉由進行加熱該啤酒花萃取物之工序,可製造含有異黃腐酚的飲食品。飲食品中為了提高異黃腐酚的溶解性,亦可摻混γ-環糊精及/或β-環糊精。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等用作為醫藥品或準醫藥品時,醫藥品或準醫藥品的投予(攝取)形態,可舉出例如經口、經腸、經粘膜、注射等,但以經口投予為佳。製作為了進行經口投予之製劑的劑型可舉出例如液劑、錠劑、散劑、細粒劑、顆粒劑、糖衣錠、膠囊劑、懸濁液、乳劑、口嚼劑等。製作為了進行非經口投予之製劑的劑型可舉出例如注射劑、吸入劑、輸液劑、坐劑、經皮吸收劑、點鼻劑、點眼劑、乳霜、凝膠、乳液等。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等提供為醫藥品或準醫藥品時,例如,可將異黃腐酚與醫藥品或準醫藥品領域容許的載體、因應需要添加的添加劑等組合後使用。該等載體、添加劑等只要是醫藥品或準醫藥品領域容許者即可,可舉出例如賦形劑、結合劑、崩解劑、滑澤劑、抗氧化劑、著色劑等之1種或2種以上。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等用作為醫藥品或準醫藥品時,並無特別限定該等之製造方法,可藉由相關領域周知的方法製造。例如於製造醫藥品或準醫藥品時摻混異黃腐酚即可。另外,於製造醫藥品或準醫藥品時摻混啤酒花萃取物,藉由進行加熱該啤酒花萃取物之工序,可製造含有異黃腐酚的醫藥品或準醫藥品。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等用作為飲食品、醫藥品及準醫藥品時,並無特別限定異黃腐酚的含量,可因應其形態等設定。例如,異黃腐酚的含量在脂質代謝促進用組成物等之中,以0.0001重量%以上為佳,另外,90重量%以下為佳。其中之一實施形態異黃腐酚的含量在脂質代謝促進用組成物等之中,以0.0001~90重量%為佳,0.0003~90重量%更佳,0.001~50重量%再更佳,0.003~30重量%最佳。
例如,將脂質代謝促進用組成物等用作為飲料時,異黃腐酚的濃度於飲料中,以0.001~0.050重量%為佳,0.003~0.030重量%更佳。例如具有200~500mL容量之容器包裝飲料,該飲料中以含有異黃腐酚為5~100mg為佳,15~60mg更佳。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等用作為飲食品、醫藥品或準醫藥品時,異黃腐酚的投予量或攝取量若為可獲得脂質代謝促進效果、脂肪蓄積抑制效果等之量即可,可依據對象者的狀態、體重、年齡、性別等因素適當地加以設定。例如,若為成年人,以體重60kg,每日適合之異黃腐酚量較佳係5~200mg,更佳係5~100mg,最佳係15~60mg。前述劑量可1日1次~分為數次,經口攝取或經口投予為佳。
將本發明之脂質代謝促進用組成物等作為飼料、飼料用添加劑時,可將異黃腐酚摻混於飼料、飼料添加劑。飼料可舉出例如牛、豬、雞、羊、馬等使用的家畜用飼料;兔子、大鼠、小鼠等使用的小動物用飼料;犬、貓、小鳥等使用的寵物食品等。製造飼料時,例如可將異黃腐酚與一般可使用於該等動物的飼料原料,以及依據期望摻混的添加劑,進行摻混後再依照常法製造飼料。並無特別限定飼料、飼料用添加劑中異黃腐酚的含量,例如,於飼料、飼料用添加劑中以0.0001重量%以上為佳,另外,90重量%以下更佳,其中之一實施形態,以0.0001~90重量%為佳,0.0003~90重量%更佳,0.001~50重量%再更佳,0.003~30重量%最佳。
由於本發明之脂質代謝促進用組成物等係顯示具有促進脂質代謝作用、抑制脂肪蓄積作用、抗肥滿作用、抑制體重上升作用,例如可適用目的為減低腰圍尺寸、維持腰圍尺寸、維持苗條身形、抑制體脂肪蓄積、減低體脂肪、抑制內臟脂肪蓄積、減低內臟脂肪、減少體重(減量)、節食、預防或改善代謝症候群等,為了該等目的可加以使用。例如,脂肪蓄積抑制用組成物係可適用為為了獲得抑制體脂肪蓄積、減低體脂肪、抑制內臟脂肪蓄積、減低內臟脂肪、抑制肝臟中之脂肪蓄積、減低肝臟中之脂肪、預防或改善代謝症候群之1種或2種以上之作用。
本發明之脂質代謝促進用組成物,亦可附加以脂質代謝促進作用或脂肪蓄積抑制作用為基礎的功能表示。另外,亦可為,亦可附有以抗肥滿作用或體重上升抑制作用為基礎的功能表示。 本發明之脂質代謝促進用組成物,例如亦可附加「抗肥滿」、「預防肥滿」、「改善肥滿」、「減低腰圍尺寸」、「維持腰圍尺寸」、「維持苗條身形」、「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「抑制肝臟中之脂肪蓄積」、「減低肝臟中之脂肪」、「減少體重」、「減量」、「節食」、「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」、「脂質代謝」、「粒線體功能」、「產生熱」、「基礎代謝」、「代謝功能」、「代謝力」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示者。 另外,例如,本發明之抗肥滿用組成物以及脂肪蓄積抑制用組成物,亦可附加「抗肥滿」、「預防肥滿」、「改善肥滿」、「減低腰圍尺寸」、「維持腰圍尺寸」、「維持苗條身形」、「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「減少體重」、「減量」、「節食」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示者。本發明之一實施方式,於本發明之脂肪蓄積抑制用組成物附加表示時,亦可附加「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示。脂質代謝促進用組成物,亦可附加「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」、「脂質代謝」、「粒線體功能」、「產生熱」、「基礎代謝」、「代謝功能」及「代謝力」之1或2種以上的功能表示,亦可附加「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」及「脂質代謝」之1或2種以上的功能表示。 本發明之一實施方式中,本發明之脂質代謝促進用組成物等,以附加上述表示之飲食品為佳。另外上述功能表示,亦可為為了獲得該功能而使用之要義之表示。
本發明之脂質代謝促進用組成物等的攝取或投予對象,較佳係動物,更佳係脊椎動物,最佳係哺乳動物(人類或非人類的哺乳動物)。其中,本發明之脂質代謝促進用組成物等的攝取或投予對象,以人類為佳。本發明之脂質代謝促進用組成物等,可使用於需要促進脂質代謝的對象、需要抑制脂肪蓄積的對象、需要預防或改善肥滿的對象等。另外,本發明之脂質代謝促進用組成物等,適合使用於期望促進脂質代謝、抑制脂肪蓄積、預防或改善肥滿等對象。本發明之脂質代謝促進用組成物等,亦適合使用於需要抑制體重上升的對象或期望抑制體重上升的對象。
藉由投予異黃腐酚促進脂質代謝之方法亦包含於本發明中。藉由投予異黃腐酚抑制脂肪蓄積之方法亦包含於本發明中。藉由投予異黃腐酚預防或改善肥滿之方法亦包含於本發明中。預防或改善肥滿之方法,較佳係藉由投予異黃腐酚而促進脂質代謝之預防或改善肥滿。 藉由投予異黃腐酚抑制體重增加之方法亦包含於本發明中。 上述方法,若為將可獲得脂質代謝促進效果(例如脂肪燃燒促進效果)、脂肪蓄積抑制效果等之量(亦可稱為有效量)的異黃腐酚對對象進行投予即可。異黃腐酚較佳的投予量及投予對象等,係與上述本發明之脂質代謝促進用組成物等情況相同。例如,投予以經口投予為佳。異黃腐酚可直接投予,亦可以含異黃腐酚組成物之形式進行投予。例如,亦可投予上述本發明之脂質代謝促進用組成物等。上述方法可為治療性的方法,亦可為非治療性的方法。「非治療性的」係不包含醫療行為,亦即手術、治療或診斷之概念。
本發明亦包含下述使用。 一種異黃腐酚之使用,其目的係促進脂質代謝。 一種異黃腐酚之使用,其目的係抑制脂肪蓄積。 一種異黃腐酚之使用,其目的係抑制體重增加。 一種異黃腐酚之使用,其目的係預防或改善肥滿。預防或改善肥滿而使用時,異黃腐酚較佳係以促進脂質代謝而預防或改善肥滿為目的使用。 異黃腐酚亦可較佳使用於為了促進脂肪燃燒。 上述使用可使用於動物(較佳係哺乳動物)。使用係可為治療性的使用,亦可為非治療性的使用。 異黃腐酚的使用量(投予量)等係與上述本發明之脂質代謝促進用組成物等情況相同。異黃腐酚的使用,可直接使用異黃腐酚,亦可以含異黃腐酚之組成物形式使用。例如,亦可使用上述本發明之脂質代謝促進用組成物等。 另外,異黃腐酚,可使用於為了製造上述使用目的所使用之飲食品、醫藥品、準醫藥品、飼料、飼料添加劑等。本發明之一實施方式,亦包含為了製造脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物或抗肥滿用組成物之異黃腐酚的使用。 上述方法及使用中脂質代謝促進及脂肪蓄積抑制係與上述相同。例如脂質代謝之促進,較佳係藉由促進脂肪燃燒而促進脂質代謝。脂質代謝的促進亦可為藉由促進脂肪酸β氧化或熱產生而促進脂質代謝。脂質代謝之促進,亦可為藉由活化粒線體功能而促進脂質代謝。 脂肪蓄積的抑制,較佳係內臟脂肪或肝臟中的脂肪蓄積的抑制。異黃腐酚,較佳係可使用於為了藉由促進脂肪燃燒,而抑制脂肪蓄積。
本發明亦包含使下述異黃腐酚的溶解性提高的方法。 <1>含異黃腐酚的組成物中摻混選自啤酒花萃取物、β-環糊精及γ-環糊精所成群之至少1種,係提高異黃腐酚溶解性之方法。 <2>本發明係一種使用,係為了提高異黃腐酚溶解性,使用選自啤酒花萃取物、β-環糊精及γ-環糊精所成群之至少1種。 <3>一種異黃腐酚溶解性提升劑,係含有選自啤酒花萃取物、β-環糊精及γ-環糊精所成群之至少1種作為有效成分。 溶解性較佳係對水的溶解性(水溶性)。啤酒花萃取物、β-環糊精及γ-環糊精顯示具有提高異黃腐酚溶解性之效果。可組合該等之1種或2種以上使用。 啤酒花萃取物可使用啤酒花的毬花之水萃取液、其濃縮物或乾燥物等。
自提高異黃腐酚溶解性效果較高之觀點而言,以使用γ-環糊精為佳。如後述實施例所示般例如於冰冷條件下,於含異黃腐酚的水溶液中摻混0.2(w/v)%的γ-環糊精時,與僅溶解異黃腐酚時相比,異黃腐酚的溶解度提升了約5倍。利用前述條件,於含異黃腐酚的水溶液中摻混1.0(w/v)%的γ-環糊精時,與僅溶解異黃腐酚時相比,異黃腐酚的溶解度提升了約18倍。
在含有異黃腐酚的組成物中摻混選自啤酒花萃取物、β-環糊精及γ-環糊精所成群之至少1種時,其摻混量若為可獲得提高溶解性效果之範圍即可。自提高異黃腐酚的溶解性之觀點,例如,β-環糊精的摻混量為組成物中之0.1重量%以上為佳,0.2重量%以上更佳,0.2~1.0重量%最佳。γ-環糊精的摻混量為組成物中之0.1重量%以上為佳,0.2重量%以上更佳,0.2~1.0重量%最佳。
自提高異黃腐酚溶解性之觀點而言,β-環糊精的摻混量與異黃腐酚的重量比(β-環糊精/異黃腐酚)以10~3000為佳,38~1587更佳。γ-環糊精的摻混量與異黃腐酚的重量比(γ-環糊精/異黃腐酚)以10~3000為佳,17~1587更佳。
本發明亦包含以下的組成物。 含有(A)選自β-環糊精及γ-環糊精所成群之至少1種,以及(B)含異黃腐酚的組成物。自提高異黃腐酚溶解性之觀點而言,前述(A)及(B)摻混比較佳的範圍係如上所述。含上述(A)及(B)的組成物,亦可使用作為本發明的脂質代謝促進用組成物。 [實施例]
以下,藉由實施例更具體地說明本發明。但本發明未限定於該等實施例。
相關的動物實驗均遵守動物保護管理法或是其他相關的法令,並以經公司內動物實驗委員會審查及機構負責人認可的計畫為基礎而實施。
<調製例1> 調製黃腐酚及異黃腐酚 自啤酒花萃取物(ASAMA化成公司製)利用下述方法分離純化黃腐酚及異黃腐酚。亦即,利用正相色層分析、逆相色層分析、製備型高效液相層析儀的純化,將啤酒花萃取物作為原料,分別純化出黃腐酚及異黃腐酚,且利用HPLC分析確認了純度為95%以上。且HPLC分析中管柱係使用Develosil C30-UG-5(野村化學公司),檢測器的紫外線吸收測定波長為280nm(異黃腐酚)及350nm(黃腐酚)。 獲得之異黃腐酚及黃腐酚分別作為標準品(純度均為95%以上)使用於下述實驗。
<實施例1> 進行與高脂肪飲食負荷模型之異黃腐酚抗肥滿作用相關之評價。 以下述步驟,檢討異黃腐酚對於高脂肪飲食負荷伴隨的體重上升及脂肪蓄積的影響。
(群體構成) 本試驗的群體構成(群體名、基礎飼料、受驗物質及受驗物質的投予量)示於表1。 且表中普通飲食使用「控制組飼料」(D12450J)(製品名),60kcal%高脂肪飲食使用「超高脂肪飼料」(D12492)(製品名)(均為Research Diets公司製),及使用兒茶素類製劑「多酚70A」(製品名,三井農林公司製)。黃腐酚及異黃腐酚係使用調製例1獲得的標準品(純度均為95%以上)。表中的「投予量」係體重每1kg,每日受驗物質的投予量(mg)。
(評價項目) 主要評價項目係各個體的體重及脂肪重量(副睪周圍脂肪、腎周圍‧後腹壁周圍脂肪、腸繫膜周圍脂肪)(最終日均為:設為投予55天)。
(馴化及分群) 購入小鼠(C57BL/6J,雄性,7週齡,日本KUREA公司)後經過1星期檢疫及馴化之後,自一般觀察狀態下未發現異常的動物,選擇作為體重變化的基準動物。選出的動物依據馴化終止時的體重,利用分層連續隨機法,分配為表1所示群構成之各群(每1群n=8),再以可自由攝取規定的基礎飼料及水之狀況下進行飼育。
(受驗物質投予方法) 將受驗物質於8週內,1日1次進行經口投予。 且,受驗物質的投予係將投予開始日定義為投予0日,實施至投予55日,該期間作為投予期間。投予期間內飼料以一週2次的頻率完全更換。且投予液量係10mL/kg,將投予日的最新體重作為標準計算出受驗物質量及液量。
(組織取出及重量測定) 投予期間終止後,取出脂肪組織(副睪周圍脂肪、腎周圍‧後腹壁周圍脂肪、腸繫膜周圍脂肪),進行重量測定。
(統計解析) 以下述方式進行統計解析。亦即,針對體重、脂肪重量計算出各群的平均值及標準差。統計處理係使用Microsoft Office Excel 2003實施,且在普通飲食群與高脂肪飲食群之間,及高脂肪飲食群與普通飲食群之外的各群之間施行顯著差異檢定。統計方法係利用F檢定等進行分散性的檢定,等分散的狀況時進行Student的t檢定,分散不均時實施Aspin-Welch的t檢定。
(結果) 各群體重及脂肪重量(副睪周圍脂肪、腎周圍‧後腹壁周圍脂肪及腸繫膜周圍脂肪)的平均值(n=8)示於圖1~4。圖1~4中,XN為黃腐酚,IX為異黃腐酚。圖1~4表示的結果均為最終日(投予55日)的測定結果(顯著差異係指對高脂肪飲食群為顯著差異)。 圖1係表示各群體重平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01,N. S.:p≧0.10 vs.高脂肪飲食群)。 圖2係表示各群副睪周圍脂肪重量平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01 vs.高脂肪飲食群)。 圖3係表示各群腎周圍及後腹壁周圍脂肪重量平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01 vs.高脂肪飲食群)。 圖4係表示各群腸繫膜周圍脂肪重量平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01 vs.高脂肪飲食群)。
與高脂肪飲食群相比,異黃腐酚中用量群(60mg/kg)呈現體重較低的傾向,副睪周圍脂肪、腸繫膜周圍脂肪為顯著的降低。異黃腐酚高用量群(180mg/kg),獲得體重及整體的脂肪重量為顯著的降低之結果。另外,異黃腐酚中用量群(60mg/kg)體重的平均值與黃腐酚中用量群(60mg/kg)相同,異黃腐酚高用量群(180mg/kg)的體重平均值與兒茶素類群(300mg/kg)為相同與超過。由上述結果,異黃腐酚的抗肥滿作用及脂肪蓄積抑制作用與黃腐酚為同等強度,與兒茶素類相比顯示強力的效果。
<實施例2> 測定肝臟三酸甘油酯(TG)量 使用實施例1中摘出的肝臟,測定肝臟中的中性脂肪量(三酸甘油酯量,亦稱作TG量)。詳細係切取摘出肝臟之約30mg,再添加1mL的甲醇(Nakaraitekusu公司製):氯仿(Nakaraitekusu公司製)=1:1的混合溶液,再以珠磨機進行粉碎,萃取出肝臟中的三酸甘油酯。離心處理(12000 g,15分鐘)後,回收上清液並去除溶液,藉由添加異丙醇再溶解而調整檢體量。使用三酸甘油酯E-和光試劑組(Wako公司)測定檢體中所含三酸甘油酯量,並計算出單位重量的肝臟中含有的三酸甘油酯量(mg/g)。數據以平均值±標準誤差來表示,統計學的檢定使用Student’s t-test,p<0.05為顯著差異。
(結果) 各群單位重量的肝臟中含有的三酸甘油酯量(mg/g)示於圖5(#:p<0.05 vs. 高脂肪飲食群)。圖5中,XN為黃腐酚,IX為異黃腐酚。肝臟中三酸甘油酯量(TG)量測定結果發現,於異黃腐酚投予群,肝臟中中性脂肪量與高脂肪飲食群相比為顯著的低值,作用的強度與投予黃腐酚相比亦獲得較強的結果。亦即,確認了利用異黃腐酚之肝臟中中性脂肪蓄積抑制作用。
<實施例3> 攝取異黃腐酚對脂肪燃燒造成影響的評價 使用呼氣分析裝置Oxymax(生物研究中心公司製)依據下述步驟,檢討攝取異黃腐酚對脂肪燃燒造成影響的評價。
(群構成、馴化及分群) 群構成係分成「控制組群」與「異黃腐酚0.2%群」的2群。購入8隻小鼠(C57BL/6J,雄性,14週齡,日本KUREA公司)後經過1星期馴化之後,藉由體重的分層連續隨機法,分成「控制組群」與「異黃腐酚0.2%群」(各群n=4)。基礎飼料係使用「控制組飼料」(D12450J) (Research Diets公司製)。試驗期間中,「控制組群」係使用基礎飼料進行飼育,「異黃腐酚0.2%群」使用相對於基礎飼料,受驗物質(調製例1獲得之異黃腐酚)為0.2%(重量比)比例摻混的混合飼料進行飼育。
(試驗期間中的操作) 試驗期間(攝取受驗物質,進行呼氣分析的期間)為7天,試驗期間中測試用飼育籠中,係可自由攝取飼料及水之狀況下進行飼育。使用Oxymax(生物研究中心公司製)測定各個體的經時性的氧氣消耗量(VO2
)與二氧化碳產出量(VCO2
)並記錄。
(解析方法) 自各時點氧氣消耗量(VO2
)與二氧化碳產出量(VCO2
),使用下述(式1)計算呼吸商(RQ)。 (式1) 呼吸商(RQ)=二氧化碳產出量(VCO2
)/氧氣消耗量(VO2
)
呼吸商(RQ)於脂肪燃燒(脂肪消耗)比例高時表示為低值。針對各時點的呼吸商(RQ),分別計算明期(早上7點~晚上7點)、暗期(晚上7點~早上7點)的平均值與標準誤差,列於圖表的縱軸製作點狀圖。將控制組群與異黃腐酚0.2%群的呼吸商(RQ)的點狀圖結果示於圖6(橫軸為第1天的暗期至第7天的明期為止,依照評價期間的順序畫上點記號)。圖6的圖表中黑色是控制組群,白色是異黃腐酚0.2%群。
(統計解析) 統計處理係使用Microsoft Office Excel 2003實施。顯著差異檢定係各期間中「控制組群」與「異黃腐酚0.2%群」之間,以Student’s t-test(顯著水準:5%)進行(*:p<0.05)。
(結果) 異黃腐酚0.2%群與控制組群相比,呼吸商(RQ)的值較低。亦即,獲得了藉由攝取異黃腐酚提高了脂肪燃燒(脂肪消耗)的結果。
<實施例4> 攝取異黃腐酚對與脂肪燃燒有關基因表現造成之影響 使用高脂肪飲食負荷模型,依據下述步驟,檢討攝取異黃腐酚對與脂肪燃燒有關基因表現造成之影響。
(群構成、馴化及分群) 購入32隻小鼠(C57BL/6J,雄性,8週齡,日本KUREA公司)後經過1星期馴化之後,藉由體重的分層連續隨機法,分成表2所示群構成中的各群(各群n=8)。本試驗中群構成(群名、基礎飼料、受驗物質及受驗物質投予量)示於表2。且表2中普通飲食係使用「控制組飼料」(D12450J),60kcal%高脂肪飲食係使用「超高脂肪飼料」(D12492)(均為Research Diets公司製)。使用作為受驗物質之異黃腐酚係調製例1獲得之標準品(純度為95%以上)。表中的「投予量」係體重每1kg,每日受驗物質的投予量(mg)。
(試驗期間中之操作) 試驗期間設定為14天,試驗期間內每日1次進行溶媒及受驗物質的經口投予。投予液係將0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC)水溶液使用為溶媒,投予液量為10mL/kg。液量係以投予日中的最新體重為基準計算出受驗物質量及液量。以可自由攝取飼料及水之狀況進行飼育。
(組織摘出) 於試驗期間最終日,取出肝臟及褐色脂肪組織。
(檢討與脂質代謝相關基因表現) 使用取出的肝臟及褐色脂肪組織,檢討攝取異黃腐酚對與脂質代謝有關的複數個基因表現造成之影響。藉此檢討可探索與異黃腐酚的脂質代謝有關的功能性。詳細方式係使用Qiazol(製品名,Qiagen公司製)自肝臟及褐色脂肪組織細胞萃取出RNA,使用RNeasy Mini Kit(製品名,Qiagen公司製)純化RNA。再使用High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit(製品名,Lifetechnologies公司製)合成cDNA,接著使用Fast Universal PCR Master Mix(製品名,Lifetechnologies公司製)後利用定量的PCR (TaqMan探針法),調查與表3所示基因相關的基因表現量。表3亦揭示使用的引子(製品編號,Thermo Fisher Scientific公司製)。解析係使用18S rRNA基因作為內部標準基因並適用比較Ct法,利用18S rRNA基因修正計算基因表現量。結果示於圖7~10。且,基因表現量係以相對於普通飲食群(Control,非添加受驗物質群)的相對表現量來表示。數據以平均值±標準誤差來表示,統計學的檢定使用Student’s t-test,p<0.05為顯著差異。
圖7表示肝臟中Acox1基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 圖8表示肝臟中Cpt1a基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 圖9表示褐色脂肪組織中Ucp1基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 圖10表示褐色脂肪組織中Pgc-1α基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 數據以平均值±標準誤差來表示,統計學的檢定使用Student’s t-test,p<0.05為顯著差異。 圖7~10中,HF係高脂肪飲食群,IX為異黃腐酚投予群。
(結果) 自上述檢討發現藉由攝取異黃腐酚,肝臟中的Cpt1a基因及Acox1基因的基因表現量為顯著的上升。此結果表示脂肪酸β氧化亢進,其結果暗示提高了脂肪燃燒。另外自上述檢討,藉由攝取異黃腐酚,褐色脂肪組織中的Pgc-1α基因為顯著的上升。此結果表示與產生熱能有關的基因發生變動,其結果暗示提高了脂肪燃燒。
<試驗例1> 冰冷條件下黃腐酚與異黃腐酚的溶解性評價 使用黃腐酚與異黃腐酚的標準品,檢討冰冷條件下對水(實驗A)及各種溶媒(實驗B)的溶解性,評價飲料適性。黃腐酚及異黃腐酚係分別使用調製例1獲得的標準品(純度均為95%以上)。
(操作順序) (實驗A:檢討黃腐酚、異黃腐酚之對水的溶解性) 準備於蒸餾水中,經添加相當於0.2(w/v)%重量的黃腐酚或異黃腐酚之試料,冰冷條件下以旋轉子攪拌10秒以上,再藉由進行震盪60分鐘,使各標準品儘可能地溶解於蒸餾水中。再進行離心分離(12,000rpm、4℃、5分鐘),回收上清液並重複操作3次,將最後一次取得的上清液作為黃腐酚飽和水溶液及異黃腐酚飽和水溶液。使用經以25%乙醇水溶液稀釋100倍者作為分析用檢體,再利用LC-MS/MS系統(TSQ Quantiva,Thermo Fisher Scientific公司製)進行定量分析評價對水的溶解性。上清液中黃腐酚、異黃腐酚各別的濃度(ppm)示於表5。若無特別說明,ppm係表示ppm(w/v)。黃腐酚及異黃腐酚的檢量線係使用調製例1獲得的標準品製作。
黃腐酚及異黃腐酚的LC-MS/MS測定條件係如下所示。 <LC-MS/MS分析條件> [HPLC條件] 移動相係使用下述溶媒,使用下述基本條件、梯度條件。 (基本條件) 裝置:UltiMate 3000(製品名,Thermo Fisher Scientific公司製) 流速:0.25mL/分鐘 分析時間:17.0分鐘/檢體 管柱:Atlantis T3, 2.1×150(mm),粒子徑3μm 管柱溫度:40℃ (移動相) A相:0.1%蟻酸水溶液(Fisher Science公司製) B相:含0.1%蟻酸的乙腈(Fisher Science公司製) (梯度條件) 表4顯示梯度條件。B相的比率(%)係v/v%。
[MS/MS條件] 裝置:TSQ QUANTIVIA(製品名,Thermo Fisher Scientific公司製) 測定模式:MRM negative Q1/Q3:353.3>119.2 注射量:2μL
(實驗B:檢討異黃腐酚對各種溶媒的溶解性) 溶媒係除了蒸餾水之外,尚調製溶解啤酒花萃取液、β-環糊精或γ-環糊精(均為Nakaratekisu公司製)為0.2(w/v) %,1.0(w/v)%之水溶液,檢討冰冷條件下異黃腐酚的溶解性。且,啤酒花萃取液係使用相當於顆粒狀啤酒花粉碎品(SAAZ)重量的10倍的蒸餾水,室溫下震盪約60分鐘進行萃取,再藉由抽吸過濾取得的濾液供作試驗。該啤酒花萃取液中異黃腐酚濃度係未達0.5ppm。準備經添加相當於對各種溶媒為0.2(w/v)%重量的異黃腐酚之試料,冰冷條件下以旋轉子攪拌10秒以上,再藉由進行震盪60分鐘,使各標準品儘可能地溶解於蒸餾水中。再進行於實驗A同樣的離心分離、定量解析,評價異黃腐酚對各種溶媒的溶解性。上清液中異黃腐酚各別的濃度(ppm)示於表6。 (結果)
自上述結果,可明確得知異黃腐酚比黃腐酚具有對水較佳的溶解性。另外,亦判明異黃腐酚的溶解性可藉由啤酒花萃取液、β-環糊精或γ-環糊精而提高。 [產業上的可利用性]
本發明係可適用於飲食品領域、醫藥品領域等。
[圖1] 表示各群體重平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01,N. S.:p≧0.10 vs.高脂肪飲食群)。 [圖2] 表示各群副睪周圍脂肪重量平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01 vs.高脂肪飲食群)。 [圖3] 表示各群腎周圍及後腹壁周圍脂肪重量平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01 vs.高脂肪飲食群)。 [圖4] 表示各群腸繫膜周圍脂肪重量平均值之圖表(#:p<0.05,##:p<0.01 vs.高脂肪飲食群)。 [圖5] 表示各群中單位重量中的肝臟內所含三酸甘油脂量(mg/g)之圖表(#:p<0.05 vs.高脂肪飲食群)。 [圖6] 表示控制群及0.2%異黃腐酚群的呼吸商(RQ)的點狀圖表。 [圖7] 表示肝臟中Acox1基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 [圖8] 表示肝臟中Cpt1a基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 [圖9] 表示褐色脂肪組織中Ucp1基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。 [圖10] 表示褐色脂肪組織中Pgc-1α基因的相對表現量(將普通飲食群(Control)設定為1時之相對值)(*:p<0.05)。
Claims (19)
- 一種脂質代謝促進用組成物,其係包含異黃腐酚(isoxanthohumol)。
- 如申請專利範圍第1項之脂質代謝促進用組成物,其係藉由促進脂肪燃燒而促進脂質代謝。
- 如申請專利範圍第1或2項之脂質代謝促進用組成物,其係藉由氧化脂肪酸β或促進熱產生而促進脂質代謝。
- 如申請專利範圍第1~3項中任一項之脂質代謝促進用組成物,其係藉由粒線體功能之活化而促進脂質代謝。
- 一種脂肪蓄積抑制用組成物,其係包含異黃腐酚(isoxanthohumol)。
- 如申請專利範圍第5項之脂肪蓄積抑制用組成物,其係可使用於目的為抑制內臟脂肪或肝臟中的脂肪蓄積。
- 如申請專利範圍第5或6項之脂肪蓄積抑制用組成物,其目的係藉由促進脂肪燃燒以抑制脂肪蓄積。
- 一種抗肥滿用組成物,其係包含異黃腐酚( isoxanthohumol),目的係促進脂質代謝以預防或改善肥滿。
- 如申請專利範圍第8項之抗肥滿用組成物,其係藉由促進脂肪燃燒而促進脂質代謝。
- 如申請專利範圍第1~4項中任一項之脂質代謝促進用組成物、如申請專利範圍第5~7項中任一項之脂肪蓄積抑制用組成物、或如申請專利範圍第8或9項之抗肥滿用組成物,其係飲食品。
- 如申請專利範圍第1~4及10項中任一項之脂質代謝促進用組成物、如申請專利範圍第5~7及10項中任一項之脂肪蓄積抑制用組成物、或如申請專利範圍第8~10項中任一項之抗肥滿用組成物,其係飲料。
- 如申請專利範圍第11項之脂質代謝促進用組成物、脂肪蓄積抑制用組成物或抗肥滿用組成物,其中飲料係茶系飲料、咖啡飲料、酒精飲料、無酒精啤酒、碳酸飲料、功能性飲料、果實.蔬菜系飲料、乳性飲料、豆漿飲料或風味水(Flavored water)。
- 如申請專利範圍第1~4及10~12項中任一項之脂質代謝促進用組成物、如申請專利範圍第5~7及10~12項中任一項之脂肪蓄積抑制用組成物、或如申請專利範圍第8~12項中任一項之抗肥滿用組成物,其係附有「抗肥滿」、「預防肥滿」、「改善肥滿」、「減低腰圍尺寸」、「維持腰圍尺寸」、「維持苗條身形」、「抑制體脂肪蓄積」、「減低體脂肪」、「抑制內臟脂肪蓄積」、「減低內臟脂肪」、「抑制肝臟中之脂肪蓄積」、「減低肝臟中之脂肪」、「減少體重」、「減量」、「節食」、「脂肪燃燒」、「脂肪消耗」、「脂質代謝」、「粒線體功能」、「產生熱」、「基礎代謝」、「代謝功能」、「代謝力」、「代謝症候群之預防」以及「代謝症候群之改善」之1或2種以上的功能表示。
- 一種促進脂質代謝之方法,其係藉由投予異黃腐酚(isoxanthohumol)。
- 一種抑制脂肪蓄積之方法,其係藉由投予異黃腐酚(isoxanthohumol)。
- 一種預防或改善肥滿之方法,其係藉由投予異黃腐酚(isoxanthohumol)而促進脂質代謝。
- 一種異黃腐酚(isoxanthohumol)之使用,其目的係促進脂質代謝。
- 一種異黃腐酚(isoxanthohumol)之使用,其目的係抑制脂肪蓄積。
- 一種異黃腐酚(isoxanthohumol)之使用,其目的係促進脂質代謝以預防或改善肥滿。
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