TW201806625A

TW201806625A - 經修飾之傷口敷料

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Publication number: TW201806625A
Application number: TW106110915A
Authority: TW
Inventors: 露西貝拉姆
Original assignee: 康瓦鐵克科技股份有限公司
Priority date: 2016-03-30
Filing date: 2017-03-30
Publication date: 2018-03-01
Also published as: WO2017173026A1; JP2019509853A; JP7395630B2; US20210275693A1; SG11201808528VA; PL3436012T3; JP2022065128A; BR112018070191A2; CN109219436A; US11865192B2; EP3436012B1; IL262011A; CO2018011720A2; US20190307904A1; ES2968013T3; KR20180132093A; EP3436012C0; UY37176A; CA3019548A1; AU2017244116C1

Abstract

本文所述之實施例係關於用於檢測傷口(例如慢性傷口或經感染傷口)之化合物，包括含有該等化合物之組合物、受質、套組、敷料材料及物品及系統。其他實施例係關於以組合物中所含特異性受質之酶轉化作用為基礎在慢性或經感染傷口診斷分析及診斷及/或檢測中使用該等化合物、套組及系統之方法。其他實施例係關於基於複數種標記物之表現描述傷口之特徵及使用該資訊治療、管控及追蹤罹患慢性或經感染傷口之患者的方法。

Description

經修飾之傷口敷料

本文所闡述之實施例概言之係關於傷口癒合，且具體而言關於檢測及治療傷口之組合物及方法。

在哺乳動物中，真皮損傷會觸發有組織性的複雜的細胞及生物化學事件級聯從而使得傷口癒合。傷口癒合係引起解剖學連續性及功能恢復之複雜動態過程：癒合理想的傷口係恢復正常解剖學結構、功能及外觀者。典型傷口經由由以下四個階段組成之模型癒合：「滲出性」階段、增殖階段、修復階段及上皮成熟(Hatz等人，Wound Healing and Wound Management , Springer-Verlag, Munich, 1994)或止血、發炎、增殖及重塑階段(Nwomeh等人，Clin. Plast. Surg . 1998, 25, 341)。不幸地，慢性及「經感染」傷口通常難以癒合。慢性傷口包括(例如)下肢靜脈潰瘍、糖尿病足潰瘍及壓瘡(Krasner等人，Chronic Wound Care: A Clinical Source Book for Healthcare Professionals, HMP Communications , 2001)。具有慢性傷口之患者需要大量照護且傷口通常導致生活品質下降；慢性傷口可能成為一些患者在其整個餘生中必須應付的問題。患者共同合併症亦會對傷口癒合過程具有顯著影響，限制及甚至終止該過程並成為生活品質喪失之促成因素。導致傷口難以癒合之因素包括病理生理問題、被微生物感染、存在無活力組織、組織灌注較差、慢性發炎病況及其他潛在病況(例如糖尿病) (Bowler等人，Annals of Medicine 2002, 34, 419-427)。在多種情況下，慢性傷口被細菌群落及/或病原體(例如真菌及病毒)拓殖，在該情形下該慢性傷口會被感染。傷口被細菌感染會延遲癒合過程，乃因細菌產生酶及毒素且亦與巨噬細胞及纖維母細胞競爭營養及氧，該等巨噬細胞及纖維母細胞之活性對於傷口之癒合係必需的。因此感染係有利於侵入性細菌且擾亂宿主/細菌平衡之表現。此會引發全身性敗血性反應，且亦抑制多個參與傷口癒合之過程。癒合之粒化階段只有在感染消退後才會開始。發炎階段對於傷口癒合過程特別重要，其中傷口部位處的生物化學反應有利於癒合但亦因產生過量蛋白酶而造成組織降解。儘管過量蛋白酶在降解死亡組織中起重要作用，但其亦對活力組織具有有害效應，造成額外發炎。該等蛋白水解酶(例如基質金屬蛋白酶(MMP)、彈性蛋白酶及細胞自溶酶G)之釋放通常與嗜中性球之過量刺激相關。升高之蛋白酶活性似乎負責延遲傷口修復且可預測傷口感染。例如，為周圍細胞提供結構及生物化學支持之細胞外基質(ECM) (由細胞分泌之細胞外分子之集合)在傷口位點處由於過量蛋白酶(例如，MMP)活性及伴隨地由於降低之纖維蛋白原含量而通常缺失。增加之蛋白酶活性亦導致生長因子降解，因此抑制癒合過程。因此，在慢性傷口中感染及其他問題加劇且傷口難以治療(Yager等人，Wound Repair Regen 1997, 5, 23-32；Widgerow等人，Wound Repair Regen 2011, 19, 287-291)。目前評價傷口之方法依賴於從業人員之訓練及經驗。傷口可以視覺方式進行評價，可採取長度及深度量測，且可使用數位照相來跟蹤傷口之視覺狀況及大小(Krasner等人，上文文獻)。在臨床實踐中，感染之診斷係基於間接參數，例如，局部疼痛、發熱、腫脹、出膿及發紅之存在。該等臨床指標中之許多(例如發炎及出膿)具有低傷口感染預測值。在醫院實驗室擦洗傷口然後進行微生物學測試係證實細菌拓殖及鑑別菌株的選項，以便開具正確的抗生素療程；然而，此療程係耗時且勞動密集的。感染診斷之延遲會延遲抗生素之投與且會增加發生敗血症之風險。另外，量測傷口癒合的客觀技術極少。儘管已報導，在與癒合傷口中之流體相比時，慢性傷口之流體中存在MMP蛋白酶含量及活性(Liu等人，Diabetes Care 2009, 32, 117-119；Bullen等人，J. Investig. Dermatol . 1995, 104, 236-240)，但該等報導未表明傷口變成慢性之限制。因此，業內亟需對鑑別人類及家畜個體之慢性及經感染傷口之敏感且特異的試劑、套組及分析技術，包括使用該等試劑及/或套組用於科學研究亦及臨床應用(例如，用於有效且準確診斷及治療以該等傷口為特徵之疾病(例如靜脈潰瘍、褥瘡潰瘍及糖尿病潰瘍)中)。

本文所揭示之技術提供檢測經感染及/或慢性傷口之組合物及方法。所揭示之技術在退出分析之後在以下方面進行改良：增加經感染傷口檢測之靈敏度、精密度及特異性；提供定性及定量量測之能力；及增加原位及即時檢測經感染傷口之速度。本文所闡述之分析及方法部分地基於檢測經感染或慢性傷口中所存在之生物標記及/或探針之特異試劑之使用。檢測過程涉及使用對經感染傷口中存在但未經感染或非慢性傷口中不存在之標記物具有特異性之試劑，且檢測步驟可涉及在標記物作用於探針時生成之信號之定性或定量量測。在檢測方法涉及檢測傷口中所存在酶之實施例中，探針較佳地包含對酶具有特異性之經修飾酶受質，從而生成可視情況擴增之信號。此可顯著改良檢測之效率及特異性。此外，可採用複數個檢測探針，其各自特異於一或多個靶標，例如對傷口具有特異性之酶。此顯著有助於最大化診斷分析之效率及準確度同時最小化偽陽性之發生率(例如，由非特異性相互作用及/或靶標冗餘性引起)。此外，本文所揭示之實驗結果證實新穎探針及基於其之分析技術能檢測及表徵各種類型之傷口。最後，所揭示技術之試劑可連同治療劑分子(例如抗生素、抗真菌劑等)一起用於監測及評估慢性傷口之治療及管控。在一個實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R。在另一實施例中，本文提供包含結構M-R之化合物，其中M係凝膠形成聚合物且R係報導分子。在另一實施例中，本文提供包含結構M-R之化合物，其中M係凝膠形成聚合物且R係報導分子且其中M與R共價或非共價偶聯。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其彼此獨立地與M及R共價或非共價偶聯。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其中報導子R包含酶受質。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其中報導子R包含酶受質，其係糖、多醣、核酸、醯胺、肽、蛋白質、脂質或其衍生物或其組合。具體而言在此實施例下，受質係糖、多醣、醯胺、肽或蛋白質或其衍生物。尤其在此實施例下，受質係包含胺基酸之肽受質(PEP)或包含複數個胺基酸之肽。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中M選自纖維素、羧甲基纖維素、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物或其衍生物或其任一混合物或組合。具體而言在此實施例下，聚合物係羧甲基纖維素(CMC)或其鹽。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中M包含約200個至約4000個單體單元。具體而言在此實施例下，M包含約500個至約2000個單體單元。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中L包含單體或中性聚合物，其係乙氧基化多元醇、聚乙烯吡咯啶酮聚合物、聚丙烯、聚烷二醇、多胺或其醚、醯胺或酯。具體而言在此實施例下，L包含乙氧基化多元醇、聚乙烯吡咯啶酮聚合物、聚丙烯、聚烷二醇、多胺或其醚、醯胺或酯之1至10個單體單元。更特定而言在此實施例下，L包含至少一個聚丙二醇亞單元。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中R包含可檢測標記。具體而言在此實施例下，可檢測標記選自由以下組成之群：發光分子、化學發光分子、螢光染料、螢光淬滅劑、脂質、有色分子、放射性同位素、閃爍體、生物素、抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白、蛋白A、蛋白G、抗體或其片段、聚組胺酸、Ni2+、Flag標籤、myc標籤、重金屬及酶。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中R包含選自由以下組成之群之螢光分子：螢光黃、玫瑰紅、四甲基玫瑰紅(tetramethylrhodamine)、R-藻紅素、Cy-3、Cy-5、Cy-7、德克薩斯紅(Texas Red)、法爾紅(Phar-Red)、別藻藍蛋白(APC)、螢光黃胺、伊紅、丹磺醯、傘形酮、5-羧基螢光黃(FAM)、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基螢光黃(JOE)、6-羧基玫瑰紅(R6G)、N,N,N’,N’-四甲基-6-羧基玫瑰紅(TAMRA)、6-羧基-X-玫瑰紅(ROX)、4-(4’-二甲基胺基苯基偶氮)苯甲酸(DABCYL)、5-(2’-胺基乙基)胺基萘-1-磺酸(EDANS)、4-乙醯胺基-4’-異硫氰基二苯乙烯-2,2’二磺酸、吖啶、吖啶異硫氰酸酯、r-胺基-N-(3-乙烯基磺醯基)苯基萘二甲醯亞胺-3,5,二磺酸酯(螢蝦黃VS)、N-(4-苯胺基-1-萘基)馬來醯亞胺、鄰胺基苯甲醯胺、明黃、香豆素、7-胺基-4-甲基香豆素、7-胺基-4-三氟甲基香豆滿(香豆素151),四氯四溴螢光素、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、5’,5’’-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、5’,5’’-二溴五倍子酚-磺酞(溴五倍子酚紅)、7-二乙基胺基-3-(4’-異硫氰基苯基)-4-甲基香豆素二伸乙基三胺五乙酸酯、4,4’-二異硫氰基二氫-二苯乙烯-2,2’-二磺酸、4,4’-二異硫氰基二苯乙烯-2,2’-二磺酸、4-二甲基胺基苯基偶氮苯基-4’-異硫氰酸酯(DABITC)、伊紅異硫氰酸酯、赤藻紅B、赤藻紅異硫氰酸酯、乙錠、5-(4,6-二氯三嗪-2-基)胺基螢光黃(DTAF)、QFITC (XRITC)、螢光胺(fluorescamine)、IR144、IR1446、孔雀石綠異硫氰酸酯、4-甲基傘形酮、鄰甲酚酞、硝基酪胺酸、副玫瑰色素、酚紅、B-藻紅素、正鄰苯二甲醛、芘、芘丁酸酯、1-芘丁酸琥珀醯亞胺基酯、活性紅4、麗絲胺(lissamine)玫瑰紅B磺醯氯、玫瑰紅B、玫瑰紅123、玫瑰紅X、磺醯玫瑰紅B、磺醯玫瑰紅101、磺醯玫瑰紅101之磺醯氯衍生物、四甲基玫瑰紅、核黃素、玫紅酸及鋱螯合物衍生物。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中R包含可檢測標記及淬滅劑分子。具體而言在此實施例下，包含淬滅劑分子之報導子係由酶或其產物活化在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中報導分子或其一部分係在與酶相互作用時釋放。具體而言在此實施例下，報導分子包含在與酶相互作用時釋放之可檢測標記。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R，其中報導分子包含對傷口特異性酶具特異性之受質，該受質在由酶作用時形成產物。具體而言在此實施例下，傷口特異性酶係蛋白酶。更具體而言在此實施例下，報導子包含選自由以下組成之群之對傷口特異性酶具特異性之受質：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。尤其在此實施例下，報導子包含對MMP-2及MMP-9或其組合具特異性之受質。在另一實施例中，本文提供組合物，其包含載劑及包含包括結構M-L-R之式I化合物之傷口-敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；R係報導分子；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及R。具體而言在此實施例下，組合物係醫藥組合物。更具體而言在此實施例下，醫藥組合物包含抗生素化合物或傷口癒合性肽。尤其在此實施例下，抗生素選自由以下組成之群：β-內醯胺、氟喹啉酮、胺基醣苷、四環素、甘胺醯基環素及多黏菌素(polymyxin)，及/或傷口癒合性肽係纖維母細胞生長因子(FGF)或血小板衍生之生長因子(PDGF)。在另一實施例中，本文提供包含包括如前文所闡述之傷口敷料材料之物品之組合物。在另一實施例中，本文提供在有需要之個體中診斷傷口之狀態之方法，其包含使傷口與如前文所闡述之傷口敷料材料接觸以允許報導分子轉化為可檢測信號及檢測信號。具體而言在此實施例下，報導分子轉化為可檢測信號係由傷口特異性蛋白酶進行，例如選自由以下組成之群之傷口特異性蛋白酶：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。尤其在此實施例下，該方法包含診斷慢性傷口或經感染傷口。在另一實施例中，本文提供在有需要之個體中診斷傷口狀態之方法，其包含使傷口與如前文所闡述之傷口敷料材料接觸以允許報導分子轉化為可檢測信號，及檢測信號；評價為傷口中傷口特異性酶之活性或含量之參數；將參數與臨限值相比較；及若傷口中該參數之量高於臨限值，則確定傷口係慢性或經感染的。在此實施例下，參數係選自由以下組成之群之傷口特異性蛋白酶之量或活性：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。具體而言在此實施例下，診斷方法係原位實施。在另一實施例中，本文提供治療有需要之個體之傷口之方法，其包含使傷口與如前文所闡述之傷口敷料材料接觸。具體而言在此實施例下，敷料材料係以局部或經皮方式施加於傷口之位點。在另一實施例中，本文提供製備前述式I化合物之方法，其中L不存在，該方法包含使凝膠形成聚合物M與報導子區R偶聯，其中M及R各自個別地如先前所闡述。具體而言在此實施例下，凝膠形成聚合物M係經由選自由以下組成之群之共價鍵聯偶聯至報導子區R：肽鍵聯、醣苷鍵聯、酯鍵聯、氧基酯鍵聯、醯胺鍵聯、醯胺基鍵聯、氧基醯胺基鍵聯、醚鍵聯、磺醯基鍵聯、亞磺醯基鍵聯、磺醯胺鍵聯、烷氧基鍵聯、烷硫基鍵聯、烷基胺基鍵聯或其組合。尤其在此實施例下，凝膠形成聚合物M係經由醣苷鍵聯或肽鍵聯偶聯至報導子區R。在另一實施例中，本文提供製備前述式I化合物之方法，其中L存在，該方法包含使凝膠形成聚合物M與連接體L偶聯以生成前體分子M-L；將前體分子M-L偶聯至報導子區R，其中M、L及R各自個別地如先前所闡述。具體而言在此實施例下，凝膠形成聚合物M係偶聯至連接體L及/或連接體L係經由選自由以下組成之群之共價鍵聯偶聯至報導子區R：酯鍵聯、氧基酯鍵聯、醯胺鍵聯、醯胺基鍵聯、氧基醯胺基鍵聯、醚鍵聯、磺醯基鍵聯、亞磺醯基鍵聯、磺醯胺鍵聯、烷氧基鍵聯、烷硫基鍵聯、烷基胺基鍵聯或其組合。在另一實施例中，本文提供製備前述式I化合物之方法，其中L存在，該方法包含將連接體L與報導子R偶聯以生成前體分子L-R；將前體分子L-R偶聯至凝膠形成聚合物M，其中M、L及R各自個別地如先前所闡述。具體而言在此實施例下，凝膠形成聚合物M係偶聯至連接體L及/或連接體L係經由選自由以下組成之群之共價鍵聯偶聯至報導子區R：酯鍵聯、氧基酯鍵聯、醯胺鍵聯、醯胺基鍵聯、氧基醯胺基鍵聯、醚鍵聯、磺醯基鍵聯、亞磺醯基鍵聯、磺醯胺鍵聯、烷氧基鍵聯、烷硫基鍵聯、烷基胺基鍵聯或其組合。在另一實施例中，本文提供包含包括結構M-L-PEP (式II)之化合物之傷口敷料材料，其中M係凝膠形成聚合物；PEP係肽及至少一個胺基酸；且L係連接體，其存在或不存在，且L (在存在時)連接M及PEP。在另一實施例中，本文提供選自由以下組成之群之傷口敷料材料：及其中n = 200至4000。應瞭解，熟習此項技術者根據以下詳細說明將容易明瞭標的技術之其他實施例及構形，在以下詳細說明中以實例或闡釋之方式顯示並闡述標的技術之各種構形。如將認識到，標的技術能夠具有其他及不同構形且其數個細節能夠在各個其他方面進行修改，而所有該等皆不背離標的技術之範圍。因此，應將各圖式及詳細說明視為本質上為闡釋性而非限制性。

相關申請案之交叉參考本申請案主張在2016年3月30日提出申請之美國臨時申請案第62/315,567號之權益，其揭示內容以全文引用方式併入本文中且成為本文之一部分。現將在下文更充分地闡述各種態樣。然而，該等態樣可以許多不同的形式來體現且不應視為限制本文所闡述之實施例；而是，提供該等實施例以使得本發明將透徹且完整，且將為熟習此項技術者充分傳達其範圍。在整個本發明中，參考各種專利、專利申請案及出版物。該等專利、專利申請案及出版物之揭示內容係以其全文引用方式併入本發明中，以便更充分地闡述截至本發明之日期為熟習此項技術者已知之技術現狀。假若在所引用專利、專利申請案及出版物與本發明之間存在任何不一致，則將以本發明為準。 I. 定義倘若提供值之範圍，則該範圍之上限與下限之間之每一介入值及該所述範圍內之任何其他所述或介入值均意欲涵蓋在本發明內。舉例而言，若闡述1 μm至8 μm之值，則亦意欲明確揭示2 μm、3 μm、4 μm、5 μm、6 μm及7 μm，以及大於或等於1 μm之值之範圍及小於或等於8 μm之值之範圍。除非上下文另有明確指示，否則單數形式「一(a，an)」及「該(the)」包括複數個指示物。因此，例如，對「聚合物」之提及包括單一聚合物以及相同或不同聚合物中之兩者或更多者；對「賦形劑」之提及包括單一賦形劑以及相同或不同賦形劑中之兩者或更多者及諸如此類。除非本發明上下文另有指示或與此一詮釋不一致，否則詞語「約」在緊接在數值前時意指該值加或減10%之範圍，例如「約50」意指45至55，「約25,000」意指22,500至27,500等。例如，在諸如「約49、約50、約55」等數值之清單中，「約50」意指延伸至小於前述值與後續值之間之間隔之一半的範圍(例如大於49.5至小於52.5)。此外，鑒於本文所提供術語「約」之定義，應理解「小於約」一個值或「大於約」一個值之片語。「實質上」或「基本上」意指幾乎全部或完全地，例如，某一給定數量之80%至95%或更大，例如至少85%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、至少99.9%或更大% (以重量或體積或所量測之任何其他參數計)。「實質上不含」意指幾乎全部或完全不存在某一給定數量，例如以小於某一給定數量之約1%至約20% (例如小於10%、小於9%、小於8%、小於7%、小於6%、小於5%、小於4%、小於3%、小於2%、小於1%、小於0.5%、小於0.1%或更小%)(以重量或體積或所量測之任何其他參數計)之量存在。在一些實施例中，「實質上不含」意指以小於或等於醫藥組合物之1-5重量%之量存在。 II. 用於傷口敷料中之組合物及系統本文提供經修飾之傷口敷料材料，其用於傷口敷料中用於傷口之療法及診斷及傷口管控，其中傷口敷料材料在使用時指示在傷口中原位存在升高之酶含量。如本文所用，「傷口」係指組織結構之連續性或完整性之物理破壞。「傷口癒合」係指組織完整性之恢復。將理解此可指組織完整性之部分或完全恢復。因此，傷口之治療係指與傷口癒合過程相關之一或多個階段或過程之促進、改良、進展、加速或其他方面的進展。傷口可為急性或慢性的。慢性傷口(包括壓瘡、下肢靜脈潰瘍及糖尿病足潰瘍)可簡單地闡述為無法癒合之傷口。儘管慢性傷口之確切分子發病機制尚未完全瞭解，但其被認為係多因素的。由於急性損傷期間駐留細胞及遊走細胞之正常反應之受損，因此該等傷口之特徵在於發炎反應延長、傷口細胞外基質(ECM)重塑受損及再上皮化失敗。傷口可為任一內部傷口，例如在該內部傷口中維持皮膚之外部結構完整性，例如在淤血或內部潰瘍形成中；或外部傷口，具體而言皮膚傷口，且因此，組織可為任一內部或外部身體組織。在一個實施例中，組織係皮膚(例如人類皮膚)，亦即，傷口係皮膚傷口，例如真皮或表皮傷口。人類皮膚由兩個不同的層構成(表皮及真皮)，在其下方有皮下組織。皮膚之主要功能係為內部器官及組織提供免受外部創傷及病原體感染之保護、感覺及體溫調節。皮膚之最外層(表皮)為約0.04 mm厚，其無血管，其包括四種細胞類型(角質細胞、黑色素細胞、朗格漢斯細胞(Langerhans cell)及默克爾細胞(Merkel cell))，且被分層成若干上皮細胞層。表皮之最內上皮層係基底膜，其與真皮直接接觸，並將表皮錨定至該真皮。皮膚中發生之所有上皮細胞分裂皆在基底膜處發生。在細胞分裂後，上皮細胞朝表皮之外表面遷移。在此遷移期間，細胞經歷稱為角質化之過程，藉此喪失細胞核且細胞轉變為堅韌、扁平、有抵抗性的非活性細胞。當細胞到達最外表皮結構時完成遷移，該最外表皮結構係角質層，其係乾燥的防水鱗狀細胞層，其有助於防止下伏組織脫水。此層死的上皮細胞連續脫落且由自基底膜移動至表面之角質化細胞替代。由於表皮上皮係無血管的，因此基底膜之營養供應依賴於真皮。真皮係為表皮供應營養之高度血管化的組織層。另外，真皮含有神經末梢、淋巴管、膠原蛋白及結締組織。真皮為約0.5 mm厚且主要由纖維母細胞及巨噬細胞構成。該等細胞類型主要負責產生及維持膠原，該膠原係見於所用動物結締組織(包括皮膚)中之蛋白質。膠原主要負責皮膚之反彈、彈性性質。在富膠原真皮下方發現之皮下組織為其上方之組織提供皮膚遷移性、隔離、卡路里儲存(calorie storage)及血液。傷口可分成兩大類之一，部分厚度傷口或全厚度傷口。部分厚度傷口限於表皮及表淺性真皮，且對真皮血管無損害。全厚度傷口涉及真皮之破壞且延伸至較深組織層，其涉及真皮血管之破壞。部分厚度傷口之癒合係藉由上皮組織之簡單再生而進行。全厚度傷口之傷口癒合更為複雜。本文所涵蓋之皮膚傷口可為部分厚度傷口或全厚度傷口。本文涵蓋之傷口包括割口及撕裂、外殼手術切口或傷口、刺痕、擦傷、劃痕、擠壓傷口、磨損、摩擦傷口(例如，尿布疹、摩擦水泡)、褥瘡潰瘍(例如，壓瘡(pressuresore或bed sore))；熱效應傷口(直接或藉助傳導、對流或輻射及電源自冷及熱源燒傷)、化學傷口(例如酸或鹼燒傷)或病原體感染(例如，病毒、細菌或真菌)(包括開放或完整癤、皮膚疹、粉刺及痤瘡)、潰瘍、慢性傷口(包括糖尿病相關性傷口，例如小腿及足部潰瘍、下肢靜脈潰瘍及壓瘡)、皮膚移植物/移植供給及接受位點、免疫反應病況(例如牛皮癬及濕疹)、胃或腸潰瘍、口腔傷口(包括口腔之潰瘍)、受損軟骨或骨、截斷術傷口及角膜病灶。傷口敷料材料及其調配物：本文所闡述之實施例提供經修飾之傷口敷料，其可用於診斷及/或治療慢性傷口。敷料可包含凝膠形成聚合物、非凝膠形成纖維或其組合。本文所闡述之傷口敷料材料可用於檢測哺乳動物傷口中之一或多種酶之含量之方法中。在一些實施例中，本文所闡述之傷口敷料材料可用於診斷哺乳動物之慢性傷口之方法中。在一些實施例中，本文所闡述之傷口敷料材料可用於診斷哺乳動物之經感染傷口之方法中。在其他實施例中，本文所闡述之傷口敷料材料可用於治療哺乳動物之傷口之方法中。在其他實施例中，本文所闡述之傷口敷料材料可用於治療哺乳動物之慢性傷口之方法中。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式I之結構：式I 其中M係凝膠形成聚合物；R係包含報導分子之區；且L係連接M及R之連接體。在一個實施例中，存在連接體(L)。在另一實施例中，不存在連接體(L)，在該情形下，傷口敷料材料包含式M-R化合物，其中M及R各自個別地如上文所闡述。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式II之結構：式II 其中M係凝膠形成聚合物；PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；且L係連接M及PEP之連接體。在一個實施例中，存在連接體(L)。在另一實施例中，不存在連接體(L)，在該情形下，傷口敷料材料包含式M-R化合物，其中M及R各自個別地如上文所闡述。在具體實施例中，式I或式II之傷口敷料材料不含連接體，其中報導子(R)或肽(PEP)共價或非共價地直接與凝膠形成聚合物結合。如業內所瞭解，共價鍵涉及所鍵結原子之間之電子之共享。相比之下，非共價鍵可包括(例如)離子相互作用、靜電相互作用、氫鍵結相互作用、生理化學相互作用、凡得瓦力(van der Waal force)、路易斯酸(Lewis-acid)/路易斯鹼相互作用或其組合。具體而言，在該等不存在連接體之情況中，肽係經由共價相互作用附接或偶聯至凝膠形成聚合物。術語「肽」包括肽以及肽之醫藥上可接受之鹽。通常，肽包含複數個胺基酸殘基，例如2個、3個、4個、5個、6個、8個、10個或更多個胺基酸殘基，其係係經由共價鍵(例如肽鍵)彼此鍵結。「胺基酸殘基」意指納入本發明肽中之個別胺基酸單元。如本文所用術語「胺基酸」意指天然或合成胺基酸以及在功能上與天然胺基酸類似之胺基酸類似物、立體異構物及胺基酸模擬物。此定義包括天然胺基酸，例如：1. 組胺酸(His) 2. 異白胺酸(Ile) 3. 白胺酸(Leu) 4. 離胺酸(Lys) 5. 甲硫胺酸(Met) 6.苯丙胺酸(Phe) 7. 蘇胺酸(Thr) 8. 色胺酸(Trp) 9. 纈胺酸(Val) 10. 精胺酸(Arg) 11. 半胱胺酸(Cys) 12. 麩醯胺酸(Gln) 13. 甘胺酸(Gly) 14. 脯胺酸(Pro) 15. 絲胺酸(Ser) 16. 酪胺酸(Tyr) 17. 丙胺酸(Ala) 18. 天冬醯胺(Asn) 19. 天冬胺酸(Asp) 20. 麩胺酸(Glu) 21. 硒基半胱胺酸(Sec)；非天然胺基酸：瓜胺酸；胱胺酸；γ-胺基丁酸(GABA)；鳥胺酸；茶胺酸及胺基酸衍生物(例如甜菜鹼)；肉鹼；肌肽肌酸；羥基色胺酸；羥脯胺酸；N-乙醯基半胱胺酸；S-腺苷基甲硫胺酸(SAM-e)；牛磺酸；酪胺。尤其採用含有反應性側鏈之胺基酸，例如半胱胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、離胺酸、精胺酸、天冬胺酸鹽/天冬醯胺、麩胺酸鹽/麩醯胺酸、甘胺酸、丙胺酸等。在某些實施例中，肽可例如經由一或多個胺基酸之添加、缺失、取代、經由一或多個胺基酸之衍生化或環化等來修飾。具體而言，肽係在羧基末端(C-末端)或胺基-末端(N-末端)藉由添加、缺失或取代一或多個胺基酸經修飾。具體而言，肽係在C-末端藉由添加至少一個胺基酸、尤其含有反應性側鏈之胺基酸(例如半胱胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、離胺酸、精胺酸、天冬胺酸鹽/天冬醯胺, 麩胺酸鹽/麩醯胺酸、甘胺酸、丙胺酸等)經修飾，其中反應性側鏈可用於與標記(例如染料)偶聯。尤其在此實施例下，肽在C-末端經修飾以含有其他半胱胺酸或絲胺酸殘基，半胱胺酸之硫基團或絲胺酸之羥基用於與螢光染料偶合。在具體實施例中，含有另一包含反應性側鏈(例如半胱胺酸之SH基團)之胺基酸之肽可經由點擊化學偶合至染料。此處，可使用1,2-胺基硫醇與2-氰基苯并噻唑(CBT)之間之反應來製備螢光素(其具有螢光性)。螢光素螢光然後可在洗滌之後藉由光譜測定法來定量，且可用於測定具有1,2-胺基硫醇之分子之相對存在。若期望沒有1,2-胺基硫醇之蛋白質之定量，則可裂解所關注蛋白質以產生具有易受2-CBT影響之N’ Cys之片段。參見Liang等人，J. Angew.Chem ., Int.編輯，48, 965, 2009。凝膠形成聚合物(M)：在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物係選自以下之化合物：纖維素、化學修飾之纖維素、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、經修飾幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物或其衍生物或其任一混合物或組合。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物選自纖維素、羧甲基纖維素(CMC)、經氧化纖維素(或其衍生物)、纖維素磺酸乙酯(CES)、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、經修飾幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物或其任一組合或混合物。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物係纖維素或化學修飾之纖維素，例如羧甲基纖維素、經氧化纖維素或其衍生物、纖維素磺酸乙酯。在一個實施例中，凝膠形成聚合物係聚合化合物之衍生物，例如纖維素衍生物。如本文所用術語「衍生物」包括凝膠形成聚合物之鹽、醯胺、酯、烯醇醚、烯醇酯、縮醛、縮酮、原酸酯、半縮醛、半縮酮、酸、鹼、溶劑合物、水合物或前藥。例如，倘若聚合物係纖維素，則纖維素之羥基(-OH)可與各種試劑部分地或完全地反應以形成具有有用性質之衍生物，例如纖維素酯及纖維素醚(-OR)。在一個實施例中，纖維素之衍生物選自羧甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、甲基乙基纖維素、羥基乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素及羥丙基纖維素。該等衍生物可由熟習此項技術者使用用於該衍生化之已知方法容易製備。在某些實施例中，該等衍生物可投與動物或人類而無實質毒性效應且具有醫藥活性或為前藥。纖維素衍生物之代表性類型闡述於美國專利第7,544,640號及第9,561,188號中。在另一實施例中，衍生物係聚合化合物之鹽，例如Li⁺ 、Na⁺ 、K⁺ 、Rb⁺ 、Mg²⁺ 、Ca²⁺ 、Sr²⁺ 或Ba²⁺ 、較佳地Na⁺ 、K⁺ 、Mg²⁺ 、Ca²⁺ 之鹽。纖維素之鹽、纖維素酯及纖維素醚(例如鈉鹽或鈣鹽)已為業內熟知。在一些實施例中，凝膠形成聚合化合物可含有上文所提及化合物中之一或多者之組合或混合物。術語「組合」包括含有一以上種組份之化合物，該等組份彼此可偶聯或不偶聯。在一個實施例中，凝膠形成聚合化合物包含上文所提及化合物中之一或多者之組合，該等化合物經由(例如)共價或非共價相互作用彼此偶聯。作為具體實例，凝膠形成聚合物可包含果膠及羧甲基纖維素之組合。參見Ninan等人，Carbohydr Polym . 2013年10月15日；98(1):877-85；PMID: 23987424。在一些實施例中，化合物包括上文所提及聚合化合物之混合物。術語「混合物」係指兩種或更多種物質可一起混合而不發生其可喪失個別性質之反應。例如，化合物A及化合物B之混合物可含有化合物A及化合物B之任一重量比，使得混合物之總重量可達到100%，例如化合物A/化合物B之99:1重量比或化合物A/化合物B之1:99重量比。典型混合物可含有上文所提及之聚合物化合物中之約2者、3者、4者、5者或更多者。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物係呈粉末或纖維或其組合之形式。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物係呈纖維之形式。凝膠形成纖維係吸濕性纖維，其在攝取傷口滲出物之後變濕潮濕、濕滑或凝膠狀且因此降低周圍纖維與傷口黏著之趨勢。凝膠形成纖維可為在吸收滲出物後保持其結構完整性之類型或可為喪失其纖維形式且變成無結構凝膠之類型。凝膠形成纖維較佳地具有至少2克0.9%鹽水溶液/克纖維之吸收率(如藉由自由膨脹方法所量測)。在一些實施例中，傷口敷料材料可包含非凝膠形成纖維。在一些實施例中，非凝膠形成纖維選自纖維素纖維(例如，棉花或萊賽爾纖維(lyocell)/TENCEL)、聚酯、耐綸、黏膠液、聚芳醯胺、丙烯酸、彈性纖維(LYCRA)、聚烯烴、聚乳酸、絲綢及天然或合成毛。在一些實施例中，傷口敷料材料包含凝膠形成聚合物及非凝膠形成纖維。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物係呈粉末之形式。在式I或式II之傷口敷料材料之某些實施例中，粉末凝膠形成聚合物因粉末凝膠形成聚合物之取代程度(DoS)更高而優於纖維凝膠形成纖維。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，纖維凝膠形成纖維優於粉末凝膠形成聚合物。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，凝膠形成聚合物具有至少0.2、至少0.3、至少0.4、至少0.5、至少0.6、至少0.7、至少0.8、至少0.9、至少1.0、至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少2.0或更大之DoS。術語DoS已為業內熟知。例如，在纖維素化學之背景下，倘若每一脫水葡萄糖(β-葡萄吡喃醣)單元具有三個反應性(羥基)之；則因此DoS可在零個(纖維素)至三個(完全取代之纖維素)之範圍內。連接體(L)：在傷口-敷料材料包含連接體之一些實施例中，連接體可以共價或非共價方式附接至凝膠形成聚合物。如業內所瞭解，共價鍵涉及電子之共享。相比之下，非共價鍵可包括(例如)離子相互作用、靜電相互作用、氫鍵結相互作用、生理化學相互作用、凡得瓦力、路易斯酸/路易斯鹼相互作用或其組合。具體而言，連接體係經由共價相互作用附接或偶聯至凝膠形成聚合物。在一個實施例中，化學連接體係具有2至10個碳原子、具體而言4至8個碳原子或尤其約4至6個碳原子之羧酸。在另一實施例中，連接體係選自由以下組成之群之單體或中性聚合物：乙氧基化多元醇、聚乙烯吡咯啶酮聚合物、聚丙烯、聚烷二醇、多胺，包括其醚、醯胺及酯。在一個實施例中，中性聚合物係聚丙烯，但亦可使用其單體(包含丙烯)。聚丙烯(PP)係最重要且廣泛用作基質材料之聚烯烴之一，乃因其密度低、生產成本低、設計撓性及再循環能力。由於聚丙烯具有疏水性，故其可能與極性表面(例如纖維素)不相容。此問題可藉由將官能化聚丙烯(例如聚(丙烯-移植物-馬來酸酐) (PP-g-MA))納入複合物中來解決，其中羧酸酐基團可提供與纖維素之共價鍵結。參見Spoljaric等人，Composites : Part A 40, 791-799, 2009。在一個實施例中，中性聚合物連接體係聚烷二醇，但亦可使用其單體(包含烷二醇)。術語「聚烷二醇」係指直鏈或具支鏈聚烷二醇聚合物，例如聚乙二醇、聚丙二醇及聚丁二醇。聚烷二醇亞單元係單一聚烷二醇單元。舉例而言，聚乙二醇亞單元之實例可為乙二醇-O-CH2-CH2-O-或丙二醇-O-CH2-CH2-CH2-O-，其在鏈端點經氫封端。聚(烷二醇)之其他實例包括(但不限於)PEG、PEG衍生物例如甲氧基聚(乙二醇) (mPEG)、聚(環氧乙烷)、PPG、聚(四亞甲基二醇)、聚(環氧乙烷-共-環氧丙烷)或其共聚物及組合。在另一實施例中，中性聚合物係多胺，但亦可使用其單體(包含胺)。術語「多胺」係指在單體單元中具有胺官能基之聚合物，該胺官能基係納入主鏈中(如在聚伸烷基亞胺中)或位於側基中(如在聚乙烯基胺中)。具體而言，連接體係PEG或PEG衍生物，例如甲氧基聚(乙二醇) (mPEG)、聚(環氧乙烷)、PPG、聚(四亞甲基二醇)、聚(環氧乙烷-共-環氧丙烷)或其共聚物及組合。在另一實施例中，亦可使用其他親水或疏水性連接體作為連接體，只要其具有撓性即可，例如不含雙鍵或環狀結構或僅含有幾個雙鍵或環狀結構之連接體。代表性實例包括(例如)聚伸烷基、聚羥基伸烷基、聚琥珀酸伸烷基酯、聚乳酸等，其中鏈長度具有約2至約20個鏈原子。聚烷二醇之鏈長度可自僅3個單元(MW約150 Da)至最多例如約100 (MW約5000)變化。聚烷二醇相對於多醣之相對量可自約1/200至約1/1、尤其自約1/50至約1/1.5變化，此端視產物之所需稠度及所需撓性而定。參見美國專利第9,089,614號及US PGPUB第2005-0079155號。在式I或式II之傷口敷料材料之一些實施例中，連接體L包含(例如)天然聚合物之1至約20個單體單元，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個單體單元。在具體實施例中，連接體包含1至約5個乙二醇單元或其衍生物、2至約5個乙二醇單元或其衍生物、2至約8個乙二醇單元或其衍生物、2至約10個乙二醇單元或其衍生物或5至約10個乙二醇單元或其衍生物。在一些實施例中，連接體L包含為親核反應之產物之化學部分。一般而言，術語「親核劑」在業內公認為意指具有反應性電子對之化學基團，該電子對藉由置換脫離基(通常另一親核劑)與化合物發生反應，例如通常在脂肪族化學中作為單分子(稱為「SN1」)或雙分子(「SN2」)反應而發生。親核劑之實例包括不帶電化合物(例如胺、硫醇及醇)及帶電基團(例如醇陰離子、硫醇、硫醇陰離子、碳陰離子及各種有機及無機陰離子)。闡釋性陰離子親核劑尤其包括簡單陰離子，例如疊氮根、氰根、硫氰酸根、乙酸根、甲酸根或氯甲酸根及亞硫酸根。在一些實施例中，連接體L包含馬來醯亞胺-硫醇加成物。馬來醯亞胺尤其可用於偶聯至含硫醇物質，例如含硫醇胺基酸(例如半胱胺酸)。硫醇基團藉由跨雙鍵加成形成硫醚而與馬來醯亞胺反應。馬來醯亞胺對半胱胺酸之硫醇之選擇性優於甲硫胺酸、組胺酸或酪胺酸。馬來醯亞胺與胺之反應所需要之pH通常高於馬來醯亞胺與硫醇之反應。具體而言在高於pH 8下，馬來醯亞胺之水解與硫醇修飾顯著競爭，參見US PGPUB第2007-0087446號。在一些實施例中，L包含鹵基乙醯胺-硫醇偶聯產物。亦可使用鹵基乙醯胺(例如碘乙醯胺或溴乙醯胺)與胺基酸(例如半胱胺酸)之硫醇基團共價結合。在一些實施例中，連接體L包含含有硫醇或二硫化物之化合物，該化合物可以與馬來醯亞胺類似之方式使用。參見Zalipsky等人，Bioconjug. Chem . 6, 150-165, 1995；Greenwald等人Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst .17, 101-161, 2000；及Herman等人，Macromol. Chem. Phys . 195, 203-209, 1994。亦參見美國專利第7,432,330號。報導子及標記物：在一些實施例中，傷口敷料材料包含包括報導分子之區。具體而言，報導子係針對一或多個傷口特異性標記物之受質，例如在傷口環境發現之酶。如本文所用，「傷口特異酶」係在傷口中差異表現之酶。「差異表現」意指傷口微環境中酶之含量或活性高於或低於其他位點，例如正常組織或周圍組織。具體而言，差異表現暗指傷口微環境中酶之表現量或活性高於正常或未受傷組織。酶之差異表現可藉由常規方式來分析。舉例而言，可藉由ELISA分析或其他免疫分析來分析試樣中酶之含量。可藉由使用(例如)質譜術或HPLC量測受質損失速率及/或產物形成速率分析酶之活性。該等技術為業內已知且闡述於實例部分中。在一個實施例中，標記物係選自由以下組成之群之酶：水解酶、蛋白酶、酯酶及過氧化酶。在一個實施例中，標記物係水解酶。如本文所用，「水解酶(hydrolase或hydrolytic enzyme)」係催化化學鍵之水解之酶，例如酯酶及核酸酶(斷裂酯鍵)；乙二醇酶(斷裂醣苷連接體)；肽酶(斷裂肽鍵)等。在一個實施例中，標記物係蛋白酶酶。蛋白酶可為序列特異性或一般蛋白酶。具體而言，術語「序列特異性蛋白酶」意指識別肽之特定序列用於其消化之蛋白酶(例如，半胱天冬酶)，且其與一般蛋白酶(例如，胰蛋白酶)之區別在於自肽之一個端依序分解肽或以序列非特異方式消化肽。對於序列特異性，肽受質之胺基酸序列可包含四個或更多個胺基酸(a.a.)殘基。識別位點及消化位點可彼此靠近。如本文所用術語「蛋白酶之受質肽」意指包含蛋白質之胺基酸序列之肽，其因其蛋白酶活性被蛋白酶識別為受質，例如作為可裂解為一或多種產物之受質。在一些實施例中，傷口敷料材料包含包含包括複數種胺基酸之肽序列之肽區。術語「複數」意指兩個或更多個單元，例如胺基酸，但個別單元不需要在結構及/或功能上不同。在一個實施例中，肽包含天然胺基酸。在其他實施例中，亦可使用含有一或多個非天然胺基酸之合成肽。在某些實施例中，可使用複數種受質，其每一者均特異於具體酶。在其他實施例中，亦可使用複數種受質，其每一者均特異於複數種酶。在一個實施例中，蛋白酶酶係肽鏈端切酶或肽鏈內切酶。肽鏈端切酶僅在肽鏈之末端降解結構；肽鏈內切酶能裂解肽內之內部鍵。亦可將該等類別分為亞組：半胱胺酸-蛋白酶、絲胺酸-蛋白酶、蘇胺酸-蛋白酶、天門冬胺酸-蛋白酶、麩胺酸-蛋白酶、金屬-蛋白酶等。每一者均能藉由肽鍵之水解消化特定蛋白質鍵聯。在一個實施例中，蛋白酶對傷口具有特異性。如本文所用，「傷口特異性蛋白酶」係在傷口中差異表現之蛋白酶。「差異表現」意指傷口微環境中蛋白酶之含量或活性高於或低於其他位點，例如正常組織或周圍組織。具體而言，差異表現暗指傷口微環境中蛋白酶之表現量或活性高於未受傷組織。可藉由常規方式分析蛋白酶之差異表現。舉例而言，可藉由ELISA分析或其他免疫分析分析試樣中蛋白酶之含量。可藉由使用(例如)質譜術或HPLC量測受質損失速率及/或產物形成速率分析酶之活性。該等技術為業內已知且闡述於實例部分中。在一個實施例中，傷口特異性蛋白酶選自由以下組成之群：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。在一些實施例中，受質係膠原酶之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係MMP-2之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係MMP-3之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係嗜中性球膠原酶之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係明膠酶之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係人類嗜中性球彈性蛋白酶之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係細胞自溶酶G之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係溶菌酶之特異性肽序列。在一些實施例中，受質係可藉由溶菌酶裂解之糖。在一個特定實施例中，傷口特異性蛋白酶係選自由以下組成之群之基質金屬蛋白酶(MMP)：MMP-1、MMP-2、MMP-8及MMP-9 (膠原酶)或其組合。MMP-1 (UNIPROT登錄號P03956 [人類]及Q9EPL5 [小鼠])亦稱為間質膠原酶及纖維母細胞膠原酶。MMP-2 (UNIPROT登錄號P08253 [人類]及P33434 [小鼠])亦稱為明膠酶。MMP-8 (UNIPROT登錄號P22894 [人類]及O70138 [小鼠])亦稱為PMNL膠原酶(MNL-CL)。MMP-9 (UNIPROT登錄號P14780 [人類]及P41245 [小鼠])亦稱為明膠酶B (GELB)。在一個特定實施例中，MMP係MMP-2或MMP-9或其組合。在一些實施例中，約5 U/mL至約30 U/mL之基質金屬蛋白酶(MMP)活性含量係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約6 U/mL、約7 U/mL、約8 U/mL、約9 U/mL、約10 U/mL、約11 U/mL、約12 U/mL、約13 U/mL、約14 U/mL、約15 U/mL、約16 U/mL、約17 U/mL、約18 U/mL、約19 U/mL、約20 U/mL、約21 U/mL、約22 U/mL、約23 U/mL、約24 U/mL、約25 U/mL或更大。如業內所瞭解，活性之單位(U)通常用於闡述酶催化活性，其中單位(U)係指每分鐘催化1微莫耳(μmol)受質轉化之酶之量。因此，1酶單位(U) = 1 μmol/min，其中μmol係指轉化受質之量。在一個特定實施例中，MMP係MMP-2或MMP-9，其中至少10.5 U/mL之MMP-2及MMP-9活性含量係顯示慢性傷口感染。根據本文所闡述之實施例可使用可藉由MMP裂解之任一肽。例如，參見美國專利第7,148,194號之表1，針對此標的物以引用方式併入本文中。表1顯示各種受質及其對人類MMP之不同同種型之特異性。數據示於Nagase等人之(「Substrate specificity of MMPs,」 inMatrix Metalloproteinase Inhibitors in Cancer Therapy , Clendeninn及Appelt編輯,Springer Science Media New York , 2001)之表3中，其係以引用方式併入本文中。表1在另一實施例中，本發明之傷口特異性蛋白酶係人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE) (UNIPROT登錄號P08246 [人類]且Q3UP87 [小鼠])係與胰凝乳蛋白酶相同家族中之絲胺酸蛋白酶且具有廣泛受質特異性。在發炎期間由嗜中性球及巨噬細胞分泌，其破壞細菌及宿主組織。在一個實施例中，用於檢測HNE之受質具有核心序列丙胺酸-丙胺酸-脯胺酸-纈胺酸(AAPV) (SEQ ID NO: 46)。在另一實施例中，HNE之受質係Ala-Pro-Glu-Glu-Ile/Met-Arg-Arg-Gln (APEEI/MRRQ) (SEQ ID NO: 47) (Kasperkiewicz等人，PNAS USA , 111(7): 2518-2523, 2014；Korkmaz等人，Methods Mol Biol ., 844:125-138, 2012)。在一些實施例中，約5 U/mL至約30 U/mL之人類嗜中性球彈性蛋白酶活性含量係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約6 U/mL、約7 U/mL、約8 U/mL、約9 U/mL、約10 U/mL、約11 U/mL、約12 U/mL、約13 U/mL、約14 U/mL、約15 U/mL、約16 U/mL、約17 U/mL、約18 U/mL、約19 U/mL、約20 U/mL、約21 U/mL、約22 U/mL、約23 U/mL、約24 U/mL、約25 U/mL或更大。在一些實施例中，至少9.6之人類嗜中性球彈性蛋白酶活性含量係顯示慢性傷口感染。在一些實施例中，至少22.9 U/mL之人類嗜中性球彈性蛋白酶活性含量係顯示慢性傷口感染。 MMP及HNE亞組在傷口中與蛋白質相互作用時具有不同的機制，且因此可預期，每一者具有不同的抑制傷口癒合的方法。在另一實施例中，傷口特異性酶係溶菌酶。溶菌酶(UNIPROT登錄號P61626 [人類]及P08905 [小鼠])係醣苷水解酶且其主要功能係破壞細菌之細胞壁。其水解在肽聚醣中之N-乙醯基胞壁酸與N-乙醯基-D-葡糖胺殘基之間亦及在殼糊精中N-乙醯基-D葡糖胺殘基之間的(1→4)-β-鍵聯。溶菌酶之天然受質係細菌細胞壁之肽聚醣層。然而，包括胞壁質降解產物之各種低分子量受質以及合成化合物已用於各種光度測定、同位素及免疫溶菌酶分析。Höltje等人，EXS, 75:105-10, 1996。以下低分子量溶菌酶受質係購自Sigma Aldrich, Saint Louis, MO：4-甲基傘形酮基β-D-N,N',N"-三乙醯基-殼三糖糖苷(Sigma目錄號M5639)及4-硝基苯基β-D -N,N',N"-三乙醯基-殼三糖糖苷(Sigma目錄號N8638)。在一些實施例中，約1000 U/mL至約10000 U/mL之溶菌酶活性含量係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約1100 U/mL、約1200 U/mL、約1300 U/mL、約1400 U/mL、約1500 U/mL、約1600 U/mL、約1700 U/mL、約1800 U/mL、約1900 U/mL、約2000 U/mL、約2100 U/mL、約2200 U/mL、約2300 U/mL、約2400 U/mL、約2500 U/mL、約2600 U/mL、約2700 U/mL、約2800 U/mL、約2900 U/mL、約3000 U/mL、約3250 U/mL、約3500 U/mL、約3750 U/mL、約4000 U/mL、約4250 U/mL、約4500 U/mL、約4750 U/mL、約5000 U/mL、約5250 U/mL、約5500 U/mL、約5750 U/mL、約6000 U/mL或更大。在一些實施例中，至少4800 U/mL之溶菌酶活性含量係顯示慢性傷口感染。在再一實施例中，傷口特異性酶係過氧化酶，更特定而言，髓過氧化酶(MPO)。MPO (UNIPROT登錄號P05164 [人類]及P11247 [小鼠])係在嗜中性球顆粒球中發現之過氧化酶。在過氧化氫(H2O2)及鹵化物(最通常氯化物)存在下，其產生抗微生物物質次氯酸鹽、單線態氧(1O2)、氯(Cl2)及羥基自由基(OH•)。可使用四甲基聯苯胺或4-苯甲醯基胺基-2,5-二甲氧基苯胺檢測MPO。參見，Andrews等人，Anal Biochem , 127(2):346-50, 1982；Klebanoff等人，J. Leukocyte Biol ., 77, 598-625, 2005。在再一實施例中，傷口特異性酶係細胞自溶酶G (UNIPROT登錄號P08311 [人類]及P28293 [小鼠])，其係胰凝乳蛋白酶家族之三種絲胺酸蛋白酶之一，該等絲胺酸蛋白酶係在嗜苯胺藍顆粒中儲存。細胞自溶酶G特異性受質具有序列Ala-Ala-Pro-Phe (SEQ ID NO: 48)或Ala-Ala-Pro-Met (SEQ ID NO: 49) (Sigma Aldrich目錄號S7388及M7771)。在一些實施例中，約10 U/mL至約100 U/mL之細胞自溶酶G活性含量係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約15 U/mL、約20 U/mL、約25 U/mL、約30 U/mL、約35 U/mL、約40 U/mL、約45 U/mL、約50 U/mL、約55 U/mL、約60 U/mL、約65 U/mL、約70 U/mL、約75 U/mL、約80 U/mL、約85 U/mL、約90 U/mL、約95 U/mL、約100 U/mL、約110 U/mL、約120 U/mL或更大。在一些實施例中，至少50 U/mL、至少40 U/mL、至少30 U/mL、至少20 U/mL、至少15 U/mL或至少10 U/mL之細胞自溶酶G活性含量係顯示慢性傷口感染。在一些實施例中，傷口特異性酶係尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(UNIPROT登錄號P00749 [人類]及P06869 [小鼠])，其係參與細胞外基質之降解及可能的腫瘤細胞遷移及增殖之絲胺酸蛋白酶。尿激酶之特異性受質具有基礎基序Arg-Val或Lys-Val。參見，Rijken等人，Biochem Biophys Res Commun. , 174(2):432-8, 1991。在一些實施例中，一或多個酶係酯酶。酯酶係用水以化學反應將酯分解為酸及醇之水解酶。在一個特定實施例中，酯酶之受質係二乙酸螢光素酯-5-馬來醯亞胺。在一些實施例中，組合物包含能檢測複數種酶(例如上文所提及酶中之至少2者、至少3者、至少4者或更多者)之受質。該等組合物可包括(例如)偶聯至相同凝膠聚合物或不同凝膠聚合物之複數種受質。在某些實施例中，受質係經標記的。如本文所用術語「標記」係指附接至表位結合劑或其他受質材料之任一物質，其中該物質可藉由檢測方法來檢測。適宜標記之非限制性實例包括發光分子、化學發光分子、螢光染料、螢光淬滅劑、有色分子、放射性同位素、閃爍體、生物素、抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白、蛋白A、蛋白G、抗體或其片段、聚組胺酸、Ni2+、Flag標籤、myc標籤、重金屬及酶(包括鹼性磷酸酶、過氧化酶及螢光素酶)。該等方法為業內所熟知。在某些實施例中，受質係經一標記加以標記，該標記為可檢測的標記。可檢測標記是個分子部分，其存在可直接或間接加以確定。通常，標記之檢測涉及可檢測信號(例如能量之發射)之產生。標記可具有化學、肽或核酸性質，但其並不限於此。所用標記之性質將取決於各種因素，包括所執行分析之性質、所用能源及檢測器之類型及聚合物、分析物、探針及主要及次要分析物特異性配體之類型。標記在空間及化學上應與其所結合之成分相容。標記可(例如)藉由其發射及/或吸收具體波長之電磁輻射之能力以直接方式檢測。標記可藉由(例如)其結合、募集及在一些情形下裂解另一部分之能力以間接方式檢測，該另一部分本身可發射或吸收具體波長之光(例如，表位標識(例如FLAG表位)、酶標籤(例如辣根過氧化物酶)等)。通常，可檢測標記可選自由以下組成之群：直接可檢測標記，例如螢光分子(例如，螢光黃、玫瑰紅、四甲基玫瑰紅、R-藻紅素、Cy-3、Cy-5、Cy-7、德克薩斯紅、法爾紅、別藻藍蛋白(APC)、螢光黃胺、伊紅、丹磺醯、傘形酮、5-羧基螢光黃(FAM)、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基螢光黃(JOE)、6-羧基玫瑰紅(R6G)、N,N,N’,N’-四甲基-6-羧基玫瑰紅(TAMRA)、6-羧基-X-玫瑰紅(ROX)、4-(4’-二甲基胺基苯基偶氮)苯甲酸(DABCYL)、5-(2’-胺基乙基)胺基萘-1-磺酸(EDANS)、4-乙醯胺基-4’-異硫氰基二苯乙烯-2, 2’二磺酸、吖啶、吖啶異硫氰酸酯、r-胺基-N-(3-乙烯基磺醯基)苯基萘二甲醯亞胺-3,5,二磺酸酯(螢蝦黃VS)、N-(4-苯胺基-1-萘基)馬來醯亞胺、鄰胺基苯甲醯胺、明黃、香豆素、7-胺基-4-甲基香豆素、7-胺基-4-三氟甲基香豆滿(香豆素151)、四氯四溴螢光素、4’, 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、5’,5’’-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、5’,5’’-二溴五倍子酚-磺酞(溴五倍子酚紅)、7-二乙基胺基-3-(4’-異硫氰基苯基)-4-甲基香豆素二伸乙基三胺五乙酸酯、4,4’-二異硫氰基二氫-二苯乙烯-2,2’-二磺酸、4,4’-二異硫氰基二苯乙烯-2,2’-二磺酸、4-二甲基胺基苯基偶氮苯基-4’-異硫氰酸酯(DABITC)、伊紅異硫氰酸酯、赤藻紅B、赤藻紅異硫氰酸酯、乙錠、5-(4,6-二氯三嗪-2-基)胺基螢光黃(DTAF)、QFITC (XRITC)、螢光胺、IR144、IR1446、孔雀石綠異硫氰酸酯、4-甲基傘形酮、鄰甲酚酞、硝基酪胺酸、副玫瑰色素、酚紅、B-藻紅素、正鄰苯二甲醛、芘、芘丁酸酯、琥珀醯亞胺基1-芘丁酸酯、活性紅4 (Cibacron® Brilliant Red 3B-A)、麗絲胺玫瑰紅B磺醯氯、玫瑰紅B、玫瑰紅123、玫瑰紅X、磺醯玫瑰紅B、磺醯玫瑰紅101、磺醯玫瑰紅101之磺醯氯衍生物、四甲基玫瑰紅、核黃素、玫紅酸及鋱螯合物衍生物)、化學發光分子、生物發光分子、發色分子、放射性同位素(例如，P32或H3、14C、125I及131I)、電子自旋共振分子(例如硝醯基自由基)、光學或電子密度分子、電荷轉導或轉移分子、電磁分子(例如磁性或順磁性珠粒或粒子)、半導體奈米晶體或奈米粒子(例如闡述於(例如)美國專利第6,207,392中且購自Quantum Dot Corporation and Evident Technologies之量子點)、膠體金屬、膠體金奈米晶體、核磁共振分子及諸如此類。可檢測標記亦可選自由以下組成之群：間接可檢測標記，例如酶(例如，鹼性磷酸酶、辣根過氧化物酶、p-半乳糖苷酶、葡萄糖澱粉酶、溶菌酶、螢光素酶(例如螢火蟲螢光素酶及細菌螢光素酶)(美國專利第4,737,456號)；醣氧化酶，例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶及葡萄糖-6-磷酸去氫酶；雜環氧化酶，例如偶合至使用過氧化氫來氧化染料前體之酶(例如HRP)之尿酸酶及黃嘌呤氧化酶；乳過氧化酶或微過氧化酶)、酶受質、親和分子、配體、受體、生物素分子、抗生物素蛋白分子、鏈黴抗生物素蛋白(streptavidin)分子、抗原(例如，表位標識，例如FLAG或HA表位)、半抗原(例如，生物素、吡哆醛、地高辛螢光黃(digoxigenin fluorescein)及二硝基苯酚)、抗體、抗體片段、微珠等。抗體片段包括Fab、F(ab)2、Fd及包括CDR3區之抗體片段。在一些實施例中，受質分別與供體及受體螢光團偶聯，從而形成FRET對。無論FRET所結合分析物之一致性如何，FRET均可以(例如)陣列格式使用以便確定是否結合具體二級抗體。或者，二級結合配體可以可檢測地標記而不標記一級結合配體。二級結合配體之標記亦可用於確立附接至其之核酸之定向。單獨FRET通常僅需要一種激發源(及因此波長)且通常僅需要一種檢測器。可將檢測器設定為供體或受體螢光團之發射光譜。若藉由淬滅供體螢光檢測FRET，則將其設定為供體螢光團發射光譜。或者，若藉由受體螢光團發射檢測FRET，則將其設定為受體螢光團發射光譜。在一些實施例中，可檢測供體及受體螢光團之FRET發射。在其他實施例中，用偏光刺激供體且檢測發射光譜之偏光。在一個實施例中，可檢測標記與機遇FRET之分析相容。FRET需要使用FRET螢光團對。FRET螢光團對係兩個在經放置彼此靠近時能經歷FRET以產生或消除可檢測信號的螢光團。供體之實例包括Alexa 488、Alexa 546、BODIPY 493、Oyster 556、Fluor (FAM)、Cy3及TMR (Tamra)。受體之實例包括Cy5、Alexa 594、Alexa 647及Oyster 656。例如，Cy5可與Cy3、TMR或Alexa 546一起充當供體。FRET應可利用螢光極大值彼此間隔50-100 nm之任一螢光團對。除本文所論述之條碼標記以外，可以序列非特異性方式來標記受質。舉例而言，若聚合物係核酸(例如DNA)，則可利用主鏈標記對其主鏈進行染色。以序列非特異性方式標記核酸之主鏈染色劑之實例包括嵌入染料，例如菲啶及吖啶(例如，溴乙錠、碘化丙錠、碘化己錠、二氫乙錠、乙錠同二聚體-1及乙錠同二聚體-2、單疊氮乙錠及ACMA)；小溝黏合劑(例如吲哚及咪唑)(例如，Hoechst 33258、Hoechst 33342、Hoechst 34580及DAPI)；及混雜核酸染色劑，例如吖啶橙(亦能夠嵌入)、7-AAD、放線菌素D、LDS751及羥基司替巴脒(hydroxystilbamidine)。所有上述核酸染色劑皆購自諸如Molecular Probes等供應商。核酸染色劑之再其他實例包括來自Molecular Probes之以下染料：青色素染料，例如SYTOX BLUE、SYTOX GREEN、SYTOX ORANGE、POPO-1、POPO-3、YOYO-1、YOYO-3、TOTO-1、TOTO-3、JOJO-1、LOLO-1、BOBO-1、BOBO-3、PO-PRO-1、PO-PRO-3、BO-PRO-1、BO-PRO-3、TO-PRO-1、TO-PRO-3、TO-PRO-5、JO-PRO-1、LO-PRO-1、YO-PRO-1、YO-PRO-3、PICOGREEN、OLIGREEN、RIBOGREEN、SYBR GOLD、SYBR GREEN I、SYBR GREEN II、SYBR DX、SYTO-40、-41、-42、-43、-44、-45 (藍色)、SYTO-13、-16、-24、-21、-23、-12、-11、-20、-22、-15、-14、-25 (綠色)、SYTO-81、-80、-82、-83、-84、-85 (橙色)、SYTO-64、-17、-59、-61、-62、-60、-63 (紅色)。在一些實施例中，報導分子包含發色團或螢光團。在其他實施例中，發色團係偶氮部分、硝基部分、三芳基甲烷部分、甲川、蒽醌、多烯部分或酞青素。在一些實施例中，報導分子係染料。想像染料可為(但不限於)玫瑰紅、香豆素、青色素、、多甲川、芘、二吡咯亞甲基二氟化硼、萘二甲醯亞胺、藻膽蛋白、蟲藻屬葉綠素蛋白質、其偶聯物及其組合。染料之非限制性實例包括螢光黃、6-FAM、玫瑰紅、德克薩斯紅、加利福尼亞紅(California Red)、iFluor594、四甲基玫瑰紅、羧基玫瑰紅、羧基玫瑰紅6F、羧基對甲胺基酚、羧基玫瑰紅110、瀑布藍(Cascade Blue)、瀑布黃、香豆素、Cy2®、Cy3®、Cy3.5®、Cy5®、Cy5.5®、Cy7®、Cy-鉻黃、DyLight 350、DyLight 405、DyLight 488、DyLight 549、DyLight 594、DyLight 633、DyLight 649、DyLight 680、DyLight 750、DyLight 800、藻紅素、PerCP (甲藻黃素葉綠素-蛋白質)、PerCP-Cy5.5、JOE (6-羧基-4’,5’-二氯-2’,7’-二甲氧基螢光黃)、NED、ROX (5-(及-6-)-羧基-X-玫瑰紅)、HEX、螢蝦黃、瑪麗藍(Marina Blue)、俄勒岡綠488 (Oregon Green 488)、俄勒岡綠500、俄勒岡綠514、Alexa Fluor® 350、Alex Fluor® 430、Alexa Fluor® 488、Alexa Fluor® 532、Alexa Fluor® 546、Alexa Fluor® 568、Alexa Fluor® 594、Alexa Fluor® 633、Alexa Fluor® 647、Alexa Fluor® 660、Alexa Fluor® 680、7-胺基-4-甲基香豆素-3-乙酸、BODIPY® FL、BODIPY® FL-Br₂ 、BODIPY® 530/550、BODIPY® 558/568、BODIPY® 630/650、BODIPY® 650/665、BODIPY® R6G、BODIPY® TMR、BODIPY® TR、其偶聯物及其組合。在一些實施例中，報導分子係二甲基胺基偶氮苯磺酸(丹磺醯)或丹磺醯衍生物。在一些實施例中，報導分子係螢光黃、螢光黃衍生物或含螢光黃化合物。在一些實施例中，報導分子係脂質。在一些實施例中，脂質係合成磷脂衍生物。在一些實施例中，合成磷脂衍生物係DDPC、DLPC、DMPC、DPPC、DSPC、DOPC、POPC或DEPC。在一些實施例中，合成磷脂衍生物係DLPC、DMPC或DPPC。在一些實施例中，合成磷脂衍生物係DLPC。在一些實施例中，合成磷脂衍生物係DMPC。在一些實施例中，合成磷脂衍生物係DPPC。在一些實施例中，報導分子包含於在與酶接觸時自傷口敷料材料裂解之可檢測片段中。在一些實施例中，報導分子不包含於在與酶接觸時自傷口敷料材料裂解之片段中。在一些實施例中，報導分子係藉由肉眼進行可視化。在一些實施例中，報導分子係在UV光下進行可視化。在一些實施例中，報導分子係使用螢光燈進行可視化。在式I之傷口敷料材料之一些實施例中，R視情況包含淬滅劑片段。在一些實施例中，淬滅劑片段防止報導分子發螢光。在一些實施例中，淬滅劑片段係保護基團。在一些實施例中，淬滅劑片段係乙酸酯基團。在某些實施例中，本文揭示含有針對一或多種酶之靶序列之經修飾之傷口敷料材料。在一些實施例中，酶催化之裂解釋放可檢測片段。可檢測片段可包含報導分子。可檢測片段之含量之定性或定量量測能夠測定傷口中感染之存在或不存在。在一些實施例中，酶催化之裂解釋放非可檢測片段。在一些實施例中，酶與傷口敷料材料相互作用裂解淬滅劑片段，且容許結合至傷口敷料材料之報導分子發螢光。螢光之定性或定量量測能夠測定傷口中感染之存在或不存在。在某些實施例中，本文揭示含有針對一或多種蛋白酶之靶序列之經肽修飾之傷口敷料材料。蛋白酶催化之裂解釋放可檢測肽片段。可檢測肽片段包含報導分子。可檢測肽片段之含量之定性或定量量測能夠測定傷口中升高之蛋白酶之存在或不存在。在一些實施例中，酶催化之裂解釋放非可檢測片段。在一些實施例中，酶與傷口敷料材料相互作用裂解淬滅劑片段，且容許結合至傷口敷料材料之報導分子發螢光。螢光之定性或定量量測能夠測定傷口中感染之存在或不存在。在式I之傷口敷料材料之一些實施例中，R包含淬滅劑片段。在一些實施例中，淬滅劑片段防止報導分子發螢光。在一些實施例中，淬滅劑片段係保護基團。在一些實施例中，淬滅劑片段係乙酸酯基團。在式I之傷口敷料材料之一些實施例中，R包含親核反應產物之化學部分。在一些實施例中，R包含馬來醯亞胺-硫醇加成物。在一些實施例中，R包含鹵基乙醯胺-硫醇偶聯產物。在一些實施例中，R包含鹵基乙醯胺偶聯產物。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式Ia之結構：式Ia 其中R係包含報導分子之區；m係1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30或更大；且n係選自200至4000之整數，例如250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、3700、3800、3900、4000，包括其間之所有整數值，例如，201、202、203等。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。在一些實施例中，R係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式Ib之結構：式Ib 其中R係包含報導分子之區；且n係選自200至4000之整數，例如250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、3700、3800、3900、4000，包括其間之所有整數值，例如，201、202、203等。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。在一些實施例中，R係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區。在一些實施例中，R係包含報導分子及一個胺基酸之肽區。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式IIa之結構：式IIa 其中M係選自纖維素、化學修飾之纖維素、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物或其任一組合之凝膠形成聚合物；PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；且L係連接M及PEP之連接體，其中L包含一或多個聚乙二醇亞單元或聚丙烯亞單元。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式IIb之結構：式IIb 其中PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；m係1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30或更大；且n係選自200至4000之整數。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。在一些實施例中，傷口敷料材料具有式IIc之結構：式IIc 其中PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；m係1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30或更大；且n係選自200至4000之整數，例如250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、3700、3800、3900、4000，包括其間之所有整數值，例如，201、202、203等。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。組合物本文所闡述之實施例進一步係關於含有式I或式II之化合物之組合物。該等組合物可使用習用方法來製備。在調配時，可使用習用方法、例如使用載劑、膠凝劑、軟化劑、表面活性劑、保濕劑、黏度增強劑、乳化劑等將所得式I或式II之化合物之儲備組合物進一步修飾成期望形式，例如凝膠、香膏、洗劑、乳霜、膏糊、軟膏劑等。參見，例如WO 2011/126384及WO 2013/004953，其係以引用方式併入。用於組合物中之載劑可包括(但不限於)水、甘油、二甘油、甘油衍生物、二醇、二醇衍生物、糖、乙氧基化及/或丙氧基化酯及醚、尿素、PCA鈉、醇、乙醇、異丙醇及其組合。在一實施例中，載劑係丙二醇。通常，組合物含有以下量之載劑：組合物之約1重量%至組合物約99.9重量%、更通常組合物之約2重量%至組合物之約95重量%，且更通常組合物之約5重量%至組合物之約90重量%。熱-可逆膠凝劑定義為在升高之溫度(例如50℃)下可溶、部分地可溶或混溶於親水載劑中之成分，其中在冷卻至25℃時該等載劑能夠使載劑增稠，但在必需施加至受質時在50℃下黏性將更差。適宜親水載劑包括水、二醇(例如丙二醇)。用於組合物中之熱-可逆膠凝劑可包括脂肪酸之鹽，例如硬脂酸鈉、棕櫚酸鈉、硬脂酸鉀。該等鹽可添加至組合物中或可藉由添加脂肪酸並用適當鹼中和原位產生。組合物之原位形成之實例係提供硬脂酸及氫氧化鈉以產生硬脂酸鈉。其他常見熱-可逆膠凝劑可包括(例如)聚乙二醇及衍生物(例如PEG-20、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-150季戊四醇硬脂酸酯、二硬脂醇聚醚-75 IPDI、二硬脂醇聚醚-100 IPDI)、脂肪醇(例如十六烷醇)、脂肪酸(例如硬脂酸、羥基硬脂酸及其衍生物)及其組合。除載劑及熱-可逆膠凝劑以外，組合物可含有各種其他成分及組份。可包括在組合物內之其他成分之實例係軟化劑、固醇或固醇衍生物、天然及合成脂肪或油、黏度增強劑、流變改質劑、多元醇、表面活性劑、醇、酯、聚矽氧、黏土、澱粉、纖維素、微粒、增濕劑、膜形成劑、滑動改良劑、表面改質劑、皮膚保護劑、保濕劑、遮光劑及諸如此類。醫藥組合物及/或製劑：本文所闡述之實施例進一步係關於醫藥組合物及/或製劑，其包含上文所提及式I或式II之化合物中之一或多者及載劑。片語「醫藥上可接受」在本文中用於指彼等在合理藥學判斷範圍內適於與人類及/或其他動物之組織接觸使用且無過度毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或併發症且與合理益處/風險比相應之化合物、鹽、組合物、劑型等。在一些態樣中，「醫藥上可接受」意指由聯邦或州政府之管理機構批准或列示於美國藥典或其他公認藥典中用於哺乳動物(例如動物)且更特定而言用於人類中。醫藥組合物可藉由業內已知之任一適宜方式來製備。該等組合物之實例包括適於如下投與之彼等：(a) 局部施用，例如物品(例如，紗布、墊、拭子、敷料)、乳霜、軟膏劑、凝膠、洗劑等；(b) 非經腸投與，例如以無菌溶液或懸浮液進行皮下、肌內或靜脈內注射；(c) 經口投與，外部施用(例如灌劑，包括水性及非水溶液或懸浮液)、錠劑、濃注、粉末、顆粒、與飼料混合之糰粒、施用至舌之膏糊等。在某些實施例中，醫藥組合物可包含一或多種抗生素藥劑。如本文所用術語「抗生素」或「抗微生物劑」係指抑制微生物之生長或破壞其之物質。較佳地，抗生素可用於遏製傳染原之毒力及/或治療傳染病。抗生素亦係指由微生物(例如酵母或真菌)所產生之天然形式在結構上經修飾之半合成物質。較佳地，抗生素選自由以下組成之群：β-內醯胺(包括β-內醯胺酶抑制劑及頭孢菌素(cephalosporin))、氟喹啉酮、胺基醣苷、四環素(tetracycline)及/或甘胺醯基環素及/或多黏菌素。亦可採用抗微生物劑之任一組合，例如至少一種β-內醯胺及至少一種氟喹啉酮；至少一種胺基醣苷及一種頭孢菌素；至少一種β-內醯胺及一種β-內醯胺酶抑制劑，視情況連同胺基醣苷一起等。如本文所用術語「β-內醯胺」抑制劑包括天然及半合成青黴素及青黴素衍生物，例如苄星青黴素(benzathine penicillin)、苄基青黴素(青黴素G)、苯氧基甲基青黴素(青黴素V)、普魯卡因青黴素(procaine penicillin)及扼煞西林(oxacillin)；甲氧西林(methicillin)、二氯噻青黴素(dicloxacillin)及氟氯西林(flucloxacillin)；替莫西林(temocillin)；阿莫西林(amoxicillin)及胺苄青黴素(ampicillin)；阿洛西林(azlocillin)、卡本西林(carbenicillin)、替卡西林(ticarcillin)、美洛西林(mezlocillin)及必倍西林(piperacillin)；比阿培南(biapenem)、多尼培南(doripenem)、厄他培南(ertapenem)、亞胺培南(imipenem)、美羅培南(meropenem)、帕尼培南(panipenem)及PZ-601；頭孢力新(cephalexin)、噻吩頭孢菌素(cephalothin)、頭孢若林(cefazolin)、頭孢可若(cefaclor)、頭孢呋辛(cefuroxime)、頭孢孟多(cefamandole)、西弗特坦(cefotetan)、頭孢西丁(cefoxitin)、頭孢噻肟(cefotaxime)及頭孢泊肟(cefpodoxime)；頭孢吡肟(cefepime)及頭孢匹羅(cefpirome)；頭孢羥胺苄(cefadroxil)、希復欣敏(cefixime)、頭孢丙烯(cefprozil)、頭孢力新、噻吩頭孢菌素、頭孢呋辛、頭孢孟多、頭孢吡肟及頭孢匹羅；頭孢西丁、西弗特坦、頭孢美唑(cefmetazole)及氟氧頭孢(flomoxef)；替吉莫南(tigemonam)、諾卡菌素A(nocardicin A)及菸毒素(tabtoxin)；克拉維酸(clavulanic acid)、拉氧頭孢(moxalactam)及氟氧頭孢。氟喹啉酮包括環丙沙星(ciprofloxacin)、加雷沙星(garenoxacin)、加替沙星(gatifloxacin)、吉米沙星(gemifloxacin)、左氧氟沙星(levofloxacin)及莫西沙星(moxifloxacin)。胺基醣苷包括(例如)康黴素(kanamycin)、阿米卡星(amikacin)、妥布黴素(tobramycin)、地貝卡星(dibekacin)、慶大黴素(gentamicin)、西索米星(sisomicin)、奈替米星(netilmicin)、新黴素B (neomycin B)、新黴素C、新黴素E (巴龍黴素(paromomycin))及鏈黴素(streptomycin)，包括合成衍生物克拉黴素及阿奇黴素(azithromycin)。四環素包括天然化合物(例如，四環素、氯四環素、氧四環素、地美環素(demeclocycline))或半合成藥劑(例如，賴甲環素(lymecycline)、甲氯環素(meclocycline)、美他環素(methacycline)、米諾四環素(minocycline)、羅利環素(rolitetracycline))。甘胺醯基環素(例如，米諾四環素/替吉環素(tigecycline))係自四環素衍生的。多黏菌素包括(例如)多黏菌素B及多黏菌素E (可利斯汀(colistin))。在某些實施例中，組合物可含有如下濃度之抗生素：0.1 mg/mL、0.5 mg/L、1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL、5 mg/mL、6 mg/mL、7 mg/mL、8 mg/mL、9 mg/mL、10 mg/mL、11 mg/mL、12 mg/mL、13 mg/mL、14 mg/mL、15 mg/mL、16 mg/mL、17 mg/mL、18 mg/mL、19 mg/mL、20 mg/mL、21 mg/mL、22 mg/mL、23 mg/mL、24 mg/mL、25 mg/mL、26 mg/mL、27 mg/mL、28 mg/mL、29 mg/mL、30 mg/mL、31 mg/mL、32 mg/mL、33 mg/mL、34 mg/mL、35 mg/mL、36 mg/mL、37 mg/mL、38 mg/mL、39 mg/mL、40 mg/mL、41 mg/mL、42 mg/mL、43 mg/mL 44 mg/mL、45 mg/mL、50 mg/mL、60 mg/mL、70 mg/mL、80 mg/m、90 mg/mL、100 mg/mL、150 mg/mL、200 mg/mL、250 mg/mL、300 mg/mL、400 mg/mL、500 mg/mL或更大。舉例而言，亞胺培南及厄他培南可以50 mg/mL、30 mg/mL、20 mg/mL、15 mg/mL、10 mg/mL、5mg/mL及1 mg/mL之濃度使用。傷口敷料：在某些實施例中，本文所揭示包含如本文所闡述之傷口敷料材料(例如式I或式II之化合物)之傷口敷料。在一些實施例中，傷口敷料基本上由如本文所闡述之傷口敷料材料(例如式I化合物或式II)組成。在一個實施例中，本文所揭示之傷口敷料係生物相容、生物可降解、非免疫原性且易於購買的。在一個實施例中，式I或式II之化合物係以視情況含有藥劑之粒子(例如纖維粒子或粉末粒子)之形式提供。具體而言，材料較佳地含有CMC纖維。組合物可較佳地包含敷料材料及其他化合物之均勻混合物。例如，在一個實施例中，均勻混合物包含敷料材料及適宜媒劑(例如溶劑)之混合溶液或分散液，或藉由自此一溶液或分散液去除溶劑而產生之固體組合物。在此實施例下，敷料材料佔材料之至少5重量%、更佳至少10重量%、20重量%、30重量%、50重量%、75重量%、90重量%或更大重量%。在某些較佳實施例中，材料基本上由敷料材料組成。材料之其他組份可包括0-25重量%(例如約1至約20重量%)之一或多種其他生物相容性多醣，例如海藻酸鹽(例如海藻酸鈉或海藻酸鈣)、澱粉衍生物(例如羥乙酸澱粉鈉)、纖維素衍生物(例如甲基纖維素或羧基甲基纖維素)或醣胺基聚多醣(例如玻尿酸或其鹽、硫酸軟骨素或硫酸乙醯肝素)。材料亦可包含至多約25重量%(例如約1至約20重量%)之一或多個結構蛋白質，該等蛋白質選自由以下組成之群：纖連蛋白、纖維蛋白、層黏蛋白、彈性蛋白、膠原及其混合物。較佳地，蛋白質包含膠原，且更佳地其基本上由膠原組成。材料亦可包含至多約20重量%、較佳地約2重量%至約10重量%之水。材料亦可含有0-40重量%(例如約5至約25重量%)之塑化劑，較佳地多元醇，例如甘油或山梨醇。在某些實施例中，材料亦可包含至多約10重量%(例如約0.01重量%至約5重量%，通常約0.1重量%至約2重量%)之一或多種治療傷口癒合劑，例如非類固醇消炎藥(例如，乙醯胺酚)、類固醇、局部麻醉劑、抗微生物劑或生長因子(例如，纖維母細胞生長因子或血小板衍生之生長因子)。抗微生物劑可包含(例如)消毒劑、抗生素或其混合物。較佳抗生素包括四環素、青黴素、土黴素(terramycin)、紅黴素(erythromycin)、枯草桿菌素(bacitracin)、新黴素、多鏈絲黴素B (polymycin B)、莫匹羅星(mupirocin)、克林達黴素(clindamycin)及其混合物。較佳消毒劑包括銀(包括膠體銀)、銀鹽(包括構成材料之陰離子聚合物中之一或多者之鹽)、磺胺嘧啶銀、洛赫西定(chlorhexidine)、聚維酮碘(povidone iodine)、三氯生(triclosan)、硫糖鋁(sucralfate)、四級銨鹽及其混合物。本發明之該等含藥傷口敷料材料提供治療劑之持續釋放，乃因傷口敷料材料在使用期間降解。所有上述百分比皆以乾重為基礎。較佳地，傷口敷料材料對其他助劑及材料之重量比為約1:99至約99:1。更佳地，重量比在約1:9至約9:1之範圍內，更佳地其在約4:1至約1:4之範圍內，再更佳地在約2:1至約1:2之範圍內。材料可呈任一便利形式，例如粉末、微球體、片材、墊塊或膜。在某些實施例中，材料係呈用於局部施用之半固體或凝膠軟膏劑之形式。在某些實施例中，材料係呈用於施用至慢性傷口之冷凍乾燥或溶劑乾燥型生物吸收性海綿狀物之形式。較佳地，海綿狀物之平均孔徑在10-500 μm、更佳約100-300 μm之範圍內。適宜海綿狀物係藉由冷凍乾燥或溶劑乾燥包含式I或式II之化合物以及適宜治療劑之水性分散液來製備。在其他實施例中，材料係呈撓性膜之形式，其可為連續或間斷的(例如多孔的)。撓性膜較佳地包含賦予其撓性之塑化劑，例如甘油。具有一系列可控性質之兩種凝膠形成聚合物(例如纖維素衍生物)之隨時可用性意味著可將本發明組合物之性質控制至特殊程度。具體而言，可控制材料之生物吸收速率、孔隙度及密度。在一個實施例中，本文提供呈薄片形式之傷口敷料材料，其包含包括式I或式II之化合物之組合物之活性層。活性層在使用中通常可為傷口接觸層，但在一些實施例中，其可藉由液體滲透性頂部薄片與傷口分開。在一個實施例中，活性層之面積為約1 cm² 至約400 cm² ，具體而言約4 cm² 至約100 cm² 。在另一實施例中，傷口敷料材料進一步包含在活性層之向傷口側相對之活性層上方延伸之背襯薄片。較佳地，背襯薄片大於活性層使得寬度為1 mm至50 mm、較佳地5 mm至20 mm之邊緣區圍繞活性層延伸以形成所謂的島狀敷料。在該等情形下，背襯薄片較佳地在至少其邊緣區經壓敏性醫療級黏著劑塗覆。在敷料材料包含背襯薄片之實施例中，背側薄片係實質上不透液體的。在另一實施例中，背襯薄片係半透性的，例如背襯薄片較佳地透水蒸汽，但不透液體水或傷口滲出物。較佳地，背襯薄片亦係不透微生物的。在37.5℃下在100%至10%相對濕度差異下，適宜的連續舒適的背襯薄片將較佳地具有單獨背襯薄片300至5000 g/m² /24 hr、較佳地500至2000 g/m² /24 hr之濕蒸汽透射率(MVTR)。背襯薄片厚度較佳地在10至1000微米、更佳100至500微米之範圍內。敷料整體之MVTR低於單獨背襯薄片，因為有孔薄片部分地阻塞水分藉助敷料之轉移。適於形成背襯薄片之聚合物包括聚胺基甲酸酯及聚烷氧基烷基丙烯酸酯及甲基丙烯酸酯。較佳地，背襯薄片包含主要為閉孔之高密度封阻型聚胺基甲酸酯發泡體之連續層。適宜背襯薄片材料係聚胺基甲酸酯膜。在包含包括黏著劑之背襯層之傷口敷料中，黏著劑層應具有水分蒸汽透過性及/或經圖案化以容許水蒸汽通過。黏著劑層較佳地為照慣例用於島型傷口敷料之類型之連續水分蒸汽透過性、壓敏性黏著劑層，例如，基於丙烯酸酯共聚物、聚乙烯基乙基醚及聚胺基甲酸酯之壓敏性黏著劑。可選擇性地使用基於聚胺基甲酸酯之壓敏性黏著劑。在另一實施例中，敷料可包含多層吸收劑物品之其他層，該等層可在活性層與保護性薄片之間建立。舉例而言，該等層可包含有孔塑膠膜以在使用中為活性層提供支撐，在該情形下膜中之孔較佳地與水凝膠層中之孔對準。此外，在其他實施例中，敷料可在活性層與保護性薄片之間包含吸收劑層，尤其在敷料用於滲出性傷口之情況下。可選吸收劑層可為在傷口癒合業內照慣例用於吸收傷口流體、血清或血液之層中之任一者，包括紗布、非織物、超吸收劑、水凝膠及其混合物。較佳地，吸收劑層包含吸收劑發泡體(例如開孔式親水性聚胺基甲酸酯發泡體)之層。在其他實施例中，吸收劑層可為非織造纖維網，例如黏膠液短纖維之梳理網。在某些實施例中，傷口敷料可藉由可去除覆蓋薄片來保護。覆蓋薄片通常係自撓性熱塑性材料形成。適宜材料包括聚酯及聚烯烴。較佳地，覆蓋薄片之面向黏著劑之表面係釋放表面。亦即，該表面僅微弱地黏著至活性層及背襯薄片上之黏著劑以輔助水凝膠層自覆蓋薄片剝離。舉例而言，覆蓋薄片可自非黏著性塑膠(例如氟聚合物)形成或其可裝有釋放塗層(例如聚矽氧或氟聚合物釋放塗層)。在一個實施例中，傷口敷料係無菌的且包裝在不透微生物的容器中。套組：在某些實施例中，所揭示之技術提供套組，其在一個或單獨區室中視情況連同賦形劑、載劑或油一起包含式I或式II之化合物。套組可在一或多個區室中進一步包含其他成分，例如膠凝劑、軟化劑、表面活性劑、保濕劑、黏度增強劑、乳化劑等。套組可視情況包含調配用於診斷、檢測或治療傷口(例如慢性或經感染傷口)之物品之說明書。套組亦可包含在傷口之治療中個別地或一起使用組份之說明書。在相關實施例中，所揭示之技術提供套組，其包含包裝及至少一個包含上文所提及組合物之吸收劑物品(上文所闡述)。或者，套組可單獨地、視情況連同次級資訊一起包含個別組份，其可在包裝中使用或可與包裝一起使用。本文所揭示之其他實施例係關於組合物之用途，其用於製備用以治療傷口之敷料。較佳地，傷口係慢性傷口，例如選自由以下組成之群之傷口：靜脈潰瘍、褥瘡潰瘍及糖尿病潰瘍。表面：所揭示技術之實施例進一步提供包含上文所提及之式I或式II化合物之表面，其中報導子或肽經定向以允許結合至配體(例如酶)。較佳地，表面係固體支撐物之表面。多種不同的固體支撐物已為熟習此項技術者熟知。有用的固體支撐物包括天然聚合碳水化合物及其以合成修飾之交聯或經取代之衍生物，例如瓊脂、瓊脂醣、交聯海藻酸、經取代且交聯之瓜爾膠(guar gum)、纖維素酯(尤其與硝酸及羧酸一起形成的)、混合纖維素酯及纖維素醚；含有氮之天然聚合物，例如蛋白質及衍生物，包括交聯或經修飾明膠；天然烴聚合物，例如乳膠及橡膠；可利用適宜多孔結構製備之合成聚合物，例如乙烯基聚合物，包括聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚乙酸乙烯基酯及其部分地水解之衍生物、聚丙烯醯胺、聚甲基丙烯酸酯、上述聚縮合物之共聚物及三元共聚物，例如聚酯、聚醯胺及其他聚合物，例如聚胺基甲酸酯或聚環氧化物；多孔無機材料，例如鹼土金屬及鎂之硫酸鹽或碳酸鹽(包括硫酸鋇、硫酸鈣、碳酸鈣)、鹼及鹼土金屬鋁及鎂之矽酸鹽；及鋁或矽之氧化物或水合物，例如黏土、氧化鋁、滑石、高嶺土、沸石、矽膠或玻璃(該等材料可與上述聚合材料一起用作過濾器)；及上述類別之混合物或共聚物，例如藉由在預先存在的天然聚合物上開始合成聚合物之聚合獲得之接枝共聚物。在一個實施例中，支撐物係陣列式板(例如微陣列)之孔。構築該等陣列之方法已為業內熟知，例如Cao等人，Appl Environ Microbiol ., 77(23): 8219-8225, 2011。可一式三份對每一式I或式II化合物(或單獨報導子)進行點樣以消除由陣列中之物理缺陷引起之不規則數據。系統：所揭示技術之實施例進一步提供包含上文所提及之組合物及/或套組之診斷系統。診斷系統之各種組份可以各種形式提供。舉例而言，式I或式II之化合物(例如，含有肽報導子之化合物)可以凍乾試劑形式提供。該等凍乾試劑可在凍乾前預先進行混合，使得在重構時其形成每一組份之比率均適當之完備混合物以隨時用於分析中。另外，本發明之診斷系統可含有用於重構套組之凍乾試劑之重構試劑。本文所闡述之實施例進一步係關於LC檢測系統。LC檢測系統利用5CB液晶(LC)之配向變化之監測作為檢測方法。為製備適應CMC結構之此LC檢測系統，將脂質添加至肽序列中可裂解之部分中。脂質在釋放時可引起5CB之配向變化。5CB之配向可藉助交叉偏光透鏡來檢測且顯示自黑暗至明亮之變化；該系統可包含將LC限制於正確配向直至使用點為止，且亦可涉及使用交叉偏光透鏡及顯微鏡來檢測及/或可視化。在一些實施例中，傷口敷料包含具有式Ia結構之傷口敷料材料：式Ia 其中R係包含報導分子之區；m係1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且n係選自200至4000之整數。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。在一些實施例中，R係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區。在一些實施例中，傷口敷料包含具有式Ib之結構之傷口敷料材料：式Ib 其中R係包含報導分子之區；且n係選自200至4000之整數。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。在一些實施例中，R係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區。在一些實施例中，R係包含報導分子及一個胺基酸之肽區。在另一態樣中，本文提供包含具有式II結構之傷口敷料材料之傷口敷料：式II 其中M係凝膠形成聚合物；PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；且L係連接M及PEP之連接體。在一些實施例中，傷口敷料包含具有式IIa之結構之傷口敷料材料：式IIa 其中M係凝膠形成聚合物選自纖維素、化學修飾之纖維素、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、經修飾幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物、CES、經氧化纖維素(或其衍生物)或其任一組合；PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；且L係連接M及PEP之連接體，其中L包含一或多個聚乙二醇亞單元或聚丙烯亞單元。在一些實施例中，傷口敷料包含具有式IIb之結構之傷口敷料材料：式IIb 其中PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；m係1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且n係選自200至4000之整數。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。在一些實施例中，傷口敷料包含具有式IIc之結構之傷口敷料材料：式IIc 其中PEP係包含報導分子及至少一個胺基酸之肽區；m係1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且n係選自200至4000之整數。在其他實施例中，n係選自300至3500之整數。在再其他實施例中，n係選自400至3200之整數。製備式I或式II化合物之方法：本文所提供之實施例進一步係關於製備式I或式II之化合物(包括其前體)之方法。術語「前體」包括用作反應物以生成中間或最終產物之任一化合物。在一個實施例中，本文提供製備包含結構M-R之式I化合物之方法，其中，M係包含複數個選自由以下組成之群之單體之凝膠形成聚合物：纖維素、羧甲基纖維素(CMC)、經氧化纖維素(或其衍生物)、纖維素磺酸乙酯(CES)、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、經修飾幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物或其任一組合或混合物，且R係報導子區，該方法包含使凝膠形成聚合物與報導分子經由(例如)共價鍵偶聯。在一個實施例中，報導子R係針對傷口特異性標記物之受質，例如傷口特異性酶，例如水解酶且更特定而言蛋白酶，如前文所闡述。在此實施例下，針對傷口特異性標記物之受質包含(例如)可水解受質，例如胺基酸、糖、肽、多醣、核酸、脂質或其組合。在一個實施例中，凝膠形成聚合物係經由肽、醣苷、醯胺、酯、醚、酸酐或類似鍵聯偶聯至報導分子。如本文所用，「肽鍵」係藉由兩個胺基酸之間之縮合反應形成，其中一個反應物之酸部分與另一反應物之胺基部分反應以在兩個胺基酸之間產生肽鍵(-CO-NH-)。如本文所用，「醣苷鍵」係在糖(或自糖衍生之分子)之半縮醛或半縮酮基團與一些化合物(例如醇)之羥基之間形成。含有醣苷鍵之物質係醣苷。術語「醣苷」現已擴展至亦涵蓋在糖之半縮醛(或半縮酮)基團與除羥基以外之若干化學基團(例如-SR (硫醣苷)、-SeR (硒基醣苷)、-NR1R2 (N-醣苷)或甚至-CR1R2R3 (C-醣苷))之間形成鍵之化合物。如本文所用術語「醯胺」係指--N(R¹ )--C(═O)--或--C(═O)--N(R¹ )--，其中R¹ 在本文中定義為包括氫以及其他基團。術語「經取代之醯胺」係指R1不為氫之情況，而術語「未經取代之醯胺」係指R1為氫之情況。術語「酯」係指衍生自酸(有機或無機)且其中至少一個羥基由烷氧基替代之化學化合物。酯具有通式-C(=O)-OR¹ 或R¹ -C(=O)-O-，其中R¹ 在本文中定義為包括氫以及其他基團。「酯」之代表性類型包括(但不限於)酸性基團之烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基及雜環基酯，該酸性基團包括(但不限於)羧酸、磷酸、次磷酸、磺酸、亞磺酸及酸。術語「磺醯基」代表式—SO₂ -烷基或—SO₂ -芳基之基團，其中「烷基」包括具有直鏈、具支鏈或環狀部分或其組合且含有1-20個碳原子、較佳地1-5個碳原子之飽和單價烴自由基，且「芳基」包括藉由去除一個氫自芳香族烴衍生之有機自由基，例如苯基或萘基，其視情況經1至5個獨立地選自基團鹵素、羥基、硫醇、胺基、硝基、氰基、醯基、醯氧基、磺醯基、亞磺醯基、烷基胺基、羧基、酯、醚、醯胺基、磺酸、磺醯胺、烷硫基、氧基酯之取代基取代。術語「亞磺醯基」代表式—SO-烷基或—SO-芳基之基團，其中「烷基」及「芳基」係如上文所定義。術語「磺醯胺」代表式—SO₂ NH₂ 之基團。術語「氧基酯」意指式—O—COO-烷基或—O—COO-芳基之基團，其中「烷基」及「芳基」係如上文所定義。術語「醚」意指式烷基-O-烷基或烷基-O-芳基或芳基-O-芳基之基團，其中「烷基」及「芳基」係如上文所定義。術語「醯胺基」意指式—CONRR’之基團，其中R及R’獨立地選自氫、「烷基」或「芳基」。術語「氧基醯胺基」意指式—O—CONRR’之基團，其中R及R’獨立地選自氫、「烷基」或「芳基」。如本文所用術語「烷氧基」包括—O-烷基，其中「烷基」係如上文所定義。如本文所用術語「烷硫基」包括烷基，其中「烷基」係如上文所定義。如本文所用術語「烷基胺基」包括—NH烷基或—N(烷基)₂ 基團，其中「烷基」係如上文所定義。用於偶聯反應性部分以生成醣苷、肽、酯、氧基酯、醯胺、醯胺基、氧基醯胺基、醚、磺醯基、亞磺醯基、磺醯胺或其他鍵聯(例如烷氧基、烷硫基、烷基胺基等)之方法為業內已知且進一步闡述於實例中。在另一實施例中，本文提供製備包含結構M-L-R之式I化合物之方法，其中，M及R各自如先前所闡述且L係為單體或中性聚合物之聚合物之連接體，該中性聚合物係例如選自由以下組成之群之聚合物：乙氧基化多元醇、聚乙烯吡咯啶酮聚合物、聚丙烯、聚烷二醇、多胺，包括其醚、醯胺及酯。在一個實施例中，M係經由第一酯、氧基酯、醯胺、醯胺基、氧基醯胺基、醚、磺醯基、亞磺醯基、磺醯胺、烷氧基、烷硫基、烷基胺基或類似鍵聯偶聯至L。同樣，在此實施例下連接體L係經由第二酯、氧基酯、醯胺、醯胺基、氧基醯胺基、醚、磺醯基、亞磺醯基、磺醯胺、烷氧基、烷硫基、烷基胺基或類似鍵聯偶聯至報導子區R。該兩個鍵聯可相同或不同，例如M可經由酯鍵聯偶聯至L，而L可經由肽鍵聯偶聯至R。在一個實施例中，藉由以下合成具有結構M-L-R之式I化合物：首先使凝膠形成聚合物M與連接體L偶聯以生成前體M-L，且然後使前體M-L與報導子區R偶聯以生成式I化合物。或者，藉由以下合成具有結構M-L-R之式I化合物：首先使連接體L與報導子區R偶聯以生成前體L-R，然後將該前體偶聯至凝膠形成聚合物M以生成式I化合物。此外，可在單一反應室或多個反應室中合成具有結構M-L-R之式I化合物。下文呈現式I化合物之合成中所採用之潛在反應方案之代表性逆合成概述：逆合成方案I診斷及治療方法：在一個實施例中，本文所闡述之組合物、敷料材料、物品、套組及系統可用於診斷或治療傷口，具體而言慢性或經感染傷口。儘管任一類型之傷口均可經診斷及/或治療，但該等實施例尤其適於診斷及治療滲出傷口流體之傷口。舉例而言，傷口可為慢性或急性傷口。慢性傷口之代表性實例包括(例如)靜脈潰瘍、壓瘡、褥瘡潰瘍、糖尿病潰瘍及病因不明之慢性潰瘍。急性傷口之代表性實例包括(例如)急性創傷性撕裂，其可能由有意的手術切口引起。如本文所用術語「傷口流體」係指任一傷口滲出物或其他流體(適宜地實質上不包括血液)，其係存在於傷口之表面或其可藉由吸出、吸收或洗滌自傷口表面去除。測定、量測或定量可適宜地在自患者體內去除之傷口流體上實施，但亦可在傷口流體上原位實施。術語「傷口流體」通常不指遠離傷口位點之血液或組織血漿。傷口流體係哺乳動物傷口流體，適宜地人類傷口流體。在一個實施例中，診斷方法包含使傷口與本文所闡述之至少一種包含式I或式II化合物之組合物、包含該等化合物之敷料材料、包含該等材料或化合物之物品、包含該等材料或化合物之套組或包含該等材料或化合物之系統接觸；及量測與傷口相關之參數。在具體實施例中，所量測參數係傷口特異性水解酶之含量或活性。具體而言，所量測參數係水解酶之活性。在上文所提及之實施例中，量測可原位或非原位進行。如本文所用術語「原位」係指在系統或器件之環境(包括周圍環境)內存在或發生之過程、事件、物體或組份，例如，組合物、物品、系統或器件所接觸之生物材料。作為實例，原位反應可指存在於器件中之各種組份(例如，式I或式II之化合物)之反應，該等組份包括由人類皮膚組織(例如，含有酶之傷口滲出物)提供之組份。該術語與非原位相反，其係指環境外部。在另一實施例中，量測係非原位進行，例如自傷口去除流體用於在本發明之裝置或器件中分析。適宜地，量測係原位進行。在一個診斷實施例中，該方法包含測定報導子(例如傷口特異性酶所作用受質之產物)之含量。更特定而言，或方法包含測定水解酶產物之含量。如本文所用術語「測定」包括量測該水解酶之活性或含量之數值；確立活性或含量係高於抑或低於預定範圍；及/或將活性或含量之數值與對照標準相比較。對照標準可包含測定自未受傷位點或健康個體獲得之生檢材料中之水解酶之含量或活性。在一個特定實施例中，術語「測定」包含量測至少一種選自由以下組成之群之傷口特異性蛋白酶之參數(例如，活性或含量)：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶或其組合；確立該參數是否超過第一預定臨限值；及/或將參數之數值與對照標準相比較。對照標準可包含測定自未受傷位點或健康個體獲得之生檢材料中之蛋白酶之參數。在相關實施例中，術語「測定」包含確立與複數個上述蛋白酶相關之參數之加權平均值(加權總和)是否超過該加權平均值之預定臨限值。在一個具體實施例中，參數係傷口流體中分析物(例如蛋白酶)之活性位準。通常，個別分析物之活性係以單位/mL表示。在另一實施例中，參數係傷口流體中之分析物(例如，蛋白酶)之含量。通常，術語量亦指示具體分析物之活性。在本文中使用時，術語「組合量」或「組合活性」係指將數學函數應用至複數個值而產生之單一數值，例如針對多種個別分析物獲得之彼等量。舉例而言，術語「組合量」或「組合活性」可指一組個別值之總和或乘積。通常，術語「組合量」或「組合活性」係指一組個別值之總和。舉例而言，在適宜實施例中，彈性蛋白酶之量係指彈性蛋白酶樣活性(例如，U/mL)，且金屬蛋白酶(MMP)之量係指各別分析物之總濃度(例如，以ng/mL計)。在本文中使用時，術語「定量」係指在實驗誤差之邊際內量測試樣中具體分析物或受質之絕對數值數量。術語「標記物」或「分析物」係指使用本文所定義之裝置、器件、套組或方法鑑別或測定之任一化學實體。藉由本發明之裝置、器件、套組或方法測定或鑑別之標記物或分析物係上文所提及酶之裂解產物。在本文中使用時，術語「預定範圍」係指熟習此項技術者可瞭解之指示患者之具體子類之數據範圍或分佈。例如，預定範圍可為可充分反應出具體傷口治療(例如抗生素療法)之傷口所特有之數據範圍或分佈。或者，預定範圍可適宜地指可充分反應出具體傷口治療(例如抗生素療法)之傷口所特有之數據範圍。在本文中使用時，術語「預定臨限值」係指熟習此項技術者可基於針對已知癒合及非癒合傷口所測定之含量之統計分析確定的指示非癒合傷口之最小量，例如如上文進一步解釋。為使測試在臨床上有用，應將臨限值設為適當量，使得正確地鑑別出具有高蛋白酶活性之非癒合傷口。增加臨限值將增加僅非癒合傷口超過臨限值之機會。然而，若臨限值過高，則無法鑑別出由高含量蛋白酶引起之非癒合傷口，且在臨床上此將意味著該等傷口將無法接受所需要之蛋白酶調節治療。在本文中使用時，術語「對照標準」或「對照」係指可用作參考或比較以便定義或正規化另一數據點或數據集之數據集或分佈。例如，術語「對照」或「對照標準」可為指示患者之具體子類之數據集或分佈。適宜地，對照標準可為指示癒合或非癒合傷口狀態之數據集或分佈。適宜地，在本發明之其他態樣或實施例中，「對照」或「對照標準」可為可用作容許熟習此項技術者確定傷口可能係對傷口治療(例如抗生素療法)有反應抑或無反應之比較工具之數據集或分佈。在一個實施例中，對照標準係顯示未充分反應傷口治療之患者之數據集或分佈。典型地，對照標準係指示充分反應傷口治療之患者之數據集或分佈。傾向於充分反應如本文所揭示傷口治療之患者所展現之組合之水解酶量或活性低於傾向於不充分反應該治療之患者。舉例而言，傾向於充分反應如本文所揭示傷口治療之患者之至少一種傷口特異性水解酶之組合量更低。在一個實施例中，約5 U/mL至約30 U/mL之臨限值基質金屬蛋白酶(MMP)活性係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約6 U/mL、約7 U/mL、約8 U/mL、約9 U/mL、約10 U/mL、約11 U/mL、約12 U/mL、約13 U/mL、約14 U/mL、約15 U/mL、約16 U/mL、約17 U/mL、約18 U/mL、約19 U/mL、約20 U/mL、約21 U/mL、約22 U/mL、約23 U/mL、約24 U/mL、約25 U/mL或更大。如業內所瞭解，活性單位(U)通常用於闡述酶催化活性，其中單位(U)係指每分鐘催化1微莫耳(μmol)受質轉化之酶之量。因此，1酶單位(U) = 1 μmol/min，其中μmol係指轉化受質之量。在一個實施例中，約5 U/mL至約30 U/mL之臨限值人類嗜中性球彈性蛋白酶活性係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約6 U/mL、約7 U/mL、約8 U/mL、約9 U/mL、約10 U/mL、約11 U/mL、約12 U/mL、約13 U/mL、約14 U/mL、約15 U/mL、約16 U/mL、約17 U/mL、約18 U/mL、約19 U/mL、約20 U/mL、約21 U/mL、約22 U/mL、約23 U/mL、約24 U/mL、約25 U/mL或更大。在一個特定實施例中，至少9.6之臨限值人類嗜中性球彈性蛋白酶活性含量係顯示慢性傷口感染。在一些實施例中，至少22.9 U/mL之人類嗜中性球彈性蛋白酶活性含量係顯示慢性傷口感染。在一個實施例中，約1000 U/mL至約10000 U/mL之臨限值溶菌酶活性含量係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約1100 U/mL、約1200 U/mL、約1300 U/mL、約1400 U/mL、約1500 U/mL、約1600 U/mL、約1700 U/mL、約1800 U/mL、約1900 U/mL、約2000 U/mL、約2100 U/mL、約2200 U/mL、約2300 U/mL、約2400 U/mL、約2500 U/mL、約2600 U/mL、約2700 U/mL、約2800 U/mL、約2900 U/mL、約3000 U/mL、約3250 U/mL、約3500 U/mL、約3750 U/mL、約4000 U/mL、約4250 U/mL、約4500 U/mL、約4750 U/mL、約5000 U/mL、約5250 U/mL、約5500 U/mL、約5750 U/mL、約6000 U/mL或更大。在一個特定實施例中，至少4800 U/mL之溶菌酶活性含量係顯示慢性傷口感染。在一個實施例中，約10 U/mL至約100 U/mL之臨限值細胞自溶酶G活性含量係顯示慢性傷口感染，包括其間之所有值，例如約15 U/mL、約20 U/mL、約25 U/mL、約30 U/mL、約35 U/mL、約40 U/mL、約45 U/mL、約50 U/mL、約55 U/mL、約60 U/mL、約65 U/mL、約70 U/mL、約75 U/mL、約80 U/mL、約85 U/mL、約90 U/mL、約95 U/mL、約100 U/mL、約110 U/mL、約120 U/mL或更大。在一些實施例中，至少50 U/mL、至少40 U/mL、至少30 U/mL、至少20 U/mL、至少15 U/mL或至少10 U/mL之細胞自溶酶G活性含量係顯示慢性傷口感染。本文所揭示之實施例進一步係關於使用本文所闡述之組合物、材料、物品、敷料、套組及/或系統治療慢性或經感染傷口。治療實施例包括使本發明之組合物、材料、物品、敷料、套組、系統或器件與有需要之個體接觸。視情況，該方法可包括確定個體是否對該治療具有反應。熟習此項技術者能夠輕易地鑑別傷口是否「對該治療具有反應」。具體而言，熟習此項技術者將能夠容易地測定出本發明申請專利範圍中鑑別出之蛋白酶含量，該等含量可預測或指示對傷口治療(具體而言對利用包含經氧化纖維素之傷口敷料之治療)之良好反應或較差反應。如本文所用術語「反應性」及「反應」係指視為充分反應傷口治療(具體而言利用藥理學藥劑(例如抗生素)之治療)之傷口。類似地，「非反應性」及「非反應者」係指視為未充分反應傷口治療(具體而言利用藥理學藥劑(例如抗生素)之治療)之傷口。例如，在4週傷口治療後展現好於50%傷口閉合之患者視為對該治療有反應性。在某些實施例中，可利用本文所闡述之組合物、物品、系統或器件同時診斷及治療患者。在本文中使用時，術語「同時」意指一起實施所述目標，例如診斷及治療。在某些實施例中，可利用本文所闡述之組合物、物品、系統或器件依序診斷及治療患者。在本文中使用時，術語「依序」意味著所述目標(例如診斷及治療)在時間或空間上係分開的，例如在治療前診斷或在治療後診斷或其組合，例如第1次診斷==＞治療==＞第2次診斷。本文所闡述之實施例進一步使得照護者或患者能夠快速且可靠地確定傷口是否可能非癒合及基於此確定來選擇適當療法。舉例而言，非癒合傷口可能需要施加專用傷口敷料(例如包含特定治療劑之傷口敷料)來促進癒合。因此，本文所闡述之實施例進一步提供治療傷口(例如慢性或經感染傷口)之方法，該方法包含確定傷口係癒合的抑或非癒合的，若傷口係非癒合的，則之後將包含治療劑之傷口敷料施用至傷口。本文所闡述之實施例提供用於診斷或檢測經感染傷口之方法及分析。該等方法適於檢測細菌傳染原。在一個實施例中，傷口係經革蘭氏陰性細菌(gram-negative)感染。典型革蘭氏陰性細菌包括變形菌門(proteobacteria)，例如大腸桿菌(E. coli )、沙門桿菌屬(Salmonella )、假單胞菌屬(Pseudomonas )及螺桿菌屬(Helicobacter )及藍綠菌(cyanobacteria )。在結合醫學分類時，其包括綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa )及造成擾亂呼吸系統之流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae )、大腸桿菌(Escherichia coli )及造成擾亂泌尿系統之奇異變形桿菌(Proteus mirabilis)及造成擾亂消化系統之幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori )及格特芽孢桿菌(Bacillus Gaertner )及微球菌(micrococci) (例如腦膜炎雙球菌(Neisseria meningitidis )、卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis )及淋病雙球菌(Neisseria gonorrhea ))。在另一實施例中，傷口係經革蘭氏陽性細菌感染。「革蘭氏陽性細菌」意指細胞壁中含有磷壁酸(例如，脂磷壁酸及/或壁磷壁酸)或功能等效物含糖聚合物(例如，鼠李多醣、糖醛酸磷壁酸、阿拉伯半乳聚醣、脂甘露聚醣及脂阿拉伯甘露聚醣)之一或多種細菌。功能等效物含糖聚合物之非限制性實例闡述於Weidenmaier等人，Nature ,6 :276-287, 2008中。細菌包括感染哺乳動物宿主(例如，牛、鼠類、馬、靈長類動物、貓、犬及人類宿主)之病原細菌。該等病原細菌之實例包括(例如)細菌物種之成員，例如類桿菌屬(Bacteroides) 、芽孢梭菌屬(Clostridium )、鏈球菌屬(Streptococcus )、葡萄球菌屬(Staphylococcus )、假單胞菌屬、嗜血桿菌屬、軍團菌屬(Legionella )、分枝桿菌屬(Mycobacterium )、大腸桿菌屬、沙門桿菌屬、志賀桿菌屬(Shigella )、弧菌屬(Vibrio )或李氏菌屬(Listeria )。在人類宿主中造成疾病之病原細菌之一些臨床相關實例包括(但不限於)炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis )、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus )、百日咳博德氏菌(Bordetella pertussis )、伯氏疏螺旋體(Borrelia burgdorferi )、流產布氏桿菌(Brucella aborus )、犬布氏桿菌(Brucella canis )、羊布氏桿菌(Brucella melitensis )、豬布氏桿菌(Brucella suis )、空腸曲狀桿菌(Campylobacter jejuni )、肺炎披衣菌(Chlamydia pneumoniae )、鸚鵡披衣菌(Chlamydia psittaci )、沙眼披衣菌屬(Chlamydia trachomatis )、肉毒芽孢梭菌(Clostridium botulinum )、難養芽胞梭菌(Clostridium difficile )、產氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens )、破傷風芽孢梭菌(Clostridium tetani )、白喉棒狀桿菌(Corynebacterium diphtheriae )、糞腸球菌(Enterococcus faecalis )、耐萬古黴素性糞腸球菌、屎腸球菌(Enterococcus faecium )、大腸桿菌、腸毒性大腸桿菌(ETEC)、腸內病原大腸桿菌、大腸桿菌O157:H7、土倫病弗朗西斯氏菌(Francisella tularensis )、流感嗜血桿菌、幽門螺旋桿菌、嗜肺軍團菌(Legionella pneumophila )、問號鉤端螺旋體(Leptospira interrogans )、單核球增多性李氏菌(Listeria monocytogenes )、麻風分枝桿菌(Mycobacterium leprae )、結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis )、肺炎黴漿菌(Mycoplasma pneumoniae )、淋病雙球菌、腦膜炎雙球菌、變形桿菌屬、綠膿桿菌、落磯山熱立克次體(Rickettsia rickettsii )、傷寒沙門桿菌(Salmonella typhi )、鼠傷寒沙門桿菌(Salmonella typhimurium )、索氏志賀桿菌(Shigella sonnei )、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermis )、腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus )、甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌(MRSA )、耐萬古黴素性金黃色葡萄球菌(VSA) 、無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae )、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae )、釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes )、梅毒密螺旋體(Treponema pallidum )、霍亂弧菌(Vibrio cholerae )及鼠疫耶爾辛氏菌(Yersinia pestis )。在另一實施例中，感染性細菌選自由以下組成之群：難養芽胞梭菌、碳青黴烯抗性腸桿菌科(Enterobacteriaceae ) (CR-Klebsiella spp(CR-克雷伯氏菌屬)；CR-大腸桿菌)及淋病雙球菌。在另一實施例中，感染性細菌選自由以下組成之群：多藥耐性不動桿菌屬(Acinetobacter )、多藥耐性曲狀桿菌屬、產超光譜β-內醯胺酶(ESBL)之腸桿菌科、耐萬古黴素性腸球菌屬、多藥耐性綠膿桿菌、多藥耐性非傷寒樣沙門桿菌屬、多藥耐性傷寒沙門桿菌(Salmonella enterica serovar Typhi )、多藥耐性志賀桿菌屬、甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌(MRSA)、多藥耐性肺炎鏈球菌及耐藥性結核症。在另一實施例中，感染性細菌選自由以下組成之群：耐萬古黴素性金黃色葡萄球菌、耐紅黴素性A組鏈球菌屬、耐克林達黴素性B組鏈球菌屬。在某些實施例中，慢性或經感染傷口係在宿主個體中發現。較佳地，宿主係哺乳動物，例如齧齒類動物、人類、家畜動物、伴侶動物或非家養或野生動物。在一個實施例中，個體可為齧齒類動物，例如小鼠、大鼠、天竺鼠等。在另一實施例中，個體可為家畜動物。適宜家畜動物之非限制性實例可包括豬、牛、馬、山羊、綿羊、駱馬及羊駝。在另一實施例中，個體可為伴侶動物。伴侶動物之非限制性實例可包括寵物，例如狗、貓、兔及鳥。在另一實施例中，個體可為動物園動物。如本文所用，「動物園動物」係指可在動物園中發現之動物。該等物可包括非人類靈長類動物、大型貓科動物、狼及熊。在一個例示性實施例中，個體係人類。在一態樣中，本文提供檢測哺乳動傷口物中之一或多種酶之方法，該方法包含以下步驟：(a)使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b)將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；且(c)定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度。在一些實施例中，檢測哺乳動物傷口中之一或多種酶之含量之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；且(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度。在另一態樣中，本文提供檢測哺乳動物傷口中之一或多種酶之含量之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；且(c) 將定量測定與一或多個參照試樣相比較。在一些實施例中，檢測哺乳動物傷口中之一或多種酶之含量之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；且(c) 將定量測定與一或多個參照試樣相比較。在一態樣中，本文提供檢測哺乳動物傷口中之一或多種蛋白酶之含量之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；且(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度。在一些實施例中，檢測哺乳動物傷口中之一或多種蛋白酶之含量之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；且(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度。在另一態樣中，本文提供檢測哺乳動物傷口中之一或多種蛋白酶之含量之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；且(c) 將定量測定與一或多個參照試樣相比較。在一些實施例中，檢測哺乳動物傷口中之一或多種蛋白酶之含量之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；且(c) 將定量測定與一或多個參照試樣相比較。在另一態樣中，本文提供診斷哺乳動物之慢性傷口之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；且(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度。在一些實施例中，診斷哺乳動物之慢性傷口之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；且(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度。在另一態樣中，本文提供診斷哺乳動物之慢性傷口之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；且(c) 將定量測定與一或多個參照試樣相比較。在一些實施例中，診斷哺乳動物之慢性傷口之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；且(c) 將定量測定與一或多個參照試樣相比較。在另一態樣中，本文提供治療哺乳動物之傷口之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；及(d)向哺乳動物投與醫學治療；其中當報導分子之濃度指示哺乳動物傷口係慢性的時，醫學治療僅包含抗生素療法。在一些實施例中，治療哺乳動物之傷口之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣視覺相比較；(c) 定性測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；及(d)向哺乳動物投與醫學治療；其中當報導分子之濃度指示哺乳動物傷口係慢性的時，醫學治療僅包含抗生素療法。在另一態樣中，本文提供治療哺乳動物之傷口之方法，該方法包含以下步驟：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；(c) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣相比較；及(d)向哺乳動物投與醫學治療；其中當報導分子之濃度指示哺乳動物傷口係慢性的時，醫學治療僅包含抗生素療法。在一些實施例中，治療哺乳動物之傷口之方法基本上由以下步驟組成：(a) 使本文所闡述之傷口敷料材料與哺乳動物傷口接觸；(b) 定量測定與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料中之報導分子之濃度；(c) 將與哺乳動物傷口接觸之傷口敷料材料與一或多個參照試樣相比較；及(d)向哺乳動物投與醫學治療；其中當報導分子之濃度指示哺乳動物傷口係慢性的時，醫學治療僅包含抗生素療法。較佳地，診斷及治療係原位執行。因此，本文所闡述之實施例容許以容易、非侵襲性方式診斷及治療傷口。例如，診斷可即時進行且可將治療施用至經感染傷口或患者(全身)，且即時監測傷口治療之進展，例如由於傷口-癒合由報導分子生成之信之耗散號。實例本文所闡述之結構、材料、組合物及方法意欲為本發明之代表性實例，且將瞭解本發明之範圍並非限於實例之範圍。熟習此項技術者將認識到本發明可利用所揭示結構、材料、組合物及方法之變化來實踐，且該等變化視為在本發明之界限內。縮寫之清單：除非另有指示，否則如上文及本發明說明通篇所用之以下縮寫應理解為具有以下含義： ACN或MeCN 乙腈 Bn 苄基 BOC或Boc 胺基甲酸第三丁基酯t -Bu 第三丁基 CMC 羧甲基纖維素 DCE 二氯乙烷(ClCH₂ CH₂ Cl) DCM 二氯甲烷(CH₂ Cl₂ ) DIPEA或DIEA 二異丙基乙胺 DMAP 4-(N,N -二甲基胺基)吡啶 DMF 二甲基甲醯胺 DMSO 二甲亞碸 equiv 當量 Et 乙基 EtOH 乙醇 EtOAc 乙酸乙酯 Fmoc 胺基甲酸茀基甲基酯 HBTUN,N,N’,N’ -四甲基-O -(1H -苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸 HPLC 高效液相層析 Me 甲基 MeOH 甲醇 MS 質譜 NMR 核磁共振 PBS 磷酸鹽緩衝鹽水 RP-HPLC 反相高壓液相層析 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃對於下文實例所顯示之聚合物，n係選自400至3200之整數。實例1：聚合物1之製備(使用CMC纖維)將羧甲基纖維素鈉(NaCMC)纖維(443 mg, 1.08 mmol)溶解於去離子水(44 ml)中，以得到1%溶液。添加Dowex 650C monosphere離子交換樹脂以便提供酸化CMC (CMC-H)。藉由過濾去除monosphere且然後添加四丁基氫氧化銨(TBAH) 40% (aq)直至pH為8-9。將所得溶液攪拌30 min，之後凍乾過夜。在氮下在攪拌下將凍乾物質(0.38 g)溶解於40 ml無水DMF中並經約1 h之時段輕微加熱。所得溶液係渾濁且灰白色的。使溶液冷卻至約4℃。向此攪拌溶液中添加2-氯-N-甲基碘化吡啶鎓(CMP-I) (0.33 g, 1.3 mmol)。此後不久，亦連同3滴無水DCM及幾滴無水三乙胺一起添加化合物1-b (0.5 g, 2 mmol)。在4℃下保持反應混合物並攪拌3 h，此後其變得更暗，幾乎為褐色。緩慢添加95%丙酮(aq) (80ml)並在4℃下攪拌20 min且然後在4℃下保持過夜。自褐色溶液過濾出所得白色沈澱物。然後藉由以下方法用丙酮將材料洗滌5次：添加40 ml 99.5%丙酮，混合並音波處理約1 min，過濾掉丙酮並收集固體產物。此產生固體狀、灰白色海綿狀物質。在減壓下去除剩餘丙酮。相繼在乙醇(20 ml × 1)及丙酮(20 ml × 3)中洗滌固體。在每次洗滌期間，將洗滌溶液音波處理1 min，之後過濾以收集固體。將固體(化合物1-c)置於高真空旋轉蒸發器上並保持45 min。重量 = 0.288 g。FTIR：3360、3320 (N-H/ O-H)、2875 (C-H)、1650 (具有肩峰) (BOC之醯胺C=O)、1590 (CMC之C=O)。為評價化合物1-c之溶解性，遵循以下方法：將化合物1-c稱重至質譜小瓶中(約0.0013 g/小瓶)。將約1 ml所需溶劑添加至小瓶中。在以下時間點視覺評價試樣之溶解性：最初、在40℃下輕微加熱1 min之後、在音波處理10 sec之後及在RT下過夜之後。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料。對化合物1-c (0.05g, 0.11089 mmol)進行稱重並將其切割成儘可能最小的片。添加於DCM中之10% TFA(10ml)並將混合物在RT下攪拌1 h。使用高真空旋轉蒸發器去除揮發性溶劑及試劑。使剩餘固體經受共沸三次以便藉由降低其沸點去除任何剩餘TFA：將甲苯(10 ml × 3)添加至固體產物中並加以攪拌，之後使用高真空旋轉蒸發器去除，以得到灰白色固體狀聚合物1。重量= 0.0524 g。FTIR: 3326 (N-H/ O-H), 2891 (C-H), 1668 (C=O胺基甲酸酯伸展)。元素分析(TFA鹽)：碳：預計約43%；實際 = 38.90%。氫：預計約5.8%；實際 = 5.43%。氮：預計約4.4%；實際 = 0.28%。取代程度為0.28/ 4.38 = 0.06。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物1之溶解性。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料。使用基於寧海準(ninhydrin)之Kaiser測試評價聚合物1之胺化之定性測定。製備三種試劑：(1) 於10 ml EtOH中之500 mg (0.5 g)寧海準；(2) 於20 ml EtOH中之80 g酚；且(3) 用吡啶稀釋至100 mL之2 ml 0.001 M KCN。將聚合物1之試樣(10-20 mg)置於圓底燒瓶中。將3至4滴每一試劑添加至燒瓶中。使用油浴及回流冷凝器將燒瓶加熱至100℃並攪拌5 min。視覺觀察任一色彩變化。檢測到深藍色/紫色，指示存在胺。實例2：聚合物2之製備製備Fmoc-Phe-OH (0.0267 g, 0.069 mmol)、HBTU (0.0262 g, 0.069 mmol)、DIPEA (0.015 ml, 0.090 mmol)及無水DMF (0.82 ml)之溶液。用10 µm聚乙烯玻料裝配15-ml塑膠分離管柱並附接魯爾尖端(luer tip)。將聚合物1 (0.034 g, 0.097 mmol)添加至管柱中，隨後胺基酸溶液。將蓋置於管柱上並用石蠟膜進一步密封。在RT下將管柱置於血液轉子上過夜。使用減壓瀝乾溶液並用EtOH洗滌固體產物，以得到白色固體狀聚合物2。重量 = 0.0266 g。使用Kaiser測試來證實末端胺之不存在。FTIR：3324 (N-H/ O-H), 3281 (O-H), 2898 (C-H), 1720 (芳香族C=O), 1666 (C=O胺基甲酸酯伸展), 1660, (Fmoc之C=O醯胺伸展)。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物2之溶解性。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料。實例3：聚合物3之製備將聚合物2置於六氫吡啶: DMF之溶液(1:4 v/v, 6 ml)中並保持約2 h。然後用EtOH洗滌所得去保護之產物，之後實施Kaiser測試以證實游離胺之存在。將此去保護之產物(0.080 g, 0.15 mmol)添加至裝配有10 µm聚乙烯玻料及魯爾尖端之15 ml塑膠分離管柱中。製備Fmoc-Phe-OH (0.063 g, 0.16 mmol)、HBTU (0.062 g, 0.16 mmol)、DIPEA (0.23 ml, 1.8 mmol)及無水DMF (6 ml)之溶液並將其添加至管柱中。將蓋置於管柱上並用石蠟膜進一步密封。在RT下將管柱置於血液轉子上過夜。使用減壓瀝乾溶液並用EtOH (10 ml ×3)洗滌固體產物，以得到紅色固體狀偶合產物。重量 = 0.0691 g。使用Kaiser測試來證實末端胺之不存在。用DCM洗滌偶合產物。FTIR：3315 (N-H/ O-H), 2866 (C-H),1730 (芳香族C=O), 1651+肩峰(C=O, F之醯胺)及/或(F-Fmoc之C=O醯胺伸展), 1587 (C=O胺基甲酸酯伸展)。為去除Fmoc基團，將偶合產物置於六氫吡啶: DMF之溶液(1:4 v/v, 6 ml)中並保持約2 h。然後用EtOH (10 ml ×3)及DCM (10 ml)洗滌所得去保護之產物，以得到脆性紅色固體狀聚合物3。重量 = 0.0638 g，產率 = 62%。使用Kaiser測試來證實末端胺之存在。FTIR：3315(N-H/ O-H), 2866 (C-H), 1730極小峰(芳香族C=O), 1651無肩峰(C=O, F之醯胺), 1587 (C=O胺基甲酸酯伸展)。[注意：FTIR表明最終產物上留下少量Fmoc]。實例4：聚合物4之製備中間體4-c之合成將Fmoc-Lys-OH•HCl (0.0405g, 0.100 mmol)置於圓底燒瓶中，向其中逐滴添加1,4-二噁烷: 10% K₂ CO₃ (aq)之5:2混合物(3 ml)。攪拌混合物並將丹磺醯氯(0.033 g, 0.10 mmol)添加至混合物中，然後將其在與大氣相通及RT下攪拌過夜。用150 ml水稀釋溶液。分離各層，並用乙醚(10 ml ×3)萃取水層。乾燥合併之有機層並濃縮。使用急速管柱層析(10:90 MeOH/DCM)純化粗製物質以得到化合物4-c。¹ H NMR (400 MHz，CDCl₃ 及一滴CD₃ OD) 8.55, 7.79, 7.65, 7.52, 7.26, 7.17, 6.69, 6.59, 5.19, 5.06, 4.78, 4.28, 4.17, 4.08, 3.97, 3.57, 3.55, 3.35, 3.05, 2.87, 2.14, 1.99, 1.63, 1.41, 1.21, 0.83, 0.03。聚合物4之合成製備化合物4-c (0.0160 g, 0.024 mmol)、HBTU (0.00925 g, 0.0244 mmol)、DIPEA (0.23 ml, 1.8 mmol)及無水DMF (6 ml)之溶液。用10µm聚乙烯玻料及魯爾尖端裝配15 ml塑膠分離管柱。將聚合物3 (0.0230 g, 0.084 mmol)添加至管柱中，隨後胺基酸溶液。將蓋置於管柱上並用石蠟膜進一步密封。在RT下將管柱置於血液轉子上過夜。使用減壓瀝乾溶液並用EtOH (10 ml×3)洗滌固體產物，以得到紅色固體狀偶合產物，用DCM洗滌洗滌該產物。使用Kaiser測試來證實末端胺之不存在。FTIR：3346 (N-H/ O-H), 2912 (C-H), 1730 (丹磺醯之C=C芳香族基團), 1652 (C=O, 胺基酸之醯胺), 1591 (C=O胺基甲酸酯)。將偶合產物置於六氫吡啶: DMF (1:4 v/v)之溶液(6 ml)中並保持約2 h。然後用EtOH (10 ml×3)隨後DCM (10 ml)洗滌所得去保護之產物，以得到紅色/褐色脆性固體狀聚合物4。重量 = 0.0368 g，產率= 56%。實施Kaiser測試來證實末端胺之存在。FTIR：3335 (N-H/ O-H), 2918 (C-H), 1651 (C=O, 胺基酸或Fmoc之醯胺), 1589 (C=O胺基甲酸酯)。實例5：聚合物5之製備(使用粉末狀CMC)將DoS 0.7之羧甲基纖維素鈉(NaCMC) (2.0 g, 8.33 mmol)溶解於去離子水(180 mL)中，以得到1%溶液。經10分鐘在攪拌下添加Dowex 650C monosphere離子交換樹脂。藉由過濾去除monosphere，之後在0.1mL等分試樣中添加四丁基氫氧化銨(TBAH) 40% (aq)直至pH為8-9 (3.5 mL, 36.14 mmol)。將所得溶液攪拌30分鐘，之後凍乾超過7天。經約2小時之時段將凍乾材料溶解於無水DMF (240 mL)中，此需要在氮氣氛、攪拌及輕微加熱下進行。使溶液冷卻至約4℃，之後在劇烈攪拌下添加2-氯-N-甲基碘化吡啶鎓(CMP-I) (1.5 g, 5.8 mmol)。將2,2’-(伸乙基二氧基)雙(乙胺) (1.3567 g, 9.17 mmol)與無水三乙胺(5mL)一起添加至反應中。在4℃下保持反應物並將其攪拌最短3小時，此後添加95%乙醇(aq) (80 mL)並在4℃下攪拌10分鐘。在攪拌下緩慢添加99%丙酮(200 mL)以沈澱產物，過濾該產物並用丙酮(3 × 200 mL)洗滌。在真空中濃縮產物以得到灰白色固體。重量 = 1.908 g，產率 =68 %。FTIR：(ν_max / cm^-1 ) 3267 (N-H/ O-H), 2916/ 2873 (C-H), 1739 (丙酮), 1650 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1588 (CMC之C=O), 1401/ 1314/ 1257/ 1037。¹³ C CP MAS NMR：CMC 0.7 DoS (起始材料)：δ C (13,000Hz, CP MAS) 61.7 (C6), 74.5 (C7, C2, C5), 82.5 (肩峰, C3), 97.0 (C4), 103.3 (C1), 177 (C=O)；CMC- PEG二-胺：δC (13,000Hz, CP MAS) 13.4 (C14), 20.1 (未指派), 23.4 (未指派), 30.6 (C9), 61.7 (C6), 70 (肩峰, C7), 74.5 (C2, C5), 82.5 (C3), 95 (C4), 103.3 (C1), 113 (未指派), 142 (未指派), 152 (未指派), 169.7 (連接體之C=O), 177.1 (CMC之C=O)。元素分析：若原材料之DoS為0.7則產物預計：質量306 g/mol：C 45%、H 7%、N 6%；(d) 實際：C 43%、H 7%、N 4%。因此，在所有單體中，約47%已經取代且現在含有連接體基團。定性Kaiser測試：陽性，指示游離胺之存在。根據基於作為標準參考之纈胺酸之校正曲線，在570 nm下獲得之UV數據等於4.6 μmol胺。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物5之溶解性。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料實例6：聚合物6之製備在過濾管中將聚合物5浸泡於無水DMF (6 mL)中並保持20 min。連同DIPEA (0.2 mL, 0.8571 mmol)一起添加化合物4-c (0.0416g, 0.063 mmol)及HBTU (0.2893g, 0.8571 mmol)。固定該管並在RT下在實驗室混合器上旋轉過夜。過濾上清液並用DMF (3 × 3 mL)及甲醇(3 × 5 mL)洗滌剩餘固體，之後在真空中乾燥。重量 = 0.1285 g (45%產率)。使用Kaiser測試來證實游離胺之存在。FTIR：3313 (N-H, O-H), 2862 (O-H), 1747 (醯胺之C=O), 1587 (CMC之C=O), 1404/ 1315 / 1023。元素分析：碳：預計51%；實際 = 40%。氫：預計5%；實際 = 6%。氮：預計5%；實際 = 4%。以下列方式檢查聚合物6之溶解性。將少量聚合物6置於兩個單獨玻璃底皮氏培養皿(petri dish)中。用pH 4一般實驗室緩衝液或pH 9 K₂ HPO₄ / MgCl₂ 緩衝液(各20 µL)使材料飽和。在Zeiss Axioimager光顯微鏡10倍放大倍數光學透鏡加10倍放大倍數下在接目鏡上觀察每一者。試樣在與緩衝液接觸時形成水凝膠。在顯微鏡下，粉末聚集物似乎膠凝化且含有丹磺醯之紅色。一些區域之色彩濃於其他區域，但在整個試樣內均觀察到色彩分佈。針對起始材料化合物4-c及聚合物5重複此實驗。在聚合物5試樣中沒有可見色彩；觀察到水凝膠粉末結構。化合物4-c之試樣遍及各處為紅色且未形成水凝膠。實例7：聚合物7之製備在攪拌下將羧甲基纖維素鈉(NaCMC)粉末(2.0 mg, 8.3 mmol, DoS = 0.7)溶解於去離子水(200 mL)中，音波處理60 sec，且在30 min之過程內輕微加熱。在攪拌下將1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(EDC) (1.92 g, 10.01 mmol)添加至溶液中。發現pH為8並藉助添加1.0 M HCl (3滴)將其調節至pH = 6。在攪拌下將L-半胱胺酸(0.50 g, 4.1 mmol)添加至反應物中。然後發現pH為8並使用HCl再次將其調節至達到pH 6 (約1 mL)。將反應物攪拌過夜，之後針對1 M HCl (700 mL)、然後1 M HCl加1% NaCl (700 mL)、然後0.5 M HCl (700 mL)實施透析(12-14 KDa Medicell透析膜)，每次透析均在黑暗中在10℃下實施60 min。將所得溶液凍乾，以得到聚合物7。FTIR：3296 (N-H, O-H), 2972/ 2930 (C-H), 2733 (小峰), 2522 (C之S-H), 2089 (極小峰), 1730 (Cys之C=O酸), 1681 (醯胺), 1633 (CMC之C=O), 1469 (肩峰), 1382/ 1346/ 1221/ 1107, 1051。¹³ C CP MAS NMR：14 (C11), 18 (未指派), 24 (未指派), 43 (C9), 58 (未指派), 62 (C6), 74 (C2, 3, 5, 7), 82 (C4), 103 (C1), 173 (醯胺之C8羰基)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量299 g/mol：C 40%, H 6%, N 3%, S 6%；實際：C 34%, H 8%, N 8%, S 1.4%。因此，在所有單體中，約16%含有連接體基團。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物7之溶解性。發現聚合物7不可溶於水、DMF、丙酮、MeOH、EtOH及DCM中。實例8：聚合物8之製備將聚合物5 (1.00 g, 2.86 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (25 ml)混合20 min。在攪拌及RT、對空氣開放下添加Fmoc-Cys(StBu)-OH (3.7 g, 8.6 mmol)、HBTU (2.87 g, 8.57 mmol)及DIPEA (1.10 ml, 8.57 mmol) (使用離心管及實驗室轉子促進混合過夜)。對混合物進行音波處理30 sec，之後容許攪拌過夜。過濾固體並用DCM (20 mL ×5)及MeOH (20 mL ×5)洗滌。在真空下乾燥所得產物以得到灰白色固體狀化合物8-b。¹³ C CP MAS NMR：20 (未指派), 30 (C9), 32 (C19), 39 (C10,11,12,13), 47 (C18, 22), 55 (C16), 61 (C6), 70-74 (寬峰，C2,3,5,7), 82 (肩峰, C4), 92 (C17), 96 (未指派), 103 (C1), 120 (C24), 127 (C25,26,27), 141 (C28), 145 (肩峰, C23), 157 (C20, C=O胺基甲酸酯), 171 (醯胺之C8羰基), 177 (CMC之C8羰基), 191 (未指派), 221/227 (可能污染物)。將化合物8-b (0.5 g)在六氫吡啶: DMF (20:80 v/v)之溶液(10 ml)中置於實驗室轉子上並保持約2 h。然後用EtOH (50 mL×3)及DCM (50 mL×3)洗滌所得去保護之產物以得到灰白色固體狀化合物8-c。重複此過程以完全去除Fmoc基團。將化合物8-c (0.30 g, 0.54 mmol)添加至圓底燒瓶中並用氮氣吹掃。將參(2-羧基乙基)膦(TCEP) (0.307 g, 1.07 mmol)溶解於去離子水(1.3 ml)中並將其在攪拌下連同MeOH (2.6 ml)一起添加至反應物中。將系統在氮下在RT下在攪拌下保持1 h，之後加以過濾並用以下溶液洗滌：2:1 MeOH/水(90 ml)、1:2 MeOH/水(90 ml)、100%水(90 ml)、100% MeOH (90 ml)。在真空中乾燥所得固體，以得到灰白色固體狀聚合物8。重複此過程以完全還原二硫化物。¹³ C CP MAS NMR：30 (C9, 19), 39 (C10,11,12,13), 47 (C18, 22), 54 (C16), 60 (C6), 70-74 (寬峰，C2,3,5,7), 82 (肩峰, C4), 92 (C17), 97 (未指派), 102 (C1), 120 (C24), 127 (C25,26,27), 141 (C28), 156 (C20, C=O胺基甲酸酯), 171 (醯胺之C8羰基), 177 (CMC之C8羰基), 191 (未指派), 221(未指派)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量390 g/mol：C 43%, H 6%, N 6%, S 5%；實際：C 46%, H 7%, N 4%, S 3.5%。因此，在所有單體中，約50%含有連接體基團。實例9：聚合物9之製備在輕微加熱、攪拌及音波處理下將聚合物5 (1.0 g, 2.714 mmol)分散於PBS (25 mL)中。用氮氣吹掃反應器皿。向喬特試劑(Traut’s reagent) (0.600 g, 4.304 mmol)於PBS (50 mL)中之溶液中添加EDTA (0.044g, 0.15 mmol)。在完全溶解之後，將此溶液添加至反應混合物中，將其在RT下在氮氣氛下攪拌1小時。藉由過濾分離所得產物並用PBS (3 × 10 mL)及甲醇(3 × 10 mL)洗滌。然後在真空中乾燥白色/灰白色粉末狀固體產物並在氮下儲存。重量 = 1.2413 g (91%)。來自Ellman測試之黃色指示可能在未反應之剩餘起始材料中仍存在一些游離硫醇。在定量測試中，存在約0.06 mmol/g S-H基團。FTIR：3315 (N-H/ O-H), 2957/ 2934/ 2870 (C-H), 1644 (C=O，偶合產物之醯胺), 1593 (CMC之C=O), 1412/ 1322/ 1022。對於S-H在2059 cm^-1 下存在極小峰。δ C (13,000Hz, CP MAS): 176.7 (C8, CMC之C=O), 172.2 (C8, 醯胺之C=O), 156.0 (C15, 小峰) 121.0, 103.0 (C1), 81.3 (C7, 肩峰), 74.4 (C2,C3,C4,C5), 61.7 (C6), 38.9加肩峰(C9,C10,C11,C12,C13,C14)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量414 g mol^-1 ：C 43%, H 7%, N 6%, S 4%。實際：C 40%, H 7 %, N 4%。因此，在所有單體中，約47%含有連接體基團。實例10：聚合物10之製備將聚合物9 (0.150g, 0.316 mmol)稱重至圓底燒瓶中並用氮吹掃。將Ellman試劑(0.375g, 0.947 mmol)溶解於PBS (20 mL)中並將其添加至聚合物9中。將反應物在RT下攪拌2 h。過濾中間體二硫化物產物10-a並用PBS (3 × 20 mL)及甲醇(1 × 20 mL)洗滌，之後在真空中乾燥以產生蒼白色/黃色粉末狀固體狀中間體10-a。重量 = 0.133 g (60%產率)。來自Ellman測試之黃色指示可能在未反應之剩餘起始材料中仍存在一些游離硫醇。在定量測試中，存在約0.33 mmol/g S-H基團。FTIR：3310 (N-H/ O-H), 2911/ 2875 (C-H), 1727 (C=O羧酸), 1648 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1592 (CMC之C=O)。對於S-H在約2059 cm^-1 下存在極小峰。δ C (10,000Hz, CP MAS)：222.37 (旋轉側帶), 172.5之肩峰(C8, CMC之C=O), 172.5 (C8，醯胺之C=O，可能還有一些Ellman試劑上之酸基團), 156.0 (C15, 小峰) 123.7 (旋轉側帶), 144.5 (Ellman試劑之芳香族區), 103.0 (C1), 96.79, 82.25 (C7, 肩峰), 74.5 (C2, C3, C4, C5), 61.4 (C6), 39.3加肩峰(C9, C10, C11, C12, C13, C14), 32.2尖峰(可能污染物)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量553 g mol^-1 ：C 43%, H 6%, N 6%, S 6%。實際：C 39%, H 6 %, N 4%, S 1.45%。因此，在所有單體中，約17%含有連接體基團。合併中間體二硫化物產物10-a (0.1g, 0.1422 mmol)、巰基苯甲酸(0.11g, 0.7112 mmol)及甲醇:水(4:1 比率, 5 mL)並將其在RT下在氮氣氛下攪拌2 h。過濾所得產物並用甲醇(3 × 10 mL)、DCM (3 × 10 mL)洗滌且用甲醇(3 × 10mL)進一步洗滌，之後在真空中乾燥以產生黃色固體粉末狀聚合物10。重量 = 0.0821 g (87%產率)。來自Ellman測試之鮮黃色指示可能在未反應之剩餘起始材料中仍存在一些游離硫醇。在定量測試中，存在約2.97 mmol/g S-H基團。FTIR：3293 (N-H/ O-H), 2910/ 2881/ 2849 (C-H), 1718 (C=O羧酸), 1638 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1586 (CMC之C=O), 1553。δ C (10,000Hz, CP MAS)：177.4 (C8, CMC之C=O), 171.9 (C8, 醯胺之C=O, 可能還有一些在苯甲酸上之酸基團), 130/143小寬峰, 102.7 (C1), 96.79, 81.6 (C7, 肩峰), 74.1 (C2, C3, C4, C5), 62.5 (C6), 39.0加肩峰(C9, C10, C11, C12, C13, C14), 32.1尖峰(可能污染物)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量520 g mol^-1 ：C 44%, H 6%, N 6%, S 6%。實際：C 37%, H 6 %, N 3%。在水中實施另一洗滌順序以確保自呈膨脹(水凝膠樣)狀態之結構洗滌任何副產物。使用pH 9磷酸鹽緩衝液(100 mL)、去離子水(20 mL)、pH 9磷酸鹽緩衝液(5 mL)及最後甲醇(20 mL)洗滌固體，然後在真空中乾燥該固體以得到白色/乳霜色固體粉末狀聚合物10。重量 = 0.0482 g (51%產率)。來自Ellman測試之淺黃色指示可能在未反應之剩餘起始材料中仍存在一些游離硫醇。在定量測試中，存在約0.31 mmol/g S-H基團。FTIR：3267 (N-H/ O-H), 2904/ 2866 (C-H), 2119小峰(S-H), 1638 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1587 (CMC之C=O), 1547。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量520 g mol^-1 ：C 44%, H 6%, N 6%, S 6%。實際：C 38%, H 6%, N 3%, S 0.65%。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物9及10之溶解性。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料實例11：聚合物11之製備將胺基苯基螢光黃(0.005g, 0.0180 mmol)、HBTU (0.0136g, 0.036 mmol)及聚合物5 (0.013g, 0.036 mmol)添加至帶有攪拌棒之25mL RBF中並用N₂ (g)吹掃。添加無水DMF (5 mL)並將反應物在RT攪拌過夜，用箔覆蓋以保護避光。反應溶液經過濾管過濾並用DMF洗幾次。上清液維持橙色；將其與洗液一起保存並在真空中乾燥。回收固體產物並在真空下乾燥。為使偶合達到最大，且若上清液及洗液具有一些橙色，使用自上清液及洗液回收之固體作為反應物重複反應。重量 = 0.012 g (43%產率)。FTIR：3367 (N-H/O-H), 2932 (C-H), 1702, 1655 (C=O, 醯胺), 1555 肩峰(CMC之C=O), 1494 (APF之芳香族C-C), 1437/ 1413/ 1387/ 1308, 1194 (C-C), 1106 (APF之C-O), 838 (芳香族面外C-H彎曲)。實例12：聚合物12之製備最初用TCEP處理聚合物8以去偶合任何已形成之二硫鍵。將TCEP (0.0243 g, 0.0848 mmol, 4當量)溶解於1 mL水中並添加至聚合物8 (0.01 g, 0.0212 mmol)中並在RT攪拌30 min。過濾固體並用水(3 × 10 mL)洗並冷凍乾燥，得到固體灰白色/乳酪色粉末，然後用DMF (3 × 10 mL)洗該粉末。將化合物12-a (0.0108 g, 0.0212 mmol, 1當量)溶解於3 mL無水DMF中並添加至已經N₂ (g)吹掃之聚合物8中。將反應物在RT攪拌過夜，用箔覆蓋以保護避光。在攪拌過夜之後，反應混合物變成紅色，且當過濾時，僅回收極少量白色固體材料(0.0022 g)。在真空中濃縮溶液相，得到紅色蠟狀固體粗製聚合物12。產物及起始材料可能存在於粗製聚合物12中，且因此需洗以進一步純化粗製材料。混合物不溶於己烷、乙醇及氯仿中。然而，當浸於去離子水中及在輕微加熱及音波處理之後，上清液變成橙色，其可能係起始材料化合物12-a。使溶液經以下步驟5次：(1)添加去離子水(5 mL)，(2)在攪拌下輕微加熱，(3)1min音波處理重複3次，及(4)經過濾管柱及玻料過濾器過濾。以另外50 mL去離子水洗固體試樣。然後過濾並冷凍乾燥過夜以去除水。產物之重量：0.01701 g (85%產率)。FTIR：3347 (N-H/O-H), 2915/ 2851 (C-H), 1756 (酯之C=O /螢光黃之C=O), 1716 (酯之C=O/ 螢光黃之C=O), 1643 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1608 (CMC之C=O/芳香族C=C伸展), 1492 (芳香族C=C伸展), 1369 (酯之C-O伸展), 1246 (C-O伸展), 1152 (t -OH), 1110 (酯之C-O/ -OH), 842 (芳香族面外C-H彎曲)。聚合物 12 之酶效能 用酯酶(約50單位/mL，此係藉由在PBS (0.99 mL)中混合純淨酯酶(0.01 mL)達成)檢查酶效能。螢光顯微鏡術指示在聚合物12之試樣與對照試樣(於沒有酶之PBS中之聚合物12)之間明顯可觀察到螢光差異，證實酶對聚合物有活性以自所附接螢光黃釋放酯基團。使用共焦顯微鏡可以可視化聚合物12與對照試樣之間之螢光差異。顯微鏡設置：智能增益 = 716 v，智能偏移= -2.1 %，放大倍數 = 20倍，針孔大小= 105.05 µm。為定量及準確測定酶效能，使用96孔板及讀板儀(Fluostar Optima BMG Labtech，其中激發設為485 nm，發射設為590 nm且增益設為1500)設置另一實驗。將聚合物12分散於320 µL PBS中並進行渦旋混合。將40 µL懸浮液分配至8個孔中，並將量測視為基線讀數。製備以下溶液：於PBS中之酯酶58單位/mL (弱酶溶液)、於PBS中之酯酶116單位/mL (強酶溶液)、1 M NaOH (aq)。 N=2個孔僅將40 µL PBS添加(對照)至測試分散液中。 N=2個孔將40 µL弱酶溶液吸量至測試分散液中。 N=2個孔將40 µL強酶溶液吸量至測試分散液中。 N=2個孔將40 µL 1 M NaOH溶液吸量至測試分散液中。在添加至最後孔中之後立即記錄另一螢光讀數，且此後在5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55及60分鐘之後進行記錄。然後覆蓋板並靜置過夜以便在24 h之後獲得讀數。然而，螢光檢測器已達到其限值且因此在此時間點未達成有意義的結果。表2及圖1顯示每一時間點之螢光讀數減去基線讀數(僅粒子懸浮液)。表2. 經1小時時段陰性對照發射之螢光略有增加。如所預計，弱及強酯酶溶液之螢光隨時間增加。強酯酶溶液似乎已達到最大螢光強度，此可藉由儀器在約30 min測得(機器飽和點為65000)。圖1顯示強酯酶長達30 min之圖形且繪製此酯酶及弱酯酶在整個60 min內之趨勢線之圖形。在此實驗之後，將每一溶液(n=僅1)自其孔吸量出來並將其吸量至玻璃底顯微鏡孔中以藉由肉眼進行檢查。亦將其置於設為長波長設置之UV室中並捕獲影像(圖2a-c)。綜上所述，此證據表明合成方法係成功的且酶裂解步驟給出陽性反應，此可藉由螢光光譜來定量。聚合物12之試樣即便在不添加酯酶之情況下亦發螢光，此表明偶合或許已經有點過度。實例13：聚合物13之製備(使用CMC纖維)將具有約0.2-0.3DoS之NaCMC纖維(2 × AQUACEL敷料10×10 cm) (1.97 g, 8.33 mmol)手工分成小的、開放纖維，並將其分散於乙醇/去離子水(80:20 v/v)之溶液(180 mL)中。按順序添加Dowex 650C monosphere離子交換樹脂，以得到酸化CMC (CMC-H)並混合約30 min。藉由過濾小心去除monosphere，並添加四丁基氫氧化銨(TBAH) 40% (aq)直至pH為8-9。將所得溶液攪拌30 min，之後在真空中濃縮。在氮下將乾燥材料溶解於無水DMF (150 mL)中。需要攪拌過夜且所得溶液之黏性極強且具有澄清/黃色。另外添加無水DMF (100mL)以便降低黏度並使混合物冷卻至約4℃並加以攪拌，之後添加2-氯-N -甲基碘化吡啶鎓(CMP-I) (1.4875 g, 5.8 mmol)。不久以後，連同無水三乙胺(5 mL)一起添加化合物5-b (1.3567 g, 9.17 mmol)。將反應物保存在4℃下並攪拌過夜。過濾固體且然後用丙酮(3 × 100 mL)、然後DMF (3 × 100 mL)洗滌，在洗滌步驟期間實施音波處理，以便促進纖維分散於洗滌溶液中。在真空中進一步乾燥固體以產生聚合物13之灰白色蓬鬆/粉狀纖維。重量 = 1.8365 g (60%產率)。使用Kaiser測試來證實末端胺之存在(570 nm下之讀數等於3.08 µmol胺)。SS NMR：δ(10,000Hz, CP MAS) 176.9 (C=O) 153.4, 142.4, 104.1 (C1), 96.8 (C4), 83.6 (C3), 74.2 (C7, C2, C5),69.4 (C6), 61.9 (C6, 肩峰)。FTIR：3325 (N-H/ O-H), 2872 (C-H), 1648 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1589 (CMC之C=O), 1543, 1408/ 1367/ 1265/ 1022。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量318 g mol^-1 ：C 45%, H 7%, N 6%。實際：C 42.5%, H 7%, N 3%。因此，在所有單體中，約35%含有連接體基團。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物13之溶解性。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料。實例14：聚合物14之製備在氮氣氛下將聚合物13 (0.250 g, 1.396 mmol)置於RB燒瓶中。在氮氣氛下將化合物14-a (90 mg, 0.679 mmol)溶解於無水DMF (5 mL)中並在攪拌下將其添加至聚合物13中。在RT下在氮氣氛下將反應混合物攪拌90 min，之後過濾並用DMF (5 × 5 mL)及甲醇(5 × 5 mL)洗滌。在真空中濃縮產物，以產生灰白色粉狀固體狀聚合物14。重量 = 0.1852 g (52%產率)。使用Kaiser測試來證實末端胺之存在(570 nm下之讀數等於1.86 µmol胺)。FTIR：3251 (N-H/ O-H), 2915/ 2874 (C-H), 1649 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1583 (CMC之C=O), 1405/ 1316/ 1262/ 1020。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量519 g mol^-1 ：C 48%, H 5.8%, N 5.6%。實際：C 42.8%, H 6.95%, N 4.25%。因此，在所有單體中，約53%含有連接體基團。以與化合物1-c類似之方式測定聚合物14之溶解性。數據顯示於下文中：x指示不可溶性材料。實例15：聚合物15之製備在氮下將聚合物5-a (如在實例5中使用2.0 g NaCMC製備)溶解於無水DMF (150 mL)中。除音波處理1 min之多個循環以外，需要在約2 h時段內攪拌並加熱至約50℃，以得到澄清溶液。使溶液冷卻至約4℃並攪拌，之後添加2-氯-N-甲基碘化吡啶鎓(CMP-I) (1.4875 g, 5.8 mmol)。溶液變成黏膠性「膠狀物」，並進行劇烈混合，並添加另外20 mL無水DMF從而降解並稀釋凝膠。此後不久，連同無水三乙胺(5 mL)一起添加4,7,10-三氧雜-1,13-十三烷二胺(12.02 g, 2.02 mL, 9.17 mmol)。將反應物保存在4℃下並攪拌過夜。使丙酮(100 mL)冷卻至4℃並在攪拌下緩慢滴加反應混合物。以20 mL等分試樣過濾混合物，以得到澄清白色的膠凝化固體。在丙酮(3 × 100 mL)、乙醇(3 × 100 mL)、水(1 × 100 mL)、己烷(1 × 100 mL)中洗滌此固體，且然後再次用水(1 × 100 mL)洗滌，之後濃縮約15分鐘。經3天時段將所得產物凍乾以得到輕且蓬鬆的固體狀聚合物5-a。重量 = 1.794 g (49%產率)。使用Kaiser測試來證實末端胺之存在(570 nm下之讀數等於1.86 µmol胺)。¹³ C NMR (101 MHz, 無) δ 176.51 (C8, CMC之C=O), 171.09 (C8, 醯胺之C=O), 163.79 (新峰), 153.15, 143.12, 103.40 (C1), 82.39 (C7), 75.81/ 73.99/ 70.07 (C2, C3, C4, C5), 60.81 (C6), 42.54/ 36.84 (C11, C12, C13, C14, C15, C16), 31.45(C9, C14), 28.25。FTIR：在3239 (N-H/ O-H)、2865 (C-H)、1650 (C=O, 偶合產物之醯胺)、1586 (CMC之C=O)、1404/ 1388/ 1315/ 1256/ 1053下之峰。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量369 g mol-1：C 47.5%, H 7%, N 4%。實際：C 45.5%, H 7.4%, N 5.1%。因此，在所有單體中，約87.5%含有連接體基團。實例16：聚合物16之製備將聚合物15 (1.000 g, 2.273 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (15 mL)混合20 min。在攪拌、RT及對空氣開放下添加化合物8-a (1.14 g, 2.639 mmol)、HBTU (2.59 g, 6.82 mmol)及DIPEA (1.19 mL, 6.82 mmol)(使用離心管及實驗室轉子促進混合過夜)。將混合物音波處理30 s，之後容許攪拌過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。在真空中乾燥所得偶合中間體。將此中間體(850 mg)添加至六氫吡啶: DMF (20:80 v/v)之溶液(20mL)中並用氮氣鼓泡以便將混合物攪拌1小時，此後過濾固體並用乙醇(3 × 50 mL)及DCM (3 × 50 mL)洗滌。然後重複此過程並在真空中乾燥胺中間體。將此胺中間體添加至RB燒瓶中並用氮氣吹掃。將TCEP (428 mg)溶解於去離子水(2.6 mL)中並在攪拌下將其添加至胺中間體中，隨後添加甲醇(5.2 mL)。將系統在氮下在RT下在攪拌下保存1 h，之後過濾並用以下溶液洗滌：2:1甲醇:水(90 mL)、1:2甲醇:水(90 mL)、100%水(90 mL)、100%甲醇(90 mL)。在真空中乾燥所得固體以得到灰白色粉末狀固體狀聚合物16。重量 = 0.3537 g (30%產率)。來自Ellman測試之黃色指示存在游離硫醇。FTIR：3349 (N-H/ O-H), 2917/ 2872 (C-H), 1716 (丙酮), 1650 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1593 (CMC之C=O), 1539, 1438/ 1313/ 1255/ 1028。δ C (10,000Hz, CP MAS)：171.8 (C8,C19), 156.5 (Fmoc之殘餘C=O), 142.3 (Fmoc之殘餘CHAr), 127.9 (Fmoc之殘餘CHAr), 120.08, 103.3 (C1), 82.6 (C7), 74.5(C2, C3, C4, C5), 69.9 (x), 61.5(C6), 49.5(C20), 36.37 (C9, C18, C21), 29.52 (C10-18)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量440.7 g mol^-1 ：C 45%, H 7%, N 5.4%, S 4.1%。實際：C 47.1%, H 6.74%, N 4.11%, S 0.80%。因此，在所有單體中，約20%含有連接體基團。溶解性評價指示聚合物16在pH 9緩衝液(K₂ HPO₄ /MgCl₂ )中形成水凝膠。實例17：聚合物17之製備最初，用TCEP處理聚合物16以便去偶合已形成之任何二硫鍵。將TCEP (0.1685 g, 0.196 mmol, 4當量)溶解於1 mL水中並將其添加至聚合物16 (0.0754 g, 0.147 mmol)中並在RT下攪拌30 min。過濾固體並用水(3 × 10 mL)洗滌並冷凍-乾燥，得到固體灰白色/ 乳酪色粉末，然後用DMF (3 × 10 mL)洗滌該粉末。將化合物12-a (0.0250 g, 0.049 mmol, 1當量)溶解於2 mL無水DMF中並將其添加至已經N₂ (g)吹掃之聚合物16中。將反應物在RT下攪拌過夜，用箔覆蓋以保護避光。在攪拌過夜之後，反應尚未改變色彩。過濾灰白色固體粉末並如下進行洗滌，每一步驟重複5次：(1)添加去離子水(5 mL)，(2)在攪拌下輕微加熱，(3) 1min音波處理重複3次，(4)藉助過濾管柱及玻料過濾器過濾，及(5)用去離子水(20 mL)進一步沖洗。過濾所得固體並冷凍乾燥3小時以得到聚合物17之灰白色產物。重量 = 0.063 g (44%產率)。FTIR：3315 (N-H/ O-H), 2911/ 2869 (C-H),1922, 1756 (酯之C=O/ 螢光黃之C=O), 1720 (酯之C=O/ 螢光黃之C=O), 1647 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1591 (CMC之C=O/芳香族C=C伸展), 1420 (芳香族C=C伸展), 1366 (酯之C-O伸展), 1248 (C-O伸展), 1050 (酯之C-O/ -OH), 894 (在平面C-H外之芳香族基團)。δ C (10,000Hz, CP MAS)：171.0 (C8,C19, C40) 153.1 (C22, C37), 141.7 (C-CAr), 127.0 (C-CAr), 102.4 (C1), 81.9 (C7, C33), 74.5(C2, C3, C4, C5), 68.6 (C23, C34), 61.5(C6), 46.7(C20), 36.5 (C9, C18), 32.1 (C21), 29.5 (C10-17)。元素分析：若原材料之DoS為0.7，則產物預計：質量797.7 g mol^-1 ：C 52%, H 5%, N 3.5%, S 2.1%。實際：C 42.8%, H 6.95%, N 4.02%, S 0.52%。因此，在所有單體中，約25%含有連接體基團。聚合物 17 之酶效能 用酯酶(約58單位/mL，藉由在PBS (0.99 mL)中混合純淨酯酶(0.01 mL)達成)檢查酶效能。為定量並準確測定酶效能，使用96孔板及讀板儀(Fluostar Optima BMG Labtech，其中激發設為485 nm，發射設為590 nm且增益設為1500)設置實驗。試樣之製備：將0.4 mg聚合物17浸泡於640 µL PBS中並保持24 h。在浸泡後，PBS溶液尚未發生變化且保持澄清。對混合物進行離心以去除大多數固體，且在此時間點，聚合物17之試樣似乎已變成水凝膠。然後過濾溶析劑並加以分析；將固體水凝膠保存在一旁用於額外實驗。在每一等分試樣之前，將40 µL溶析劑分配至充分混合之孔中。將量測視為基線讀數。製備以下溶液：於PBS中之酯酶58單位/mL (弱酶溶液)、於PBS中之酯酶116單位/mL (強酶溶液)。 N=4個孔將僅40 µL PBS添加(對照)至測試分散液中。 N=4個孔將40 µL弱酶溶液吸量至測試分散液中。 N=4個孔將40 µL強酶溶液吸量至測試分散液中。在添加至最後孔中之後立即記錄另一螢光讀數，且此後每60 sec進行記錄達160分鐘。圖3顯示每一時間點之螢光讀數減去基數讀數(僅粒子懸浮液)。在此實驗期間儀器未如同先前一般達到飽和點。如所預計，弱及強酯酶溶液之螢光隨時間增加。陰性對照試樣(無酶、僅PBS之試樣)之螢光隨時間略有增加。除上文實驗以外，使用固體過濾物實施另一對照實驗。將固體添加至640 µL PBS之後，進行渦旋混合並進行音波處理直至觀察到良好分散為止。使用相同的上述動力學方法分析溶液(結果參見圖4)。綜上所述，此證據表明合成方法係成功的且酶裂解步驟給出陽性反應，此可藉由螢光光譜來定量。在不存在酯酶下聚合物17不如聚合物12那樣發螢光，指示更少螢光標記附接至聚合物。實例18：聚合物18之製備最初，用TCEP處理聚合物8以便去偶合已形成之任何二硫鍵。將TCEP (0.0243 g, 0.0848 mmol, 4當量)溶解於1 mL水中並將其添加至聚合物8 (0.01 g, 0.0212 mmol)中並在RT下攪拌30 min。過濾固體並用水(3 × 10 mL)洗滌並冷凍乾燥，得到固體灰白色/ 乳酪色粉末，然後用DMF (3 × 10 mL)洗滌該粉末。將甲氧基聚乙二醇馬來醯亞胺(化合物18-a) (0.01 g, 0.0543mmol, 2.5當量)溶解於2 mL無水DMF中並將其添加至已經N₂ (g)吹掃之聚合物8中。將反應物在RT下攪拌過夜，用箔覆蓋以保護避光。在攪拌過夜後，反應混合物變成紅色且在過濾時，不存在固相。用DMF (5 mL)沖洗過濾器併合併溶液並在真空中減少，以得到澄清/黃色油狀物(重量 =0.0106 g)。在4℃下將冷凍去離子水(2 mL)緩慢滴加至油狀物中且然後冷凍乾燥，以產生灰白色/粉紅色蠟狀固體狀聚合物18。重量 = 6.42 mg。非定量Kaiser測試指示不存在游離胺。FTIR：約3350 (小峰, N-H/ O-H), 2881 (C-H), 2740 (C-H), 1964, 1710 (5員環酮), 1665 (C=O, 醯胺), 1359 (酯之C-O伸展), 1240 (C-O伸展), 1145/ 1100 (酯之C-O/-OH), 842 (在平面C-H外之芳香族基團)。溶解性評價指示易溶於氯仿、PBS及DMF中。實例19：聚合物19之製備將聚合物5 (300 mg, 0.81 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (20 mL)混合20分鐘。將Fmoc-Ala-OH (1.00 g, 2.31 mmol)、HBTU (1.84 g, 4.86 mmol)、EDC (100 mg, 0.52 mmol)及DIPEA (6.2 mL, 4.86 mmol)添加至大離心管中並用氮吹掃。使用實驗室轉子促進混合過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。將所得產物乾燥，以得到灰白色粉末狀聚合物19-a。重量 = 0.2932 g。陽性Kaiser測試指示不完全偶合。FTIR：3300 (N-H/ O-H), 2850 (C-H), 1748 (醯胺), 1648 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1589 (CMC之C=O), 1403/ 1022, 896。將聚合物19-a (207 mg)置於六氫吡啶: DMF (20:80 v/v)之溶液(20 mL)中並用氮氣吹掃並攪拌1小時，此後過濾固體並用乙醇(3 × 50 mL)及DCM (3 × 50 mL)洗滌。然後重複此過程，並乾燥產物，以得到灰白色粉末狀聚合物19。重量 = 0.345 g (60%產率)。陽性Kaiser測試結果證實游離胺之存在。FTIR：3300 (N-H/ O-H), 2850 (C-H), 1748 (醯胺), 1648 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1589 (CMC之C=O), 1403/1022, 896。實例20：聚合物20之製備將聚合物19 (200 mg, 0.470 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (20 mL)混合20分鐘。將Fmoc-Ala-OH (0.439 g, 1.41 mmol)、HBTU (0.539 g, 1.41 mmol)、EDC (270 mg, 1.41 mmol)及DIPEA (.018 mL, 1.41 mmol)添加至大離心管中並用氮吹掃。使用實驗室轉子促進混合過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。乾燥所得產物，以得到灰白色粉末狀聚合物20-a。重量 = 0.1576 g。陽性Kaiser測試結果指示不完全偶合。FTIR：在3300 (N-H/ O-H)、2900/ 2850 (C-H)、1748 (醯胺)、1648 (C=O, 偶合產物之醯胺)、1584 (CMC之C=O)、1542 ()、1445/1403/ 1022、899下之峰。將聚合物20-a (158 mg)置於六氫吡啶: DMF (20:80 v/v)之溶液(20 mL)中並用氮氣吹掃並攪拌1小時，此後過濾固體並用乙醇(3 × 50 mL)及DCM (3 × 50 mL)洗滌。然後重複此過程，並乾燥產物，以得到灰白色粉末狀聚合物20。重量 = 0.1391 g (58%產率)。陽性Kaiser測試結果證實游離胺之存在。FTIR：在3300 (N-H/ O-H)、2900/ 2850 (C-H)、1748 (醯胺)、1648 (C=O, 偶合產物之醯胺)、1584 (CMC之C=O)、1403/ 1025、900下之峰。實例21：聚合物21之製備將聚合物20 (150 mg, 0.2785 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (20 mL)混合20分鐘。將Fmoc-Pro-OH (0.282 g, 0.836 mmol)、HBTU (0.317 g, 0.8356 mmol)、EDC (160 mg, 0.836 mmol)及DIPEA (0.20 mL, 0.836 mmol)添加至過濾管柱管中並密封。使用實驗室轉子促進混合過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。乾燥所得產物，以得到灰白色粉末狀聚合物21-a。重量 = 0.10967 g。陽性Kaiser測試結果指示未反應胺之存在。FTIR：在3300 (N-H/ O-H)、2850 (C-H)、1748 (醯胺)、1648 (C=O, 偶合產物之醯胺)、1584 (CMC之C=O)、1403/1025下之峰。將聚合物21-a (100 mg)置於六氫吡啶: DMF (20:80 v/v)之溶液(20 mL)中並攪拌1小時，此後過濾固體並用乙醇(3 × 50 mL)及DCM (3 × 50 mL)洗滌。然後重複此過程，並乾燥產物，以得到灰白色粉末狀聚合物21。重量 = 0.08020 g (47%產率)。陽性Kaiser測試結果指示游離胺之存在。FTIR：在3300 (N-H/ O-H)、2850 (C-H)、1748 (醯胺)、1648 (C=O, 偶合產物之醯胺)、1584 (CMC之C=O)、1453/1403/1024、962/906/841下之峰。實例22：聚合物22之製備將聚合物21 (100 mg, 0.165 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (10 mL)混合20分鐘。將Fmoc-Val-OH (0.167 g, 0.494 mmol)、HBTU (0.187 g, 0.494 mmol)、EDC (95 mg, 0.494 mmol)及DIPEA (0.064 mL, 0.494 mmol)添加至過濾管柱管中並密封。使用實驗室轉子促進混合過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。乾燥所得產物，以得到灰白色粉末狀聚合物22-a。重量 = 0.0603 g。陽性Kaiser測試結果指示未反應胺之存在。將聚合物22-a (60 mg)置於六氫吡啶: DMF (20:80 v/v)之溶液(20 mL)中，並攪拌1小時，此後過濾固體並用乙醇(3 × 50 mL)及DCM (3 × 50 mL)洗滌。然後重複此過程，並乾燥產物，以得到灰白色粉末狀聚合物22。重量 = 0.0553 g (48%產率)。陽性Kaiser測試結果指示游離胺之存在。FTIR：在3300 (N-H/ O-H)、2850 (C-H)、1748 (醯胺)、1648 (C=O, 偶合產物之醯胺)、1585 (CMC之C=O)、1453/1403/ 1024/1095/ 1058、961、841下之峰。實例23：聚合物23之製備將聚合物22 (50 mg, 0.707 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (10 mL)混合20分鐘。將Fmoc-Cys(StBu)-OH (716 mg, 2.122 mmol)、HBTU (805mg, 2.122 mmol)、EDC (407 mg, 2.122 mmol)及DIPEA (0.274 mL, 2.122 mmol)添加至過濾管柱管中並密封。使用實驗室轉子促進混合過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。乾燥所得產物，以得到灰白色粉末狀聚合物23-a。重量 = 0.0253 g。陽性Kaiser測試結果指示未反應胺之存在。FTIR：3300 (N-H/ O-H), 2850 (C-H), 1748 (醯胺), 1648 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1585 (CMC之C=O), 1453/1403/ 1024/1095/ 1058, 961, 841。將聚合物23-a (25 mg)置於TCEP之水溶液(5mL)中並在RT下攪拌2小時，此後過濾固體並用乙醇(3 × 50 mL)及DCM (3 × 50 mL)洗滌。然後重複此過程，並乾燥產物，以得到灰白色粉末狀聚合物23。陽性Kaiser測試結果指示游離胺之存在。此物質用於實例24中，且未進行額外表徵。實例24：聚合物24之製備將TCEP (0.0357g, 0.125 mmol, 4當量)溶解於1 mL水中並將其添加至聚合物23 (25.3 mg, 0.0312 mmol)中，並將混合物在RT下攪拌30 min。過濾固體並用水(10 ml × 3)洗滌並冷凍乾燥，得到灰白色/ 乳酪色粉末狀固體，然後用DMF (10 ml × 3)洗滌該固體。將二乙酸螢光素酯-5-馬來醯亞胺(化合物12-a) (0.016 g, 0.0312 mmol, 1當量)溶解於3 mL無水DMF中將其添加至已經N₂ (g)吹掃之預先處理之聚合物23中。將反應物在RT下攪拌過夜，用箔覆蓋以保護避光。使用實驗室轉子促進混合過夜。過濾固體並用DCM (5 × 20 mL)、水(5 × 20 mL)及甲醇(5 × 20 mL)洗滌。乾燥所得產物，以得到灰白色粉末狀聚合物24。重量 = 0.0156 g (32%產率)。FTIR：(ν_max / cm^-1 ) 3286 (N-H/ O-H), 2872 (C-H), 1722 (丙酮), 1647 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1589 (CMC之C=O), 1545 (C-C Ar.螢光黃), 1409/ 1317/ 1250/ 1024/ 894。¹³ C CP MAS NMR：CMC 0.7 DoS (起始材料)：δC (13,000Hz, CP MAS) 61.7 (C6), 74.5 (C7, C2, C5), 82.5 (肩峰, C3), 97.0 (C4), 103.3 (C1), 177 (C=O)；CMC- PEG二-胺：δ C (13,000Hz, CP MAS) 13.4 (C14), 20.1 (未指派), 23.4 (未指派), 30.6 (C9), 61.7 (C6), 70 (肩峰, C7), 74.5 (C2, C5), 82.5 (C3), 95 (C4), 103.3 (C1), 113 (未指派), 142 (未指派), 152 (未指派), 169.7 (連接體之C=O), 177.1 (CMC之C=O)。實例25：聚合物25 (纖維)之製備將聚合物13與DMF (30 mL)混合20 min。在攪拌、RT、對空氣開放下添加Fmoc-C(StBu)-OH (1.5 g, 3.5 mmol)、HBTU (3.09 g, 8.14 mmol)及DIPEA (1.05 mL, 8.14 mmol) (使用離心管及實驗室轉子促進混合過夜)。在旋轉過夜後，過濾固體並用DCM (5 × 50 mL)、甲醇(5 × 50 mL)洗滌，且再次用DCM (5 × 50 mL)洗滌。乾燥所得產物，以得到聚合物25且其直接用於下一實例(實例26)中。實例26：聚合物26之製備使用與實例12中所闡述類似之程序製備聚合物26。外觀：灰白色、粉末/ 固體。重量 = 1.258 g (59%產率)。FTIR：3339 (N-H/ O-H), 2872 (C-H), 1736 (丙酮), 1648 (C=O, 偶合產物之醯胺), 1549 (CMC之C=O), 1419, 1363, 1313, 1201。δ C (10,000Hz, CP MAS)：30 (C9, 19), 39 (C10,11,12,13), 47 (C18, 22), 54 (C16), 60 (C6), 70-74 (寬峰，C2,3,5,7), 83 (肩峰, C4), 92 (C17), 97, 104 (C1), 120 (C24), 128 (C25,26,27), 142 (C28), 156 (小峰, C20, C=O胺基甲酸酯), 171 (醯胺之C8羰基)。元素分析：若原材料之DoS為1且完全轉化為連接體基團，則產物預計：質量781 g mol^-1 ：C 55%, H 7%, N 5 %, S 8%。實際：C 46%, H 7%, N 2%, S (未實施)。取S態樣並計算所存在N之%對可能N之% (2/3.5) = 連接體基團之57%偶合。因此在所有單體中，約40%含有連接體基團。實例27：聚合物27之製備製備胺基苯基螢光黃(5 mg, 0.018 mmol)及HBTU (14 mg, 0.036 mmol)於無水DMF (2.0 mL)中之溶液。將CMC-PEG-NH₂ (5-a) (0.13 mg, 0.036 mmol)添加至反應混合物中並在RT下攪動約24小時，使用箔蓋保護避光。過濾產物，用乙醇(10 mL×3)及DMF (5×10 mL)洗滌且隨後在真空中濃縮，得到紅色/橙色固體狀產物(27) (12.0 mg, 43%)。FTIR (νmax/ cm-1) 3367 (N-H/ O-H), 2932 (C-H), 1702 (APF之醯胺), 1655 (CONH, 偶合產物之醯胺), 1555 (HNCO, CMC), 1494, 1437, 1413, 1387 (芳香族C=C彎曲), 1106 (OCH_R , 烷氧基APF), 838, 759, 722, 557 (芳香族CH彎曲)。實例28：聚合物28之製備將CMC-Cys (7) (10 mg, 0.029 mmol 1當量)與於DI水(1mL)中之TCEP (16.8 mg, 0.058 mmol, 4當量)一起在RT下攪拌1小時，以便去偶合任何不期望之二硫鍵。過濾固體並用水(10mL×3)洗滌，冷凍乾燥且然後再次用DMF (10mL×3)洗滌。將二乙酸螢光素酯-5-馬來醯亞胺(12-a) (11 mg, 0.029mmol, 1當量)溶解於無水DMF (3mL)中並在氮氣氛下將其添加至CMC-CYS中。將反應物在RT下攪拌過夜且保護其免受光之影響。用水(3×100mL)及DMF (1×100mL)洗滌產物，得到不透明蠟狀固體(28) (0.017 g, 85%)。FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3365 (O-H), 2971/2910, (N-H, CH) 2883 (SH), 1728 (COOH,酸), 1677 (CONH,醯胺), 1640 (HNCO, 肽), 1598 (HNCOO, CMC), 1409, 1371 (COO), 1307 (芳香族C=C彎曲), 1216, 1019 (CN, 三級胺)；溶解性，不溶於水、pH9磷酸鹽緩衝液及常見實驗室溶劑(丙酮、甲醇、乙醇、THF、DCM及DMF)中。實例29：聚合物29之製備將CMC-PEG-NH₂ (15) (1.000 g, 2.27 mmol)研磨成精細粉末並與DMF (15 mL)混合20分鐘。在攪拌下在RT下添加Fmoc-C(StBu)-OH (1.14 g, 2.639 mmol, 1.2當量)、HBTU (2.59 g, 6.8181 mmol)及DIPEA (1.19 mL, 6.8181 mmol)，過夜。過濾產物並用DCM (5×20 mL)及甲醇(5×20 mL)洗滌且然後在真空中減少。然後對經保護產物實施StBu去保護，將每一去保護步驟重複3次，每次之後均在真空中縮減，得到白色固體粉末(29-a) (0.236 g, 5%)。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 176.52 (CMC部分之C-8), 171.84 (C-8, C-19), 156.45, 142.32, 127.85- 120.08 (C-Ar, Fmoc), 113.93, 103.26 (C-1), 82.60 (C-4), 74.50 (C-2, C-3, C-5), 69.92 (C-7), 61.45 (C-6), 54.93 (C-20), 49.52, 47.30, 41.58, 38.72- 23.08 (C-9, C-10, C-11, C-12, C-13, C-14, C-15, C-16, C-17, C-18, C-20)；FTIR (νmax/ cm-1) 3310 (O-H), 2915 (N-H, C-H), 2868 (S-H), 1731 (COOH, 酸), 1650 (CONH, 偶合產物之醯胺), 1592 (HNCOO, CMC), 1538 (HNCOO, 肽), 1441, 1417, 1361 (COO), 1310 (芳香族C=C彎曲), 1252 (醯胺CO伸展), 1031 (CN, 三級胺), 841；EA預計去保護產物C:45.3%, H:7.5%, N:4.7%, S:7.1%，測定值C:47.1%, H:7.8%, N:6.7%, S:10.1%，因此偶合率為11%；溶解性，不溶於水及常見實驗室溶劑(丙酮、甲醇、乙醇、THF、DCM及DMF)中，隨時間可溶於pH9磷酸鹽緩衝液中；Ellmans測試陽性。將中間體(29-a) (75.4 mg, 0.147 mmol 3當量)與於DI水(1mL)中之TCEP (168.5 mg, 0.196 mmol, 4當量)一起在RT下攪拌1小時，以便去偶合任何不期望之二硫鍵。過濾固體並用水(10mL×3)洗滌，冷凍乾燥且然後再次用DMF (10mL×3)洗滌。將二乙酸螢光素酯-5-馬來醯亞胺(12-a) (25.0 mg, 0.049mmol, 1當量)溶解於無水DMF (2mL)中並在氮氣氛下將其添加至CMC-PEG-NH-CYS (29-a)中。將反應物在RT下攪拌過夜且保護其免受光之影響。在真空中縮減反應混合物，用水(約75mL)將產物洗滌五次並冷凍乾燥，得到灰白色粉末(29) (63.0 mg, 44%)。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 176.38 (CMC部分之C-8), 171.00 (C-8, C-19, C-38) , 153.12 (C-22), 141.67, 135.49-, 119.80 (C-Ar, Fmoc, 螢光黃), 102.43 (C-1), 81.92 (C-4), 74.47 (C-2, C-3, C-5), 70.30 (C-7), 68.61, 61.45 (C-6), 46.73 (C-42), 36.47- 29.48 (C-9, C-10, C-11, C-12, C-13, C-14, C-15, C-16, C-17, C-18, C-20)；FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3315 (O-H), 2911 (N-H, C-H), 2869 (S-H), 1922 , 1720 (COOR, 偶聯之酯, 螢光黃), 1647 (CONH, 偶合產物之醯胺), 1591 (HNCOO, CMC), 1542 (CONH, 肽), 1420, 1366/ 1309, (芳香族C=C彎曲), 1248 (C-O伸展), 1213, 1050 (CN, 三級胺), 842, 581(芳香族CH彎曲)；EA預計C:51.1%, H:5.8%, N:3.7%, S:2.1%，測定值C:42.8%, H:7.0%, N:4.0%, S:0.5%，因此偶合率為24%。實例30：聚合物30之製備(纖維)將DoS 0.3之NaCMC纖維(2.0 g, 8.33 mmol)分散於乙醇:去離子水(80:20 v/v)之溶液(180 mL)中，以得到1%懸浮液。添加Dowex 650C monosphere離子交換樹脂，且在攪拌下30分鐘。藉由過濾去除monosphere，之後以0.1mL等分試樣添加四丁基氫氧化銨(TBAH) 40% (aq)直至pH為8-9 (3.0 mL, 1.16 mmol)。將所得溶液攪拌30分鐘，之後在真空中縮減。在氮氣氛下將膜樣材料溶解於無水DMF (100 mL)中，需要攪拌及輕微加熱過夜，產生具有均勻質地之黏性凝膠樣溶液。使溶液冷卻至約4℃且在劇烈攪拌下添加CMP-I (1.48 g, 5.8 mmol)。將2,2’-(伸乙基二氧基)雙(乙胺) (1.36 g, 9.17 mmol)連同無水三乙胺(3mL)一起添加至反應物中。將反應物保存在4℃下並攪拌最短3小時，此後過濾固體並用99%丙酮(3 ×100 mL)及DCM (3×100mL)洗滌，在每次洗滌期間均音波處理1分鐘，以促進纖維團塊解開並釋放任一污染物。在真空中縮減產物以得到白色纖維固體(30-a) (1.8g, 60%)。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 176.93 (CMC部分之C-8), 171.96 (C-8), 153.41, 142.40, 104.11, (C-1), 96.80, 83.55 (C-4), 74.18 (C-2, C-3, C-5),69.39 (C-7), 61.89 (C-6), 40.48 (寬峰，C-10, C-11, C-12, C-13, C-14)；FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3325 (O-H), 2872 (N-H, C-H), 1648 (CONH, 偶合產物之醯胺), 1589 (HNCOO, CMC), 1543, 1408, 1367 (CHO), 1314, 1265 (醯胺CO伸展), 1022 (CN, 三級胺), 896；EA預計C:41.7%, H:7.0%, N:2.3 %，測定值C:42.6%, H:6.3%, N:2.9%，因此偶合率為127%；溶解性，不溶於水及常見實驗室溶劑(丙酮、甲醇、乙醇、THF、DCM及DMF)中，隨時間可溶於pH9磷酸鹽緩衝液及PBS中；Kaiser測試陽性，3.08 µ.mol胺。將呈纖維形式之CMC-PEG-NH₂ (30-a) (1.0 g, 2.86 mmol)與DMF (30 mL)混合20分鐘。在攪拌下在RT下添加Fmoc-C(StBu)-OH (1.5 g, 3.5 mmol)、HBTU (3.09 g, 8.14 mmol)及DIPEA (1.10 mL, 8.57 mmol)，過夜。過濾產物並用DCM (5×50 mL)、甲醇(5×50 mL)洗滌，再次用DCM (5×50 mL)洗滌，且然後在真空中縮減得到白色固體粉末(30-b) (1.23 g, 59%)。注意：在此階段經保護產物不為Fmoc或StBu去保護的。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 176.38 (小峰, CMC部分之C-8), 171.93 (C-8, C-15) , 156.28 (C-20), 141.73, 127.61- 120.01 (C-Ar, Fmoc), 104.17 (C-1), 96.81, 87.27, 82.86 (C-4), 74.29 (C-2, C-3, C-5), 69.17 (C-7), 62.17 (C-6), 60.00 (C-21), 54.22 (C-16), 46.87 (C-22), 46.87, 39.36- 29.49 (C-10, C-11, C-12, C-13, C-14, C-17, C-19)；FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3339 (O-H), 2872 (N-H, C-H), 1736 (COOH, 酸), 1648(CONH, 偶合產物之醯胺), 1549 (HNCOO, CMC), 1419, 1363 (COO), 1201, 1031 (CN, 三級胺), 841；EA預計C:44.6%, H:6.7%, N:1.6%, S:2.5%，測定值C:46.0%，H:6.5%，N:2.2%，S：可獲取物質不足；溶解性，不溶於水及常見實驗室溶劑(丙酮、甲醇、乙醇、THF、DCM及DMF)中，隨時間可溶於pH9磷酸鹽緩衝液中；Ellmans測試陽性。將呈纖維形式之CMC-PEG-Cys(Fmoc)StBu (30-b) (0.5965g, 1.265 mmol)與於DI水(3mL)中之TCEP (1.45g, 5.060 mmol, 4當量)一起在RT下攪拌30 min，以便去偶合任何不期望之二硫鍵。過濾固體並用水(10mL×3)洗滌，冷凍乾燥且然後再次用DMF (10mL×3)洗滌。將二乙酸螢光素酯-5-馬來醯亞胺(12-a) (0.125g, 0.240 mmol, 1當量)溶解於無水DMF (15mL)中並在氮氣氛下將其添加至CMC-PEG-NH-CYS中。將反應物在RT下攪拌過夜且保護其免受光之影響。在真空中縮減反應混合物，用DCM (3×50mL)、甲醇(3×50mL)洗滌產物並在真空中縮減。然後在輕微加熱、攪拌及音波處理下用水(5×75mL)洗滌灰白色固體纖維，之後過濾並凍乾，得到灰白色固體纖維(30) (1.10g, 72%)。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 174.88 (CMC部分之C-8), 172.30 (C-8, C-15, C-34) , 141.36, 129.34- 126.65 (C-Ar, Fmoc, 螢光黃), 104.58 (C-1), 86.94, 82.52 (C-4), 78.56- 72.96 (C-2, C-3, C-5, C-7), 69.74, 61.45, 60.35 (C-6), 38.69- 21.02 (C-9, C-10, C-11, C-12, C-13, C-14)；FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3315 (O-H), 2868 (N-H, C-H), 1728 (COOR, 偶聯之酯, 螢光黃), 1647 (CONH, 偶合產物之醯胺), 1542 (CONH，肽偶合之醯胺, NHCOO CMC), 1419, 1364 (芳香族C=C彎曲), 1264 (C-O伸展), 1152 (OCH_R ), 1018 (CN三級胺), 879；EA預計C:50.9%, H:6.9%, N:5.5 %, S:1.0%；測定值C:30.8 %, H:8.6%, N:1.3%, S: ＜0.3%，因此偶合率為24%。實例30：聚合物31之製備將呈粉末形式之CMC-PEG-NH-AAPVC(Fmoc)StBu (如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」) (23-a) (525 mg, 439 mmol)與於DI水(23mL)中之TCEP (503.4 mg, 0.1756 mmol, 4當量)一起在RT下攪拌30 min以便去偶合任何不期望之二硫鍵。過濾固體並用水(50mL×3)、甲醇(50mL×3)、乙醇(50mL×3)洗滌且然後再次用水(50mL×3)洗滌，然後將其冷凍乾燥且然後再次用DMF (50mL×3)洗滌。將螢光黃-5-馬來醯亞胺(25mg, 59 mmol, 0.1當量)溶解於無水DMF (70mL)中並在氮氣氛下將其添加至CMC-PEG-NH-AAPVC(Fmoc) (如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」)中。將反應物在RT下攪拌3小時且保護其免受光之影響。在真空中縮減反應混合物，用DCM (3×50mL)、甲醇(3×50mL)、DI水(3×50mL)洗滌產物，再用DCM (3×50mL)洗滌且再用甲醇(3×50mL)及甲醇(3×50mL)洗滌，並在真空中縮減得到灰白色固體(31) (436 mg, 68%)。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 176.70 (CMC部分之C-8, C-39, C-41), 171.39 (C-8, C-15, C-18, C-21, C-26, C-30, C-45) , 153.37 (C-33, C-51), 142.19 (C-36, C-37, C-Ar), 127.57- 120.48 (C-Ar), 103.85, (C-1), 102.63 (C-Ar), 97.55, 82.31 (C-4), 74.34 (C-2, C-3, C-5, C-7), 69.85 (C-23), 60.80 (C-6, C-27), 52.23- 48.37 (C-16, C-19, C-25, C-35), 42.10 (C-9, C-14, C-38), 38.70-25.05 (C-9, C-10, C-11, C-12, C-13, C-14), 18.45 (C-17, C-20, C-29), 14.11；FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3340/ 3294 (O-H), 2914/ 2862 (N-H, C-H), 1737 (COOH, 酸), 1645 (CONH，偶合產物之醯胺/ COOR, 偶聯之酯, 螢光黃), 1593 (HNCOO, CMC), 1543 (CONH, 肽), 1414, 1375 (COO), 1343 (芳香族C=C彎曲), 1262 (C-O伸展), 1230, 1056 (CN,三級胺/ OCHR), 897, 841, 764, 556 (芳香族CH彎曲)；EA預計C:53.4%, H:6.0%, N:5.4%, S:1.5 %，測定值C:47.1 %, H: 6.7%, N: 4.1%, S: 0.8%，因此偶合轉化率為52%。實例32：聚合物32之製備將呈粉末形式之CMC-PEG-NH-AAPVC(Fmoc)StBu (如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」) (23-a) (175 mg, 146 mmol)與於DI水(23mL)中之TCEP (168 mg, 585 mmol, 4當量)一起在RT下攪拌30 min，以便去偶合任何不期望之二硫鍵。過濾固體並用水(50mL×3)、甲醇(50mL×3)、乙醇(50mL×3)洗滌，且然後再用水(50mL×3)洗滌，然後將其冷凍乾燥且然後再用DMF (50mL×3)洗滌。將N-溴苯基馬來醯亞胺(37mg, 0146 mmol, 1當量)溶解於無水DMF (20mL)中並在氮氣氛下將其添加至CMC-PEG-NH-AAPVC(Fmoc) (如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」)中。將反應物在RT下攪拌3小時並保護其免受光之影響。在真空中縮減反應混合物，用DCM (3×50mL)、甲醇(3×50mL)、DI水(3×50mL)洗滌產物，再用DCM 3×50mL)洗滌且再用甲醇(3×50mL)及甲醇(3×50mL)洗滌，並在真空中縮減得到灰白色固體(32) (129 mg, 69%)。固體狀態¹³ C NMR (10,000 MHz, CP MAS) 171.16 (C-8, C-15, C-18, C-21, C-26, C-30, C-38, C-39), 153.33 (C-32), 142.03, 127.45-113.03 (C-Ar, Fmoc, 螢光黃), 102.74 (C-1), 97.09 , 82.15 (C-4), 74.39 (C-2, C-3, C-5, C-7), 69.84, 61.21, 57.42 (C-6, C-31), 47.91 (C-16, C-19, C-27), 38.76- 22.56 (C-9, C-10, C-11, C-12, C-13, C-14) 18.33-14.16 (C-17, C-20, C-29)；FTIR (νmax/ cm^-1 ) 3322 (O-H), 2901/ 2872 (N-H, C-H), 2103, 1788 (COOH, 酸), 1644 (CONH, 偶合產物之醯胺/ COOR, 偶聯之酯, 螢光黃), 1594 (HNCOO, CMC), 1544/ 1514 (CONH, 肽), 1349/ 1304 (芳香族C=C彎曲), 1251 (C-O伸展), 1230, 1025 (CN,三級胺/ OCHR), 898, 843, 738, 556 (芳香族CH彎曲)；EA預計C:50.0%, H:6.1%, N:6.1%, S:1.8 %, Br: 4.3% 測定值C:46.3 %, H: 6.7%, N: 5.2%, S: 0.33%, Br：未檢測到，因此偶合轉化率為17%。實例33 蛋白酶/肽之酶裂解分析傷口特異性蛋白酶(包括其他蛋白酶，例如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及嗜熱菌蛋白酶)之活性。胰蛋白酶裂解P1-P1’，其中P1係Lys或Arg，且P1’係非特異性的(後接脯胺酸時除外)。胰凝乳蛋白酶裂解P1-P1’，其中P1係任一芳香族胺基殘基Trp、Tyr或Phe，且P1’係非特異性的。嗜熱菌蛋白酶係金屬肽鏈內切酶，其裂解P2-P1-P1’-P2’，其中P1係非特異性的，P1’係Leu、Phe、Ile、Val、Met、Ala且P2’不為Pro。酯酶水解羧酸酯之酯鍵聯，且因此其性質與蛋白酶不同，該等蛋白酶特定而言水解胺基酸序列。用於酶分析之受質係CMC-PEG-NH-Phe-Phe-Lys (丹磺醯)且酶活性係使用基於UV可見光之方法來測定。Phe-Phe-Lys (丹磺醯)序列可由胰凝乳蛋白酶水解。使用胰蛋白酶作為陰性對照，乃因其不可裂解此序列。使用共焦螢光顯微鏡術分析酶對受質CMC-PEG-NH-Cys-馬來醯亞胺二乙酸螢光素酯之活性。首先觀察單獨的固體粒子且然後在添加酯酶溶液(約50單位/mL)之後進行觀察。當將酶溶液添加至試樣中時，顯微鏡影像證實所觀察到螢光之增加。使用此方法之優點係在添加酶溶液時可以可視化粒子並觀察螢光強度之差異，此證實二乙酸螢光素酯偶合至CMC聚合物。或者，可使用多板讀取器來評價受質之裂解並利用Michaelis-Menton動力學對結果進行定量。在一個實驗中，量測酯酶對CMC-PEG-NH-Cys-馬來醯亞胺-二乙酸螢光素酯粉末之效應。首先，將CMC-PEG-NH-Cys-馬來醯亞胺-二乙酸螢光素酯粉末(0.2 mg)分散於PBS (320 μL)中。需要音波處理、渦旋混合及輕微加熱來分散化合物。將40 μL受質懸浮液添加至96孔板之孔中，然後添加弱酯酶溶液(58 U/mL)、強酯酶溶液(116 U/mL)或PBS (陰性對照)(40μL/孔)。選擇在2小時內5分鐘之循環時段進行螢光量測。關注使用兩個不同強度之酯酶溶液使得可分析反應速率之差異。藉由自每一後續時間點減去零時間點讀數(基線)計算螢光強度變化。在與弱(58 U/mL)及強(116 U/mL)酯酶溶液一起培育之試樣中觀察到增加之螢光，該螢光隨時間增加。強酯酶溶液在其在約30 min達到飽和點(45000單位之強度)之前顯示比弱酯酶溶液之速率增加3.5倍。間隔體長度之效應為研究較長PEG鏈長度對酯酶分析之效應，記錄77 (CMC-「較長」 PEG-NH-Cys (Fmoc)-馬來醯亞胺二乙酸螢光素酯)之螢光量測。在此測試中，每個試樣實施4個重複且記錄在兩個小時之時間段內一分鐘之循環。關於較短受質，與酯酶一起培育較長受質(77)可檢測螢光。116 U/mL (強)酯酶試樣在40分鐘之後出現峰值；58 U/mL (弱)酯酶試樣在80分鐘之後出現峰值。116 U/mL酯酶反應之速率為58 U/mL試樣之兩倍，因此使酶濃度加倍可使速率加倍。反應速率顯著低於較短PEG連接體等效物。預計此降低是由肽至CMC上之負載降低引起的。與酯酶一起培育纖維格式CMC-PEG-NH-Cys(Fmoc)-馬來醯亞胺二乙酸螢光素酯(82)亦生成類似結果，其中兩種酯酶溶液(58及116 U/mL)均使得螢光隨時間增加及螢光產物之生成速率在酶濃度提高下有所提高。 CMC-PEG-NH-AAPVC-馬來醯亞胺螢光黃(如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」) (粉末，海藻酸鹽纖維及水膠體形式)經彈性蛋白酶之裂解：AAPV肽序列(SEQ ID NO: 46)係彈性蛋白酶之受質，其中預測裂解位點在Ala及Val之P1處。對於含有此AAPV序列(SEQ ID NO: 46)之化合物，以與酯酶分析類似之方式實施彈性蛋白酶分析。測試三種形式之受質：(a)粉末形式；(b)具有呈纖維格式之化合物之濕紡海藻酸鹽；及(c)含有0.8%或8%化合物之水膠體凝膠。將單獨化合物與彈性蛋白酶一起培育顯示螢光隨時間明顯增加。亦實施相同實驗來評價添加彈性蛋白酶溶液對具有0.8%及8%之CMC-PEG-NH-AAPVC-馬來醯亞胺螢光黃(如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」) (粉末格式)負載之水膠體凝膠之效應。結果顯示在與對照(單獨水膠體凝膠)相比時，負載經修飾CMC之水膠體凝膠之螢光隨時間增加。較高負載量(8%)之螢光顯著大於較低負載(0.8%)試樣。測試兩個不同的酶強度；在此情形下，與弱彈性蛋白酶溶液(0.1 mg/mL)相比，當使用強彈性蛋白酶溶液(0.5 mg/mL)時，試樣之螢光僅略微增加。此表明彈性蛋白酶即便在0.1 mg/mL下亦係過量的及使用經修飾CMC對螢光反應具有更顯著的效應。經裂解片段之LC-MS分析設置實驗以嘗試表徵在將彈性蛋白酶添加至CMC-PEG-NH-AAPVC-馬來醯亞胺螢光黃(如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」) (粉末格式)中時產生之片段。將彈性蛋白酶(0.5mg/ mL in PBS)添加至78中並在37℃下培育；在若干時間點(1分鐘至3小時)收集等分試樣並藉由在液氮中立即冷凍加以保存。在每一解凍等分試樣上實施HPLC以分離片段且然後實施質譜以分析其質量。該分析證實在與彈性蛋白酶一起培育期間存在所預計經裂解片段。如所預測，裂解位點為Ala及Val之P1。另外，存在一些Pro片段之證據，此可表明在Pro之P1位存在另一裂解位點。此結果與在螢光計分析期間記錄之螢光增加係一致的且進一步確立系統能檢測特定酶且給出可檢測信號之證據。實例34 細胞研究 -醫學器件之生物相容性在設計醫學器件時應考慮之重要態樣係其生物安全性及其他因素，例如細胞毒性、敏化、血液相容性、熱原性、植入、基因毒性、致癌性、生殖及發育毒性、生物降解等。在新材料與體外生長之細胞間之相互作用之研究可良好的指示該等材料之毒性，且因此使用一系列該等方法(Eisenbrand等人，Food Chem. Toxicol . 2002, 40, 193-236)。必須選擇適宜細胞類型以便使該測試適於與器件最終使用相關之身體區域及功能。該方法可為定量或純粹視覺的，且現代技術容許細胞相互作用之精密觀察點，例如經由顯微鏡使用細胞之間時視訊成像。與傷口癒合相關之細胞：纖維母細胞在傷口癒合過程中至關重要。其在損傷後約24小時在發炎階段之最後階段期間開始移向傷口床。其在整個增殖及上皮化階段因產生調介劑(包括蛋白酶(如MMP))而改變傷口環境。最後，在重塑階段且在新傷口細胞外基質達成充足強度之後，纖維母細胞含量減少回到正常含量(Bainbridge等人，J. Wound Care 2013, 22, 407-408)。因此，纖維母細胞係在模擬傷口癒合過程時適宜使用之細胞系。所用活體外方法：使用兩種活體外細胞方法來篩選肽修飾之CMC材料用於其生物相容性之初始想法。人類真皮纖維母細胞之來源及培育：人類真皮纖維母細胞已預先分離並儲存在適當條件下。在患者知情同意之情況下獲得正常纖維母細胞之培養物。該研究不包括患有糖尿病、全身免疫阻抑或具有局部感染證據之患者。此研究利用三種患者細胞系：患者A、F及G。自患者大腿取出6 mm生檢。在酶降解樣品之後藉由單一細胞懸浮液技術建立培養物。簡言之，將組織與Dispase (2 mg/mL；Boehringer Mannheim, Lewes, UK)一起培育過夜以使表皮組織與真皮組織分離。然後利用細菌溶組織芽孢梭菌(Clostridium histolyticum) A膠原酶(1 mg/mL；Boehringer Mannheim)將真皮組織樣品解聚過夜。在含有補充有L-麩醯胺酸(2 mM)、非必需胺基酸(1×)、抗生素(100 U/mL青黴素G；100 mg/mL硫酸鏈黴素；0.25 mg/mL兩性黴素B)及1% (v/v)胎牛血清(FCS)之達爾伯克改良伊格爾培養基(DMEM)之含纖維母細胞血清之培養基(F-SCM)中維持纖維母細胞培養物。在37℃下在5% CO₂ 加濕氣氛中維持培養物。在鋪滿時，胰蛋白酶化纖維母細胞並再接種(1.5 × 10⁵ 個細胞/T75燒瓶)。纖維母細胞劃痕分析方法：劃痕分析係如下技術：其中在平面表面上生長鋪滿的纖維母細胞單層，然後將此表面「劃痕」或「損傷」以產生分離兩個纖維母細胞區域之通道。將試樣溶液添加至細胞之頂部上並使用共焦顯微鏡隨時間監測通道以便觀察細胞如何反應(Liang等人，Nat. Protocols 2007, 2, 329-333)。若含有試樣之周圍區域於細胞而言係適宜的，則在該時間段期間細胞將增殖並遷移以填充通道；若試樣不適宜，則細胞將不遷移且將死亡。將人類真皮纖維母細胞接種至24孔組織培養板(2 × 10⁴ 個細胞/孔)中，將其培養至80-90%鋪滿，且藉由用200 μL吸量管吸頭沿組織培養塑膠之表面劃痕來損傷單層。用PBS洗滌單層並添加於DMEM中0.66 mg/mL或0.066 mg/mL之化合物。然後利用F-SCM再進給細胞並在利用Cell-IQ系統之共焦顯微鏡之機動化、加熱及充氣階段在標準培養條件下培育。每20分鐘收集影像且利用Cell-IQ軟體產生影片。對於每一細胞系分析均一式三份進行；患者A、F及G。膠原基質模型方法：膠原基質模型係在癒合之再組織階段期間代表真皮之活體外工具。此處，使用一系列纖維母細胞聚集之膠原網架(FPCL)在對膠原基質之再組織之效應方面比較肽修飾之纖維素與對照。在正常條件下，預期可看到由於纖維母細胞再組織可引起FPCL直徑之減小，此顯示細胞過程正常進行且「正癒合」(Carlson等人，Wound Repair Regen . 2004, 12, 134-147)。利用源於胰蛋白酶化之培養物之纖維母細胞來構築纖維母細胞聚集之膠原網架(FPCL)。I型大鼠尾膠原係購自First Link。將1.5 × 10⁵ 個纖維母細胞(於750 μL F-SCM中)添加至60mm細菌板中，該細菌板含有2 × DMEM (40份數10 × DMEM、10份數NaHCO₃ (7.5% (w/v))、4份數L-麩醯胺酸(200 mM)、4份數非必需胺基酸(100 ×)、140份數H₂ O及5份數NaOH (1 M)；3mL)、0.1M NaOH (750 μL)、FCS (750 μL)、2.25 mL I型膠原(1.7 mg/mL)及測試化合物(0.66 mg/mL)。將該等板在37℃下培育60分鐘以容許膠原聚合。然後將其自板之邊緣分離並添加2 mL F-SCM。在37℃及5% CO₂ 增濕氣氛下維持FPCL。在FPCL再組織過程中保持圓形，容許在第3天及第7天量測FPCL之直徑。對於每一試樣，在來自三個不同患者試樣(n=3)之細胞上實施實驗。連同作為基線之CMC粉末及CMC纖維一起測試七種經修飾之CMC材料(表3)。表3：在活體外細胞測試期間分析之化合物(如SEQ ID NO: 50所揭示之「AAPVC」) 纖維母細胞劃痕分析之結果：一般而言，在測試時段期間，纖維母細胞保持活力且增殖而填充劃痕通道。結果(圖5)顯示纖維母細胞完全封閉劃痕通道所花費之時間。如圖5中所顯示，所有試樣皆在70小時內封閉通道。使用CMC粉末試樣作為參考，乃因已知此CMC粉末可安全的用於傷口接觸應用中。CMC-PEG-NH₂ 纖維係劃痕經封閉之時間段短於對照之唯一試樣。CMC-PEG-NH₂ 粉末劃痕封閉時間約等於其他經修飾之CMC試樣(約40 - 60小時)，表明細胞可能稍微偏好呈纖維形式之試樣之物理結構。含有0.066 mg/mL之12 (CMC-PEG-NH₂ 粉末)之患者A (圖6)及含有0.66 mg/mL之12 (CMC-PEG-NH₂ 粉末)之患者A (圖7)之劃痕均隨時間封閉，乃因纖維母細胞複製並遷移至通道中。該等影像顯示纖維母細胞不受試樣不溶解性或較高試樣濃度之影響且仍能在經修飾CMC中及周圍茁壯成長。圖6及圖7代表在患者A、F及G之所有試樣及細胞系內實施之幾乎所有測試之觀察。儘管在一個研究中CMC-較長PEG-NH₂ 粉末(編號83)生成異常結果，但當利用自三個不同患者獲得之試樣重複測試時，纖維母細胞增殖且遷移。實例35：膠原基質模型在膠原基質模型研究期間，在所有試樣內纖維母細胞皆保持活力。與對照相比，對於經修飾之CMC試樣(除了83 (CMC-較長之PEG-NH₂ 粉末)以外)僅觀察到略微更少之再組織，藉助該測試與其他試樣相比此顯示僅有限之纖維母細胞再組織(圖8、圖9及圖10)。在化合物83 (CMC-較長之PEG-NH2粉末；在第7天網架直徑為約40 mm至60 mm)與化合物12 (CMC-PEG-NH2粉末；在第7天網架直徑為約15 mm-35 mm)之間觀察到顯著差異，結果自圖8-10顯而易見。自圖11-13中之照片顯而易見之原始數據證實在分別自患者A (圖11)、B (圖12)及C (圖13)獲得之細胞試樣中在第3天及第7天化合物12、83、81、74、78、80、CMC粉末及CMC纖維中之每一者對網架直徑之效應。總結該研究證實經修飾之CMC材料對纖維母細胞沒有毒性。而且，在纖維與粉末格式、較長或較短的PEG間隔體連接體或添加肽及可檢測片段之間不存在差異。在膠原基質模型期間纖維母細胞在所有情形下皆存活，大多數試樣之再組織僅略慢於對照，CMC-較長之PEG-NH₂ 粉末83除外，與其他化合物相比83展現減弱之效應。實例36液晶(LC)研究液晶實驗設置實施研究，在該研究期間將CMC凝膠置於5CB液晶上方且使用偏光顯微鏡隨時間監測錨定。為設置LC研究，需要創建室以便使得LC能夠保持在設定區域內且容許使用偏光顯微鏡進行可視化。根據公開之研究實施5CB之TEM網格限定(Nazarenko等人，Physical Review E 1999 , 60, R3495-R3497；Brake等人，Langmuir 2003, 19, 6436-6442)。為創建5CB-TEM網格實驗系統，首先使用作基底之載玻片較佳地不含諸如油脂等雜質。使用食人魚溶液(Piranha solution) (強氧化劑)實施清潔，此自玻璃去除所有有機物質。由於食人魚溶液之強氧化性質，適當採取安全防範以避免與皮膚接觸亦及避免爆炸。將濃硫酸(約30 mL, 98%級)添加至含有玻璃之欲清潔器皿中，隨後緩慢添加過氧化氫(約10 mL, 30%)且在RT下靜置1小時。倒出食人魚溶液，並用水及乙醇充分洗滌玻璃。最後，小心中和廢物食人魚溶液。接下來，用十八烷基三氯矽烷(OTS)塗佈玻璃。OTS係長鏈自組裝兩親性分子，其將塗佈載玻片表面且使其疏水。因此，5CB沿室之基底與垂直錨定對準。將TEM網格置於OTS塗佈之玻璃上以將LC溶液保持在網格內。使用毛細管將5CB小心添加至TEM網格中以確保每一網格經充分填充，但不過度填充而在網格之頂部上產生溶液圓頂。在將5CB添加至TEM網格之後，使用光顯微鏡之交叉偏光透鏡檢查5CB配向。5CB在此階段係垂直的，此係由LC與OTS塗佈之載玻片對準引起的。酶檢測之原理依賴於脂質(例如DLPC)釋放時LC定向之變化。以此方式使用肽修飾之CMC及LC之潛在系統顯示於圖14中。為此，圖15顯示在施加CMC凝膠時顯示5CB填充之TEM網格之顯微照片。其他實施例前述實例可藉由用所揭示技術之一般或特別地闡述之反應物及/或操作條件取代前述實例中所使用之彼等來重複。自上述闡述，熟習此項技術者可容易確定所揭示技術之基本特徵，且可在不背離其精神及範圍之情形下對所揭示技術作出各種改變及修改，以使其適用於各種用途及條件。除非另有定義，否則本文所使用之所有技術及科學術語皆具有與熟習此項技術者通常理解相同之含義。儘管在所揭示技術之實踐或測試中可使用與本文所述類似或等效之方法及材料，但適宜的方法及材料闡述於上述段落中。另外，材料、方法及實例僅為闡釋性而並非意欲具有限制性。倘若出現衝突，則以本說明書(包括定義)為准。本文引用之所有美國專利及公開或未公開之美國專利申請案皆以引用方式併入。本文引用之所有公開之國外專利及專利申請案皆以引用方式併入本文中。本文引用之所有公開之參考文獻、文件、手稿、科學文獻皆以引用方式併入本文中。本文所引用之關於NCBI、基因庫、EBI、PUBMED資料庫之所有標識符及登錄號皆以引用方式併入本文中。儘管本文中已顯示並闡述所揭示技術之較佳實施例，但熟習此項技術者將明瞭，該等實施例僅以實例方式提供。熟習此項技術者現將想出多種變更、變化及取代。應瞭解在實踐所揭示技術中可採用本文所闡述之所揭示技術之實施例之各種替代。以下申請專利範圍意欲定義所揭示技術之範圍且意欲由此涵蓋該等申請專利範圍及其等效形式之範圍內之方法及結構。

為了理解本發明，現將藉助實例參考附圖來闡述本發明，本發明之實施例及實例在附圖中加以闡釋且連同以下說明一起用來解釋本發明之原理。圖1顯示使用基於螢光之研究對聚合物12之酶效能之定量。圖2顯示試樣圖1之基於螢光之研究中使用之聚合物12之影像。圖2A顯示如在環境光下觀察到之試樣。圖2B顯示如在UV光下觀察到之試樣。圖2C顯示個別試樣之標記。圖3顯示使用基於螢光之研究對聚合物17 (經PBS預處理)之酶效能之定量：在PBS浸泡時段後之溶析劑。圖4顯示使用基於螢光之研究對聚合物17 (經PBS預處理)之酶效能之定量：在初始PBS浸泡時段之後將固體再懸浮於PBS中。圖5顯示針對患者A、F及G之細胞系在劃痕模型測試期間之平均封閉時間(誤差槓顯示SD)。紅色槓突出顯示呈纖維形式之試樣；藍色槓代表呈粉末形式之試樣。圖6顯示12、CMC-PEG-NH2粉末、患者A、0.066 mg/mL劃痕分析之共焦顯微照片。紅色虛線代表劃痕區，在T=1h (通道中不存在細胞)與T=68h (細胞填充通道)之間可觀察到纖維母細胞增殖。圖6A顯示如在1小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖6B顯示如在30小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖6C顯示如在50小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖6D顯示如在68小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖7顯示12、CMC-PEG-NH2粉末、患者A、0.66 mg/mL劃痕分析之共焦顯微照片。紅色虛線代表劃痕區，在T=1h (通道中不存在細胞)與T=68h (細胞填充通道)之間可觀察到纖維母細胞增殖。圖7A顯示如在1小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖7B顯示如在30小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖7C顯示如在50小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖7D顯示如在68小時觀察到之纖維母細胞增殖。圖8顯示利用膠原基質模型之研究之結果，圖形顯示患者A在7天內之網架直徑。圖9顯示利用膠原基質模型之研究之結果，圖形顯示患者F超過7天之網架直徑。圖10顯示利用膠原基質模型之研究之結果，圖形顯示患者G超過7天之網架直徑。圖11顯示利用膠原基質模型之研究之結果，其中照片指示患者A在第3天及第7天之網架直徑之差異。圖12顯示利用膠原基質模型之研究之結果，其中照片指示患者F在第3天及第7天之網架直徑之差異。圖13顯示利用膠原基質模型之研究之結果，其中照片指示患者G在第3天及第7天之網架直徑之差異。圖14顯示用於檢測蛋白酶之潛在肽修飾之CMC及LC系統之示意圖，其中(a)顯示可顯示向同LC配向之初始系統設置(若在交叉偏光透鏡下觀察，則黑暗)，(b)顯示處於進展中之釋放脂質之肽之裂解，(c)顯示與LC接觸之經裂解脂質，其可起始平面LC重新配向(若在交叉偏光透鏡下觀察，則有色)。圖15顯示展示在施加CMC凝膠時液晶4’-正戊基-4-氰基-聯苯(5CB)填充之TEM (透射電子顯微鏡)網格之顯微照片。圖15A顯示在施加CMC水凝膠-垂直LC配向之前的5CB填充之TEM網格。圖15B顯示在T=0施加CMC水凝膠之後5CB填充之TEM網格；變化為平面LC配向。圖15C顯示在T=2分鐘施加CMC水凝膠之後(平面LC配向) (左圖)及在T=5分鐘施加CMC水凝膠之後(平面LC配向) (右圖)之5CB填充之TEM網格。圖15D顯示在T=10分鐘施加CMC水凝膠之後(保持平面LC配向) (左圖)及在T=90分鐘施加CMC氫之後(保持平面LC配向) (右圖)之5CB填充之TEM網格。

Claims

一種傷口敷料材料，其包含式I化合物：式I 其中 M係凝膠形成聚合物； R係報導分子；且 L係連接體，存在或不存在，且當存在時，L連接M及R。
如請求項1之傷口敷料材料，其中該L不存在。
如請求項2之傷口敷料材料，其中該M與R共價或非共價偶聯。
如請求項1之傷口敷料材料，其中L存在。
如請求項4之傷口敷料材料，其中該連接體L彼此獨立地與M及R共價或非共價偶聯。
如請求項1之傷口敷料材料，其中該報導子包含酶受質。
如請求項6之傷口敷料材料，其中該酶受質係糖、多醣、核酸、醯胺、肽、蛋白質、脂質或其衍生物或其組合。
如請求項7之傷口敷料材料，其中該酶受質係糖、多醣、醯胺、肽、蛋白質或其衍生物或其組合。
如請求項1之傷口敷料材料，其中該凝膠形成聚合物係選自纖維素、羧甲基纖維素、果膠、海藻酸鹽、幾丁聚醣、玻尿酸、多醣或樹膠源聚合物或其衍生物或其任何混合物或組合。
如請求項9之傷口敷料材料，其中該凝膠形成聚合物係羧甲基纖維素或其鹽。
如請求項9之傷口敷料材料，其中該凝膠形成聚合物包含約200至約4000個單體單元。
如請求項11之傷口敷料材料，其中該凝膠形成聚合物包含約500至約2000個單體單元。
如請求項1之傷口敷料材料，其中L包含中性聚合物，該聚合物係乙氧基化多元醇、聚乙烯吡咯啶酮聚合物、聚丙烯、聚烷二醇、多胺或其醚、醯胺或酯。
如請求項13之傷口敷料材料，其中L係包含2至10個之以下單體單元之中性聚合物：乙氧基化多元醇、聚乙烯吡咯啶酮聚合物、聚丙烯、聚烷二醇、多胺或其醚、醯胺或酯。
如請求項13之傷口敷料材料，其中L包含至少一個聚丙二醇亞單元。
如請求項1之傷口敷料材料，其中該報導分子包含可檢測標記。
如請求項16之傷口敷料材料，其中該可檢測標記選自由以下組成之群：發光分子、化學發光分子、螢光染料、螢光淬滅劑、脂質、有色分子、放射性同位素、閃爍體、生物素、抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白、蛋白A、蛋白G、抗體或其片段、聚組胺酸、Ni2+、Flag標籤、myc標籤、重金屬及酶。
如請求項15之傷口敷料材料，其中該報導分子包含選自由以下組成之群之螢光分子：螢光黃、玫瑰紅、四甲基玫瑰紅(tetramethylrhodamine)、R-藻紅素、Cy-3、Cy-5、Cy-7、德克薩斯紅(Texas Red)、法爾紅(Phar-Red)、別藻藍蛋白(APC)、螢光黃胺、伊紅、丹磺醯、傘形酮、5-羧基螢光黃(FAM)、2'7'-二甲氧基-4'5'-二氯-6-羧基螢光黃(JOE)、6-羧基玫瑰紅(R6G)、N,N,N',N'-四甲基-6-羧基玫瑰紅(TAMRA)、6-羧基-X-玫瑰紅(ROX)、4-(4'-二甲基胺基苯基偶氮)苯甲酸(DABCYL)、5-(2'-胺基乙基)胺基萘-1-磺酸(EDANS)、4-乙醯胺基-4'-異硫氰基二苯乙烯-2,2'二磺酸、吖啶、吖啶異硫氰酸酯、r-胺基-N-(3-乙烯基磺醯基)苯基萘二甲醯亞胺-3,5,二磺酸酯(螢蝦黃(Lucifer Yellow) VS)、N-(4-苯胺基-1-萘基)馬來醯亞胺、鄰胺基苯甲醯胺(anthranilamide)、明黃、香豆素、7-胺基-4-甲基香豆素、7-胺基-4-三氟甲基香豆滿(couluarin)(香豆素151)、四氯四溴螢光素(cyanosine)、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、5',5''-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、5',5''-二溴五倍子酚-磺酞(溴五倍子酚紅)、7-二乙基胺基-3-(4'-異硫氰基苯基)-4-甲基香豆素二伸乙基三胺五乙酸酯、4,4'-二異硫氰基二氫-二苯乙烯-2,2'-二磺酸、4,4'-二異硫氰基二苯乙烯-2,2'-二磺酸、4-二甲基胺基苯基偶氮苯基-4'-異硫氰酸酯(DABITC)、伊紅異硫氰酸酯、赤藻紅B、赤藻紅異硫氰酸酯、乙錠(ethidium)、5-(4,6-二氯三嗪-2-基)胺基螢光黃(DTAF)、QFITC (XRITC)、螢光胺(fluorescamine)、IR144、IR1446、孔雀石綠(Malachite Green)異硫氰酸酯、4-甲基傘形酮、鄰甲酚酞、硝基酪胺酸、副玫瑰色素(pararosaniline)、酚紅、B-藻紅素、正鄰苯二甲醛、芘、芘丁酸酯、琥珀醯亞胺基1-芘丁酸酯、活性紅4、麗絲胺(lissamine)玫瑰紅B磺醯氯、玫瑰紅B、玫瑰紅123、玫瑰紅X、磺醯(sulfo)玫瑰紅B、磺醯玫瑰紅101、磺醯玫瑰紅101之磺醯氯衍生物、四甲基玫瑰紅、核黃素、玫紅酸(rosolic acid)及鋱螯合物衍生物。
如請求項16之傷口敷料材料，其中該報導子包含可檢測標記及淬滅劑分子。
如請求項19之傷口敷料材料，其中包含該淬滅劑分子之報導子係由酶或其產物活化。
如請求項16之傷口敷料材料，其中該報導分子或其一部分係在與酶相互作用時釋放。
如請求項16之傷口敷料材料，其中該報導子包含對於傷口特異性酶具特異性之受質。
如請求項22之傷口敷料材料，其中該傷口特異性酶係蛋白酶。
如請求項22之傷口敷料材料，其中該報導子包含受質，該受質對選自由以下組成之群之傷口特異性酶具特異性：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。
如請求項24之傷口敷料材料，其中該報導子包含對於MMP-2及MMP-9或其組合具特異性之受質。
一種組合物，其包含如請求項1之敷料材料，且進一步包含載劑。
一種醫藥組合物，其包含如請求項26之組合物，且其中該載劑係醫藥上可接受之載劑。
如請求項27之醫藥組合物，其進一步包含抗生素化合物或傷口癒合性肽。
如請求項28之醫藥組合物，其中該抗生素係選自由以下組成之群：β-內醯胺、氟喹啉酮、胺基醣苷、四環素、甘胺醯基環素及多黏菌素。
如請求項29之醫藥組合物，其中該傷口癒合性肽係纖維母細胞生長因子(FGF)或血小板衍生之生長因子(PDGF)。
一種診斷傷口狀態之方法，其包含以下步驟：使傷口與如請求項1之傷口敷料材料接觸以允許報導分子轉化為可檢測信號；及，檢測信號。
如請求項31之方法，其中該報導分子轉化為可檢測信號係由傷口特異性蛋白酶進行。
如請求項32之方法，其中該傷口特異性蛋白酶係選自由以下組成之群：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。
如請求項31之方法，其進一步包含確定慢性傷口或經感染傷口存在或不存在之步驟。
如請求項34之方法，其中確定慢性傷口或經感染傷口存在或不存在之步驟包含以下步驟：量測該傷口之參數，將該經量測參數與臨限值比較，及若該傷口之參數值高於該臨限值，則確定該傷口是慢性或經感染。
如請求項35之方法，其中該參數係選自由以下組成之群之傷口特異性蛋白酶之量或活性：MMP-1 (膠原酶)、MMP-2 (明膠酶A)、MMP-3 (基質裂解素1)、MMP-8 (嗜中性球膠原酶)、MMP-9 (明膠酶B)、人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)、細胞自溶酶G、尿激酶型纖維蛋白溶酶原活化劑(uPA)及溶菌酶。
一種治療個體之慢性或經感染傷口之方法，其包含向該個體投與如請求項1之敷料材料，其中該敷料材料係以局部或經皮施加至該傷口。
一種製備如請求項1之式I化合物之方法，其中L不存在，該方法包含使凝膠形成聚合物M與報導子區R偶聯，藉此生成式M-R之化合物，其中M及R各自個別地如請求項1中所述。
一種製備如請求項1之式I化合物之方法，其中L存在，該方法包含使凝膠形成聚合物M與連接體L偶聯，藉此生成前體化合物M-L，及使該前體化合物M-L與報導子區R偶聯，藉此生成式M-L-R化合物，其中M、L及R各自個別地如請求項1中所述。
一種製備如請求項1之式I化合物之方法，其中L存在，該方法包含使該連接體L與報導子區R偶聯，藉此生成前體化合物L-R，及使該前體化合物L-R與凝膠形成聚合物M偶聯，藉此生成式M-L-R化合物，其中M、L及R各自個別地如請求項1中所述。
一種傷口敷料材料，其係選自由以下組成之群：及，且其中n = 200至4000。
一種傷口敷料材料，其包含式II化合物：式II 其中 M係凝膠形成聚合物； PEP係肽及至少一個胺基酸；且 L係連接體，存在或不存在，且當存在時，L連接M及PEP。