TW201625627A - 新穎化合物 - Google Patents

新穎化合物 Download PDF

Info

Publication number
TW201625627A
TW201625627A TW104118800A TW104118800A TW201625627A TW 201625627 A TW201625627 A TW 201625627A TW 104118800 A TW104118800 A TW 104118800A TW 104118800 A TW104118800 A TW 104118800A TW 201625627 A TW201625627 A TW 201625627A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
group
compound
alkyl
formula
phenyl
Prior art date
Application number
TW104118800A
Other languages
English (en)
Inventor
艾莉莎貝塔 亞曼尼
卡梅莉達 卡帕迪
強納森 馬克 薩頓
羅伯特 安德魯 希爾德
Original Assignee
吉斯藥品公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 吉斯藥品公司 filed Critical 吉斯藥品公司
Publication of TW201625627A publication Critical patent/TW201625627A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/14—Antitussive agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/0075—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a dry powder inhaler [DPI], e.g. comprising micronized drug mixed with lactose carrier particles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/008—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy comprising drug dissolved or suspended in liquid propellant for inhalation via a pressurized metered dose inhaler [MDI]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本發明係關於具有人類嗜中性白血球彈性蛋白酶抑制性質的嘧啶酮衍生物，及其治療用途。

Description

新穎化合物
本發明係關於具有人類嗜中性白血球彈性蛋白酶抑制性質的嘧啶酮衍生物，及其治療用途。
人類嗜中性白血球彈性蛋白酶(HNE)係一種存於嗜中性白血球之嗜苯胺顆粒(azurophilic granules)中的32kDa絲胺酸蛋白酶。其參與廣範圍之細胞外基質蛋白質(包括纖維黏結蛋白(fibronectin)、層黏蛋白(laminin)、蛋白多醣(proteoglycans)、第III型及第IV型膠原蛋白以及彈性蛋白(elastin))的降解(Bieth,G.於Regulation of Matrix accumulation,Mecham,R.P.(Eds),Academic Press,NY,USA 1986,217-306中)。HNE長久以來被認為在體內平衡中透過修復及處置經由組織結構蛋白質之降解所產生之受損組織而扮演重要的角色。其亦藉由降解細菌體來提供防衛防止細菌入侵。除其對基質組織的效應外，HNE已涉及IL-8基因表現之上調且亦誘發自肺的上皮細胞釋放IL-8。在由暴露於菸煙所誘發之慢性阻塞性肺病的動物模型中，小分子抑制劑及HNE之蛋白質抑制劑皆抑制發炎反應及氣腫之發展(Wright,J.L.等人，Am.J.Respir.Crit.Care Med.2002,166,954-960；Churg,A.等人，Am.J.Respir.Crit.Care Med.2003,168,199-207)。因此，HNE可在嗜中性白血球流入係為表徵性特徵之慢性呼吸疾病中參與基質破壞及增強發炎反 應。實際上，咸信HNE參與若干肺病，包括慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纖維變性(cystic fibrosis；CF)、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、肺氣腫、肺炎及肺纖維化。其亦參與若干其中涉及組織重塑之心血管疾病，例如，心衰竭及於急性心肌梗塞後產生缺血組織傷害。
COPD係一種涵蓋三種皆促進氣流限制之不同病理症狀的涵蓋性術語：慢性支氣管炎、氣腫及呼吸道末梢疾病。一般而言，此三者將不同程度地存在於患有COPD的患者中，且三者皆可歸因於由嗜中性白血球所介導的發炎，如由在COPD患者之支氣管肺泡灌洗(BAL)流體中所觀察到之增加數量的嗜中性白血球所證實(Thompson,A.B.、Daughton,D.等人，Am.Rev.Respir.Dis.1989,140,1527-1537)。COPD中的主要致病決定因素長久以來被認為係蛋白酶-抗蛋白酶平衡(亦稱為「彈性蛋白酶：抗彈性蛋白酶假說」)，其中HNE及內源性抗蛋白酶(諸如α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)、分泌性白血球蛋白酶抑制劑(SLPI)及前彈力素(pre-elafin))的失衡導致COPD的各種發炎病症。具有蛋白酶抑制劑α1-抗胰蛋白酶之基因缺陷的個體會發展出嚴重度隨時間增加的氣腫(Laurrell,C.B.、Erikkson,S Scand.J.Clin.Invest.1963 15,132-140)。因此，過量的HNE具破壞性，其會導致肺的形態瓦解並損失彈性及破壞肺中氣道的肺泡附著(氣腫)，同時增加微血管滲透性及黏液過度分泌(慢性支氣管炎)。
迄今為止於技藝中已揭示若干種人類嗜中性白血球抑制劑。特定而言，國際專利申請案第WO2011/110858號及第WO2011/110859號描述一些具有人類嗜中性白血球彈性蛋白酶抑 制性質的嘧啶衍生物及其治療用途。
儘管如上所述迄今為止已揭示若干種HNE抑制劑，但仍有需要其他的HNE抑制劑。特定而言，仍有需要對HNE酶抑制賦有高效力的其他HNE抑制劑。識別出其他對HNE酶抑制賦有高效力且將展現作為吸入治療之適當發展概況的HNE抑制劑亦將尤其有利。
本發明藉由提供本發明化合物而解決上述需求。
其他HNE抑制劑說明於國際專利申請案第WO2014/095700號中。
本發明提供作為HNE抑制劑之新穎化合物，且其適用於治療HNE活性於其中存在影響的疾病或病症。
在一態樣中，本發明提供一種式(I)化合物、或其醫藥上可接受之鹽：
其中 A係CH或N；B係CH或N；D係CH或N；E係CH或N；R1係-CN或基團-C(O)-VR2；V係選自由-O-、-(CH2)-及-NH-所組成之群；R2係氫或視情況經一或多個選自由鹵素、OR3及-NR3R7所組成之群之取代基取代的-(C1-C6)烷基；R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基；R4係選自-CF3及-CHF2，R5係選自下列之基團
j係0或1至4之整數；y係0或1至4之整數；L及T獨立地為在任何自由位置處帶有-X-基團的4至8員雜環烷基環； X係選自-O-、-S-、-S(O2)-及-NR6；W係選自由下列所組成之群：-N(R3)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)N(R3)-、-N(R3)C(O)N(R3)-、-C(O)N(R3)-、-NR3C(O)-、-SO2-、-SO2N(R3)-、-NR3S(O2)-、-S-、-C(O)O-、-OC(O)-、視情況經取代的(C1-C6)伸烷基、視情況經取代的(C3-C6)伸環烷基及視情況經取代的(C4-C7)伸雜環烷基；G係氫或係選自由下列所組成之群：鹵素、-CN、-N(R3)(R7)、-OR3、-OC(O)OR3、-OC(O)NR3R7、-N(R3)C(N)N(R3)(R7)、-N(R3)C(O)N(R3)(R7)、-C(O)N(R3)(R7)、-N(R3)C(O)R7、-S(O2)R3、-S(O2)N(R3)(R7)、-N(R3)S(O2)(R7)、-SR3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、視情況經取代的(C1-C6)烷基、視情況經取代的(C3-C6)環烷基及視情況經單或二取代的(C4-C7)雜環烷基；Ra係氫或係選自由-OH、-NH2及視情況經取代的(C1-C6)烷基所組成之群；R6係氫或係選自由-S(O2)R7、-CO2R7、-CONR3R7、-SO2NR3R7及視情況經取代的(C1-C6)烷基所組成之群；R7係氫或係視情況經取代的(C1-C6)烷基；其中，除非另外明確說明，否則「視情況經取代」意指視情況經一或多個選自由下列所組成之群之取代基取代：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)羥烷基、-OH、-NH2、鹵素、-CF3及-OCF3；-NR3R7及其醫藥上可接受之鹽，其限制條件為當y係1至4之整數、W係-O-及j係0時，則G不為氫或視情況經一或多個(C1-C6)烷氧基取代的(C1-C6)烷基； 當y係1至4之整數、W係-N(R3)-、R3係氫或(C1-C6)烷基及j係0時，則G不為氫或(C1-C6)烷基；當y係0、W係-C(O)N(R3)-、R3係氫或(C1-C6)烷基及j係0時，則G不為H或視情況經-NR3R7取代之(C1-C6)烷基，其中R3及R7獨立地為H或(C1-C6)烷基；當y係0、W係-S(O2)-及j係0時，則G不為視情況經-OH取代之(C1-C6)烷基；當y係0、W係-S(O2)N(R3)-、R3係H及j係0時，則G不為氫；當y係0、W係-S(O2)N(R3)-、R3係H或(C1-C4)烷基及j係0時，則G不為氫或(C1-C6)烷基。
式(I)化合物可以其之鹽形式(尤其係醫藥上可接受之鹽)、N-氧化物、水合物、溶劑合物及多形體製備得。當提及本文化合物，或提及「本發明化合物」、「式(I)化合物」等等時，其包括無論是否呈鹽、N-氧化物、水合物、溶劑合物或多形體形式的該等化合物。
本發明化合物可用於治療或預防其中涉及HNE的疾病，例如慢性阻塞性肺病(COPD)、支氣管擴張症、慢性支氣管炎、肺纖維化、肺炎、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、肺氣腫、吸菸誘發的氣腫及囊性纖維變性。
因此，本發明之其他態樣為(i)包含本發明化合物及醫藥上可接受之載劑或賦形劑的醫藥組成物；及(ii)本發明化合物用於製造用來治療或預防其中涉及HNE之疾病或病症之藥劑的用途。
在一具體例中，本發明提供一種式(IB)化合物或其醫 藥上可接受之鹽：術語術語「(Ca-Cb)烷基」(其中a及b係整數)係指具有自a至b個碳原子的直鏈或分支鏈烷基。因此，例如，當a係1及b係6時，該術語包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基及正己基。
依此類推，表述語「(Ca-Cb)伸烷基」係指如以上所定義之二價烷基。
術語「(Ca-Cb)環烷基」(其中a及b係整數)係指視情況含有a至b個環碳原子的飽和單環、雙環或三環烴基。實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基及環庚基、金剛烷基。
依此類推，表述語「(Ca-Cb)伸環烷基」(其中a及b係整數)係指如以上所定義之二價環狀基團。
如本文所用，術語「(Ca-Cb)雜環烷基」(其中a及b係整數)係指飽和單環或雙環非芳族基團，其中至少一個環碳原子經雜原子(例如，-N-、NH、-S-、-O-或-S(O2)-)置換。(Ca-Cb)雜環烷基之實例包括吡咯啶基、噻唑啶基、哌口井基、哌啶基、啉基、硫代啉基。
依此類推，表述語「(Ca-Cb)伸雜環烷基」(其中a及b係整數)係指如以上所定義的二價雜環基團。特定而言，表述語「(Ca-Cb)伸雜環烷基」係指二價(Ca-Cb)雜環烷基基團(諸如(例如)伸吡咯啶基)，其中「(Ca-Cb)雜環烷基」係如以上所定義。
L係透過經Ra基團取代之碳原子鍵聯至其餘分子的4至8員雜環烷基環，其中該雜環烷基環在任何自由位置處帶有選 自-O-、-S-、-S(O2)-及-NR6的-X-基團；T係透過氮原子鍵聯至其餘分子的4至8員雜環烷基環，其中該雜環烷基環在任何自由位置處帶有選自-O-、-S-、-S(O2)-及-NR6的-X-基團；術語「(Ca-Cb)烷氧基」(其中a及b係整數)係指直鏈及分支鏈烷氧基，其中組成碳原子之數目係在a至b之範圍內。特定的烷基係甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基及第三丁氧基。
術語「鹽」包括鹼加成及酸加成鹽。
術語「醫藥上可接受之鹽」係指式(I)化合物之衍生物，其中母化合物藉由利用任何習知意欲為醫藥上可接受之鹼或酸將任何若存在之游離酸或鹼性基團轉變為對應加成鹽而經適當地改質。
呈酸性的本發明化合物可與鹼(諸如鹼金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉及氫氧化鉀；鹼土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈣、氫氧化鋇及氫氧化鎂)；與有機鹼(例如，N-甲基-D-還原葡糖胺、膽鹼叁(羥甲基)胺基甲烷、L-精胺酸、L-離胺酸、N-乙基哌啶、二苯甲胺及其類似物)形成鹽，包括醫藥上可接受之鹽。呈鹼性的該等化合物可與無機酸(例如，與氫鹵酸諸如氫氯酸或氫溴酸、硫酸、硝酸或磷酸及其類似物)，及與有機酸(例如，與乙酸、酒石酸、琥珀酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、蘋果酸、水楊酸、檸檬酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸、麩胺酸、乳酸、及苯乙醇酸及其類似物)形成鹽，包括醫藥上可接受之鹽。具有四級氮的該等化合物亦可與醫藥上可接受之相對離子(諸如氯離子、溴離子、乙酸根、甲酸根、對甲苯磺酸根、琥珀酸根、半琥珀酸根、萘-雙磺酸 根、甲磺酸根、羥萘酸根(xinafoate)、及其類似物)形成四級鹽。
在本發明化合物具有至少一個立體中心的情況下，其可以鏡像異構物存在。當根據本發明之化合物具有兩個或更多個立體中心時，其可另以非鏡像異構物存在。當明瞭所有該等異構物及其以任何比例的混合物皆係涵蓋於本發明之範疇內。
當明瞭通式(I)之化合物包含至少一個立體中心，即由以下打上星號的碳原子(1)表示，且因此存在光學立體異構物：
在一具體例中，本發明係關於式(I)’之化合物，其係如以上所定義之式(I)化合物，其中碳(1)的絕對組態係如下文所示：
在另一具體例中，本發明係關於式(I)”之化合物，其係如以上所定義之式(I)化合物，其中碳(1)的絕對組態係如下文所示：
碳(1)之絕對組態係基於Cahn-Ingold-Prelog命名法根據基團的優先順序來指定。
當明瞭下文針對式(I)化合物所述之所有較佳群組或具體例可相互組合及在作適當修正後應用於式(I)’及(I)”之化合物。
在一具體例中，關於式(I)化合物，A係CH，B係CH及D係CH。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中W係選自由下列所組成之群：-C(O)-、-OC(O)N(R3)-、-N(R3)C(O)N(R3)-、-NR3C(O)-、-NR3S(O2)-、-S-、-C(O)O-、-OC(O)-、視情況經取代的(C1-C6)伸烷基、視情況經取代的(C3-C6)伸環烷基及視情況經取代的(C4-C7)伸雜環烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2，W係-NR3S(O2)-，R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基，j係1及G係氫。
在另一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2或3，W係-S-，j係0及G係視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在另一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2或3，W係-SO2-，j係0及G係視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在另一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2或3，W係-NR3C(O)-，R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基，j係1及G係氫。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係選自下列之基團
其中Ra係氫或係選自由-OH、-NH2及視情況經取代之(C1-C6)烷基所組成之群；L及T獨立地為在任何自由位置處帶有-X-基團的4至8員雜環烷基環；X係選自-O-、-S-、-S(O2)-及-NR6；R6係氫或係選自由-SO2R7、-CO2R7、-CONR3R7、-SO2NR3R7及視情況經取代的(C1-C6)烷基所組成之群；R3及R7獨立地為氫或視情況 經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R4係選自-CF3及-CHF2。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R1係-CN或基團-C(O)-VR2；V係-O-；R2係視情況經一或多個選自由鹵素、-OR3及-NR3R7所組成之群之取代基取代的-(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-C(O)N(R3)-，j係2，G係-OR3及R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-C(O)N(R3)-，j係0，G係視情況經-OH取代的(C1-C6)烷基及R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-C(O)N(R3)-，j係0，G係(C3-C6)環烷基及R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-C(O)N(R3)-，j係2，G係-S(O2)R3及R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係1，W係-C(O)N(R3)-，j係0，G係(C1-C6)烷基及R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係1，W係-C(O)-，j係0，T係帶有-X-基團的4至8員雜環烷基環，其中X係-O-。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2，W係-N(R3)-，R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基，j係1，G係(C4-C7)雜環烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2，W係(C4-C7)伸雜環烷基，j係1，G係-N(R3)(R7)，其中R3及R7獨立地為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2，W係-N(R3)-，R3係(C1-C6)烷基，j係0，G係(C4-C7)雜環烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2，W係(C4-C7)伸雜環烷基，j係0，G係-N(R3)(R7)，其中R3及R7獨立地為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係2，W係-N(R3)-，R3係(C1-C6)烷基，j係3，G係-N(R3)(R7)，其中R3及R7獨立地為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-N(R3)C(O)N(R3)-，j係0，G係(C1-C6)烷基及R3係視情況經-OH或-NR3R7取代的(C1-C6)烷基，其中R3及R7獨立地為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-N(R3)C(O)N(R3)-，j係0，G係(C1-C6)烷基及R3係視情況經-OH或-NR3R7取代的(C1-C6)烷基，其中R3及R7獨立地 為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-N(R3)-，j係0，G係-C(O)OR3，其中R3係氫或視情況經NR3R7取代的(C1-C6)烷基，其中R3及R7獨立地為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-NR3C(O)-，j係0，G係(C1-C6)烷基及R3係氫。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-O-，j係0，G係(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係-O-，j係2，G係-OR3及R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係視情況經-OH取代的(C1-C6)伸烷基，j係2，G係 -OR3，其中R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團 其中y係0，W係視情況經-OH取代的(C1-C6)伸烷基，j係0，G係-OR3，其中R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團
其中y係0，W係視情況經-OH取代的(C1-C6)伸烷基，j係0，G係-S(O2)R3，其中R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
在一具體例中，關於式(I)化合物，R5係以下基團
其中y係0，W係視情況經-OH取代的(C1-C6)伸烷基，j係0，G係(C1-C6)烷基。
在另一具體例中，本發明化合物係選自由以下所組成之群：(R)-5-[4-氰基-2-(R)-1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(S)-1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯； (R)-5-[2-(2-乙醯胺基-丙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-{2-(3-乙醯基-甲基-胺基)-丙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-{4-氰基-2-[3-(甲磺醯基-1-甲基胺基)-丙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[2-(2-乙醯胺基-乙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[2-(2-乙醯胺基-乙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-{2-[2-(乙醯基-甲基-胺基)-乙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基胺基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-{4-氰基-2-[3-(甲磺醯基-1-甲基胺基)-乙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯； (R)-5-[4-氰基-2-(2-甲基硫基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲基硫基-丙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-丙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基胺甲醯基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙基胺甲醯基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙基胺甲醯基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(4-氰基-2-環丙基胺甲醯基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯； (R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-乙基胺甲醯基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-((R)-1-羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-((S)-1-羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(4-氰基-2-甲基胺甲醯基甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(4-氰基-2-二甲基胺甲醯基甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-啉-4-基-2-側氧基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-{2-[2-(三亞甲亞胺-3-基甲基-甲基-胺基)-乙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯甲酸鹽；(R)-5-{4-氰基-2-[2-(3-甲基胺基甲基-三亞甲亞胺-1-基)-乙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯甲酸鹽； (R)-5-{4-氰基-2-[2-(甲基-哌啶-4-基-胺基)-乙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯甲酸鹽；(R)-5-{4-氰基-2-[2-(4-二甲胺基-哌啶-1-基)-乙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(4-氰基-2-{2-[(3-二甲胺基-丙基)-甲基-胺基]-乙基}-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(3-乙基-脲基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-{4-氰基-2-[3-(2-羥基-乙基)-脲基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；R)-5-{4-氰基-2-[3-(2-二甲胺基-乙基)-脲基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(4-氰基-2-乙氧羰基胺基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-二甲胺基-乙氧羰基胺基)-苯基]-7-甲基-3- 側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(S)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(S)-5-[4-氰基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯；(R)-5-[4-氰基-2-((S)-1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(R)-5-[4-氰基-2-((R)-1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7- 甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(S)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈；(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈。
本發明化合物之治療效用適於任何已知至少部分由人類嗜中性白血球彈性蛋白酶之作用介導的疾病。舉例而言，本發明化合物可有利於治療慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纖維變性(CF)、支氣管擴張症、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、肺氣腫、肺炎及肺纖維化。
本發明化合物適用於治療發炎性呼吸病症，例如哮喘(輕度、中度或重度)、類固醇抗性哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纖維變性(CF)、肺水腫、肺栓塞、肺炎、肺結節病、肺氣腫、矽肺症、肺纖維化、肺高血壓、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、氣腫、慢性支氣管炎、肺結核、麴黴病(aspergillosis)及其他黴菌感染、過敏性肺炎、肺血管之血管性及栓塞性病症、止咳活性包括治療與氣道之發炎性及分泌性病症相關聯的慢性咳嗽、因呼吸道融合病毒、流行性感冒、冠狀病毒(包括嚴重急性呼吸道症候群，SARS)及腺病毒所引起的感染、支氣管擴張症及肺癌。
本發明亦關於包含本發明化合物作為活性成分之醫 藥調配物。其他化合物可與本發明化合物組合用來預防及治療肺的發炎性疾病。因此，本發明亦關於用來預防及治療肺的發炎性疾病之醫藥組成物，其包含治療有效量的本發明化合物及一或多種其他治療劑。
用於與本發明化合物之組合療法的適宜治療劑包括：(1)皮質類固醇，例如布地奈德(budesonide)、倍氯米松(beclomethasone)、倍氯米松(例如，作為單或二丙酸酯)、氟尼縮松(flunisolide)、氟替卡松(fluticasone)(例如作為丙酸或呋喃甲酸酯)、環索奈德(Ciclesonide)、莫米松(mometasone)(例如作為呋喃甲酸酯)、莫米松地奈德(mometasone desonide)、羅氟奈德(rofleponide)、氫皮質酮(hydrocortisone)、潑尼松(prednisone)、潑尼松龍(prednisolone)、甲基潑尼松龍、萘非可特(naflocort)、地夫可特(deflazacort)、乙酸鹵潑尼松(halopredone acetate)、丙酮化氟新龍(fluocinolone acetonide)、氟欣諾能(fluocinonide)、氯可托龍(clocortolone)、替潑尼旦(tipredane)、潑尼卡酯(prednicarbate)、二丙酸安氯皮質醇(alclometasone dipropionate)、鹵米松(halometasone)、利美索龍(rimexolone)、丙酸地潑羅酮(deprodone propionate)、去炎舒松(triamcinolone)、倍他米松(betamethasone)、氟氫可的松(fludrocortisone)、脫氧皮質酮(desoxycorticosterone)、羅氟奈德(rofleponide)、二氯乙酸艾潑諾酯(etiprednol dicloacetate)及其類似物。類固醇藥物可另包括於臨床或臨床前期發展用於呼吸疾病的類固醇，諸如GW-685698、GW-799943、GSK 870086、QAE397、NCX-1010、NCX-1020、NO-地塞米松(NO-dexamethasone)、PL-2146、NS-126(先前為ST-126)。類固醇藥 物亦可另包括經發展具有降低副作用分佈之新一代分子諸如選擇性糖皮質激素受體激動劑(SEGRA)，包括ZK-216348及AZD5423；(2)β2-腎上腺素接受器激動劑，諸如沙丁胺醇(albuterol)、班布特羅(bambuterol)、特布他林(terbutaline)、非諾特羅(fenoterol)、佛莫特洛(formoterol)、反丁烯二酸佛莫特洛、沙美特羅(salmeterol)、沙美特羅羥萘酸酯(salmeterol xinafoate)、福莫特羅(arformoterol)、酒石酸福莫特羅、茚達特羅(indacaterol；QAB-149)、卡莫特羅(carmoterol)、BI 1744 CL、GSK159797(米維特羅(milveterol))、GSK59790、GSK159802、GSK642444(維藍特羅(vilanterol))、GSK678007、GSK96108、克倫特羅(clenbuterol)、丙卡特羅(procaterol)、比托特羅(bitolterol)、LAS100977(阿貝特羅(abediterol))、BI1744CL(奧達特羅(olodaterol))及部洛沙特羅(brodxaterol)；(3)白三烯素調節劑，例如孟魯司特(montelukast)、扎魯司特(zafirlukast)及普侖司特(pranlukast)；(4)抗膽鹼性藥劑，例如選擇性毒蕈鹼-3(M3)受體拮抗劑諸如異丙托溴銨(ipratropium bromide)、托溴銨(tiotropium)、噻托溴銨(tiotropium bromide)(Spiriva®)、格隆溴銨(glycopyrronium bromide)、阿地溴銨(aclidinium bromide)、LAS34273、GSK656398、GSK233705、GSK573719(蕪地溴銨(umeclidinium))、LAS35201、QAT370及氧托溴銨(oxytropium bromide)；(5)磷酸二酯酶-IV(PDE-IV)抑制劑，例如羅氟司特(roflumilast)、西洛司特(cilomilast)或茶鹼；(6)鎮咳劑，諸如可待因(codeine)或右美沙芬(dextramorphan)；及(7)非類固醇消炎劑(NSAID)，例如布洛芬(ibuprofen)或酮洛芬(ketoprofen)；(8)黏液溶解藥，例如N乙醯基半胱胺酸或福多司坦(fudostein)；(9)袪痰劑 /黏液促動(mucokinetic)調節劑，例如胺溴索(ambroxol)、高滲壓溶液(例如食鹽水或甘露糖醇)或界面活性劑；(10)肽黏液溶解藥，例如重組人類去氧核醣核酸酶I(去氧核醣酶-α及rhDNase)或螺殺菌素(helicidin)；(11)抗生素，例如阿奇黴素(azithromycin)、泰百黴素(tobramycin)及氮烯內醯胺(aztreonam)；及(12)p38有絲分裂劑活化蛋白(MAP)激酶抑制劑，諸如GSK 856553及GSK 681323；(12)酪胺酸激酶(Janus Kinase；JAK)之抑制劑，諸如CP-690550或GLPG0634；(13)脾酪胺酸激酶(SYK)抑制劑，諸如R406、R343或PRT062607；(14)磷脂肌醇3-激酶(PI3K)之δ及/或γ同功酶之抑制劑；(15)抗逆轉錄病毒劑諸如立貝維爾(ribavirin)、紮那米韋(zanamivir)或拉尼米韋(laninamivir)；(16)PPAR-γ激動劑諸如吡格列酮(pioglitazone)及羅格列酮(rosiglitazone)。
在一態樣中，本發明提供經吸入投與本發明化合物組合包括(但不限於)下列之其他消炎藥物及支氣管擴張藥物組合(即三重組合產品)的用途：沙美特羅羥萘酸酯/丙酸氟替卡松(Advair/Seretide®)、維藍特羅/呋喃甲酸氟替卡松(BREO ELLIPTATM)、反丁烯二酸佛莫特洛/布地奈德(Symbicort®)、反丁烯二酸佛莫特洛/呋喃甲酸莫米松、反丁烯二酸佛莫特洛/二丙酸倍氯米松(Foster®)、反丁烯二酸佛莫特洛/丙酸氟替卡松(FlutiForm®)、茚達特羅/呋喃甲酸莫米松、茚達特羅/QAE-397、GSK159797/GSK 685698、GSK159802/GSK 685698、GSK642444/GSK 685698、反丁烯二酸佛莫特洛/環索奈德、酒石酸福莫特羅/環索奈德。
在另一態樣中，本發明提供經吸入投與本發明化合物 組合包括(但不限於)下列之其他支氣管擴張藥物組合(特定言之β2激動劑/M3拮抗劑組合)(即三重組合產品)的用途：沙美特羅羥萘酸酯/噻托溴銨、反丁烯二酸佛莫特洛/噻托溴銨、反丁烯二酸佛莫特洛/格隆銨(glycopyrrolate)(PT003)、BI 1744 CL/噻托溴銨、茚達特羅/NVA237、茚達特羅/QAT-370、佛莫特洛/LAS34273、蕪地溴銨/維藍特羅(AnoroTM)、GSK159797/GSK 573719、GSK159802/GSK 573719、GSK642444/GSK 573719、GSK159797/GSK 233705、GSK159802/GSK 233705、GSK642444/GSK 233705。
第一及第二活性成分之重量比可改變且將視各成分的有效劑量而定。一般而言，將使用各者的有效劑量。
本發明化合物之預防或治療劑量的量值當然將隨待治療症狀之嚴重度性質及特定化合物及其給藥途徑而改變，且一般將於醫藥技藝中視需要由臨床試驗決定。其亦將根據個別病患的年齡、體重及反應而改變。一般而言，每日劑量範圍將在每公斤哺乳動物體重約0.001毫克至約100毫克之範圍內，較佳每公斤0.01毫克至約50毫克，及最佳每公斤0.1至10毫克，以單一或分開的劑量。另一方面，在一些情況中可能需要使用在此等界限外的劑量。
本發明之另一態樣提供包含本發明化合物及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物。如於醫藥組成物中之術語「組成物」意欲涵蓋包含活性成分及構成載劑之惰性成分(醫藥上可接受之賦形劑)的產品，以及任何直接或間接地由任兩種或更多種成分之組合、複合或聚集，或由一或多種成分之解離，或由一或多種成分之其他類型的反應或交互作用得到的產品。因此，本發明之醫藥組成 物涵蓋任何經由混合本發明化合物、其他活性成分、及醫藥上可接受之賦形劑所製得的組成物。
本發明之醫藥組成物包含作為活性成分的本發明化合物或其醫藥上可接受之鹽，且亦可包含醫藥上可接受之載劑及視需要的其他治療成分。術語「醫藥上可接受之鹽」係指由包括無機鹼或酸及有機鹼或酸之醫藥上可接受之無毒鹼或酸製備得的鹽。
可採用任何適宜的給藥途徑來提供哺乳動物(尤其人類)有效劑量的本發明化合物。在治療用途中，活性化合物可經由任何方便、適宜或有效的途徑投與。已知適宜的給藥途徑，且其包括經口、經靜脈、經直腸、非經腸道、外用、經眼、經鼻、經頰及肺(經由吸入)。
已知適於經吸入給藥的組成物，且其可包括已知用於該等組成物中之載劑及/或稀釋劑。該組成物可包含0.01-99重量%之活性化合物。較佳地，單位劑量包含1微克至10毫克量的活性化合物。
最適宜的劑量值可由任何已知的適當方法決定。然而，當明瞭針對任何特定病患的特定量將取決於多種因素，包括所使用之特定化合物的活性、病患的年齡、體重、飲食、一般健康及性別、給藥時間、給藥途徑、排泄速率、任何其他藥物的使用、及待治療疾病的嚴重度。
為經由吸入傳遞，活性化合物較佳係呈微粒形式。其可藉由各種技術(包括噴霧乾燥、冷凍乾燥及微粒化)製備得。
舉例來說，可將本發明之組成物製備成為用於自噴霧器遞送之懸浮液或成為存於液體推進劑(例如用於壓力式定量吸入 器(pressurised metered dose inhaler；PMDI))中之氣溶膠。適用於PMDI中之推進劑為熟悉技藝人士所知曉，且包括CFC-12、HFA-134a、HFA-227、HCFC-22(CCl2F2)及HFA-152(CH4F2及異丁烷)。
在本發明之一較佳具體例中，本發明之組成物係呈乾粉形式，用於使用乾粉吸入器(DPI)遞送。已知許多類型的DPI。
用於經由投藥遞送之微粒可利用促進遞送及釋放的賦形劑來調配。舉例來說，在乾粉調配物中，可利用促進自DPI流入至肺中的大載劑顆粒來調配微粒。已知適宜的載劑顆粒，且其包括乳糖顆粒；其可具有大於90微米的質量中值空氣動力直徑。
在基於氣溶膠之調配物的情況中，較佳組成物為：本發明化合物 24毫克/罐
卵磷脂，NF液體濃縮物 1.2毫克/罐
三氯氟甲烷，NF 4.025克/罐
二氯二氟甲烷，NF 12.15克/罐。
本發明化合物可與其他用於治療/預防/抑制或減輕本發明化合物適用之疾病或病症的藥物組合使用。該等其他藥物可藉由通常使用的途徑及以通常使用量投與，因此與本發明化合物同時或依序地投與。當本發明化合物與一或多種其他藥物同時使用時，除本發明化合物外尚含有該等其他藥物的醫藥組成物為較佳。因此，本發明之醫藥組成物包括彼等除本發明化合物外亦包含一或多種其他活性成分者。
本發明之藥劑可以吸入形式投與。氣溶膠產生可使用(例如)壓力驅動噴射霧化器或超音波霧化器，較佳使用推進劑驅動 之計量氣溶膠或自(例如)吸入膠囊或其他「乾粉」傳遞系統之微粒化活性化合物的無推進劑投與來進行。
活性化合物可如所述取決於所使用的吸入器系統來計量。除活性化合物外，投與形式可另包含賦形劑，諸如(例如)，推進劑(例如，在計量氣溶膠情況中之氟利根(Frigen))、表面活性物質、乳化劑、安定劑、防腐劑、芳香劑、填料(例如，在粉末吸入器之情況中的乳糖)、或若適用之其他活性化合物。
關於吸入用途，可取得大量可使用適用於病患之吸入技術來產生及投與最佳粒度之氣溶膠的系統。除使用配接器(隔離件、膨脹器)及梨形容器(例如，Nebulator®、Volumatic®)、及發射膨化噴霧之自動裝置(Autohaler®)外，關於計量氣溶膠，特定言之在粉末吸入器之情況中，可取得許多技術溶液(例如，Diskhaler®、Rotadisk®、Turbohaler®或例如如EP-A-0505321所述之吸入器)。
合成方法
在本發明之一態樣中，提供一種根據下文流程A-J中所記述之一般合成途徑製備本發明化合物(Ia)(即式(I)化合物，其中R1係-C(O)-VR2)之方法。E及R4係如前文所定義。
式(IV)化合物可自式(III)化合物經由與氯甲酸乙酯(或焦碳酸乙酯)於鹼(諸如三乙胺)之存在下在溶劑(諸如THF)中於0℃至回流之溫度下反應而製備得。式(IV)化合物可經由於適當溶劑中加熱而轉變為式(Ia)化合物。適宜條件包括使用諸如IMS之溶劑及使用微波輻照於高至150℃之溫度下加熱或於諸如正丁醇之溶劑中在回流下的習知加熱。
式(III)化合物(其中R2係(C1-C6)烷基)可根據以下流程B來製備：
式(V)化合物可與苯甲醛(VI)(諸如3-溴-4-甲醯基-苯甲腈)及乙醯乙酸酯(諸如乙醯乙酸乙酯)於酸(諸如TMS-多磷酸酯或多磷酸)之存在下在溶劑(諸如THF)中於自室溫至回流之溫度下反應，得到式(VII)化合物，其中R2係(C1-C6)烷基及其他基團係如針對式(I)化合物所定義。式(III)化合物可自式(VII)化合物經由與氧化劑(諸如尿素過氧化氫)反應，接著於IMS中利用水合肼原位處理來製備。
此外，式(Ia)’化合物(其係如以上所定義之式(I)’化合物，其中碳(1)之絕對組態係如下文所示)可根據流程C來製備。
流程C
舉例來說，式(II)化合物(其中E=CH及R4=CF3)可自式(V)化合物經由使用於流程B中針對式(V)化合物轉變為式(VIII)化合物所述之類似方法與3-溴-4-甲醯基-苯甲酸(VIa)反應來獲得。式(II)’化合物(其係式(II)化合物，其中於立體中心(1)處之絕對組態係如流程C中所記述)可自式(II)化合物經由於適宜溶劑(諸如二烷)中與適宜的對掌性胺(諸如(+)-金雞納鹼(Cinchonine))形成對掌性非鏡像異構鹽，接著利用諸如氫氯酸之酸處理該鹽，得到鏡像異構上純的式(II)’化合物來獲得。式(VII)’化合物(其係式(VII)化合物，其中於立體中心(1)處之絕對組態係如流程C中所記述)可自式 (II)’化合物經由與氨水溶液於偶合劑(諸如羰基二咪唑)之存在下在溶劑(諸如THF)中於自0℃至室溫之溫度下反應，得到中間一級醯胺(IIa)’來製備。式(IIa)’化合物之轉變為式(VII)’化合物可使用脫水劑來進行。適宜的條件包括使用諸如DMF之溶劑及諸如氧氯化磷或三聚氯化氰之脫水劑在自0℃至室溫之溫度下。
式(Ia)’化合物(其係如以上所定義之式(Ia)化合物且其中碳(1)之絕對組態係如流程C(方法A)中所示)可自式(VII)’化合物使用於流程B及A中針對式(VII)化合物轉變為式(Ia)化合物所述之類似方法來獲得。或者，式(Ia)’化合物(其係如以上所定義之式(Ia)化合物且其中碳(1)之絕對組態係如流程C中所示)亦可自式(VII)’化合物使用方法B獲得；其中可使式(VII)’化合物與含氯羰基/釋放化合物(諸如光氣或三光氣及無水肼)於鹼(諸如2,6-二甲基吡啶)之存在下在溶劑(諸如二氯甲烷)中於-5至5℃之溫度下反應得到式(Ia)’化合物(其中R2係(C1-C6)烷基及其他基團係如針對式(I)化合物所定義)。類似地，式(Ia)’化合物亦可自式(VII)化合物依照使用方法A或B之環化反應(參見流程C)及使用對掌性層析分離期望的鏡像異構物(Ia)’來製得。
熟悉技藝人士當明瞭經由選擇適當的對掌性胺及其絕對組態，可獲得式(II)”、(IIa)”、(VII)”及(Ia)”之衍生物[其分別係式(II)、(VII)、及(Ia)之化合物，其中於立體中心(1)處之絕對組態係與流程C中所記述者相反]。
在適用之情況下，熟悉技藝人士可對實驗中明確說明的條件引入適當的變化，以將合成途徑改用來提供本發明之其他化合物。該等變化可包括，但不限於，使用適當的起始物料來產生不 同化合物、改變溶劑及反應溫度、替換具有類似化學作用的反應物、引入或移除對反應條件及試劑敏感之官能基的保護/解保護階段、以及引入或移除指向化學骨架之其他官能化的特定合成步驟。
不應將可使用且描述及記述於實施例中之方法視為限制可用來製備本發明化合物之合成方法的範疇。
用作起始物料或中間體之化合物可於市面購得，其製備可明確地敘述於文獻中或其可根據於文獻中可獲得且熟悉技藝人士熟知的方法製備得。
所述方法由於易於透過熟悉技藝人士已知之任何適當變型適當地調整，來獲得任何本發明之期望化合物而尤其有利。該等變型包括在本發明之範疇內。
由所有上述內容，熟悉技藝人士應明瞭任何所述基團可以原樣或以任何經適當保護的形式存在。特定而言，存於中間體及實施例中且可能產生不期望副反應及副產物的官能基在發生烷基化、醯基化、偶合或磺基化反應之前需受適當地保護。同樣地，在完成該等反應後可隨後接著將該等經保護的基團解保護。
在本發明，除非另外指示，否則術語「保護基」係指適於保留其所鍵結之基團之官能的保護基。通常，保護基係用來保留胺基、羥基、或羧基官能。因此，適當的保護基可包括，例如，苄基、苄氧羰基、第三丁氧羰基、烷基或苄基酯或其類似物，其等係熟悉技藝人士所熟知[關於一般的參考，參見T.W.Green；有機合成中之保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)(Wiley,N.Y.1981)]。
同樣地，任何該等基團(例如包括羰基、羥基或胺基)之選擇性保護及解保護可根據有機合成化學中常用的極熟知方法 來完成。
式(I)化合物之視需要的鹽形成可經由將任何游離酸性基團或胺基適當地轉變為相應的醫藥上可接受之鹽來進行。在此情況，用於視需要鹽化本發明化合物之操作條件亦皆係在熟悉技藝人士的一般知識內。
式(I)化合物之非鏡像異構物(當可利用時)可根據技藝中熟知之方法獲得，諸如(例如)藉由製備型HPLC或藉由層析純化。式(I)化合物之外消旋混合物亦可使用製備型HPLC及具有對掌性固定相之管柱分離，或使用技藝中熟知之方法解析得到個別鏡像異構物。此外，可解析及使用對掌性中間體以製備本發明之對掌性化合物。
由所有上述內容，熟悉技藝人士應明瞭以上方法，包括用於製備本發明適當化合物之其之任何變型，可方便地經修改，以使反應條件適應特定需求，例如經由視情況而定，選擇適當的縮合劑、溶劑及保護基。
式(X)化合物(其中R1係基團-C(O)-VR2(其中R2=Me)，A、B及D係CH及R5係溴或其他得自基團(但非詳盡地)Cl、I、OTf之適當活化基團)可自式(VIII)化合物根據下文記述的流程D製備得：
在諸如DCM之溶劑中在自-78℃至室溫之溫度下用強路易士(Lewis)酸(諸如三溴化硼)處理式(VIII)化合物，接著用水或甲醇終止反應可提供式(IX)化合物。在流程D中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(VIII)或自單一鏡像異構物起始。
熟悉技藝人士應明瞭可涵蓋其他適當的保護基策略，且酸(IX)代表用於進一步官能化以及用於製備式(X)化合物的多樣中間體。
事實上，應強調下文所述自式(VIII)(即於流程F、G及H中)或(VIII)’化合物起始之許多合成途徑，如熟悉技藝人士所當明瞭，亦可應用於式(IX)及(X)之化合物，以得到式(I)、(Ia)及(Ia)’之其他化合物。
舉例來說，經由與醇或胺HVR2(諸如氨或2-甲氧乙醇)於偶合劑(諸如HATU)之存在下於溶劑(諸如DMF)中於鹼(諸如三乙胺)之存在下於自室溫至80℃之溫度下反應可製備得如以上所定義之式(IX)化合物衍生化為式(X)化合物(其中R2不為氫)。流程D中所示之合成途徑將有利於在稍後階段引入-VR2取代基。
式(XII)之化合物(即式(X)化合物，其中R1(-C(O)-VR2)係基團-CN)可根據流程E自式(IX)化合物製備得。式(XI)化合物(其 係式(X)化合物，其中VR2係NH2)可經由與氨在偶合劑(諸如HATU)之存在下於溶劑(諸如DMF)中於鹼(諸如三乙胺)之存在下於自室溫至80℃之溫度下反應而製備得。
式(XII)化合物可自式(XI)化合物經由與脫水劑(諸如柏傑士(Burgess)試劑)於溶劑(諸如THF)中於自室溫至回流之溫度下反應而製備得。於流程E中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(IX)或自單一鏡像異構物起始，其可自式(VIII)化合物之單一鏡像異構物起始根據流程D製備得。
熟悉技藝人士當明瞭經由調整下文流程F至J中所述之合成途徑及自式(XII)化合物起始，可製備得式(Ib)化合物(即式(I)化合物，其中R1係氰基)。
式(Iq)之化合物(即式(Ia)化合物，其中R1(-C(O)-VR2)係基團-CN及R4係二氟甲基)可根據流程E’自式(Va)化合物製備得。
式(Vc)化合物可自式(Va)化合物依照2步驟程序製備得。式(Vb)化合物係自式(Va)化合物經由與異氰酸苯甲酸酯於溶劑(諸如丙酮)中於RT至回流之溫度下反應而製備得。式(Vc)化合物可自式(Vb)化合物在利用適當鹼(諸如1M氫氧化鈉水溶液)在介於50至80℃間之溫度下水解後獲得。式(VIIa)化合物可經由利用用來製備式(VII)化合物(流程B)之類似條件，使式(Vc)化合物與式(VIc)化合物反應而製備得。式(VIIIa)化合物可自式(VIIa)化合物利用與用來製備式(Ia)’化合物(流程C，方法B)者類似之方法製備得。式(IXa)化合物可自式(VIIIa)化合物在介於RT與50℃間之溫度下在溶劑(諸如THF)中在胺(諸如啉)之存在下利用鈀觸媒(諸如肆(三苯膦)鈀(0))處理後獲得。
熟悉技藝人士當明瞭經由調整流程E中所示及下文流程F至J中所述之合成途徑，自式(IXa)化合物起始，可製備得式(Iq)化合物(即式(I)化合物，其中R1係氰基及R4係二氟甲基)。
式(Ic)、(Id)、(Ie)及(If)之化合物(即式(I)化合物，其中R1係基團-C(O)-VR2，V係氧，R2係甲基，A、B及D係CH及R5分別係如流程F中所記述之基團，其中Rx可具有根據彼等針對式(I)化合物所述的不同含意)可根據下述流程F自式(VIII)化合物製備得。
流程F
式(VIII)化合物之轉變為式(Ic)化合物可於催化混合物(諸如二氯化雙(三苯膦)鈀(II)及碘化銅(I))與鹼(諸如三乙胺)之存在下於溶劑(諸如DMF)中於至高120℃之溫度下，通常使用微波輻照，與適當地未經取代的乙炔化合物(XIII)反應來達成。式(Id)化合物可自式(Ic)化合物經由使用諸如Pd/C之觸媒於諸如IMS之溶劑中氫化而製備得。
式(Ie-Ih)化合物(即式(I)化合物，其中R1係基團-C(O)-VR2，V係氧，R2係甲基，A、B及D係CH及R5可係如以上所定義之乙二醇(Ie)、亞甲基連接之三級胺-NR18R19(If)、醯胺-NR18R19CO-(Ig)或磺醯胺-NR18SO2R20(Ih))可根據以下流程G自式(VIII)化合物製備得：流程G
(VIII)化合物之轉變為式(XIV)化合物可經由於觸媒(諸如肆(三苯膦)鈀(0))之存在下於溶劑(諸如二烷或DMF)中於至高150℃之溫度下，通常使用微波輻照，與適當的親核劑(諸如乙烯基三丁基錫烷)反應來達成。式(Ie)化合物可自式(XIV)化合物於室溫下使用諸如二水合鋨酸鉀之觸媒與諸如N-甲基啉-N-氧化物之共氧化劑於諸如丙酮/水之溶劑混合物中氧化後製備得，因此，在於適當的溶劑混合物(諸如THF/水)中使用適當試劑(諸如過碘酸鈉)裂解二醇(Ie)後，獲得式(XV)化合物。式(XVI)化合物可自式(XV) 化合物經由通常使用諸如硼氫化鈉之還原劑於諸如MeOH之溶劑中還原而獲得。式(XVII)化合物可自式(XVI)化合物經由溴化而獲得。適當的條件包括與適當的溴化劑(諸如四溴化碳)與三苯膦於諸如二氯甲烷之溶劑中在自0℃至室溫之溫度下反應。式(XVI)化合物之轉變為式(If)之胺可經由於諸如THF或MeCN之適當溶劑中與式HNR3R3之適宜胺反應來達成。此外，當其中一個或兩個R3=H時，式(If)化合物之轉變為式(Ig)化合物或式(Ih)化合物可經由分別與經適當取代的酸氯化物(R7COCl)或磺醯氯(R7-SO2Cl)反應來達成。用於製備式(Ig)化合物之適宜條件包括使式(If)化合物與適宜的酸氯化物(R7COCl)及諸如三乙胺之鹼於諸如二氯甲烷之溶劑中在0℃至室溫之溫度下反應。用於製備式(Ih)化合物之適宜條件包括使式(If)化合物與適宜的磺醯氯(R7-SO2Cl)於諸如吡啶之溶劑中在0℃至100℃之溫度下反應。
於流程G中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(VIII)或自單一鏡像異構物起始，其可使用如根據流程C自式(II)化合物起始關於式(Ia)化合物之類似方法獲得。
熟悉技藝人士應明瞭醛(XV)代表用於進一步官能化以及用於製備式(If-Ih)化合物的多樣中間體。
式(Ir-Iv)化合物(即式(I)化合物，其中R1係基團-C(O)-VR2，V係氧，R2係甲基，A、B及D係CH及R5可係如以上所定義之醯胺-C(O)N(R3)(R7)(Ir)、脲-N(R3)C(O)N(R3)(R7)(Is)、反醯胺(reverse amide)-N(R3)C(O)R7(It)、胺基甲酸酯N(R3)C(O)O(R7)-或醇-CH(OH)R3)可根據以下流程G’自式(XV)化合物製備得：
式(XV)化合物之轉變為式(XXIV)化合物可自式(XV)化合物經由通常使用諸如亞氯酸鈉之氧化劑於諸如第三丁醇及水之溶劑混合物在諸如2-甲基-2-丁烯之犧牲烯烴的存在下氧化而獲得。式(Ir)化合物可自式(XXIV)化合物在與式(XXV)化合物反應後獲得。適當的條件包括與適當偶合劑(諸如HATU)在適當鹼(諸如DIPEA)之存在下及在溶劑(諸如DMF)中在0℃至室溫之溫度下反應。式(XXIV)化合物之轉變為式(Is)之胺基甲酸酯可經由與疊氮磷酸二苯酯及式R7OH(XXVI)之適宜醇在適當鹼(諸如DIPEA)之存在下、在適當溶劑混合物(諸如甲苯/二烷)中在介於50至100℃間之溫度下反應而達成。此外，式(XXVI)化合物(其中R7=tBu)之轉變為式(It)化合物可在於適當溶劑(諸如二氯甲烷)中使用適當酸(諸如三氟乙酸)移除「Boc」保護基後獲得。中間胺基化合物可在於適宜 溶劑(諸如THF)中於適宜鹼(諸如DIPEA)之存在下與適當酸氯化物(R3COCl)反應後轉變為式(It)之反醯胺。式(XXIV)化合物之轉變為式(Iu)之脲可經由於介於50至100℃間之溫度下於適當溶劑混合物(諸如甲苯/二烷)中在適當鹼(諸如DIPEA)之存在下與疊氮磷酸二苯酯反應，隨後在室溫下與式R3R7NH(XXV)之適當胺反應而達成。
式(Iv)化合物可自式(XV)化合物在與適當的格任亞(Grignard)試劑(XXVII)(諸如甲基溴化鎂)於適宜溶劑(諸如THF)中在自-78℃至RT之溫度下反應後製備得。
在流程G’中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(XV)或自單一鏡像異構物起始。
式(Ii-Io)化合物可根據流程H自式(VIII)化合物製備得。式(XIX)化合物可使用Heck偶合化學經由與經適當取代的乙烯基化合物(XVIII)於適當觸媒/配位體系統(諸如Herrmann-Beller觸媒/四氟硼酸三丁膦)之存在下於溶劑(諸如四甘醇或二甲氧乙烷)中於鹼(諸如五甲基哌啶)之存在下於自室溫至160℃之溫度下反應而製備得。式(XX)化合物可自式(XIX)化合物於使用諸如三氟乙酸之酸於諸如DCM之溶劑中在-10℃下得到中間體醛，及諸如硼氫化鈉之還原劑於諸如MeOH之溶劑中在自0℃至室溫之溫度下得到式(XX)化合物的水解及還原步驟後製備得。式(XX)化合物可自式(XIX)化合物使用四溴化碳/三苯膦之混合物於諸如DCM之溶劑中在自0℃至50℃之溫度下製備得。式(Ii-Ik)化合物可使用式(XXI)化合物類似於針對式(If-Ih)化合物(流程G)所述者製備得。
流程H
式(Im)化合物亦可自式(XXI)化合物使用適當硫醇鹽(NaSR7)於適當溶劑(諸如乙醇)中於自0℃至室溫之溫度下得到式(Im)化合物而製備得。式(In)化合物可自式(Im)化合物使用適當氧化劑(諸如間氯苯甲酸)於適當溶劑(諸如二氯甲烷)中於自0℃至室溫之溫度下得到式(In)化合物而製備得。式(In)化合物或本發明化合物(I)(其中R1係定義為CN)亦可直接自式(XXI)化合物或類似物(其中R1係定義為CN)在與適當的亞磺酸鹽(諸如甲磺酸鈉)於適當溶劑(諸如DMF)中在自RT至100℃之溫度下反應後製備得。
再者，式(Io)化合物亦可自式(XXI)化合物使用KSAc於適當溶劑(諸如DMSO)中在自0℃至室溫之溫度下得到式(XXII) 化合物而製備得。式(Io)化合物可自式(XXII)化合物在利用適當氧化劑(諸如過氧化氫)氧化，接著利用適當氯化劑(諸如亞硫醯氯)氯化，接著使中間體磺醯氯與本發明之胺化合物(HNR3R7)反應後製備得。
在流程H中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(VIII)或自單一鏡像異構物起始。
式(Iw-Iy)化合物可自式(VIII)化合物製備得。式(XXVIII)化合物可自式(VIII)化合物使用Heck偶合化學經由與經適當取代的乙烯基化合物(諸如烯丙醇)於適當觸媒/配位體系統(諸如叁(二亞苄基丙酮)二鈀(0)/四氟硼酸三丁膦)之存在下於溶劑(諸如二烷)中於鹼(諸如N,N-二環己基甲基胺)之存在下於自室溫至100℃之溫度下反應而製備得。式(XXIX)化合物可自式(XXVIII)化合物在使用諸如硼氫化鈉之還原劑於諸如MeOH之溶劑中在自0℃至室溫之溫度下還原得到式(XXIX)化合物後製備得。式(XXX)化合物可自式(XXIX)化合物使用四溴化碳/三苯膦之混合物於諸如DCM之溶劑中在自0℃至50℃之溫度下製備得。
在流程H’中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(VIII)或自單一鏡像異構物起始。
式(Iw-Iy)化合物可使用式(XXX)化合物類似於針對式(If-Ih)化合物(流程G)所述者製備得。
流程H’
式(Ip)化合物(即式(I)化合物，其中R1係基團-C(O)-VR2，A、B及D係CH，V係氧，R2係甲基，及R5係如流程J中所記述之醯胺鍵聯基團，其中R3及R7可具有根據針對式(I)化合物所述之不同含意)可根據以下流程J自式(XX)化合物製備得：
式(XXIII)化合物可自式(XX)化合物使用適當氧化劑(諸如亞氯酸鈉)及適當共氧化劑(諸如TEMPO)於適當溶劑混合物(諸如乙腈/水)中及使用適當鹼(諸如二氫磷酸鈉)於室溫下製備得。通常，式(Ip)化合物可自式(XXIII)化合物經由與胺(XXV)於偶合劑(諸如HATU)之存在下於溶劑(諸如DMF)中於鹼(諸如三乙胺) 之存在下於自室溫至80℃之溫度下反應而獲得。
在流程J中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(XX)或自單一鏡像異構物起始。
或者，式(Ip)化合物可根據以下流程J’自式(VIII)化合物製備得。
式(XXXII)化合物可自式(VIII)化合物利用與1-(第三丁基二甲基矽烷氧基)-1-甲氧乙烯(XXXI)及適當氟化物配體(諸如ZnF2)於適當溶劑(諸如DMF)中之鈀介導的交叉偶合反應製備得。適當的鈀觸媒可藉由使用鈀(0)雙(二亞苄基丙酮)與三(第三丁基)膦配體形成。中間體化合物(XXXII)通常可使用酸混合物(諸如三氟乙酸)於質子性溶劑(諸如甲醇)中水解成式(XXXIII)化合物。式(XXIII)化合物可自式(XXXIII)化合物經由利用適當鹼(諸如氫氧化鋰)於溶 劑混合物(諸如THF及水)中於室溫下水解而獲得。式(Ip)化合物可自式(XXIII)化合物經由與胺(XXV)於偶合劑(諸如1,1’-羰基二咪唑(CDI))之存在下於溶劑(諸如DMF)中於鹼(諸如三乙胺)之存在下於自室溫至80℃之溫度下反應而獲得。
在流程J’中，熟悉技藝人士當明瞭可自外消旋體(VIII)或自單一鏡像異構物起始。
此外，熟悉技藝人士應明瞭於三唑啉酮部分可涵蓋適當的保護基策略，且可在本發明化合物(Ia-Iy)之合成中於任何中間步驟併入適當的保護基。
一般實驗細節
除非另外明確說明，否則反應未在惰性氛圍下進行，且所有溶劑及商業試劑係以收到狀態使用。
經由層析純化係指使用CombiFlash® Companion純化系統或Biotage SP1純化系統純化。在產物係使用Isolute® SPE Si II匣筒純化之情況，「Isolute SPE Si匣筒」係指包含具平均尺寸為50微米及標稱60埃(Å)孔隙度之不規則顆粒之未黏結活性矽石的預填充聚丙烯管柱。匯集包含所需產物之部分(由TLC及/或LCMS分析識別)，經由蒸發移除有機部分，及將殘留含水部分凍乾，得到終產物。當使用薄層層析(TLC)時，其係指使用通常為在鋁箔板上之3 x 6公分矽膠之板，利用螢光指示器(254nm)的矽膠TLC(例如，Fluka 60778)。微波實驗係使用Biotage Initiator 60TM(其使用單模諧振器及動態場調節)進行。可達成40-250℃之溫度，且可達成高至30巴(bar)之壓力。
NMR光譜係於具有在400MHz下操作之5毫米反偵 測三重諧振探針的Varian Unity Inova 400光譜儀上或於具有在400MHz下操作之5毫米反偵測三重諧振TXI探針的Bruker Avance DRX 400光譜儀上或於具有在300MHz下操作之標準5毫米雙重頻率探針的Bruker Avance DPX 300光譜儀上獲得。位移係以相對於四甲基矽烷的ppm給出。
化合物名稱係使用MDL ISISTM/Draw 2.5 SP2軟體中之Autonom 2000特徵產生。
LC-MS分析條件 LC-MS方法1
具有C18-逆相管柱(30 x 4.6毫米Phenomenex Luna 3微米粒度)的Waters ZQ四極子質譜儀，用A：水+0.1%甲酸；B：MeCN+0.1%甲酸溶離。梯度：
偵測-MS、ELS、UV(200微升/分鐘分流至具有線上HP1100 PDA偵測器的ESI源)
MS離子化方法-電噴灑(正及負離子)
LC-MS方法2
具有C18-逆相管柱(30 x 4.6毫米Phenomenex Luna 3 微米粒度)的Waters Micromass ZMD四極子質譜儀，用A：水+0.1%甲酸；B：MeCN+0.1%甲酸溶離。梯度：
偵測-MS、ELS、UV(100微升分流至具有線上UV偵測器的MS)
MS離子化方法-電噴灑(正及負離子)
LC-MS方法3
具有C18-逆相管柱(100 x 2.1毫米Acquity BEH 1.7微米粒度)的Waters Micromass ZQ2000質譜儀，維持於40℃下，用A：水+0.1%甲酸；B：MeCN+0.1%甲酸溶離。或者，當有明確說明時，使用C18-逆相(100 x 2.1毫米Acquity UPLC BEH Shield 1.7微米粒度)管柱。
梯度：
偵測-MS、UV PDA
MS離子化方法-電噴灑(正/負離子)。
LC-MS方法4
具有C18-逆相管柱(30 x 4.6毫米Phenomenex Luna 3微米粒度)的Waters Platform LC四極子質譜儀，用A：水+0.1%甲酸；B：MeCN+0.1%甲酸溶離。梯度：
偵測-MS、ELS、UV(分流-200微升/分鐘分流至具有線上HP1100 DAD偵測的ESI源)
MS離子化方法-電噴灑(正及負離子)。
LC-MS方法5
具有C18-逆相管柱(30 x 4.6毫米Luna 3微米粒度)的Waters VG Platform II四極子光譜儀，用A：水+0.1%甲酸；B：MeCN+0.1%甲酸溶離。
梯度：
偵測-MS、ELS、UV(分流-200微升/分鐘分流至具有線上HP1050 DAD偵測的ESI源)
MS離子化方法-電噴灑(正及負離子)
MDAP系統：
儀器：Agilent 1260無限純化系統。Agilent 6100系列單一四極子LC/MS
管柱：XSELECT CSH Prep C18 5微米OBD，30X150毫米，RT
移動相A：0.1%甲酸水溶液
移動相B：於乙腈中之0.1%甲酸
流量：60毫升/分鐘
梯度程式：10%-95%，22分鐘，以特定焦點梯度為中心
樣品注入：於DMSO(+視需要的甲酸及水)中之20-60毫克/毫升溶液
實驗部分中所使用的縮寫：
AIBN 偶氮雙異丁腈
CDI 1,1’-羰基二咪唑
DCM 二氯甲烷
DIPEA 二異丙基乙胺
DMF N,N-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
Et2O 乙醚
EtOAc 乙酸乙酯
HATU (1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]嘧 錠3-氧離子六氟磷酸鹽)
HPLC 高效液相層析
IMS 工業甲基化酒精
LC-MS 液相層析-質譜
MeCN 乙腈
MDAP 質量導向自動純化
NBS N-溴琥珀醯亞胺
Rt 滯留時間
RT 室溫
THF 四氫呋喃
在以下程序中，一些起始物料係通過「中間體」或「實施例」編號來識別。此僅係為熟練的化學人士提供輔助。起始物料可能未必係由所提及的批次製備得。
當提及使用「相似」或「類似」程序時，如熟悉技藝人士所當明瞭，該程序可涉及微小變化，例如反應溫度、試劑/溶劑量、反應時間、處理條件或層析純化條件。
實施例1a/1b
(R)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(非鏡像異構物1a及1b)
中間體1
3-溴-4-二溴甲基苯甲酸
在安裝有機械攪拌器的20公升法蘭燒瓶(flange flask)中將3-溴-4-甲基苯甲酸(910克，4.23莫耳，1.0當量)及NBS(2010克，11.29莫耳，2.67當量)溶解於DCM(8.5公升)中。隨後添加AIBN(50克，0.3莫耳，0.07當量)於DCM(1公升)中之漿液，且使混合物在N2氛圍下於回流冷凝器中在強光(500瓦)下輻照。反應之內部溫度自17℃上升至41℃，且起始白色懸浮液在其達到溫和回流時成為淡橙色懸浮液。於總計72小時後，反應完全且將水(5公升)添加至混濁橙色溶液，將其在RT下攪拌1小時。然後使橙色雙相混合物靜置隔夜，接著於真空中濃縮得到橙色餾出物及棕褐色懸 浮固體。接著經由過濾收集固體，用水(2公升)洗滌及抽吸乾燥2小時，得到標題化合物之棕褐色潮濕固體(1860克)。
LCMS(方法1)：Rt=3.39分鐘，m/z 369、371、373、375[M-H]
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)：δ 8.14-8.03(3H,m),7.36(1H,s)。
中間體2
3-溴-4-甲醯基苯甲酸
將中間體1(1860克，4.23莫耳，1.0當量)懸浮於水(5公升)中且將漿液加熱至40℃之內部溫度。然後在20分鐘期間內小份量地添加固態Na2CO3(1460克，13.77莫耳，3.25當量)。於起始添加時產生起泡，因此添加EtOAc(0.2公升)以消解泡沫且抑制任何進一步起泡。一旦添加完成，即於40分鐘內將褐色懸浮液加熱至90℃，然後於90℃下攪拌90分鐘，接著於90分鐘內冷卻至40℃。添加EtOAc(1.5公升)，隨後經由滴液漏斗添加濃HCl水溶液(0.7公升)，導致劇烈放出CO2氣體及蒸發大部分的EtOAc。進一步添加EtOAc(1公升)以自冷凝器及反應器壁洗滌起泡產品，隨後添加額外的EtOAc(0.3公升)及將濃稠漿液於RT下攪拌隔夜。然後將漿液加熱至40℃及在45分鐘內經由滴液漏斗添加更多的濃HCl水溶液並劇烈攪拌，導致放出CO2氣體、蒸發大部分EtOAc及形成固體。停止攪拌，且固體浮至水性混合物(pH 1)之頂部。分離大部分水層(約5公升)，然後添加2-MeTHF(5公升)。接著移除澄清的水層，且用額外的2-MeTHF將有機層稀釋至10公升，並溫熱至 50℃而得到暗橙色溶液。接著將有機層用1M HCl(0.5公升)洗滌，蒸發，且與甲苯共沸，得到標題化合物之棕褐色固體(960.3克)。
LCMS(方法4)：Rt 2.73分鐘，m/z 227[M(79Br)+H]+
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)：δ 10.26(1H,d,J=0.8Hz),8.20(1H,d,J=1.5Hz),8.08-8.04(1H,m),7.95(1H,d,J=8.0Hz)。
中間體3
4-(2-溴-4-羧苯基)-6-甲基-2-硫酮基-1-(3-三氟甲基苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲基酯
在N2氛圍下將中間體2(458克，2莫耳，1.0當量)、乙醯乙酸甲酯(274.4克，255毫升，2.36莫耳，1.18當量)及3-三氟甲基苯基硫脲(519克，2.36莫耳，1.18當量)加至10公升夾套反應器中，並懸浮於THF(4.6公升)中同時攪拌，冷卻至-10℃(內部溫度-3℃)。將多磷酸(1650克，3.6重量當量)於50℃水浴中預熱，接著一次性添加，導致立即放熱，且內部溫度上升至19℃。接著以10℃增量將所得之橙色混合物溫熱至75℃至溫和回流，且將反應於此溫度下攪拌20小時。然後使反應冷卻至20℃，且於真空中移除大量THF得到暗橙色的黏性油，然後將其用水(5公升)及Et2O(5公升)稀釋。將水層分離並用Et2O(2 x 2公升)再次萃取，且隨後用水 (1公升)、鹽水(1公升)洗滌合併的有機物，及乾燥(Na2SO4)並過濾通過矽藻土(Celite)以移除任何微細顆粒。接著將經過濾溶液於真空中濃縮得到黏性橙色膠，將其再懸浮於Et2O(約1.5公升)中並靜置隔夜。將所得懸浮液過濾及用Et2O(0.5公升)沖洗收集得之固體並在真空烘箱中於50℃(8毫巴(mbar))下乾燥4天，得到標題化合物(754克)。
LCMS(方法1)：Rt 3.52分鐘，m/z 529[M(79Br)+H]+
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)：δ 10.15(1H,d,J=3.5Hz),8.11(1H,d,J=1.6Hz),8.05(1H,dd,J=8.1,1.7Hz),7.92-7.64(5H,m),5.80(1H,d,J=2.9Hz),3.53(3H,s),2.07(3H,s)。
中間體4
(S)-4-(2-溴-4-羧苯基)-6-甲基-2-硫酮基-1-(3-三氟甲基苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲基酯
將中間體3(151.7克，0.29莫耳，1.0當量)溶解於二烷(2公升)中並加熱至80℃。將所得懸浮液過濾以移除任何無機殘留物且將澄清溶液再次加熱至80℃及添加(+)-金雞納鹼(88克，0.29莫耳，1.0當量)，產生澄清溶液。使所得混合物緩慢冷卻並結晶。3小時後，過濾所得固體並用冷的二烷洗滌。將固體再懸浮 於熱的二烷(85℃)中並使其冷卻及結晶隔夜。將所得晶體濾除，用冷的二烷洗滌，及使固體再次自熱的二烷再結晶。將最終再結晶固體濾除並風乾得到中間體(+)-金雞納鹼鹽的白色固體83.2克(68%)。
經由於1M HCl與EtOAc之間分溶來測定經解析(+)-金雞納鹼鹽的光學純度；將有機層分離，於真空中濃縮然後再溶解於含有0.1% TFA的20% IPA/正庚烷中並進行對掌性分析HPLC(ChiralPak IA，5μM 4.6 x 250mm)，用20% IPA/正庚烷(+0.1% TFA)於1毫升/分鐘下溶離且波長為254nm。亦藉由對掌性HPLC檢查外消旋產物；針對外消旋樣品觀察到14.8及42.5分鐘之滯留時間且期望的鏡像異構物於42.5分鐘時溶離並測得其大於99.5ee%。
經由於EtOAc(1公升)與1M HCl(1公升)之間分溶來釋放中間體(+)-金雞納鹼鹽(83.2克，101.75毫莫耳)。再次用EtOAc(2 x 0.5公升)萃取水層且將合併的有機層先用1M HCl(0.5公升)、接著用鹽水(0.25公升)洗滌，乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮，得到標題化合物的白色固體(45.45克)。
中間體5
(S)-4-(2-溴-4-胺甲醯基-苯基)-6-甲基-2-硫酮基-1-(3-三氟甲基 苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲基酯
將中間體4(93.8克，0.18莫耳)溶解於THF(1公升)中並逐份添加1,1’-羰基二咪唑(57.5克，0.35莫耳，2.0當量)及於RT下留置攪拌直至停止排放氣體為止。接著逐滴添加氨水溶液(33%，330毫升)，確保內部溫度不超過10℃(於起始添加時觀察到放熱)。使反應於RT下留置攪拌2小時，然後添加鹽水及使層分離。用1M HCl水溶液(2 x)洗滌有機相及用EtOAc進一步萃取酸性層。將合併的有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾及於真空中濃縮，得到標題化合物的無色發泡體(87.3克)。
LCMS(方法2)：Rt 3.44分鐘，m/z 528[M(79Br)+H]+
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)：δ 10.12(1H,d,J=2.6Hz),8.12(1H,s),8.11(1H,d,J=1.7Hz),7.96(1H,dd,J=8.1,1.7Hz),7.88-7.77(2H,m),7.75-7.63(3H,m),7.54(1H,s),5.78(1H,s),3.54(3H,s),2.07(3H,s)。
中間體6
(S)-4-(2-溴-4-氰基苯基)-6-甲基-2-硫酮基-1-(3-三氟甲基苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲基酯
將中間體5(87.3克，0.165莫耳)溶解於DMF(400毫 升)中及於冰浴中冷卻至0至5℃。然後逐滴添加氧氯化磷(62.0克，37.0毫升，2.5當量)，確保內部溫度不超過10℃。一旦添加完成，即將黃色溶液於0至5℃下攪拌15分鐘，然後倒入固態2M Na2CO3及冰的混合物中。形成黃色沈澱物及使漿液老化1小時，然後將固體過濾、用水洗滌及於真空烘箱中在P2O5上在40至45℃下乾燥。所得產物之NMR分析仍顯示起始物料殘留，因此再次使用另外的20毫升氧氯化磷重複反應。所得固體之NMR顯示產物為與POCl3之加成物。因此，將固體溶解於無水EtOH(1000毫升)中及溫熱懸浮液以幫助溶解。然後添加NaHCO3飽和水溶液(250毫升)及將混合物加熱至40℃並攪拌2小時。然後將所得混合物倒入水(500毫升)中並將所得白色固體濾除，用水洗滌及風乾得到標題化合物(77.5克)。
LCMS(方法2)：Rt 3.94分鐘，m/z 510[M(79Br)+H]+
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)：δ 10.18(1H,d,J=2.7Hz),8.24(1H,d,J=1.5Hz),7.96(1H,dd,J=8.0,1.6Hz),7.89-7.76(3H,m),7.74-7.64(2H,m),5.8(1H,s),3.53(3H,s),2.06(3H,s)。
中間體7
(S)-5-(2-溴-4-氰基苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基苯 基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體6(30.3克，59.4毫莫耳)溶解於DCM(500毫升)中，添加2,6-二甲基吡啶(19.7毫升，169毫莫耳)及使溶液冷卻至2℃。邊攪拌，邊隨後於3分鐘期間內添加三光氣(5.58克，18.8毫莫耳)。5分鐘後，將反應溫熱至RT並攪拌25分鐘。使反應冷卻至2至3℃及接著利用套管將溶液轉移至肼溶液(1M THF溶液，170毫升)於MeCN(150毫升)中之冷卻(7℃)混合物中。將混合物於7℃下再多攪拌5分鐘。2.25小時後，將反應混合物用水、10%檸檬酸溶液(以移除殘留的二甲基吡啶)、水及50%飽和鹽水洗滌，及將有機相乾燥(Na2SO4)、過濾及於真空中濃縮。經由利用矽膠層析，及利用於環己烷中之40%至100% EtOAc溶離進行進一步純化，得到中間體7的奶油色固體(17.8克，56%)。
LCMS(方法3)：Rt 3.61分鐘，m/z 534[M(79Br)+H]+
1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 8.36(1H,s),7.88(1H,d,J=1.5Hz),7.83-7.79(1H,m),7.73(1H,t,J=8.0Hz),7.65-7.60(2H,m),7.59-7.50(2H,m),6.39(1H,d,J=1.0Hz),3.62(3H,s),2.25(3H,d,J=1.0Hz)。
利用Chiralpak IC對掌性HPLC管柱(5微米粒度，5% MeOH/DCM，流率5毫升/分鐘)分析對掌性純度及得到Rt=5.83分鐘。(100%ee)。外消旋樣本(中間體4)針對第一及第二溶離鏡像異構物分別得到3.58及5.85分鐘之Rt。
中間體8
(R)-5-(4-氰基-2-乙烯基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體7(9.0克，16.84毫莫耳)及三丁基乙烯基錫烷(6.08克，18.60毫莫耳)溶解於二甘二甲醚(50毫升)中及將所得溶液抽真空及用N2淨化(5次)。然後添加肆(三苯膦)鈀(0.58克，0.50毫莫耳)，及接著於氬氣下將反應混合物於150℃下(於預熱塊上)加熱2小時。將反應混合物冷卻，於真空中濃縮，用EtOAc(150毫升)及水(150毫升)稀釋及過濾通過矽藻土襯墊。將有機層分離，先用水再用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，於真空中濃縮及利用矽膠層析純化，用含於環己烷中之10至70% EtOAc之梯度溶離，得到標題化合物的黃色發泡體(7.92克)。
LC-MS(方法2)：Rt=3.52分鐘，m/z=482[M+H]+
(R)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例1a及實施例1b)
在RT下將二水合鋨酸鉀(VI)(8毫克，21.7微莫耳)添加至中間體8(1.00克，2.08毫莫耳)及N-甲基啉N-氧化物水合物(0.56克，4.14毫莫耳)於丙酮(10毫升)-水(1毫升)之溶液中並攪拌 隔夜。使用偏亞硫酸氫鈉水溶液終止反應，攪拌2小時，經由矽藻土過濾及於真空中移除溶劑。經由層析純化所得殘留物，用含於EtOAc中之0至6% MeOH溶離得到外消旋產物(0.89克)。經由MDAP純化得到標題化合物1a(414毫克)及1b(197毫克)之白色固體。
實施例1a(非鏡像異構物1)：
LC-MS(方法3)：Rt=3.87分鐘，m/z=516.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.27(1H,s),8.13(1H,bs),7.97-7.89(2H,m),7.87(1H,d,J=1.8Hz),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.71(1H,dd,J=8.2及1.9Hz),7.58(1H,d,J=8.1Hz),6.18(1H,s),5.43-5.22(2H,m),4.82(1H,bs),4.14-3.92(2H,m),3.55(3H,s),2.10(3H,s)。
實施例1b(非鏡像異構物2)：
LC-MS(方法3)：Rt=3.97分鐘，m/z=516.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.44(1H,s),8.13(1H,s),7.96-7.90(2H,m),7.89(1H,d,J=1.7Hz),7.82(1H,t,J=7.9Hz),7.75(1H,dd,J=8.0及1.7Hz),7.70(1H,d,J=8.1Hz),6.33(1H,s),5.50-5.41(2H,m),4.92-4.83(1H,m),3.76-3.65(2H,m),3.50(3H,s),2.18(3H,s)。
實施例2
(R)-5-[2-(2-乙醯胺基-丙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體9
(R)-5-[4-氰基-2-(3-側氧基-丙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將四氟硼酸三-第三丁基鏻(163毫克，0.56毫莫耳)及叁(二亞苄基丙酮)二鈀(0)於無水二烷(20毫升)中之懸浮液用氬氣脫氣10分鐘。向其中添加中間體7(5.0克，9.36毫莫耳)於無水二烷(30毫升)中之溶液，接著添加烯丙醇(2.55毫升，37.43毫莫耳)及N,N-二環己基甲胺(4.01毫升，18.72毫莫耳)。將所得混合物於60℃下攪拌30分鐘然後冷卻，過濾通過矽藻土及於真空中濃縮得到標題化合物之暗黃色發泡體，其係未經進一步純化而使用(287毫克)。
LC-MS(方法4)：Rt=3.32/3.49分鐘，m/z=512[M+H]+
中間體10
(R)-5-[4-氰基-2-(3-羥基-丙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
在5℃下向中間體9(4.30毫莫耳)溶於MeOH(40毫升)之溶液逐份添加硼氫化鈉(163毫克，4.30毫莫耳)。將混合物攪拌30分鐘及使其升溫至RT。於真空中移除溶劑及使殘留物於1N HCl與EtOAc之間分溶。將水層用EtOAc(x 2)萃取及將合併的有機萃取物乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。將所得殘留物利用層析純化，用含於DCM中之0至10% MeOH之梯度溶離，得到標題化合物的黃色發泡體(990毫克)。
LC-MS(方法4)：Rt=3.29分鐘，m/z=514[M+H]+
中間體11
(R)-5-[2-(3-溴-丙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
在5℃下向中間體10(780毫克，1.52毫莫耳)溶於 DCM(20毫升)之溶液添加四溴化碳(756毫克，2.28毫莫耳)，隨後添加三苯膦(598毫克，2.28毫莫耳)。將所得混合物攪拌1.5小時及使其升溫至RT。將溶液用DCM稀釋及用水洗滌，及將有機層乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。將所得殘留物利用層析純化，用含於環己烷中之0至50% EtOAc溶離，得到標題化合物的黃色發泡體(620毫克)。
LC-MS(方法4)：Rt=3.90分鐘，m/z=576[M(79Br)+H]+
(R)-5-[2-(2-乙醯胺基-丙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例2)
將中間體11(205毫克，0.35毫莫耳)及氨溶於MeOH(2M，4毫升，8.00毫莫耳)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)及DIPEA(246微升，1.42毫莫耳)中。在RT下於氬氣中添加乙醯氯(74微升，1.04毫莫耳)溶於THF(1毫升)之溶液，攪拌1小時然後於空氣流中移除溶劑。將所得殘留物溶解於MeOH(5毫升)中及在室溫下與碳酸鉀(0.12克，0.87毫莫耳)一起攪拌。於1小時後，將混合物添加至EtOAc-HCl水溶液並萃取至EtOAc中。將此等萃取物用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(55毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.20分鐘，m/z=555.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.19(1H,bs),8.11(1H,s),7.96-7.89(3H,m),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.70-7.60(3H,m),6.18(1H,s),3.49(3H,s),3.25-2.98(4H,m),2.14(3H,s),2.00-1.84(2H, m),1.83(3H,s)。
實施例3
(R)-5-{2-(3-乙醯基-甲基-胺基)-丙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體11(200毫克，0.347毫莫耳)及甲胺溶於THF(2M，1.80毫升，3.60毫莫耳)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)及DIPEA(240微升，1.39毫莫耳)中。在RT下於氬氣中添加乙醯氯(75微升，1.05毫莫耳)溶於THF(1毫升)之溶液，攪拌1小時然後於空氣流中移除溶劑。將所得殘留物溶解於EtOAC中，用水、碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，然後乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。將此殘留物再溶解於MeOH(8毫升)中及在室溫下與碳酸鉀(93毫克，0.673毫莫耳)一起攪拌。於2小時後，將混合物添加至EtOAc-HCl水溶液並萃取至EtOAc中。將此等萃取物用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(90毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.27分鐘，m/z=569.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.21-11.15(1H,m),8.11(1H,bs), 7.946-7.86(2H,m),7.80(1H,t,J=7.8Hz),7.76-7.60(3H,m),6.24-6.19(1H,m),3.95-3.71(1H,m),3.71-3.61(1H,m),3.53-3.47(3H,m),3.39-3.14(2H,m),3.06-2.90(3H,m),2.13(3H,s),2.05-2.00(3H,m)。
實施例4
(R)-5-{4-氰基-2-[3-(甲磺醯基-1-甲基胺基)-丙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體11(250毫克，0.434毫莫耳)及甲胺溶於THF(2M，2.0毫升，4.0毫莫耳)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)中。在RT下於氬氣中將其添加至DIPEA(375微升，2.17毫莫耳)及甲磺醯氯(102微升，1.31毫莫耳)溶於THF(1.0毫升)之經攪拌溶液。1小時後將溶劑於空氣流中移除，及將所得殘留物溶解於EtOAC中，用水、碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，然後乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(106毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.51分鐘，m/z=605.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.19(1H,bs),8.11(1H,bs),7.94-7.86(2H,m),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.77-7.74(1H,m), 7.69-7.59(2H,m),6.16(1H,s),3.51(3H,s),3.24-2.91(4H,m),2.90(3H,s),2.83(3H,s),2.23-1.88(2H,m),2.13(3H,s)。
實施例5
(R)-5-[2-(2-乙醯胺基-乙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體12
(R)-5-[2-(2-第三丁氧基-乙烯基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
向熱壓釜裝填中間體7(10克，18.72毫莫耳)、2-甲基-2-乙烯氧基-丙烷(6.55克，65.50毫莫耳)、四氟硼酸三-第三丁基鏻(540毫克，1.86毫莫耳)、Herrmann-Beller觸媒(反-二(μ-乙酸根)雙(O- 二-鄰甲苯基-膦基)苄基)二鈀(II))(880毫克，0.94毫莫耳)、1,2,2,6,6-五甲基哌啶(11.5克，74.20毫莫耳)之混合物。添加四甘醇(140毫升)及使所得溶液於氬氣下脫氣。然後將混合物於150℃下加熱1小時。使混合物冷卻，經EtOAc及10%檸檬酸水溶液稀釋，及將有機萃取物用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。將所得殘留物利用層析純化，用含於環己烷中之25-75% EtOAc溶離，得到標題化合物的E/Z異構物之[3：1]混合物且呈黃色發泡體(7.95克)。
LC-MS(方法5)：Rt=3.87分鐘，m/z=554.2[M+H]+
中間體13
(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使用鹽/冰浴將中間體12(7.87克，14.20毫莫耳)溶於DCM(130毫升)之溶液冷卻至-10℃及用TFA(6.35毫升，85.47毫莫耳)逐滴處理。於在-10℃下攪拌溶液2小時後，將所得溶液倒入冰冷的Na2CO3水溶液中。將有機相分離及用DCM(70毫升)進一步萃取水相，且使合併的DCM萃取物回到-5℃下的鹽/冰浴中。逐份添加硼氫化鈉(1.57克，41.42毫莫耳)，及於攪拌15分鐘後，將MeOH(32毫升)添加至所得混合物。將反應於-5℃下攪拌1.5小時，添加水及使所得混合物劇烈攪拌15分鐘，然後再分離有機相。 用DCM進一步萃取水相，及將合併的有機萃取物用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。將所得殘留物利用層析純化，用EtOAc溶離，得到標題化合物的乳白色固體(3.7克)。
LC-MS(方法5)：Rt=3.17分鐘，m/z=500.1[M+H]+
中間體14
(R)-5-[2-(2-溴-乙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體13(23克，46.1毫莫耳)於DCM(400毫升)中在RT下攪拌並添加四溴甲烷(22.95克，69.1毫莫耳)。然後於10分鐘內逐份添加三苯膦(18.11克，69.1毫莫耳)。將反應混合物於冰中短暫冷卻以維持RT(發生小的初始放熱)。繼續在RT下攪拌3小時。將混合物用水洗滌，將有機相乾燥(Na2SO4)，過濾及蒸發，及將殘留物層析，用含於環己烷中之40%至75% EtOAc之梯度溶離，得到標題化合物之白色固體(23.6克)。
LC-MS(方法5)：Rt=3.83分鐘，m/z=562.1[M(79Br)+H]+
(R)-5-[2-(2-乙醯胺基-乙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例5)
將中間體14(200毫克，0.35毫莫耳)及氨溶於MeOH (2M，4毫升，8.00毫莫耳)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)及DIPEA(246微升，1.42毫莫耳)中。在室溫下於氬氣中添加乙醯氯(76微升，1.07毫莫耳)溶於THF(1毫升)之溶液，攪拌1小時然後於空氣流中移除溶劑。將所得殘留物溶解於MeOH(5毫升)中及在RT下與碳酸鉀(0.12克，0.87毫莫耳)一起攪拌。於1小時後，將混合物添加至EtOAc-HCl水溶液並萃取至EtOAc中。將此等萃取物用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(43毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.16分鐘，m/z=541.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.24(1H,bs),8.12(1H,s),8.04(1H,t,J=5.3Hz),7.95-7.89(2H,m),7.81(1H,t,J=7.9Hz),7.71-7.62(3H,m),6.17(1H,s),3.51(3H,s),3.58-3.44(2H,m),3.29-3.14(2H,m),2.14(3H,s),1.83(3H,s)。
實施例6
(R)-5-{2-[2-(乙醯基-甲基-胺基)-乙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體14(150毫克，0.267毫莫耳)及甲胺溶於THF (2M，1.34毫升，2.68毫莫耳)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)及DIPEA(185微升，1.07毫莫耳)中。在RT下於氬氣中添加乙醯氯(57微升，0.80毫莫耳)溶於THF(1毫升)之溶液，攪拌1小時然後於空氣流中移除溶劑。將所得殘留物溶解於EtOAC中，用水、碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，然後乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。將此殘留物再溶解於MeOH(8毫升)中及在RT下與碳酸鉀(71毫克，0.513毫莫耳)一起攪拌。於2小時後，將混合物添加至EtOAc-HCl水溶液並萃取至EtOAc中。將此等萃取物用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(40毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.21分鐘，m/z=555.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.22-11.17(1H,m),8.12(1H,bs),7.95-7.89(2H,m),7.85-7.72(2H,m),7.69-7.59(2H,m),6.19-6.12(1H,m),3.49(3H,s),3.47-3.37(2H,m),3.20-3.05(1H,m),3.02-2.84(4H,m),2.22-1.78(8H,m)。
實施例7
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基胺基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧 酸甲基酯
將中間體14(100毫克，0.178毫莫耳)及氨溶於MeOH(2M，2毫升)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)。在RT下將此混合物添加至甲磺醯氯(58微升，0.748毫莫耳)及DIPEA(138微升，0.796毫莫耳)溶於THF(1毫升)之溶液，攪拌30分鐘然後於空氣流中移除溶劑。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(21毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.29分鐘，m/z=577.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.24(1H,bs),8.12(1H,bs),7.95-7.89(2H,m),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.76(1H,d,J=1.4Hz),7.70(1H,dd,J=8.0及1.6Hz),7.67(1H,d,J=8.0Hz),7.21(1H,t,J=5.3Hz),6.16(1H,s),3.62-3.52(1H,m),3.51(3H,s),3.44-3.33(2H,m),3.27-3.19(1H,m),2.95(3H,s),2.14(3H,s)。
實施例8
(R)-5-{4-氰基-2-[3-(甲磺醯基-1-甲基胺基)-乙基]-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體14(190毫克，0.329毫莫耳)及甲胺溶於THF (2M，2.0毫升，4.0毫莫耳)之溶液於密封管中在50℃下攪拌及加熱隔夜。將溶劑於空氣流下移除及將所得殘留物再溶解於THF(2毫升)中。在RT下於氬氣中將其添加至DIPEA(285微升，1.65毫莫耳)及甲磺醯氯(78微升，1.00毫莫耳)溶於THF(1.0毫升)之經攪拌溶液。1小時後將溶劑於空氣流中移除，及將所得殘留物溶解於EtOAC中，用水、碳酸鈉水溶液及鹽水洗滌，然後乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(95毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.46分鐘，m/z=591.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.22(1H,bs),8.12(1H,bs),7.95-7.89(2H,m),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.78-7.76(1H,m),7.73-7.63(2H,m),6.19(1H,s),3.73-3.43(2H,m),3.51(3H,s),3.30-3.22(2H,m，被水遮蔽)，2.95(3H,s),2.89(3H,s),2.14(3H,s)。
實施例9
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲基硫基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將硫代甲醇鈉(30毫克，0.40毫莫耳)添加至中間體14(100毫克，0.18毫莫耳)溶於IMS(1毫升)之溶液中並於RT下攪拌隔 夜。於真空中移除溶劑且使所得殘留物於EtOAc-水之間分溶。將EtOAc萃取物用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(45毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.88分鐘，m/z=530.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.20(1H,s),8.11(1H,bs),7.81(1H,t,J=7.9Hz),7.76(1H,d,J=1.5Hz),7.68(1H,dd,J=8.1及1.6Hz),7.63(1H,d,J=8.1Hz),6.15(1H,s),3.51(3H,s),3.45-3.35(1H,m),3.29-3.20(1H,m),3.09-3.00(1H,m),2.93-2.84(1H,m),2.19(3H,s)。
實施例10
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
在RT下將間氯過氧苯甲酸(50-55%，0.30克，0.95毫莫耳)逐份添加至實施例9(0.23克，0.43毫莫耳)溶於DCM(5毫升)之經攪拌溶液中。當由LCMS確認反應完成時，用DCM(10毫升)稀釋混合物，添加NaOH水溶液(1M)並徹底搖動。將分離的DCM相用水及鹽水洗滌，然後使用相分離匣筒分離並於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(35毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.31分鐘，m/z=562.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.25(1H,s),8.13(1H,bs),7.95-7.90(2H,m),7.85-7.80(2H,m),7.73(1H,dd,J=8.1及1.6Hz),7.70-7.65(1H,m),6.16(1H,s),3.91-3.82(1H,m),3.66-3.54(2H,m),3.52(3H,s),3.46-3.37(1H,m),3.10(3H,s),2.14(3H,s)。
實施例11
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲基硫基-丙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將硫代甲醇鈉(58毫克，0.79毫莫耳)添加至中間體11(300毫克，0.52毫莫耳)溶於IMS(4毫升)之溶液中並於RT下攪拌隔夜。於真空中移除溶劑且使所得殘留物於EtOAc-水之間分溶。將EtOAc萃取物用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾及於真空中濃縮得到粗產物(309毫克)。經由MDAP純化一些此殘留物(110毫克)得到標題化合物之白色固體(76毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.98分鐘，m/z=544.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.17(1H,bs),8.10(1H,bs),7.94-7.87(2H,m),7.81(1H,t,J=7.9Hz),7.72-7.69(1H,m),7.66(1H,dd,J=8.1及1.6Hz),7.61(1H,d,J=8.1Hz),6.17(1H,s),3.50 (3H,s),3.26-3.04(2H,m),2.63(2H,t,J=7.2Hz),2.19-2.12(4H,m),2.11(3H,s),2.01-1.90(1H,m)。
實施例12
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-丙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
在RT下將間氯過氧苯甲酸(50-55%，0.25克，0.72毫莫耳)逐份添加至實施例11(198毫克，0.36毫莫耳)溶於DCM(5毫升)之經攪拌溶液中。於1小時後，用DCM(10毫升)稀釋反應混合物，添加NaOH水溶液(1M)並徹底搖動。將分離的DCM相用水及鹽水洗滌，然後使用相分離匣筒分離並於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(60毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.30分鐘，m/z=576.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.21(1H,bs),8.12(1H,bs),7.96-7.89(2H,m),7.82(1H,t,J=7.8Hz),7.79-7.75(1H,m),7.69(1H,dd,J=8.1及1.6Hz),7.65(1H,d,J=8.1Hz),6.19(1H,s),3.51(3H,s),3.32-3.24(3H,m，被水遮蔽)，3.21-3.09(1H,m),3.03(3H,s),2.39-2.26(1H,m),2.24-2.12(4H,m)。
實施例13
(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基胺甲醯基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體15
(R)-5-(4-氰基-2-甲醯基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使中間體8(7.92克，16.45毫莫耳)懸浮於丙酮(80毫升)及水(8毫升)之混合物中。先添加4-甲基啉N-氧化物單水合物(4.45克，32.92毫莫耳)，接著再添加二水合鋨酸鉀(62毫克，0.17毫莫耳)，及將反應混合物於RT下劇烈攪拌18小時。接著添加Na2S2O5(6.90克，36.30毫莫耳)及將反應再多攪拌20分鐘。使所得混合物過濾通過矽藻土然後於真空中蒸發。將所得殘留物溶解於THF(100毫升)及水(100毫升)中然後冷卻至0℃，隨後再添加過碘酸鈉(7.04克，32.91毫莫耳)。使反應混合物於<10℃下在氬氣中攪拌3小時，然後 用EtOAc稀釋。將有機層分離，及用EtOAc萃取水層。將合併的有機層先用水接著用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)及於真空中蒸發。將所得殘留物利用矽膠層析純化，用含於環己烷中之0至80% EtOAc之梯度溶離，得到標題化合物的褐色發泡體(6.58克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.20分鐘，m/z=484[M+H]+
中間體16
(R)-5-(2-羧基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使中間體15(3.50克，7.25毫莫耳)、磷酸二氫鈉(861毫克，7.25毫莫耳)及2-甲基-2-丁烯(2M THF溶液；15.75毫升，31.50毫莫耳)溶於t-BuOH：水[44毫升：12.5毫升]之混合物中的溶液在RT下攪拌，同時經10分鐘逐份添加亞氯酸鈉。藉由添加至反應之速率及藉由冰/水冷卻來控制所產生的放熱。使反應於RT下攪拌4小時，然後用EtOAc(100毫升)及水(100毫升)稀釋及添加一些1M HCl水溶液以確保酸度。將有機相用10% K2CO3水溶液及10%檸檬酸水溶液連續洗滌，及將合併的有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。將所得殘留物利用矽膠層析純化，用含於含有0.5%醋酸之DCM中之0至5% MeOH之梯度溶離，得到標題化合物的灰白色膠(1.47克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.08分鐘，m/z=500[M+H]+
(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基胺甲醯基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例13)
將中間體16(43毫克，0.086毫莫耳)、乙醇胺(6.6毫克，0.12毫莫耳)及DIPEA(44毫克，0.34毫莫耳)溶解於DMF(0.8毫升)中及用HATU(49毫克，0.29毫莫耳)處理所得混合物並於RT下攪拌18小時。使混合物於EtOAc與水之間分溶。將有機層分離，用水洗滌兩次，乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(17毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=3.87分鐘，m/z=543.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.59(1H,s),9.28(1H,m),8.37-8.02(2H,bs),7.96-7.87(2H,m),7.86-7.72(3H,m),6.51(1H,m),4.76(1H,t,J=5.1Hz),3.62-3.53(2H,m),3.40(3H,s),3.28-3.18(2H,m),2.14(3H,s)。
以下實施例係使用類似於實施例13之方法自中間體16及經適當取代的胺製備得：
實施例18a/18b
(R)-5-[4-氰基-2-(1-羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(非鏡像異構物18a及18b)
將中間體15(245毫克，0.507毫莫耳)溶於THF(3.0毫升)之冷卻(0℃)溶液用溴化甲基鎂(1.4M甲苯溶液；0.78毫升，1.10毫莫耳)處理且將反應混合物攪拌40分鐘。進一步添加溴化甲基鎂(1.4M甲苯溶液；0.78毫升，1.10毫莫耳)，然後於多攪拌40分鐘後，於0℃下添加最終等份的溴化甲基鎂(1.4M甲苯溶液；0.78毫升，1.10毫莫耳)。於10分鐘後，使反應混合物於EtOAc與NH4Cl飽和水溶液之間分溶，及分離有機相，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)並於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物實施例18a(47毫克)及實施例18b(17毫克)之白色固體。
實施例18a(非鏡像異構物1)：
LC-MS(方法3)：Rt=4.12分鐘，m/z=500.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.20(1H,s),8.11(1H,bs),7.94-7.87(3H,m),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.69(1H,dd,J=8.2,1.9 Hz),7.57(1H,d,J=8.2Hz),6.21(1H,s),5.52-5.43(1H,m),5.22(1H,d,J=4.4Hz),3.55(3H,s),2.11(3H,d,J=0.7Hz),1.57(3H,d,J=6.3Hz)。
實施例18b(非鏡像異構物2)：
LC-MS(方法3)：Rt=4.42分鐘，m/z=500.1[M]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.47(1H,s),8.12(1H,bs),7.96(1H,d,J=1.9Hz),7.94-7.88(2H,m),7.82(1H,t,J=8.0Hz),7.74(1H,dd,J=8.1,1.8Hz),7.69(1H,d,J=8.1Hz),6.37(1H,s),5.70-5.61(1H,m),5.22(1H,m),3.48(3H,s),2.17(3H,d,J=0.7Hz),1.46(3H,d,J=6.4Hz)。
實施例19
(R)-5-(4-氰基-2-甲基胺甲醯基甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體17
(R)-5-(4-氰基-2-甲氧羰基甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
向微波瓶中裝填中間體7(2.5克，4.67毫莫耳)、鈀(0)雙(二亞苄基丙酮)(132毫克，0.23毫莫耳)、氟化鋅(242毫克，2.34毫莫耳)及無水DMF(12毫升)，然後於氬氛圍下脫氣。將三(第三丁基)膦(1M甲苯溶液；475微升，0.19毫莫耳)及1-(第三丁基二甲基矽烷氧基)-1-甲氧乙烯(3.05毫升，14毫莫耳)之溶液添加至反應，隨後進一步脫氣。使混合物於微波照射下在135℃下加熱4小時。進一步添加1-(第三丁基二甲基矽烷氧基)-1-甲氧乙烯(0.7毫升，3.2毫莫耳)及使混合物於微波照射下在135℃下再加熱1小時。使所得混合物於EtOAc與水之間分溶，及用EtOAc萃取水層。將合併的有機萃取物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)然後於真空中濃縮。將所得殘留物溶解於MeOH中，用TFA(5滴)處理及使其於RT下攪拌18小時(此過程自初始產生的矽烷化產物移除TBDMS基團)。將反應混合物於真空中濃縮然後利用層析純化，用含於環己烷中之0至100% EtOAc溶離，得到標題化合物的白色固體(1.82克)。
LC-MS(方法4)：Rt=3.45分鐘，m/z=528.3[M+H]+
中間體18
(R)-5-(2-羧甲基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使中間體17(900毫克，1.71毫莫耳)及LiOH.H2O(146毫克，3.48毫莫耳)溶於水/THF[2.6毫升：13毫升]之混合物中且使所得溶液於RT下攪拌2小時。將反應用EtOAc(100毫升)及水(100毫升)稀釋及添加一些1M HCl水溶液以確保酸度。將有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。使所得殘留物與DCM共同研製得標題化合物的奶油色固體(0.50克)。
LC-MS(方法3)：Rt=3.99分鐘，m/z=514.2[M+H]+
(R)-5-(4-氰基-2-甲氧羰基甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例19)
將中間體18(137毫克，0.267毫莫耳)溶於THF(2毫升)之溶液用CDI(86.5毫克，0.534毫莫耳)處理且將所得溶液於RT下攪拌1小時。添加甲胺之溶液(2M THF溶液；342微升，0.684毫莫耳)，及使混合物在RT下再多攪拌18小時。使反應於EtOAc與水之間分溶。分離有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)並於真空中濃縮。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物之白色固體(81毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.03分鐘，m/z=527.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.26(1H,s),8.13(1H,bs),8.05-7.97(1H,m),7.96-7.87(2H,m),7.81(1H,t,J=7.8Hz),7.74-7.63(3H,m),6.20(1H,m),4.05(1H,d,J=15.7Hz),3.89(1H,d,J=15.7Hz),3.42(3H,s),2.65(3H,d,J=4.6Hz),2.17(3H,s)。
以下實施例係使用類似於實施例19之方法自中間體18及經適當取代的胺製備得：
實施例22
(R)-5-{2-[2-(三亞甲亞胺-3-基甲基-甲基-胺基)-乙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯甲酸鹽
中間體19
(R)-5-(2-{2-[(1-第三丁氧羰基-三亞甲亞胺-3-基甲基)-甲基-胺基]-乙基}-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體14(100毫克，0.178毫莫耳)及1-boc-3-(甲基胺基甲基)-三亞甲亞胺(78毫克，0.39毫莫耳)溶於MeCN(2毫升)之溶液於50℃下攪拌及加熱4小時。將溶劑於真空中移除及將所得殘留物溶解於EtOAc中，用水及鹽水洗滌然後乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，先用含於DCM中之2.5至5% MeOH，接著用含於DCM中之5%(2M NH3之MeOH 溶液)溶離，得到標題化合物的白色固體(92毫克)。
LC-MS(方法4)：Rt=2.82分鐘，m/z=682.4[M+H]+
(R)-5-{2-[2-(三亞甲亞胺-3-基甲基-甲基-胺基)-乙基]-4-氰基-苯基}-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯甲酸鹽(實施例22)
將中間體19(81毫克，0.119毫莫耳)溶於DCM(2毫升)之溶液用水(30微升)及TFA(0.30毫升)處理且於RT下攪拌3½小時。將溶劑於真空中移除且所得殘留物。經由MDAP純化所得殘留物得到標題化合物(45毫克)之白色固體。
LC-MS(方法4)：Rt=2.83分鐘，m/z=582.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 10.50(1H,v.bs),8.39(1H,s，甲酸鹽)，8.10(1H,bs),7.95-7.86(2H,m),7.81(1H,t,J=7.9Hz),7.71(1H,s),7.68-7.59(2H,m),6.15(1H,m),3.93-3.79(2H,m),3.60-3.46(2H,om),3.51(3H,s),3.35-3.21(2H,m),3.15-3.03(1H,m),3.02-2.91(1H,m),2.89-2.77(1H,m),2.73-2.58(2H,m),2.26(3H,s),2.13(3H,s)。胺NH未被觀察到/被遮蔽。
以下實施例係使用類似於實施例22之方法自中間體14及經適當取代的單-Boc保護之雙-胺製備得：
實施例27
(R)-5-[4-氰基-2-(3-乙基-脲基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體16(80毫克，0.160毫莫耳)及DIPEA(44毫克，0.34毫莫耳)溶解於甲苯/二烷[1毫升：0.5毫升]之混合物中並添加疊氮磷酸二苯酯(48毫克，0.175毫莫耳)，及使所得經攪拌混合物升溫至85℃並老化5分鐘。使反應混合物稍微冷卻並添加乙胺(2M之MeOH溶液；0.24毫升，0.48毫莫耳)，及使所得混合物冷卻至RT並再多攪拌1小時。使反應於EtOAc與碳酸氫鈉水溶液之間分溶，及將有機層分離，用水洗滌兩次，乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之60至75% EtOAc溶離，得到標題化合物的奶油色固體(26毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.15分鐘，m/z=542.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.36(1H,bs),8.39(1H,bs),8.17-8.11(2H,m),7.97-7.88(2H,m),7.81(1H,t,J=7.9Hz),7.64-7.55(1H,m),7.45(1H,dd,J=8.1,1.7Hz),7.03(1H,t,J=5.3Hz),6.16(1H,d,J=0.9Hz),3.39(3H,s),3.22-3.13(2H,m),2.18(3H,d,J=0.8Hz),1.11(3H,t,J=7.2Hz)。
以下實施例係使用類似於實施例27之方法自中間體 16及經適當取代的胺製備得：
實施例30
(R)-5-(4-氰基-2-乙氧羰基胺基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體16(50毫克，0.100毫莫耳)、DIPEA(28.4毫克，0.22毫莫耳)及乙醇(18毫克，0.39毫莫耳)溶解於甲苯中並添加疊氮磷酸二苯酯(30毫克，0.109毫莫耳)。將所得溶液於RT下 攪拌5分鐘，隨後升溫至85℃持續1小時。使反應於EtOAc與碳酸氫鈉水溶液之間分溶，及將有機層分離，用水洗滌兩次，乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之20至25% EtOAc溶離，得到標題化合物的奶油色固體(13毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.60分鐘，m/z=543.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.52(1H,bs),9.26(1H,m),8.11(1H,bs),7.99-7.95(1H,m),7.94-7.87(2H,m),7.81(1H,t,J=7.9Hz),7.77-7.72(1H,m),7.64(1H,dd,J=8.1,1.7Hz),6.18(1H,m),4.23-4.12(2H,m),3.40(3H,s),2.20(3H,d,J=0.8Hz),1.26(3H,t,J=7.2Hz)。
以下實施例係使用類似於實施例30之方法自中間體16及2-二甲胺基乙醇製備得：
實施例32
(R)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體20
(R)-5-(2-第三丁氧羰基胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使用自中間體16得到實施例30之類似方法自中間體16(300毫克，0.601毫莫耳)及2-甲基-丙-2-醇(2.5毫升)製備標題化合物，得到產物之琥珀色膠(111毫克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.72分鐘，m/z=571.0[M+H]+
中間體21
(R)-5-(2-胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使用類似於在實施例22之最終合成階段中所用之方法自中間體20(105毫克，0.184毫莫耳)製備標題化合物，得到產物之米色固體(60毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.25分鐘，m/z=471.0[M+H]+
(R)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例32)
將中間體21(15毫克，0.032毫莫耳)及DIPEA(28微升，0.16毫莫耳)溶解於1,2-二氯乙烷(0.5毫升)中並添加乙醯氯(7微升，0.096毫莫耳)。將所得溶液於50℃下攪拌1½小時，隨後添加4-二甲胺基-吡啶之晶體及另外的乙醯氯(7微升，0.096毫莫耳)並在50℃下繼續加熱30分鐘。將所得溶液用K2CO3(40毫克，0.29毫莫耳)、MeOH(1毫升)及水(5滴)處理並在RT下攪拌1½小時。使反應於DCM與水之間分溶，及將有機層分離，用水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之50至75% EtOAc溶離，得到標題化合物的奶油色固體(13毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.09分鐘，m/z=513.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.51(1H,bs),9.89(1H,bs),8.12(1H,s),8.04-8.01(1H,m),7.94-7.88(2H,m),7.84-7.78(1H,m),7.77-7.71(1H,m),7.65-7.59(1H,m),6.30(1H,s),3.37(3H,s),2.21(3H,d,J=0.8Hz),2.20(3H,os)。
實施例33a/33b
(R)及(S)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體22
4-(4-氰基-2-甲氧基-苯基)-6-甲基-2-硫酮基-1-(3-三氟甲基-苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲基酯
將4-甲醯基-3-甲氧基-苯甲腈(3.22克，19.98毫莫耳)、3-三氟甲基苯基硫脲(4.40克，19.98莫耳)及三甲基矽烷基多 磷酸(6.50克，2重量當量)於DME(65毫升)中之經攪拌溶液用乙醯乙酸甲酯(2.53克，2.35毫升，21.78毫莫耳)處理。使所得混合物升溫至70℃持續18小時及使反應於真空中濃縮得到黃色/橙色發泡體，使其於EtOAc與水之間分溶。將含水萃取物用EtOAc(x2)進一步萃取，及將合併的有機萃取物用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮，得到標題化合物的橙色發泡體(9.79克)。
LCMS(方法1)：Rt 3.69分鐘，m/z 461.9[M+H]+
(R)及(S)-5-(2-乙醯胺基-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例33a/33b)
使用自中間體6得到中間體7所用之類似方法自中間體22(5.60克，12.14毫莫耳)製備得實施例33a及33b外消旋混合物。於分離實施例33a及33b(2.88克)之外消旋混合物後，經由使用對掌性SFC層析於對掌性YMC Amylose C管柱(5μM；21.2 x 250mm)上純化，利用MeOH/CO2[30：70]於100毫升/分鐘(40℃/40psi)下溶離，獲得標題化合物。
實施例33a：
SFC Rt=1.24分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=4.36分鐘，m/z=486.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.09(1H,s),7.94(1H,bs),7.93-7.87(1H,m),7.85-7.78(2H,m),7.55(1H,d,J=6.7Hz),7.54(1H,s),7.42(1H,dd,J=7.8,1.6Hz),6.04(1H,d,J=0.9Hz),3.84(3H,s),3.53(3H,s),2.10(3H,d,J=0.9Hz)。
實施例33b：
SFC Rt=2.75分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=4.36分鐘，m/z=486.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.09(1H,s),7.94(1H,bs),7.93-7.87(1H,m),7.85-7.78(2H,m),7.55(1H,d,J=6.7Hz),7.54(1H,s),7.42(1H,dd,J=7.8,1.6Hz),6.04(1H,d,J=0.9Hz),3.84(3H,s),3.53(3H,s),2.10(3H,d,J=0.9Hz)。
實施例34a/34b
(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
中間體23
4-甲醯基-3-(2-甲氧基-乙氧基)-苯甲酸甲基酯
將4-甲醯基-3-羥基-苯甲酸甲基酯(1.80克，9.99毫莫耳)及K2CO3(2.76克，19.97毫莫耳)於DMF(20毫升)中之混合物 用1-溴-2-甲氧基-乙烷(1.20毫升，12.77毫莫耳)處理並於氮氣下加熱至75℃持續18小時。將反應混合物於真空中濃縮且於EtOAc與水之間分溶。將含水萃取物用EtOAc(x2)進一步萃取，及將合併的有機萃取物用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮，得到標題化合物的暗褐色蠟狀固體(1.88克)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.56(1H,d,J=0.5Hz),7.88(1H,dd,J=7.8,0.5Hz),7.70-7.69(1H,m),7.68(1H,s),4.39-4.28(2H,m),3.95(3H,s),3.85-4.81(2H,m),3.4(3H,s)。
中間體24
4-[4-甲氧羰基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-6-甲基-2-硫酮基-1-(3-三氟甲基-苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲基酯
使用類似於中間體22所用之方法自中間體23(1.88克，7.89毫莫耳)製備中間體24，得到期望產物之黃色玻璃(2.57克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.86分鐘，m/z=539.0[M+H]+
中間體25
5-[4-甲氧羰基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使用類似於自中間體6製備中間體7所用之方法自中間體24(2.56克，4.75毫莫耳)製備中間體25，得到期望產物之白色固體(1.20克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.29分鐘，m/z=563.0[M+H]+
中間體26
5-[4-胺甲醯基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
將中間體25(1.20克，2.13毫莫耳)溶於二烷(15毫升)之溶液用1M NaOH水溶液(4.8毫升)處理且使所得溶液於RT下攪拌18小時。將反應用EtOAc(100毫升)及水(100毫升)稀釋及添 加1M HCl水溶液(5.0毫升)以確保酸度。將有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)及於真空中濃縮。使所得殘留物與DCM共同研製得標題化合物的白色固體(0.91克)。
LC-MS(方法1)：Rt=2.97分鐘，m/z=547.1[M-H]
中間體27
5-[4-胺甲醯基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯
使用類似於在自中間體16製備實施例13之最終階段中所用之方法自中間體26(0.80克，1.46毫莫耳)及氯化銨(0.32克，5.98毫莫耳)製備中間體27。得到期望產物之灰白色膠(0.38克)。
LC-MS(方法4)：Rt=2.97分鐘，m/z=548.2[M+H]+
(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸甲基酯(實施例34a/34b)
將中間體27(450毫克，0.82毫莫耳)溶於DMF(2毫升)之冰冷溶液用三聚氯化氰(227毫克，1.23毫莫耳)處理且將所得溶液於RT下攪拌1½小時。使用冰/水浴冷卻反應混合物且添加K2CO3(380毫克，2.75毫莫耳)溶於丙酮/水[2毫升：2毫升]之混 合物之溶液。移除冷卻浴且添加額外量的水(15毫升)及使所得混合物於RT下攪拌18小時。將反應用水及EtOAc(x3)稀釋及將合併的有機相用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾及於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之0至10% MeOH溶離，得到實施例33之外消旋體的白色固體(230毫克)。
於分離實施例34a及34b之外消旋混合物後，經由使用對掌性層析利用ChiralPak IA管柱(5μM；20 x 250mm)純化，利用以18毫升/分鐘流動之20%乙醇/30%正庚烷/50% DCM(等強度)之混合物溶離，獲得標題化合物，及測量254nm下之吸光度。
實施例34a：
對掌性層析Rt=3.8分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=4.50分鐘，m/z=530.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.07(1H,s),8.04(1H,s),7.92-7.83(2H,m),7.83-7.68(1H,m),7.57-7.52(2H,m),7.40(1H,dd,J=7.8,1.5Hz),6.06(1H,d,J=0.9Hz),4.36-4.28(1H,m),4.27-4.18(1H,m),3.69-3.57(2H,m),3.50(3H,s),3.26(3H,s),2.08(3H,d,J=0.9Hz)。
實施例34b：
對掌性層析Rt=9.2分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=4.50分鐘，m/z=530.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.07(1H,s),8.04(1H,s),7.92-7.83(2H,m),7.83-7.68(1H,m),7.57-7.52(2H,m),7.40(1H,dd,J=7.8,1.5Hz),6.06(1H,d,J=0.9Hz),4.36-4.28(1H,m),4.27-4.18(1H,m),3.69-3.57(2H,m),3.50 (3H,s),3.26(3H,s),2.08(3H,d,J=0.9Hz)。
實施例35a/35b
(R)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈(非鏡像異構物35a及35b)
中間體28
(S)-5-(2-溴-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸
將中間體7(10.70克，20.04毫莫耳)溶於DCM(200毫升)之經冷卻(-50℃)、經攪拌溶液用BBr3(1M DCM溶液；100毫升，0.10莫耳)以可觀察到適度放熱的速率逐滴處理。使所得溶 液經1小時升溫至0℃，然後再經1½小時升溫至RT。使反應混合物冷卻至0℃及小心地經由添加水(25毫升)來終止反應。將DCM層分離及利用DCM(x2)萃取水層。將合併的有機萃取物用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾及於真空中濃縮。將此殘留物利用層析純化，自含於DCM中之0至10% MeOH溶離，得到半純產物的淺橙色固體(9.42克)。將此材料溶解於EtOAc中及用NaHCO3飽和水溶液(x3)萃取有機相。將合併的水性萃取物小心地用濃氫氯酸水溶液酸化及經由過濾收集所得沈澱物並於真空中乾燥得到標題化合物的白色固體(3.38克)。
LC-MS(方法1)：Rt=2.97分鐘，m/z=520.1[M(79Br)+H]+
中間體29
(S)-5-(2-溴-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸醯胺
使用類似於在自中間體16製備實施例13之最終階段中所用之方法自中間體28(3.90克，7.50毫莫耳)及氯化銨(1.62克，30.0毫莫耳)製備中間體29。得到標題化合物之淺黃色固體(2.87克)。
LC-MS(方法4)：Rt=2.83分鐘，m/z=519.2[M(79Br)+H]+
中間體30
(S)-5-(2-溴-4-氰基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈
將中間體29(2.87克，5.53毫莫耳)溶於THF(100毫升)之溶液用柏傑士試劑(1-甲氧基-N-三乙基銨基磺醯基-甲亞胺鹽)(3.94克，16.55毫莫耳)處理且將所得溶液於RT下攪拌2小時。將反應混合物用水及EtOAc(x3)稀釋，及將合併的有機相用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾及於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之0至50% EtOAc溶離，得到標題化合物的白色固體(2克)。
LC-MS(方法4)：Rt=2.83分鐘，m/z=519.2[M(79Br)+H]+
(R)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈(實施例35a/35b)
使用類似於自中間體7製備實施例1a/1b所用之程序自中間體30(1.0克，2.0毫莫耳)製備標題化合物。
經由層析純化，自含於EtOAc中之0至5% MeOH溶離，得到標題化合物的白色固體35a(150毫克)及35b(20毫克)的白色固體。
實施例35a(非鏡像異構物1)：
LC-MS(方法3)：Rt=3.73分鐘，m/z=483.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.20(1H,s),8.05(1H,bs),7.92-7.90(1H,m),7.90-7.86(2H,m),7.82-7.77(1H,m),7.76(1H,dd,J=8.1,1.8Hz),7.61(1H,d,J=8.1Hz),6.16(1H,m),5.33(1H,d,J=4.4Hz),5.14-5.05(1H,m),4.57(1H,t,J=5.8Hz),3.94-3.84(1H,m),3.59-3.49(1H,m),1.84(3H,d,J=1.2Hz)。
實施例35b(非鏡像異構物2)：
LC-MS(方法3)：Rt=3.77分鐘，m/z=481.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.13(1H,s),8.05(1H,bs),7.92-7.90(1H,m),7.90-7.86(2H,m),7.82-7.77(1H,m),7.76(1H,dd,J=8.1,1.8Hz),7.71(1H,d,J=8.1Hz),6.14(1H,m),5.31-5.27(2H,m),4.55(1H,t,J=5.7Hz),3.68-3.59(1H,m),3.58-3.49(1H,m),1.99(3H,d,J=1.2Hz)。
實施例36
(R)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈
使用類似於自中間體7製備中間體13所用之程序自中間體30(0.95克，1.895毫莫耳)製備標題化合物。依照此程序，得到標題化合物的無色玻璃(60毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=3.98分鐘，m/z=467.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.39(1H,s),8.32-8.03(1H,v.bs),7.95-7.85(2H,m),7.84-7.79(1H,m),7.78(1H,s),7.77(1H,dd,J=7.8,1.7Hz),7.73-7.64(1H,m),6.05(1H,s),4.83(1H,bs),3.82-3.61(2H,m),3.19-2.94(2H,m),1.94(3H,d,J=1.1Hz)。
實施例37
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈
中間體31
(R)-5-[2-(2-溴-乙基)-4-氰基-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈
使用類似於自中間體13製備中間體14所用之程序自實施例36(35毫克，0.075毫莫耳)製備標題化合物，得到期望產物的白色玻璃(18毫克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.41分鐘，m/z=528.9[M(79Br)+H]+
(R)-5-[4-氰基-2-(2-甲磺醯基-乙基)-苯基]-7-甲基-3-側氧基-8-(3-三氟甲基-苯基)-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈(實施例37)
將中間體31(18毫克，0.034毫莫耳)溶於DMF(0.5毫升)之溶液在氬氣下用甲亞磺酸鈉(10毫克，0.098毫莫耳)處理且使所得混合物在70℃下攪拌3小時。將反應於真空中濃縮且使殘留物於水與EtOAc(x3)之間分溶，及將合併的有機相用水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之0至10% MeOH溶離，得到標題化合物的無色玻璃(14毫克)。
LC-MS(方法3)：Rt=4.07分鐘，m/z=529.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.40(1H,s),8.13(1H,v.bs),7.95-7.88(2H,m),7.87-7.68(4H,m),6.03(1H,s),3.79-3.60(2H,m),3.56-3.44(2H,m),3.07(3H,s),1.84(3H,d,J=1.2Hz)。
實施例38a/38b
(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈 中間體32
1-苯甲醯基-3-(3-二氟甲基-苯基)-硫脲
將異氰酸苯甲醯酯(9.06毫升，67.42毫莫耳)溶於丙酮(45毫升)之溶液添加至3-二氟甲基-苯基胺(9.65克，67.42毫莫耳)溶於丙酮(45毫升)之經冷卻(5℃)溶液且將所得溶液回流加熱30分鐘。將反應混合物傾倒於碎冰(300毫升)上並快速攪拌，且經由過濾收集所得黃色沈澱物並於真空中乾燥得標題化合物(>20.65克-濕)。
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 12.65(1H,bs),11.64(1H,bs),8.03-7.97(3H,m),7.82(1H,d,J=8.1Hz),7.68(1H,dd,J=7.5,1.2Hz),7.61-7.52(3H,m),7.48(1H,d,J=7.6Hz),7.08(1H,t,J=55.8Hz)。
中間體33
(3-二氟甲基-苯基)-硫脲
將中間體32(20.65克，67.4毫莫耳)懸浮於1M NaOH水溶液(135毫升，135.0毫莫耳)中並將所得混合物加熱至80℃並攪拌1小時。使反應混合物冷卻，並利用甲酸將pH調整至pH 4而得 淺橙色固體沈澱物。利用NaHCO3飽和水溶液將懸浮液鹼化至pH 8得灰白色固體，經由過濾將其收集。將固體溶解於DCM(300毫升)中及將有機相用1M Na2CO3水溶液、水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮得標題化合物的棕褐色固體(11.11克)。
LC-MS(方法1)：Rt=2.31分鐘，m/z=203.0[M+H]+
中間體34
4-(2-溴-4-氰基-苯基)-1-(3-二氟甲基-苯基)-6-甲基-2-硫酮基-1,2,3,4-四氫-嘧啶-5-羧酸烯丙酯
使用類似於製備中間體22所用之程序自中間體33、3-溴-4-甲醯基-苯甲腈及3-側氧基丁酸烯丙酯製備標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=3.86分鐘，m/z=517.9[M(79Br)+H]+
中間體35
5-(2-溴-4-氰基-苯基)-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基 -2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸烯丙酯
使用類似於自中間體6製備中間體7所用之程序自中間體34(1.94克，3.74毫莫耳)製備標題化合物，得到期望產物之黃色發泡體(1.01克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.39分鐘，m/z=541.9[M(79Br)+H]+
中間體36
5-(2-溴-4-氰基-苯基)-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-羧酸
將中間體35(814毫克，1.50毫莫耳)及啉(0.23毫升，2.63毫莫耳)溶於THF(15毫升)之溶液用肆(三苯膦)鈀(0)(9毫克，0.008毫莫耳)處理及將所得溶液於氬氣中在RT下攪拌18小時。添加額外的肆(三苯膦)鈀(0)(2 x 9毫克，2 x 0.008毫莫耳)及繼續攪拌3天。將反應混合物用水(25毫升)及EtOAc(150毫升)稀釋及將有機相分離及用10%檸檬酸水溶液、水及鹽水洗滌，然後乾燥(Na2SO4)，過濾並於真空中濃縮。將此所得殘留物利用層析純化，自含於DCM中之0至100% EtOAc溶離，得到標題化合物的白色固體(104毫克)。
LC-MS(方法1)：Rt=2.72分鐘，m/z=501.9[M(79Br)+H]+
中間體37
5-(2-溴-4-氰基-苯基)-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈
使用類似於自中間體28製備中間體30所用之程序自中間體36(100毫克，0.20毫莫耳)製備標題化合物，得到產物之白色發泡體(67毫克)。
LC-MS(方法1)：Rt=3.06分鐘，m/z=482.9[M(79Br)+H]+
(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(2-羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈(實施例38a/38b)
使用自中間體7製備中間體13所用之類似程序自中間體37(222毫克，0.46毫莫耳)製備標題化合物。
於分離實施例38a及38b(64毫克)之外消旋混合物後，於使用對掌性層析利用ChiralPak IA管柱(5μM；20 x 250mm)純化，利用18毫升/分鐘之含於DCM中之2% IPA溶離及利用254nm之波長，獲得標題化合物。
實施例38a：(22毫克)
對掌性管柱Rt=9.50分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=3.64分鐘，m/z=449.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.36(1H,bs), 7.95-7.80(1H,bm),7.78(1H,bs),7.70-7.69(4H,m),7.68-7.60(1H,m),7.13(1H,t,J=55.7Hz),6.06(1H,s),4.80(1H,t,J=5.1Hz),3.84-3.62(2H,m),3.19-2.94(2H,m),1.93(3H,d,J=1.1Hz)。
實施例38b：(26毫克)
對掌性管柱Rt=14.5分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=3.64分鐘，m/z=449.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.36(1H,bs),7.95-7.80(1H,bm),7.78(1H,bs),7.70-7.69(4H,m),7.68-7.60(1H,m),7.13(1H,t,J=55.7Hz),6.06(1H,s),4.80(1H,t,J=5.1Hz),3.84-3.62(2H,m),3.19-2.94(2H,m),1.93(3H,d,J=1.1Hz)。
實施例39a/39b/39c/39d
(R)及(S)-5-[4-氰基-2-(1,2-二羥基-乙基)-苯基]-8-(3-二氟甲基-苯基)-7-甲基-3-側氧基-2,3,5,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶-6-甲腈
使用自中間體7製備實施例1a及1b所用之類似程序自中間體37(340毫克，0.70毫莫耳)製備標題化合物。
經由層析純化，自含於EtOAc之0至5% MeOH溶離，得到非鏡像異構物1(作為鏡像異構物1及2之混合物)及非鏡像異構物2(作為鏡像異構物1及2之混合物)的白色固體。於分離 非鏡像異構物1及非鏡像異構物2之外消旋體後，於使用對掌性層析利用ChiralPak IC管柱(5μM；20 x 250mm)純化，利用18毫升/分鐘之EtOH-正庚烷-DCM(30：45：25)DCM溶離及利用254nm之波長，獲得純鏡像異構物。
實施例39a(非鏡像異構物1/鏡像異構物1)：(13毫克)
對掌性層析Rt=11.6分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=3.39分鐘，m/z=465.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.41(1H,s),7.92(1H,d,J=1.7Hz),7.87(1H,vbs),7.81(1H,dd,J=8.1,1.8Hz),7.78-7.68(2H,om),7.74(1H,s),7.61(1H,d,J=8.1Hz),7.12(1H,t,J=55.7Hz),6.13(1H,m),5.61(1H,d,J=4.5Hz),5.21-4.98(1H,m),4.93-4.72(1H,m),4.16-4.69(1H,m),3.51-3.40(1H,m),1.92(3H,d,J=1.1Hz)。
實施例39b(非鏡像異構物1/鏡像異構物2)：(13毫克)
對掌性層析Rt=16.6分鐘
LC-MS(方法3)與實施例39a相同
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)與實施例39a相同
實施例39c(非鏡像異構物2/鏡像異構物1)：(5.5毫克)
對掌性層析Rt=11.1分鐘
LC-MS(方法3)：Rt=3.47分鐘，m/z=465.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 11.30(1H,s),7.93(1H,d,J=1.8Hz),7.88(1H,vbs),7.82(1H,dd,J=8.0,1.7Hz),7.79-7.65(4H,m),7.12(1H,t,J=55.6Hz),6.12(1H,m),5.61(1H,m),5.43-5.19(1H,m),4.86(1H,t,J=5.8Hz),3.79-4.50(1H,m),3.51-3.39(1H,m),1.97(3H,m)。
實施例39d(非鏡像異構物2/鏡像異構物2)：(5毫克)
對掌性層析Rt=14.7分鐘
LC-MS(方法3)與實施例39c相同
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)與實施例39c相同
生物測定法
測試本發明化合物在人類嗜中性白血球彈性蛋白酶(HNE)酶活性測定法中的效力。
HNE酶測定法
測定係於96孔盤中以100微升之總測定體積進行。彈性蛋白酶(人類白血球彈性蛋白酶，Sigma E8140)的最終濃度為0.00072U/毫升。肽基質(MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC，Calbiochem #324740)係以100μM之最終濃度使用。DMSO之最終濃度係1%含於測定緩衝液(0.05M Tris.HCl、0.1M NaCl、0.1M CaCl2、0.0005% brij-35，pH 7.5)中。經由添加酶及於25℃下培育30分鐘來起始酶反應。培育後，經由以50微克/孔之最終濃度添加大豆胰蛋白酶抑制劑(Sigma T9003)來停止反應。使用Molecular Devices螢光盤讀取器使用380nm激發及460nm發射波長來測量螢光。
進行對各化合物的劑量反應且將化合物於各實驗中的效應表示為對照酶螢光的抑制百分比。繪製劑量反應曲線及確定化合物效力(IC50)。於至少兩個獨立實驗中測試化合物。
代表本發明之測試實施例的IC50示於下表中：
在上表中，HNE酶抑制(IC50值)係指示如下： >500nM「+」；100-500nM「++」；20-100nM「+++」；<20nM「++++」。

Claims (16)

  1. 一種式(I)化合物、或其醫藥上可接受之鹽 其中A係CH或N；B係CH或N；D係CH或N；E係CH或N；R1係-CN或基團-C(O)-VR2；V係選自由-O-、-(CH2)-及-NH-所組成之群；R2係氫或視情況經一或多個選自由鹵素、OR3及-NR3R7所組成之群之取代基取代的-(C1-C6)烷基；R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基；R4係選自-CF3及-CHF2，R5係選自下列之基團 j係0或1至4之整數；y係0或1至4之整數；L及T獨立地為在任何自由位置處帶有-X-基團的4至8員雜環烷基環；X係選自-O-、-S-、-S(O2)-及-NR6；W係選自由下列所組成之群：-N(R3)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)N(R3)-、-N(R3)C(O)N(R3)-、-C(O)N(R3)-、-NR3C(O)-、-SO2-、-SO2N(R3)-、-NR3S(O2)-、-S-、-C(O)O-、-OC(O)-、視情況經取代的(C1-C6)伸烷基、視情況經取代的(C3-C6)伸環烷基及視情況經取代的(C4-C7)伸雜環烷基；G係氫或係選自由下列所組成之群：鹵素、-CN、-N(R3)(R7)、-OR3、-OC(O)OR3、-OC(O)NR3R7、-N(R3)C(N)N(R3)(R7)、-N(R3)C(O)N(R3)(R7)、-C(O)N(R3)(R7)、-N(R3)C(O)R7、-S(O2)R3、-S(O2)N(R3)(R7)、-N(R3)S(O2)(R7)、-SR3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、視情況經取代的(C1-C6)烷基、視情況經取代的(C3-C6)環烷基及視情 況經單或二取代的(C4-C7)雜環烷基；Ra係氫或係選自由-OH、-NH2及視情況經取代的(C1-C6)烷基所組成之群；R6係氫或係選自由-S(O2)R7、-CO2R7、-CONR3R7、-SO2NR3R7及視情況經取代的(C1-C6)烷基所組成之群；R7係氫或係視情況經取代的(C1-C6)烷基；其中，除非另外明確說明，否則視情況經取代意指視情況經一或多個選自由下列所組成之群之取代基取代：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)羥烷基、-OH、-NH2、鹵素、-CF3及-OCF3；-NR3R7及其醫藥上可接受之鹽，其限制條件為當y係1至4之整數、W係-O-及j係0時，則G不為氫或視情況經一或多個(C1-C6)烷氧基取代的(C1-C6)烷基；當y係1至4之整數、W係-N(R3)-、R3係氫或(C1-C6)烷基及j係0時，則G不為氫或(C1-C6)烷基；當y係0、W係-C(O)N(R3)-、R3係氫或(C1-C6)烷基及j係0時，則G不為H或視情況經-NR3R7取代之(C1-C6)烷基，其中R3及R7獨立地為H或(C1-C6)烷基；當y係0、W係-S(O2)-及j係0時，則G不為視情況經-OH取代之(C1-C6)烷基；當y係0、W係-S(O2)N(R3)-、R3係H及j係0時，則G不為氫；當y係0、W係-S(O2)N(R3)-、R3係H或(C1-C4)烷基及j係0時，則G不為氫或(C1-C6)烷基。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R5係以下基團 其中W係選自由下列所組成之群：-C(O)-、-OC(O)N(R3)-、-N(R3)C(O)N(R3)-、-NR3C(O)-、-NR3S(O2)-、-S-、-C(O)O-、-OC(O)-、視情況經取代的(C1-C6)伸烷基、視情況經取代的(C3-C6)伸環烷基及視情況經取代的(C4-C7)伸雜環烷基。
  3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R5係以下基團 其中y係2，W係-NR3S(O2)-，R3係氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基，j係1及G係氫。
  4. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R5係以下基團 其中y係2或3，W係-S-，j係0及G係視情況經取代的(C1-C6)烷基。
  5. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R5係以下基團 其中y係2或3，W係-SO2-，j係0及G係視情況經取代的(C1-C6)烷基。
  6. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R5係以下基團 其中y係2或3，W係-NR3C(O)-，R3係氫或視情況經取代的(C1-C6) 烷基，j係1及G係氫。
  7. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R4係選自-CF3及-CHF2。
  8. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R1係-CN或基團-C(O)-VR2；V係-O-；R2係視情況經一或多個選自由鹵素、OR3及-NR3R7所組成之群之取代基取代的-(C1-C6)烷基。
  9. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中，R5係選自下列之基團 其中Ra係氫或係選自由-OH、-NH2及視情況經取代之(C1-C6)烷基所組成之群；L及T獨立地為在任何自由位置處帶有-X-基團的4至8員雜環烷基環；X係選自-O-、-S-、-S(O2)-及-NR6；R6係氫或係選自由-SO2R7、-CO2R7、-CONR3R7、-SO2NR3R7及視情況經取代的(C1-C6)烷基所組成之群；R3及R7獨立地為氫或視情況經取代的(C1-C6)烷基。
  10. 如申請專利範圍第1項之化合物，其係式(I)”之化合物，其中碳(1)的絕對組態係如下文所示：
  11. 如申請專利範圍第1項之化合物，其係呈醫藥上可接受之鹽的形式。
  12. 一種醫藥組成物，其包含申請專利範圍第1至11項中任一項之化合物及醫藥上可接受之載劑或賦形劑。
  13. 如申請專利範圍第11項之醫藥組成物，其適於口服給藥或經肺部途徑給藥。
  14. 如申請專利範圍第1至11項中任一項之化合物，其係用於治療其中涉及HNE之疾病或病症或用於製造用來治療其中涉及HNE之疾病或病症的藥劑。
  15. 如申請專利範圍第14項之用途的化合物，其中，該疾病或病症係慢性阻塞性肺病(COPD)、支氣管擴張症、慢性支氣管炎、肺纖維化、肺炎、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、肺氣腫、吸菸誘發的氣腫或囊性纖維變性。
  16. 如申請專利範圍第14項之用途的化合物，其中，該疾病或病症係哮喘、鼻炎、牛皮癬、異位性皮膚炎、非異位性皮膚炎、克隆氏症(Crohn's disease)、潰瘍性結腸炎、或大腸激躁症。
TW104118800A 2014-06-12 2015-06-10 新穎化合物 TW201625627A (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14172176 2014-06-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201625627A true TW201625627A (zh) 2016-07-16

Family

ID=50933039

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW104118800A TW201625627A (zh) 2014-06-12 2015-06-10 新穎化合物

Country Status (11)

Country Link
US (1) US9487528B2 (zh)
EP (1) EP3154980B1 (zh)
KR (1) KR20170012258A (zh)
CN (1) CN106459065A (zh)
AR (1) AR100794A1 (zh)
CA (1) CA2951743A1 (zh)
MA (1) MA39965A (zh)
MX (1) MX2016016381A (zh)
RU (1) RU2016148397A (zh)
TW (1) TW201625627A (zh)
WO (1) WO2015189362A1 (zh)

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU650953B2 (en) 1991-03-21 1994-07-07 Novartis Ag Inhaler
GB0605469D0 (en) * 2006-03-17 2006-04-26 Argenta Discovery Ltd Multimers of heterocyclic compounds and their use
US8198288B2 (en) 2006-05-04 2012-06-12 Pulmagen Therapeutics (Inflammation) Limited Tetrahydropyrrolopyrimidinediones and their use in therapy
MX2008013996A (es) 2006-05-04 2009-01-14 Argenta Discovery Ltd Tetrahidropirrolopirimidindionas y su uso como inhibidores de elastasa de neutrofilo humano.
GB201004179D0 (en) 2010-03-12 2010-04-28 Pulmagen Therapeutics Inflamma Enzyme inhibitors
GB201004178D0 (en) 2010-03-12 2010-04-28 Pulmagen Therapeutics Inflamma Enzyme inhibitors
AR087841A1 (es) 2011-09-14 2014-04-23 Chiesi Farma Spa Derivados de tetrahidrotriazolopirimidina
IN2015DN00202A (zh) 2012-07-12 2015-06-12 Chiesi Farma Spa
CN104870449B (zh) 2012-12-18 2018-11-06 奇斯药制品公司 化合物
RU2016123379A (ru) 2013-12-16 2017-12-19 КЬЕЗИ ФАРМАЧЕУТИЧИ С.п.А. Тетрагидротриазолопиримидиновые соединения в качестве ингибиторов нейтрофильной эластазы человека

Also Published As

Publication number Publication date
CA2951743A1 (en) 2015-12-17
US9487528B2 (en) 2016-11-08
EP3154980B1 (en) 2021-08-04
KR20170012258A (ko) 2017-02-02
WO2015189362A1 (en) 2015-12-17
CN106459065A (zh) 2017-02-22
AR100794A1 (es) 2016-11-02
MX2016016381A (es) 2017-05-01
MA39965A (fr) 2021-04-28
RU2016148397A (ru) 2018-07-18
US20150353561A1 (en) 2015-12-10
EP3154980A1 (en) 2017-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI568735B (zh) 新穎化合物
DK2935274T3 (en) 3-OXO-2,3,5,8-TETRAHYDRO- [1,2,4] TRIAZOLO [4,3-A] PYRIMIDINE DERIVATIVES FOR THE TREATMENT OF AIR TRACT
US9573955B2 (en) Compounds
JP6990663B2 (ja) ヒト好中球エラスターゼ阻害剤としてのイミダゾロン化合物
KR20170095262A (ko) 신규 화합물
WO2017207433A1 (en) Hetetocyclic compounds for use in the treatment of a disease in which hne is implicated
US9487528B2 (en) Compounds
US9868740B2 (en) Pyrimidinone compounds which are HNE inhibitors