TW201618768A - 製造前藥及靶定治療性化合物之方法 - Google Patents
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Abstract
提供一種製造式1的化合物之方法：
□亦提供該方法中利用的各種化合物，與製造該等化合物的方法。亦提供一種具有式XO-CO-(CH2)nNH2之化合物，其中n為大於2的整數。額外地提供一種製造該化合物的方法。進一步提供一種製造一種生物活性化合物之前藥的方法。
Description
本申請案一般而言係有關於合成有機化合物之方法。更明確地，本發明係有關於製造前藥化合物之方法，舉例而言對抗癌症有用的前藥，以及更特別地，有關於製造相對無毒性的前藥之方法，無毒性的前藥係藉由肽酶，例如攝護腺專一性膜抗原(prostate specific membrane antigen)(PSMA)予以切割，以釋放細胞毒性治療性化合物，例如毒胡蘿蔔素(thapsigargin)或其他化合物(參見，舉例來說美國專利第7,468,354號)，於一些具體例中，該前藥包含毒胡蘿蔔素(thapsigargin)衍生物8-O-(12-胺基十二醯基)-8-O-去丁醯基毒胡蘿蔔素(8-O-(12-aminododecanoyl)-8-O-debutanoyl thapsigargin)(12ADT)鏈接至具有序列Asp-Glu*Glu*Glu*Glu之胜肽的天冬胺酸，其中標以*的至少一個鍵為γ羧基鍵聯，以及具有式1：
還有製造其等之某些中間物的方法。本發明亦有關於藉由此提出的方法所獲得的化合物及中間物。
美國專利第7,767,648號及第7,468,354號中業已提出以及描述一種胜肽前藥化合物，其識別為G-202，且包含毒胡蘿蔔素(thapsigargin)衍生物8-O-(12-胺基十二醯基)-8-O-去丁醯基毒胡蘿蔔素(8-O-(12-aminododecanoyl)-8-O-debutanoyl thapsigargin)(12ADT)，鏈接至具有序列Asp-Glu*Glu*Glu*Glu之胜肽的天冬胺酸，其中標以*的至少一個鍵為γ羧基鍵聯，以及具有式1的結構式：
。美國臨時專利申請案第61/714,662號及第61/693,273號中亦揭示含有G-202之可注射的癌症組成物和方法，以及使用G-202來治療肝細胞癌之組成物。此外，美國臨時專利申請案第61/791,909號教示各種製造G-202及其他化合物之方法。
生產G-202之方法主要的挑戰是由於中間物或最終活性藥學成分(API)之任一者缺乏結晶性。此點使得在合成的任一時間點都無法使用結晶作用來移除雜質。此限制
使得反應必須是高效率的且產生的雜質很少或是完全不產生雜質。此外，缺乏結晶性會增加交替的純化方法的量值，例如水萃取法、極性/非極性有機分配法、沈澱法、研製法，及有效率的層析純化法。美國臨時專利申請案第61/791,909號中揭示的此種方法提供了一種有效的合成策略來產生純的G-202。本發明提供了一種任擇的策略用於生產G-202及其他的前藥，該策略提供某些優點超越以上的申請案及專利案中描述的方法。
藉此提供一種製造式1的化合物之方法：
該方法包含
(a)使式2的化合物：
與X-OH於一種酸催化劑存在下反應，以生產式3a的化合物：
其中X為一取代基，其形成能從式5a的化合物切割的酯類
，以生產式6的化合物：
(b)使式3a的化合物與式4的化合物反應：
以生產式5a的化合物；
(c)從式5a的化合物移除X基團，以生產式6的化合物：
(d)使式6的化合物與式7的化合物反應：
以生產式8的化合物：
(e)使式8的化合物轉化成式1的化合物。
藉此亦提供一種製造式1的化合物之更特定的方法：
該方法包含(a)使式2的化合物：
與苄醇(BnOH)於一種酸催化劑存在下反應，以生產式3的化合物：
(b)使式3的化合物與式4的化合物反應：
以生產式5的化合物：
(c)從式5的化合物移除該苄基基團，以生產式6的化合物：
(d)使式6的化合物與式7的化合物反應：
以生產式8的化合物：
(e)使式8的化合物轉化成式1的化合物。
亦提供一種具有式3、式3a、式5、式5a或式6之化合物。
此外，提供一種製造式3a之化合物的方法。該方法包含使式2的化合物與X-OH，於一種酸催化劑存在下反
應。
於額外的具體例中，提供一種製造式5a之化合物的方法。該方法包含使式3a的化合物與式4的化合物進行反應。
額外地提供一種製造式6化合物的方法。該方法包含從式5a的化合物移除X基團。
亦提供一種具有式XO-CO-(CH2)nNH2之化合物，其中X為一取代基，其形成能從式5a的化合物切割的酯類，以及其中n為大於2的整數。
進一步提供一種製造一種具有式XO-CO-(CH2)nNH2之化合物的方法，如同剛剛描述的。該方法包含使X-OH與HOOC-(CH2)nNH2，於一種酸催化劑存在下反應。
於另外的具體例中，提供一種製造一種生物活性化合物之前藥的方法。該方法包含
(a)使一種具有式XO-CO-(CH2)nNH2之鏈接子化合物，與遮蔽、靶定部分(masking,targeting moiety)(MTM)反應，以形成該化合物X-鏈接子-MTM；
(b)從該X-鏈接子-MM化合物移除該X基團，以生產該化合物OH-鏈接子-MM；以及
(c)使一種生物活性化合物與該化合物OH-鏈接子-MM反應，以生產該生物活性化合物之前藥。
圖1顯示用於生產DBTg(7)以及苄基12-AD(3)的
程序。
圖2顯示用於生產鏈接子-胜肽AD(6)的程序。
圖3顯示使用7及6來生產G-202的程序。
當使用於本文中，單數形式"一(a)"、"一(an)"以及"該(the)"係打算也含括複數的形式，除非上下文顯然另有規定。此外，使用“或”係打算含括“及/或”，除非上下文顯然另有規定。
為了本說明書及附隨的請求項的目的，除非另外表明，否則要瞭解到，本說明書及請求項中使用來表達量、大小、維度、比例、形狀、調配物、參數、百分比、參數、數量(quantities)、特徵，以及其他數值的所有數字，在所有情況下係如同用術語「大約」予以修飾，即使該值、量或範圍中未明顯出現術語「大約」。
除非另外定義，否則本文中所使用的所有技術與科學術語具有被在本發明所屬之技藝具有通常技術者所普遍瞭解相同的意義。縱然可以使用與本文中所述的機器、材料與方法相似或均等的該等來實施或測試本發明，但是現在說明較佳的機器、材料與方法。本文中所提及的出版物係為了說明及揭示細胞株、程序、試劑及載體的目的而列舉，以及其等可以與本發明的各種具體例組合使用。於此的任何內容不應被理解為承認本發明無權先於因先前發明所作的此類揭示。
當使用於本文中，術語“G-201”係指8-O-(12-胺基十二醯基)-8-O-去丁醯基-毒胡蘿蔔素(8-O-(12-aminododecanoyl)-8-O-debutanoyl-thapsigargin))天冬胺酸-γ-麩胺酸-γ-麩胺酸-γ-麩胺酸-麩胺酸OH，其具有式1的化學結構。
G-202為一種毒胡蘿蔔素前藥，其含有一種偶合至遮蔽及靶定胜肽之毒胡蘿蔔素細胞毒性類似物，該胜肽抑制其之生物活性直到在腫瘤位置被蛋白酶切割為止。毒胡蘿蔔素自身為8-O-去丁醯基-毒胡蘿蔔素(DBTg)之化學修飾的一種天然產物。此毒胡蘿蔔素類似物(DBTg)係與12-胺基十二酸的羧酸偶合，12-胺基十二酸的羧酸已經偶合至遮蔽胜肽Asp-γ-Glu-γ-Glu-γ-GluGlu之N端末端處之Asp的β羧基，以生產PG-202，PG-202隨後進行去保護來產生前藥(12ADT)-Asp-γ-Glu-γ-Glu-γ-Glu-GluOH(G-202)。
G-202之化學名為(8-O-(12-胺基十二醯基)-8-O-去丁醯基-毒胡蘿蔔素)(8-O-(12-aminododecanoyl)-8-O-debutanoyl-thapsigargin)天冬胺酸-γ-麩胺酸-γ-麩胺酸-γ-麩胺酸-麩胺酸OH。其有時以縮寫方式稱為：(12ADT)Asp-γ-Glu-γ-Glu-γ-Glu-GluOH，其中12ADT表示毒胡蘿蔔素(thapsigargin)衍生物，以及Asp-γ-Glu-γ-Glu-γ-Glu-GluOH表示PSMA-可切割的遮蔽胜肽。G-202為一種分子量為1409.52之白色固體。
G-202係由所組成一種PSMA-選擇性5個胺基酸胜肽基質，其偶合至一種天然產物毒胡蘿蔔素高度細胞毒
性類似物。參見，舉例來說Denmeade等人，2003，以及美國專利第7,767,648號及第7,468,354號。毒胡蘿蔔素係由植物毒胡蘿蔔(Thapsia garganica)的種子單離，毒胡蘿蔔像雜草一樣生長遍及地中海盆地。參見，舉例來說Rasmussen等人，1978。毒胡蘿蔔素作用係透過強有力地抑制一種關鍵性的細胞內蛋白質，肌質/內質網鈣三磷酸腺苷酶(SERCA)泵，其之正常功能是維持所有細胞類型中細胞內鈣的恆定性。SERCA泵之合適的功能對於所有細胞類型之生存力是必須的。因而，毒胡蘿蔔素之SERCA泵抑制作用會導致測試的所有細胞類型，正常及惡性的細胞二者死亡。參見，舉例來說Thastrup等人，1990；Denmeade，2005。
根據前述，於此所描述的G-202及其他的毒胡蘿蔔素前藥被設計成要將毒胡蘿蔔素靶定遞送至所欲的靶定位址，舉例而言，各種癌症的腫瘤，以獨特的作用機轉用於PSMA之前藥的選擇性活化，舉例而言攝護腺癌處的攝護腺癌上皮細胞以及其他的癌症細胞類型中的腫瘤內皮細胞所生產的PSMA，舉例而言肝細胞癌或任何其他生產PSMA的癌症。
不願被任何特定的理論所束縛，據信PSMA為一種細胞外羧肽酶，其從G-202前藥連續地切割去除酸性胺基酸，最後釋放一種毒胡蘿蔔素細胞毒性類似物。參見，舉例來說Pinto等人，1996：Carter等人，1996；Mhaka等人，2004。此種高度親脂性類似物，稱為12ADT-Asp，一從其之水溶性胜肽載劑釋放，便快速地分配至周圍的細胞膜。
參見，舉例來說Jakobsen等人，2001。該類似物繼而與SERCA泵結合，產生細胞內鈣的持續上升，其導致細胞凋亡之活化(參見，舉例來說圖1；Denmeade等人，2003；Singh等人，2005)。因為12ADT-Asp類似物係由細胞外釋放至腫瘤微環境之內，所以不必要每個細胞產生PSMA而因前藥活化被殺死。實質的旁觀者效應係由活性藥物釋放至腫瘤微環境之內而完成。
用G-202進行之症狀出現前的研究業已顯示PSMA於活體外選擇性活化該前藥，以及對於表現PSMA之腫瘤細胞vs.未表現PSMA之腫瘤細胞更毒~60倍。PSMA於活體內以對宿主動物最小毒性的劑量，對於一組攝護腺癌、乳癌、腎臟癌、肝癌，以及膀胱癌，表現出顯著的生長抑制。參見，舉例來說Denmeade,S.等人，2012。
美國臨時專利申請案第61/791,909號描述一種生產G-202的方法，其涉及從毒胡蘿蔔素生產8-O-去丁醯基-毒胡蘿蔔素(DBTg)，及鏈接子Boc-胺基十二酸酯(AD-Boc)，鍵聯DBTg與AD-Boc來製造Boc-12-胺基十二酸酯-毒胡蘿蔔素(Boc-12ADT)，移除Boc基團以形成12-ADT，以及鍵聯12-ADT與胜肽Boc-Asp-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-OtBu以形成PG-202，其繼而轉化成G-202。本發明提供該方案之修飾，以更容易生產G-202且產量更佳。
藉此提供一種製造式1的化合物之方法：
該方法包含(a)使式2的化合物：
與X-OH於一種酸催化劑存在下反應，以生產式3a的化合物：
其中X為一取代基，其形成能從式5a的化合物切割的酯類：
5a
以生產式6的化合物：
(b)使式3a的化合物與式4的化合物反應：
以生產式5a的化合物；(c)從式5a的化合物移除X基團，以生產式6的化合物：
(d)使式6的化合物與式7的化合物反應：
以生產式8的化合物：
(e)使式8的化合物轉化成式1的化合物。
於以上的步驟(a)中，X-OH可以為能夠製造容易地從式5a的化合物切割的酯類之任何醇類。熟悉此藝者毋須過度實驗，能容易地識別此等醇類。舉例而言，簡單的烷基酯類不適合，但是經取代的苄酯類、烯丙酯類，以及芳基酯類通常是有效的。於一些具體例中，X為苄醇。
此外，許多的酸催化劑可用於反應的步驟(a)中，包括但不限於，HCl、HBr、甲苯磺酸(TsOH)、三氟乙酸(TFA)及磷酸。雖然以上的步驟(a)顯現為苄基12-AD之甲磺酸鹽類，但是熟悉此藝者會理解可以使用許多其他的鹽類，以及HCl。該等具體例不排除此等方法。
熟悉此藝者毋須過度實驗，可以判定以上方法的
步驟(b)中能使用的反應物。於各種具體例中，步驟(b)係使用乙基-(二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDC)、二異丙基乙胺(iPr2NEt)、羥苯并三唑(HOBt)，以及二甲基甲醯胺(DMF)來執行。
同樣地，熟悉此藝者會理解於步驟(c)中移除該X基團之各種方法。於一些具體例中，步驟(c)係使用鈀碳(Pd/C)催化劑及三乙基矽烷來執行。其他的有效移除該X基團的條件包括鈀催化劑，於供選擇的氫來源存在下，包括但不限於氫氣、甲酸鈉、甲酸，或環己烯。
步驟(d)的反應亦可以使用許多毋須過度實驗能識別出的條件及方法來執行。於一些具體例中，步驟(d)係使用4-二甲基胺吡啶(4-DMAP)及二異丙基碳化二亞胺(DIC)配於二氯甲烷來執行。於其他的具體例中，可以使用供選擇的碳二亞胺試劑(舉例而言，乙基二甲基胺基丙基碳化二亞胺(ethyldimethylaminopropylcarbodiimide)(EDC))、混合酸酐方法(舉例而言，三甲基乙醯氯/鹼(pivalyl chloride/base))，以及磷活化劑(舉例而言，丙基磷酸酐T3P)，如本技藝已知的。
於此等方法之各種具體例中，步驟(e)係使用三乙基矽烷及三氟乙酸配於二氯甲烷來執行。供選擇的酸條件，例如鹽酸配於二噁烷也是有效的。
於此等方法之一些具體例中，式7的化合物之製造係藉由使式9的化合物：
與配於醇類的一種鹼進行反應。於此有用的鹼-醇組合之非限制性實例為三乙基胺及乙醇、甲醇鈉，以及叔丁醇(t-butoxide)和醇類以及嗎福啉。於一些具體例中，該鹼及醇為配於乙醇之乙氧鈉。以任何醇-鹼組合實行此反應有用的條件可以毋須過度實驗而作判定。於鹼及醇為配於乙醇之乙氧鈉的情況中，實行該反應有用的溫度為-15±5℃的溫度。
一旦式1的化合物係經由以上描述的方法予以合成，該化合物可以進一步用本技藝已知的任何手段予以純化。於一些具體例中，式1的化合物係使用逆相層析法，舉例而言如同美國臨時專利申請案第61/791,909號及PCT/US2014/029674中所描述的。
藉此亦提供一種製造式1的化合物之更特定的方法：
，1
該方法包含(a)使式2的化合物：
與苄醇(BnOH)於一種酸催化劑存在下反應，以生產式3的化合物(圖1下方的反應)：
(b)使式3的化合物與式4的化合物反應：
以生產式5的化合物(圖2上方的反應)：
(c)從式5的化合物移除該苄基基團，以生產該式6的化合物(圖1下方的反應)：
(d)使式6的化合物與式7的化合物反應：
以生產式8的化合物(圖3上方的反應)：
(e)使式8的化合物轉化成式1的化合物(圖3下方的反應)。用於此轉化步驟(e)之方法係描述於PCT/US2014/029674中。
以上關於X部分之完全的討論亦適用於X為苄基之此等具體例中。
本發明亦提供了一種具有式3a、式5、式5a或式6之化合物。該等化合物係有用於，舉例而言製造能由肽酶，例如PSMA切割的各種前藥。
額外地提供一種製造式3a之化合物的方法。該方法包含使式2的化合物與X-OH，於一種酸催化劑存在下反應。如同以上先前討論的，X-OH可以為任何醇類，其中X形成能從式5a的化合物切割的酯類。如同先前討論的，此等酯類之非限制性實例為經取代的苄酯類、烯丙酯類，以及芳基酯類。於一些具體例中，X-OH為苄醇。
進一步提供一種製造式5a之化合物的方法。該方法包含使式3a的化合物與式4的化合物進行反應。於各種具體例中，X為經取代的苄基、烯丙基基團或是芳基基團。於額外的具體例中，X為苄基。於一些具體例中，執行此方法係使用乙基-(二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDC)、二異丙基乙胺(iPr2NEt)、羥苯并三唑(HOBt)，以及二甲基甲醯胺(DMF)。
本發明亦提供一種製造式6之化合物的方法。該方法包含從式5a的化合物移除X基團。於各種具體例中，X為經取代的苄基、烯丙基基團或是芳基基團。於額外的具
體例中，X為苄基。於額外的具體例中，此方法係使用鈀碳(Pd/C)催化劑及三乙基矽烷來執行。
亦提供一種具有式XO-CO-(CH2)nNH2之化合物，其中X為一個取代基，其形成能從式5a的化合物切割的酯類，以及其中n為大於2的整數，舉例而言，3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或是任何更高的數字。於一些具體例中，X為經取代的苄基、烯丙基基團或芳基基團。於額外的具體例中，X為苄基。於另外的具體例中，n=11。於更特定的具體例中，X為苄基且n=11，如同於式3的化合物中。亦提供了製造此化合物之方法。於一些具體例中，該方法包含使X-OH(舉例而言，苄醇)以及HOOC--(CH2)nNH2，於一種酸催化劑的存在下進行反應。
本發明亦提供一種製造一種生物活性化合物之前藥的方法。該方法包含(a)使如上描述之該具有式XO-CO-(CH2)nNH2之鏈接子化合物，與遮蔽部分(masking moiety)(MM)反應，以形成該化合物X-鏈接子-MM；(b)從該X-鏈接子-MM化合物移除該X基團，以生產該化合物OH-鏈接子-MM；以及(c)使一種生物活性化合物與該化合物OH-鏈接子-MM反應，以生產該生物活性化合物之前藥。
類似於以上描述的方法及化合物中的數者，X為一取代基，其形成能從鏈接子切割的酯類，舉例而言經取代的苄基、烯丙基基團或芳基基團。於一些具體例中，X
為苄基；於其他的具體例中，n=11；於額外的具體例中，X為苄基且n=11。
此方法對於製造前藥是特別有用的，舉例而言當MM為一種胜肽及該生物活性化合物為一種胜肽時，舉例而言毒胡蘿蔔素或美國專利第7,468,354號中所描述的另一種化合物。於一些具體例中，該前藥易被蛋白酶切割，舉例而言，攝護腺專一性膜抗原(PSMA)，以“去遮蔽(unmask)”細胞毒素。於此方法之各種具體例中，該鏈接子化合物為式3的化合物。於另外的具體例中，MM為式4的化合物。於額外的具體例中，該生物活性化合物係於步驟(c)之前予以修飾。
G-202之此合成途徑超越美國臨時專利申請案第61/791,909號中所描述的途徑之一些優點，為(a)免除建構及單離相對不穩定的中間物12-ADT；(b)更簡短且更有效率的合成鏈接子片段；以及(c)所有的中間物均為固體，其等能以高產量和純度予以單離。
下列實施例說明例示具體例。從考慮如此所揭示的說明書或是本發明之實施，請求項範疇之內的其他具體例對於熟悉此藝者會是明顯的。本說明書連同實施例僅僅打算視為示範，且本發明之範疇及精神係由實施例之後的請求項來表示。
將20g(0.0929mol，1.0eq.)的12-胺基十二酸
(12-AD-2)接著100mL的苄醇，裝入一種N2沖洗的3N 500mL圓底燒瓶(RBF)內，以及在攪拌中形成濃稠的懸浮液。經由添加漏斗在大約10分鐘的期間添加6.63mL(0.1022mol，1.1eq.)的甲磺酸(MSA)。放熱反應使溫度從22℃來到至34℃。混合物加熱至大約50℃總共3小時，以及冷卻至室溫。在大約30℃，產物開始從溶液中沈澱。溶液攪拌大約10分鐘，以讓產物沈澱直到形成濃稠的漿體。經由添加漏斗在大約20分鐘的期間添加丙酮(200mL)同時攪拌。生成的漿體係於室溫下攪拌歷時30分鐘，以及進一步冷卻至<5℃歷時額外一小時，並且過濾以單離產物。以2X 100mL冷丙酮來清洗過濾器上的產物，以及轉移至一配衡瓶子。於50℃真空烘箱內於真空中乾燥產物過夜，以提供35.14g的粗產物、94.2%回收率、88.6%面積HPLC，以及包含大約11面積%的苄醇。
將33.0g的粗製鹽類接著165mL(5mL/g)的乙醇裝入1L燒瓶內。生成的漿體加熱至大約40℃，以及於40-44℃形成澄清無色的溶液。關掉熱度，開始將溶液冷卻至室溫。在大約35-38℃，逐漸產生非常濃稠的漿體。經由添加漏斗在大約20分鐘的期間，於33℃至23℃添加330mL(10mL/g)的丙酮。漿體係於室溫下攪拌歷時30分鐘，以及用乾冰水浴冷卻至<5℃。於<5℃歷時一小時之後，經由過濾來單離產物。以75mL的冷丙酮清洗漏斗上的產物三次，於過濾器上乾燥短時間，以及轉移至一配衡瓶子。於50℃
的真空烘箱內於真空中乾燥產物，以提供28.33的產物為白色結晶固體100面積%HPLC，85.8%回收率，80.8%的整體產量。
將12.0g(0.0117mol，1.0eq.)的G202胜肽(4)、4.91g(0.0122mol，1.05eq.)12-AD Bn酯甲磺酸鹽(3)、3.92g(0.0256mol，2.2eq.)HOBt，以及120mL(10mL/g)，裝入一種氮沖洗的3N 250mL RBF內。開啟攪拌器，以及添加5.1mL(0.0291mol，2.5eq.)的iPr2NEt(Hunigs鹼(Hunigs base))伴隨持續的歷時大約10分鐘，直到形成黃色的溶液。添加2.46g(0.0128mol，1.1eq.)EDC-HCl，以及溶液加熱至大約50℃歷時大約2小時。根據HPLC剩餘0.15%面積胜肽時，反應完成。於總共2小時45分鐘之後，關掉熱度，並且將溶液冷卻至大約25℃，以及轉移至1L分液漏斗。用400mL的甲基三級丁基醚(MTBE)來稀釋反應，以及用60mL的0.5M HCl、2 X 60mL的飽和NaHCO3及1 X 60mL的鹽水，來清洗有機物三次。有機層於Na2SO4上乾燥，並且過濾。乾燥的鹽類係用MTBE來沖洗且以旋轉式蒸發器來濃縮濾液成膠狀固體。添加MTBE(200mL)，且於旋轉式蒸發器上以40℃攪拌歷時15-20分鐘以形成溶液。將溶液濃縮成半固體，以及產物於大約40℃真空烘箱內乾燥歷時二天，以提供14.71g的產物、97.9面積%的HPLC(G202BN3.M)，95.8%的回收率。
將12.0g(0.00911mol，1.0eq.)的苄酯偶合的胜肽(5)、0.969g(0.000273mol，0.03eq.)鈀碳(5%，60%濕氣)，以及120mL的異丙醇裝入一種氮沖洗的3N 250mL RBF內。開啟攪拌器，以及混合物係於室溫下攪拌歷時大約15分鐘。經由添加漏斗在大約20分鐘的期間，於19-25℃添加三乙基矽烷4.38mL(0.0273mol，3.0eq.)，於添加的整個期間均有氣體散展。TES添加完成一小時之後，經由HPLC來檢查反應的完成，以及沒有偵測到起始材料。通過紙過濾反應混合物，以移除大部分的催化劑/碳，然後第二次通過0.45微型過濾器來移除細料。澄清的溶液係以旋轉式蒸發器來濃縮成黏的澄清油。執行100mL ACN蒸餾來移除殘餘的IPA。產物係以旋轉式蒸發器伴隨攪拌、於大約40℃溶解於82mL ACN/6.8mL H2O中，以及轉移至250mL分液漏斗。用26.2mL ACN/5.2mL H2O(總計：108.2mL ACN/12mL H2O)來沖洗燒瓶向分液漏斗。以3 X 27mL庚烷來清洗水層，以及使水層濃縮成油的/固體。執行ACN蒸餾(distilations)(2 X 60mL)來移除殘餘的水，接著2 X 60mL的二氯甲烷(DCM)，以形成光滑的泡沫/固體。產物係於旋轉式蒸發器於高真空中、在大約40℃下乾燥大約45分鐘，且用刮勺予以打碎。產物進一步於大約50℃的真空烘箱內乾燥過夜，以提供11.37g的產物、97.6面積% HPLC(G202BN3.M)，101%回收率。
將12.0g(0.0098mol，1.02eq.)去苄化偶合的胜
肽(6)、5.56g(0.0096mol，1.0eq.)的DBTg(7)、1.4g(0.0115mol，1.2eq.)的4-DMAP以及300mL的DCM裝入一種氮沖洗的3N RBF內。開啟攪拌器，以及混合物攪拌歷時大約5-10分鐘直到形成澄清黃色的溶液。於室溫下，一次添加全部的2.75g(0.0144mol，1.5eq.)的EDC-HCl。沒有放熱反應，以及，EDC-HCl快速地變成溶液。溶液於室溫下攪拌過夜，以及檢查完成與否。有剩餘大約0.2%的反應物。反應混合物係於旋轉式蒸發器來濃縮成泡沫來移除DCM。殘餘物係以旋轉式蒸發器、於大約35℃溶解於180mL MTBE/27mL的0.5M HCl中，以及將二相混合物轉移至分液漏斗。強有力地攪拌混合物，以及讓層分離。讓層分離，以及用2 X 27mL的0.5M HCl、1 X 27mL的飽和NaHCO3及1 X 27mL的鹽水，來清洗有機物。有機物於Na2SO4上乾燥，並且過濾；乾燥的鹽類係用MTBE來清洗。溶液係以旋轉式蒸發器濃縮濾液成泡沫/油。殘餘物係以旋轉式蒸發器、於大約35℃溶解於120mL MTBE中，以及溶液濃縮成泡沫且產物放置於真空中大約30-40分鐘。用刮勺打碎泡沫，以及於大約45℃真空烘箱內以真空進一步乾燥過夜，以提供16.62g的產物、96.3面積% HPLC(G202BN3.M)，95.7%回收率(根據面積% HPLC的起始材料及產物)。
將10.0g(0.00559mol，1.1eq.)PG 202(8)接著73mL的DCM裝入一種N2沖洗的3N 250mL RBF內，以及開始攪拌。混合物攪拌歷時大約5-10分鐘直到形成黃色的溶液。
一次添加全部的三乙基矽烷(TES)4.48mL(0.0279mol，5eq.)，以及將溶液冷卻至<5℃。經由添加漏斗在大約15分鐘的期間，於<5℃下添加三氟乙酸39mL，以及溶液於<5℃下攪拌歷時30分鐘，然後加溫至室溫。溶液於室溫下攪拌歷時大約10小時(86.6%的產物以面積% HPLC計)，以及放置於冷凍器中過夜(88.8%產物以此時的面積% HPLC計)。使黃色的溶液濃縮來移除DCM及一些TFA。進行50mL DCM蒸餾二次俾以移除更多的TFA。將殘餘物溶解於90mL ACN/10mL H2O中，以及用2 X 10mL的庚烷來清洗水層。攪拌時，將1g的活性碳添加至水層，以及於室溫下攪拌深色的混合物歷時30分鐘。通過紙來過濾混合物，以移除大部分的碳，然後通過0.45微米過濾器來移除細料，產生澄清非常淺的黃色溶液。溶液係以旋轉式蒸發器濃縮以移除ACN/H2O；執行二次額外的50ml ACN蒸餾來移除大部分的水。最後，執行2 X 50mL MTBE蒸餾，以提供灰白色的泡沫/油之產物。產物係於大約40℃、真空中、於旋轉式蒸發器上乾燥大約30分鐘，此時一些材料為流動性固體。用刮勺打碎產物，以及主體於45℃真空烘箱內乾燥二天，以提供8.40g的粗製G202，88.7面積% HPLC G202BN3.M)98.7%回收率。此方法之產物為70.7重量%(T618)，以及87.6面積%。
Carter等人，1996，Proc. Natl. Acad. Sci.，USA 93:749-753。
Denmeade等人，2003，J. Natl. Cancer Inst. 9: 990-1000。
Denmeade，2005，Cancer Biol. Ther. 4:14-22。
Denmeade等人，2012，Sci. Transl. Med. 4:1-12。
Jakobsen等人，2001，J. Med. Chem. 44:4696-4703。
Mhaka等人，2004，Cancer Biol Ther. 3:551-558。
Pinto等人，1996，Clin. Cancer Res. 2:1445-1451。
Rasmussen等人，1978，Acta Pharm. Suec. 15:133-140。
Singh等人，2005，J. Med. Chem. 48:3005-3014。
Thastrup等人，1990，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2466-2470。
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美國專利第7,468,354號。
美國臨時專利申請案第61/714,662號。
美國臨時專利申請案第61/693,273號。
美國臨時專利申請案第61/791,909號。
PCT申請案案號PCT/US2014/029674。
鑑於以上，將理解已實現本發明的幾個目的及達到其他的優點。
因以上的方法和組成物可以作各種變化而不背離本發明的範圍，所以以上的說明包含的及附圖中顯示的所有內容，應該被解讀為例示性的且非限制的意義。
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者之主張，且不承認任何參考文獻會構成先前技藝。申請人保留挑戰引用的參考文獻之正確性和恰當性之權利。
Claims (36)
- 一種製造式1的化合物之方法：
- 如請求項1之方法，其中該式7的化合物之製造係藉由使式9的化合物：
- 如請求項2之方法，其中該配於醇類的鹼類為配於乙醇之乙氧鈉，以及該反應係於-15±5℃的溫度下實行。
- 如請求項1-3中任一項之方法，其中步驟(b)係使用乙基-(二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDC)、二異丙基乙胺(iPr2NEt)、羥苯并三唑(HOBt)及二甲基甲醯胺(DMF)來執行。
- 如請求項1-4中任一項之方法，其中步驟(c)係使用鈀碳(Pd/C)催化劑及三乙基矽烷來執行。
- 如請求項1-5中任一項之方法，其中步驟(d)係使用4-二甲基胺吡啶(4-DMAP)及二異丙基碳化二亞胺(DIC)配於二氯甲烷來執行。
- 如請求項1-6中任一項之方法，其中步驟(e)係使用三乙基矽烷及三氟乙酸配於二氯甲烷來執行。
- 如請求項1-7中任一項之方法，其中該式1的化合物係使用逆相層析法予以進一步純化。
- 一種製造式1的化合物之方法：
- 如請求項9之方法，其中步驟(b)係使用乙基-(二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDC)、二異丙基乙胺(iPr2NEt)、羥苯并三唑(HOBt)及二甲基甲醯胺(DMF)來執行。
- 如請求項9或10之方法，其中步驟(c)係使用鈀碳(Pd/C)催化劑及三乙基矽烷來執行。
- 一種具有式3、式3a、式5、式5a或式6的化合物。
- 一種製造式3a的化合物之方法，該方法包含使式2的化合物與X-OH，於酸催化劑存在下反應。
- 如請求項13之方法，其中該X-OH為苄醇(BnOH)。
- 一種製造式5a的化合物之方法，該方法包含使式3a的化 合物與式4的化合物反應。
- 如請求項15之方法，其中X為苄基。
- 如請求項15或16之方法，其中該方法係使用乙基-(二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDC)、二異丙基乙胺(iPr2NEt)、羥苯并三唑(HOBt)及二甲基甲醯胺(DMF)來執行。
- 一種製造式6的化合物之方法，該方法包含從式5a的化合物移除X基團。
- 如請求項18之方法，其中X為苄基。
- 如請求項18或19之方法，其中該方法係使用鈀碳(Pd/C)催化劑及三乙基矽烷來執行。
- 一種具有式XO-CO-(CH2)nNH2之化合物，其中X為一取代基，其形成能從式5a的化合物切割的酯類，
- 如請求項21之方法，其中X為苄基。
- 如請求項21或22之方法，其中n=11。
- 一種製造如請求項21之化合物的方法，該方法包含使X-OH與HOCO--(CH2)nNH2，於酸催化劑存在下反應。
- 如請求項24之方法，其中X為苄基。
- 如請求項24或25之方法，其中n=11。
- 一種製造一生物活性化合物之前藥的方法，該方法包含(a)使請求項11之化合物，與一遮蔽部分(masking moiety)(MM)反應，以形成化合物X-鏈接子-MM；(b)從該X-鏈接子-MM化合物移除X基團，以生產化合物OH-鏈接子-MM；以及(c)使一生物活性化合物與該化合物OH-鏈接子-MM反應，以生產該生物活性化合物之前藥。
- 如請求項27之方法，其中該MM為胜肽。
- 如請求項27或28之方法，其中該MM可藉由攝護腺專一性膜抗原(prostate specific membrane antigen)予以切割。
- 如請求項27-29中任一項之方法，其中X為苄基。
- 如請求項27-30中任一項之方法，其中n=11。
- 如請求項27-29中任一項之方法，其中該鏈接子化合物為式3的化合物。
- 如請求項27-32中任一項之方法，其中該MM為式4的化合物。
- 如請求項27-33中任一項之方法，其中該化合物為毒胡蘿蔔素(thapsigargin)。
- 如請求項27-34中任一項之方法，其中該生物活性化合物係於步驟(c)之前予以修飾。
- 如請求項27-35中任一項之方法，其中該鏈接子化合物為該式3的化合物；該MM為該式4的化合物；以及 該生物活性化合物為毒胡蘿蔔素。
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