TW201431568A

TW201431568A - 包含雷格拉非尼（ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ）的局部眼科醫藥組成物

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Publication number: TW201431568A
Application number: TW102147361A
Authority: TW
Inventors: Michael Boettger; Degenfeld Georges Von; Julia Freundlieb; Claudia Hirth-Dietrich; Joerg Keldenich; Juergen Klar; Uwe Muenster; Andreas Ohm; Annett Richter; Bernd Riedl
Original assignee: Bayer Healthcare Llc
Priority date: 2012-12-21
Filing date: 2013-12-20
Publication date: 2014-08-16
Also published as: JP2016507505A; US20150328145A1; DOP2015000155A; EA201500669A1; CL2015001701A1; MX2015007488A; AP2015008493A0; IL238791A0; AU2013364004A1; AR094104A1; WO2014100797A1; MA38215A1; CR20150327A; PH12015501407A1; ZA201505196B; CA2895804A1; UY35183A; SG11201503838WA; TN2015000280A1; ECSP15026386A

Abstract

本發明係關於包含雷格拉非尼(Regorafenib)的局部眼科醫藥組成物，水合物，溶劑合物或製藥上可接受的鹽或其多晶型物，但無疏水性二氧化矽，及其製備方法及其於治療眼科疾病之用途。

Description

包含雷格拉非尼(REGORAFENIB)的局部眼科醫藥組成物

本發明係關於包含雷格拉非尼(Regorafenib)的局部眼科醫藥組成物，水合物，溶劑合物或製藥上可接受的鹽或其多晶型物，但不含疏水性二氧化矽，及其製備方法及其於治療眼科疾病之用途。

大部份的藥物無法藉由眼藥水或眼睛附近的長效藥傳輸至脈絡膜。有些藥物是藉由注射至眼睛各腔室而傳輸至視網膜並因而傳輸至脈絡膜。以簡單可使用之局部眼睛配方如眼藥水來治療眼球後部疾病(眼球後部)仍是一個未解決的問題。

雷格拉非尼，其為4{4-[3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-脲基]-3-氟苯氧基}-吡啶-2-羧酸甲基醯胺，式(I)化合物為一有效之抗癌及抗血管生成劑，其具有多種活性，包括對於VEGFR，PDGFR，raf，p38，及/或flt-3激酶信號分子之抑制活性，且其可用來治療多種疾病及狀況，如過度增生性疾病，如癌症，腫瘤，淋巴瘤，肉瘤及白血病，如說明於WO 2005/009961。再者，式(I)化合物之鹽，如其氫氯酸鹽，甲磺酸鹽及苯磺酸鹽係於WO 05/009961中提及。式(I)化合物之單水合物係於WO 08/043446中提及。

與年齡相關的黃斑部病變(AMD)是導致老年人口失明的首要原因，且被認定為乾性及濕性AMD(Expert Opin.Ther.Patents(2010)，20(1)，103-11)。該乾性，或非滲出性形式涉及視網膜色素上皮(RPE)萎縮性及增生性變化兩者。該乾性形式之特徵為黃斑部玻璃膜疣，其為包含死細胞及代謝產物之染色區域，而扭曲視網膜並最終導致急性視力喪失。罹患非滲出性AMD(乾性型式)之患者可能發展為濕性，或滲出性或新生血管性，AMD，其中病理性脈絡膜新生血管膜(CNVM)在視網膜下發展，洩漏液體及血液，且如果不及時治療，最終，在相當短的時間內會造成中心性致盲盤狀瘢痕。脈絡膜新生血管形成(CNV)，該來自脈絡膜毛細血管網所生成之新血管跨過Bruch’s膜/RPE界面而進入視網膜神經，導致視網膜剝離，視網膜下及視網膜內水腫，及疤痕。

要進入脈絡膜，其係介於鞏膜及視網膜之間，除了經由血液是很困難。眼睛是由三個主要的解剖結構隔室，前房，後房，及玻璃體腔組成，其彼此具有有限的生理性相互作用。該視網膜係位於玻璃體腔內的背面，且係由白色堅韌不可滲透之屬眼球壁之鞏膜從外部保護。脈絡膜血流為攜帶物質至脈絡膜的常用方法且需要，如經口或經由靜脈給藥。大部份的藥物無法藉由眼藥水或眼睛附近的長效藥傳輸至脈絡膜。有些藥物是藉由注射至眼睛各腔室而傳輸至視網膜並因而傳輸至脈絡膜。以簡單可使用之局部眼睛配方如眼藥水來治療眼球後部疾病(眼球後部)仍是一個未解決的問題。

VEGF(血管內皮生長因子)是正常血管發展以及腫瘤中血管發展及其他組織進行異常血管新生時的關鍵生長因子且看起來在CNV形成之發病機制中扮演重要角色(Expert Opin.Ther.Patents(2010)，20(1)，103-118，Expert Opin.Ther.Patents(2009)，18(10)，1573-1580，J.Clin.Invest.(2010)，120(9)，3033-3041，J.Cell.Physiol.(2008)，216，29-37，New Engl.J.Med.2006，355，1474-1485，WO 2010/127029，WO 2007/064752)。阻斷VEGF作用之藥物係被說明來治療濕性AMD，例如適配子，如倍加他尼(New Engl.J.Med.2004，351，2805-2816)，或VEGF抗體如蘭尼單抗(New Engl.J.Med.2006，355，1419-1431)或貝伐單抗(Ophthalmology，2006，113，363-372)。然而，該藥物必須藉由注射至眼睛內之玻璃體中給藥。索拉非尼，VEGF抑制劑而且，係說明來藉由口服給藥治療CNV(Clinical and Experimental Ophthalmology，2010，38，718-726)。帕唑帕尼，VEGF抑制劑而且，係說明來藉由局部給藥以包含帕唑帕尼水溶液之眼藥水來治療AMD(WO 2011/009016)。WO 2006/133411係說明化合物藉由局部給藥以脂質體製劑而治療CNV。WO 2007/076358，US2006257487係說明局部給藥用之水性眼科製劑。WO 2008/27341係說明局部給藥至眼睛之乳化液。

通常局部眼藥水不會傳遞治療濃度之藥物分子至存在於眼球後部之目標組織以治療眼球後部疾病是一般的專業知識(U.B.Kompella及H.F.Edelhauser，“Drug Product Development for the Back of the Eye”，aapspress Springer，2011，第449頁)。

儘管於技藝中說明的進度仍然存在有改進治療眼科病症如AMD之藥物的需要。特別的，仍需要局部眼科醫藥組成物如眼藥水，其可容易給藥因此可提高患者的服從性。再者，對於化合物例如低溶解度者仍然需要適用之局部眼科醫藥組成物，因其不能調製成簡單的溶液，乳化液，呈絡合物或於脂質體製劑中。該局部眼科醫藥組成物必須於眼睛提供一足以治療之濃度的活性試劑。此係根據該活性試劑之溶解度及釋放行為。於液態製劑之情況時，該活性試劑之溶解特性及化學穩定性是重要的。為了提供高遵守性，該局部眼科醫藥組成物不應該每天給予超過5次，愈少次愈好。合併於該醫藥組成物製備時之賦形劑的型式及量對於眼睛中活性試劑之釋放特性，生物利用性，特別是在眼球後部(如在視網膜的區域，Bruch’s膜及脈絡膜)，穩定度，相容性，功效及製造該局部眼科醫藥組成物過程之工業應用性至關重要。

需藉本發明解決的問題是提供包括雷格拉非尼作為活性試劑之局部眼科醫藥組成物，其具有足夠之穩定性及相容性且其於眼睛達到有效濃度之雷格拉非尼，特別是在治療眼球後部之眼科病症，有足夠的療效，藉由避免靜脈或口服給藥或注射至或接近眼睛(如玻璃體內注射或其他注射)。

另一個需要本發明來解決之問題是要提供局部眼科醫藥組成物以治療眼球後部疾病。

雷格拉非尼單水合物具有有限的溶解度特徵。雷格拉非尼單水合物於不同溶劑之熱力學溶解度係出示於表1：

令人驚訝的，根據本發明之醫藥組成物提供了藉由局部給藥以足夠量之活性試劑至眼睛而可有效的治療眼科病症。特別的，根據本發明之醫藥組成物係提供足夠量之活性試劑至眼球後部，亦即根據本發明之醫藥組成物影響活性試劑由眼球前部至眼球後部的傳輸。再者，根據本發明之醫藥組成物具有足夠的穩定度，其中活性試劑無任何有意義的降解且與眼睛相容。

本發明涉及一局部眼科醫藥組成物，其包括雷格拉非尼，式(I)化合物，雷格拉非尼之水合物，溶劑合物或製藥上可接受的鹽，或其多晶型物及至少一種醫藥上可接受之載體且任意至少一種製藥上可接受的賦形劑，其中該組成物不含疏水性二氧化矽。

較佳為一局部眼科醫藥組成物，其包括雷格拉非尼，雷格拉非尼之水合物，溶劑合物或製藥上可接受的鹽或其多晶型物作為活性試劑及至少一種醫藥上可接受之載體及任意至少一種製藥上可接受的賦形劑，其中該組成物為懸浮液，其包括懸浮於適用之醫藥上可接受之載體之活性試劑且其中組成物不含疏水性二氧化矽。

醫藥上可接受之載體或賦形劑為任何載體或賦形劑，於與活性試劑之有效活性一致之濃度時，是對患者相對無毒且無害的，因此任何該載體或賦形劑引起的副作用無損於活性試劑之有益效果。

“式(I)化合物”或“雷格拉非尼”之詞係指4-{4-[({[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]胺基}羰基)胺基]-3-氟苯氧基}-N-甲基吡啶-2-羧醯胺如描繪於式(I)。

“本發明化合物”或“活性試劑”之詞係指雷格拉非尼，雷格拉非尼之水合物，溶劑合物或製藥上可接受的鹽，或其多晶型物。

本發明中之溶劑合物為該等化合物或其等鹽類之型式，其中溶劑分子形成固體狀態之化學計量絡合物且包括，但非侷限於，例如乙醇及甲醇。

水合物為溶劑合物之一特殊型式，其中該溶劑分子為水。本發明化合物之水合物或其等之鹽類為該化合物或鹽類與水之化學計量組成物，例如，半-，單-或二水合物。較佳為雷格拉非尼單水合物。

就本發明目的之鹽類宜為根據本發明化合物之製藥上可接受的鹽。適當之製藥上可接受的鹽為精於此方面技藝者所熟知且包括無機酸及有機酸，例如氫氯酸，氫氟酸，硫酸，磷酸，甲磺酸，三氟甲磺酸，苯磺酸，對甲苯磺酸(對甲苯磺酸鹽)，1-萘磺酸，2-柰磺酸，醋酸，三氟醋酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸，乳酸，草酸，琥珀酸，反式丁稀二酸，順式丁稀二酸，苯甲酸，水楊酸，苯基醋酸，及苦杏仁酸。此外，製藥上可接受的鹽包括無機鹼之鹽類，如包含鹼金屬陽離子(如，Li+，Na+或K+)，鹼土金屬陽離子(如，Mg+2，Ca+2或Ba+2)之鹽類，銨陽離子，以及有機鹼的酸式鹽，包括經脂肪族與芳香族取代的胺類，以及四級銨陽離子，如由三乙胺質子化與過烷基化而得，N,N-二乙胺，N,N-二環己胺，離胺酸，吡啶，N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)，1,4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷(DABCO)，1,5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)及1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)。較佳者為雷格拉非尼之氫氯酸鹽，甲磺酸鹽或苯磺酸鹽。

較佳為雷格拉非尼及雷格拉非尼單水合物，最佳為作為本發明化合物之雷格拉非尼單水合物。

由於雷格拉非尼之溶解度低，特別是雷格拉非尼單水合物(參見表1)標準溶液不適用之。雖然溶液包含可容忍量之乳化劑，溶解劑，絡合物形成賦形劑等，溶液仍不能提供例如足夠穩定之雷格拉非尼。

根據本發明之局部眼科醫藥組成物包括本發明之化合物，宜為雷格拉非尼，更宜為雷格拉非尼單水合物，以其固體型式以固體型式，宜為以結晶型式以結晶型式，更宜為以微結晶型式。

微粒化可藉由熟練人員已知之標準研磨法來達成，宜為藉由噴氣研磨。該微晶型式之平均粒徑為由0.5至10μm，宜為由1至6μm，更宜為由1至3μm。所提及之粒徑為經由熟練人員所已知之射線繞射法測量之粒徑平均分佈(測良儀器：HELOS，Sympatec)。

本發明化合物，宜為雷格拉非尼，更宜為雷格拉非尼單水合物於局部眼科醫藥組成物中之最小濃度以組成物總量計為0.01%，宜為0.2%重量。本發明化合物，宜為雷格拉非尼，更宜為雷格拉非尼單水合物於局部眼科醫藥組成物中之最大濃度以組成物總量計為10%，宜為6%，更宜為5%，最宜為4%重量。

本發明化合物於醫藥組成物中之較佳濃度為由0.1至100mg/ml，宜為由1至50mg/ml，更宜為由2至40mg/ml。

雷格拉非尼於醫藥組成物中之特佳濃度為由0.1至100mg/ml，宜為由1至50mg/ml，更宜為由2至40mg/ml。

特佳者為以由0.1至100mg/ml，宜為由1至50mg/ml，更宜為由2至40mg/ml之量添加雷格拉非尼單水合物所產生之醫藥組成物。

根據本發明之局部眼科醫藥組成物包括非侷限於眼藥水，凝膠，油膏，分散液或懸浮液。

較佳之局部眼科醫藥組成物為一懸浮液。

本發明之化合物，宜為雷格拉非尼，更宜為雷格拉非尼單水合物，宜以微粉化型式使用。

微粒化可藉由熟練人員已知之標準研磨法來達成，宜為藉由噴氣研磨。該微晶型式之平均粒徑為由0.5至10μm，宜為由1至6μm，更宜為由2至3μm。所提及之粒徑為經由熟練人員已知之射線繞射法測量之粒徑平均分佈(測良儀器：HELOS，Sympatec)。

本發明之一個具體例為局部眼科醫藥組成物，其為包括以固體型式，宜為以結晶型式，更宜為以超細結晶型式之本發明化合物，宜為雷格拉非尼，更宜為雷格拉非尼單水合物，懸浮於適用之製藥上可接受之載體的懸浮液，且任意的再包括一種或多種製藥上可接受的賦形劑，其中該組成物不含疏水性二氧化矽。

較佳之懸浮液係以非水性載體為基底，更宜為懸浮液以疏水性載體為基底。

根據本發明之適當製藥上可接受的載體包括，但非侷限於，油醯聚乙二醇三酸甘油酯，亞油醯聚乙二醇三酸甘油酯，月桂醯聚乙二醇甘油酯，烴類載體如液態石蠟(Paraffinum liquidum，礦物油)，輕質液體石蠟(低黏度石蠟，Paraffinum perliquidum，輕質礦物油)，軟石蠟(凡士林)，硬石蠟，植物性脂肪油，如蓖麻油，花生油或芝麻油，合成脂肪油，如中鏈三酸甘油酯(MCT，含飽和脂肪酸之三甘油酯，宜為辛酸及癸酸)，異丙基肉豆蔻，鬼醯基己醯聚乙二醇-8甘油脂，鬼醯基己醯聚氧-8甘油酯，羊毛醇像是鯨蠟硬脂醇，羊毛脂，甘油，丙二醇，丙二醇，辛酸或癸酸的二酯類，聚乙二醇(PEG)，水，如水性等滲壓氯化鈉溶液或其混合物。

較佳之非水性製藥上可接受的載體，包括，但非侷限於，中鏈三酸甘油酯(MCT，與飽和脂肪酸混合的三酸甘油酯，宜為辛酸與癸酸，異丙基肉豆蔻，鬼醯基己醯聚乙二醇-8甘油脂，鬼醯基己醯聚氧-8甘油酯，油醯聚乙二醇甘油酯，油醯聚乙二醇-6甘油酯(Labrafil M 1944 CS)，亞油醯聚乙二醇-6甘油酯(Labrafil M2125 CS=亞油醯聚氧-6甘油酯)，月桂醯聚乙二醇-6甘油酯(Labrafil M 2130 CS=月桂醯聚氧-6甘油酯))，碳氫載體，脂肪油像是蓖麻油或其混合物。最宜使用的是疏水性載體如烴類載體，其包括，但非侷限於，液態石蠟或輕質液體石蠟或其混合物。

非常令人驚訝的，根據本發明之醫藥組成物包括一親脂性(或疏水性)載體，如液態或輕質液態石蠟，其係藉由局部給藥以足夠有效治療眼科病症之量的活性試劑進入眼睛而提供，雖然雷格拉非尼單水合物於親脂性(或疏水性)載體之溶解度非常低。

該醫藥上可接受之載體為根據本發明之局部眼科醫藥組成物的基底，且係於組成物中以組成物總量計以最低濃度75%，宜為80%，更宜為85%及最大濃度99-9%，宜為99%，更宜為98%重量存在。

根據本發明之醫藥組成物可具有不同黏度，因此，原則上由低粘度系統至糊劑之範圍是可以想像的。較佳為流體系統，其包括低黏度以及較高黏度系統，只要在其等自身重量下仍為可流動的。

於根據本發明局部眼科醫藥組成物中使用之其他適當製藥上可接受的賦形劑包括，但非侷限於，表面活性劑，以載體為基底之聚合物，如膠凝劑，有機共溶劑，pH活性組成份，滲透活性組成份集防腐劑。該組成物宜不含穩定劑。

於根據本發明局部眼科醫藥組成物中使用之適當表面活性劑包括，但非侷限於，脂類，如磷脂，磷脂醯膽鹼，卵磷脂，心磷脂，脂肪酸，磷脂乙醯胺，磷脂，四丁酚醛，聚乙烯醇及衍生物，如PEG 400，PEG 1500，PEG 2000，泊洛沙姆407，泊洛沙姆188，聚山梨酯80，聚山梨酯20，山梨糖醇月桂酸，山梨糖醇硬脂酸，山梨糖醇棕櫚酸酯或其混合物，宜為聚山梨酯80。

於根據本發明局部眼科醫藥組成物中使用之適當聚合物基底載體，如膠凝劑包括，但非侷限於，纖維素，羥丙基甲基纖維素(HPMC)，羥丙基纖維素(HPC)，羧甲基纖維素(CMC)，甲基纖維素(MC)，羥化乙基纖維素(HEC)，澱粉酶及衍生物，支鏈澱粉及衍生物，右旋糖苷及衍生物，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，聚乙烯醇(PVA)，及丙烯酸聚合物，如聚丙烯或聚甲基丙烯酸之衍生物如HEMA，卡波姆及前述衍生物或其混合物。

於根據本發明之醫藥組成物中使用之適當有機共溶劑包括，但非侷限於，乙二醇，丙二醇，N-甲基吡咯烷酮，2-吡咯烷酮，3-吡咯烷，1,4-丁二醇，二甲基甘油單甲醚，二乙基甘油單甲醚，丙酮縮甘油，甘油，聚乙二醇，聚丙二醇。

於根據本發明之醫藥組成物中使用之適當pH活性組成份，如緩衝劑或pH調整劑包括，但非侷限於，磷酸氫二鈉，磷酸二氫鈉，硼酸，硼酸鈉，檸檬酸鈉，氫氯酸，氫氧化鈉。

活性組成份之pH係依據組成物之目標pH來選擇，其通常範圍為由 pH 4-9。

於根據本發明之醫藥組成物中使用之適當滲透活性組成份包括，但非侷限於，氯化鈉，甘露醇，甘油。

於根據本發明之醫藥組成物中使用之防腐劑包括，但非侷限於，氯化苯甲烴銨，烷基二甲基苄基銨氯化物，溴棕三甲銨，十六烷基吡啶，溴化苯度氯銨，氯化苄乙氧，硫柳汞，氯丁醇，苯甲醇，苯氧乙醇，苯乙醇，山梨酸，甲基及丙基對羥基苯甲酸酯，葡萄糖酸氯己定，EDTA或其混合物。

膠凝劑，pH活性劑及滲透活性劑宜使用於一水性製藥上可接受之載體的情況時。

根據本發明懸浮液中，其他適當製藥上可接受的賦形劑的量以懸浮液總重計可為由0.1至15%，宜為由0.5至10%，更宜為由1至5%。

根據本發明懸浮液中羥丙基甲基纖維素的量以懸浮液總重計宜為由0.05至15%，宜為由0.1至10%，更宜為由1至5%。

根據本發明懸浮液中聚山梨酯80之量以懸浮液總重計宜為由0.05至10%，宜為由0.1至7%，更宜為由0.5至4%。

根據本發明之醫藥組成物不含疏水性二氧化矽，宜為不含包括膠體二氧化矽，親水性或疏水性二氧化矽之穩定劑。

疏水性二氧化矽為不會被水弄濕之二氧化矽；此意味其等漂浮於水面。其等係藉由將親水性二氧化矽與矽烷(鹵素矽烷，烷氧基矽烷，矽氮烷，矽氧烷)掺合而製備。此意味矽烷醇基團被烷基基團所烷基化，其宜為最多具有18個碳原子，特別宜為具有1個多至8個碳原子，非常特別宜為具有1個多至4個碳原子，尤其是被甲基基團。於製備疏水性二氧化矽時所使用之矽烷的實例為六甲基二矽氮烷或，宜為，二甲基二氯矽烷。適當的疏水性二氧化矽可衍生自沉澱，膠狀，預壓縮或致熱二氧化矽，較佳者為致熱二氧化矽。例如，親水性二氧化矽與二甲基二氯矽烷反應得到之疏水性 Aerosil，其專有名稱為Aerosil® R 972；其中甲基化之程度為66%至75%(藉由滴定法測定剩餘之矽烷醇基團而確定)。

較佳之局部眼科醫藥組成物係包括結晶雷格拉非尼單水合物，更宜為微晶雷格拉非尼單水合物，以組成物總量計以濃度例如0.01至10%，更宜為0.2至5%重量，懸浮於一醫藥上可接受之載體，其係選自包括液態石蠟，輕質液體石蠟或其混合物者，其中該組成物不含疏水性二氧化矽。

亦屬較佳之局部眼科醫藥組成物包括結晶雷格拉非尼單水合物，更宜為微細結晶雷格拉非尼單水合物，以組成物總量計以濃度例如0.1至10%，更宜為0.2至5%重量，懸浮於油醯聚乙二醇甘油脂作為醫藥上可接受之載體，其中該組成物不含疏水性二氧化矽。

使用本發明醫藥組成物經由局部途徑給藥至眼睛之活性試劑之總量通常範圍為每次及每天給藥由約0.01至50mg，宜為0.02至10mg，更宜為0.05至5mg。依據已知之標準實驗室技術來評估有用於治療眼科病症之化合物，藉由標準藥理分析以於哺乳類確定於上確認之狀況的治療，並將這些結果與用已知醫藥品來治療這些狀況之結果做比較，本發明醫藥組成物之有效劑量可容易的藉由精於此方面技藝者來確定。活性組成份之給藥量可根據特定化合物及所使用之劑量單位，給藥模式及時間，治療期間，年齡，性別，及治療之患者的一般狀況，治療狀況之性質及程度，藥物代謝及排泄之速率，潛在的藥物組合及藥物交互作用等情況而做大幅變化。

根據本發明之醫藥組成物係每天給藥一次或多次，宜為至多5次，更宜為至多3次。

根據本發明之醫藥組成物的典型給藥方法為局部傳輸至眼睛。

然而，在某些情況下，根據對於活性組成份之個別回應，製劑型式及給藥的時間及間隔，偏離所指定量時亦為有利。例如，少於上述最小量之量於某些情況可能足夠，然而於其他情況可能要超過所設定之上限。於相對大量給藥之情況時，亦宜將其等分成一天數個個別劑量。

此醫藥組成物可用來達成想要的藥理作用，宜為藉由局部給藥至需要之患者的眼睛，且於哺乳類在藥物釋放，生物利用性，及/或配合度方面具有有利的特性。患者，於本發明之目的中，為哺乳類，包括人類，需要治療特殊狀況或疾病者。

根據本發明之醫藥組成物的化學穩定性達至少18個月，宜為於24個月。根據本發明，化學上穩定意指該活性試劑於儲存期間不會顯著降解(<1%)。

為此，根據本發明之局部眼科醫藥組成物包含4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺(IUPAC：4-(4-胺基-3-氟苯氧基)-N-甲基吡啶-2-羧醯胺)(AFP-PMA)，以式(I)化合物之重量計，其量為等於或少於0.05%，其意指由0.001%至最多0.05%，量宜為等於或少於0.025%，其意指由0.001%至最多0.025%，量最宜為等於或少於0.01%，其意指由0.001%至最多0.01%重量。

製備方法

可使用多種方法來製備根據本發明之眼科醫藥組成物。首先，醫藥上可接受之載體係藉由任意的將適用之載體或載體混合物與製藥上可接受之賦形劑掺合而製備。之後，將活性試劑分散或懸浮於該混合物中。該製法亦可包括消毒，如藉由無菌沉澱，γ射線，無菌過濾，熱滅菌，無菌灌裝，或此等任意步驟之組合。

本發明亦關於一種製備根據本發明之局部眼科醫藥組成物的方法，其中，本發明化合物係懸浮於一適用之醫藥上可接受之載體中任意的再於一種或多種製藥上可接受的賦形劑存在之下，將該懸浮液均質化。

較佳之製備根據本發明之局部眼科醫藥組成物的方法為，其中 a)適用之醫藥上可接受之載體或適用之製藥上可接受的載體之混合物係藉由將載體任意的再於一種或多種製藥上可接受的賦形劑存在之下掺合而製備，b)本發明化合物，宜為雷格拉非尼，更宜為雷格拉非尼單水合物，懸浮至該適用之醫藥上可接受之載體或混合物中例如於室溫，任意的再於一種或多種製藥上可接受的賦形劑存在之下，c)該懸浮液係藉由攪拌，搖動，渦旋震盪或高剪切均質化而均質化，宜為攪拌，於室溫或不大於40℃，d)該懸浮液係細分為單一單位或填充至適用之藥瓶，容器，管子，瓶子，滴瓶及/或注射器。

任意的於步驟a)於升高的溫度例如40至70℃時，將另一種或多種製藥上可接受的賦形劑添加至適用之醫藥上可接受之載體中。

治療眼科病症的方法

本發明亦關於根據本發明之醫藥組成物於治療或預防眼科病症的用途。

再者本發明亦關於治療或預防一眼科病症之方法，其包括給藥以包含根據本發明製藥上有效量之活性試劑之醫藥組成物。

根據本發明眼科疾病之實例包括，但非侷限於，跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)，脈絡膜新生血管形成(CNV)，脈絡膜新生血管性膜(CNVM)，黃斑囊樣水腫(CME)，外延視網膜(ERM)及黃斑裂孔，與近視有關之脈絡膜新生血管形成，血管紋，視網膜剝離，糖尿病性視網膜病變，糖尿病性黃斑水腫(DME)，視網膜色素上皮細胞(RPE)之萎縮性變化，視網膜色素上皮細胞(RPE)之增生性變化，視網膜靜脈阻塞，脈絡膜視網膜靜脈阻塞，黃斑水腫，視網膜靜脈阻塞造成之黃斑水腫，視網膜色素變性，Stargardt氏病，青光眼，眼睛發炎狀況，如眼色素層炎，鞏膜炎或眼內炎，白內障，屈光異常，如近視，遠視或散光及圓錐角膜及早產兒視網膜病變。此外，實例包括，但非侷限於，眼球前部之血管生成如如角膜炎，角膜移植或角膜成形術後之角膜的血管生成，缺氧造成的角膜的血管生成(隱形眼鏡過度配戴)，翼狀胬肉結膜，視網膜水腫及視網膜內水腫。跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)之實例包括，但非侷限於，乾性或非滲出性AMD，或濕潤或滲出性或新生血管性AMD。

較佳為跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)如乾性AMD，濕性AMD或脈絡膜新生血管形成(CNV)。

本發明之另一具體例為用來治療或預防眼球後部疾病之局部眼科醫藥組成物，其中該組成物為一懸浮液，其包括適用於治療或預防眼球後部疾病之活性試劑懸浮於一適用之製藥上可接受的載體。

較佳為以非水性載體為基底之懸浮液，更宜為以疏水性載體為基底之懸浮液。

眼球後部疾病之實例包括，但非侷限於，跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)，脈絡膜新生血管形成(CNV)，脈絡膜新生血管性膜(CNVM)，黃斑囊樣水腫(CME)，外延視網膜(ERM)及黃斑裂孔，與近視有關之脈絡膜新生血管形成，血管紋，視網膜剝離，糖尿病性視網膜病變，糖尿病性黃斑水腫(DME)，視網膜色素上皮細胞之萎縮性變化(RPE)，視網膜色素上皮細胞之增生性變化(RPE)，視網膜靜脈阻塞，脈絡膜視網膜靜脈阻塞，黃斑水腫，視網膜靜脈阻塞造成之黃斑水腫，視網膜色素變性，Stargardt氏病及早產兒視網膜病變。

較佳之眼球後部疾病包括跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)如乾性AMD，濕性AMD或脈絡膜新生血管形成(CNV)。

跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)的實例包括，但非侷限於，乾性或非滲出性AMD，或濕性或滲出性或新生血管性AMD。

根據本發明適用於治療或預防眼球後部疾病之活性試劑包括，但非侷限於，下列功能域族之訊號傳導抑制劑目標受體激酶：如VEGFR，PDGFR，FGFR及其各別之配位體或其他途徑抑制劑如VEGF-Trap(阿柏西普)，哌加他尼，蘭尼單抗，帕唑帕尼，貝伐西尼，KH-902，四甲雙環庚胺，PF-04523655，E-10030，ACU-4429，伏洛昔單抗，斥消靈錠，芬維a胺，雙硫龍，1-磷酸鞘氨醇，雷格拉非尼，索拉非尼及/或坦度螺酮。這些試劑包括，但非侷限於，抗體例如Avastin(貝伐單抗)。這些試劑亦包括，但非侷限於，小分子抑制劑如STI-571/Gleevec(Zvelebil，Curr.Opin.Oncol.，Endocr.Metab.Invest.Drugs 2000，2(1)，74-82)，PTK-787(Wood等，Cancer Res.2000，60(8)，2178-2189)，SU-11248(Demetri等，Proceedings of the American Society for Clinical Oncology 2004，23，abstract 3001)，ZD-6474(Hennequin等，92nd AACR Meeting，New Orleans，March 24-28，2001，abstract 3152)，AG-13736(Herbst等，Clin.Cancer Res.2003，9，16(suppl 1)，abstract C253)，KRN-951(Taguchi等，95th AACR Meeting，Orlando，FL，2004，abstract 2575)，CP-547,632(Beebe等，Cancer Res.2003，63，7301-7309)，CP-673,451(Roberts等，Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004，45，abstract 3989)，CHIR-258(Lee等，Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004，45，abstract 2130)，MLN-518(Shen等，Blood 2003，102，11，abstract 476)，及AZD-2171(Hennequin等，Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004，45，abstract 4539)，PKC412，奈帕芬胺。

較佳為雷格拉非尼，貝伐單抗，阿柏西普，哌加他尼，蘭尼單抗，帕唑帕尼及/或貝伐西尼。

根據本發明之適當製藥上可接受的載體包括，但非侷限於，油醯聚乙二醇三酸甘油酯，亞油醯聚乙二醇三酸甘油酯，月桂酰聚乙二醇甘油酯，烴類載體如液態石蠟(Paraffinum liquidum，礦物油)，輕質液體石蠟(低黏度石蠟，Paraffinum perliquidum，輕質礦物油)，軟石蠟(凡士林)，硬石蠟，植物性脂肪油，如蓖麻油，花生油或芝麻油，合成脂肪油，如中鏈三酸甘油酯(MCT，含飽和脂肪酸之三甘油酯，宜為辛酸及癸酸)，異丙基肉豆蔻，鬼醯基己醯聚乙二醇-8甘油脂，鬼醯基己醯聚氧-8甘油酯，羊毛醇，如鯨蠟硬脂醇，羊毛脂，甘油，丙二醇，辛酸/癸酸之丙二醇二酯，聚乙二醇(PEG)或其混合物。

較佳為非水性製藥上可接受的載體，其包括，但非侷限於，中鏈三酸甘油酯(MCT，含飽和脂肪酸之三甘油酯，宜為辛酸及癸酸，異丙基肉豆蔻，鬼醯基己醯聚乙二醇-8甘油脂，鬼醯基己醯聚氧-8甘油酯，油醯聚乙二醇甘油酯，油醯聚乙二醇-6甘油酯(Labrafil M 1944 CS)，亞油醯聚乙二醇-6甘油酯(Labrafil M2125 CS=亞油醯聚氧-6甘油酯)，月桂醯聚乙二醇-6甘油酯(Labrafil M 2130 CS=月桂醯聚氧-6甘油酯))，烴類載體，脂肪油如蓖麻油或其混合物。最宜為使用疏水性載體如烴類載體，其包括，但非侷限於，液態石蠟或輕質液體石蠟或其混合物。

非常令人驚訝的，根據本發明懸浮液包括一親脂性載體如液態或輕質液體石蠟，其係藉由局部給藥以足夠量之活性試劑至眼球後部而有效的治療眼球後部疾病。

於根據本發明局部眼科醫藥組成物中使用之適當其他製藥上可接受的賦形劑包括，但非侷限於，表面活性劑，以聚合物為基底之載體如膠凝劑，有機共溶劑，pH活性組成份，滲透活性組成份及防腐劑。

醫藥上可接受之載體為根據本發明局部眼科醫藥組成物之基底且於組成物係以最小濃度75%，宜為80%，更宜為85%及最大濃度99.9%，宜為99%，更宜為98%重量存在，以組成物總量計。於局部眼科醫藥組成物中使用之活性組成份宜以微粉化型式使用。

微粒化可藉由精於此方面技藝者所熟知之標準研磨方法來達成，宜為藉由噴氣研磨。該微粉化型式之平均粒徑為由0.5至10μm，宜為由1至6μm，更宜為由2至3μm。所註明之粒徑係藉由精於此方面技藝者所熟知之射線繞射法(測量儀器：HELOS，Sympatec)所測得之平均粒徑分佈。

於醫藥組成物中活性組成份之濃度係由0.1至100mg/ml，宜為由1至50mg/ml，更宜為由2至40mg/ml。

根據本發明之醫藥組成物可就醫藥組成物單獨給藥或合併一種或多種於合併時不會造成不可接受之不良效果的其他醫藥組成物或活性試劑。

“組合”就本發明而言不僅係指一劑量型式，其包含所有的活性試劑(所謂的固定組合)，及組合包，包含彼此分開之活性試劑，以及同時或連續給藥之活性試劑，只要其等係使用來預防或治療相同疾病。

由於根據本發明之組合耐受性良好且即使在低劑量也有潛在療效，可以有各式各樣的製劑種類。因此，一種可能性是分別調配根據本發明組合之個別活性組成份。於此情況時，並非絕對必要將個別活性組成份在同一時間給藥；相反的，依序攝取對於達到最佳效果可能是有利的。此等分別給藥宜合併個別活性組成份之製劑同時於一適當主要包裝中。該活性組成份於每一情況中係存於主要包裝之個別容器中，其可為，例如，管子，瓶子或泡罩包裝。此等於聯合主要包裝中之組成份的個別包裝亦指稱為試劑盒。

於一個具體例中，本發明醫藥組成物可與其他眼科試劑合併。此等試劑之實例包括，但非侷限於，類胡蘿蔔素，如番茄紅素，葉黃素，玉米黃質，八氫番茄紅素，六氫番茄紅素，鼠尾草酸及其衍生物，如鼠尾草酚，6,7-脫氫鼠尾草酸，7-酮基鼠尾草酸，一鋅源，如氧化鋅或鋅鹽，如其氯化物，醋酸化物，葡萄糖酸，碳酸鹽，硫酸鹽，硼酸鹽，硝酸鹽或矽酸鹽，氧化銅，維生素A，維生素C，維生素E及/或ß-胡蘿蔔素。

於另一個具體例中，本發明醫藥組成物可與下列功能域族之其他訊號傳導抑制劑目標受體激酶合併：如VEGFR，PDGFR，FGFR及其個別配位體或其他途徑抑制劑，如VEGF-Trap(阿柏西普)，哌加他尼，蘭尼單抗，帕唑帕尼，貝伐西尼，KH-902，四甲雙環庚胺，PF-04523655，E-10030， ACU-4429，伏洛昔單抗，斥消靈錠，芬維a胺，雙硫龍，1-磷酸鞘氨醇及/或坦度螺酮。這些試劑包括，但非侷限於，抗體，如Avastin(貝伐單抗)。這些試劑亦包括，但非侷限於，小分子抑制劑，如STI-571/Gleevec(Zvelebil，Curr.Opin.Oncol.，Endocr.Metab.Invest.Drugs 2000，2(1)，74-82)，PTK-787(Wood等，Cancer Res.2000，60(8)，2178-2189)，SU-11248(Demetri等，Proceedings of the American Society for Clinical Oncology 2004，23，abstract 3001)，ZD-6474(Hennequin等，92nd AACR Meeting，New Orleans，March 24-28，2001，abstract 3152)，AG-13736(Herbst等，Clin.Cancer Res.2003，9，16(suppl 1)，abstract C253)，KRN-951(Taguchi等，95th AACR Meeting，Orlando，FL，2004，abstract 2575)，CP-547,632(Beebe等，Cancer Res.2003，63，7301-7309)，CP-673,451(Roberts等，Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004，45，abstract 3989)，CHIR-258(Lee等，Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004，45，abstract 2130)，MLN-518(Shen等，Blood 2003，102，11，abstract 476)，及AZD-2171(Hennequin等，Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004，45，abstract 4539)，PKC412，奈帕芬胺。

較佳之組合為含有貝伐單抗，阿柏西普，哌加他尼，蘭尼單抗，帕唑帕尼及/或貝伐西尼。

通常，於本發明醫藥組成物中合併使用其他眼科試劑將有助於：(1)與單獨給藥以各試劑相較得到較佳之功效，(2)提供較小的給藥量，(3)提供治療大範圍哺乳類，尤其是人類，(4)於治療之患者中提供較高的回應速度，(5)得到至少與試劑單獨使用時同樣好的功效及耐受性結果，相較於已知情況，其中其他試劑合併產生拮抗作用。相信精於此方面技藝者，採用前述資訊及技藝中可取得之資訊，可充分利用本發明至其極限。

精於此方面技藝者應顯知可在不脫離本發明的精神或本文中所載明之範圍時對本發明做出變化及改進。

所有引證如上或如下的公開案，申請案及專利案係合併於本文中做為參考。

所有的重量數據，除非另有註明，為重量百分比且份數為重量份數。

圖1：於第21天，以載體(油醯聚乙二醇甘油酯(Labrafil)，製劑a)及雷格拉非尼(實例1，製劑b)處理之動物的血管造影分數。

圖2：於第21天，以載體(石蠟，製劑c)及雷格拉非尼(實例2，製劑d)處理之動物的血管造影分數。

圖3：於第21天，以載體(以水為基底，製劑e)及雷格拉非尼(實例3，製劑f)處理之動物的血管造影分數。

圖4：於第23天，以載體(油醯聚乙二醇甘油酯(Labrafil)，製劑a)及雷格拉非尼(實例1，製劑b)處理之動物的新生血管面積。

圖5：於第23天，以載體(石蠟，製劑c)及雷格拉非尼(實例2，製劑d)處理之動物的新生血管面積。

圖6：於第23天，以載體(以水為基底，製劑e))及雷格拉非尼(實例3，製劑f)處理之動物的新生血管面積。

圖7：於第21天，於含或不含2%疏水性二氧化矽之載體處理組動物(載體=製劑k)，及含或不含2%疏水性二氧化矽之雷格拉非尼處理組動物，分別(石蠟=製劑l及石蠟2%二氧化矽=製劑m)之IV級病變%。

實例： HPLC方法：

兩個獨立HPLC方法係發展來分別測定於醫藥製劑中雷格拉非尼含量，未確認之降解產物及未確認之第二組成份，以及用來測定特定之降解產物4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺(AFP-PMA)。

a)HPLC方法係用來測定雷格拉非尼含量，未確認之第二組成份，及未確認之降解產物：樣品係藉由將抽出之製劑等份用水/乙腈(25/75)稀釋成最終雷格拉非尼濃度100μg/ml而製備。將各10μl之樣品注射至Agilent 1100 HPLC系統中(Agilent，Waldbronn，Germany)，並將樣品於一加熱之(40℃)Symmetry C18列(150 x 4,6mm-3,5μm粒徑，Waters，Eschborn，Germany)中使用流速1ml/min跑流程。該流動相含有磷酸鉀緩衝液pH 2.4(A)及乙腈/乙醇(6/4)(B)之混合物。使用下列梯度：分鐘0：A，60%/B，40%；分鐘12：A，20%/B，80%；分鐘16：A，20%/B，80%；分鐘16.5：A，60%/B，40%；分鐘20：A，60%/B，40%。雷格拉非尼，未確認之第二組成份，及未確認之降解產物係用DAD檢測器於波長265nm來定量。於製劑中之雷格拉非尼含量(列3於下表)係藉由使用外部2點校準直線法來定量。未確認之第二組成份及未確認之降解產物(列5-7於下表)係以總樣品相關峰區%來說明。該系統的精確度係由每個樣品設置所跑流程來確定，藉由注射6次100%雷格拉非尼標準組(如100μg/ml)，由此等6次注射所產生之峰區變異係數始終在2%以下。2點(如50μg/ml，100μg/ml)校準直線之相對Y-軸截距始終在3%以下(指100%雷格拉非尼標準組)。該雷格拉非尼峰出現在11.5分鐘。

b)HPLC法用來測定特定降解產物4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺(IUPAC：4-(4-胺基-3-氟苯氧基)-N-甲基吡啶-2-羧醯胺)(AFP-PMA)。樣品係藉由使用丙酮來稀釋抽出之製劑等份成最終雷格拉非尼濃度3000μg/ml而製備。將各15μl之樣品注射至Agilent 1100 HPLC系統(Agilent，Waldbronn，Germany)，並將保存於10°自動取樣器之樣品於20℃ Symmetry C18列(150 x 4,6mm-3,5μm粒徑，Waters，Eschborn，Germany)以1ml/min之流速跑流程。流動相含有磷酸鉀緩衝液pH 2.4(A)及乙腈/乙醇(6/4)(B)之混合物。使用下列梯度：分鐘0：A，62%/B，38%；分鐘5：A，44%/B，56%；分鐘5.01：A，15%/B，85%；分鐘9：A，15%/B，85%；分鐘9.01：A，62%/B，38%；分鐘12：A，62%/B，38%。4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺(列4於下表)係用DAD檢測器於波長232mm來定量，指稱為外部3點(如0.04μg/ml，0.1μg/ml，1μg/ml)校準直線法。該4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺峰出現在3.9分鐘。對兩個不同基質(水及石蠟)測定4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺之偵測極限(LOD)及定量極限(LOQ)，且為：LOD：4ppm=0.0004%(水)，13ppm=0.0013%(石蠟)；LOQ：13ppm=0.0013%(水)及43ppm=0.0043%(石蠟)。

實例1：包括雷格拉非尼單水合物於油醯聚乙二醇甘油脂(20mg/ml)之眼科懸浮液

將200mg微粉化雷格拉非尼單水合物懸浮於油醯聚乙二醇甘油脂(10ml)中。將懸浮液於室溫攪拌15分鐘而均質化。

雷格拉非尼於油醯聚乙二醇甘油脂中之穩定度係以濃度3mg/ml於25℃，60%相對濕度(r.h.)及於40℃，75% r.h.測試4週。雷格拉非尼含量範圍係介於95.0-101%理論濃度，最大未確認之降解產物範圍係由0.3至0.7%。4-(4-胺基-3-氟苯氧基)吡啶-2-羧酸甲基醯胺(AFP-PMA)含量低於<13ppm=0.0013%(<LOD測定以石蠟為基底之製劑，表2)。分析細節請參見前文HPLC方法章節。

實例2：包括雷格拉非尼單水合物於液態石蠟之眼科懸浮液(20mg/ml)

將400mg微粉化雷格拉非尼單水合物懸浮於20ml輕質液體石蠟中。將懸浮液藉由於室溫攪拌15分鐘而均質化。

懸浮液之穩定度係於濃度20mg/ml於25℃，60%相對濕度(r.h.)及於40℃，75% r.h.時測試13週。雷格拉非尼含量範圍係介於74.8-99.6%理論濃度。所觀察到的變動最有可能是因為手動搖動懸浮液後樣品的不均勻性。無未確認之降解產物出現於色譜圖。AFP-PMA含量低於<43ppm=0.0043%(<LOQ determined for以石蠟為基底之製劑，表3)。分析細節請參見前文分析章節。

實例3：包括雷格拉非尼單水合物於以水為基底之載體中(20mg/ml)之眼科懸浮液

於70℃，將1.7g羥基丙基甲基纖維素15 cp(HPMC)分散於等滲壓氯化鈉溶液(48g，0.9% NaCl於水)中。將混合物於攪拌時冷卻至室溫。於室溫將水蒸發，且隨即加入聚山梨酯80(0.5g)並於溫和攪拌下溶解。加入518mg雷格拉非尼單水合物至所製得之等分載體(24.5g)中並於室溫將懸浮液藉由溫和攪拌15分鐘而均質化。

以濃度10mg/ml於13週期間於25℃，60%相對濕度(r.h.)及40℃，75% r.h.測試懸浮液之穩定度。雷格拉非尼含量範圍介於103-112%理論濃度。所觀察到的變動最有可能是因為手動搖動懸浮液後樣品的不均勻性。最大未確認之降解產物係<0.1%相對峰區域之總樣品。AFP-PMA之量僅在9週儲存後測定。

於上表2，3及4中，列5係說明於標準組中使用於HPLC方法之最大未確認之第二組成份之百分比量與列6之值相較，其說明了相同未確認之第二組成份於製劑之百分比量。列7係說明最大未確認之降解產物於製劑之百分比量，其不為AFP-PMA。該降解產物未於標準組中檢測出來但卻於製劑中形成。

實例4：包括雷格拉非尼單水合物於中鏈三甘油酯(MCT，miglyol)(20mg/ml)之眼科懸浮液

實例4係根據實例1製備。

實例5：眼科懸浮液包括雷格拉非尼單水合物於單純眼膏(20mg/g)

將100mg微粉化雷格拉非尼單水合物懸浮於4900mg單純眼膏(組成物：膽固醇1%，液態石蠟42.5%，軟石蠟56.5%重量)中。將懸浮液於室溫藉由於瑪瑙研缽中攪拌大約1分鐘而均質化。

實例6：包含雷格拉非尼之不同製劑於老鼠中雷射誘導脈絡膜新生血管形成(CNV)模式之局部功效

本研究之目的在於確定是否每天局部給藥(眼藥水)兩次以根據本發明之局部眼科醫藥組成物時會造成血管滲漏及/或脈絡膜新生血管形成於鼠類模式之雷射誘導脈絡膜新生血管形成會降低(Dobi等，Arch.Ophthalmol.1989，107(2)，264-269或Frank et al，Curr.Eye Res.1989 Mar，8(3)，239-247)。

為此目的，選擇全部133個經染色之沒有可見之眼部缺陷的Brown-Norway鼠並隨機分為8組每組6至8隻動物。於第0天，將動物藉由腹腔注射(15mg/kg甲苯噻嗪及80mg/kg氯胺酮(溶解於包含5mg/ml氯丁醇半水合物及丙二醇之水中))而麻醉。滴入一滴0.5%托吡卡胺(溶解於0.9%包含苯扎氯銨之食鹽水)以放大瞳孔後，藉由在每個動物一隻眼睛之視網膜燒6個孔而誘發脈絡膜新生血管形成(瓦解Bruch’s膜)(病變大小：50μm，射線強度：150mW；刺激期間：100ms)使用532nm氬射線。

下列製劑係包括：

a)100%油醯聚乙二醇甘油酯如使用於實例1(載體控制組)，n=8

b)實例1(20mg/ml，懸浮液)，n=8

c)100%輕質液體石蠟如使用於實例2(載體控制組)，n=8

d)實例2(20mg/ml，懸浮液)，n=8

e)以水為基底之載體(羥基丙基甲基纖維素15 cp 3.5%，聚山梨酯80 0.5%，等滲壓NaCl溶液96%如使用於實例3(載體控制組)，n=6

f)實例3(20mg/ml，懸浮液)，n=6

g)100% Miglyol如使用於實例4(載體控制組)，n=8

h)實例4(20mg/ml，懸浮液)，n=7

i)100%單純眼膏如使用於實例5(載體控制組)，n=8

j)實例5(20mg/g，懸浮液)，n=6

於每個製劑中，於23天之完整觀察期間以10：14小時之區間，將10μl每天兩次施用至受感染的眼睛。將所有動物之體重於開始前及研究期間每日紀錄一次。於第21天，使用螢光眼底照相機(Kowe Genesis Df，Japan)進行血管造影。此處，於麻醉及瞳孔放大後，隨即將10%螢光素鈉(染料，溶解於水)予以皮下注射並於注射染料後約2分鐘以圖片記錄。螢光素在血管造影之血管滲漏係藉由對組之分配(實例1至3相對於個別載體)設盲之檢查者評分。將每個病變以0(無滲漏)至3(強烈染色)來評分，且來自所有6種病變之平均值係用作為個別動物之值。於第23天，將動物殺掉並收取眼睛且於室溫之4%多聚甲醛溶液中固定小時。清洗後，將視網膜小心的去皮，並清洗鞏膜-脈絡膜絡合物，阻斷並用FITC-植物凝集素B4抗體染色以便使脈管可見。然後，將鞏膜-脈絡膜予以整平並用螢光顯微鏡(Keyence Biozero)於488nm激發波長時檢測。脈絡膜新生血管形成之面積(以μm2)係使用ImageTool軟體來測量。

結果： A)對於血管滲漏之功效(血管造影分數第21天)：

圖1：載體(油醯聚乙二醇甘油酯(Labrafil)，製劑a)及雷格拉非尼(實例1，製劑b)治療之動物於第21天之血管造影分數。數據係以平均±SD來呈現，根據t-測試之p-值。每組N=8。

圖2：載體(石蠟，製劑c)及雷格拉非尼(實例2，製劑d)治療之動物於第21天的血管造影分數。數據係以平均±SD來呈現，根據t-測試之p-值。每組N=8。

圖3：載體(以水為基底，製劑e)及雷格拉非尼(實例3，製劑f)治療之動物於第21天之血管造影分數。數據係以平均±SD來呈現，p-值根據t-測試。每組N=6。

B)對於新生血管形成(新生血管性面積，第23天)之功效：圖4：載體(油醯聚乙二醇甘油酯(Labrafil)，製劑a)及雷格拉非尼(實例1，製劑b)治療組動物於第23天之新生血管性面積。數據係以平均±SD來呈現，p-值根據t-測試。每組N=8。

圖5：載體(石蠟，製劑c)及雷格拉非尼(實例2，製劑d)治療之動物於第23天之新生血管性面積。數據係以平均±SD來呈現，根據t-測試之p-值。每組N=8。

圖6：載體(以水為基底，製劑e))及雷格拉非尼(實例3，製劑f)治療組動物於第23天之新生血管性面積。數據係以平均±SD來呈現，根據t-測試之p-值。每組N=5。

於兩組中，每組各有一個整平製備物因不良組織質地而未能評分。

實例1之結果：

實例2之結果：

實例3之結果：

實例4之結果：

實例5之結果：

實例7：眼部藥物動力學： A)

於實驗之日，將懸浮液於不同載體之定量的測試化合物(雷格拉非尼單水合物20mg/ml)藉由Eppendorf滴量管施用至各眼睛中。於施用24至96小時期間後，依序(8-12時間點)將動物殺死以取得這些動物(鼠)之眼睛。將這些眼睛用1ml生理食鹽水溶液潤濕至少2次且之後用紙(paper flies)弄乾。為了測定該測試化合物於眼睛的總濃度，將其於一定量食鹽水溶液中均質化並將等份的均質液掺入乙腈以沉澱出溶液中之蛋白質。離心後，於上層清液中，測試化合物及其可能已知之分解產物用適當的LC/MS-MS方法予以定量。如果測試化合物或其可能已知之分解產物需要於某些已界定之眼睛隔室中測定，將眼睛解剖成適當隔室且將各個隔室均質化，處理並如上所述來測定。

依此方式確定濃度-時間曲線；然後將其用來計算標準藥物動力學參數，以評估某些製劑之條件(最大濃度及半衰期)。該經計算之測試化合物的標準藥物動力學參數或於此釋放之活性醫藥組成份為：AUCnorm，Cmax，及MRT(平均滯留時間)。

由眼睛之濃度-時間曲線所計算之劑量相同但製劑不同之雷格拉非尼的藥物動力學參數係出示於下表。

B)

將三隻未麻醉之雌兔於各個眼睛之下部淚囊給藥以定義量之(30μL)於石蠟的懸浮液。使用玻璃毛細管超過60分鐘期間，將數個重量控制之樣品(n=8)之淚液收集起來。在流體中化合物濃度之確定及藥物動力學參數之評估與說明如上者相同。

該結果顯示該活性試劑在在淚液及角膜上令人驚訝的具有高滯留時間。

實例8：包含雷格拉非尼之不同製劑於非人類靈長類射線誘導之脈絡膜新生血管形成(CNV)模式之局部功效

本研究之目的在於確定是否每天局部給藥(眼藥水)兩次以根據本發明之局部眼科醫藥組成物時會造成臨床上有意義之IV級病變於非人類靈長類模式之雷射誘導脈絡膜新生血管形成會降低(Ryan，1982，Krzystolik等，2002，Nork等，2011)。

為此目的，選擇全部51個經染色之沒有可見之眼部缺陷的非人類靈長類(食蟹獼猴)並隨機分為3組。於第0天，將動物藉由腹腔注射(10-12mg/kg氯胺酮)而麻醉。滴入一滴1%托吡卡胺以放大瞳孔後，藉由在每個動物之一個眼睛的視網膜燒9個孔而誘發脈絡膜新生血管形成(瓦解Bruch’s膜，僅有1個動物，僅能有8個病變，動物5於雷格拉非尼/石蠟組)(病變大小：50μm，射線強度：300-500mW；刺激期間：50ms)使用532nm氬射線。下列製劑係包括：

k)輕質液體石蠟或包含2%(w/v)疏水性二氧化矽之輕質液體石蠟(載體控制組)，n=23

l)於輕質液體石蠟中之雷格拉非尼單水合物20mg/ml懸浮液，n=16

m)懸浮液於包含2%(w/v)疏水性二氧化矽之輕質液體石蠟中之雷格拉非尼單水合物20mg/ml，n=12

於每個製劑中，於21天之完整觀察期間以12：12小時之區間，將50μl每天兩次施用至受感染的眼睛。將所有動物之體重於開始前及研究期間每日紀錄一次。於第21天，使用螢光眼底照相機(Kowa VX-10i，Japan或FF450 plus IRu Retina Camera，Carl Zeiss Meditec，Jena，Germany)進行血管造影。此處，於麻醉及瞳孔放大後，將10%螢光素鈉(染料，溶解於水，0.1mL/kg)予以皮下注射並於注射染料後約2分鐘(早期相)及10分鐘(晚期相)以圖片記錄。螢光素在血管造影之血管滲漏係藉由對組之分配設盲之檢查者根據下列級距評分：有“I級”(無強螢光)，“II級”(強螢光無染料滲漏)，“III級”(早期強螢光及晚期溫和染料滲漏)或“IV級”(早期強螢光及晚期嚴重染料滲漏超越燃燒區域的邊界)。IV級病變被認為有臨床意義且因此被認為是主要的讀取。每隻動物，9個病變中IV級病變之百分比當作原始數據。

製劑k)：

輕質液體石蠟填充至棕色玻璃瓶中，用橡膠塞蓋住並用帶凸緣之鋁密封。23個瓶子中有11個於不低於25kGY之γ-射線來終極滅菌。

任意的將5.0g疏水性膠體二氧化矽(Aerosil R972)添加至206.5632g輕質液體石蠟中並於使用高批量剪切混合器時均質化45分鐘。將介質填充至棕色玻璃瓶用橡膠塞蓋住並用帶凸緣之鋁密封。

製劑l)：

將41.494g微粉化雷格拉非尼單水合物(相當於40.0g雷格拉非尼)懸浮於1676.50g輕質液體石蠟中。將懸浮液於室溫攪拌10分鐘。之後，將懸浮液使用在線高剪切混合器以10,000至12,000rpm予以均質化30分鐘。將溫度控制在不大於40℃。將懸浮液於持續攪拌期間填充至棕色玻璃瓶中並將瓶子用橡膠塞蓋住並用帶凸緣之鋁密封。16個瓶子中有11個於不低於25kGy之γ-射線來終極滅菌。

製劑m)：

將5.0g疏水性膠體二氧化矽(Aerosil R972)添加至206.563g輕質液體石蠟中並於使用高批量剪切混合器時均質化45分鐘。將溫度設定在不大於40℃。將5.187g雷格拉非尼單水合物(相當於5.0g雷格拉非尼)懸浮於該分散介質並將懸浮液於使用高批量剪切混合器時以10,000至12,000rpm均質化45分鐘。將溫度控制在不大於40℃。將懸浮液於持續攪拌期間填充至棕色玻璃瓶中並將瓶子用橡膠塞蓋住並用帶凸緣之鋁密封。12個瓶子中有5個於不低於25kGY之γ-射線來終極滅菌。

結果： A)關於血管滲漏之功效(血管造影分數第21天)：

圖7：於第21天，於含或不含2%疏水性二氧化矽之載體處理組動物(載體=製劑k)，及含或不含2%疏水性二氧化矽之雷格拉非尼處理組動物，分別(石蠟=製劑l及石蠟2%二氧化矽=製劑m)之IV級病變%。數據以平均±SEM來表示。

雖然本發明以其特別具體例揭示，顯而易知其他精於此方面技藝者可在不背離本發明之真實精神及範圍下設計出本發明之其他具體例及變化。申請專利範圍意欲用來包括所有的此等具體例及等同之變化。

Claims

一種局部眼科醫藥組成物，其包括雷格拉非尼(regorafenib)、雷格拉非尼之水合物、溶劑合物或製藥上可接受的鹽或其多晶型物作為活性劑及至少一種醫藥上可接受之載體，其中該組成物為一懸浮液，其包括懸浮於適用之醫藥上可接受之載體的活性劑且其中該組成物不含疏水性二氧化矽。
如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中該組成物不包含任何包括膠體二氧化矽，親水性或疏水性二氧化矽之穩定劑。
如申請專利範圍第1至2項中任一項之醫藥組成物，其包含雷格拉非尼單水合物作為活性劑。
如申請專利範圍第1至3項中任一項之醫藥組成物，其中該活性劑係呈固體型式。
如申請專利範圍第1至4項中任一項之醫藥組成物，其中該活性劑係呈結晶型式。
如申請專利範圍第1至5項中任一項之醫藥組成物，其中該活性劑係呈微結晶型式。
如申請專利範圍第1至6項中任一項之醫藥組成物，其中該於醫藥組成物中之活性劑的濃度以組成物總量計係由0.01至10%重量。
如申請專利範圍第1至7項中任一項之醫藥組成物，其中該醫藥上可接受之載體係選自包括下列者：油醯基聚乙二醇三酸甘油酯，亞油醯基聚乙二醇三酸甘油酯，月桂醯聚乙二醇甘油酯，液態石蠟，輕質液體石蠟，軟石蠟(凡士林)，硬石蠟，蓖麻油，花生油，芝麻油，中鏈三酸甘油酯，鯨蠟硬脂醇，羊毛脂，甘油，丙二醇，聚乙二醇(PEG)或其等之混合物，水或其混合物。
如申請專利範圍第1至8項中任一項之醫藥組成物，其係以非水性載體為基底。
如申請專利範圍第1至9項中任一項之醫藥組成物，其係以疏水性載體為基底。
如申請專利範圍第1至10項中任一項之醫藥組成物，其中該醫藥上可接受之載體係選自包括液態石蠟，輕質液體石蠟或其混合物者。
如申請專利範圍第1至11項中任一項之醫藥組成物，其進一步包括製藥上可接受的賦形劑，如表面活性劑，聚合物基底載體如膠凝劑，有機共溶劑，pH活性組成份，滲透活性組成份及防腐劑。
一種製備如申請專利範圍第1至12項中任一項之醫藥組成物的方法，其中該活性劑係懸浮於一適用之醫藥上可接受之載體上任意的再於一種或多種製藥上可接受的賦形劑存在之下，並將該懸浮液均質化。
如申請專利範圍第1至12項中任一項之醫藥組成物，其係用來治療或預防選自包括下列之眼科病症：跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)，脈絡膜新生血管形成(CNV)，脈絡膜新生血管性膜(CNVM)，黃斑囊樣水腫(CME)，外延視網膜(ERM)及黃斑裂孔，與近視有關之脈絡膜新生血管形成，血管紋，視網膜剝離，糖尿病性視網膜病變，糖尿病性黃斑水腫(DME)，視網膜色素上皮細胞(RPE)之萎縮性變化，視網膜色素上皮細胞(RPE)之增生性變化，視網膜靜脈阻塞，脈絡膜視網膜靜脈阻塞，黃斑水腫，視網膜靜脈阻塞造成之黃斑水腫，視網膜色素變性，Stargardt氏病，青光眼，發炎狀況，白內障，屈光異常，圓錐角膜，早產兒視網膜病變，於眼球前部之血管生成，角膜炎，角膜移植或角膜成形術後的角膜的血管生成，缺氧造成的角膜血管生成(隱形眼鏡過度配戴)，翼狀胬肉結膜，視網膜水腫及視網膜內水腫。
如申請專利範圍第14項之醫藥組成物，其係用來治療或預防選自包括下列之眼科病症：乾性AMD，濕性AMD或脈絡膜新生血管形成(CNV)。
一種治療或預防選自包括下列之眼科病症的方法：跟年齡有關之黃斑部病變(AMD)，脈絡膜新生血管形成(CNV)，脈絡膜新生血管性膜(CNVM)，黃斑囊樣水腫(CME)，外延視網膜(ERM)及黃斑裂孔，與近視有關之脈絡膜新生血管形成，血管紋，視網膜剝離，糖尿病性視網膜病變，糖尿病性黃斑水腫(DME)，視網膜色素上皮細胞(RPE)之萎縮性變化，視網膜色素上皮細胞(RPE)之增生性變化，視網膜靜脈阻塞，脈絡膜視網膜靜脈阻塞，黃斑水腫，視網膜靜脈阻塞造成之黃斑水腫，視網膜色素變性，Stargardt氏病，青光眼，發炎狀況，白內障，屈光異常，圓錐角膜，早產兒視網膜病變，眼球前部之血管生成，角膜炎，角膜移植或角膜成形術後之角膜的血管生成，缺氧造成的角膜的血管生成(隱形眼鏡過度配戴)，翼狀胬肉結膜，視網膜水腫及視網膜內水腫，其包括將如申請專利範圍第1至12項中任一項包含製藥上有效量之活性劑之醫藥組成物給藥。
一種局部眼科醫藥組成物，其係用來治療或預防眼球後部疾病，其中該組成物係包括適用於治療或預防眼球後部疾病之懸浮於適用之醫藥上可接受之載體之活性劑的懸浮液，其中組成物不含疏水性二氧化矽。
如申請專利範圍第17項之局部眼科醫藥組成物，其中該組成物不含有任何包括膠體二氧化矽，親水性或疏水性二氧化矽之穩定劑。
如申請專利範圍第17或18項中任一項之局部眼科醫藥組成物，其中該醫藥上可接受之載體為非水性載體。
如申請專利範圍第19項之局部眼科醫藥組成物，其中該醫藥上可接受之載體為疏水性載體。
如申請專利範圍第20項之局部眼科醫藥組成物，其中該醫藥上可接受之載體係選自包括液態石蠟，輕質液體石蠟或其混合物者。