TW201429478A - 用於局部施用之包含玻尿酸和幾丁聚醣之黏膜黏性組成物 - Google Patents

用於局部施用之包含玻尿酸和幾丁聚醣之黏膜黏性組成物 Download PDF

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Abstract

本發明係關於玻尿酸與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽組合之水性組成物，其具有熱膠凝及黏膜黏性性質。此等性質允許其藉由局部投予而用於治療黏膜損傷，且特定言之用於治療體腔黏膜，其中尤其關注源自用於治療癌症之化學療法及/或放射療法之損傷。

Description

用於局部施用之包含玻尿酸和幾丁聚醣之黏膜黏性組成物
本發明係關於玻尿酸與幾丁聚醣及甘油磷酸鹽組合之水性組成物，其具有熱膠凝及黏膜黏性性質，及其藉由局部投予而用於黏膜創傷再上皮化(re-epithelisation)及修復之用途。
玻尿酸(下文稱為HA)為一種熟知的高分子量生物多醣，其具有聚陰離子性質且屬於非硫酸鹽葡萄糖胺聚糖類。其很大程度上存在於脊椎動物之所有結締組織中、關節滑液及軟骨(其中玻尿酸為主要組分)中及眼內球液(eye endobulbar fluid)中。
在自然界中，其分子量可達至高於10,000kDa，然而，如所已知的，當提取及操作時，玻尿酸始終為通常利用平均分子量鑑別之部分，其由分子量包含在一定分子量範圍內之不同聚合物形成，亦即其特性在於多分散性指數。
其廣泛用於許多醫學應用，包括投予眼睛、關節、黏膜及皮膚以用於治療多種病理病狀。
目前，提取自動物來源或細菌培養液之此生物聚合物之許多部分長期用於病理病狀，諸如創傷癒合、關節(arthrosic)/關節炎疾病及眼睛手術，此等用途基本上係基於其生物學作用且基於其水溶液之非牛頓(non-newtonian)物理性質(例如黏度及/或其結構黏彈性)。黏度及/或黏彈 性質均主要視HA部分之分子量範圍、聚合物濃度而定，然而諸如與化學試劑之鏈交聯程度之其他技術特徵可有助於提高流變效能以及有助於所主張之分子量。
實際上，HA之流變性質受所考慮之樣品之不同技術特徵之 組合影響或由其產生。儘管如此，當需要較高黏度及/或黏彈性質時，常識及慣例提及高分子量HA部分，尤其例如在膝關節發炎性病狀或眼睛手術中，其中玻尿酸由於其黏度/黏彈性質而用於滑液或眼內球液之增補目的。
就關於創傷癒合性質而言，此性質主要歸因於具有基本上低 分子量之玻尿酸部分及分子量為50至100kDa之此多醣部分已據稱在水溶液中展現較低黏度，但具有促進創傷組織修復之能力(US 5,925,626)。
所主張之HA部分(與其他低分子量HA部分一樣)並不展 示任何黏膜黏性性質，然而此性質可尤其適用於其局部施用。
實際上，就創傷癒合，且特定言之治療體內腔之內黏膜組織 (其中創傷敷料不適用)而言，主要需要使適量玻尿酸可供用於待治療部位且持續足以利用其生物活性之時間。
WO2009/024677揭示玻尿酸(較佳與維生素相關)之用途， 其用於製備針對藉由局部投予而改進上下呼吸道、腸道及眼睛之黏膜組織之保護的組成物。適用於腸道黏膜治療之組成物係以耐胃藥劑形式經口投予。
然而，就改進在施用部位之滯留時間而言，尤其重要之特徵 為所使用之組成物之生物黏附及黏膜黏性性質。
舉例而言，針對治療皮膚及黏膜上皮，揭示與合成聚合物(諸如聚乙烯醇及聚卡珀菲(polycarbophyl))相關之生物聚合物(諸如褐藻酸、玻尿酸及硫酸皮膚素)之高度生物黏附及黏膜黏性組成物(WO96/03973)。此等組成物據稱適用於治療皮膚及黏膜組織乾燥及脫水以及為用於活性物 質之經皮吸收之載劑。
由於具有結合高量水及形成水凝膠之能力而用於皮膚及黏 膜局部施用因而目前受到大量關注之生物聚合物為幾丁聚醣。幾丁聚醣為由葡糖胺及N-乙醯基-葡糖胺單元組成之幾丁質之去乙醯化衍生物；其為生物相容的、生物可降解的、無毒性的陽離子聚合物，不溶於水，然而可溶於至多pH 6.2之經稀釋的水性酸。其廣泛用於許多應用，但其在中性溶液中之不良溶解度對其在生理情況下之使用構成主要障礙。為了克服此缺點，幾丁聚醣主鏈在末端經多種化學修飾，得到共價接枝或經交聯之幾丁聚醣，且以此方式改進其水溶解度及膠凝性質。然而，此類化學修飾常常需要使用有毒試劑，該等有毒試劑在某種程度上妨礙此等產物向生物醫學應用轉化。
一種避免使用化學試劑之可能的方式為製備物理性幾丁聚 醣水凝膠，藉由與由合成聚合物及生物聚合物(分別諸如為聚乙烯醇及陰離子多醣，包括玻尿酸)兩者組成之聚陰離子進行離子相互作用來利用其在形成聚電解質複合物(polyelectrolyte complex；PEC)方面之陽離子性質(Berger J.等人，Eur.J.Pharmaceutics and Biopharmaceutics,2004,57,35-52)。
然而，由於向幾丁聚醣溶液中添加HA構成干擾要素，具潛 在衝突性，故形成在溶液中含有幾丁聚醣及HA之均質分散之穩定的水凝膠具挑戰性。實際上，幾丁聚醣之基本電荷引起與HA之陰離子電荷進行陰離子相互作用，且因此得到伴有相分離之HA-幾丁聚醣聚電解質複合物之沈澱。此現象很常見以致其被廣發利用且報導為製造微米或奈米粒子之策略(一些實施例列於先前所引用之Berger J.等人中)。
幾丁聚醣之另一特有特性為其與攜有單一磷酸根陰離子頭 基之多元醇，且特定言之與甘油磷酸鹽形成熱敏性凝膠之能力。
US 6,344,488揭示離子多醣凝膠之經溫度控制及pH依賴性 形成，該等離子多醣凝膠由幾丁聚醣/有機磷酸鹽水溶液之系統組成，在包含30℃至60℃之溫度及包含6.5至7.4之pH值內呈現溶膠/凝膠轉變。在高於6.9之pH值下獲得之凝膠具熱不可逆性，而在低於6.9之pH值下獲得之凝膠具熱可逆性。此外，在該專利中，明確地指出幾丁聚醣具有包含10至2,000kDa之分子量，然而該專利對幾丁聚醣之另一特徵，亦即去乙醯化程度沒有提及。較佳有機磷酸鹽為甘油磷酸鹽。US 6,344,488亦揭示製備水凝膠之方法且詳細描述其在加熱之後的狀態，然而不包括添加其他活性物質或其他多醣(諸如玻尿酸)之情況。
此後，熱敏性凝膠藉由幾丁聚醣及甘油磷酸鹽之結合而形成 之機制經同一作者報導(Chenite A.等人，Biomaterials,2000,21,2155-2161；Chenite A.等人，Carbohydr.Polym.,2001,46,39-47)。根據資料顯示，甘油磷酸鹽之存在允許幾丁聚醣在低溫下之較高水合作用，由此促進溶液在接近中性之pH值下之穩定性。值得注意的是，在參考文獻中，考慮到幾丁聚醣之化學特徵(亦即去乙醯化程度及分子量)。所展示之結果指出，分子量對膠凝溫度無顯著影響，而去乙醯化程度似乎對於溶膠/凝膠轉變發生之溫度至關重要。特定言之，初期膠凝之溫度隨著去乙醯化程度降低而升高。對於去乙醯化程度為70%、81%及91%之幾丁聚醣，所報導之膠凝溫度分別為66℃、57℃及37℃。去乙醯化程度亦對水凝膠穩定性至關重要(Ruel-Gariépy E.等人，Int.J.Pharmaceutics,2000,203,89-98)。
關於製造含有幾丁聚醣及玻尿酸之熱敏性水凝膠之資料並 不常見。
Fang等人(Eur.J.Pharmaceutics and Biopharmaceutics,2008,68, 626-636)及Chen等人(Polymer,2009,50,107-116)報導關於由幾丁聚醣及玻尿酸組成之熱敏性水凝膠，但在此兩種情況下，均需要幾丁聚醣、HA或兩者進行化學修飾以克服此等分子之間的不相容性。
如先前所提及，實際上，組合幾丁聚醣及聚陰離子多醣(諸 如玻尿酸)之均質分散之水凝膠的製備並非尋常問題。
本發明之目的為提供在水溶液中包含玻尿酸之組成物，其藉由局部投予而用於治療黏膜損傷，且特定言之用於治療創傷性起因、醫源性起因或相關病症起因之體腔(諸如口腔、鼻腔、胃腸腔、結腸直腸腔及陰道腔)之黏膜。HA之投予係針對緩解黏膜損傷，其中尤其關注源自用於治療癌症之化學療法及/或放射療法之損傷。
就諸如黏膜組織之組織之創傷癒合而言，主要需要使適量玻尿酸可供用於部位與損傷接觸足以提供組織之緩解且隨後觸發癒合過程之時間。
本發明之另一目的為提供在水溶液中包含玻尿酸之組成物，該等組成物能夠形成水凝膠，該水凝膠較佳在局部施用之後原位形成。
出於前述目的，一種理想組成物應具有生物相容性、安全性及黏膜黏性之特性，以確保在投予部位處具良好持久性。在形成水凝膠方面具熱敏性之能力鑒於所實行之施用亦為相關特徵。
設想玻尿酸與幾丁聚醣及甘油磷酸鈉組合之組成物潛在適用於在待治療部位處傳遞玻尿酸。
因此，在第一態樣中，本發明之目的為在水溶液中包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽摻合之玻尿酸及其鹽之組成物，其中該等組成物在35℃-38℃下具有溶膠-凝膠轉變性質，因此在該等溫度下形成水凝膠。此外，此等組成物另外賦有黏膜黏性性質。包含與幾丁聚醣及甘油磷酸鹽摻合之玻尿酸及其鹽之組成物視情況另外包含無機或有機酸鹽。
在另一態樣中，本發明之另一目的為包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽摻合之玻尿酸及其鹽之水溶液之用途，其用於製備在 35℃-38℃下具有溶膠-凝膠轉變性質之組成物，該等組成物藉由局部投予而用於治療人體口腔、鼻腔、胃腸腔、陰道腔、結腸直腸腔之創傷性、醫源性或病症相關起因之黏膜創傷。較佳用途為用於源自化學療法及/或放射療法之黏膜損傷之緩解(再上皮化及修復)，且特定言之用於源自用於治療結腸直腸癌之放射療法之結腸直腸黏膜損傷。
此等目的及其他目的(其將根據以下【實施方式】而變得明 確)係由本發明之水溶液對象中包含與幾丁聚醣及甘油磷酸鹽組合之玻尿酸的組成物來達成。
本發明之其他特性及優勢將描述於以下本發明之較佳(然而 不為全部)具體實例之詳細描述中。
描述係參考所附圖式給出，該等圖式完全出於指示目的而提供，且因此不具限制性。
圖1展示根據實施例1至3及7製備之組成物中結合水百分比相對於幾丁聚醣與HA濃度之間的比率。
圖2展示隨時間自實施例1之組成物釋放之HA百分比；長條表示標準偏差(n=3)。
圖3展示隨時間自對應於組成物1之基於Carbopol之組成物釋放之HA百分比；長條表示標準偏差(n=3)。
圖4展示隨時間自實施例2之基於幾丁聚醣之組成物釋放之HA百分比；長條表示標準偏差(n=3)。
圖5展示隨時間自對應於實施例2之組成物之基於Carbopol之組成物釋放的HA百分比；長條表示標準偏差(n=3)。
出於本發明之目的，整個描述中所用之以下術語及表述定義 如下。
術語「玻尿酸(hyaluronic acid)」在本文中意欲意謂提取自 動物來源或藉由微生物醱酵獲得之玻尿酸部分，其分子量在7-250kDa(7,000-250,000)範圍內。根據Ph.Eur.7.0,2011第2928頁所測定，此部分之固有黏度低於0.65m3/kg。
出於本發明之目的，較佳玻尿酸為分子量在30至250kDa 範圍內且更佳在30及100kDa範圍內之部分。玻尿酸較佳呈具有鹼金屬之鹽的形式，且更佳呈鈉鹽之形式，亦即玻尿酸鈉。
術語「幾丁聚醣(chitosan)」在本文中意欲定義源自幾丁質 去乙醯化之多醣，其去乙醯化程度(本文中稱為DD)在60%至80%範圍內，其獲自諸如甲殼(crustaceous shell)之天然來源或真菌之細胞壁。該幾丁聚醣之分子量包含在50至300kDa範圍內，且較佳在80及200kDa範圍內。
出於本發明之目的，較佳幾丁聚醣之去乙醯化程度為約70% 至80%。75%去乙醯化之幾丁聚醣最佳，且為在20℃下於1%乙酸中在1%濃度(w/v)下黏度在30與70mPas之間的幾丁聚醣。
此外，具有所提及之去乙醯化程度之幾丁聚醣可呈鹽形式， 且可選自鹽酸硫酸、乙酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、抗壞血酸、反丁烯二酸、己二酸幾丁聚醣鹽。
術語「甘油磷酸鹽(glycerophosphate)」在本文中意欲意謂D 或Lα-甘油磷酸、β-甘油磷酸及其混合物之鹼金屬或鹼土金屬(較佳為鈉)鹽。其可諸如藉由卵磷脂之水解或藉由甘油之磷酸化自天然來源來製備。 出於本發明之目的，較佳甘油磷酸鹽為β-甘油磷酸之鈉鹽，且係根據Ph.Eur.7.0，亦即作為具有4至6個結晶水分子之結晶水合物材料。五水合甘油磷酸鈉為最佳。
術語「多醣溶液(polysaccharide solution)」在本文中意欲意 謂在介於0℃至室溫(例如15℃-25℃)範圍內之溫度下不膠凝且穩定之相關多醣的澄清水溶液。
術語「溶膠/凝膠轉變溫度(sol/gel transition temperature)」及 「膠凝溫度(gelation temperature)」等效且在本文中意欲意謂在34℃至約40℃範圍內之任何溫度，較佳為35℃-38℃，在該等溫度下包含玻尿酸、幾丁聚醣及甘油磷酸鹽之澄清水溶液轉變成均質分散之水凝膠且不形成任何沈澱及相分離。
為了滿足本發明之目的，亦即為了提供包含玻尿酸之黏膜黏 性水凝膠組成物以用於將其局部施用於體腔內黏膜組織上，設想基於幾丁聚醣及甘油磷酸鈉溶液之水性組成物為用於發展適合醫學裝置之潛在適用系統。如先前技術中所提及，已知此類系統具有能夠形成熱敏性水凝膠、在加熱時其黏度持續增加之獨特特徵，而黏膜黏性性質或其他組分之添加未經研究。
儘管如此，預期向此系統中添加聚陰離子(諸如玻尿酸)會 產生先前所提及之歸因於以水溶液中兩種多醣之間的彼此不相容性為例之技術問題。
因此，對於賦予在35℃-38℃下溶膠-凝膠轉變及黏膜黏性性 質之在水溶液中包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽組合之玻尿酸及其鹽的組成物，必須解決此不相容性，以便獲得穩定水凝膠且避免藉由幾丁聚醣與玻尿酸之間的離子相互作用而形成聚電解質複合物及相分離。
此目的之達成依賴於一系列技術特徵：所使用之多醣之特 性、其與pH值之間的比率。
HA已因其關於創傷癒合之已知性質且然而甚至由於技術原 因而選自呈現低分子量之部分。實際上，文獻中已廣泛報導，自HA降解獲得之天然存在之片段積極參與組織重塑及再生，因此在創傷癒合中起關鍵 作用，且同時已知，聚合物大小可深度影響其在組成物中之狀態，因為兩條聚合鏈之間的相互作用次數嚴格地視其分子大小而定。因此，用於本發明之組成物之HA之分子量為7至250kDa，且較佳為30至250kDa，且更佳為30至100kDA。
至於幾丁聚醣，與針對本發明之組成物之先前技術中所揭示 相反，關於在約35℃-38℃之生理範圍內之凝膠溫度最佳執行之幾丁聚醣為去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣，而在幾丁聚醣具有95%之DD之情況下，所獲得之水凝膠在介於0℃與40℃之間的溫度下展示形成凝聚層伴有突然相分離。因此，用於本發明之組成物之幾丁聚醣或其鹽之DD程度為60%-80%，且較佳為70%-80%，且更佳DD程度為75%。
在水溶液中包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鈉組合之玻 尿酸及其鹽之組成物的最關鍵特徵為幾丁聚醣與HA之間的比率。考慮幾丁聚醣，此等比率可包含1：0.6(HA：幾丁聚醣)及至1：45(HA：幾丁聚醣)。 HA與幾丁聚醣之間的比率較佳為：1：10(HA：幾丁聚醣)、1：6(HA：幾丁聚醣)、1：3(HA：幾丁聚醣)及1：1.8(HA：幾丁聚醣)。
就熱膠凝能力而言，幾丁聚醣與甘油磷酸鹽之間的比率可包 含1：0.8至1：15(幾丁聚醣：甘油磷酸鹽)。較佳比率為1：1.8至1：7.0(幾丁聚醣：甘油磷酸鹽)。
因此，在本發明之水溶液中包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽組合之玻尿酸及其鹽之本發明組成物的一個具體實例中，組分之含量在以下範圍內：- 0.1w/v%至1.5w/v%之玻尿酸；- 1.0w/v%至4.5w/v%之幾丁聚醣；及- 呈無水物質形式之4.0w/v%至15w/v%之甘油磷酸鹽
且pH值包含6.9至7.1。
在一較佳具體實例中，本發明組成物包含：- 0.3至1.0之玻尿酸；- 1.8至3.0之幾丁聚醣；及- 呈無水物質形式之5.6至12.7之甘油磷酸鹽
且pH值包含6.9至7.1，在此情況下，當甘油磷酸鹽係根據Ph.Eur.7.0且為五水合物質時，上文所報導之範圍為8w/v%至18w/v%。此外，出於本發明之目的，五水合甘油磷酸鹽較佳為8w/v%。
因此，本發明之較佳組成為：玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%；玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%；玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%；及玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%。最後一個組成為最佳。
當所使用之幾丁聚醣不呈鹽形式時，組成物可另外包含在0.6w/v%至0.9w/v%範圍內之無機或有機酸，以便使幾丁聚醣溶解於水中，且得到幾乎在生理範圍內之pH值，亦即6.9及7.1。該等無機或有機酸係選自由以下組成之群：鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸抗壞血酸、蘋果酸、琥珀酸、己二酸或反丁烯二酸，酸較佳為乳酸。
在於37℃下加熱時能夠得到厚凝膠之組成物中，兩種組成物為最佳：包含0.3% HA、3%幾丁聚醣、8%五水合甘油磷酸鈉及0.9%乳酸之組成物，及包含1.0% HA、1.8%幾丁聚醣、8.0%五水合甘油磷酸鈉及0.6%乳酸之組成物。
在一個具體實例中，組成物可藉以下方式製備：將單一組分之水溶液以足夠比例混合，從而得到在介於0℃至25℃範圍內之溫度下所追求之濃度。當幾丁聚醣不呈鹽形式時，幾丁聚醣之水溶液添加有選自以 下之無機或有機酸：鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸、抗壞血酸、蘋果酸、琥珀酸、己二酸或反丁烯二酸，且較佳添加有乳酸。製備溫度並不影響在37℃下加熱時之膠凝，然而在清澈度及均質性方面強烈影響組成物之外觀。實際上，在大於10℃之溫度下製備之組成物可呈現乳白光/混濁伴有相分離之跡象。出於此原因，0℃至4℃之溫度為製備組成物之較佳起始溫度。
水對此等組成物之狀態起到非常關鍵的作用，特定言之結合 水之量越高，凝膠特性越好：調配物中自由水之定量佔全部水之約90%，顯著影響組成物之穩定性。在所測試之儲存條件中之任一者中，亦即在4℃下或在25℃下或在40℃下，組成物中無一者展示明顯的熱可逆性跡象，除了新鮮製備或4℃儲存之後的具有較高HA含量之組成物之黏度略微降低。
在另一具體實例中，本發明組成物可藉由製備欲在投予時混 合之兩種獨立起始水溶液(一者含有幾丁聚醣之酸性水溶液或幾丁聚醣鹽之水溶液，且另一者含有甘油磷酸鈉及HA之水溶液)來獲得。起始溶液相對於所需組成物中之最終濃度可為兩倍濃縮的，且可在室溫下經由適合裝置(例如藉由將兩個注射器連接至Y型接頭而形成之自動注射器)混合。 在此等條件中，所得溶液當在37℃下加熱時仍保持在不到15分鐘內變為厚凝膠之能力。此現象令人非常感興趣，尤其考慮到所有步驟均可在室溫下進行，由此消除在混合之前冷卻溶液之需要，且水凝膠可在向需要治療之個體投予時原位形成。
下文簡要報導用本發明組成物之一些具體實例獲得且詳細 揭示於實施例中之結果。
作為第一步，如實施例製備之組成物中之水含量係藉由熱解 重量分析(Thermo Gravimetric Analvsis；TGA)來定量，產生與標稱量良好一致之結果(資料未展示)。水對組成物之狀態起到非常關鍵的作用，特定言之，結合水之量越高，膠凝特性越好，因為其與幾丁聚醣之聚合鏈之相 互作用決定組成物變為凝膠之能力以及其穩定性。為了定量可凍結之自由水之量，對具有不同含量之幾丁聚醣及玻尿酸之組成物進行差示掃描熱量測定(Differential Scanning Calorimetry；DSC)：所得自由水之量分別為87.2%(組成比率幾丁聚醣：HA等於10：1)及91.9%(組成比率幾丁聚醣：HA等於1.8：1)。換言之，結合水之量對於組成比率幾丁聚醣：HA等於10：1而言為12.8且對於組成比率幾丁聚醣：HA等於1.8：1而言為8.1。此結果意謂結合水之量伴隨幾丁聚醣與玻尿酸之間的相對比例而增加，由此表明水之結合主要歸因於幾丁聚醣。本發明之組成物已在活體外實驗中針對黏膜黏性進行測試。選擇豬黏膜作為模型，且相對於視為黃金標準之基於Carbopol®之調配物進行沖洗測試(wash-off test)。測試結果顯示，所測試之組成物相對於相應基於Carbopol®之組成物具有較高黏膜黏性。
由此，本發明組成物之獨特特徵為：- 存在生物學上安全且具生物相容性之組分；- 在水溶液中共存諸如幾丁聚醣之鹼性化合物及諸如玻尿酸之酸性化合物，且無需幾丁聚醣及玻尿酸兩者之化學修飾，由此完全避免源自化學或光起始之交聯之毒性的任何風險；- 在37℃下形成水凝膠之能力；- 較高黏膜黏性，顯著高於黃金標準。
總之，本發明之組成物構成一種創新的用於玻尿酸之黏膜投予之醫學傳遞系統。其具有允許溶液中共存諸如幾丁聚醣之鹼性化合物及諸如玻尿酸之酸性化合物之獨特特性。此外，其在37℃下凝膠化之能力伴隨較高黏膜黏性構成針對投予原位形成之水凝膠及針對HA在損傷部位之有效及持久定位的良好解決方案。
實施例
在以下實施例中描述組成物之製備，其中玻尿酸、幾丁聚醣 及甘油磷酸鹽以不同量組合，且幾丁聚醣之去乙醯化程度為75%(實施例1至8)或，作為比較，去乙醯化程度為95%(實施例A至F)。下文亦描述對本發明之組成物進行之特性化測試。
實施例1 製備玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備五水合甘油磷酸鈉(NaGP)之50w/v%水溶液及玻尿酸鈉(HA)之10w/v%水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後，所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及NaGP 8.0w/v%之最終濃度，將已知體積之50w/v% NaGP水溶液及10w/v% HA鈉水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳酸濃度=0.9w/v%)。在室溫下，三種水溶液用渦旋或磁性攪拌混合，得到最終pH值為6.9之均質且澄清的溶液。
實施例2 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備五水合甘油磷酸鈉(NaGP)之50w/v%水溶液及玻尿酸鈉(HA)之10w/v%水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得三種組分之最終濃度(玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及NaGP 8.0w/v%)，將已知體積之50w/v% NaGP水溶液及10w/v% HA水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳 酸濃度=0.6w/v%)。在室溫下，三種組分水溶液之混合物用渦旋或磁性攪拌混合，得到最終pH值為6.9之均質且澄清的溶液。
實施例3 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備五水合甘油磷酸鈉(NaGP)之50w/v%水溶液及玻尿酸鈉(HA)之10w/v%水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後，所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得三種組分之最終濃度(玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及NaGP 8.0w/v%)，將已知體積之50w/v% NaGP鈉水溶液及10w/v% HA鈉水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳酸濃度=0.9w/v%)。在室溫下，三種組分水溶液之混合物用渦旋或磁性攪拌混合，得到最終pH值為6.9之均質且澄清的溶液。
實施例4 製備玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉18w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備50w/v%甘油磷酸鈉(NaGP)水溶液及10w/v%玻尿酸鈉(HA)水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後，所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得三種組分之最終濃度(玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及NaGP鈉18w/v%)，將已知體積之50w/v% NaGP水溶液及10w/v% HA鈉水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳酸濃度=0.9w/v%)。在室溫下，三種組分水溶液之混合物用渦旋或磁 性攪拌混合，得到最終pH值為7.0之均質且澄清的溶液。
實施例5 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及五水合甘油磷酸鈉18w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備五水合甘油磷酸鈉(NaGP)之50w/v%水溶液及玻尿酸鈉(HA)之10w/v%水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後，所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得三種組分之最終濃度(玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣 1.8w/v%及NaGP 18w/v%)，將已知體積之50w/v% NaGP鈉水溶液及10w/v% HA水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳酸濃度=0.6w/v%)。在室溫下，三種組分水溶液之混合物用渦旋或磁性攪拌混合，得到最終pH值為7.1之均質且澄清的溶液。
實施例6 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉18w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備五水合甘油磷酸鈉(NaGP)之50w/v%水溶液及玻尿酸鈉(HA)之10w/v%水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後，所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得三種組分之最終濃度(玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及NaGP 18w/v%)，將已知體積之50w/v% NaGP水溶液及10w/v% HA水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳酸濃度=0.9w/v%)。在室溫下，三種組分水溶液之混合物用渦旋或磁性攪拌混合，得到最終pH值為7.0之均質且澄清的溶液。
實施例7 製備玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
幾丁聚醣之第一水溶液(4w/v%)係藉由向去乙醯化程度為75%之幾丁聚醣之水分散液中添加乳酸至1w/v%的濃度來製備。分別製備五水合甘油磷酸鈉(NaGP)之50w/v%水溶液及玻尿酸鈉(HA)之10w/v%水溶液。所有水溶液均在0℃下製備。隨後，所獲得之水溶液在介於0℃至25℃之間的溫度下於低溫恆溫器中穩定化。
為了獲得三種組分之最終濃度(玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及NaGP鈉8w/v%)，將已知體積之50w/v% NaGP水溶液及10w/v% HA鈉水溶液的樣品添加至已知體積之4%幾丁聚醣之第一水溶液的樣品中(乳酸濃度=0.9w/v%)。在室溫下，三種組分水溶液之混合物用渦旋或磁性攪拌混合，得到最終pH值為6.8之均質且澄清的溶液。
實施例8 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
實施例2之組成物用允許兩種不同溶液瞬時混合之替代方法製備。
起始溶液於室溫下製備，相對於所需組成物中之最終濃度為兩倍濃縮的，且經由自動注射器以相同速率混合。
更詳細言之，3.6w/v%幾丁聚醣溶液用1.2w/v%乳酸製備。同時，32w/v%五水合甘油磷酸鈉(NaGP)水溶液及4w/v%玻尿酸鈉(HA)水溶液經分別製備，隨後以相同比率混合，以便具有16% NaGP濃度及2% HA濃度。
各5mL之兩種所得溶液用安裝在自動注射器上速率設定為50μL/min之2個注射器取出。藉由將兩個注射器連接至Y型接頭來允許兩種溶液混合。
在此等條件中，所得組成物為最終pH值為7.1之均質且澄清的溶液。
實施例A 製備玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
實施例1之製備使用去乙醯化程度為95%之幾丁聚醣製備。記錄伴有凝聚層沈澱之相分離。
實施例B 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8.w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
實施例2之製備使用去乙醯化程度為95%之幾丁聚醣製備。記錄伴有凝聚層沈澱之相分離。
實施例C 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉8.0w/v%之組成物.
實施例3之製備使用去乙醯化程度為95%之幾丁聚醣製備。記錄伴有凝聚層沈澱之相分離。
實施例D 製備玻尿酸0.3w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉18w/v%之組成物.
實施例4之製備使用去乙醯化程度為95%之幾丁聚醣製備。記錄伴有凝聚層沈澱之相分離。
實施例E 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣1.8.w/v%及五水合甘油磷酸鈉18w/v%之組成物.
實施例5之製備使用去乙醯化程度為95%之幾丁聚醣製備。記錄伴有凝聚層沈澱之相分離。
實施例F 製備玻尿酸1.0w/v%、幾丁聚醣3.0w/v%及五水合甘油磷酸鈉18w/v%之組成物.
實施例6之製備使用去乙醯化程度為95%之幾丁聚醣製 備。記錄伴有凝聚層沈澱之相分離。
實施例9 實施例1、2D及E之組成物之濁度評估
根據實施例1、2D及E製備之最終溶液之濁度係藉由使用配備有光程為1cm之石英光析槽之V530 UV-Vis分光光度計(Jasco,Japan)在590nm下讀取該等溶液之透光率來測定。
結果報導於表1。
報導於表1中之資料指出，實施例D及E之組成物由於其透射僅3%-4%之入射光而為不透明溶液，而實施例1及2之組成物為透明且澄清的溶液。
實施例10 與根據實施例A至F製備之組成物相比根據實施例1至6製備之組成物之熱膠凝作用
所製備之水性組成物之溶膠-凝膠轉變性質係藉由在室溫(15℃-25℃)下量測與在37℃下膠凝後量測之黏度之間的黏度差異(△黏度)來評估。黏度量測使用配備有R7型軸(Fungila S.A.,Italy)之Brookfield型黏度計Visco-Star-R進行。
分析在以下條件下進行：- 起始溫度：0℃-0.5℃；- 在起始溫度下之穩定時間：15分鐘；- 在室溫下(15℃-25℃)之穩定時間：30分鐘；- 在37℃下於恆溫水浴中加熱12-16小時； - 軸速率(100rpm)。
結果報導於表2。
如結果所示，幾丁聚醣之去乙醯化程度在所測試組成物之溶膠-凝膠轉變中似乎起關鍵作用。
表2中所報導之資料之統計分析證實，對熱膠凝作用具較高統計顯著性之作用係由幾丁聚醣之去乙醯化程度呈現(p值=3×10-4)。較低統計顯著性係由乳酸濃度之作用呈現(p值=0.025)，而幾丁聚醣、HA及NaGP之濃度之作用不具顯著性(p值分別等於0.15、0.69及0.59)。
該等作用之此分析允許得出以下結論，HA及NaGP之濃度在所考慮之濃度範圍內對調配物之pH值及產生熱膠凝作用之能力實際上無影響，而乳酸濃度經證實為pH值及熱膠凝作用兩者之關鍵參數。
pH值不受用於熱膠凝作用之加熱處理影響。
實施例11 在不同溫度下根據實施例1、3、4及6製備之組成物之熱膠凝作用
測試組成物以便找出發生熱膠凝作用之最低溫度。考慮四個不同溫度，亦即30℃、34.5℃、35.5℃及37.5℃。
所獲得之結果報導於表3。
可觀測到，所測試之組成物在30℃下無一者產生熱膠凝作用。實施例4及6之組成物在34.5℃下經歷溶膠-凝膠轉變，而對於實施例1及3之組成物，該現象在約37℃下觀測到。
實施例12 根據實施例1、2、3、7及8製備之組成物之差示掃描熱量測定(DSC)分析
用於量測自由(可凍結)水之量的DSC分析用由STARe軟體(Mettler Toledo,USA)驅動之DSC 821e(Mettler Toledo,USA)進行。此測定係基於根據以下等式(1)與每單位重量純水之熔化焓相比對樣品中水之熔化焓進行的量測：F w =△Hf s /(△Hf pw /m pw ) (1)
其中：F w 為測試樣品中自由水之質量；△Hf s 為測試樣品中水之熔化焓；△Hf pw 為質量為m pw 之純水樣品之熔化焓。
結合水之百分比(B w )係根據以下等式(2)計算：B w =(T w -F w )/T w ×100 (2)
其中：T w 為利用TGA(TG 50，Mettler Toledo USA，由STARe軟體(Mettler Toledo Switzerland)驅動)測定之樣品中之水的總量。
樣品中結合水之百分比與幾丁聚醣及玻尿酸之間的相關比率一起報導於表4。
在幾丁聚醣/玻尿酸濃度比率與結合水之百分比之間發現線性相關(R2=0.996)(圖1)。
由此表明，隨著幾丁聚醣與HA之間的比率增大，結合水之百分比同樣增大。此結果可能與幾丁聚醣與HA之間的相互作用有關，而非僅僅與幾丁聚醣相對於HA與水相互作用之能力較好有關。實際上，幾丁聚醣更可供用於其較少參與與玻尿酸之相互作用之組成物中的結合水。
具有一半幾丁聚醣濃度(0.9%)之根據實施例8製備之組成物亦經測試。此調配物不完全澄清，表明組分之水合作用不完全。此外，其未能產生熱膠凝作用。DSC及TGA分析指出，起始溶液中不存在結合水。
實施例13 根據實施例1及2製備之組成物之黏膜黏性分析：活體外黏膜黏附
組成物之黏膜黏性潛力係利用自Lehr等人所報導之方法(Lehr A.等人，Int.J.Pharmaceutics,1992,78,43-48)改編之沖洗測試測定。
新鮮切離之豬(大白豬(Large White)，Landrance，10-11個月大，145-190kg重)腸在屠宰一小時之內獲自當地屠宰場(Parma,Italy)。腸外植體(至少30cm之下行結腸，切割自左曲及sigma區)由獸醫進行。 新鮮切離之豬腸於等滲鹽水溶液中在冰浴中在處死一小時內運送至實驗室。在用等滲鹽水溶液(500mL至少三次)澈底洗滌之後，將各腸標本沿其長度切割，且用手術剪將黏膜與下伏結締組織小心地分離，注意不要損壞黏膜結構。
豬腸組織片(約2cm×4cm)使用氰基丙烯酸酯膠貼至玻璃 載片上，保持內腔側向上。將給定重量之組成物均一地展塗在腸黏膜組織上，隨後使玻璃載片在37℃烘箱中保持15分鐘。各玻璃載片隨後懸掛在Ph.Eur.7.0錠劑崩解設備(Erweka,Germany)之臂上，且在37±0.5℃下於30mL磷酸鹽緩衝溶液(pH 6.8)中藉由操作Ph.Eur.7.0錠劑崩解測試設備來有規律地(30擊/分鐘)浸漬。
在給定時間間隔下，收集1mL溶液且用新緩衝液置換。冷 凍所收集之樣品，隨後進行用於定量之進一步處理。自沖洗測試取出之樣品隨後經處理且利用HPLC-ESI-MS分析，用於定量自組成物釋放至緩衝溶液中之HA。HA釋放視為組成物隨時間推移保持與黏膜接觸之能力之負指示。
測試根據實施例1及2製備之組成物。含有同一百分比之 HA之Carbopol®凝膠之兩種組成物用於對照參考。
製備用於分析之樣品
玻尿酸為一種天然存在之高分子量線性多醣。重複雙醣單元由葡糖醛酸及N-乙醯葡萄胺糖經由β-1,4鍵組成。溶液中HA之直接定量對於大量樣品(諸如獲自此等釋放實驗之樣品)而言為不可行的。HA通常藉由一或多種HA降解產物之定量來定量。因為HA之酶促降解昂貴且費時，所以包括鹼或酸降解之方法較佳。在此研究中，利用酸降解方案。採用Alkrad等人(AlkradJ.A.等人，J.Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2002,30,913-919)報導之方法：使獲自沖洗實驗之各樣品(1mL)乾透，隨後用 250μL 47.5%(v/v)硫酸溶液處理。將樣品在45℃下保持10分鐘，隨後反應藉由用氫氧化鈉溶液中和達到pH 5來停止。各樣品用蒸餾水使最終體積達至3mL，隨後通過0.45μm乙酸纖維素過濾器過濾，且保持在-20℃下，隨後進行LC-MS分析。
液相層析-電噴霧-質譜分析方法
HPLC分離係在5μm Atlantis® dC18 100Å管柱(2.1mm×100mm)(Waters公司，USA)上進行。移動相藉由二元泵(Agilent 1100系列)傳遞，且洗提係在梯度模式下藉由使用甲酸水溶液(pH 3.5)(洗提劑A)及甲醇(洗提劑B)以0.2mL/min之流動速率進行。樣品(Vinj：20μL)係以如下設定之梯度注射：
ESI質譜使用配備有Turboion噴射源(Applied Biosystems,USA)之MS API 150EX記錄。電噴射介面參數設定如下：毛細管電壓4.5kV，源溫度450℃，去簇電位50V，聚焦電位400V。針對定量分析，信號在正離子電離中在SIM模式下藉由在m/z 380、m/z 759下監測離子而獲得。氮氣用作氣幕(10公升/小時)及霧化氣體(10公升/小時)。
黏膜黏性研究之結果
A. 沖洗實驗中之HA釋放
將HA與幾丁聚醣及基於Carbopol®之組成物混合。藉由進行如上所述之沖洗實驗，隨時間監測HA自放在保持在37℃下之PBS溶液中之豬黏膜上的實施例1及2之組成物的釋放。
根據實施例1(含有0.3% HA)製備之組成物在第一個10 分鐘內釋放約10%初始量之HA，此後緩衝溶液中之HA濃度呈平穩狀態，表明無更多HA自組成物釋放(圖2)。初始突釋(burst)可能歸因於調配物之上層在測試之第一擊之後由於重力而機械下落。
相應的基於Carbopol®之組成物顯示類似釋放概況，然而偏 移至較高HA%值。實際上，在10分鐘之後，所釋放之HA之量為劑量之約55%。在此情況下，沿實驗之剩餘部分亦觀測到平台(圖3)。
在根據實施例2製備之基於幾丁聚醣之組成物(含有1% HA)之情況下，在第一個45分鐘內監測到HA劑量之約60%之釋放，接著在10小時之後監測到達至70%之HA濃度之極低提昇(圖4)。
在對應於組成物2之基於Carbopol®之組成物之情況下，HA釋放在不到45分鐘內完成(圖5)。
結果清楚地指出基於幾丁聚醣之組成物相對於相應的基於Carbopol®之組成物在根據實施例1及2製備之組成物的情況下均具較高黏膜黏性。

Claims (20)

  1. 一種組成物，其在水溶液中包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽摻合之玻尿酸及其鹽，其中該組成物在35℃-38℃下具有溶膠-凝膠轉變性質，因此在該等溫度下形成水凝膠。
  2. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中玻尿酸與幾丁聚醣之間的比率為1：0.6至1：45(HA：幾丁聚醣)。
  3. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中幾丁聚醣與甘油磷酸鹽之間的比率為1：0.8至1：15(幾丁聚醣：甘油磷酸鹽)。
  4. 如申請專利範圍第2項之組成物，其中玻尿酸與幾丁聚醣之間的比率為1：10至1：1.8(HA：幾丁聚醣)。
  5. 如申請專利範圍第3項之組成物，其中幾丁聚醣與甘油磷酸鹽之間的比率為1：1.8至1：7.0(幾丁聚醣：甘油磷酸鹽)。
  6. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該等組分之含量包含以下範圍：0.1w/v%至1.5w/v%之玻尿酸；1.0w/v%至4.5w/v%之幾丁聚醣；及4.0w/%至15.0w/%之無水甘油磷酸鹽，且其中pH值包含6.9至7.1。
  7. 如申請專利範圍第6項之組成物，其中該等組分之含量包含以下範圍：0.3w/v%至1.0w/v%之玻尿酸；1.8w/v%至3.0w/v%之幾丁聚醣；及5.6w/v%至12.7w/v%之無水甘油磷酸鹽。
  8. 如申請專利範圍第7項之組成物，其中該甘油磷酸鹽為5.6w/v%。
  9. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該玻尿酸具有包含7至250 kDa之分子量。
  10. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該幾丁聚醣之去乙醯化程度為60%至80%。
  11. 如申請專利範圍第9項之組成物，其中該玻尿酸具有包含30至250kDa之分子量。
  12. 如申請專利範圍第10項之組成物，其中該幾丁聚醣之去乙醯化程度為70%-80%。
  13. 如申請專利範圍第1項至第12項中任一項之組成物，其中該甘油磷酸鹽呈具有4至6個結晶水分子之結晶水合物之形式。
  14. 如申請專利範圍第1項至第13項中任一項之組成物，其進一步包含在0.6w/v%至0.9w/v%範圍內之選自鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸硫酸抗壞血酸、蘋果酸、琥珀酸、己二酸或反丁烯二酸之無機或有機酸。
  15. 如申請專利範圍第1項至第14項中任一項之組成物，其藉由局部投予而用於促進體腔黏膜之創傷癒合。
  16. 如申請專利範圍第15項之組成物，其中該用途為用於口腔、鼻、胃腸、結腸直腸及陰道黏膜之創傷癒合。
  17. 如申請專利範圍第15項之組成物，其中該用途為用於源自用於治療癌症之化學療法及/或放射線療法之黏膜損傷的創傷癒合。
  18. 一種玻尿酸及其鹽、幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽之用途，其用於製備如前述申請專利範圍第1項至第14項中任一項之在水溶液中包含與幾丁聚醣及其鹽及甘油磷酸鹽摻合之玻尿酸及其鹽的組成物，該等組成物藉由局部投予而用於促進體腔黏膜之創傷癒合。
  19. 如申請專利範圍第18項之用途，其中該等組成物用於口腔、鼻、胃腸、結腸直腸及陰道黏膜之創傷癒合。
  20. 如申請專利範圍第18項之用途，其中該等組成物用於源自用於治療 癌症之化學療法及/或放射線療法之黏膜損傷之創傷癒合。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105903059A (zh) * 2016-06-21 2016-08-31 林春梅 一种抑菌医用功能敷料

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11623008B2 (en) * 2014-08-20 2023-04-11 Professional Compounding Centers Of America Excipient compositions for mucoadhesive pharmaceutical compositions including a synergistic combination of amylopectin, pullulan, hyaluronic acid, and xyloglucan
EP3261683B1 (en) * 2015-02-26 2019-01-02 Fundació Institut d'Investigació en Ciències de la Salut Germans Trias i Pujol Topical composition for the treatment of mucosal lesions
CN106474050B (zh) * 2016-11-09 2019-10-29 中国药科大学 一种载有核酸适配体-阿霉素结合物的温敏原位凝胶瘤内注射制剂及其制备方法
CN107099042A (zh) * 2017-04-17 2017-08-29 大连理工大学 一种温敏型可注射水凝胶的制备方法
UY37687A (es) * 2017-04-20 2018-11-30 Zoetis Services Llc Composiciones veterinarias para uso en tratamiento de mastitis y métodos asociados
MX2017017192A (es) * 2017-12-20 2019-06-21 Gerardo Leyva Gomez Biopolimero de quitosano y poloxamero 407 obtenido por irradiacion gamma que exhibe propiedades fisicoqumicas y biologicas para la reparacion de heridas.
US20210000910A1 (en) 2019-07-03 2021-01-07 Jysk Skin Solutions Pte Ltd Topical compositions
US12083204B2 (en) 2022-06-02 2024-09-10 L'oreal Topical composition for homeostatic delivery of nitric oxide and uses thereof

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1212892B (it) 1983-10-11 1989-11-30 Della Valle Francesco Acido ialuronico ottenuto per mezzodi filtrazione molecolare sprovvisto di attivita' infiammatoria e sua utilizzazione terapeutica
IT1273742B (it) 1994-08-01 1997-07-09 Lifegroup Spa Composizioni ad elevata bioadesivita' e mucoadesivita' utili per il trattamento di epitali e mucose
CA2212300A1 (en) 1997-08-04 1999-02-04 Abdellatif Chenite In vitro or in vivo gelfying chitosan and therapeutic uses thereof
US7767656B2 (en) * 2005-04-25 2010-08-03 Molly S Shoichet Blends of temperature sensitive and anionic polymers for drug delivery
FR2919185B1 (fr) 2007-07-23 2010-09-10 Ard Sa Utilisation d'acide hyaluronique pour la preparation de compositions destinees a l'amelioration notamment de l'etat des muqueuses

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105903059A (zh) * 2016-06-21 2016-08-31 林春梅 一种抑菌医用功能敷料

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