TW201402556A

TW201402556A - 氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽

Info

Publication number: TW201402556A
Application number: TW102118928A
Authority: TW
Inventors: Yuji Oonishi
Original assignee: Toyama Chemical Co Ltd
Priority date: 2012-05-30
Filing date: 2013-05-29
Publication date: 2014-01-16
Also published as: WO2013180149A1

Abstract

由以下通式所表示的氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽：□[其中D表示氘原子；及X表示鹵素原子]呈現優良的藥物動力學等，如降低新陳代謝速率及維持高血液濃度，且可用作為抗病毒劑。

Description

氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽

本發明關於一種可用作為藥物的氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽。

藥物一旦被身體吸收則被新陳代謝，且轉化成為惰性化合物或易於從身體排除的形式，因而經常失效。為了降低新陳代謝感受性，已知一種以氘原子取代化合物中的一部分氫原子之方法(非專利文獻1)。

然而，此方法無法用於所有的化合物。

已知6-氟-3-羥基-2-吡羧醯胺(6-fluoro-3-hydroxy-2-pyrazinecarboxamide)(以下稱為化合物A)具有優良的抗病毒效果(專利文獻1)。

然而，如化合物A的含氮雜環羧醯胺衍生物之氘化化合物為完全未知。

[先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]國際公告第WO 00/10569號文件

[非專利文獻]

[非專利文獻1]Nature，2009，第458卷，第19期，第269頁

本發明之一目的為提供一種新穎的化合物，其呈現優良的抗病毒效果及優良的藥物動力學，小劑量即有效，如毒性等之副作用低，且可用作為醫藥產品。

在此情況下，本發明人已進行深入的研究，結果發現由通式[1]所表示的氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽： [其中D表示氘原子；及X表示鹵素原子]相較於對應的非氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽，呈現優異的藥物動力學，如降低新陳代謝速率及維持高血液濃度，且可用作為抗病毒劑，因而完成本發明。

此外，本發明人亦已發現，含該氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽之醫藥組成物可用於治療病毒感染，因而完成本發明。

相較於對應的非氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽，由通式[1]所表示的化合物或其鹽呈現優異的藥物動力學，如降低新陳代謝速率及維持高血液濃度，且可用作為抗病毒劑。

此外，由於該改良的藥物動力學，由通式[1]所表示的化合物或其鹽在比非氘化含氮雜環羧醯胺衍生物小的劑量下即有效，且可用作為抗病毒劑。

[實施發明之形態]

以下詳述本發明。

在本說明書中，除非另有指示，否則該些術語具有以下的意義。

在本發明中，D表示氘原子；鹵素原子表示氟原子、氯原子、溴原子、或碘原子。

C_1-6烷氧基表示線形或分支C_1-6烷氧基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、戊氧基、與己氧基。

鹵化烴類之實例包括氯亞甲基、氯仿或二氯乙烷。

醇類之實例包括甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、或2-甲基-2-丙醇。

醚類之實例包括二乙醚、二異丙醚、二、四氫呋喃、甲氧苯、乙二醇二甲基醚、二乙二醇二甲基醚、或二乙二醇二乙基醚。

酯類之實例包括乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、或乙酸丁酯。

醯胺類之實例包括N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、或1-甲基-2-吡咯啶酮。

芳香族烴類之實例包括苯、甲苯或二甲苯。

有機鹼之實例包括吡啶、甲吡啶、二甲基吡啶、N,N-二甲胺基吡啶、二乙胺、二異丙胺、三乙胺、N,N-二甲基苄胺、乙酸鈉、或乙酸鉀。

無機鹼之實例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸三鈉、或磷酸三鉀。

通式[1]之化合物之鹽包括，例如，具有如鈉與鉀等鹼金屬之鹽；具有如鈣與鎂等鹼土金屬之鹽；銨鹽；及具有含氮有機鹼之鹽，含氮有機鹼例如三甲胺、三乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基啉、二乙胺、二環己胺、普羅卡因(procaine)、二苄胺、N-苄基-β-苯乙胺、1-非那名(1-ephenamine)、與N,N’-二苄基乙二胺。

上述的鹽中較佳為醫藥可接受鹽，且更佳為鈉鹽。

通式[1]或其鹽具有互變異構物。例如6-氟-3-羥基-2-(5-D)吡羧醯胺(以下稱為5-D-化合物A)具有已知為6-氟-3-側氧-3,4-二氫-2-(5-D)吡羧醯胺之互變異構物。本發明包含此種異構物，且進一步包含溶劑合物、水合物、及形狀不同的結晶。

在本發明之化合物中，較佳化合物包括其中X為氟原子之化合物，尤其是6-氟-3-羥基-2-(5-D)吡羧醯胺。

由通式[1]所表示的化合物或其鹽呈現優良的安全性及藥物動力學。該安全性及藥物動力學可藉各種測試評估，其選自例如細胞毒性測試、hERG測試、重複劑量毒性測試、細胞色素P450(CYP)活性抑制測試、新陳代謝依附性抑制測試、活體小鼠小核測試、活體大鼠肝UDS測試、新陳代謝安定性測試、與小鼠藥物動力學測試。

其次，揭述製造本發明之化合物之方法。本發明之化合物可藉由組合已知的方法而製造，例如下述的製造方法。

[製造方法1]

其中X^a表示氯原子、溴原子與碘原子。

通式[1A]之化合物或其鹽可藉由在鹼存在下將式[2]之化合物或其鹽以鹵化劑反應而製造。

用於此反應之溶劑較佳為醇類、醯胺類、亞碸類、及水，更佳為醇類及醯胺類，且進一步更佳為醯胺類。

溶劑之使用量並未特別地限制，然而相對式[2]之化合物或其鹽，較佳為1至100倍體積(v/w)，更佳為1至10倍體積(v/w)，且進一步較佳為1至5倍體積(v/w)。

用於此反應之鹵化劑並未特別地限制，只要其為一般用於將芳香族化合物鹵化反應之試劑，然而其包括，例如，碘、溴、氯、硫醯氯、N-碘琥珀醯亞胺、N-溴琥珀醯亞胺、N-氯琥珀醯亞胺、N-碘糖精、N-溴糖精、二溴異三聚氰酸、與溴異三聚氰酸單鈉鹽。

用於此反應之鹵化劑量相對式[2]之化合物或其鹽較佳為1至10倍莫耳，更佳為1至5倍莫耳，且進一步更佳為1至1.5倍莫耳。

用於此反應之鹼較佳為有機鹼，更佳為吡啶、甲吡啶與二甲基吡啶，且進一步更佳為吡啶。

鹼之使用量相對式[2]之化合物或其鹽較佳為1至10倍莫耳，更佳為1至5倍莫耳，且進一步更佳為1至2倍莫耳。

反應溫度較佳為0至150℃，更佳為50至100℃，進一步更佳為65至100℃，且最佳為80至100℃。

反應時間較佳為5分鐘至50小時，且更佳為5分鐘至5小時。

至於特定步驟，較佳為將鹵化劑加入式[2]之化合物或其鹽與鹼的混合物而起始反應。

[製造方法2]

式[1B]之化合物或其鹽可藉由在鹼存在下及有或無過氧酸存在下，將式[3]之化合物或其鹽水解而製造。

用於此反應之溶劑較佳為醇類、亞碸類、酯類、及水。

溶劑之使用量相對式[3]之化合物或其鹽較佳為1至100倍體積(v/w)，更佳為1至10倍體積(v/w)，且進一步更佳為1至5倍體積(v/w)。

用於此反應之鹼較佳為例如鹼金屬鹼，如氫氧化鈉，及胺類水溶液，如氨水。

鹼之使用量相對式[3]之化合物或其鹽較佳為0.1至20倍莫耳，且更佳為0.5至10倍莫耳。

視情況用於此反應之過氧酸的實例包括過氧化氫。

過氧酸之使用量相對式[3]之化合物或其鹽較佳為0.1至20倍莫耳，且更佳為0.5至10倍莫耳。

反應溫度較佳為-20至170℃，且更佳為0至160℃。

反應時間較佳為1分鐘至72小時，且更佳為5分鐘至48小時。

再來，揭述製備用以製造本發明之化合物的原料之方法：

[製備方法A]

其中R^a表示C_1-6烷氧基。

由式[5]所表示的氘化乙二醛為市售，或者藉已知方法或其等效方法而製備，或其組合。揭述該製備方法之文獻的實例包括「標記化合物及放射藥物期刊(Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals)」，2003，第46卷，第3期，第243-253頁。

例如，式[5]之化合物可藉由使用氘化劑對通式[4]之化合物進行還原反應而製造。

例如，草酸二乙酯為已知的通式[4]之化合物。

例如，氘化鋰鋁為已知的氘化劑。

式[5]之化合物可不必隔離而直接用於後續反應。

[製備方法B]

式[2]之化合物或其鹽可例如在有或無緩衝劑存在及有或無鹼存在下，藉由將式[5]之化合物以式[6]之化合物或其鹽反應而製造。

式[6]之化合物之鹽之實例包括鹼性基中的鹽，鹼性基如一般已知的胺基。

用於此反應之較佳溶劑包括醇類、醯胺類、亞碸類、及水，更佳為醇類及水，且進一步更佳為水。

溶劑之使用量並未特別地限制，然而相對式[6]之化合物較佳為1至500倍體積(v/w)，且更佳為1至200倍體積(v/w)。

用於此反應之式[5]之化合物之量相對式[6]之化合物較佳為1至10倍莫耳，更佳為1至5倍莫耳，且進一步更佳為1至1.1倍莫耳。

式[5]之化合物較佳為以水溶液使用。

視情況用於此反應之鹼的實例包括，例如，無機鹼，如氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸三鈉、與磷酸三鉀；及有機鹼，如二乙胺、二異丙胺與三乙胺。較佳鹼之實例包括無機鹼，更佳為一種或以上的選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、磷酸三鈉、與磷酸三鉀之鹼，且進一步更佳為氫氧化鈉。

鹼之使用量相對式[6]之化合物較佳為1至10倍莫耳，更佳為1至5倍莫耳，且進一步更佳為1至1.1倍莫耳。

緩衝劑表示具有緩衝作用之化合物。視情況用於此反應之緩衝劑包括，例如，碳酸之鹼金屬鹽、與磷酸之鹼金屬鹽。碳酸之鹼金屬鹽包括，例如，碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、與碳酸氫鉀，且其可組合使用。磷酸之鹼金屬鹽包括，例如，磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸三鈉、與磷酸三鉀，且其可組合使用。較佳緩衝劑之實例包括磷酸之鹼金屬鹽，且更佳為磷酸氫二鈉。

緩衝劑之使用量相對式[6]之化合物較佳為0.1至10倍莫耳，且更佳為0.2至5倍莫耳。

緩衝劑較佳為以水溶液使用。緩衝劑亦可在反應系統中製備。緩衝劑之水溶液可作為反應溶液。

反應溫度較佳為0至100℃，更佳為10至50℃，且進一步更佳為10至30℃。

反應時間較佳為5分鐘至50小時，且更佳為5分鐘至 10小時。

[製備方法C]

其中X^a表示氯原子、溴原子與碘原子。

(C-1)

式[7]之化合物可藉由在有或無鹼存在下，將通式[1A]之化合物或其鹽以氯化劑反應而製造。

用於此反應之溶劑較佳為芳香族烴類、鹵化烴類、及醯胺類，更佳為鹵化烴類及醯胺類，且進一步更佳為醯胺類。

溶劑之使用量並未特別地限制，然而相對通式[1A]之化合物或其鹽較佳為1至100倍體積(v/w)，更佳為1至10倍體積(v/w)，且進一步較佳為1至5倍體積(v/w)。

用於此反應之氯化劑實例包括草醯氯、氧氯化磷與亞硫醯氯，較佳為氧氯化磷與亞硫醯氯，且更佳為氧氯化磷。

氯化劑之使用量相對通式[1A]之化合物或其鹽較佳為0.3至100倍莫耳，且更佳為1至30倍莫耳。此外，氯化劑亦可作為溶劑。

用於此反應之鹼並未特別地限制，只要其為一般使用之鹼，然而其包括，例如，無機鹼及有機鹼。

鹼之使用量相對通式[1A]之化合物或其鹽較佳為0.1至5倍莫耳，更佳為0.1至2倍莫耳，且進一步更佳為0.5 至1倍莫耳。

反應溫度較佳為0至150℃，更佳為50至100℃，且進一步更佳為80至100℃。

反應時間較佳為1至100小時，且更佳為1至5小時。

(C-2)

式[8]之化合物可藉由有或無添加劑，將式[7]之化合物以氟化劑反應而製造。

溶劑之使用量相對式[7]之化合物較佳為1至100倍體積(v/w)，更佳為1至20倍體積(v/w)，且進一步較佳為1至10倍體積(v/w)。

用於此反應之氟化劑包括例如鹼金屬氟化物，如氟化銫、氟化銣、氟化鉀、氟化鈉、與氟化鋰；鹼土金屬氟化物，如氟化鈣；其他的金屬氟化物，如氟化鋅與氟化銀；氟化氫；銨鹽(如氟化四丁銨)、鏻鹽、及其氟化氫錯合物，且其可組合使用。

雖然氟化劑之使用量係依氟化劑之型式而定，但相對式[7]之化合物較佳為等莫耳或以上，更佳為1至20倍莫耳，且進一步更佳為1至10倍莫耳。

視情況用於此反應之添加劑包括，例如，四級銨鹽，如溴化四正丁銨、氯化四甲銨與氟化四甲銨；四級鏻鹽，如溴化四苯鏻；及多醚類，如18-冠-6-醚與聚乙二醇，且這些添加劑可組合使用。

雖然添加劑之使用量係依添加劑之型式而定，但相對式[7]之化合物較佳為0.01至2.0倍莫耳，且更佳為0.1至1.0倍莫耳。

反應溫度較佳為0至150℃，更佳為50至150℃，且進一步更佳為80至150℃。

反應時間較佳為1至100小時，且更佳為1至5小時。

式[8]之化合物可不必隔離而直接作為後續步驟之反應溶液。

[製備方法D]

式[3]之化合物或其鹽可藉由將式[8]之化合物以羥化劑反應而製造。

用於此反應之溶劑實例包括芳香族烴類、鹵化烴類、及醯胺類，更佳為鹵化烴類及醯胺類，且進一步更佳為醯胺類。

溶劑之使用量並未特別地限制，然而其相對式[8]之化合物較佳為1至100倍體積(v/w)，更佳為1至20倍體積(v/w)，且進一步較佳為1至10倍體積(v/w)。

用於此反應之羥化劑並未特別地限制，只要其為一般用於芳香族鹵素化合物之親核性取代反應的羥化反應之試劑，然而其實例包括，例如，無機鹼、有機鹼、及無機或有機酸，如氫氯酸、磷酸、乙酸、與甲酸水溶液。

羥化劑之使用量相對式[8]之化合物較佳為0.01倍莫耳或以上，且更佳為0.05至20倍莫耳。

反應溫度較佳為-78至180℃，且更佳為-20至100℃。

反應時間較佳為1分鐘至96小時，且更佳為10分鐘至72小時。

含有本發明之由通式[1]所表示的化合物之氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽的抗病毒劑之目標病毒包括，例如，正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)，如流行性感冒病毒；副黏液病毒科(Paramyxoviridae)，如RS病毒、人類副流行性感冒病毒、杜立百(Nipah)病毒、麻疹病毒、新城雞瘟(Newcastle disease)病毒、與腮腺炎病毒；桿狀病毒科(Rhabdoviridae)，如狂犬病病毒、與水泡性口炎(vesicular stomatitis)病毒；絲狀病毒科(Filoviridae)，如伊波拉(Ebola)病毒、與馬堡病毒屬(genus Marburg virus)；沙狀病毒科(Arenaviridae)，如賴薩(Lassa)病毒、與胡寧(Junin)病毒；本揚病毒科(Bunyaviridae)，如里夫特谷熱(Rift Valley fever)病毒、漢他病毒屬(genus Hanta virus)、發熱伴血小板減少綜合症(severe fever with thrombocytopenia syndrome)病毒、與拉克羅絲(La Crosse)病毒；冠狀病毒科(Coronaviridae)，如SARS冠狀病毒；肝炎病毒科(Hepeviridae)，如E型肝炎病毒；小核醣核酸病毒科(Picornaviridae)，如A型肝炎病毒、小兒麻痺病毒(poliovirus)、人類腸道細胞致病性病毒(echovirus)、克沙奇病毒(coxsackievirus)、腸病毒、與鼻病毒屬(genus rhinovirus)；黃熱病毒科(Flaviviridae)，如C型肝炎病毒、日本腦炎病毒、黃熱病病毒、登革熱病毒、與西尼羅河(West Nile)病毒；披衣病毒科(Togaviridae)，如辛得比α病毒屬(genus alphavirus)；杯狀病毒科(Caliciviridae)，如諾羅病毒屬(genus Norovirus)；及呼腸孤病毒科(Reoviridae)，如輪狀病毒。較佳為流行性感冒病毒、RS病毒、杜立百病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、狂犬病病毒、伊波拉病毒、馬堡病毒屬、賴薩病毒、胡寧病毒、里夫特谷熱病毒、漢他病毒屬、發熱伴血小板減少綜合症病毒、SARS冠狀病毒、小兒麻痺病毒、人類腸道細胞致病性病毒、克沙奇病毒、腸病毒、鼻病毒屬、C型肝炎病毒、日本腦炎病毒、黃熱病病毒、登革熱病毒、西尼羅河病毒、辛得比α病毒屬、與諾羅病毒屬，且更佳為流行性感冒病毒。

流行性感冒病毒之實例包括A型流行性感冒病毒、B型流行性感冒病毒、與C型流行性感冒病毒。

當將本發明之化合物作為藥物時，可如所需而混合一般用於醫藥調配物之醫藥助劑，如賦形劑、載劑與稀釋劑。這些藥物可依照例行方法，以藥錠、膠囊、粉末、糖漿、顆粒、藥丸、懸浮液、乳劑、溶液、粉末製劑、栓劑、眼藥水、鼻藥水、耳藥水、貼布、軟膏、或注射劑之形式口服或經腸胃外投藥。此外，投藥之方法、劑量及頻率可依照病人之年齡、體重及症狀而適當地選擇。一般而言，該藥物對成人可為單次或分成數劑，以每日0.01至1,000毫克/公斤口服或經腸胃外投藥。

[實施例]

接著，本發明將參考實施例及參考例而說明，然而不受其限制。

在各實施例及參考例中，DMSO-d₆表示氘化二甲基亞碸。

在各實施例及參考例中，TFA表示三氟乙酸。

實施例1

將0.14克之3-羥基-2-(5,6-D₂)吡羧醯胺、與0.14毫升之吡啶加入0.35毫升之N,N-二甲基甲醯胺，且將生成物加熱至80℃。將0.35毫升之N,N-二甲基甲醯胺加入反應混合物，然後將生成物提高到100℃之溫度，及對其加入0.067毫升之溴，且將生成物在該溫度攪拌30分鐘。將0.14毫升之甲苯、與1.1毫升之水加入反應混合物，且將生成物在該溫度攪拌30分鐘，及在冰冷下攪拌1小時。藉過濾收集固體且以水清洗而產生58毫克之6-溴-3-羥基-2-(5-D)吡羧醯胺，為黃色粉末。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：13.80-13.30(1H，寬)，8.69(1H,s),8.55-8.35(1H，寬)。

MS(DART-TOF)[M+H]⁺ m/z：218.96498,220.96291。

實施例2

將1.1毫升之水、0.10克之氫氧化鈉、與0.30克之30%過氧化氫水溶液加入0.18克之6-氟-3-羥基-2-(5-D)吡腈，且將生成物在室溫攪拌15分鐘。將乙酸乙酯與水加入反應混合物，且以1莫耳/升之氫氯酸將其pH調整成2。分離有機層，且將水層以乙酸乙酯萃取2次。將有機層與萃取液組合，以飽和鹽水清洗，然後以無水硫酸鎂乾燥。在低壓下蒸餾溶劑。將二異丙醚加入所得殘渣，且藉過濾收集固體而產生37毫克之6-氟-3-羥基-2-(5-D)吡羧醯胺，為淺黃色粉末。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：13.41(1H,s),8.84-8.66(1H，寬)，8.60-8.40(1H，寬)。

MS(DART-TOF)[M+H]⁺ m/z：159.04335。

參考例1

在氮大氣下將0.11克之氘化鋰鋁加入40毫升之二乙醚，且在冰冷下歷時30分鐘對其逐滴加入1.5克之草酸二乙酯的40毫升溶液。將反應混合物在室溫攪拌1小時。將100毫升之水加入反應混合物，分離水層且以二乙醚清洗。將0.59克之2-胺基丙二醯胺加入所得水層，且將生成物在室溫攪拌6小時。對其加入6莫耳/升之氫氯酸而將pH調整成4，且濾除不溶性物質，對其加入1-丁醇，及在低壓下蒸餾溶劑。將甲醇加入所得殘渣，濾除生成的不溶性物質，及在低壓下蒸餾溶劑。將水加入所得殘渣且藉過濾收集固體而產生77毫克之3-羥基-2-(5,6-D₂)吡羧醯胺，為白色粉末。

¹H-NMR(DMSO-d₆ 0.01% TFA)δ：8.69(1H,s),8.30-7.90(1H，寬)。

MS(DART-TOF)[M+H]⁺ m/z：142.05795。

參考例2

將2.0克之6-溴-3-羥基-2-(5-D)吡羧醯胺懸浮在2.4毫升之氧氯化磷中，且在冰冷下歷時5分鐘對其逐滴加入1.0毫升之三乙胺。將反應混合物歷時5分鐘提高到85℃之溫度，且在該溫度攪拌3.5小時。將1.0毫升之甲苯加入反應混合物，且將生成物歷時10分鐘逐滴加入水冷的4.0毫升之甲苯、與8.0毫升之水，及在室溫攪拌30分鐘。分離有機層，循序以6莫耳/升之氫氯酸與飽和鹽水清洗，及以無水硫酸鎂乾燥。在低壓下蒸餾溶劑。將己烷加入所得殘渣且藉過濾收集固體而產生0.97克之3,6-二氯-2-(5-D)吡羧醯胺，為黃色粉末。

²H-NMR(DMSO)δ：9.00(1D,s)。

MS(DART-TOF)[M+H]⁺ m/z：174.97047,176.96753,178.96483。

參考例3

將0.34毫升之N,N-二甲基甲醯胺、與0.16克之氟化鉀加入0.23克之3,6-二氯-2-(5-D)吡羧醯胺，且將生成物在室溫攪拌1小時，然後在110℃攪拌30分鐘。將1.0毫升之N,N-二甲基甲醯胺加入反應混合物，然後將生成物在110℃攪拌5小時。將0.11毫升之乙酸、與0.27毫升之三乙胺在冰冷下加入反應混合物，且將生成物在該溫度攪拌90分鐘，及在室溫靜置14小時。將乙酸乙酯與水加入反應混合物，且對其加入1莫耳/升之氫氯酸而將pH調整成1。分離有機層，及將水層以乙酸乙酯萃取3次。將有機層與萃取液組合，已飽和鹽水清洗，然後以無水硫酸鎂乾燥。在低壓下蒸餾溶劑。將所得殘渣以逆相矽膠管柱層析術純化(載體：來自YMC有限公司之ODS-A-HG，溶析液：水/三乙胺(100：1))而產生0.18克之6-氟-3-羥基-2-(5-D)吡羧醯胺，為黑色油狀物質。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：8.05-8.00(1H，寬)。

MS(DART-TOF)[M+H]⁺ m/z：141.03149。

測試例1 在小鼠肝細胞液中的新陳代謝安定性

將5-D-化合物A或化合物A之60微莫耳/升的水溶液加入小鼠肝細胞液(2毫克/升)，且在37℃將生成物在100毫莫耳/升之磷酸鉀緩衝液(pH7.4)中培養(1小時)。

在培養之後，添加反應混合物的2倍體積之甲醇而中止反應，然後將混合物離心(大約14000×g，4℃，10分鐘)。收集上清液且在低壓下蒸發至乾。將殘渣溶於移動相而作為分析樣品。

將該分析樣品在以下的HPLC條件下分析：

管柱：Inertsil ODS-3(4.6毫米內徑×100毫米)，GL Sciences

移動相：溶液A 100%(0分鐘)→溶液B 100%(10分鐘)之線性梯度

溶液A：甲醇/0.5莫耳/升之三乙胺乙酸酯溶液(pH7.0)/蒸餾水(5：10：85,v/v/v)

溶液B：甲醇/0.5莫耳/升之三乙胺乙酸酯溶液(pH7.0)/蒸餾水(20：10：70,v/v/v)

管柱溫度：30℃

流速：1毫升/分鐘

偵測：360奈米之UV

測量時間：10分鐘

產生校正曲線，且由峰面積測定分析樣品中的5-D-化合物A、化合物A與M1之濃度。在此情形，M1表示由肝細胞液所形成的化合物A代謝物，且化合物A之M1為6-氟-3,5-二羥基-2-吡羧醯胺。由化合物A所形成的M1之校正曲線測定5-D-化合物A之M1濃度。

M1形成速率之比較係示於表1。

相較於化合物A，5-D-化合物A在小鼠中的M1形成速率降到大約一半。

其證明5-D-化合物A之體外新陳代謝安定性較化合物A改良。

測試例2在小鼠中的藥物動力學

將5-D-化合物A或化合物A懸浮在0.5%甲基纖維素水溶液中，以製備3毫克/毫升之劑液。將各劑液對小鼠(BALB/c雌鼠，6週大)口服投藥。將劑量設為30毫克/公斤。在投藥後15分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、與6小時，使用肝素化針筒從各組之下大靜脈抽血且快速離心(大約10000×g，4℃，10分鐘)而獲得血漿。

以固相萃取板[Oasis MAX 96-well plate，30微米(10毫克)，Waters Corporation]從所得血漿萃取5-D-化合物A、化合物A與M1。將溶析液濃縮及以移動相稀釋而產生分析樣品。

將該分析樣品在與測試例1相同的條件下分析。

產生校正曲線，且由峰面積測定分析樣品中的5-D-化合物A及化合物A之濃度。

表2顯示排除半生期(T_1/2)、及血漿濃度時間曲線下的面積(AUC)。

相較於化合物A投藥組，5-D-化合物A投藥組之新陳代謝清除(自血漿新陳代謝排除)降低大約60%， T_1/2為大約1.5倍長，及AUC高大約2倍，如此證實維持高血漿濃度。

其證明5-D-化合物A相較於化合物A具有較佳的藥物動力學。

[產業上之可利用性]

本發明之氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽呈現良好的藥物動力學等，如降低新陳代謝速率及維持高血液濃度，且可用作為抗病毒劑。

Claims

一種由以下通式所表示的氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽：其中D表示氘原子；及X表示鹵素原子。
如申請專利範圍第1項之氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽，其中X為氟原子。
一種醫藥組成物，其含有如申請專利範圍第1或2項之氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽。
一種抗病毒劑，其含有如申請專利範圍第1或2項之氘化含氮雜環羧醯胺衍生物或其鹽。
如申請專利範圍第4項之抗病毒劑，其中該病毒為流行性感冒病毒、RS病毒、杜立百(Nipah)病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、狂犬病病毒、伊波拉(Ebola)病毒、馬堡病毒屬(genus Marburg virus)、賴薩(Lassa)病毒、胡寧(Junin)病毒、里夫特谷熱(Rift Valley fever)病毒、漢他病毒屬(genus Hantavirus)、SARS冠狀病毒、小兒麻痺病毒(poliovirus)、人類腸道細胞致病性病毒(echovirus)、克沙奇病毒(coxsackievirus)、腸病毒、鼻病毒屬(genus rhinovirus)、C型肝炎病毒、日本腦炎病毒、黃熱病病毒、登革熱病毒、西尼羅河(West Nile)病毒、辛得比α病毒屬(genus alphavirus)、或諾羅病毒屬(genus Norovirus)。
如申請專利範圍第4或5項之抗病毒劑，其中該病毒為流行性感冒病毒。