TW201236702A - Dressing comprising active components of centella asiatica and use of the same - Google Patents

Description

20丐67(S明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種含積雪草（Ce«ie//a <3>w_i2iz_ca)活性成分之敷材 及其應用，尤其係關於該敷材於治療傷口之應用。 【先前技術】 隨著人類生活與工作複雜度提高，個人在日常生活中無可避免 會遭遇到如擦傷、刀傷、手術傷口、甚至嚴重的燒燙傷等創傷。 創傷敷材是當組織或器官出現創傷或缺損時，被覆於傷口之上， 暫時替代表皮或内皮組織而進行保護，使傷口免於遭受外界細菌 或不潔物之感染，並促使傷口癒合，進而使受損組織恢復功能。 由於創傷的成因越來越複雜，因此，傳統的創傷敷材，如紗布、 棉花、或棉墊已不足以應付各種不同傷口之照護需求。再者，隨 著人們對於醫療品質的要求提升，也要求傷口敷材可提供傷口良 好的癒合環境、降低換藥次數、減少感染、提升患者生活品質等。 為因應前述需求，業已發展出各種敷材，包括抗菌敷材、藻膠 敷材、泡棉、矽水膠、及玻尿酸敷材等’然而，市面上之敷材仍 具有許多缺點。舉例言之，對於滲出液（如膿液或A液）流量_ 多的傷口’當其不斷產生滲出液時，須經常更換敷材，而乾掉的 渗出液常使敷材沾黏傷口，以致於在因應更換需要而摘除敷材 時’造成傷口二次傷害，且破壞傷口邊緣的新生組織，使傷口不 易癒合’甚至導致傷口發炎，造成病人疼痛不舒適的困擾。或者， 因為敷材之透氣性不佳，使傷口不易癒合，且有細菌感染之可能 性。另一方面，習知敷材往往無法提供令人滿意的藥物釋放速率， 201236702 其或因釋放速率過慢而無法達成有效之治療效果，或罔釋放速率 過快，使藥物過早流失而導致敷材失效，使患者必須於傷口痊癒 前，頻繁地更換敷材，更加導致患者之不便與痛苦。此外，部分 藥物於高濃度下可能對細胞產生毒性，反而降低傷口痊癒速度， 此時更應避免過快之藥物釋放速率。因此，市面上仍須要一種可 改進上述缺點的敷材。 本發明即係針對上述需求所為之研究，提供一種具有良好生物 相容性及藥物釋放速率的敷材，該敷材具有一奈米纖維層，含有 積雪草（oskiica )之活性成分、聚乙稀醇、以及明膠與 膠原蛋白之至少一者。 【發明内容】 本發明之一目的在於提供一種敷材，其係包含： (a) —基底層；以及 (b) —活性成分層，其係一奈米纖維層且含有：（bl)明膠及膠 原蛋白之至少一者；（b2)聚乙烯醇；以及（b3)積雪草苷 (asiaticoside)及積雪草萃取物之至少一者。 本發明之另一目的在於提供一種製備上述敷材之方法。 本發明之詳細技術及較佳實施態樣，將描述於以下内容中，以 供本發明所屬領域具通常知識者據以明瞭本發明之特徵。 【實施方式】 於本文中（包括後附申請專利範圍），除非另外說明，所使用之 「一」、「該」及類似用語應理解為包含單數及複數形式’且「奈 米纖維」乙詞係指平均直徑小於1000奈米之纖維。此外，在所附 201236702 圖式中，為明確起見可能誇示各物件及區域的尺寸，而未按照實 際比例繪示。 積雪草具有促進組織損傷癒合、增進學習及記憶能力、改善末 稍血液循環、減少下肢水腫、改善消化道潰瘍與腸胃道發炎、調 節免疫功能、改善膚質及抗腫瘤等功能。積雪草含有積雪草苷， 其可促進纖維母細胞增生、加速傷口癒合，具有以下化學式（I) 之結構：

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本發明結合積雪草之活性成分而提供一種敷材，其係包含： (a) —基底層；以及 (b ) —活性成分層， 其中，該活性成分層係一奈米纖維層且含有：（bl)明膠及膠原蛋 白之至少一者；（b2)聚乙烯醇；以及（b3)積雪草苷及積雪草萃 取物之至少一者。 參考第1圖，顯示本發明敷材之一結構態樣，其中，敷材1具 有雙層結構，包含基底層10與活性成分層20，活性成分層20係 具有奈米纖維（nanofiber)結構，當敷材1使用時，活性成分層 20為與皮膚接觸之層。 於敷材1中，可採用任何可以阻隔細菌之材質以構成基底層

S 201236702 ' 10。較佳地，該材質為生物可分解者。舉例言之，基底層10為一 幾丁聚醣層。幾丁聚醣係一生物可分解性材料，具有良好的生物 相容性，其結構上的胺基於酸性條件下會成為帶正電的ΝΗ3+，可 干擾細菌表面的負電荷而改變細胞壁的通透性，使菌體内的物質 外流，造成細菌死亡。此外，小分子的幾丁聚醣於進入菌體後， 可藉由與DNA錯合而影響染色體結構，進而降低細菌之生命力， 達到抑菌的效果。因此，以幾丁聚醣提供之基底層10，除可支持 活性成分層20，提供所欲支持功能以外，亦可防止細菌穿過敷材 而感染組織或傷口。 活性成分層20係由奈米纖維構成，平均纖維直徑為小於1000 奈米，較佳為小於500奈米，更佳為小於200奈米。該奈米纖維 含有：（bl)明膠及膠原蛋白之至少一者；（b2)聚乙烯醇；以 及（b3)積雪草苷及積雪草萃取物之至少一者。較佳地，於活性 成分層20中，以成分（bl)及（b2)之重量總和為基準，成分（M) 之含量為約80%至99%。 由於活性成分層20具有奈米纖維結構，故具高透氣性（或多孔 性）與大比表面積，可增加空氣對傷口組織之流通性，及增加傷 口組織與活性成分層20中之藥物（如積雪草苷）的接觸面積，促 進纖維母細胞增生，進而誘導纖維母細胞進入真皮層，分泌大量 的細胞外間質（例如膠原蛋白、生長因子及造血因子等），達到快 速癒合傷口、降低細菌感染機率、且不留下疤痕的效果，使組織 修補再生與傷口復原之速率加快。 此外，由於活性成分層20係使用明膠及/或膠原蛋白作為基質 成分，因明膠為天然膠原蛋白分解或失活所產生之物質，二者 201236702 (即，明膠與膠原蛋白）與皮膚接觸時皆不會產生排斥性，亦可 由體液所分解，故具有優異之生物相容性。因此，於使用敷材1 時，活性成分層20在幫助傷口修復之同時，亦可被組織降解而吸 收，因而避免敷材於撕下時造成組織受損或傷口的二度傷害，從 而減輕患者所承受的痛苦。再者，明膠及膠原蛋白具有與天然之 細胞外基質相似之結構與功能，可促進纖維母細胞之貼附與增 生，而達成加速傷口癒合、縮短治療時間之功效。 於本發明一實施態樣中，敷材1之活性成分層20係藉由靜電紡 絲（electrospinning )技術而形成於基底層10之一表面。舉例言之， 可藉如下操作而形成活性成分層20 : (I) 提供一第一溶液，其係包含成分（bl); (II) 提供一第二溶液，其係包含成分（b2); (III) 混合該第一溶液與該第二溶液，以提供一第三溶液； (IV) 添加一含成分（b3)之第四溶液至該第三溶液中，以獲得 一第五溶液； (V) 以靜電紡絲技術自該第五溶液形成一纖維層於該基底層之 一表面上；以及 (VI) 進行一交聯反應，使該纖維層交聯反應成該活性成分層。 於步驟（I)中，可選用適當之溶劑，將成分（bl)溶於該溶劑 中以提供該第一溶液。例如，可使用甲酸、乙酸、乙醇、或其組 合。於本發明一實施態樣中，係使用曱酸作為溶劑。 於步驟（II)中，可將聚乙烯醇溶於一合宜之溶劑中，以提供該 第二溶液。舉例言之，可使用水作為溶劑。 201236702 ' 步驟（ιν)之第四溶液為一含成分（b3)(即，敷材中冬活性成 分）之溶液’舉例言之’其可為積雪草萃取液或含積雪草苷之水 溶液。於一實施態樣中，係直接將自中藥店購得之積雪草中藥方 以90體積％之甲醇水溶液萃取之後，取可溶部分，先予以乾燥， 再回溶於水中，以提供該第四溶液。 參考第2圖以說明靜電紡絲操作，其中顯示一進行靜電紡絲之 設備2之示意圖。如第2圖所示，靜電紡絲設備2係包含一高壓 電產生器1〇〇以及一連接於高壓電產生器1〇〇之正極的注射器 200 ’注射器200之一端具有一金屬針頭（或喷嘴）210。於進行 靜電紡絲時’係將目標物（即基底層）220置於負極，將聚合物溶 液置於注射器2⑽中’當溶液被打入通電的金屬針頭（或喷嘴） 210時，高壓電在針頭210的外圍會產生三角錐狀的液體形狀而被 電場吸引到針頭下方特定距離 '置於負極的目標物220表面，在 溶液喷出時，於百萬分之一秒内，電場會使聚合物分子排成一線 而成為纖維絲，喷出的聚合物經延展後成為奈米纖維。由於靜電 纺絲可快速且直接將聚合物材料轉變成奈米纖維，且形成之奈米 纖雉為具多孔洞的薄膜形式，故於目標物220表面所形成之奈米 纖維層（未示出）具有大比表面積的優點。關於靜電紡絲之相關 原理與操作可參見如 Frenot ei a/.，Polymer nanofibers assembled by electrospinning, Current Opinion in Colloid and Interface Science, 8 (2003)，64-75 ’該文獻全文併於此處以供參考。 於步驟（III)將上述第一溶液與第二溶液混合，以提供一第三 溶液後’再於步驟（IV)將該第三溶液與上述第四溶液混合，以 提供進行步驟（V)靜電纺絲之第五溶液。

8 201236702 為使所提供之活性成分層具有良好奈米纖維結構，以賦予其優 異之成絲性、透氣性與比表面積，宜調配第五溶液之聚合物成分 (即，成分（bl)與（b2))之含量為使該溶液具有足夠黏度者， 以避免因聚合物分子之含量過低，無法紡出均勻之奈米纖維層。 較佳地，可於步驟（III)調配第三溶液，使成分（bl)之濃度為 約130至170毫克/毫升，且成分（b2)之濃度為約5至30毫克/ 毫升；且於步驟（IV)中，以該第三溶液與該第四溶液之體積總 和為基準，該第三溶液之用量為約60%至95%。更佳地，於步驟 (III)第三溶液中，成分（bl)之濃度為約140至160毫克/毫升， 且成分（b2)之濃度為約5至15毫克/毫升；且於步驟（IV)中， 以該第三溶液與該第四溶液之體積總和為基準，該第三溶液之用 量為約80%至90%。 於步驟（V)中，可使用如第2圖所示之靜電紡絲設備，將第五 溶液置入注射器中，並使用注射器於基底層上方進行靜電紡絲， 以形成纖維層。其中，該靜電紡絲之工作條件為：電壓為約20至 30千伏特；該第五溶液於該注射器中之推進流速為約0.005至 0.015毫升/小時；該注射器之針頭與該基底層之表面的距離為約7 至13公分；且該靜電紡絲之進行時間為約2至8小時。較佳地， 該靜電紡絲之工作條件為：電壓為約24至26千伏特；該第五溶 液於該注射器中之推進流速為約0.008至0.012毫升/小時；該注 射器之針頭與該基底層之表面的距離為約9至11公分；且該靜電 紡絲之進行時間為約3至5小時。 於本發明一具體實施態樣中，係使用以下工作條件以進行靜電 紡絲：電壓為25千伏特；第五溶液於該注射器中之推進流速為0.01 201236702 毫升/小時；注射器之針頭與基底層之表面的距離為10公分；且靜 電紡絲之進行時間為4小時。如後附實施例所示，以上述靜電紡 絲工作條件製得之活性成分層，具有優異之成絲性、透氣性與比 表面積。此外，由於本發明係將積雪草活性成分與聚合物分子混 合，再由該混合物製成奈米纖維，故可大幅增加積雪草活性成分 之表面積3提高其生物利闬度。 如上所述，就敷材之性質而言，控制藥物於敷材中之釋放速率 亦為重要之考量因素之一，蓋因若藥物釋放速率過慢，則無法達 到有效之治療效果；另一方面，一般傷口約須四至八周始能完全 痊癒，若藥物釋放速率過快，使藥物過早流失而導致敷材失效， 則於傷口痊癒前，勢必增加更換敷材之頻率，而導致患者之不便 與不適。此外，部分藥物於高濃度下可能對細胞產生毒性，反而 降低了傷口痊癒之速度，於此情況下，更要避免過快之藥物釋放 速率。為此目的，於製備本發明敷材時，係進一步進行一交聯反 應步驟（VI)，使奈米纖維層交聯反應而形成交聯結構，以維持並 提升活性成分層之纖維結構強度、剛性與穩定性，使積雪草活性 成分不會因纖維結構分解太快而過快釋放，達成控制藥物釋放速 率之效果。 於步驟（VI)中，可以例如約40至60體積％之戊二醛水溶液 作為交聯劑，使該纖維層進行蒸氣交聯反應歷時約35至55分鐘； 更佳地，係以約45至55體積％之戊二醛水溶液使該活性成分層進 行蒸氣交聯反應歷時約40至50分鐘。於一實施態樣中，係以50 體積％之戊二醛水溶液使該活性成分層進行蒸氣交聯反應歷時45 分鐘。如後附實施例所示，經交聯處理後之活性成分層，不論其 201236702 且能有效促進 藥物濃度之高低’皆能維持—定的藥物釋放逮率 傷口瘡合’故具有較市售敷材更佳的癒合療效。 由於本發明敷材可提供良好的荦 幻樂物釋放速率，且_雪草活性 成分具有改善膚質、促進纖維母細胞 田飑增生、加逮傷口癒合等功效， 故可應用於各種用途，例如醫療用品 、如#用紗布、醫用繃帶、 或醫用纖維）或美容用品（如美容面膜）等。 本發明亦提供-種製備敷材之方法，其係包含上述⑴至㈤ 之步驟。本發明方法具有製程設備簡單、程序簡易、操作方便、 以及成本低廉等優點。 兹以下列具體實施態樣以進-步例示說明本發明。其中該些實 施例僅提供作為說明，而非用以限制本發明之範疇。 [實施例1]積雪草萃取液之細胞試驗 將乾燥的積雪草（購自中藥行）研磨成粉狀，將乾燥的積雪草 (購自中藥行）研磨成粉狀，取1公克粉末溶於2〇毫升之溶劑（9〇 體積％甲醇溶於水）中，並於室溫下攪拌5小時，再以濾紙過濾。 將慮液經由抽氣減壓漠縮乾燥後得到積雪草萃取物，接著將該萃 取物溶於水中配置成濃度為2500微克/毫升之萃取液。 將原始濃度為2500微克/毫升之積雪草萃取液對半稀釋成6個 不同濃度（78、156、312、625、1250、或2500微克/毫升）之樣 品，並與纖維母細胞L929 (購自台灣財團法人食品工業發展研究 所）進行共培養以進行 MTT ( 3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，商品名.售哇藍）试驗’ 實驗結果顯示於第3圖。 第3圖顯示，纖維母細胞在積雪草萃取液濃度為156微克/毫升 201236702 時的增生率最佳，而在312微克/毫升以上濃度的增生率有，下降的 趨勢，且相較於對照組，藥物濃度在2500微克/毫升時達到最明顯 的抑制效果。 [實施例2】製備含積雪草萃取液之敷材 [製備積雪草萃取液1 將乾燥的積雪草（購自中藥行）研磨成粉狀，取1公克粉末溶 於20毫升之溶劑（90體積％甲醇溶於水）中’並於室溫下攪拌5 小時，再以濾紙過濾。將濾液經由抽氣減壓濃縮乾燥後得到積雪 草萃取物，接著以微量天平量秤312毫克之萃取物，並回溶於1 毫升去離子水中得到定量的積雪草萃取液（即，製得一第四溶液）。 [靜電紡絲] (1 )配置進行靜電紡絲用之溶液 首先將10毫升的曱酸置入1〇〇毫升燒杯中並攪拌，再量取i 7 公克之明膠粉末（購自SigmaChemkalc。，美國），緩慢倒入擾 拌中的曱酸中後，以料紙封口，再_2Q分鐘（即製得一第 接著’於另—_毫升之大燒杯中裝約50毫升去離子 水’放置在加祕上加熱至欺，再於另—⑽料小燒 10毫升去離子水，並量秤1公克聚乙 昭和-級，試藥級，日本）加人小燒杯中::蹲自SH隱， 水加敎，自動再置於大燒杯内隔 加…自動攪拌30分鐘（即，製得一第二溶 將明膠溶液抽吸1毫升並 並充分授拌i ' 1毫升聚乙烯醇溶液’ 溶液並去畢後；1㈣0轉/聚乙稀醇 /、後，添加1毫升之312毫克/毫 膠/聚乙烯醇、开之積4草年取液至明 岭液中，均句搜拌1小時（即，製得一第五溶液）。

12 201236702 (2) 製備幾丁聚醣層 將2公克幾丁聚醣粉末（購自sigma Chemical Co.，美國）加入 20毫升醋酸中溶解後均勻混合，再加入980毫升去離子水攪拌24 小時後’倒入玻璃器皿中並置於抽氣櫃内成膜，即製得一薄膜形 式之幾丁聚醣層。 (3) 進行靜電紡絲 靜電紡絲之設備係如第2圖所示。將以上步驟製得之10毫升明 膠/聚乙烯醇/積雪草萃取液之混合溶液（即，第五溶液）置入一 1〇毫升針筒（或注射器）2⑽内，將針筒接上導管後連接一微量 推進器（未示出），另一端則接上金屬針頭210，將高壓電極（+ ) 接上金屬針頭210，設定微量推進器的流速後，將以上步驟（2) 製得之幾丁聚聽層（基底層220)置於接地收集板（_)上，此時 啟動高壓電電源（注意此時周邊所有可能導電的物品），開始進行 靜電紡絲，並收集電紡纖維。靜電紡絲之工作條件為：電壓為25 千伏特；混合溶液於針筒中之推進流速為〇.〇1毫升/小時；針筒200 之針頭210與幾丁聚醣層220之表面距離為10公分；且靜電紡絲 之進行時間為4小時。製得—靜電紡絲明膠結合積雪草活性成分 之奈米纖維層。 將該奈米纖維層裁切為直徑為20毫米大小的圓型試片，再以50 體積戊二醛進行蒸氣交聯45分鐘後，將該奈米纖維層放置於直 徑為8公分的培養皿中，最後在抽氣櫃中放置1小時使戊二醛完 全择發，即製得本發明含積雪草活性成分之敷材，其包含一活性 成为層（electrospinning gelatin nanofiber combined with ’下文簡稱為「egc活性成分層」）。使用掃描式電子顯微

S 13 201236702 鏡（SEM)觀察EGC活性成分層之表面型態，結果如第4圖所示。 第4圖顯示EGC活性成分層經由靜電紡絲紡在幾丁聚醣表面後 形成雙層結構，可觀察到上層的EGC活性成分層經由電紡的成絲 性貼附於幾丁聚醣層表面，其厚度經由計算為約40±5微米，下層 為幾丁聚醣層，其厚度為約300±35微米。 [實施例3】積雪草萃取液比例對EGC活性成分層之影響 第5圖為不含積雪草萃取液之EGC活性成分層的掃描式電子顯 微鏡圖，其中靜電紡絲的溶液成分體積比為明膠：聚乙烯醇=9: 1， 經統計分析後測得其纖維平均直徑為約150至350奈米。由實施 例1之MTT測試得知積雪草萃取液之最佳濃度為156微克/毫升， 將此濃度之積雪草萃取液以不同體積比例加入靜電紡絲溶液中進 行電紡，分別為明膠/聚乙烯醇溶液（明膠/聚乙烯醇=9/1):積雪 草萃取液=9:1、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、 及1:9。以掃描式電子顯微鏡觀察製得之EGC活性成分層之表面， 其形態如第6圖所示（A到I分別為添加1〇〇/0、20%、30%、40%、 50%、60%、70%、80%、及90%的積雪草萃取液）。 由第6圖可觀察到在明膠/聚乙烯醇溶液與積雪草萃取液之比例 為6:4下所紡出之纖維表面含有許多水珠，表示其溶液黏度不足， 造成電紡成絲性不佳’而以明膠/聚乙烯醇溶液與積雪草萃取液之 比例為9: 1時’可紡出較佳之具有均勻纖維的EGC活性成分層。 [實施例4】靜電紡絲工作時間對EGC活性成分層之影響 將積雪草萃取物濃度156微克/毫升等倍放大為2〇0及300倍（即 31200及46800微克/毫升），並依據與實施例2中相同之方法製備 201236702 含有不同濃度之積雪草萃取液的EGC活性成 工作時間為1、4弋1yI , 士 靜电、·万、，糸之 作子巧4或14小時。接著’將製得之咖 纖維母細胞L929雄m▲ 戌风刀廣興 以7… 結果顯示於第7圖。 由弟圖可看出，靜電紡絲工作時間以小時之舰活性成分 層對母細胞並無顯著之增生作用，而在靜電紡絲工作時間 為Η小時下，對於纖維母細胞有增生效果的為扇倍濃度之朦 活性成分層，_倍濃度之咖雜成分層反__濃度過高 而產生細胞毒性。此外，纖維母細胞在靜電纺駐作時間為4小 時之EGC活性成分層有顯著的增生情形，推測在以31耀微克/ 毫升之藥物濃度進行4小時之靜電纺絲條件下，所提供的聊活 性成分層所含積雪草萃取液較接近體外細胞試驗中之藥物濃度 156微克/毫升的效果。 [實施例5】EGC活性成分層之藥物釋放速率分析 為了確認所製造之EGC活性成分層在加入積雪草萃取液後，是 否能在一定速率下正常地將積雪草活性成分釋出，本試驗將EGC 活性成分層浸泡於去離子水中達一天，並藉由高效能液相層析儀 (HPLC)對EGC活性成分層浸泡液成分中積雪草苷的含量進行 測定，結果顯示於第8A圖至第8C圖。經由測量HPLC圖譜中的 積雪草苷吸收峰面積’測得於第1天，藥物濃度為46800微克/毫 升的EGC活性成分層’釋放積雪草苷之積分面積為57.88 (第8A 圖）；藥物濃度為31200微克/毫升的EGC活性成分層之積分面積 為53.23 (第8B圖）；而藥物濃度為156微克/毫升的EGC活性成 分層之面積是55.48 (第8C圖）。 此結果說明由藥物濃度經過200或300倍放大的積雪草萃取液

S 15 201236702 所製備成的EGC活性成分層’具有與體外細胞試驗中 田 使細胞增生受到抑 物濃度（即156微克/毫升）所製得之EGC活性成分層相同的藥物 釋放速率’可釋放出相同的積雪草苦濃度。此說明本發明敷材。 有效控制藥物釋放，除可有效地釋放出活性成分進行治療夕卜 可避免因藥物釋放濃度過高而產生細胞毒性， 制而無法達成細胞修復的不利結果。 [實施例6] EGC活性成分層降解率與膨潤度測試 將實施例2中製得之敷材置於去離子水中，並觀察其降解速率， 結果顯示於第9圖。由帛9圖可觀察到經過戊二酸交聯處理的_ 活性成分層浸泡在去離子水巾，由第1天之降解比率观緩慢上 升到第4天的32_5%，再由第7天的降解比率35%逐漸上升至^ 14天的40。/。’第21天之降解比率則為42.5%。 此結果說明經過交聯作用後的EGC活性成分層之結構增強 用於傷口治療上不會太快被體液分解，而且其結構至少可以 μ 達天之久，因此’在傷口修復的周期内，本發明敷材可 揮支持及促進纖維母細胞生長的功能。 另-方面，量測EGC活性成分層在去離子水中的膨潤度結果 顯示於第1G圖。第1G圖顯示經過戊二搭交聯處理的咖活性 分層浸泡在去離子水中，在第3小時膨潤度達原本重量的^并 在第6小時緩慢上升至！.55倍，第12小時為16倍逐漸上升〇到 第24小時為1.7倍，到第48小時膨潤度逐漸趨於平穩至1 此膨潤度測試結果說明經由交聯處理的咖活性成分層使用。在 傷口治療上’可維持其良好姓拔 在 艮好π構，EGC活性成分層的膨潤程戶 不會因纖維的直徑變化過大，以致於失去模仿細胞外基質= 201236702 能’仍能使纖維母細胞在此結構上可順利地貼附及生長。 [實施例7】EGC活性成分層之水接觸角測試 進行EGC活性成分層之水接觸角測試’結果顯示於第u圖。 第Π圖顯示，未添加積雪草萃取液之egc活性成分層的水接觸 角角度約在40±3度，而添加積雪草萃取液的EGC活性成分層之 水接觸角角度約在44±4度左右，經過統計分析，添加積雪草萃取 液與未添加積雪草萃取液之活性成分層的水接觸角並無顯著差 異，其角度均小於90度。因此，EGC活性成分層經戊二醛進行 45分鐘蒸氣交聯後，並不會影響其親水性結構。 [實施例8】動物試驗 本實驗以本發明敷材進行大鼠傷口治療之動物試驗。將SD大鼠 (購自樂斯科生物科技股份有限公司）分為4組：A_實驗組：含 積雪草萃取液46800微克/毫升之EGC活性成分層；B_控制組：不 含積雪草萃取液之EGC活性成分層；C-對照組：市售敷材；D-空 白組。試驗結果顯示於第12圖。 第12圖為SD大鼠在第14天之傷口修復的巨觀圖，藉由運算軟 體计算大鼠皮膚再生的癒合面積，得到4組的修復率分別為A-實 驗組.88.68±0.82 %，B-控制組：83.96±1.70 % ; C-對照組：34.30 ±1.24 % ; D-空白組：7〇.88±2.60 %，即a-實驗組>Β_控制組> d-空 白組>C-對照組。可觀察到C-對照組之市售敷材於創傷組織有沾黏 的情形，在取下敷材的同時也會傷害到新生組織，故其修復率僅 達到34 %左右。完全不置入任何敷材直接蓋上紗布的B控制組， 藉由老鼠本身自體癒合可達到70 %的修復率。添加積雪草萃取液 201236702 的A-實驗組對於SD大鼠皮膚創傷的修復率最佳，可以達到近9〇% 的修復率’即使未添加積雪草萃取液的敷材也可達到83 %的修復 率，說明本發明敷材之材料本身有優異的生物適應性，能幫助纖 維母細胞增生，而添加積雪草萃取液更能加速_母細胞的生 長’因此’本發明㈣可促進創傷組織加速癒合能夠達到短時 間内修復創傷組織之效果。 上述實施例僅係用以例示說明本發明之原理及功效，而非用於 限制本發明。任何熟於此項技藝之人士均可在不違背本發明之技 術原理及精神的情況下，對上述實施例進行修改及變化。因此， 本發明之權龍護範圍應如後述之_料利㈣所列者。· 【圖式簡單說明】 第1圖所示為本發明敷材之雙層結構的示意圖； 第2圖所示為用於製備本發明敷材之靜電料設備的示意圖； 第3圖所不為積雪草萃取液濃度對纖維母細胞生長之影響的統 計直條圖； 第4圖所7F為本發明敷材之掃描式電子顯微鏡（sem)圖； 第5圖所示為不含積雪草萃取液之EGC活性成分層的隱圖； 第6圖所不為由含不同體積比率之積雪草萃取液的靜電纺絲溶 液製得之EGC活性成分層的SEM圖； 第7圖所示為由不同靜電訪絲工作時間製得之EGC活性成分層 對纖維母細胞生長之影響的統計直條圖； 第8A圖至第8C圖所不為由含不同積雪草萃取液濃度之靜電纺 絲溶液製得之EGC活性成分層之積雪草苦釋放濃度的Ηριχ圖 201236702 第9圖所示為EGC活性成分層之降解率的曲線圖； 第10圖所示為EGC活性成分層之膨潤度的統計直條圖； 第11圖所示為EGC活性成分層之水接觸角的統計直條圖； 及 第12圖所示為各種敷材對大鼠傷口癒合之效果的比較圖。 【主要元件符號說明】 1 敷材 2 靜電紡絲設備 10 基底層 20 活性成分層 100 高壓電產生器 200 注射器 210 金屬針頭 220 基底層

Claims (1)

1. 201236702 七、申請專利範圍： 1. 一種敷材，其係包含： (a) —基底層；以及 (b) —活性成分層，其係一奈米纖維層且含有： (bl)明膠及膠原蛋白之至少一者； (b2 )聚乙烯醇；以及 (b3)積雪草苦（asiaticoside )及積雪草（ )萃取物之至少一者。 2. 如請求項1之敷材，其中該基底層係幾丁聚醣層。 3. 如請求項1之敷材，其中於該活性成分層中，以成分（bl) 及（b2)之重量總和為基準，成分（bl)之含量為約80%至 99%。 4. 如請求項1至3中任一項之敷材，其中該活性成分層係藉由 靜電纺絲（electrospinning )技術而形成於該基底層之一表面。 5. 如請求項4之敷材，其中該活性成分層係藉如下操作形成： (I) 提供一第一溶液，其係包含成分（bl); (II) 提供一第二溶液，其係包含成分（b2); (III) 混合該第一溶液與該第二溶液，以提供一第三溶液； (IV) 添加一含成分（b3)之第四溶液至該第三溶液中，以 獲得一第五溶液； (V) 以靜電紡絲技術自該第五溶液形成一纖維層於該基 底層之一表面上；以及 (VI) 進行一交聯反應，使該纖維層交聯反應成該活性成分 層0 ⑤ 201236702 6. 如請求項5之敷材，其中於步驟（III)之該第三溶液中，成 分（bl)之濃度為約130至170毫克/毫升，且成分（b2)之 濃度為約5至30毫克/毫升；且於步驟（IV)之該第五溶液 中，以該第三溶液與該第四溶液之體積總和為基準，該第三 溶液之量為約60%至95%。 7. 如請求項5之敷材，其中於步驟（III)之該第三溶液中，成 分（bl)之濃度為約140至160毫克/毫升，且成分（b2)之 濃度為約5至15毫克/毫升；且於步驟（IV)之該第五溶液 中，以該第三溶液與該第四溶液之體積總和為基準，該第三 溶液之量為約80%至90%。 8. 如請求項5之敷材，其中係於步驟（V)將該第五溶液置入一 配置有一針頭之注射器中，並使用該注射器於該基底層上方 進行靜電紡絲，以形成該纖維層，且其中該靜電紡絲之工作 條件為：電壓為約20至30千伏特；該第五溶液於該注射器 中之推進流速為約0.005至0.015毫升/小時；該注射器之針 頭與該基底層之表面的距離為約7至13公分；且該靜電紡絲 之進行時間為約2至8小時。 9. 如請求項8之敷材，其中步驟（V)之該靜電紡絲之工作條件 為：電壓為約24至26千伏特；該第五溶液於該注射器中之 推進流速為約0.008至0.012毫升/小時；該注射器之針頭與 該基底層之表面的距離為約9至11公分；且該靜電紡絲之進 行時間為約3至5小時。 10. 如請求項5之敷材，其中係於步驟（VI)以約40至60體積 %之戊二醛水溶液使該纖維層進行蒸氣交聯反應歷時約35至 S 21 201236702 55分鐘。 11.如請求項5之敷材，其中係於步驟（VI)以約45至55體積 %之戊二醛水溶液使該活性成分層進行蒸氣交聯反應歷時約 40至50分鐘。 S 22