TW201225852A - Oligosaccharide mixture and food product comprising this mixture, especially infant formula - Google Patents

Description

201225852 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於寡醣混合物及包含該寡醣混合物之食品， 特別是嬰兒配方。 1 【先前技術】 • 人類結腸定殖有眾多種細菌，該等細菌對腸生理具有積 極及消極作用，且具有其他全身性影響。在結腸中發現之 主要細菌群包括擬桿菌species)，具體而今係 雙歧桿菌（Bifidobacteria)、真細菌（Eubacieria)、後狀芽抱 桿菌（C/osirWa)及乳酸桿菌（i：(3Cio6acz7/z.)。該等細菌之活 性因應結腸中之受質利用度、氧化還原電位、pH、〇2壓力 及其分佈而波動。一般而言，可將腸細菌分為對其宿主發 揮潛在有害或有益效應之種類。致病效應（例如，可能由 梭狀芽孢桿菌或凝岸磨引發）包括腹瀉、感染、肝損傷、 致癌作用及腸道腐敗。可經由抑制有害細菌之生長、刺激 免疫功能 '改善必需營養素之消化及吸收以及合成維生素 來誘導促進健康之效應。人們期望可提高可能具有健康促 進性質之細菌群（例如雙歧桿菌及乳酸桿菌）之數量及/或活 V 性。 ' 對於特定嬰兒情形，人們認為在即將出生前’嬰兒胃腸 道係無菌的。在出生過程期間，其遇到來自母親消化道及 皮膚之細菌且開始被定殖。腸微生物叢之組成方面因應嬰 兒之餵養而存在巨大差異。母乳餵養之嬰兒之糞便菌叢包 括可感知雙歧桿菌群體及一些乳酸桿菌，而配方餵養之嬰 160447.doc 201225852 兒具有更複雜之微生物叢’其中通常存在雙碰舁磨！凝濘 磨、梭狀芽孢桿菌及鏈球菌（Sirepiococcf)。在離乳後，確 立與成人腸微生物叢模式類似之模式。 推薦所有嬰兒皆餵養母乳。然而，在一些情形下，由於 醫學原因’或由於母親選擇不餵養母乳，母乳餵養不足或 不順利。業内已研發用於該等情況之嬰兒配方。 一種提高結腸中有益細菌之數量及/或活性之方法係在 食品中添加益菌生。益菌生係藉由選擇性刺激結腸中之一 種或有限數量的細菌之生長及/或活性，由此改善宿主健 康’來對宿主產生有益影響的不可消化性食物成份。該等 成份不在胃或小腸中分解並吸收，且因此其在進入結腸時 保持完整，其在結腸中經有益細菌選擇性發酵，在此意義 上，其係不可消化的。益菌生之實例包括某些寡醣，例如 果寡醣（FOS)及半乳寡醣（GOS)。 已知人乳含有之不可消化性寡醣之量大於大多數其他動 物乳。事實上，不可消化性寡醣代表母乳中之第三大固體 組份（位於乳糖及脂質後），其以12 g/l至15 g/l之濃度存於 初乳中且以5 g/Ι至8 g/Ι之濃度存於成熟乳中。人乳寡醣對 酶促水解具有高抗性，表明該等寡醣可展示與其卡值並不 直接相關之基本功能。 隨著業内對人乳組成之理解日益深入，亦已有人建議將 益菌生添加至嬰兒配方中。例如，可在市場上購得各種補 充有益菌生（例如果寡醣與半乳寡醣之混合物）之嬰兒配 方。然而，該等混合物僅接近人乳中存在之寡醣混合物。 160447.doc 201225852 已在人乳中檢測到超過100種不同寡醣組份，其中一些在 諸如牛乳等動物乳中尚未檢測到，或僅檢測到少量。一些 唾液酸基化寡耱及岩藻聽基化寡膽存在於牛乳及初乳二者 中，但僅存在極少量。 來自 Abbott Laboratories之ΕΡ 〇 975 235 B1 闞述包含一 或多種人乳募醣之合成營養組合物，其中組合物中之HM〇 選自八種HM0(3-岩藻醣基乳糖、乳·Ν_岩藻五醣⑴、乳· Ν·岩藻五醣Π、二岩藻醣基乳糖、2ι_岩藻醣基乳糖、乳― Ν-岩藻五醣I、乳小·新四醣及乳_Ν_岩藻五醣ν)之群，其 中該組合物意欲用於以下情形：正常健康嬰兒、兒童、成 人或具有特殊需求之個體，例如彼等伴隨某些病理病況 者。此歐洲專利陳述，一般而言，募醣保護嬰兒免於呼吸 道、胃腸道及泌尿-生殖道之病毒及細菌感染。 本發明之目標係提供尤其在人類腸中有效作為益菌生之 寡醣混合物。 業内尤其需要目標定為幼兒、嬰兒及/或新生嬰兒之食 品’其有助於獲得正常免疫或發炎狀態，或減輕或降低食 物過敬效應。 業内需要提供上述益處同時保持個體中之平衡正常代謝 之食品。 業内需要藉由並非基於藥物之干預來改善人類腸環境， 該干預與諸如嬰兒或幼兒等虛弱個體相容。 業内需要提供對過敏原之口服耐受性之食品。 【發明内容】 160447.doc 201225852 在一態樣中，本發明係關於寡醣混合物，其包含： i. 5 wt%至70 Wt%之至少一種N_乙醯基化寡醣’其選 自包含以下之群：N-乙醯基_胺基半乳糖基·乳糖 (=GalNACal，3Gaip 1，4Glc=3'GalNAc-lac)及半乳糖基 _N- 乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖（=Galpl，6GaINAcal, 3Galpl,4Glc=6’Gal-3GalNAc-lac)，及 ιι· 5 wt%至90 wt%之至少一種半乳寡醣，其選自包含 以下半乳糖基-雙醣或半乳糖基寡醣中之一或多者之 群：Galpl，6Gal (=β1，6-二半乳糖苷）、Gaip^Gaiy， 4Glc(=6’Gal-lac)、Gaipi，6Gaipi，6Glc、Gaipi，3Galpl, 3Glc ' Gaipi,3Galpl54Glc(=3'Gal-lac) ' Gaip 1,6Gaip 1, 6Galpl，4Glc(=6’，6-二 Gal-lac)、Galpl，6Gaipi，3Galpl， 4Glc(=6’，3-:Gal-lac)Gaipi，3Gaipi，6Gaipi,4Glc(=3，，6-二 Gal-lac)、Gaipi，3Gaipi，3Galpl，4Glc(=3，，3-:Gal-lac)、Gaipi，4Galpl，4Glc(=4，Gal-lac)及 Galpl，4GaIpl， 4Galpl，4Glc( = 4',4-:Gal-lac)，& iii· 2 wt%至50 wt%之至少一種唾液酸基化寡醣，其選 自包含以下之群：3·-唾液酸基乳糖（NeuAca2, 3Gaipi,4Glc)及 6'-唾液酸基乳糖（NeuAca2,6Gaipi， 4Glc)，及/或 iv. 5 wt%至70 wt%之至少一種岩藻醣基化寡_，其選 自包含以下之群：Fucal，2Gaipi，4Glc(2·-岩藻醣基乳 糖）、Gaipi，4(Fucal，3)Glc(3-岩藻醣基乳糖）、 Fucal,2Galpl，4(Fucal，3)Glc(二岩藻醣基乳糖）、 160447.doc 201225852 乳-N-岩藻五醣（換言之，Fucal，2Gaipi,3GlcNAcpl， 3Gaipi，4Glc-乳-N-岩藻五醣I、Gaipi，3(Fucal，4)GlcNAcpl, 3Gaipi，4Glc-乳-N-岩藻五醣II、Gaipi，4(Fucal，3)GlcNAcpi， :;Gaipi，4Glc-乳-N-岩藻五醣 III及 Gaipi，3GlcNAcpi， :!Gaipi，4(Fucal,3)GlcH-N-giS_V)、Fucal，2Gaipi， 3(Fucαl，4)GlcNAcβl，3Galβl,4Glc(乳-N-二岩藻六醣 ·[)、Galbl，4(Fucal,3)GlcNAcbl，6(Galbl,3GlcNAcbl，3)Galbl, 4Glc(單岩藻醣基乳-N-六醣）、Fucal，2Gaipi， 3GlcNAcpi，3(Galbl，4(Fucal，3)GlcNAcbl，6)Galbl，4Glc (二岩藻醣基乳-N-六醣I)、及Gaipi,4(Fucal,3)GlcNAcpi， 3(Galbl，4(Fucal，3)GlcNAcbl，6)Galbl，4Glc(二岩藻 醣基乳-N-新六醣II)。 化合物係藉由其結構來定義，其中GalNAc係N-乙醯基 半乳糖胺，GlcNAc係N-乙醯基葡醣胺，Gal係半乳糖， NeuAc係N-乙醯基神經胺酸，Fuc係岩藻醣且Glc係葡萄 糖。 各成份之上述混合物係尤其有效地作為益菌生之新穎保 護性及免疫調節性組合物。該混合物在結構上比市售益菌 生成份（例如FOS及GOS)更接近人類母乳寡醣，此乃因事 實上其包含（例如）特定酸性（唾液酸基化）及中性（岩藻醣基 化或乙醯基·乳糖胺或其他）寡醣之混合物。 在一實施例中，寡醣混合物可源自動物乳，例如牛乳、 山羊乳或水牛乳中之一或多者。 在另一實施例中，寡醣混合物係合成組合物。 1604^-7.doc 201225852 在另一態樣中，本發明係關於包含上述寡醣混合物之食 品。視情況，建議該食品作為嬰兒食物或配方，但該產品 可用於幼兒、嬰兒或成人食用之任何食物或飲料。成人通 吊在需要時、具體而言在臨床營養之技術領域使用本發明 募醣混合物。含有此一寡醣混合物作為益菌生之食品之食 用將選擇性促進結腸中一種或有限數量之有益細菌之生長 及/或活性’且將由此改善宿主之健康。 【實施方式】 本文中所用之以下術語具有以下含義。 術語「嬰兒」意指年齡小於12個月之兒童。 術”吾「年幼兒童」意指年齡介於丨歲與3歲之間之兒童。 衍要兒配方」思指意欲用於在生命之最初4個月至6 個月期間之嬰兒之特定營養用途且本身滿足此類人之營養 要求之食品（1991年5月14曰關於嬰兒配方及較大嬰兒配方 (f〇U〇W-up formula)之歐洲委員會指令（Eur〇pean ⑽

Directive) 91/321/EEC 第 1.2條）〇 術》。較大嬰兒配方」意指意欲用於年齡超過4個月之 嬰兒之特定營養用途且構成此類人逐漸多樣化之飲食中之 主要液體要素之食品。 術語「初生嬰兒配方（Starter infant f〇muU)」意指意欲 用於在生命之最初4個月期間之嬰兒之特定營養用途之食 品0 術語「幼兒食物」意指意欲用於在生命第1年期間之嬰 兒之特定營養用途之食品。 160447.doc 201225852 術語「嬰兒穀類組合物」意指意欲用於在生命第1年期 間之嬰兒之特定營養用途之食品。 術語「成長乳」意指適應年幼兒童之特定營養需求之基 於乳之飲品。 術語「離乳期」意指藉由嬰兒飲食中之其他食物替代母 乳之階段。 術語「增強對過敏原之口服耐受性」意指當口服時降低 對過敏原之敏感性。 術語「營養組合物」意指給予個體營養之組合物。此營 養組合物通常係口服或靜脈内服用，且其通常包括脂質或 脂肪來源及蛋白質來源。 術語「合成組合物」意指藉由化學及/或生物（例如酶）方 式獲得之組合物，其可在化學上與哺乳動物乳中天然存在 之組合物相同。只要至少-種組合物組份係藉由化學及/ 或生物（例如酶）方式獲得，即可稱該組合物係合成組合 物。 術浯「低致敏性組合物」意指不太可能引起過敏反應之 組合物。 術浯N•乙醯基化」寡醣意指具有N-乙醯基之寡醣。 術-f液酸基化寡醣」意指具有唾液酸殘基之募醣。 m「μ醣基化寡骑」意指具有岩絲殘基之募畴。 術s吾「益菌冷 音4匕 ， 」忍扣不可消化性碳水化合物，其藉由選 择性刺激人類結腸^ Φ ''中之健康細菌（例如雙歧桿菌）之生長及/ 或活性來有器灿旦彡站，+ 系/ β 依支{Gibson GR、Roberfroid MB. 160447.doc 201225852

Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J Nutr. 1995; 125: 1401-12)。 術語「益生菌」意指對宿主之健康或身體狀況具有有益 效應之微生物細胞製劑或微生物細胞組份。（Salminen s ' Ouwehand A.、Benno Y.等人，「iVoMoi/c·?: /zow Aow/i/ they be defined j Trends Food Sci. Technol. 1999:10 107-10) ° 「過敏」係已由内科醫師檢測到並可以不定時方式或以 更持久方式治療之過敏。「食物過敏」係對營養產品之過 敏。 除非另有說明，否則所有百分比均以重量計。 本發明寡醣混合物較佳係低致敏性組合物。 本發明提供寡醣混合物，其較佳包含： i. 5 wt%至5 0 wt%之至少一種N-乙醯基化寡醣，其選 自包含以下之群：N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖及 半乳糖基-N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖， ii. 5 wt%至70 wt%之至少一種半乳寡醣，其選自包含 以下半乳糖基-雙醣或半乳糖基寡醣中之一或多者之 群：Galpl，6Gal、Galpl,6Gaipi，4Glc、Gaipi，6Galpl， 6Glc、Galpl，3Gaipi,3Glc、Gaipi，3Gaipi，4Glc、Gaipi， 6Gaipi，6Gaipi，4Glc、Gaipi，6Gaipi，3Gaipi，4Glc、Galpl， 3Galpl，6Gaipi，4Glc、Gaipi，3Gaipi，3Galpl，4Glc、Gaipi， 4Galpl，4Glc^Gaipi，4Gaipi,4Galpl，4Glc， 160447.doc •10· 201225852 iii. 2 wt%至40 wt%之至少一種唾液酸基化寡醣，其選 自包含以下之群：3'-唾液酸基乳糖及6··唾液酸基乳 糖，及/或 iv. ].0 wt%至70 wt%之至少一種岩藻醣基化寡醣，其選 自包含以下之群：2'-岩藻醣基乳糖、3-岩藻醣基乳 糖、二岩藻醣基乳糖、乳-N-岩藻五醣、乳-N-二岩 藻六醣I、單岩藻醣基乳六醣、二岩藻醣基乳-N-六醣I及二岩藻醣基乳-N-新六醣Π。 更佳地，該混合物包含： '·· 10 wt%至40 wt%之N-乙醯基化寡醣， :ii，5 wt%至35 wt%之半乳寡醣， iii. 2 wt%至20 wt%之唾液酸基化寡醣及 iv. 30 wt%至60 wt%之岩藻醣基化募醣。 尤佳混合物包含25 wt%之N-乙醯基化寡醣、20 wt%之半 乳寡酵、10 wt%之唾液酸基化寡醣及45 wt%之岩藻醣基化 寡醣> 本發明者已驚奇地發現，本發明寡醣混合物在包含於食 品中時尤其有利於預防食物過敏及相關食物過敏對健康之 效應及降低其風險及/或降低其嚴重性及/或降低其發生 率。該等效應較佳係⑴皮膚效應、異位性皮膚炎、皮疹或 發紅；（ii)對免疫系統或發炎狀態之效應；或（iH)對胃腸道 系統之效應，例如絞痛、腹痛及諸如此類。 本發明寡醣混合物可源自動物乳。該乳可得自任何哺乳 動物’具體而言得自牛、山羊、水牛、馬、象、路轮或綿 160447.doc 201225852 羊。 另一選擇為，寡醣混合物可藉由購買並混合個別組份來 製備。舉例而言，合成半乳寡醣（例如Galpl，6Gal、 Gaipi,6Galpl,4Glc ' Gaip 1,6Galp 1,6Glc ' Galp 1,3Gaip 1, 3Glc、Galpl，3Gaipi，4Glc、Gaipi，6Gaipi，6Gaipi，4Glc、 Gaipi，6Galpl，3Galpl，4Glc、Galpl，3Gaipi，6Gal01，4Glc、 Galpl，3GaIpl，3Galpl，4Glc、Gaipi，4Galpl，4Glc 及 Galpl， 4Gaipi，4Gaipi，4Glc及其混合物）可以商標vivinai®及 Elix'or®自市場購得。其他寡醣供應商係Dextra

Laboratories、Sigma-Aldrich Chemie GmbH 及 Kyowa

Hakko Kogyo有限公司《另一選擇為，可使用特定醣基轉 移酶（例如半乳糖基轉移酶）來產生半乳寡醣。 N-乙醯基化寡醣可藉由胺基葡醣苷酶及/或胺基半乳糖 苷酶對N-乙醯基-葡萄糖及/或Ν·乙醯基半乳糖之作用來製 備。同樣，N-乙酿基-半乳糖基轉移酶及/或义乙醯基_膽基 轉移酶可用於此目的。N_乙醯基化寡醣亦可經由使用發酵 技術使用各別酶（重組或天然酶）及/或微生物發酵來產生。 在後一情形中，微生物可表現其天然酶及受質或可經改造 以產生各別受質及酶。可使用單一微生物培養物或混合培 養物。可由受體受質自聚合度（Dp)=1往前之任一聚合度為 起點開始形成N-乙醯基化寡醣。另一選擇係將游離或與寡 醣結合（例如乳果醣）之酮基_己醣（例如果醣）化學轉化為n_ 乙醯基己醣胺或含N_乙醯基己醣胺之寡醣，如Wrodnigg， Τ·Μ. , Stutz, A.E. (1999) Angew. Chem. Int. Ed. 38:827- I60447.doc 201225852 828中所述。 唾液酸基化寡醣3'-唾液酸基乳糖及6，-唾液酸基乳糖可藉 由層析或過濾自天然來源（例如動物乳）分離。另—選擇 為’其亦可藉由生物技術方法使用特定唾液酸基轉移酶或 唾液酸酶（神經胺酸酶）藉由基於酶之發酵技術（重組或天然 酶）、藉由化學合成或藉由微生物發酵技術來產生。在後 一情形中，微生物可表現其天然酶及受質或可經改造以產 生各別受質及酶。可使用單一微生物培養物或混合培養 物。可由受體受質自聚合度（DP)=1往前之任一聚合度為起 點開始形成唾液酸基寡醣。 岩澡耱基化寡聽可選自包含以下之群：2'-岩藻酿基乳 糖、3-岩藻醣基乳糖、二岩藻醣基乳糖、乳_N_岩藻五醣 I、乳-N-岩藻五醣π、乳-N-岩藻五醣;[Π、乳_N_岩藻五醣 V、乳-N-二岩藻六醣！、單岩藻醣基乳_N_六醣、二岩藻醣 基乳-N-六醣I及二岩藻醣基乳新六醣π。 尤佳岩藻醣基化募醣係2，-岩藻醣基乳糖。 岩讓畴基化寡酿可藉由層析或過濾技術自天然來源（例 如動物乳）分離。另一選擇為，其可藉由生物技術方法使 用特定岩藻_基轉移酶及/或岩藻醣苷酶經由使用基於酶 之發酵技術（重組或天然酶）或微生物發酵技術來產生。在 後一情形中，微生物可表現其天然酶及受質或可經改造以 產生各別受質及酶。可使用單一微生物培養物及/或混合 坨養物。可由受體受質自聚合度（DP)=1往前之任一聚合度 為起點開始形成岩藻醣基化寡醣。另一選擇為，岩藻醣基 1604.V7.doc •13- 201225852 化寡醣可藉由化學合成自乳糖及游離岩藻醣產生^岩藻醣 基化寡醣亦可購自（例如）Kyowa，Hakko, Kogyo(日本）。 在本發明之較佳態樣中，將上述寡醣混合物納入食品 中。在本發明上下文中，術語「食品」意欲涵蓋任何可食 用物質。因此，其可係意欲由人類食用之產品，具體而言 係嬰兒配方、較大嬰兒配方、嬰兒或年幼兒童食物（例如 嬰兒榖類）及諸如此類。具體而言，可將本發明募醣混合 物納入嬰兒配方、脫水乳或榖類混合物中。 因此，本發明亦包括包含本發明寡醣混合物之食品。該 食品較佳包含蛋白質來源、脂肪來源及碳水化合物來源。 本發明食品亦含有蛋白質來源。人們相信’蛋白質類型 對本發明無關鍵作用，前提係滿足對必需胺基酸含量之最 基本要求且確保良好生長。因此，可使用基於乳清、赂蛋 白及其混合物之蛋白質來源以及基於大豆之蛋白質來源。 然而，蛋白質來源較佳包含介於2〇%與95%之間之乳清蛋 白質及/或源自乳清之蛋白質。就乳清蛋白質而言，蛋白 質來源可基於酸乳清或甜乳清或其混合物，且可以任一期 望比例包括α·乳白蛋白及β-乳球蛋白。 本發明食品通常含有碳水化合物來源。此在本發明食品 係嬰兒配方之情形中尤佳。在此情形中，儘管較佳碳水化 合物來源係乳糖，但仍可使用嬰兒配方中常用之任一碳水 化合物來源’例如乳糖、蔗醣、麥芽糊精、澱粉及其混合 物。 本^明艮。。通常含有脂質來源。若本發明食品係嬰兒配 160447.doc 201225852 方’則此尤其適當。在此情形中’脂質來源可係適用於嬰 兒配方之任_脂質或脂肪。較佳脂肪來源包括棕橺油酸、 向油酸向曰蔡油及高油酸紅花油。亦可添加必需脂肪酸亞 麻油酸h.次絲油酸，亦可添加少量含有大量預形成花 生四稀酸及二十二破六嫌酿之占 * f 奴烯i之油，例如魚油或微生物油。 脂彷來源中n-6與n_3脂肪酸之比率較佳為約Η至約ΐ5:ι ; 例如約8:1至約1 〇: j。 本發明食品較佳亦以營養顯著量含有認為在日常飲食中 所必系之所有維生素及礦物f。已確立對某些維生素及礦 物之最基本要求。本發明食品中視情況存在之礦物、維生 素及其他營養素之實例包括維生素A、維生素B1、維生素 B2、維生素B6、維生素m2、維生素e、維生素κ、維生素 C »維生素D '葉酸、肌醇、於驗酸、生物素、泛酸、膽 鹼、鈣、磷、碘、鐵、鎂、銅、辞、錳、氣、鉀、鈉、 硒、鉻、鉬、牛磺酸及L_肉鹼。礦物通常以鹽形式添加。 特定礦物及其他維生素之存在及量將視既定群體而變化。 右需要，則本發明食品可含有乳化劑及穩定劑，例如大 豆卵磷酯、單-及二甘油脂之檸檬酸酯及諸如此類。 本發明食品亦可含有可能具有有益效應之其他物質，例 如乳鐵蛋白、核苷酸、核苷及諸如此類。 本發明食品較佳係合成營養組合物。在此情形中，其可 係初生嬰兒配方、嬰兒配方、幼兒食物、嬰兒穀類組合 物、較大嬰兒配方或成長乳，且該食品較佳係初生嬰兒配 方0 160 私 7.doc -15- 201225852 本發明食品可進一步包含至少一種益生菌菌株，該益生 菌菌株較佳係雙歧桿菌及/或乳酸桿菌。該食品尤其有利 於增強對過敏原之口服耐受性。 適宜益生菌菌株包括以商標LGG得自Valio Oy(芬蘭）之 鼠李酷乳酸桿菌r/zamwosws) ATCC 53103、 鼠李醣乳酸桿菌CGMCC 1.3724、類乾酪乳酸桿菌 {Lactobacillus paracasei) CNCM 1-2116 ' 由 BioGaia A.B以 商標Reuteri出售之路氏乳酸桿菌（Lac/oimci/ZMS rewieri)、 約氏乳酸桿菌CNCM 1-1225、由 BLIS Technologies有限公司（紐西蘭）以名稱KI2出售之唾液 鍵球菌sa/ivar/wi) DSM 13084、尤其由 Christian Hansen公司（丹麥）以商標Bb 12出售之乳酸雙歧 桿菌/izciij) CNCM 1-3446、由 Morinaga Milk Industry有限公司（日本）以商標BB536出售之長雙歧桿 菌/owgMW) ATCC BAA-999、由 Danisco以 商標Bb-03出售之短雙歧桿菌、由 Morinaga以商標Μ-16V出售之短雙歧桿菌、由Procter & Gamble公司以商標Bifantis出售之嬰兒雙歧桿菌 及由 Institut Rosell (Lallemand) 以商標R0070出售之短雙歧桿菌。 除了本發明寡醣混合物以外，諸如嬰兒配方等食品可包 含一或多種可單獨添加之其他寡醣。 本發明食品可進一步包含至少一種益菌生，其量通常介 於食品重量之0.3重量％與10重量％之間。 160447.doc •16- 201225852 舉例而言’食品亦可包含除了本發明寡醣混合物中之寡 醣以外之益菌生。益菌生通常不在胃或小腸中分解並吸 收’且因此其在進入結腸時保持完整，其在結腸中經有益 細銪選擇性發酵，在此意義上，其係不可消化的。益菌生 之實例包括某些寡醣，例如果寡醣（F〇S)及半乳寡醣 (GOS)。可使用益菌生之組合，例如9〇〇/0 GOS與10%短鏈 果皋醣（例如在BENEO-Orafti以商標〇rafti®寡果聽（先前係 Raitilose®)出售之產品中）或1〇%菊醣（例如BENE〇_〇ra出 以商標Orafti®菊醣（先前sRaftUine⑧）出售之產品中）之組 合。益菌生之尤佳組合係7〇〇/。短鏈果寡醣及3〇%菊醣，其 係由BENEO-Orafu以商標「Prebi〇、」出售之產品。 本發明食品較佳包含水解蛋白質。此係增強對過敏原、 尤其食物過敏原之口服耐受性之協同效應之基礎。 水解蛋白質可視水解反應進行之程度描料「部分水 解」或「廣泛水解」。當前，根據WAO(世界過敏組織， W〇rld AUergy Organization)關於牛乳蛋白質過敏（CMA)之 準則廣泛水解產物尚無統一之法律/臨床定義，但WA〇 一致認為’已證明水解配方係患有CMA之嬰兒之有用且廣 泛使用之蛋白g來源。在本發明中，部分水解蛋白質係 60/。主70/。之蛋白質/肽群具有小於1〇〇〇道耳頓（^如^之 分子量者’而廣泛水解蛋白質係至少95%之蛋白質/肽群且 有小於胸道耳頓之分子量者》當前，工業中使用該等i 義。1分水解蛋白質通常視為低致敏性（HA)，而廣泛水解 蛋白貝通㊉視為非致敏性。水解蛋白質及/或部分水解蛋 160447.doc 17 201225852 白質可降低過敏（對牛乳或其他類型之過敏原）之風險。 本發明食品可包含水解蛋白質。水解蛋白質較佳可有介 於10%與100%之間、更佳介於15%與95%之間之蛋白質/肽 群具有小於1〇〇〇道耳頓之分子量。 本發明水解蛋白質之水解程度可以NPN/TN %來描述。 廣泛使用相對於總氮之非蛋白質氮作為藉由酶促水解產生 之可溶肽之量度。NPN/TN%意指（非蛋白質氮除以總氮）X 100。NPN/TN% 玎如在 Adler-Nissen J-, 1979, J. Agric. Food Chem.，27 (6), 1256-1262中所詳述來量測。一般而 言，廣泛水解蛋白質描述為具有大於95%之NPN/TN%，而 部分水解蛋白質描述為具有在75°/〇至85%之範圍内之 NPN/TN%。在較佳實施例中’本發明水解蛋白質具有在 70%至90%、較佳75%至85%之範圍内之NPN/TN %。後一 水解蛋白質係「部分」水解蛋白質。該等水解蛋白質之特 徵亦可在於，其60%至70%之蛋白質/肽群具有小於1〇〇〇道 耳頓之分子量。 根據本發明，水解蛋白質之水解程度在介於50與1〇〇之 間、較佳介於65與99之間之NPN/TN %範圍内。 在期望「廣泛」水解蛋白質之另一較佳實施例中，本發 明水解蛋白質具有在大於95%之範圍内之NPN/TN %。此 水解蛋白質之特徵亦可在於’其至少95%之蛋白質/肽群具 有小於1000道耳頓之分子。 水解程度亦可使用與游離離胺酸反應之試劑（例如三硝 基苯磺酸（TNBS))來量測。本發明水解蛋白質之TNBS反應 160447.doc -18 - 201225852 眭氮％胺基（離胺酸）Ν/ΤΝ通常在8。/。至15%、較佳9%至14〇/〇 之範圍内。 ° 根據本發明較佳實施例，本發明食品較佳用於預防食物 . 過敏及相關食物過敏對健康之效應及降低其風險及/或降 低其嚴重性及/或降低其發生率，該等效應較佳係皮膚 • 效應、異位性皮膚炎、皮疹或發紅；（ii)對免疫系統或發 炎狀態之效應；或（iii)對胃腸道系統之效應，例如絞 痛、腹痛及諸如此類。 根據本發明之另一實施例，本發明食品用於增強對過敏 原之口服财受性。 根據較佳實施例’本發明食品用於嬰兒及年幼兒童，其 較佳係嬰兒配方、較大嬰兒配方、成長乳或幼兒食物。 本發明亦包括包含本發明寡醣混合物作為合成營養組合 物（即作為合成營養劑）之食品之用途，其用於預防食物過 敏及相關食物.過敏對健康之效應及降低其風險及/或降低 其嚴t性及/或降低其發生率。 本發明亦包括包含本發明寡醣混合物作為合成營養組合 物（即作為合成營養劑）之食品之用途，其用於增強對過敏 原之〇服耐受性。 ' 在一實施例中’本發明涵蓋所主張本發明寡醣混合物之 用途，其用於降低過敏或發炎相關病況之發生率或嚴重 性。在一實施例中’該用途係用於增強免疫狀態及/或抵 抗感染。在一實施例中，該用途係用於降低腹痛及/或緩 和腸不適及/或改善’肖化道之狀態。在一實施例中，本發 160447.doc -19- 201225852 明目標群係嬰兒或兒童群體，尤其係彼等具有出現不期望 病況（例如過敏、慢性發炎、皮膚發紅、皮疹、腸痛或感 染）之風險之嬰兒。更具體而言，目標尤其係彼等具有該 等病況之家族史或已經歷彼等病況之數次發作者。在一實 施例中，本發明之組合物及用途適合於具有上述病況之風 險或已經歷上述病況（尤其係呼吸過敏或皮膚過敏）之發作 之青少年或成人。 該等用途涵蓋食品混合物係較佳以單位劑量形式提供之 補充品之情形。 。亥食。σ可根據產品類型，依業内已知之任何適宜方式製 備，且可在製程期間之適當階段將本發明寡醣混合物添加 至產m中。舉例而言，嬰兒配方可藉由將蛋白質來源與除 礼糖以外之任何碳水化合物以及脂肪來源依適當比例摻和 在起來製備。若需要可添加乳化劑。維生素及礦物可於 此時添加，但其通常在稍後添加，以避免熱降解。可在摻 和刖將任何親脂性維生素、乳化劑及諸如此類溶解於脂肪 來源中。然後可混入水（較佳為經過逆滲透之水）以形成液 體混合物。 j後，可藉由（例如）將液體混合物迅速加熱至介於約 80 C與約1 50 C之間之範圍内之溫度，並保持約5秒至約$ 刀鐘之持續時間’來熱處理液體混合物，以降低細菌載 S。此可藉助蒸汽注入、高壓釜或熱交換器(例如，板式 熱交換器）來實施。 後可藉由（例如）急驟冷卻法，將液體混合物冷卻至 160447.doc -20. 201225852 。然後，可分（例如）兩個階段再次將

約60°C與約85°C之間 液體混合物均質化， Mpa之間，且在第二 將均質化混合物轉移至適宜乾燥裝置（例如，喷霧乾燥 器或冷凍乾燥器）中並轉化為粉末。粉末之水分含量應小 於約5重量％。N-乙酿基化寡醣、半乳寡聽、唾液酸基化 寡醣及岩藻醣基化寡醣可在此階段藉由與 使用時卜起乾燥混合後添加，或由其以晶體糖 益生S丨菌株（若使用時）一起摻和並喷霧乾燥（或冷凍乾燥） 較佳藉由乾燥混合法，將本發明寡醣混合物直接添加至 嬰兒配方中。然而，若其係自動物乳製備，例如如下文所 述，則可方便地添加寡醣混合物而不必先移除所有乳糖。 由於嬰兒配方含有通常完全或部分由乳糖構成之碳水化合 物組份，故熟習此項技術者可瞭解，慮及所添加募醣混合 物將，疋供之額外碳水化合物，將需要調整嬰兒配方中之碳 水化合物含量。寡醣混合物在年幼兒童或嬰兒食品或配方 中之最終浪度以乾物質之重量計，較佳係0 3%至，較 佳〇·75%至i.54%。此相當於0.2克/升至5克/升復水配方， 較佳1克/升至2克/升之濃度。然而，該等量不應視作限 制性，且應基於（例如）年幼兒童或嬰兒之體重及年齡或健 160447.doc 21 201225852 康來配合目標群體。較佳地，在每次銀養嬰兒時給予嬰兒 含有本發明募醣混合物之配方或飲食。 另一選擇為，可藉由濕式混合法將募醣混合物添加至含 水嬰兒或成人食品中。可依約〇·2至約5克募醣/升產品之濃 度將該混合物添加至嬰兒配方中。然而，該等量不應視作 限制性’且應基於（例如）年幼兒童或嬰兒之體重及年齡或 特定群體之健康來配合目標群體。在使用濕式混合法時， 較佳以糖漿形式來添加寡醣摻合物。糖漿可含有至多8〇% 總固體，但此不應具限制性。 儘管其較佳補充專門以嬰兒營養為目標之食品，但其亦 可有益於補充並無專門目標或以成人群體為目標之食品。 舉例而言’可將本發明寡醣混合物納入保健營養產品及老 年營養產品中。該等食品尤其可包括乳、酸乳、凝乳、乾 酷·、冰淇淋。該等食品亦包括口服食物補充品及腸營養製 劑或例如供導管灌食投與。 現將參照以下實例來闡釋本發明。 實例1 現將僅藉助實例來闡述一種製備本發明寡醣混合物之方 法。 將200,000升乳清超濾滲透物預濃縮至22% (w/w)總固體 (TS) ’在約75°C下進行約30秒之巴氏殺菌（pasteurise)，且 隨後在60°C下藉由蒸發濃縮至達到TS為59% (w/w) ^在結 晶器中以2°C /小時之速率將液體冷卻24小時時間以使乳糖 結晶。洗滌結晶乳糖且隨後使用絞擰機移除。藉由使剩餘 160447.doc -22- 201225852 液體（母液）通過傾析11來使其澄清。將得自澄清ϋ之77_ 升液體（17.7% TS)藉由在60t下蒸發再濃縮至達到叫 55% (w/w)，且隨後在與上文所述相同之條件下實施第二 乳糖結晶步驟。藉由電渗析與離子交換之組合以本身已知 之乃式將由此獲得之29000升母液（20 55 TS)去礦物化，從 而獲得28500升90%去礦物化液體（17·3% TS)。此液體端視 起始材料含有約1.5克/升之約30wt% GalNAal 3GalJ3l，4G1c 及 Gaipi，6GalNACal，3Gaipi，4GlC、50wt%Gaipi，6Galpi， 6Glc，Galpl，6Gaipi，4Glc 及 Galpl，3Gaipi，4Glc 與 20 wt% NeuAca2,3Gaipi，4Glc及 NeuAca2,6Gaipi，4Glc之混合物， 可將該液體直接添加至諸如嬰兒配方等食品中或可藉由以 熟習此項技術者已知之方式進一步濃縮。 舉例而言，可將液體中剩餘之乳糖水解為葡萄糖及半乳 糖並藉由奈米過遽、移除該等單醋，或若需要，可藉由 (例如）β-半乳糖苷酶之作用使半乳糖至少部分聚合，以產 生亦可藉由奈米過濾膜保留之半乳寡醣。

Fuc:(xl，2Galpl，4GlC(2，-岩藻醣基乳糖）係自 Ky〇wa Hakko

Kogyo(日本）購得，可將其在將液體直接添加至食品中之 同時直接添加至食品中。較佳地，將其與液體濃縮物混合 且將混合物再添加至食品中。 實例:2 下文給出含有本發明寡醣之嬰兒配方之實例。另一實例 (實例3)基於市售NAN及或Lactogen嬰兒配方（來自Nestl6， 瑞士）’以下文所述量向其添加本發明特定寡醣。 160447.doc •23- 201225852 營養素 每 100 kcal 每升 能量(kcal) 100 670 蛋白質(g) 1.83 12.3 脂肪(g) 5.3 35.7 亞麻油酸(g) 0.79 5.3 α-次亞麻油酸(mg) 101 675 乳糖(g) 11.2 74.7 實例1之寡醣混合物(g) 0.15 1.0 礦物(g) 0.37 2.5 Na (mg) 23 150 K(mg) 89 590 Cl (mg) 64 430 Ca (mg) 62 410 P(mg) 31 210 Mg (mg) 7 50 Mn_ 8 50 Se㈣ 2 13 維生素A (pg RE) 105 700 維生素D(pg) 1.5 10 維生素E(mgTE) 0.8 5.4 維生素K1 (pg) 8 54 維生素C (mg) 10 67 維生素B1 (mg) 0.07 0.47 維生素B2 (mg) 0.15 1.0 於驗酸(mg) 1 6.7 維生素B6 (mg) 0.075 0.50 葉酸&g) 9 60 泛酸(mg) 0.45 3 維生素Β12(μ§) 0.3 2 生物素(pg) 2.2 15 160447.doc ·24· 201225852 膽驗(mg) 10 67 Fe (mg) 1.2 8 i (μ&) 15 100 Cu (mg) 0.06 0.4 Zn (mg) 0.75 5 160447.doc -25-

Claims (1)

1. 201225852 七、申請專利範圍： 1. 一種寡醣混合物，其包含： i. 5 wt%至70 wt°/〇之至少一種N-乙醯基化募醣，其選自 包含以下之群：N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖及半乳 糖基-N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖，及 ii· 5 wt%至90 wt%之至少一種半乳寡醣，其選自包含以 7 —或多種半乳糖基-雙醣或半乳糖基寡醣之群： Gaipi，6Ga卜 Gaipi，6Gaipi，4Glc、Galpl，6Gaipi，6Glc、 Gaipi,3Gaipi，3Glc、Gaipi，3Gaipi，4Glc、Gaipi，6Gaipi， 6Galpl,4Glc、Galpl，6Gaipi，3Gaipi,4Glc、Gaipi，3Gaipi， 6Gaipi,4Glc ' Gaipi,3Gaipi,3Gaipi,4Glc ' Gaipi,4Gaipi, 4Glc及 Gaipi，4Gaipi，4Galpl，4Glc，及 iii. 2 wt%至50 wt°/。之至少一種唾液酸基化寡醣，其選自 包含以下之群：3’-唾液酸基乳糖及6，-唾液酸基乳 糖，及/或 iv. 2 wt%至70 wt%之至少一種岩藻醣基化寡醣，其選自 包含以下之群：2’-岩藻醣基乳糖、3-岩藻醣基乳 糖、二岩藻醣基乳糖、乳-N-岩藻五醣、乳-N-二岩 藻六醣I、單岩藻醣基乳-N-六醣、二岩藻醣基乳-N-六醣I及二岩藻醣基乳-N-新六醣II » 2. 如請求項1之寡醣混合物，其包含： i. 5 wt%至50 wt%之該N-乙醯基化寡醣， ii. 5 wt%至70 wt%之該半乳募醣， iii. 2 wt%至40 wt%之該唾液酸基化寡醣，及/或 160447.doc 201225852 iv. 10wt%至70wt%之該岩議醣基化寡醣。 3.如請求項1及2中任一項之寡醣混合物，其包含： i. 1〇 wt°/〇至40 wt%之該N-乙醯基化寡醣， ii. 5 wt%至35 wt%之該半乳寡醣， iii. 2 wt°/〇至20 wt%之該唾液酸基化募醣，及/或 iv. 30 wt%至60 wt%之至少一種岩藥醣基化寡醣。 4 ·如凊求項1及2中任一項之寡醣混合物，其包含2 5 wt°/〇之 該N-乙醯基化寡醣、2〇 wt%之該半乳寡醣、1 〇 wt%之該 唾液酸基化寡醣及45 wt°/〇之該岩藻醣基化募醣。 5.如請求項1及2中任一項之募醣混合物，其係合成的，或 完全源自動物乳，或部分源自動物乳。 6· 一種食品，其包含如請求項1至5中任一項之寡醣混合 物。 7. 如請求項6之食品，其包含蛋白質來源、脂肪來源及碳 水化合物來源。 8. 如請求項6及7 t任一項之食品，其係初生嬰兒配方 (starter infant formula)、嬰兒配方、幼兒食物嬰兒縠 類組合物、較大嬰兒配方（f〇u〇w_up f〇rmiUa)或成長乳， 且該食品較佳係初生嬰兒配方。 9. 如請求項6及7中任一項之食品，其中該食品包含水解蛋 白質，該等水解蛋白質具有較佳介於1〇%與1〇〇%之間， 更佳介於15。/❶與95%之間之分子量小於1〇〇〇道耳頓 (Dalton)之蛋白質/肽群。 1〇.如請求項9之食品，Μ該等水解蛋白質之水解程度為 160447.doc 201225852 "於.)0與100之間’較佳介於65與的之間之範 圍内。 11·如β农項9之食品’其中該等水解蛋白質之tnbs反應性 氮/。胺基（離胺酸）N/tn在8。/。至15%，較佳9%至14%之範 圍内。 12H求項6及7中任-項之食品’其用於預防食物過敏及 相關食物過敏對健康之效應及降低其風險及/或降低其嚴 重性及/或降低其發生率。 13. 如请求項12之食品，其中該等效應係⑴皮膚效應、異 位性皮膚炎、皮疹或發紅；（Η)對免疫系統或發炎狀態 <效應，或（ill)對胃腸道系統之效應，例如絞痛、腹痛 及諸如此類。 14. 如請求項6及7中任一項之食品，其用於增強對過敏原之 口服耐受性。 15. 如s青求項6及7中任一項之食品，其中該食品包含至少一 種益生菌菌株。 16. —種包含春醣混合物之食品之用途，該寡醣混合物包 含： 】_.· 5 wt%至7〇 wt%之至少一種N-乙醯基化寡醣，其選自 包含以下之群：N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖及半乳 糖基-N-乙醯基-胺基半乳糠基-乳糠，及 ii. 5 wt%至90 wt%之至少一種半乳寡醣，其選自包含以 下一或多種半乳糖基-雙醣或半乳糖基募醣之群： Gaipi,6Gal ' Gaipi,6Gaipi,4Glc ' Galpl,6Gaipi,6GIc ' J60447.doc 201225852 Gaipi,3Galpl,3Glc ' Gaipi,3Galpl,4Glc ' Galpl,6Gaipi, 6Galpl,4Glc ' Gaipi,6Galpl,3Galpl,4Glc ' Galpl,3Galpl, 6Gaipi，4Glc、Gaipi，3GaIpl，3Gaipi，4Glc、Gaipi，4Galpl， 4Glc及 Galpl，4Gaipi,4Galpl,4Glc，及 iii. 2 wt%至5 0 wt°/。之至少一種唾液酸基化寡醣，其選自 包含以下之群：3’-唾液酸基乳糖及6·-唾液酸基乳 糖，及/或 iv. 5 wt%至70 wt%之至少一種岩藻醣基化寡醣，其選自 包含以下之群：2’-岩藻醣基乳糖、3-岩藻醣基乳 糖、二岩藻醣基乳糖、乳-N-岩藻五醣、乳-N-二岩 藻六醣I、單岩藻醣基乳-N-六醣、二岩藻醣基乳-N-六醣I及二岩藻醣基乳-N-新六醣II， 該食品用於製造合成營養組合物，該合成營養組合物用 於預防食物過敏及相關食物過敏對健康之效應及降低其 風險及/或降低其嚴重性及/或降低其發生率。 1 7. —種包含寡醣混合物之食品之用途，該寡醣混合物包 含： V. 5 wt%至70 wt%之至少一種N-乙酿基化寡醣，其選自 包含以下之群：N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖及半乳 糖基-N-乙醯基-胺基半乳糖基-乳糖，及 vi. 5 wt%至90 wt%之至少一種半乳寡醣，其選自包含以 下一或多種半乳糖基-雙醣或半乳糖基寡醣之群： Galpl，6Gal、Gaipi，6Gaipi，4Glc、Gaipi，6Gaipi，6Glc、 Gaipi，3Gaipi，3Glc、Galpl，3Galpl，4Glc、Gal01，6Gaipi， 160447.doc 201225852 6Gaipi,4Glc ' Gaipi,6Galpl,3Galpl,4Glc ' Gaipi,3Gaipi, 6Galpl，4Glc、Gaipi，3GaIpl，3Gaipi，4Glc、Gaipi，4Galpl， 4Glc及 〇&叩1，4〇&101，4〇&1戸1，4〇比，及 vii. 2 wt%至50 wt%之至少一種唾液酸基化寡醣，其選自 包含以下之群：3'-唾液酸基乳糖及6'-唾液酸基乳 糖，及/或 i. 5 wt°/〇至70 wt%之至少一種岩藻醣基化寡醣，其選自 包含以下之群：2，-岩藻醣基乳糖、3-岩藻醣基乳 糖、二岩藻醣基乳糖、乳_N_岩藻五醣、乳-N_二岩 藻六醣I、單岩藻醣基乳_N_六醣、二岩藻醣基乳_N_ 六醣I及二岩藻醣基乳_N_新六醣π， 該食品用於製造合成營養組合物，該合成營養組合物用 於増強對過敏原之口服耐受性。 18. 如睛求項16及17中任—項之用途，其中該食品係較佳以 單位劑量形式提供之補充品。 19. 如叫求項16及17中任—項之用途，其中該食品進一步包 3凡全水解及/或部分水解蛋白質，較佳係包含足量或例 如陪低過敏風險之量。 160447.doc 201225852 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表.圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： (無） 160447.doc