TW201208702A - Combination therapy for treating cancer comprising an IGF-1R inhibitor and an Akt inhibitor - Google Patents

Description

201208702 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種藉由投與IGF_1R特異性抗體與由Akt 路徑抑制劑例示之抗癌劑組合來治療癌症之方法。第一量 與第二量共同構成治療有效量。 【先前技術】 與癌症病源學有關之酶的類別中突出為胰島素樣生長因 子（IGF)，例如胰島素樣生長因子]及胰島素樣生長因子_ Η，各涉及對各種細胞類型（諸如腫瘤細胞）發揮促有綠分 裂活性。IGF在結構上類似於胰島素，且已作為多種疾病 及損傷中之治療工具。胰島素樣生長因子_I(IGFI)為“為 8.4之7649道爾頓多肽，其以高濃度循環於血漿中且可在 大部分組織中偵測到。Ι(}ΙΜ刺激細胞分化及細胞增殖， 且為大部分哺乳動物細胞類型持續增殖所需。此等細胞類 型尤其包括人類二倍體纖維母細胞、上皮細胞、平滑肌細 胞、Τ淋巴細胞、神經細胞、骨髓細胞、軟骨細胞、成骨 細胞及骨髓幹細胞。此等生長因子中之每一者藉由結合至 稱為胰島素樣生長因子受體(IGF 1R)之共同受體來發揮 其促有絲分裂作用。 引起IGF-I刺激之細胞增殖或分化之轉導路徑中的第一 步為生理濃度之IGF-I或IGF-II(或胰島素）結合至…”受 體。IGF與IGF 1R之相互作用藉由引起受體在酪胺酸殘基 上自體磷酸化而活化受體（Butler等人，（1998) comparative

Biochemistry and Physiology 121:19)。一旦活化，iGFIR 157311.doc 201208702 隨即磷酸化細胞内標靶以活化細胞信號傳導路徑β此受體 活化對於刺激腫瘤細胞生長及存活為關鍵的。因此，抑制 IGF 1R活性代表一種治療或預防人類癌症及其他增生性疾 病發展之有價值的潛在方法。 相當多的證據表明IGF-I及/或IGF-IR在活體外及活體内 維持腫瘤細胞方面的作用。舉例而言，具有「高正常」含 量之IGF-I的個體相較於IGF-I含量處於「低正常」範圍内 之個體而言患常見癌症之風險增加。除在正常細胞生長及 發育方面起關鍵作用外，IGF-1R信號傳導亦已涉及在腫瘤 細胞生長、細胞轉型及腫瘤生成方面起關鍵作用。新近資 料得出如下結論：IGF-IR在多種腫瘤及多種腫瘤細胞株中 表現’且IGF經由連接至IGF-IR來增強腫瘤生長。實際 上，清楚表明IGF-IR在轉型方面所發揮之重要作用的關鍵 發現為證明編碼IGF-IR之基因不活化之r_細胞完全難以由 通常能夠使該等細胞轉型之不同試劑（諸如牛乳頭狀瘤病 毒之E5蛋白質、EGFR或PDGFR過度表現、SV 40之T抗 原、活化之ras或最後兩個因子之組合）轉型。支持此假說 之其他關鍵實例包括藉由以IGF· 1R之反義RNA處理使鼠類 癌細胞之轉移性表型喪失以及藉由添加IGF-1R抗體在活體 外抑制人類黑素瘤細胞運動性及人類乳癌細胞生長。 誘導細胞凋亡或抑制與IGF-I含量增加、IGF-II含量增加 及/或IGF-IR受體含量增加有關之細胞增殖的潛在策略包 括降低IGF-I含量或IGF-Π含量或例如使用抗IGF1R抗體防 止IGF-I結合至IGF-IR。 157311.doc 201208702

Akt信號傳導調節血管生成中之多個關鍵步驟。蛋白激 酶B(Akt/PKB)絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶在信號轉導、細胞 生長、增殖及抑制細胞凋亡方面發揮重要作用。人類存在 三種結構相關之同系物，指定為Aktl、Akt2及Akt3。 Akt/PKB為在調節細胞存活、增殖及生長方面起關鍵作用 的絲胺酸/蘇胺酸激酶。Akt家族之標誌包括胺基端普列克 受質蛋白（pleckstrin)同源性（PH)結構域、短α-螺旋連接子 及羧基端激酶結構域。ΡΗ結構域有助於將Akt錨定至由磷 脂醯肌醇3-激酶（PI3K)產生之膜磷脂。PI3K由生長因子、 細胞激素及胰島素活化且產生磷脂醯肌醇3,4-磷酸酯 (PIP2)及磷脂醯肌醇3,4,5-磷酸酯（PIP3)，該等物質與Akt 相互作用且將Akt自細胞溶質募集至細胞膜。在膜定位 後，Akt在激酶活化迴路（T-迴路）中由磷酸肌醇依賴性激酶 1(PDK1)在Thr-308處磷酸化，該磷酸肌醇依賴性激酶1因 其自身之PH結構域而與Akt共同位於PIP2/PIP3產生位點 處。Akt在羧基端尾部（疏水性基元）内Ser-473處之磷酸化 為最大活化所需。 PI3K/Akt/mTOR路徑在大部分人類癌症中具有異常活性 且促進細胞生長、增殖及存活。其亦參與促進治療抗性。 此外，對人類腫瘤中Akt含量之分析展示Akt2在大量卵巢 癌及胰臟癌中過度表現。同樣，發現Akt3在乳癌細胞株及 前列腺癌細胞株中過度表現。雖然需要Akt抑制劑，但僅 少數Akt抑制劑可用。 自以上敍述清楚，雖然在進行中或最近完成之治療試驗 157311.doc 201208702 中存在多種化合⑯，但仍不滿足對能夠治療癌症，尤其治 療早期及晚期過度增生性細胞病症（諸如癌症）之其他治療 挫化0物的需求。除增強治療功效之目的外，本文詳述之 組合治療之另一目的在於潛在減少所得組合中個別組分之 劑量以減少由較高劑量之個別組分所引起之不必要或有害 副作用。 本發明藉由提供有效治療癌症之方法來解決上述需求， 該等方法包含使副作用減少且有效治療及控制惡性病之組 合治療方案。 【發明内容】 本發明提供治療哺乳動物（通常為人類）之過度增生性疾 病（諸如癌症）的改良之組合治療劑及方法，該等方法係藉 由投與特異性結合至人類腺島素樣生長因子受體1型（JGF-1R)之IGF-1R抑制劑（例如達利珠單抗（dal〇tuzumab))與Akt 抑制劑（例如MK-2206)之組合來達成。 本發明之驚人特徵為發現包括投與IGF-1R抑制劑之第一 治療程序與包含Akt抑制劑之第二治療程序的組合足以治 療另外可能對單獨投與Akt抑制劑所進行之治療產生抗性 的各種癌症。 如本文所用之抗體及其抗原結合片段包括單株、多株、 嵌合、單鏈、雙特異性及人類化或最佳化抗體以及Fab片 段’諸如維持抗體對IGF-1R蛋白（包括其表現與如本文所 述本發明抗體所結合之抗原決定基相同之抗原決定基的片 段）之結合特異性的片段，且如本文所述使用一或多種Akt 157311.doc 201208702 抑制劑之第二治療程序可提供治療有效性抗癌作用。各治 療（投與IGF-1R抑制劑及投與Akt抑制劑）以彼此組合可提 供治療有效性治療之量或劑量使用。治療方案無須限定於 限於IGF 1R抑制劑之第一治療程序及限於投與鳩抑制劑 之第- /〇療程序。在一各別實施例中，癌症為對組合治療 • 劑之反應性大於對單獨投與治療組合之各組分之反應性的 過度增生性病症。 組合療法可經由誘導癌細胞分化、細胞生長停滯及/或 細胞凋亡起作用。此外，IGF_1R抑制劑與例如Akt抑制劑 之抗癌劑之作用可為疊加或協同作用。由於組合療法中之 各藥劑之劑量相較於使用該藥劑之單一療法而言有所降 低’同時仍可達成總體抗腫瘤作用，所以組合療法尤其有 利。 實際上’本發明之一廣泛態樣依賴於意外地發現一種治 療有需要個體之癌症之方法，該方法係藉由在第一治療程 序中投與有需要之個體第一量之IGF· 1R抑制劑（較佳為 IGF-1R抗體），且在第二治療程序中投與第二量之抗癌劑 (例如Akt抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或水合物）來達 * 成，其中第一治療與第二治療共同構成治療有效量。 ， 如本文所用之治療癌症係指部分或完全抑制、延遲或逆 轉例如人類之哺乳動物的癌症進展（包括癌症轉移）；抑 制、延遲或逆轉其癌症復發（包括癌症轉移）。 本發明之方法適用於治療多種癌症，包括（但不限於）實 體腫瘤（例如肺、乳房、結腸、前列腺、膀胱、直腸、腦 157311.doc 201208702 或子宮内膜之腫瘤）、惡性血液病（例如白血病、淋巴瘤、 骨髓瘤）、癌瘤（例如膀胱癌、腎癌、乳癌、結腸直腸癌）、 神經母細胞瘤或黑素瘤。此等癌症之非限制性實例包括皮 膚T細胞淋巴瘤（CTCL)、非皮膚性周邊τ細胞淋巴瘤、與 親人類T細胞淋巴病毒（HTLV)有關之淋巴瘤、成人τ細胞 白血病/淋巴瘤（ATLL)、急性淋巴細胞性白血病、急性非 淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、慢性骨髓性 白血病、霍奇金氏病（Hodgkin’s disease)、非霍奇金氏淋巴 瘤、多發性骨髓瘤、間皮瘤；兒童實體腫瘤，諸如腦神經 母細胞瘤、視網膜母細胞瘤、韋爾姆斯氏腫瘤（wilms, tumor)、骨癌及軟組織肉瘤；成人之常見實體腫瘤，諸如 頭頸部癌（例如口腔癌、喉癌及食道癌）、生殖泌尿道癌症 (例如前列腺癌、膀胱癌、腎癌、子宮癌、印巢癌、睪丸 癌、直腸癌及結腸癌）、肺癌、乳癌、騰臟癌、黑素瘤及 其他皮膚癌、胃癌、腦癌、肝癌、腎上腺癌、腎癌、曱狀 腺癌、基底細胞癌、潰瘍型及乳頭狀型鱗狀細胞癌、轉移 性皮膚癌、髓性癌、骨肉瘤、尤文氏肉瘤（Ewing's sarcoma)、網狀細胞肉瘤、卡波西氏肉瘤（Kaposi's sarcoma)、神經母細胞瘤及視網膜母細胞瘤。 本發明進一步關於適用於治療癌症之醫藥組合。該醫藥 組合包含第一量之IGF-1R抑制劑（例如達利珠單抗）及第二 量之Akt抑制劑（例如MK-2206)。第一量與第二量共同構成 治療有效量。 本發明進一步關於第一量之IGF-1R抑制劑及第二量之 157311.doc ·8· 201208702

Akt抑制劑的用途’其係用於製造供治療癌症之藥物。 在本發明之特定實施例中，IGF- 1R抑制劑與Akt抑制劑 之組合具有疊加效應’亦即該組合治療方案產生之結果為

各組分在單獨投與時之疊加效應。根據此實施例，IGF-1R • 抑制劑之量與Akt抑制劑之量共同構成治療癌症之有效 . 量。 在本發明之另一特定實施例中，IGF_ 1R抑制劑與八匕抑 制劑之組合在該組合治療方案產生之抗癌結果（例如細胞 生長停滯、細胞凋亡、誘導分化、細胞死亡）顯著優於各 組分在以治療劑量單獨投與時之疊加效應時被認為具有治 療協同效應。可使用標準統計分析來確定結果是否顯著較 佳。舉例而言’可使用曼-懷特尼檢驗（Mann_whitney Test)或一些其他公認之統計分析。 在態樣中，本發明之方法包含在第一治療程序中投與 有需要之患者第一量之IGF_1R抗體（其包含如下文所述之 輕鏈及重鏈）以及在第二治療程序中投與第二量之抗癌劑 (較佳為Akt抑制劑，例如MK-2206)。第一治療與第二治療 共同構成治療有效量。 . 在本發明之另一態樣中，IGF-1R抗體為達利珠單抗 - (MK-0646)。 在本發明之另一態樣中，投與組合相對於單獨投與igf_ 1R抑制劑而言可產生增強之治療功效。 在本發明之另一態樣中，投與組合相對於單獨投與Ah 抑制劑而言可產生增強之治療功效。 157311.doc -9- 201208702 在本發明之另一特定實施例中，IGF-1R抗體與Akt抑制 劑之組合在該組合治療方案產生之抗癌結果（例如減小腫 瘤體積、細胞生長停滞、細胞凋亡、誘導分化 '細胞死亡 等）顯著優於各組分在以治療劑量單獨投與時之疊加效應 時被認為具有治療協同效應。可使用標準統計分析來確定 結果是否顯著較佳。舉例而言，可使用曼_懷特尼檢驗或 一些其他公認之統計分析。 治療程序可以任何次序依序進行、同時進行或其組合。 舉例而言，第一治療程序（投與IGF-1R抑制劑）可在第二治 療程序（亦即Akt抑制劑）之前進行，在Akt抑制劑之第二治 療之後進行，與Akt抑制劑之第二治療同時進行，或其組 合°舉例而言’可針對IGF_1R抑制劑確定總治療時段。 Akt抑制劑可在以IGF_1R抑制劑開始治療之前或在以iGF_ 1R抑制劑治療之後投與。另外’ Akt抑制劑之治療可在投 與1GF_1R抑制劑期間投與，但無需歷經整個IGF-1R抑制劑 治療時段。同樣’ IGF-1R抑制劑之治療可在投與Akt抑制 劑期間投與’但無需歷經整個Akt抑制劑治療時段。在另 實施例中，治療方案包括用一種藥劑（IGF-1R抑制劑或

Akt抑制劑）預先治療，接著添加第二藥劑並維持治療時段 之持續時間。 在本發明之一特定實施例中，Akt抑制劑可與如本文所 述之任一或多種其他Akt抑制劑或其任何組合組合投與。 在本發明之另一實施例中，IGF-1R為IGF-1R抗體，較佳 為達利珠單抗或具有如本文所述之輕鍵及重鍵的抗體，其 157311.doc -10- 201208702 可與另一 IGF- 1R抑制劑、抗血管生成劑、分化誘導劑、細 胞生長停滯誘導劑、細胞凋亡誘導劑、細胞毒性劑中之任 一或多者或其任何組合組合投與。 抗IGF-1R抗體可經由非經腸（例如皮下、腫瘤内、靜脈 内、皮内）、經口、經黏膜或直腸投藥來投與。雖然不意 欲受特定操作理論限制，但咸信經由投與抗IGF-1R抗體阻 斷IGF-1R介導之信號傳導級聯可藉由負向調節伴隨於原生 IGF-1R配位體結合至受體所產生之信號傳導級聯來增強抗 腫瘤免疫。適用於本發明中之JGF·1 R抑制劑包括（但不限 於）美國專利第7,241，444號中所述及主張之IGF-1R抗體。 本發明之Akt路徑抑制劑化合物適用於抑制絲胺酸/蘇胺 酸激酶Akt之活性。在一特定實施例中，Akt抑制劑為MK-2206。MK-2206之合成及其使用方法詳述於WO 2008/070016、第 11/999234 號及美國專利第 7,576,209 號 中，其各自之全部内容係以全文引用之方式併入本文中。 下文描述合成MK-2206之一流程。亦可使用合成MK-2206之其他 流程。 MK-2206之合成亦可見於WO 2008/070016中。 157311.doc 201208702

1-(4-漠苯基）環丁垸甲腈（ι_2) 將 TBAB(1.61 g ’ 0.5 mmol)、二溴丙烷（22 2 g㈣ mmol)及腈 1-1(19.6 g，1〇〇 mm〇i)添加至 κ〇Η(3117 层 500 mmol)於15 mL水與200 mL甲苯之混合物中之經攪拌溶 液中（溫度維持在72°C與79。〇之間）。蒸汽加熱混合物且I 99°C至l〇8°C下攪拌2.5小時。混合物冷卻至8〇t且添加 200 mL庚烷。所得混合物在攪拌下冷卻至室溫後，過濾頂 部澄清溶液，用水（3x30 mL)洗滌且在真空中濃縮，得到 油狀產物1-2。 1-(4-溴苯基）環丁烷甲醯胺（1_3) 在 40°C 至 87°C 下，H2O2(30%，11.3 mL，118 mm〇1)經 3 小時添加至腈 1-2(13.88 g，約 58.9 mmol)及 k2C03(1.62 g , 157311.doc -12· 201208702 11.8 mol)於59 mL DMSO中之經攪拌混合物中，用水浴冷 部。所得混合物冷卻至27°C且經3〇分鐘添加水（1〇〇 mL)。 形成結晶產物1-3。再經1小時添加水（1〇〇 mL)。在室溫下 老化所得漿料16小時’之後過濾。用1〇〇 mL水沖洗濾餅， 接著用100 mL庚烷沖洗。在真空烘箱中於5(rc下乾燥後， 獲得呈白色固體狀之產物1-3。 [1 -(4-溴苯基）環丁基]胺基甲酸第三丁酯（14) 在 57eC 至 86。(：下，Pb(OAc)4(25.7 g，25.7 mmol)添加至 醯胺1-3(12.7 g，50 mmol)於64 mL t_BuOH中之經攪拌溶 液中’用水浴冷卻。在65°C至86°C下攪拌所得混合物0.5 小時。混合物冷卻至26°C且添加12.7 g Na2C03，繼而添加 65 mL MTBE。10分鐘後，過濾混合物。用1〇 L MTBEw 洗濾餅且用20 mL水洗滌合併之濾液，接著用3xl〇 mL 10% KHCO3洗滌有機層（注意：鼓泡），經Na2S04乾燥且在 真空中濃縮。用8 mL IPAc及8 mL庚烷沖洗所得固體，且 在真空烘箱中於40°C下乾燥’得到呈灰色固體狀之產物 4 〇 Π-(4-氰基苯基）環丁基]胺基甲酸第三丁酯（1·5) 用氮氣對Pd2dba3(101 mg ; 1 mol%)及dppf(122 mg ; 2莫 耳％)於DMF(25 mL)中之經攪拌漿料充氣5分鐘，接著升溫 至65 °C且老化30分鐘。在此溫度下，添加芳基溴化物 4(3.6 g，11 mmol)、辞粉（5 1 mg ; 6 mol°/〇)及氰化鋅（777 mg ; 0.60當量），用DMF(5 mL)沖洗。將溶液加熱至92°C 至95°C且老化4小時。溶液冷卻至室溫隔夜且經Solka F1〇e 157311.doc -13- 201208702 墊過濾，用〇]\^(51111^)沖洗滤餅。在25。(：至33。〇下經3.5小 時添加水（30 mL)以及晶種。在室溫下老化隔夜後，過據 所得結晶溶液’且用甲醇水溶液洗蘇，且乾燥隔夜，得到 呈黃色固體狀之1-5。 {1-[4-苯基乙醯基）苯基]環丁基}胺基甲酸第三丁酯（16) 以不使反應溫度升高至- l〇°C以上之速率將苯甲基格林 納試劑（Benzyl Grignard，19 mL，38.5 mmol)添加至腈1_ 5(3 g，11 mmol)於THF(25 mL)中之冷卻至約_2〇〇C之經攪 拌略渾濁之溶液中。在保持反應溫度介於·丨〇它與_2〇〇c之 間下老化溶液3至4小時。經授拌溶液冷卻至_3且在維 持溫度低於15C下，添加至先前冷卻至5°c_1〇°c之15 wt〇/〇 檸檬酸水溶液（60 mL)中。分離各層且用MTBE洗滌水層。 合併有機層’用半飽和鹽水（60 mL)洗滌，且在減壓下 濃縮。添加庚烧且將混合物濃縮成漿料，將其過濾，用庚 院（15 mL)洗滌且在氮氣下乾燥，得到丨_6。 4-胺基-2-氣终搭（i_8) 在保持溫度低於25。(：下，將三氟乙酸（17.4 mL，234 mmol)小心地添加至B〇c醛^(20 g，78」爪爪以）與二氯甲 烷（60 mL)之經攪拌混合物中。溶液升溫至“π，老化隔 夜（劇烈放氣），接著冷卻至室溫。添加25 mL MTBE且所 得白色漿料老化1小時，過濾且用MTBE(1〇 mLx2)沖洗濾 餅。在真空下乾燥固體TFA鹽。 {1-[4-(5-氣-3-苯基_丨，6_喑啶·2_基）笨基]環丁基丨胺基曱 酸第三丁酯（1_9) 157311.doc •14· 201208702 在保持溫度低於24°C下，將45 wt%氫氧化鉀溶液（18 mL ; 5當量）經20分鐘逐滴添加至氯吡啶TFA鹽ι_8(ΐ9.5 g)、環丁基胺基酮1-6(26 g)及異丙醇（200 mL)之經授拌混 合物中。1小時後，添加水（1 〇〇 mL)且再過1小時後，過濾 所得漿料，用2:1 IPA/水（30 mL，接著24 mL)洗滌，接著 用水（80 mL，接著2x60 mL)洗滌。在氮氣流下乾燥固體， 得到呈灰白色固體狀之1_9。 {1-[4-(3-側氧基·9_ 苯基 _2,3-二氫[1，2,4]三唑并[3,4- f][l，6]喑啶-8-基）苯基]環丁基}胺基曱酸第三丁酯（1_1〇) 使氣喑啶1-9(1.8 g)、肼甲酸甲酯（0.3 18 g)及異丙醇（2〇 L)之經攪拌漿料升溫至66°C，之後其變均質。添加5 N HC1之IPA溶液（〇.〇5 ml)且溫度升高至70。(：並維持16小 時’接著冷卻至室溫。冷卻至室溫後，將45 wt%氫氧化鉀 溶液（0.52 mL)與水（5.5 mL)混合且經15分鐘添加。30分鐘 後’添加乙酸水溶液（0.7 mL於6 mL水中），繼而添加水（2 mL)。所得漿料在室溫下老化三小時，過濾且用1:ι IpA/水 (2x2.4 mL)洗滌。在氮氣流下乾燥產物，接著在2〇〇c下在 二氯曱烷中形成漿料，歷時4小時，過濾且在氮氣流下乾 燥，得到呈灰白色固體狀之1-10。 8-[4-(1-胺基環丁基）苯基]-9-苯基[1，2,4]三唑并[3,4-f]-1,6-嗉啶-3(2H)-酮（MK-2206) 在50C下將濃鹽酸水溶液（12.1 Μ，1.64 mL)於乙醇（2.0 mL)中之溶液經30分鐘逐滴添加至1-10(500 mg，0.985 mol)於乙醇（1.7 mL)及水（0.2 mL)中之經攪拌漿料中。在添 157311.doc •15· 201208702 加酸後3小時後’接種混合物且在5〇艺下老化隔夜，冷卻 至至恤且過渡。在〇C下將乙酿氣（〇.5 g，7 mmol)經1小時 添加至乙醇（2 mL)中。接著溶液冷卻至室溫且老化3〇分 鐘。用此溶液（1 mLx2)洗滌濾餅，接著用乙酸乙酯（4 mLx2)洗滌且最終在真空烘箱中於75 下在氮氣吹掃（5〇 托）下乾燥’得到呈二鹽酸鹽形式之MK-2206。 亦經由溶解於水中產生MK-2206之單鹽酸鹽型式。6小 時後’水性漿料變成淡黃色且過濾。對此固體進行氣化銀 滴定，揭示存在1當量氣化物。 包含MK-2206之醫藥製劑 MK-2206之單鹽酸鹽之製劑可製備成錠劑，製錠包含輥 壓造粒’繼而研磨’與其他非活性成分混合，壓製及包覆 膜衣。 用於此調配物中之一些稀釋劑或填充劑較佳為膨脹劑， 且可包括（但不限於）各種等級之微晶纖維素，諸如阿維塞 爾（Avicel)PHlOl、阿維塞爾PH102及阿維塞爾PH200。若 添加微晶纖維素，則其尺寸較佳為約5〇至180微米，更佳 為約100微米。阿維塞爾PH 101之平均粒徑為約50微米； 阿維塞爾PH 102之平均粒徑為約100微米；且阿維塞爾pH 200之平均粒徑為約190微米。較佳地，較佳微晶纖維素為 阿維塞爾PH 102。 適用於本文中之可食用鈣鹽包括（但不限於）二水合填酸 氫二約、無水填酸鈣及磷酸三鈣；或其混合物。較佳可食 用鈣鹽為無水磷酸氫二鈣，其亦提供優良可壓製性。 157311.doc 16 201208702 然而’特定稀釋劑之適合比率描述於下文中：微晶纖維 素：二水合磷酸氫二鈣之適合比率為約2:1至約4:1，較佳為 約2.6.1至3 · 1:1，微晶纖維素：無水鱗酸弼之適合比率為約 1:1至約3:1，較佳為約丨6:1 ;微晶纖維素：磷酸三鈣之適合 比率為約2:1至約4:1，較佳為約3 1:1。 較佳之崩解劑為交聯羧曱纖維素鈉。較佳地，交聯羧甲 纖維素鈉以約2% w/w至約5% w/w之量存在。 較佳之潤滑劑為硬脂酸鎂。 本發明之一態樣為製備旋劑調配物之方法，其包含： a) 將MK-2206之活性單鹽酸鹽、微晶纖維素、可食用鈣 鹽、崩解劑及潤滑劑摻合在一起以形成該等物質之粒内混 合物； b) 對步驟（a)之混合物進行報壓造粒以製備顆粒； c) 潤滑步驟（b)之顆粒； d) 將步驟（c)之經潤滑顆粒壓成凹形疑劑；及 e) 將步驟（d)之錠劑包覆膜衣。 適用於本發明中之生物劑包括（但不限於）免疫調節蛋 白、針對腫瘤抗原之單株抗體、腫瘤抑制基因及癌症疫 苗。舉例而言，免疫調節蛋白可為介白素2、介白素4、介 白素12、干擾素E1、干擾素D、干擾素α、紅血球生成素、 粒細胞-CSF、粒細胞巨噬細胞-CSF、卡介苗（badUus Cahnette-Guerin)、左旋咪。坐（ievamis〇ie)或奥曲肽（〇ctre〇tide) 。此外，腫瘤抑制基因可為DPC-4、NF-1、NF-2、RB、 p53、Win、BRCA或 BRCA2。 157311.doc •17- 201208702 IGF-m抑制劑（例如達利珠單抗）及抗癌劑（例如Akt抑制 劑）可藉由熟習此項技術者所知之任何投藥方法來投與。 投藥途徑之實例包括（但不限於）經口、非經腸、腹膜内、 靜脈内、動脈内 '經皮、舌下、肌肉内、直腸、經頰、鼻 内、脂質體、經由吸入、陰道、眼内、經由導管或支架局 傳遞、皮下、脂肪内、關節内、鞘内或以緩慢釋放劑型 投藥。 IGF-1R抑制劑或任一 Akt抑制劑可根據任何劑量及給藥 時程來投與以連同Akt抑制劑之作用一起達成有效治療癌 症之劑量。然而，Akt抑制劑之較佳劑量為隔曰一次6〇 mg 及/或每週一次200 mg。 本發明之一較佳實施例係關於治療有需要個體之癌症的 方法，其係藉由在第一治療程序中投與有需要之個體第一 量之IGF-1R抑制劑以及在第二治療程序中以隔日一次 (QOD)至多60 mg或每週一次200 mg之總日劑量投與第二 量之Akt抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或水合物來達 成’其中第一量與第二量共同構成治療有效量。 本發明之另一較佳實施例係關於治療有需要個體之癌症 的方法’其係藉由在第一治療程序中以每週一次2〇 mg/kg 之總劑量投與有需要之個體第一量之ZGF-1R抑制劑以及在 第二治療程序中以隔曰一次（QOD)至多60 mg之總曰劑量 投與第二量之Akt抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或水合 物來達成’其中第一量與第二量誇同構成治療有效量。在 一替代實施例中’ IGF-1R抑制劑（例如達利珠單抗）以每週 157311.doc • 18 - 201208702 一次10 mg/Kg之總劑量投與。在一替代實施例中，Akt抑 制劑（MK-2206)以每週一次200 mg之總劑量投與。 當將本發明之組合物投與人類個體時，日劑量通常由開 處方之醫師來確定’其中劑量一般根據個別患者之年齡、 體重及反應以及患者症狀之嚴重度而變化。 在一實施例中，Akt抑制劑（例如MK-2206)以較佳適於經 口投與之醫藥組合物形式投與。在另一實施例中，Μκ_ 2206以凝膠化膠囊形式經口投與，該膠囊可包含賦形劑， 諸如微晶纖維素、交聯羧曱纖維素鈉及硬脂酸鎂。 熟習此項技術者顯而易知，IGF -1R抑制劑之任一或多種 特定劑量及給藥時程亦可適用於待用於組合治療中之任一 或多種抗癌劑。此外，抗癌劑之特定劑量及給藥時程可進 一步變化，且最佳劑量、給藥時程及投藥途徑應基於所用 之特定抗癌劑來確定。 本發明亦提供選擇性誘導贅生性細胞終末分化、細胞生 長停滯及/或細胞凋亡，從而抑制該等細胞在個體體内增 殖的方法，其係藉由在第一治療程序中投與該個體第一量 之IGF- 1R抑制劑或Akt抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或 水合物，以及在第二治療程序中投與第二量之抗癌劑，例 如Akt抑制劑或IGF-1R抑制劑來達成，其中第一量與第二 量共同構成有效誘導細胞終末分化、細胞生長停滯或細胞 >周亡之量。 本發明亦提供選擇性誘導贅生性細胞終末分化、細胞生 長停滞及/或細胞凋亡，從而抑制該等細胞增殖的活體外 157311.doc •19· 201208702 方法’其係藉由使該等細胞與第_量之igf ir抑制劑及第 二量之抗癌劑（例如A k t抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或 水合物）接觸來達成，其中第一量與第二量共同構成；效 誘導該等細胞終末分化、細胞生長停滯或細胞社之量。 考慮到與兩種治療模態有關之差分毒,杜，組合療法可提 供治療優勢。舉例而言，以IGF_1R抑制劑進行治療可產生 在以Akt抑制劑治療下未見到之特定毒性，且反之亦然。 因而’此差分毒性可允許各治療以該等毒性不存在或最小 之劑量投與，使得組合療法總體上提供治療劑量同時避免 組合藥劑之各組分之毒性。此亦適用於Akt抑制劑。 此外，當由組合治療所達成之治療作用增強或具協同效 應，例如顯著優於疊加治療作用時，甚至可進一步減少各 藥劑之劑量，從而在甚至更大之程度上降低相關毒性。 【實施方式】 如隨附圖式中所說明，本發明之上述及其他目的、特徵 及優勢將由以下對本發明較佳實施例之更特定描述而顯而 易見，在圖式中相同參考特徵在所有不同視圖中均指相同 部分。該等圖式未必按比例繪製，而是著重於說明本發明 之原理》 本發明係關於一種治療有需要個體之癌症的方法，其係 藉由在第一治療程序中投與有需要之個體第一量2IGf_ir 抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，以及在第二治 療程序中投與第二量之Akt抑制劑來達成，其中第一量與 第二量共同構成治療有效量^ IGF_1R抑制劑與Akt抑制劑 157311.doc •20· 201208702 之作用可為疊加或協同作用。 本發明亦關於一種治療有需要個體之癌症的方法，其係 藉由在第一治療程序中投與有需要之個體第一量之達利珠 單抗（MK-0646) ’以及在第二治療程序中投與第二量之 抑制劑MK-2206或其醫藥學上可接受之鹽或水合物來達 成，其中第一量與第二量共同構成治療有效量。達利珠單 抗與MK-2206藥劑之作用可為疊加或協同作用。 本發明之組合物或組合包括IGF1R抑制劑（諸如抗igfir 抗體或其抗原結合片段）「聯合」八尺丁抑制劑；此等組合 可視情況聯合一或多種其他治療劑或治療程序。術語「聯 合」指示各組分（例如達利珠單抗&MK_22〇6)可調配成單 一組合物以同時傳遞，或各別調配成兩種或兩種以上組合 物（例如套組h此外，各組分可在不同於其他組分投與時 間之時間投與個體；例如，各投藥可經既定時段以若干時 間間隔不同時（例如各別或依序）施與。此外，各別組分可 藉由相同或不同途徑（例如非經腸及經口）投與患者。本發 明之組合物及組合包括包含例如指定量之指定成分的任何 產物，包括由指定量之指定成分之組合直接或間接產生之 任何此類產物。 關於本發明組合之術語「投藥」及其變體（例如「投 與」化合物）意謂將組分引入需要該治療之哺乳動物或動 物系統（諸如人類）内。當本文揭示之組合聯合一或多種其 他治療劑（例如細胞毒性劑等）提供時，「投藥」及其變體 各應理解為包括同時及依序引入組合及其他治療劑。 157311.doc -21- 201208702 關於本發明之呈各種文法形式之術語「治療」係指治 癒、逆轉、削弱、減輕、最小化、抑制或制止疾病病況之 有害影響、疾病進展、疾病病原體（例如細菌或病毒）或其 他異常情況。如本文所用之治療癌症係指部分或完全抑 制、延遲或逆轉例如哺乳動物（諸如人類）之癌症進展丨包括 癌症轉移及原發性腫瘤細胞生長或存活）^舉例而言，在 本發明之一實施例中，以本發明組合（例如達利珠單抗與 MK-2206)治療之癌症患者之一或多個腫瘤的尺寸（例如以 體積、表面積或直徑計）縮小。 另外，本發明包括化學預防人類之過度增生性病症，諸 如癌症。 如本文所用之術語「治療有效量」意欲形容本發明組合 療法中IGF1R抑制劑（例如達利珠單抗）與Ακτ抑制劑（例如 MK-2206)之組合量。該組合量可達成所需生物反應。在本 發明中’所需生物反應為部分或完全抑制 '延遲或逆轉諸 如人類之哺乳動物的原發性腫瘤或癌症轉移進展。 在本發明之一實施例中，腫瘤治療係藉由使用成像技術 (諸如X射線、超音波掃描、MRI(磁共振成像）、cat掃描 或PET(正電子發射斷層攝影法；例如氟去氧葡萄糖 掃描）確定治療是否引起腔瘤縮小來評估。 人如本文所用之術言吾「組合治療」、「組合療法」或「組 0〜療劑」可互換使用，且係指用以下至少兩種不同治療 劑m療個體.第一治療劑（諸如達利珠單抗或另一 IGF· ^R 抑制劑）聯合第二治療劑（諸b MK_2206或某些其他Akt路徑 I57311.doc •22· 201208702 抑制劑）。組合治療可包括或不包括任何其他治療劑。 本發明進一步關於適用於治療癌症之醫藥組合。該醫藥 組合包含第一量之IGF-1R抑制劑（例如達利珠單抗）及第二 量之抗癌劑（例如Akt路徑抑制劑）。第一量與第二量共同構 成治療有效量。

在本發明之特定實施例中，IGF-1R抑制劑與Akt抑制劑 之組合具有疊加效應，亦即該組合治療方案產生之結果為 各組分在單獨投與時之累加效應。根據此實施例，IGF_ i R 抑制劑之量與Akt抑制劑之量共同構成治療癌症之有效 量。 在本發明之另一特定實施例中，IGF- 1R抑制劑（例如達 利珠單抗）與Akt抑制劑（MK-2206)之組合在該組合治療方 案產生之抗癌結果（例如細胞生長停滯、細胞祠亡、誘導 分化、細胞死亡）顯著優於各組分在以治療劑量單獨投與 時之疊加效應時被認為具有治療協同效應。可使用標準統 s十分析來確定結果是否顯著較佳。舉例而言，可使用曼_ 懷特尼檢驗或一些其他公認之統計分析。 本發明之治療程序包括以任何次序依序投與IGF1R抑制 劑（例如達利珠單抗）與AKT抑制劑（MK-2206)、同時投與 IGF1R抑制劑（例如達利珠單抗）與AKT抑制劑（]^_22〇6)， 或其組合。舉例而言，第一治療程序（投與IGF_1R抑制劑） 可在第二治療程序（亦即Akt抑制劑）之前進行，在Akt抑制 劑之第二治療之後進行，與Akt抑制劑之第二治療同時進 行，或其組合。舉例而言，可針對IGF_1R抑制劑確定總治 157311.doc -23· 201208702 療時段^ Akt抑制劑可在以IGF_1R抑制劑開始治療之前或 在以IGF-1R抑制劑治療之後投與。另外，Akt抑制劑之户 療可在投與制劑期間投與，但無需歷經整個ig= 1R抑制騎療時段。在另-實施例中，治療方案包括用— 種藥劑（IGF-1R抑制劑或Akt抑制劑）預先治療，接著添加 第二藥劑。所建議之組合治療劑之各組分的投藥可經由不 同投藥途徑施與》 本發明之方法適用於治療多種癌症，包括（但不限於）實 體腫瘤（例如肺、乳房、結腸、前列腺、膀胱、直腸、腦 或子宮内膜之腫瘤）、惡性血液病（例如白血病、淋巴瘤、 骨髓瘤）、癌瘤（例如膀胱癌、腎癌、乳癌、結腸直腸癌）、 神經母細胞瘤或黑素瘤。此等癌症之非限制性實例包括皮 膚T細胞淋巴瘤（CTCL)、非皮膚性周邊τ細胞淋巴瘤、與 親人類Τ細胞淋巴病毒（HTLV)有關之淋巴瘤、成人τ細胞 白血病/淋巴瘤（ATLL)、急性淋巴細胞性白血病、急性非 淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、慢性骨趙性 白血病、霍奇金氏病、非霍奇金氏淋巴瘤、多發性骨髓 瘤、間皮瘤；兒童實體腫瘤，諸如腦神經母細胞瘤、視網 膜母細胞瘤、韋爾姆斯氏腫瘤、骨癌及軟組織肉瘤；成人 之常見實體腫瘤，諸如頭頸部癌（例如口腔癌、喉癌及食 道癌）、生殖泌尿道癌症（例如前列腺癌、膀胱癌、腎癌、 子呂癌、卵巢癌、睪丸癌、直腸癌及結腸癌）、肺癌、乳 癌、胰臟癌、黑素瘤及其他皮膚癌、胃癌、腦癌、肝癌、 腎上腺癌、腎癌、曱狀腺癌、基底細胞癌、潰瘍型及乳頭 157311.doc .24- 201208702 狀型鱗狀細胞癌、轉移性皮膚癌、髓性癌、骨肉瘤、尤文 氏肉瘤、網狀細胞肉瘤、卡波西氏肉瘤、神經母細胞瘤及 視網膜母細胞瘤。 在本發明之一特定實施例中’ IGF-1R抑制劑為達利珠單 抗’且可與AKT抑制劑（例如MK-2206)聯合投與，上述兩 者可進一步與其他化學治療劑聯合投與，諸如任一或多種 其他IGF-1R抑制劑、烧基化劑、抗生素劑、抗代謝劑、激 素藥劑、源於植物之藥劑、抗血管生成劑、分化誘導劑、 細胞生長停滯誘導劑、細胞凋亡誘導劑、細胞毒性劑、生 物劑、基因治療劑或其任何組合。 考慮到與兩種治療模態有關之差分毒性，組合療法可提 供>〇療優勢。舉例而g ’以IGF -1R抑制劑進行治療可產生 在以抗癌劑治療下未見到之特定毒性，且反之亦然。因 而’此差分毒性可允許各治療以該等毒性不存在或最小之 劑量投與，使得組合療法總體上提供治療劑量同時避免組 合藥劑之各組分之毒性。此外，當由組合治療所達成之治 療作用增強或具協同效應，例如顯著優於疊加治療作用 時，甚至可進一步減少各藥劑之劑量，從而在甚至更大之 程度上降低相關毒性。 術語「IGF-1R」、「胰島素樣生長因子受體_j」及「騰 島素樣生長因子受體I型」為此項技術中所熟知。儘管 IGF-1R可來自任何生物體，但其較佳來自動物，更佳來自 哺乳動物（例如小鼠、大鼠、兔、綿羊或狗）且最佳來自人 類。典型人類IGF-1R前驅體之核苷酸及胺基酸序列可獲自 157311.doc •25· 201208702

Genebank，例如基因ID 3480或NM000875。前驅體（例如在 胺基酸710與711之間）裂解產生α-次單元及…次單元，該等 次單位締合形成成熟受體。 「患者」在其用於本文中時係指治療之接受者。包括哺 乳動物及非哺乳動物患者。在一特定實施例中，患者為嘴 乳動物，諸如人類、犬類、鼠類、貓類、牛、綿羊、猪戍 公山羊。在一特定實施例中，患者為人類。 抗IGF1R抗體 本發明包含含有抗IGF1R抗體或其抗原結合片段聯合 ΑΚΤ抑制劑（例如μκ-2206)之組合物及套組；以及治療或 預防過度增生性病症之方法，其係藉由投與患有該病症之 患者治療有效量之該等抑制劑來達成。 在本發明之一實施例中，抗IGF1R抗體或其抗原結合片 段為「h7C10」、「MK-0646」或「達利珠單抗」，其可 互換用於描述特徵在於結合IGF-1R以及結合ir/IGF- 1雜交 受體之人類化抗體。在本發明之一實施例中，該抗體或其 抗原結合片段與達利珠單抗結合至相同抗原決定基或與達 利珠單抗競爭結合IGF 1R。 在本發明之某些實施例中，抗IGF1R抗體係如美國專利 第7,241，444號（’444專利）中所述，該專利之内容係以全文 引用之方式併入本文中。表現重組抗IGF1R抗體之核酸分 子亦描述於'444專利中。 在本發明之一實施例中，抗IGF1R抗體或其抗原結合片 段包含下表1中所詳述之任一或多者。 157311.doc -26· 201208702 表1 抑制劑 公司 XL228 Exelixis OSI-906 0SI AMG-479 Amgen R1507 Roche 菲格珠單抗（Figitumumab) Pfizer BMS-754807 BMS MK-0646 Merck IMC A12 Imclone/Lilly 來源：www.pharmastrategyblog.com/2009/06/igflr-inhibitors-in-cancer.html 在本發明之一實施例中，抗IGF1R抗體或其抗原結合片 段包含一或多個（例如3個）源自非人類來源且具有選自由 SEQ ID NO: 1、2或3組成之群的胺基酸序列之互補決定 區；及包含一或多個（例如3個）具有選自由SEQ ID NO: 4、 5或6組成之群之胺基酸序列的互補決定區之重鏈。 在本發明之一實施例中，輕鏈免疫球蛋白包含來自如 SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列或在與SEQ ID NO: 7中 所述之胺基酸序列最佳比對後與其具有至少80%—致性之 序列的CDR1、CDR2及CDR3 ;及/或重鏈免疫球蛋白包含 來自如SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列或在與SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列最佳比對後具有至少80%—致性 157311.doc -27- 201208702 之序列的CDRl、CDR2及CDR3。 在本發明之一實施例中，輕鍵免疫球蛋白包含如SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列或在與SEQ ID NO: 7中所述之 胺基酸序列最佳比對後與其具有至少80%—致性的序列； 及/或重鏈免疫球蛋白包含如SEQ ID NO: 8中所述之胺基 酸序列或在與SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列最佳比對 後具有至少80%—致性的序列。 在本發明之一實施例中，抗IGF 1R包含含以下胺基酸序 列之輕鏈免疫球蛋白中所述之輕鏈CDR :

1 DIVMTQSPLS LPVTPGEPAS ISCRSSQSIV HSNGNTYLQW YLQKPGQSPQ

51 LLIYKVSNRL YGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDVGV YYCFQGSHVP

101 WTFGQGTKVE IKRTVAAPSV FIFPPSDEQL KSGTASWCL LNNFYPREAK 151 VQWKVDNALQ SGNSQESVTE QDSKDSTYSL SSTLTLSKAD YEKHKVYACE 201 VTHQGLSSPV TKSFNRGEC (SEQ ID NO: 7) 及/或含以下胺基酸序列之重鏈免疫球蛋白中所述之重鏈 CDR ： 10505050 51122334

QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGYSIT GGYLWNWIRQ PPGKGLEWIG YISYDGTNNY KPSLKDRVTI SRDTSKNQFS LKLSSVTAAD TAVYYCARYG RVFFDYWGQG TLVTVSSAST KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY SLSSWTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RWSVLTVLH QbWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAATE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK (SEQ ID NO: 8)。 在本發明之一實施例中： LCDR1包含以下胺基酸序列：RSSQSIVHSNGNTYLQ (SEQ ID NO: 1)； LCDR2包含以下胺基酸序列：KVSNRLY (SEQ ID NO: 2); 157311.doc -28- 201208702 LCDR3包含以下胺基酸序列：FQGSHVPWT (SEQ ID NO: 3) ; 及/或； HCDR1包含以下胺基酸序列：GGYLWN (SEQ ID NO: 4) ; HCDR2包含以下胺基酸序列：YISYDGTNNYKPSLKD (SEQ ID NO: 5)； HCDR3包含以下胺基酸序列：YGRVFFDY (SEQ ID NO: 6)。 如上所述，本發明之範疇包含含有本文所述之如藉由以 下參考文獻中所述之任一方法鑑別的任一輕鏈免疫球蛋白 或重鏈免疫球蛋白之一或多個CDR(3個輕鏈CDR及/或3個 重鏈CDR)及/或構架區之任何抗體或其抗原結合片段： Chothia等人，J· Mol. Biol. 186:651-663 (1985) ; Novotny及 Haber, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:4592-4596 (1985)； 或 Kabat，E. A.等人，Sequences of Proteins of

Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda，Md·，（1987)。 「抗體」為四聚體分子。在天然存在之抗體中，各四聚 體由兩對相同之多肽鏈構成，各對具有一個「輕」鏈（約 25 kDa)及一個「重」鏈（約50-70 kDa)。各鏈之胺基端部 分包括具有約100至110個或110個以上胺基酸之可變區， 其主要負責識別抗原。各鏈之羧基端部分界定主要負貴效 應功能之恆定區。人類輕鏈分為κ及λ輕鏈。重鏈分為μ、 157311.doc -29- 201208702 δ、γ、α或ε重鏈，且將抗體同型分別定義為IgM、IgD、 IgG(例如 IgGl、IgG2、IgG3 或 IgG4)、IgA及 IgE。在輕鍵 及重鏈内，可變區與恆定區由具有約12個或12個以上胺基 酸之「J」區接合，其中重鏈亦包括具有約10個或10個以 上胺基酸之「D」區。一般參見基礎免疫學第7章 (Fundamental Immunology Ch. 7)(Paul，W.編，第 2版，Raven Press，Ν·Υ. (1989))(其出於所有目的以全文引用之方式併 入本文中）。各輕鏈/重鏈對之可變區形成抗體結合位點， 因此完整抗體具有兩個結合位點。 抗原結合片段可藉由重組DNA技術或藉由酶促或化學裂 解完整抗體而產生。抗原結合片段尤其包括Fab、Fab1、 F(ab’)2、Fv、dAb及互補決定區（Cdr)片段、單鏈抗體 (scFv)、雙功能抗體，以及含有足以賦予多肽特異性抗原 結合性之至少一部分免疫球蛋白的多肽。 如本文所詳述，本發明之一態樣係關於改良抗癌劑之抗 腫瘤功效的方法，其係藉由向癌症患者共同投與igf ir抑 制劑及Akt抑制劑來達成。應瞭解，用於實踐本發明方法 之IGF-1R抑制劑不限於IGF_〗R特異性抗體，例如達利珠單 抗。同樣，即使當IGF-1R抑制劑為達利珠單抗時，亦應瞭 解其可與另-IGF-1R抗體或小分子IGF]R抑制劑組合。因 此，IGF-1R抑制劑無須限於抗體且實際上其可包含任何 IGF-m抑制部^參見例如表卜在某些實施例中:祖人 ^:可包含-種以上IGF_1R抑制劑（因此包含抗肌二 -)、包含至少兩種或兩種以上化學治療劑之化學治療 157311.doc 201208702 混合物組合，其在與單獨化學治療劑比較時不會顯著增加 不良事件之發生率。 如本文所狀「㈣」或「㈣分子」係餘何單股或 雙股DNA或RNA分子，且若為單股，則係指呈線性或圓形 ㈣之具有互補序列之分子。在論述核酸分子時，特定核 ‘ ㈣子之序列或結構在本文中可根據以5，至3,方向提供序 列之通常慣例來描述。在本發明之一些實施例中，核酸為 「分離」之核酸。此術語在應用於DNA時係指dna分子與 在其來源之生物體之天然存在的基因組中與其直接相鄰的 序列分離。舉例而言，「分離之核酸」可包含插入載體 (諸如質體或病毒載體）中之DNA分子，或整合至原核或真 核細胞或佰主生物體之基因組dna中之DNA分子。當應用 於RNA時，術語「分離之核酸」主要係指由如上文所定義 之刀離之DNA分子編碼的RNA分子《或者，該術語可指 RNA分子與在其天然狀態中（亦即在細胞或組織中）與其締 合之其他核酸充分分離。分離之核酸（DNA或RNA)可進一 步表示由生物或合成方式直接產生且與其產生期間存在之 其他組分分離的分子。 本發明之核酸亦包括本發明核酸之片段。「片段」係指 • 長度較佳為至少約1 〇個核酸，更佳為約40個核酸且長度最 佳為約100個核酸之核酸序列。r片段」亦可意謂具有至 少約100個連續核苷酸且含有一或多處缺失、插入或取代 的延伸段。「片段」亦可意謂基因之整個編碼序列且可包 括5’及3’非轉譯區。 157311.doc •31- 201208702 用於本發明中之抗體及其抗原結合片段包括（但不限於） 單株抗體、合成抗體、多株抗體、多特異性抗體（包括雙 特異性抗體）、人類抗體、人類化抗體、嵌合抗體、單鏈 Fvs(scfv)(包括雙特異性SCFVS)、單鏈抗體、Fab片段、 F(ab’）片段、二硫鍵連接之Fvs(sdFv)及上述任一者之抗原 結合片段。特定而言，用於本發明中之抗體包括免疫球蛋 白分子及免疫球蛋白分子之免疫活性部分，亦即含有免疫 特異性結合至IGF-1R之IGF-1R結合位點的分子。用於本發 明中之免疫球蛋白分子可具有任何類型（例如IgG、igE、 IgM、IgD、IgA及 IgY)、類別（例如 igGl、IgG2、IgG3、 IgG4、IgAl及IgA2)或免疫球蛋白分子子類。用於本發明 中之抗體較佳為IgG，更佳為IgGl。 用於本發明中之抗體可來自任何動物來源。抗體較佳為 人類化單株抗體。或者，抗體可為完全人類抗體，例如只 要其與·444專利中所主張之抗體結合相同抗原決定基即 可。如本文所用之「人類」抗體包括具有人類免疫球蛋白 之胺基酸序列的抗體且包括自人類免疫球蛋白文庫中分離 或自由人類基因表現抗體之小鼠或其他動物分離的抗體。

用於本發明中之抗體可具單特異性、雙特異性、三重特 異性或二重特異性以上之多特異性。多特異性抗體可免疫 特異性結合至多肽之不同抗原決定基或可免疫特異性結合 至多肽以及異源抗原決定基，諸如異源多肽或固體支撐物 質。參見例如國際公開案第W〇 93/17715號、第WO 92/08802號、第 WO 91/00360號及第 w〇 92/05793號；Tutt 157311.doc •32- 201208702 等人，1991，J. Immunol. 147:60-69;美國專利第 4,474,893 號、第 4,714,681號、第 4,925,648號、第 5,573,920號及第 5,601，819说，及Kostelny等人，1992，J. Immunol. 148:1547-1553。 用於本發明中之抗體包括抗體衍生物。可使用熟習此項 技術者已知之標準技術將突變引入編碼用於本發明中所用 方法之抗體的核苷酸序列中，該等標準技術包括例如產生 胺基酸取代之定點突變誘發及PCR介導之突變誘發。較佳 地，衍生物相對於原始分子包括低於25處胺基酸取代、低 於20處胺基酸取代、低於15處胺基酸取代、低於1〇處胺基 酸取代、低於5處胺基酸取代、低於4處胺基酸取代、低於 3處胺基酸取代或低於2處胺基酸取代。在一較佳實施例 中，衍生物具有在一或多個預測之非必需胺基酸殘基上進 行之保守胺基酸取代。「保守胺基酸取代」為胺基酸殘基 經具有電荷相似之側鏈的胺基酸殘基置換之胺基酸取代。 具有電荷相似之側鏈的胺基酸殘基家族已在此項技術中加 以定義。此等家族包括具有驗性側键之胺基酸（例如離胺 酸、精胺酸、組胺酸）、具有酸性側鏈之胺基酸（例如天冬 胺酸、麵胺酸）、具有不帶電極性側鏈之胺基酸（例如甘胺 酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、絲胺酸 '蘇胺酸、酪胺酸、半 胱胺酸）、具有非極性側鏈之胺基酸（例如丙胺酸、纈胺 酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、曱硫胺酸、 色胺酸）、具有β分支側鏈之胺基酸（例如蘇胺酸、纈胺酸、 異白胺酸）及具有芳族側鏈之胺基酸（例如酪胺酸、苯丙胺 157311.doc •33- 201208702 X色胺酸、㈣酸）°或者’可沿編竭序列之全部或一 部/刀’諸如藉由飽和突變誘發隨㈣入突變，且可 物活性筛選所得突變體以㈣保持活性之突變體突 誘發後’可表現所編碼之蛋白質且可測定蛋白質之活性變 用於本發明中之抗體包括經修_，亦即任何類型之分子 :價連接至抗體所產生之衍生物。舉例而言“旦不限制)， 抗體衍生物包括已例如藉由糖基化、乙酿化、聚乙二醇 化、填酸化、酿胺化、由已知保護基/阻隔基衍生化、蛋 白質裂解、連接至細胞配位體或其他蛋白質等而經修飾之 抗體。多種化學修飾中之任一者可藉由已知技術進行，該 等技術包括（但不限於）特定化學裂解、⑽化、甲酿化、 在衣黴素（tUnicamycin)存在下合成等。另外，衍生物可含 有一或多個非經典胺基酸。 本發明亦提供用於本發財之包含熟習此項技術者已知 之構架區的抗體。在某些實施例中，用於本發明中所用組 合物及方法中之抗體的-或多個構架區，較佳全部構架區 為人類構架區。在用於本發明中之某些其他實施例中，用 於本發明中之抗體之片段區為人類化片段區。在某些實施 例中’用於本發明令所用方法之抗體為合成抗體、單株抗 體、内抗體（intrabody)、嵌合抗體、人類抗體、人類化嵌 合抗體、人類化抗體、糖基化抗體、多特異性抗體、人類 抗體、單鏈抗體或雙特異性抗體。 在某些實施例中，用於本發明中之抗體對IGF_ 1R具有高 結合親和力。 1573Il.doc •34- 201208702 在某些實施例中’用於本發明中之抗體在個體（較佳人 類）體内之半衰期為約12小時或12小時以上、約1天或1天 以上、約3天或3天以上、約6天或6天以上、約1〇天或10天 以上、約15天或15天以上、約2〇天或20天以上、約25天或 25天以上、約30天或30天以上、約35天或35天以上、約40 天或40天以上、約45天或45天以上、約2個月或2個月以 上、約3個月或.3個月以上、約4個月或4個月以上，或約5 個月或5個月以上。活體内半衰期延長之抗體可藉由熟習 此項技術者已知之技術產生。舉例而言，活體内半衰期延 長之抗體可藉由修飾（例如取代、缺失或添加）經鑑別為參 與Fc域與FcRn受體之間相互作用的胺基酸殘基而產生（參 見例如國際公開案第WO 97/34631號及由Johnson等人在 2001 年 12 月 12 日申請之題為「Molecules with Extended Half-Lives, Compositions and Uses Thereof」之美國專利申 請案第10/020,354號；及美國公開案第2005/003700號及第 2005/00645 14號，其係以全文引用之方式併入本文中）。可 使用熟習此項技術者已知之方法，例如藉由本文所述之免 疫檢定來測試該等抗體與抗原之結合活性以及其活體内功 效。 此外’活體内半衰期延長之抗體可藉由使聚合物分子 (諸如咼分子量聚乙二酵（PEG))連接至抗體而產生。peg可 在存在或不存在多官能性連接子下經由PEG位點特異性結 σ至抗體之N端或C端’或經由離胺酸殘基上存在之ε胺基 連接至抗體。使用令生物活性損失最小之線性或分枝聚合 157311.doc •35· 201208702 物衍生化。藉由SDS-PAGE及質譜分析密切監測結合度以 確保PEG分子適當結合至抗體。可藉由例如尺寸排阻或離 子交換層析使未反應之PEG與抗體-PEG結合物分離。可使 用熟習此項技術者已知之方法，例如藉由本文所述之免疫 檢定來測試PEG衍生化之抗體與抗原之結合活性以及其活 體内功效。 在某些實施例中，完整抗體之抗原結合片段保持結合 IGF-1R之能力。實例包括（i) Fab片段，其為由VL、VH、 CL及CH1域組成之單價片段；（ii) F(ab')2片段，其為包含 兩個Fab片段由絞鏈區之二硫橋鍵連接之二價片段；（iii) Fd片段，其由VH及CH1域組成；（iv) Fv片段，其由抗體單 臂之VL及VH域組成；（v) dAb片段（Ward等人，（1989) Nature 341:544-546)，其由VH域組成；及（vi)分離之互補 決定區（CDR)。此外，儘管Fv片段之兩個結構域（即VL及 VH)係由各別基因編碼，但其可使用重組方法，藉由使其 能夠以單一蛋白質鏈形式製得的合成連接子接合，在該單 一蛋白質鏈中，VL區與VH區配對形成單價分子（稱作單鏈 Fv(scFv);參見例如Bird等人，（1988) Science 242:423-426 ;及 Huston 等人，（1988) Proc. Natl. Acad Sci. USA 85:5879-5883)。對術語「抗體」之提及包括該等單鏈抗 體。 產生針對IGF-1R之抗體的方法詳述於例如'444專利（上 述）中，其内容以全文引用之方式併入本文中。 針對抗體特異性進行筛選-上文已描述用於產生抗體之 157311.doc -36- 201208702 技術。可依照需要進一步選擇具有某些生物特徵之抗體β 因此，一旦產生抗體，即可針對其對IGF_1R之結合親和力 進行篩選。可使用酶聯結免疫吸附劑檢定（ELISA)篩選特 異性結合至IGF-1R之抗體，其中用IGF_1R塗佈微量滴定 板。在一些實施例中’可在基於ELISA之檢定中，使用塗 有其他IGF-1R同功異型物之微量滴定板，針對對其他IGF_ 1R同功異型物（例如IGF-1R)之反應性，進一步篩選來自陽 性反應純系之結合IGF-1R之抗體。排除產生對iGF·丨R之另 一同功異型物具反應性之抗體的純系，且可選擇產生僅對 IGF-1R具反應性之抗體的純系供進一步擴增及研究。可例 如使用西方墨點檢定來確定抗體對IGF-1Ri反應性，在該 西方墨點檢定中，使來自卵巢癌、乳癌、腎癌、結腸直腸 癌、肺癌、子宮内膜癌或腦癌細胞之蛋白質以及純化之 IGF-1R及其他IGF-1R同功異型物在SDS_pAGE凝膠上跑 膠，隨後點潰於膜上。接著可用假定抗IGF_1R抗體探測該 膜。對IGF-1R而非另一胰島素樣受體同功異型物具反應性 可證實對IGF-1R之反應性的特異性。 偵測IGF- 1R或其诉生物之一般方法_使用本發明抗體或 其結合片段偵測IGF-1R之檢定方法不特定受限。可使用任 何檢定方法’只要其可藉由化學或物理方式偵測所測試之 流體中抗體之量、抗原之量或對應於抗原之量（例如IGF_ 1R含量）的抗體-，抗原複合物之量且可自由含有已知量之抗 原之標準溶液製知之標準曲線計算抗原之量即可。本發明 所涵蓋之代表性免疫檢定包括（但不限於）美國專利第 157311.doc -37· 201208702 4,367，110號（雙重單株抗體夾心檢定）；Wide等人，Kirkham 及 Hunter 編，Radioimmunoassay Methods, E. and S. Livingstone, Edinburgh (1970);美國專利第 4,452,901 號 (西方墨點法）；Brown 等人，J. Biol. Chem. 255: 4980-4983 (1980)(標記配位體免疫沈澱法）；及Brooks等人，Clin. Exp. Immunol. 39:477 (1980)(免疫細胞化學）中所述者；使用螢 光標記之抗體結合光學顯微偵測、流動式細胞測量術偵測 或螢光偵測等之免疫螢光技術。亦參見Immunoassays for the 80's，A. Voller等人編，University Park, 1981 ; Zola, Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques,第 147-158 頁（CRC Press，Inc· 1987)。 用於偵測IGF-1R之典型活體外免疫檢定包含生物樣品在 經可偵測標記之本發明能夠選擇性結合至IGF-1R之抗IGF-1R抗體或抗原結合片段存在下培育，及偵測樣品中結合之 經標記片段或抗體。該抗體結合至可有效地在抗體結合至 細胞或其部分時偵測到該等細胞或其部分（例如由增生 性、發育不良及/或癌細胞釋放之IGF-1R或其片段）之標 記。生物樣品中任何細胞或其部分的存在係藉由偵測該標 記來偵測。 生物樣品可與固相支撐物或載體（諸如硝化纖維或其他 能夠固定細胞、細胞粒子、膜或可溶性蛋白質之固體支撐 物或基質）接觸且固定於其上。接著該支撐物可用適合緩 衝液洗，繼而用經可偵測標記之抗IGF-1R抗體處理。接著 可用緩衝液再次洗固相支撐物以移除未結合之抗體。接著 157311.doc -38- 201208702 可藉由習知方式偵測固體支撐物上結合之標記的量。因 此，在本發明之另一實施例中，提供包含結合至諸如本文 所述之固相支撐物之單株抗體或其結合片段的組合物。 「固相支撐物」或「載體」欲指能夠結合肽、抗原或抗 體之任何支撑物。熟知之支撐物或載體包括玻璃、聚苯乙 烯聚丙婦、聚乙烯、聚葡萄糖、耐論、澱粉酶、天然及 改質纖維素、聚丙烯醯胺、瓊脂糖及磁鐵礦。為本發明之 目的，載體之性質可為可溶至某種程度，或不可溶。支撐 物質可具有實際上任何可能之結構組態，只要所偶合之分 子能夠結合至IGF_1R或抗IGF_lR抗體。因此支撐物組態 可為球形（如在珠粒中）或圓柱形（如在試管之内表面或桿狀 物之外表面）。或者，表面可為平坦的，諸如薄片、培養 瓜、測試條等。較佳支撐物包括聚苯乙烯珠粒。熟習此項 技術者已知多種其他適用於結合抗體、肽或抗原之載體， 或可藉由常規實驗確定該等載體。 本發明之活體外檢定亦包括使用自表現重組IGF1R之細 胞分離之膜、包含IGF_1R之配位體結合區段的可溶性片 段’或連接至固相基質之片段。此等檢定允許診斷性確定 結合區段突變及修飾或配位體突變及修飾（例如配位體類 似物）之影響。 對組合免疫療法在活體内模型中之功效的檢定--可在腫 瘤攻擊後多個時間點使用此項技術中熟知之技術來評估腫 瘤負荷。用於監測抗腫瘤反應且確定組合免疫療法之功效 的檢定描述於下文中。雖然可在投與免疫療法後不久（例 157311.doc •39· 201208702 如5至1 0天内）最顯著地觀測到改善或增強之抗腫瘤反應， 但在有些情況下該反應可能延遲，視諸如以下之因素而 定：IGF-1R之表現量、抗IGF-1R抗體之劑量及給藥頻率， 以及相對於投與IGF-lRi-SAHA之時間選擇投與IGF-1R抑 制劑（IGF-1R抗體）之相對時間選擇。因此，可對在組合治 療劑處理或投與之後多個時間點收集之生物樣品進行任何 熟知之檢定以充分評估免疫療法後之抗腫瘤反應。 監測治療-熟習此項技術者應瞭解在投與本發明組合治 療後監測治療結果及/或全身免疫反應之方式。特定而 言’治療結果可藉由監測腫瘤生長之削弱及/或腫瘤消退 及/或腫瘤特異性標記物之含量來評估。回應於治療之腫 瘤生長削弱或腫瘤衰退可使用熟習此項技術者已知之若干 終點中之一或多者來監測，該等終點包括例如腫瘤數目、 腫瘤質量或尺寸或轉移之減少/抑制。

Akt及Akt路徑抑制劑 本發明包括一種包含AKT抑制劑（諸如MK_22〇6)聯合 IGF1R抑制劑（諸如本文所述之任一者，例如達利珠單抗） 的組合物或套組，例如其中該等抑制劑共同調配成單一組 合物或各別調配成各別組合物。治療或預防過度增生性病 症（諸如癌症）之方法亦處於本發明之範疇内，該等方法係 藉由投與患者（諸如人類患者）治療有效量之抑制劑來達 成。根據本發明之廣泛態樣，本文提供有效治療癌症而例 如對進行該治療之人類患者無顯著不利影響时法。本發 明治療之臨床結果出人意外，因為包含抗igf ir抑制劑， 157311.doc -40· 201208702 尤其IGF-1R抗體（例如達利珠單抗）及Akt抑制劑（例如ΜΚ- 2206(

)之組合治療劑被認為相較於藉由單獨投與組合治療劑之 各組分進行治療而言可更有效地治療過度增生性細胞病症 (諸如癌症），該等病症更易於以組合治療劑治療。同樣， 組合治療劑在治療各種癌症方面比單獨Akt抑制劑更有 效。 應瞭解，非MK-2206之Akt抑制劑可與IGF-1R抑制劑組 合。因此，本發明之一態樣包括一種組合治療劑，其可包 含一種以上Akt抑制劑以及一或多種IGF-1R抑制劑。根據 此實施例建議之化學治療混合物包含至少兩種或兩種以上 化學治療劑或抗癌劑（Akt抑制劑）連同至少一種IGF-1R抑 制劑，其在與單獨化學治療劑比較時不會顯著增加不良事 件之發生率。

Akt抑制劑包括哌立福新（perifosine)且亦揭示於下列公 開案中：WO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140、 US 2004-0116432、W0 02/083138、US 2004-0102360、 W0 03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、W0 03/084473、W0 03/086403、W0 2004/041162、W0 157311.doc • 41 · 201208702 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135、WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO 2005/100344、US 2005/029941、US 2005/44294、US 2005/43361、60/734188、 60/652737、60/670469、美國中請案第11/999234號及美國 專利第7,576,209號》 MK-2206所附帶之抗癌特性非常適於所建議之組合治療 劑中來治療癌症，尤其與Akt之活性及Akt下游細胞標靶失 調有關之癌症。該等癌症包括（但不限於）卵巢癌、胰臟 癌、乳癌及前列腺癌以及腫瘤抑制因子PTEN突變之癌症 (包括神經膠母細胞瘤）（Cheng等人，/Vocr. Jcai/· 5W. (1992) 89:9267-9271 ; Cheng等人，Proc. Natl. Acad· Sci. (1996) 93:3636-3641 ; Bellacosa等人，/«ί· X Cawcrer (1995) 64:280-285 ； Nakatani# A, J. Biol. Chem. (1999) 274:21528-21532 ； Graff, Expert. Opin. Ther. Targets (2002) 6(1):103-113 ;以及 Yamada 及 Araki，J. Cell Science. (2001) 1 14:2375-2382 ； Mischel^ Cloughesy, Brain Pathol. (2003) 13(1):52-61)。 可由本發明之組合治療組合物及方法治療之癌症包括 (但不限於）：乳癌、前列腺癌、結腸癌、結腸直腸癌、肺 癌、非小細胞肺癌、腦癌、睪丸癌、胃癌、胰臟癌、皮膚 癌、小腸癌、大腸癌、喉癌、頭頸部癌、口腔癌、骨癌、 肝癌、膀胱癌、腎癌、甲狀腺癌及血液癌症。其他癌症包 括晚期腫瘤、毛細胞白血病、黑素瘤、晚期頭頸部癌、轉 移性腎細胞癌、非霍奇金氏淋巴瘤、轉移性乳癌、乳房腺 157311.doc •42· 201208702 癌、晚期黑素瘤、騰臟癌、胃'癌、神經膠母細胞瘤、肺 癌、印巢癌、非小細胞肺癌、前列腺癌、小細胞肺癌、腎 細胞癌、各種實體腫瘤、多發性骨髓瘤、轉移性前列腺 癌、惡性神經膠質瘤、腎癌、淋巴瘤、難治性轉移性疾 病、難治性多發性骨髓瘤、子宮頸癌、卡波西氏肉瘤、復 發性多形性神經膠質瘤及轉移性結腸癌（Dredge等人， 五xperi 出〇/· TTzer. (2002) 2(8):953-966)。因此，本 申请案中所揭示之Akt抑制劑亦適用於治療此等血管生成 相關癌症。 在本發明範疇内進一步包括治療或預防涉及血管生成之 非惡性病的方法。在本發明範疇内進一步包括治療過度增 生性病症之方法’該等病症對組合治療劑之反應性大於對 單獨起作用之各個別組分之反應性。 在本發明範疇内進一步包括本發明化合物塗佈支架之用 途’因此包括本發明組合治療劑於所塗佈之支架上用於治 療及/或預防再狹窄之用途（WO 03/032809)。 在本發明範疇内進一步包括本發明化合物用於治療及/ 或預防骨關節炎之用途（W〇 03/035048)。 本發明之組合治療性化合物亦適用於製備適用於治療上 述疾病（尤其癌症）之藥物。 本發明之組合治療性化合物可根據標準醫藥規範單獨或 與醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑組合以醫藥組 合物形式投與哺乳動物（包括人類）。組合治療性化合物可 經口或非經腸（包括靜脈内、肌肉内、腹膜内、皮下、直 157311.doc -43- 201208702 腸及局部投藥途徑）投與。 其他化學治療劑 在本發明之一實施例中，可提供包含IGF1R抑制劑（例如 達利珠單抗）聯合AKT抑制劑（例如MK-2206)之本發明組合 與一或多種其他治療劑（例如抗癌治療劑）聯合。該等組合 自身以及使用該等組合治療或預防過度增生性疾病（諸如 癌症）的方法亦處於本發明之範疇内。本發明揭示之組合 治療性化合物與其他治療劑、化學治療劑及抗癌劑之組合 亦處於本發明之範疇内。該等藥劑之實例可見於

Principles and Practice of Oncology, Λ/.Ύ. Oevita 反 S. Heilman (編），第 6版（2001 年 2 月 15 曰），Lippincott Williams & Wilkins Publishers*。一般技術者基於藥物及所涉及癌 症之特定特徵’將能夠辨別適用之藥劑組合。該等藥劑包 括以下：雌激素受體調節劑、雄激素受體調節劑、類視色 素（retinoid)受體調節劑、細胞毒性/細胞生長抑制劑、抗 增生劑、平基（prenyl)-蛋白質轉移酶抑制劑、HMG-CoA還 原酶抑制劑及其他血管生成抑制劑、Hiv蛋白酶抑制劑、 逆轉錄酶抑制劑、細胞增殖及存活信號傳導抑制劑、雙鱗 酸鹽、芳香酶抑制劑、siRNA治療劑、分泌酶抑制劑、 干擾受體酷·胺酸激酶（RTK)之藥劑及干擾細胞週期檢查點 之藥劑。本發明之組合（例如達利珠單抗聯合 與治療程序（諸如手術腫瘤切除術或抗癌放射療法）一起投 與患者^ 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 157311.doc -44 * 201208702 抗聯合MK-2206)聯合提供之「雌激素受體調節劑」係指干 擾或抑制雌激素結合至受體的化合物，與機制無關。雌激 素受體調節劑之實例包括（但不限於）他莫西芬（tamoxifen)、 雷洛昔芬（raloxifene)、艾多昔芬（idoxifene)、LY353381、 LY117081.、托瑞米芬（toremifene)、敗維斯群（fulvestrant)、 丙酸4-[7-(2,2-二甲基-1-側氧基丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(l-哌啶基）乙氧基]苯基]-2H-1-苯并哌喃-3-基]-苯基-2,2-二甲 酯、4,4’-二羥基二笨甲酮-2,4-二硝基苯基-腙及SH646。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「雄激素受體調節劑」係指干 擾或抑制雄激素結合至受體的化合物，與機制無關。雄激 素受體調節劑之實例包括非那雄胺（finasteride)及其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特（nilutamide)、氟他胺 (flutamide)、比卡魯胺（bicalutamide)、利阿。坐（liarozole)及 乙酸阿比特龍（abiraterone acetate)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「類視色素受體調節劑」係指 干擾或抑制類視色素結合至受體的化合物，與機制無關。 該等類視色素受體調節劑之實例包括貝瑟羅汀 (bexarotene)、維曱酸（tretinoin)、13-順-視黃酸、9-順-視 黃酸、α-二氟甲基鳥胺酸、ILX23-7553、反-N-(4’-羥基苯 基）維曱胺（trans-N-(4'-hydroxyphenyl) retinamide)及 N-4-叛 基苯基維甲胺（N-4-carboxyphenyl retinamide)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 157311.doc • 45- 201208702 抗聯合MK-2206)聯合提供之「細胞毒性/細胞生長抑制 劑j係指主要藉由直接干擾細胞發揮功能或抑制或干擾細 胞減數分裂來引起細胞死亡或抑制細胞增殖的化合物’包 括烧基化劑、腫瘤壞死因子、嵌·入劑、低氧可活化化合 物、微管抑制劑/微管穩定劑、有絲分裂驅動蛋白抑制 劑、組蛋舀脫乙醯基酶抑制劑、涉及有絲分裂進程之激酶 的抑制劑、涉及生長因子及細胞激素信號轉導路徑之激酶 的抑制劑、抗代謝物、生物反應調節劑、激素/抗激素治 療劑、造血生長因子、單株抗體靶向治療劑、拓撲異構酶 抑制劑、蛋白體抑制劑、泛素連接酶抑制劑及極光激酶 (aurora kinase)抑制劑0 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之細胞毒性/細胞生長抑制劑之 實例包括（但不限於）瑟坦夫（sertenef)、凱屈停（cachectin)、 異環填醢胺（ifosfamide)、他索納明（tasonermin)、氯尼達 明（lonidamine)、卡鉑（carboplatin)、六曱蜜胺（altretamine)、 潑尼氣芬（prednimustine)、二漠衛矛醇（dibromodulcitol)、 雷莫司汀（ranimustine)、福莫司；丁（fotemustine)、奈達翻 (nedaplatin)、奥赛力銘（oxaliplatin)、替莫 °坐胺 (temozolomide)、庚在白（heptaplatin)、雕莫司汀（estramustine)、 曱笨項酸英丙舒凡（improsulfan tosilate)、曲構胺 (trofosfamide)、尼莫司汀（nimustine)、氣化二溴螺氣敍 (dibrospidium chloride)、嗓啦替派（pumitepa)、洛翻 (lobaplatin)、赛特始（satraplatin)、波弗黴素（profiromycin)、 157311.doc -46 - 201208702 順始（cisplatin)、伊洛福芬（irofulven)、右異環填醢胺 (dexifosfamide)、順-胺二氯（2-曱基比咬）鉑、苯甲基鳥嘌 呤、葡磷醯胺（glufosfamide)、GPX100、四氣化（反，反，反）-雙 _μ-(己-1，6-二胺）-μ-[二胺-鉑（II)]雙[二胺（氣）鉑（II)]、二 0丫嗪咬基精胺（diarizidinylspermine)、三氧化二珅、1-(11-十二烷胺基-10-羥基十一烷基）-3,7-二甲基黃嘌呤、佐柔比 星（zorubicin)、艾達黴素（idarubicin)、道諾黴素 (daunorubicin)、比生群（bisantrene)、米托蒽醒 (mitoxantrone)、0比柔比星（pirarubicin)、°比萘非特 (pinafide)、戍柔比星（valrubicin)、胺柔比星（amrubicin)、 抗瘤酮（antineoplaston)、3’-去胺基-3’-嗎琳基-13-去側氧 基-10-經基洋紅黴素（carminomycin)、脂質體蒽環黴素 (annamycin)、加柔比星（galarubicin)、依利奈法德 (elinafide)、MEN10755、4-去甲氧基-3-去胺基-3-氮丙啶 基-4-曱基磺醯基-道諾黴素（參見WO 00/50032)、Raf激酶 抑制劑（諸如Bay43-9006)及mTOR抑制劑（諸如Wyeth之 CCI-779)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之蛋白體抑制劑之實例包括（但 不限於）雷克塔西汀（lactacystin)及MLN-341(萬珂（Velcade))。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之微管抑制劑/微管穩定劑之實 例包括太平洋紫杉醇（paclitaxel)、碌酸長春地辛（vindesine sulfate)、3'，4匕二去氣-4匕去氧-8·-去甲長春花驗（3^41. 157311.doc -47- 201208702 didehydro-4'-deoxy-8'-norvincaleukoblastine)、多西他赛 (docetaxol)、利索新（rhizoxin)、海兔毒素（dolastatin)、經 乙基續酸米福林（mivobulin isethionate)、奥瑞他ίΤ (auristatin)、西馬多汀（cemadotin) 、 RPR109881 、 BMS184476、長春It寧（vinflunine)、自念珠藤環肽 (cryptophycin)、2,3,4,5,6-五氟-Ν-(3·氟-4-曱氧基苯基）苯 績醯胺、脫水長春驗（anhydrovinblastine)、Ν,Ν-二甲基-L-纈胺醯基-L-纈胺醢基-Ν-曱基-L-纈胺醯基-L-脯胺醯基-L-脯胺酸-第三丁醯胺、TDX258、埃坡黴素（epothilone)(參 見例如美國專利第6,284,781號及第6,288,237號）及 BMS188797。在一實施例中，埃坡黴素不包括於微管抑制 劑/微管穩定劑中。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之拓撲異構酶抑制劑之一些實例 為拓朴替康（topotecan)、海普胺（hycaptamine)、伊立替康 (irinotecan)、魯比替康（rubitecan)、6-乙氧基丙醯基-3*，4·-0-外-苯亞甲基-教酒菌素（6-ethoxypropionyl-3*，4’-0-exo-benzylidene-chartreusin)、9-甲氧基-N，N-二曱基-5-硝基口比 唑并[3,4,5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-胺基-9-乙基-5-氟-2,3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H,12H-苯并[de]哌喃并[3’，4’:1)，7]-吲 哚嗪并[l，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、洛托替康 (lurtotecan)、7-[2-(N-異丙基胺基）乙基]-(20S)喜樹鹼（7-[2-(N-isopropylamino)ethyl]-(20S)camptothecin)、BNP1350、 BNPI1100、BN80915、BN80942、填酸依託泊普（etoposide 157311.doc -48- 201208702 phosphate)、替尼泊戒（teniposide)、索布佐生（sobuzoxane)、 2’-二曱胺基-2’-去氧-依託泊苷、GL331、N-[2-(二甲胺基） 乙基]-9-羥基-5,6-二甲基-6H-吡啶并[4,3-b]咔唑-1-甲醯 胺、阿素拉瑞（asulacrine)、（5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(: 曱胺基）乙基]-N-曱胺基]乙基]-5-[4-羥基-3,5-二甲氧基苯 基]-5,5a，6,8,8a，9-六氬呋喃并（3'，4···6,7)萘并（2,3-d)-l，3-間 二氧雜環戊烯-6-酮、2,3-(亞曱基二氧基）-5-甲基-7-羥基-8-曱氧基苯并[c]-啡錠、6,9-雙[(2-胺基乙基）胺基]苯并[g] 異喹啉-5，10-二酮、5-(3-胺基丙胺基）-7,10-二羥基-2-(2-羥 基乙胺基曱基）-6H-吡唑并[4,5，l_de]吖啶-6-酮、N-[l-[2(二 乙胺基）乙胺基]-7-曱氧基-9-側氧基-9H-噻咄-4-基曱基]甲 醯胺、Ν-(2·(二甲胺基）乙基）吖啶-4-曱醯胺、6-[[2-(二曱 胺基）乙基]胺基]-3-羥基-7Η-茚并[2，l-c]喹啉-7-酮及地美 司納（dimesna)。

在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之有絲分裂驅動蛋白抑制劑及尤 其人類有絲分裂驅動蛋白KSP抑制劑之實例描述於公開案 WO 03/039460、WO 03/050064、W0 03/050122、WO 03/049527 ' W0 03/049679 、 W0 03/049678 、 W0 04/039774 、 WO 03/079973 ' W0 03/099211 ' WO 03/105855 、 W0 03/106417 、 W0 04/037171 、 W0 04/058148 、 W0 04/058700 、 W0 04/126699 、 W0 05/018638 、 W0 05/019206 、 W0 05/019205 、 W0 05/018547、WO 05/017190、US 2005/0176776 中。在一實 157311.doc -49- 201208702 施例中，有絲分裂驅動蛋白抑制劑包括（但不限於）KSP抑 制劑、MKLP1抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑及 Rab6-KIFL抑制劑》 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「組蛋白脫乙醯基酶抑制劑」 之實例包括（但不限於）Miller，T.A.等人，·/·^^^/·^：/^/^· 46(24):5097-51 16 (2003)中所揭示者。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「涉及有絲分裂進程之激酶的 抑制劑」包括（但不限於）極光激酶之抑制劑、Polo樣激酶 之抑制劑（PLK抑制劑；尤其PLK-1抑制劑）、bub-Ι抑制劑 及bub-Rl抑制劑。「極光激酶抑制劑」之一實例為VX-680 〇 在本發明之一實施例_可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「抗增生劑」包括反義RNA及 DNA 寡核苷酸，諸如 G3139、ODN698、RVASKRAS、 GEM231及INX3001 ;及抗代謝物，諸如依諾他濱 (enocitabine)、卡莫氣（carmofur)、喃氟咬（tegafur)、喷司 他丁（pentostatin)、去氧氟尿苷（doxifluridine)、三甲曲沙 (trimetrexate)、|L 達拉濱（fludarabine)、卡培他濱 (capecitabine)、加洛他濱（galocitabine)、阿糖胞苦十八烧 基構酸鹽（cytarabine ocfosfate)、氫化福斯替濱納 (fosteabine sodium hydrate)、雷替曲塞（raltitrexed)、帕替 曲塞（paltitrexid)、乙嘴替氟（emitefur)、嗟0坐咬林 157311.doc -50- 201208702 (tiazofurin)、地西他濱（decitabine)、諾拉曲特（nolatrexed)、 培美曲"坐（pemetrexed)、奈拉濱（nelzarabine)、2’-去氧-2'-亞曱基胞苷、2·-氟亞甲基-2^去氧胞苷、Ν-[5-(2,3·二氫-苯并呋喃基）磺醯基]-Ν·-(3,4-二氯苯基）脲、Ν6-[4-去氧-4-[Ν2-[2(Ε)，4(Ε)_十四碳二烯醯基]甘胺醯基胺基]-L-甘油-Β-L-甘露-庚娘痛糖基]腺嗓吟、安力定（aplidine)、海勒素 (ecteinascidin)、曲沙他濱（troxacitabine)、4-[2-胺基-4-側 氧基-4,6,7,8-四氫-3H-嘧啶并[5,4-b][l，4]噻嗪_6-基-(S)·乙 基]-2,5-°塞吩醯基-L-麩胺酸、胺基蝶呤（aminopterin)、5-I 脲喊咬（5-flurouracil)、阿拉諾新（alairosine)、11-乙酿 基-8-(胺甲醯基氧基甲基）-4-甲醯基-6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環（7.4.1.0.0)-十四-2,4,6-三烯-9-基乙酸酯、 苦馬豆素（swainsonine)、洛美曲索（lometrexol)、右雷佐生 (dexrazoxane)、蛋胺酸酶（methioninase)、2'-氰基-2'-去氧-N4-十六醯基阿糖呋喃胞嘧啶、3-胺基吡啶-2-曱醛 硫縮胺基腺及曲妥珠單抗（trastuzumab)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之單株抗體靶向治療劑之實例包 括具有細胞毒性劑或放射性同位素連接至癌細胞特異性或 標靶細胞特異性單株抗體之治療劑。實例包括阿來組單抗 (alemtuzumab)、曲妥珠單抗、尼妥珠單抗（nimotuzumab)、 西妥昔單抗（cetuximab)、托西莫單抗（tositumomab)、貝伐 單抗（bevacizumab)或利妥昔單抗（rituximab)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 157311.doc -51 - 201208702 抗聯合MK-2206)聯合提供之「HMG-CoA還原酶抑制劑」 係指3-羥基-3-甲基戊二醯基-CoA還原酶抑制劑。可使用 之HMG-CoA還原酶抑制劑之實例包括（但不限於）洛伐他汀 (lovastatin)(MEVACOR® ;參見美國專利第 4,231，938號、 第 4,294,926 號及第 4,3 19,039 號）、辛伐他汀（simvastatin) (ZOCOR® ;參見美國專利第4,444,784號、第4,820,850號 及第 4,916,239號）、普伐他汀（pravastatin)(PRAVACHOL® ; 參見美國專利第4,346,227號、第4,537,859號、第 4,410,629號、第5,030,447號及第5，180,589號）、氟伐他汀 (打1^3313以11)(1^3(：01^;參見美國專利第5,354,772號、第 4,911，165 號、第 4,929,437 號、第 5，189,164 號、第 5,1 18,853號、第 5,290,946號及第 5,356,896號、）、阿托伐 他汀（atorvastatin)(LIPITOR® ;參見美國專利第 5,273,995 號、第4,681，893號、第5,489,691號及第5,342,952號）及西 立伐他江（cerivastatin)(亦稱作立伐他汀（rivastatin)及 BAYCHOL® ;參見美國專利第5，177,080號）。可用於本發 明方法中之此等及其他HMG-CoA還原酶抑制劑之結構式 描述於 M. Yalpani， 「Cholesterol Lowering Drugs」， ，第 85-89 頁（1996年 2 月 5 日）之第 87 頁 及美國專利第4,782,084號及第4,885,314號中。如本文所用 之術語HMG-CoA還原酶抑制劑包括具有HMG-CoA還原酶 抑制活性之化合物之所有醫藥學上可接受之内酯及開環酸 (open-acid)形式（亦即，其中内酯環打開形成游離酸）以及 鹽及酯形式，因此該等鹽、酯、開環酸及内酯形式的使用 157311.doc -52- 201208702 包括於本發明之範疇内。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「平基-蛋白質轉移酶抑制 劑」係指抑制平基-蛋白質轉移酶（包括法呢基-蛋白質轉移 酶（FPTase)、I型四異戊二烯基·蛋白質轉移酶（GGPTase_I) 及II型四異戍二烯基-蛋白質轉移酶（GGPTase-II，亦稱作 Rab GGPTase))中之任一者或任一組合之化合物。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之平基-蛋白質轉移酶抑制劑之 實例可見於以下公開案及專利中：WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO 97/38665、 WO 98/28980、WO 98/291 19、WO 95/32987、美國專利第 5,420,245號、美國專利第5,523,430號、美國專利第 5,532,359號、美國專利第5,510,510號、美國專利第 5,5 89,485號、美國專利第5,602,098號、歐洲專利公開案0 618 221、歐洲專利公開案0 675 112、歐洲專利公開案0 604 181、歐洲專利公開案 0 696 593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、 WO 95/10514、美國專利第 5,661，152號、WO 95/10515、 WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、 WO 96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、WO 96/05168、 WO 96/05169、WO 96/00736、美國專利第 5,571，792號、 157311.doc -53- 201208702 WO 96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、 WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO 96/31478 ' WO 96/31501 ' WO 97/00252 ' WO 97/03047 ' WO 97/03050 ' WO 97/04785 ' WO 97/02920 ' WO 97/17070、WO 97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053 ' WO 97/44350、WO 98/02436及美國專利第 5,532,359號。 關於平基-蛋白質轉移酶抑制劑對血管生成之作用的實 例，參見 European J. of Cancer,第 3 5 卷，第 9期，第 1394-1401 頁（1999)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「血管生成抑制劑」係指抑制 新血管形成之化合物，與機制無關。血管生成抑制劑之實 例包括（但不限於）酪胺酸激酶抑制劑，諸如酪胺酸激酶受 體 Flt-l(VEGFRl)及 Flk-1/KDR(VEGFR2)之抑制劑；表皮 衍生生長因子、纖維母細胞衍生生長因子或灰小板衍生生 長因子之抑制劑；MMP(基質金屬蛋白酶）抑制劑；整合素 阻斷劑；干擾素-α ;介白素-12 ;戊聚糖多硫酸鹽 (pentosan polysulfate);環加氧酶抑制劑，包括非類固醇 消炎劑（NSAID)(如阿司匹靈（aspirin)及布洛芬（ibuprofen)) 以及選擇性環加氧酶-2抑制劑（如赛利克西（celecoxib)及羅 非考昔（rofecoxib))(户见45，第 89卷，第 7384 頁（1992) ; «Λ/Ν/Γ/， 第 69卷，第 475 頁（1982); Jrc/z. Ο尸i/m/wo/.，第 108卷，第 573 頁（1990) ; 及％.，第 238卷，第 68 頁（1994) ; 157311.doc -54- 201208702 第 372 卷，第 83 頁（1995);C7i«, ΟίΛο/7.第 313 卷，第 76 頁 (1995) ; Mo/· 第 16卷，第 107 頁（1996) ; J>n. 丄 Pharmacol.，第 75卷，第 105 展（1997)Cancer Res.，第 57卷， 第 1625 頁（1997); Ce//,第 93卷，第 705 頁（1998);/«"· «/. Mo/. Med.,第 2卷，第 715 頁（1998); J. Biol· Chem.,第 274 卷，第 9116頁（1999));類固醇消炎劑（諸如皮質類固醇、鹽皮質 素、地塞米松（dexamethasone)、潑尼松（prednisone)、潑尼 松龍（prednisolone)、甲潑尼龍（methylpred)、倍他米松 (betamethasone))、叛基醯胺基三唾、康普立汀A-4 (combretastatin A-4)、角鯊胺（squalamine)、6-0-氯乙醯 基-羰基）-煙麯黴醇（fumagillol)、瑟利德米（thalidomide)、 金管抑制素（angiostatin)、肌#5蛋白-1、血管緊張素II拮抗 劑（參見 Fernandez等人，·/. C7z_«. Med. 105:141-145 (1985)) ’ 及 VEGF抗體（參見 iVaiwre 第 17卷， 第 963-968 頁（1999 年 10月）；Kim 等人，；\^«"6，3(52，841-844 (1993) ; WO 00/44777 ;及 WO 00/61 186)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供的調節或抑制血管生成且亦可與 本發明之組合治療性化合物組合使用的其他治療劑包括調 節或抑制凝血及纖維蛋白溶解系統之藥劑（參見C7k. CTzew. Ζα· Med. 38:679-692 (2000)中之評述）。該等調節或 抑制凝血及纖維蛋白溶解路徑之藥劑的實例包括（但不限 於）肝素（heparin)(參見 77irom6. /faemosi. 80:10-23 (1998))、 低分子量肝素及羧舦酶U抑制劑（亦稱作活性凝血酶可活化 157311.doc -55· 201208702 纖維蛋白溶解抑制劑[TAFIa]之抑制劑）（參見 101:329-354 (2001))。TAFIa抑制劑已描述於美國第 60/310,927 號（2001 年 8 月 8 日申請）及第 60/349,925 號（2002 年1月18曰申請）中。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「干擾細胞週期檢查點之藥 劑」係指抑制轉導細胞週期檢查點信號之蛋白激酶，藉此 使癌細胞對DNA破壞劑敏感的化合物。該等藥劑包括 ATR、ATM、CHK11及CHK12激酶之抑制劑以及cdk及cdc 激酶抑制劑，且尤其由7-羥基星形孢菌素、夫拉平度 (flavopiridol)、CYC202(Cyclacel)及BMS-387032所例示。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「干擾受體酪胺酸激酶（RTK) 之藥劑」係指抑制RTK，藉此抑制涉及腫瘤發生及腫瘤進 展之機制的化合物。該等藥劑包括c-Kit、Eph、PDGF、 Flt3及c-Met之抑制劑。其他藥劑包括如由Bume-Jensen及 Hunter，TVaiwre，41 1:3 55-3 65, 2001所述之RTK抑制劑。

在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之「細胞增殖及存活信號傳導路 徑抑制劑」係指抑制細胞表面受體下游信號轉導級聯之化 合物。該等藥劑包括絲胺酸/蘇胺酸激酶之抑制劑（包括（但 不限於）諸如以下專利中所述之Akt抑制劑：WO 02/083064 ' WO 02/083139 ' WO 02/083140 ' US 2004-0116432、WO 02/083138、US 2004-0102360、WO 157311.doc -56- 201208702 03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、WO 03/084473、WO 03/086403、WO 2004/041162、WO 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135 ' WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO 2005/100344、US 2005/029941 、 US 2005/44294 、 US 2005/43361 、 60/734188 、 60/652737、60/670469)、Raf激酶抑制劑（例如 BAY-43-9006)、MEK抑制劑（例如 CI-1040及 PD-098059)、mTOR抑 制劑（例如Wyeth CCI-779)及PI3K抑制劑（例如LY294002)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之NSAID(非類固醇消炎藥）包括 COX-2抑制劑。為達成本說明書之目的，若如由細胞或微 粒體檢定所量測，NSAID抑制COX-2之IC5〇為1 μΜ或1 μΜ 以下，則NSAID為有效的。為達成本說明書之目的，作為 選擇性COX-2抑制劑之NSAID定義為如由細胞或微粒體檢 定所評估之針對COX-2之IC5〇與針對COX-1之IC5G的比值所 量測，抑制COX-2之特異性為抑制COX-1之特異性的至少 100倍的NSAID。該等化合物包括（但不限於）揭示於以下專 利中之化合物：美國專利5,474,995、美國專利5,861，419、 美國專利6,001，843、美國專利6,020,343、美國專利 5,409,944、美國專利 5,436,265、美國專利 5,536,752、美 國專利 5,550，142、美國專利 5,604,260、U.S. 5,698,584、 美國專利 5,710,140、WO 94/15932、美國專利 5,344,991、 美國專利5，134,142、美國專利5,380,738、美國專利 5,393,790、美國專利5,466,823、美國專利5,633,272及美 157311.doc -57- 201208702 國專利5,932,598(皆以引用之方式併入本文中）。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之血管生成抑制劑之其他實例包 括（但不限於）内皮抑制素（end〇statin)、優克林（ukrain)、豹 蛙酶（ranpirnase)、IM862、（氯乙醯基）胺基甲酸5_曱氧基_ 4-[2-曱基-3-(3 -甲基-2-丁烯基）環氧乙基]-1-氧雜螺[2 5]辛_ 6-基醋、乙醯地那林（acetyldinanaline)、5-胺基-i_[[3,5-二 氣-4-(4-氣苯甲醯基）苯基]甲基]_1H-1，2,3-三唑-4-甲醯胺、 CM101、角鯊胺、康普立汀、RPI461〇、NX31838、硫酸 化甘露戊糖磷酸酯、7,7-(羰基-雙[亞胺基甲基-4,2-(N-吡咯基）羰基亞胺基[N-甲基-4,2-吡咯]-羰基亞胺基]-雙- (1，3-萘二磺酸酯）及3-[(2,4-二甲基吡咯-5-基）亞曱基]-2-吲 哚啉酮（SU5416)。 如本文所用’在本發明之一實施例中可與本發明組合 (例如達利珠單抗聯合]^尺_22〇6)聯合提供之「整合素阻斷 劑」係指選擇性拮抗、抑制或對抗生理性配位體結合至 ανβ3整合素的化合物’選擇性拮抗、抑制或對抗生理性配 位體結合至ανβ5整合素的化合物，拮抗、抑制或對抗生理 性配位體結合至〜卩3整合素與ανρ5整合素的化合物，及拮 抗、抑制或對抗毛細血管内皮細胞上表現之特定整合素之 活性的化合物。該術語亦指06、ανρ8、αιΡι、α2|3ι、 α5βι、丨及ο^β4整合素之拮抗劑。該術語亦指ανρ3、 'β5、ανβ6、ανβ8、αιβι、α2ρι、α5βι、及整合素之 任何組合的拮抗劑。 157311.doc -58 - 201208702 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之酪胺酸激酶抑制劑之一些實例 包括N-(三氟曱基苯基）_5_曱基異噁唑_4_曱醯胺、3_[(2,4· 二曱基吡咯-5-基）亞甲基）吲哚啉_2_酮、17_(烯丙胺基）_17_ 去曱氧基格爾德黴素（17-(allylamino)-17-demethoxygeldanamycin) 、4-(3-氣-4-氟苯胺基）_7·甲氧基_6_[3_(4-嗎啉基）丙氧基] 喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基）-6,7_雙（2_曱氧基乙氧基）·4·喹 唑啉胺、ΒΙΒΧ1382、2,3,9，10,ll，12-六氫-10-(羥甲基）_10_ 羥基-9-曱基-9，12-環氧基_lH-二吲哚并[l，2,3-fg:3，，2，，l'_kl] °比略并[3,4-i][l，6]苯并二吖4 -ΐ_酮、SH268、染料木素 (genistein)、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯胺基）-5,6-二曱 基-7H-吡嘻并[2,3-d]嘧啶甲烧續酸酯、4-(3-溴-4-羥基苯 基）胺基-6,7-二甲氧基喹唑啉、4_(4，_羥基苯基）胺基-6 7-二 甲氧基喧唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氣苯基·4-(4-吡 啶基曱基）-1-酞嗪胺及EMD121974 » 與除抗癌化合物以外之化合物的組合亦涵蓋於本發明方 法中。舉例而言，在本發明之一實施例中可與本發明組合 (例如達利珠單抗聯合MK-2206)聯合提供之PPAR-γ促效劑 及PPAR-δ促效劑適用於治療某些惡性病。ρρΑΚ·γ及ppAR_ δ為核過氧化體增殖物活化受體γ&δ。PPAr_y於内皮細胞 上之表現及其涉及血管生成已報導於文獻（參見丄 Cardiovasc. Pharmacol. 1998; 31:909-913 ； J. Biol. Chem. 1999, 274:9116-9121 ； Invest. Ophthalmol Vis. Sci. 2000； 41:2309-23 17)中。PPAR-γ促效劑已展示在活體外抑制對 157311.doc -59- 201208702 VEGF之血管生成反應；曲格列嗣（troglitazone)與順丁稀二 酸羅格列酮（rosiglitazone maleate)抑制小鼠體内視網膜新 血管生成的發展 2001; 1 19:709-717)。 PPAR-γ促效劑及PPAR-γ/α促效劑之實例包括（但不限於）噻 唑啶二酮（thiazolidinedione)(諸如 DRF2725、CS-011、曲格 列酮、羅格列嗣及β比格列嗣（pioglitazone))、非諾貝特 (fenofibrate)、吉非羅齊（gemfibrozil)、氯苯丁酯（clofibrate)、 GW2570 ' SB219994 ' AR-H039242 ' JTT-501 ' MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、 DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、 2-[(5,7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基）氧基]-2-曱基丙酸（揭示於USSN 09/782,856中），及2(1〇-7-(3-(2-氣-4-(4·氟苯氧基）苯氧基）丙氧基）-2-乙基咣烷-2-甲酸（揭示於 USSN 60/235,708及60/244,697中）° 本發明之另一實施例為本發明揭示之包含組合治療性化 合物之組合療法與基因療法一起用於治療癌症的用途。關 於治療癌症之基因策略的概述，參見Hall等人.乂丑ww. Gewei. 61:785-789，1997)及Kufe等人（Cancer Medicine,第 5版，第 876-889頁，BC Decker，Hamilton 2000)。基因療法 可用於傳遞任何腫瘤抑制基因。該等基因之實例包括（但 不限於）可經由重組病毒介導之基因轉移來傳遞的p53(參見 例如美國專利第6,069，134號）、uPA/uPAR拮抗劑 (「Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPAR Antagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth and 157311.doc .60· 201208702

Dissemination in Mice」，Gene Therapy， 1998 年 8 月； 5(8):1105-13)，及干擾素 γ(«/_ 2000; 164.:217- 222)。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之固有多藥抗性（MDR)抑制劑包 括任何MDR抑制劑，尤其與轉運蛋白高表現量有關之 MDR的抑制劑。該等MDR抑制劑包括p-膽蛋白（P-gp)抑制 劑，諸如 LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、 VX853及PSC833(伐司朴達（valspodar))。 在本發明之一實施例中可與本發明組合（例如達利珠單 抗聯合MK-2206)聯合提供之神經激肽-1受體拮抗劑包括例 如以下專利中所揭示者：美國專利第5，162,339號、第 5,232,929號、第 5,242,930號、第 5,373,003號、第 5,387,595 號、第 5,459,270號、第 5,494,926號、第 5,496,833 號、第 5,637,699號、第5,719，147號；歐洲專利公開案第EP 0 360 390號、第 0 394 989號、第 〇 428 434號、第 0 429 366號、 第 0 430 771號、第 0 436 334號、第 0 443 132號、第 〇 482 539號、第 0 498 069號、第 〇 499 313號、第 0 512 901 號、 第 0 512 902號、第 0 514 273號、第 0 514 274號、第 〇 514 275號、第 0 514 276號、第 〇 515 681號、第 0 517 589號、 第 0 520 555號、第 0 522 808號、第 0 528 495號、第 〇 532 456號、第 0 533 280號、第 〇 536 817號、第 0 545 478號、 第 0 558 156號、第 0 577 394號、第 0 585 913號、第 0 590 152號、第 0 599 538號、第 〇 610 793號、第 0 634 402號、 157311.doc -61- 201208702 第 0 686 629號、第 〇 693 489號、第 〇 694 535號、第 0 699 655號、第 0 699 674號、第 〇 7〇7 006號、第 〇 708 101 號、 第 0 709 375號、第 0 709 376號、第 〇 714 891號、第 0 723 959號、第0 733 632號及第〇 776 893號；PCT國際專利公開 案第 WO 90/05525號、第 90/05729號、第 91/09844號、第 91/18899號、第 92/01688號、第 92/06079號、第 92/12151 號、第92/15585號、第 92/17449號、第 92/20661號、第 92/20676號、第 92/21677號、第 92/22569號、第 93/00330 號、第93/00331號、第93/01159號、第 93/01165號、第 93/01169號、第 93/01170號、第 93/06099號、第 93/09116 號、第93/10073號、第 93/14084號、第 93/14113號、第 93/18023號、第 93/19064號、第 93/21155號、第 93/21181 號、第 93/23380 號、第 93/24465 號、第 94/00440 號、第 94/01402號、第 94/02461號、第 94/02595號、第 94/03429 號、第 94/03445 號、第 94/04494 號 '第 94/04496 號、第 94/05625號、第 94/07843號、第 94/08997號、第 94/10165 號、第94/10167號、第94/10168號、第94/10170號、第 94/11368號、第 94/13639號、第 94/13663號、第 94/14767 號、第94/15903號、第94/19320號、第 94/19323號、第 94/20500號、第 94/26735 號、第 94/26740號、第 94/29309 號、第95/02595號、第 95/〇4〇40號、第95/〇4〇42號、第 95/06645號、第 95/07886號、第 95/07908號、第 95/08549 號、第95/11880號、第95/14017號、第 95/15311號、第 95/16679號、第 95/17382號、第 95/18124號、第 95/18129 157311.doc -62 · 201208702 號、第95/19344號、第 95/20575號、第 95/21819號、第 95/22525號、第 95/23798 號、第 95/26338 號、第 95/28418 號、第95/30674號、第 95/30687號、第95/33744號、第 96/05181 號、第 96/05193 號、第 96/05203 號、第 96/06094 號、第96/07649號、第96/10562號、第96/16939號、第 96/18643 號、第 96/20197號、第 96/21661 號、第 96/29304 號、第 96/29317 號、第 96/29326 號、第 96/29328 號、第 96/31214號、第 96/32385 號、第 96/37489號、第 97/01553 號、第 97/01554 號、第 97/03066 號、第 97/08144 號、第 97/14671 號、第 97/17362號、第 97/18206號、第 97/19084 號、第97/19942號及第97/21 702號；及英國專利公開案第2 266 529號、第 2 268 931號、第 2 269 170號、第 2 269 590 號、第 2 271 774號、第 2 292 144號、第 2 293 168號、第 2 293 169號及第2 302 689號。該等化合物之製備充分描述 於上述專利及公開案中，該等專利及公開案以引用之方式 併入本文中。 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合MK-2206)亦可與適用於治療嗜中性白血球減少症之藥劑聯合 提供。此類嗜中性白血球減少症治療劑為例如調節嗜中性 白血球產生及功能之造血生長因子，諸如人類粒細胞群落 刺激因子（G-CSF)。G-CSF之實例包括非格司亭 (filgrastim)。 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合MK-2206)亦可與免疫增強藥物（諸如左旋咪唑、異丙肌苷 157311.doc -63- 201208702 (isoprinosine)及日達仙（Zadaxin))聯合提供。 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合MK-2206)亦可與P450抑制劑聯合提供，該等P450抑制劑包 括：外來生物（xenobiotic)、奎尼丁（quinidine)、赂胺 (tyramine)、酮康唾（ketoconazole)、睪固酮（testosterone)、 奎寧（quinine)、甲0比丙酮（methyrapone)、咖啡驗 (caffeine)、苯乙肼（phenelzine)、小紅莓（doxorubicin)、醋 竹桃黴素（troleandomycin)、環苯紮林（cyclobenzaprine)、 紅黴素（erythromycin)、可卡因（cocaine)、0夫碎茶驗 (furafyline)、西眯替丁（cimetidine)、右甲嗎喃 (dextromethorphan)、利托那韋（ritonavir)、茚地那韋 (indinavir)、安普那韋（amprenavir)、地爾硫卓（diltiazem)、 特非那定（terfenadine)、維拉帕米（verapamil)、皮質醇 (cortisol)、伊曲康0坐（itraconazole)、米貝地爾（mibefradil)、 奈法0坐綱（nefazodone)及奈非那韋（neinnavir)。 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合MK-2206)亦可與Pgp及/或BCRP抑制劑聯合提供，該等Pgp及/ 或BCRP抑制劑包括：環抱素 A(cyclosporin A)、PSC833、 GF120918、十六醇聚氧乙稀酿EL(cremophorEL)、福美抑 制素C(fumitremorgin C)、Kol32、Kol34、易瑞沙（Iressa)、 曱續酸依嗎尼布（Imatnib mesylate)、EKI-785、C11033、 新生黴素（novobiocin)、己稀雌酌"（diethylstilbestro+l)、他莫 昔芬、利舍平（resperpine)、VX-710、特普抑制素A (tryprostatin A)、類黃酮（flavonoid)、利托那韋、沙啥那 157311.doc •64- 201208702 韋（saquinavir)、奈非那韋、奥美拉β坐（omeprazole)、奎尼 丁、維拉帕米、特非那定、酮康唑、硝苯啶（nifidepine)、 FK506、乙胺碘呋酮（amiodarone)、XR9576、茚地那拿、 安普那韋、皮質醇、睪固酮、LY335979、OC144-093、紅 黴素、長春新驗（vincristine)、地高辛（digoxin)及他林洛爾 (talinolol)。 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合MK-2206)亦可與適用於治療或預防包括骨癌之癌症的藥劑（例 如雙膦酸鹽（應瞭解其包括雙膦酸鹽、二膦酸鹽、雙膦酸 及二膦酸））聯合提供。雙膦酸鹽之實例包括（但不限於）： 依替膦酸鹽（etidronate)(Didronel)、帕米膦酸鹽（pamidronate) (Aredia)、阿侖膦酸鹽（alendronate)(Fosamax)、利塞膦酸 鹽（risedronate)(Actonel)、0坐來膦酸鹽（zoledronate)(Zometa)、 伊班鱗酸鹽（ibandronate)(Boniva)、因卡膦酸鹽 (incadronate)或西嗎膦酸鹽（cimadronate)、氣屈膦酸鹽 (clodronate)、EB-1053、米諾膦酸鹽（minodronate)、奈立 膦酸鹽（neridronate)、必利膦酸鹽（piridronate)及替魯膦酸 鹽（tiludronate)，包括其任何及所有醫藥學上可接受之 鹽、衍生物、水合物及混合物。 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合MK-2206)亦可與適用於治療或預防乳癌之藥劑（諸如芳香酶抑 制劑）聯合提供。芳香酶抑制劑之實例包括（但不限於）··安 美達鍵（anastrozole)、來曲0坐（letrozole)及依西美坦 (exemestane) 0 157311.doc -65- 201208702 本發明之組合治療性化合物（例如達利珠單抗聯合ΜΚ-2206)亦可與siRNA或RNAi治療劑聯合提供。 本發明之組合治療性化合物亦可適用於與PARP抑制劑 組合治療或預防癌症。 本發明之組合治療性化合物亦可與以下治療劑組合用於 治療癌症：阿巴瑞克（abarelix)(Plenaxis depot®);阿地介 白素（aldesleukin)(Prokine®);阿地介白素（Proleukin®); 阿來組單抗（Campath®);亞利崔托寧（alitretinoin)(Panretin®) :別嗓吟醇（allopurinol)(Zyloprim®);六甲蜜胺（Hexalen®); 胺填汀（amifostine)(Ethyol®);安美達鍵（Arimidex®);三 氧化二钟（Trisenox®);天冬醯胺酶（Elspar®);阿紮胞苷 (azacitidine)(Vidaza®);貝伐單抗（Avastin®);貝瑟羅ί丁膠 囊（Targretin®);貝瑟羅汀凝膠劑（Targretin®);博萊黴素 (bleomycin)(Blenoxane®);波普單抗（bortezomib)(Velcade®); 靜脈内用白消安（busulfan)(Busulfex®) ; 口服白消安 (Myleran®);二甲睪酮（calusterone)(Methosarb®);卡培他 濱（Xeloda®);卡翻（Paraplatin®);卡莫司汀（carmustine) (BCNU®、BiCNU®);卡莫司汀（Gliadel®);卡莫司汀與聚 苯丙生20(Polifeprosan 20)植入物（Gliadel Wafer®);赛利 克西（Celebrex®);西妥昔單抗（Erbitux®);苯丁酸氣芥 (chlorambucil)(Leukeran®);順翻（Platinol®);克拉曲濱 (cladribine)(Leustatin®、2-CdA®);克羅拉濱（clofarabine) (Clolar®);環填醯胺（cyclophosphamide)(Cytoxan®、 Neosar®);環填酿胺（Cytoxan Injection®);環填醯胺 157311.doc • 66- 201208702 (Cytoxan Tablet®);阿糖胞苦（Cytosar-U®);阿糖胞芽脂 質體（DepoCyt®);達卡巴嗓（dacarbazine)(DTIC-Dome®); 更生黴素（dactinomycin);放線菌素 D(actinomycin D) (Cosmegen®);達依泊汀 a(Darbepoetin alfa)(Aranesp®); 道諾黴素脂質體（DanuoXome®);道諾黴素、柔紅黴素 (daunomycin)(Daunorubicin®);道諾黴素、柔紅黴素 (Cerubidine®);地尼介白素（Denileukin diftitox)(Ontak®); 右雷佐生（Zinecard®);多烯紫杉醇（docetaxel)(Taxotere®); 小紅莓（Adriamycin PFS®);小紅莓（Adriamycin®、 Rubex®);小紅每（Adriamycin PFS Injection®);小紅莓脂 質體（Doxil®);丙駿屈他雄酮（dromostanolone propionate) (dromostanolone®);丙酸屈他雄酮（masterone injection®); 艾利伯特氏 B 溶液（Elliott's B Solution)(Elliott’s B Solution®);表柔比星（epirubicin)(Ellence®);依泊汀 a (Epoetin alfa)(epogen®);埃羅替尼（erlotinib)(Tarceva®); 雌莫司汀（Emcyt®);填酸依託泊苦（Etopophos®);依託泊 苷、VP-16(Vepesid®);依西美坦（Aromasin®);非格司亭 (Neupogen®);氟尿苷（floxuridine)(動脈内）(FUDR®);氟 達拉濱（Fludara®);氟尿0^ 咬（fluorouracil)、5-FU (Adrucil®);氟維斯群（Faslodex®);吉非替尼（gefitinib) (Iressa®);吉西他濱（gemcitabine)(Gemzar®);吉妥單抗奥 口坐米星（gemtuzumab ozogamicin)(Mylotarg®);醋酸戈舍瑞 林（goserelin acetate)(Zoladex Implant®);醋酸戈舍瑞林 (Zoladex®);乙酸組胺瑞林（histrelin acetate)(Histrelin 157311.doc -67- 201208702 implant®);經脈（Hydrea®);替伊莫單抗（Ibritumomab Tiuxetan)(Zevalin®);艾達黴素（Idamycin®);異環填醯胺 (IFEX®);曱續酸伊馬替尼（imatinib mesylate)(Gleevec®); 干擾素a2a(Roferon A®);干擾素 a-2b(Intron A®);伊立替 康（Camptosar®);來那度胺（lenalidomide)(Revlimid®);來 曲0坐（Femara®);曱醢四氫葉酸（leucovorin)(Wellcovorin®、 Leucovorin®);乙酸亮丙瑞林（Leuprolide Acetate)(Eligard®); 左旋 °米 0坐（Ergamisol®);洛莫司江（lomustine)、CCNU (CeeBU®);氮芥（meclorethamine，nitrogen mustard) (Mustargen®);醋酸曱地孕酿I(megestrol acetate)(Megace®); 美法命（melphalan)、L-PAM(Alkeran®);疏基嗓呤 (mereaptopurine)、6-MP(Purinethol®);酼乙續酸鈉 (mesna)(Mesnex®);疏乙續酸納（Mesnex tabs®);甲胺嗓 吟（methotrexate)(Methotrexate®);補骨脂素（methoxsalen) (Uvadex®);絲裂黴素C(mitomycin C)(Mutamycin®);米托 坦（mitotane)(Lysodren®);米托蒽酿（Novantrone®);苯丙 酸諾龍（nandrolone phenpropionate)(Durabolin-50®);奈拉 濱（nelarabine)(Arranon®):諾莫單抗（Nofetumomab) (Verluma®);奥普瑞介白素（Oprelvekin)(Neumega®);奥 賽力鉑（Eloxatin®);太平洋紫杉醇（Paxene®);太平洋紫 杉醇（Taxol®);太平洋紫杉醇蛋白結合粒子（Abraxane®); 帕利夫明（palifermin)(Kepivance®);帕米膦酸鹽（Aredia®); 培加酶（pegademase)(Adagen (Pegademase Bovine)®);培 門冬酶（pegaspargase)(Oncaspar®);聚乙二醇非格司亭 157311.doc -68 - 201208702 (Pegfilgrastim)(Neulasta®);培美曲唾二鈉（Alimta®);喷 司他丁（Nipent®);雙溴丙基0底0秦（pip〇broman)(Vercyte®); 普卡黴素(plicamycin)、光神黴素（mithramycin)(Mithracin®); 口卜吩姆納（porfimer sodium)(Photofrin®);丙卡巴拼 (procarbazine)(Matulane®);奎納克林（quinacrine)(Atabrine®); 拉布立酶（Rasburicase)(Elitek®);利妥昔單抗（Rituxan®); 沙格司亭（sargramostim)(Leukine®);沙格司亭（Prokine®); 索拉非尼（sorafenib)(Nexavar®);鏈脲黴素（streptozocin) (Zanosar®);順丁烯二酸舒尼替尼（sunitinib maleate) (Sutent®);滑石（Sclerosol®);他莫西芬（Nolvadex®);替 莫0坐胺（Temodar®);替尼泊武、VM-26(Vumon®);睪内醋 (testolactone)(Teslac®);硫鳥嗓呤（thioguanine)、6-TG (Thioguanine®) ; °塞替派（thiotepa)(Thioplex®);拓朴替康 (Hycamtin®);托瑞米芬（Fareston®);托西莫單抗 (Bexxar®);托西莫單抗/1-131托西莫單抗（Bexxar®);曲 妥珠單抗（Herceptin®);維甲酸、ATRA(Vesanoid®);尿 嘴咬氮芥（Uracil Mustard)(Uracil Mustard Capsules®);戊 柔比星（Valstar®);長春驗（vinblastine)(Velban®);長春新 驗（Oncovin®);長春瑞濱（vinorelbine)(Navelbine®) ; 0坐來 膦酸鹽（Zometa®)及伏立諾他（vorinostat)(Zolinza®)。 可與本發明組合聯合提供之其他藥劑包括胰島素、胰島 素促泌素、PPAR-γ促效劑、二曱雙脈（metformin)、生長抑 素受體促效劑（諸如奥曲肽）、DPP4抑制劑、磺醯脲、α-葡 糖苷酶抑制劑、鉀鹽、鎂鹽、β-阻斷劑（諸如阿替洛爾 157311.doc •69· 201208702 (atenolol))及内皮素-a(ETa)结抗劑。 因此，本發明之一態樣涵蓋使用組合治療性化合物之本 發明所主張之組合治療方法與選自以下之另一化合物組合 的用途：雌激素受體調節劑、雄激素受體調節劑、類視色 素受體調節劑、細胞毒性/細胞生長抑制劑、抗增生劑、 平基-蛋白質轉移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、 HIV蛋白酶抑制劑、逆轉錄酶抑制劑、血管生成抑制劑、 PPAR-γ促效劑、PPAR-δ促效劑、固有多藥抗性抑制劑、 止吐劑、適用於治療貧血之藥劑、適用於治療嗜中性白血 球減少症之藥劑、免疫增強藥物、細胞增殖及存活信號傳 導抑制劑、雙膦酸鹽、芳香酶抑制劑、siRNA治療劑、γ_ 分泌酶抑制劑、干擾受體酪胺酸激酶（RTK)之藥劑、干擾 細胞週期檢查點之藥劑及上列任何治療劑。 投藥方式及劑量 本發明之方法包含在第一治療程序中投與有需要之患者 第一量之IGF- 1R抑制劑（例如較佳為由達利珠單抗例示之 IGF-1R抗體）及在第二治療程序中投與第二量之Akt抑制 劑。第一治療與第二治療共同構成治療有效量。應瞭解投 與IGF-1R抑制劑與投與Akt抑制劑可互換’因為第一治療 方案可包含Akt抑制劑，接著進行包含IGF_1R抑制劑之第 "一治療方案。 當將本發明組合物投與人類個體時，日劑量通常由開處 方之醫師來確定，其中劑量一般根據個別患者之年齡、體 重及反應以及患者症狀之嚴重度而變化。 157311.doc -70· 201208702 利用本發明之組合治療性組合化合物之給藥方案可根據 多種因素來選擇，該等因素包括類型、物種、年齡、體 重、性別及所治療癌症之類型；所治療癌症之嚴重度（亦 即階段）；投藥途徑；患者之腎功能及肝功能；及所用特 定化合物或其鹽。一般醫師或獸醫可容易地確定且規定藥 物治療疾病（例如預防、抑制（完全或部分）或阻止疾病進 展）所需之有效量。 舉例而言，本發明之組合治療性化合物可每日一次⑴D) 杈與，或分成多個日劑量，諸如每曰兩次（ΒΙ〇)及每日三 次（TID)投與。 一 另外，投藥可連續進行（亦即每日投與）或間歇進行。如 本文所用之術語「間歇」意謂以有規律或不規律之時間間 隔停止及開始。舉例而言’間歇投與本發明之化合物可為 每週投與1至6天’或可意謂以週期形式投與（例如連續2至 8週每日投藥’接著為長達一週不投藥之中止期），或可意 謂隔日投與》 ' 另外’本發明之組合治療性化合物可根據本文所述之任 何時程連續投與幾週，接著進人中止期。舉例而言，本發 明之組合治療性化合物可根據上文所述之任一時程投與2 至8週’接著為-週中止期，或以⑽·5⑼叫之劑量每日 兩次投與’每週投與3至5天。在另一特定實施例中，本發 明之組合治療性化合物之Ακτ抑制劑組分可每曰三次投與 連續兩週，接著中止一週。 本發明化合物之任— 或多種特定劑量及給藥時程亦可適 157311.doc -71- 201208702 用於任一或多種用於組合治療之治療劑（下文稱作「第二 治療劑」）。此外’此後繼治療劑之特定劑量及給藥時程 可進一步變化’且最佳劑量、給藥時程及投藥途徑可基於 所用特定第二治療劑來確定。 當然，本發明化合物之投藥途徑與第二治療劑之投藥途 徑無關。在一實施例中’本發明化合物之投藥為經口投 樂。在另一實施例中’本發明化合物之投藥為靜脈内投 藥。因此’根據此等實施例，本發明之化合物可經口或靜 脈内投與’且第二治療劑可經口、非經腸、腹膜内、靜脈. 内、動脈内、經皮、舌下、肌肉内、經直腸、經頰、鼻 内、經脂質體、經由吸入、經陰道、眼内、經由導管或支 架局部傳遞、皮下、脂肪内、關節内、鞘内腔或以緩慢釋 放劑型投與。 另外，本發明之化合物及第二治療劑可藉由相同投藥方 式投與’亦即兩種藥劑例如均經口、藉由IV投與。然而， 藉由一種投藥方式（例如經口）投與本發明之化合物且藉由 另一投藥方式（例如iv)或上述任何其他投藥方式投與第二 治療劑亦在本發明之範疇内。 投與本發明化合物之第一治療程序可在第二治療程序 (亦即第二治療劑）之前進行，第二治療劑之治療之後進 行，與第二治療劑之治療同時進行，或其組合。舉例而 言，可決定本發明化合物之總治療時段。第二治療劑可在 本發明化合物之治療開始之前或在本發明化合物之治療之 後技與。另外，抗癌治療（例如Akt抑制劑）可在投與本發明 157311.doc -72- 201208702 化合物期間投與，但無需歷經本發明化合物之整個治療時 段。 IGF-1R抑制劑之投藥 劑量及投藥途徑 包含IGF-1R抑制劑（IGF1Ri)(例如抗體及其抗原結合片 段（例如達利珠單抗））及化學治療劑之本發明組合治療劑係 根據已知方法，諸如以快速注射形式或藉由經一定時段連 續輸注靜脈内投與、藉由肌肉内、腹膜内、腦脊髓内、皮 下、關節内、滑膜内、鞘内、經口、局部或吸入途徑投與 人類患者。較佳為靜脈内或皮下投與抗體。三種不同之傳 遞方式預期適用於傳遞本發明之抗體。習知靜脈内傳遞可 能為用於大部分腫瘤之標準傳遞技術。然而，對於一些腫 瘤，諸如由卵巢腫瘤、膽管腫瘤、其他導管之腫瘤及其類 似腫瘤所例示的腹膜腔内之腫瘤，腹膜内投藥經證明有利 於腫瘤處獲得高劑量之抗體且使抗體清除率降至最低。以 類似方式，某些實體腫瘤具有適於區域灌注之血管結構。 區域灌注將允許腫瘤部位處獲得高劑量之抗體且使抗體之 短期清除率降至最低。同樣，IGF_1Ri可以靜脈内（快速注 射或輸注）、腹膜内、皮下或肌肉内形式投與，所有使用 形式均為一般醫藥技術者所熟知。 IGF-1 Ri亦可以儲槽式注射劑或植入式製劑形式投與， 該製劑可以允許活性成分持續釋放之方式加以調配。活性 成分可壓製成小丸粒或小圓柱體且以儲槽式注射劑或植入 物形式皮下或肌肉内植入。植入物可使用惰性物質，諸如 157311.doc •73· 201208702 生物可降解聚合物或合成聚矽氧，例如矽橡膠（Silastic)、 聚石夕氧橡膠或由Dow-Corning Corporation製造之其他聚合 物。 IGF-IRi亦可以脂質體傳遞系統（諸如單層小微脂粒、單 層大微脂粒及多層微脂粒）形式投與。脂質體可由多種磷 脂（諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼）形成。 如同任何基於蛋白質或抗體輸注之治療劑一般，安全性 問題主要關於⑴細胞激素釋放症候群，亦即低血壓、發 熱、震顫、寒戰；（Π)對物質產生免疫原性反應（亦即患者 對抗體治療劑產生人類抗體，或HAHA或HACA反應）；及 (ii〇對表現EGF受體之正常細胞（例如表現 1R之肝細胞）的毒性。使用標準測試及追蹤來監測此等安 全性問題中之每一者。特定而言，在臨床試驗期間時常監 測肝功能以評估對肝臟之損害（若存在）。 為預防或治療疾病，抗體之適當劑量將視如上文所定義 之所治療疾病之類型、疾病之嚴重度及病程、抗體係出於 預防性還是治療性目的而投與、先前療法、患者的臨床病 史及對抗體之反應，以及主治醫師之判斷而定。抗體可一 次性或經一系列治療適當地投與患者。在組合療法方案 中’本文所揭示之組合治療劑係以治療有效或協同量投 與。如本文所用之「治療有效」量為共同投與抗igf_ir抗 體與一或多種其他治療劑或投與本發明組合物使乾向疾病 ^病狀^以減輕或抑制之量。「治療協同」量為抗IGF_1R 抗體〃 4多種其他治療劑協同或顯著減輕或消除與特定 157311.doc -74· 201208702 疾病相關之病狀或症狀所需的量。 以靜脈内或皮下方式，患者接收足以傳遞每天約3至 1500 mg/m2 ’ 例如每天約 3、30、60、90、180、300、 600、900、1200或 1500 mg/m2之量的 IGF-1R抑制劑。該等 量可以多種適合方式投與，例如在一長時段内或一天若干 次投與大體積低濃度之IGF-IRi。該等量可每週（7天時段） 連續投與一或多天、間歇投與一或多天或其組合。或者， 小體積高濃度之IGF-IRi可在短時段内，例如一天一次， 每週（7天時段）一或多天連續投與、間歇投與或其組合。舉 例而言’可投與每天3〇〇 mg/m2之劑量並維持連續5天以達 成每次治療總共1500 mg/m2。在另一給藥方案中，連續天 數亦可為5天’其中治療持續連續2或3週以達成總共3〇〇〇 mg/m2 及 4500 mg/m2總治療。 通常’可製備含有濃度為約1.0 mg/mL至約10 mg/mL， 例如 2.0 mg/mL、3.0 mg/mL、4.0 mg/mL、5.0 mg/mL、6.0 mg/mL、7.0 mg/mL、8.0 mg/mL、9.0 mg/mL及 10 mg/mL· 之IGF-1R抑制劑的靜脈内調配物，且以達成上述劑量之量 投與。在一實例中，可在一天内投與患者足夠體積之靜脈 内調配物以使該天之總劑量為約3〇〇 mg/m2至約15〇〇 mg/m2 ° 較佳根據此項技術中熟知之程序在約5至約12範圍内之 pH值下製備的皮下調配物亦包括如下文所述之適合緩衝劑 及等張劑。其可經調配以分一或多次每曰皮下投藥（例如 每天一次、兩次或三次）傳遞日劑量之IGF-iRi。 157311.doc -75· 201208702 本發明之一廣泛態樣涉及組合投與抗IGF·! R抗體與一或 多種化學治療劑（較佳為Akt抑制劑，更佳為MK-2206)。組 合投藥包括使用各別調配物或單一醫藥調配物共同投藥， 及按任一次序連續投藥，其中較佳存在兩種（或全部）活性 劑同時發揮其生物活性的時段。可根據製造商之說明書或 如由熟練專業人員憑經驗所判定來使用該等化學治療劑之 製劑及給藥時程。用於化學療法之製劑及給藥時程亦描述 於 Chemotherapy Service 編，M· C· Perry，Williams &

Wilkins，Baltimore，Md. (1992)中。可在投與抗體之前或之 後或可與其同時給與化學治療劑或抗癌劑。本發明之治療 組合之臨床給藥可能受如在當今用於臨床之單株抗IGF _ J R 抗體及PI3/Akt路徑抑制劑下所觀測到之皮療不良反應程度 限制》 適合之劑量為醫學專業人員所知，且當然，視特定疾病 病況、所投組合物之特定活性，及進行治療之特定患者而 定。在有些情況下，為達成所需治療量，需要重複投藥， 亦即重複個別投與特定監測或計量之劑量，其中重複個別 投藥’直至達成所需曰劑量或作用為止。關於適合劑量之 其他資訊提供於下文實例中。 視疾病之類型及嚴重度而定，約i 0§/1^至5〇 mg/kg(例 如0.1-20 mg/kg)之抗體為投與患者之初始候選劑量，無論 例如藉由一或多次各別投藥還是藉由連續輸注。典型曰劑 量可能處於約1 n^g/kg至約1〇〇 mg/kg或1〇〇 mg/kga上之範 圍内，視上述因素而定。對於經若干天或較長時間重複投 157311.doc • 76 · 201208702 藥，視情況而定，持續治療，直至出現對疾病症狀之所需 抑制作用為止。然而，其他給藥方案亦可適用。 在一態樣中，本發明之抗體係以處於約5 mg/kg至約15 mg/kg之範圍内的劑量每兩週投與一次、每週投與一次， 或可每兩至三週投與一次。更佳地，該給藥方案與用於治 療埃羅替尼抗性癌症（諸如NSCLC)之化學療法方案組合使 用。在一些態樣中，化學療法方案涉及傳統之高劑量間歇 投藥。在一些其他態樣中，使用較小且較頻繁之劑量在無 定期間斷下投與化學治療劑（「節拍器式化學療法 (metronomic chemotherapy)」）。本發明療法之進展易於由 習知技術及檢定來監測。 在一實施例中，給藥次序包含與Akt抑制劑同時投與達 利珠單抗-每週一次β每週一次5 mg/kg，較佳10-30 mg/kg 及最佳20 mg/kg之劑量連同Akt抑制劑一起投與IGF-1R， 其中IGF-1R抑制劑經由注射投與且Akt抑制劑經口投與。 或者，兩種藥劑可皆經由注射投與。在替代實施例中， MK-2206可經口投與，而抗IGF1R抗體（例如達利珠單抗） 係同時經由注射投與。在其他替代方案中，IGF-1R抗體以 20 mg/kg之劑量每週一次靜脈内投與，而Akt抑制劑可以 60 mg隔日一次投與。在另一替代方案中，IGF-1R抗體以 10或20 mg/kg之劑量每週一次靜脈内投與，而Akt抑制劑 可以200 mg每週一次投與。 達利珠單抗之替代給藥方案如下： (i) 15 mg/kg起始劑量，接著每週一次7.5 mg/kg ; 157311.doc -77- 201208702 (ii) 隔週一次 20 mg/kg ; (iii) 每週一次 20 mg/kg ; (iii) 每週一次或隔週一次1〇 mg/kg; (iv) 每三週一次 30 mg/kg。 為非經腸投與，抗體可調配成溶液、懸浮液、乳液或;東 乾粉末，與醫藥學上可接受之非經腸媒劑聯合或各別地提 供。該等媒劑之實例為水、生理食鹽水、林格氏溶液 (Ringer's solution)、右旋糖溶液及1%至1〇%人血清白蛋 白。亦可使用脂質體及非水性媒劑，諸如不揮發性油。媒 劑或凉·乾粉末可含有維持等張性（例如氯化納、甘露糖醇） 及化學穩定性（例如緩衝劑及防腐劑）的添加劑。藉由已知 或適用技術對調配物進行殺菌。可持續投與組合治療劑， 直至疾病進展。

Akt抑制劑之投藥 劑量及投藥途徑 用於本發明方法中之Akt抑制劑（例如MK-2206)可每曰一 次（QD)投與’或可分成多個日劑量，諸如每日兩次（BID) 及每日三次（TID)。此外，本發明之Akt抑制化合物可以至 多 10,000 mg，例如 2,000 mg、3,000 mg、4,000 mg、6,000 mg、8,000 mg或10,000 mg之總曰劑量投與，該總曰劑量 可以一個曰劑量投與或可如上文所述分成多個曰劑量。 另外，投藥可連續進行（亦即每日投與）或間歇進行。如 本文所用之術語「間歇」意謂以有規律或不規律時間間隔 停止及開始。舉例而言，間歇投與本發明之化合物可為每 157311.doc -78- 201208702 週投與1至6夭，十 、 、 虱可意謂以週期形式投與（例如連續2至8 週每日投樂，接著長達—週不投藥之中止期），或可 隔日投與。 另外’用於本發明方法中之Akt抑制化合物可根據本文 :述，任何時程連續投與幾週，接著進入中止期。舉例而 〇 可根據上文所述之任一時程投與Akt抑制劑2至8週， 接著為週之中止期，或以1〇〇5〇〇呵之治療劑量每日兩 次投與，每週投與3至5天。在另―特^實施例中，本發明 之化合物可每日三次投與連續兩週，接著中止一週。 备則較佳之治療方案包含連同IGF-1R抑制劑一起或與 IGF-1R抑制劑同時以6〇 mg之劑量隔日一次投與抑制 齊1或者，其可以200 mg之劑量每週一次投與。 菱、^此項技術者顯而易知本文所述之各種投藥方式、劑 量及、藥時程僅闡述特定實施例，且不應視作限制本發明 之廣泛範疇。劑量及給藥時程之任何變更、變化及組合包 括於本發明範疇内。 組合投藥 第一治療程序投與IGF- 1R抑制劑（例如達利珠單抗）可在 第二治療程序之前進行，在Akt抑制劑（例如ΜΚ·22〇6)之治 療之後進行，與Akt抑制劑之治療同時進行或其組合。 藉由一種投藥方式（例如IV注射）投與組合治療劑之一組分 (尤其在組合治療劑之一組分為例如抗體之大分子的情況 下）且藉由另一投藥方式（例如經口）投與第二或後繼治療組 分或藥劑亦在本發明之範疇内。 157311.doc -79- 201208702 較佳地，本發明之方法包含投與有需要之患者包含igf_ 1R抑制劑及Akt抑制劑之組合治療劑，其中該Akt抑制劑 (例如MK-2206)較佳以60 mg之劑量隔日一次（q〇d)投與。 或者或另外’ Akt抑制劑可以20〇 mg之劑量每週一次 (QWK)投與。IGF-1R抑制劑或任一 Akt抑制劑可根據任何 劑量及給藥時程來投與以連同抗癌劑之作用一起達成有效 治療癌症之劑量》 醫藥組合物 本發明亦涵蓋一種醫藥組合物，其包含IGF_丨Ri(例如達 利珠單抗）及/或抗癌劑之醫藥學上可接受之鹽。含有活性 組分之醫藥組合物的製備為此項技術中熟知，例如藉由混 合、粒化或成鍵製程來製備。活性治療成分常與醫藥學上 可接受且與活性成分相容之賦形劑混合。為經口投藥，將 活性劑與慣用於達成此目的之添加劑（諸如媒劑、穩定劑 或惰性稀釋劑）混合，且藉由慣用方法轉化成如上文所詳 述之適用於投藥之形式，.諸如鍵劑、包衣旋劑、硬或軟明 膠膠囊、水性溶液、醇溶液或油性溶液及其類似物。 投與患者之組合治療劑或其任一或多種組分化合物的量 低於在患者體内引起毒性之量。在某些實施例中，投與患 者之各化合物的量低於引起患者企漿中化合物濃度等於或 超過化合物毒性含量的量。在本發明之實踐中應投與患者 之組合治療劑或組合治療性化合物之各組分的最佳量視所 用特定化合物及所治療癌症之類型而定。 本文所述且適用於本發明方法中之化合物之適合醫藥學 15731I.doc •80- 201208702 上可接受之鹽為習知之無毒 ,j, m 且了包括與鹼形成之鹽或酸 踏 ^m ^ ，战之现，例如鹼金屬鹽（例如鋰 鹽、納鹽 '鉀鹽等）、鹼土 屬鹽（例如鈣鹽、鎂鹽等）、銨 二：有機驗形成之鹽，例如有機胺鹽(例如三、 °比咬鹽、，甲基対鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環己胺 鹽 n，n 本甲基乙二胺鹽等彳算· #、 寺）4 ,無機酸加成鹽（例如鹽 、虱溴酸鹽、硫酸鹽、磷 研酸鹽等）；有機羧酸或磺酸 加成鹽(例如甲酸鹽、乙酸鹽、4乙酸鹽、順丁稀二酸 鹽、.酒石酸鹽、甲烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽 等）；與鹼性或酸性胺基酸(例如精胺酸、天冬胺酸、麩胺 酸等）形成之鹽及其類似鹽。 本發明亦涵蓋包含工G F _ i R i及/或抗癌劑之水合物的醫藥 組合物。術語「水合物」包括（但不限於）半水合物、單水 合物、一水合物、三水合物及其類似物。 另外，本發明亦涵蓋包含達利珠單抗或任何其他igf_ir 抑制劑之任何固體或液體物質形式的醫藥組合物。舉例而 言，IGF-iRi可呈結晶形式、非晶形形式且具有任何粒 徑。IGF-iRi粒子可經微米尺寸化’或可為聚結物、微粒 狀顆粒、粉末、油狀物、油性懸浮液或固體或液體物質形 式之任何其他形式。 對於經口投藥’醫藥組合物可為液體或固體。適合之固 體口服調配物包括錠劑、膠囊、丸劑、顆粒、小丸粒及其 類似物。適合之液體口服調配物包括溶液、懸浮液、八 刀煎· 液、乳液、油劑及其類似物。 157311.doc • 81 - 201208702 任何常用作載劑或稀釋劑之惰性賦形劑均可用於本發明 之調配物中，諸如膠、澱粉、糖、纖維素材料、丙烯酸酯 或其混合物。組合物可進一步包含崩解劑及潤滑劑，且另 外可包含一或多種選自以下之添加劑：黏合劑、緩衝劑、 蛋白酶抑制劑、界面活性劑、增溶劑、增塑劑、乳化劑、 穩定劑、黏度增強劑、甜味劑、成膜劑或其任何組合。此 外，本發明之組合物可呈控制釋放或立即釋放調配物之形 式。 IGF-1R抑制劑可作為活性成分與針對預期投藥形式適當 選擇的適合之醫藥稀釋劑、賦形劑或載劑(本文統稱為 「載劑」&質或「醫藥學上可接受之載劑」）混合… 如本文所用之「醫藥學上可接受之載劑」意欲㈣㈣# 投與相容之任何及所有溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑 及抗真ϋ劑、等張劑及吸收延遲劑及其類似物。 適。之載劑描述於雷明頓醫藥科學(Rem_〇

PharmaCeUtlCal Sciences)之最新版本中，此書為該領域 之標準參考課本，其係以引用之方式併人本文中。 對於液體調配物而言’醫藥學上可接受之载劑 丙二醇、聚乙二醇及可、·主=油。非水性溶劑之實例 进…紅 /主射有機醋(諸如油酸乙醋)。水, :劑包括水、醇/水性溶液、乳液或懸浮液，包括生理 鹽水及經緩衝之介質。油之實例為石括:: 或合成來源之油，例如 動物油、植物、; 油、向曰蔡油及魚肝油。二大豆油、礦物油、㈣ 157311.doc •82· 201208702 分：無菌稀釋劑，諸如注射用水、生理食鹽水溶液、不摧 發性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶劑 菌劑，諸如苯甲醇或斜@ I # ' 飞對羥基本F酸甲酯；抗氧化劑， 抗壞血酸或亞硫酸氫納；螯合劑，諸如乙二胺四乙酸 (EDTA) ’緩衝劑，諸如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽；以 及張力調即劑，諸如.裔仆々知斗,，,_ 如鼠化鈉或右旋糖。pH值可用酸 (諸如鹽酸或氫氧化鈉）調節。 亦可使用脂質體及非水性媒劑（諸如不揮發性油）。用於 醫藥活性物質之該等介質及試劑的使用為此項技術中熟 知。除非任何習知介質或試劑與活性化合物不相容，否則 預期其用於組合物中。亦可在组合物中併人輔助性活性化 固體載劑/稀釋劑包括（但不限於）膠、澱粉（例如玉米殿 粉、預膠凝化澱粉）、糖（例如乳糖、甘露糖醇、蔗糖、'右λ 旋糖）、纖維素材料（例如微晶纖維素）、丙烯酸酯（例如聚 甲基丙稀酸醋）、碳酸釣、氧化鎂、滑石或其混合物。 另外，組合物可進一步包含黏合劑（例如阿拉伯勝、玉 米殿粉、明膠、卡波姆（carb〇mer)、乙基纖維素、瓜爾 膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚維酮）' 崩解 劑（例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、褐藻酸、二氧化矽、交 聯羧曱纖維素鈉、交聯聚維酮、瓜爾膠、羥基乙酸澱粉 鈉、澱粉羥基乙酸鈉）、各種pH值及離子強度之緩衝劑（例 如tris-HCl、乙酸鹽、磷酸鹽）、添加劑（諸如白蛋白或明 膠，用以防止表面吸收）、清潔劑（例如吐溫（Tween)2〇、吐 157311.doc •83· 201208702 概80、普洛尼克（piur〇nic)F68、膽酸鹽）、蛋白酶抑制劑、 界面/舌！·生劑（例如十二烷基硫酸鈉）、滲透增強劑增溶劑 (例如甘油、聚乙二醇）、滑動劑（例如膠態二氧化矽）、抗 氧化劑（例如抗壞血酸、偏亞硫酸氫鈉、丁基化羥基甲氧 苯）、穩定劑（例如經丙基纖維素、經丙基甲基纖維素）、黏 度增強劑（例如卡波m氧切、乙基纖維素、瓜 爾膠）、甜味劑（例如蔗糖、阿斯巴甜糖、檸檬酸）、調味劑 (例如胡椒薄荷、水楊酸甲酯或橙味調味劑)、防腐劑(例如 硫柳汞、苯曱醇、對羥基苯曱酸酯）、潤滑劑（例如硬脂 i硬知酸鎂、聚乙二醇、十二院基硫酸鈉）、助流劑（例 如膠態二氧化矽）、增塑劑（例如鄰苯二甲酸二乙酯、檸檬 酸三乙酯）、乳化劑（例如卡波姆、羥丙基纖維素、十二烷 基硫酸鈉）、聚合物包衣（例如泊洛沙姆（pol〇xamer)或保麗 視明（poloxamine))、包衣及成膜劑（例如乙基纖維素 '丙烯 酸醋、聚甲基丙烯酸酯）及/或佐劑。 在一實施例中，用保護化合物不自身體快速消除之載劑 來製備活性化合物，諸如控制釋放調配物，包括植入物及 微囊封傳遞系統。可使用生物可降解、生物相容性聚合 物，諸如乙烯·乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋 白、聚原酸酯及聚乳酸。製備該等調配物之方法為熟習、此 項技術者顯而易知。該等物質亦可自Alza corp〇rati〇n及 Nova Pharmaceuticals，Inc購得。脂質體懸浮液（包括以針 對病毒抗原之單株抗體乾向受感染細胞的脂質體）亦可用 作醫藥學上可接受之載劑。此等物質可根據熟習此項技術 I57311.doc -84- 201208702 者已知之方法（例如如美國專利第4,522,81 1號所述之方法） 來製備。 為投藥容易及劑量均一，尤其宜將口服組合物調配成單 位劑型。本文所用之單位劑型係指適合作為單一劑量用於 所治療個體的物理個別單元；各單元含有經計算以產生所 需治療作用之預定量的活性化合物聯合所需醫藥載劑。本 發明之單位劑型的規格由以下規定且直接視以下而定：活 性化合物之獨特特徵及欲達成之特定治療作用；及為治療 個體而混配此類活性化合物之技術中的固有限制。 包含本發明之治療組合或該組合之任一或多種個別組分 的醫藥組合物可呈滅菌可注射水性或油性懸浮液形式用於 肌肉内及皮下投藥。此懸浮液可根據已知技術使用上文已 提及之適合分散劑或濕潤劑及懸浮劑調配。滅菌可注射製 劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中的滅菌可 注射溶液或懸浮液，例如於丨，3_丁二醇中之溶液。另外， 滅菌不揮發性油習用作溶劑或懸浮介質。為此目的，可使 用任何溫和之不揮發性油，包括合成單酸甘油g旨或二酸甘 油醋。另外’在製備可注射劑中可使用脂肪酸，諸如油 酸。包含本發明之治療組合或該組合之任—或多種個別組 分的醫藥組合物亦可呈水包油乳液形式。油相可為植物油 (例如橄欖油或花生油）或礦物油（例如液體石蠟卜或其混 合物。適合之乳化劑可為天然存在之鱗脂(例如大豆;;鱗 脂）及來源於脂肪酸及己醣醇肝之醋或偏醋 _叫(例域水山_料油_以料偏自旨與環氧.乙 157311.d〇c -85- 201208702 烷之縮。產物(例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)。乳 液亦可含有甜味劑、調味劑、防腐劑及抗氧化劑。 可主射溶液或微乳液可藉由局部快速注射引入患者血流 内。或者’宜以維持本發明化合物之值定循環濃度的方式 投與該溶液或微乳液。騎持該怪定濃度，彳利用連續靜 脈内傳遞裝置。此類裝置之一個實例為Deltec CADD_ plus™ 5400型靜脈内泵。 對於IV投藥，可使用葡糖經酸、L_乳酸、乙酸、檸檬酸 或任何在靜脈内投藥可接受之PH範圍内具有適當緩衝能力 的醫藥學上可接受之酸/共軛鹼作為緩衝劑。亦可使用PH 已用酸或鹼（例如鹽酸或氫氧化鈉）調節至所需範圍内的氣 化鈉溶液。通常，用於靜脈内調配物2PH範圍可於約5至 約12之範圍内。用於包含iGF_1Ri(其中IGJMRi具有異羥肟 酸部分）之靜脈内調配物的較佳pH範圍可為約9至約12。 較佳根據此項技術中熟知之程序在約5至約丨2範圍内之 pH值下製備的皮下調配物亦包括適合之緩衝劑及等張劑。 其可經調配，以一或多次每日皮下投藥傳遞日劑量之活性 劑。視所投IGF-1 Ri之溶解度而定，調配物之適當緩衝劑 及pH值可容易地由一般技術者來選擇。在皮下調配物中亦 可使用pH值已用酸或鹼（例如鹽酸或氫氧化鈉）調節至所需 範圍内的氯化鈉溶液。通常，用於皮下調配物之pH值範圍 可處於約5至約12之範圍内。用於含有具異經躬酸部分之 IGF-IRi之皮下調配物的較佳pH值範圍可為約9至約12。 包含本發明之治療組合（達利珠單抗+MK-2206)或該組合 157311.doc • 86 · 201208702 之任一或多種個別組分的醫藥組合物亦可以检劑形式投與 以經直腸投與藥物。此等組合物可藉由將藥物與適合之無 刺激性賦形劑混合來製備，該賦形劑在常溫下為固體，但 在直腸溫度下為液體，因此將在直腸中熔融以釋放藥物。 該等物質包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子 量之聚乙二醇與聚乙二醇之脂肪酸酯的混合物。 用於本發明之所建議之組合治療令的組合治療性化合物 之任一或多種組分可以鼻内形式經由局部使用適合之鼻内 媒劑及傳遞裝置，或經由經皮途徑使用一般技術者所熟知 之經皮皮膚貼片形式投與。為以經皮傳遞系統形式投藥， 劑量投與在整個給藥方案期間當然應為連續而非間歇的。 亦可以使用諸如可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分 子1之聚乙二醇與聚乙二醇之脂肪酸酯的混合物之基質的 栓劑形式傳遞本發明之組合治療性化合物。 本發明中包括Akt抑制劑（尤其Akt路徑小分子抑制劑， 包括MK-2206)之游離形式以及其醫藥學上可接受之鹽及立 體異構體。術语「游離形式」係指呈非鹽形式的胺化合 物。所涵蓋之醫藥學上可接受之鹽不僅包括對於本文所述 之特定化合物（MK-2206)所例示之分離鹽，且亦包括此化 合物（MK-2206)及其他Akt路徑小分子抑制劑之游離形式的 全部典型醫藥學上可接受之鹽。MK_22〇62特定鹽化合物 之游離形式例如可使用此項技術中已知之技術分離。參見 例如第1 1/999234號及美國專利第7,576,2〇9號（，2〇9專利）， 其尤其描述式A化合物及產生其游離形式之方法。 157311.doc -87 - 201208702 適用於實踐本發明方法之本發明化合物之醫藥學上可接 觉之鹽以及化合物A之醫藥學上可接受之鹽亦揭示於，2〇9 專利中。因此，MK-2206之醫藥學上可接受之鹽包括如藉 由使鹼性本發明化合物與無機酸或有機酸反應而形成之化 合物之習知無毒鹽。參見’209專利。當適用於實踐本發明 方法之特定化合物（例如MK-22-6)呈酸性時，適合之「醫 藥學上可接受之鹽」係指由醫藥學上可接受之無毒鹼（包 括無機鹼及有機鹼）製備之鹽。源自無機驗之鹽包括銘 鹽、錄鹽、飼鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、链鹽、鎂鹽、猛 鹽、亞錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽及其類似鹽。尤其較佳者 為銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽及鈉鹽。源自醫藥學上可接受 之有機無毒鹼之鹽包括以下之鹽：一級胺、二級胺及三級 胺、包括天然存在之經取代胺在内之經取代胺、環胺及驗 性離子交換樹脂’諸如精胺酸、甜菜驗、咖啡驗、膽驗、 Ν，>Γ-二苯曱基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2_二甲 胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、Ν-乙基嗎啉、Ν-乙基哌咬、 還原葡糖胺、葡糖胺、組胺酸、海卓胺、異丙胺、離胺 酸、甲基還原葡糖胺、嗎琳、娘嗓、略咬、多元胺樹脂、 普魯卡因（procaine)、嘌吟、可可豆驗、三乙胺、三甲 胺、三丙胺、緩血酸胺及其類似物。 上文所述之醫藥學上可接受之鹽及其他典型醫藥學上可 接受之鹽的製備由Berg等人，「Pharmaceutical Salts,」 j, 1977:66:1-19更充分描述。

Akt抑制劑（例如MK-2206)之可能之内鹽或兩性離子亦涵 157311.doc -88 - 201208702 蓋於本發明内，因為在生理條 條件下化合物中之去質子化酸 性部分（諸如羧基）可為陰離子，且 且此電子電荷可能接著針 對質子化或烧基化之驗性部分「咕& 赋丨王口丨刀（諸如四級氮原子）之陽離子 電荷被内部平衡掉。 咖-帅制劑及Akt抑制劑可調配成同一調配物供同時 投藥用’或其可處於兩個各別劑型中，該等劑型可如上文 所述同時或依序投與。 醫藥組合物可連同投藥說明書一起包括於容器、包裝或 分配器中。 儘管可在活體外實踐本發明之方法，但預期選擇性誘導 贅生性細胞出現細胞死亡、終末分化、細胞生長停滞及/ 或細胞凋亡之方法的較佳實施例包含在活體内接觸細胞， 亦即向需要治療之帶有贅生性細胞或腫瘤細胞之個體投與 化合物。 在隨後實驗細節部分中之實例中說明本發明。闡述此部 分以幫助理解本發明，但不意欲且不應理解為其以任何方 式限制如隨後申請專利範圍中所闡述之本發明。 實例 RTK/PI3K/AKT信號傳導在多種癌症類型中促進細胞增 殖及細胞存活。抑制此路徑為一種有效之癌症療法。已證 實諸如PI3K/AKT之信號傳導路徑具有調節信號傳導強度 之反饋迴路。本發明證實存在回應於以MK-2206抑制AKT 之新穎負反饋迴路。在活體外及活體内之多種癌細胞株 中，多種RTK回應於AKT之抑制而活化。AKT介導之負反 157311,d〇c -89- 201208702 饋似乎在功能上起重要作用。在活體外與活體内，用igf-1R抑制劑（例如達利珠單抗）阻斷此反饋迴路實質上會增強 AKT抑制劑之功效。因此，AKT抑制劑（MK-2206)與RTK-抑制劑組合可為利用此反饋迴路作為對AKT抑制之抗性來 源的癌症提供益處。 基本原理 AKT抑制已展示在活體外與活體内在細胞增殖及/或存 活方面起重要作用。立體異位AKT抑制劑（MK-2206)有效 抑制AKT激酶活性。在活體外及活體内對廣泛範圍之癌細 胞株進行處理已證明單一療法有效。試圖進一步增強MK_ 2206功效，將其與IGF-1R抗體達利珠單抗組合。在此研究 中，本發明者報導如下驚人發現：MK-2206處理會引起包 括IGF-1R在内之多種RTK上調。此上調看似在決定功效方 面起功能作用，因為IGF-1R抑制劑（例如達利珠單抗）與 Akt抑制劑（例如MK-2206)組合會增強活體外及活體内功 效0

Akt抑制會引起多種RTK之鱗酸化上調 在研究由以MK-2206抑制AKT所介導之信號傳導效應的 過程中，觀測到IGF-1R酪胺酸激酶上調。為更詳細地研究 此現象，對結腸直腸癌細胞株HT·29滴定AKT抑制劑MK-2206。如圖1A所示’ AKT之墙酸化以劑量依賴性方式減 少。意外地，IGF-1R含量以劑量依賴性方式增加。為確定 IGF-1R之總含量上調是否亦對應於如由受體填酸化所確定 之活性增強’使用構酸化RTK陣列。如圖所示’ MK- 157311.doc -90- 201208702 2206處理引起IGF-1R之磷酸化增強。有趣的是，亦觀測到 IR及cMET之磷酸化。此等結果共同表明以MK-2206抑制 AKT會引起IGF-1R之總含量增加以及IGF-1R、IR及cMET 之磷酸化增強。 為研究上述RTK上調是否存在於其他細胞株/癌症類型 中，用MK-2206處理來自不同癌症類型（結腸癌、乳癌、肺 癌）之細胞株，接著使用磷酸化RTK陣列評估RTK之磷酸 化。如圖2所示，MK-2206處理引起多種癌細胞株中之多 種RTK之磷酸化增強。RTK(即IGF-1R、IR、cMET、 Her2、Her3及EphA2)之磷酸化展示以細胞類型依賴性方式 增強。此等實驗亦揭示RTK活性（亦即Her2)可能降低。此 等結果共同表明多種RTK之活性以細胞類型依賴性方式受 AKT抑制影響。 共同抑制Akt與1GF-1R比個別處理更有效 自上述結果推測，在抑制AKT後IGF-1R活性的增強會降 低MK-2206之功效。此外，表明與抑制AKT同時抑制IGF-1R可能為有益的。為測試此，將兩種抑制劑單獨或以組合 形式置於細胞上。為評估此組合對IGF-1R活性之影響，再 次使用磷酸化RTK陣列。結果展示MK-0646與MK-2206共 同處理可消除IGF-1R活性上調（圖3A及C)。意外地，MK-0646處理亦降低活性cMET及胰島素受體之量。此等資料 表明MK-0646可藉由降低活性在AKT抑制後得到增強之其 他RTK之活性而具有額外有益作用。 為研究MK-2206/MK-0646組合是否在功能上有益於抑制 157311.doc • 91- 201208702 細胞生長’在軟壤脂群落形成檢定中評估該組合β如圖 3(Β及D)所示’兩種抑制劑之組合相較於相同劑量之單個 抑制劑而言顯著減少群落形成。此等資料共同指示在活體 外ΜΚ-0646與ΜΚ-2206組合會阻斷ΜΚ-2206介導之IGF-1R 活性上調且提供額外的功效。 對西妥昔單抗難治型CRC模型進行活體内功效評估 本文描述使用西妥昔單抗難治型KRAS突變CRC異種移 植模型（SKC01)證明MK-0646及MK-2206組合之活體内功 效的資料。用MK-0646(每週一次並維持4週）、MK-2206(每週3次並維持4週）或組合處理SKCOl腫瘤負載小鼠 (圖4)。相較於媒劑處理之對照組，MK-0646(IGF-1R抑制 劑：達利珠單抗）及MK-2206(Akt抑制劑）單一藥劑處理對 SKC01異種移植腫瘤產生顯著之生長抑制作用。經單一藥 劑處理之腫瘤保持穩定在500至700 mm3腫瘤尺寸之範圍 内，與處理開始時之尺寸相當。以MK-0646及MK-2206組 合處理相較於單一藥劑處理可顯著增強生長抑制作用 (P<0.05)，引起腫瘤生長消退（約20%)«· 在西妥昔單抗難治型SW837模型中’ MK-0646及MK-2206單一 藥劑處 理分別 產生約 10% 及約 30%腫瘤生 長抑制 作用（圖5)。然而，相較於媒劑處理組’ MK-0646/MK-2206組合產生約60%之統計顯著性腫瘤生長抑制作用 (p=0.002)。在此模型中，相較於西妥昔單抗及單一藥劑處 理，該組合亦顯示統計顯著性TGI(均為p<〇.〇2)。MK-0646/ΜΚ·2206組合亦在最具侵襲性之一種CRC模型HT29 157311.doc •92- 201208702 中展示功效（圖5)。在此模型中，組合在與西妥昔單抗相比 時顯示顯著之TGI(p<〇.〇5)。所觀測到之組合益處與MK-0646及MK-22〇6單一藥劑活性無顯著不同。 與活體外研究一致，對MK-2206處理後PI3K及IGF-1R信 號傳導組分之分析揭示如由IGF-1R磷酸化所量測之IGF-1R 信號傳導反饋活化（圖6)。MK-0646與MK-2206組合處理會 阻斷此反饋活化且增強如由4-ΕΒΡ1(—種調節蛋白質轉譯 之mTOR/PI3K信號傳導之關鍵下游標靶）之磷酸化所量測 之PI3K路徑抑制作用。由組合增強之PI3K靶向作用亦因對 AKT調節之PRAS40(—種mTOR活性之調節因子）磷酸化的 更深抑制作用而明顯。此等結果展示以MK-0646及MK-2206(AKTi)組合處理可增強PI3K路徑抑制作用，有可能增 強抗腫瘤活性。此等研究表明MK-0646與MK-2206組合可 用於治療可觀測到此由MK-2206引起之IGF-1R反饋活化之 多種腫瘤。 方法 細胞株及培養條件 所有CRC及NSCLC細胞株皆獲自ATCC且根據ATCC之說 明書在37°C下維持於補充有青黴素-鏈黴素（pen-strep) (Invitrogen)之含有10%胎牛血清FBS(Hyclone)之培養基 (DMEM 或 RPMI ; I.nvitrogen Inc)中。 固著非依賴性生長檢定

在96孔玻璃底培養板（MatriCal)中進行軟瓊脂檢定"將 細胞以每孔3,000至9,000個細胞之濃度於補充有14% FBS 157311.doc •93· 201208702 及 0.3%(w/v)SeaPlaque壤脂糖（Lonza Rockland, Inc)之 100 μΐ RPMI 1640(Invitrogen)中接種於由補充有0.8%璦脂糠之 相同培養基組成之底層頂上。在瓊脂糖凝固後添加於補充 之100 μΐ培養基中之化合物。培育細胞7至14天，之後用 LavaCell(Active Motif)染色隔夜。使用13〇〇>^6顶雷射掃描 細胞儀定量群落。在軟瓊脂群落形成檢定中評估MK-0646 單獨或與護理標準藥劑組合抑制固著非依賴性生長之能 力。 西方墨點分析 ' 藉由移除培養基，用PBS沖洗一次且在NP-40緩衝液（1% NP-40、20 MM Tris-HCL(pH 8.0)、137 mM NaC卜 10%甘 油、2 mM EDTA、迷你完全蛋白酶抑制劑（Mini Complete protease inhibitor)、HALT構酸酶抑制劑混合液）中溶解， 來產生培養於6孔板中之細胞（約30萬個）之總蛋白溶胞物。 用所示之完全或磷酸化特異性抗體，繼而用二次抗體（Cell Signaling Technology, CST)對樣本進行西方墨點分析，接 著與SuperSignal化學發光受質（Pierce)—起培育。接著將 墨點暴露於Kodak Biomax光膠片。針對ERK、p-ERK (Thr202/Tyr204)、AKT及 p-AKT(Ser473)、IGF1RP、S6K 及P-S6K(T389)、IRS1及P-IRS1(S302)以及肌動蛋白之抗體 係獲自CST。完全IGF1R抗體係獲自Santa Cruz且GAPDH 係獲自Chemicon。 RTK陣列 在10 cm板中培養約2百萬個細胞且自近匯合（sub- 157311.doc •94· 201208702 confluent)培養物製備蛋白質溶胞物。如手冊中所詳述， 將500 pg蛋白質溶跑物與rtk陣列（R&D bioscience ;目錄 號：ARY〇〇i)—起埒育且顯影。用結合HRI^p_Tyr抗體探 測陣列’接著與Super_Signal化學發光受質（Pierce)一起培 育’接著將墨點暴露於Kodak Biomax光膠片》 異楂移植±長評估 將人類SKC01及SW837細胞（5><106)及町29(3乂106)於基 質膠（目錄號.356231，BD Biosciences; 1:1 v/v)中之懸浮 液分別皮下注射於4至6週大SCID無毛遠親雜交（SHO)小 鼠、NOD SCID小鼠或 CD-I nu/nu(Jackson Laboratories)小 鼠之右側腹部。當腫瘤達到約300 mm3之尺寸（長度X寬度X 寬度x〇.5)時，將小鼠隨機化分入處理組中。用MK-0646媒 劑（20 mM L-組胺酸、150 mM NaC卜 0.5°/。PS80，pH值=6) 每週一次對小鼠（n==4-8/組）進行腹膜内給藥3週（qwk><3)且 用MK-2206媒劑（3 0°/。Captisol)每週三次對小鼠進行經口給 藥3週。其餘小鼠用MK-0646每週一次腹膜内給藥（2〇 mg/kg)，或用MK-2206每週三次經口給藥（140 mg/kg),或 用MK-0646/MK-2206組合使用單一劑量給藥，或用西妥昔 單抗每週兩次腹膜内給藥（30 mg/kg)。在研究期間每週2次 及在終止時對動物進行稱重且藉由測徑規量測來測定腫瘤 體積。在終止時量測並記錄腫瘤重量。第28天，藉由c〇2 窒息處死動物。在最終MK-0646給藥後24小時且在最終 MK-2206給藥及組合給藥後6小時處死小鼠。處死時，收 集腫瘤塊用於西方墨點分析（迅速冷凍於液氮中）及免疫組 157311.doc 95· 201208702 織化學（10%中性緩衝福馬林（formalin))。 免疫組織化學： , 用完全IGF1R 抗體（Ventana Medical Systems)、裂解之卡 斯蛋白酶3抗體（Cell Signaling Technologies)及填酸化組蛋 白3抗體（Millipore Inc.)分析石蠟包埋之腫瘤切片。在標準 方案條件下在 Discovery XT(Ventana Medical Systems)上使 用ChromoMap套組進行自動染色。使用具有2〇x物鏡之cai Zeiss(Jena，Germany)影像儀Z1平場複消色差透鏡（pian_ Apochromu^得影像。用 Carl zeiss AxioCam HRc相機獲 取影像且所用影像獲取軟體為Carl Zeiss Axio Vision Rel 4.6。使用定性染色指數（信號強度χ染色面積）定量 IGF1R。使用Gentix ari〇le系統軟體定量裂解之卡斯蛋白酶 3及磷酸化組蛋白3染色。 本發明之範疇不受本文所述之特定實施例限制。實際 上，本發明之範疇包括本文特定闡述之實施例及本文未特 定闡述之其他實施例；本文特定闡述之實施例未必意欲為 對本發明之各種修改為熟習此項 易知。該等修改意欲屬於申請專 詳盡的。除本文所述外，對本 技術者自上述描述所顯而易知 利範圍之範鳴内。 在本申請案通篇中引用專利 、專利申請案，公開案、產

【圖式簡單說明】 用之方 而上調β 1A)用遞增劑 圖1A及B詳述RTk伴隨於Akt抑制 157311.doc -96· 201208702 量之ΜΚ-2206(0·041至1.11 μηι)處理HT-29細胞且針對磷酸 化及總Akt及總IGF1R之含量進行西方墨點分析^ 1Β)用1 μΜ MK-2206處理HT-29細胞18小時，接著使用RTK陣列評 估RTK磷酸化狀態。1表示磷酸化IGF-1R，2表示磷酸化 IR，且3表示磷酸化cMET。所有磷酸化RTK均以兩個重複 斑點量測。 圖2A-C表明在多種癌症類型中抑制AKT會引起多種RTK 上調。用 MK-2206(分別為 370 nM、370 nM、1 μΜ)處理 2A)SKC01(CRC)、2B)HCC70(乳癌）及 2C)H1793(NSCLC) 細胞18小時，接著使用RTK陣列評估RTK磷酸化狀態。1 為磷酸化IGF-1R，2為磷酸化cMET，3為磷酸化Her2，4為 磷酸化Her3，5為磷酸化EphA2，6為磷酸化IR。所有磷酸 化RTK均以兩個重複斑點量測。 圖3A-D詳述活體外MK-0646(達利珠單抗）抑制MK-2206 介導之填酸化RTK增加的能力及其在組合中之功效。圖A 及C :用 123 nM MK-2206、20.95 pg/ml MK-0646或組合處 理HT-29及SW-837細胞18小時，接著使用RTK陣列評估 RTK磷酸化狀態。1為磷酸化IGF-1R，2為磷酸化IR，3為 磷酸化cMET。所有磷酸化RTK均以兩個重複斑點量測。 圖B及D : HT-29及SW-837細胞在遞增量之MK-2206、固定 劑量之MK-0646或組合存在下在軟瓊脂中生長且對群落面 積評分《數據展示為相對於經媒劑處理之細胞的％抑制。 圖 4展示 MK-0646與 MK-2206之組合對 SKCOl(KRASmut) 腫瘤生長之抑制作用。繪製相對腫瘤體積（n=4/組）相對於 157311.doc •97- 201208702 治療開始後之持續時間（天）的曲線。誤差線表示平均值之 標準誤差。相較於經媒劑處理之動物，MK-0646及MK-2206單一藥劑治療可顯著抑制腫瘤生長（P<〇.01 ;雙程 ANOVA)。根據數據，MK-0646與MK-2206之組合相較於 單一藥劑治療（P<0.05)或媒劑對照組（P<0.001)而言可顯著 抑制S K C Ο · 1腫瘤生長。 圖5總結關於對照、MK-0646、MK-2206及MK-0646與 MK-2206之組合（MK0646/MK-2206)的治療方案在兩種 KRASmut及一種BRAFmut結腸直腸癌異種移植模型SKCO1 (KRASG12V)、SW837(KRASG12C)及 HT29(BRAFV600E) 中的功效。MK-0646/MK-2206組合在所測試之三種CRC模 型中之一者中引起腫瘤消退。然而，MK-0646/MK-2206組 合在所有三種KRAS/BRAF突變型CRC異種移植模型中相 較於護理標準（西妥昔單抗）可產生顯著的腫瘤生長抑制作 用。條形圖表示相對於適當對照組校正之平均腫瘤體積百 分比。誤差線表示SEM。所有數據均表示在22至28天治療 時段結束時之最終腫瘤體積。比較MK-0646/MK-2206組合 組與西妥昔單抗組或單一藥劑組，展示統計顯著性差異。 使用史都登氏t檢驗（Student's t-test)比較。 圖6A-C詳述在MK-0646與MK-2206治療後IGF-1R信號傳 導路徑之劇烈變化。在MK-0646單次給藥後24小時或在 MK-2206治療後6小時採集樣品。A)及B):如由IHC所評估 之總IGF-1R蛋白質表現。圖A表示用媒劑或MK-2206處理 之腫瘤内IGF-1R表現量之一實例。圖B展示在用MK-0646 157311.doc -98- 201208702 或MK-0646/MK-2206組合處理之腫瘤内所觀測到之一代表 性視野。C)使用西方墨點分析，以所指示之總抗體或磷酸 化特異性抗體探測來評估腫瘤樣品之IGF-1R路徑活性。 157311.doc •99- 201208702 序列表 <110>美商默沙東公司 <120>包含IGF-1R抑制劑及Akt抑制劑之癌症組合療法 <130> NRL-ONC-00043 <140〉 100126660 <141> 2011-07-27 <150> 61/368,374 <151> 2010-07-28 <160> 8 <170> Patentln version 3.5 <210> 1 <211> 16 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223> CDR <400> 1

Arg Ser Ser Gin Scr lie Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gin 1 5 10 15 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223> CDR <400> 2

Lys Val Ser Asn Arg Leu Tyr <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223> CDR <400> 3

Phe Gin Gly Ser His Val Pro Trp Thr <210> 4 <211> 6 <212>. PRT <213> 人工序列 <220> <223> CDR <400> 4 Gly Gly Tyr Leu Trp Asn <210> 5 <211> 16 <212> PRT <213>人工序列 157311-序列表.doc 201208702 <220> <223> CDR <400> 5 Tyr lie Ser Tyr

Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu Lys Asp 5 10 15 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223> CDR <400> 6

Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr <210> 7 <211> 219 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人類化抗體免疫球蛋白鏈 <400> 7

Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser lie Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gin Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Leu Tyr Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly 85 90 95

Ser His Va] Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Va] G]u lie Lys 100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 . 120 125

Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin 145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 -2- 157311·序列表.doc 201208702

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr G!u 180 . 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 8 <211> 447 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人類化抗體免疫球蛋白鏈 <400> S

Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 15 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser lie Thr Gly Gly 20 25 30

Tyr Leu Trp Asn Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 lie Gly Tyr He Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr lie Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser 65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser 165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 157311·序列表.doc 201208702

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255

Pro Glu Va丨 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350.

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365

Val Lys G]y Phe Tyr Pro Ser Asp He Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 -4 - 157311-序列表.doc

Claims (1)

1. 201208702 七、申請專利範圍： 1· 一種組合之用途，其係用於製造供治療患有過度增生性 病症之患者之該過度增生性病症的藥物，其中該組合包 含特異性結合人類胰島素樣生長因子_〖受體之分離之抗 體或其抗原結合片段以及Atk抑制劑，其中投與該組合 相對於單獨投與該抗體或抗原結合片段而言治療該病症 之冶療功效增強，其中該抗體或抗原結合片段包含seq ID NO: 7中所述之胺基酸序列的輕鏈免疫球蛋白之 CDR1、CDR2及CDR3 ;以及包含SEQ ID N〇: 8中所述之 胺基酸序列的重鍵免疫球蛋白之CDR1、CDR2及CDR3。 2·如請求項1之用途，其中該抗體或其抗原結合片段包含 SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列的輕鏈免疫球蛋白； 以及包含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列的重鏈免疫 球蛋白。 3. 如請求項1之用途，其中該抗體或片段為抗體達利珠單 寺几（dalotuzumab) 〇 4. 如請求項i之用途，其中該Akt抑制劑為MK-2206。 5. 如請求項3之用途，其中該抗體或片段為抗體達利珠單 抗且該Akt抑制劑為MK-2206。 6. 如請求項5之用途’其中該患者為人類。 7. 如請求項1之用途’其中該病症為癌症。 8. 如請求項7之用途，其中該癌症為： 急性淋巴細胞性白血病； 急性非淋巴細胞性白血病； 157311.doc 201208702 腎上腺癌； 成人τ細胞白血病/淋巴瘤； 基底細胞癌； 膀胱癌； 骨癌； 腦癌； 乳癌； 慢性淋巴細胞性白血病； 慢性骨髓性白血病； 結腸癌； 結腸直腸癌； 皮膚T細胞淋巴瘤； 子宮内膜癌； 食道癌； 尤文氏肉瘤（Ewing's sarcoma); 生殖泌尿道癌； 頭頸癌； 霍奇金氏病（Hodgkin's disease); 卡波西氏肉瘤（Kaposi's sarcoma); 腎癌； 喉癌； 白jk病； 肝癌； 肺癌； 157311.doc 201208702 淋巴瘤； 與親人類τ細胞淋巴病毒有關之淋巴瘤； 髓性癌； 黑素瘤； 間皮瘤； 多發性骨髓瘤； 骨髓瘤； 神經母細胞瘤； 非皮膚性周邊τ細胞淋巴瘤； 非霍奇金氏淋巴瘤（non-Hodgkin’s lymphoma); 口腔癌； 骨肉瘤； 卵巢癌； 姨臟癌； 前列腺癌； 直腸癌； 腎癌； 視網膜母細胞瘤； 鱗狀細胞癌； 胃癌； 睪丸癌； 甲狀腺癌； 子宮癌； 網狀細胞肉瘤；或 157311.doc 201208702 韋爾姆斯氏腫瘤（Wilms丨tumor)。 9. 如請求項丨之用途，其中該藥物包含另一化學治療劑。 10. 如請求項9之用途，其中該另一化學治療劑為雌激素受 體調節劑、雄激素受體調節劑、類視色素（retin〇id)受體 調節劑、細胞毒性劑、細胞生長抑制劑、抗增生劑、平 基（Prenyl)-蛋白質轉移酶抑制劑、HMG_c〇A還原酶抑制 劑、血管生成抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉錄酶抑 制劑、細胞增殖及存活信號傳導抑制劑、雙膦酸鹽、芳 香酶抑制劑、siRNA治療劑、γ-分泌酶抑制劑、干擾受 體赂胺酸激酶（RTKs)之藥劑或干擾細胞週期檢查點之藥 劑。 11. 一種組合，其包含： (i) 分離之抗體或抗原結合片段，其包含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列的輕鏈免疫球蛋白之CDR1、CDR2 及CDR3 ;以及包含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列的 重鏈免疫球蛋白之CDR1、CDR2及CDR3 ;及 (ii) Atk抑制劑。 12. 如請求項丨丨之組合，其中該抗體或其抗原結合片段包含 SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列的輕鏈免疫球蛋白； 以及包含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列的重鏈免疫 球蛋白。 13. 如請求項11之組合，其中該抗體或片段為抗體達利珠單 抗。 14. 如請求項11之組合，其中該Akt抑制劑為MK-2206。 157311.doc 201208702 15·如請求項13之組合’其中該抗體或片段為抗體達利珠單 抗且該Akt抑制劑為ΜΚ-2206。 16. 如請求額之組合，其進一步包含另一化學治療劑。 17. 如請求項16之组合，其中該另—化學治療劑為雌激素受 體調節劑、雄激素受體調節劑、類視色素受體調節劑、 細胞毒性劑、細胞生長抑制劑、抗增生劑、平基·蛋白質 轉移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、血管生成抑制 劑、麟蛋白酶抑制劑、逆轉錄酶抑制劑、細胞增殖及 存活信號傳導抑制劑、雙膦酸鹽、彡香酶抑制劑、 siRNA'療劑、γ·分泌酶抑制劑、干擾受體酪胺酸激酶 (RTK)之藥劑或干擾細胞週期檢查點之藥劑。 157311.doc