TW201201794A - Small molecule lipolytic compounds - Google Patents

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201201794 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於具有生物及治療活性之小分子。特定士 之’本發明係關於具有解脂及抗成脂活性之小分子。此等 分子之兩實例係4-曱基-2-(辛醯基胺基）戊酸及义異戊基辛 醯胺。本發明進一步係關於利用具有解脂及抗成脂活性之 小分子預防或治療諸如脂肪團（cellulite)之皮膚病之方法。 本申請案主張2010年7月2曰申請之美國臨時申請案 61/361,179號之優先權，該案係以引用全文之方式併入本 文。 【先前技術】 脂肪團係由退化的脂肪組織於皮膚中之累積而引起。導 致此疾病之一或數個因素包括不良動脈或靜脈循環、内分 泌素齋亂及淋巴引流問題。誘發脂肪團產生之一條件係皮 膚脂肪細胞中儲存過量脂肪。隨著脂肪（呈甘油三酸酯形 式之脂質）負載情況變得嚴重，脂肪細胞膨脹及變得肥 厚，有時達到高度肥厚。因肥厚導致血管及淋巴管受脂肪 物質壓縮會誘發流體引流不良及毒素滯留於皮膚中。由此 等病況導致之結締組織水腫及病變導致表現為不規則點狀 表觀之脂肪團。 皮膚護理工業之一目的係發展可滲入皮膚以刺激脂肪團 中之脂肪沈積及其他皮膚異常分解之小（小於5〇〇 MW)分 子。已證貫辛酸（一種游離脂肪酸，亦稱為辛酸鹽或羊脂 酸）參與脂肪細胞中脂類代謝之軀體自然調節（2〇〇〇，Guo 156995.doc

I 201201794 等，Biochem. J. 349:463-471 ; 2002, Han等，J. Nutr. 132 : 904-910 ; 2004，Lei 等，Obesity Res. 12:599-610 ; 2006.

Guo等，Nutr. Metab. (Lond，）3:30 ;美國專利申請公開案 2005/0019372)及因此係治療脂肪團之一候選藥物。辛酸天 然存在於牛乳及一些植物油（例如，椰子及棕櫚）中，且係 一種用於多種目的（包括抗真菌活性）之廣泛使用之膳食補 充劑。除了其解脂活性外’辛酸亦會被脂肪細胞攝取及與 甘油及其他脂肪酸一起用於合成甘油三酸酯（圖丨）。 除辛酸外’已知可調節脂肪細胞中脂類代謝之其他化合 物主要改自已發展用於各種心臟及呼吸疾病之全身性藥 物。此等包括異丙基腎上腺素（β-腎上腺素能激動劑）、胺 茶驗（麟酸二酯酶抑制劑）及茶驗（結構類似於咖π井因之碌酸 二酷酶抑制劑）。此等分子係作為美塑療法之一部分注射 或局部使用以於諸如脂肪團沈積之病症中減少脂肪。為提 而諸如此類分子於應用至皮膚護理產品時之利用率要求生 產⑴屬非處方藥物’（ii)來源更天然，（iii)展現良好皮膚滲 透品質’及（iv)具有較現有分子佳之解脂活性之藥劑。 【發明内容】 本發明之一實施例係關於一種治療哺乳動物皮膚之方 法’其包含將組合物投與至哺乳動物之皮膚。該組合物可 包含醫藥可接受載劑及醫藥有效量化合物或其醫藥可接受 鹽。δ玄化合物可具有式，其中R!包含5至35 個碳原子鏈，式中之尺广以⑺部分係脂肪醯基，及&包含 有機基團。 156995.doc • 4 - 201201794 於本發明之特定實施例中，式r】_c(0) NH R2中之nh_R2 部分可包含胺基酸。於此情況中，基團包含胺基酸之α_ 碳、敌基及側基；ΝΗ基團連接至胺基酸之α—碳。於本發明 之其他實施例中，式Κ(〇)·ΝΗ-Ι12中之NH-R2部分可包含 胺基酸類似物’於此情況中，該類似物因缺少連接至胺基 酸α-碳之羧基而不同於胺基酸。於此情況中，1基團包含 胺基酸之α-碳及側基；NH基團連接至胺基酸類似物之α_ 碳。胺基酸或胺基酸類似物侧基可呈疏水性。於此等實施 例中之胺基酸（完整胺基酸或以上類似物）可為白胺酸、異 白胺酸、纈胺酸或丙胺酸》 以上方法之特定實施例採用包含下式或由下式組成之化 合物：

(Ν-異戊基辛醯胺） 以上方法之特定其他實施例採用包含下式或由下式組成之

(4-甲基-2-(辛醯胺基）戊酸） 於4_甲基_2-(辛醯胺基）戊酸實施例中，顯然1基團係白 酸，而異戊基辛醯胺實施例中之I基團係缺少羧基之 胺酸。實施例進一步包括本發明化合物之醫藥可接受雎 156995.doc 201201794 於本發明之特定實施例中，式Κ(ο)-ΝΗ-ιι2中之心基 團鏈可包含7至21個碳原子。於R!鏈為7個碳原子長度之此 等及其他實施例中，脂肪醯基Κ(Ο)-可為辛醯基。本發 明之此等及其他實施例可包含含2至1 5個碳原子之R2基 團’此R2基團可視需要由碳及氫原子組成。於本發明之其 他實施例中，R2可包含5至9個碳原子及基團可包含5至 13個碳原子。於本發明之一或多個實施例中之脂肪醯基可 為飽和或不飽和。 於以上方法之特定實施例中所使用之組合物可呈氣溶 膠、乳劑、液體、乳液（lotion)、乳霜、糊膏、軟膏、粉丰 或泡沫之形式。除包含式Rl_C(0)_NH_R2之化合物外，該 組合物可進一步包含肉毒鹼、白藜蘆醇、異丙基腎上腺 素、胺茶鹼、茶鹼、咖啡因或任何其他脂肪分解誘導劑或 脂質生成抑制劑。 於以上方法之特定實施例中，可將該化合物投與至皮下 層上方之脂肪分佈相對正常皮下組織異常之皮膚^於其他 實施例中，可將該化合物投與至皮下層上方之易於形成相 對正常皮下組織異常之脂肪分佈之皮膚。本發明之特定實 施例包含將該化合物投與至含脂肪團之皮膚或易於形成脂 肪團之皮膚。 本發明之實施例亦係關於藉由細胞增加甘油產生之方 法，其包含使該細胞與含式Rl_c(〇)_NH_R2之化合物接 觸，其中Rl包含5至35個碳原子鍵，式中Ri_c(〇)部分係脂 肪醯基，及&包含有機基團。於特定實施例中，此方法之 156995.doc * 6 - 201201794 標的細胞係脂肪細胞或包含於皮下脂肪組織中之脂肪細 胞。就特定實施例而言，該化合物導致細胞將儲存於細胞 中之甘油三酸酯分子代謝為甘油及脂肪酸。 本發明之實施例亦係關於一種減少脂肪生成之方法，其 包含使細胞與含式Ι^-(：(0)-ΝΗ-Ι12之化合物接觸，其中R, 包含5至35個碳原子鏈，式中Rrc(0)部分係脂肪醯基，及 R·2包含有機基團。於特定實施例中，此方法之標的細胞係 脂肪細胞或前脂肪細胞，或包含於皮下組織中之脂肪細胞 或前脂肪細胞。就特定實施例而言，該化合物導致細胞 (例如’脂肪細胞或前脂肪細胞）脂質積累減少。脂質積累 減少可為細胞質脂之減少。 【實施方式】 本發明提供如經由刺激解脂過程調節脂肪細胞之化合 物’特定言之脂肪醯胺》此等化合物之實例係4·甲基_2_ (辛酿胺基）戊酸（圖2A)及N-異戊基辛醯胺（圖2B)，其等各 小於300 MW及較現有分子（如異丙基腎上腺素、胺茶鹼及 茶驗）更大程度地誘導脂肪細胞中甘油三酸酯之分解。本 文中揭示之此等化合物缺少對皮膚細胞之毒性。此等特徵 及可使其等渗透皮膚之脂質化令此等化合物特別用於預防 及治療皮膚中之異常脂肪沈積之負面作用（例如，脂肪團 及姓娘紋）。本發明對皮膚之此有利作用亦係與增強皮膚 環境之皮膚中之甘油含量增強有關。 本發明之一實例化合物係4-曱基-2-(辛醯胺基）戊酸。此 化合物另稱為（例如）4-曱基-2-(羊脂醯胺基）戊酸、4_甲基_ 156995.doc 201201794 2-(辛醢胺基）纈草酸、或4_甲基_2_(羊脂醯胺基）纈草酸β 此分子之命名係基於戊酸之2位碳處（1位係羧酸基碳）上為 辛醯胺基及戊酸之4位碳上為甲基。包含4_曱基_2_(辛醯胺 基）戊酸或由其組成之化合物可用於本發明中。 本發明之另一實例化合物係Ν_異戊基辛醯胺。此化合物 另稱為（例如）Ν-異戊基辛醯胺、Ν_異戊基羊脂醯胺或Ν_異 戊基羊脂醯胺。包含Ν-異戊基辛醯胺或由其組成之化合物 可用於本發明中。 可用於本發明令之化合物實例包含以下化學式或由以下 化學式組成： r,-co-nh-r2 化合物4-曱基-2-(辛醯胺基）戊酸及N-異戊基辛醯胺符合此 式。 本技藝已熟知式R〗-CO-NH-R2中之Ri-CO·部分可獲自（例 如）脂肪酸。技術者將瞭解，由於r^CO-可獲自脂肪酸 (FA) ’故R〗可包含烴鍵（例如，烷烴、烯烴、炔烴或如本 文所揭示之FA鏈之變體）及-CO-可來自與_>^-112部分縮聚 之羧酸基。於此情況中’ KO-部分可包含脂肪醯基或由 脂肪醯基組成。Ri可為完全由碳及氫組成之脂族基團，或 進一步包含諸如（例如）氧及氮之其他原子。可用於提供本 發明化合物Κ〇-部分之飽和脂肪酸（即，&係烷烴）之實 例具有通式CH3(CH2)nCOOH且列於表1中。 156995.doc 201201794 表1 :飽和脂肪酸 系統名稱 常見名稱 速記命名 丁酸 酪酸 4:0 戊酸 纈草酸 5:0 己酸 羊油酸 6:0 辛酸 羊脂酸 8:0 壬酸 天竺葵酸 9:0 癸酸 羊躐酸. 10:0 十二破酸 月桂酸 12:0 十四碳酸 肉豆蔻酸 14:0 十六碳酸 棕橺酸 16:0 十七碳酸 珠脂酸 17:0 十八碳酸 硬脂酸 18:0 二十碳酸 花生酸 20:0 二十二碳酸 山蓊酸 22:0 二十四碳酸 木蝶酸 24:0 二十六碳酸 蠟酸 26:0 二十七碳酸 卡波卡(carboceric)酸 27:0 二十八碳酸 褐煤酸 28:0 三十碳酸 蜂花酸 30:0 三十二碳酸 紫膠蠟酸 32:0 三十三碳酸 蠟蜜酸(葉蝨酸） 33:0 三十四碳酸 格地酸 34:0 三十五碳酸 蠟塑酸 35:0 脂肪酸或脂肪醯基（即，KO-)之烴鏈（注意，羧基碳原 子視為鏈中之一碳）等於或大於4個碳原子長度。用於提供 及/或描述本發明之脂肪酸/脂肪醯基實例具有4、5、6、 7 、 8 、 9 、 10 、 11 、 12 、 13 、 14 、 15 、 16 、 17 、 18 、 19 、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、 32、33、34、35、36、37、38、39 或 40個碳原子之鏈長 度。因此，R,可具有 3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 156995.doc -9- 201201794 24 、 25 、 26 、 27 、 28 、 29 、 30 、 31 、 32 ' 33 、 34 、 35 、 36、37、38或39個碳原子之鏈長度。於特定實施例中，脂 肪醯基之鏈長度為6至36、8至16、8至18、8至2〇、8至22 或8至24個碳原子長度；因此，此等實施例之心各具有$至 35 7至15、7至17、7JL19、7至21、或7至23個碳原子長 度。可用於本發明中之其他脂肪酸/脂肪醯基具有偶數或 奇數個碳原子之鍵長度。可使用短鏈、中等鏈及長鏈脂肪 酸或脂肪醯基來製備本發明實施例。中等鏈脂肪酸一般具 有8(或6)至1〇(或12)個碳原子，而長鏈脂肪酸一般具有 14(或12)及更多碳原子。必需及非必需脂肪酸亦係本發明 之一部分，及天然存在及合成獲得之脂肪酸。 技術者將瞭解任何脂肪酸之相應脂肪醯基；例如，脂肪 酸CH3(CH2)6COOH(辛酸）之脂肪醯基係ch3(CH2)6CO-(辛 醢基）（1^ = 7)。因此，本文中關於脂肪酸之論述等價地係關 於相應的脂肪醯基。脂肪醯基實例為丁醯基、戊醯基、己 醯基、庚醯基、辛醯基、壬醯基、癸酿基、十二醯基、十 四醯基、十六醯基、十七醯基、十八醯基、二十醯基、二 十二醯基、二十四醯基、二十六醯基、二十七醯基、二十 八酿基及三十酿基。 可用於實施本發明之脂肪酸可包括飽和脂肪酸（即，鏈 中碳原子間不具有雙鍵及具有最大氫原子數之烷烴鏈）及 不飽和脂肪酸（即，鏈中碳原子間分別具有至少一雙鍵及/ 或三鍵之烯烴或炔烴鏈）。不飽和脂肪酸之實例為單不飽 和酸（MUFA)(若鏈中僅存在一雙鍵）、多烯（或多不飽和脂 156995.doc •10- 201201794 肪酸，PUFA)(若鏈具有兩或更多雙鍵）（例如，亞曱基間 斷、多個亞甲基間斷、共軛二烯、丙二烯系酸、卡木蘭 (cumulenic)酸），及炔系（若鏈含有三鍵）。不飽和脂肪酸之 其他實例為Ω-3(η-3)、Ω-6(η-6)及Ω-9(η-9)脂肪酸。可用於 提供本發明化合物ΚΟ-部分之不飽和脂肪酸之實例 (即，h係烯烴或炔烴）列於表2中。 表2 :不飽和脂肪酸 系統名稱 常見名稱 速記名稱 9,順式-十四石炭稀酸 肉豆證油酸 14:1(η-5) 9-順式-十六碳烯酸 棕櫚油酸 16:1(η-7) 6-順式-十六碳稀酸 撒皮恩(sapienic)酸 16:1(η-10) 全-順式-7，10，13-十六碳 三烯酸 16:3(η-3) 9-順式-十八碳稀酸 油酸 18:1(η-9) 全-順式-9,12-十八碳二 烯酸 亞油酸 18:2(η-6) 全-順式-9，11-十八碳二 烯酸 共輛亞油酸 18:2(η-6) 全-順式-9,12,15-十八碳 三烯酸 α-亞麻酸(ALA) 18:3(η-3) 全-順式-6,9，12-十八碳 三烯酸 γ-亞麻酸(GLA) 18:3(η-6) 全-順式-6,9，12，15-十八 碳四浠酸 硬脂四烯酸(SDA) 18:4(η-3) 全-順式-11,14,17-二十 碳三烯酸 二十碳三烯酸(ΕΤΕ) 20:3(η-3) 全-順式-8，11，14-二十碳 四烯酸 雙同-γ-亞麻酸(DGLA) 20:3(η-6) 全-順式-5,8,11，14-二十 碳四烯酸 花生油酸 20:4(η-6) 全-順式-8,11，14,17-二 十碳四稀酸 二十碳四烯酸(ΕΤΑ) 20:4(η-3) 156995.doc 11 201201794 全-順式-5,8,11，14，17-二 十碳五烯酸 二十碳五诔酸(EPA) 20:5(n-3) (Z)-二十二碳-13-烯酸 芥酸 22:l(n-9) 全-順式-7，10，13，16，19-二十二碳五烯酸 二十二碳五烯酸(DPA) 22:5(n-3) 全-順式- 4,7，10，13，16，19-二十二 碳六烯酸 二十二碳六烯酸(DHA) 22:6(n-3) 全-順式-9，12，15，18,21-二十四碳五烯酸 二十四碳五烯酸 24:5(n-3) 全-順式- 6,9，12，15，18,21-二十四 碳烯酸 二十四碳六烯酸(尼生 酸） 24:6(n-3) 可使用其他較不常見類型的脂肪酸來製備本發明化合 物’包括烴鏈中具有除曱基外之其他類型基團之彼等物。 可於鏈中之非甲基基團之實例為醚基、羧基、酮基、酯基 及醛基。較不常見脂肪酸之其他實例係具有側基除氫外之 之鏈之彼等物。可用於本發明中之其他脂肪酸之實例為羥 基脂肪酸、二羧酸、脂肪酸碳酸酯、二乙烯基醚脂肪酸、 含硫脂肪酸、脂肪酸醯胺、曱氧基及乙醯氧基脂肪酸、_ 基脂肪酸、醛系脂肪酸、自代脂肪酸（例如，F、C卜Br)、 硝化脂肪酸、支鏈脂肪酸、單或多支鏈脂肪酸、支鍵甲氧 基脂肪酸、支鏈羥基脂肪酸（例如，黴菌酸）、含環脂肪 酸、環丙烷酸、環丁烷酸（例如，梯烷）、環戊基酸、類呋 喃酸、環己基酸及己烯基酸、苯基及苯曱基鏈烷酸、環氧 酸、環狀脂肪過氧化物及硫辛酸。 雖然可利用本文所述之脂肪酸製備本發明化合物，然而 技術者將輕易知曉用於製備該等化合物之其他形式。因 此’雖然本發明針對脂肪酸及其製造描述式Ri_c〇_Nh_R2 156995.doc -12· 201201794 中之R!-CO-部分，然而此論述未限定該等化合物必須由脂 肪酸自身合成。應用其他合成方法來製造本發明化合物 時，仍可就其脂肪酸或脂肪醯基特徵來特徵化Ri_c〇_部 分。 於本技藝中已熟知式Rl-CO-NH-R2中之Rl_C0_NH•部分 可獲自或描述為（例如）脂肪醯胺（a.k.a脂肪酸酿胺或烧基醯 胺）。可藉由使諸如本文所述之脂肪酸與胺（例如，氛水、 一級胺、二級胺）縮聚製造脂肪醯胺。因此，可用於提供 式K-CO-NH-R2中之KO-NH-部分之脂肪醯胺之實例可 參照所揭示之脂肪酸實例而輕易知曉β脂肪醯胺之非限制 性實例包括戊醯胺（纈草醯胺）、己醯胺（羊油醯胺）、辛醯 胺（羊脂酿胺）、壬醯胺（天竺葵醯胺）、癸醯胺（羊蠛醯胺）、 十二烷醯胺（月桂醯胺）、十四烷醯胺（肉豆蔻醯胺）、掠摘 酿胺、花生醯胺、山嵛醯胺、硬脂醯胺、油醯胺、芬醯胺 及蓖麻油酿胺。 可使用胺基酸及其衍生物來製備式R^CO-NH-R^之本發 明化合物中之-NH-R2部分。可使用之胺基酸之實例為呈L_ 及D-形式之丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、半胱 胺酸、榖胺醯胺、榖胺酸、甘胺酸、組胺酸、異白胺酸、 白胺酸、賴胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺 酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸。胺基酸之其他實 例為正白胺酸、正纈胺酸、α-胺基辛酸酯、β-曱基苯丙胺 酸、α-胺基苯乙酸酯、鳥胺酸、牛磺酸、肉毒鹼、γ_胺基 丁酸（GABA)、L-DOPA(L-3,4-二羥基苯丙胺酸）、羥基脯 156995.doc 13 201201794 胺酸、硒代甲硫胺酸及硒代半胱胺酸。胺基酸具有連接至 胺基、羧酸基及側基（R)之中心碳（α·碳，Ctt)。游離胺基酸 之通式如下：

R 〇 一Kh 技術者將瞭解結合至胺基酸之α_碳之胺基係用於提供式 KO-NH-R2中之-ΝΗ部分’於此情況中，I可包含胺基 酸之α-碳、側基及叛基或由此等物組成。具有其中 部分係獲自胺基酸之式Ri-CO-NH-R2之化合物之實例可為 4-甲基-2-(辛醯胺基）戊酸：

於此實例中，-NH-R2部分可獲自白胺酸。或者，技術者 亦瞭解當胺基以特定胺基酸（例如，精胺酸、天冬醯胺、 榖胺醯胺、賴胺酸、組胺酸、脯胺酸、色胺酸）側基形式 存在時，其可用於提供式Ri_c〇_NHR2中之_nh部分於 此情況中，&可包含胺基酸之心碳、羧基、胺基及側基之 餘下部分或由其等組成。 胺基酸衍生物包括鹽衍生物及缺少連接至α_碳之胺基或 羧基之衍生物。其他實例為其等側基經改質（如，經酯化 或醯胺化）之彼等胺基酸。具有其中_NH_R2部分係獲自胺 基酸類似物之式R〗-C 〇 · N η _ R 2之化合物之實例可係N _異戊 156995.doc 201201794 基辛醯胺：

於此實例中，-NH-R2部分可獲自缺少在其他情況中連接 至α-碳之羧基（c〇〇H)之白胺酸。 就式KO-NH-R2中之-NH-R2部分可獲得或於其他情況 中類似而言，胺基酸或胺基酸衍生物之側基可呈正電性、 負電性、極性、極性不帶電荷、非極性、疏水性、酸性、 鹼性、脂肪族或中性。 於本技藝中已熟知如何製造本發明之化合物。例如，合 成方法可包括脂肪酸（例如，本文所描述之彼等物）與胺基 酸或胺基酸相關之化合物之縮聚或鍵合。以引用全文之方 式併入本文之美國專利申請公開案2〇〇8/〇2〇〇7〇4揭示此類 有機合成之實例。此外，技術者將瞭解關於4_甲基2_(辛酿 胺基）戊酸及Ν·異戊基辛醯胺合成之如下揭示之方法（實例） 如何用於製備貫施本發明之其他化合物。 、心奢解本發明揭示内容提及獲自胺基酸或任何其他部 或基團之通式片段時，該揭示内容係提及實際上利用該 =基酸、基團或部分製造之產物，及自其他組分製造之產 物。於後一實例由 ' ，可用於根據其中基團與特定化學基團 (如胺基酸）之相彳 物 a或匹配度，針對此等基團論述最終產

式 Ri_C〇-NH K中之-NH_R2部分可視為Ri_c〇_脂肪醯基 156995.doc •15- 201201794 之封端、封端基或阻斷基。就此意義而言，-nh-r2部分防 止脂肪醯基與醇基（R-OH)形成酯。由於醯基係於醯胺鍵結 中，故其羧基碳不易或較不易受諸如醇之親電體之親核性 攻擊。 可用於本發明中之化合物之實例係呈部份或完全親脂性 (疏水性）且具有約 200 ' 250、300 ' 350 ' 400、450 ' 500、 550或600之分子量。一般而言，化合物之親脂性可大部份 由K基團提供。呈部份親脂性之彼等本發明化合物可具極 性，係因R!基團具疏水性及視需要與中間-CO-NH-核共軛 之R2基團具一定親水性。本發明之化合物及/後其Ri或R2 部分可具約 100%、95%、90%、85%、80%、75%、70%、 65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%或 30%親月旨性或 疏水性。 本發明之其他實例係具有根據本文揭示内容之式Ri-CO-NH-R2且具有與4_曱基-2-(辛醯胺基）戊酸或N-異戊基辛醯 胺相同之活性（例如，解脂活性），或此等任一化合物活性 之至少約 10%、20% > 30%、40% ' 50%、55% > 60%、 65%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98% 或 99%之 化合物。 本發明化合物之所有實施例可呈「單離」狀態。例如， 「單離」化合物係經完全或部份純化之化合物。於一些情 況中，單離化合物係更大組合物、緩衝系統或反應混合物 之一部分。於其他情況中，單離化合物可純化至均質。組 合物可包含佔亦存在於其中之所有其他物質之至少約50、 156995.doc -16 - 201201794 80、90或95%(以莫耳或重量計）之該化合物。所揭示化合 物之混合物可用於實施本發明提供之方法。 本發明之其他實施例係關於將本文所揭示之化合物用於 (例如）調配物或用作治療劑之方法。此等方法可涉及使用 單一化合物或呈組合形式（即，混合物）之多種化合物。因 此，本發明之特定實施例係關於包含本文所揭示化合物之 藥劑及製造此等藥劑之方法。 於某些情況中，本發明組合物可置於放在皮膚上、中或 下之裝置内。此等裝置包括經皮貼片、植入物及注射(例 如美塑療法），其以與皮膚或毛囊接觸之方式以被動或主 動釋放機制釋放該物質。例如，該物質可於適宜載體中及 以有效濃度以規則間隔（如每日一次或兩次）局部施用至表 皮。一或多次注射於皮膚提供本發明肽投與皮膚或任何其 他組織之另一路徑。 之組合物可呈氣溶 軟膏、粉末、泡沐 在本文所述之方法中用於遞送化合物 膠、乳劑、液體、乳液、乳霜、糊膏、 或其他醫藥可接受㈣物之形式。此外，可利用不常涉及 的調配物（如去離子/蒸潑水、PBS或標準f療鹽水溶液）遞 送化合物。一般而言，醫藥可接受調配物可包括任何適用 於人類皮膚或黏膜表面之载劑。此等醫藥可接受載劑包括 乙醇 '二甲亞颯、甘油、石夕石' 氧化紹 '殿粉、及等效載 劑及稀釋劑。調配物可視需要具有化妝用途，及/或含有 其他劑，諸如類視黃醇（retinoids),或可用作本發明肽治 療作用之佐劑之其他肽。亦可將抗生素添加至該調配物中 156995.doc 17 201201794 以避免感染，進而允許發生最大癒合過程。可將治療及/ 或化妝肽與本發明化合物一起使用。組合物令化合物之濃 度可為約0·1 pg/mL至約50 gg/mL，或約〇」gg/mL至約1〇〇 pg/mL ;然而，所採用之最終濃度可超出此等範圍變化， 視標的組織之屬性、本發明化合物之生物活性及任何佐劑 或技術之使用以增強組合物吸收而定。此等確定爲一般擯 長該技術者可行。例如，用於實施本發明之化合物之濃度 可為約 0.1、1、2、5、1〇、15、20、25、50、75、1〇〇、 200、500或 1〇〇〇 pg/mL。 本發明化合物及相關組合物可投與人類及動物，包括所 有哺乳動物（例如，豬、牛、馬、綿羊、山羊、小鼠、大 鼠、貓、狗、雪貂、靈長類動物亦可與諸如組織移植 物、組織培養產物、氧氣及敷料之一般及/或實驗材料組 合應用。一般而言，組合物可局部、經口、經皮、經皮 下、經肌肉内、經全身或藉由熟習本技術者已知可用於將 本發明化合物遞送至標的組織之任何其他方法投與。組合 物亦可以活體外或離體（ex vivo)方式施用至例如在培養物 中生長之細胞或患者移植物。 由於其等尺寸小，故預期本發明之化合物自身可—定程 度地滲透通過皮膚；然而，可使用特定技術以增強此移 動。例如’可將親脂性（非極性）側基添加至化合物，或可 將化合物置於親脂性賦形劑中遞送至皮膚，以使化合物向 角質層接近，進而移位至更深表皮層。如此一來，此等親 脂性改質可視為賦予前藥作用。賦形劑中可使用諸如已知 156995.doc • 18 · 201201794 溶劑及表面活性劑之滲透增強劑以使化合物吸收更佳。用 於促進化合物接近標的組織/傷口之特殊技術包括注射方 案離子導入法、冑泳及超音波。此等處自獲得可增強化 σ物在皮膚或其他標的組織中之滲透性之各種效果（例 如，成腔、混合、溫度提高）。 一般併入皮膚護理製劑中之組分係為本技藝所熟知。除 生物活性化合物組分外，本發明組合物可含有其他活性 劑，諸如菸鹼醯胺、植烷三醇、金合歡醇、紅沒藥醇及水 揚酸。特定的其他活性劑與生物活性化合物組分協同作 用，或提高調配物之使用期限。 解脂劑可包含於包含如本文所描述之化合物之組合物 中。解脂劑之實例為肉毒鹼、白藜蘆醇、異丙基腎上腺 素、胺茶鹼、茶鹼、咖啡因、黃嘌呤衍生物、可可鹼、毛 喉素、二丁醯基環AMP、環AMP麟酸二酯酶抑制劑、腎上 腺素、兒茶酚胺、菸鹼醯胺及己酮可可鹼。本發明之組合 物亦可包含已知用作減肥藥之特定植物/蔬菜提取物。例 如’於美國專利案4,795，638(以引用全文之方式併入本文） 中’揭示含有具減肥作用之油溶性植物提取物之熱減肥化 妝組合物。此等油溶性植物提取物之典型實例係蔬菜提取 物’包括常春藤（Hedera helix)、山金車（Arnica montana)、迷疊香（Rosmarinus officinalis N)、萬壽菊 (Calendula officinalis)、鼠尾草（Salvia officinalis N)、人 參（Panax ginseng)、金絲桃（Hypericum perforatum)、花竹 柏（Ruscus aculeatus)、，繡線菊（Filipendula ulmaria L)及雞 156995.doc 19 201201794 腳參（Ortosifon stamincus Benth)。 用於實施本發明之解脂劑可為誘導儲存於脂肪細胞或其 他細胞中之脂質分解之彼等物，或誘導細胞外（即，不包 含於細胞脂肪儲存體中）之脂質分解之彼等物。本發明化 合物與其他解脂劑組合時之總解脂活性較彼此獨立使用時 之各自單獨活性大（即，協同作用）。脂肪分解可指三、二 及/或單甘油酯代謝或分解為甘油及游離脂肪酸。且，脂 肪分解可涵蓋三酸甘油酯分解為二及/或單甘油酯及游離 脂肪酸。 可包含對皮膚展現減肥作用之具有或不具有解脂活性之 試劑以實施本發明。此試劑之一實例係抑制脂肪生成，進 而阻止脂肪沈積之試劑。 當組合物與動物或人類皮膚接觸時，應選擇適宜施用至 角質組織之額外組分（即，穩定、低毒性、低敏感性）。以 引用全文之方式併入本文之CTFAK妝品成份手冊 (Cosmetic Ingredient Handb〇〇k)第二版描述皮膚護理工業 常用且適用於本發明組合物中之多種非限制性化妝及醫藥 成伤此等成份之貫例包括：研磨劑、吸收劑、諸如芳香 劑顏料、著色劑、精油、皮膚感知物、收敛劑等之美感 組分(例如，丁香油、薄荷醇、樟腦、桉樹油、丁香紛、 乳酸薄荷醋、金縷梅顧份）、接癌劑（例如，間苯二紛、 硫、水揚酸、過氧化苯甲醯、紅徽素、辞）、防結塊劑、 消泡劑、抗微生物劑(例如，胺基甲酸碘丙基丁酯)、抗氧 J黏、劑、生物添加劑、緩衝劑、增積劑、整合劑、 156995.doc •20- 201201794 化學添加劑、變性劑、外用止痛劑、聚合物（例如，—十 碳烯與乙烯吼咯啶酮之共聚物）、乳白劑、pH調節劑、推 進劑、還原劑、錯隔劑、皮膚漂白及增亮劑（例如，1 醌、曲酸、抗壞血酸[維生素C]、抗壞血酸基磷酸鎂、抗 壞血酸基葡萄糖胺）、皮膚調理劑（例如，保濕劑，包括混 雜及閉塞性）、皮膚舒緩及/或癒合劑（例如，泛酿醇及衍生 物[例如，乙基泛醯醇]、蘆薈、泛酸及其衍生物、尿囊 素、沒藥醇、甘草酸二鉀）、增稠劑、顆粒物質、結構劑 及維生素。此等試劑中多數詳細描述於美國專利案 6,492,326中，該案係以引用全文之方式併入本文，尤其係 關於各種成份之論述。 本發明之組合物可含有顆粒物質，諸如金屬氧化物。此 等顆粒可經塗覆或不經塗覆、帶電荷或不帶電荷。可用於 製備本發明之顆粒物質之非限制性實例包括氧氣化鉍、氧 化鐵、雲母、經硫酸鋇及Ti〇2處理之雲母、矽石、尼龍、 聚乙烯、滑石、苯乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯酸共聚物、 絹雲母、氧化鋁、聚矽氧樹脂、硫酸鋇、碳酸鈣、纖維素 乙酸酯、二氧化鈦、聚甲基丙烯酸甲酯及其混合物。諸如 Τι〇2、ZnO(氧化鋅）或Zr〇2之無機顆粒物質商業上可得自 許多來源。顆粒物質可以0.01至2重量％，或〇 〇5至15重量 %，或0.1至1重量％(均為近似值）之量存在於組合物中。 本發明之組合物可含有選自保濕劑、潤濕劑或皮膚調理 劑之調理劑1採用多種此等材料且各存在量可為該組合 物之約0·01%至20%，或約〇.1%至1〇%，或約〇 5%至7重量 156995.doc •21 · 201201794 /〇(均為近似值）。此等材料包括，但非限於，胍，·服；乙 醇S文及乙醇酸鹽（例如銨及四級烷基銨）；水揚酸；乳酸及 乳酸鹽（例如銨及四級烷基銨）；呈任一種形式之蘆薈（例如 蘆薈膠），多羥基醇，諸如山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤 蘚糖醇、甘油、丙三醇、己三醇、丁三醇、丙二醇、丁二 醇及己一醇，聚乙二醇；糖（例如蜜二糖）及殿粉，·糖及澱 粉衍生物（例如烷氧基化葡萄糖、果糖、葡萄糖胺）；玻尿 酸；乳酿胺單乙醇胺；乙醯胺單乙醇胺；泛醇；尿囊素； 礦脂（petroleum jelly);及其混合物。 本發明之組合物可含有用於製備水包油乳劑之結構劑。 不受任何理論限制，相信結構劑有助於提供該組合物流變 特性，改良該組合物之穩定性。例如，該結構劑有助於液 晶凝膠網狀結構之形成。結構劑亦可用作乳化劑或表面活 性劑。本發明可含有該組合物重量之約〇至20%、約 〇.1°/。至10%’或約0.5%至9%(均為近似值）之一或多種結構 劑。 隨後可併入本發明中之結構劑係選自硬脂酸、棕櫚酸、 硬脂醇、鯨蠟醇、山茶醇、具有平均約1至約5個環氧乙烧 單元之硬脂醇聚乙二醇醚、具有平均約1至約5個環氧乙烧 單元之鯨蠟醇聚乙二醇醚及其等混合物。可用於本發明中 之其他結構劑係選自硬脂醇、鯨蠟醇、山籥醇、具有平均 約2個環氧乙烷單元之硬脂醇聚乙二醇醚（硬脂醇喊_2)、具 有平均約2個環氧乙烷單元之鯨蠟醇聚乙二醇醚，及其等 混合物。 156995.doc -22· 201201794 方法： 本發明進一步係關於利用本文所述化合物來治療皮膚之 方法。此治療可係針對（例如）皮膚之表皮、真皮或皮下 層。此治療之目的可用於減少皮下脂肪量或防止皮下脂肪 積累。冶療皮膚之一實例係將化合物投與至皮下層上方之 脂肪分佈相對正常皮下組織異常之皮膚。治療皮膚之另一 實例係將化合物投與至皮下層上方之易於形成相對正常皮 下組織異常之脂肪分佈之皮膚。脂肪團（亦稱為肥胖水 腫、皮膚皮下結節變形、皮膚突出狀態（status pr〇trusus cutis)、雌性脂肪代謝障礙）係可藉由此等方法治療或預防 之皮膚疾病之一實例。易於形成本發明所涉及之脂肪團之 皮膚區域係（例如）大腿、臀部、骨盆區、下肢及腹部。期 望不受任何具體理論限制，本發明化合物藉由⑴刺激脂肪 細胞，特定言之皮下組織之彼等脂肪細胞進行脂肪分解， 及/或（ii)減少或防止皮下組織之脂肪生成來治療或預防皮 膚中之異常脂肪沈積/積累疾病。 本發明之方法亦係用於治療或預防除脂肪團外之在皮膚 中之其他異常脂肪沈積疾病。例如’化合物可用於治療或 預防脂肪水腫，亦稱為疼痛性脂肪症候群。本發明亦可用 於治療或預防脂肪瘤或其他脂肪生長。本發明亦可用於治 療或預防局部超重。本發明亦可用於阻止或減少脂質生成 或脂肪生成（即，促進抗脂質生成或抗脂肪生成）。本發明 之抗脂肪生成特性可減少脂質在脂肪細胞之細胞質令之積 累。由於在細胞含量下之此作用，本發明之另一抗脂肪生 156995.doc -23- 201201794 成特性可減少脂肪組織生長或肥大。如此等之又另一特性 可阻止或減少前脂肪細胞或成纖維細胞分化為脂肪細胞》 如本文所使用之「減少j 、「抑制」、「阻止」或「防 止」意指化合物使疾病之發生率、嚴重性、尺寸、體積或 相關症狀或活性相較於疾病在未施用該化合物或包含該化 合物之組合物時所常展現之情況降低了至少約7.5%、 10〇/〇、12.5%、150/〇、17.5%、20%、22.5%、25%、 27.5%、30%、35%、40〇/〇、450/〇、50〇/〇、55%、600/〇、 65%、70%、75%、80%、90%或 1〇〇〇/0。 本發明之另一實施例係使用如本文所述之化合物來刺激 諸如脂肪細胞，特定言之皮膚或皮膚皮下層中之脂肪細胞 之細胞之脂肪分解。此方法可用於治療或預防（抑制）諸如 脂肪圑之疾病。如本文所述，刺激、誘導、上調、提高或 增強諸如脂肪細胞之細胞之脂肪分解意指增加該等細胞之 脂肪分解水平以超越脂肪分解基礎水平（例如，不添加化 合物時之休止狀態）或諸如水之非活性試劑誘導之脂肪分 解水平。此增加可達至少約5%、1〇%、15%、20%、 25%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、75%、80%、 90〇/〇、1 〇〇〇/〇、15〇〇/0、200%、300%、400%、500%、1000% 或 10000%。 技術者將瞭解，當治療係最終針對皮膚之皮下層時，可 將調配物施用至標的皮下區域上之皮膚。或者，可施用諸 如採用注射方案之美塑療法之方法以將治療或化妝化合物 直接置於皮膚之較深層（如皮下層）中。 156995.doc -24- 201201794 本文_所揭不之化合物增加諸如脂肪細胞之細胞之甘油 生成。期望不受任何具體理論限制，此活性可與化合物之 解月曰活性有關’其刺激甘油三酸酯(及二及單甘油酯)代謝/ 分解成游離甘油及游離脂肪酸。本發明之特定實施例係關 於藉由利用本文所揭示之一或多種化合物處理皮膚以增加 皮膚，特定言之皮膚皮下層中脂肪細胞之甘油生成。增加 皮膚中之甘油生成因其潤膚及保護作用而甚為有益。本發 明之此特性係一外加益處以因儲存於皮膚中之脂肪之脂肪 分解而瘦身及潤膚。例如，乾性皮膚或易過敏皮膚之個體 將獲益於本發明之甘油生成，且有益於尋求維持正常膚色 及平滑度之個體。 應瞭解’所揭示之方法可作治療或化妝用。就後一用途 而言’本發明維持正常及健康膚質，如膚色、彈性、水 分、色彩、堅實度及平滑度。所有此等品質可因皮下脂肪 沈積嚴重而變差。 雖然本文基本上係將本發明描述為對細胞之脂肪分解之 刺激’然而’亦應理解，本發明本質上係針對脂質生成， 脂質生成過程導致脂肪酸酯化生成甘油，得到三、二及單 甘油s旨。 實施本發明之標的組織係皮膚及皮膚之相關黏膜組織。 皮膚之相關黏膜組織係以與皮膚類似之方式組織之任何組 織’含有上皮細胞，且與皮膚直接相連。此等組織之實例 係口、鼻、耳、肛及泌尿道表面，及眼瞼結膜。實施本發 明時之其他標的組織係獲自外胚層、中胚層及内胚層之彼 156995.doc -25- 201201794 等組織，或包含上皮細胞、間葉細胞（例如，纖維母細 胞）、肌細胞、或神經細胞（例如，神經元）^本發明之其他 標的器g、器官系統及組織為（例如）傭環系統（例如，心 臟、血液、血管）、消化系統（例如，唾腺、食道、胃、 肝、膽囊、胰臟、小及大腸、直腸）、内分泌系統（例如， 下視丘、垂體腺、松果腺、甲狀腺、甲狀旁腺、腎上 腺）、外皮系統（例如，皮膚、毛髮、指甲）、淋巴系統（例 如’淋巴結及淋巴管）、免疫系統（例如，扁桃體、腺樣 體、胸腺、脾臟）、肌肉系統（例如，心肌、平滑肌、骨胳 肌）、神經系統（例如，大腦、脊髓、周邊神經、神經）、生 殖系統（例如’卵巢、輸卵管、子宮、陰道、乳腺、睾 丸、輸精管、精囊、前列腺、陰莖）、呼吸系統（例如， 咽、喉、氣管、支氣管、肺、隔膜）、骨路系統（例如， 骨、軟骨、韌帶、腱）及排泄系統（例如，腎、輸尿管、膀 胱、尿道）。本發明之特定實施例係關於將化合物以不引 入毒性之方式施用至以上組織（例如，皮膚）或細胞（脂肪細 胞、角質細胞、上皮細胞、皮膚細胞、纖維母細胞）中之 一者。 以下實例係用於證實本發明之特定實施例。 實例 實例1 :合成4_甲基-2-(辛醯胺基）戊酸（HB2031) 以下製程係用於使白胺酸與辛酸反應形成4_甲基-2_(辛 醢胺基）戊酸，並顯示於圖2A中》將Fmoc-白胺酸-(Fmoc-2-胺基-4-甲基戊酸）-Wang樹脂於含25%派。定的二曱基甲酿 156995.doc -26- 201201794 胺（DMF)溶液中室溫下授拌20分鐘。過濾並經DMF清洗6 次之後，Kaiser測試表現為陽性（準備偶合）。使辛酸與三 莫耳當量白胺酸樹脂胺基偶合’接著添加與辛酸等莫耳量 之六氟填酸苯并三嗤-1 -氧基-三（吡咯啶）鱗（PyB〇p)及經基 苯并三唑水合物（HOBt)之DMF。將1.3當量二異丙基乙基 胺（DIE A)添加至反應中之其他反應物後，室溫授拌2小 時。過濾樹脂並經DMF清洗3次及經DCM(二氣甲烧）清洗3 次之後’ Kaiser測試表現為陰性，說明反應完全。 將乾樹脂懸浮於三氟乙酸（TFA)及水（149:1)中並擾摔2小 時。過濾該樹脂及隨後經TFA清洗三次。旋轉蒸發合併之 渡液以移除TFA。將產物溶於二乙基喊（Et2〇)中及經5%乙 酸水溶液、水、飽和碳酸氫鈉水溶液及水萃取三次。Et2〇 相經無水硫酸納乾燥’過遽及硫酸納經Et；2〇清洗三次。將 合併之濾液旋轉蒸發為固體。 實例2:合成N-異戊基辛醯胺（HB2032) 以下製程係用於合成N-異戊基辛醯胺（圖2B)，其係4-曱 基-2-(辛醯胺基）戊酸之類似物。將辛酸與含等莫耳量N_異 戊基胺之DCM(二氯甲烷）溶液組合及攪拌5分鐘。添加與 最初兩組分等莫耳量之六氟磷酸苯并三唑氧基_三（吡洛 啶）鳞（PyBop)及羥基苯并三唑水合物（HOBt)，接著添加1.3 當量之二異丙基乙基胺（DIEA)及於室溫下將反應攪拌2小 時。溶液經5 %乙酸水溶液、水、飽和碳酸氫鈉水溶液及 水萃取三次。DCM相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，及硫酸鈉 經DCM清洗三次。將合併之濾液旋轉蒸發成油。 156995.doc •27· 201201794 實例3 :測量4-甲基-2-(辛醯胺基）戊酸及N-異戊基辛醯胺 對脂肪分解及脂肪生成之作用 脂肪分解： 如圖3中所示’游離脂肪酸及甘油均係脂肪分解之產 物’及因此游離脂肪酸釋放之測量係與脂肪細胞之解脂活 性度直接相關。給出此相關性，則脂肪酸釋放度可用於估 算甘油釋放之相對量。以下方法係用於確定4-甲基-2-(辛 醯胺基）戊酸及N-異戊基辛醯胺對脂肪細胞之脂肪分解之 作用。 利用 BioVision(Mountain View, CA)(Free Fatty Acid Quantification Kit, Cat號K612-100)製造之脂肪酸試驗套組 確定3T3-L1脂肪細胞中分化脂肪細胞之脂肪分解誘導。游 離脂肪酸釋放係與甘油量增加有關》此等試驗之脂肪細胞 係如下製備。自 American Type Culture Collection(ATCC) (CL-173TM)購置3T3-L1老鼠前脂肪細胞。該等細胞於完全 培養基（ATCC-調配之補充有10%胎牛血清之杜貝卡氏改良 依格培養基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium)中培養及 直至達100%匯合度^於完全培養基中誘導分化或脂肪生 成。於第0日時，使細胞經含有誘導劑（100 gg/ml異丁基甲 基黃嘌呤（Sigma，St· Louis, MO)、5 gg/ml胰島素及 2 pg/ml 地塞米松（dexamethasone))之完全培養基處理。於第3曰 時，將細胞轉移至含有5 pg/ml胰島素之完全培養基及培養 2至3天《然後，當大部份細胞形成可觀察的細胞内脂滴 時，將該等細胞於完全培養基中維持3至6天。 156995.doc •28· 201201794 爲了分析4-甲基-2-(辛醯胺基）戊酸及N—異戊基辛醯胺對 脂肪分解之作用，使細胞（如上製備之脂肪細胞）經任一此 等化合物以100 pg/mi進行處理.或者，使細胞經已知屬脂 肪分解誘導劑之特定物質（例如，白藜蘆醇、異丙基腎上 腺素、胺命鹼、茶鹼）（100 pg/ml)過夜處理。利用 Bio Vision之游離脂肪酸量化套組’參照生產商的説明書進 行估算，以測量各培養物之上清液之相對甘油釋放。 圖4顯不’ 4-曱基·2_(辛醯胺基）戊酸（HB2〇31)&N_異戊 基辛醯胺（HB2032)相較於所測試之所有其他化合物（包 括，異丙基腎上腺素、胺茶鹼及茶鹼）在脂肪細胞中以較 向程度誘導游離脂肪酸產生（如藉由測量游離脂肪酸產生 所確定）。當以異丙基腎上腺素、HB2031及HB2032以一式 二份方式進行以上試驗時，後兩者化合物展現較異丙基腎 上腺素顯著更佳之活性（圖5)。在用於刺激脂肪分解之濃度 下，HB203 1及HB2032對3T3-L1脂肪細胞均無細胞毒性（數 據未顯示）。 脂肪生成： 脂肪細胞中之細胞内脂滴產生係脂肪生成之一特徵。因 此’藉由使用來自Cayman(Ann Arbor，MI)之脂肪生成試驗 套組’參照生產商的説明書進行細胞中脂滴染色以監測脂 肪生成。此試驗係以Oil red Ο染料染色細胞脂質。 爲了分析4-甲基-2-(辛醯胺基）戊酸及N-異戊基辛醯胺對 脂肪生成之作用’當誘導脂肪生成（第0曰）（參照以上方案） 時將此等化合物單獨地添加至細胞培養物中，及在整個分 156995.doc •29- 201201794 化期間維持於培養物中。於此試驗中脂肪細胞形成之陽性 對照係經誘導發生前脂肪細胞至脂肪細胞的分化但未添加 測試化合物之細胞培養物（圖6B)。於7天培養時間之後， 陽性對照中之50%至70%細胞已完全分化，且在解剖顯微 鏡下觀察到多個細胞質脂滴之積聚。陰性對照係在無脂肪 生成誘導劑之完全培養基中培養之細胞培養物（圖6A)。 N-異戍基辛酿胺（HB2032)藉由減慢較大細胞之形成及細 胞内脂滴之積聚而抑制細胞分化為脂肪細胞。此等作用係 以依濃度方式觀察（圖6C、D、E)(參照圖說明）及與脂肪細 胞誘導之陽性對照相比較（圖6B)。於經低濃度HB2032處理 之細胞（例如’圖6C)中，大量細胞發生分化；然而，細胞 月曰質形成之強度明顯降低’如降低之〇il red 〇染色所示。 實例4 :測量4-曱基-2-(辛酿胺基）戊酸及N-異戊基辛醯胺 之細胞毒性水平

EpiDermTM MTT試驗（MatTek，Ashland, MA)用於確定 4_ 甲基-2-(辛醯胺基）戊酸（HB2〇31)& N_異戊基辛醯胺 (HB2〇32)對皮膚組域是否展現任何程度的細胞毒性。 EpiDermTM皮膚模型係由類似於體内發現之組織基層、刺 層、粒層及角質層組成且展現類體内形態及生長特性，其 等一致且具高度重現性。如圖7中所示’較甘油載劑經 HB2031或HB2032處理細胞存活率無差異（由〇D57〇㈣確 定）。當以1 mg/ml處理24小時時，兩化合物亦未對相同皮 膚組織展現毒性（數據未顯示）。 根據本發明可在無過度實驗下製得及實施本文揭示及主 I56995.doc •30- 201201794 張之所有組合物或方法。雖然已以特定實施例描述本發明 之組合物及方法，然而，熟習本項技術者將瞭解，在不脫 離本發明之概念、主旨及範圍下，可對本文所述之組合物 及/或方法及方法之步驟或步驟次序進行修改。更特定言 之’將瞭解，化學性及生理性相關的特定試劑可替代本文 所述之試劑’但仍獲得相同或類似結果。熟習本項技術者 所知曉之所有此等類似替代及修改應屬本發明之範圍内。 於本說明書中引用之所有專利案及公開案係以引用全文 之方式併入本文。 【圖式簡單說明】 圖1顯示脂肪生成及脂肪分解之代謝過程。所顯示之脂 肪酸係己酸分子。 圖2顯示（Α)4·曱基-2-(辛醯胺基）戊酸及（B)N-異戊基辛醢 胺之化學式。另顯示各化合物之結構及基本分子式，及分 子量（MW)。 圖3顯示（A)脂肪生成及（B)脂肪分解所涉及的脂肪細胞 中之特定訊號路徑。LDL(低密度脂蛋白）；VLDL(極低密 度脂蛋白）；TG(甘油三酸酯）；FFA(游離脂肪酸）；HSL(激 素敏感脂肪酶）；AQP7(水通道蛋白-7)。 圖4顯示在已曝露於1〇〇 pg/ml肉毒驗、白葱蘆醇、異丙 基腎上腺素、胺茶鹼、茶鹼、咖啡因、4-曱基-2·(辛醯胺 基）戊酸（ΗΒ2031)或Ν-異戊基辛醯胺（ΗΒ2032)過夜之3Τ3-L1脂肪細胞中之相對游離脂肪酸產生。將磷酸緩衝鹽溶液 (PBS)用於對照樣品中。 156995.doc 31 · 201201794 圖5顯示在已曝露於100 pg/ml異丙基腎上腺素、4-曱基-2-(辛醯胺基）戊酸（HB2031)或N-異戊基辛醯胺（HB2032)過 夜之3T3-L1脂肪細胞中之相對游離脂肪酸產生。將PBS用 於對照樣品中。 圖6顯示N-異戊基辛醯胺（HB2032)之抗脂肪生成活性。 A)在不添加脂肪生成誘導劑之完全培養基中生長之3 T3-L1 前脂肪細胞。B)經脂肪生成誘導劑誘導9天後，將3 T3 -L1 前脂肪細胞誘導成完全分化之脂肪細胞。C)在脂肪生成誘 導劑存在下經100 pg/ml HB2032處理9天之細胞^ D)在脂 肪生成誘導劑存在下經150 pg/ml HB2032處理9天之細 胞。E)在脂肪生成誘導劑存在下經2〇〇 pg/mi HB2032處理 9天之細胞。經Oil red Ο染料染色細胞以用於脂質含量測 定。圖像如解剖顯微鏡顯示。 圖7顯示利用膚模型（MatTek，MA)與經修改 之MTT試驗的組合，在2、5及18小時培養後1〇〇叩/爪丨心 甲基-2-(辛醯胺基）戊酸（HB2〇3i) & N_異戊基辛醯胺（HB2 032)對皮膚存活率之作用。將甘油處理用作對照。 156995.doc -32-

Claims (1)

1. 201201794 七、申請專利範圍： 1 · 一種用於治療哺乳動物皮膚之組合物，該組合物包含醫 藥可接受載劑及醫藥有效量之化合物或其醫藥可接受 鹽，其中該化合物包含式： . Ri-C(0)-NH-R2 ;其中 Ri包含5至35個碳原子之鏈， 該式申之1^-(：(0)部分係脂肪醯基，及 該式中之NH-R2部分包含： (i)胺基酸，其中該R2基團包含該胺基酸之α-碳、羧 基及側基，及其中該ΝΗ基團連接至該胺基酸之α-碳；或 (ΰ)該胺基酸之類似物’其中該類似物與該胺基酸 不同’缺少連接至該胺基酸α_碳之羧基，其中該尺2基 團包含該胺基酸之α-碳及側基，及其中該ΝΗ基團連接 至該類似物之α-碳。 2-如請求項1之組合物，其中該胺基酸側基為疏水性。 3.如請求項1之組合物，其中該胺基酸係白胺酸、異白胺 酸、纈胺酸或丙胺酸。 • 4.如請求項1之組合物，其中該化合物包含式： O I (Ν-異戊基辛醯胺）或其醫藥可接受鹽。 5.如請求項4之組合物，其中該化合物係由下式. 156995.doc 201201794

   (N-異戊基辛醯胺）或其醫藥可接受鹽組成。 6.如請求項1之組合物，其中該化合物包含式：

   (4-曱基-2-(辛醯胺基）戊酸）或其醫藥可接受鹽。 7.如請求項6之組合物，其中該化合物係由下式：

   (4-曱基-2-(辛醯胺基）戊酸）或其醫藥可接受鹽組成。 8·如請求項1之組合物’其中該Rl鏈包含7至21個碳原子。 9.如請求項1之組合物，其中該脂肪醯基係辛醯基。 10_如請求項1之組合物’其中尺2包含1至15個碳原子。 11. 如請求項1之組合物，其中&包含5至9個碳原子及心包 含5至13個碳原子。 12. 如請求項1之組合物，其中該脂肪醯基係飽和。 13. 如請求項丨至^中任一項之組合物，其中該組合物係呈 氣溶膠、乳劑（emulsion)、液體、乳液（1〇ti〇n)、乳霜、 糊膏、軟膏、粉末或泡沫之形式。 14. 如請求項13之組合物，其中該組合物進一步包含肉毒 鹼、白藜蘆醇、異丙基腎上腺素、胺茶鹼、茶鹼或咖啡 因0 156995.doc • 2 · 201201794 其中°亥組合物係投與以下皮下層 15 ·如請求項13之組合物 上方之皮膚： (i)包含相對於正常皮下組織異常之脂肪分佈；或 (11)易於發生相對於正常皮下組織異常之脂肪分佈。 16. 如請求項15之組合物，其中該組合物係投與包含脂肪團 (cellulite)之皮膚或易於發生脂肪團之皮膚。 17. 如凊求項13之組合物’其可用於增加細胞之甘油產生。 18. 如請求項17之組合物，其中該細胞係脂肪細胞或前脂肪 細胞。 19. 如請求項13之組合物，其可用於減少細胞之脂肪生成。 20. 如請求項19之組合物，其中該細胞係前脂肪細胞或脂肪 細胞。 156995.doc