MX2012014751A - Derivados de acido n-acil amio para tratar condiciones de la piel tales como celulitis. - Google Patents

Abstract

Moléculas pequeñas que tienen actividad biológica y terapéutica. Particularmente, la invención se relaciona con moléculas pequeñas que tienen actividad lipolítica y anti-adipogénica. Dos ejemplos de dichas moléculas son el ácido 4-metil-2-(octanoilamino) pentanoico y la N-isopentiloctanamida. La invención además se relaciona con métodos para prevenir o tratar trastornos de la piel tales como la celulitis usando moléculas pequeñas que tienen actividad lipolítica y anti-adipogénica.

Description

DERIVADOS DE ÁCIDO N-ACIL AMINO PARA TRATAR CONDICIONES DE LA PIEL TALES COMO CELULITIS Campo de la Invención La invención se relaciona con moléculas pequeñas que tienen actividad biológica y terapéutica. Particularmente, la invención se relaciona con moléculas pequeñas que tienen actividad lipolitica y anti-adipogénica . Dos ejemplos de dichas moléculas son el ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y la N-isopentiloctanamida . La invención además se relaciona con métodos para prevenir o tratar trastornos de la piel tales como la celulitis usando moléculas pequeñas que tienen actividad lipolitica y anti-adipogénica.

Antecedentes de la Invención La celulitis puede resultar de la acumulación de tejido graso en la piel. Uno o varios factores que contribuyen a este trastorno incluyen una pobre circulación arterial o venosa, alteraciones hormonales y problemas con el drenaje linfático. Una condición que subyace a la producción de celulitis es el almacenamiento excesivo de grasa en los adipocitos de la piel. Al volverse muy cargados con grasa (lipidos en la forma de triglicéridos ) , los adipocitos se hinchan y se vuelven hipertróficos, a veces hasta un grado elevado. La compresión de los vasos sanguíneos y linfáticos por las masas grasas como resultado de la hipertrofia induce un drenaje pobre de fluidos y estancamiento de las toxinas en la piel. El edema y degeneración del tejido conectivo como resultado de estos condiciones lleva a un aspecto salpicado irregular que caracteriza a la celulitis.

Uno de los objetivos de la industria del cuidado de la piel es desarrollar moléculas pequeñas (PM menor de 500) con capacidad de penetración en la piel que puedan estimular la ruptura de los depósitos de grasa en la celulitis y otras anormalidades de la piel. Se ha demostrado que el ácido octanoico, un ácido graso libre que también referido como octanoato o ácido caprílico, está involucrado en la modulación natural corporal del metabolismo de lípidos en adipocitos (2000, Guo et al., Biochem. J. 349:463-471; 2002, Han et al., J. Nutr. 132:904-910; 2004, Lei et al., Obesity Res. 12:599-610; 2006, Guo et al., Nutr. Metab. (Lond.) 3:30; publicación US 2005/0019372), y por lo tanto es un fármaco candidato para el tratamiento de celulitis. El ácido octanoico se encuentra de manera natural en la leche y algunos aceites vegetales (v.gr., de coco y de palma), y es un suplemento dietario ampliamente usado tomado para un amplio rango de propósitos que incluyen actividad anti-fúngica. Además de su actividad lipolítica, el ácido octanoico también es incorporado por los adipocitos y usado - -junto con el glicerol y otros ácidos grasos para sintetizar triglicéridos (figura 1) .

Otros compuestos además del ácido octanoico conocidos por modular el metabolismo de lípidos en adipocitos son principalmente adaptados a partir de fármacos sistémicos que han sido desarrollados para diferentes condiciones cardiacas y respiratorias. Estos incluyen isoproterenol (un agonista beta-adrenérgico) , aminofilina (un inhibidor de fosfodiesterasa) y teofilina (un inhibidor de fosfodiesterasa similar en estructura a la cafeína) . Estas moléculas se inyectan como parte de un régimen de mesoterapia o se usan tópicamente para actuar en la reducción de grasa en trastornos tales como deposición de celulitis. Para mejorar la disponibilidad de moléculas tales como estas para la aplicación a productos de cuidado de la piel se requeriría producir agentes que (i) sean fármacos sin prescripción, (ii) sean de origen más natural, (iii) exhiban buenas cualidades de penetración en la piel, y (iv) que tengan actividad lipolítica aumentada con respecto a las moléculas actualmente disponibles.

Compendio de la Invención Una forma de realización de la presente invención puede estar dirigida a un método para tratar la piel de un mamífero, que comprende administrar una composición a la piel de un mamífero. La composición puede comprender un vehículo - -farmacéuticamente aceptable y una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable. El compuesto a su vez puede comprender la fórmula Ri-C (0) -NH-R2 donde Ri comprende una cadena de 5 a 35 átomos de carbono, la porción R!-C(0) de la fórmula es un grupo acilo graso, y R2 comprende un grupo orgánico.

En ciertas formas de realización de la invención, la porción NH-R2 de la fórmula Ri-C (0) -NH-R2 puede comprender un aminoácido. En este caso el grupo R2 comprende el carbono alfa, grupo carboxilo y grupo lateral del aminoácido; el grupo NH está unido al carbono alfa del aminoácido. En otras formas de realización de la invención, la porción NH-R2 de la fórmula Ri~C (0) -NH-R2 puede comprender un análogo de un aminoácido, en cuyo caso el análogo difiere del aminoácido por faltarle el grupo carboxilico unido al carbono alfa del aminoácido. En este caso, el grupo R2 comprende el carbono alfa y grupo lateral del aminoácido; el grupo NH está unido al carbono alfa del análogo del aminoácido. El grupo lateral del aminoácido o análogo del aminoácido puede ser hidrófobo. El aminoácido en estas formas de realización (aminoácido completo o el análogo anterior) puede ser leucina, isoleucina, valina, o alanina.

Ciertas formas de realización del método anterior emplean un compuesto que comprende o consiste de la fórmula: - - (N-isopentiloctanamida) .

Otras ciertas formas de realización del método anterior emplean un compuesto que comprende o consiste de la fórmula: (ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico) .

En la forma de realización de ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico, es evidente que el grupo R2 es una leucina, mientras que el grupo R2 en la forma de realización de N-isopentiloctanamida es una leucina que carece del grupo carboxilo. Las formas de realización además incluyen las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos objeto. ciertas formas de realización de la invención la cadena del grupo Ri de la fórmula Ri~C (O) -NH-R2 puede comprender entre 7 y 21 átomos de carbono. En estas y otras formas de realización, en donde la cadena Ri es de 7 átomos de carbono de longitud, el grupo acil graso Ri-C(O)- podría ser un grupo octanoílo. Estas y otras formas de realización de la invención pueden comprender un grupo R2 que comprende entre 2 y 15 átomos de carbono; tal como un grupo R2 puede consistir opcionalmente de átomos de carbono e hidrógeno. Aún en otras formas de realización de la invención, el R2 puede - -comprender entre 5 y 9 átomos de carbono y el grupo Rx puede comprender entre 5 y 13 átomos de carbono. El grupo acil graso en una o más formas de realización de la invención puede ser saturado o insaturado.

La composición usada en ciertas formas de realización del método anterior puede estar en la forma de un aerosol, emulsión, liquido, loción, crema, pasta, ungüento, polvo, o espuma. Además de comprender un compuesto que tiene la fórmula Ri~C (0) -NH-R2, la composición además puede comprender carnitina, resveratrol, isoproterenol, aminofilina, teofilina, cafeína o cualquier otro agente inductor de lipólisis o agente inhibidor de lipogénesis.

En ciertas formas de realización del método anterior, el compuesto puede ser administrado a la piel sobre una capa subcutánea que comprende una distribución anormal de grasa en relación al tejido subcutáneo normal. En otras formas de realización, el compuesto puede ser administrado a la piel sobre una capa subcutánea que es propensa a desarrollar una distribución de grasa que es anormal en relación al tejido subcutáneo normal. Ciertas formas de realización de la invención comprenden administrar el compuesto a la piel que comprende celulitis o a piel que es propensa a desarrollar celulitis.

Las formas de realización de la invención también están dirigidas a un método para aumentar la producción de glicerol per una célula que comprende poner en contacto dicha célula con un compuesto que comprende la fórmula Ri-C(O) -INJERI en donde Ri comprende una cadena de entre 5 y 35 átomos de carbono, la porción Ri-C(O) de la fórmula es un grupo acil graso, y R2 comprende un grupo orgánico. En ciertas formas de realización, la célula blanco de este método es un adipocito, o un adipocito comprendido en tejido adiposo subcutáneo. Con ciertas formas de realización, el compuesto hace que la que célula metabolice moléculas de triglicérido almacenadas en la célula a glicerol y ácidos grasos.

Las formas de realización de la invención también están dirigidas a un método para reducir la adipogénesis que comprende poner en contacto una célula con un compuesto que comprende la fórmula Ri~C (0) -NH-R2, en donde Ri comprende una cadena de entre 5 y 35 átomos de carbono, la porción Ri-C(O) de la fórmula es un grupo acil graso, y R2 comprende un grupo orgánico. En ciertas formas de realización, la célula blanco de este método es un adipocito o pre-adipocito, o un adipocito o pre-adipocito comprendido en el tejido subcutáneo. Con ciertas formas de realización, el compuesto hace que la célula (v.gr., adipocito o pre-adipocito) reduzca la acumulación de lipidos. La acumulación reducida de lipidos puede ser una disminución en lipidos citoplasmáticos .

Breve Descripción de los Dibujos La figura 1 muestra los procesos metabólicos para - -lipogénesis y lipólisis. Los ácidos grasos representados son moléculas de ácido hexanoico.

La figura 2 muestra la fórmula química para (A) ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y (B) N-isopentiloctanamida . La fórmula estructural y molecular básica, así como el peso molecular (MW) , se muestran adicionalmente para cada compuesto.

La figura 3 muestra ciertas vías de señalización en adipocitos que subyacen (A) lipogénesis y (B) lipólisis. LDL, lipoproteína de baja densidad; VLDL, lipoproteína de muy baja densidad; TG, triglicérido; FFA, ácido graso libre; HSL, lipasa sensible a hormonas; AQP7, acuaporina-7.

La figura 4 muestra la producción relativa de ácidos grasos libres en adipocitos 3T3-L1 que han sido expuestos durante la noche a 100 g/ml de carnitina, resveratrol, isoproterenol, aminofilina, teofilina, cafeína, ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico (HB2031), o N-isopentiloctanamida (HB2032). En la muestra control se usó sal amortiguada con fosfato (PBS) .

La figura 5 muestra la producción relativa de ácidos grasos libres en adipocitos 3T3-L1 que han sido expuestos durante la noche a 100 g/ml de isoproterenol, ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico (HB2031) , o N-isopentiloctanamida (HB2032) . En la muestra control se usó PBS .

- - La figura 6 muestra la actividad anti-adipogénesis de N-isopentiloctanamida (HB2032) . A) Pre-adipocitos 3T3-L1 crecidos en medio completo sin agregado de agentes inductores de adipogénesis . B) Se indujeron pre-adipocitos 3T3-L1 a adipocitos completamente diferenciados luego de nueve días de inducción con inductores de adipogénesis. C) Células tratadas con 100 yg/ml de HB2032 en presencia de inductores de adipogénesis durante nueve días. D) Células tratadas con 150 g/ml de HB2032 en presencia de inductores de adipogénesis durante nueve días. E) Células tratadas con 200 yg/ml de HB2032 en presencia de inductores de adipogénesis durante 9 días. Las células están teñidas para el contenido de lipidos con colorante Oil red 0. Las imágenes están como se muestran bajo un microscopio de disección.

La figura 7 muestra los efectos de 100 g/ml de ácido 4-metil-2- (octanoilamino) entanoico (HB2031) y N-isopentiloctanamida (HB2032) sobre la viabilidad de la piel usando el EpiDerm Skin Model (MatTek, A) en combinación con un ensayo MTT modificado, luego de 2, 5 y 18 horas de periodo de incubación. Como control se usó tratamiento con glicerina.

Descripción Detallada de la Invención La presente invención provee compuestos, amidas grasas en particular, para modular adipocitos tal como a través de la estimulación de procesos lipoliticos. Ejemplos de estos compuestos son ácido 4-metil-2- (octanoilamino) - -pentanoico (figura 2A) y N-isopentiloctanamida (figura 2B) , que son menores de 300 MW e inducen la ruptura de triglicéridos en adipocitos en mayor medida que las moléculas actualmente disponibles tales como isoproterenol , aminofilina y teofilina. En la presente se describe que estos compuestos carecen de toxicidad para las células de la piel. Estas características, junto con el poder ser lipidados que los hace tener la capacidad de penetrar la piel, hace a estos compuestos particularmente útiles para prevenir y tratar los efectos negativos de la deposición adiposa anormal en la piel (v.gr., celulitis y estrías)., Este efecto beneficioso de la presente invención sobre la piel también está asociado con un mejoramiento de los niveles de glicerol en la piel, que mejora la condición de la piel.

Un compuesto ejemplo de la presente invención es ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico . Este compuesto es referido alternativamente como ácido 4-metil-2- (capriloilamino) pentanoico, ácido 4-metil-2- (octanoilamino) valérico, o ácido 4-metil-2- (capriloilamino) valérico, por ejemplo. La nomenclatura para esta molécula se basa en que tiene un grupo octanoilamino en el carbono de posición 2 (siendo la posición 1 el carbono del grupo ácido carboxilico) del ácido pentanoico y un grupo metilo en el carbono de posición 4 del ácido pentanoico. Los compuestos que comprenden o consisten de ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico se pueden usar en la presente invención.

Otro compuesto ejemplo de la presente invención es N-isopentiloctanamida. Este compuesto se refiere alternativamente como N-isoamiloctanamida, N-isopentilcaprilamida, o N-isoamilcaprilamida, por ejemplo. Los compuestos que comprenden o consisten de N-isopentiloctanamida se pueden usar en la presente invención.

Ejemplos de compuestos que se pueden usar en la presente invención comprenden o consisten de la fórmula química : Ri-CO-NH-R2.

Los compuestos ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y N-isopentiloctanamida siguen esta fórmula.

En la materia está bien entendido que el componente Ri-CO- de fórmula R1-CO-NH-R2 puede derivar de un ácido graso, por ejemplo. Un técnico en la materia podría reconocer que, debido a que Ri-CO- puede derivar de un ácido graso (AG) , Ri puede comprender una cadena hidrocarbonada (v.gr., alcano, alqueno, alquino, o variaciones de cadenas de AG como se describe en la presente) y -C0- puede ser de un grupo ácido carboxílico que se ha condensado con la porción -NH-R2. El componente Ri-CO- en este caso podría comprender o consistir de un grupo acil graso. Ri puede ser un grupo alifático comprendido enteramente de carbono e hidrógeno, o además puede comprender otros átomos tales como oxígeno y nitrógeno, ¦ - por ejemplo. Ejemplos de ácidos grasos saturados (es decir, en donde Ri es un alcano) que se pueden usar para proveer el componente Ri-CO- de los compuestos de la invención tienen la fórmula general CH3 (CH2) nCOOH y están listados en la Tabla 1.

Tabla 1: Ácidos grasos saturados.

La cadena de hidrocarburo de un ácido graso o grupo acil graso (es decir, Ri~C0-) (nótese que el átomo de carbono del grupo carboxilico es considerado como un carbono en la cadena) , es igual o mayor de 4 átomos de carbono de longitud. Ejemplos de ácidos grasos/grupos acil graso útiles para proveer y/o describir la invención tienen longitud de cadena de 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, - - 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, o 40 carbonos. De ello se deduce que Ri puede tener una longitud de cadena de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, o 39 carbonos. En ciertas formas de realización, la longitud de cadena del grupo acil graso es entre 6 y 36, entre 8 y 16, entre 8 y 18, entre 8 y 20, entre 8 y 22, o entre 8 y 24 carbonos de longitud; por lo tanto, Ri para estas formas de realización tiene una cadena de entre 5 y 35, entre 7 y 15, entre 7 y 17, entre 7 y 19, entre 7 y 21, o entre 7 y 23 carbonos, respectivamente. Otros ácidos grasos/grupos acil graso útiles en la invención tienen longitud de cadena de un número par o impar de carbonos. Se pueden usar ácidos grasos o grupos acil graso de cadena corta, cadena media, y cadena larga en la preparación de las formas de realización de la invención. Los ácidos grasos de cadena media generalmente tienen entre 8 (o 6) y 10 (o 12) átomos de carbono, mientras que los ácidos grasos de cadena larga generalmente tienen entre 14 (o 12) y más átomos de carbono. Los ácidos grasos esenciales y no esenciales también son parte de la invención, asi como los ácidos grasos derivados naturalmente y los derivados sintéticamente.

Los técnicos en la materia podrían saber el grupo acil graso correspondiente para cualquier ácido graso; por - -ejemplo, el grupo acil graso para el ácido graso CH3 (CH2) e^??? (ácido octanoico) es (¾((¾) 6C0- (grupo octanoilo) (Ri=7) . Por lo tanto, la descripción en la presente relacionada a ácidos grasos en consecuencia también se relaciona con los correspondientes grupos acil graso. Ejemplos de grupos acil graso son butanoilo, pentanoilo, hexanoilo, heptanoilo, octanoilo, nonanoilo, decanoilo, dodecanoilo, tetradecanoilo, hexadecanoilo, heptadecanoilo, octadecanoilo, eicosanoilo, docosanoilo, tetracosanoilo, hexacosanoilo, heptacosanoilo, octacosanoilo y triacontanoilo .

Los ácidos grasos útiles en la práctica de la invención pueden incluir ácidos grasos saturados (es decir, una cadena de alcano que no tiene dobles enlaces entre los carbonos de la cadena y que tiene el máximo número de átomos de hidrógeno) , y ácidos grasos no saturados (es decir, una cadena de alqueno o alquino que tiene al menos un doble y/o triple enlace entre los carbonos de la cadena, respectivamente). Ejemplos de ácidos grasos no saturados son monosaturados (MUFA) si sólo hay un doble enlace presente en la cadena, polienoico (o ácidos grasos poliinsaturados, PUFA) si la cadena tiene dos o más dobles enlaces (v.gr., metileno-interrumpida, polimetileno-interrumpida, dienos conjugados, ácidos alénicos, ácidos cumulénicos) , y acetilénico si la cadena contiene un triple enlace. Otros ejemplos de ácidos grasos insaturados son ácidos grasos omega-3 (n-3) , omega-6 - - (n-6) , y omega-9 (n-9) . Ejemplos de ácidos grasos insaturados (es decir, Ri es un alqueno o alquino) que se pueden usar para proveer el componente Ri-CO- de los compuestos de la invención se listan en la Tabla 2.

Tabla 2: Ácidos grasos insaturados.

Otros tipos menos comunes de ácidos grasos se pueden usar en la preparación de compuestos de la invención, que incluyen aquellos que tienen otros tipos de grupos en sus - -cadenas hidrocarbonadas además de metilo. Ejemplos de grupos no metilo que pueden estar en la cadena son grupos éter, carboxílico, cetona, éster, y aldehido. Otros ejemplos de ácidos grasos menos comunes son aquellos que tienen cadenas que tienen grupos ramificados además de hidrógeno. Ejemplos de ácidos grasos alternativos que se pueden usar en la invención son hidroxiácidos grasos, ácidos dicarboxilicos, carbonatos de ácido grasos, diviniléter ácidos grasos, ácidos grasos que contienen azufre, amidas de ácidos grasos, etoxi y acetoxi ácidos grasos, cetoácidos grasos, aldehido ácidos grasos, ácidos grasos halogenados (v.gr., F, Cl, Br) , ácidos grasos nitrados, ácidos grasos de cadena ramificada, ácidos grasos de cadena mono o multiramificada, metoxiácidos grasos ramificados, hidroxiácidos grasos ramificados (v.gr., ácido micólico) , ácidos grasos que contienen anillos, ácidos de ciclopropano, ácidos de ciclobutano (v.gr., laderanos) , ácidos de ciclopentilo, ácidos furanoideos, ácidos de ciclohexilo y hexenilo, ácidos fenil y benzoico alcanoicos, ácidos de epóxido, peróxidos grasos cíclicos, y ácido lipoico.

Aunque compuestos de la presente invención se pueden preparar usando los ácidos grasos descritos en la presente, otros formatos para preparar los compuestos podrían resultar fácilmente evidentes para técnico en la materia. Por lo tanto, cuando la presente divulgación describe el - -componente Ri-CO- de la fórmula Ri-CO-NH-R2 en términos de ácidos grasos y producción de los mismos, dicha divulgación no limita los compuestos a tener que ser sintetizados a partir de ácidos grasos per se. Donde otros métodos de síntesis se aplican para producir compuestos de la invención, también es útil y comprensible caracterizar el componente Rico- con respecto a su carácter ácido graso o grupo acil graso .

En la materia se encuentra bien entendido que el componente Ri-CO-NH- de la fórmula Ri-CO-NH-R2 puede ser derivado a partir de o descrito como una amida grasa (también conocida como amida de ácido graso o alquilamida) , por ejemplo. Las amidas grasas se pueden producir por condensación de un ácido graso, tal como se describe en la presente, con una amina (v.gr., amoníaco, amina primaria, amina secundaria). Ejemplos de amidas grasas que se pueden usar para proveer el componente Ri-CO-NH- de la fórmula Ri~CO-NH-R2 resultan fácilmente evidentes en vista de los ejemplos descritos de ácidos grasos. Una lista no limitante de amidas grasas incluyen pentanamida (valeramida) , hexanamida (caproamida) , octanamida (caprilamida ) , nonanamida (pelargonamida) , decanamida (capramida) , dodecanamida (lauramida), tetradecanamida (miristamida) , palmitamida, araquidamida, behenamida, estearamida, oleamida, erucamida, y recinoleamida .

Se pueden usar aminoácidos y derivados de los mismos en la preparación de la porción-NH-R2 de la fórmula Ri-CO-NH-R2 de los compuestos de la invención. Ejemplos de aminoácidos que se pueden usar son, en ambas formas L- y D-, alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, glutamina, ácido glutámico, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, y valina. Otros ejemplos de aminoácidos son norleucina, norvalina, alfa-aminooctanoato, beta-metilfenilalanina, alfa-aminofenilacetato, ornitina, taurina, carnitina, ácido ?-aminobutírico (GABA) , L-DOPA (L-3, 4-dihidroxifenilalanina) , hidroxiprolina, selenometionina, y selenocisteína . Los aminoácidos tienen un carbono central (el carbono alfa, Ca) que está unido a un grupo amino, grupo ácido carboxílico, y un grupo lateral (R) . La estructura general de un aminoácido libre es como sigue: Los técnicos en la materia podrán reconocer que el grupo amino unido al carbono alfa de un aminoácido podría ser usado para proveer la porción -NH de la fórmula Ri-CO-NH-R2, en cuyo caso R2 podría comprender o consistir del carbono alfa, grupo lateral, y. grupo carboxílico del aminoácido. Un ejemplo de un compuesto que tiene la fórmula R1-CO-NH-R2 con - -la porción-NH-R2 del mismo derivada de un aminoácido puede ser ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico: En este ejemplo, la porción -NH-R2 puede ser derivada de leucina. Como alternativa, las personas con experiencia también pueden reconocer que el grupo amino tal como existe en ciertos grupos laterales de aminoácidos (v.gr., arginina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, prolina, triptofano) se pueden usar para proveer la porción — H de la fórmula R1-CO-NH-R2 , en cuyo caso R2 podría comprender o consistir del carbono alfa, grupo carboxílico, grupo amino, y el resto del grupo lateral del aminoácido.

Derivados de aminoácidos incluyen derivados de sal y derivados que carecen del grupo amino o del grupo carboxílico unido al carbono alfa. Otros ejemplos son aquellos aminoácidos modificados en sus grupos laterales, tal como por esterificación o amidación. Un ejemplo de un compuesto que tiene la fórmula R1-CO-NH-R2 con la porción -NH-R2 del mismo derivado de un análogo de aminoácido puede ser N-isopentiloctanamida : En este ejemplo, la porción -NH-R2 puede ser derivada de una - -leucina que carece del grupo carboxilo (COOH) que está unido de otro modo al carbono alfa.

El grupo lateral de un aminoácido o derivado de aminoácido, para el cual la porción-NH-R2 de la fórmula Ri-CO-NH-R2 puede ser derivada o de otro modo parecerse, puede ser cargado positivamente, cargado negativamente, polar, polar no cargado, no polar, hidrófobo, ácido, básico, alifático, o neutro .

En la materia está bien entendido cómo se pueden producir los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, los métodos de síntesis pueden incluir la condensación o unión a un ácido graso (v.gr., aquellos descritos en la presente) con un aminoácido o un compuesto relacionado con aminoácido. La publicación de solicitud de patente US 2008/0200704, la cual se incorpora a la presente a modo de referencia en su totalidad, describe un ejemplo de este tipo de síntesis orgánica. Además, las personas con experiencia podrían reconocer cómo se podría aplicar la metodología descrita más adelante (ejemplos) en relación a la síntesis de ácido 4-metil-2-- (octanoilamino) pentanoico y N-isopentiloctanamida para la preparación de otros compuestos para la práctica de la invención.

Debe resultar evidente que cuando la presente descripción se refiere a segmentos de fórmula derivados de un aminoácido o cualquier otra porción o grupo, dicha - -descripción se refiere a ambos productos que de hecho se produjeron usando dicho aminoácido, grupo o porción, asi como a productos producidos a partir de otros componentes. En los últimos ejemplos, podría ser útil referirse al producto final con respecto a grupos en él en base a su similitud o coincidencia con ciertos grupos químicos tales como aminoácidos .

La porción-NH-R2 de la fórmula Ri-CO-NH-R2 puede ser considerada como un casquete, grupo terminal, o grupo bloqueante del grupo Ri-CO- acil graso. En este sentido, la porción -NH-R2 previene que el grupo acil graso forme un éster con un grupo alcohol (R-OH) . Debido a que el grupo acilo es una unión amida, su carbono carboxilo no es susceptible o es menos susceptible a ataque nucleofilo por un electrófilo tal como un alcohol.

Ejemplos de compuestos que se pueden usar en la presente invención son parcialmente o enteramente lipófilos (hidrófobos) y por debajo de un peso molecular de aproximadamente 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, o 600. En general, la lipofilia de los compuestos puede ser provista en gran medida por el grupo Ri . Aquellos compuestos de la invención que son parcialmente lipófilos pueden ser polarizados en aquellos en donde el grupo Ri es de un carácter hidrófobo y el grupo R2, opcionalmente junto con el núcleo intermediario -CO-NH- comprende un poco de carácter - -hidrófilo. Los compuestos de la presente invención y/o sus componentes Ri o R2 pueden ser aproximadamente 100%, 95%, 90%, 85%, 80%, 75%, 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, o 30% lipófilos o hidrófobos.

Otros ejemplos de la presente invención son compuestos que tienen la fórmula R1-CO-NH-R2 de acuerdo a la descripción en la presente y que tienen la misma actividad (v.gr., actividad lipolitica) como ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico o N-isopentiloctanamida, o al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%,, 98%, o 99% de la actividad de cualquiera de estos compuestos.

Todas las formas de realización de los compuestos de la invención pueden estar en el estado "aislado". Por ejemplo, un compuesto "aislado" es uno que ha sido completamente o parcialmente purificado. En algunos casos, el compuesto aislado será parte de una composición mayor, sistema amortiguador o mezcla de reactivo. En otras circunstancias, el compuesto aislado puede ser purificado hasta homogeneidad. Una composición puede comprender el compuesto a un nivel de al menos aproximadamente 50, 80, 90, o 95% (en base molar o base de peso) de todas las otras especies que también están presentes en la misma. Se pueden usar mezclas de los compuestos descritos en la práctica de los métodos provistos por la invención.

Formas de realización adicionales de la presente invención están dirigidas a métodos para usar los compuestos descritos en la presente en formulaciones o como agentes terapéuticos, por ejemplo. Estos métodos pueden involucrar el uso de un único compuesto, o compuestos múltiples en combinación (es decir, una mezcla) . En consecuencia, ciertas formas de realización de la invención están dirigidas a medicamentos que comprenden compuestos descritos en la presente, y métodos para fabricar dichos medicamentos.

En ciertos casos, la composición de la invención puede ser administrada con dispositivos colocados sobre, en, o por debajo de la piel. Dichos dispositivos incluyen parches transdérmicos, implantes, e inyecciones (v.gr., mesoterapia) que liberan las sustancias de un modo tal de entrar en contacto con la piel o folículo piloso por mecanismos de liberación pasiva o activa. La sustancia puede ser aplicada, por ejemplo, tópicamente a la epidermis a intervalos regulares, tal como una o dos veces por día, en un vehículo adecuado en una concentración eficaz. Una o más inyecciones en la piel ofrecen otra ruta para la administración de péptidos de la invención a la piel o cualquier otro tejido.

Las composiciones usadas para administrar compuestos en los métodos descritos en la presente pueden estar en la forma de un aerosol, emulsión, líquido, loción, crema, pasta, ungüento, polvo, espuma, u otra formulación - -farmacéuticamente aceptable. Además, los compuestos pueden ser administrados usando formulaciones menos involucradas tal como agua desionizada/destilada, PBS o soluciones salinas médicas estándares. Generalmente, una formulación farmacéuticamente aceptable podría incluir cualquier vehículo adecuado para uso sobre la piel o superficie mucosa humana. Dichos vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen etanol, dimetilsulfóxido, glicerol, sílice, alúmina, almidón, y vehículos y diluyentes equivalentes. La formulación opcionalmente puede tener atractivo cosmético, y/o contener otros agentes tales como retinoides u otros péptidos que pueden actuar como adyuvantes para la acción terapéutica de los péptidos de la invención. También se pueden agregar antibióticos a la formulación con el objetivo de evitar infección, permitiendo de este modo que ocurran los procesos de curación máxima. Se pueden usar péptidos terapéuticos y/o cosméticos en conjunto con los compuestos de la invención. La concentración del (los) compuesto (s) en la composición puede ser entre aproximadamente 0.1 µ9/p?]-? y aproximadamente 50 g/mL o entre aproximadamente 0.1 \xq/ y aproximadamente 100 g/mL; sin embargo la concentración final que se emplea puede variar por fuera de estos rangos, dependiendo de la naturaleza del tejido objetivo, de la bioactividad del compuesto de la invención y del uso de cualquier adyuvante o técnica para obtener una mejor absorción de la composición. - - Dichas determinaciones están bien dentro del estado de la técnica. Por ejemplo, la concentración de los compuestos que se usan en la práctica de la presente invención puede ser de aproximadamente 0.1, 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 200, 500, o 1,000 pg/mL.

La administración de los compuestos de la invención y composiciones asociadas se puede hacer a humanos y animales, incluyendo a todos los mamíferos (v.gr., cerdos, vacas, caballos, ovejas, cabras, ratones, ratas, gatos, perros, hurones, primates) . La aplicación también se puede hacer en combinación con materiales típicos y/o experimentales tales como injertos de tejido, productos de cultivo tisular, oxígeno y apositos. En general, la composición se puede administrar de manera tópica, de manera oral, de manera trans-dérmica, de manera sub-cutánea, de manera intramuscular, de manera sistémica, o por cualquier otro método conocido por los técnicos en la materia como útil para administrar los compuestos de la invención al tejido objetivo. Las composiciones también se pueden aplicar de una forma in vitro o ex vivo, ya sea a células o injertos de pacientes creciendo en cultivo, por ejemplo.

Debido a su pequeño tamaño, los compuestos de la invención se espera que sean capaces de ganar por si mismos un nivel de permeabilidad a través de la piel; sin embargo, se pueden usar ciertas técnicas para amplificar este - -movimiento. Por ejemplo, se pueden agregar grupos laterales lipófilos (non-polares) a los compuestos, o los compuestos se pueden administrar a la piel en un excipiente lipófilo, con el objetivo de mejorar la accesibilidad del compuesto al estrato córneo para permitir la traslocación hacia las capas epidérmicas inferiores. De esta forma, dichas modificaciones lipófilas se pueden considerar como en posesión de un efecto pro-fármaco. Se pueden usar en el excipiente mej oradores de la permeabilidad tales como solventes y tensioactivos conocidos para permitir una mejor absorción del compuesto. Las técnicas especiales que son útiles para mejorar el acceso del compuesto al tejido objetivo/lesión incluyen a, regímenes de inyección, iontoforesis, electroforesis y ultrasonido. Estos tratamientos resultan en diferentes efectos (v.gr., cavitación, mezclado, incremento de temperatura) que pueden mejorar la permeación de los compuestos en la piel u otro tejido objetivo.

Componentes que generalmente se incorporan en preparaciones para el cuidado de la piel son bien conocidos en la materia. Además del componente de compuesto bioactivo, las composiciones de la presente invención pueden contener otros agentes activos tales como niacinamida, fitantriol, farnesol, bisabolol y ácido salicilico. Ciertos agentes activos adicionales actúan sinérgicamente con el componente de compuesto bioactivo, o mejoran la vida útil de la - -formulación .

Se pueden incluir agentes lipoliticos en las composiciones que comprenden un compuesto como se describe en la presente. Ejemplos de agentes lipoliticos son carnitina, resveratrol, isoproterenol, aminofilina, teofilina, cafeína, derivados de xantina, teobromina, forskolina, dibutiril AMP cíclico, inhibidores de fosfodiesterasa de AMP cíclico, epinefrina, catecolaminas , niacinamida y pentoxifillina . Composiciones de la invención también pueden comprender ciertos extractos de plantas/vegetales que son conocidos por actuar como agentes para adelgazar. Por ejemplo, en la patente US 4,795,638 (que se incorpora a la presente por referencia en su totalidad) se expone una composición cosmética termo adelgazante que contiene un extracto vegetal soluble en aceite que tiene acción adelgazante. Representantes de estos extractos vegetales solubles en aceite son los extractos vegetales que incluyen a los de hiedra común (Hederá helix) , árnica (Arnica montana) , romero (Rosmarinus officinalis N) , caléndula (Caléndula officinalis) , salvia (Salvia officinalis N) , ginseng (Panax ginseng) , hierba de San Juan (Hypericum perforatum) , rusco (Ruscus aculeatus) , reina de los prados (Filipéndula ulmaria L) y té de Java (Ortosiphon stamineus Benth) .

Los agentes lipófilos que se incluyen en la práctica de la invención pueden ser aquellos que inducen degradación de las reservas lipídicas de los adipocitos (es decir, células grasas) u otras células, o aquellos que inducen degradación de lipidos que son extracelulares (es decir, que no están comprendidos en los depósitos de células grasas) . La actividad lipolitica total de un compuesto de la invención y otro agente lipolitico, cuando están en combinación, puede ser mayor que sus actividades propias respectivas cuando se los usa en forma separada uno de otro (es decir, sinergismo) . La lipólisis se puede referir al metabolismo o degradación de tri-, di-, y/o mono-glicéridos a glicerol y ácidos grasos libres. También, la lipólisis puede abarcar la degradación de triglicéridos a di- y/o mono-glicéridos y ácidos grasos libres.

Se pueden incluir agentes que exhiben un efecto adelgazante sobre la piel, con o sin actividad lipolitica, en la práctica de la invención. Un ejemplo de dicho un agente en uno que inhibe la lipogénesis, bloqueando por lo tanto la deposición de grasas.

En los casos en los que la composición va a estar en contacto con piel animal o humana, se deben elegir componentes adicionales que sean apropiados para la aplicación a tejido queratinoso (es decir, estable, de baja toxicidad, hipoalergénica) . El CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Segunda Edición (1992), que se incorpora a la presente por referencia en su totalidad, describe una amplia - -variedad de ingredientes cosméticos y farmacéuticos no limitantes que se usan comúnmente en la industria del cuidado de la piel que son apropiados para usar en las composiciones de la presente invención. Ejemplos de dichos ingredientes incluyen a: abrasivos, absorbentes, componentes estéticos tales como fragancias, pigmentos, agentes de color/colorantes, aceites esenciales, sensibilizantes de la piel, astringentes, etc. (v.gr., aceite de clavo, mentol, alcanfor, aceite de eucalipto, eugenol, lactato de mentilo, destilado de Hamamelis) , agentes anti-acné (v.gr., resorcinol, sulfuro, ácido silicilico, peróxido de benzoilo, eritromicina, zinc) , agentes anti-apelmazantes, agentes antiespuma, agentes anti-microbianos (v.gr., yodopropil butilcarbamato) , antioxidantes, aglutinantes, aditivos biológicos, agentes amortiguadores de pH, agentes de relleno, agentes quelantes, aditivos químicos, desnaturalizantes, analgésicos externos , polímeros (v.gr., co-polímero de eicoseno y vinil pirrolidona) , agentes opacantes, ajustadores de pH, propelentes, agentes reductores, secuestrantes, blanqueadores de la piel y agentes aclaradores (v.gr., hidroquinona, ácido kójico, ácido ascórbico [vitamina C] , fosfato de magnesio ascorbilo, ascorbil glucosamina) , agentes acondicionadores de la piel (v.gr., humectantes, incluyendo a misceláneos y oclusivos) , agentes balsámicos para la piel y/o curadores (v.gr., pantenol y derivados [v.gr., etil -pantenol] , aloe vera, ácido pantoténico y sus derivados, alantoína, bisabolol, glicirrinato dipotásico) , espesantes, materiales particulados, agentes estructurales y vitaminas. Muchos de estos agentes se describen en detalle en la patente US 6,492,326, que se incorpora a la presente por referencia en su totalidad, específicamente con respecto a las diferentes descripciones de ingredientes.

Las composiciones de la presente invención pueden contener un material particulado tal como un óxido metálico. Estos particulados pueden estar recubiertos o sin recubrir, cargados o sin cargar. Ejemplos no limitantes de materiales particulados que son útiles para preparar la presente invención incluyen oxicloruro de bismuto, óxido de hierro, mica, mica tratada con sulfato de bario y Ti02, sílice, nylon, polietileno, talco, estireno, polipropileno, co-polímero de etileno/ácido acrílico, sericita, óxido de aluminio, resina de silicona, sulfato de bario, carbonato de calcio, acetato de celulosa, dióxido de titanio, polimetil metacrilato, y mezclas de los mismos. Materiales particulados inorgánicos tales como Ti02, ZnO (óxido de zinc) , o Zr02 están comercialmente disponibles desde un varias fuentes. Los materiales particulados pueden estar presentes en la composición a niveles de entre 0.01% y 2% en peso, o entre 0.05% y 1.5% en peso, o entre 0.1% y 1% en peso (todas medidas aproximadas) .

- - Las composiciones de la presente invención pueden contener un agente acondicionador que se elige de humectantes, hidratantes, o acondicionadores de piel. Se puede emplear una variedad de estos materiales y cada uno puede estar presente en un nivel de aproximadamente entre 0.01% y 20%, o entre aproximadamente 0.1% y 10%, o entre aproximadamente 0.5% y 7% en peso de la composición (todas medidas aproximadas) . Estos materiales incluyen a, pero no como limitación, guanidina; urea; ácido glicólico y sales de glicolato (por ejemplo amonio y alquil amonio cuaternario) ; ácido salicilico; ácido láctico y sales de lactato (v.gr., amonio y alquil amonio cuaternario) ; aloe vera en cualquiera de sus variedades de formas (v.gr., aloe vera en gel) ; polihidroxi alcoholes tales como sorbitol, manitol, xilitol, eritritol, glicerol, glicerina, hexanotriol, butanotriol, propileno glicol, butileno glicol y hexileno glicol; polietileno glicoles; azúcares (v.gr., melibiosa) y almidones; azúcar y derivados de almidón (v.gr., glucosa alcoxilada, fructosa, glucosamina) ; ácido hialurónico; lactamida monoetanolamina; acetamida monoetanolamina; pantenol; alantoina; jalea de petróleo; y mezclas de los mismos .

Las composiciones de la presente invención pueden contener un agente estructural, que se puede usar para preparar una emulsión de aceite en agua. Sin estar limitados - -por ninguna teoría, se cree que el agente estructural ayuda proveyendo características reológicas a la composición que contribuyen a la estabilidad de la composición. Por ejemplo, el agente estructural tiende a ayudar en la formación de estructuras de red de gel de cristal líquido. El agente estructural también puede funcionar como un emulsionante o tensioactivo . La presente invención puede contener entre aproximadamente 0.1% y 20%, entre aproximadamente 0.1% y 10%, o entre aproximadamente 0.5% y 9% de uno o más agentes estructurales en peso de la composición (todas medidas aproximadas) .

Los agentes estructurales que se pueden incorporar a la presente invención se eligen de ácido esteárico, ácido palmítico, alcohol estearílico, alcohol cetílico, alcohol behenílico, el éter de polietileno glicol de alcohol estearílico que tiene un promedio de entre aproximadamente 1 y aproximadamente 5 unidades de óxido de etileno, en donde el éter de polietileno glicol del alcohol cetílico tiene un promedio de entre aproximadamente 1 y aproximadamente 5 unidades de óxido de etileno, y mezclas de los mismos. Otros agentes estructurales que se pueden usar en la presente invención se eligen de alcohol estearílico, alcohol cetílico, alcohol behenílico, en donde el éter de polietileno glicol del alcohol estearílico tiene un promedio de aproximadamente 2 unidades de óxido de etileno (estearet-2 ) , el éter de - -polietileno glicol del alcohol cetílico tiene un promedio de aproximadamente 2 unidades de óxido de etileno, y mezclas de los mismos.

Métodos : La presente invención está dirigida además a métodos para usar un compuesto que se describe en la presente para tratar la piel. Dicho tratamiento se puede dirigir a la epidermis, dermis, o capa subcutánea de la piel, por ejemplo. El propósito de dicho tratamiento puede ser reducir la cantidad de grasa subcutánea o prevenir la acumulación de grasa subcutánea. Un ejemplo de tratamiento de la piel es la administración de un compuesto a la piel sobre una capa subcutánea que comprende una distribución de grasa que es anormal con respecto al tejido subcutáneo normal. Otro ejemplo de tratamiento de la piel es la administración de un compuesto a la piel sobre una paca subcutánea que es propensa a desarrollar una distribución de grasa que es anormal con respecto al tejido subcutáneo normal. La celulitis (también conocida como adiposis edematosa, dermopaniculosis deformante, estado de protrusus cutis, lipodistrofia ginoide) es un ejemplo de una condición de la piel que se puede tratar o prevenir mediante estos métodos. Las áreas de la piel que son propensas a desarrollar celulitis, para las cuales la presente invención puede estar dirigida, son los muslos, glúteos, región pélvica, miembros inferiores y abdomen, por - -ejemplo. Sin estar limitados por ninguna teoría en particular, los compuestos de la invención tratan o previenen trastornos de deposición/acumulación anormal de grasa en la piel mediante (i) estimulación de la lipólisis en los adipocitos, particularmente esos adipocitos del tejido subcutáneo, y/o mediante (ii) reducción o prevención de la adipogénesis en el tejido subcutáneo.

Los métodos de la invención también están dirigidos a tratar o prevenir otros trastornos de deposición anormal de grasa en la piel además de celulitis. Por ejemplo, se puede usar un compuesto para tratar o prevenir lipedema, que también es conocido como un síndrome de grasa doloroso. La invención también se puede dirigir a tratar o prevenir lipomas u otros crecimientos grasos. La invención también se puede dirigir a tratar o prevenir exceso de peso localizado. La invención también se puede dirigir a bloquear o reducir la lipogénesis o adipogénesis (es decir, promover la anti-lipogénesis o anti-adipogénesis) . Una característica de anti-adipogénesis de la invención es la habilidad para reducir la acumulación de lípidos en el citoplasma de los adipocitos. Como resultado de este efecto a nivel celular, otra característica de anti-adipogénesis de la invención es la habilidad para reducir el crecimiento de tejido adiposo o hipertrofia. Aun otra característica a lo largo de estas líneas es la habilidad para bloquear o reducir la diferenciación de pre-adipocitos o fibroblastos a adipocitos. Por "reducción," "inhibición," "bloqueo," o "prevención" como se denominan en la presente, se entiende que un compuesto disminuye la existencia, severidad, tamaño, volumen, o síntomas asociados de una condición o actividad en al menos aproximadamente 7.5%, 10%, 12.5%, 15%, 17.5%, 20%, 22.5%, 25%, 27.5%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 90%, o 100% en comparación con lo que la condición normalmente mostraría sin la aplicación del compuesto o composición que comprende el compuesto.

Otra forma de realización de la invención es usar un compuesto como se describe en la presente para estimular la lipólisis en células tales como adipocitos, particularmente adipocitos de la piel o capa sub-cutánea de la piel. Dicho método es útil para tratar o prevenir (inhibir) trastornos tales como la celulitis. Como se denomina en la presente, estimular, inducir, activar, elevar, o aumentar la lipólisis en células tales como adipocitos significa incrementar el nivel de lipólisis en dichas células por sobre un nivel basal de lipólisis (v.gr., estado de reposo sin compuesto agregado) o un nivel de lipólisis inducida por agentes no activos tales como agua. Dicho incremento sería de al menos aproximadamente 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 60%, 75%, 80%, 90%, 100%, 150%, 200%, 300%, 400%, 500%, 1, 000% o 10, 000%.

- - Los técnicos en la materia comprenderán que, cuando el tratamiento se dirige finalmente a la capa subcutánea de la piel, las formulaciones se pueden aplicar a la piel que está por arriba de la región subcutánea objetivo. Alternativamente, se pueden aplicar métodos tales como mesoterapia que emplean un régimen de inyecciones para colocar directamente un compuesto terapéutico o cosmético en las capas más profundas de la piel tal como la capa subcutánea .

Los compuestos que se exponen en la presente incrementan la producción de glicerol por parte de células tales como adipocitos. Sin estar limitados por ninguna teoría en particular, esta actividad puede estar relacionada con la actividad lipolítica de los compuestos, que estimula el metabolismo/degradación de triglicéridos (también di- y mono-glicéridos) a glicerol y ácidos grasos libres. Ciertas formas de realización de la invención se dirigen a incrementar la producción de glicerol por parte de los adipocitos en la piel, particularmente en la capa subcutánea de la piel, mediante tratamiento de la piel con uno o más compuestos expuestos en la presente. El incremento en la producción de glicerol en la piel es beneficioso dados sus efectos humectantes y protectores. Esta característica de la invención es un beneficio agregado al adelgazamiento y tonificación de la piel que ocurre como resultados de la - -lipólisis de los depósitos de grasa de la piel. Los individuos con piel seca o piel fácilmente irritable, por ejemplo, se beneficiarán con la producción de glicerol efectuada por parte de la invención, como también lo harán los que buscan mantener el tono normal de la piel y la suavidad.

Será evidente que los métodos que se exponen se pueden usar terapéuticamente o cosméticamente. Con respecto a este último uso, la presente invención mantiene características normales, saludables de la piel, tal como el tono, elasticidad, hidratación, coloración, firmeza y suavidad. Todas estas cualidades se pueden degradar con el incremento de la deposición de grasa subcutánea.

Aunque esta exposición por lo general se dirige a describir la invención como estimuladora de la lipólisis en células, también se debe comprender que la invención actúa inherentemente contra la lipogénesis, cuyo proceso resulta en la producción de esterificación de ácidos grasos con glicerol rindiendo tri-, di-, y mono-glicéridos .

Los tejidos que pueden ser objetivo en la práctica de la presente invención son la piel y tejidos mucosos asociados de la piel. Un tejido mucoso asociado de la piel es cualquier tejido organizado de una manera similar a la piel, que contiene células epiteliales, y que está directamente continuo con la piel. Ejemplos de dichos tejidos son las superficies oral, nasofaríngea, aural, anal y urogenital, asi como también la conjuntiva palpebral del ojo. Otros tejidos que pueden ser objetivo en la práctica de la presente invención son los que derivan del ectodermo, mesodermo y endodermo, o que comprenden células epiteliales, células mesenquimáticas (v.gr., fibroblastos), células musculares, o células nerviosas (v.gr., neuronas). Otros órganos, sistemas de órganos y tejidos alcanzados por la invención son, por ejemplo, el sistema circulatorio (v.gr., corazón, sangre, vasos sanguíneos), sistema digestivo (v.gr., glándulas salivales, esófago, estómago, hígado, vesícula biliar, páncreas, intestinos delgados y grueso, recto) , sistema endocrino (v.gr., hipotálamo, glándula pituitaria, glándula pineal, tiroides, paratiroides, glándulas adrenales) , sistema tegumentario (v.gr., piel, cabellos, uñas), sistema linfático (v.gr., nodulos linfáticos y vasos), sistema inmune (v.gr., amígdalas, adenoides, timo, bazo), sistema muscular (v.gr., músculo cardiaco, músculo liso, músculo esquelético) , sistema nervioso (v.gr., cerebro, cordón espinal, nervios periféricos), sistema reproductor (v.gr., ovarios, trompas de Falopio, útero, vagina, glándulas mamarias, testículos, vasos deferentes, vesículas seminales, próstata, pene) , sistema respiratorio (v.gr., faringe, laringe, tráquea, bronquios, pulmones, diafragma), sistema esquelético (v.gr., huesos, cartílago, ligamentos, tendones), y sistema excretor (v.gr., -riñones, uréteres, vejiga, uretra). Ciertas formas de realización de la invención están pensadas para la aplicación de un compuesto a uno de los tejidos anteriores (v.gr., piel) o células (v.gr., adipocito, queratinocito, célula epitelial, célula de piel, fibroblasto) de una manera que no induce toxicidad en las mismas.

Los siguientes ejemplos se incluyen para mostrar ciertas formas de realización de la invención.

Ejemplos Ejemplo 1: Síntesis de ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico (HB2031) Se usó el siguiente proceso para hacer reaccionar leucina con ácido octanoico para formar ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico, que se muestra en la figura 2A. Se agitó resina Fmoc-leucina- (ácido Fmoc-2-Amino-4-metil pentanoico) -Wang en 25% de piperidina en dimetilformamida (DMF) durante 20 minutos a temperatura ambiente. Después de filtrarse y lavarse con DMF seis veces, la prueba de Kaiser dio positiva (listo para acoplamiento) . El acoplamiento de ácido octanoico se llevó a cabo con tres equivalentes molares de grupos amino de resina de leucina seguido por cantidades molares iguales del ácido octanoico de hexafluorofosfato de benzotriazol-l-oxi-tris (pirrolidino) fosfonio (PyBop) e hidrato de hidroxibenzotriazol (HOBt) en DMF. Con el agregado de 1,3 equivalentes de diisopropiletil amina (DIEA) a los otros reactivos en la reacción, se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Después de filtrar la resina y lavar tres veces con D F y tres veces con DCM (diclorometano) la prueba de Kaiser dio negativa, lo que es indicativo de una reacción completa.

Se resuspendió la resina seca en ácido trifluoroacético (TFA) y agua (149:1) y se agitó durante 2 horas. Se filtró la resina y después se lavó tres veces con TFA. Los filtrados combinados se rotoevaporaron para eliminar el TFA. Se disolvió el producto en éter dietilico (Et20) y se extrajo tres veces con 5% de ácido acético en agua, agua, bicarbonato de sodio saturado en agua, y con agua. La fase de Et20 se secó sulfato de sodio anhidro, se filtró y el sulfato de sodio se lavó tres veces con Et20. Los filtrados combinados se rotoevaporaron a un sólido.

Ejemplo 2: Síntesis de N-isopentiloctanamida (HB2032) Se usó el siguiente proceso para sintetizar N-isopentiloctanamida (figura 2B) , que es un análogo del ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico. Se combinó ácido octanoico con una cantidad molar igual de N-isopentilamina en DCM (diclorometano) y se agitó durante cinco minutos. Se agregó hexafluorofosfato de benzotriazol-l-oxi-tris (pirrolidino) fosfonio (PyBop) e hidroxibenzotriazol hidrato (HOBt) equivalente a las cantidades molares de los primeros dos componentes seguido por 1,3 equivalentes de - -diisopropiletil amina (DIEA) y se agitó la reacción durante 2 horas a temperatura ambiente. Se extrajo la solución tres veces con ácido acético al 5% en agua, agua, bicarbonato de sodio saturado en agua y con agua. La fase DCM se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y se lavó el sulfato de sodio tres veces con DCM. Los filtrados combinados se rotoevaporaron a un aceite.

Ejemplo 3: Medida de los efectos del ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y N-isopentiloctanamida sobre la lipólisis y adipogénesis Lipólisis : Como se muestra en la figura 3, tanto los ácidos grasos libres como glicerol son los productos de la lipólisis y por lo tanto la medida de liberación de ácidos grasos libres se correlaciona directamente con el grado de actividad lipolitica en los adipocitos. El grado de liberación de ácidos grasos se puede usar para medir el nivel relativo de liberación de glicerol dada esta correlación. Se usaron los siguientes métodos para determinar el efecto del ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y la N-isopentiloctanamida sobre la lipólisis en adipocitos.

Se determinó la inducción de lipólisis en adipocitos diferenciados en adipocitos 3T3-L1 usando un conjunto de componentes para ensayo de ácidos grasos fabricado por BioVision (Mountain View, CA) (Free Fatty Acid - - Quantification Kit, Número de Catálogo K612-100) . La liberación de ácidos grasos se correlaciona con un incremento en el nivel de glicerol. Los adipocitos para estos ensayos se prepararon como sigue. Se adquirieron pre-adipocitos murinos 3T3-L1 de American Type Culture Collection (ATCC) (CL-173) . Se cultivaron las células en medio completo (medio Dulbecco's Modified Eagle 1 s formulado por ATCC suplementado con 10% de suero fetal bovino) y se dejaron alcanzar 100% de confluencia. La inducción de diferenciación o adipogénesis se llevó a cabo en medio completo. En el día 0, se trataron las células con medio completo con agentes de inducción (100 pg/ml de isobutilmetixantina (Sigma, St. Louis, MO) , 5 g/ml de insulina y 2 g/ml de dexametasona) . En el día 3, se cambiaron las células a medio completo con 5 g/ml de insulina y se incubaron entre 2 y 3 días. Luego, se mantuvieron las células en medio completo entre 3 y 6 días cuando la mayoría de las células desarrolló gotas de lípidos intracelulares observables.

Para analizar los efectos del ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y la N-isopentiloctanamida sobre la lipólisis, se trataron las células (los adipocitos preparados previamente) con cualquiera de estos compuestos a 100 µg/ml. Alternativamente, se trataron las células durante una noche con ciertas sustancias (v.gr., resveratrol, isoproterenol, aminofilina, teofilina) (100 g/ml) previamente conocidas como inductores de lipólisis. Se midió el sobrenadante de cada uno de los cultivos para ver liberación relativa de glicerol según estimación usando el conjunto de componentes de cuantificación de ácidos grasos libres de BioVision siguiendo las instrucciones del fabricante.

La figura 4 muestra que el ácido 4-metil-2-(octanoilamino) pentanoico (HB2031) y la N-isopentiloctanamida (HB2032) indujeron la producción de ácidos grasos libres en adipocitos (según determinación por medida de producción de ácidos grasos libres) en un mayor grado que los otros compuestos probados incluyendo isoproterenol, aminofilina y teofilina. Cuando el ensayo anterior se llevó a cabo por triplicado con isoproterenol, HB2031 y HB2032, los últimos dos compuestos demostraron ser significativamente más activos que el isoproterenol (figura 5) . Tanto HB2031 como HB2032 fueron no citotóxicos para los adipocitos 3T3-L1 en las concentraciones usadas para estimular la lipólisis (datos no mostrados) .

Adipogénesis : La producción de gotas de lipidos intracelulares en adipocitos es una característica de la adipogénesis. Por lo tanto, se monitoreó la adipogénesis mediante tinción para gotas de lipidos en células usando el Adipogenesis Assay Kit de Cayman (Ann Arbor, MI) siguiendo las instrucciones del fabricante. Este ensayo tiñe los lipidos celulares con el pigmento Oil red O.

Para analizar los efectos del ácido 4-metil-2-(octanoilamino) pentanoico y la N-isopentiloctanamida sobre la adipogénesis, se agregaron individualmente estos compuestos a un cultivo celular cuando se indujo la adipogénesis (dia 0) (referirse al protocolo anterior) y se mantuvieron en el cultivo durante el proceso completo de diferenciación. El control positivo en este ensayo para formación de adipocitos fue un cultivo celular que se había inducido para sufrir diferenciación desde pre-adipocito a adipocito sin el agregado de un compuesto de prueba (figura 6B) . Después de un periodo inducción de 7 días, entre 50 y 70% de las células en el control positivo se volvieron totalmente diferenciadas con acumulación visible de múltiples gotas de lípidos citoplasmáticas según se vio bajo un microscopio de disección. El control negativo fue un cultivo celular que se incubó en medio completo sin agentes de inducción de adipogénesis (figura 6A) .

La N-isopentiloctanamida (HB2032) inhibió la diferenciación de células a adipocitos mediante la disminución de la formación de células agrandadas así como también de la acumulación intracelular de gotas de lípidos. Estos efectos se observaron en una forma dependiente de la concentración (Figuras 6C, D, E) (referirse a la leyenda de la figura) y en comparación con el control positivo para - -inducción de adipocitos (figura 6B) . De las células gue se trataron con una baja concentración de HB2032 (v.gr., figura 6C) , un número significativo se volvió diferenciado; sin embargo la intensidad de la formación de lipidos celulares se redujo significativamente según lo indicado por una menor tinción con Oil red 0.

Ejemplo 4: Medida de niveles de citotoxicidad de ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico y N-isopentiloctanamida Se usó el ensayo de EpiDerm MTT (MatTek, Ashland, MA) para determinar si el ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico (HB2031) y la N-isopentiloctanamida (HB2032) exhiben algún nivel de citotoxicidad hacia el tejido de piel. El EpiDerm Skin Model consiste en capas basal, espinosa, granular y cornificada organizadas gue son análogas a las que se encuentran in vivo y que exhiben características morfológicas y de crecimiento de tipo in vivo que son uniformes y altamente reproducibles . Como se muestra en la figura 7, no hubo diferencias de viabilidad celular (determinada por OD57onm) entre tratamientos con HB2031 o HB2032 en comparación con el vehículo de glicerina. Ambos compuestos tampoco mostraron toxicidad hacia el mismo tejido de piel cuando se trataron a 1 mg/ml durante 24 horas (datos no mostrados) .

Todas las composiciones o métodos que se exponen y reivindican en la presente se pueden hacer y ejecutar sin una - -excesiva experimentación a la luz de la presente exposición. Aunque las composiciones y métodos de esta invención se han descrito en términos de ciertas formas de realización, será evidente para los técnicos en la materia que se pueden aplicar variaciones a las composiciones y/o métodos y en los pasos o en la secuencia de pasos de los métodos que se describen en la presente sin alejarse del concepto, espíritu y alcance de la invención. Más específicamente, será evidente que se pueden sustituir los agentes que se describen en la presente por ciertos agentes que están tanto químicamente como fisiológicamente relacionados, con los que se obtendrían iguales o similares resultados. Todos dichos sustitutos y modificaciones similares evidentes para los técnicos en la materia se consideran dentro del alcance de la invención.

Todas las patentes y publicaciones identificadas en esta solicitud se incorporan a la presente por referencia en su totalidad.

Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Una composición para usar en el tratamiento de la piel de un mamífero, caracterizada porque comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde el compuesto comprende la fórmula: Ri-C (0) -NH-R2; en donde Ri comprende una cadena de entre 5 y 35 átomos de carbono, la porción Ri-C(O) de la fórmula es un grupo acil graso, y la porción NH-R2 de dicha fórmula comprende: (i) un aminoácido, en donde el grupo R2 comprende el carbono alfa, grupo carboxilo y grupo lateral de dicho aminoácido, y en donde el grupo NH se une al carbono alfa de dicho aminoácido; o (ii) un análogo de dicho aminoácido, en donde dicho análogo difiere de dicho aminoácido por la carencia del grupo carboxílico unido al carbono alfa del aminoácido, en donde el grupo R2 comprende el carbono alfa y grupo lateral de dicho aminoácido, y en donde el grupo NH está unido al carbono alfa de dicho análogo.

2. La composición de la reivindicación 1, caracterizada porque el grupo lateral de dicho aminoácido es hidrófobo .

3. La composición de la reivindicación 1, caracterizada porque dicho aminoácido es leucina, isoleucina, valina, o alanina.

4. La composición de la reivindicación 1, caracterizada porque dicho compuesto comprende la fórmula: (N-isopentiloctanamida) o sales farmacéuticamente aceptable de la misma.

5. La composición de la reivindicación 4 caracterizada porque dicho compuesto consiste en la fórmula: (N-isopentiloctanamida) o sales farmacéuticamente aceptable de la misma.

6. La composición de la reivindicación 1 caracterizada porque dicho compuesto comprende la fórmula: (ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico) o sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

7. La composición de la reivindicación 6, caracterizada porque dicho compuesto consiste en la fórmula: (ácido 4-metil-2- (octanoilamino) pentanoico) o sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

8. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque la cadena de Ri comprende entre 7 y 21 átomos de carbono.

9. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque el qrupo acil graso es un grupo octanoilo.

10. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 8 y 9, caracterizada porque R2 comprende entre 1 y 15 átomos de carbono.

11. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y 8 a 10, caracterizada porque R2 comprende entre 5 y 9 átomos de carbono y Ri comprende entre 5 y 13 átomos de carbono.

12. La composición de una de las reivindicaciones 1 y 8 a 11, caracterizada porque el grupo acil graso está saturado .

13. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, caracterizada porque se encuentra en forma de aerosol, emulsión, liquido, loción, crema, pasta, ungüento, polvo, o espuma.

1 . La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, caracterizada porque además comprende carnitina, resveratrol, isoproterenol, aminofilina, teofilina, o cafeína.

15. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizada porque se administra a la piel sobre una capa subcutánea que (i) comprende una distribución de grasa que es anormal con respecto al tejido subcutáneo normal; o (ii) es propensa a desarrollar una distribución de grasa que es anormal con respecto al tejido subcutáneo normal .

16. La composición de la reivindicación 15, caracterizada porque se administra a piel que comprende celulitis o piel que es propensa a desarrollar celulitis.

17. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizada porque es útil para incrementar la producción de glicerol por parte de una célula .

18. La composición de la reivindicación 17, caracterizada porque dicha célula es un adipocito o un pre-adipocito .

19. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizada porque es útil para reducir la adipogénesis por parte de una célula.

20. La composición de la reivindicación caracterizada porque dicha célula es un pre-adipocito adipocito .