TW201200678A - Method of recycling laccase and fiber enzyme from discarded growth bag for use in culturing white-rot fungus, and bleaching method applying in direct dye - Google Patents

Description

201200678 -六、發明說明： v 【發明所屬之技術領域】 本發明係有種自自腐真賊之廢棄太线回收漆酶及 纖維酶之方法及其應用於直接性染料之脫色方法，尤指—種自白腐真 菌裁培用之廢棄太空包巾隨漆酶，及朗敎業用直接性染劑脫色 之技術。 【先前技術】 • 臺灣一年栽培食藥用簟菇之廢棄太空包木屑約有12萬公噸，其中 以栽培香兹(仏始*卿泌如)之廢棄物約為5.4冑公嘲佔最大比例， 藥用簟細以松杉靈芝(如她葡红驟)為大宗，兹農對廢棄益類 木屑的處理方式大多採取直接傾倒或力σ以焚燒’往往造成環境的污染。 由於漆酶是-種含銅的聽蛋白，EC number為L 1〇. 3.2⑴表 不是乳化還原酵素；10 :表示酵素作用於diphen〇1類的化合物並 =之為氧化還原反應之電子提供者；3 :表示此酵素是以氧氣作為氧化 籲還原反應中的電子接受者）。而經研究發現，在白腐真針普遍存在漆 酶，能催化_物質的氧化還原反應，在木質素的生物降解中發揮著 重要的作用。漆酶的氧化基質極為廣泛，包括_及其衍生物、芳胺 及其仿生物、芳香細复及其衍生物等。漆酶多為外泌型的醋蛋白，單 體(monomer)大小約5()〜_ kDa’酵素分子通常必須結合銅離子作為 輔因子(cofactor)才會有催化活性，其活性邱値範圍在Μ』間⑷ 附件二參考文獻[u] : Wesenberg心.，2〇〇3)。漆酶在催化含紛物 質的氧化過程中會概㈣子，經電子傳_，以氧分子作為電子受 201200678 •體’其過程中會產生活性氧自由基(achvated oxygen species)如： v H0 ·，〇2· ’而受質本身則因為失去電子而成為正價自由基(cati〇n radical) ’此兩者皆可引發烧基—芳基的解離(aikyi_aryi cieavage) 和支鏈與^香環的解離（cleavage side chains and aromatic rings) ’反應最終產物則為水(如附件二參考文獻[12] : Le〇ntievsky eia/. ’ 1997)。當有氧化還原介質(red〇x mediat〇r)存在時，漆酶則 會氧化介質如2, 2’-連氮-雙（3-乙基苯并噻唑—6—磺酸），簡稱ABTS 鲁（2 ’ 2 Azino-bis - [3-ethylbenthiazoline sulfonic acid]) ' 1-羥基笨並二氮哇’簡稱 HBT (N-hydroxybenzotriazole)、N-羥基鄰 苯二曱醯亞胺，簡稱HPI(N-hydroxy-phthalimide)等，形成介質的自由 基形式 ABTS、ABTS、ΗΒΤ.、ΗΡΙ·(如附件二參考文獻[i3]:d，Acunzo 以沒/·，2002;如附件二參考文獻[i4]:j〇hannes and Majcherczyk， 2000)，自由基再進一步去氧化受質完成催化反應。再者，由於漆酶之 強氧化及木質素分解特性，其在應用上非常廣泛包括：（1)去除工業廢 鲁水之污染物毒性及進行水質淨化；（2)造紙業之紙漿漂白及改質； 紡織品之染整廢水處理及染料拔色；（4)分解土壤中之除草劑及農藥； (5)抗癌藥物製造之生物性催化劑；（6)作為化妝品之添加物。 近年來利用低成本之生物性廢棄物如玉米穗軸、榖物麩皮及果皮 來生產南成本之酵素已射為風潮·以凡>肥S 把⑽為生產菌 之固體發酵過程中等比混合小麥及大豆麩皮則在第28天可得到最高 漆酶(520 u/g)產量及第15天之最高ΜηΡ (14. 5 U/g)產量（如附件二 參考文獻[15]:Papinutti andForchiassin，2006)。另有學者利用柑 201200678 •橘果皮（2. 5g /250 mL)添加5福硫酸銅作為；>淡把切&之誘導 i生產培養基質，結果可得到最高之31768 U/L之漆酶(如附件二參考文 獻[16] . Rosales ei a人，2006);在以為生產 菌株下以香慧皮基質培養也可獲得i 57〇 U/L之漆酶產量。Eichl_a 杜从（2000)(如附件二參考文獻[17])發現 ostreatus 在稻桿中所分泌的木質素分解酶較液體培養時產量更高，若配合適當 的誘導物如二甲苯胺(Xylidine)，藜蘆基醇(veratryl alc〇h〇1)則可 以更進一步增加酵素的產量（如附件二參考文獻[18] : R〇driguez ® Couto et al., 2002) ° 白腐菌漆酶在染料脫色上之應用：靈芝财母^ WR-1漆酶 在含2%澱粉及〇. 125%酵母抽出物（yeast extract)之培養基中，可於 8小時内將96%合成紫紅色素脫色，且對各類合成染劑均有廣泛之脫色 效果’如附件一參考文獻[28] 撕娜KMK2所產生之熱 穩疋性43 kDa漆酶（25 U/mL·)則能將anthraqui none類染劑Remazo 1 I Brilliant Blue R (RBBR)於20小時内脫色達9〇%，且在有1禮氧化還 原媒介HBT下可於2小時内將diazo類染劑Remazol Black-5脫色達 77.4% (如附件二參考文獻[19] : Murugesan ei a人，2006)。利用香 菇玉米穗軸進行固態發酵產生之漆酶 (16 U/g)、ΜηΡ (2600 U/g)與LiP (<10 U/g)之混合酵素，可在缺锰 離子及雙軋水之條件下’於18天内對200 ppm濃度之Amido Black、

Trypan Blue、Methyl Green、RBBR、Methyl Violet、Ethyl Violet 及Poly R478各色染劑完全脫色，且對Bri 11 iant Cresy 1 Blue及Methy 1 201200678 -Blue染劑部分脫色（如附件二參考文獻[20] : Boer a/.，2004)。 v Isc/moderma resinosum所A ±之胞外漆酶(2H WL)可在添加氧北還 原介質HBT及violuric acid (VA)下，將紡織品上之反應性染料

Reactive Black 5 、 Reactive Blue 19 、 Reactive Red 22及Reactive

Yellow 15於pH 3〜4之酸性條件下完全脫色（如附件二參考文獻[2i]: Kokol a/.，2007)。肥之漆酶粗酵素液於添加氧化 還原介質VA時可於3分鐘内迅速對酸性染料c. I. Acid Red 97及C. I. 參 Acid Green 26脫色達90% (如附件二參考文獻[22] : Rodriguez Couto and Sanroman，2005)。近年來更有學者利用試驗設計之反應區面法 (response surface methodology，RSM)以沉必切如/-以所產 漆酶對反應性偶氮染劑Reactive Black 5 (BR-5)之最適化脫色條件進 行探討，其中影響脫色之變因分別為BR—5濃度25〜l〇〇mg/L、漆酶濃 度0.5~2·5 U/mL及氧化還原介質HBT濃度0.5〜1.5 ppm，經2448 小時三因子三階層試驗即可獲得最佳脫染之變因影響力數學方程式及 鲁高達84.4%之最適化脫色效果（如附件二參考文獻[19] : Murugeesan己广 5/.，2006)。 本發明所欲解決的課題，主要係鑑於台灣每年因為栽培蕈兹產生 大量的廢棄太空包木屑，造成環境的污染之缺失，有待加以改善。並 鑑於廢棄太空包木屑中存在可供工業充份利用的漆酶（laccase)及纖 維酶(cellulase)。本發明乃積極努力投入自白腐真菌（靈芝、香菇） 廢棄太空包回收漆酶（laccase)及纖維酶(ceiiuiase)之方法技術。其 主要包括以酸液洗浸萃取、壓榨、過濾等步驟製備混合酵素，從香菇

LSI 6 201200678 (A ei/afesL922)及松杉靈芝2^叫與3栽培後廢太空包中回收漆 酶’其活性分別為〇· 21〜0· 27及〇· 65〜0. 78 U/mL，且纖維酶活性分 別為6· 40〜8. 99及7.11〜8. 44 U/ mL。以回收漆酶0.1 U/ mL探討 其對合成直接性染料脫色之效率，結果該酵素可在6(rc高溫下，8小 時内分別對0.01%之工業用藍(Blue 3BL&BWL143)、褐（Br〇wn B2R) 與頁色合成Yellow GLS (YI)等四種直接性染料之脫色百分率為香菇 漆酶.36，93 ’ 25，應及松杉靈芝漆酶：3卜43，44，57% ;該回收 酵素右添加1 mM氧化還原媒介N_hydrQxybe腦加㈣卜⑽τ)，則 香雜酶可以對Blue 3BL及Yell〇w GLs之脫色百分率顯著提高2倍 及2. 7仏，此外，回收之漆酶酵素可以有效降低染料之cop達 3K 68. 5U。因此’本發明回收之漆酶可直接應用於紡織品之染料 拔色及廢水處理，其具有價格低廉、耐高溫及符合綠 重優點。 【發明内容】 本發明主要目的，在提供—種廢棄物再糊，無須耗費酵素生產 培養材料及時間，回收酵辛 工業之染整脫色的猶。 酵素活性高，可直接應用纺織 為達成上述目的’本發明所採的技術手段包括：⑷收集 卤裁培後廢棄太空包；（b) 液洗浸萃取；（d) __ ϋ棄太空包中之木_ ; (c)酸 代）備用即完成回收酵;;及(e)將敝該濾液冷藏（溫度約 【實施方式】 201200678 壹·本發明之特色及原理 ，根據調查資料顯示，臺灣一年栽培_之廢棄太空包木屬量有 119, 250公嘴，其中來自香雜培廢棄物約為％ _公嘲佔最大比 例。有鐘於香兹裁培太空包廢棄木屑數量龐大，亟待處理，以改善環 境，而且其中含有可供利用的漆酶，因此本發明人乃研發一種自白腐 真菌香菇Ue始·篇a/你L922)及松杉靈芝 栽培採收後廢棄太空包木屑中回收漆酶（laccase)及纖維酶 籲（cel lulase)之方法技術。 因此，本發明技術應用於香菇裁培廢棄太空包木屑回收酵素，具 有以下特色： ~ (1) 廢棄物再利用，無須耗費酵素生產培養材料及時間。 (2) 回收酵素方法簡單且酵素活性高，可直接應用紡織工業之染整 脫色。 (3) 適用60°C高溫脫色之紡織工業染整製程。 • (4)製程可套用至他種白腐菌菇類（金針菇、秀珍菇、杏鮑菇等） 栽培後之廢棄太空包木屑之酵素回收。 貳·本發明的基本技術特徵 本發明所研發之自白腐真菌（靈芝、香菇）廢棄太空包木屑回收漆 酶（laccase)及纖維酶(ceiiulase)之方法，其主要包括以酸液洗浸萃 取、壓榨、過濾等步驟製備混合酵素，從香菇（厶s L922)及松 杉靈芝（6： &啦ae)栽培後廢棄太空包木屑中回收漆酶’其活性分別為 0.21〜〇·27及〇·65〜0.78 U/mL，且纖維酶活性分別為6.40〜8. 99 201200678 8. 44 U/ mL。以回收漆酶 〇. 1 u/ Couto and Sanroman，2006 抓。十其對合成直接性染料脫色之效率，絲鱗素可在赃高溫下， 8 Η守内分別對〇 〇1%之工業用藍⑻此狐及肌-⑽、褐(Br_B2R) 與只色口成(YellowGLS (γι))等四種直接性染料之脫色百分率為香菇 /水酶36 ’ 93 ’ 25，10°/〇及松杉靈芝漆酶：3卜43，44，57% ;該回收 酵素若添加1福氧化還原媒介N 卿benz〇triaz〇le⑽τ)，則 曰絲酶可以對Blue 3BL及Ye—s之脫色百分率顯著提高2倍 I及2.7七，此外，回收之漆酶酵素可以有效降低染料之達 3.45%~68. 51%。 參•本發明之實驗例 3.1本發明回收酵素的實驗例之方法流程 請配合參看圖一所示，本發明回收酵素之實驗例流程如下： .⑷收集白腐錢（香奴松杉靈芝至少其中—種）之廢棄太空 包：收集白腐真菌栽培採收後之廢棄太空包； I 2)備妥該廢棄太空包中之木屑碎料··去除該廢棄太空包之包裝 而取得其内部的廢棄木屬塊體，以粉碎機將太空包木屬塊體加以粉 碎，而備妥木屑碎料，勿堆置晒乾； (〇酸液洗浸萃取：取—特定量⑽公斤）之該木科料，加入2 倍體積醋酸水溶液(pH 3. G)(每剛公升水中加入冰醋酸咖此)以水 千式齡機·半均勻，並於室溫中靜置浸潤一特定時間（約4小時）； ⑷壓榨及過滤：取已於該醋酸水溶液中浸濕之該木層碎料，使 用渡袋壓渡機對該木屑碎料進行過滤(?〜1〇 —壓力，通過咖叩孔 201200678 4 徑濾袋），以滤出一特定量(53〜55公升）的據液， 堆肥資材）；及 並去除濾渣（可作為 回收酵素液， (e)將濾出之該濾液冷藏（溫度約4。〇備用即完成 該酵素液包括有漆酶及纖維酶。 3.2本發明實驗例之檢測 具有功效，乃將酵素液 為證明本發明依前述方法所製得之酵素液 進行如下之各種實驗檢測。

(a)漆酶活性染色： 用 0.2 mM (3-ethylbenzo-thiazoline·务sulf〇nic di_nium _)與〇· 2福c_混合加入ι% Α_%倒皿利 用定置遽紙滴上20//1酵素，在3rt避光反應2小時，在香蒜太空包 回收酵素中_素活性染色環大小約2 4〜2. 5咖（請參看附件一昭 片1所示），但在松杉靈芝太空包回收酵素中，酵素活性染色環大小約 3· 7 4 cm (明參看附件_照片2所示），顯示初步騎以松杉靈芝漆 鲁酶活性較高。 ' (b)漆酶活性測定： 本發明參考如附件二參考文獻[23]所示D，如腦 (1999)之方 法’取0. 5 mL培養液加漆酶分析試劑〇· 5 a，總體積為丨mL，在室溫 下以UV (日立a 司光3晋儀spectrometer Model: U2100)讀取 405 nm吸光錄化’帛公式計算漆酶活性，酵素活性_表示受質經酵 素催化後每分鐘ymole產物生成量，分析試劑含ABTS 2祕、

Glycine-HCl buffer (pH 3) 5〇禮。其中，酵素活性計算公式如下： 201200678 . U = △ #m〇ie/min= △ AM/cm x cm/min x vol. of cuvet1i / ε * x dilution factor/vol. of enzyme ; ε = 35000 m—1 cm—1 x l〇6。 (c)纖維分解酵素活性測定： 本發明參考Miller (1959)(如附件二參考文獻[24])之方法，取 0. 5 mL酵素加〇. 5 mL 1% carboxymethylcellulose (CMC)與 1% xylan 混 和’ 50C加熱30分鐘’測還原糖含量’每1 #m〇ie的別⑽為丨職 維分解酵素。 • (d)本發明應用於直接性染料退染試驗測定： 分別以漆酶1 U/ mL，漆化酶1 U/ mL + HBT 10 mM分別於60°C處 理直接性染料(direct dye)藍色3BL、BWL-143，褐色B2R，黃色GLS(YI) 各0. 01% ’連續測定8小時，測得香益漆酶對藍色3bl、亂—143、褐色 B2R及黃色GLS(YI)直接性染料之脫色百分率分別為：36，93，25，1〇%， 而松杉靈芝漆酶對藍色3BL、BWL-143、褐色B2R及黃色GLS(YI)直接性 染料之脫色百分率分別為：31，43，44，57%。該回收酵素若添加1 mM φ氧化還原媒介M-hydroxybenzotriazole (HBT)，則香兹漆酶可以對 Blue 3BL及Yellow GLS之脫色百分率顯著提高2倍及2. 7倍。請配合參 看圖二所示。而且，對0.01%之工業用藍（Blue 3BL及BWL-143)、褐 (Brown B2R)與黃色合成YeU〇w gls (YI)等四種直接性染料可有效降 低染料之COD達3.45%〜68. 51%。請配合參看圖三所示。 (e)水中化學需氧量檢測方法（⑶D) 一密閉迴流法： 本發明參考環檢局水中化學需氧量檢測方法一密閉迴流滴定法測 定，將消化用重鉻酸鉀標準溶液（〇. 008333 Μ :取33. 4 g硫酸汞溶於 201200678 .700 mL去離子水中後’加入167 mL濃硫酸使上述溶液完全溶解，移入 < 1 L量瓶，再秤取分析級之重鉻酸鉀2. 4518 g (先在15(TC供乾2小 時）加入1 L量瓶中，完全溶解後以試劑水定容至標線）丨.5虬與硫 酸-硫酸銀試劑（使用已配妥之市售品）3·5mL放入消化管中，混合後 冷卻’再加入2.5 mL水樣沿管壁小心地加入上述消化管中，使水樣留 在上層’蓋妥蓋子’並倒轉數次直至完全混合，將消化管放進已事先 預熱至151TC的加熱板加熱迴流2小時，完成後，取出試管置於試管 >架上，冷卻至室溫，將溶液倒入燒杯中，以試劑水淋洗消化管數次將 淋歧-併收集於燒杯中，並置入小磁石，在上述溶液中滴加2至3 滴菲羅琳糊’减卿Μ的硫酸賴銨溶液滴定，由藍綠色改變成 紅棕色。其中，化學需氧量的計算公式如下式： 化學需氧量（mg / L )

V 上式中，A:空白樣品分析時滴加之硫酸亞鐵銨滴定液體積⑷； B :樣品分析時滴加之硫酸亞鐵銨滴定液體積Μ) ; Μ ••硫酸亞鑛 滴定液的莫轉度w ; V:水樣體積（mL)。 肆•結論 二、利用本㈣之技術製備混合酵素，可峨隸(z.—遞幻 、來δ!'靈之(Π獅)栽培後之廢棄太空包木屬中有效回收漆酶，其 陶為G· 21〜G· 27及G. 65〜G. 78 u/mL，且纖维酶活性分 W.40〜㈣及以卜㈣^卜請配合參看圖一所示。 、以回收_ 0.111/ _討其對合成直雛祕聽之效率， 201200678 ，結果該酵素可在6(TC高溫下，8小時内分別對〇· 〇1%之工業用藍(版 ,3BL及亂-143)、褐(Brown B2R)與黃色合成YeU〇w as (γι)等四種 直接性染料之脫色百分率為據漆酶：36，93，25，灌及松杉靈芝漆 酶：3卜43 ’ 44，57%。該回收酵素若添加丨_氧化還原媒介 N-hydroxybenzotriazole (ΗΒΤ)，則香菇漆酶可以對則此3虬及

Yellaw (Μ 著提高2倍及2. 7倍。請配合參看圖二所 示0 • 3、以回收漆酶0.1 U/ mL探討其對合成直接性染料化學需氧量 (C0D)的影響，結果該酵素可在6〇。〇高溫下，8小時内分別則⑽之 工業用藍(Blue 3BL及BWL-143)、褐(B觸_與黃色合成仙⑽ GLS (YI)等四種直接性染料有效降絲料之⑽達3.45%〜68 51%。請 配合參看圖三所不。 4、傳統的練產業需_大量的水及化學㈣（強酸驗、氧化還 原，）’不僅请耗資源，損傷纖維材料，而且產生嚴重污染。隨著全球 籲對環保的日益重視及人們對紡織品之高品質要求，發展環境友好型染 整工藝，尋麟麟和環㈣具核雛的製程，即發展綠色染整產 業為刻不紐之課題。本發明目咖廢棄太故木屑贱之低價漆酶 及，維酶應用於直接性染料脫色製程，漆酶具有高度的基質專一性 和高效率哪化能力，綠紅可降錄_濃度，其在布料的酵 素先整里時可獲知與人工石磨接近之獨具特色的處理效果；在織物 表面整理時’可改善織物手感，提高懸垂性和柔軟性；因此為業界返 切需要開發導入之技術。 201200678 專利細，絲^ 可行實酬，麟肋限林發明之 其他列請求項所述之内容、特徵以及其精神而為之 體咖:Γ實施，皆應包含於本發明之專利範圍内。本發明所具 項之結構特徵，未見於_物品，且具實雜與進步性， =符:=專利要件，銳法具文提出申請，謹請躺依法核予專 矛J，以維濩本申請人合法之權益。 【圖式簡單說明】 圖一為本發明之回收製程示意圖； 圖為本發明從香蒜及松杉靈芝栽培後廢太空包中回收漆酶及纖維酶 活性檢測圖表； 圖三為本發·顿及松機芝喊_對四種直接性純之脫色率 檢測圖表；及 圖四為本發香魏松健芝贼_對四種直接性祕之⑽影 響檢測圖表。 附件-：照片1為本發明香兹太空包漆酶活性染色；照片2為本發明 • 松杉靈芝太空包漆酶活性染色。 附件二:參考文獻。 【主要元件符號說明】 (a) 收集白腐真菌之廢棄太空包 (b) 備妥該廢棄太空包中之木屑碎料 (c) 酸液洗浸萃取 (d)壓榨及過濾 (e)冷藏完成回收

Claims (1)

1. 201200678 七、申請專利範圍： 法，1其：自白腐真_培用之廢棄太空包回收漆酶及纖維酶之方 ⑷收集白腐真a之廢棄太空包 棄太空包； 曰腐真鹵栽培採收後之廢 ⑹備文轉棄太空包中之木柄料：去除 而取得其内部的廢棄木屬塊體，以粉碎機將太空包 碎，而備妥木屑碎料； 料塊體加以如 (C)酸液洗浸萃取：取—特定量之該木 酸水溶液均勻，胁室溫中靜置浸潤-特定咖倍體積醋 ⑷猶及過濾^取已於觸酸水雜巾浸 幽峨對該蝴料進賴，以遽出-特定：及使 有漆酶嶋撕恤m鱗素液包括 ^如請求項丨所述之自白腐真_ 之廢棄衫包回 纖維酶之方法，針，該自腐賴 杉靈芝^細_至少其卜種。α·e祕SL922)及松 殲唯=求項1所狀自自__之廢—漆酶及 纖抽之方法，其中’步驟(c)中之醋酸水溶液的pH值為3· 〇，由每 100公升水中加入冰醋酸250 mL授拌均勾而得，浸潤時間約4小時· 之麵賴，⑽1Q -壓力，通過柳孔經之 慮衣的方式碱；及步驟⑹中之該歧冷藏溫度約為代。 15 [s] 201200678 • 4.如請求項1所述之自白腐真菌裁拉 …纖維酶之方法，財’步驟⑷中。用之廢棄太空包回收漆酶及 腦），錄）中之# 值為3. 0，由每⑽公升水中加 a ’該醋酸水溶液的PH 如的川主止駿25〇mL授拌均勻而得，浸潤 時間糾時,·步驟⑷#之_濾機，係以W

   3=術域，蝴較她㈣ 中之誠訪顏賴為代，勤__得每公相培該香雜 廢棄的該木屑碎料回收漆酶236.2现4 U及纖維酶721_ U，苴 漆酶活性為〇· 21〜〇· 27 U/mL，及纖維酶活性為6. 40〜8. 99 U/raL/、 、5.如請求項1所述之自白腐真菌裁培用之廢棄太空包回收漆酶及 纖維酶之方法’其中，步驟⑸中之該白腐真g為松杉靈芝 加娜）’步驟(C)中之該木屑碎料的量為5G公斤，該醋酸水溶液的 pH值為3. 0 ’由每1〇〇公升水中加入冰醋酸25〇乩攪拌均勻而得， 浸满時間約4小時；步驟⑷中之濾袋壓滤機，係以M()心2壓力， 通過250 μπι孔徑之濾袋的方式過濾，而得濾液量為53 55公升；及步 驟(e)中之該濾液冷藏溫度約為4。〇，並由該濾液測得每公斤裁培該松 杉靈芝後廢棄的該木屑碎料回收漆酶727.6±68.6 U及纖維酶 7370±355 U，其漆酶活性為〇· 65〜〇. 78 u/mL，及纖維酶活性為7 u 〜8.44 U/mL。 6· —種自白腐真菌裁培用之廢棄太空包回收漆酶及纖維酶而應用 於直接性染料脫色之方法，其包括： 利用如請求項1所述之方法，其中該白腐真菌為香菇，以回收包 201200678 •括有漆酶及纖維酶之該酵素液；及 . 以回收之該漆酶0· 1 U/虬，在60°C高溫下及8小時内，分別對 0. 01%之工業用藍(Blue 3BL及BWL-143)、褐(Brown B2R)與黃色合成 (Yellow GLS (Y〇)直接性染料進行脫色，測得該漆酶對該工業用藍 (Blue 3BL及BWL-該143)、褐版麵_及該黃色合成(Yell0W GLS (YI))直接性染料之脫色百分率分別為36%、9挪、25%及1〇% β 7. —種自白腐真菌裁培用之廢棄太空包回收漆酶及纖維酶而應用 _於直接性染料脫色之方法，其包括： 利用如s青求項1所述之方法，其中該白腐真菌為松杉靈芝，以回 收包括有漆酶及纖維酶之該酵素液；及 以回收之該漆酶0.1 ϋ/ mL ’在6(TC高溫下及8小時内，分別對 0. 01%之工業用藍(Blue 3BL及BWL-143)、褐(Brown B2R)與黃色合成 (Yellow GLS (YI))直接性染料進行脫色，測得該漆酶對該工業用藍 (Blue 3BL及BWL-該 143)、褐（Brown B2R)及該黃色合成(Yell〇w GLS 鲁（YI))直接性染料之脫色百分率分別為31%、43%、44%及57%。 8·如請求項6或7所述之自白腐真菌裁培用之廢棄太空包回收漆 酶及纖維酶而應用於直接性染料脫色之方法，其中，該回收酵素添加 1 mM氧化還原媒介N-hydroxybenzotriazole (HBT)，該漆酶對工業用 藍Blue 3BL及該工業用黃色合成Yeii〇w GLS之脫色百分率分別提高 2倍及2. 7倍。 9.如請求項8所述之自白腐真菌裁培用之廢棄太空包回收漆酶及 纖維酶而應用於直接性染料脫色之方法，其中，該漆酶酵素降低該直 [s] 17 201200678 接性染料之化學需氧量(COD)為3. 45%〜68. 51%。