TW201138801A - Compositions and methods for the treatment of angiogenesis-related eye diseases - Google Patents

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201138801 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明大體而言係關於使用低劑量之解聚蛋白（disintegrin) 變異體來治療及/或預防血管新生相關之眼疾之組合物及 方法。 【先前技術】 整合素為將細胞錨定於受質且將來源於外部之信號傳遞 穿過質膜之雜二聚基質受體。整合素ανβ3為一類作為玻璃 連結蛋白（vitronectin)之受體的整合素。整合素ανβ3在包 括腸道、血管及平滑肌細胞之大多數正常細胞中低量表 現。表現高量此雜二聚體分子之細胞類型包括骨再吸收破 骨細胞、活性巨嗟細胞、一小部分嗜中性白血球、血管新 生内皮細胞及遷移平滑肌細胞。整合素ανβ3參與活體内及 活體外破骨細胞介導之骨吸收，以及新血管形成。此雜二 聚體分子識別諸如骨橋蛋白（osteopontin)及骨延蛋白（bone sialoprotein)之骨基質蛋白質中所含之胺基酸基元Arg-Gly-Asp(RGD)。 解聚蛋白為含低分子量RGD之肽家族，其特異性結合表 現於血小板及其他細胞（包括血管内皮細胞及一些腫瘤細 胞）上之整合素allbp3、α5β1及ανβ3。 各種解聚蛋白為此項技術所已知，包括蛇毒蛋白及其變 異體，包括（但不限於）ARLDDL。 血管新生相關之眼疾為與自原有血管長出新血管有關之 眼疾。此等疾病包括（但不限於）年齡相關黃斑變性、糖尿 152984.doc 201138801 病性視網膜病、角膜新生血管病、視網膜血管瘤增生、息 肉狀脈絡膜血管病、局部缺血誘發之新生血管視網膜病、 高度近視及早產兒視網膜病。 因為現有藥物並不令人滿意地有效治療血管新生相關之 眼疾’所以需要此等疾病之新穎療法。 【發明内容】 大體而§，本發明係關於使用低劑量之蛇毒蛋白變異體 來治療及/或預防血管新生相關之眼疾之組合物及方法。 術語「低劑量」係指低於通常用於治療血管新生相關之 眼疾之劑量的劑量。 較佳地，「低劑量」為每眼約0.0001 pg至約3〇〇 pg、更 佳為每眼約0.005 pg至約200 且甚至更佳為每眼約〇 〇〇1 pg至約100 pg適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體。該等 劑量可以每週一次、每月一次、每季一次或每年一次劑量 投與有需要之個體。 較佳地’該等蛇毒蛋白變異體與人類血清白蛋白（HSA) 或HSA之變異體融合。如整個申請案中所使用，術語「蛇 毒蛋白變異體」涵蓋與HSA或HSA變異體融合之蛇毒蛋白’ 變異體’其可經聚乙二醇化或經另外修飾。 適用於本發明之蛇毒蛋白變異體包含選自SEQ ID NO: 1 至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列或該蛇毒蛋白變異體之醫 藥學上可接受之鹽。 SEQ ID NO: 1表示「ARGDDP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48ARGDDP53之蛇毒蛋 152984.doc 201138801 白變異體。 SEQ ID NO: 2表示「ARGDDV」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48ARGDDV53之蛇毒蛋 白變異體。 SEQ ID NO: 3表示「ARGDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48ARGDDL53之蛇毒蛋 白變異體。 SEQ ID NO: 4表示「PRGDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRGDDL53之蛇毒蛋白 變異體。 SEQ ID NO: 5表示「ARGDDM」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48ARGDDM53之蛇毒蛋 白變異體。 SEQ ID NO: 6表示「PRGDDM」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRGDDM53之蛇毒蛋 白變異體。 SEQ ID NO: 7表示「PRLDMP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRLDMP53之蛇毒蛋白 變異體。 SEQ ID NO: 8表示「PRLDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRLDDL53之蛇毒蛋白 變異體。 SEQ ID NO: 9表示「ARLDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48ARLDDL53之蛇毒蛋 152984.doc 201138801 白變異體。 SEQ ID NO: 10表示「PRIDMP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRIDMP53之蛇毒蛋白 變異體。 SEQ ID NO: 11表示「PRHDMP」蛇毒蛋白變異體之胺 基酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRHDMP53之蛇毒 蛋白變異體。 SEQ ID NO: 12表示「PRGDNP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRGDNP53之蛇毒蛋白 變異體。 SEQ ID NO: 13表示「PRGDGP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列，其為具有RGD基元變異體48PRGDGP53之蛇毒蛋白 變異體。 SEQIDNO: 14表示與HSA結合之「ARLDDL」蛇毒蛋白 變異體的胺基酸序列。 SEQ ID NO: 15表示與HSA變異體結合之「ARLDDL」蛇 毒蛋白變異體的胺基酸序列，其中野生型HSA胺基酸序列 之位置34處的半胱胺酸殘基已經絲胺酸置換。由SEQ ID NO: 15表示之蛇毒蛋白變異體亦可稱為HSA(C34S)-ARXDDL·融合蛋白質。該蛋白質為以下之融合產物： a)HSA變異體，其中HSA胺基酸序列之位置34處的半胱胺 酸殘基已經絲胺酸置換；b)連接子胺基酸序列；及 c)ARLDDL蛇毒蛋白變異體。 SEQIDNO: 16表示與HSA變異體結合之「ARLDDL」蛇 152984.doc 201138801 毒蛋白變異體的胺基酸序列，其中野生型HS A胺基酸序列 之位置34處的半胱胺酸殘基已經丙胺酸置換。 因此，在一實施例中，本發明係關於一種治療及/或預 防血管新生相關之眼疾之組合物，其包含約〇 〇〇〇! pg至約 3 00 包含選自SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO: 16之胺基酸序 列的蛇毒蛋白變異體或該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接 受之鹽。 最佳地’適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體包含SEQ ID NO: 9或 SEQ ID NO: 15。 較佳地，本發明之組合物包含約〇 0〇5 pg至約200 且 更佳為約0.00 1 pg至約1 〇〇 適於本發明之目的之蛇毒蛋 白變異體。 在一實施例中’本發明之組合物係調配為局部組合物。 在另一實施例中’本發明之組合物適於眼内注射（亦即注 入眼内）。 在另一實施例中’本發明係關於一種治療及/或預防血 官新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體投與該 個體母眼約0.0001 pg至約300 pg包含選自SEQ ID NO: 1至 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇毒 蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 在一較佳實施例中，本發明係關於一種治療及/或預防 血官新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體投與 該個體每眼約0.0001 pg至約3〇〇吨包含選自SEq ID N〇: 9 及SEQ ID NO: 15之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇 152984.doc 201138801 毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽β 在一更佳實施例中，本發明係關於一種治療及/或預防 血管新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體投與 β亥個體每眼約0.0005 pg至約2〇〇 μβ包含選自SEq ID Ν〇 1 至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇 毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 在甚至更佳實施例中，本發明係關於一種治療及/或 預防血g新生相關之眼疾之方法其包含向有需要之個體 投與該個體每眼約0.001 pg至約1〇〇叫包含選自沾卩m NO·· 1至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或 該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 較佳地，本發明之方法包含投與該個體每眼約0.005 pg 至約300叫且更佳為約〇.〇〇1 pg至約1〇〇料適於本發明之 目的之蛇毒蛋白變異體。 在實施例中纟發明之方法包含經由玻璃體内注射投 與該個體適於本發明之目的之蛇毒蛋自變異體。 在一實施例中，該血管新生相關之眼錢選自由以下組 成之群：年齡相關黃斑變性（娜）、冑尿病性視網膜病、 角膜新生血管病、視網膜血管瘤增生、息肉狀脈絡膜血管 病、年齡相關局部缺i誘發之新生血管視網膜病、高度近 視及早產兒視網膜病。 在另一實施例中，本發明之方法另外包含投與治療有效 量之另—活性劑。該另-活性劑可在投與適於本發明之目 的之蛇毒蛋白變異體之前、期間或之後投與。 152984.doc 201138801 較佳地，該另一活性劑係選自由VEGF拮抗劑、抗血管 新生劑、消炎劑及類固醇組成之群。 本發明之組合物可另外包括醫藥學上可接受之載劑。 由以下各種實施例之描述結合以下圖式，此等及其他態 樣將顯而易知’但可在不脫離本發明之新穎概念的精神及 範嘴之情況下’在其中進行變化及修改。 應瞭解’以上概述與以下詳細描述皆僅為例示性及說明 性的’且不限制所主張之本發明。 【實施方式】 現詳細描述本發明之各種實施例。除非本文另外明確指 不，否則如說明書及整個申請專利範圍中所使用，「一」 及「該」之含義包括複數個提及物。又，除非本文另外明 確指示’否則如說明書及整個申請專利範圍中所使用， 「在.··..·中」之含義包括「在……中」及「在……上」。 另外’本說明書中所使用之一些術語更特定地定義如下。 定義 本說明書中所用之術語在本發明之上下文中且在使用各 術語之特定上下文中通常具有其此項技術中之一般含義。 用於描述本發明之某些術語在下文或在說明書別處論述， 以向從業者提供關於本發明之描述的額外指導。提供某此 術語之同義詞。一或多個同義詞之敍述並不排除其他同義 詞之使用。在本說明書中任何地方使用實例（包括本文所 論述之任何術語的實例）僅為說明性的，且絕不限制本發 明或任何例示術語之範疇及含義。本發明不限於本說明書 152984.doc 201138801 中所給出之各種實施例。 除非另有定義，否則本文中所使用之所有技術及科學術 語均具有與熟習本發明所屬技術者通常所瞭解相同之含 義。在發生衝突之情況下，以本文獻（包括定義）為準。 術語「左右」、「約」、「近似」一般將意謂在既定值 或範圍之20%内、ι〇〇/。内、5%、4%、3%、2%或1〇/〇内。既 定數值量為近似值，意謂若未明確說定，則可推斷存在術 語「左右」、「約」、「近似」。 術語「肽」及「蛋白質」在整個申請案中可互換使用。 術”°低劑量」及「低量J在整個申請案中可互換使 用。 ' 術語「個體」及「哺乳動物」包括（但不限於）人類。 術語「治療」係指用於哺乳動物疾病之治療法的任何投 藥或施用且包括抑制該疾病，阻滯其發展，緩解該疾病， 例如藉由使其消退，或恢復或修復損失、丟失或缺失之功 能；或刺激低效過程。該術語包括獲得所需藥理學及/或 生理學作用，涵蓋哺乳動物病理學病狀或病症之任何治 療。該作用就完全或部分預防病症或其症狀而言可為預防 性的，及/或就部分或完全治癒病症及/或由該病症引起之 不良作用而言可為治療性的。其包括：⑴預防病症在可能 易患病症但仍無症狀之個體中發生或復發；（2)抑制病症， 諸如阻滞其發展；（3)停止或終止病症或至少其相關症狀， 以使宿主不再罹患病症或其症狀，諸如使病症或其症狀消 退’例如藉由恢復或修復損失、丟失或缺失之功能，或刺 152984.doc 201138801 激低效過程；或⑷緩解、減輕或改善病症或其相關症狀， 其中改善在最廣泛意義上用於指至少降低諸如發炎、疼痛 及/或腫瘤大小之參數的量值。 術^藥學上可接$之載劑」係、指任何習知類型之無 毒固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、囊封物質、調配 助劑或賦形劑。醫藥學上可接受之載劑在調配物中所用之 劑量及遺度下對#受者而言為無毒且與調配物《其他成分 相容。 術語「組合物」係指通常含有此項技術中習知且出於治 療性、診斷性或預防性目的適於#與個體之載劑（諸如醫 藥學上可接受之载劑或賦形劑)的混合物。其可包括細 培養物，纟中蛇毒蛋白變異體存在於細胞或培養基中。舉 例而言，用於經口投藥之組合物可形成溶液、懸浮液、錠 劑、丸劑、膠囊、持續釋放調配物、漱口水或散劑。 麟「血管新生相關之眼疾」係指與自原有血管長出新 血&有關之任何眼疾。此等疾病包括(但不限於)年齡相關 黃斑變性、糖尿病性視網膜病、角膜新生丘管病、視網膜 *管瘤增生、息肉狀脈絡膜血管病、局部缺血誘發之新生 血管視網膜病、高度近視及早產兒視網膜病。 術π '口療有效里」係指投與活個體時對該活個體達成 所需作用的量。確切量將視治療目的Μ，且可由孰習此 項技術者制已知技術來確定。如此項技術巾所已知，可 能必需根據全身對局部傳遞、年齡、體重、一般健康狀 況、性別、勝食、投藥0主„ .., , 又樂時間、樂物相互作用及病狀嚴重性 152984.doc -11· 201138801 作出調整，且該等調整可由熟習此項技術者利用常規實驗 來確定。 術語「RGD基元變異體」係指在跨越相應野生型序列之 RGD序列的胺基酸序列（諸如包含蛇毒蛋白中之RGD的序 列）中包含修飾之肽。 術語「ARGDDP」係指具有RGD基元變異體48ARGDDP53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。ARGDDP由 SEQ ID NO: 1表示。 語「ARGDDV」係指具有RGD基元變異體48ARGDDV53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。ARGDDV由 SEQ ID NO: 2表示。 語「ARGDDL」係指具有RGD基元變異體48ARGDDL53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。ARGDDL由 SEQ ID NO: 3表示。 術語「PRGDDL」係指具有RGD基元變異體48PRGDDL53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRGDDL由 SEQ ID NO: 4表示。 術語「ARGDDM」係指具有RGD基元變異體48ARGDDM53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。ARGDDM由 152984.doc •12· 201138801 SEQ ID NO: 5表示。 術·語「PRGDDM」係指具有RGD基元變異體48PRGDDM53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRGDDM由 SEQ ID NO: 6表示。 術語「PRLDMP」係指具有RGD基元變異體48PRLDMP53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRLDMP由 SEQ ID NO: 7表示。 術語「PRLDDL」係指具有RGD基元變異體48PRLDDL53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基’酸序列中之位置。PRLDDL由 SEQ ID NO: 8表示。 術語「ARLDDL」係指具有RGD基元變異體48ARLDDL53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。ARLDDL由 SEQ ID NO: 9表示。 術語「PRIDMP」係指具有RGD基元變異體48PRIDMP53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRIDMP由 SEQ ID NO: 10表示。 術語「PRHDMP」係指具有RGD基元變異體48PRHDMP53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRHDMP由 152984.doc -13- 201138801 SEQ ID NO: 11表示。 術語「PRGDNP」係指具有RGD基元變異體48PRGDNP53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRGDNP由 SEQ ID NO: 12表示。 術語「PRGDGP」係指具有RGD基元變異體48PRGDGP53 之蛇毒蛋白變異體。數字「48」及「53」係指此等胺基酸 在野生型蛇毒蛋白之胺基酸序列中之位置。PRGDGP由 SEQ ID NO: 13表示。 術語「HSA-ARLDDL」係指包含以下之融合蛋白質：a) 人類血清白蛋白（HSA)變異體；b)連接子胺基酸序列；及 c)具有RGD基元變異體48ARLDDL53之蛇毒蛋白變異體。其 由 SEQ ID NO: 14表示。 術語「HSA(C34S)-ARLDDL」係指包含以下之融合蛋白 質：a)人類血清白蛋白（HSA)變異體，其中野生型HSA胺 基酸序列之位置34處的半胱胺酸殘基已經絲胺酸置換；b) 連接子胺基酸序列；c)具有RGD基元變異體48ARLDDL53之 蛇毒蛋白變異體。其由SEQ ID NO: 15表示。 術語「HSA(C34A)-ARLDDL」係指包含以下之融合蛋白 質：a)人類血清白蛋白（HSA)變異體，其中野生型HSA胺 基酸序列之位置34處的半胱胺酸殘基已經丙胺酸置換；b) 連接子胺基酸序列；及具有RGD基元變異體48ARLDDL53 之蛇毒蛋白變異體。其由SEQ ID NO: 16表示。 應瞭解，本發明包含使用不為ARLDDL之蛇毒蛋白變異 I52984.doc · 14- 201138801 體經由連接子胺基酸序列與HSA變異體融合的融合蛋白質 之組合物及方法。舉例而言，適於本發明之目的之融合蛋 白質包括（但不限於）HSA-ARGDDP、HSA(C34S)-ARGDDP 、HSA(C34A)-ARGDDP、HSA-ARGDDV、HSA(C34S)-ARGDDV、HSA(C34A)-ARGDDV等。 本發明之組合物及方法 發明者明確地以引用的方式合併美國專利申請案第 61/226,945號中所揭示之所有方法及蛇毒蛋白變異體。 大體而言，本發明係關於使用低劑量之蛇毒蛋白變異體 來治療血管新生相關之眼疾之組合物及方法。 術語「低劑量」係指低於通常用於治療血管新生相關之 眼疾之劑量的劑量。 較佳地，「低劑量」為約0.0001 pg至約300 pg、更佳為 約0.0005 pg至約200 pg且甚至更佳為約0.001 pg至約1〇〇 pg適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體。該等劑量可以單 次劑量或分次劑量投與有需要之個體，只要總投與劑量在 所提供之範圍内即可。 較佳地，該等蛇毒蛋白變異體與人類血清白蛋白（HSA) 或HS A之變異體融合，其可經聚乙二醇化或經另外修飾。 甚至更佳地，適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體係選 自包含選自SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列 的蛇毒蛋白變異體或該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接受 之鹽。 在一較佳實施例中，蛇毒蛋白變異體與白蛋白結合或經 152984.doc -15- 201138801 聚乙二醇化。 甚至更佳地，適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體包含 SEQ ID NO: 9或 SEQ ID NO: 15。 用於本發明之目的之最佳蛇毒蛋白變異體為HSA(C34S)-ARLDDL，其由 SEQ ID NO: 15表示。HSA-ARLDDL C34S 為包含具有RGD基元48ARLDDL53之蛇毒蛋白變異體的重 組蛋白質，其中該等蛇毒蛋白變異體與人類血清白蛋白 (HSA)之變異體結合。與野生型蛇毒蛋白相比， HSA(C34S)-ARLDDL對ανβ3整合素具有選擇性且展現與 allbp3及/或α5β1整合素之結合減弱。 在一實施例中，本發明係關於一種治療及/或預防血管 新生相關之眼疾之組合物，其包含約0.0001 pg至約300 pg 包含選自SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的 蛇毒蛋白變異體或該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之 鹽。 較佳地，本發明之組合物包含約0.0005 pg至約200 pg且 更佳為約0.001 pg至約100 Kg適於本發明之目的之蛇毒蛋 白變異體。 在一實施例中，本發明之組合物係調配為局部組合物。 在另一實施例中，本發明之組合物適於玻璃體内注射（亦 即注入眼内）。 在另一實施例中，本發明係關於一種治療及/或預防血 管新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體投與該 個體每眼約0.0001 pg至約300 gg包含選自SEQ ID NO: 1至 152984.doc •16- 201138801 SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇毒 蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 在一較佳實施例中’本發明係關於一種治療及/或預防 血管新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體投與 該個體每眼約0.0001 Pg至約300 包含選自SEQ ID NO: 9 及SEQ ID NO: 15之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇 毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 在一更佳實施例中’本發明係關於一種治療及/或預防 血官新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體投與 S玄個體每眼約0.0005 pg至約200 包含選自SEQ ID NO: 1 至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇 毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 在一甚至更佳實施例中，本發明係關於一種治療及/或 預防血管新生相關之眼疾之方法，其包含向有需要之個體 投與該個體每眼約〇·〇01 pg至約1〇〇吨包含選自SEQ 1〇 NO: 1至SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的蛇毒蛋白變異體或 該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 較佳地，本發明之方法包含投與該個體每眼約0.005 pg 至約200吨且更佳為約〇〇〇1 pg至約1〇〇叫適於本發明之 目的之蛇毒蛋白變異體。 在貫施例巾纟發明之方法包含經由眼内注射投與該 個體適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體。 在一實施财，該血管新生相關之眼疾係選自由以下組 成之群：年齡相關黃斑變性、糖尿病性視網膜病、角膜新 152984.doc 201138801 生血管病、視網膜血營鹿 .^ 層增生、息肉狀脈絡膜血管病、年 齡相關局部缺血誘發之薪 贯又新生血管視網膜病、高度近視及早 產兒視網膜病。 本發明之組合物可如下投與需要治療之個體：藉由全身 注射’諸如藉由玻璃體内注射或靜脈内注射；或藉由注射 或施用至相關部位’諸如藉由當該部位在手術中暴露時， 直接注射或直接施用至該部位；或藉由局部施用。 本發明之組合物可與另—活性劑組合使用來治療也管新 生相關之眼疾。 因此在貫施例中，治療及/或預防企管新生相關之 眼疾之方法另外包含向個體投與另一活性劑。 較佳地，該另一活性劑係選自由VEGF拮抗劑、抗血管 新生劑、消炎劑及類固醇組成之群。 該等活性劑之投藥可依多種方式達成，包括經口、經 頰、經鼻、直腸、非經腸、腹膜内、皮内、經皮、皮下、 靜脈内、動脈内、心臟内、心室内、顱内、氣管内及鞘内 投藥、肌肉内注射、玻璃體内注射（亦即注入眼内）、局部 施用（包括但不限於滴眼劑、乳膏及乳液）、植入及吸入。 本發明之醫藥組合物可呈含有此項技術所已知之醫藥學 上可接受之載劑、賦形劑及稀釋劑的調配物形式提供。此 等醫藥載劑、賦形劑及稀釋劑包括彼等USP醫藥賦形劑清 單中所列者。USP and NF Excipients，分類別列舉（Listed by Categories)，第 2404-2406 頁，USP 24 NF 19，United

States Pharmacopeial Convention Inc., Rockville, Md. 152984.doc •18· 201138801 (ISBN 1·889788·03·1)。醫藥學上可接受之賦形劑（諸㈣ 劑、佐劑 '載劑或稀釋劑）可容易地公開獲得。此外，醫 藥學上可接受之助劑物質（諸如ρΗ值調節劑及緩衝劑、張 力調節劑、穩定劑、濕潤劑及其類似物)可容易地公開獲 得。 適合之載劑包括（但不限於）水、右旋糖、甘油、生理食 鹽水、乙醇及其組合。該載劑可含有增強調配物之效能的 其他製劑，諸如濕潤劑或乳化劑、阳值緩衝劑或佐劑。局 部載劑包括液體石油、棕搁酸異丙酯、聚乙二醇、乙醇 (95%)、聚氧乙烯單月桂酸醋（5%)水溶液或月桂基硫酸鈉 (5%)水浴液。必要時，可添加其他物質，諸如抗氧化劑、 保濕劑、黏度穩定劑及類似製劑。亦可包括諸如氣嗣 (Azone)之經皮滲透增強劑。 適於本發明之目的之蛇毒蛋白變異體可藉由將其溶解、 ’公浮或乳化於水性或非水性溶劑中而調配成注射用製劑， 該溶劑諸如植物油或其他類似油、合成脂族酸甘油酷、高 碳脂族酸或丙二醇之酉旨；且需要時，含有習知添加劑，諸 如增溶劑、等張劑、懸浮劑、乳化劑、駭劑及防腐劑。 如此項技術中所以° ’亦可使用用於經口或非經腸傳遞之 其他調配物。 本發明之醫藥組合物可調配成m體、半固體、液體或氣 :形式之製劑，諸如錠劑、膠囊、散劑、顆粒劑、軟膏、 浴液、栓劑、注射液、吸入劑及氣溶膠。 在馐藥劑型中，本發明之組合物可呈其醫藥學上可接受 152984.doc -19· 201138801 之鹽形式投與，或其亦可單獨使用或與其他醫藥活性化合 物適當結合以及組合使用。標的組合物係根據可能採用之 投藥模式來調配》 本發明更特定描述於以下實例中，該等實例僅意欲為說 明性的，因為熟習此項技術者將顯而易知其中之許多修改 及變化。 實例1 在氧誘發之視網膜病之小鼠模型中由ARLDDL& Hs A_ ARLDDL抑制視網膜血管新生 如下在小鼠中產生氧誘發之視網膜病的動物模型。將每 組含至少兩隻哺乳母畜之7天齡小鼠分配至含有75%氧氣 之氧腔室（氧過多）或室内空氣（氧正常）中。使該等小鼠接 觸小於300勒克司（111)〇之12小時週期性寬譜光。若哺乳母 畜死亡，則替換替代母畜。將經氧處理之小鼠圈養於連接 於含氧氣及氮氣之Bird 3-M氧摻合器（Palm Springs，CA)的 培育箱中，將氧濃度調整至75%±2%。每日檢查丨5L/min 之流速兩次。用^(；1〇^11氧分析器（型號D2，Irvine，CA)監 測氧濃度。籠子溫度維持在231 ± 2〇c。將小鼠置於具有 足以使其維持5天之食物及水的氧腔室中。該腔室在第1天 至第5天之氧過多接觸期間不打開。第5天，使動物返回室 内空氣中，持續7天。一旦經氧處理之小鼠返回室内空氣 中即第5天經由玻璃體内注射投與標準生理食鹽水（每眼 2 μΐ)、ARLDDL(每眼2 ng或每眼2〇 pg)、HSA-ARLDDL(每 眼2 ng)或抗VEGF抗體（每眼2 ng或每眼2〇 pg),且第12天 I52984.doc •20· 201138801 處死小鼠。每隻動物製作一隻眼之切片，去石蠟化且用蘇 木素及伊紅染色。對每視網膜切片内視網膜中之血管數目 進行計數，且該數目包括黏著於内界膜之血管。在照相顯 微鏡（Leica)上以10〇x之放大倍數進行計數。結果展示於圖 1B中。 结果證明，與經標準生理食鹽水處理之組相比，劑量為 每眼2 ng及每眼20 pg之ARLDDL及HSA-ARLDDL減少每視 網膜切片之血管數目。此外，與每眼2 ng ARLDDL、每眼 2 ng HSA-ARLDDL及每眼20 pg抗VEGF抗體相比，即使在 每眼20 pg之極低劑量下，ARLDDL亦使得每視網膜切片之 血管數目以更大的幅度減少。 由不知此實情者對神經節細胞層之前部中及視網膜之内 界膜上之内皮細胞進行計數。結果展示於圖1C中。 結果證明，劑量為每眼2 ng與每眼20 pg之ARLDDL及 HSA-ARLDDL均減少每視網膜切片之内皮細胞數目》 實例2 在氧誘發之視網膜病的小鼠模型中由極低劑量之ARLDDL 及HSA-ARLDDL抑制視網膜血管新生 如實例1中所述，在小鼠中產生氧誘發之視網膜病的動 物模型。經由玻璃體内注射投與以下量之HS A-ARLDDL : 每眼10 pg、每眼0.1 pg及每眼0.001 pg，且第12天處死經 處理之小鼠》每隻動物製作一隻眼之切片，去石蠟化且用 蘇木素及伊紅染色。對每視網膜切片内視網膜中之血管數 目進行計數，且該數目包括黏著於内界膜之血管。在照相 152984.doc •21· 201138801 顯微鏡（Leica)上以1〇〇χ之放大倍數進行計數。結果展示於 圖2A中。 結果證明，與經標準生理食鹽水處理之組相比，每眼ι〇 pg、0.1 pg及0.001 pg之HSA-ARLDDL減少每視網膜切片 之血管數目。 由不知此實情者對神經節細胞層之前部中及視網膜之内 界膜上之内皮細胞進行計數。結果展示於圖2B中。 結果證明，與經標準生理食鹽水處理之組相比，每眼1〇 pg、0.1 pg及0.001 pg之HSA-ARLDDL減少每視網膜切片 之内皮細胞數目。 實例3 在氧誘發之視網膜病的小鼠模型中由HSA-ARLDDL對 Avastin®抑制視網膜血管新生 如實例1中所述，在小鼠中產生氧過多/氧正常之動物模 型。經由玻璃體内注射投與ARLDDL(每眼1〇 pg或每眼〇 i pg)或Avastin®(每眼20 pg或每眼0.2 pg)且第η天處死經處 理之小鼠。 每隻動物製作一隻眼之切片’去石蠟化且用蘇木素及伊 紅染色。對每視網膜切片内視網膜中之血管數目進行計 數，且該數目包括黏著於内界膜之血管。在照相顯微鏡 (Leica)上以10〇x之放大倍數進行計數。結果展示於圖3A及 4A中。 由不知此實情者對神經節細胞層之前部中及視網膜之内 界膜上之内皮細胞進行計數。結果展示於圖3B及4B中。 152984.doc •22- 201138801 結果證明，所有投與劑量之HSA-ARLDDL均比Avastin® 顯著有效地抑制視網膜血管新生。 申請案中所用之胺基酸及核苷酸序列 SEQ ID NO: 1表示「ARGDDP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 2表示「ARGDDV」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 3表示「ARGDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 4表示「PRGDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 5表示「ARGDDM」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 6表示「PRGDDM」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 7表示「PRLDMP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 8表示「PRLDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 9表示「ARLDDL」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 10表示「PRIDMP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 11表示「PRHDMP」蛇毒蛋白變異體之胺 152984.doc -23- 201138801 基酸序列。 SEQ ID NO: 12表示「PRGDNP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 13表示「PRGDGP」蛇毒蛋白變異體之胺基 酸序列。 SEQ ID NO: 14表示「HSA-ARLDDL」蛇毒蛋白變異體 之胺基酸序列。 SEQ ID NO: 15表示「HSA(C34S)-ARLDDL」蛇毒蛋白 變異體之胺基酸序列。 SEQ ID NO: 16表示「HSA(C34A)-ARLDDL」蛇毒蛋白 變異體之胺基酸序列。 本發明之例示性實施例的以上描述僅出於說明及描述之 目的提供，且不意欲詳盡本發明或將本發明限於所揭示之 確切形式。依據上述教示，許多修改及變化為可能的。 鑒於本文所揭示之本發明的說明書及實踐，本發明之其 他實施例將為熟習此項技術者顯而易知。意欲本說明書及 實例僅視為例示性的，而本發明之真實範疇及精神由以下 申請專利範圍指示。 【圖式簡單說明】 圖1A為一組四張照片，其展示氧誘發之視網膜病之小鼠 模型中的血管新生（B)，經ARLDDL蛇毒蛋白變異體處理之 氧誘發之視網膜病小鼠的血管新生減少（C)，及經HSA-ARLDDL·蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視網膜病小鼠的 血管新生減少（D)。照片（A)為氧正常情況（對照組）。箭頭 152984.doc •24- 201138801 指示血管分佈（BVP)。 圖18為展示經ARLDDL蛇毒蛋白變異體或HSA-ARLDDL 蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視網膜病的小鼠模型中每 視網膜切片之血管數目減少的圖。 圖1 C為展示經ARLDDL蛇毒蛋白變異體或HSA-ARLDDL 蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視網膜病的小鼠模型中每 視網膜切片之内皮細胞數目減少的圖。 圖2A為展示經以下量之HSA-ARLDDL蛇毒蛋白變異體 處理之氧誘發之視網膜病的小鼠模型中每視網膜切片之血 管數目減少的圖：10pg、0.1pg及O.OOlpg。 圖2A為展示經以下量之ARLDDL蛇毒蛋白變異體或 HSA-ARLDDL·蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視網膜病的 小鼠模型中每視網膜切片之内皮細胞數目減少的圖：10 pg ' 0.1 pg及 0.001 pg。 圖3 A為展示與經Avastin®處理之氧誘發之視網膜病小鼠 相比，經HS A-ARLDDL蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視 網膜病的小鼠模型中每視網膜切片之血管數目減少的圖。 圖3B為展示與經Avastin®處理之氧誘發之視網膜病小鼠 相比，經HSA-ARLDDL蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視 網膜病的小鼠模型中每視網膜切片之内皮細胞數目減少的 圖。 圖4A為展示與經Avastin®處理之氧誘發之視網膜病小鼠 相比，經HSA-ARLDDL蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視 網膜病的小鼠模型中每視網膜切片之血管數目減少的圖。 152984.doc -25- 201138801 圖4B為展示與經Avastin®處理之氧誘發之視網膜病小鼠 相比，經HSA-ARLDDL蛇毒蛋白變異體處理之氧誘發之視 網膜病的小鼠模型中每視網膜切片之内皮細胞數目減少的 圖。 152984.doc -26- 201138801 序列表 <110>國立成功大學 <120>治療血管新生相關之眼疾之組合物及方法

< 13 0> ANC10477P00061US <140> 099145616 <141> 2010-12-23 <150> 61/289,624 <151> 2009-12-23 <160> 16 - <210> 1 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：ARGDDP合成蛇毒蛋白變異體 <400> ]

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Scr Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala ] 5 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys He Cys Arg lie Ala 35 40 45

Arg Gly Asp Asp Pro Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 2 <211> 68 <212> PRT <2]3>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：ARGDDV合成蛇毒蛋白變異體 <400> 2

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Scr Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 1 5 10 15

Ala ΊΤιτ Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Ala 35 40 45

Arg Gly Asp Asp Val Asp Asp Arg Cys fYhr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 3 <2H> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：ARGDDL合成蛇毒蛋白變異體 <400> 3

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15 152984-序列表.doc 201138801

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu G)y Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Ala 35 40 45

Arg Gly Asp Asp Leu Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 4 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRGDDL合成蛇毒蛋白變異體 <400> 4

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Giu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys He Cys Arg lie Pro 35 40 45

Arg Gly Asp Asp Leu Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Fro Arg Tyr His 65 <210> 5 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：ARGDDM合成蛇毒蛋白變異體 <400> 5

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Scr Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys He Cys Arg lie Ala 35 40 45

Arg Gly Asp Asp Met Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 6 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRGDDM合成蛇毒蛋白變異體 <400> 6 -2- 152984·序列表.doc 201138801

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 IS

Ala Hir Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Pro 35 40 45

Arg Gly Asp Asp Met Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 7 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRLDMP合成蛇毒蛋白變異體 <400> 7

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys He Cys Arg Me Pro 35 40 45

Arg Leu Asp Met Pro Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <2]0> 8 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRLDDL合成蛇毒蛋白變異體 <400> 8

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Scr Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ma Gly Lys lie Cys Arg lie Pro 35 40 45

Arg Leu Asp Asp Leu Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 9 <21l> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：ARLDDL合成蛇毒蛋白變異體 152984-序列表.doc 201138801 <400> 9

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro GIu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys He Cys Arg lie Ala 35 40 45

Arg Leu Asp Asp Leu Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 10 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRIDMP合成蛇毒蛋白變異體 <400> 10

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser- Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg He Pro 35 40 45

Arg He Asp Met Pro Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 11 <2il> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRHDMP合成蛇毒蛋白變異體 <400> 11

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Pro 35 40 45

Arg His Asp Met Pro Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 12 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 152984-序列表.doc 201138801 <220> <223>人工序列之描述：PRGDNP合成蛇毒蛋白變異體 <400> 12

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala rrhx Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Pro 35 40 45

Arg Gly Asp Asn Pro Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 13 <211> 68 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：PRGDGP合成蛇毒蛋白變異體 <400> 13

Gly Lys Glu Cys Asp Cys Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala 15 10 15

Ala Thr Cys Lys Leu Arg Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys 20 25 30

Cys Glu Gin Cys Lys Phe Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg He Pro 35 40 45

Arg Gly Asp Gly Pro Asp Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys 50 55 60

Pro Arg Tyr His 65 <210> 14 <211> 670 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人工序列之描述：HSA-ARLDDL <400> 14

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu 15 10 15

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu lie Ala Phe Ala Gin Tyr Leu Gin 20 25 30

Gin Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 40 45

Phe Ala lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 50 55 60

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu 65 70 75 80

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gin Glu Pro 152984-序列表,doc 201138801 85 90 95

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Oln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu 100 105 110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His 115 120 125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu lie Ala Arg 130 135 140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg 145 150 155 160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gin Ala Ala Asp Lys Ala Ala 165 170 175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser 180 185 190

Ser Ala Lys Gin Ar£ Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gin Lys Phe Gly Glu 195 200 205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gin Arg Phe Pro 210 215 220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys 225 230 235 240

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp 245 250 255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr lie Cys Glu Asn Gin Asp Ser He Ser 260 265 270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His 275 280 285

Cys lie Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser 290 295 300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala 305 310 315 320

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg 325 330 335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr 340 345 350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu 355 360 365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro 370 375 380

Gin Asn Leu lie Lys Gin Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gin Leu Gly Glu 385 390 395 400

Tyr Lys Phe Gin Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro 405 410 415

Gin Val Ser TTir Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys 420 425 430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys 435 440 445

Ala Glu Asp Tyr Uu Ser Val Val Leu Asn Gin Leu Cys Val Leu His 450 455 460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser 465 470 475 480

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr 4S5 490 495

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp 152984·序列表,doc 201138801 500 505 510 lie Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gin lie Lys Lys Gin Thr Ala 515 520 525

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gin Leu 530 535 540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys 545 550 555 560

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val 565 570 575

Ala Ala Ser Gin Ala Ala Leu Gly Leu Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Lys Glu Cys Asp Cys 595 600 605

Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala Ala Thr Cys Lys Leu Arg 610 615 620

Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys Cys Glu Gin Cys Lys Phe 625 630 635 640

Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Ala Arg Leu Asp Asp Leu Asp 645 650 655

Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys Pro Arg Tyr His 660 665 670 <210> 15 <211> 670 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：HSA-ARLDDLC34S <400> 15

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu 15 10 15

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu lie Ala Phe Ala Gin Tyr Leu Gin 20 25 30

Gin Ser Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 . 40 45

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 50 55 60

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu 65 70 75 80

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gin Glu Pro 85 90 95

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gin His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu 100 105 110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His 115 120 125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lvs Lys Tyr Leu Tyr Glu lie Ala Arg 130 丨35 ' 140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg 145 150 155 160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gin Ala Ala Asp Lys Ala Ala 165 170 175 152984·序列表.doc 201138801

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arc Asp Glu Gly Lys Ala Ser 180 185 190

Set Ala Lys Gin Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gin Lys Phe Gly Glu 195 200 205

Ar£ Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gin Arg Phe Pro 210 215 220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Scr Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys 225 230 235 240

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp 245 250 255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr lie Cys Glu Asn Gin Asp Ser He Ser 260 265 270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His 275 280 285

Cys He Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser 290 295 300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala 305 310 315 320

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg 325 330 335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr 340 345 350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu 355 360 365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro 370 375 380

Gin Asn Leu He Lys Gin Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gin Leu Gly Glu 385 390 395 400

Tyr Lys Phe Gin Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro 405 410 415

Gin Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Uu Gly Lys 420 425 430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys 435 440 445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gin Leu Cys Val Leu His 450 455 460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser 465 470 475 480

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr 485 490 495 Τγτ Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp 500 505 510 lie Cys Thr l^u Ser Glu Lys Glu Arg Gin lie Lys Lys Gin Thr Ala 515 520 525

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gin Leu 530 535 540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys 545 550 555 560

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val 565 570 575

Ala Ala Ser Gin Ala Ala Leu Gly Leu Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590 152984-序列表.doc 201138801

Gly Q\y Gly Gly Ser Gly Gly Gly Giy Ser Gly Lys Glu Cys Asp Cys 595 600 605

Ser Ser Pro Glu Asn Pro Cys Cys Asp Ala Ala Thr Cys Lys Leu Arg 610 615 620

Pro Gly Ala Gin Cys Gly Glu Gly Leu Cys Cys Glu Gin Cys Lys Phe 625 630 635 640

Ser Arg Ala Gly Lys lie Cys Arg lie Ala Arg Leu Asp Asp Leu Asp 645 650 655

Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys Pro Arg Tyr His 660 665 670 <210> 16 <211> 670 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述：HSA-ARLDDL C34A突變體 <400> 16

Asp Ala His Lys Ser Glu \;al Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu 15 10 15

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu He Ala Phe Ala Gin Tyr Leu Gin 20 25 30

Gin Ala Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 40 45

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Ala Asp Leu Ala Lys Tyr He Cys Glu Asn Gin Asp Ser lie Ser 152984·序列表.doc 201138801 260 265 270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His 275 280 285

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Asp Arg Cys Thr Gly Gin Ser Ala Asp Cys Pro Arg Tyr His 660 665 670 -10- 152984-序列表.doc

Claims (1)

1. 201138801 七、申請專利範圍： 1. 一種治療及/或預防血管新生相關之眼疾之組合物，其包 含低劑量之包含選自SEQ id NO: 1至SEQ ID NO: 16之胺 基酸序列的蛇毒蛋白變異體或該蛇毒蛋白變異體之醫藥 學上可接受之鹽。 2. 如清求項1之組合物’其中該胺基酸序列係選自SEQ ID N〇: 9及 SEQ ID NO: 15。 3. 如明求項1之組合物，其中該胺基酸序列為SEq id NO: 15 ° 4·如凊求項1之組合物’其中該蛇毒蛋白變異體與白蛋白 結合或經聚乙二醇化。 5.如咐求項1之組合物’其中該低劑量為約〇 〇〇〇1 pg至約 Pg該蛇毒蛋白變異體。 6·如吻求項1之組合物，其中該低劑量為約〇 〇〇〇5 pg至約 20〇 Kg該蛇毒蛋白變異體。 7如响求項1之組合物’其中該低劑量為約0.001 pg至約 100 Kg該蛇毒蛋白變異體。 8. 如吻求項1之組合物，其中該組合物係調配為局部組合 物。 9. 如吻求項1之組合物，其中該組合物係調配為可注射組 合物。 10. 種/〇療及/或預防血管新生相關之眼疾之組合物，其包 含低劑量之包含SEQ ID Ν〇: 15之胺基酸序列的蛇毒蛋白 變異體或該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽。 152984.doc 201138801 11. 種如3青求項1之組合物的用途，其用於製造供治療及/ 或預防血管新生相關之眼疾的藥劑。 12. 種包含選自SEQ ID NO: 1至SEQ ID NOM6之胺基酸序 列的蛇t蛋白變異體或該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可 接又之鹽的用途，其用於製造供治療及/或預防個體之金 管新生相關之眼疾的藥劑。 13·如凊求項12之用途’其中該血管新生相關之眼疾係選自 由下、、且成之群·年齡相關黃斑變性、糖尿病性視網膜 病角膜新生血管病、視網膜企管瘤增生、息肉狀脈絡 膜血:病、年齡相關局部缺血誘發之新生血管視網膜 病、间度近視及早產兒視網膜病。 其中該血管新生相關之眼疾為年齡 其中该血管新生相關之眼疾為糖尿 14.如請求項13之用途， 相關黃斑變性。 1 5.如請求項13之用途， 病性視網膜病》 16. 如請求項12之用途， 合或經聚乙二醇化。 17. 如請求項12之用途， 該個體之眼睛。 18.如請求項12之用途 眼睛。 其中該蛇毒蛋白變異體與白蛋白結 其中该個體為人類且該藥劑係投與 其中該藥劑係局部施用於該個體之 19.如請求項〗2之用途， 用於該個體之眼晴。 其中該藥劑係經由 破缡體内注射施 20.如請求項11之用途 其中該藥劑係與另一 活性劑組合使 152984.doc 201138801 用。 21. 如請求項20之用途，其中該另一活性劑係選自由vegf 结抗劑、抗血管新生劑、消炎劑及類固醇組成之群。 22. 如請求項20之用途，其中該另一活性劑係與該藥劑同時 投與。 23. 如請求項20之用途，其中該另一活性劑係在投與該 之前投與。 24. 如請求項20之用途，其中該另一活性劑係在投與該藥劑 之後投與。 25· —種包含SEQ ID NO: I5之胺基酸序列的蛇毒蛋白 ’交吳體 或該蛇毒蛋白變異體之醫藥學上可接受之鹽的用途，复 用於製造供治療及/或預防血管新生相關之眼疾的藥劑、 152984.doc