TW201105673A - Novel 1,2,3,4-tetrahydropyrimido{1,2-a}pyrimidin-6-one derivatives, preparation thereof and pharmaceutical use thereof - Google Patents

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TW201105673A TW099121933A TW99121933A TW201105673A TW 201105673 A TW201105673 A TW 201105673A TW 099121933 A TW099121933 A TW 099121933A TW 99121933 A TW99121933 A TW 99121933A TW 201105673 A TW201105673 A TW 201105673A
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Bruno Filoche-Romme
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Karl Andreas Karlsson
Gilbert Marciniak
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Laurent Schio
Bertrand Vivet
Fabrice Viviani
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Description

201105673 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於衍生自嘧啶酮之新穎化合物（1，2,3，4-四氫 嘧啶并U，2-a}嘧啶-6-酮）、其製備方法、所得新穎中間 物、其作為藥劑之用途、含有其之醫藥組合物、及該等衍 生物之新穎用途。 因此’本發明亦係關於該等衍生物用於製備供治療人類 用之藥劑的用途。 更詳言之，本發明係關於新穎嘧啶酮衍生物，及其用於 預防及治療能夠由抑制PI3K/AKT/mTOR路徑而調節之病 狀的醫藥用途。AKT為此信號傳導路徑中之關鍵參與者。 在許多人類癌症中發現，高程度之AKT磷酸化為此路徑活 化之標記物。 因此，本發明產物可特定言之用於預防或治療能夠由抑 制AKT磷酸化（P-AKT)而調節之病狀。對P-AKT之抑制可 尤其藉由抑制PI3K/AKT/mTOR路徑，及特定言之藉由抑 制屬於此路徑之激酶，例如受體酪胺酸激酶（諸如EGFR、 IGFR、ErbB2)、3·-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶-l(PDKl)、 PI3K磷酸肌醇激酶、AKT絲胺酸-蘇胺酸激酶或mTOR激酶 來實現。 抑制及調控PI3K/AKT/mTOR路徑特定言之構成一種治 療包括固體及液體腫瘤之大量癌症疾病的新穎且強大之作 用機制。 可由本申請案之產物治療之該等病狀為固體或液體人類 149299.doc 201105673 腫瘤。 本發明亦係關於新穎嘧啶酮衍生物，及其用於預防及治 療受調節自體吞噬影響之病狀的醫藥用途。抑制及調控自 體吞噬構成一種治療包括固體及液體腫瘤之大量癌症疾病 之新穎作用機制。 本發明亦係關於新穎嘧啶酮衍生物，及其用於治療諸如 癔疾、昏睡病、恰加斯氏症（Chagas disease)或利什曼病 (leishmaniasis)之寄生蟲病的醫藥用途。 【先前技術】 PI3K/AKT/mTOR路徑之作用 PI3K/AKT/mTOR信號傳導路徑為調控多種在腫瘤形成 中為關鍵過程之細胞功能（諸如生長、存活、增殖及細胞 運動）的複雜網狀結構。 此信號傳導路徑為癌症治療中之重要標靶，因為其大部 分效應子（effector)在人類腫瘤中均有所改變。促進此路徑 活化之主要效應子為：i)由突變、擴增或過度表現而活化 之致癌基因，諸如ErbBl(EGFR)、ErbB2(HER2)、PIK3CA 及AKT ; ii)諸如PTEN、TSC1/2、LKB及PML之腫瘤抑制 基因缺乏，該等腫瘤抑制基因在突變或缺失之後失活 (Jiang L-Z及Liu L-Z, Biochim Biophys Acta, 2008，1784:150 ; Vivanco I及Sawyers CL，2002，Nat Rev Cancer, 2:489 ; Cully Μ 等人，Nature Rev. Cancer, 2006, 6:184) 〇 在許多人類癌症疾病中發現此信號傳導路徑之致癌基因 之活化： 149299.doc 201105673 -15%-30%之結腸癌、乳癌、子宮内膜癌、肝癌、卵巢 癌及前列腺癌中存在PIK3CA活化突變（TL Yuan及LC Cantley，Oncogene, 2008，27:5497 ; Y. Samuels 等人， Science, 2004，304:554 ; ΚΕ· Bachman等人，Cancer Biol Ther，2004，3:772 ; DA Levine等人，Clin Cane Res. 2005, 11:2875 ; C. Hartmann 等人，Acta Neuropathol. 2005, 109:639)； - 腦癌、乳癌及肺癌（NSCLC)中諸如EGFR及HER2之RTK 擴增、活化突變及過度表現； - 腦癌、肺癌（NSCLC)、乳癌、腎癌、卵巢癌及胰腺癌 中AKT擴增及活化過度表現（Testa JR.及Bellacosa A.， Proct. Natl. Acad. Sci. USA 2001，98:10983 ; Cheng等人， Proct. Natl. Acad. Sci. USA 1992，89: 9267 ; Bellacosa等 人，Int· J· Cancer，1995，64:280 ; Cheng等人，Proct· Natl. Acad. Sci· USA 1996，93:3636 ; Yuan等人，Oncogene, 2000, 19:2324)。 在許多人類癌症疾病中亦發現缺乏此信號傳導路徑之腫 瘤抑制基因： 〇 50%之肺癌（NSCLC)、肝癌、腎癌、前列腺癌、乳 癌、腦癌、胰腺癌、子宮内膜癌及結腸癌中缺 失（Maxwell GL 等人，Cane. Res. 1998，58:2500 ; Zhou X-P 等人，Amer. J. Pathol.，2002，161:439 ; Endersby R及 Baker SJ，Oncogene, 2008, 27:5416 ； Li 等人，Science，1997, 275:1943 ; Steack PA等人，Nat. 149299.doc 201105673
Genet.，1997, 15:356); 〇 50%以上之結節性硬化症中JWC7/2突變； 〇 i：尺57(或57^77)突變或缺失，其易於引起胃腸道癌及 胰腺癌，且尤其在10%-38%之肺腺癌中發規& (Shah U·等人，Cancer Res. 2008, 68:3562); 。人類腫瘤中PMZ尤其藉由易位而經修飾（Gumen κ 人，J. NAtl Cancer Inst. 2004，96:269)。 另外，此信號傳導路徑為對例如化學療法、放射性痛' 法、及諸如EGFR及HER2抑制劑之靶向療法產生抗性的 要因素（C. Sawyers 等人，Nat Rev 2002)。 AKT之作用 AKT(蛋白激酶B ; PKB)為一種在主要細胞信號傳導路位 之一 PI3K/AKT路徑中佔據重要地位的絲胺酸-蘇胺酸激 A 丁 酶。AKT尤其涉及腫瘤細胞之生長、增殖及存活中。 活化以兩步發生：（1)藉由PDK1使蘇胺酸308鱗酸化（P_ T308);及（2)藉由mTORC2(或mTOR-Rictor複合物）使絲月女 酸473磷酸化（P-S473)，從而導致完全活化。AKT又調控大 量蛋白質，包括mTOR(雷帕黴素（Rapamycin)之哺乳動物 標靶）、BAD、GSK3、p21、p27、FOXO 或 FKHRLl(Manning BD及Cantley LC，Cell，2007 129:1261)。AKT活化可促進養分 内在化，因此引發支撐細胞生長及增殖之合成代謝過程。 詳言之，AKT經由一藉助於TSCl/2(結節性硬化症複合 物）、Rheb及TOR而發生之相互作用級聯，控制蛋白質合 成之開始，以便產生此信號傳導路徑之兩個主要標靶 149299.doc 201105673 p70S6K與4EBP。AKT亦誘發對又頭轉錄因子磷酸化之抑 制及GSK3P之失活，從而導致細胞凋亡之抑制及細胞週期 之進展（Franke TF，〇nc〇gene，2008, 27:6473)。因此，ΑΚΤ 為抗癌療法之標靶，且藉由抑制ΑΚΤ磷酸化來抑制ΑΚΤ活 化可誘發惡性細胞之細胞凋亡，且同樣提供對癌症之治 療。 諸如IGF1R之受體酪胺睃激酶 異常高程度之蛋白激酶活性牽連於多種由細胞功能異常 引起之疾病中。此可能直接或間接源於控制該激酶活性之 機制發生功能障礙，此功能障礙與例如酶之不適當突變、 過度表現或活化相關’或歸因於細胞因子或生長因子過度 產生或產生不足，亦涉及激酶之上游或下游信號之轉導。 在所有此等狀況下，激酶作用之選擇性抑制有希望產生有 益效果。 類膜島素生長因子第1型受體為一種跨膜受體 酪胺酸激酶，其首先結合於沁打，而且亦以較弱親和力結 合於IGFII及胰島素。IGFU#合於其受體會導致該受體寡 聚，酪胺酸激酶活化，細胞受質（主要受質：汛“及汕匀 之分子間自體磷酸化及磷酸化。由配位體活化之該受體誘 發正常細胞中之促有絲分裂活性。然而，在「異 常」生長中起重要作用。 若干臨床報導強調〗G F ·〗路徑在人類癌症發展中之重要 作用： 常在許多腫瘤類型（乳癌、結腸癌、肺癌、肉瘤、前列 149299.doc 201105673 且其存在 腺癌多發性骨髓瘤）中發現IGF-I-R過度表現， 常與更具侵襲性之表型相關聯。 门循％ IGF1濃度與前列腺癌、肺癌及乳癌風險密切相 ,此外’已廣泛證明’ IGIM_R為活體外建立及維持經轉 里表型所而，如同活體内般[Baserga R, Exp. Cell Res 1999 略 ，，第I-6頁]。IGF-I-R之激酶活性對以下若干致癌 基因之轉型活性而言不可或缺：EGFR、PDGFR、SV40病 毒廣泛τ抗原、活化Ras、Raf及v Src。igf小r在正常纖維 母細胞t之表現會誘發贅生性表型，隨後可引起活體内腫 瘤形成。IGF-I-R之表現在不依賴於受質之生長中起重要 作用。IGF-I-R亦已展示其為化學療法及放射線誘發之細 胞凋亡及細胞因子誘發之細胞凋亡中的保護劑。此外，藉 由顯性負性作用抑制内源性IGF-I-R、形成三股螺旋或表 現反義會抑制活體外轉型活性及減緩動物模型中腫瘤生 長0 PDK1 3’-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶_1(PDK1)為PI3K-AKT信號 傳導路徑之主要組份之一。其為一種用以使涉及細胞生 長、增殖及存活之控制及代謝之調控的AGC家族之其他 Ser/Thr激酶磷酸化及活化的絲胺酸-蘇胺酸（Ser/Thr)激 酶。此等激酶包括蛋白激酶B(PKB或AKT)、SGK(或血清 及糖皮質激素調控之激酶）、RSK(或p90核糖體S6激酶）、 p70S6K(或p70核糖體S6激酶）以及蛋白激酶C(PKC)之各種 149299.doc 201105673 同功異型物）（Vanhaesebroeck B.及 Alessi DR.，Biochem J 2000，346:561)。因此，PDK1之關鍵作用之一為活化 ΛΚΤ :在由PI3K產生之第二信使PIP3存在下，PDK-1經由 其PH(普列克受;質蛋白同源（pieckstrin homology))結構域募 集至質膜’且使AKT在位於活化環中之蘇胺酸308上磷酸 化’此為對AKT活化之主要修飾。PDK1普遍表現，且為 組成性活性激酶。PDK1為調控腫瘤形成中之關鍵過程（諸 如細胞增殖及存活）之PI3K/AKT信號傳導路徑中的關鍵元 件。因為此路徑在5 0%以上之人類癌症中活化，所以pDK i 表示抗癌療法之標靶。抑制PDK1將有效地抑制癌細胞之 增殖及存活，且因此為人類癌症提供治療益處（Bayaseas
JR，Cell cycle，2008, 7:2978 ; Peifer C.及 Alessi DR
ChemMedChem，2008, 3:1810)。 磷酸肌醇3-激酶（PI3K) 對於腫瘤學，PI3K脂質激酶為此信號傳導路徑中之重要 標靶。第I類PI3K分成由受體酪胺酸激酶（RTK)、G蛋白質 偶聯受體（GPCR)、Rho家族GTPase及p21-Ras活化之第1&類 (ΡΙ3Κα、β、δ)，及由 GPCR 及 p21-Ras 活化之第 lb 類 (ΡΙ3Κγ)。第la類PI3K為由催化次單元ρΙΙΟα、β或δ及調控 次單元ρ85或ρ55組成之異源二聚體。第lb類（ρΙΙΟγ)為單 體。第I類ΡΙ3Κ為在膜募集後由RTK、GPCR或Ras活化之 脂質/蛋白激酶。此等第I類PI3K使4,5-二磷酸磷脂醯肌醇 (PIP2)在肌醇位置3上磷酸化，以便得到此信號傳導路徑中 之關鍵第二信使磷脂醯肌醇3,4,5-三磷酸酯（PIP3)。PIP3又 149299.doc -10- 201105673 將AKT及PDK1募集至膜，AKT及PDK1在膜中經由普列克 受質蛋白同源結構域（PH結構域）結合，引起藉由蘇胺酸 308上PDK1磷酸化使AKT活化。AKT使許多受質磷酸化， 因此在引起細胞轉型之許多過程（諸如細胞增殖、生長及 存活）以及血管生成中起關鍵作用。 第I類PI3K牵連於人類癌症中：在15°/。-35°/()之人類腫瘤 中發現編碼ΡΙ3Κα之PIK3CA基因發生體細胞突變，特定言 之為兩個主要致癌突變H1047R(在激酶結構域中）及 Ε545Κ/Ε542Κ(在螺旋結構域中）（Y. Samuels等人，Science， 2004, 304:554 ； TL Yuan及 LC Cantley, Oncogene, 2008, 27:5497)。預期PI3K抑制劑可有效地治療多種顯示引起 PI3K/AKT/mTOR路徑活化之基因變化的人類癌症（Vogt. P. 等人，Virology, 2006，344:131 ; Zhao L及Vogt PK，Oncogene, 2008, 27:5486)。
mTOR mTOR(雷帕黴素之哺乳動物標靶）為一種與PI3K家族之 脂質激酶相關的絲胺酸-蘇胺酸激酶。mTOR牽連於包括細 胞生長、增殖、運動及存活之各種生物過程中。mTOR為 一種多功能激酶，其整合來自生長因子之信號與來自養分 之信號，以調控蛋白質轉譯、養分攝取、自體吞噬及線粒 體功能。mTOR以兩種不同複合物形式存在，稱為 mTORCl 及 mTORC2。mTORCl 含有 raptor 次單元且 mTORC2含有rictor次單元。此兩種複合物調控有所不同： mTORCl使S6激酶（S6K)及4EBP1磷酸化，因此刺激轉譯及 149299.doc 201105673 核糖體生物發生，從而促進細胞生長及細胞週期進展。 S6K亦在減少AKT活化之反饋路徑中起作用。mTORCl對 雷帕黴素敏感，而mTORC2 —般對雷帕黴素不敏感。 mTORC2似乎藉由使AKT在絲胺酸殘基473上磷酸化來調節 生長因子信號傳導。mTOR牵連於各種病理性病狀中，尤 其包括癌症、糖尿病、肥胖症、心血管疾病及神經系統病 症。mTOR藉由整合細胞内與細胞外信號，諸如由生長因 子、養分、能量水準（energy level)及細胞壓力輸送之信 號，來調節許多生物過程，包括轉譯、自體吞噬及核糖體 生物發生（Guertin D.A.及Sabatini D·，Cancer Cell，2007, 12: 9 ; Menon S.及Manning B.D.，Oncogene, 2009, 27 :S43)。 自體吞噬之作用 自體吞噬為一種溶酶體依賴性細胞内降解機制（細胞 器、長壽蛋白質等）。自體吞噬過程涉及稱為自體吞噬體 之特定微脂粒的形成。第III類PI3K脂質激酶（Vps34)涉及 自體吞噬體之形成中。此第III類PI3K使磷脂醯肌醇（PI)在 肌醇3位置上磷酸化，以便得到磷脂醯肌醇3-三磷酸酯 (PI3P)。PI3P為經由募集諸如WIPI、DFCP1及Alfy之蛋白 質而形成自體吞噬體中的關鍵第二信使。自體吞噬為一種 使細胞在壓力情況下，例如面對代謝壓力時能夠存活之細 胞存活機制。在癌症狀況下，自體吞噬牽連於腫瘤細胞在 面對諸如低氧、氧化應激、養分不足之環境壓力以及面對 用抗癌劑治療、電離輻射之治療壓力時所產生之抗性中。 抗瘧疾化學療法之應用 149299.doc -12- 201105673 癔疾為世界上死亡之主要感染起因之一，且每年影響1 億至2億個體。過去數年間觀測到此疾病死灰復燃之原因 可為包括以下之若干因素： -載體，即癔蚊（anopheles mosquitoes)，其對習知廉價殺 昆蟲劑有抗性， -處於危險區域中之人口增加，且主要地， -造成此致命形式之疾病的寄生蟲惡性瘧原蟲 (Plasmodium falciparum)之大量品系對習用藥劑（諸如氯喹 (chloroquine)及甲氟喹（men〇qUine))有抗性。 瘧原蟲屬品系（Plasmodium)中、尤其惡性瘧原蟲（p falciparum)對大部分抗癔疾藥劑之抗性的傳播證明急需開 發具有新穎作用模式且因此能夠減少交叉抗性風險之新穎 化合物。人類激酶為已在許多病理性病狀之治療中得到驗 證證實之標靶，且已提議惡性瘧原蟲之激酶組（kin〇me)作 為新穎標靶之儲集器，用於開發尚未在瘧疾治療中研究之 新穎藥劑。 惡性瘧原蟲激酶組由64個激酶構成，其中一些為人類激 酶之直系同源'才勿。&測試㈣信？虎傳導路徑抑制劑在活體 外及活體内抑制惡性癔原蟲及造成癔疾之其他致病物種之 生長的能力。 在使用感染之人類紅血球的活體外測試中，本發明分子 在1 μΜ及0.1 μΜ下抑制惡性癌原蟲（高度抗氣啥之品系 FCm29_Cameroon)之生長，如表2中所示。 、 類似激酶組存在於所有癔原蟲屬物種中諸如惡性癌原 149299.doc . 201105673 蟲、間曰癌原蟲（Ρ· vivax)、三曰瘧原蟲（P. malariae)、蛋 形癔原蟲（Ρ· ovale)及謹氏遽原蟲（P. knowlesi)。因此，本 發明化合物可用於治療由上文所提及之所有寄生蟲誘發之 瘧疾。另外，在其他寄生蟲中發現此等激酶，諸如錐蟲屬 (Trypanosoma)(例如布氏錐蟲（T. brucei)、克氏錐蟲（T. cruzei))及利什曼原蟲屬（Leishmania)(例如碩大利什曼原蟲 (L. major)、杜氏利什曼原蟲（L. donovani))。因此，本發 明化合物可用於治療昏睡病、恰加斯氏症、各種形式之利 什曼病及其他寄生蟲感染。 抑制激酶之嗎琳并嘴°定_衍生物為熟習此項技術者所知。 申請案WO 2008/148074描述具有mTOR抑制活性之產 物。此等產物為吡啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其與本發明產物 之不同之處在於其整體上之芳香性及其取代。 申請案WO 2008/064244描述抑制ΡΙ3Κβ之產物TGX-221 及TGX-155的應用，其用於治療癌症且特定言之治療乳 癌。此等產物為先前於申請案WO 2004/016607及WO 2001/053266中描述之吡啶并[i，2-a]嘧啶-4·酮，其與本發 明產物之不同之處在於其整體上之芳香性及其取代。 申請案 WO 2006/109081、WO 2006/109084及 WO 2006/126010 描述抑制DNA-PK之產物，其用於治療缺乏ATM之癌症。 此等產物為吡啶并[1，2-a]嘧啶_4_酮，其與本發明產物之不 同之處在於其整體上之芳香性及其取代。 申請案WO 2003/024949描述抑制DNA-PK之產物，其用 於治療ATM缺乏之癌症《此等產物為吡啶并[丨，2-a]嘧啶-4- 149299.doc 201105673 酮，其與本發明產物之不同之處在於其整體上之芳香性及 其取代。 【發明内容】 本發明之標的為式（I)產物， R3 -R2
其中： R1表示-L-芳基或-L-雜芳基，其中L表示： 單鍵， 或含有1至6個碳原子且視情況經羥基取代之直鏈或分支 鏈烧基， 或CO或-CO-烷基-， 或L’-X基團，其中L1表示含有1至6個碳原子之直鏈或分 支鏈烷基，且X為氧原子或硫原子； 該等芳基及雜芳基視情況經一或多個選自以下之可相同 或不同的基團取代：鹵素原子，及羥基、CN、硝基、 -COOH、-COO烷基、-NRxRy、-CONRxRy、-NRxCORy、 -NRxC02Rz、-CORy、烷氧基、苯氧基、烷硫基、烷基、 環烷基及雜環烷基； 後面之烷氧基、苯氧基、烷硫基、烷基及雜環烷基本身 149299.doc -15- 201105673 視情況經一或多個選自函素原子及NRvRw之可相同或不同 的基團取代； ^專雜環燒基及雜芳基可另外含有側氧基（0X0); R2表示氫原子或烷基； R3表不視情況經一或多個鹵素原子取代之烷基； R4表示氫原子或鹵素原子； NRxRy如下.rx表示氫原子或烧基，且表示氫原子或 視情況經一或多個選自羥基、烷氧基、NRvRw及雜環烷基 之可相同或不同的基團取代之環烷基或烷基；或與 其連接之氮原子一起形成含有3至1〇個環成員且視情況含 有一或多個選自〇、S、NH及N-烷基之其他雜原子的環狀 基團’此環狀基團視情況經取代； NRvRw如下：Rv表示氫原子或烷基，且rw表示氫原子 或視情況經一或多個選自羥基、烷氧基及雜環烷基之可相 同或不同的基團取代之環烷基或烷基；或Rw與其連 接之氮原子一起形成含有3至1〇個環成員且視情況含有一 或多個選自Ο、S、NH及N-烷基之其他雜原子的環狀基 團，此環狀基團視情況經取代；
Rx及Ry或Rv及RW可分別與其連接之氮原子一起形成之 環狀基團視情況經一或多個選自以下之可相同或不同的基 團取代：函素原子，及烷基、羥基、侧氧基、烷氧基、 NH2、NH烷基及N(烷基）2 ;
Rz表示除氫之外的Ry之涵義； -NRxCORy、-CORy 及 NRxC02Rz基團中之 Rx、Ry 及 Rz -16 - 149299.doc 201105673 係選自以上針對Rx、Ry及Rz所指示之含義； 該等式（I)產物為所有可能之外消旋、對映異構體及非對 映異構體形式，以及該等式（I)產物與無機酸及有機酸或與 無機驗及有機驗形成之加成鹽。 因此，本發明之標的為如上定義之式（I)產物，其中： R1表示-L-芳基或-L-雜芳基，其中L表示： 單鍵， 或含有1至6個碳原子且視情況經羥基取代之直鏈或分支 鍵烧基， 或CO基團， 或L'-X基團，其中表示含有1至6個碳原子之直鏈或分 支鏈烷基，且X為氧原子或硫原子； 該等芳基及雜芳基視情況經一或多個選自以下之可相同 或不同的基團取代：鹵素原子，及羥基、CN、硝基、 -COOH、-COO烷基、-NRxRy、-CONRxRy、-NRxCORy、 -NRxC02Rz、-CORy、烷氧基、苯氧基、烷硫基、烷基、 環烷基及雜環烷基； 後面之烷氧基、苯氧基、烷硫基、烷基及雜環烷基本身 視情況經一或多個選自鹵素原子及NRvRw之可相同或不同 的基團取代； 雜環烷基及雜芳基亦可含有側氧基； R2表示氫原子或烷基； R3表示視情況經一或多個鹵素原子取代之烷基； R4表示氫原子或i|素原子； 149299.doc •17- 201105673 NRxRy如下：RX表示氫原子或烷基，且Ry表示氫原子或 視情況經一或多個選自羥基、烷氧基、NRVRW或雜環烷基 之可相同或不同的基團取代之環烷基或烷基；或Ry與 其連接之氮原子一起形成含有3至10個環成員且視情況含 有一或多個選自0、S、NH及N-烷基之其他雜原子的環狀 基團，此環狀基團視情況經取代； NRvRw如下：RV表示氫原子或烷基，且rw表示氫原子 或視情況經一或多個選自羥基、烷氧基及雜環烷基之可相 同或不同的基團取代之環烷基或烷基；或Rv&Rw與其連 接之氮原子一起形成含有3至1〇個環成員且視情況含有一 或多個選自Ο、S、NH及N-烷基之其他雜原子的環狀基 團，此環狀基團視情況經取代；
Rx及Ry或Rv及RW可分別與其連接之氮原子一起形成之 環狀基團視情況經一或多個選自以下之可相同或不同的基 團取代：函素原子，及烷基、羥基、側氧基、烷氧基、 NH2、NH烷基及N(烷基）2 ;
Rz表示除氫之外的Ry之涵義； -NRxCORy、-CORy 及 NRxC02Rz 基團中之 RX、r>^Rz 係選自以上針對Rx、Ry及尺2所指示之含義； S玄等式（I)產物為所有可能之外消旋、對映異構體及非對 映異構體形式，以及該等式⑴產物與無機酸及有機酸或與 無機驗及有機驗形成之加成鹽。 在式（I)產物中： -術語「烷基」表示直鏈及適當時分支鏈甲基、乙基、丙 149299.doc -18- 201105673 基、異丙基、丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、戊 基、異戊基、己基、異己基以及庚基、辛基、壬基及癸 基’以及其直鏈或分支鏈位置異構體：較佳為以上清單中 含有1至6個碳原子之烧基，且更尤其較佳為以上清單中含 有1至4個碳原子之烷基； -術語「烧氧基」表示直鏈及適當時分支鏈甲氧基、乙氧 基、丙氧基、異丙氧基、直鏈丁氧基、第二丁氧基或第三 丁氧基、戊氧基或己氧基，以及其直鏈或分支鏈位置異構 體：較佳為以上清單中含有1至4個碳原子之烷氧基； -術語「烷硫基」表示直鏈及適當時分支鏈基團甲硫基、 乙硫基、丙硫基、異丙硫基、直鏈丁硫基、第二丁硫基或 第三丁硫基、戊硫基或己硫基，以及其直鏈或分支鏈位置 異構體.較佳為以上清單中含有1至4個碳原子之烷硫基； -術5吾「鹵素原子」表示氣原子、溴原子、碘原子或氟原 子，且較佳為氣原子、溴原子或氟原子； -術浯「％烷基」表示含有3至丨〇個碳原子之飽和碳環基 團且因此特定言之表示環丙基、環丁基、環戊基及環己 基’且最特定言之為環丙基、環戊基及環己基； _在-0_環烷基中，環烷基如上定義； 因此術°吾「雜環烧基」表示含有3至10個環成員且雜有 一或多個選自氫甩工 ^ ^ 礼原子、氮原子或硫原子之可相同或不同的 雜原子之單裱或雙環碳環基團：例如可提及嗎啉基、硫嗎 啉基：高嗎啉基、吖丙啶基、吖丁啶基、哌嗪基、哌啶 〔秦基、°比咯啶基、咪唑啶基、吡唑啶基、四氫呋 149299.doc -19- 201105673 喃基、四氫噻吩基、四氫哌喃甚 兩I、側氧基二氫噠嗪基或氧 雜環丁烧基，所有此等基團均視情況經取代；可尤立提及 嗎琳基、硫嗎琳基、高嗎琳基、派嗅基、派咬基、高派嗓 基或。比"各°定基； -術5吾$基」及「雜芳基」分別表示含有至多12個環成 貝且視情況可含有-c(0)-環成員之碳環及雜環不飽和或部 分不飽和單環或雙環基團，該等雜環基含有一或多個選自 0、N或S之可相同或不同的雜原子，其中適當時n上視情 況經取代； -因此術語「芳基」表示含有6至12個環成員之單環或雙 環基團，諸如苯基、萘基、聯苯基、節基、g基及g基， 更特定s之為苯基及萘基，且甚至更特定言之為苯基。可 注意到含有-c(〇)環成員之碳環基團為例如四氫萘酮基； -因此術語「雜芳基」表示含有5至12個環成員之單環或 雙環基團：單環雜芳基，諸如以下基團：諸如2_噻吩基及 3- °塞吩基之噻吩基、諸如2-呋喃基或3_呋喃基之呋喃基、 哌喃基、吡咯基、吡咯啉基、吡唑啉基、咪唑基、吡唑 基、諸如2-吡啶基、3_吡啶基及4_吡啶基之吡啶基、吡嗅 基、嘧啶基' 噠嗪基、噁唑基、噻唑基、異噻唑基、二哇 基、°塞二。坐基、°塞三。坐基、°惡二°坐基、諸如3 -異嗎唾基或 4- 異°惡唾基之異噁唑基、呋咕基、游離或鹽化四唑基，所 有此等基團均視情況經取代，其中更特定言之為以下基 團：諸如2-噻吩基及3-噻吩基之噻吩基、諸如2-呋喃基之 吱喃基、吡咯基、吡咯啉基、吡唑啉基、咪唑基、吡唑 149299.doc -20- 201105673 基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基及噠嗪基，此等基團視情 況經取代；雙環雜芳基，諸如以下基團：諸如3苯并噻吩 基之苯并噻吩基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、二氫 喹啉基、喹諾酮基、四氫萘酮基、金剛烷基、苯并呋喃 基異本并吱喃基、一鼠苯并α夫喃基、伸乙二氧基苯基、 噻嗯基、苯并吼咯基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、硫代萘 基、吲哚基、氮雜吲哚基、吲唑基、嘌呤基、噻吩并吡唑 基、四氫吲唑基、四氫環戊二烯并吼唑基、二氫呋喃并〇比 唑基、四氫吡咯并吡唑基、側氧基四氫吡咯并吡唑基、四 氫哌喃并吡唑基、四氫吡啶并吡唑基或側氧基二氫吡啶并 吼唾基，所有此等基團均視情況經取代。 更特定言之可提及視情況經一或多個如上指示之可相同 或不同的取代基取代之嘧啶基、吡啶基、吡咯基、氮雜吲 哚基、吲唑基或吼唑基、笨并噻唑基或苯并咪唑基作為雜 芳基或雙環基之實例。 式（I)產物之羧基可用熟習此項技術者已知之各種基團鹽 化或酯化’其中例如可提及： -在鹽化化合物中，無機驗，諸如鈉、卸、链、鈣、鎂戋 銨之等效物；或有機鹼，諸如甲胺、丙胺、三曱胺、二乙 胺二乙胺、Ν，Ν-—甲基乙醇胺、參（經甲基）胺基曱燒、乙 醇胺 '吡啶、甲基吡啶、二環己胺、嗎啉、苄胺 '普魯卡因 (procaine)、離胺酸、精胺酸、組胺酸及Ν_曱基葡糖胺； -在酯化化合物中，形成諸如例如：曱氧羰基、乙氧羰 基、第三丁氧羰基或苄氧羰基之烷氧羰基之烷基，此等烷 149299.doc -21 · 201105673 基可經選自例如以下之基團取代：画素原子，及羥基、炫 氧基、醯基、醯氧基、烷硫基、胺基或芳基，諸如例如： 氣甲基、羥丙基、甲氧基甲基、丙醯氧基甲基、曱硫基甲 基、二甲胺基乙基、苄基或苯乙基。 式⑴產物與無機酸或有機酸之加成鹽可例如為與鹽酸、 氫溴酸、氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、丙酸、乙酸、三氟 乙酸、甲酸、苯甲酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、琥珀 酸、酒石酸、檸檬酸、草酸、乙醛酸、天冬胺酸、抗壞血 酸、烷基單磺酸（諸如甲磺酸、乙磺酸或丙磺酸）、烷基二 磺酸（諸如甲二磺酸或α，ρ-乙二磺酸）、芳基單磺酸（諸如苯 磺酸）及芳基二磺酸形成之鹽。 可回想S ’立體異構在廣義上可定義為具有才目同結構 式’但各個基團在空間中排列不同之化合物異構現象，諸 如尤其在單取代之環己院(其中取代基可在軸向或赤道位 置中）及乙院衍生物之各種可能旋轉構形中。然而，由於 固疋取代基在雙鍵或環上之不同空 間排列而存在另一立體 。術語「立體 且因此涉及上 異構類型，通常稱為幾何異構或順_反異構 異構體」以最廣泛之涵義用於本申請案中， 文指示之所有化合物。 本發明之標的為如上定義之式⑴產物，其中 R1表示-L-苯基或-L-雜芳基，其中L表示. 單鍵， I直鏈驭 驭含有1至6個碳原 鍵炫基， 149299.doc -22- 201105673 或CO或-CO-烷基-， 或L-X基團’其中L1表示含右山js v 取τ 3有1至6個奴原子之直鏈或分 支鏈炫基’且X為氧原子或硫原子； 苯基及雜芳基視情況經一或多個選自齒素原子及_NRxRy、 烧氧基及烧基之可相同或不同的基團取代； 後面之烷氧基及烷基本身視情況經一或多個選自齒素原 子之基團取代； R2表示烷基； R3表不視情況經一或多個鹵素原子取代之烷基； R4表示氫原子或I原子； NRxRy如下：Rx表示氫原子或烷基，且Ry表示氫原子或 烷基；或Rx及Ry與其連接之氮原子一起形成冰嗎啉基； 所有以上烷基或烷氧基均為直鏈或分支鏈基團且含有夏 至6個碳原子， 该等式（I)產物為所有可能之外消旋、對映異構體及非對 映異構形式，以及該等式⑴產物與無機酸及有機酸或與無 機鹼及有機鹼形成之加成鹽。 詳ρ之^ NRxRy或NRvRw形成如上定義之環時，此類 胺壤可尤其特定言之選自吡咯啶基、吡唑啶基、吡唾淋 基、哌啶基、氮呼基、嗎啉基、高嗎啉基、哌嗪基或高哌 嗓基’此等基團本身視情況如上文或下文所指示來取代。 NRxRy或NRvRw環更尤其特定言之可選自以下基團：。比 略咬基、視情況經一或兩個烷基取代之嗎啉基、或視情況 在第二氮原子上經烷基、苯基及CHy苯基取代之哌嗪基， 149299.doc -23- 201105673 該等取代基本身視情況經一或多個選自齒素原子及烷基、 輕基及烧氧基之可相同或不同的基團取代。 本發明之標的最尤：i：料定古之氣 取九/、符疋。之為對應於以下各式之如上 定義之式（I)產物： -(叫9-[2-(4-甲氧基笨基）乙基]_2_(嗎琳·4基）_8_(三亂甲 基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4_酮 -9-[2-(4-甲氧基苯基）乙基]_2_(嗎啉_4基）_8_(三氟甲基）_ 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4_酮 -(8S)-2-(嗎 ϋ基）_9_(2_ 苯乙基）_8•(三氟甲基）6,7,8 9_ 四氫-4Η-°密咬并[l，2-a]嘴咬-4-_ -(8S)-9-卞基-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）_6,7 8,9四氫_ 4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮 _ (8S)-9-[(2S)-2-羥基-2-苯乙基]-2_(嗎啉_4_基）8(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4_酮 _ (8S)-9-[(2R)-2-羥基-2-苯乙基]-2-(嗎啉基）-8-(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮 -(8S)-9-[(2S)-2·羥基-2-(4-曱氧基笨基）乙基]·2_(嗎啉_4_ 基）-8-(二氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧。定并[1，2_3]„密0定_4-酮 -(8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-[(lR)-l-苯乙基]_8_(三氟甲基）_ 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-[l-(4-曱氧基苯基）乙基]_2_(嗎啉·4_基）_8_(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘴咬并[l，2-a]鳴。定-4-g同 -(8S)-9-[(lS)-l-(4-溴苯基）乙基]-2-(嗎啉_4-基）-8-(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4H-响咬并[l，2-a]〇^。定-4-_ 149299.doc -24- 201105673 -(8S)-9-[(lR)-l-(4-、/臭苯基）乙基]-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氣甲 基）-6,7,8,9-四氫-4Η-α密咬并[l，2-a]e密。定-4-酮 -(8S)-2-(嗎琳-4 -基）-9-苯基-8-(二氣曱基）-6,7,8,9-四氮· 4Η-σ密咬并[1,2-a]°密咬-4-綱 -(8S)-9-(4-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-· 四氫-411-°密σ定并[1，2-a]a密咬-4-酮 -(8S)-9-(3-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4Η-°^ α定并[1，2-a]鳴。定-4-酮 -(8S)-9-(2-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-411-°密。定并[1，2-a] °密α定-4-酮 -(8S)-9-[(lR)-l-(3-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-411-°密咬并[1，2-3]'1密。定-4-酮 -(8S)-9-(4-氟苄基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-t^密咬并[l，2-a]嘴°定-4-酮 -(8S)-2-(嗎咐·_4-基）-9-(苯基幾基）-8-(二敗曱基）-6,7,8,9_ 四氫-4Η-α密咬并[1,2 - a]σ密咬-4 -酮 -(8S)-2-(嗎琳-4-基）-9-(0比 α定-3-基）-8-(二氣甲基）-6，7，8，9· 四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(88)-2-(嗎啉-4-基）-9-(。比啶-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-411-°密。定并[l，2-a]°密咬-4-酮 -(8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-(吡啶-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-411-。密σ定并[l，2-a]°密咬-4-酮 -(8S)-9-(4-曱基苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-411-°密°定并[1，2-&]°密。定-4-酮 149299.doc -25- 201105673 -(8S)-9-(2·氣苄基）_2_(嗎啉·4·基）·8_(三氣甲 四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4·酮 基）·6,7,8,9_ -(8S)-9-(3-l节基）·2•(嗎琳_心基）_8、（三敦 四虱-4Η-α密咬并[1，2-a]喷咬 _4__ ) 6’7,8,9- -(8S)-9-[2-(2·甲氧基苯基）乙基]_2_(嗎琳{基）8 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2_a]嘧啶_4__ 8~(二氟甲 -(8S)-9-[2-(3-甲氧基苯基）乙基]_2_(嗎啉·4 基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[u-a]嘧啶_4_輞 〈二氟曱 -(8S)-9-(3-甲氧基节基）_2_(嗎琳基）$ ( 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧咬并[l，2-a]嘧咬_4_酮 氟甲基）_ -(8S)-9-(4-甲氧基苯基）-2-(嗎啉-4·基）8 ( _ 6，7,8,9 -四氫- 4Η_°密11 定并[1，2-a] 〇密咬-4 -酮 氟甲基）- -(8S)-9-[(2-敦苯基）幾基]-2-(嗎琳_4_基）8 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_西同 —敦曱基）--(8S)-9-(3,5-二氟苄基）-2-(嗎琳-4_ 基） 三氣审 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4-綱 τ基）- -(8S)-9-(2,4-二氟苄基）-2-(嗎啉 _4_ 基）·8 V 氣 p ^ 6.7.8.9- 四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧咬_4~酮 暴）- -(8S)-2-(嗎琳-4-基）-9-(2,3,4-三氟节基、〇 番广8-(三氟ψ Μ 6.7.8.9- 四氫-4Η-嘧啶并 H，2-a]嘧啶_4-酮 T i )- -(8S)-9-[(5-氣-1-苯并噻吩-3-基）曱基]_2、（嗎 (三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H·嘧啶并[Ha] 4~基）-8 -(8S)-9-[(lR或 lS)-l-(4-氣苯基）乙基 μ2·(嗎啉 _4 基）8 一 氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4Η-响啶并[u-a]嘧啶_4_綱 一 149299.doc -26· 201105673 -(8S)-9-[(lR或 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4·基）-8-(三 氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4Η-哺咬并[1，2-a]嘲0定-4-酮 • (8S)-9-(3-甲基苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）_ 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-(4-氣苯基）-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟曱基）_6,7,8,9-四氫-4H-响咳并[1，2-a]°密咬-4-酮 -(8S)-2-(嗎琳-4-基）-8-(三說甲基）-9-[4-(三氟曱基）苯基]· 6.7.8.9- 四氣-41^-°密咬并[1，2-3]喷咬-4-銅 _ (8S)-9-[(lR或 lS)-l-(2-氟笨基）乙基]-2-(嗎啉·心基）8_(= 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4-酮 • (8S)-9-[(lR 或 lS)-l-(2-氟苯基）乙基]·2_(嗎啉 _4·基( 一 氟甲基）-6,7,8,9-四氫·4Η·嘧啶并[i，2-a]嘧啶綱 — _ (8S)-9-[2-(3-氟苯基）乙基]_2_(嗎啉_4_基 # 〈一氟甲基）- 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-苄基-3-氟-2-(嗎啉-4-基）-8-(三患p宜、 亂1F 基）-6,7,8,9-四 氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧咬-4-酮 )-8-(三氟甲基）_ -(8S)-9-(3,5-二氟苯基）_2_(嗎啉 _4·基 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4-鲷 -(8S)-9-[(2,6-二氟苯基）羰基]_2_(嗎咻冰 J - ο - Γ —翁田 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶鲖 —Ψ -(8S)-9-[(2,4-二氟苯基）幾基]_2_(嗎啉基^… 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶酮 （一氟甲 _ (8S)-2-(嗎啉-4-基）_9-(苯基乙醯基& (—'瓶i甲其· \ 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶 _4_鲖 土 149299.doc •27· 201105673 -(8S)-9-[2-(3-氣苯基）乙基]-2-(嗎啉_4-基）_8_(三氟曱基）· 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -9-((R)-2-苯并[b]噻吩_2_基-2-羥乙基）_夂嗎啉_4_基_8_(§)_ 三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮 -9-[(S)-2-經基-2-(3-經基苯基）乙基]·2-嗎琳_4_基-8-(S)-三 氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧咬-4-蜩 _ 2-二曱胺基-N-{3-[(S)-l-羥基-2-((S)-8-嗎啉 _4_ 基 _6-側氧 基-2-二氧甲基-3,4-二氫-2H，6H-嘯。定并[i，2_a]嘴唆_ι_基）乙 基]苯基}乙醯胺 -9-[(S)-2-羥基-2-(2-曱氧基苯基）乙基]_2_嗎啉_4_基_8_(s)_ 三氟曱基-6,7,8,9 -四氫嘴。定并[1，2-3]响。定_4_綱 -9-[(S)-2-(4-氟-2-曱氧基苯基）-2-羥乙基]_2_嗎啉_4_基_8_ (S)-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]〇密咬·4_嗣 -9-[(S)-2-(4-氣-2-曱氧基苯基）-2-羥乙基]_2_嗎啉_4_基_8_ (S)-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮 -9-[(S)-2-(2-氣-4- f氧基苯基）-2-羥乙基]_2-嗎琳_4_基-8-(S)-三氟甲基·6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧咬_4_酮 -9-(2-經基-3-苯丙基）-2-嗎琳-4-基-8-(S)-三氟甲基- 6.7.8.9- 四氫嘧啶并[1，2-&]嘧啶-4-酮 -9-[2-(4-羥基苯基）乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟甲基- 6.7.8.9- 四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮 以及該等式（1)產物與無機酸及有機酸或與無機鹼及有機 鹼形成之加成鹽。 本發明之標的亦為任何製備如上定義之式⑴產物之方法。 I49299.doc •28· 201105673 本發明之產物可使用習知有機化學方法來製備。 製備式（I)化合物 以下一般流程1及2說明用於製備式（I)產物之方法。在此 方面，該等流程不可在所主張之化合物之製備方法方面對 本發明之範疇構成限制。 因此，如上定義之本發明式（I)產物可特定言之根據流程 1及2中描述之方法製備。 因此，本發明之標的亦為根據如下定義之流程1製備式 ⑴產物之方法。 因此，本發明之標的亦為根據如下定義之一般流程2製 備式⑴產物之方法。 一般流程1 :
(1)-2 149299.doc -29- 201105673 在一般流程1中： 胍A可賭得或根據Lochead，A.W·等人（EP1460076 2002)、Lochead，A.W.等人（EP1340761 2003)、Lochead， A.W.等人（EP1454909 2004)及 Lochead, A.W.等人（W0 2005 05 8908 2005)中描述之方法製備。 可藉由在諸如曱醇鈉之鹼存在下，於60°C與l〇〇°C之間 的溫度下，根據例如Badawey E.-S.A.M.等人（Eur J Med Chem, 1998，33(5), 349-361)所述之條件，使胍A與丙二酸 二烷酯（較佳為丙二酸二乙酯）B縮合，來獲得化合物C。 可藉由在溶劑缺乏下於20°C與120°C之間的溫度下，或 者在諸如二氣乙烷之溶劑存在下於20°C與溶劑沸點之間的 溫度下，例如在Yamashita, A.等人（Syn. Commun. (2004)， 34(5), 795-803)所述之條件下，用諸如氧氣化磷之氣化劑 處理化合物C，自化合物C獲得化合物D。 可藉由在溶劑缺乏下於20°C與120°C之間的溫度下，或 者在諸如乙腈之溶劑存在下於20°C與溶劑回流溫度之間的 溫度下，如例如 Aliabiev S.B.(Lett. Org. Chem. (2007), 4(4), 273-280)所述，使化合物D與嗎啉反應，自化合物D 獲得化合物E。 可藉助於烷基化或醯化反應，在烷基化反應之狀況下， 如例如 Ting P.C.等人(J. Med. Chem. (1990)，33(10)，2697-2706)所述，藉由在0°C與80°C之間的溫度下，添加化合物 F(R1-X，其中Rl =如上定義之L-芳基或雜芳基，且在烷基 化狀況下X=C1、Br、I或OTf，且在醯化狀況下X=C1)至化 149299.doc •30- 201105673 合物E與過量驗（諸如氫化納或碳酸絶）於溶劑（諸如四氫。夫 喃、N，N-二甲基曱醯胺或乙腈）中之混合物中，獲得化合 物⑴·1。 根據Tet. Assymetry 17 (2006) 2154-2182 中 E. P. Seest等 人所述之程序’自相應氣酮衍生物合成對應於對掌性〖_芳 基-2-氣乙醇或丨_雜芳基_2_氯乙醇之化合物f，該等氣酮衍 生物本身由市售乙醯基衍生物在標準條件下氣化而獲得。 如例如 Lianbo Z.等人（J. Org. Chem_ (2009)，74(5)，2200_ 2202)所述’可藉由在諸如碘化銅之偶合劑存在下，在諸 如（+/-)-反-1，2-二胺基環己烷或4,7-二曱氧基·no—啡啉之 銅配位體存在或缺乏下’在諸如峨酸鉀之驗存在下，在諸 如N-甲基吡咯啶酮或nw-二曱基曱醯胺之溶劑中，在微波 照射下，於lOOt：與200。(：之間的溫度下，使化合物e與芳 基或雜芳基鹵化物（X=C1、Br或I)或三氟甲磺酸酯g反應， 獲得化合物（1)-2。 或者’化合物（1)-1可根據一般流程2獲得。 一般流程2 :
如例如 Aliabiev S.B.(Lett. 〇rg. Chem. (2007)，4(4)，273- 280)所述’可藉由在溶劑缺乏下於2〇°c與120°C之間的溫 149299.doc •31 · 201105673 度下’或者在諸如乙腈之溶劑存在下於2〇°C與溶劑回流溫 度之間的溫度下，使化合物j與嗎啉反應，自化合物j獲得 化合物（I)-1。 可藉助於烷基化或醯化反應，在烷基化反應之狀況下， 如例如 Ting P_C•等人（J. Med. Chem. (1990)，33(10)，2697-2706)所述’藉由在〇°c與80°C之間的溫度下，添加化合物 F(R1-X，其中Rl =如上定義之l_芳基或雜芳基，且在烷基 化狀況下X=C1、Br、I或〇Tf，且在醯化狀況下x=Ci)至化 合物E與過量鹼（諸如氫化鈉或碳酸铯）於溶劑（諸如四氫呋 °南、N，N-二甲基曱醯胺或乙腈）中之混合物中，獲得化合 或者，如例如0. Mitsunobu 等人（Synthesis (1981)，1-28) 所述，可藉助於在偶氮二曱酸二乙酯及三苯基膦（視情況 支撐在樹脂上）存在下，在諸如四氫呋喃之溶劑中，於〇艺
當R2與R3不同時且若合成無立體選擇性，可藉由在對 掌性支撐4勿上層才斤來分離合纟中間#或化合物⑴之對映異 構體或可能非對映異構體。 、 不限制本發 式⑴產物之以下實例說明本發明，然而 在式A或B之起始產物中，一些 熟習此項技術者已知之常用方法， 物來獲得》 一些已知且可購得， ’或根據 例如以市售產物為起始 149299.doc •32- 201105673 熟習此項技術者應瞭解，為實施上述本發明之方法，可 能需要引入胺基、羧基及醇官能基之保護基以免發生副反 應。 可提及反應性官能基之保護實例的以下非詳盡清單·· -羥基可例如經諸如第三丁基之烷基、三甲基矽烷基、 第二丁基二甲基矽烷基、甲氧基甲基、四氫哌喃基'苄基 或乙醯基保護。 -胺基可例如經乙醯基、三苯甲基、苄基、第三丁氧羰 基BOC、苄氧羰基或鄰苯二醯亞胺基或肽化學中已知之其 他基團保護。 酸官能基可經保護，例如呈易裂解之酯（諸如苄酯或第 三丁酯）或肽化學中已知之酯的形式p 可使用之各種保護基之清單可見於熟習此項技術者已知 之手冊及例如專利BF 2 499 995中。 可注意到，為獲得其他中間物或其他式⑴產物，需要且 必要時，可使藉助於上文指示之方法由此獲得之中間產物 或式⑴產物經受熟習此項技術者已知之一或多個轉化反 應，諸如： a) 用於酯化酸官能基之反應， b) 用於皂化酯官能基，得到酸官能基之反應， c) 用於將游離或酯化羧基官能基還原成醇官能基之反 應， d) 用於將烷氧基官能基轉化成羥基官能基，或將羥基 官能基轉變成烷氧基官能基之反應， 149299.doc -33- 201105673 e) 用於移除經保護之反應性官能基可能攜帶之保護基 的反應， f) 用無機酸或有機酸或用鹼鹽化獲得相應鹽之反應， g) 用於解析外消旋形式，得到經解析之產物的反應， 由此獲得之該等式（I)產物為所有可能之外消旋、對映異 構體及非對映異構體形式。 可在熟習此項技術者已知之常用條件下，諸如下文指示 之彼等條件下，進行反應勾至幻。 a) 必要時，上述產物可在可能羧基官能基上經受酯化反 應，該等酯化反應可根據熟習此項技術者已知之常用方法 進行。 b) 必要時，可在熟習此項技術者已知之常用條件下，特 定言之藉由例如用氫氧化鈉或氫氧化鉀在諸如甲醇之醇介 質中，或者用鹽酸或硫酸進行酸或鹼水解，可將上述產物 之酿官能基轉化產生酸官能基。 可根據熟習此項技術者已知之常用方法，諸如在諸如甲 醇或乙醇、m二甲氧基乙院之溶劑中，在氫氧化納 或a氧化卸存在下進行皂化反應。 C)必要時，可藉助於熟習此項技術者已知之方法，將上 述產物之可能游離或酯化之羧基官能基還原，得到醇官能 基：必要時，可藉助於熟習此項技術者已知之方法且尤其 在諸如四氫呋喃或二噁烷或乙醚之溶劑中用氫化鋰鋁將可 能酯化之羧基官能基還原，得到醇官能基。 必要時’可尤其用氫化石朋將上述產物之可能游離緩基官 149299.doc •34· 201105673 能基還原’得到醇官能基。 )'、、要時，可在熟習此項技術者已知之常用條件下，例 如在諸如二氯曱烷之溶劑中用三溴化硼，用氫溴酸吡啶或 鹽s夂比啶’或者在水或三氟乙酸中用氫溴酸或鹽酸，在回 流下，將上述產物之可能烷氧基官能基 官能基）轉化Μ基线基。 其甲^ e)可在熟習此項技術者已知之常用條件下，尤其藉由用 諸如鹽酸、笨確酸、對f苯績酸、甲酸或三氟乙酸:酸進 行酸水解，或者藉由催化氫化，來移除保護基，諸如上文 指示之保護基。 鄰苯二醯亞胺基可用肼來移除。 〇必要時，可根據熟習此項技術者已知之常用方法，使 上述產物例如與無機酸或有機酸或與無機驗或有機驗進行 鹽化反應：此類鹽化反應可例如在鹽酸或酒石酸、檸檬酸 或曱烷磺酸存在下在諸如乙醇或甲醇之醇中進行。丁 g)可藉由根據熟習此項技術者已知之常用方法，解析外 消旋混合物，來製備上述產物之可能光學活性形式。 如上定義之式⑴產物以及其與酸之加成鹽尤其因其如上 所指示之抑制激酶之性質而具有有利的藥理學性質:、 本發明之產物可尤其用於腫瘤療法中。 因此，本發明之產物亦可増加常用抗腫瘤劑之治療效 果。 且本發明之標 該等式（I)產物 此等性質論證該等產物在療法中之用途， 的尤其為作為藥劑之如上定義之式⑴產物， I49299.doc •35· 201105673 為所有可能之外消旋、對映異構體及非對映異構體形式， 以及該等式（I)產物與無機酸及有機酸或與無機鹼及有機鹼 之醫藥學上可接受之加成鹽。 本發明之標的最特定言之為作為藥劑之對應於以下各式 之產物： -(8S)-9-[2-(4-曱氧基苯基）乙基]_2_(嗎啉_4_基）_8_(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧咬并[i，2-a]嘧咬-4-酮 -9-[2-(4-甲氧基苯基）乙基]_2_(嗎啉_4_基兴8_(三氟甲基）_ 6,7,8,9 -四負密咬并[l，2-a]嘲定 _4_酮 -(8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-(2-苯乙基）·8•(三氟曱基）_6,7,8,9_ 四 氫- 4Η-σ密咬并[l，2-a]°^^-4 -酮 -(8S)-9-苄基-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）·6,7,8,9_四氫_ 4Η-°^。定并[1，2-8]°密 °定-4-酮 -(8S)-9-[(2S)-2-羥基-2-苯乙基]-2-(嗎啉_4_基三氟甲 基）-6,7,8,9 -四氫- 4H-α密°定并[l，2-a]嘴咬_4_酮 _ (8S)-9-[(2R)-2-經基-2-苯乙基]-2-(嗎琳 _4_基名 ^ \，二》甲 基）-6,7,8,9 -四氫- 4Η-嘴咬并[l，2-a]°密υ定·4·酮 -(8S)-9-[(2S)-2-羥基-2-(4-曱氧基笨基）乙基〗 ^ _ 4 - 基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫- 4H-。密咬并[1,2_ai喷吟 定-4-_ -(8S)-2-(嗎琳-4-基）-9-[(lR)-l-苯乙基]_8_(: V—氟甲基 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 _ (8S)-9-[l-(4-曱氧基本基）乙基]-2-(嗎琳_4_基） y -^**** — cd 基）-6,7,8,9-四氫-411-0^。定并[1，2-3]'1密17定_4-_ -(8S)-9-[(lS)-l-(4-溴苯基）乙基]-2-(嗎啉-4_基）8 (二氟曱 149299.doc -36- 201105673 基）-6,7,8,9 -四氫- 4Η-σ密α定并[l,2-a]°密咬-4-酉同 -(8S)-9-[(lR)-l-(4-溴苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-411-嘧啶并[1,2-3]嘧啶-4-酮 -(8S)-2-(嗎嚇 - 4 -基）-9-苯基- 8- (二氣曱基）-6,7,8,9-四氮· ' 4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮 . -(8S)-9-(4-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四 氳-4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-(3-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四 氫-4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-(2-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四 氫-4H-°密咬并[1,2-a]°密σ定-4-酮 -(8S)-9-[(lR)-l-(3-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱 基）-6,7,8,9-四氫-411-。密°定并[1，2-3]1»密°定-4-酮 -(8S)-9-(4-氣卞基）-2-(嗎嚇>-4-基）-8-(二氣甲基）-6,7,8,9 -四 氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-(苯基羰基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-2-(嗎嚇·_4-基）-9-(0比°定-3 -基）-8-(三氣甲基）-6,7,8,9_ „ 四氫-4Η-嘧啶并[1,2-a]嘧啶_4_酮 -(88)-2-(嗎°林-4-基）-9-(0比咬-4-基）-8-(三氣曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-(4-曱基苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-。密咬并[1，2-a]^ 11 定-4-酮 -(8S)-9-(2-氯节基）-2-(嗎淋-4-基）-8-(三氣甲基）-6,7,8，9 -四 149299.doc -37- 201105673 基）-6,7,8,9-四 氫-4H-痛咬并[l，2-a]鳴咬-4-調 -(8S)-9-(3-氟苄基）·2-(嗎琳_4_ 基）_8_(:氟曱 氫-4Η-喊咬并[l，2-a]°密咬-4-酮 -(8S)-9-[2-(2-甲氧基苯基）乙基 ^丞卜2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱 基）-6,7’8,9-四氫-4H_。密咬并⑴匕㈣啶_心_ -(8S)-9-[2-(3_曱氧基苯基）乙基]^嗎K基）-8-(三敗甲 基)-6,7’8,9-四氫-4H-嘧啶并n，2_a]嘧啶_4_酮 ，-甲…基)-2-(嗎琳—4_基)_8•(三氣甲基)_ 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[i，2_a]嘧啶酮 -(8S)-9-(4-甲氧基苯基）_2•(嗎琳心基）8·(三敦甲基）- 6.7.8.9- 四虱-4H-嘴咬并[i，2-a]哺咬_4_酮 _ (8S)-9-[(2-氟苯基）羰基]_2·(嗎啉·4·基）8(三氟曱基）· 6.7.8.9- 四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4-酮 • (8S)-9-(3,5-二氟苄基）-2-(嗎啉_4·基）-8 (三氟曱基）_ 6.7.8.9- 四氫-4H-。密咬并[l，2-a]嘴。定_4-酮 -(8S)-9-(2,4,二氟苄基）-2-(嗎啉·4_基）(三氟曱基）_ 6.7.8.9- 四氫-4Η-嘧咬并[l，2-a]喷咬_4·酮 -(8S)-2-(嗎嘛-4-基）-9-(2,3,4-三氟苄基）_8_(三氟曱基）_ 6,7,8,9·四氫-4H-嘴咬并[l，2-a]喷咬-4-酮 -(8S)-9-[(5-氣-1-苯并噻吩-3-基）曱基]_2-(嗎啉_4_基）-8-(二氣甲基）-6,7,8,9 -四氫- 4H-嘴咬并[i，2-a]哺〇定_4_酮 -(8S)-9-[(lR或 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉 _4_基）-8·(三 氟甲基）-6,7,8,9-四氫咬并[i，2-a]°密咬-4-酮 -(8S)-9-[(lR或 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三 149299.doc -38- 201105673 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-411-'3密。定并[1，2-8]〇密。定_4_酮 -(8S)-9-(3 -曱基苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_ 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-(4-氣苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）_6,7,8,9四 ' 氫-4Η-β密咬并[l，2-a]°密咬-4-酮 • - (8S)-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟甲基）-9-[4-(三敗曱基）苯基]_ 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 -(8S)-9-[(lR 或 lS)-l-(2-氟苯基）乙基]-2-(嗎琳 基）_8 (: 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧。定-4-酉同 -(8S)-9-[(lR或 lS)-l-(2-l 苯基）乙基]-2-(嗎啉 _4_基）8 (_ 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘴"定并[l，2-a]嘧咬_4-_ -(8S)-9-[2-(3-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）二翁 w w V—虱甲基）_ 6.7.8.9- 四氫_4H-嘧啶并[l，2_a]嘧啶-4-酮 -(8 S)-9-苄基_3_氟-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6 7 8 9 氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 _ (8S)-9-(3,5-二氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(=盡田 v —風•甲基）_ 6.7.8.9- 四氫 _4Η-^β定并[l，2-a]。密咬-4-酮 _ (8S)-9-[(2,6-二氟笨基）羰基]-2-(嗎啉 _4-基）·8〆二 (二氟*曱 - 基）_6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶 • - (8S)-9-[(2,4·二氟苯基）羰基]-2-(嗎啉 _4_基）8 & (二氣曱 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧咬_4_剩 -(8S)-2-(嗎琳_4·基）-9-(苯基乙醯基二& 、二鼠甲基）_ 6.7.8.9- 四氫_411-»密。定并[1，2-&]喷。定_4_酮 -(8S)-9-[2-(3-氣笨基）乙基]-2-(嗎啉_4_基） V二氟曱基）_ -39- 149299.doc 201105673 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮 -9-((R)-2-苯并[b]噻吩-2-基-2·羥乙基）-2_嗎啉-4-基 三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮 -9-[(S)-2-經基-2-(3-經基苯基）乙基]-2-嗎淋-4-基- 8-(S)-二 氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧咬并[i，2-a]嘧咬-4-酮 -2-二曱胺基-N-{3-[(S)-l -經基- 2- ((S)-8 -嗎琳-4 -基-6-側氧 基-2-三氟曱基-3,4-二氫-2H,6H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-卜基）乙 基]苯基}乙醯胺 -9-[(S)-2-羥基-2-(2-曱氧基苯基）乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟甲基- 6,7,8,9-四氫。密〇定并[1,2-a]。密咬-4-酮 _ 9-[(S)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基）_2-羥乙基]-2-嗎'# -4-基-8-(5)-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[1,2-&]嘧啶-4-酮 -9-[(S)-2-(4-氣-2-曱氧基苯基>2-羥乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟甲基·6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮 -9-[(S)-：2-(2-氣_4_曱氧基苯基）_2_羥乙基]_2_嗎啉_4_基_8_ (S)-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[1，2_3]嘧啶_4-酮 -9-(2-經基-3-苯丙基）_2_嗎啉_4_基_8_(s)_三氟甲基- 6.7.8.9- 四鼠。密咬并[1，2_&]嘴咬_4__ _ 9-[2-(4-羥基苯基）乙基]_2_嗎啉_4_基_8_(3)_三氟甲基_ 6.7.8.9- 四風η密咬并[i，2_a]n密。定酮 以及該等式（I)產物與無機酸及有機酸或與無機鹼及有機 鹼之醫藥學上可接受形成之加成鹽。 本發明亦係關於醫藥組合物，其含有至少一種如上定義 之式(I)產物或此產物之醫藥學上可接受之鹽或此產物之前 149299.doc 201105673 藥作為活性成份及適當時醫藥學上可接受之載劑。 因此’本發明延伸至含有至少—種如上定義之藥劑作為 活性成份之醫藥組合物。 適田時該等本發明醫藥组合物亦可含有其他抗有絲分 裂藥劑之活性成份，尤其諸如基於紫杉酴㈣、順始 (C1S-platin)、DNA插入劑及其類似物之藥劑。 此寺醫藥組合物可經口投與’非經腸投與，或藉由表面 施加至皮膚及點膜而局部投與，或藉由靜脈内或肌肉内注 射來投與。 此等組合物可為固體或液體，且可為人類醫學中常用之 所有醫藥形式’例如單純錠劑或糖衣錠劑、丸劑、口含 劑、明膠膠囊、滴劑、顆粒、可注射製劑、軟膏、乳膏或 凝膠；料醫藥形式根據f用方法來製備。在此可將活性 成伤併入此等醫藥组合物中通常使用之賦形劑中，該等賦 形劑諸如滑石、阿拉㈣、乳糖、澱粉、硬脂酸鎖、可可 脂：水性或非水性載劑、動物或植物來源之脂肪物質、石 犧衍生物、二醇、久絲、、s 劑。 〃，、潤刎、5散劑或乳化劑或防腐 常用劑量可視所用|物、所 席&個體及所討論之病狀 而可為例如成人w5ghg，或較佳為每天〇1 g至 2 g。 本發明之標的亦為如上定義 贺供处、“ 士 我之式⑴產物的用途，其用於 製備供治療或預㈣徵為蛋白質或脂質 疾病用的藥劑。 古I·生失調之 149299.doc -41· 201105673 此類藥劑可特定言之用於治療或預防哺乳動物之疾病。 本發明之標的尤其為如上定義之式⑴產物的用途，其用 於製備供預防或治療諸如心血管疾病，特定言之包括血栓 症之各種疾病用的藥劑。 本發明之標的尤其為如上定義之式⑴產物的用途，其用 於製備供預防或治療與不受控制之增殖有關之疾病用的藥 劑。 因此，本發明之標的最尤其為如上定義之式⑴產物的用 途’其用於製備供治療或預防腫瘤學疾病及特定言之供治 療癌症用之藥劑。 在此等癌症中’集中在治療固體或液體腫瘤，且集中在 治療對細胞毒性劑具有抗性之癌症。 所列舉之本發明產物可尤其用於治療原發性腫瘤及/或 轉移，特定言之為胃癌、肝癌、腎癌、卵巢癌、結腸癌、 前列腺癌、子宮内膜癌及肺癌（NSCLC及SCLC)、神經膠母 細胞瘤、甲狀腺癌、膀胱癌及乳癌、黑色素瘤、淋巴或骨 髓造血性腫瘤、肉瘤、腦癌、喉癌及淋巴系統癌、骨癌及 胰腺癌、及錯構瘤。亦特定言之涉及顯示基因異常而引起 ΡΒΚ/ΑΚΤ/mTOR路徑活化及/或MAP激酶路徑活化之疾 病0 本發明之標的亦為如上定義之式（I)產物的用途，其用於 製備供癌症化學療法用之藥劑。 因此，本發明之標的為如上定義之式（I)產物，其用於治 療癌症。 149299.doc -42- 201105673 本發明之標的為如上定義之式（i)產物，其用於治療固體 或液體腫瘤。 因此，本發明之標的為如上定義之式⑴產物，其用於治 療對細胞毒性劑具有抗性之癌#。 因此，本發明之標的為如上定義之式（I)產物，其用於治 療原發性腫瘤及/或轉移，特定言之為胃癌、肝癌、腎 癌、卵巢癌、結腸癌、前列勝癌、子宮内膜癌及肺癌 (NSCLC及SCLC)、神經膠母細胞瘤、曱狀腺癌、膀胱癌及 乳癌、黑色素瘤、淋巴或骨髓造也性腫瘤、肉瘤、腦癌、 喉癌及淋巴系統癌、骨癌及胰腺癌、及錯構瘤。 因此，本發明之標的為如上定義之式⑴產物，其用於癌 症化學療法中。 因此，本發明之標的為如上定義之式⑴產物，其單獨或 組合用於癌症化學療法中。 用於癌症化學療法之該等藥劑可單獨或組合使用。 本發明之產物可尤其單獨或與化學療法或放射線療法組 合投與，或例如與其他治療劑組合投與。 該等治療劑可為常用抗腫瘤劑。 藉由本申請案之產物與不同靶向療法組合投與，可尤其 預期治療益處。此等靶向療法特定言之為以下療法：i)抑 制MAP激酶信號傳導路徑之療法，例如抑制RAS、RAF、 MEK或ERK之療法；ii)抑制PI3K/AKT/mTOR路徑之激酶 或假激酶（例如 EGFR、HER2、HER3、ALK、MET、 PI3K、PDK1、AKT、mTOR及 S6K)的靶向療法。 149299.doc .43- 201105673 本發明之標的尤其為如上定義之式⑴產物的用途，其用 於製備供預防或治療溶酶體病（諸如第π型肝糖貯積症或龐 培氏症（Pompe disease))用之藥劑。用於治療溶酶體病之該 等藥劑可單獨或與例如其他治療劑組合使用。 因此，本發明之標的為如上定義之式⑴產物其用於預 防或治療溶酶體病（諸如第„型肝糖貯積症或龐培氏症卜 因此’本發明之標的為如上定義之式⑴產物的用途其 用於製備供㈣或治療溶酶體病（諸如第！ χ型肝糖貯積症或 龐培氏症）用之藥劑。 因此’本發明之標的為如 勹戈上疋義之用途，其中該等式 產物單獨或組合使用。 本發明之標的亦為如上定義 疋我之式（1)產物的用途，並用於 製備供治療寄生蟲病（諸如I '' 利什曼病）用之藥劑。用於 疒或 -口 』 縻哥生蟲感染之該等藥劑可 早獨或與例如其他治療劑組合使用。 、 因此，本發明之標的為如上 療岑峰虫在_ ,. 義之式⑴產物，其用於治 縻寄生蛾病，诸如癔疾、昏 病。 ㈣病、恰加斯氏症或利什曼 因此，本發明之標的為如 用於製備供治療岑之式⑴產物的用途’其 表侑供…療寄生蟲病(諸如瘧疾 症或利什曼病）之藥劑。 、昏睡病、恰加斯氏 本發明之標的亦為如上文
及j的合成中間物，其作為新 文回顧之式C、D、E '菜產品： 149299.doc -44- 201105673
其中R1、R2、R3及R4具有技術方案1及2中任一項所指示 之含義。 作為式（I)產物之以下實例說明本發明，然而，不限制本 發明。 【實施方式】 實驗章節 使用ACDLABS軟體10.0版來命名本發明化合物。 所用微波為Biotage設備，InitiatorTM 2.0，最大功率為 400 W，2450 MHz ° 400 MHz下之1H NMR譜及500 MHz下之1H NMR譜在 Bruker Avance DRX-400 或 Bruker Avance DPX-500譜儀上 獲得，其中化學位移（δ，ppm)係在303 K之溫度下在參考 值為2·5 ppm之溶劑二甲亞砜-d6(DMSO-d6)中得出。 藉由方法A或方法B或方法E獲得質譜（MS): 方法A :
Waters UPLC-SQD儀器；電離：正離子及/或負離子模式 電喷霧（ES+/-);層析條件：管柱：Acquity BEH C18 1.7 μηι-2.1χ50 mm ;溶劑：A : H2O(0.1% 甲酸），B : CH3CN (0.1%曱酸）；管柱溫度：50°C ;流速：1 ml/min ;梯度（2 分鐘）：0.8分鐘内5%至50% B ; 1.2分鐘：100% B ; 1.85分 149299.doc -45- 201105673 鐘：100% B ; 1.95 ; 5% B ;滯留時間=Tr(分鐘）。 方法B :
Waters ZQ儀器；電離：正離子及/或負離子模式電喷霧 (ES+/-);層析條件：管柱：XBridge Cl8 2.5 μιη-3χ50 mm ; 溶劑：A . H20(〇.l% 甲酸），b : ch3CN(0.1% 曱酸）；管柱 溫度：70°C ;流速：〇·9 ml/min ;梯度（7分鐘）：5 3分鐘内 5%至 100% B ; 5.5分鐘：1〇〇% B ; 6 3分鐘：5% B ;滞留 時間=Tr(分鐘）。 方法E ··
Waters UPLC-SQD儀器；電離：正離子及/或負離子模式 電喷霧（ES+/-) ’層析條件：管柱：Ascentis express C18 2.7 μιη-2·1χ50 mm ;溶劑：A : h2〇(〇 〇2%三氟乙酸），B : CH3CN(0.014%三氟乙酸）；管柱溫度：55°c ;流速：1 ml/min ; 梯度：TO分鐘2% B、T1分鐘98❶/〇 B、T1.3分鐘98% B、 T1.33分鐘2% B、T1.5分鐘其他注射；滯留時間=Tr(分 鐘）。 在來自Perkin Elmer之偏光計型號341上量測旋光度 (OR) 〇波長：鈉之α線（5 89奈米）。 藉由製備型HPLC/MS純化：
_ 方法C
SunFire C1 8逆相管柱（Waters)3〇x 100，5 μ 梯度：水（+ 0.07% TFA)中乙腈（+0.07% TFA) TO ： 20% 乙腈（+0.07% TFA) ΤΙ ： 20% 乙腈（+0.07% TFA) 149299.doc -46- 201105673
Til.5 ： 95% 乙腈（+0.07% TFA) T15 ： 95% 乙腈（+0.07% TFA) T15.5 ： 20% 乙腈（+0.07% TFA) 流速：3 0 ml/min
質譜：130_800 AMU= ; ESP+、ESP 方法D
SunFire C18逆相管柱（Waters)30><100，5 μ 梯度：水（+ 0.07% TFA)中乙腈（+0.07% TFA) TO : 40% 乙腈（+ 0.07% TFA) ΤΙ ： 40% 乙腈（+ 0.07% TFA)
Til ： 95% 乙腈（+ 0.07% TFA) T14.5 ： 95% 乙腈（+ 0.07% TFA) T15 : 10% 乙腈（+ 0.07% TFA) 流速：3 0 ml/min 質譜 130_800 AMU= ; ESP+、ESP 實例1 : (S)-9-[2-(4-甲氧基苯基）乙基]-2-嗎啉-4-基-8-三氟 甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮
階段f. (S)-9-[2-(4-甲氧基苯基）己基]-2 -嗎琳-4-基-8-三氣 149299.doc -47- 201105673 甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并丨嘧啶·4_酮 在周圍溫度及氬氣氛圍下，0.5 g碳酸铯、0.23 g 4-曱氧 基苯乙基漠及5 mg氣化苄基三乙基銨（BTEAC)添加至150 mg (S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟甲基_6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a] 嘧啶-4-酮於5 ml無水二甲基曱醯胺中之溶液中。在8(rc下 加熱反應混合物18小時。 冷卻後’ 10 ml冷水及50 ml乙酸乙酯添加至所得混合物 中。分離有機相，接著經硫酸鎂乾燥，過濾，且在減壓下 /辰縮。藉由二氧化矽層析（梯度：至2〇%溶離劑 CH2Cl2/Me〇H/NH4OH(28〇/〇)3 8/17/2 之二氣曱烷溶液）純化 所付殘餘物’得到160 mg (S)-9-[2-(4-曱氧基革芙）乙美] 2-嗎啉-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并1^,2^嘧啶_4_ 酮，其特徵如下： 'H NMR譜： 1.82至2.05(111，11€);2.25至2.39(111，111);2 73至283 (m，lH);2.8812.99(m，lH);3.1(^3.2i(m，1H);3 34s 3.41 (m，1 H); 3.43 至 3.46 (m，4 H); 3.65 (m，4 H); 3.72 (s 3^1);4.03至4.23(111，2 11);4.47至4.60(111，111);4.99(3，1 H); 6.87 (d，J=8.6 Hz，2 H); 7.12 (d，J = 8.6 Hz，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.93 [M+H]+ : m/z 439 旋光度：OR= +91; C = 2.426 mg/0.5 mi MeOH。 階段e : (S)-2 -嗎琳-4·基-8-二甲基-6,7,8,9-四氫喷咬并 149299.doc -48- 201105673 [l，2-a]嘴咬-4-明
在80°C下加熱1 g (S)-2-氯-8-三氟甲基_6,7,8,9_四氫嘧啶 并[l，2-a]嘧啶-4-酮與15 ml嗎啉之混合物。加熱i 5小時 後，且在LC/MS驗證後，反應完成。冷卻後，在減壓下濃 縮反應混合物。10 ml冷水及1〇〇 mi乙酸乙酯添加至所得殘 餘物中。分離所得有機相，接著經硫酸鎂乾燥，過減，且 在減壓下濃縮，得到1.2 g (S)-2-嗎啉-4-基三氟甲基_ 6,7,8,9-四氮。密咬并[1,2-ap密。定-4-_，其特徵如下：
質譜：方法A 滞留時間Tr(分鐘）=0.49 [M+H]+ ： m/z 305; [M-H]- ： m/z 303 旋光度·· OR=+14.2+/-0.6; 〇2.25 mg/〇 5mlMe〇H。 階段d : (S)-2·氯-8-三氟甲基_6,7,8,9_四氫嘧啶并嘧 咬-4-網
藉由對掌性層析來分離（R，S)_2_氯_8_三氟甲基_6,7,8,9_ 四氫密咬并[1’2-a]喷咬-4-酮（17 g)之兩種對映異構體：固 定相：Chiralpak AD ;移動相：Et〇H(2〇%)/庚烧（8〇%)。 149299.doc •49- 201105673 濃縮左旋對映異構體’得到8.52 g呈白色粉末狀之（R)-2-氣-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧咬并[i，2-a]嘧咬-4-酮。 濃縮右旋對映異構體’獲得8.21 g呈白色粉末狀之 氯-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i,2-a]嘧啶-4-酮，其特 徵如下：
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.51 [M+H]+ ： m/z 254; [M-H]- : m/z 252 旋光度：OR=+21.3 +/- 0.5; MeOH。 階段c : (R，S)-2-氣-8-三氟甲基_6,7,8,9_四氫喊咬并[i，2_a】 嘯咬-4-酮
在周圍溫度及氬氣氛圍下，6〇 虛、，長l β ^
:合物。用 。32%氫氧 100 ml冷水及400 ml乙酸乙酯溶解所得殘餘物。32%氫氧
’得到20 化納添加至 接著經硫酸 餘物。藉由 g呈白色固體狀之（R，S)-2_氣_8_三 純化此殘餘物，得到2〇 I49299.doc -50- 201105673 氟甲基-6,7,8,9 -四虱嘯咬并[i，2_a]a密咬-4_酮，其特徵如 下： 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=〇.51 [M+H]+ : m/z 254; [M-H]- : m/z 252。 階段b : (R，S)-2-羥基-8-三氟甲基-心^^四氫嘧啶并丨^ a]嘴咬-4-嗣
10 g 6-二氟甲基·ι，4,5,6-四氫嘴。定_2-基胺鹽酸鹽及1〇 g 甲醇鈉添加至50 ml丙二酸二乙酯混合物中。使所得混合 物達到100°C後維持75分鐘。不均勻混合物變稠且變黃， 伴隨少量氣體放出。冷卻後，在減壓下蒸乾反應混合物。 用乙醚濕磨所得殘餘物。在燒結玻璃過濾器上濾出所形成 之固體，接著用20 ml冷水溶解。12 N鹽酸添加至所得铜 懸浮液中，直至pH=5-6。經由燒結玻璃過濾所得懸浮液， 且用乙趟清洗不溶性物質，得到丨丨·5 g呈白色固體狀之 (R，S)-2_羥基_8·三氟曱基-6,7,8,9-四氩嘧啶并[i，2_a]嘧啶_ 4-酮，其特徵如下：
質谱.方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.26 [M+H]+ : m/z 236; [M-H]- : m/z 234。 149299.doc •51 · 201105673 階段a : (R，S)-6-三氟甲基-1，4,5,6-四氫，啶-2-基胺鹽酸鹽
在高壓釜中，在3巴（bar)下，於22°C下，使1.1 g 10% Pd/C、22 g 2-胺基-4-(三氟曱基密啶溶於200 ml水、50 ml 甲醇及50 ml 12 N HC1中之混合物氫化Μ小時。接著過渡 所得混合物且在減壓下濃縮濾液。在ΙΑ存在下供乾所得 殘餘物，得到27 g呈灰色固體狀之（R，S)_6_三氟曱基_ 1，4,5,6-四氫嘧啶-2-基胺鹽酸鹽，其特徵如下： 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.1 7 [M+H]+ : m/z 168。 實例2 : (R，S)-9-[2-(4-甲氧基苯基）乙基卜夂嗎啉4基_8三 敗甲基-6,7,8,9 -四氮峨咬并[l，2-a】喊咬·4·_
階段b : (R，S)_9-[2-(4-甲氧基苯基）乙基卜2嗎啉_4基_8三 氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶·4-綱 在周圍溫度及氬氣氛圍下’ 0.5 g碳酸绝、〇 23 g 4_甲氧 149299.doc -52- 201105673 基苯乙基溴及10 mg氯化苄基三乙基銨（BTEAC)添加至12〇 mg (R，S)-2-嗎琳-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫。密〇定并[ι，2· a]嘧啶-4-酮於5 ml無水二甲基甲醯胺中之溶液中。在8〇<t 下加熱所得混合物丨8小時。 冷卻後，在減壓下濃縮反應混合物。用5〇 mi乙酸乙酯 溶解所得殘餘物’且用3 ml水洗滌所得溶液。分離有機 相’接著經硫酸鎂乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。藉由二 氧化石夕層析（梯度：〇%至20%溶離劑CH2Cl2/MeOH/NH4OH (28%)38/17/2之二氯甲烷溶液）純化後’獲得80 mg (R，S)_ (9-[2-(4-曱氧基苯基）乙基]_2_嗎啉-4-基-8-三氟i甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i,2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 1.85至 2.02 (m，1 H); 2.27至 2.35 (m，1 H); 2.72至 2.84 Ο，1 H); 2.88至 2.98 (m，1 H); 3.09至 3.20 (m，1 H); 3.37至 3.42 (m，1 H); 3.45 (m, 4 H); 3.63 至 3.67 (m，4 H); 3.72 (s， 3 H); 4.08 (m，1 H); 4_14至 4.21 (m，1 H); 4_51 至 4.63 (m，1 H)； 5.00 (s, 1 H); 6.88 (d, J=8.6 Hz, 2 H); 7.13 (d, J=8.6 Hz，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.93 [M+H]+ : m/z 439。 階段a : (R，S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [l，2-a]喷咬-4-酮 I49299.doc 53- 201105673
220 mg (R，S)-2-氣-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [l，2-a]嘧啶-4-酮於5 ml嗎啉中之混合物加熱至8〇。(3。加熱 1.5小時後’根據LC/MS之驗證，反應完成。冷卻後，在減 磨下濃縮反應混合物。藉由二氧化矽層析（梯度：5 %至 200/〇溶離劑匚112(：12/1^6〇15/>^4011(280/〇)3 8/17/2之二氣甲燒1 溶液）純化所得殘餘物，得到270 mg (R，S)-2-嗎琳-4-基-8- 二II曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4_酮，其特徵如 下：
質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）=2.53 [M+H]+ ： m/z 305; [M-H]- ： m/z 303 〇 實例3 : (S)-2-嗎啉_4_基·9_苯乙基_8_三氟甲基_6 7 8 9四 氫嘴唆并[l，2_a】鳴咬_4_明
階段a : 根據實例2中描述之程序，使用80 mg (R,S)-2-嗎啉 149299.doc -54- 201105673
基-8-二氟曱基-6,7,8,9 -四氫》密。定并[l,2-a]°密咬-4 -酮及240 mg (2·溴乙基）苯’製備（R，S)-2-嗎啉-4-基-9-苯乙基-8-三氟 甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并嘧啶_4_酮。藉由二氧化矽層 析（溶離劑：梯度為5%至2〇%溶離劑CH2Cl2/MeOH/NH4OH (28°/〇)38/17/2之二氯甲烷溶液）純化後，獲得75 mg (R，S)-2-嗎啉-4-基-9-苯乙基_8_三氟甲基_6,7,8,9-四氫嘧啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： !H NMR譜： 1.85至 2.01 (m，1 H); 2.27至 2.35 (m，1 H); 2.86 (m，1 H); 2.95至 3.05 (m，1 H); 3.11 至 3.21 (m, 1 H); 3.39至 3.49 (m，5 印；3.63至3.68(111，4 11);4.08至4.23(111，2 11);4_53至4.62 (m，1 H); 5.00 (s，1 H); 7.18至 7.25 (m，3 H); 7.29至 7.34 (m，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.95 [M+H]+ : m/z 409。 階段b : 藉由對掌性層析來分離（R，S)-2-嗎啉-4-基-9-苯乙基-8-三 氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[1，2-&]嘧啶-4-酮之兩種對映異 構體：Chiralpak 1C 20 μιη管柱，以 75%庚炫>/20% Et〇H/5% MeOH溶離。 濃縮右旋對映異構體，獲得27 mg (S)-2-嗎啉-4-基-9-苯 乙基-8-三亂甲基-6,7,8,9-四氫°密°定并[1，2_3]嘴°定_4_酮，其 特徵如下： 149299.doc -55- 201105673 4 NMR譜： 1.94(m，lH);2.23炱2·35(m，1H);2.83至291(m，1H); 2.96至 3.04 (m，1 H); 3.16 (m，1 H); 3·40至 3.52 (m，5 H); 3-65 (m, 4 H); 4.07至 4.21 (m，2 H); 4.50至 4.62 (m，1 H); 5.00 (s，1 H); 7.18至 7.25 (m，3 H); 7.29至 7.35 (m，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.95 [M+H]+ ： m/z 409 旋光度：OR=正號（+40); C=l.〇93 mg/0.5 ml DMSO。 層析純化亦產生30 mg左旋對映異構體（R)_2_嗎啉_4_基_ 9-苯乙基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并嘧啶_4_ 實例4 : (S)_9·苄基嗎啉-4-基_8_三氟甲基·心^卜四氫 嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮 階段b :
藉由對掌性層析來分離（R，S)_9_苄基_2_嗎啉_4_基·三氟 基-6,7,8,9-四氫嘧啶并n，2_a]嘧啶_4_酮之兩種對映異構 • 6X35 cm管柱；移動相：60% EtOH/40%庚烷。 濃縮右旋對映異構體，得到36 mg (s)_9_苄基_2嗎啉
149299.doc 其特 -56- 201105673 徵如下： *H NMR譜： 2.10至 2.25 (m，1 H); 2.35至 2.43 (m，i H); 3 19至3 27 (m, 5 H); 3.391.3.53 (m5 4 H); 4.16j.4.27 (m, i H); 4 51 (d, J=15.9 Hz, 1 H); 4.57^4.72 (m, ! H)； 4.96 (s, \ H); 5-23 (d, J=15.9 Hz, 1 H); 7.20^7.27 (nij 3 H)； 7.28^7.34 (m，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.88 [M+H]+ : m/z 395 旋光度：OR=+16.3 +/· 〇·7; C = 1.960 mg/〇 5 ml Dm⑽。 以上層析純化亦產生38 mg左旋對映異構體（R)_9-苄基_ 2-嗎琳-4_基_8•三氟甲基_6,7,8,9•四氫㈣并喷咬1 氟甲基-6,7,8,9-四 階段a: (R，S)_9-苄基_2_嗎啉_4基_8_三 氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶
F 根據實例2中描述之裎皮
基I三氟甲基-6,7 8 9四使用14〇mg(R，S)_2-嗎琳I ，9-四虱嘧啶并[1，2_叫嘧 W节基溴，製備此產物。 ]选定-‘_及0.270 糟由二氧化石夕層析(梯度：5%至 149299.doc -57- 201105673 20%溶離劑 CH2Cl2/MeOH/NH4〇H(28%)38/17/2之二氣甲院 溶液）純化後，獲得32 mg (R，S)-9-苄基-2-嗎啉-4-基-8-三 氟甲基-6，7,8,9-四氫嘧啶并[1，2-a]嘧。定-4-酮，其特徵如 下： 'H NMR譜： 2.11至2.25(111，111);2_35至2.44(〇1，111);3.17至3.27 (m，5 H); 3.40至 3.53 (m，4 H); 4.18至 4.29 (m，1 H); 4.51 (d, 1=15.9 Hz, 1 Η ); 4.585.4.72 (m, 1 H); 4.96 (s, 1 H); 5.22 (d, J=15.9 Hz, 1 H); 7.205.7.27 (m, 3 H); 7.28J.7.36 (m, 2 H) 〇
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=〇.88 [M+H]+ ： m/z 395 ° 實例5: 9-((S)_2_羥基苯乙基)2嗎基_8(s)三氟甲 基_6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮
根據實例2中描述之程序 基-8·二氟甲基-6,7,8,9-四 % (S)·2·氣-1·笨基乙醇， ，使用 135 mg (R，S)-2-嗎啉-4- 二氟甲基-6,7,8,9- 析（梯度： 甲基-6’7,8,9·四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮及342 笨基乙醇’製備此產物。藉由二氧化矽層 5/〇 至 2〇% 溶離劑 CH2Cl2/MeOH/NH4OH(280/〇) M9299.doc •58- 201105673 38/17/2之二氣曱烷溶液）純化後，獲得26 mg 9-((S)-2-羥 基-2-苯乙基）-2-嗎啉-4-基-8-(R)_三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧 咬并[1，2-&]°密°定-4-_及18 111§(8)-9-((8)-2-經基-2-苯乙基）-2_嗎啉-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 2.24(111，1^1);2.36至2.46(111，111);3.08((1(1，】=10.0及 14.2 Hz，1 H); 3.17至 3.27 (m，1 H); 3.40至 3.48 (m，4 H); 3.63 至 3.69 (m，4 H); 4.17至 4.32 (m，2 H); 4.74至 4.85 (m，1 H); 4.99 (m, 1 H); 5.02 (s, 1 H); 5.67 (d, J=5.1 Hz, 1 H); 7.22至 7.44 (m，5 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.85 [M+H]+ ： m/z 425; [M-H+HC02H]- ： m/z 469 旋光度：OR=+7.4 +/- 0.6; C=1.959 mg/0.5 ml CH3OH。 實例6 : 9-((R)_2-羥基-2-苯乙基）-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟 甲基-6,7,8,9_四氫嘧啶并[1，2-3]嘧啶_4-酮
根據貝例2中描述之程序，使用135 mg (r,s)_2_嗎啉·4_ 基 氟曱基-6,7,8,9 -四虱》密咬并[i,2_a]喷咬_4__及342 149299.doc •59- 201105673 mg (R)-2-氣-1-苯基乙醇，製備此產物。藉由二氧化矽層 析（梯度：5% 至 2〇% 溶離劑 CH2Cl2/Me〇H/NH4〇H (28%)38/17/2之二氣曱烷溶液）純化後，獲得25 mg 9_((r)· 2-羥基-2-苯乙基）-2-嗎啉_4_基_8-(S)-三氟曱基-6,7,8,9-四 氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4-酮，其特徵如下： 'H NMR譜： 1.40至 1.56 (m, 1 H); 2.05至 2.17 (m, 1 H); 3.05至 3.20 (m，2 H); 3.36至 3.47 (m，4 H); 3.62至 3.67 (m，4 H); 3.84至 3.94 (m，1 H); 3.96至 4.03 (m，1 H); 4.54 (dd，J=6.0及 13.8 1^，11^;4.96(3，111);4.99至5.04(111，111);5.56(寬單 峰，1 H); 7.18至 7.37 (m，5 Η)。
質譜：方法A 滞留時間Tr(分鐘）= 0.73 [M+H]+ ： m/z 425; [M-H+HC02H]- ： m/z 469 旋光度：OR =+63.3 +/- 1.4; MeOH。 在以上純化中，亦獲得20 mg 9-((R)-2-羥基-2-苯乙基）-2 -嗎琳-4-基- 8-(R)-三敦甲基-6,7,8,9 -四氫0^咬并[l，2-a]0密 β定-4-綱。 實例7 : (8S)-9-[(2S)-2-羥基-2-(4-甲氧基苯基）乙基]_2-(嗎 啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧 啶-4-綱 149299.doc -60- 201105673 Ο
/° 根據實例2中描述之程序，使用135 mg (R,s)_2_嗎啉_4_ 基-8-三氟曱基_6,7,8,9_四氫嘧啶并[i，2_a]嘧啶_4_酮及760 mg (S)-2-氣-1-(4-曱氧基笨基）乙醇，製備此產物。藉由二 氧化矽層析（梯度：5%至20%溶離劑CH2Cl2/MeOH/NH4OH (28°/〇)38/17/2之二氯甲烷溶液）純化後，獲得66 mg (8S)-9-[(2S)-2-羥基-2·(4-甲氧基苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三 氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶·4-酮，其特徵 如下： 4 NMR譜： 2.14 至 2.29 (m，1 H); 2.35 至 2.44 (m，1 H); 3.06 (dd， 卜9.8及13.9 1^，11^);3.14至3.27(111，111);3.37至3.50(111， 4 H); 3.62至 3.69 (m，4 H); 3.74 (s，3 H); 4.14至 4.28 (m，2 H); 4.79 (m，1 H); 4.90至 4.98 (m，1 H); 5.01 (s，1 H); 5.57 (d, J=4.9 Hz, 1 H); 6.93 (d, J=8.6 Hz, 2 H); 7.25 (d, J=8.6 Hz，2 H)。
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.84 [M+H]+ ： m/z 499 149299.doc -61 - 201105673 旋光度·· OR=+4; C=1.397 mg/0.5 ml CH3OH。 亦獲得36 mg (8R)-9-[(2S)-2-羥基-2-(4-曱氧基苯基）乙 基]-2-(嗎淋-4-基）-8-(三氟曱基）-6，7,8,9 -四氫-4H-嘴咬并 [l，2-a]嘧啶-4-酮。 實例8 : (8S)-2·(嗎啉-4-基）-9-[(lR或1S)-1-苯乙基卜8-(三I 甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮
根據實例If中描述之程序，使用含135 mg 嗎啉_4_ 基-8-二氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[iha]嘧啶_4_酮（實例 Id)之5 ml乙腈及520 mg (1-溴乙基）苯，製備此產物。藉由二 氧化石夕層析（梯度：5%至20%溶離劑cH2Cl2/MeOH/NH4〇H (280/。）38/17/2之二氣曱烷溶液）純化後，獲得23 mg呈苯乙 基鏈上構型未確定之單一非對映異構體形式的（8S)_2•(嗎 淋_心基）冬Π-苯乙基]_8_(三氟曱基）_6,7,8,9_四氫_化“密啶 并[l，2-a]°^^-4-_，其特徵如下. H NMR譜：
149299.doc -62 - 201105673 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=4.07 [M+H]+ : m/z 409 旋光度：OR=+54.5 +/- 〇·6; C=1.594 mg/0.5 ml CH3OH。 實例9 : (8S)-9-[(lR及lS)-l-(4-甲氧基苯基）乙基】_2-(嗎琳_ 4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧咬并[l，2-a]嘧咬-4-嗣
130 mg (S)-2-氣-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫鳴咬并[l，2-a] 喊0疋-4-酮（貫例id)引入圓底燒瓶中之3 ml四氫吱喃、250 mg樹脂支撐之三苯基膦（3 mm〇i/g)及116 mg 1-(4-曱氧基苯 基）乙醇中。接著逐滴添加〇·12 mi偶氮二甲酸二乙醋。添 加後’在周圍溫度下攪拌反應混合物丨8小時。接著25〇 mg 樹脂支撐之三苯基膦（3 mmol/g)添加至反應混合物中。在 周圍溫度下又攪拌18小時後，經由Millex過濾器過濾所得 混合物’接著在減壓下濃縮所得濾液。 殘餘物溶於5 ml嗎啉中，且在80。(：下加熱所得混合物2 小時。在減壓下濃縮反應混合物。藉由二氧化矽層析（梯 度：0。/。至 20%溶離劑 CH2Cl2/MeOH/NH4OH(28%)38/17/2之 二氣曱烧溶液）純化後，獲得4〇 mg呈兩種非對映異構體之 60/40混合物形式的（8S)-9-[l-(4-甲氧基苯基）乙基]-2-(嗎 149299.doc -63· 201105673 啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_四氫_4H_ 155 ^并[1 2-al 口窜 啶-4-酮，其特徵如下： Laj在 'H NMR譜： 1.61 (d, J=7.1 Hz, 1.8 H); 1.68 (d, J=7.l Hz i . $ 7 47 7 M、 i 5 J·2 H); 2.09 至_ (m，2 H); 3.10至3.65 (多重峰部分遮蔽， (s，1.2 H); 3.74 (s，18 H); 3.85至 4_34 (m ] κ ， b H); 4.68至 4.87 (m，0.4 H); 4.93 (s，0.4 H); 4.98 (s 0 » υ.Ο H); 5 4? / J=7.1 Hz, 0.4 H)； 5.79 (q, J=7.1 Hz, 〇.6 H)· 6 , ’
Hz，0.8 H); 6.92 (d，j=8.6 Hz，1·2 H); 7 26 M T ， H)。 . U，J=8.6 Hz，2
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.94及0.89(兩種非斟 60/4。混合物于映異構體之 [M+H]+ : m/z 439。 實例10 :”⑽或1S)小(4_漠苯基）乙基】〜嗎啉冬 基）-Μ三氣甲基Μ，7,8,9_四氫-4Η_嘴咬并[12叫喷唆*酮 0
根據實例9中描述之程序，使用含3〇〇 mg (s)_2氣_8_三 氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并4嘧啶-4_酮之6 ml四氫呋 喃、600 mg樹脂支撐之三笨基膦（3 mm〇1/g)及354 mg卜㈠― 149299.doc -64 - 201105673 溴苯基）乙醇，製備此產物。接著逐滴添加〇 28 ml偶氮二 甲酸二乙酯。添加後，在周圍溫度下攪拌反應混合物18小 時。接著600 mg樹脂支撐之三苯基膦（3 mm〇1/g)添加至反 應混合物中。在周圍溫度下又攪拌丨8小時後，經由MiUex 過濾器過濾所得混合物，接著在減壓下濃縮所得濾液。 瘵發殘餘物溶於5 ml嗎琳中，且在周圍溫度下攪拌所得 混合物4天。接著在減壓下濃縮反應混合物。藉由二氧化 石夕層析（梯度：〇至20%溶離劑cH2Cl2/MeOH/NH4OH (28%)38/17/2之二氣曱烷溶液）純化後，獲得15 mg (8S)_9_ [1-(4-溴苯基）乙基]_2_(嗎啉_4_基）_8_(三氟甲基）_6,7,8,9四 氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶·4-酮之非對映異構體之一（苯乙 基鏈上構型未確定），其特徵如下： ]H NMRt# : 1.73((1，】=7.11^，3 11);2.16至2.31(111，111);2.39至2.47 (m, 1 H); 3.12至 3.25 (m，5 H); 3.35至 3.51 (m，4 H); 4.15 (m，1 H); 4.82至 4.90 (m，1 H); 4.92 (s，1 H); 5.33 (q，J=7.1 Hz，1 H); 7.27 (d，J=8.6 Hz，2 H); 7.49 (d，Hz，2 H)。 質譜：方法B 滞留時間Tr(分鐘）=4·26 [Μ+Η]+ : m/z 487。 實例11 : (8S)-9-[(lS或lR)-l-(4_溴苯基）乙基卜2-(嗎啉_4_ 基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9_四氫_4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4-酮 149299.doc •65- 201105673 Ο
前面純化亦產生6〇 mg 溴苯基）乙基]_2-(嗎 琳-4-基）-8-(二氟甲基）_6,7,8,9四氫_41^_嘧。定并[iia]嘧 定4_酮之第一非對映異構體（苯乙基鏈上構型未確定），其 特徵如下： NMR譜： 1.64 (d, J=7.1 Hz, 3 HV ι 70 s , Λ Λ i.78至 1.94 (m，1 H); 2.30至 2.40 (m，1 H); 3_08至 3.26 (m s m n ^5 11):3.391 3 52 (^4^4.11 (m5 1 H); 4.52 (m, 1 H)； 4 9s r … (s, 1 H); 5.50 (q, =7.1 Hz, 1 H); 7.25 (d，J=8.6 Hz, 2 HV 7 q "
質譜：方法B 7.53 (d，J=8.6 Hz，2 H) 〇 冰留時間T r (分鐘）=4 3 7 [M+H]+ : m/z 487。 -8-(三氟甲基）-6,7,8,9- 實例12M8S)-2-(嗎啉基）9苯美 四氫-4H-嘧啶并【M_a】嘧啶_4•網土
425 mg (S)-2-嗎啉 _4、其 土 二氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 149299.doc * 66 - 201105673 [1，2_a]嘧啶-4_酮（實例le)引入微波管中之1 ml二甲基甲醯 胺、422 mg磷酸三鉀、38〇 〇1§碘化銅及2爪丨碘苯中。在微 波爐中於15(TC下加熱所得混合物30分鐘。接著離心反應 混合物。接著用乙酸乙酯清洗分離之上清液，接著蒸乾。 用乙酸乙醋溶解殘餘物且用水洗滌所得溶液。分離有機 相’接著經硫酸鎂乾燥’過濾，且在真空下濃縮。藉由二 氧化石夕層析（梯度：5%至15%溶離劑CH2Cl2/MeOH/NH4OH (28°/〇)38/17/2之二氣曱烷溶液）純化後，獲得15〇 mg (8S)_ 2·(嗎嘛_4-基）-9-苯基-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶 并[l，2-a]嘧啶酮，其特徵如下： NMR譜： 2.40至 2.48 (m，2 H); 3.00至 3.13 (m，4 H); 3.31 至 3.37 (m，1 H); 3.38 至 3.48 (m，4 H); 4.33 至 4.40 (m，1 H); 4.93 (叫1扣；4.99(3，1抑7.28至7.37(111,3 1^;7.43(【，卜7.7
Hz，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.83 [M+H]+ ： m/z 381 ° 實例13 : (8S)-9-(4-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a】嘧啶-4-酮 0
149299.doc •67· 201105673 根據實例I2中描述之程序，使用140 mg (S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮（實例 le)及0.66 ml 1-氟-4-碘苯，製備此產物。藉由二氧化矽層 析（梯度：5% 至 15% 溶離劑 CH2Cl2/MeOH/NH4OH (28〇/〇)38/17/2之二氣曱烧溶液）純化後，獲得125 mg (8S)-9-(4-氟本基）_2_(嗎琳_4_基）_8_(三氟甲基）_6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧咬-4-酮，其特徵如下： NMR譜： 2-41至2.48(!11，2 11);3.01至3.15(111，4 11);3.33至3.37 (m，1 H); 3.40至 3.50 (m，4 H); 4.35 (m，1 H); 4.82至 4.94 (m, 1 H); 5.00 (s, 1 H); 7.25 (t, J=8.8 Hz, 2 H); 7.40 (dd, J = 5.6及 8.8 Hz，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.86 [M+H]+ : m/z 399。 實例14 : (8S)-9-(3-氟苯基）-2-(嗎啉(三氟甲基）_ 6,7,8,9-四氫-411-嘴咬并[1，2-3]变咬_4-嗣
根據實例12中描述之程序，使用u〇 mg (s)_2_嗎琳_4_ 基-8-三氟曱基·6,7,8,9-四氫嘧啶并⑴叫嘧啶_4_酮(實例 149299.doc -68. 201105673 le)及0.66 ml 1-氟-3_碘苯，製備此產物。藉由二氧化矽層 析（梯度：5% 至 15% 溶離劑 CH2Cl2/Me〇H/NH4〇H (28%)38/17/2之二氣曱烷溶液）純化後，獲得6〇 mg (8S)_9_ (3-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H- 嘧咬并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 2.41 至 2.48 (m, 2 H); 3.03 至 3.15 (m, 4 H); 3.25 至 3.27 (m，1 H); 3.42至 3.49 (m，4 H); 4.32至 4.41 (m，1 H); 4.93 至 5.00 (m, 1 H); 5.02 (s, 1 H); 7.14^7.24 (m, 2 H); 7.30 (td, J-2.2&10.5Hz，lH);7.46(dt，J=6.7&8.1Hz，lH)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=〇.86 [M+H]+ : m/z 399。 實例15 : (8S)-9-(2·氟苯基）_2_(嗎啉_4_基）8 (三氟甲基）_ 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[124】嘧啶_4酮 0
根據實例12中描述之程序’使用140 mg (S)-2-嗎琳-4-基8 一氟曱基6,7,8,9’氫嘧啶并[^]嘧啶_4_酮(實例 le)及 0.66 ml 1-氟r曲讨..^ -峨本，製備此產物。藉由二氧化石夕層 析（梯度 ：5 % 5 1 <
至丨5/。溶離劑 CH2Cl2/MeOH/NH4〇H 149299.doc -69 - 201105673 (28%)38/17/2之二氯甲烷溶液）純化後，獲得12 mg (8S) 9_ (2 -氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9-四氫_4H 嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 2.37^2.47 (m, 2 H); 3.05^3.09 (m, 5 H)； 3.41^3.47 (m，4 H); 4.35 至 4.44 (m，1 H); 4.89 (m，1 H); 5.02 (s 1 H). 7.24至7.33(111，2 11);7.36至7.45(111,11^);7.51(111,111)。’ 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.83 [M+H]+ : m/z 399。 實例16 : (8S)-9-【（lR或lS)-l-(3-氟苯基）乙基】_2_(嗎啉_4_ 基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并【i，2_a]嘧啶_4蜩
階段b : mg 在80C下加熱圓底燒瓶中300 mg (S)-2-氯-ΐ·[ι_(3_氧笨 基）乙基]-8-三氟曱基-1，6,7,8-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮 與3 m 1嗎琳之混合物3 〇分鐘。冷卻後，在減壓下濃縮反廉 混合物。用乙酸乙酯及水溶解殘餘物。分離有機相，接著 經硫酸鎂乾燥，過濾，且在減壓下濃縮。藉由二氧化石夕層 析（溶離劑：（：^12(：12/1^0^197.5/2.5)純化後，獲得152 149299.doc -70· 201105673 呈單一非對映異構體（苯乙基鏈上之構型未確定）形式之 (8S)-9-[(1-(3_氟苯基）乙基]·2_(嗎啉_4_基）_8·(三氟，基）· 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-S同，其特徵如下： NMR 譜： 1.66 (d，J-7.0 Hz，3 H); 1.80至 1.95 (m，1 H); 2.33至 2.41 (m, 1 H); 3.09^3.28 (m, 5 H); 3.40^3.52 (m> 4 H); 4.06^ 4.16 (m, 1 H); 4.56 (m, 1 H); 4.95 (s, 1 H); 5.51 (q, J=7.0 沿，1印；7.00至7.17(111，3印；7.33至7.42(111,111)。 質譜：方法A 滞留時間Tr(分鐘）=0.94 [M+H]+ : m/z 427 0 階段a : 彻mg⑻-2-氯_8•三就甲基_6,7，M_四氫嘧咬并 嘧啶-4-_(實例ld)引入圓底燒瓶中之2〇 ml四氫呋〇南、i 6 g樹脂支撐之三苯基膦（3 mmol/g)及663 m 醇中。接著在周圍溫度下授掉反應混合物5分(鐘 加0.790 ml偶氮二甲酸二乙醋。在周圍溫度下攪拌丨小時 後，過處反應混合物且在減壓下濃縮渡液。 用乙酸乙酯及水溶解殘餘物。分離有機相，接著經硫酸 鎮乾燥’過濾、’且在減壓下濃縮。藉由二氧化妙層析（溶 離劑：CH2Cl2/EtOAc 96/04)純化後，獲得15〇 1^呈單一非 對映異構體（苯乙基鏈上構型未確定）形式之（8)_2_氣_1_^- (3-氟苯基）乙基]-8-三氟甲基四氫嘧啶并以，^口密 啶-4-酮，其特徵如下： I49299.doc -71- 201105673 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=1.11 [M+H]+ : m/z 376; [M-H]- : m/z 253 (基峰）。 實例17 : (8S)-9-(4-氟节基）K嗎淋_4_基）-8-(三氟甲基）· 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]喊咬-4·酮
F F F 在氬氣氛圍下，0.536 g碳酸鉋及0.44 ml 1-(溴甲基）_4_ 氟苯添加至300 mg (S)-2-嗎#-4-基-8~三氟曱基_6,7,8,9-四 氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4·酮（實例le)於3 mi乙腈中之溶液 中。接著在80°C下加熱所得混合物2小時。接著在減壓下 蒸發反應混合物，接著藉由二氧化矽層析（溶離劑： CI^Ch/MeOH 98/〇2)純化所得殘餘物，得到61叫呈白色 固體狀之（8S)-9-(4-氟节基）-2-(嗎啉_4•基）_8_(三氟曱美） 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶，其特徵如下： NMR譜： 2·υν 王二^ 、 3 — / 7 ^ · a 〇 qp (m, 5 H); 3.41^3.53 (m, 4 H); 4.21 (m, i H)； 4.5] j=15.2 Hz, 1 H); 4.60至 4.72 (m, i h); 4.96 (s, i h); (d，J=15.2 Hz, 1 H); 7.13 (t，J=8.7 Hz，2 H); 7.30 (dd，j 及 8.7 Hz，2 H)。 149299.doc -72· 201105673 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.89 [M+H]+ : m/z 4 13。 實例18 . (S)-9-节酿基-2-嗎琳-4-基-8-三敦甲基_6,7,8,9_四 氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮
在氬氣氣圍下35.7 mg氫化納添加至300 mg (8)-2-嗎琳-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮（實例 le)於3 ml四氫呋喃中之溶液中，接著在攪拌1〇分鐘後，添 加0.135 ml氣化笨甲醯。在周圍溫度下攪拌6小時後，飽和 碳酸氫鈉溶液及乙酸乙酯添加至反應混合物中。分離有機 相，接著接連用飽和氣化鈉溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過 濾，且在減壓下濃縮。藉由二氧化矽層析（溶離劑： C^C!2)純化所得殘餘物，得到74 ^^呈白色固體狀之（s)_
a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 2.205.2.31 (m, l 2.68J.2.82 (m, 3 H); 2.865.2.96 (111，2 11)’3.15至3.44(多重峰部分遮蔽，411);3.75至3.87 1 H); 5.15 (s，1 H); 5·38至 5.53 (〇1，111);4.17至4.3〇(111, 149299.doc •73· 201105673 (m，1H);7.37U.43(m，2H);7 45p53(m3H)。 質譜：方法B 滞留時間Tr(分鐘）=3.59 [M+H]+ ： m/z 409 方疋光度.OR=-15.8-f/ η。η 1 c c c\ I c\ c /- 〇·8; C= 1.650 mg/0.5 ml DlViSO 〇 實例19 : (S)-2-嗎啉基 〇 丞·9-η比咬-3-基-8-二氟曱基-6,7,8 9 四氫嘧啶并【l，2-a]嘧啶-4__ ’ ’ 0
根據實例12中描述之鉬 你田οηη π、，， 裎序，使用200 mg (S)-2-嗎琳_4 基-8-二I甲基-6,7,8,9-四氫嘴咬并n,2_a]嘴咬.4__ (實例 le)及380 mg 3-碘吡啶，製備此產物。藉由二氧化矽層析 (溶離梯度：CH2C丨2至96/04 CH2Cl2/MeOH)純化後，獐p 48 mg呈黃色固體狀之（s)_2_嗎啉_4_基_9•吡啶_3_基=
· » ffiT 曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4_酮，其特徵如下. 4 NMR譜： 2.44至 2.48 (m，2 H); 3.00至 3·13 (m，4 H); 3 31至3 37 (m，1 H); 3.41 至 3.47 (m，4 H); 4.37 (d, J=16.1 Hz，1 Ή). 4_97至 5.09 (m，2 H); 7.48 (dd，J=4.9及 8·3 Hz，1 H); 7 8〇至 7.85 (m, 1 H); 8.50 (dd，J=1.4及 4.9 Hz，1 H); 8.57 (d，J==2 2
Hz，1 H)。 149299.doc • 74· 201105673 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.5 5 [M+H]+ ： m/z 382 旋光度·· OR =-40 +M .6, DMSO 中 C=0_2%。 實例20 : (S)-2-嗎淋_4_基·9_吡啶_4-基-8-三氟甲其 丞'6,7,8 9 四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶 SAR236152 〇 Ο
F F ο N人 N"^|<
根據實例I2中描述之程序，使用2〇〇 mg (s^_嗎 基-8-三氟曱基-6,7’8,9-四氫嘧啶并嘧啶4 le)及380 mg 4-碘吡啶，製備此產物。藉由二氧化矽層= (溶離梯度：CH2Cl2i 96/04 CH2Cl2/MeOH)純化後，獲二 26 mg呈黃色固體狀之（S)_2_嗎啉_4_基_9_吡啶基_8_三氟 曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[丨』々]嘧啶酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 2_43 至 2.48 (m，2 H); 3.07至 3.19 (m，4 H); 3 33 至 3 39 (m，1 H); 3.45至 3.50 (m，4 H); 4.30至 4.38 (m，1 H); 5.06 (s’ 1 H); 5_09至 5.17 (m，1 h); 7_45 (d，J=6.1 Hz，2 H); 8.62 (d，J=6.1 Hz, 2 Η)。
質譜：方法A 149299.doc -75- 201105673 [M+H]+ ： m/z 382; [M-H]- ： m/z 380 滞留時間Tr(分鐘）=0.42 旋光度：OR =-31 +/- 1.3, DMSO 中 C=0.2%。 實例21 : (8S)-9-(4-甲基苯基）-2-(嗎啉-4_基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮
根據實例12中描述之程序，使用100 mg (8S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮（實例 le)及100 mg 1-碘-4-曱基苯，製備此產物。藉由二氧化矽 層析（溶離劑：CH2Cl2/MeOH 98/02)純化後，獲得23 mg呈 奶白色固體狀之（8S)-9-(4-甲基苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三 氟曱基）-6,7,8,9-四氫-411-嘧啶并[1，24]嘧啶-4-酮，其特徵 如下： 'H NMR譜： 2.32 (s，3 H); 2.44 (m，2 H); 2.97 至 3.15 (m，4 H); 3.33 至 3.50 (多重峰部分遮蔽，5 H); 4.34 (m，1 H); 4_86 (m，1 H); 4_98 (s，1 H); 7.22 (s，4 Η)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.90 149299.doc •76· 201105673 [M+H]+ : m/z 395。 實例22 : (8S)-9-(2-氣苄基）-2-(嗎啉·4·基）_8_(三氟甲基 6,7,8,9-四氫·4Η_<^ 咬并[l，2-a]喷咬 _4_ 酮
214 mg碳酸铯及74 mg 1-(溴甲基）_2_氣苯添加至1〇〇 mg (8S)-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,89_四氫_4H_嘧啶并 [l，2-a]嘧啶-4-酮（實例ie)於2 m丨二曱基曱醯胺中之溶液 中。在約2(TC之溫度下16小時後，反應介質注入水中。分 離有機相且用乙酸乙酯萃取水相。合併之有機相在減壓下 濃縮至乾。藉由製備型HPLC/MS(方法〇純化殘餘物。蒸 發乙腈及凍乾後，獲得94 „^呈油狀之（8S)9(2氣苄基分 2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_四氣秦。密咬并以，2_a] 嘧啶-4-酮，其特徵如下： NMR譜： 2.29至 2.66 (m，2 H); 3.09至 3.18 (m，4 H); 3.23 至 3.50 (多重峰部分遮蔽 ’ 5 H); 4 27 (m，i H); 4 68 (d,卜16 6 % 1 H); 4.74 (m, 1 H)； 4.96 (s, 1 H); 5.12 (d, 1=16.6 Hz, 1 H); 7.16至 7.22 (m，1 H)，7.24至 7.32 (m, 2 H); 7.41 至 7.48 (m，1 H)。 149299.doc •77- 201105673 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.96 [M+H]+ : m/z 429。 實例23 : (8S)-9-(3-氟节基）丄（嗎啉_4_基）_M三敗甲基）-6,7,8,9-四氫·4Η_喊咬并U，2_a】嘧啶4-網 Ο
根據實例22中描述之程序，使用1〇〇 mg (8S)_2_(嗎。林-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮、214 mg碳酸绝及68 mg 1-(溴甲基）_3_氟苯，製備此產 物。藉由製備型HPLC/MS(方法C)純化後，獲得102 mg呈 油狀之（8S)-9_(3-氟苄基）-2_(嗎啉·4_基）_8_(三氟曱基 6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下· NMR譜： 2.17至 2.45 (m，2 H); 3.15至 3.31 (m，5 H); 3.39至 3 49 (m，4 H); 4_23 (m，1 H); 4.58 (d，J=16_l Hz，1 H); 4 66至 4.78 (m，1 H); 4.97 (s，1 H); 5.13 (d，J=16.1 Hz，1 Ή); 6 98 至 7.15 (m，3 H); 7.35 (dt，J=6.0及 8.1 Hz，1 H)。
質s普：方法A 滞留時間Tr(分鐘）= 0.89 149299.doc -78 - 201105673 [M+H]+ : m/z 413。 實例24 : (8S)-9-[2-(2-甲氧基苯基）乙基】-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a】嘧啶-4-酮
214 mg碳酸铯及78 mg 1-(2-溴乙基）-3-甲氧基苯添加至 100 mg (8S)-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H- 啦啶并[l，2-a]嘧啶·4-酮（實例le)於2 ml二甲基甲醯胺中之 溶液中。在6〇t之溫度下18小時後，添加78 mg 1-(2-漠乙 基）-3-氟苯。在6〇t之溫度下2小時後，所得反應混合物注 入水中。分離有機相且用乙酸乙酯萃取水相。合併之有機 相在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC/MS(方法C)純化 殘餘物。蒸發乙腈及凍乾後，獲得25 mg呈油狀之（88)_9_ [2-(2-曱氧基笨基）乙基]_2_(嗎啉_4_基）_8_(三氟甲基）_ 6’7,8’9-四氫-4仏嘧啶并[1，2_3]嘧啶_4_酮，其特徵如下： NMR譜： H); 2.25至 2.35 (m，1 H); 2.83至 3,03 1.84至 2.00 (m， (m» 4 H); 3.76 (s, 3 Η)· (，H)，3.〇6i3.3〇(m，2H);3_44(m,4H);3.61j_3.67 4.08至 4.24 (m，2H); 4.37至 4.52 (m 149299.doc -79- 201105673 1 H); 4.99 (s, 1 H); 6.88 (dt，J = 0.9及 7.6 Hz，1 H); 6.96 (寬 雙峰，J=7.9 Hz，1 H); 7.14 (dd，J=l_5 及 7.6 Hz，1 H); 7.18 至 7.26 (m，1 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.98 [M+H]+ : m/z 439。 實例25 : (8S)-9-[2-(3-甲氧基苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-411-嘧啶并【1，2-3】嘧啶-4-酮
根據實例24中描述之程序’但使用含1〇〇 mg (8S)-2-(嗎 啉_4_基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧 啶-4-酮、78 mg 1-(2-溴乙基）·3-曱氧基苯及214 mg碳酸铯 之2 ml二曱基曱醯胺，製備此產物。在6〇。〇之溫度下反應 3天後’如貫例24中所述來處理，且藉由製備型 HPLC/MS(方法C)純化，獲得2〇 mg呈油狀之（8S)_9_[2_(3_ 甲氧基苯基）乙基]-2-(嗎啉_4_基）_8_(三氟曱基）_6,7,89_四 氫-4H-嘧啶并[1’2-a]嘧啶_4_酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 149299.doc •80· 201105673 1 · 8 8 至 2.01 (m，1 Η V 2 19 w 1 έτ、 乃.32(111，11{);2.74至2.90(111，11^ .2 (m，1 H); 3.26 至 3.39 (多重峰部 分遮蔽，1 H); 3.43 至 3 48 一 /i u、1 王乂 48 (m，4 H); 3.62 至 3.68 (m，4 H); 3.73 (s，3 H); 4.02至 4.23 1 ’ ·ζ·ί (m, 2 H); 4.49^.4.65 (m, 1 H)· 5·〇〇 (s，1 H); 6_70 至 6.88 (m 3 HV 7 14Z， 質譜：方法A 滞留時間Tr(分鐘）=〇.94 [M+H]+ : m/z 439。 實例26 : (8S)-9-(3_甲氧基节基叫嗎琳-4-基)-8例^ 基）_6,7,8,9-四氫-4H-，咬并u，2_a】喊唆_4嗣
根據實例22中描述之程序’但使用2如二甲基甲醯胺中 ^100 rng (8S)-2-(，^-4^)-8-(^ar&)-6s75859^t. 4H-t疋并[l，2-a]。密。定-4-酮、57 mg 1_(氣甲基）_3_甲氧基 苯及214 mg碳酸铯，製備此產物。處理後，將殘餘物拌入 乙腈中。固.體經旋轉過濾器乾燥，用乙醚清洗，接著在真 空鐘罩下乾燥。因此獲得HI mg呈白色固體狀之（8S)_9_(3_ 曱氧基苄基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H- 149299.doc •81- 201105673 嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮，其特徵如下： NMR譜： 2.075.2.23 (m, 1 H); 2.355.2.44 (m? γ Η^; 3.19JL3.28 (m，5 H); 3.40至 3.55 (m， 4 H); 3.72 (Sj 3 H); 4.22 (m, 1 H); 4.45 (d，J=15.9 Ηζ，1 H); 4.56至 4.7〇 (m，i η); 4.96 (s, 1 H); 5.21 (d，J=15.9 Hz，1 H); 6.75至 6 88 (m，3 H); 7 19至 7.27 (m，1 H) » 質譜：方法A 滞留時間Tr(分鐘）=0.88 [M+H]+ : m/z 425。
根據實例12中描述之程序，使用10〇 mg (8S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧咬并[l，2-a]嘧咬·4·酮（實例 le)、108 mg 1-碘-4-曱氧基苯及 79 mg 4,7-二甲氧基-l，i〇_ 啡啉，製備此產物《藉由二氧化矽層析（溶離劑： CH2Cl2/MeOH 98/02)純化後，獲得31 mg呈奶白色泡沐狀 149299.doc ·82· 201105673 之（8S)-9-(4-曱氧基苯基）_2 6 7 〇 Q ^ 、馬嘴基）-8-(三氟甲基）- M，8,9_四氫_4H_嘧啶并[丨，2 'HNMRtf ： ，其特徵如下：
Mm，4 H); 3.20至 3.35 4 H)； 3.77 (s, 3 H); 4.34 H); 6.95 (d，J=8.8 Hz，2 2_38至 2.46 (m，2 H); 3.04至3a (多重峰部分遮蔽，1 H); 3.45 (m (m> 1 H)； 4.83 (m3 1 H); 4.98 (s, i H); 7.25 (d，J=8.8 Hz，2 H)。
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.83 [M+H]+ : m/z 411。 實例28:(8S)-9-[(2-氣苯基德基】嗎淋-4·基）冬（三氣甲 基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并【124]嘧啶*酮
根據實例1 8中描述之程序，使用5 ml四氩呋喃中之300 mg (8S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[1，2-a]嘧σ定-4-酮（實例ie)、47 mg氫化納及156 mg 2-氟氣化苯 甲醯，製備此產物。藉由二氧化矽層析（溶離劑： CH2Cl2/MeOH 98/02)純化後，獲得35 mg呈白色泡沫狀之 (8S)-9-[(2-氟苯基）羰基]_2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）- 149299.doc • 83· 201105673 •4-_，其特徵如下： 6,7,8,9·四氫-4H-嘧啶并[Ha]嘧啶 *H NMR譜： 2」3至 2.26 (m，1 H); 2.65至 ,… 5 (m，3 H); 2.94 5 3 02 (m，2 H); 3.20 至 3.40 (多重峰 Λ 4 至 3.〇2 W遮蔽，4 H); 3 43 ? 3 55 (m, 1 H)； 4.42 (m, 1 H); 5.I9 (s , m V1 H); 5.55至 5 69 ( 7.18 至 7.31 (m，2H);7_49 至 7.64(m，2H)。 ，1 H)， 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.79 [M+H]+ : m/z 427 0 實例 29 : (8S)-9-(3,5-二氟苄基）-2 (馬琳-4 -基）-8-(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫_4H-喷咬并U，2_a】喊咬_4網 ~
根據實例22中描述之程序，使用2 ml二曱基曱醯胺中之 100 mg (8S)-2_嗎啉-4-·基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [l，2-a]嘧啶-4-酮（實例le)、214 mg碳酸鉋及75 mg 1-(溴甲 基）-3,5-二氟苯，製備此產物。藉由製備型HPLC/MS(方法 C)純化後，獲得85 mg呈油狀之（8S)-9-(3,5-二氟苄基）-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟▼基）-6,7,8,9 -四氫-4H-。密D定并[l，2-a] 149299.doc -84· 201105673 嘧啶-4·酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 2.21至2.44(111,2只）；3.14至3.33(111，5 1^);3.36至3.52 (m，4 H); 4.23 (m，1 H); 4.61 (d, J=16,4 Hz，1 H); 4.68至 4.81 (m, 1 H); 4.98 (s, i H); 5.07 (d, J=16.4 Hz, 1 H); 6.90 至 7.02 (m，2 H); 7.07 (tt，J=2.3及 9.3 Hz, 1 H)。 質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）= 3.93 [M+H]+ : m/z 43 1。 實例30 : (8S)-9-(2,4-二氟苄基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2-a】嘧啶-4-酮
根據實例22中描述之程序，使用2 ml二曱基甲醯胺中之 100 mg (8S)-2-嗎啉_4_基三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [l，2-a]嘴咬-4-酮（實例le)、214呵碳酸绝及75 mg ι_(溴曱 基）_2,4_二氟苯’製備此產物。藉由製備型HPLC/MS(方法 C)純化後’獲得86 mg呈油狀之（8S)-9-(2,4-二氟苄基）·2-(嗎啉_4_基）-8-(三氟曱基）_6,7,8,9_四氫_4Η_嘧啶并[u — a] 嘧啶-4-酮’其特徵如下： 149299.doc •85- 201105673 4 NMR譜： (m，1 H); 3.17至 3.32 (dd，J=5.9及 14.2 Hz，1 2.16至 2.30 (m，1 H); 2.35 至 2.45 (m, 5 H); 3.41 至 3.49 (m, 4 H); 4.22 H); 4.60 (d，J=16.1 Hz，1 H); 4.66至 4 76 (m，丨 H); 4 97 (s， 1 H); 5.U (d，Hz’ i H); 7.03 ⑽，j=i 12 6及 9 〇 H); 7.22 (ddd，>2.6-9.0及10.9 叫 h); 7 3〇 ⑷, J=6‘7及 9.0 Hz，1 H)。
質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）=3.96 [M+H]+ : m/z 431。 實例31 : (8S)-2-(嗎琳_4·基）_9-(2,3,4_三I节基）8 (三氣甲
基）-6,7,8,9-四氫-4H-鳴咬并[l，2-a]味咬_4酮 根據實例22中描述之程序，使用2 mi二曱基曱醯胺中之 100 mg (8S)-2-嗎啉_4·基_8_三氟曱基_6,7,8,9_四氫嘧啶并 [l，2-a]嘧。定-4-酮（實例le)、214 mg碳酸铯及82 mg 1-(溴甲 基）-2,3,4-三氟苯，製備此產物。藉由製備型HplC/MS(方 法C)純化後’獲得76 mg呈油狀之（8S)-2-(嗎琳-4-基）-9-(2,3,4-二氟午基）-8-(三氣甲基）_6,7,8,9-四氫-411-〇密11定并 149299.doc •86· 201105673 [l，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： NMR譜： 2.15至 2.31 (m，1 H); 2.35至 2.44 (m，1 H); 3.18至 3.32 (m，5 H); 3.42至 3.54 (m，4 H); 4.22 (dd，J=5.5及 14.3 Hz，1 H); 4·65 (d，J=16.1 Hz，1 h); 4.73 (m，1 h); 4.98 (s，1 H); 5.16 (d，J=16.1 Hz，1 H); 7 〇5至7 17 (m，i H); 7 2〇至 7.32 (m，1 H)。 質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）=4.08 [M+H]+ : m/z 449。 實例32 : (8S)-9-[(5-氣小苯并噻吩_3_基）甲基】_2_(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫_4H-鳴咬并【l，2-a]喊咬-4-酮
根據實例22中描述之程序，使用2 ml二甲基甲醯胺中之 100 mg (8S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [l，2-a]嘧啶-4-酮（實例le)、214 mg碳酸铯及95 mg 3-(溴曱 基）-5_氣-1-苯并噻吩，製備此產物。藉由製備型HPLC/MS (方法C)純化後’獲得72 mg呈油狀之（8|§)_9_[(5_氣_1_苯并 149299.doc -87· 201105673 °塞吩-3-基）曱基]-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟曱基）_6,7,8,9_四氫_ 定并定-4-酮，其特徵如下： 'H NMR譜： 2.13 至 2.25 (m，1 H); 2.34至 2.43 (m，1 h); 3.16至 3.32 (m, 5 H); 3.35至 3.48 (m, 4 H); 4.21 (dd，j=6.0及 14.3 Hz，1 11);4.62至4.74(111,2 11);5.00(8，1^1);5.52(£1,】=16.11^， 1 H); 7.42 (dd，J=2.0及 8.6 Hz，1 H); 7.67 (s，1 H); 8.01 (d， J=2.0 Hz，1 H); 8.03 (d，J=8.6 Hz，1 H)。 質譜：方法B 滞留時間Tr(分鐘）=4.42 [M+H]+ : m/z 485。 實例33 : (8S)-9-[(lR或lS)-l-(4-氟苯基）乙基】-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-喷咬并[i，2-a]嘯咬-4-_
階段a : 使用 130 mg (8S)-9-[(lR 及 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2-(嗎 啉-4-基）-8-(三氟曱基）_6,7,8,9_四氫_4H•嘧啶并[Lha]嘧 咬-4-_之兩種非對映異構體之7〇/3〇混合物，藉由對掌性 層析來分離該兩種非對映異構體：Chiralpak 1C 20从坊管 149299.doc -88 - 201105673 柱；溶離：70%庚烷/30%EtOH。 固體狀之 基）-8-(三 ，其特徵 濃縮第一非對映異構體，獲得42 mg呈無色 (8S)-9-[(lR 或 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]·2_(嗎嘴 j 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-痛咬并[1，2_3]0密。定4 如下： 4 NMR譜（400 MHz): 1 H); j==5.6 5.43 j=5.6 1.72 (d, J=6.8 Hz, 3 H); 2.22 (m, 1 H)； 2 43 3.14^3.27 (m, 5 H); 3.39^3.54 (m, 4 ^
&14.4HZ，lH);4.8(^4.88(m，iH);4 93 (s iH (q, J=6.8 Hz, 1 H); 7.12 (t, J=8.8 Hz, 2 H); 7.36 及 8.8 Hz, 2 H)。 （dd，
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.95 [M+H]+ : m/z 427。 階段b··叫9·隊及1S)小㈣苯基）乙基 基Μ-(三氟甲基）切，9_四氫必㈣并丨心‘二. 0
根據實例24中描沭夕# + 义之矛王序，使用2〇瓜丨乙腈中之500 mg (8S)-2-(嗎啉 _4_ 基）_8「_ — , 土）(二氟曱基）_6,7,8,9_四氫-4Ή-嘧啶弁 149299.doc -89. 201105673 [l，2-a]嘧啶-4-酮、1 g碳酸鉋及391 mg 1-(1-氣乙基）-4-氟 苯，製備（8S)-9-[(lR及lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4Η-σ密。定并[l，2-a]»^ 咬-4-_ 之混合物。藉由二氧化矽層析（溶離劑：CH2Cl2/MeOH 97/3)純化後，獲得130 mg呈兩種非對映異構體狀之70/30 混合物形式的（8S)-9-[(lR及lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2-(嗎 琳-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9 -四氫-4H-α密。定并[1，2-a] 〇密 啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜： 其為兩種異構體之70-30混合物，其中：1.65 (d，J=7〇
Hz，2.1 H); 1.72 (d，J=7.0 Hz，0.9 H); 1,75至 1.86 (m，0.7 H); 2.25至 2.48 (m，1.3 H); 3.12至 3.27 (m，5 H); 3.40至 3.56 (m，4 H); 4.00至 4·22 (m，1 H); 4.42 (m，0.7 H); 4·80至 4.87 (m, 0.3 H); 4.93 (s, 0.3 H); 4.96 (s, 0.7 H); 5.44 (q, j=7.〇 1^，0.3^1);5.65(9，】=7.0 112,0.7 11);7.06至7.21(111，2 11); 7.32至 7.40 (m，2 H)。 實例34 : (8S)-9-[(lR或lS)-l-(4-氟苯基）乙基】_2_(嗎琳_4· 基）-8·(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧咬_4_酮 前面純化（實例33，階段a)亦產生85 mg呈無色固體狀之 (8S)-9-[(lR 或 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]-2_(嗎啉 _4_ 基）8 (三 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵 如下： 4 NMR譜： 1.65 (d，J=7.0 Hz，3 H); 1.69至 1.86 (m，1 H); 2.29至 2 37 149299.doc -90- 201105673 .44至 3.58 (m，4 H); 4.〇8 (m, 1 H); 4.96 (s, 1 H)； (m，lH);3.1U3.28(m，5H); ‘ (dd, J=5.9及 14.7 Hz，1 H); 4.42 5.64 (q，1=7 0 HZ，1 H); 717 …卜8.8 Hz，2 H); 7.35 (dd， J=5.6及 8.8 Hz, 2 H)。
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.95 [M+H]+ : m/z 427。 實例35 : (8S)-9-(3_甲基苯基）-Μ嗎淋-4_基）_8·(三氟甲基） 6,7,8,9-四氫-4Η·痛咬并[l，2-a]嘧咬_4_嗣
根據實例I2中描述之程序’但使用含25〇 mg (8S)-2-㉟ 啉-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9·四氫嘧啶并嘧啶_4·_ (實例le)之4 ml二甲基甲醯胺、251 mg 1-碘-3-甲基苯、 349 mg磷酸三鉀、156 mg碘化銅及93 mg (1S，2S)-環己_ 1，2-二胺，製備此產物。在150°C下微波照射1小時及藉由 二氧化矽管柱純化所得反應混合物（溶離梯度：CH2C12至 98/02 CH2Cl2/MeOH)後，獲得195 mg呈綠色固體狀之（8S)-9-(3 -曱基苯基）_2-(嗎淋-4-基）-8-(三獻甲基）-6,7,8，9-四氫_ 4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 149299.doc •91· 201105673 NMR譜： 2.31(8,3 11);2.37至2.47(111^^ 、111，2 11);3.02至3.16(111，4 11); 3·19至3.39 (多重峰部分遮蔽 ^ 1 H); 3.40至 3.53 (m，4 H); 4.28至 4.40 (m，1 H); 4.93 (m 1 u、 、5 1 H)； 4.99 (s, 1 H); 7.13 (m, 2 H); 7.19 (寬單峰，i h). 7 2Q , 平 1 屮，/ 29 (t，J=7.5 Hz, 1 H)。
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.90 [M+H]+ : m/z 395。 實例36 : (8S)-9-(4_氯苯基）1(嗎琳-4-基）-8-(三氟甲基） 6,7,8,9-四氫-4H·’唆并【M叫嚷啶*酮 對掌性
CI 根據貫例12中描述之程序，但使用25〇 mg (8S)_2_嗎啉_ 4-基-8-二氟甲基-6,7,8,9-四氫啦。定并[Lia]鳴0定_4_酮（實例 le)、274 mg 1-氣-4-碘苯、349 mg填酸三鉀、156 mg填化 銅及93 mg (1S，2S)-環己-1，2-二胺，製備此產物。在15〇。〇 下微波照射1小時及藉由二氧化矽管柱純化所得反應混合 物（溶離梯度：CH2C12 至 98/02 CH2Cl2/MeOH)後，獲得 145 mg呈綠色泡洙狀之（8S)-9-(4-氣苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三 149299.doc •92· 201105673 氟曱基）-6,7,8,9-四氫_4H-嘧。定并[i,2-a]>€、^-4-酮，其特徵 如下： 4 NMR譜： 2.41 至 2.47 (m，2 H); 3.07至 312 (m，4 H); 3.20至 3.43 (多重峰部分遮蔽，1 H); 3.46 (m，4 H); 4.35 (m，1 H); 4.94 (m5 1 H); 5.01 (S} 1 H)； 7.39 (d, J=8.8 Hz, 2 H)； 7.49 (d, J=8.8 Hz, 2 H)。
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.94 ; [M+H]+ : m/z 4 1 5。 實例37 : (8S)-2-(嗎蛛_4_基）三氟甲基）-9-[4-(三氟甲基） 苯基】-6,7,8,9-四氫-4H-嘴咬并[j，2_a]峨咬-4-網
根據實例12中描述之程序，但使用25〇 mg (8S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮（實例 le)、313 mg 1-碘-4-(三氟曱基）苯、349 mg磷酸三鉀、156 mg碘化銅及93 mg (lS，2S)_環己_丨，2_二胺，製備此產物。 在150°C下微波照射1小時及藉由二氧化矽管柱純化所得反 149299.doc •93· 201105673 應混合物（溶離梯度：CH2C12至98/02 CH2Cl2/MeOH)後， 獲得120 mg呈淺綠色固體狀之（8S)_2_(嗎啉_4_基）_8_(三氟 曱基）-9-[4-(三氟甲基）苯基]_6,7,8,9_四氫_4H嘧啶并π，2_ a]嘧啶-4-酮’其特徵如下： 'H NMR譜（400 MHz): 2_42至2.53 (多重峰部分遮蔽，2 h); 3.01至3.13 (m，4 H); 3.22 至 3.39 (多重峰部分遮蔽，！ h); 3.41 至 3.46 (m, 4 H)； 4.37 (m, 1 H); 5.03 (s, 1 H); 5.05 (m, 1 H); 7.62 (d, J=8.6 Hz，2 H); 7·81 (d，J=8.6 Hz，2 H)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=〇. 9 8 [M+H]+ : m/z 449 〇 實例38 : (8S)-9-【（lR或lS)-l-(2-氟苯基）乙基】_2·(嗎啉 基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶 階段c :
使用 70 mg (8S)-9-[(lR 及 lS)-l-(2-氟苯基）乙基；(嗎 啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧 啶·4-酮之兩種非對映異構體之70/30混合物，藉由對掌性 149299.doc -94- 201105673 層析（Chiralpak AD 20 μηι管柱；溶離：8〇%庚烷/1()〇/〇
EtOH/10% MeOH)來分離該兩種非對映異構體。 因此獲得41·5 mg (8S)_9-[(1R或氟笨基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_四氫_4H嘧啶并[^24] D密咬酮，其特徵如下： 4 NMR譜（400 MHz): 1.62 (d，J=7.2 Hz，3 H); 1.68至 1.85 (m, 1 H); 2.30至 2.39 (m，1 H); 3.20至 3.42 (m，5 H); 3.50至 3.65 (m，4 H); 4,03 (m，lH);4.22至4.36(m，lH);4·99(s，lH);6.05(q，J=7·2 Hz，1 H); 7.14至 7.29 (m, 2 H); 7.35至 7.43 (m，1 H); 7.47 (m，1 H)。 質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）=4.02 [M+H]+ : m/z 427 旋光度：OR=+33; C=2.543 mg/ml DMSO。 階段 b ·· (8S)-9-[(lR及 lS)-l-(2-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并【l，2-a]嘧啶-4-酮
149299.doc •95 201105673 可根據實例1 7中描述之程序，但使用22 ml乙腈中之500 mg (8S)-2-(嗎啉-4-基）-8•(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶 并[l，2-a]嘧啶-4-酮、1 g碳酸鉋及391 mg 1-(1-氣乙基）-2· 氟苯（參見下文階段a)，製備此產物。二氧化矽管柱純化 (溶離劑：CH2Cl2/MeOH 97/03)後，獲得70 mg呈淺黃色粉 末狀之（8S)-9-[(lR及lS)-l-(2-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(二氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘴唆并[l，2-a]。密咬-4-酮的兩 種非對映異構體之70/30混合物，其特徵如下： 滞留時間Tr(分鐘）=0.93及0.90 :異構體之70%-30%混合 物； [M+H]+ : m/z 427。 階段a: 1-(1_氣乙基）_2_氟苯
767 mg亞硫醯氣添加至！ g市售1(2_氟苯基）乙醇於2〇 ml 氣仿中之溶液中。在約2〇°c之溫度下攪拌隔夜後，用飽和 奴酸氫鈉水溶液洗滌反應混合物，接著經無水硫酸鎂乾 燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。因此獲得78〇 mg卜^ —氯 乙基）2 -氟本，δ玄產物原樣用於下一階段。 實例39 . (8S)-9-[(lR或苯基）乙基卜2 (嗎啉_4_ 基）-8-(二氣甲基）_6,7,8,9_四氫_4h-响咬并[nq喷咬·4酮 149299.doc •96· 201105673
狀之（8S)-9-[(lR或lS)-l-(2-氟苯基）乙基]-2-(嗎啉_4-基）_8_ (三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H_嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其 特徵如下： 4 NMR譜（400MHz): 1.69(〇1，卢7.0沿，3 11);1.97至2.12(111，1叫；2.36至2.46 (m，1 H); 3.15 至 3.35 (多重峰部分遮蔽，5 H); 3.43 至 3.59 (m, 4 H); 4.09 (m, 1 H); 4.72 (m, 1 H); 4.93 (s, 1 H); 5.73 4，1=7.0 1^，111);7.07至7.25(111，2 11);7.28至7.40(111，1 H); 7.5 1 (m，1 H)。 質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）=3.93 [M+H]+ ： m/z 427 旋光度：OR=-96.3 +/- 1.4; C=2.812 mg/0.5 ml DMSO。 實例40 : (8S)_9-[2-(3-氟苯基）乙基】-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氣 甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-鲖 149299.doc •97- 201105673
200 mg 1-(2-溴乙基）·3_氟苯添加至15〇 mg (8S)-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮 於2.5 ml甲苯中之溶液中。在60〇c下微波照射（在cem discover設備上功率為100瓦小時接著再在6〇°c下1 小時及兩次在70。(：下6小時後，用乙酸乙酯稀釋反應混合 物。用水洗滌所得混合物。分離有機相接著在減壓下濃縮 至乾。藉由製備型HPLC/MS(方法D)純化所得殘餘物後， 獲得 43 mg (8S)-9-[2-(3-|l 苯基）乙基]-2-(嗎啉_4_ 基）-8-(三 氟曱基）-6,7,8,9-四氫·4Η-嘧啶并[l，2-a]嘧啶·4·酮，其特徵 如下： 4 NMR譜（400 MHz): 1.871.2.05 (m, 1 H); 2.29J.2.38 (m, l H); 2.82J.3.24 (m，3 H); 3.38至 3.50 (m，5 H); 3.60至 3.66 (m，4 H); 4.11 至 4.25 (m，2 H); 4.50至 4.69 (m，1 H); 4.99 (s，1 H); 6.96至 7.15(111，3 11);7.28至7.41(111，111)。 質譜：方法B 滯留時間Tr(分鐘）=4.10 149299.doc -98- 201105673 [M+H]+ : m/z 427。 實例41 : (8S)-9-苄基-3-氟-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基 6,7,8,9-四氫·4Η·峨咬并[l，2-a]喊咬-4·酮 對掌性 (
F 階段e: 4 g碳酸铯及796 mg苄基溴添加至i g (83)_3_氟_2_(嗎啉· 4-基）-8-(二氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_ 酮於11 ·8 ml乙腈中之懸浮液中。在約2〇。〇之溫度下攪拌隔 仪後，過濾所得懸浮液且所得濾液在減壓下濃縮至乾。在 二氧化矽管柱上純化黃色油狀殘餘物（溶離劑： CH^h/MeOH)。合併相關溶離份且在減壓下濃縮至乾。 用乙醚溶解殘餘物，經旋轉過濾器乾燥，接著在真空下乾 燥。因此獲得600 mg呈白色粉末狀之（8S)_9苄基氟2 (嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）_6,7,89四氫_4Η_β密啶并[】 嘧啶-4-酮，其特徵如下： ’ a 'H NMR譜(400 MHz): 2.175.2.30 (m, 1 H); 2.395.2.46 (m, 1 H)； 3.31^.3.52 (m，9 H); 4.23 (m，1 H); 4·55 (d，J=16」Hz，i H); * η 至 4·73 (m，1 H); 5.13 (d，J：=16.1 Hz，1 H); 7.20至 7.26 (m，3 149299.doc -99· 201105673 H); 7.28至 7.36 (m，2 Η)。 質譜：方法Β 滯留時間Tr(分鐘）=4.01 [M+H]+ : m/z 413。 階段d : (8S)-3-氟-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9-四 氫_4Η·嘧啶并【l，2-a]嘧啶-4-酮
可根據實例16階段b中描述之程序，但使用5 ml乙腈及 1.6 ml嗎啉中之1 g (88)_2_氣_3•氟_8_(三氟曱基）_6,7,8,9四 氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，製備此產物。在65。(：下隔 夜後’獲得1.1 g呈米色粉末狀之（8S)_3_氟_2-(嗎啉-4-基）-8_(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶酮，其 特徵如下：
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.56 [M+H]+ : m/z 323; [M-H]- : m/z 321。 階段c : (8S)-3-氟·2-氣_8_(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧 咬并[l，2-a】喊咬-4-_ 149299.doc -100- 201105673
Of 使用6.8 g外消旋混合物，藉由對掌性層析（chiralpak AD 20 μιη 80x350 mm 250 ml/min 254 nm ； 5% EtOH/5% MeOH/90% 庚烷 + 0.1% TEA)來分離（8R，8S)-2-氣-3-氟-8-(三氣曱基）-6,7,8,9 -四氮-4H-P密σ定并[1，2-牡]〇密。定-4-嗣之對 映異構體。 濃縮右旋對映異構體，獲得3.13 g呈白色固體狀之（8S)-2 -氣-3-氟- 8-(三敦曱基）-6,7,8,9-四氮定并[1,2-a]嘴 啶-4-酮，其特徵如下： 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.62 [M+H]+ ： m/z 272; [M-H]- ： m/z 270 旋光度：OR=+19.6 +/- 0.6; C=2.488 mg/0.5 ml CH30H。 階段b: (8R，8S)-2·氣 _3_氟-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧咬并[l，2-a】嘧啶-4-酮
8 ml三氣化磷添加至6·5 g (8R，8S)-3-氟-2-羥基-8-(三氟 曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮於20 ml 149299.doc •101 - 201105673 1，2-一氣乙烷中之溶液中。在65〇c之溫度下攪拌4小時且回 至約20°C之溫度後，在減壓下反應混合物濃縮至乾。用 150 ml乙酸乙酯及10 m丨冰水稀釋殘餘物。在〇。〇與1〇它之 間的溫度下，添加濃氫氧化鈉溶液，直至獲得6與7之間的 pH值。濾出所形成之固體，得到3 5 g米色固體^。藉由 沈澱來分離濾液，且有機相經無水硫酸鎂乾燥，過濾且在 減壓下濃縮至乾。藉由二氧化矽管柱純化殘餘物（溶離 劑：CH2Cl2/Me〇H 97/03)後，獲得3.3 g淺黃色固體S2。合 併S1與S2兩種固體’得到6 8 g呈淺黃色粉末狀之（8r,8s)_ 2-氣-3-氟-8-(二氟甲基）_6,7,8,9四氫_4H_嘧啶并[^21]嘧 α定-4 -酮’其特徵如下： 質譜：方法Β 滯留時間Tr(分鐘）=2.9〇 [M+H]+ : m/z 272; [M-H]- : m/z 270。 階段a · (8R，8S)-3-氟·2_羥基-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫_ 4Η-嘴咬并【1，2-3]鳴咬_4•明
5.6 g曱醇鈉添加至7 g 6_(三氟曱基）_14,5,6•四氫嘧啶-胺鹽酸鹽（實例1，階段a)於3 5 m丨氟丙二酸二甲酯中之懸浮 液中。在10(TC之溫度下攪拌懸浮液3小時後，所得介質在 I49299.doc •102· 201105673 減壓下濃縮至乾。殘餘物溶解於乙醚中接著在真空下經旋 轉過濾器乾燥。所得固體溶解於14 ml水中，且在冰中冷 部所得混合物，接著經由添加濃鹽酸（25°/。），酸化至ρΉ 5_ 6。在0 C之溫度下攪拌2小時接著在約2(rc之溫度下攪拌 隔伏後，過濾懸浮液接著固體經旋轉過濾器乾燥，且經 ?2〇5真空乾燥。獲得6·5 §呈黃色粉末狀之（8R，8S)_3_氟J_ 羥基-8-(二氟甲基）_6,7,8,9_四氫_4H_嘧啶并[1，2·a]嘧啶_4_ 酮，其特徵如下： 質譜：方法A 滞留時間Tr(分鐘）=〇.28 [M+H]+ : m/z 254; [M-H]- : m/z 252。 實例42 : (8S)-9-(3,5-二氟苯基）_2_(嗎啉_4_基）_8_(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫-4H-喊咬并[i，2-a】喊咬-4-酮
根據實例12中描述之程序’但使用250 mg (8S)-2-嗎啉-4-基-8-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶·4_酮（實例 le)、276 mg 1，3-二氟-5-碘苯、349 mg磷酸三鉀、156 mg 蛾化銅及93 mg (1S，2S)-環己-l，2-二胺，製備此產物。在 -103- 149299.doc ς 201105673 150 C下微波照射1小時及藉由二氧化矽管柱純化反應混合 物（浴離梯度：CH2C12 至 98/02 CH2Cl2/MeOH)後’獲得91 mg呈赭色泡沫狀之（8S)-9-(3,5-二氟苯基）_2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并n，2_a]嘧啶_心酮，其 特徵如下： 4 NMR譜（400 MHz): 2.45 (m，2 H); 3.07至 3.16 (m，4 H); 3.32至 3.37 (m，1 H); 3.45至 3.55 (m，4 H); 4.36 (m，1 H); 5.01 (m，1 H); 5.04 (s， 1 H); 7.18至 7.34 (m，3 Η)。
質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.95 [M+H]+ : m/z 417;. [M-H+HC02H]- ： m/z 461 ° 實例43 . (8S)-9-【（2,6-二氟苯基）羰基】_2_(嗎啉_4_基）·8_(三 氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4Η-嘧啶并[i，2-a]嘧啶-4-酮
根據貫例18中描述之程序，使用4 mi四氫呋喃中之3〇〇 mg (8S)-2·嗎啉-4-基-8-三氟甲基_6,7,8,9_四氩嘧啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮（實例ie)、47 mg氫化鈉及174 mg氣化2,6-二氟 苯甲酿’製備此產物。藉由二氧化矽層析（溶離劑： 149299.doc -104- 201105673 CH2Cl2/MeOH ;梯度：100/0 至 98/02 ’ 接著 98/1 及 98/2)連 續純化三次後，獲得22 mg呈白色固體狀之（8S)-9-[(2,6-二 氟苯基）羰基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜（400 MHz): 2.06至 2.23 (m，1 H); 2.69至 2.79 (m，1 H); 2.91 (m，2 H); 3.06(111，2 11);3.18至3.34(多重峰部分遮蔽，1印；3.37至 3.50 (m，4 H); 4.52至 4.61 (m, 1 H); 5.23 (s, 1 H); 5.62至 5.86 (m，1 H); 7.04至 7.35 (m，2 H); 7.50至 7.67 (m, 1 Η)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.93 [M+H]+ : m/z 445。 實例44 : (8S)-9-[(2,4-二氟苯基）羰基】_2_(嗎啉_4_基）_8_(三 氟甲基）-6,7,8,9-四氫·4Η-嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4-酮
根據實例18中描述之程序，使用4 ml四氫呋喃中之3〇〇 mg (8S)_2-嗎啉-4-基_8-三氟曱基_6 7 8 9·四氫嘧啶并[12_ a]嘧啶-4-酮（實例le)、47 mg氫化鈉及174 mg氣化2,4-二氟 苯曱醯，製備此產物。藉由二氧化矽層析（溶離劑： 149299.doc •105- 201105673 CH2Cl2/MeOH ;梯度：100/0 至 98/02，接著 99/01)連續純 化兩次後，獲得24 mg呈無色漆狀之（8S)_9_[(2,4-二氟苯 基）羰基]-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_四氫-4H-嘧 咬并[1，2-a]°密咬-4-酮’其特徵如下： 4 NMR譜（400 MHz): 2.20 (m，1 H); 2.67至 2.77 (m，1 H); 2.81 至 2.91 (m，2 H); 3_03〇，2 11);3.24至3.45(多重峰部分遮蔽，2 11);3.37至 3.46 (m，2 H); 3.52 (m，1 H); 4.30至 4.48 (m，1 H); 5.21 (s， 1 H); 5.53至 5.67 (m，1 H); 7.18 (dt，J=2.5及 8.6 Hz，1 H); 7.35(ddd，J=2.5&9.3&11.2Hz,lH);7.6K7.71(m，lH)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）= 0.94 [M+H]+ : m/z 445。 實例45 . (8S)-2-(嗎啉_4_基）_9_(苯基乙醯基）_8_(三氟甲
根據實例1 8中γ、+、 田迎之程序，使用4 ml四氫呋喃中之300 mg (8S)-2-嗎啉 丞三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[1，2-149299.doc -106- 201105673 a]嘧啶-4-酮（實例le)、47 mg氫化鈉及152 mg苯乙醯氣， 製備此產物。藉由二氧化矽層析（溶離劑：CH2Cl2/MeOH ; 梯度：100/0 至 98/02,接著CH2Cl2/EtOAc 95/05)連續純化 兩次後’獲得12 mg呈無色漆狀之（8S)-2-(嗎啉_4-基）_9-(苯 基乙酿基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘴。定并[1，2_a] 〇密 啶-4-酮，其特徵如下： 4 NMR譜（400 MHz): 1.91(m，lH);2.5^2.69(m，lH);2.88(m，iH);3_33 至 3.45 (m，4 H); 3.60 (m，4 H); 4.07 (d，J=]_6.〇 Hz，1 Η). 4.16 (d，J=16.0 Hz, 1 H); 4.43 至 4.52 (m，1 h); 5.30 (s，1 只）；5.48至5.61(111，111);7.11(<1，1=7.7 1^，2 11);7.17至 7.23 (t，J=7.7 Hz，1 H); 7.28 (t，J=7_7 Hz，2 H) 〇 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=0.99; [M+H]+ ： m/z 423; [M-H]- : m/z 421;基峰：m/z 303。 實例46 : (8S)-9-[2-(3-氣苯基）乙基】-2-(嗎啉_4_基）·8_(三氟 甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2_a]嘧啶-4-酮
149299.doc -107- 201105673 根據實例40中描述之程序，使用含15〇 mg (8S)-2-〇m 4-基）-8-(三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_ 酮之2_5 ml曱苯’添加含296 mg氫氧化鈉之2.5 ml水、33 mg四丁基硫酸氫銨及216 mg 1-(2-溴乙基）_3_氣苯，製備此 產物。在60°C下44小時後。冷卻後’用乙酸乙酯稀釋反應 混合物。分離有機相且用乙酸乙醋萃取水相。合併之有機 相在減壓下濃縮至乾，且藉由製備型HPLC/MS(方法D)純 化殘餘物。因此獲得42 mg (8S)_9-[2-(3-氯苯基）乙基]_2_ (嗎啉-4-基）-8-(三氟曱基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a] 嘲啶-4-酮，其特徵如下： 'H NMR譜（400 MHz): 1.91 至 2.05 (m，1 H); 2.34 (m，1 H); 2.81 至 2.92 (m，1 H); 2.94至3.04(111，111);3.17(111，111);3.38至3.50(111，5 1^); 3.65 (m，4 H); 4.09至 4.22 (m，2 H); 4.57至 4.71 (m，1 H); 4.99(3，111);7.17((1，1=7.8 1^，111);7.25至7.38(111，3^1)。 質譜：方法A 滯留時間Tr(分鐘）=1.03 [M+H]+ : m/z 443; [M-H+HC02H]- : m/z 487。 實例47醫藥組合物 製備對應於以下配方之錠劑.： 實例1之產物.............0.2 g 錠劑賦形劑之最終重量.............1 g (賦形劑詳述：乳糖、滑石、澱粉、硬脂酸鎂）。 149299.doc • 108- 201105673 採用實例1作為醫藥製劑的實例，必要時，可用本發明 之其他式（I)產物，且特定言之在本申請案中之實例，在實 例2至46及48至56中給出之式⑴產物完成此製劑。 下表產物為如上定義之式（I)產物，且構成本發明之實例 48至56。此等實例48至56產物如上文實驗章節中所指示來 製備。 實例 名稱 質譜分析： 方法E Tr (分鐘） [M+H]+ ： m/z 實例48 9-((R)-2-苯弁[b]π塞吩-2-基-2-經乙基)-2-嗎 啉-4-基-8-(S)-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [1,2-a]嘧啶-4-酮 0.83 m/z481 實例49 9-[(S)-2-羥基-2-(3-羥基苯基）乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [l，2-a]嘧啶-4-酮 0.63 m/z 441 實例50 2-二曱胺基-N-{3-[(S)-l-經基-2-((S)-8-嗎嚇 4-基-6-側氧基-2-三氟甲基-3,4-二氫-2H,6H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶-1-基)乙基]苯基}乙醯胺 0.51 m/z 525 實例51 9-[(S)-2-羥基-2-(2-曱氧基苯基）乙基]-2-嗎 啉-4-基-8_(S)-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并 [1，2-&]嘴咬-4-酮 0.74 m/z 455 實例52 9-[(S)-2-(4-氟-2-曱氧基苯基)-2-羥乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶 并[l，2-a]。密咬-4-酮 0.76 m/z 473 實例53 9-[(S)-2-(4-氯-2-甲氧基苯基)-2-羥乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶 并[1,2-a]。密咬-4-酮 0.81 m/z 489 實例54 9-[(S)-2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-羥乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)-三氟甲基-6;7,8,9-四氫嘧啶 并[1,2-a]嘧啶-4-酮 0.78 m/z 489 實例55 9-(2-經基-3-苯丙基)-2-嗎嚇*-4-基-8-(S)·二氣 甲基-6,7,8,9-四氫嘴σ定并[l，2-a]°密咬 0.74 m/z 439 -109- 149299.doc 201105673 實例56 9-[2-(4-羥基苯基）乙基]-2-嗎啉-4-基-8-(S)- 三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4- 0.68 m/z 425 酮 藥理學章節： 實驗方案 活體外實驗程序 藉由西方墨點法，使用下文描述之技術，或藉由來自 Meso Scale Discovery之下文亦描述之MSD多點生物標記 偵測技術，量測該等分子對AKT磷酸化之抑制活性。經證 實，兩種技術在一類分子上得到一致結果。 藉由西方墨點法量測PC3人類前列腺癌細胞中ρΑΚΤ表 現之研究（測試A): 此測試係基於量測在絲胺酸473上磷酸化之AKT蛋白質 的表現。藉由西方墨點法，在PC3人類前列腺癌細胞株 (ATCC CRL-143 5)中，使用特異性識別pAKT-S473之抗 體，量測AKT之磷酸化（ρΑΚΤ)。 第1天，以0·8χ106個細胞/孔之濃度，將PC3細胞接種至6 孔培養盤（ΤΡΡ, # 92006)中之1800 μΐ含10%胎牛血清（SVF Gibco，# 10500-056)及 1% 麩醯胺酸（L-Glu Gibco # 25030-024)之 DMEM 培養基（DMEM Gibco # 11960-044)中，且在 37°C、5% C02下培育隔夜。 第2天，在測試產物存在或不存在下，在5% C02存在 下，於37°C下培育細胞1至2小時。添加自10倍濃縮之儲備 溶液經二曱亞砜（DMSO S丨gma #D2650)稀釋之分子， 149299.doc •110- 201105673 DMSO之最終百分比為0.1%。在小於或等於ι〇 μΜ之單一 濃度下或在範圍可自小於1 ηΜ延伸至1 〇 μΜ之遞增濃度下 測試分子。 此培育後，溶解細胞，以製備蛋白質。抽出培養基後， 用 1 ml PBS(DPBS Gibco，#14190-094)清洗細胞，刮下細 胞，回收在200 μΐ完全HNTG缓衝液中，且轉移至96孔培 養盤（Greiner #65 1201)中，且冰上溶解卜】、時。HNTG緩衝 液由以下混合物構成：50 mM hepes、150 mM NaCl、1% 曲拉通（triton)、10%甘油，其中每l〇 mi缓衝液臨用時方添 加一個微蛋白細抑制劑混合物（Mini Protease Inhibitor Cocktail)錠劑（Roche 1836153)及一個礎酸酶抑制劑混合物 錠劑（Roche 104906837001)。 在6000 rpm下離心溶解產物1〇分鐘。回收155 μΐ上清 液。在稀釋4倍之4x NuPAGE LDS樣品緩衝液（InVitrogen 參考號NPOOO7)及稀釋10倍之l〇x NuPAGE樣品還原劑 (InVitrogen參考號NP0009)存在下於95°C下培育150 μΐ上清 液5分鐘’以進行變性。接著在-20°C下冷凍此等樣品。根 據MicroBCA蛋白質檢定套組（Pierce #23235)之技術通報， 藉由microBCA技術來檢定5 μΐ。 為分離蛋白質’將20 pg蛋白質負載於12孔NU-PAGE 4-12% Bis Tris 凝膠（InVitrogen 參考號 NP0322BOX)上，且在 150 伏特（volt)下在稀釋 20 倍之 2〇x NU-PAGE MOPS SDS 電 泳緩衝液（InVitrogen參考號NP0001)中遷移1.5小時。 接著將凝膝轉移至Invitrolon PVDF膜（Invitrogen 149299.doc -Ill - 201105673 #LC2007)上，該膜預先在乙醇（Ethanol Fischer Scientific #E/0600DF/15)中滲透幾秒。 在稀釋20倍之2〇x NUPAGE轉移緩衝液（InVitrogen參考 號NP0006)存在下，在伯樂槽（Biorad tank)中於30伏特下進 行隔夜轉移或在60伏特下轉移3小時。 接著在由TBS(10x Tris緩衝鹽水，Sigma #T5912，稀釋 10 倍）、0.1% 吐溫 20(Tween 20)(Sigma #P5927)及 3% BSA(牛血清白蛋白第v部分，Sigma #A4503)構成之飽和 溶液中使該膜飽和，此過程在隔夜轉移後歷時6小時，或 在3小時轉移後歷時1小時。 對於抗磷酸化AKT-Ser473抗體（193H2，兔單株，目錄號 4058，來自 Cell Signaling Technology)Abeam) > 用由 PBS、0.1%吐溫20及3% BSA構成之飽和溶液將一次抗體稀 釋1/1000，接著在4°C下震盪隔夜。 用由TBS及0.1 %吐溫20構成之洗滌溶液清洗兩次，歷時 5分鐘，隨後雜交二次抗體。 對於兔抗小鼠IgG HRP抗體（W402 Promega)，用飽和溶 液將二次抗體稀釋1 〇〇〇〇倍，且對於山羊抗兔IgG HRP抗體 (W401 Promega)，稀釋10000倍，接著在周圍溫度下震盪1 小時。 用洗滌溶液清洗兩次，歷時30分鐘，接著用H20清洗5分 鐘，以除去剩餘吐溫20。 根據Western Lightning加強型化學發光試劑（Western Lightning加強型化學發光試劑，Perkin Elmer #NEL 104)之 149299.doc -112- 201105673 技術通報’同體積（v〇lume-for-v〇lume)製備顯色溶液β 將膜置杰顯色溶液中丨分鐘，排乾，插在兩個透明盤之 間，接著置於量測裝置中，以讀取發光及信號定量讀數。 用FujiFilm裝置（Ray Test)讀取發光。 FUJI裝置量測每一所選亮帶所獲得之總發光信號。 接著減去與所選亮帶尺寸（面積）成比例之背景雜訊（BG)， 該背景雜訊由特定背景雜訊亮帶算得，以便獲得每一亮帶 之特疋信號（AU-BG)。在沒有產物存在下及在〇」％ DMSO 存在下獲得之亮帶視為10〇%信號。以100%信號為函數， 由軟體計算每一所選亮帶所獲得之比活性％(比率）。根據 式（100°/。-比率），計算每一濃度之抑制百分比。 針對僅在一種濃度下測試之產物，兩個獨立實驗可計算 出在既定濃度下獲得之抑制百分比的平均值。 適當時，產物活性轉換為近似IC50，其自所測試之各種 濃度之劑量反應曲線獲得且表示產生5〇%特異性抑制之劑 量（絕對ICso)。兩個獨立實驗可計算IC5G值之平均值。 藉由來自Meso Sea丨e Disco very之MSD多點生物標記損 測技術量測PC3人類前列腺癌細胞中ρΑΚΤ表現之研究（測 試Β): 此測試係基於藉助於基於夾心免疫檢定之技術，使用來 自Meso Scale Discovery之以下MSD多點生物標記偵測套 組’量測在絲胺酸473上磷酸化之AKT蛋白質（P-AKT-S473)在PC3人類前列腺癌細胞株中之表現：鱗酸化 Akt(Ser473)完整細胞溶解產物套組（#K151CAD)或磷酸化 149299.doc -113- 201105673
Akt(Ser473)/總Akt完整細胞溶解產物套組（#K151〇〇D)。 將對P-AKT-S473(套組#K151CAD)具有特異性之一次抗體 塗佈於MSD套組之96孔培養盤之各孔中的電極上：在蛋白 質溶解產物添加至各孔後，藉由添加經電化學發光化合物 標記之二次偵測抗體來目測信號。所遵循程序為套組中描 述之程序。 第1天，以35 000個細胞/孔之濃度，將pc3細胞接種至 96孔培養盤（TPP，# 92096)中之200 μΐ含1〇〇/。胎牛血清（FCS Gibco, #10500-056)及 1% 麵醯胺酸（L_Glu Gibc〇 # 25〇3〇_ 024)之 DMEM 培養基（DMEM Gibco # 11960-044)中，且在 37°C、5% C02下培育隔夜。 第2天，在測試產物存在或缺乏下，在5% c〇2存在下， 於37 C下培育細胞1至2小時。添加自2〇倍濃縮之儲備溶液 經二曱亞砜（DMSO Sigma #D2650)稀釋之分子，DMS〇之 百分比為0.1%。在小於或等於1〇 μΜ之單一濃度下或在範 圍可自小於1 ηΜ延伸至1 〇 μΜ之遞增濃度下測試分子。 此培育後，溶解細胞以製備蛋白質。為此，在脫去培養 基後，50 μΐ含有蛋白酶及磷酸酶抑制劑溶液之MSD套組之 元王Tr is /谷解緩衝液添加至該等孔中，且在震烫下於4。〇下 溶解細胞1小時。在此階段，可在_2G<t或_8代下冷束含有 溶解產物之培養盤。 在周圍溫度下，用MSD套組之阻斷溶液使MSD套組之96 孔培養盤之各孔飽和H、時。用15〇 μΐ MSD套組之THs洗滌 緩衝液洗細次。將先前製備之溶解產物轉移至MSD套組 149299.doc -114- 201105673 之96孔多點培養盤中，且在震盪下於周圍溫度下培育1小 時。用150 μΐ MSD套組之Tris洗滌緩衝液洗滌四次。25 μΐ MSD磺基標籤（sulfo-tag)偵測抗體溶液添加至孔中，且在 震盪下於周圍溫度下培育1小時。用150 μΐ MSD套組之Tris 洗滌緩衝液洗滌四次。150 μΐ MSD套組之讀取緩衝液添加 至孔中’且立即在來自Meso Scale Discovery之S12400儀器 上讀取該等培養盤。 儀器量測各孔之信號。無細胞且含有溶解緩衝液之孔用 以測定將自所有量測結果中減去之背景雜訊（最小值）。在 產物缺乏下及在〇· 1% DMSO存在下含有細胞之孔視為 100%信號（最大值）。根據下式，計算出每一濃度測試產物 之抑制百分比：（1-((測試值_最小值）/(最大值·最小 值）)）χ100。 產物活性轉換為IC50 ’ IC5〇自所測試之各種濃度之劑量 反應曲線獲得且表示產生5G%特異性抑制之劑量（絕對 ICW。兩個獨立實驗可計算值之平均值。
藉助於LC3蛋白質自知％ @ s A 、·’胞資至自體吞噬體之易位，量測 該等分子對自體吞噬之抑制 仰市彳活性。為此，用編碼嵌合蛋白 GFP-LC3之載體轉染海技δ 孜、'、田胞（Hela cell) »選擇穩定地表 現GFP-LC3蛋白質之泡知从々 和 拉，、屯系。藉由使用iCyte自動影像分 析細胞儀（Compucyte)，| :目丨丨成地两丄 $利代謝壓力後顯示LC3粒化之細 胞數目，纟測定LC3蛋白f之易位。 藉由影像分析細胞測量術量測海拉人類細胞中I。蛋白 質之易位的研究（測試c): 149299.doc Π5 201105673 第1天，以15 000個細胞/孔之濃度，將海拉GFP-LC3細 胞接種至塗有聚D-離胺酸（Greiner，#65 5946)之96孔培養盤 中的 200 μΐ含 10%胎牛血清（FCS Gibco，#10500-056)及 1% 麩醯胺酸（L-Glu Gibco # 25030-024)之 DMEM培養基 (DMEM Gibco # 1 1960-044)中，且在 37。(：、5% C02下培育 隔夜。 第2天’用EBSS(Sigma #E3024)洗蘇細胞兩次。接著在 5% C02存在下於37°C下，在EBSS、10 μΜ羥氣嗜 (hydroxychloroquine)及測試產物中培育細胞2小時。用二 曱亞砜（DMSO Sigma #D2650)稀釋該等分子，最終DMSO 百分比為0.1 %。測試在範圍可自1 〇 nM延伸至1 μΜ之遞增 濃度下的分子。 此培育後，用4%三聚甲醛（Sigma #HT501 128 4L)固定細 胞10分鐘。接著用PBS洗滌細胞兩次，接著用2 pg/ml
Hoechst 33342(Invitrogen #H3570)將細胞核染色。接著用 iCyte影像分析細胞儀（Compucyte)讀取96孔培養盤。分析 儀定量顯示LC3粒化之細胞數目。當細胞顯示至少4個LC3 粒化時’其視為陽性。計真顯示4個以上粒化之細胞相對 » 於細胞總數之百分比。 產物活性轉換為IC5Q，ICw自所測試之各種濃度之劑量 反應曲線獲得且表示產生50%特異性抑制之劑量（絕對 ICm)。兩個獨立實驗可計算出ic5G值之平均值。 針對作為實驗章節中之實例的產物獲得之結果在以下藥 理學結果表中給出： 149299.doc -116- 201105673 藥理學結果表1 : 實例 測試A* 測試B* 測試C* 實例1 15 11 實例2 315 16 實例3 15 20 實例4 265 569 實例5 10 1 7 實例6 23 310 實例7 1 5 實例8 75 462 實例9 676 實例10 357 249 實例11 46 319 實例12 6596 441 實例13 25 632 實例14 15 337 實例15 2715 7 > 1000 實例16 41 187 實例17 350 119 實例18 335 > 1000 實例19 39 > 1000 實例20 60 > 1000 實例21 24 157 實例22 23 785 實例23 24 663 實例24 9 103 實例25 7 38 實例26 18 270 實例27 10 363 實例28 33 > 10000 實例29 22 > 1000 實例30 43 212 實例31 150 557 實例32 33 780 實例33 24 221 實例34 22 35 149299.doc •117· 201105673 實例35 20 650 實例36 18 157 實例37 18 270 實例38 2 167 實例39 5 237 實例40 3 82 實例41 4 192 實例42 20 310 實例43 16 986 實例44 108 > 1000 實例45 14 > 1000 實例46 4 16 * 測試 A、B及 C : IC5〇(nM) 抗瘧疾活性測試 根據Desjardins之放射性微量法，進行抗癔疾活性測試 (R.E. Desjardins, C.J. Canfield, J.D. Haynes, J.D. Chulay, Antimicrob. Agents Chemother·, 1979, 16, 710-718)。該等 檢定在96孔微量培養盤（測試盤參考號92696, Techno
Plastic Products Ag, Zollstrasse 155, CH-8219 Trasadingen) 中進行。在補充有5%人類血清之RPMI 1640溶液中培養惡 性瘧原蟲品系，其中血球比容為2%且血液寄生蟲濃度為 1_5°/〇。對於每一檢定，在潮濕氛圍及5% C02下，於37°C 下用選定漢度之藥物培育寄生蟲。青蒿素（Artemisinin)、 青蒿琥自旨（artesunate)以及二填酸氯喧（chloroquine diphosphate)用作參考分子。在二甲亞颯中製備藥物之第 一稀釋液，為1 mg/ml。亦在二曱亞礙中製備一定範圍的 連續子溶液稀釋液。接著用補充有5%人類血清之RPMI 1640將各子稀釋液稀釋50倍，所有稀釋皆在37°C下進行。 149299.doc -118- 201105673 接著此等稀釋液添加至微量培養盤中之培養物中的寄生蟲 中。添加藥物後，在含有5%人類血清及1 %二曱亞砜之 RPMI 1640中培養寄生蟲。藉由併入氚化次黃嘌呤（開始暴 露於藥物後24小時添加），相較於在藥物缺乏下之併入， 量測寄生蟲之生長。 在使用感染之人類紅血球的活體外測試中，在1 μΜ及 0.1 μΜ下產物活性轉換為惡性瘧原蟲（高度抗氯喹之品系 Fcm29-Cameroon)之生長抑制 ％。 針對作為實驗章節中之實例的產物獲得之結果在以下藥 理學結果表2中給出： 藥理學結果表2 : 實例 1 μηι下惡性瘧原蟲之抑制％ 0.1 μιη下惡性瘧原蟲之抑制％ 實例1 99 79 實例4 97 19 實例5 92 97 實例12 59 / 實例13 52 / 實例24 100 40 實例27 36 / 實例48 96 89 實例49 99 81 實例50 99 79 實例51 99 75 實例52 99 75 實例53 99 75 實例54 99 83 實例55 93 81 實例56 99 94 149299.doc -119-

Claims (1)

  1. 201105673 七、申請專利範圍： 1. 一種式⑴產物，
    其中： R1表示-L-芳基或-L-雜芳基，其中L表示： 單鍵， 或含有1至6個碳原子且視情況經羥基取代之直鏈或分 支鍵烧基’ 或CO或-CO-烷基-， 或L’-X基團，其中L'表示含有1至6個碳原子之直鏈或 分支鏈烷基，且X為氧原子或硫原子； 該等芳基及雜芳基視情況經一或多個選自以下之可相 同或不同的基團取代：鹵素原子，及羥基、CN、硝 基、-COOH、-COO烷基、-NRxRy、-CONRxRy、-NRxCORy、 -NRxC02Rz、-CORy、烷氧基、苯氧基、烷硫基、烷 基、環烷基及雜環烷基； 後面之烷氧基、苯氧基、烷硫基、烷基及雜環烷基本 身視情況經一或多個選自鹵素原子及NRvRw之可相同或 不同的基團取代； 該等雜環烷基及雜芳基可另外含有側氧基（oxo); 149299.doc 201105673 R2表示氫原子或烷基； R3表不視情況經一或多個鹵素原子取代之烷基； R4表示虱原子或函素原子； NRxRy如下：Rx表示氫原子或烷基，且Ry表示氫原子 或視情況經一或多個選自羥基、烷氧基、NRvRw及雜環 烷基之可相同或不同的基團取代之環烷基或烷基；或尺父 及Ry與其連接之氮原子一起形成含有3至1〇個環成員且 視情況含有一或多個選自〇、S、NH及N-烷基之其他雜 原子的環狀基團’此環狀基團視情況經取代； NRvRw如下：Rv表示氫原子或烷基，且Rw表示氫原 子或視情況經一或多個選自羥基、烷氧基及雜環烷基之 可相同或不同的基團取代之環烷基或烷基；或Rv& Rw 與其連接之氮原子一起形成含有3至ι〇個環成員且視情 況含有一或多個選自〇、S、NH及N-烷基之其他雜原子 的環狀基團，此環狀基團視情況經取代； Rx及Ry或Rv及RW可分別與其連接之氮原子一起形成 之該等環狀基團視情況經一或多個選自以下之可相同或 不同的基團取代：齒素原子，及烷基、羥基、側氧基、 烷氧基、NH2、NH烷基及N(烷基）2 ; RZ表示除氫之外的Ry之涵義； 該等-NRxCORy、_CORy 及 NRxC02Rz基團中之Rx、Ry 及RZ係選自以上針對RX、Ry及以所指示之含義； 以上所有該等烷基、烷氧基及烷硫基均為直鏈或分支 鏈基團且含有1至6個碳原子， 149299.doc 201105673 忒等式（I)產物為所有可能之外消旋、對映異構體及非 對映異構體开> 式，以及該等式⑴產物與無機酸及有機酸 或與無機鹼及有機鹼形成之加成鹽。 2.如請求項1所定義之式⑴產物，其中： R1表示-L-苯基或-L-雜芳基，其中l表示： 單鍵， 或含有1至6個碳原子且視情況經羥基取代之直鏈或分 支鏈烷基， 或CO或-CO-烷基-， 或L'-X基團，其中L’表示含有1至6個碳原子之直鏈或 分支鏈烷基’且X為氧原子或硫原子； 該等苯基及雜芳基視情況經一或多個選自齒素原子 及-NRxRy、烷氧基及烷基之可相同或不同的基團取代； 後面之烷氧基及烷基本身視情況經一或多個選自鹵素 原子之基團取代； R2表示烷基； R3表示視情況經一或多個鹵素原子取代之烷基； R4表示氫原子或氟原子； NRxRy如下：rx表示氫原子或烷基，且Ry表示氫原子 或烷基；或Rx及Ry與其連接之氮原子一起形成N_嗎啉 基； 以上所有該等烷基或烷氧基均為直鏈或分支鏈基團且 含有1至6個碳原子， 該等式（I)產物為所有可能之外消旋、對映異構體及非 149299.doc 201105673 無機酸及有機酸 對映異構體形式’以及該等式⑴產物與 或與無機鹼及有機鹼形成之加成鹽。 3. 如請求項1及2中任—項所定義之式⑴產物 下各式： 其對應於以 (8S)-9-[2-(4-甲氧基苯基）乙基]·2·(嗎琳_4_基三氟 甲基）-6,7,8,9-四氫_4Η “密咬并[i，2_a]喷啶_4, 9_[2-(4-曱氧基苯基）乙基]_2·(嗎啉_4基(三氟甲 基）-6,7,8,9-四氫_4Η_嘧啶并fl,2_a]嘧啶_4酮 (8S)-2-(嗎琳_4_基）冬(2·苯乙基）·8_(三氣甲基）_6,7,8,9_ 四氫-4Η-°密咬并[1，2-a]喷。定-4-酉同 (8S)-9-节基-2-(嗎琳-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9四数_ 4H-°密。定并[l，2-a]e密咬-4-酉同 (8S)-9-[(2S)-2-經基-2-苯乙基]_2-(嗎啉 _4_基）_8_(三氟 甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4_酮 (8S)-9-[(2R)-2-經基-2-苯乙基]-2-(嗎啉 _4_ 基）_8·(三氟 甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4酮 (8S)-9-[(2S)-2-羥基-2-(4-甲氧基笨基）乙基] 基）-8-(二氟曱基）-6,7,8,9 -四氫-4Η-»密。定并[1 2_a]。密11 定_ 4-_ (8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-[(lR)-l-苯乙基]_8_(三氟甲基）_ 6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-酉同 (8S)-9-[l-(4-甲氧基苯基）乙基]_2-(嗎啉_4_基）_8_(三氟 甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧咬_4_酮 (88)-9-[(18)-1-(4-溴苯基）乙基]-2-(嗎琳_4_基）_8_(三氟 149299.doc • 4 · 201105673 甲基）-6,7,8,9-四氮-4H-0密〇定并[l，2-a]〇密〇定_4_嗣 (83)-9-[(1尺)-1-(4-漠，苯基）乙基]-2-(嗎琳_4-基）-8-(三氟 曱基）-6,7,8,9-四氫定并[1，2-a]"密 口定 _4_嗣 (8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-苯基-8-(三氟甲基）_6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4-_ (8S)-9-(4-氟苯基）-2-(嗎啉-4-基）-8-(三氟甲基）_6,7,8,9_ 四氫-4H-嘧。定并[i，2-a]嘧D定-4-酮 (8S)-9-(3-氣苯基）_2-(嗎嘛-4_基）_8_(三氟甲基）_6,7,8,9_ 四氫-4H-嘧啶并[i，2-a]嘧啶_4•酮 ，， (8s)-9-(2-氟苯基）_2_(嗎琳_4_基）_8_(三氟甲基χ，7,8,9_ 四氫- 4H-°密咬并[i，2-a]鳴唆酮 -4-基）-8-(三氟 (8S)-9-[(lR)小(3·氟苯基）乙基]2 (嗎啉 曱基）-6,7’8,9-四氫，4H-。密啶并[u-a]嘯 (83)-9-(4-1 节基）_2_(嗎啉 _4•基）_8_(三氧 四氫-4H-嘧啶并[Ha]嘧啶_4酮 曱基）-6,7,8,9_
    三氟曱基）- 基）-8-(三氟曱基）_ 基）-8-(三氟曱基）_ -4-基）-8_(三氟曱基）_ (88)-9-(2-氣苄基）_2_(嗎琳 4·基）_8-(三氟甲基）-6,7,8,9- 149299.doc 201105673 四氫_4Η·嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4-酮 (8S)-9-(3_氟节基）_2_(嗎淋冰基）|(三 四氫-4H-嘯啶并n，2_a]喷啶酮 土）·6,7,8,9_ ⑽冬[2-(2·甲氧基苯基）乙基]_2爾 … 甲基，6’7,8,9-四氫，，咬并Π，2，“_ ·(二鼠 (8S)-9-[2-(3-甲氧基苯基）乙基]_2 (嗎啉_4_ 甲基）-6,7，Μ·四氫·4H+定并二氟 叫9♦甲氧基节基）_2_(嗎心·基）|(三氟 6.7.8.9- 四氫_411-嘧啶并[1，2-3]嘧啶_4_酉同 土 (8S)-9-(4-曱氧基苯基）_2·(嗎啉基* 6.7.8.9- 四氫_4H_嘧啶并[12_a]嘧啶_4_酮 盎）- 氟甲基 (8S)-9-[(2-氟苯基）羰基;|_2_(嗎啉_4基>8_( 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l,2-a]嘧啶_4_酮 (8S)-9-(3,5-二氟苄基）-2-(嗎啉—4-基）·8_( V 6.7.8.9- 四氫-411-〇^咬并[1，2-&]»密咬_4-酮 (8S)-9-(2,4-二氟节基）-2-(嗎琳 _4_ 基）_8_( 6.7.8.9- 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶_4_酮 (8S)-2-(嗎啉-4-基）-9-(2,3,4-三氟苄基）_8、（ 6,7,8,9 -四氫- 咬并[l，2-a]喷咬·4-酮 (8S)-9-[(5-氯-1-苯并噻吩-3-基）曱基]·2_(嗎啉 (三氟曱基）-6,7,8,9-四氩-4Η-嘧啶并[u-a]。密啶4基）~ (8S)-9-[(lR或 lS)-l-(4-氟苯基）乙基]_2_( ^ (三氟甲基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[^-判嘧 疋酿j (8S)-9-[(lR或 lS)-l-(4-氟笨基）乙基]-2-(ni| 也 啉、4、基）、 氟甲基）. 氟甲基 氟甲基 149299.doc -6· 8 201105673 (二氣甲基）-6,7,8,9-四氫-4^嘧啶并[^2 — a]喊喷4 (8S)-9-(3-甲基苯基）_2·(嗎琳·4_基）七（^ ^_ 6.7.8.9- 四氫-4Η-嘧啶并^,24]嘧啶_4_酮 甲基）、 (8S)-9-(4-氯苯基）-2-(嗎啉·“基）_8(三氟甲義 四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶·4_酮 土）6,7’8,9- (8S)-2-(嗎啉-4_基）、8_(三氟甲基）_9_[4_(三氟 基]_6,7,8,9_四氫-4H-嘧啶并n，2_a]嘧啶虱甲基）笨 (8S)-9-[(lR或 lS)-l-(2_ 氟苯基）乙基]·2 8- 与啉-4-其、 (三氟甲基）-6,7,8,9-四氫_4Η嘧啶并嘧啶4 土） (8S)-9-[(lR或 lS)-l-(2_ 氟苯基）乙基]._2 m 8- (三氟甲基）-6,7,8,9-四氫·4Η_嘧啶并嘧啶4 土） (8S)-9-[2-(3-氟苯基）乙基]_2_(嗎啉 _4_ m 丞)一8·(二备 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并n，2_a]嘧啶_4、鲷 〜氟曱 (8S)-9-苄基_3_氟(嗎啉_4_基）_8_(三氟甲我 四氫-4H-嘧啶并[12-a]嘧啶_4_酮 氣曱基）. (8S) 9 (3,5-一 I 苯基）-2-(嗎琳-4 -基） 6.7.8.9- 四氫-411-〇密咬并[1，2-3]嘧咬-4-酮 (8S) 9 [(2,6-一 I 本基）獄基]-2-(嗎琳-4-基）8 基）-6,7,8,9-四氫·4η_嘧啶并口，2々]嘧啶綱 〜氟曱 (8S)-9-[(2,4-二氟苯基）羰基]_2_(嗎啉、4_ 基）-6,7,8,9-四氫_4Η_嘧啶并以，2々]嘧啶_4-鲖 一軋甲 氣甲基> (8S)-2_(嗎啉-4-基）-9-(苯基乙醯基二 6.7.8.9- 四氫_4H-嘧。定并[l，2-a]嘧。定-4-_l (8S)-9-[2-(3-氣苯基）乙基]-2-(嗎琳-4-基）_ '(二氟甲 149299.doc 201105673 基）-6,7,8,9-四氫-4H-嘧啶并[l，2-a]嘧啶-4、酉同 9-((R)-2-苯并[b]噻吩-2-基-2-羥乙基/ w 馬淋-4-基 (8)-三氟曱基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[1，2-丑]嘧啶_4酮 9-[(S)-2-經基_2_(3_經基苯基）乙基]_2•嗎啉|基^傅 三氟甲基-6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2-a]嘧啶、酮 2_二甲胺基-N-{3_[(S)_卜經基_2_((叫嗎琳_4_基側 氧基-2-三氟曱基_3,4-二氫_2h，6H-嘧啶林n。Ί 汴Ll，2-a]嘧啶 基）乙基]苯基}乙醯胺 9-阶2-經基_2-(2_甲氧基苯基）乙基]^嗎琳+基| (S)-二氟甲基·6,7,8,9-四氫嘧啶并[i，2_a]嘧啶4酮 [⑻1(4-敗-2-甲氧基苯基）_2_經乙基]1 8-(S)-二氟甲基“，^、四氫嘧啶并以^ ^嘧啶斗 9·[⑻-2-(4-氣冬甲氧基苯基）_2_經乙基]、2_嗎 8-⑻-二氟甲基'以細氫嘧啶并^叫嘧啶+酮 9-[⑻-2-(2·氣|甲氧基苯基）·2_經乙基]、^嗎琳_心基_ 8-(S)-二氣甲基_6,7,8,9_四氫喷啶并n，2_a]策啶_4酮 M2-經基·3_苯丙基）_2_嗎^4•基_8(s)_三氟甲某 6.7.8.9- 四氫嘧啶并n，2_a]嘧啶_4_酮 土· 9-[2-(4-經基苯基）乙基>2•嗎琳_4_基_8傅 6.7.8.9- 四氫嘧啶并[1，2_3]嘧啶_4_酮 土 ~ 以及該等式⑴產物與無機酸及有機酸或與無機 機鹼形成之加成鹽。 “’、 有 4. 一種製備如請求項1至3中任一 @ # 、土 〇 項所疋義之式（I)產物之方 法，其係根據如下文定義之流程丨製備， 149299.doc 201105673 流程1 : NH ϋ HN NH R2 R3 OR OR O^Y^O B R4 R3 R3 -R2 驗 A °νΝτΝΗR入丨N OH C 氣化反應 -R2 〇、、/N〜NH R4" Cl D
    R3 嗎1# 〇一 N …NH R4
    烷基化或/ R3 醯化多應 广、 /^,-x、鹼、 (0-1 F e 〇 Cul' ArX/OTf G 或 HetX/OTf r3=i>\(雜）芳基化反應 R3drR2 s^N 〇< R4" ,Ν、 、0一 (l)-2 其中取代基Rl、R2、R3及R4具有如請求項1及2中任一 項所指示之含義，且其中R表示烷基，且X表示氯原子、 溴原子或碘原子，或磺醯氧基，諸如三氟曱基磺醯氧基。 5. 一種製備如請求項1至3中任一項所定義之式（I)產物之方 法，其係根據如下文定義之流程2製備， 流程2 : R3r^-R2
    D 烷基化或 酿化反應 R,-X F 驗或 RrOH Η DEAD/PPh3
    Cl J
    (1)-1 149299.doc 9- 201105673 其中取代基R1、R2'们及以具有如請求項⑴中任一 項：指示之含義，且X表示氣原子、演原子或碘原子， 或磺醯氧基，諸如三氟甲基磺醯氧基。 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 如請求項！至3中任一項所定義之式⑴產物，以及該等式 ⑴產物與無機酸及有機酸或與無機驗及有機驗形成之醫 藥學上可接受之加成鹽，其用作藥劑。 如請求項3所定義之式⑴產物，以及該等式⑴產物與無 機1及有機酸或與無機鹼及有機鹼形成之醫藥學上可接 受之加成鹽，其用作藥劑。 一種醫藥組合物，其含有至少一種如請求項1至3中任一 項所定義之式（I)產物或此產物之醫藥學上可接受之鹽或 此產物之前藥作為活性成份，及醫藥學上可接受之載 劑0 一種如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物之用途， 其用於製備供治療癌症之藥劑。 如請求項9之用途，其用於治療固體或液體腫瘤。 如請求項9及10之用途，其用於治療對細胞毒性劑具有 抗性之癌症。 如請求項9至11中—或多項之用途，其用於治療原發性 腫瘤及/或轉移，特定言之在胃癌、肝癌、腎癌、卵巢 癌、結腸癌、前列腺癌、子宮内膜癌及肺癌（NSCLC及 SCLC)、神經膠母細胞瘤、甲狀腺癌、膀胱癌及乳癌、 …色素瘤、淋巴或骨髓造血腫瘤、肉瘤、腦癌、喉癌及 淋巴系統癌、骨癌及胰腺癌、及錯構瘤中之原發性腫瘤 149299.doc 201105673 及/或轉移。 其用於製 13. 一種如請求項1至3所定義之式（I)產物之用途， 備供癌症化學療法中用之藥劑。 其用於製 14. 一㈣請求項1至3岐義之式⑴產物之用途， 備單獨或組合供癌症化學療法中用之藥劑。、 其用作 15·如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物 AKT(PKB)鱗酸化抑制劑。 16. —種如前述請求項4及5中定義及下文回顧之式匸、〇 e 及J的合成中間物’其作為新穎工業產品："、D' E
    中任—項所指 其用於治療 其中Rl、R2、R3及R4具有如請求項！及2 示之定義。 17.如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物 癌症。 18.如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物，a 固體或液體腫瘤。 味 19. 如請求項⑴中任-項所定義之式⑴產物，其用 對細胞毒性劑具有抗性之癌症。 20. 如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物，其用於治、 原發性腫瘤及/或轉移，特定言之在胃癌、肝癌、腎=療 149299.doc •11- 201105673 印巢癌、結腸癌、前列腺癌、子宮内膜癌及肺癌 (NSCLC及SCLC)、神經膠母細胞瘤、曱狀腺癌、膀胱癌 及乳癌、黑色素瘤、淋巴或骨髓造血腫瘤、肉瘤、腦 癌、喉癌及淋巴系統癌、骨癌及胰腺癌、及錯構瘤中之 原發性腫瘤及/或轉移。 2 1 ·如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物，其用於癌症 化學療法中。 22·如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物，其單獨或組 合用於癌症化學療法中。 23. 如請求項1至3中任一項所定義之式⑴產物，其用於預防 或治療溶酶體病’諸如第„型肝糖貯積症或龐培氏症 (Pompe disease)。 24. —種如請求項1至3中任一 τ仕項之式⑴產物之用途，其用於 製備供預防或治療諸如第π】 ^ ^ Α 弟11型肝糖貯積症或龐培氏症之 溶鉍體病用的藥劑。 25. 如請求項23或24之用途，其中$等 使用。 中"亥專式（I)產物單獨或組合 寄生蟲病，諸如瘧疾、 ，一用於治 disease)或利什曼病㈤。斤氏症（Chag 27. —種如請求項1至3中任一項 其用於製備徂，A $ 義之式⑴產物之用途 ，、用於製備供治療諸如瘧疾、 用途 什曼病之寄生蟲病的藥齊卜 氏症或3 I49299.doc •12- 201105673 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：
    149299.doc
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI586670B (zh) * 2012-06-22 2017-06-11 賽諾菲公司 嘧啶酮衍生物，其製備及其治療用途

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL2655375T3 (pl) 2010-12-23 2015-05-29 Sanofi Sa Pochodne pirymidynonu, ich wytwarzanie i ich farmaceutyczne zastosowanie
FR2969613B1 (fr) * 2010-12-23 2013-02-08 Sanofi Aventis Nouveaux derives de 1,2,3,4-tetrahydro-pyrimido{1,2-a}pyrimidin-6-one, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique
DK2790705T3 (en) 2011-12-15 2018-03-12 Novartis Ag Use of inhibitors of the activity or function of PI3K
FR2992314B1 (fr) * 2012-06-22 2015-10-16 Sanofi Sa Nouveaux derives de 2,3-dihydro-1h-imidazo{1,2-a}pyrimidin-5-one et 1,2,3,4-tetrahydro-pyrimido{1,2-a}pyrimidin-6-one comportant une morpholine substituee, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique
EP3828269B1 (en) 2015-03-06 2023-05-03 Korea Advanced Institute Of Science And Technology Composition for prevention or treatment of intractable epilepsy comprising mtor inhibitor
PL3416957T3 (pl) 2016-02-19 2021-02-08 Sprint Bioscience Ab Związki 6-heterocyklilo-4-morfolino-4-ylopirydyn-2-onu przydatne w leczeniu raka i cukrzycy
LT3416945T (lt) 2016-02-19 2020-11-25 Sprint Bioscience Ab 6-aril-4-(morfolin-4-il)-1h-piridin-2-ono junginiai, tinkami vėžio ir diabeto gydymui
JP2023515708A (ja) * 2020-04-27 2023-04-13 アルナ バイオ， インコーポレーテッド 中枢神経系送達のための結合剤及びその使用

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2703712A1 (de) * 1977-01-29 1978-08-03 Bayer Ag Substituierte pyrimidinon eckige klammer auf (di)-thio eckige klammer zu -phosphor-(phosphon)-saeureester bzw. -esteramide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als insektizide, akarizide und nematizide
MY125533A (en) * 1999-12-06 2006-08-30 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclic dihydropyrimidine compounds
PT1257537E (pt) 2000-01-24 2007-08-03 Astrazeneca Ab Compostos terapêuticos morfolino-substituídos.
WO2002018386A1 (en) * 2000-09-01 2002-03-07 Sanofi-Synthelabo 2-PYRIDINYL-6,7,8,9-TETRAHYDROPYRIMIDO[1,2-a]PYRIMIDIN-4-ONE AND 7-PYRIDINYL-2,3-DIHYDROIMIDAZO[1,2-a]PYRIMIDIN-5(1H)ONE DERIVATI VES
GB0119865D0 (en) 2001-08-14 2001-10-10 Cancer Res Campaign Tech DNA-PK inhibitors
EP1340761A1 (en) 2002-02-28 2003-09-03 Sanofi-Synthelabo Substituted 2-pyridinyl-6,7,8,9-tetrahydropyrimido[1,2-a]pyrimidin-4-one and 7-pyridinyl-2,3-dihydroimidazo[1,2-a]pyrimidin-5(1H)one derivatives
MXPA04002629A (es) 2001-09-21 2005-02-17 Sanofi Aventis Derivados de 2-piridinil-6, 7, 8, 9-tetrahidropirimido [1, 2-a] pirimidin-4-ona y 7-piridinil-2, 3-dihidroimidazo [1, 2-a] pirimidin-5(1h) -ona.
BR0308109A (pt) * 2002-02-28 2005-01-04 Sanofi Aventis Derivados 2-piridinil e 2-pirimidinil-6,7,8,9-tetraidro-pirimido[1,2-a] pirimidin-4-ona substituìdos com hetero arila
US7598377B2 (en) 2002-08-16 2009-10-06 Astrazeneca Ab Inhibition of phosphoinositide 3-kinase β
AU2003292436B2 (en) * 2002-12-27 2009-07-30 Msd Italia S.R.L. Tetrahydro-4H-pyrido[1,2-A]pyrimidines and related compounds useful as HIV integrase inhibitors
EP1454909B1 (en) 2003-03-07 2008-08-20 Sanofi Aventis 8'-pyridinyl-dihydrospiro (cycloalkyl) -pyrimido (1,2-a) pyrimidin-6-one and 8'-pyrimidinyl-dihydrospiro (cycloalkyl) pyrimido (1,2-a) pyrimidin-6 derivatives -one and their use against neurodegenerative diseases
EP1460076A1 (en) 2003-03-21 2004-09-22 Sanofi-Synthelabo Substituted 8-perfluoroalkyl-6,7,8,9-tetrahydropyrimido[1,2-a] pyrimidin-4-one derivatives
EP1557417B1 (en) 2003-12-19 2007-03-07 Sanofi-Aventis Substituted 8'-pyri(mi)dinyl-dihydrospiro-[cycloalkylamine]-pyrimido[1,2-a] pyrimidin-6-one derivatives
AR054438A1 (es) * 2005-04-15 2007-06-27 Kudos Pharm Ltd Inhibidores de adn -pk
EP1895997A2 (en) 2005-05-26 2008-03-12 Kudos Pharmaceuticals Ltd Use of dna-pk inhibition to sensitise atm deficient cancers to dna-damaging cancer therapies
WO2008064244A2 (en) 2006-11-20 2008-05-29 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Phosphoinositide modulation for the treatment of neurodegenerative diseases
WO2008148074A2 (en) * 2007-05-24 2008-12-04 Research Foundation Of State University Of New York Inhibitors of mtor and methods of treatment using same

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI586670B (zh) * 2012-06-22 2017-06-11 賽諾菲公司 嘧啶酮衍生物，其製備及其治療用途

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