TW201100860A - State determination method for cell cluster, image processing program and imaging processing device using said method, and method for producing cell cluster - Google Patents

Description

201100860 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 影像’來判 本發明係關於自細胞觀察中所取得的 別細胞塊之複層化狀態的狀態判別手法。 【先前技術】 ❹ 〇 用作一邊培養細胞一邊觀察之裝 微鏡。培養顯微鏡具備形成適合於細胞培養I 置，與顯微觀察培養容器内細胞的顯微觀養1 面培養活細胞，一面觀察細胞之變化或分裂ϋ成為^ 文獻1}。在活細胞之培養過程中，因細胞分裂上:，例如專矛 養基内朝向水平方向擴展，細胞分裂活化而ί:】狀= 起來，則細胞起泡並朝上下方向擴張，進行所謂成菊 在使用到培養顯微鏡的以往細胞觀宛 2匕。 :匕狀=係進㈣視觀察顯微觀察;像 疋，ί投與試藥，由著色狀態等判別之試藥判定⑶目視判 【先前技術文獻】 【專利文獻】 【專利文獻1】曰本特開2004_229619號公報 【發明内容】 【發明欲解決課題】 之觀3 Jt勺ί者耗費時間進行判別。尤其是在各時刻 夕數細胞塊情形，—面識別各個細胞塊，一 是===觸’縣非常繁雜的作業。又，有的課題 疋在目視做t，蚊量财握細職巾轉層化雜之位置 201100860 Λ細胞塊所占比率等)則有困難。再者，有的課題 介與:樂判定之手法中’因試藥之投與而使細胞蒙受之 ^上•物理上的料，或彻所培養的細胞時之限制變大 月係鑒於此種課題而完成者’其目的在於提供-種不 投與所致損害’自藉由成像裝置所攝影之Ϊ 數的衫像可#判別細胞塊之複層化狀態的手段。 【解決課題之手段】 手、示本發批第—，係提供—種細胞塊狀態判別 ΐΓ卿s1 ’取得以成像裝置攝影細胞塊之第-影像之細胞塊中的局部區域之亮度分 >二ΐ ^ ^第一影像之細胞塊中的對應位置之近旁邛it ==:，對’以符合度最高區域之近似度t =域之代表近似度，義第―影像中的局部區域 Ο声ί代表近似度’按照所計算之細胞塊各部分之代表近 似度來判k/f細胞塊之複層化狀態。 近 =為;ί，在包含

f位置區域之代表近似度，移動第-影像度作ί 塊各部分之代表近似度之步驟，·輸出依照所計^之G 用之影像處理程式，以使可資判斷自取得=^發揮作 細胞塊的複層化狀態的複層化=自予^^一、t影像之 間隔發明第三態様，影像處理裝置係構成為且備. H之日HWX錄裝置取賴影細猶㈣像f第 201100860 2L並Ϊ行影像解析之影像解析部；及輸出影像解析部之 第一 部。在該影像處理裝置中’該影像解析部係以 弟旦=像之細胞塊中的局部區域之亮度分布為基準，在包含 的對應位置之近旁進行亮度分布之區塊比 度，近似度作為触置區域之代表近似 f〜像中的局部區域，並計算細胞塊各部分之代表 g 按照所計算細胞塊各部分之代表近似度的複層化 i層化ίί部係構成為，輸出以影像解析部所生成細胞塊之 ❹ ❹ 声之以上本發明令’該近似度為相關值’在代表近似 in，界值以下之情形’宜為判斷該部位已複層化。 界值差分值(difference)，代表近似度之差分值為臨 界值以上之情形，宜為判斷該部位經複層化。 杰發明之影像處理程式或影像處理裝置中，較佳之構 佳^^2為經複層化之部位的細胞塊中的位置資訊，較 之資:成4輪二部位五之細胞塊所占大小 在妒傻中〜=4率等）。又，吾人期望之構成為， ^r^f胞塊之情形，彻每—細胞塊之複層化 的ί胞塊，並輸刀出區 = 果化部位的細胞塊與不具複層化部位 造方示ϋΓί第四態様’係提供一種細胞塊的製 ϊΓί二，、備養胞之培養步驟；在該培養步驟中所择 忿前述影像處理裝置觀察，判別因培養而變化之； '、、田胞中的1塊之複層化狀態之判別步驟。 造方法，不本發明之第五態様，係提供一種細胞塊的製 ϊϊΐ中細胞之培養步驟；以成像裝置攝影該培 卩祕少宾痄八«r驟乂5亥第一影像之細胞塊中的局部 G if基準，在包含該第二影像之細胞塊中的對應 於該局晶域之位置的近旁部，進行亮度分布之區塊比對= 5 201100860 =度J高區域之近似度做為該局部_之代表近似度之近 疋ΐΐ，移動該第—影像中的該局部區域，計算細胞塊 3近似度之計算步驟；及按照在該計算步驟中所計 部分之代表近似度判別細胞塊之複層化狀態 【發明效果】 β理細胞塊狀_別手法’在影像處理程式及影像 fίί Γ間隔預設之時間以成像裝置攝影細胞塊之第 影像，係進行以第一影像之局部區域的亮度分布 ί土f之區塊比對’根據所計算之細胞塊各部分之代表近似 ^ ’判別細，塊之複層化狀態。因此，根據本發明，可提供— if試藥之投與而使細胞蒙受卿，可自以成像裝置所攝 衫之 > 數影像可資判別細胞塊之複層化狀態之手段。 【實施方式】 =於本發明實施方式，—面參照圖面—面加以說明如下。 作，適用本發明之影像處理裝置的纽之—例，第二圖及 Ϊ ^=養觀察㈣之概要構成圖及方塊®，首先就培養觀察 系、·先BS之全體構成作概要說明。 ” 抖春if^1系、统耶，大致區分係由：設置於外殼1上部的 收谷、保持複數個培養容器10的存放架3，觀察抖 養^ 1G内之試料的觀察單元5，搬送培養容器1G之搬送^ ’控·統運作解元6，及具備影軸示裝置的据 作盤7等所構成。 只,衣置的刼 培養室2係形成培養環境的房間，隨付著該培 ίί溫?調整裝置2卜加濕器22、供給C〇2氣體或L氣體箄 孔體的氣體供給裝置23、循環風扇24、檢測培養室2之 f 境感測器25等。存放架(st。㈣3係在形成分(ί 為刖後及上下之棚架狀的各棚架設定固有之號碼牌。培二 1〇可因應培養之細胞之類戰目的而適宜選擇，例如 Ο ο 201100860 之培養容n巾’使細鱗料 f培養容n ίο中吩編邮基-起注人、保持。在 定號碼牌之方式收容。搬送二-對應於存放架3之指 可上下移動的z S(stage)4h 設置於培養室2内部， 移動的X台43等所構成，在χ :，的Y台42、可左右 養容器10並支持的支持臂45。σ 3之前端側設有可舉起培 觀察單元5係由：自試料台 明部51 ;沿著顯微觀察系％ 下側照明試料的第一照 試料的第二照明部52及自下方^ ’自=料台15上方照明 行試料之巨觀觀察之巨觀觀爽系1的第二照明部53 ;進 ，觀察系55 ;及影像處理Ϊ置卿等察的 旦硯硯察糸54係由具有：觀察光 ，進行背光照明的培養容器〗〇上ί t，察影像(巨觀像）。顯微觀察系55係具有：由對物3 旦兄透鏡，螢絲滤11等所構成觀察光學系55a;攝 光學系55a所成像試料之像的冷卻CCD照相機等$ 置55c而構成。對物透鏡及中間變倍透鏡係構成為：萨 =各自設置複數個，並改變透鏡之組合而可設定任意之觀察^ 率。在顯微觀察系55中，可取得被第二照明部52所照明之细 胞之透過像，被第三照明部53所照明之細胞之反射像，被第 二照明部53所照明之細胞之螢光像等，使培養容器1〇内之細 胞經顯微鏡觀察的顯微觀察像(微觀像）。 、 影像處理裝置100係以巨觀觀察系54之成像裝置54c、 顯微觀察系55之成像裝置55c攝影，處理自該等成像裝置所 輪入之信號’而產生全體觀察影像或顯微觀察影像等之影像。 又’影像處理裝置100係實施對該等觀察影像(影像數據)的影 像解析、慢速(time lapse)影像之產生、細胞移動方向的預測、 7 201100860 憶按照觀察程式之谇盖玄？ a τ你0又疋。己 日，索巧與影像數據之方式，加以記錄序嫩“ 呆4盤7設置：設有鍵盤或鍵(SWitCt0等之輸出 擇，板71+’進娥察程式之設定或條件選 行數據之傳送、接收。 錢之棘权間’可進 設定.爾盤7中所 i料之攝影。觀察程式―開始，⑽！係1 22等^ 7 1的％境條件來控制溫度調整裝置21、加渴哭 ^ "f：x xY ^r4rr ^ 之培養容ϋ 10於^ a 、自存放架3搬送觀察對象 察。例如，在觀察ϋ舶二„進行觀察單元5所致的觀 ^5^J〇 ^ ^ Λ 攝影顯微觀^象明部53之光源開燈，在成像裝置55c上 201100860 少在以上方式構成的培養觀察系統BS中，影像處理裝置loo 係，隔預設之時間，取得以成像裝置(54c、55c)所攝影的複數 枚影像’且具有判別影像所含細胞塊之複層化狀態的作用，例 如，可適用於iPS細胞或es細胞等之解析。 ο 在影像處理裝置1〇〇中，間隔預設之時間使用所攝影的2 ，枚細^塊之觀察影像，以前時刻之細胞塊一部分區域(局部區 域)之亮度分布為基準，進行相對於次時刻之包含該位置的周 邊部之區塊比對，以符合度最高區域(區域内亮度分布之變化 ，>、的位置H域)之近似度作為該位置區域之代表近似度，來 ^價判斷複層化狀態。該手法係利用細胞不經複層化的部位 (早層區域^與已複層化之部蚊影像具有以下之特徵者。 吾^認為細胞塊係複數個細胞之聚集(gathering)，單純地 = 平方向擴展的單層之細胞塊，即使原來細胞各個 ^的，或旋轉，亦可觀察細胞大小及細胞彼此間 h兄nl么並可保持構造。一方面’細胞經複層化之情形，由於 ==的變化係朝上下方向進行分裂或移動= 故衫像之工間構造或明亮度會大幅改變。 〇 魏tΪ在單層區域，由於細胞塊内部變化係以空間的 ϋίί由Γ影像之對應位置周邊’進行區= 表近似度變低，而可心= 特徵之影像上之 處理，而觸複層化雜。影像影像進行影像 塊中二 預之硯察影像(同樣作為第二影像)之細 9 201100860 胞塊中包含對應位置的近套 & 合度最高區域之近似度作為:分布之區塊比對，以符 像中的局部區域在f彡像表近似度，第-影 表近似度，根據所計算之細^ 异細胞塊各部分之代 資判斷細胞塊之複層化狀雜^各°卩分之代表近似度，輸出可 第四圖表示影像處理裝置 化之部位之位置或大小資二η被推疋為進仃稷層 之推定度，包含經複層化之 、严積、比率等），複層化 胞塊之判別等，自nwn ^之巧胞塊與不含經複層化之細 影像處顯示面板· :=資源的c_(‘作以處= 說明絲像處理程式GP，喊像裝置(在 _63之^ϋ親^之成像裝置攻)攝影，將紀錄於 以成像裝置^影像處理。此外，在 影像與新近取得像時，係自紀錄於麗幻的第一 狀態的影像處理，並出以即時進行現在之細胞塊複層化 時刻t之^二？20係取，：在步驟S10中記憶於論脱的 設之時間的第五⑻圖所示㈣-影像）；及間隔預 影像^田峨察影像(第五_所示的第二 及分散過料；^ ’相對於各影像’藉由位準設定(Level Set) 相h，來進行細胞塊MC之分段。此時，如第六圖所） 10 201100860 形，_ ===。例如:關於在各自影I實施標像= 對ΐ。此外C-^像重疊的標記彼此間作為相同之細胞塊一一 丄二t二T設之時間係觀觀察之細胞之類別或活動 隔川上/ii擇ί ’而在細胞之活動為活化之情形，則選擇間 2 j二t Γ夺左^ ’在非活化的情形，則選擇間隔30分至 2小時左右之捋間間隔的影像。 Ο 著^ 了減小在第—影像—第二影像之細胞塊之移動所 ^ ί ’ f 胞塊MC之對準(圖未示出）。對準可以細胞 形之頂點位置等絲準來進行，藉由使 间丨/ 呈致，以使圖形力矩之相關為最大(差分值為 之 效果。此外’亦可意®在使各細胞塊 布之差分值成為最小(相關值為最大） 中’於弟一影像之細胞塊MC中，係設定以形 成衫像的像素作為中心之局部區域A a局部區域」A係如第 七⑻圖以去白的框圍繞所示，相較於細胞塊之大小被設定為充 分地小，例如設定為5x5至15xl5像素左右(細胞數個左右之 〇 大小）。此外，局部區域之位置設定，在步驟S20中係構成為， 以被分段化之細胞塊之輪廓端部為起㈣自動設定，除此以 外例如，關於細胞塊之特定部分(特別顯著部分），在操作者 以滑鼠等指定解析範實行解析之情形，亦可構成為，以所 設定解析範圍之端部或中央為起點來設定。 關於如此所設定的局部區域，在步驟S4〇中係進行區塊比 對。區塊比對係以第一影像中所設定的局部區域(bl〇ck)A之亮 度分布為基準(參照第七⑻圖相對於第二影像中包含對應位 置區域，周邊，如第七(b)圖所示，掃瞄局部區域a之亮度分 布，計算在各位置之近似度，並探索符合度最高位置。 201100860 或者：可使用亮度分布之相闕值或差分值， 或者采法值寺’例如，在使用 索差分值最小(接近情:^署係^ 用相關值作為近似度之情形持續說明。鳩3韻係就使 ^化係以細胞之移動作為主體，故藉由在包含對 一=仃I塊比對，而代麵似紅糊侧制&大的值°。 二方面，在局部區龜化之部奴情形，由 =?i變ΐ;伴隨空間構造之變形或亮度變㈣ 订周邊板索，代表近似度之相關值亦採用較小之值。進 γ·〜ΐΐϋ4()中，係將為比較基準之第—影像之局部區域， 設之像素(單位像钱減像素），依順序進行 岭域(在指定騎範圍 圍全域係計算各部分之代表近似度。將在步驟S50 =0所=之細胞，各部分之代表近似度變換為可判斷作為細 胞塊之複層化狀態的複層化資訊，自輸❹輸 &干 於顯示面板72等。 ^兀”、、貝不 第八圖中，在(a)，局部區域之大小係以虛線例示，同 同圖(b)中，係表示複層化資訊之輸出例。在該複層化資訊 輸出例中，與第二影像之細胞塊之外形輪廓線L· 一起，使代表 $似度之相關值為尚的部位變暗，使相關值低的部位變明， 示作為知:照相關值之多階段之級數(gradati〇n)顯示。在使用差 分值等作為近似度之情形，亦為相同地可為多階段之級數顯 7Γ> ° 自該複層化資訊之顯示影像，可判斷在被外形輪廓線所包 圍的細胞塊内部，明度越尚(在灰階標度(gray scale)係越近於白 色），則越進行複層化，可以視覺判斷在細胞塊之哪一部位， 進行何種程度的複層化。 12 201100860 值，他輸出例可例示：代表近似度之相關 γΪ二影財經複概的部位以去白的框包 早層&域吨繩卿抑識職示_鮮。 ” 成為此區塊比5成為代表近似度之位置區域，其構 勻)，代表二庳區f之亮度分布來計算空間的亮度變化(不 ft中^間的亮度變化為預設之臨界值以上時，湖it Ο Ο

位置區域經複層仆，为筮_里~务山、丨丄，，T 而子以,_ - t衫—讀+去自框等包騎層化區域 可。作為空間的亮度變化之指標，係例示亮 ί利ΐϋ狀於空間方向之亮度值之微分的總和等。此 之部位，空間的亮度變化比較大。 、、複層化 於構心在第一景多像中局部區域既經複層化，而關 t區塊_所計算之代表近似度成為中度之相關值(灰階標 度中的中’)的部位，卿雜是倾複層化可更正確地識 別判斷。此外’ S間的亮度變化為大的位置區域，除了經複1 化之部位之外’雖有細胞塊内夕卜境界的部分，不過由於吾曰 分因區塊比對所計算之代表近似度之相關值變大(接近 前述複層化狀態之識別判斷可省略。 、 一如此一來，作為判別經複層化的區域而顯示之情形的複層 化資訊’則有細胞塊中複層化區域之位置資訊(例如χ_γ座4 位置）\或細胞塊中佔有複層化區域之大小之資訊(面積、體 ，、該等之比率等）’輪出該等數值數據而顯示於顯示面板72 等’在定量地判斷複層化狀態上為較佳態様。 以上係表示自觀察影像選擇特定之細胞塊，在擴大顯示狀 態下之解析事例，不過如第六圖，在影像中含有複數個細胞 塊，在無，別指定解析範圍之情形，關於觀察影像所含各細胞 塊，則可貫行相同之複層化解析。在此情形，藉由變換顯示晝 13 201100860 面，即jr，就各個個別之細胞塊顯示複層化狀態，或者在觀察影 像中，可識別並顯示含有經複層化部位的細胞塊與不含複層化 部位的細胞塊。 如/、有’纟層化部位的細胞塊係以黃色，而無複層化 部位内細胞塊係以藍色作區分顯示，又，可例示之顯示型態， 係因應各細胞塊佔有之複層化部位之面積比，面積比高的細胞 塊則越紅’隨著面積比之降低，則有黃色〜綠色〜藍色般之識 別顯不。此外，亦可構成為將解析結果輸出於印表機或 RAM63、磁性§己錄介質等並記錄，或者經由通信部仍，輸出 於系統外部。 藉此’觀察者可以目視判斷’並定量影像所含細胞塊之複 層化狀態如此一來，在影像處理裝置100中，關於以成像裝 $間，預设之時間，攝影細胞塊之第一影像及第二影像，係進 ^以第一影像之局部區域的亮度分布為基準的區塊比對，根據 最近2的代表近似度來判別細胞塊之複層化狀態 。因此，本發 明係提供一種，if影像處理裝置1〇〇所致細胞塊狀態判別手 法，不致因試藥之投與而使細胞蒙受損害，自以成像裝置所攝 影之少數影像即可判別細胞塊之複層化狀態的手段。 此外、’以上說明之實施形態中，雖係例示在培養觀察系統 BS中於成像裝置攝影’且檢索(retrieve)記憶於的時間 順序影像(影像數據）’並解析複層化狀態之構成，不過亦可構 成為，將成像裝置所攝影之影像依次作為第一、第二影像，並 即時進行解析’又’亦可構成為將紀錄於其它觀察系統中所攝 影之磁性記憶介質等的影像予以檢索，解析複層化狀態。又， ，可構成為操作者輯I等設定第—影像之預設範圍(例如特 定細胞塊，或細胞塊中的特定部位)作為解析範圍，而就所設 定之解巧範®，使f彡像處理裝置實行複層化狀態之解析。 —接著’關於本發明實施形態之細胞塊的製造方法，則參照 第九圖加以說明。該製造方法，基本上係具備：培養細胞之培 養步驟(S110);將在該培養步驟中所培養之細胞，使用前述景^ 14 201100860 而變化之細胞中細胞塊之複 ^具體言之，其具備：培養細胞之培養步驟(811ω .蔣/ ==:1之，，像裝置“=設= 第一旦墙夕，〜之#衫像及第一影像之取得步驟(S120);以 禮夕、田胞塊中的局部區域之亮度分布為基準，在第-爭 有對麟前述局部區域之位置的近旁ΐ G 儿又刀布區塊比對，使符合度最高區域之近似度作為兮 似度之近似度設定步驟(S130= Ο ❹ 的局㈣域’計算細胞塊各部分 =0);按照該計算步㈣所計算之該細胞塊^ 么準，：複層化狀態的判別步驟(S15G) ’·根據預設 別、，、田胞塊的選別(SdeCti〇n)步驟(S160);採取已選別 法U =以ί存的採取保存步驟(sl7〇)，而構成此製造方 此外，所培養的細胞可為人類、牛、馬、豬、老鼠 ’亦可為來自植物之細胞。又，細胞塊之保存可為 /東結保存(freezing storage)。 【圖式簡單說明】 第-圖例示影像處理程式之概要構成的流程圖。 圖係表示作為本發明之適關的培養觀察系統之概 要構成圖。 第二圖係前述培養觀察系統之方塊圖。 第四圖係例示影像處理裝置之概要構成的方塊圖。 及第細預設之時騎攝影的細胞塊之第—影像⑻ 巧六圖例=經分段、並標記的細胞塊的狀況之模式圖。 第七囷係第〜像中所没定局部區域之構成例(a);與就關 於第一影像中包含對應位置的近旁部，用以說明實行區比 之狀況的說明圖(b)。 τ 201100860 第八圖係例示相對於細胞塊的局部區域大小的說明圖 (a);與以影像解析所計算複層化資訊之顯示構成例(b)。 第九圖表示細胞塊的製造方法的流程圖。 【主要元件符號說明】 元件符號 名稱 A 局部區域 BS 培養觀察系統 GP 影像處理程式 MC 細胞塊 L 外形輪廓線 1 外殼 2 培養室 3 存放架 4 搬送單元 5 觀察單元 6 控制單元 7 操作盤 10 培養容器 15 試料台 16 窗部 21 溫度調整裝置 22 加濕器 23 氣體供給裝置 24 循環風扇 25 環境感測器 41 Z台 42 Y台 43 X台 45 支持臂 51 第一照明部 52 第二照明部 53 第三照明部 54 巨觀觀察系 54a 觀察光學系 54c 成像裝置 55 顯微觀察系 55a 觀察光學系 55c 成像裝置 61 中央處理單元(電腦） 16 201100860

62 ROM 63 RAM 65 通信部 71 操作面板 72 顯示面板 100 影像處理裝置 120 影像解析部 130 輸出部 17

Claims (1)

1. 201100860 七、申請專利範圍： 1· 一種細胞塊狀態判別手法，其特徵為，間隔預設之時間， 取得以成像裝置攝影細胞塊的第一影像及第二影像，以該 第一影像之細胞塊中局部區域之亮度分布為基準，在該^ 二影像之細胞塊中包含對應位置之近旁部進行亮度分布之 區塊比對(block matching)，以符合度最高區域之近似度作 為該位置區域之代表近似度， 移動該第一影像中的該局部區域計算細胞塊各部分之 代表近似度，按照所計算之該細胞塊各部分之代表近似 度，來判斷細胞塊複層化狀態。 2. 如申請專利範圍第1項之細胞塊狀態判別手法，其中該近 似度為相關值，该代表近似度之相關值為臨界值以下之情 形，則判斷該部位經複層化。 θ 3. 如申請專利範圍第1項之細胞塊狀態判別手法，其中該近 似度為差分值(difference)，該代表近似度之差分值為臨界值 以上之情形，則判斷該部位經複層化。 4. 一種影像處理程式，該程式係以電腦可資讀取，在取得以 成像裴置所攝影的影像，進行影像處理的影像處理裝置用 以使電腦發揮作用之影像處理程式，其包含：間隔預設時 間，取得以成像裝置攝影細胞塊之第一影像及第二影之 步驟； 、 以該第一影像之細胞塊中局部區域之亮度分布為基 準，在該第二影像之細胞塊中包含對應位置之近旁進行& 度分布之區塊比對，以符合度最高區域之近似度作為該= 置區，之代表近似度，移動該第一影像中的該局部區域， 來5十鼻細胞塊各部分之代表近似度之步驟； 輸出按照所計算之該代表近似度的複層化資訊之輸出 步驟， ，以使電腦發揮作用，以輸出可判斷自取得的該第 一、第二影像之細胞塊之複層化狀態的複層化資訊。'^ 18 201100860 5. 如申請專利範圍第4項之影像處理 相關值，輸喊複層化資訊的步n中該近似度為 似度之相關值為臨界值以下之情妒，、二，為，在該代表近 經複層化的複層化資訊。 y 、'輸出判斷為該部位 6. ΐίϊ專!!範圍第j項之影像處理程式，其中該近似度為 成為在該代表近 輸出判斷為該部位經 =差為在該代表近 7.

   8. 9. 複層化的複層化資訊 如申請專利範圍第5或6項之影像處 複層化資訊之步驟，其係構成為輸輸出該 部位之該細胞塊中的位置資訊。 斷為涇該複層化的 如申請專利範圍第5至7項°中任— 中輸出該複層化資_步驟，舰、處理程式’其 層化的部位之該細二Γ大；=輸出判斷為經該複 專利範圍第5至8項中任—‘ 开^在含有複數個細胞塊於該第―影像及該第二影i之情

   之福層化!訊之步驟’係構成為判別每-- 複#二位=區分具有複層化部位的細胞塊與 複層化。卩位的細胞塊，並輸出區分結果。 細胞塊 不具 1〇· 理裝置，其具備：間隔預設之時間，取得以成 細胞塊之第—影像及第二影像，而解析影像= 郷雜卿續析絲的輸出部的 夕古像解析部係以該第一景多像之細胞塊中的局部區域 署Γΐί布為基準’在該第二影像之細胞塊中包含對應位 、^、t方進行亮度分布之區塊比對，使符合度最高區域之 ^似度作為該位置區域之代表近似度，移_第一影像中 的„域’計算細胞塊各部分之代表近似度，並產生 依照所計算之該細胞塊各部分之代表近似度的複層化資 19 201100860 訊 之複層係構成為輸出由該影像解析部所產生細胞塊 相關象處理裝置，其中該近似度為 情形’則構成為產㈣斷=== 12. 如申請專利範圍第1〇 差分值，鄉像解㈣裝置，財該近似度為 情形，職成為輪㈣ 13. 如申請專利範圍第 R 像解析部係構成為，計%像處理裝置，其t該影 胞塊中的位置，該輪出;化之部位之該細 複層化之位置資訊。 、輸出以5亥衫像解析部所計算的 如申請專利範圍第u至〗3 ==¾算; 15. 陶成為輪出 形其中綱—影像及該第二4==塊裝以 該影像解析部係判別每一細胞塊複芦 _ ②化部位的細胞塊％ ;種細胞塊㈣造方法，其包含：騎細㈣培養步鄉； 在該培養步驟中，使用如申請專利範圍第 項之影像處理|置，觀察所培養的細胞，二15項 婕化之該細胞中細胞塊之複層化狀態的判別步^因培 20 16. 201100860 17. ❹ 1細胞，製造方法，料徵為包含 步驟；以成像技攝影該培麵驟 、之= 預設之時間取得所攝影的第-影像及第3像之取S Ϊ ’ 嫌之細胞塊中局部區域之亮度分布為i 準’在影像之細胞塊中包含對應於該局部區域之位 置的近旁部進行亮度分布之區塊輯，以符合度最高區域 之近似度作為該局部區域之代表近似度之近似度設定步 驟；、移動該第-影像巾賴局部區域，計算細胞塊各部分 之代表近似度的計算步驟；及按照該計算步驟中所計算的 5亥細胞塊各部分之代表近似度判別細胞塊之複層化狀態之 判別步驟。 G 21