TW200908981A - Triazolyl aminopyrimidine compounds - Google Patents

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200908981 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明提供三唑基胺基嘧啶化合物，及其用於製備治療 癌症之藥劑之用途。 【先前技術】

Plkl屬於特徵在於稱為polo盒結構域之磷酸絲胺酸/蘇胺 酸結合結構域的蛋白激酶小家族。Plkl在細胞週期調節中 發揮重要作用。而於其之其他功能中，Plkl被認為可調 節有絲分裂之啟始、進展及退出，即癌細胞分裂之階段。 因此，阻斷癌細胞中之Plkl可防止癌細胞分裂或有絲分 裂。 已鑑別出干擾有絲分裂之有效抗癌劑，例如長春花生物 鹼（NAVELBINE®)、紫杉烷（TAXOTERE®)及拓撲異構酶II 抑制劑（ADRIAMYCIN®)。VELCADE®係抑制26S蛋白體 之抗腫瘤劑。然而，該等藥物對正常非分裂細胞造成相當 大的副作用。Plk抑制劑特異性地標定分裂細胞且能夠避 免不期望之毒性。

Plkl抑制劑為熟習此項技術者所知者。參見例如，WO 06/066172。此外，WO 06/021548揭示某些作為Plkl抑制 劑之二氫嗓咬酮類似物（例如，BI-2536)。BI-2536目前正 在第II期臨床試驗中，但其具有高度清除率（CL>1000 mL/min)，且在人體中因骨髓抑制作用而使劑量受限。亟 需具有改良效力或藥物代謝動力學特性之其他抑制Plkl之 化合物。 130205.doc 200908981 【發明内容】 本發明提供新穎之三唑基胺基嘧啶化合物，咸信其可抑 制Plkl，而對癌症治療具有臨床用途。咸信某些該等化人 物具有較WO 06/066172所揭示化合物為佳之改良功效。此 外’咸信某些本發明化合物具有較BI_2536為佳之改良藥 物代謝動力學特性，例如清除率。再者，有鑑於經測試之 本發明化合物的口服生物可利用性，咸信某些該等化合物 可經口服用。 本發明提供式I化合物

其中： R係曱基、曱氧基、羥基、胺基、氯、胺基 基）、二曱基胺基（CVC2烷基）、（CVC2烷基）胺基（c丨-C2烷 基）、胺基羰基（C^C：3烷基）、胺基）乙基羰基胺基）乙 基、2-(iV-甲基胺基）乙氧基、2·氰基丙_2_基、（2_經基_2_曱 基）-1-丙基氧基、（2-羥基）乙基胺基羰基曱基、（卜氟^之― 胺基）乙基、（1_氟）·（1-曱基胺基）乙基、二氟甲基、 1-((2,2-二氟）乙基胺基）乙基' 二氟曱基羰基、三氟曱基羰 基、（1-胺基Η2,2,2-三氟）乙基、（1-曱基胺基）-(2,2,2-三 130205.doc 200908981 氟）乙基、（1-羥基）-(2,2,2-三氟）乙基、2-(胺基）乙氧基、2-(說基）乙氧基、l-((iV-(2-經基）乙基）-(a/~甲基）-胺基）((^-匸2 烷基）、4-(羥基）六氫吡啶_1_基-甲基、ι_(六氫吡嗪―丨―基） 乙基、2-(羥基）乙基磺醯基、(胺基）環丙基、ι_(曱基胺 基）環丙基、1-胺基（環丁基）、丨_胺基環戊_2_基、環戊 酮-2-基、四氫呋喃_2_基、吡咯啶_2_基、氮丙啶·2-基或 (嗎啉-4-基）曱基； R2係氫或胺基，前體條件係若R2係胺基，…與尺2形成稠 合至笨基之吡咯環；或若Ri係胺基，Ri與R2可形成稠合至 笨基之°比>»各或吼<1定環； r3係氫、氯或氟； R4係氫、曱基、氯或氟； R5係氫、羥基曱基或曱基；且 R6係氫、羥基曱基或曱基；或 其醫藥上可接受之鹽。 本發明提供治療哺乳動物選自由下列組成之群之癌症的 方法：非小細胞肺癌、口咽癌、食管癌、胃癌、黑素瘤、 皮膚表皮樣癌、乳癌、卵巢癌、子宮内膜癌、結腸直腸 癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、曱狀腺癌、子宮頸癌、 胰腺癌、前列腺癌、肝母細胞瘤及非霍奇金淋巴瘤（n〇n_ Hodgkin lymph〇ma)，該方法包含向需要該治療之哺乳動 物扠與有效量之式Z化合物或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦提供包含式][化合物或其醫藥上可接受之鹽與 醫藥上可接受之賦形劑、載劑或稀釋劑之醫藥組合物。 130205.doc 200908981 4!明亦提供可用作藥劑之式1化合物或其醫藥上可接 又孤。另外，本發明提供式〗化合物或其醫藥上可 之|用以製造用於治療癌症之藥劑的用途。具體而士，該 等癌症係選自由下肋成之群：料細胞肺癌、口㈣了 食官癌、胃癌、黑素瘤、皮膚表皮樣癌、乳癌、印巢癌、 子宮内膜癌、結腸直腸癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、 甲狀腺癌子呂頸癌、胰腺癌、前列腺癌、肝母細胞瘤及 非霍奇金淋巴瘤。而且’本發明提供治療選自由下列組成 ^群之癌症的醫藥組合物：非小細胞肺癌、口咽癌、食管 癌、胃癌、黑素瘤、皮膚表皮樣癌、乳癌、印巢癌、子宮 内膜癌、結腸直腸癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、曱狀 腺癌、子宮頸癌、胰腺癌、前列腺癌、肝母細胞瘤及非霍 奇金淋巴瘤，該醫藥組合物包含式I化合物或其醫藥上可 接受之鹽作為活性成份。 本發明亦提供下式化合物：

其中： R係甲基、曱氧基、羥基、胺基、氣、胺基（Ci_C2烷 基）、二曱基胺基曱基、烷基）胺基（CrCz烷基）、胺 130205.doc 200908981 基幾基甲基、2-(N-甲基胺基）乙氧基、（2-羥基-2-甲基）-卜 丙基氧基、二氟甲基、2-(胺基）乙氧基、2-(羥基）乙氧基、 4_(赵基）六氫D比啶-1-基-曱基、[N-(2-羥基）乙基-N-甲基]-胺基曱基、2-(羥基）乙基磺醯基、1-(胺基）環丙基、四氫呋 喃-2-基或（嗎啉基）甲基； (、

R係氯或胺基’前體條件係若R2係胺基，R1與R2形成稠 合至苯基之各環；或若R1係胺基，R1與R2可形成稠合至 本基之°比D各或。比咬環； R3係氫或鹵素；且 R4係氫或鹵素；或 其醫藥上可接受之鹽。 【實施方式】 在上文式中所用之通用化學術語具有其一般含義。例 如，術語’’（c!-C4烷基），，意指曱基、乙基、正丙基、異丙 基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。術語"（(：1_C3 烷基）’’包括在"（CrC4烷基）"含義内且意指曱基、乙基、正 丙基及異丙基。術語"（Cl_C2烷基）"包括在術語”（(：1_〇4烷 基）"内且意指曱基及乙基。 術語''鹵素"意指氟、氯、漠及蛾。 當在術語”胺基（(VC4烷基）"或"二曱基胺基（Ci_C2烷基），, 或"（C^-C2烷基）胺基（Cl_C2烷基）"中取代基係藉助諸如乙 基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三 丁基等烷基連接時，該取代基之連接可藉助烷基之任何 碳。使用胺基乙基[胺基（C：2烷基）]作為例示，意指以下 130205.doc •11 - 200908981 & 連結。 熟習此項技術之讀者應瞭解大多數或所有本發明化合物 皆能夠形成鹽。本發明化合物係胺，且因此可與多種無機 及有機酸中之任一種反應形成醫藥上可接受之酸加成鹽。 該等醫藥上可接受之酸加成鹽及製備其之一般方法已為業 内熟習此項技術者所熟知。參見，例如，P Stahl，等 人，HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2002)，S.M. Berge，專人，Pharmaceutical Salts" » Journal of Pharmaceutical Sciences，第 66 卷，第 1期，1977 年 1 月。 較佳者係式I化合物，其中： a) R1係胺基（CVC4烷基）； b) R1係1-(胺基）乙基； c) R2係氫； d) R3係氟； e) R4係氟； f) R5係氫或甲基； g) R5係曱基； h) R6係氫； i) R1係胺基（(VC4烷基）、二曱基胺基（Cl_C2烷基）、 (CVC2烧基）胺基（CVC2烧基）' 胺基幾基烧基）' 1-((1-胺基）乙基羰基胺基）乙基、2-氰基丙_2_基、（2_羥基） 130205.doc -12· 200908981 乙基胺基羰基甲基、（1-氟）-(2-胺基）乙基、（丨_氟）_(丨-曱 基H2-胺基）乙基、二氟曱基、二氟）乙基胺基）乙 基、（1-胺基）-(2,2,2-三氟）乙基、（1_甲基胺基）_(2,2,2_三 氟）乙基、（1-經基）_(2,2,2_三氟）乙基、1_((#_(2_經基）乙 基Hi甲基）-胺基）(Cl_C2烧基）、4_(經基）六氫〇比〇定小基_ 曱基、1-(六氫吡嗪_1_基）乙基或（嗎啉_4_基）曱基； j) R係胺基（C丨-C4烷基）、二甲基胺基（Ci_C2烷基）、 (CrC：2烷基）胺基（q-C2烷基）、（2-羥基）乙基胺基羰基甲基 或（嗎啉-4-基）曱基；且 R6係氫； k) R1係胺基（Cl_C4烷基）、二甲基胺基（Ci_C2烷基）、 ((VC2烧基）胺基（Cl_C2烧基）或（嗎琳_4_基）曱基； R3係氟； R4係氟； R5係氫或甲基；且 R6係氫； l) R係胺基（C^-c：4烷基）、二甲基胺基（Ci_C2烷基）或 (Ci-c〗烷基）胺基（Ci_C2烷基）； R3係氟； R4係氟； R5係氫或曱基；且 R6係氫； =請求項1之化合物，其中係W胺基）乙基，R3係 既，R係氟，R5係氫，且R6係氫；且 130205.doc -13- 200908981

氟，R4係氟’ R5係曱基，且R6係氫。 反應圖與製備及實例一起闡釋本發明化合物之合成。

反應圖I 反應圖I中之化合物5係藉由起始材料丨與2間或起始材料 3與4間之鈀（〇)偶合反應製備。適宜鈀觸媒係（例如）四（三 苯基膦）鈀（0)或[M，-雙（二笨基-膦基）二茂鐵]二氯鈀（π)與 DCM (1:1)之錯合物[Pd(dppf)cl2]。pd(dppf)cl2係在諸如碳 酸納或碳酸鉀等鹼存在下使用。該等反應係在諸如四氫吱 蜂（THF)、二噁烷及水等溶劑中通常在約1〇(rc至15〇(>(：：之 溫度下使用油浴或微波反應器來實施。

在四氫呋喃（THF)及硼酸三異丙酯中用二異丙基醯胺鋰 將化合物5鋰化原位形成苯并[b]嘆吩硼酸酯物質，繼之與 130205.doc -14· 200908981 2,4-二氣嘧啶（化合物6)鈀（〇)偶合反應得到化合物7。硼酸 醋通常係在低溫下形成，例如，。偶合反應後立即採 用上文對於製備化合物5所闡述之條件。 隨後經由親核取代反應製備本發明化合物，其中使化合 物7與化合物8反應。該等反應係在諸如正丁醇、二噁烷i 等溶劑中實施。該等反應係在約 120°C至150°C之溫度下使用油浴或微波反應器實施。使用 約2當量之2-(胺基-乙基）-1，2,3_三唑（化合物8)。諸如三乙 胺及一異丙基乙基胺尊胺驗用作酸清除劑。

反應圖II 或者，本發明化合物可藉由起始材料2與9間或4與1〇間 之鈴木反應（Suzuki reaction)在上述條件下製備。

因為在本發明化合物之合成中使用兩個偶合反應，所以 與反應圖I相比反應圖Π之起始材料9及1〇代表相反之偶合 順序。 熟習此項技術者應瞭解，並非所有本發明化合物令之取 130205.doc 15 200908981 代基將忍受合成該等化合物所用 叫i系些反應條件。該等基 團可在合成之方便時刻引入，或 ^ j視而要或期望經保護並 h後去保S蒦。熟習此項技術者應瞭組，γ 1 ’、解可在本發明化合物 合成之任何方便時刻引入或移除 律 抄除保5蔓基團。引入及移除氮 及氧保S蒦基團之方法已為熟習π馆杜，i 為此項技術者所熟知丨參見， 例如，Greene 及 Wuts，protert;、7i3 r Groups in Organic Synthesis，第 3 版，John Wil y and Sons，New York，

Chapter 7 (1999)。對於實例對掌性合成，⑻-第三丁基亞 磺胺可用作以下兩種：Ό作為對掌性輔助試劑經由醛縮合 形成亞確亞胺’隨後進-步與（例如）(三1甲基）三甲基石夕 烧立體選擇性反應以形成經保護之非對映異構亞謂胺及 I旦分離出非對映異構亞相胺則用作容易移除之胺基 保護基團。本發明之一些實例係自本發明之其他實例製 備。而且’熟習此項技術者應瞭解，在許多情形下，引入 該等基團之順序並不重要。產生本發明化合物所需要之步 驟的特定順序可端視所合成之特定化合物、起始化合物及 經取代基團之相對不穩定性而定。 一些本發明化合物含有不對稱中心。在該等情形下，對 映異構體以及外消旋物涵蓋於本發明+。心⑽㈣⑧ 1 〇.〇版用於產生實例名稱。 製備1 2-苯并[b]噻吩-7-基-4,4,5,5-四甲基-[1，3,2]二氧硼咪 將7肩-苯并⑻售吩（426 mg，2匪叫、雙（戍醯）二硼 (756 mg，3 mm〇1)、pd(dppf)cl2 (81 叫，〇」職命乙酸 130205.doc -16 · 200908981 π Μ” mg，3 mm〇1)合併於燒瓶中之二甲基亞颯 (DMSO)(1〇 mL)中。向混合物中通入氮氣5分鐘（_)。將 燒瓶畨封並將其放置於油浴中以在丨〇(rc下加熱4小時（h” 用氯仿/異丙醇（IPA)(3/1)稀釋該混合物。用飽和氯化鈉水 溶液洗蘇溶液。經硫酸納乾燥。在真空中將溶液濃縮成黑 色殘留物。藉由管柱層析法（己烷+存於己烷中之2〇%乙酸 乙酯）純化以得到無色固體狀標題化合物（342 mg，66%)。 MS (ES) m/z 261 [M+l]+。 製備2 苯并[b]嘆吩-7-蝴酸 將7-/臭表并[b]嗟吩（300 g’ 1.41 mmol)及蝴酸三異丙酯 (403.6 g，2.15 mmol)合併於裝備有機械攪拌器之12_L Morton燒瓶中之無水THF (4 L)中並在氮氣中於乾冰/丙酮 浴中冷卻至-70°C。以使内部溫度保持低於_67 5ι之速率 逐滴添加正丁基鋰（1.6 Μ存於己烷中，714 g ,丨68 mmol)。添加完成後’將反應混合物在該溫度下搜掉1 h。 移除冷卻浴並緩慢添加4 L水，此使得溫度升至約_5t。 然後，添加濃HC1 (75 mL)直至溶液之pH值為約ph=2。將 漿液攪拌1 h。添加足量5 N NaOH水溶液以將該混合物之 pH值調節至約pH=12並轉移至22-L底部滴落漏斗中。分離 並保留較低水性層。用4 L甲基-第三丁基醚稀釋上部有機 層並用1 L 5 N NaOH水溶液萃取。分離水性層，與先前水 性萃取物合併並放置回分液漏斗中。用額外曱基_第=丁 基醚（4 L)洗滌水性層。再次分離水性層並轉移至裝備有機 130205.doc -17- 200908981 械攪拌器之12-L 3-頸圓底燒瓶中。將溶液用冰_水浴冷卻 至+5°C。緩慢添加濃hci直至溶液之pH值為約pH=2。將該 混合物攪拌30分鐘並隨後過濾出所得固體。將固體在漏^ 上用2 L水沖洗兩次並將其空氣乾燥3〇爪化。將該固體放置 於50°C下之真空烘箱中並在真空中乾燥過夜。將乾燥固體 用2 L正庚燒製漿3〇 min以去除黃色。再次過濾出固體，空 氣乾燥30 min並隨後在4(rc下真空乾燥過夜以得到白色固 體狀標題化合物（188.8 g，75%) NMR (4〇〇 MHz， CD3OD) δ 7.86 (d, /=8 Hz, 1H), 7.49-7.57 (m, 2H), 7.30-7.39 (m，2H)。 製備3 1-(2-溴-苯基）_乙酮將 將1-(2-溴·苯基）_乙酮（4 5 g，22 6 mm〇1)、存於水中之 50%羥胺（2.3 g，69.6 mmol)及1 mL乙酸合併於壓力容器中 之15 mL 一》惡烧中。將容器密封並將混合物在油浴中於1 5 〇 C下加熱3 h。將該混合物冷卻至室溫。用氯仿/IpA (3/1)稀釋，用水及飽和氣化鈉水溶液洗滌。分離該等層並 經硫酸鈉乾燥有機層。在真空中濃縮以得到粗產物。藉由 官柱層析法（存於二氯甲烷（DCM)中之20% THF)純化以得 到標題化合物（4.0 g，83%)。MS (ES) m/z 214/216 [M+l]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 130205.doc •18- 200908981 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 4 1-(2->臭-4-鼠-苯基)-乙嗣將 232/234 製備5 1-(2 ->臭-4 -氟-苯基）-乙基胺 在N2中將蝴氫化納（3.1 g，86 mmol)及四氯化鈦（1 Μ存 於曱苯中，43 mL，43 mmol)存於40 mL無水1,2-二甲氧基 乙烷中之溶液冷卻至0°C。向上述溶液中逐滴添加1 -(2-溴-苯基）-乙酮肟（4.6 g，21.5 mmol)。將混合物在RT下攪拌過 夜。用200 mL水終止反應。用氫氧化銨鹼化該混合物。將 粗產物萃取至曱苯及乙酸乙酯中。分離該等層並經硫酸鈉 乾燥有機層。在真空中濃縮以得到粗產物（4.0 g，100%)。 MS (ES) m/z 200/202 [M+l]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 6 1 -(2->臭-4·氟-苯基)·乙基胺 218/220 7 2-(2->臭-4-氟-苯基)-乙基胺 218/220 製備8 2-(2 ->臭-4 -氯苯基）-2-氟乙猜 向含有碘化鋅（8 mg)之燒瓶中添加存於DCM (6 mL)中之 2-溴-4-氯-苯曱醛（3.5 g，16 mmol)。將混合物在RT下攪拌 30 min。用冰-水浴將該混合物冷卻至0°C。向經劇烈攪拌 之混合物中添加三曱基曱矽烷基氰化物（2.14 mL，15.99 mmol)。移除冷卻浴並在RT下攪拌18 h。添加DCM (20 130205.doc -19- 200908981

mL)並將混合物冷卻 基胺基三氟化硫（2 32 C °向先前反應混合物中添加二乙 溶液並將該混合物授:，18匪。1)存於DCM (8 mL)中之 ,τ、丄 许過夜。將該反應混合物傾倒入冰- 水（50 mL)中並分離 钱層。用水、0.5 N HC1、水、飽和 NaHC〇3及水洗〉條有檣 ,θ ^ ^ 殊滑。經硫酸鎂乾燥。移除有機溶劑 以得到粗產物。藉由故 &柱層析法（己烷/乙酸乙酯，10:1)純 化以得到標題化合物 以.4〇 g，74%)。MS (GC) 249 [M]+。 使用與上文所述頬似

之程序製備以下中間體： 化合物名稱 2-(2_演-4-氣笨基)錢丙腈

247 來自1-(2-漠-4- 氟苯基)乙酮 製備10

2-(2-邊-4-氣笨基）_2_氟乙胺之鹽酸鹽 將2 (2-K氣苯基）_2_氟乙腈（2 45 g，9 86 _〇1)溶解 於THF (50 mL)中。將混合物冷卻至〇。〇，隨後添加 BH3-THF複合物（1 n，20 mL，20 mmol)，並擾拌過夜。添 加乙醇（5 mL)並隨後用乙醇HC1溶液調節呈酸性。在移除 溶劑後，向固體中添加DCM (20 mL)。過濾並用DCM洗 務’並乾燥以得到呈HC1鹽形式之標題化合物。MS (ES) m/z 254 [M+1]、 使用與上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 11 2-(2-溴-4-氟苯基)-2-氟丙-i_胺之鹽酸鹽 250.0 130205.doc •20· 200908981 製備12 2-(2-溴-4-氟苯基）_2_曱基丙腈 在〇C下，向（2-溴-4-氟-笨基）_乙腈（3 g，14 mm〇1)存於 10 mL二曱基甲醯胺（DMF)中之經攪拌溶液中添加氫化鈉Q g，42.1 mmol)。將混合物在〇〇c iRT下攪拌半小時。添加 碘曱烷（6 g，42 mmol)。再攪拌30 min。用水終止反應。 將產物萃取至DCM中。將有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮以得 到油狀殘留物*藉由急驟管柱層析法（FCC)(己烷至存於己 烷中之20%乙酸乙酯作為梯度溶析）純化該殘留物以得到白 色固體狀標題化合物（2.2 g，65%)。4 NMR (400 MHz， CDC13) δ 7.41-7.47 (m, 2H), 7.03-7.08 (m, 1H), 1.88 (s, 6H) 〇 ’ 製備13

2-(2 -漠-4 -敗苯基）-2-曱基丙酸 將2-(2·溴-4-氟-苯基）_2_曱基-丙腈（1 g，4.13 mm〇1)及 1，4,7，1〇，13，16-六氧雜環十八烷（18_冠醚_6)(1〇〇111§,1重量 /〇)與虱氧化納（1 〇 Μ，20 mL，200 mmol)混合於乙醇（5 mL)中。將混合物加熱回流3 h。用1 n HC1終止反應。用 氣仿萃取產物。將有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮以得到油狀 殘留物。藉由FCC(存於DCM中之1〇%甲醇作為溶析液）純 化該殘留物以得到黃色固體狀標題化合物（1 g, 93%)。MS (ES) 260/262 [M+l]+。 製備14 2-(2-溴-4-氟苯基）-2-甲基丙_丨_胺 130205.doc •21 - 200908981 在0 C下’向2-(2-溴-4-氟-苯基）_2_曱基-丙腈（0.8 g， 3·30 mmol)存於1〇 mL THF中之經攪拌溶液中添加硼烷_ THF複合物（2 M存於THF中，10 mL，20 mmol)。將混合物 在〇°C至RT下攪拌一個週末。用經稀釋之氫氧化銨終止反 應。用氯仿萃取產物。將有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮以得 到標題化合物（0 8 g ’ 99%)。MS (ES) w/z 246/248 [M+l]+。 製備15 溴-4-氟苯基）-2,2,2-三氟乙醇 將2_/臭氟-苯甲路（6.1 g，30.1 mmol)及三氟甲基三曱 基矽烷（5.4 g，36.1 mmol)裝入存於100-mL圓底燒瓶中之 THF (5〇 mL)中。將溶液在乂中冷卻至（TC。添加Bu4NF (〇·3 g ’丨·20 mm〇l)。將該混合物在0°C下再攪拌1小時。向 該混合物中添加氯化氫（40 mL，1 Μ，40 mmol)。將該混 合物在RT下攪拌過夜。用氯仿稀釋該反應混合物。將有機 層用水/飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，並在真 空中濃縮以得到粗產物。藉由FCC(己烷/乙酸乙酯，4/1)純 化以得到黃色油狀標題化合物40 g，90%)。MS (ES) m/z 273/275 [M+l]+。 製備16 1-(2-溴-4-氟苯基）-2,2,2-三氟乙酮 向3,3,3 一乙酿氧基-3-蛾苯酜（52 g ’ 122.6 mmol)及18_ 冠喊-6 (0.6 g)存於dCm (400 mL)中之經攪拌懸浮溶液中 添加存於20 mL DCM中之1-(2-溴-4-氟-苯基）-2,2,2-三氟- 130205.doc -22- 200908981 乙醇（12 g，43.9 mm〇1)。將混合物在RT下攪拌4 h並傾倒 入NaHCCb/NaSzO3溶液中。將有機層用水洗滌，經硫酸鈉 乾燥’並在真空中濃縮。藉由FCC(存於己院中之鳩乙酸 乙醋作為溶析液）純化所得粗產物以得到淡黃色油狀標題 化合物（9 g ’ 76%)。iH nmR (4〇〇 MHz, CDCl3) δ 7 77 (m， 1H)，7_51 (m，1H)，7.20 (m，1H)。 製備17 1_(2 -演-4 -氣苯基）丙_ι·醇 在〇C下於氮氣中向2-溴_4_氟苯甲醛（1 g，4 93 111111〇1)存 於二乙醚（15 mL)中之溶液中添加乙基溴化鎂（1 M存於醚 中，8.37 mL，8.37 mmol)。將混合物在RT下攪拌J h。緩 慢添加水’繼之用2 M HC1將該混合物調節至酸性狀態。 用氣仿/ΙΡΑ (3/1)萃取產物。經硫酸鈉乾燥。在真空中將 溶液濃縮成黃色油狀物。藉由管柱層析法（存於己烷中之 30¾乙酸乙酯）純化以得到無色油狀標題化合物（11 §， 96%)。巾 NMR (400 MHz，CD3C1) δ 0.99 (t，*/=7.2 Hz, 3H), 1.75 (m, 2H), 4.99 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 7_53 (m，1H)。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS(ES)^/2 [M+l]+ 備註 18 2-(2-漠-4-氣-苯基)丙-2-醇 233/235 來自1-(2-漠-4_ 氟i苯基)乙_ 及甲基溴化鎂 19 1-(2_漠_4-敗苯基)-2-甲基丙-1-醇 247/249 130205.doc -23· 200908981 製備20 N-(2-(2-漠·-4 -氣苯基）丙-2-基）甲醯胺 在N2中於-20°C下向2-(2-溴-4-氟-苯基）_丙_2_醇（2.4 g， 10·3〇 mmol)及三曱基曱矽烷基氰化物（2〇4 g，59 mm〇1)存 於25-mL圓底燒瓶中之混合物中逐滴添加98〇/0硫酸g，31 mmol)。將燒瓶自冷卻浴中移出並將該混合物在RT下攪掉 過夜。將該混合物用冰-水稀釋並用氫氧化銨中和至？11值 為8。用氣仿/IPA (3/1，100 mL)萃取產物。將有機相用水/ 飽和氣化鈉水溶液洗滌’經硫酸鈉乾燥，並在真空中濃縮 以得到粗產物。藉由FCC(存於DCM中之20% THF作為溶析 液）純化以得到白色固體狀標題化合物（2 g，75%) » MS (ES) w/z 260/262 [M+l]+。 製備21 1-(1-疊氮基-2,2,2-三氟乙基）·2-溴-4-氟苯 向三苯基膦（5.76 g’ 22 mmol)存於50 mL DCM中之溶液 中逐份添加4,5-二氯-3,6-二氧環己_ι，4-二烯_1，2_二曱腈（5 g，22 mmol)。授拌2 min後，添加四正丁基疊氮化敍（625 g ’ 22 mmol)。向上述混合物中添加丨_(2_溴_4_氟苯 基）-2,2,2-三氟乙醇（4 g，14.7 mmol)存於 10 mL DCM中之 溶液。將該混合物在RT下攪拌i h並濃縮至約3〇 mL。將該 混合物裝載至二氧化矽管柱上。用己烷至存於己烷中之 20〇/〇乙酸乙醋溶析以得到褐色油狀標題化合物（〇 8呂， 18%)。MS (ES) w/z 298/300 [M+l]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 130205.doc •24· 200908981 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 22 (及)-1-(1-疊氮基乙基)_2_溴苯 226/228 23 1-(1-疊氮基-2-甲基丙基)_2·溴-4-氟苯 272/274 製備24 1-(2-溴-4-氟苯基）_2,2,2-三氟乙胺 向1-(1-疊氮基-2,2,2-三氟-乙基）_2_溴-4-氟-苯（〇.8 g， 2.68 mmol)、曱酸（1·24 g ’ 26.8 mmol)及肼（0.86 g，26.8

mmol)存於10 mL乙醇中之溶液中添加拉尼鎳（Raney Nickel)(l_58 g，26_8 mmoip將混合物在rt下攪拌1 h並 過濾出過量的鎳。將母液用水稀釋並用氣仿萃取。將有機 層經硫酸鈉乾燥並濃縮以得到褐色油狀標題化合物（〇.73 g，100%)。MS (ES) m/z 272/274 [M+l]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 25 (i?)-1 -(2-漠-苯基)乙胺 200/202 製備26 1-(2-溴-4-氟苯基）環丁烷曱酸 向 2-(2 -漠-4-氟苯基）乙腈（4 g，18.69 mmol)及 1,3-二漠 丙烧（4.15 g，20.5 mmol)存於甲苯（20 mL)中之溶液中添加 氫氧化鉀（8.39 g，150 mmol)及四丁基溴化銨（0.3 g，催化 性）。將其在100°C溫度下攪拌2 h。將混合物用水稀釋並用 乙酸乙酯萃取。用1 N HC1及飽和氣化鈉水溶液洗滌有機 層。經硫酸鎂乾燥。移除有機溶劑以得到粗產物。蒸餾以 130205.doc -25- 200908981 得到1-(2-溴-4-氟苯基）環丁烷甲腈（沸點為ll〇-12〇t/〇 3 托）（1.5 g ’ 31%)。MS (GC) w/2 253 [M]+。 向上述固體中添加6 mL HC1飽和甲醇並攪拌過夜。蒸發 溶劑以乾燥。添加NaHC03 (1 Μ，30 mL)及醚（20 mL)。攪 拌15 min。分離有機層並用醚萃取水性層。合併醚溶液並 移除溶劑。將殘留物溶解於曱醇（1〇 mL)及K〇H (1 5幻中 並攪拌一個週末。移除甲醇並添加水（3〇 mL)。用乙酸乙 酯萃取並隨後用HC1酸化水性層。將酸性溶液用乙酸乙酯 萃取，經MgSCU乾燥，並移除溶劑以得到標題化合物υ 〇 g，24%) 〇 MS (ES) w/z 271 [M-1]-。 製備27 1-(2-溴-4-氯苯基）乙胺 將1-(2-溴-4-氯笨基）乙醇（2·33 g，1〇 mmo丨）、異丙醇鈦 (6 mL，20 mm〇l)及存於乙醇中之氨（25 mL，5〇 之 混合物在A中於環境溫度下攪拌6 h。添加四氫硼化鈉（〇6 g，15 mmol)並將該混合物攪拌3 h。用氫氧化銨（2 Ν，μ mL)終止反應❶藉由過濾移除不溶物。用乙酸乙酯萃取水 性層。合併有機層並用HC1溶液（1 N，30 mL)萃取。用乙 酸乙酯洗滌水性層並隨後用Na〇H (2 N)溶液處理至pH值為 10-12。用乙酸乙酯（5〇 mLx3)萃取水性層。合併有機層並 用飽和氣化鈉水溶液洗滌。經硫酸鎂乾燥。移除有機溶劑 以得到標題化合物（1·5 g，64%)。Ms (ES)所么a% [M+l]+。 製備28 130205.doc •26· 200908981 2-(2-溴-4-氟苯基）環戊酮 在N2中將2-溴-4-氟-1-碘苯（4.5 g，15 mmol)、環戊酮 (2.65 mL，29.9 mmol)、碳酸鉋（10.72 g，32 9 mm〇1)、 4,5-雙（二苯基膦基）_9,9-二甲基咕噸（0.54§，〇9111111〇1)及 把 2(二亞苄丙酮）3 [Pd2(dba)3)](0.35 g，〇·37 mmol)存於二 噁烧（10 mL)中之混合物加熱至80°c，保持22 h。在將該混 合物冷卻至RT後，用醚稀釋，藉由矽藻土墊過濾並移除溶 劑。藉由管柱層析法（己烷：醚/20:1)純化殘留物以得到標題 化合物（0.55 g，15%)。MS (GC) w/z 25 8 [M]+ 〇 製備29 1 -(2-溴-4-氟苯基）-2,2-二氟乙酮 在-100°C下於N2中在15 min内向2-溴-4-氟-1-碘苯（4 27 g，14,2 mmol)存於THF (50 mL)中之溶液中緩慢添加… BuLi (8·86 mL，14.18 mmol)。將溶液攪拌30 min。添加二 氟乙酸乙S曰（2.81 mL，26.9 mmol)並授拌3 h。添加HC1 (50 mL ’ 2 N)溶液並將該溶液升溫至rt。分離有機層，經硫 酸鎂乾燥有機層，並移除溶劑。藉由管柱層析法（己烷：乙 酸乙醋/io:i)純化殘留物以得到標題化合物（2 3 g，64%)。 MS (GC) w/z 252 [M]+。 製備30 5-(2-溴-4-氟苯基）_3,4-二氫-211-吡咯 在-20°C下於A氣氛中用二異丙基醯胺鋰（LDA)(13 ， 31.45 mmol)處理1-乙烯基吡咯啶_2_酮（2 g，8 58瓜瓜〇1)存 於無水THF(30 mL)中之溶液並在相同溫度下攪拌3〇爪匕。 130205.doc •27- 200908981 隨後添加2-溴-4-氟苯曱酸曱酯（2 g，8· 5 8 mmol)並將其攪 拌一個週末。添加HC1 (12 N，9 mL)溶液及水（12 mL)。移 除THF並添加HC1 (12 N，12 mL)及水（15 mL)。將其加熱 至100 °C，保持15 h。將該混合物冷卻至RT並添加5% NaOH溶液。將該溶液用醚萃取，經硫酸鎂乾燥，並移除 溶劑。藉由管柱層析法（己烷至乙酸乙酯）純化殘留物以得 到標題化合物（0.42 g，27%)。MS (ES) m/z 244 [M+l]+。 製備31 2-(2-溴-4-氟苯基）吡咯啶 在-40°C下，向5-(2-溴-4-氟苯基）-3,4-二氫-2H-吡咯（420 mg，1.73 mmol)存於甲醇-乙酸（飽和；1() mL)混合物中之 溶液中添加四氫硼化鈉（146 mg，3.7 mml)。在升溫至rt 後，添加水（10 mL)並用NaOH溶液（2 N)使溶液呈驗性。用 DCM萃取溶液，用飽和氣化鈉水溶液洗滌有機溶液，經碳 酸鉀乾燥並移除有機溶劑以得到標題化合物（3〇〇 ， 71%)。MS (ES) m/z 23 6 [M+l]+。 製備32 1-(2-溴-4-氟苯基）環丁基胺基甲酸第三丁酯 在RT下，向1-(2-溴_4_氤笼篡、搔丁於m必/… ___

分離有機層並經硫酸鎂乾燥。 min並在90 C下攪拌過夜。用醚稀釋混 氫鈉及飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層。 酸鎂乾燥。過濾並在真空中濃縮以得到 130205.doc •28- 200908981 殘留物。藉由管柱層析法（己烷：醚/20:1)純化殘留物以得到 標題化合物（1.26 g，48%)。MS (ES) w/z 368 [M+23]+。 製備33 2-(2-溴-4-氟-苯基）-乙醯胺 將（2->臭-4-氟-苯基）_乙醯氣（3.5 g，14 mmol)、氫氧化錄 (8.8 Μ 存於水中 ’ 50 mL，0.45 mmol)及 THF (10 mL)合併 於壓力容器中。密封該容器並將混合物在RT下攪拌過夜。 用氣仿-IPA (3 :1，1 〇〇 mL)稀釋該混合物。用飽和氯化納水 溶液及水洗滌有機相。經硫酸鈉乾燥該混合物。在真空中 濃縮以得到白色固體狀標題化合物〇 g，93%)。Ms (Es) tw/z 232/234 [M+l]+。 製備34 1-(2-溴-4-氟苯基）丙-1·胺 將三苯基膦（2.48 g，9.44 mmol)及碘（2.40 g , 9.44 mmol)之溶液在RT下攪拌10 min。添加1H-咪唑（0.97 g， 14_2 mmol)並在rt下攪拌1〇 min。添加丨气^溴‘氟苯基） 丙-1-醇（1.1 g，4.72 mmol)並在RT下攪拌2 h。添加疊氮化 鈉（0.62 g，9.44 mm〇1)存於DMF (5 mL)中之懸浮液並攪拌 過仪。用DCM稀釋，並用水及飽和氣化鈉水溶液洗滌。經 硫酸鈉乾燥。在真空中將溶液濃縮成黃色油狀物。 向上述黃色油狀物（0_9 g，3.49 mm〇i)存於乙醇（5 mL)中 之溶液中添加肼（0.57 mL，174 mm〇1)與曱酸（〇69 mL， 17·4 mmol)之混合物。在〇〇c下緩慢添加拉尼鎳（i 〇2 g， 17_4 mmol)。將混合物在RT下攪拌5 h。過濾以移除過量 130205.doc -29· 200908981 鎳。將液體用水稀釋並用氣仿萃取。經硫酸鈉乾燥有機 層。在真空中將溶液濃縮成淺黃色油狀物。藉由管柱層析 法（DCM至存於DCM中之10%曱醇）純化以得到無色油狀標 題化合物（0.7 g，87%)。MS (ES) w/z 233 [M+l]+。 製備35 (2_〉臭-4 -氣-本基）(2-經基乙基）-乙酿胺 向（2-溴-4-氟-苯基）-乙酸（〇.3 g，1.26 mmol)存於 DCM (3 mL)中之溶液中添加亞硫醯氣（1.5 g，12.6 mmol)。將混合 物回流2 h。在減壓下移除溶劑及過量的亞硫醯氯以得到 中間體（2-溴-4-氟苯基）-乙醯氣。將殘留物溶解於dcm (3 mL)中並在0°C下添加至乙醇胺（〇·15 mL，2.52 mmol)存於 DCM (3 mL)中之經攪拌溶液中。將混合物攪拌過夜。用 DCM稀釋並用飽和NaHC03、水及飽和氯化鈉水溶液洗 務。經硫酸鈉乾燥。在真空中濃縮溶液以得到白色固體狀 標題化合物（3 00 mg，86%)。MS (ES) m/z 276 [M+l]+。 製備36 2-胺基-1-(2-溴-4-氟苯基）乙醇 向2-溴-4-氟苯甲醛（15 g，7 39 mm〇1)存於DCM (1〇爪[) 中之溶液中添加三甲基甲矽烷基氰化物（1.01 mL，7.39 mmol)及碘化鋅（0.u g，〇37 mm〇1)。將混合物在rt下攪 拌過夜。移除溶劑。將殘留物溶解於THF (5 mL)中並在〇 °c下冷卻。添加硼烷-THF複合物（11」mL，n丨mm〇i)。 將該混合物在RT下攪拌3 h。緩慢添加丨Μ Ηα並攪拌i5 min。用飽和碳酸鈉將{)^1值調節至鹼性。用dcm萃取。將 130205.doc •30- 200908981 其經硫酸鈉乾燥並濃縮以得到無色油狀標題化合物（15 g ’ 86%)。MS (ES) m/z 235 [M+l]+。 製備37 1-(2-溴-4-氟苯基）環丙胺 在-70 C下於N2中向2-溴-4-氟苄腈（15 g，73.5 mmol)及 四異丙氧基鈦（23 mL，162 mmol)存於醚（25 mL)中之溶液 中添加乙基溴化鎂（3 N，53.9 mL , 74.9 mmol)。在於該溫 度下攪拌10 min後，使其升溫至rt並攪拌1小時。向該溶 液中緩慢添加三氟化硼醚合物（BF3〇Et2)(16.8 mL，147 mmol)並再攪拌1小時。在添加1 n HC1 (200 mL)及醚（150 mL)後，分離醚層。向水溶液中添加1〇% Na〇H (150 mL) 並用醚將其萃取。分離有機層並經硫酸鎂乾燥。過濾並在 真空中浪縮以得到殘留物。藉由管柱層析法（二乙謎）純化 該殘留物以得到標題化合物（7.5 g，44叫。MS (ES) m/z 230 [M+l]+ 〇 製備38 1-(2-溴-4-氟苯基）環丙基胺基甲酸第三丁酯 向1-(2_溴_4·氟苯基）環丙基胺（3 5 g，15.2 mmol)存於第 二丁醇（18 mL)及水（26 mL)中之溶液中添加NaOH (0.78 g，19.5 mmol)及二碳酸二第三丁酯[(boc)2〇](4 2 g，19」 mmo1)。在於RT下攪拌1小時後，用醚萃取反應混合物。 分離有機層並將其經硫酸鎂乾燥。過濾並在真空中濃縮。 藉由管柱層析法（己烷/二乙醚）純化殘留物以得到標題化合 物（4.45 g，89%)。NMR (400 MHz-CDC13) δ 7.61 (bs, 130205.doc -31 - 200908981 1H), 7.25 (dd, J=7.6, 4 Hz, 1H), 6.95 (t d, /=8.4, 2.4 Hz, 1H)，5.547 (s, 1H)，1.372 〇, 9H), 1.1 (m, 2H)，0.881 (m, 2H)。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS(ES)m/z [M+l]+ 39 40 1-(2-漠-4-氯苯基)乙基胺基曱酸第三丁酯 346 2·(2-漠-4-氟苯基)〇比嘻咬+曱酸第三丁酯 344 41 2·(2· >臭-4-氟苯基)_2·氟丙基胺基曱酸第三丁酯 351 製備42 [1-(2-溴-苯基）_乙基]_胺基曱酸第三丁基酯 向1 (2臭-4 -氟-苯基）_乙基胺（4 g，2〇 mmol)及二碳酸二 第二丁醋（6·5 g ’ 30 mmol)存於20 mL DCM中之溶液中添 加二異丙基乙基胺（1.5 g，12 mm〇i)。將混合物在rT下攪 拌過夜。將該混合物用氣仿/IpA (3/1)稀釋，用飽和氯化 納水溶液及水洗滌，將其經硫酸鈉乾燥並在真空中濃縮。 藉由官柱層析法（存於DCM中之1 〇%曱醇）純化粗產物以得 到標題化合物（2.〇 g，33%)。MS (ES) m/z 244/246 [M-第 三丁基]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [Μ-第三丁基]+ 43 [1 -(2_漠氟苯基)乙基]-胺基甲酸第三丁基酯 244/246 44 [2_(2·演苯基)-乙基]-胺基甲酸第三丁基酯 262/264 45 [2-(2-溪-苯基)-乙基]-胺基曱酸第三丁基酯 244/246 130205.doc -32- 200908981 46 2-(2->臭-4-氣苯基)丙-2-基第二丁基碳酸酉旨 346/348 47 (i〇-第三丁基1-(2-溴苯基)乙基胺基甲酸酯 300/302 48 1-(2-溴-4-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基胺基甲酸第三 丁酯 372/374 49 2-(2->臭-4-氣苯基)-2-經基乙基胺基曱酸第二丁 酯 357/ 359 [M+Na]+ 50 1 -(2-溴-4-氟苯基)丙基胺基曱酸第三丁酯 332/334 製備51 (i?)-1-(2-溴-4-氟苯基）乙基胺基甲酸第三丁酯 藉由對掌性層析法（Chiralcel® OD-H管柱：40%曱醇， 0.2%異丙基胺，於C〇2中；流速為5 mL/min ;在225 nm檢 測）分離（及）_ 1-(2 ->臭-4 -氣苯基）乙基胺基曱酸第二丁 S旨以得 到標題化合物。MS (ES) w/z 478 [M+l]+。藉由振動圓二 色譜（VCD)測定對掌性。 製備52 1-(2-溴-4-氟苯基）乙基（曱基）胺基甲酸第三丁酯 向1-(2-溴_4·氟苯基）乙基胺基曱酸第三丁酯（4.75 g， 14.9 mmol)存於DMF (10 mL)中之溶液中添加氫化鈉（0.89 g，22.4 mmol，60%擴散於礦物油中）。將混合物在RT下攪 拌30 min。添加破甲烧（1.86 mL，29.9 mmol)。將該混合 物在RT下攪拌1 h。用乙酸乙酯稀釋，並用水及飽和氯化 納水溶液洗滌。經硫酸鈉乾燥並濃縮。藉由管柱層析法 (己烷至存於己烷中之20%乙酸乙酯）純化以得到無色油狀 標題化合物（4.9 g，98%)。4 NMR (400 MHz，CD3C1) δ 1.32 (s, 9H), 1.45 (t, /=8.0 Hz, 3H), 2.58 (s, 3H), 5.39 (br, 130205.doc -33 - 200908981 1H)，7.00 (m，1H)，7.28 (m，2H)。 使用與上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 _____ 化合物名稱 MS(ES)m/z [Μ-第三丁基]+ 53 1-(2-溪_4-乱苯基)環丙基(曱基)胺基甲酸第：丁酯 288/290 製備54 2-(2-溴-4-氟苯基）氮丙啶甲酸第三丁酯 向2-(2-溴-4-氣苯基）_2_經基乙基胺基曱酸第三丁醋（ι 19 g，3.56 mmol)及對曱苯磺醯氣（〇 75 g，3 88 mm〇1)存於無 水THF(50 mL)中之溶液中添加氫氧化鉀〇 15 g，17 5 mmol，新鮮粉末）。將混合物在RT下攪拌過夜。用DCM稀 釋，並用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌。經硫酸鈉乾燥並濃 縮。藉由管柱層析法（己烷至存於己烷中之5%乙酸乙酯）純 化以付到無色油狀標題化合物（0.46 g , 41%)。iji NMR (400 MHz, CD3C1) δ 1.47 (s, 9H), 2.08 (d, J=3.2 Hz, 1H), 2.67 (d, J=5.6 Hz, 1H), 3.59 (dd, J=3.6 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.00 (m，1H)，7.28 (m，1H)，7.35 (m，1H)。 製備55 1-(2-溴-4-氟-苯基）-3-[i，3]二噁烷_2_基-丙_丨_醇 在〇°C下於N2中向2-溴-4·氟-苯曱醛（3 g，15 mmol)存於 THF (20 mL)中之溶液中添加（i，3_二噁烷_2_基乙基）溴化鎂 (0.5 Μ存於THF中，40 mL，20 mmol)。將混合物在rt下 連績攪拌48h。用IN HC1驟冷該反應混合物，繼之用經稀 釋之氫氧化敍驗化至pH值約為9。用氯仿/IPA (3/1)萃取產 130205.doc -34- 200908981 物。經硫酸鈉乾燥有機層。在真空中濃縮該溶液。藉由管 柱層析法（存於DCM中之1〇〇/0甲醇）純化以得到黃色油狀標 題化合物（24.5 g，95%)。MS (ES) m/z 319/321 [M+l]+ 〇 製備56 1-(2-溴-4-氟-苯基）_ 丁烧-i，4_二醇 將1-(2-溴-4-氟-苯基）-3-[1，3]二噁烷-2-基-丙-1-醇（4.0 g，12.5 mmol)與乙酸（20 mL·，280 mmol)之混合物在 1〇〇。匚 下加熱30 min。用碳酸鈉（2 N)稀釋反應混合物。將產物萃 取至氣仿中。經硫酸鈉乾燥有機相。在真空中將溶液濃縮 以得到中間體醛。向上述中間體存於曱醇（5〇 mL)中之溶 液中添加删虱化納（1.42 g，37.6 mmol)。將混合物在rt下 攪拌1 h。用經稀釋之HC1終止反應。將產物萃取至氯仿 中。經礙酸鈉乾燥有機相。將溶液在真空中濃縮以得到黃 色油狀標題化合物（2.5 g，76%)。MS (ES) 288 [M+Na]+。 製備57 2-(2-;臭-4-氟-苯基）_四氫β夫口南 將 1-(2-溴-4-氟-苯基）_ 丁烷 4·二醇 〇 g，3 8 mm〇1) ' 六氟錄酸銀（1)(131 mg，0.4 mmol)、氯化鉑（II)(40吨， 〇.2mm〇l)合併於壓力管中之氣乙烷（1〇mL)*。將該 έ狁封並將混合物在11 〇°c下加熱過夜。用氯仿_ιρA (3:丄， 100 mL)稀釋該混合物。用飽和氣化鈉水溶液及水洗滌有 機相。經硫酸鈉乾燥該混合物。在真空中濃縮該溶液。藉 由管柱層析法（存於己烷中之20%乙酸乙酯）純化以得到淡 130205.doc -35- 200908981 κ色油狀標題化合物（0.72 g，77%)。 製備58 2-[2-(2-溴_苯氧基）-乙氧基]_四氫0比喃 向氫化鈉（60%擴散於礦物油中，2.77 g，69 36 mm〇〗）存 於DMF (6 mL)中之懸浮液中添加2_溴_苯酚（1〇 g，57 8〇 mmol)。將混合物攪拌i he添加2_(2_溴_乙氧基四氫吡喃 (13·54 g ’ 64.74 mmol)。將該溶液在RT下攪拌過夜。用乙 k乙S曰及水稀釋該混合物。用飽和氣化鈉水溶液及水洗滌 有機層。經硫酸鈉乾燥該混合物。在真空^濃縮該溶液。 藉由管柱層析法（存於己烷中之10%乙酸乙酯）純化以得到 淺黃色油狀標題化合物（13.9 g，80%)。MS (ES) m/2 323 [M+Na]+。 製備59 [2-(2-溴-苯基）-乙基]_胺基甲酸第三丁基酯 向2-'/臭苯乙基胺（1.65 g，8.25 mmol)、三乙胺（3.45 mL·，24.7 mmol)及 4-二甲基胺基吡啶（DMAP)(100 mg)存於 DCM (16.5 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯（2.7 g， 12·4 mmol)並在RT下攪拌過夜。用DCM稀釋，用飽和 NaHCCh繼之飽和NhCl洗滌，將有機物用Na2S04乾燥，過 濾，濃縮，並藉由藉助二氧化矽墊過濾及用1:1乙酸乙酯： 己烷溶析來純化以得到標題化合物。MS (ES) m/2 244 [M-第三丁基]·。 製備60 {2-[2-(4,4,5,5_四曱基-[1，3,2]二氧硼咮-2-基）-苯基]-乙基卜 130205.doc •36· 200908981 胺基曱酸第三丁基酯 向[2-(2-溴-苯基）-乙基]_胺基曱酸第三丁基酯（〇 85 g， 2.83 mmol)、雙（戊醯）二硼（810 mg，3 n mm〇1)& 乙酸鉀 (830 mg，8.49 mmol)存於l，4-二噁烷⑴_3 mL)中之懸浮液 中添加 Pd(dppf)Cl2 (71 mg，84.9 μιηοΐ)並在 100°C 下加熱5 h。冷卻至RT並濃縮。將殘留物溶解於dcm中並藉助二氧 化矽墊（1 cm墊，於30-mL燒結玻璃漏斗中）過濾，用2〇 mL DCM洗滌。濃縮以得到標題化合物。MS (ES) 248 [M_ Boc]+。 製備61 1-(2->臭-4-氟-苯氧基）丙_2_酮 在冰浴中於氮氣中將2-溴-4-氟-苯酚（1 g，4.89 mmol)及 K2C03 (1.8 g ’ 13.2 mmol)存於DMF (10 mL)中之懸浮液冷 卻至0 C。在30 min時間段期間添加氣丙酮（678 mg，7 33 mmol)。並將混合物在RT下攪拌過夜。添加水並用乙酸乙 酯萃取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌溶液。經硫酸鈉乾燥。 在真空中濃縮該溶液。藉由管柱層析法（己烷至存於己烷 中之10%乙酸乙酯）純化以得到黃色油狀標題化合物（〇 75 g ’ 59%)。4 NMR (400 MHz-CDC13) δ 2.35 (s，3H)，4.51 (s, 2H), 6.73 (dd, J=4.8, 8.8 Hz, 1H), 6.97 (m5 1H), 7.32 (m, 1H) 〇 製備62 1-(2-溴-4-氟-苯氧基）_2_甲基_丙_2_醇 在冰浴中於氮氣中將1-(2-漠_4_氟-苯氧基）_丙_2_酮（52〇 130205.doc •37- 200908981 mg，2.10 mm〇l)存於THF (4 mL)中之溶液冷卻至〇它。逐 滴添加甲基氣化鎂（3·〇 Μ存於THF中，0.84 mL，2 53 mmol)。將混合物在(TC下再攪拌半小時。添加水並用乙酸 乙醋萃取。用飽和氣化鈉水溶液洗滌溶液。經硫酸納乾 燥。在真空中濃縮該溶液。藉由管柱層析法（己烧至存於 己烧中之30。/。乙酸乙酯）純化以得到黃色油狀標題化合物 (230 mg ’ 42%)。MS (ES) w/z 285 [M+Na]+。 製備63 2-溴-1-溴甲基-4-氟-苯 將2->臭-4-敗-1-甲基-苯（15 g’ 79.3 mmol)、iV-漠破珀醯 亞胺（18.08 g，101.6 mmol)及 2,2-偶氮雙異丁腈（3.9 g， 23.8 mmol)合併於裝備有回流冷凝器之圓底燒瓶中之四氯 化碳（150 mL)中。將混合物回流加熱21 h。冷卻該混合物 並在減壓下移除溶劑。將粗混合物懸浮於DCM中並用水洗 滌。將有機物用飽和氣化鈉水溶液洗滌並經硫酸鈉乾燥。 過濾並在減壓下移除溶劑以獲得粗產物。藉由管柱層析法 (存於己烷中之1%乙酸乙酯-> 存於己烷中之1 〇〇/〇乙酸乙酯） 純化以得到油性白色固體狀標題化合物（1 8.5 g，87%)。 GCMS w/z 268 [M]+。 製備64 4 - (2 - >臭-4 -氟-节基）-嗎琳 將2-漠-1 -漠曱基-4-氟-苯（4 g，14.9 mmol)、嗎琳（2.6 mL，29.8 mmol)及二異丙基乙基胺（5.2 mL，29.8 mmol)合 併於乙腈（1〇·〇 mL)中。將反應混合物在81°C下加熱2 h並 130205.doc • 38- 200908981 冷卻至RT。在減壓下移除溶劑。用DCM稀釋並用水及隨 後飽和氯化納水溶液洗條。經硫酸納乾燥有機物。過遽並 在減壓下移除溶劑以獲得標題化合物（3.9 g，95%)。LCMS (ES) w/z 274 [M+l]+。 製備65 (2-溴-4-氟苄基）-二曱基-胺 將2-溴-4-氟苯曱醛（5 g，24.63 mmol)、二甲基胺（2 M， 49_26 mL，98.52 mmol)及乙酸（8.47 mL，147.78 mmol)合 併於DCM (50 mL)中，並攪拌30 min。向該混合物中添加 三乙醯氧基硼氫化鈉（49.26 mmol, 10.44 g)並在RT下攪拌 過夜。用飽和NaHC03溶液（1 〇〇 mL)洗務，用飽和氯化納 水溶液乾燥，並隨後經硫酸鈉乾燥。過濾有機物並在減壓 下移除溶劑以得到褐色油狀標題化合物（4.56 g)。GCMS w/z 232 [M]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 LCMS (ES) m/z [M+l]+ 備註 66 2-[(2-溴-4-氟-苄基)-曱基-胺基]-乙醇 1H NMR (400 MHz-CD3OD3) δ 2.24 (s, 3H), 2.59 (t, /=6.0 Hz, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.66 (t, J=6.0 Hz, 2H), 4.85 (s, 1H), 7.07 (m, 1H), 7.32 (dd, /=2.0, 8.4 Ηζ,ΙΗ), 7.52 (dd, J=2.0, 8.4Hz,lH) ° 67 1-0溴-4-氟-苄基)-六氫°比。定-4-醇 288 130205.doc -39- 200908981 製備68 #-(1-(2-溴-4-氟苯基）乙基）-2,2-二氟乙醯胺 在0 C下’向丨_(2_溴-4_氟苯基）乙胺（1 18 g，5.4 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基）_3_乙基碳化二亞胺鹽酸鹽 G·55 g ’ 8·1 mm〇i)、卜羥基苯并三唑水合物（1 24 g，8」 mino1)及二乙胺（2.26 mL，16.2 mmol)存於DCM (20 mL)中 之混合物中添加二氟乙酸（777 mg，8.1 mm〇l)。將混合物 在RT下擾拌過夜。將該混合物用dcm稀釋，用水及飽和 氯化鈉水溶液洗滌。分離有機層並經硫酸鈉乾燥。過濾並 在真空中濃縮。藉由管柱層析法[存於己烷中之5%至5〇0/〇 乙酸乙醋]純化殘留物以得到標題化合物（丨.〇6 g，44%)。 MS (ES)讲/z 296 [M+l]+。 製備69 #-(1-(2-溴-4-氟苯基）乙基）_2,2_二氟乙胺 向#-(1-(2-溴-4-氟笨基）乙基）_2,2-二氟乙醯胺（1.06 g， 3·56 mmol)存於THF (3 mL)中之溶液中添加硼烷_ΤΗρ複合 物（10,69 mL，10.7 mmol)。將混合物回流17 h。用鹽酸（5 N，8 mL)驟冷。將溶液攪拌i h。添加飽和NaHC〇3。將該 混合物用DCM稀釋，用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌。分離 有機層並經硫酸鈉乾燥。過濾並在真空中濃縮以得到標題 化合物（0.94 g，93%)。MS (ES)讲/2 282 [M+1]+。 製備70 2-苯并[b]噻吩-7-基-4-氟-苯酚 將7-漢-苯并⑻噻吩（6 53 g，3〇 64 _〇1) ' 5_敗_2_羥基 130205.doc •40- 200908981 苯基 _ 酸（4.87 g，31.26 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (1.25 g，1.53 mmol)、2-(二-第三丁基膦基）聯苯（0.28 g，0.92 mmol)、 碳酸鈉（2 Μ, 30.64 mL，61.92 mmol)合併於燒瓶中之二°惡 烷（60 mL，或者THF)中。將混合物在100°C下加熱2 h。用 氣仿/IPA (3/1)稀釋該混合物。用飽和氯化鈉水溶液洗滌 溶液。經硫酸鈉乾燥。在真空中濃縮該溶液。藉由管柱層 析法（己烷至存於己烷中之10%乙酸乙酯）純化殘留物以得 到黃色固體狀標題化合物（6.0 g，80%)。MS (ES) w/z 243 [M-l]+。 使用與彼等上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS(ES) m/z [M+l]+ 備註 71 2-苯弁[b]σ塞吩-7-基-苯紛 227 72 2-(2-苯弁[b]a塞吩-7-基-4-氟-苯基)-四氫呋喃 兩個滯轉異 構體 ]H NMR (CD2C12) δ 7.82 (1Η), 7.67 (1H), 7.74 (3H),7.19(2H), 7.07 (1H), 4.79 (0.5 H), 4.55 (0.5 H), 4.05 (1H),3.71 (1H), 1.95 (1H)，1.66(1H)。 73 [2-(2-苯并[b]噻吩-7-基-4- 氣-苯基)-乙基]-胺基曱酸 第三丁基酯 394 觀測[M+Na]+ 74 [1-(2-苯并[b]°塞吩-7-基-苯 基)-乙基]-胺基甲酸第三丁 基酉旨 376 觀測[M+Na]+ 75 4-(2-苯并[b]噻吩-7-基-4- 氟Γ节基)-嗎琳 328 130205.doc -41 - 200908981 76 (2-苯并[b]噻吩-7-基-4-氟_ 苄基)-二甲基-胺 286 2-(二-第三丁基膦基） 聯苯與 Pd(dppf)Cl2— 起使用 77 2-[2-(2-笨并[b]«塞吩 _7_基_ 4_敗•本氧基)-乙氧基]_四 氫°比喃 395 觀測[M+Na]+ 78 2;[2-(2-苯并[b]噻吩基-本氧基)_乙氧基]-四鼠°比喃 377 觀測[M+Na]+ 79 7-(5-氟-2-甲基-苯基)-苯并 [b]嚷吩 242 GCMS用以分析[M]+ 80 7-(2-氯-5-氟-苯基)-苯并[b] 噻吩 262 GCMS用以分析[M]+ 81 (7?)小(2-(苯并[b]噻吩-7-基)_4_氟苯基)乙基胺基甲 酸第三丁酯 372 製備82 [2-(2-苯并[b]噻吩-7-基-苯氧基）_乙基]-胺基甲酸第三丁基酯 向2-苯并[b]嘆吩-7-基-苯酚（1 g ’ 4.4 mmo1)存於10 mL DMF中之溶液中添加氫化鈉（424 mg，I8 mm〇l)。將混合 物在RT下攪拌1 hi添加（2-溴-乙基）-胺基甲酸第三丁基酯 (2 g，8.9 mmol)。將反應混合物再在RT下連續攪拌4 h。 用氯仿-IPA (3 :1，1 〇〇 mL)稀釋該混合物。用飽和氯化納水 溶液及水洗滌有機相。經硫酸鈉乾燥該混合物。在真空中 濃縮該溶液。藉由管柱層析法（存於己烷中之20%乙酸乙 酯）純化殘留物以得到淡黃色固體狀標題化合物（1.4 g， 86%)。MS (ES) 392 [M+Na]+ 0 藉助與上文所述類似之程序製備以下中間體： 130205.doc • 42· 200908981 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+Na]+ 83 [2-(2-苯并[b]°塞吩-7-基-4-氣-苯氧基)-乙基]-胺基 曱酸第三丁基酯 410 製備84 [2-(2-苯并[b]噻吩-7-基-4-氟-苯氧基）-乙基]-曱基-胺基曱 酸第三丁基酯 向2-苯并[b]噻吩-7-基-4-氟-苯酚（1 g，2.6 mmol)存於15 f mL DMF中之溶液中添加氫化納（620 mg，26 mmol)。將現 合物在RT下授拌1 h並添加破曱烧（3.7 g，26 mmol)。將反 應混合物再在RT下連續攪拌4 h。用氯仿-IPA (3:1, 1()() mL)稀釋該混合物。用飽和氣化納水溶液及水洗猶;有機 相。經硫酸鈉乾燥該混合物。在真空中將溶液濃縮成黃色 油狀物。藉由管柱層析法（存於己烧中之20%乙酸乙§旨純 化殘留物以得到淡黃色固體狀標題化合物（0.85 g，。 MS (ES) m/z 424 [M+Na]+。 藉助與上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+Na]+ …一^^_ 備註 85 [[2-(2-苯并[b]噻吩-7-基-4-氟-苯基)-乙 基]-曱基-胺基曱酸第三丁基酯 408 "^^--- 86 [2-(2-苯并[b]噻吩-7-基-苯基)-乙基]-曱 基-胺基甲酸第三丁基酯 312 觀測[M-第二 丁基]+ 一 87 1-(2_溴_4_氣苯基)-2,2,2-三氟乙基(曱 基)胺基曱酸第三丁酯 386/388 ---_ 130205.doc -43- 200908981 88 1 -(2-溴-4-氟苯基)乙基(甲基)胺基曱酸 第三丁酯 332/334 —· 製備89 2-氣-5-氣- 4-(7-{2-[2-(四氫-D比°南-2-基氧基）-乙氧基]-笨 基}•苯并[b]D塞吩-2-基）-嘴咬 在500-mL圓底燒瓶中，於A中，將2-[2-(2-苯并[b]^ 吩-7-基-苯氧基）-乙氧基]-四氫η比喃（5〇〇 mg，1.41 mm〇i)及 硼酸三異丙酯（530 mg ’ 2.82 mmol)存於THF (30 mL)中之

溶液冷卻至-70°C。在30 min時間段内向該溶液中逐漸添加 二異丙基醯胺链（2 Μ存於THF中，1.41 mL，2.82 mm〇i)。 在冷卻浴中將該混合物再連續攪拌1 h。在30 min時間段内 將該混合物逐漸轉移至2,4-二氯-5-氟嘧啶（353 mg，2.12 mmol)、Pd(dPPf)Cl2 (57.6 g，of 咖吣及碳酸納（2 畴 於水中，1.8 mL，3·6 mmol)存於THF (2〇 mL)中之回流溶 液中。再回流1 h。將混合物冷卻至尺下並用氯仿/ΙρΑ (3/ι) 及水稀釋。用飽和氣化鈉水溶液m有機層。經硫酸納乾

燥。在真^中濃縮。藉由FCC(存於己烧中之观乙酸乙 醋）純化殘留物以得到標題化合物⑽mg，80%pMS (ES) m/z 507 [M+Na]+ ο 基本上使用2·氯-5_氟_4_(7_{2_[2_(四氯-吼喃_2_基氧基）_ 乙氧基]苯基}苯并[咐吩_2•基）^所用之彼等程序使 用合適起始材料製備以下中間體： 130205.doc -44 - 200908981 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 備註 90 2-氯-5-氟-4-(7-{5-氟-2-[2-(四 氮比喃-2-基氧基)-乙氧基]-苯 基}-苯弁[b]σ塞吩-2-基)-嘴。定 525 觀測[M+Na]+ 91 2-氯-4-[7-(5-氟-2-曱基-苯基)-苯并[b]噻吩-2-基]- σ密σ定 355 92 2-氯-4-[7-(2-氯-5-氟-苯基)-苯并[b]噻吩-2-基]- °密。定 375 93 4-{2-[2-(2-氯-5-氟-11 密 °定-4-基)-苯并[b]噻吩-7-基]-4-氣-苄基}-嗎淋 458 2-(二-第三丁基膦 基)-聯苯與Pd (dppf)Cl2—起使用 94 {2-[2-(2-氣-5-氣-°密。定-4-基)-本 并[b]噻吩-7_基]-4-氟-苄基}-二 甲基-胺 416 如製備94相同 95 2-氯-5-氟-4-{7-[5-氟-2-(四氳呋 喃-2-基)-苯基]-苯弁[b]11 塞吩-2- 基}-嘧啶 429 96 ((2-{2-[2-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-苯并[b]噻吩-7-基]-苯氧 基}-乙基)-胺基曱酸第三丁基 酯 522 觀測[M+Na]+ 97 (2-{2-[2-(2-氣-5-氣密 π定-4-基)_ 苯并[b]噻吩-7-基]_4_氟-苯氧 基}-乙基)-胺基曱酸第三丁基 酯 540 觀測[M+Na]+ 98 (。-{^-[^-(之-氯^-氣-^密咬-彳-基)-苯并[b]p塞吩-7·基]_4·氣-苯基卜 乙基)-曱基-胺基甲酸第三丁基 酯 538 觀測[M+Na]+ 130205.doc -45- 200908981 99 (2-{2-[2-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-苯弁问嗟吩-7-基]•苯基}-乙 基)-曱基-胺基曱酸第三丁基酯 520 觀測[M+Na]+ 100 4-(7->臭-苯并[b]°塞吩-2-基)-2-氯-5-氟-嘴咬 476 101 4-(7->臭苯弁[13]0塞吩-2-基)-2,5· 二氯嘧啶 359 102 4-(7->臭苯弁[13]°塞吩-2-基)-2-氯_ 5-曱基。密。定 339 103 4-(7-溴苯并[b]噻吩-2-基)-2-氣 嘴π定 325 104 〇R)-1 -(2-(2-(2-氯-5 -氟响啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯 基)乙基胺基曱酸第三丁酯 502 製備105 2-(2-(5-(羥基曱基）-1H-1，2,3-三唑-1-基）乙基）異吲哚 啉-1,3-二酮 將2-(2-疊氮基乙基）異吲哚啉-1，3-二酮（12 g，55.5 mmol)及 2-丙炔-1-醇（3.88 mL，66.6 mmol)存於甲苯（50 1/ mL)中之混合物在90°c下於密封反應器中加熱3天。冷卻至 RT並收集固體。藉由管柱層析法（DCM至存於DCM中之2% 曱醇）純化以得到白色固體狀標題化合物（第一流份）(4.7 g，31%)。MS (ES)273 [M+l]+。 自上述層析法之第二流份分離以下區域異構體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 106 2-(2-(4-(羥基甲基)-1 Η-1,2,3-三唑-1 -基)乙基)異 °引°朵琳-1，3-二酮 273 130205.doc -46- 200908981 製備107 2-(2_(4-(碘曱基）-1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基）異吲哚啉-u- 二酮 將二苯基膦（0.29 g，1.1〇 mm〇i)及碘（〇 28 g，11〇 mmol)存於DCM (4 mL)中之混合物攪拌1〇 添加m_ 咪唑（0.12 g，1.84 mmol)並攪拌 10 min。添加 2·(2_(4_(羥基 甲基）-1Η-1，2,3-二。坐_1_基）乙基）異吲哚琳二酮（〇 2 g， 0.73 mm〇l)並在RT下攪拌過夜。用DCM稀釋並用水及飽和 氣化鈉水溶液洗滌。經硫酸鈉乾燥。在真空中濃縮該溶 液。藉由管柱層析法（DCM至存於DCM中之20〇/〇乙酸乙酯） 純化以得到黃色固體狀標題化合物（〇 22 g，78%)。MS (ES) m/z 383 [M+l]+。 使用與上文所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 108 2-(2-(5-(蛾甲基)-1Η-1，2,3-三。坐-1-基)乙基)異。弓卜朵 淋-1,3-二酮 383 製備109 2-(2-(4·甲基-1H-1，2,3-三唑-1-基）乙基）異吲哚啉“，、二酮 將2-(2-(4-(破曱基）-1Η-1，2,3-三唑-i_基）乙基）異〇引〇朵 啉-1，3-二酮（1 g，2.62 mmol)及0.2 g存於碳上之1〇%鈀存 於乙醇（1 〇 mL)中之混合物在充入氫氣之條件下授摔過 夜。過濾以移除固體並濃縮。藉由管柱層析法（DCM至存 於DCM中之20%乙酸乙酯）純化以得到黃色固體狀標題化 130205.doc -47- 200908981 合物（0.5 g，74〇/〇)。MS (ES) w/z 257 [M+l]+。 使用與彼等對於2-(2-(4-曱基-1Η-1，2,3·三唑-l_基）乙基） 異吲哚啉-1,3-二酮所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 110 2_(2-(5·曱基-1沁1，2,3-三唑-1-基)乙基)異吲哚琳-1，3-二酮 257 製備111 2-(2-[1，2,3]三唑-1-基-乙基）-異吲哚-1，3-二酮 向裝備有磁力攪拌器、氮氣入口及溫度探針之5-L圓底 燒瓶中添加 1H-1，2,3-三唑（250 g ; 3_51 mol)、iV-(2-溴乙 基）鄰苯二甲醯亞胺（942 g ; 3.52 mol)及1500 mL DMF。將 混合物冷卻至15°C。攪拌該混合物直至所有固體皆幾乎溶 解並隨後在冰-水浴中冷卻。在1 〇 min内分份添加碳酸鉋 (1145 g ; 3·51 mol)。反應混合物放熱至21°C。攪拌該混合 物過夜並達到RT。將該反應混合物傾倒入含有8 L冰水之 I； 12-L燒瓶中^將懸浮液攪拌30 min並隨後過濾並用3 L水沖 洗。空氣乾燥2 h。自7 L無水乙醇中重結晶區域異構體之 混合物。藉由過濾分離固體並空氣乾燥。再次自16 L無水 乙醇中重結晶。藉由過濾分離固體並用新鮮乙醇（1000 mL)沖洗。在40°c下真空乾燥固體以得到292 7 g白色固體 狀標題化合物（34%)。MS (El) w/z 243 [M+l]+。 製備112 2-[1，2,3]三唑-卜基-乙基胺 將2-(2-[1，2,3]三唑-1-基-乙基）-異吲哚-1，3-二酮（1〇6 g， 130205.doc -48· 200908981 437.59 mmol)溶解於含有2 L無水乙醇之5-L圓底燒瓶中。 將經攪拌之混合物在氮氣中加熱至7〇°C ;在該溫度下於10 min内逐滴添加單水合肼（23 mL; 463.76 mmol; 23.69 g)。 該混合物變均勻且顏色為黃色。在該溫度下約30 min後， 反應中開始形成固體且黃色顏色隨時間逐漸變得較淺。在 7 h後移除熱並在1 h内冷卻至RT。經矽藻土過濾並用1〇〇〇 mL乙醇沖洗。蒸發成半固體。溶解於2 [ CH2C12中，經石夕 萬土過;慮並蒸發。用甲苯（1500 mL)稀釋殘留物並經石夕藻 土過濾以移除不溶性黃褐色固體。蒸發並在真空中放置過 夜。將油狀物溶解於1〇〇 mL CH1C11中並再次藉助石夕藻土 墊過濾。蒸發成43.9 g (90%)渾濁油狀標題化合物。Ms (El) m/z 112 [M]+。 使用與彼等2·[1，2,3]三4·1·基·乙基胺所用類似之程序 製備以下中間體：

化合物名稱 (1-(2-胺基 -基 (1 -(2-m^ L· i)-1 Η-1 2_(2-甲基-IH-I，1,3-三嗤]_基)乙胺 MS (ES) m/z [M+i]+

-49- 1 -(4_甲基-IH-I，1,3-三。圭_1_基)乙胺 2 類似之程序製備以下中間體： 土）乙醇所述 3 使用與彼等對於2-(2-(2-(2-(2-(11^ 一 胺基）-5-氟嘧啶-4-基）苯并[b]噻吩·7_基）笨& ·\)乙基 4 130205.doc 200908981 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 備註 117 [4-(7->臭-苯弁[b]σ塞吩-2-基)·5· 說·嘧啶-2-基]-(2-[1，2,3]三。坐-I-基-乙基)_胺 419/421 118 7V-(2-( 1 Η-1，2,3 -三唑-1 -基）乙 基)-4-(7-溴苯并[b]噻吩-2-基） σ密π定-2-胺 401,403 119 iV-(2-(lH-l，2,3-三唑-1-基）乙 基)-4-(7->臭苯弁[b]°塞吩-2-基)-5-氯°密°定-2-胺 435,437 120 AK2-(1H-1,2,3-三唑-1-基）乙 基)-4-(7->臭苯弁[b]a塞吩-2-基)-5-甲基嘧啶-2-胺 415,417 121 第三丁基 1 -(4-氟-2-(2-(5-氟-2-(2-(4-曱基-lH-1,2,3-三嗤-1-基)乙基胺基)°密咬-4-基)苯弁 [b]噻吩-7-基)苯基)乙基胺基 曱酸酯 592 122 (i?)-1 -(4-鼠-2-(2-(5-鼠-2-(2-(4-曱基-1H-1,2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)喂°定-4-基)苯弁[b]D塞 吩-7-基)苯基)乙基胺基甲酸 第三丁酯 592 來自對掌性中 間體 123 1-(4-氟-2-(2-(5-氟-2-(2-(5-曱 基-1H-1，2,3-三唑-1-基）乙基 胺基)嘧咬斗基)苯并[b]噻吩-7-基)苯基)乙基胺基甲酸第三 丁酯 592 124 (i?)-1 -(4-敦-2-(2-(5-鼠-2-(2-(5-曱基-1H-1,2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)σ密。定-4-基)苯并[b]π塞 吩-7-基)苯基)乙基胺基曱酸 第三丁酯 592 來自對掌性中 間體 130205.doc -50- 200908981 125 1 -(4-氟-2-(2-(5-氟-2-(2-(4-(羥 基甲基)-1Η-1，2,3-三唑-1-基） 乙基胺基)嘧啶-4-基)苯并[b] 噻吩-7-基)苯基)乙基胺基甲 酸第三丁酯 608 126 1 -(4-氟-2-(2-(5-氟-2-(2-(5-(羥 基甲基)_1H-1，2,3-三唑-1-基） 乙基胺基)嘧啶-4-基)苯并[b] 噻吩-7-基)苯基)乙基胺基曱 酸第三丁酯 608 使用與彼等對於下文#-(2-(1扎1，2,3-三唑-1-基）乙基）_5- 氟-4-(7-(5-氟-1H-吲哚-7-基）苯并[b]噻吩_2-基）嘧啶-2-胺 所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 127 ^H{2-[5-氟-2-(2-[1，2,3]三。坐·乙基胺 基)-嘧啶斗基]•苯并[b]嗟吩_7_基}_苯基)_乙基]_胺 基甲酸第三丁基酯 "------- 578 128 1，2,3-三峻1 ·基)乙基胺基氟 密啶基)本开[b]噻吩-7-基氟苯基)-2,2,2-三氟 乙基(甲基)胺基甲酸第三丁酯 646 129 甲醯胺 520 130 三仏基)乙基胺基)_5_氟 定_ _基)本开[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)丙基胺基曱 酸第三丁酯 --------- 592 131 甲酸第三丁酯 MS (ES) [M]+ 575 130205.doc -51 - 200908981 132 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基)乙基胺基)-5-甲 基嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)乙基(甲 基)胺基甲酸第三丁酯 588 133 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1,2,3-三唑-1-基）乙基胺基)嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)乙基(曱基)胺基 甲酸第三丁酯 574 134 1-(2-(2-(2-(2-(111-1，2,3-三唑-1-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)乙基(曱基)胺基 曱酸第三丁酯 574 135 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1,2,3-三唑-1-基)乙基胺基)-5-氟 。密。定-4-基)苯弁[13]°塞吩-7-基)-4-氣苯基)環丁基胺基 甲酸第三丁酯 602 (M-1)' 136 2-(2-(2-(2-(2-(1Η-1,2,3-三唑-1-基）乙基胺基)-5-氟 °密°定-4-基)苯弁[1)]11塞吩-7-基)-4-氣苯基)17比洛17定-1-曱酸第三丁酯 604 137 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1,2,3-三。坐-1-基)乙基胺基)-5-氟 嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)乙酮 477 製備138 [2-(2-{2-[5-氟-2-(2-[l，2,3]三唑-1-基-乙基胺基）-嘧啶-4-基]-苯并[b]噻吩-7-基}-苯基）-乙基]-胺基甲酸第三丁基酯 向{2-[2-(4,4,5,5-四曱基-[1，3,2]二氧硼咮-2-基）-苯基]-乙 基}-胺基曱酸第三丁基酯（0.5 g，1.08 mmol)、[4-(7-溴-苯 并[b] °塞吩-2-基）-5 -鼠-D密 σ定-2 -基]-(2-[1，2,3]二哇-1-基-乙 基）-胺（450 mg，1.08 mmol)及 Pd(dppf)Cl2 (45 mg，53.99 μιηοΐ)存於1,4-二°惡烧（4.32 mL)中之懸浮液中添加2 1^4碳_酸 鈉（1.08 mL，2.16 mmol)溶液並在100°C下加熱4 h。冷卻 至RT並濃縮。將殘留物懸浮於DCM中並藉助於60-mL燒結 玻璃漏斗中之2-cm二氧化矽墊過濾。用50 mL DCM及50 mL(l:l乙酸乙酯/己烷）溶析。隨後用200 mL乙酸乙酯溶析 130205.doc -52- 200908981 以收集產物。濃縮並在二氧化矽上用存於丨：1 DCM/己烷中 之1〇〇/。乙醇溶析純化以得到標題化合物。MS (ES) w/z 56〇 [M+ 1 ]+ 0 使用與彼等對於[2-(2-{2-[5-氟_2_(2-[1，2,3]三唾-1-基-乙 基胺基）-鳴咬_4_基]-苯并[b] „塞吩冬基卜苯基乙基胺基 甲酸第二丁基酯所述類似之程序製備以下中間體： 製備 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 139 2-{2-[5_敗备乙基胺基嘴啶冰 基]-苯并[b]。塞吩_7-基}_茉甲搭 445 製備140 (9H-苟-9-基）曱基（及）_ι_(⑻小（2_(2_(2_(2_(1h_12,3 三 唑-1-基）乙基胺基）·5-氟嘧啶_4-基）苯并[b;j噻吩_7_基）_4_氟 笨基）乙基胺基）-1-氧丙_2_基胺基甲酸酯 向（Λ)-#·(2-(1Η-1，2,3·三唑-1-基）乙基）_4_(7_(2_(1_胺基乙 基）-5-氟苯基）苯并[b]噻吩-2-基）-5-氟嘧啶-2-胺（80 mg， 167 pmol)、（9-苟基甲氧基羰基）_D_丙胺酸-氯化物（83 mg，251 μιηοΐ)存於1，4_二噁烷（5 mL)中之溶液中添加二異 丙基乙基胺（43 mg，335 μηιοί)。將混合物在RT下攪拌3 h。將該混合物用氣仿/IPA (3/1，1〇〇 mL)稀釋，用水/飽和 氣化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，並在真空中濃縮。藉 由FCC(存於DCM中之1 〇%甲醇溶析）純化粗產物以得到黃 色固體狀標題化合物（129 mg，1〇〇%)。MS (ES) 770 [M+l]+。 130205.doc -53- 200908981 實例1 2-(2-(2 (2 (2-(1Η-1，2,3-三嗤小基）乙基胺基）_5_氟。密啶_4_ 基）苯并[b]噻吩_7_基）苯氧基）乙醇

將2-氣-5-氟-4-(7-{2-[2-(四氫-吼喃_2_基氧基）_乙氧基]_ 苯基}-苯并[b]噻吩_2-基）_嘧啶（25〇 mg，〇 52 mm〇1)及 2-[1’2,3]一°坐-1-基-乙基胺（14〇11^，1,29 111111〇1)合併於壓 力谷器中之第二丁醇（2.6 mL ’或者二°惡烧、正丁醇、二 噁烷-NMP、單獨NMP作為溶劑）及NMP (1.3 mL)中。將混 合物在油浴中於120-150。(：下加熱過夜（或在微波反應器中 某時間段）。用氣仿/IPA (3/1)稀釋該混合物。用飽和氯化 納水溶液洗滌溶液。經硫酸鈉乾燥。在真空中濃縮該溶 液。藉由管柱層析法（DCM至存於DCM中之10%甲醇）純化 以提供黃色固體狀標題化合物（16〇 mg，65%)。MS (ES) m/z 477 [M+l]+。 使用與彼等對於2-(2-{2-[5-氟-2-(2-[l，2,3]三唑-1-基-乙 基胺基）-嘧啶-4-基]-苯并[b]噻吩-7-基}-苯氧基）-乙醇所述 類似之程序製備以下實例： 130205.doc -54- 200908981

實例 化合物結構 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 備註 2 i F iV-(2-(lH-l，2,3-三 唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙 基)苯基)苯并[b] 噻吩-2-基)-5-氟 嘧啶-2-胺 460 3 2-(2-(2-(2-(2-( 1H-1，2,3-三唑-1-基） 乙基胺基)-5-氟°密 啶-4-基)苯并[b] 0塞吩-7-基)-4-說 苯氧基)乙醇 495 4 0 F J $ ty^o iV-(2-(lH-l，2,3-三 唆-1-基)乙基)-4· (7-(5-氟-2-甲基苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)喷淀-2-胺 431 5 p F tHD6 #-(2-(lH-l,2,3-三 〇坐-1 -基)乙基)-4_ (7-(2-氯-5-氟苯 基)苯并[b]噻吩· 2-基)嘧啶-2-胺 451 6 〇o A F ΛΚ2-(1Η-1，2,3-三 口坐-1 -基)乙基)-5· 氟-4-(7-(5-氟-2-(嗎琳基-曱基)苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 534 130205.doc -55- 200908981 ί 7 Ά F iV-(2-(lH-l，2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-((二-曱基胺 基)甲基)-5-氟苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟密。定-2-胺 492 8 (τψ F AM>(1H-1,2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氟-4-(7-(5-氟-2-(四鼠D夫喃-2-基） 苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)π密咬-2-胺 505 9 Ρ \ } 7。〜 tHX) F ΛΚ2-(1Η-1，2,3-三 σ坐-1 -基)乙基)-4_ (7-(2-(2-胺基-乙 氧基)苯基)苯并 [b]噻吩 _2-基)-5· 氟-嘧啶-2-胺 476 使用TFA 以移除 Boc 10 ^orrF F 7V-(2-(lH-l，2,3-三 。坐基)乙基)_5_ 氟·4·(7_(5·氟-2-(2-(曱基-胺基)乙 氧基)苯基)-苯并 [b]噻吩-2-基)嘧 。定-2-胺 508 使用TFA 以移除 Boc 11 F AM>C1H-1，2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(2-胺基乙氧 基)-5-說-苯基)苯 并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 494 使用TFA 以移除 Boc 130205.doc -56- 200908981 12 S-^O r ΛΜ>(1Η-1，2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氟-4-(7-(2-(2-(曱 基胺基)乙基)-苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 474 使用TFA 以移除 Boc 13 bvO F ΛΚ2-(1Η-1，2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氣-4-(7-(5-氣-2-(2-(甲基-胺基)乙 基)苯基)苯并[b] °塞吩-2-基） 嘴咬-2-胺 492 使用TFA 以移除 Boc 實例14 #-(2-(1Η-1，2,3-三唑-i_基）乙基 D朵-7-基）苯并[bp塞吩-2-基）"密咬_2-胺

將7V-(2-(lH-l，2,3-三唑-1-基）乙基）-5-氟-4-(7-(4,4,5,5-四 甲基-1，3，2-二氧硼咮-2-基）苯并[b]噻吩-2-基）嘧啶_2_胺 (〇·12 g，0.26 mmol)、7_ 溴-5-氟-1H-吲哚（64 mg，0.28 mmol，根據以下參考文獻合成：Manfred S·; Assunta G.; Fr0d6ric L.，五訊 /· c办㈣· 2006, 2956-2969)、八水合

氫氧化鋇（0.24 g，0.77 mmol ’或者碳酸鈉、碳酸鉀、氟 化绝）、Pd(dppf)Cl2 (2〇 mg，0.03 mmol)合併於 2 mL 130205.doc -57- 200908981 DMF(或者二噁烷、DMs〇)與水（4/i，v/v)之混合溶劑中。 將該混合物用N2吹掃三次。將該反應混合物加熱至8〇。〇， 保持4 h(HPLC監測器）（或微波反應器）。冷卻至RT。用5〇 mL氯仿/IPA (3:1，v/v)稀釋。用水、飽和氯化納水溶液洗 務並經硫酸㈣燥。移除有機溶劑以得到粗產物。藉由管 柱層析法(己烷至乙酸乙酯，或二氣曱烷及甲醇)純化殘留 物以得到標題化合物（0,053 g , 43%)。Ms (es)讲/2 474 [M+l]+ 〇 f 使用—與彼等對祕(2-(_，2,3-三嗤-卜基）乙基）·5_氟_4_ (7-(5-氟-1Η-η弓卜朵-7_基）笨并[b]嗟吩_2_基）喷咬_2_胺所述類 似之程序製備以下實例：

實例 15 化合物結構

化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 備註 AK2-(1H-1，2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-( 1 -胺基-環丙 基)-苯基)苯并[b] 嘆吩-2-基)-5-氣-嘴 啶-2-胺 472 1-(2-澳-苯 基)-環丙 基胺： J. Org. Chem. 2003, 68, 7133

16 490 ΛΚ2-(1Η-1,2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-環丙 基)-5-氟-笨基)苯 弁[b]喧吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 130205.doc -58 - 200908981 17 F Ο Fr&^: F ΛΚ2-(1Η-1,2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(二氟-甲基)-5-氟苯基)-苯并[b] 噻吩-2-基)-5-氟嘧 。定-2-胺 485 18 F o \ h2n^ T 严 F 2-(2-(2-(2-(2-( 1H-1，2,3-三峻-1-基）乙 基胺基)-5-氣。密。定-4-基)苯并[b]噻吩· 7-基)_4·氟苯基)-乙 醯胺 492 19 、o Ul>^n F 2-(2-(2-(2-(2-( 1H-1，2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)苯基磺醯基） 乙醇 525 20 F 0 F 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1,2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)-5 -氣。密^定-4-基)苯并[b]噻吩· 7-基)-4-氟苯氧基)-2-曱基丙-2-醇 523 21 F 0 H。〜ί U^~0N F 2-((2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三哇-1-基)乙 基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟节基)-(曱基)-胺基)乙醇 522 130205.doc -59- 200908981 22 Λ Ν—ν XU/ : F 1-(2-(2-(2-(2-( 1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-說节基)六 氳定-4-醇 548 23 A Ν—Ν F ΑΗ2-(1Η-1，2,3-三 °坐-1 -基）乙基)-4_ (7-(2-胺基-苯基)苯 弁[bp塞吩-2-基)-5- 氟嘧啶-2-胺 432 藉由反相 純化 24 〜 Ν—Ν F 7V-(2-(lH-l，2,3-三 哇-1 -基)乙基)-4_ (7-(2-胺基-5-乳苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 466 藉由反相 純化 25 Ο UC^0N F 2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)-5- 7-基)苯酚 433 藉由反相 純化 26 Ο Ν—Ν ^ i ζΧ^^Ν F ΛΜ>(1Η-1,2,3-三 嗤-1-基)乙基)-5-氟-4-(7-(2-曱氧基 苯基)-苯并[b]噻 吩-2-基胺 447 藉由反相 純化 27 Ο Ν—Ν 。々ί F ΛΜ>(1Η-1,2,3-三 。坐-1-基)乙基)-4_ (7-(2·氣-苯基)苯弁 [b]噻吩-2-基)-5·氟 嘧啶-2-胺 451 藉由反相 純化 130205.doc •60- 200908981 f 28 〇〇 1 I NH F AK2-(1H-1,2,3-三 。坐_ 1 _基)乙基)_4_ (7-(lH-吲哚-4-基） 苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟°密。定-2-胺 456 藉由反相 純化 29 A n—n F ΛΜ：2-(1Η-1，2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氟-4-(7-(喹啉-8-基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 468 藉由反相 純化 30 F o X^i h3c ⑻-7V-(2-(lH-l，2,3-二。坐-1 ·基）乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙 基)_5_敗-苯基)苯 并[b]噻吩-2-基)-5-曱基-嘧啶-2-胺 474 來自對掌 性中間 體，使用 TFA以移 除Boc 31 A N—n Cl (i?)-iV-(2-(lH-l,2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙 基)-5-氟-苯基)苯 并[b]°塞吩-2-基)-5-氯嘧啶-2-胺 494 來自對掌 性中間 體，使用 TFA以移 除Boc 32 A N—n 〇H0>0N F 1-(2-(2-(2-(2-( 1H-1，2,3-三唾-1-基）乙 基胺基)-5-鼠嘴。定_ 4-基)苯并[b]噻吩· 7-基)-4-氟苯基)-2,2,2-三氟乙醇 533 33 A n—n F 1-(2-(2-(2-(2-( 1H-1，2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)-5-亂-°¾ 啶-4-基)苯并[b]噻 吩-7-基>4-氟苯 基)-2,2,2-三氟乙酮 531 130205.doc -61 - 200908981 34 Ο Ν—Ν F ΛΚ2-(1Η-1，2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-2-曱 基丙-2-基)-5-氟苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 506 35 Ο Ν—Ν F 2-(2-(2-(2-(2-( 1H-1,2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)_5_氣°密°定-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)-N-(2-羥基乙基)-乙 醯胺 536 36 ο F ⑻-2-(2 气 2-(2-(2-仰-1,2,3-三唑-1-基)乙基胺基)-5-氟 嘧啶-4-基)苯并[b] 嗟吩-7-基)-4-氣苯 基)-環戊酮 517 37 A Ν—Ν F 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙 基胺基)-5-氟°密咬-4-基)苯并[b]噻吩-7-基)-4-氟苯基)-2,2-二氟-乙酮 513 38 o F (R)-N-{2-{m-\,2,3-二嗅-1 -基)乙基)-4-(7-(2-( 1 -胺基丙-2-基)-苯基)苯并[b] 噻吩-2-基)-5·氟嘧 11 定-2-胺 474 130205.doc -62- 200908981 /. v 39 A N—n F f^；-iV-(2-(lH-l,2,3-三唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(2-胺基-1-氣 乙基)-5-氯苯基)苯 并[b]n塞吩-2-基)-5-氟D密。定-2-胺 512 40 F o H：N I T NH F ΛΚ2-(1Η-1,2,3-三 °坐-1 -基)乙基)-4· (7-(2-(1-胺基-2-氟 丙-2_基)-5-策苯基） 苯弁[b]σ塞吩-2-基)-5_氟^密淀-2-胺之 鹽酸鹽 510 41 A Ά飞 F ΛΜ>(1Η-1，2,3-三 ϋ圭-1 ·基)乙基)_4_ 2,2,2-二氟乙基)-5-氟苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)-5-氟-嘴 。定-2-胺 532 42 F o F #-(2-(1Η-1，2,3-三 。坐-1 -基)乙基)-5_ 氟-4-(7-(5-氣-2-(1-(曱基胺基)-乙基） 苯基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 492 43 F o ：；X? F AM>(1H-1，2,3-三 °坐-1_基)乙基)-4_ (7-(2-(1-胺基·2-曱 基丙基)-5-氟-苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)_5_氟嘧啶_2-胺 506 130205.doc •63- 200908981 44 A F AH2-(1H-1,2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(l-(2,2-二氟 乙基-胺基)乙基)"* 5-氟苯基)苯并[b] 噻吩-2,基)-5-氟-嘧 ^-2·胺 542 藉由反相 純化 45 A N—n F ΛΗ2-(1Η-1,2,3-三 σ坐-1 -基)乙基)_4_ (7·(2·(1-胺基乙 基)_5_氣苯基)苯 并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 494 使用與彼等對於上文[2-(2-{2-[5-氟-2-(2-[l，2,3]三唑-1-基-乙基胺基）-°密°定-4 -基]-苯弁[b]a塞吩-7-基}-苯基）-乙基]_ 胺基曱酸第三丁基酯所述類似之程序製備以下實例： 實例 化合物結構 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 46 "άκί (i?)-AK2-( 1 Η-1,2,3 -三唑-1 _ 基)乙基)-4-(7-(2-( 1 -胺基乙 基)苯基)苯并[b]噻吩-2-基） 密咬-2-胺 442 47 iV-(2-( 1 Η-1,2,3 -三唑-1 -基） 乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-乙 基)-5-氟苯基)-苯并[b]噻 吩-2-基)嘧啶-2-胺 460 48 〇 I1 F 2-(2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3·三 峻-1-基)乙基胺基)-5-氟口密 。定-4-基)苯并[b]°塞吩-7-基)-4-氟苯基)-2-曱基-丙猜 502 130205.doc -64- 200908981 實例49 7M2-(1H-1，2’3-三唾小基）乙基）_4·(7_(2•(胺基甲基）苯基) 苯并[b]噻吩-2-基）-5-氟嘧啶-2-胺

將（2-{2-[5·氣-2-(2-[1，2,3]三嗤-1·基-乙基胺基密啶_4_ 基]-苯并[b]噻吩-7-基卜苄基）_胺基甲酸第三丁基酯（1〇〇 mg，0.18 mmol)及無水TFA酸（2〇 mL)合併於無水DCM (2.2 mL)中。將溶液在RT下攪拌1 h。移除溶劑。添加 DCM，用飽和碳酸氫鈉溶液、水及飽和氣化鈉水溶液洗 蘇。分離有機層並經硫酸錢乾燥。過濾並在真空中濃縮。 藉由管柱層析法[0· 1 %至2% 2 Μ氨水，存於甲醇/DCM中] 純化殘留物以得到標題化合物（78 mg，96%)。MS (ES) w/z 446 [M+1 ]+。 使用與彼等對於#-(2-(1Η-1，2,3-三唑_丨_基）乙基）-4-(7-(2-(胺基甲基）苯基）苯并[b]噻吩_2_基）_5_氟嘧啶_2-胺所述 類似之程序製備以下實例： 130205.doc -65- 200908981 實例 化合物結構 化合物名稱 MS (ES) m/z [M+l]+ 備註 50 r\ 2HCI #-(2-(11^-1，2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(2-胺基乙基)苯基） 苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟-嘧啶-2-胺之二 鹽酸鹽 460 使用HC1 作為酸 51 F/ #-(2-(1私1,2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(氮丙°定-2-基)-5-氣 苯基)-苯并[b]噻吩-2-基)-5-亂嘴α定-2-胺 476 52 F #-(2-(5-曱基-1Η-1,2,3-三。坐-1-基）乙 基)-4-(7-(2-( 1 -胺基 乙基)-5-氣-苯基)-苯 弁[b]11 塞吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 492 53 f (1 -(2-(4-(7-(2-( 1 胺 基乙基)-5-氟苯基） 苯并[b]17塞吩-2-基)-5-氣-喊。定-2-基胺基） 乙基)-1Η-1，2,3-三 唑-4-基)曱醇 508 54 H,N_〇rF ^ F (i?)-7V-(2-(4-甲基-肝1,2,3-三唑-1-基） 乙基)-4-(7-(2-( 1 -胺 基乙基)-5-氟-苯基)-苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟-嘧啶-2-胺 492 來自對 掌性中 間體 130205.doc -66 - 200908981 55 F 尽(2-(111-1，2,3-三唑-1-基)乙基)-5-氣-4_ (7-(5-氟-2-(1-(曱基-胺基)環丙基)苯基） 苯并[b]噻吩-2-基)嘧 咬-2-胺 504 56 F AM>(1H-1，2,3-三唑-1 -基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-¾ 丁基)-5-氟-苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)-5-氣ϋ密^定-2-胺 504 57 F iV-(2-(lH-l，2,3-三唑-1 -基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-乙基)-5-氣 苯基)-苯并[b]噻吩-2-基)-5-鼠。密。定-2-胺 478 58 Η2ΝγΧ^ F #-(2-(1沁1,2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-丙基)-5-襄 苯基)-苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 492 59 εΗ'&κί AK2-(1H-1，2,3-三唑-1 -基)乙基)-4-(7-(5-氟-2-(1-(甲基胺基） 乙基)-苯基)苯并[b] σ塞吩-2-基)σ密咬-2-胺 474 60 h3c #-(2-(111-1，2,3-三唑-1_ 基)乙基)-4-(7-(5-氟-2-(1-(甲基胺基） 乙基)-苯基)苯并[b] 噻吩-2-基)-5-甲基嘧 σ定-2-胺 488 130205.doc -67- 200908981 61 F 4-(7-(2-(1-胺基乙 基)-5-氟苯基)苯弁 [b]°塞吩-2·基)-5-鼠-N-(2-(5-曱基-1H-1，2,3·三唑-1·基)乙 基)嘧啶-2-胺 492 62 F (1-(2-(4-(7-(2-(1-胺 基-乙基)-5-氟苯基)-苯并[b]σ塞吩-2-基)-基-胺基） 乙基)·1Η·1，2,3·三 唑-5-基)曱醇 508 63 F #-(2-(1沁1，2,3-三唑-1 -基)乙基)-5-1-4-(7-(5-氟-2-(°比洛咬-2-基)-苯基)苯并[b] °塞吩-2-基)°密σ定-2-胺 504 64 F iV-(2-(lH-l,2,3-三唑-1 ·基)乙基)-5-氣-4· (7-(5-氟-2-(2,2,2-三 氟-1-(曱基胺基)乙 基)-苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)°密咬~2_胺 546 實例65 #-(2-( 1H-1，2,3-三唑-1-基）乙基）-5-氟-4-(7-(2-((曱基胺基） 甲基）苯基）苯并[b]噻吩-2-基）嘧啶-2-胺

130205.doc -68- 200908981 將2-{2-[5-氟-2-(2-[l，2,3]三唑-1-基-乙基胺基）_嘧啶_4- 基]-苯并[b]噻吩-7-基}_苯甲醛（800 mg，i 8 mm〇1)、氰基 蝴氫化物（二氧化矽支撐，1 mm〇丨/g，2 7 g，2 7 _〇1)、 二曱基乙酸（0.55 g ’ 4.7 mmol)及單曱基胺（0.42 g，5.4 mmol)合併於12 mL二噁烷中。將反應混合物在1〇〇〇c下於 微波反應态中加熱20 min。將其冷卻至rt。用50 mL氯仿 /IP A (3 :1，v/v)稀釋。用水、飽和氯化鈉水溶液洗滌，並經 硫酸錢乾燥。移除有機溶劑。藉由管柱層析法[氯仿/甲醇/ 氫氧化録（35%存於水中），7/3/0.05]純化殘留物以得到標 題化合物（425 mg，3 8%)。MS (ES) m/z 460 [M+l]+。 使用與彼等對於#-(2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基）-5-氟_4_ (7-(2-((甲基胺基）曱基）苯基）苯并[b]嗟吩_2_基）„密D定·2·胺 所述類似之程序自對應苯甲醛或酮製備以下實例：

實例 化合物結構 化合物名稱 MS (ES) m/z _]+ 備註 66 >^6 f AK2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-((二-曱基胺基)曱基)-苯基)-本弁[b]嘆吩-2·基)·5-氣 嘧啶-2-胺 474 使用Si-CNH 67 7V~(2-( 1 Η~ 1，2，3 -三口坐-1 _ 基)乙基)-4-(7-(2-((乙 基-胺基)曱基)苯基)-苯 并[b]噻吩_2_基)-5-氟嘧 啶-2-胺 474 使用Si-CNH 130205.doc -69· 200908981

68 F Q F 7V-(2-(lH-l,2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(2-胺 基-¾戊基氟-苯基） 苯弁[b]D塞吩-2-基)-5-氣 嘧啶-2-胺 518 69 F #-(2-(111-1，2,3-三唑-1-基)乙基)-5-氟-4-(7-(5-氟-2-(1-(六氫°比°秦-1-基)乙基)苯基)苯并[b] 噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 547 70 F 7V-(2-(lH-l，2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-(二 甲基胺基)乙基)-5-氟苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟密咬-2-胺 506 71 6>v F Λφ-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(1-(乙 基胺基)乙基)-5-氣苯 基)苯弁[b]D塞吩-2-基)-5-氟嘴咬-2-胺 506 實例72 2-((1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基胺基）-5-氟嘧 啶-4-基）苯并[b]噻吩-7-基）-4-氟苯基）乙基）（曱基）胺基）乙醇

130205.doc -70- 200908981 將 1-(2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基胺基）_5_ 氟嘧 咬-4-基）苯并[b] °塞吩-7-基）-4-氟苯基）乙嗣（〇」g，〇21 mmol)、存於二噁烧（2 mL)中之10%三甲基乙酸、2_(甲基 胺基）乙醇（18.2 mg，0.252 mmol)及二氧化石夕支撐之氰基 硼氫化物（0.276 g，0.262 mmol)合併。將反應混合物在ι6〇 °C下於微波反應器中加熱2 h。添加2-(曱基胺基）乙醇 (0.157 g ’ 2.1 mmol)及二氧化矽支撐之氰基硼氫化物 (0·138 g ’ 0.131 mmol)。將反應混合物在i6〇°c下於微波反 應器中加熱4 h。將粗反應混合物傾倒至強陽離子交換 (SCX)(10 g)管柱上。用2 N曱醇氨（40 mL)溶析並濃縮。藉 由正相層析法（0-100% B ’以25 mL/分鐘流速，25分鐘， 在12 g —氧化石夕管柱上，溶劑A : DCM，溶劑b : 1 〇% 2 N 曱醇氨，於DCM中）純化殘留物以得到標題化合物（41 mg，36%)。MS (ES) m/z 536 [M+l]+。 實例73 (及）-#-(2-(出-1,2,3_三唑-1-基）乙基）-4-(7-(2-(1_胺基乙 基）-5·氟苯基）苯并[b]噻吩-2-基）-5-氟嘧唆_2-胺

藉由對掌性層析法（Chiralcel® OD-H管柱：流動相 130205.doc -71 - 200908981 40%甲醇，0.2¾異丙基胺，於C〇2中；流速為5 mL/min ; 在225 nm檢測）分離外消旋（4-{7-[2-(1_胺基-乙基）_5_氣_笨 基]-苯并[1>]11塞吩-2-基}-5-氟-哺唆-2-基）-(2-[1，2,3]三°坐_1_ 基-乙基）-胺（18〇 mg)以得到標題化合物（6i mg，33%)e Ms (ES) w/之 478 [M+l]+。或者使用 HPLC Chiralpak® AS-H管 柱（100% MeOH/0.02% 二曱基乙基胺（Dmea)\C02，5 mL/min，225 nm)。糟由振動圓二色譜（vcd)測定對掌 性。 藉由使用與上文所列示者類似之對掌性層析方法自以下 實例之外消旋物中分離以下實例： 實例 化合物結構 化合物名稻_ MS (ES) m/z [M+l]+ 備註 74 F (及)善(2_(5-甲基-1H-1，2,3-三唑小基)乙 基)-4-(7-(5-氟-2-( 1 _胺 基-乙基)-苯基)-笨并 [b]嘆吩·2_基)-5_氟_嘴 啶-2-胺 492 Chiralpak® AS-H 75 F (5)-(1-(2-(4-(7-(2-(1-胺基乙基)_5-氟苯基） 苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-基胺基)乙 基)-1Η-1，2,3-三嗤-5-基)甲醇 508 Chiralcel® OD-H 76 Η2Τ?對掌;， / 7V-(2-(lH-l，2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2_(i-胺基-丙基)-5-氟苯 基)-苯并[b]°塞吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 492 Chiralpak® AS-H，第 一流份 130205.doc -72- 200908981

77 Η AK2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)·4·(7-(5_ 氟-2-(1-(曱基胺基)乙 基)-苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)嘴。定-2-胺 474 Chiral OJ-H，第一流 份 78 h3c 7^-(2-(111-1,2,3-三唑-1_ 基)乙基)-4-(7-(5-氟-2-(1-(曱基胺基)乙 基)-苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)-5-曱基嘧啶-2-胺 488 Chiral OJ-H，第一流 份 79 對掌性 Cy ^Jya ^ F ΛΚ2-(1Η-1,2,3-三唑-1 -基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙基)-5-氣-苯 基)苯并[b]噻吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 494 Chiralpak® AD-H > 第一流份 80 ' ~F 對掌性 OJ7 a^O 〆 〇S)-A42-(lH-l,2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氣-4-(7-(5-氟-2-(1-(六氫口比 °秦-1-基)乙基)-苯基） 苯并[b]噻吩-2-基)嘧 。定-2-胺 547 Chiralpak® AD-H 81 講 ,χί/ N) ΐό>^Η F 〇S>AK2-ClH-l，2,3-三 唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(1-(二甲基胺基)乙 基)-5-氟苯基)苯并[b] °塞吩-2-基)-5-氟-°密 π_^-2-胺 506 Chiralpak® AD-H 82 lN> F C5)-AK2-(1H-1,2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-(乙基胺基)乙 基)-5-氟苯基)苯并[b] 嗟吩-2-基)-5H 咬-2-胺 506 Chiralpak® AD-H 130205.doc -73- 200908981

83 對掌性 丫吸F AK2-(1H-1，2,3-三唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-(2,2·二氟乙基胺基） 乙基)-5-氣苯基)苯并 [b]嗟吩-2-基)-5·氟-哺 ϋ定-2_胺 542 Chiralpak® AS-H 第二流份 84 c> F (i?)-AK2-(lH-l，2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氟-4-(7-(5-氟-2-(1-(曱基 胺基)乙基)-苯基)苯 并[b]噻吩-2-基)嘧咬-2-胺 492 Chiralpak® AD-H 85 Q ί UC^^N F (i?)-7V-(2-(lH-l，2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙基)苯 基)-苯弁[b]σ塞吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 460 Chiralcel® OD-H 管柱 86 \ 0 HaN^0 \ F 〇S>AK2-ClH-l,2,3-三 唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙基)苯 基)-苯弁[b]σ塞吩-2-基:Κ5-氟嘧啶-2-胺 460 Chiralcel® OD-H 87 τγΡ l F 〇S)-iV-(2-(lH-l，2,3-三 唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-2,2,2-三 氟-乙基)-5-氟苯基)-苯并[b]。塞吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 532 Chiralpak® AD-H 130205.doc • 74· 200908981 88 0 F (i?)-iV-(2-(lH-l，2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-2,2,2-三 氟-乙基)-5-氟苯基)-苯弁[b]B塞吩-2-基)-5-氟嘧啶-2-胺 532 Chiralpak® AD-H 89 c> }m F 〇S>7V-(2-ClH-l,2,3-三 唑-1-基)乙基)-5-氟-4_(7-(5-氟-2-(2,2,2-三 氟-1-(甲基-胺基)乙 基)苯基)·苯并[b]噻 吩-2-基)-嘴。定-2-胺 546 對掌性 OJ-H 90 〇 F (i〇-AK2-(lH-l,2,3-三 唑-1-基）乙基)-4-(7-(2-(1-胺基-2-曱基丙 基)·5-氟苯基)苯并[b] 嗟吩-2-基)-5-氟-°密 ^定-2-胺 506 Chiralpak® AS-H 91 ，、、 ^jy¥ i (i?)-AM；2-(lH-l,2,3-三 唑-1-基)乙基)-4-(7-(2-(1-胺基乙基)-5-氟-苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)嘧啶-2-胺 460 Chiralcel® OJ-H 92 F (#-(2-(1沁1,2,3-三唑-1-基)乙基)_5_氣-4-(7-(5-氟-2-(。比咯σ定-2-基)苯基)苯并[b]噻 吩-2-基)σ密咬-2-胺 504 Chiralcel® OJ-H， 第一流份 *該表中一些對映 異構體之絕對構型 未確定。 *例如，對映異構體 實例76-79、83及92 藉由保留時間說明， 即，離開管柱之第一 或第二流份。 130205.doc -75- 200908981 實例93 ΑΓ_(2_(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基）-4-(7-(2-(2-胺基丙 _2_基） 5 -氟苯基）苯并[b]°塞吩-2-基）-5-^π密咬_2_胺

將 #-(2-(2-(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三唑-i-基）乙基胺基）_5_ 氟 癌咬-4-基）苯并[b]噻吩-7-基）-4-氟笨基）丙-2_基）甲醯胺 (120 mg，231 μιηοΐ)及氫氧化鈉（5 N，1〇 mL，50 mmol)存 於乙醇（10 mL)中之混合物在80°C下加熱3 h。將該混合物 用冰水稀釋並用氣仿/IPA (3/1，100 mL)萃取。將有機相用 水/飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，並在真空中 濃縮。藉由？(：(：(001^至氣仿/曱醇/氫氧化銨，7/3/0.05作 為梯度）純化粗產物以得到灰色固體狀標題化合物（82 mg，750/〇)。MS (ES) m/z 492 [M+l]+。 實例94 2-(2-(2-(2-(2-( 1H-1，2,3-三唑-1-基）乙基胺基）-5-氟嘧啶-4-基）苯并[b]噻吩-7-基）-4-氟苯基）-2-曱基丙醯胺 130205.doc •76- 200908981

向2-(2_(2-(2-(2-(1Η-1，2,3-三嗅+基）乙基胺基）_5-氟嘧 °定·4_基）苯并[b] °塞吩基）+氟笨基）·2·甲基丙腈（140 mg，279叫〇1)、认^⑶儿六氧雜環十八院…^ 重量％)及碳酸納（1 M’ 5 mL，5 mm〇1)存於1〇紅乙醇中 之經擾拌溶液中逐滴添加過氧化氫。將混合物在rt下授掉 48 h。將該反應混合物用水稀釋並用DCM萃取。經硫酸鈉 乾燥有機相並在真空中濃縮。藉由FCC(存於DCM中之1〇% 甲醇溶析）純化粗產物以得到黃色固體狀標題化合物（11〇 mg ’ 76%)。MS (ES) w/z 520 [M+l]+。 實例95 W-Y-(W-l-(2-(2-(2-(2-(lH-l，2,3-三嗤-1-基）乙基胺基）-5-乱嘧啶-4-基）笨并[b]噻吩_7_基）_4_氟苯基）乙基）_2_胺基丙 醯胺

將{1-[1-(4-說-2-{2-[5_氟-2_(2_[1，2,3]三。坐_1_基_乙基胺 基）'°密°定_4_基]苯并[b]°i吩-7-基}-苯基）_乙基胺甲酿基]-130205.doc -77- 200908981 乙基}-胺基甲酸9H-芴-9-基曱基g旨（129 mg，167 μιηοΐ)溶 解於六氫吡啶（5 mL)中。將混合物在rt下攪拌30 min並隨 後用氣仿/IPA (3/1，1〇〇 mL)稀釋。將有機相用水/飽和氯 化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，並在真空中濃縮。藉由 FCC(存於DCM中之1〇〇/0甲醇至氯仿/甲醇/氫氧化銨 (7/3/0.05)作為梯度）純化粗產物以得到黃色固體狀標題化 合物（72 mg，78%)。MS (ES) w/z 549 [M+l]+。 實例96 實例88之對掌性合成 (i?)-7V-(2-( 1H-1，2,3-三峻-1-基）乙基）-4-(7-(2-(1-胺基-2,2,2· 二氣乙基）-5 -乳 > 基）本并[b]°塞吩-2-基）-5 -氣嘴π定-2-胺

A. (51，五)-#-(1-(2-溴-4-氟苯基）亞乙基）_2_甲基丙烷_2_亞磺 醯胺 在RT下，向2-溴-4-氟苯曱醛（9.85 g，81.28 mmol)存於 1，2-二氯乙烷（50 mL)中之攪拌混合物中添加（&㈠·2_曱 基-2-丙烧亞確醯胺（1 5 g ’ 73,89 mmol)。並隨後向該混合 物中添加Ti(OEt)4 (25.28 g，4.78 mol)並在RT下授拌過 伏。將反應在冰/水洛中冷卻，並用水稀釋。經1 /2英对之 矽藻土墊過濾反應混合物，並用二氯甲烷（4x150 mL)洗務 過遽出之材料。分離有機層並用150 mL D CM洗務水性 130205.doc -78- 200908981 層。合併有機層，經MgSCU乾燥，過濾，並濃縮。經由二 氧化矽層析用己烷至8:2己烷：乙酸乙酿溶析來純化殘留 物。將期望流份集中並濃縮以得到非常淡之黃色油狀產物 (21.5 g，95%)。GCMS m/z 305 [M]+ 〇 B. 备4_氣苯基）_2,2,2_三i乙基）_2_甲基丙 烧-2-亞續酿胺 向（5，五)-7^_(1_(2_溴_心氟苯基）亞乙基）_2曱基丙烧·2_亞 石尹、醯胺（13 g，42.46 mmol)存於THF中之攪拌混合物中添加 四丁基銨二苯基二氟矽酸鹽（29_8 g，55.19 mmol)。將該混 合物冷卻至約_60°c並在約1〇 min内添加（三氟曱基）三曱基 矽烷。升溫至5。(：並授拌2 h。繼續升溫至。將該混合 物冷卻回-3(TC ’並用飽和ΝΗπΐ (150 mL)驟冷。將產物萃 取至乙酸乙酯（2x200 mL)中。合併萃取物，用飽和氯化鈉 水溶液洗滌，經NajO4乾燥，過濾，並濃縮。將物質在 700 g —氧化矽上用8:2至1:1己烷：乙酸乙酯溶析純化成粗 物質。將該物質結晶以得到長針狀物（9 7 g，91%)。Ms (ES) w/2 377 [M+l]+。 〇.(5>)亦（(及）小（2_((2-(2-(2-(出-1，2,3-三唑-1-基）乙基胺 基）-5-氟喷咬-4-基）苯并[b]噻吩_7_基）曱基）_4_氟苯 基）2,2,2-二氟乙基）_2_曱基丙烧_2_亞磺醯胺 使用與彼等對於沁（2-(1Η-1，2,3-三唑-1-基）乙基）-5_氟·4_ (氟卜木_7_基）苯并[b]D塞吩_2_基）嘴咬_2_胺所述類 似之程序製備標題化合物。 D.⑻-以叫⑹，2,3-三唑+基）乙基）_4_(7_(2_(1_胺 130205.doc -79· 200908981 基-2,2,2-三氟乙基）_5_氟苄基）苯并[b]噻吩_2•基>5_氟嘧 咬-2-胺 將（5)善((/?)小(2-((2-(2-(2-(11'1-1，2,3-三嗤-1_基）乙基胺 基）-5·氟嘧啶-4-基）苯并噻吩_7_基）甲基）_4_氟苯基）_ 2,2,2-二氟乙基）-2·曱基丙烷_2_亞磺醯胺（1〇5经， mmol)及 HC1(16.52 mL，66·〇7 匪〇1，存於二。惡烧中）存於 曱醇（100 mL)中之混合物攪拌2 h。將該混合物濃縮並用 NaOH (1 N)稀釋。用乙酸乙酯（15〇 mLx3)萃取產物。用ι:ι 水/飽和氯化鈉水溶液及飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層。 經NadO4乾燥，過慮，並濃縮。將物質在加熱下溶解於 DCM/己烷中並在3 h内冷卻使該物質凝固。過濾固體以得 到標題化合物（8.1 g黃褐色固體，92%)。MS (ES) m/z 546 [M+l]+。 已顯示Plk 1在許多人類腫瘤中過表現，例如非小細胞肺 癌、口咽癌、食管癌、胃癌、黑素瘤、乳癌、卵巢癌、子 宮内膜癌、結腸直腸癌、膠質母細胞瘤、乳突癌、胰腺 癌、前列腺癌、肝母細胞瘤及非霍奇金淋巴瘤。而且， Plkl表現在非小細胞肺癌、口咽癌、食管癌、黑素瘤、結 腸直腸癌、肝母細胞瘤及非霍奇金淋巴瘤中具有預後意義 (Strebhardt, K.及 A. Ullrich. Nature Reviews Cancer 6(4): 321-30 (2006))。經Plkl磷酸化之受質藉由調整中心體成 熟、進入有絲分裂、姊妹染色單體分離及胞質分裂調節有 絲分裂進展[Eckerdt F. Strebhardt K. Cancer Research. 66(14):6895-8, 2006 ; Strebhardt 及 Ullrich 2006 ; van de 130205.doc • 80 - 200908981

Weerdt, B. C.及 R. H. Medema. Cell Cycle 5(8): 853-64 (2006)]。使用抗體注射、表現顯性陰性Plkl及減少反義 mRNA來抑制Plkl功能可產生單極紡錘體及後期停滯，此 導致腫瘤細胞系中有絲分裂細胞死亡及正常非轉化原細胞 系中之可逆G2停滯。 另外，已報導，Plk可用於治療桿狀腫瘤（Morozov A.,等 人，Clinical Cancer Research.13(16):4721-30，2007年 8 月 15 曰）° BI-2536已在使用HCT116、A549及NCIH460鼠科異種移 植物之臨床前模型中展示活性（Baum, A.，P. Garin-Chesa等 A 5 (2006). #C191 In vivo activity of BI 2536, a potent and selective inhibitor of the mitotic kinase PLK1, in a range of cancer xenografts.關於"Molecular Targets and Cancer Therapeutics"之AACR-NCI-EORTC國際討論會，Philidelphia， PA)。 以下分析之結果展示本發明化合物可用作抗癌劑之證 據。本文所述某些實例化合物係外消旋混合物。該等化合 物係以外消旋混合物及/或單獨對映異構體來測試。至少 一種對映異構體或外消旋物符合下文分析標準。

Plkl之表現及純化 可直接將人類Plkl cDNA在其一個末端處與表現His6標 藏（例如C-末端FLAG-His6標蕺）之聚核苷酸序列連接，並 插入至合適表現載體（例如pFastBacTM載體（Invitrogen))中 並轉染至與 Yue-Wei Qian,等人，Science, 282, 1701 (1998) 130205.doc -81 - 200908981 對於xPlkkl所報導系統類似之合適系統（例如桿狀病毒） 中。若使用病毒表現系統，則將病毒（例如，帶有Plkl-Flag-His6標藏聚核苷酸構建體之桿狀病毒）感染至適宜宿 主細胞（例如Sf9細胞）培養物中。當已表現足量Plkl-Flag-His6標籤融合蛋白時（例如在感染後約46小時），應用岡田 軟海綿酸（0· 1 μΜ)將該培養物處理足夠時間段（例如，3小 時）。該Plkl-Flag-His6標籤融合體係使用金屬親和樹脂（例 如TALON™)利用熟習此項技術者所熟知之方法自細胞顆 粒純化。將經純化之Plkl-Flag-His6標籤融合體以少量等分 試樣儲存在於-80°C下之適宜培養基（例如10 mM HEPES、 150 mM Naa、0.01% TRITON® X-100、1 mM二硫蘇糖醇 (DTT)、10%甘油，pH值為7.5)中直至使用。經純化之 Plkl-Flag-His6標籤融合蛋白之身份藉由MALDI(基質辅助 之雷射解吸 / 電離（Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization))來證實。 GST-Cdc25C(l-206)之表現及純化》 可自任何合適來源獲得之人類Cdc25C cDNA可在任何適 宜表現系統中表現，其後藉由與Bin Ouyang等人， Oncogene ’ 18，6029-6036 (1999)所述方法類似之熟知方 法達成純化。一個適宜系統涉及經pGEX-2T載體 (Amersham)轉化的大腸桿菌（E.coli) BL21在18°C下過夜生 長’其中已使用1 mM異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷將人 類Cds25C之cDNA改造用於誘導表現。可將經表現之GST-

Cdc25C(l-206)(Plkl之受質）純化（例如，藉由GLUTATHIONE 130205.doc -82- 200908981 SEPHAROSE® 4B)並以少量等分試樣儲存在於-80°C下之 合適溶液（例如 10 mM HEPES、100 mM NaCl、pH值為 7.5) 中。 PIkl抑制分析

Plkl激酶反應在含有50 mM HEPES，pH值為7.3、1.0 mM二硫蘇糖醇、5·0 μΜ ATP、10 mM MgCl2、0.01% TRITON® X-100、0_4 pCi 33P-ATP 及 0_06 pg/pL GST-Cdc25c (1-206)肽之緩衝液中含有Plkl-Flag-His6標籤融合 酶（0.2 ng/pL)。化合物係以存於DMSO中之10 mM原液提 供。將化合物1:3連續稀釋於20% DMSO中以產生10點濃度 反應曲線並隨後1:5稀釋（最終濃度為20 μΜ至0.001 μΜ， 存於最終濃度為4%之DMSO中）於反應混合物中以測定化 合物活性。使反應在室溫下實施60 min並隨後藉由添加60 pL 10.0% H3P〇4終止。將反應混合物（85 μ!〇轉移至用30 μί 10.0% Η3Ρ〇4預潤濕之96孔磷酸纖維素濾膜上，在室溫 下培育20-30 min並隨後用0.5% Η3Ρ〇4洗滌三次。乾燥該等 孔之後添加40 mL MicroScintTM20 (Packard)並隨後在 Wallac MICROBETA ® Jet上計數。隨後（例如）使用 ACTIVITY BASE™軟體（IDBS)使用四參數對數方程對來自 1 0點濃度反應數據之抑制百分比值實施分析。自所得曲線 擬合計算絕對IC5〇值。所有例示化合物皆具有小於100 nM 之IC5〇值，IC5〇值之最小顯著比（MSR)為3.6，需聲明的是 外消旋混合物及/或至少一種對映異構體之IC5〇值小於100 nM。例如，實例57外消旋物之IC5〇值為11 nM。此表明本 130205.doc •83- 200908981 發明化合物係有效之Plkl抑制劑。 pHH3(S10)，有絲分裂細胞及DNA含量分析 將HeLa細胞以200個細胞/孔鋪板於96孔Beckman Dickinson BIOCOAT™板中，並在含10% FBS(胎牛血清）之 MEM(最低必需培養基（Minimum Essential Medium))中於 37°C 5% C02中培育24小時。藉由向培養基中添加化合物 (存於0.25% DMSO中）處理細胞，在0.5 μΜ至0.0098 μΜ範 圍内之10點處定量加入。在暴露於化合物中23小時後，例 如，用PREFER™固定劑將細胞固定30 min，隨後用存於 經磷酸鹽缓衝之鹽水（PBS)溶液中之0.1% TRITON® X100 滲透1 5 min。將細胞用PBS洗蘇三次，隨後用50 pg/mL RNAse消化。在4°C下，將以1:500存於含有1%牛血清白蛋 白（BSA)之PBS中之一級抗體（抗磷酸組蛋白H3絲胺酸10)添 加至細胞中。在3次PBS洗滌後，將細胞在室溫下與經 Alexa488標記之二級抗體一起培育1小時。再次用PBS將其 洗滌3次，並隨後在30 min内添加1 5 μΜ破化丙錠以將細胞 核染色。用ACUMEN EXPLORER™ [雷射掃描螢光微量板 細胞儀（Laser-scanning fluorescence microplate cytometer) (由488 nm氬離子雷射激發及多光電倍增管檢測構成），由 TTP LABTECH LTD製造]掃描螢光板以量測磷酸組蛋白 H3、DNA含量及有絲分裂細胞，如藉由DNA縮合所量 測。圖像分析係基於用於在不同子群中鑑別細胞之細胞螢 光信號。pHH3(S10)陽性細胞係藉由在500-530 nm處閾值 上之平均強度來鑑別。在655-705 nm處來自碘化丙錠 130205.doc -84- 200908981 /DNA之總強度用以鑑別單獨細胞（具有2 N至4 N DNA含量 之細胞）及細胞週期中之子群（2 N細胞、4 N細胞）。在575-640 nm處之峰強度用以鑑別用作鑑別4 N細胞中有絲分裂 細胞之標誌之DNA縮合。分析輸出值係每一經鑑別子群之 百分比，％pHH3、％2 N、％4 N、％有絲分裂及總細胞 數。ECm值係藉由將每一輸出值曲線擬合至四參數對數方

• 程使用 ACTIVITY BASE™來確定。所得PHH3(slO)、DNA 含量及有絲分裂之ECm值之最小顯著比（MSR)分別為2.6、 2.4及2.5。例如，實例57外消旋物之1^113(3 10)£(：5()值為 37 nM ’ DNA含量EC5〇值為40 nM且有絲分裂EC5〇值為36 nM 〇 抗增殖分析 化合物對細胞增殖之影響可使用熟習此項技術者所熟知 之細胞及細胞增殖方法予以測定（Robert C. Squatrito等 人，Gynecological Oncology，58，101-105，（1995))° 例 如’可將可自美國典型培養物保藏中心（American Type

Culture Collection)獲得之HCT116細胞以約2000個細胞/孔 接種於96-孔板中並容許在增濕C〇2培育箱中於37。〇下黏附 過夜。在20-24小時培育後’添加經半對數連續稀釋之化 合物並將該等板送回培育箱中。在合適長度暴露時間（例 如’ 72小時）後’利用熟知方法估計細胞增殖。在一種方 法中’向該等細胞板中添加1〇 諸如Alamar Blue™等四 。坐鹽。在暴露於染劑中合適時間後，測定螢光（53〇 11111激 發’ 580 nm發射）。所得〖(^值之最小顯著比（MSR)為3」。 130205.doc •85- 200908981 例如，實例57外消旋物之平均IC5〇值為119 nM (n=2)。此 表明本發明化合物可用於治療包括癌症類型之增殖性病 症0 本發明化合物較佳調配成可藉由多種途徑投與之醫藥組 合物。最佳地，該等組合物係經口或靜脈内投與。該等醫 藥組合物及製備其之方法已為熟習此項技術者所熟知。參 見，你J 如，REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY(A. Gennaro等人編輯，第 19 版，Mack f

Publishing公司，1995)。 式I化合物通常在寬劑量範圍内有效。例如，每天劑量 正常在約1至約10 mg/kg體重、較佳2至65 111§/1^體重範圍 内。在一些情形下，低於上述範圍下限之劑量量可能係過 量的，而在其他情形下可使用更大劑量而不會引起任何有 害副作用，且因此以上劑量範圍並非意欲以任何方式限制 本發明之範圍。應瞭解，該化合物之實際投與量將由醫師 I 根據包括以下之相關情況予以確定：欲治療之病狀、所選 投與途徑、實際投與之化合物、個體患者之年齡、體重及 反應及患者症狀之嚴重程度。 130205.doc * 86 -

Claims (1)

1. 200908981 十、申請專利範圍： 1. 一種下式化合物：

   其中： R1係曱基、曱氧基、羥基、胺基、氯、胺基 基）、二曱基胺基（CVC2烷基）、（(VQ烷基）胺基（CVQ烷 基）、胺基羰基（C]-C3烷基）、1-((ι_胺基）乙基羰基胺基） 乙基、2-(；V-曱基胺基）乙氧基、2_氰基丙_2_基、（2_羥 基-2-曱基）-1-丙基氧基、（2-羥基）乙基胺基羰基甲基、 (1-氟）-(2-胺基）乙基、（i_氟）_(!_曱基）_(2_胺基）乙基、二 氟曱基、1-((2,2-二氟）乙基胺基）乙基、二氟曱基羰基、 三氟曱基羰基、（1-胺基）-(2,2,2-三氟）乙基、（1-甲基胺 基）-(2,2,2-三氟）乙基、（1_羥基）_(2,2,2_三氟）乙基、2_(胺 基）乙氧基、2-(羥基）乙氧基、ι_((Λτ_(2-羥基）乙基）-(#-甲 基）-胺基）(C〗-C2烧基）、4-(經基）六氫吼咬-1-基-甲基、1-(六氫°比嗪-1·基）乙基、2-(羥基）乙基磺醯基、1-(胺基）環 丙基、1-(甲基胺基）環丙基、胺基（環丁基）、丨·胺基環 戊2基環戊綱-2-基、四氣α夫π南-2 -基、η比洛U定-2 -基、 氮丙咬-2-基或（嗎啉_4•基）甲基； 130205.doc 200908981 R係氫或胺基，其條件係：若R2係胺基，R1與R2形成 稠合至苯基之吡咯環；或若Rl係胺基，…與尺2可形成稠 合至苯基之吡咯或吡啶環； r3係氫、氯或氟； R4係氫、甲基、氯或氟； r5係氫、羥基曱基或曱基；且 R6係氫、羥基甲基或曱基； 或其醫藥上可接受之鹽。 2_如請求項1之化合物，其中： R1係胺基（CVC4烷基）、二甲基胺基（Cl_c2烷基）、 (Ci-C2烷基）胺基（Cl_C2烷基）、胺基羰基（C1_C3烷基）、 1-((1-胺基）乙基羰基胺基）乙基' 2_氰基丙_2_基、（2_羥 基）乙基胺基羰基曱基、（1_氟）_(2-胺基）乙基、（1_氟）_(1_ 曱基）-(2-胺基）乙基、二氟甲基、^((2,2—二氟）乙基胺基） 乙基、（1-胺基）-(2,2,2-三氟）乙基、（1-甲基胺基）_(2,2,2_ 三氟）乙基、（1-羥基）-(2,2,2-三氟）乙基、i_((#-(2-羥基） 乙基）-(#-曱基）_胺基）（Cl_C2烷基）、4_(羥基）六氫吡啶小 基-曱基、1-(六氫η比嗪_1_基）乙基或（嗎啉_4_基）曱基； 或其醫藥上可接受之鹽。 3.如請求項1或2之化合物，其中： Rl係胺基（CVCU烷基）、二曱基胺基（Cl_C2烷基）、 (Ci-C2烷基）胺基（Cl_C2烷基）、（2-羥基）乙基胺基羰基甲 基或（嗎啉-4-基）曱基；且 R6係氫； 130205.doc 200908981 或其醫藥上可接受之鹽。 4·如請求項1或2之化合物，其中： R1係胺基（Ci-C4烷基）、二曱基胺基烷基）、 (Ci-C；2烧基）胺基（CrC2烧基）或（嗎琳_4_基）甲基； R3係氟； R4係氟； R5係氫或曱基；且 R6係氫； 或其醫藥上可接受之鹽。 5.如請求項1或2之化合物，其中： 係胺基（CVC4烷基）、二曱基胺基（Ci_C2烷基）或 (G-C2烷基）胺基（CVC2烷基）； r3係氟； r4係氟； r5係氫或曱基；且

   或其醫藥上可接受之鹽 6·如凊求項i或2之化合物，其中…係(胺基）乙基，R2係 氫，R係氟，R4係氟，R5係氫，且R6係氫，或其醫藥上 可接受之鹽。 ^

   如請求項1或2之化合物 氫’ R3係氟，R4係氟， 上可接受之鹽。 其中R1係1-(胺基）乙基，尺2係 R5係曱基’且R6係氫， 或其醫藥 8. 一種醫藥組合物，其含有如 靖求項1至7中任 一項之化合 130205.doc 200908981 物或其醫藥上可接a 按又之鹽，與醫藥上可接受之載劑、稀 釋劑或賦形劑。 9. 一種如請求項1至7 φ “ ^ 主/中任一項之化合物或其醫藥上可接受 之鹽之用、全 ^ ,^ 系用以製備治療哺乳動物癌症之藥劑，該 癌疒係心自由下列組成之群：非小細胞肺癌、口咽癌、 艮道癌、胃癌、黑素瘤、皮膚表皮樣癌、乳癌、卵巢 癌子呂内膜癌、結腸直腸癌、神經膠質瘤、膠質母細 胞瘤甲狀腺癌、子宮頸癌、騰臟癌、前列滕癌、肝母 細胞瘤及非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma)。 10.如請求項1或2之化合物，或其醫藥上可接受之鹽，其係 用作藥劑。 U.如請求項1或2之化合物，或其醫藥上可接受之鹽，其係 用於治療癌症。 130205.doc 200908981 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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