TW200900053A - Medical uses of glucans - Google Patents

Description

200900053 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關於使用聚葡萄糖治療氣喘及肺部功 能異常相關疾病。 5 【先前技術】 聚葡萄糖是一種發現於植物細胞壁中包含不同種 類（heterogeneous group)之葡萄糖聚合物。beta-聚葡萄糖 中之基本結構單元是包含或由0(143)_鍵結之葡萄糖基 10 單元所組成之主鏈。根據來源及分離（isolation)之方式， beta-聚葡萄糖的侧鏈中具有不同程度之分支與鍵結。在 側鏈上鍵結的頻率及型態將決定分子的生物活性。真菌 及酵母物種之beta-聚葡萄糖一般不溶於水，但可以藉由 酸水解溶解，亦或者藉由衍生作用（derivatization)導入如 15磷駄、㉟胺、胺、羧曱基等外來基團於分子而轉為可溶。 在歐洲、亞洲及美國’特別是源自麵包酵母（Bakers， yeast)之beta-聚葡萄糖，長久以來已被應用作為動物飼 料添加劑、人類飲食之供給、傷口之處理及皮膚乳劑配 方之'舌性成分。再者，例證如W002058711申請用以治 20療癌症，表示聚葡萄糖已可應用為功能性藥物試劑。不 同聚葡萄糖在活體内㈤Wv〇)具有非常不同之活性，且通 常很難預測哪—種聚㈣糖對於治療最為有效，不可能 只因為具不同結構之聚葡萄糖已被證實具有某活性，就 可假設特定聚葡萄糖也具活性。 200900053 乱而疋If H炎症性的肺部疾病’其特徵為呼吸困 、複感染、對—般健康造成輕微至嚴重損傷，有時 後甚會導致痛苦死亡。此疾病流行程度在過去幾十Π 明顯的增加，使得卫業化國家中約每1Q人中即有— 有此症狀。“可得治紅功效有限，且無有效的預防 方法。因此，此疾病嚴重衝擊公眾健康，導致龐大且漸 增之相關醫療照顧支出。 10 15

觀察到過去20年間氣喘流行程度極遽增加，同時 特定環境暴露（例如暴露於傳染性疾病）減少，推測特定感 染經由增強保護免疫力發展，而可降低發生氣喘之風 險。這些觀察是「衛生學假說（hygiene hyp〇thesis)」的基 礎，使人聯想到工業化社會中，改善公眾健康的手段^ 疫田與抗生素使用的改善衛生，會降低感染之發生率以 及暴露於環境因子，其是以一種以減緩對抗氣喘之方式 而正常地刺激免疫系統。 目前尚無法治癒氣喘，但可經由小心控制病患之環 境、量測肺部功能以預期發作點及經由藥物治療來管 理。而藥物治療包括降低氣道肌肉自發性痙攣之抗炎症 性藥物’以及增加空氣通道之直徑以使氣體進出肺部之 支氣管擴張藥。 氣喘起因於呼吸黏膜中不良的免疫反應 (dysregulated immune responses)。一 般認為 Th2 (T helper 2)驅動之反應於發病十扮演關鍵性角色，特別因為典型 之Th2胞質分裂有關於：白細胞介素4 (IL4)及IL-13刺 20 200900053 激IgE生長’ IL-4、IL-9及IL-10刺激肥大細胞活性（Mast cell activity);IL_5刺激嗜曙紅細胞累積；及IL_9與几_13 直接刺激黏液分泌物及氣道活動過度，這些全部是氣喘 的典型現象。 5 雖然，一般接受Th2驅動之免疫反應（Th2-driVen immune reactions)有關於氣喘發作及肺部功能異常之相 關疾病’但並不瞭解痛切的發病原因，也不知道非氣喘 個體中之保護機制。雖然所有個體暴露於環境中的過敏 原及其他使過敏之試劑，但只有在某些暴露下氣喘才發 10 作’令人聯想到在決定是否引起疾病性的Th2反應，環 境及基因兩因素均扮演重要角色。 JP 2002335926建議使用聚葡萄糖，其含有治療各 種不同情況（包括HIV、糖尿病及氣喘）之廣泛變化的配 方。此聚葡萄糖為直鏈狀，或是具有鍵結之單一或 15多個葡萄°比喃糖單元且不具1，3-鍵結之側鏈。 【發明内容】 令人驚訝地，本發明人發現氣喘及肺部功能異常相 關疾病可使用特定種類之聚葡萄糖進行治療。 20 ^ P使對於氣喘及相關疾病與狀況已進行廣泛研 九’但沒有發現單一有效且適合病患之方法及物質，可 以用來治療或預防此類疾病。本發明致力於此問題，提 出使用特定聚葡萄糖以預防及/或治療氣喘及肺部相關 疾病。 200900053 因此，在對㈣療氣喘及肺部功能異常相關疾病的 藥劑製造之態樣中’本發明提供使用一種具有一或： beta-1’3側鍵鍵結於beta+3主鏈之聚葡萄糖。 夕 5 另一態樣，本發明提供—種具有-或多beta_u 鏈鍵結於beta_U主鏈之聚葡萄糖，用以㈣氣喘或肺 部功能異常之相關疾病。

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聚葡萄糖具有beta+3主鏈，亦即該主鍵是由 ^a·1，3鍵結之葡萄。比鳴糖單元（beta'3 linked ghxcopyranose)所構成。該聚葡萄糖具有側鏈， 亦即經由beta+6鍵結而接附於魅鏈，其係為一或多 個beta-U鍵結之葡肖吡啥糖單元所構成之側鍵。因此， 該側鏈包括2個或多個典型為3、4、5、1〇或更多之 beta-1，3鍵結的葡萄。比喃糖單元。 因此，聚葡萄糖分子内beta—G/)鍵結 ㈣…外脑叫⑻之糖普鍵結⑽⑽脱‘叫較佳 為低於10%，更佳為低於5%，最佳為低於3%或2%。 聚葡萄糖部分較佳為沒有受化學基團進行衍生作 用（underivatized)，至少，較佳不包括下列基團：硫酸、 醋酸、鱗酸或鱗酸。 本發明中，聚葡萄糖可使用任何可能的服用方式而 進入一主體，但是較佳為口服的方式。 該藥劑可以如飲食療法之一部分來給予。該藥劑可 被製成營養食品、動物飼料、食物、營養食品之一部分、 動物飼料或食物及/或佐藥。含有該藥劑之聚葡萄糖可被 20 200900053 任何動物服用，包括人類、非人類之靈長類及其他哺乳 動物、家禽或家畜動物、鳥及魚，包括畜牧之烏類及如 鹤Μ之寵物鳥類’以及畜牧之魚類及寵物之魚類。明確 的例子包括狗、貓、馬、牛、豬、山羊、鼠類、老鼠及 綿羊。人類是較佳的接受者。 10 15 本發明所使用之聚葡萄糖不是天然整體產物（例如 具有蛋白質及聚葡萄糖於其内之—植物）之—部份。因 此可⑽為6亥聚葡萄糖是加工過的產品，可將其視為已 被刀離出而不再疋其所源自的整體細胞或有機體之一部 分’其較佳為不與自然界可發現之其他細胞壁成分相互 換雜在-起。較佳也可以相較於自时在的結構、及由 自然存在之細胞壁成分中分離出的結構(至少部分），以改 ，化學結構的方式來加卫處理聚葡萄糖。改變的方式通 $包括減少主鏈長度及/或側鏈複雜度或長度。 ,聚葡萄糖可以由各種不同來源而形成。重要及較佳 來源為酵母，例如釀酒酵母（―⑽外™⑽㈣。 酵：菌細胞主要由二糖、葡萄糖、甘露糖及乙醯葡萄 糖月女（N-acetylglucosamine)組成之多賴組成。甘露糖多 醣體鍵結於蛋白質，而形成主要位於外部表面之甘露糖 蛋白（mannoprotein)層。 由酵母所得之聚葡萄糖本質上由beta_u主鏈及 侧鏈所組成’其—般經由鍵結於主鏈結構。因 由酵母而來之beta·聚葡萄糖及產生相似結構之聚葡 萄糖的Ί有機體’通常被描述為beh.Ln/聚葡萄 20 200900053 糖；beta-1，3聚葡萄糖或簡稱為beta-聚葡萄糖。 本發明所使用之較佳聚葡萄糖產物，其含有總細胞 成分百分比之至少75%、較佳為至少80%之碳水化合 物，此碳水化合物主要為聚葡萄糖。 本發明之實用的beta-聚葡萄糖產品之例子包括但 不限於聚葡萄糖產品Imucell，其由 Biothera及 Immiflex(前 Fluflex)所製造，而由 CarePharma Co、Ltd. 發布。 特別地’較佳的beta-聚葡萄糖包括但不限於微粒 10 及可溶的酵母細胞壁聚葡萄糖，如PCT/IB95/00265及EP 0759089所述。根據酵母品種及種類，聚葡萄糖的組成可 上達酵母細胞壁乾燥重量之25%。在由酵母分離聚葡萄 糖過程中’移除甘露糖蛋白之外層及細胞中大部分内部 成分，留下「絲狀」粒子，或是整體聚葡萄糖顆粒，構 15 成beta-聚葡萄糖層。若beta-聚葡萄糖是由自溶解酵母分 離，其細胞壁更嚴重毁壞而呈現摺皺的絲狀粒子。 啤酒酵母（brewers yeast)不同於烘焙酵母，因為它 成長於缺氧的狀態，造成在細胞壁beta-聚葡萄糖的含量 較低。提供聚葡萄糖來源之其他酵母，包括念珠菌屬 20 (Ca«心心sp.)、漢遜酵母屬（iiawsewM/a sp.)、組織胞漿菌 屬（Histoplasma sp.)、先柔菌屬（Kloeckera sp.)、先鲁乘酵 母屬sp.)、畢赤酵母屬sp.)、红酵 母屬sp·)、釀酒酵母屬sp.)、 裂橺菌屬（SchizojphyHum sp.)、裂殖酵母屬 200900053 (ScWzosflccAflrom少cej sp.)、圆酵母屬（Torw/fl sp.)及球擬 酵母屬（rorw/o/m··? sp.)。 如上所述，具有一或多個beta-(l，3)-侧鍵鍵結於 beta-(l，3)-主鏈之聚葡萄糠已呈現出驚人的效果。這些聚 5 葡萄糖也可以源自以下一些習知的聚葡萄糖源。 聚葡萄糖的其他來源為蕈類或其他真菌，例如屬於 鞭毛菌亞門（Mastigomycotina)、 子囊菌亞門 (Ascomycotina)、擔子菌亞門（Basidiomycotina)及半知菌 亞門（Deuteromycotina)(不完美的真菌）。其他適合的真菌 10 包括曲徽菌屬（AspergiHus sp.)、青徽屬（PeniciHium sp.)、核盤菌屬sp.)及小核菌屬（《Sc/eroiwm sp.)。 第三種聚葡萄糖來源為被子植物中之禾本科 (Gramineae)(牧草）之成員，其為商業上重要榖類中胚乳 15 壁之主要成分，這些榖類例如燕麥、大麥、裸麥、高粱、 米及小麥。除這些外，植物並不是較佳的來源。 第四種聚葡萄糖來源為藻類，例如綠藻科 (Chlorophyceae)、輪綠裸·藻科（Charo/?hyceae 五wg/ewop/^ceae)、褐藻科（jP/^eop/zjceae)、石夕藻科 20 CSac/Z/ar/op/iyceae)、金藻科（CArjysop/iyceae)、黃藻科 、曱藻科（/^yrrop^yceae)及紅藻科 少ceae)。海帶多糖（Laminarin)為源自海草之聚葡 萄糖產品的例子。 該聚葡萄糖也可能來自如産域菌屬 11 200900053 (•/Ic/zromobflcierz'izcefle))、農桿菌屬及根 瘤菌屬（及/z/zoMwm (i?MzoZ>acieWace<3e))等菌之細胞壁。例 如糞産域桿菌〇4/ciz/z'ge«e5· /aeca/b)、放射形土壤桿菌 {Agrobacterium r<3i/z*oZ)izcier)及毛根農桿菌（儿 5 rhizogenes)，三葉草根瘤遠（Rhizobium japonicum og R. 、肺炎鏈球菌（(Sirepiococcws· pwewmoniize)與圓柱 藍 I田菌 ，备> ® 藻{Cyanobacteriaceae Anabaena c少//«i/r/ca/)。最後，源自糞鏈球菌（《Sirepiococcws/aeca/b) 之聚葡萄糖，其為起始的聚葡萄糖（Curdlan)，亦可使用 10 於本發明中。 在動物飼料及畜牧工業中，使用有機體之細胞，大 部分為酵母細胞，並直接用其餵食動物。這些產品成為 不同形式與形狀，例如壓縮態、液體、破碎狀、乾燥狀、 活性態、非活性態的細胞，並成為如活性乾燥、立即活 15 性乾燥及非活性乾燥之組合。這些產品大都為使用於如 釀造或烘焙之其他產品製程的細胞殘餘物。 透過衍生作用形成可溶於之beta聚葡萄糖配方， 如聚葡萄糖胺或羧甲基-聚葡萄糖，同樣可為活性產品。 使用製程產品或細胞萃取物達到本發明之功效是 20 方便的。這些產品可為經水解或自溶解細胞、部分或完 全純化之細胞壁。為合適的不同使用類型，所有這些產 品可以在不同形式中得到：液體、半漿料、漿料、微細 粉末、油包覆粉末、微顆粒狀粉末等等。 包含分離的碳水化合物成分可為兩種以上成分（例 12 200900053 如來自酵母細胞壁）之組合產品，例如聚葡萄糖及甘露聚 糖之組成物。 聚葡萄糖可與其他成分混合，例如細胞壁的其他部 分如甘露聚糖，或是非細胞壁之一部分之成分如維他命 5或礦物質，以及其他常用於製藥、營養食品、食品 物飼料及獸醫工業之其他試劑。此類產品之例子已準備 好將聚葡萄糖產品與維他命、礦物質、結合聚葡萄糖之 營養食品及其他抗氣喘試劑組合使用。 除了 1，3鍵結側鏈之外，聚葡萄糖尚可具有一個或 10多個1，6鍵結之側鏈。然而，較佳的聚葡萄糖是經過酸 或酵素、或任何其他適當方法處理，以顯著減低或去除 聚葡萄糖内重複之（1，6)鍵結之葡萄糖分子，或者自然而 然的降低1，6鍵結量。這些（1，6)_鍵結葡萄糖部分主要為 _構形’且通常可發現於beta聚葡萄糖分子之侧鍵 15中。依據聚葡萄糖之來源，(1外鍵結葡萄糖部分之數目 可由一變化到葡萄糖部分之明顯比率。所以具有 主鏈及beta-l，3側鏈之聚葡萄糖成品較佳，其中主鏈及 側鍵係經由單一⑽1，6鍵結而連接-起，A beta-i 6 鍵結不會於除去處理過程中斷開。這些修飾聚葡萄糖分 20子較佳來自釀酒酵母（& cere。 較佳之聚葡萄糖本質上無重複之beu 鍵結葡 萄糖基單元1此’在分支點上之該…鍵結並無提供 重複的」beta 1>6_鍵結之葡萄糖基單元。「本質上無」 是指低於總葡萄糖基單元之2%，較佳低於1%。此產品 13 200900053 之例子如圖1所示，其為支鏈的beta-1，3聚葡萄糖之 ^-NMR-頻譜，其具有<1%之重複beta-l，6鍵結葡萄糖基 ΰα 一 早兀。 某些處理如酵素處理，可能於側鏈中留下高達4 5 個未斷開之beta-1，6鍵結葡萄糖基單元。這些分子同樣 為本質上無重複beta 1,6鍵結葡萄糖基單元。 本發明可使用的聚葡萄糖之形式，可以為單一、萃 取片段（extracted fraction)或不同分子量之二個或多個不 同片段。 10 對於本發明之聚葡萄糖的最佳來源，係為源自釀酒 酵母之細胞壁。當然，本發明中使用較佳來源為Biotec Pharmacon ASA(挪威公司）所製造之可溶酵母產品SBG (Soluble Beta Glucan)。 該產品為未經衍生 （underivatized)且水可溶之 15 beta-l,3/l，6-聚葡萄糖，其以NMR及化學分析鑑定為由 beta-1，3-鍵結之D-葡萄糖聚合物所組成，其含有beta-1，3 及beta-1，6-鍵結D-葡萄糖之侧鏈，其中侧鏈中beta-1,6 部份之數量（不包括位於主鏈/側鏈之分支點），相較於酵 母細胞壁中聚葡萄糖結構是明顯減少的。此組成物之例 20 子如下所示： 組成物 值/範圍 代表值 水 977-983 克/kg 980 碳水化合 18 - 22 克/kg 20 蛋白質 最高1克/kg <1 灰燼 最高1克/kg <1 14 200900053 脂質 最高1克/kg <1

SBG之結構如下所示： CH,OH

η之0 ; R= Η 或（C6H8_10O5)m; m (R1 + R2)=35 至 2000 葡萄糖基單元。 減少beta-( 1,6)-鍵結之葡萄糖基剩餘物，而產生出 本發明之上述較佳聚葡萄糖，可下列方式完成： 10 i)酵素化處理，例如挪威專利號300692所記載： 如美國專利號5,401，727所製造之微粒產品，其中 透過酵素以酵素處理，選擇性地移除beta-l，6鍵結葡萄 糖之側鏈，此酵素專一性的作用在聚-葡萄糖鏈中 beta-l，6-鍵結上。該微粒產品（0.2克）懸濁於40 ml、50 15 mM、pH 5.0之乙酸銨緩衝溶液中，且與20單位之 beta-1,6-聚葡萄糖酶（beta-1,6-glucanase)酵素混合。混合 物於37°C下持續攪拌6小時，且煮沸5分鐘以停止酵素 作用。剩餘酵素處理過之粒子，以無菌蒸餾水利用離心 與再懸浮反覆清洗。此結果產物為支鏈beta-1，3-聚葡萄 20 糖，其beta-1,3-聚葡萄糖側鍵在分支點上以beta-1，6-鍵 15 200900053 結，且在由分支點延伸出之側鏈中本質上無beta-1，6-鍵 結葡萄糖。 關鍵步驟為使用beta-1,6葡萄糖酶酵素，將粒狀聚 葡萄糖於32至40°C下培養3至9小時。 5 ii)甲酸處理：舉例如美國專利號5,401，727所製備 之微粒產品，可懸浮於甲酸溶液中並加熱。冷卻該懸浮 物並移除f酸。 本發明中可溶之聚葡萄糖的分子量大於6000 Da， 較佳範圍約在6 kDa至30 kDA，更佳之範圍約自10 kDa 10 至25 kDa，最佳之範圍約為15 kDa至20 kDa。當在水 溶液中時，該分子可能會參與鏈間的相互反應，當以凝 耀·層析法（gel performance chromatography)分析，其可生 成高達5000kDa之高分子量。 包含有較佳聚葡萄糖之本發明所使用的配方，是可 15 溶beta-聚葡萄糖分子之混合物，其分子量（MW)>6000 Da，並交互作用以提供較高次序構形（a higher order conformation)。例如，具有MW數值>6 kDa之直線 beta-l，3-聚葡萄糖鏈，其較佳MW範圍為6-30 kDa，以 及具beta-l，3鍵結側鏈（從上述主鏈中延伸出）之高分子 20 量beta-1,3-聚葡萄糖（例如MW >15 kDa)之混合物。 該聚葡萄糖之平均分子量較佳為約15-20 kDa，在 約6至約30 kDa之範圍内，較佳為約10至約25 kDa之 範圍内。當在水溶液中時，該分子可能會參與鏈間的相 互反應，當以凝膠層析法分析，其可生成高達5000kDa 16 200900053 之高分子量。較佳紐成物為在水溶液中形成似凝膠外 觀，此呈現出複雜的分子間交互作用。 使用於本發明之另一較佳產品是NBG (Norwegian Beta Glucan) ’ 其為 Bi〇tec pharmacon ASA 生產之粒狀酵 5 母產 〇〇 NBG τζ. 一 來自供焙酵母（jSaccAarowyce·? cereM咖）之產品。該產品是天然未經衍生（指化學修飾 基團）的粒狀beta-Mn，、聚葡萄糖，其以nMR及化學分 析鑑疋為由1)以&-1，3-鍵結之1)_葡萄糖聚合物所組成，其 3有beta-1’3及beta]，6_鍵結D_葡萄糖之側鏈。 ° NBG之化學級成的代表值如下：

SB〇 及 基 15 表本發明所使用之較佳心^、通分子結構如下所示，其代 叫'聚葡萄糖。

17 200900053 R= Η 或(CeHnoOA-w ; n= 35-2000 ； 本發明之該較佳粒狀beta-聚葡萄糖可以下列方法 製備： 藉由在驗及酸中反覆萃取乾燥之釀酒酵母，例如根 5據美國專利號5,4〇1，727(於此合併為參考之資料）敘述之 程序。所敘述之萃取程序移除酵母細胞中細胞質成分， 以及移除含有位於細胞表面之多醣體與蛋白聚糖的甘露 糖。根據此程序所製備之產品，其由 聚葡萄糖所組成，且其粒徑為2·5微米。此微粒狀 1〇以匕-1，3、1^匕-1，6-聚葡萄糖之化學結構，其特徵為83% beta-l，3鍵結葡萄糖、6%鍵結及5% 鍵結之葡萄糖，且其為支鏈點是beta_u，6_鍵結葡萄糖之 beta-l，3-聚葡萄糖鏈。 本發明之粒狀聚葡萄糖具有一分子量範圍為5〇〇〇 15叫至込000,000 Da，較佳範圍為25 kDa至500 kDa，更 佳範圍為150kDa至300 kDa，且最佳約為25〇kDa。 如上所述之粒狀聚葡萄糖是可溶解的，如 W〇/2001/062283所敘述（於此合併為參考資料卜因此， 甲酸可用以減少聚葡萄糖中beta_(1，6)^結葡萄糖基剩 20餘物量，以及用以溶解聚葡萄糖。 “在beta_l，3-聚葡萄糖家族中，其他結構及/或結構 形I可為本技術領域中具有通常知識者根據本發明之 ，示而可^地鑑定或分離1此上料達成高效能產 ⑽之指導方針’但非對更高效能之產品之限制。當實施 18 200900053 時，複雜混合物中之分離結構元素可能已改善目前所舉 例之配方。 本發明使用之beta-聚葡萄糖具有安全、有效、治 療及/或預防的試劑之實用性，不論單獨或輔助使用，藉 5 由刺激或觸發系統之免疫系統、誘發局部炎症性反應 (inflammatory response)，以增進人或動物内之免疫反 應，進而釋放特定生化媒介物（mediators)(例如IL-1、 IL-3、IL-6、IL-17、TNF-α 及 GM-CSF)。對這些 beta-聚 葡萄糖而言，這些專一性效果是獨特的，相對於許多類 10 似之聚葡萄糖則宣稱無法以那種方法刺激或觸發免疫系 統。 不想被此理論所束缚，相信使用本發明之beta-聚 葡萄糖，藉由負向調控（down-regulation) Th2之免疫反應 及正向調控（up-regulation) Thl之免疫反應，調整人及動 15 物之免疫系統。 用於形成聚葡萄糖（包含有使用於本發明之成分） 的適當載體或是輔助劑，包括碳酸鎂、二氧化鈦、乳糖、 L-甘露糖醇與其他糖類、滑石、牛奶蛋白（milk protein)、 明膠、殿粉、維他命、纖維素及其衍生物、動物與植物 20 油、聚乙二醇以及如無菌水、酒精、甘油及多元醇之溶 劑。各種組成成分之pH值及萃取濃度，可根據一般技術 而調整。 獸醫用與醫藥用之組成物，較佳以劑量單位（dose units)方式製備與投藥。在此使用之「劑量單位」之用語 19 200900053 及其合乎文法的同義詞（grammatical equivalents)，是指 物理上適合用於人類或非人類主體作為單位劑量之不連 續單位，透過所欲治療效果，計算出每一單位包含預定 有效量之聚葡萄糖、及生理上可容忍之必須載體如稀釋 5 液或是媒介。 該組成適合實施於一主體之形式，可以只有包括活 性成分，或該組成典型包括聚葡萄糖及一或多個生理上 可接受之載體、一或多個添加之活性成分，或者這些成 f ' 分之某種組合。 10 於此敘述之配方可以藉由任何習知方式或如藥理 學、獸醫科學、動物及人類營養學等領域所發展之方式 製備。這些預備方法一般包括將活性成分帶入載體或一 個或多個其他辅助成分之步驟，然後，若必要或想要的 話，將產品成型或包裝為一所須要之單一或多劑量單 15位。可以使用習知技術，將本發明組成製成受控制或持 續釋放的配方。 f' 本發明所使用之組成中，所包含之活性化合物，其 V 劑量為可改變。聚葡萄糖之作用劑量範圍，可由本技術 領域中一般技術者立即決定。例如，當實施口服時，用 20於人體之作用劑量範圍及有效量在l〇-50〇mg/kgb.w•(身 體重量）/曰之範圍内，較佳為50_300 mg/kg bw/曰:當 實施非口服時，適當之作用劑量範圍在〇.M〇历以“ b.w·/曰範圍内。 本發明之組成可以物品或例如藥片、塗佈藥片、錠 20 200900053 劑、喉片、糖漿或萬能藥、脂質讀、粉末/滑石粉或其他 固體、溶液、乳膠、懸浮液、液體、喷液、凝膝、點滴、 氣霧劑、灌洗器、軟膏、泡泳材料、乳膏'凝膠、聚料、 微膠囊、受控制的釋放配方、持續釋放配方之載體形式 5出現，或者鑑於給藥之預期或較佳模式，任何其他可能 或可利用之物件或載體之形式出現。 對習知本技術之人士而言，顯而易見服用之途徑是 基於任何數量因素包括被治療疾病之種類及嚴重性、被 〇 治療主體之年齡及種類、及類似因素。最佳服用途徑是 10 口服，選擇性以填喂法服用。適合口服之聚葡萄糖配方 (較佳為可溶性聚葡萄糖）包括但不限於水溶性或油性之 懸汙液、水溶性或油性之溶液、或乳狀液。這些配方可 以藉由任何方式服用，其包括但不限於軟性明膠膠囊。 適& 口服用之本發明醫藥組成，其液體配方可以液體形 15式或乾燥產品（預期於使用前先將其與水或其他媒介物 而復原）之形式製造、包裝及銷售。關於微粒產品，可使 〇 用其他方式實施，其包括但不限於膠囊、藥片、粉末、 、田粒叙劑、點滴、栓劑、或任何其他適合微粒產品之 用法方式。其他較佳之服用形式為鼻部服用、吸入或氣 20而發作時任何其他易於使用之應用。不論選擇何種途 徑，較佳為可達成系統性之效果，且以此目的而決定服 用劑量及方式。 當症狀出現或甚至未出現時，可以間歇性地重複執 行治療。於預期刺激前兩星期及/或此刺激後數星期間， 21 200900053 可適當實施該成分。對於慢性症狀之治療，亦可連續使 用。 可單獨提供該聚葡萄糖，或是與其他藥劑組合而提 供有效組合。因此，於另一實施例中，係提供產品包含 5 (a)如上述之聚葡萄糖、及（b)用於治療氣喘或肺部功能異 常相關疾病之第二活性試劑’作為用於治療氣喘或肺部 功能異常相關疾病之同步、分別、或接續使用之組合調 劑。

因此’可以使用早獨之聚葡萄糖、兩或多種聚葡.萄 10 糠組合、聚葡萄糖與另一醫療物質之組合（若適當的話）。 關於包括兩或多種聚葡萄糖之組成物，可使用源自相同 或不同物種、或源自相同物種但以不同方法製造之不同 聚葡萄糖。為了治療相關症狀，熟練之人士或醫師能夠 選擇可與聚葡萄糖一起使用之醫療物質。適當之醫療物 15 質之例子為（但不限於此）如支氣管擴張藥之舒緩藥物、短 效（short-acting)、選擇性beta2-腎上腺素能受體促效藥， 例如右旋沙丁胺醇（albuterol US AN)、左旋沙丁胺醇 (levalbuterol)、間經舒喘寧（terbutaline)及比托特羅 (bitolterol)，腎上腺素促效藥（adrenergic agonists)，例如 20 異丙托溴按（ipratropium bromide)、 色甘酸鹽 (chromoglycate)治療；預防藥物，如吸入性皮質類固醇 (inhaled corticosteroid)、包括環索奈德（ciclesonide)之吸 入性糖皮質激素、倍氯米松（beclomethasone)、布地縮松 (budesonide)、氟尼縮松（flunisolide)、輔舒酮優 I 22 200900053 Π

(fluticasone)、莫米松（mometasone)、及敦經潑尼松龍 (triamcinolone)。白三稀（Leukotriene)改性劑（孟魯司特 (montelukast)、扎魯司特（zafirlukast)、半水化合物 (pranlukast)及齊留通（zileuton))。肥大細胞（Mast cell)穩 5 定劑（cromoglicate (色甘酸（cromolyn))及 nedocromil)、解 痙劑（Antimuscarinics)/抗副交感神經作用劑 (anticholinergics)(藥薯（ipratropium)、oxitropium 及噻拕 溴铵（tiotropium))、甲基黃°票0令類生，物驗 (Methylxanthines)(茶驗（theophylline)及氨茶驗 10 (aminophylline))、抗組胺劑（Antihistamines)、IgE 單克隆 抗體（Omalizumab)、氨甲0業0令（Methotrexate);以及互補 藥物治療之可供選擇與不同之藥物。 一般可對於動物在一日内數次頻繁地施用beta-聚 葡萄糖，或其可以較低頻率如一曰施用一次。舉例而言， 15 此治療取決於氣喘或相關疾病之種類、症狀之嚴重性、 以及各別患者之狀況。聚葡萄糖治療可密切相關於任何 其他治療方法，且可以在任何其他藥劑之前、同時、或 之後施用。 為了在氣喘發作前事先預防氣喘症狀，或是作為氣 20 喘已經發作後之治療，可以使用聚葡萄糖或如本發明所 述之兩或多種聚葡萄糖之組成。因此，在此使用之「治 療」包括預防疾病之治療，亦即，單獨發作或襲擊以及 有疾病發作風險之主體此兩者之預防藥。預防疾病之治 療通常是相關於一次襲擊/發作（episode)。「治療」包括 23 200900053 5 η 10 15 對於一或多個症狀，較佳多於一症狀，或氣喘或肺部功 能異常相關疾病之風險因子，有可量測及有益處之改 善。不論是經預期（例如於預防疾病治療情況下）或是歷史 疾病呈現，較佳從一或多個症狀，更佳由病患及/或治療 醫師之結論’改善氣喘或相關疾病。 「氣喘」之用語是指慢性或再發性之呼吸系統的炎 症性症狀，其中氣道對各種刺激物反應增強，其特徵為 支氣官几奮-反應、發炎、產生增加之黏液以及間歇的氣 i«阻塞通吊疋對於一或多種觸發物（triggers)的反應。 例如當暴露於環境中的刺激物（或過敏原）、冷空氣、運動 或費盡力1、或情緒上的壓力時，這些事件可觸發急性 發作，亦包括職業性氣喘。氣喘的症狀可為輕微甚至到 威脅生命的範圍内。治療通常包括改善上述之一或多個 症狀’藉由在支氣管發炎或黏液產生以及朝向更正常的 一般性呼吸行為之趨勢。

本發明最重要之優點係改善支氣管氣喘，特別是關 於減少降低肺部發炎及/或氣道巾純絲阻抗。實施例 提供這些參數之量測規則。 20 肺部功能異常相關疾病」包括患者呈現連續或偶 爾發生肺部功能減弱的這些疾病，—般上是關於限制空 乳流動及/或支氣管發炎。這些相關疾病包括肺部疾病， ，如但不限於騎性域管料霉病、（慢性）伴隨過敏之 支氣管炎以及肺氣腫。 本發明亦提供一種治療一 主體氣喘或肺部功能異 24 200900053 常相關疾病之方法，其包括施用如上述有效劑量之聚葡 萄糖通常該主體是一動物’較佳為被診斷有氣喘戋處 於氣喘（或所謂的相關疾病）風險之人類。 本發明亦提供一種套件或實施裝置’其包括於此所 5 述之聚葡萄糖、以及描述將該聚葡萄糖施予人類或其他 動物之資訊材料。該裝備或實施裝置可有含有該聚葡萄 糖之隔間。在此所使用之「資訊材料」包括但不限於刊 物、紀錄、圖形、或是任何可用來傳達本發明組成指定 用途之效用的其他表現媒介。此實施裝置之例子包括但 10不限於所有種類的吸入器、喷霧器及乾粉裝置。 因此’在另一較佳實施例中，本發明提供一種吸入 器、噴霧器或乾粉裝置，其包括一於此敘述之聚葡萄糖， 而5玄聚葡萄糖是以適合病患自行施用以治療或預防氣喘 襲擊。這種裝置通常是設計為嘴部使用。因此較佳裝置 15 3有可溶性液體或乾粉形式之聚葡萄糖。液體可處於壓 力下’且裝置可具有一元件讓空氣或氧氣通過預定量之 聚葡萄糖’而使患者可將其吸入。 「一有效劑量」是指可有效改善疾病症狀、或改 ° /α療、防止、延緩疾病開始，或者抑制疾病持續之 20 化合物量。由主治醫師或獸醫決定最終適當量及劑量用 法。「有效總量」之該活性物質，可與載體一起組合而 產生單一劑量’且其取決於治療之主體以及施用的特定 模式而改變。 包括例如刊物及專利之各式文獻陳述此一揭露，所 25 200900053 有這些文件的相關部分於此合併為參考資料。任何所提 供的相關文件之引用不可被推斷為本發明之相關先前技 術。再者，本文件中任何用語之意義或定義與合併參考 >料文件中之任何用語之意義或定義有衝突時，是適用 5 本文件中所設定之意義或定義。 於此使用於本發明中之各種組成部分之成分是參 考其商業名稱。本發明人於此並非意欲限定為一特定商 業名稱下之物質。商業名稱引用之等效的物質（例如，在 不同名稱或參考號碼下之由不同來源所得到的那些）可 10 以在本發明中替換及利用。 所述之成分可包括、本質上由、或由任何所敘述之 元素所組成。 本發明之再一態樣係於治療免疫疾病藥劑之製品 中提供$葡萄糖及上述配方之使用，&免疫疾病之特徵 15為人體免疫反應被指向直接對抗本身的組織，導致長時 間的發灭以及後續的組織敗壞。這些疾病包括了發病之 根本因素是Thl/Th2反應典型（reacti〇n patterns)向更顯 著的Th2_典型偏移的所有疾病。這些免疫疾病之例子 為，但不限於，腹腔的疾病、克羅恩氏病（Cr〇hn,s 2〇 dlSease)、胰臟炎、系統性紅斑性狼瘡（systemic lupus erythematosus)'修格連氏症候群、橋本氏曱狀腺炎、及 其他内分泌病。多樣硬化症也是這群組的一部份。同時 提供醫學治療之等效方法。 本發明之另一較佳態樣係於治療過敏性鼻炎 26 200900053 fever)藥劑之製品中提供聚葡萄糖及上述配方之使用。同 時提供醫學治療之等效方法。此治療背景之聚葡萄糖之 效力呈現在以下之實施例。 本發明之再一態樣係於治療過敏症藥劑之製品中 5提供聚葡萄糖及上述配方之使用。過敏症包括黴菌孢 子、藥物、食物（特別是堅果、芝麻、海鮮、蛋、醬油、 牛奶小麥及玉蜀黍）、昆蟲的刺毛、laytex及動物產品（特 別是動物毛髮及垢屑，蟑螂蕈體冠（C〇ckr〇ach calyx)及塵 ， 蹣排泄物。同時提供醫學治療之等效方法。 10 【實施方式】 以下實施例係為了說明本發明以及教導本技術領 域中通常知識者製造及使用本發明。這些實施例不可以 任何方式限制本發明。以下實施例及圖示中將詳細敛述 15 本發明： 實施例1 # 年紀五星期之AKR老鼠，每日以口服聚葡萄糖 預先治療（pre-treated)，每週連續5日，並於敏化作用前 持續4週-微粒狀img、微粒狀6mg、水-可溶img、或 2〇水·可溶6 mg。他們經歷敏化作用及挑戰階段（Challenge phase)持續治療。虛擬治療的老鼠接收等體積的水。未試 驗之老鼠作為負控制。然後，於7日内兩次使聚葡萄 糖治療過之老鼠與虛擬治療的老鼠對即蛋白素（〇va)及 氫氧化鋁腹腔内地過敏化，接著於7_ί〇日内施以4組 25 OVA之氣管内試驗。然後使用支氣管肺泡灌洗液 27 200900053 及計算不同的量。 虛擬 微粒狀 微粒狀 6mg 可溶的 Img 表2 BALF中的絕對白血球 總數ΪΖϊ^ϊο^ΤτΙχΤο1 5χΐο4 ϊΤΠΓδχΤο1 11-14 χΤο^ΤΤΤχίο4 3.8xl〇i~±~~~CL37xl04 BALF中嗜伊紅血球 之平均百分率20Τ33%Τ77Ϊ% ~"3~2%ΤΧ9%； 1.3% ± 0.5% 2.1% ± 1.5%

可溶的 未試驗_ 2·2χΐ〇^ΌίΤ^ 6.2% ± 4.2% 5 虛擬治療的老鼠之BALF中的絕對白血球總數 (Absolute leukocyte counts) (15.4xl04± 1.72xl〇4 P<〇.〇〇l) 相較於未試驗之老鼠（2·2χ104± 0.2xl04 PC0.001)是增加 的。所有治療群組之BALF中絕對白血球總數相較於虛 擬治療的老鼠是減少的（微粒狀lmg 5χΐ〇4±1,18χ1〇4、

ρ<0·001 ;微粒狀 6mg 11.4 xlO4 ± 1.8xl04、P<0.001 ;可 溶的 lmg 3.8x104 ± 0.37xl04、P<〇.001 ;可溶 6mg 4xl04 ± 1.5xl〇4 <p〇.001)。虛擬治療的老鼠balF中嗜伊紅血 球之平均百分率相較於未試驗組是上升的（0.1 % 士 〇·〇1 %、P<〇.〇〇8)。治療的老鼠BALF中嗜伊紅血球之平 均百分率相較於虛擬治療的老鼠是下降的（微粒狀lmg 3·2〇/〇 ± 2.9%、P=〇.〇ll ;微粒狀 6mg 1.3% ± 0,5% Ρ=0·006 ;可溶的 6mg 6,2% ± 4.2%、P =0,17)。 實施例2 28 15 200900053 年紀五星期之AKR老鼠，每日以口服β-聚葡萄糖 預先治療（pre-treated)，每週連續5曰，並於敏化作用前 持續4週，微粒狀1 mg、微粒狀6 mg、水-可溶1 mg、 或水-可溶6 mg。他們經由敏化作用及挑戰階段（challenge 5 phase)連續治療。虛擬治療的老鼠接收等體積的水。未試 驗之老鼠作為負控制。然後，於7日内兩次使β-聚葡萄 糖治療過之老鼠與虚擬治療的老鼠對卵蛋白素（OVA)及 氫氧化鋁腹腔内地過敏化，接著於7-10日内施以4組 OVA之氣管内試驗。紀錄氣道壓力時間指標（ΑΡΤΙ)。於 10 最終氣管内（i.t.)試驗後72小時，藉由量測靜脈内（i.v.) 乙醯膽素（Ach)刺激後氣道内壓力變化而決定氣道之反 應性。簡言之，老鼠以戊巴比妥纳（sodium pentobarbital)(80 mg/kg)麻醉，並經由一導管套管（18 gauge)以 RSP 1002壓力控制人工啤吸系統（IKent 15 Scientific Corporation、CT)並酉己合空氣呼吸容量（0.2 ml) 於每分鐘120之速率下使其吸收氧氣。藉由靜脈注射 队队队：^’^，：^’-六甲基-二溴化-1，10-癸銨（25 11^/]^)而提 供肌肉麻痒。經由氣管内之一接點以壓力轉換器量測氣 道壓力。於建立穩定氣道壓力2分鐘後。靜脈注射Ach (50 20 pg/kg)。於觀察及紀錄氣道壓力之變化，並以呼吸資料取 得系統之軟體 VENTP (Kent Scientific Corporation、CT) 而產生肺部參數。計算氣道壓力峰值的時間積分變化， 其為氣道壓力-時間之指標（ΑΡΤΙ ;每秒公分H20)，並作 為氣道反應性之量測。 29 200900053 表 3 ΑΡΤΙ 虛擬 517.98 士 27.65 微粒狀1 mg 267.86 ± 27.80 微粒狀6 mg 284.36 ± 18.76 可溶的1 mg 210.46 ± 13.92 可溶的6 mg 524.25 ± 98.35 未試驗 145.74 ± 24.76 在虛擬治療的老鼠（517.98 ± 27.55、P <0.001)之 5 ΑΡΤΙ相較於未試驗之老鼠（145.74 ± 24.76、P <0.001)是 增加的。所有β-聚葡萄糖治療之老鼠（微粒狀lmg 267.86 士 27.80、P <0.001 ;微粒狀 6 mg 284.36 ± 18.76、P <0.001 ;可溶的 1 mg 210.46 ± 13.92 P <0.001)相較於虚 擬治療的老鼠都具有下降的ΑΡΊ1，只有水-可溶聚葡萄 10 糖6 mg治療的老鼠（524.25 ± 98.35 P1)例外。 實施例3 年紀五星期之AKR老鼠，每日以口服β-聚葡萄糖 預先治療（pre-treated)，每週連續5曰，並於敏化作用前 持續4週，微粒狀1 mg、微粒狀6 mg、水-可溶1 mg、 15 或水-可溶6 mg。他們經由敏化作用及挑戰階段（challenge phase)連續治療。虛擬治療的老鼠接收等體積的水。未試 驗之老鼠作為負控制。然後，於7日内兩次使β-聚葡萄 糖治療過之老鼠與虛擬治療的老鼠對卵蛋白素（OVA)及 氫氧化鋁腹腔内地過敏化，接著於7-10日内施以4組 20 OVA之氣管内試驗。 30 200900053 以卵蛋白素（OVA)人工培養鼠科動物之脾細胞，且 以抗體原試驗（Elisa)評估其表面之細胞介素程度 (cytokine levels)。源自以1 mg可溶於水SBG治療的老 鼠之脾細胞相較於無SBG之虛擬治療的老鼠，其IL5之 5 製造是下降的（199,67 pg/ml 對 297,86 pg/ml、p<0.01)。 源自以1 mg粒狀的NBG治療的老鼠之脾細胞相較於有 OVA刺激之虚擬治療的老鼠，其IL5之製造是下降的 (134,85 pg/ml 對 297.86 pg/ml、ρ<0·01) ° 彳目似地，源自 以兩beta-聚葡萄糖配方治療的老鼠之脾細胞相較於虛擬 10 治療的老鼠之脾細胞，呈現出下降的IL-13之製造。 實施例4 年紀五星期之AKR老鼠，每日以口服β-聚葡萄糖 預先治療（pre-treated)，每週連續5日，並於敏化作用前 持續4週，微粒狀1 mg、微粒狀6 mg、水-可溶1 mg、 15 或水-可溶6 mg。他們經由敏化作用及挑戰階段（challenge phase)連續治療。虛擬治療的老鼠接收等體積的水。未試 驗之老鼠作為負控制。然後，於7日内兩次使β-聚葡萄 糖治療過之老鼠與虛擬治療的老鼠對卵蛋白素（OVA)及 氫氧化鋁腹腔内地過敏化，接著於7-10日内施以4組 20 OVA之氣管内試驗。 以卵蛋白素（OVA)人工培養鼠科動物之脾細胞，且 於抗體原試驗評估其細胞介素程度後72小時，收集所培 養之表面。對OVA刺激之細胞介素程度，藉由減去源自 各自單獨培養基（medium)之細胞介素程度而標準化。 31 200900053 相較於虛擬治療之群組，Ρ-BG及S-BG分別降低 IL-4 82%及36%，分別降低IL-5 56%及54%，以及分別 降低IL-13 81%及96% (圖11)。於Ρ-BG或S-BG治療之 群組與虛擬治療之群組間，IL-10、IFN-γ及TGF- β程度 5 沒有明顯差異（圖11)。 實施例5 年紀五星期之AKR老鼠，每日以口服β-聚葡萄糖 預先治療（pre-treated)，每週連續5日，並於敏化作用前 f 持續4週，微粒狀1 mg、微粒狀6 mg、水-可溶1 mg、 10 或水-可溶6 mg。他們經由敏化作用及挑戰階段（challenge phase)連續治療。虛擬治療的老鼠接收等體積的水。未試 驗之老鼠作為負控制。然後，於7日内兩次使β-聚葡萄 糖治療過之老鼠與虛擬治療的老鼠對卵蛋白素（OVA)及 氳氧化鋁腹腔内地過敏化，接著於7-10日内施以4組 15 OVA之氣管内試驗。 藉由使用定量即時PCR估算細胞介素mRNA程 度，而決定BG對不同老鼠群組之肺部的細胞介素圖形 (} (cytokine profiles)之效果（圖12)。虛擬治療群組之IL-4、 IL-5及IL-13 mRNA程度相對於標示為Th2中間反應（Th2 20 mediated response)之未治療群組，分別增加3、1及7。 相反的，在兩BG-治療之群組中，Th2 mRNA程度，特 別是11-4與IL-13程度，相較於虛擬治療群組是下降的。 在Ρ-BG及S-BG群組中，11-4分別降低55%及48%。在 Ρ-BG及S-BG群組中，IL-13分別降低40%及53%。然 32 200900053 而，在治療群組與虚擬治療群組間，IL-10、IFN-γ及TGF-β之記錄程度沒有明顯差異。 實施例6 年紀五星期之AKR老鼠，每日以口服β-聚葡萄糖 5 預先治療（pre-treated)，每週連續5曰，並於敏化作用前 持續4週，微粒狀1 mg、微粒狀6 mg、水-可溶1 mg、 或水-可溶6 mg。他們經由敏化作用及挑戰階段（challenge phase)連續治療。虛擬治療的老鼠接收等體積的水。未試 f 驗之老鼠作為負控制。然後，於7日内兩次使β-聚葡萄 气 . 10 糖治療過之老鼠與虚擬治療的老鼠對卵蛋白素（OVA)及 氫氧化鋁腹腔内地過敏化，接著於7-10日内施以4組 OVA之氣管内試驗。 就在 ΑΡΤΙ前，經由後眼窩穿刺（retro-orbital puncture)取得大約100μ1的jk液。藉由ELISA 決定電 15 漿特定抗原（antigen-specific)IgE、IgGl 及 IgG2a 程度。 在 BG治療與虛擬治療群組之間，對於特定 OVA(OVA-specific)之 IgE、IgGlc 或 IgG2a 程度並沒有 £ "ι 統計學上明顯差異（圖13)。 上述之例子證實，NBG治療及SBG治療兩者均明 20 顯地降低典型支氣管氣喘的過敏性肺部發炎，並且明顯 地降低典型支氣管氣喘的氣道空氣流動阻抗。 增加的氣道阻抗（亢奮活性）是支氣管氣喘及相關 疾病的定義要素。我們的結果證實了可溶性或粒狀（微粒 狀）之βΐ-3聚葡萄糖降低了亢奮活性，並因此出現對於氣 33 200900053 喘狀況之有效的治療/預防，其可能是經由肺部中免疫反 應由Th2種類向Th種類方向移動所致。精確的機制並未 被建立起來。然而，可以知道的是，β1-3聚葡萄糖刺激 單核噬菌細胞系列的細胞而產生一系列之細胞介素，其 5 可能影響淋巴細胞產生11-4及IFN-γ，其對於TlM/Th平 衡是關鍵的。 粒狀/微粒狀β1-3聚葡萄糖在劑量測試與建立一預 期的劑量-效果關係是均有效的。然而，可溶的β1-3聚葡 ρ 萄糖在低劑量-時具有較強的效果-這令人聯想到一較窄 10 的有效劑量範圍，或是在較高濃度下抑制物質之刺激。 這些例子呈現出S-BG及P-BG治療抑制了 Th2反 應，而對Thl或T調節（T regulatory)(IL-10)或細胞介素 -3 (TGF-β)無明顯的效應。此發現令人想到S-BG及P-BG 對AHR及肺部發炎的預防效果是相關於Th2反應之負向 15 調節（down-regulation of Th2 responses)。然而，BG 對於 特定 OVA 免疫球蛋白類（OVA-specific immunoglobulins) 不具統計學上明顯的效果，IgE、IgGl或IgG2a指出β- { 1 聚葡萄糖之主要效果是在Τ-細胞上。 實施例7 20 在以下的方案中測試BBG(如於此定義之NBG相 同之聚葡萄糖產品） A: BBG對鼻黏液分泌物之抑制效果 方法： 曱苯 -2,4- 二異 氰酸酯 (Toluene-2,4-diisocynate，TDI)-過敏化之天竺鼠作為一 34 200900053 過敏性鼻炎之原型。在口服BBG後，量測鼻黏液總量。 、”α果與讨論·攝取BbG群組之鼻黏液總量是比控 制群組低於66.7%(圖2)。 β ·西洋杉花粉誘發之過敏性鼻炎症狀之改善 5 方法：對西洋杉花粉過敏之獵犬服用BBG經57 曰檢測血液中IgE程度及皮内反應（intracutaneous reaction) ° 結果與討論：服用期間，血液中IgE程度降低（圖 3)。56日之後，達成約平均值30%之下降（圖4)，168 1° 日之後，大約下降60°/。》此結果顯示bbg對過敏反應的 改善。 實施例8 進行t葡刼糖對過敏性鼻炎（hay fe ver)效果之研 九本研九中’ 43位原發病患被施予500 mg之微粒狀聚 15葡萄糖。原發病患服用125 mg的產品，一曰4次（總共 500 11^/日）1)_〇.。研究總數之一半服用此產品18曰（群組 A) ’而其餘服用此產品37日（群組B)。基於4個參數的 自我評估（一主觀的量測所得之“分數”）作為鼻黏膜狀 況、打噴嚏的頻率、對眼發癢之效果以及鼻部呼吸能力 20 之评估，以及另5項一般參數，如物理狀況、食慾、睡 眠，此兩群組間存在顯著的差異。整體而言，大約整體 研究總數（即兩群袓之結合）的一半聲稱有效。此研究所得 之分數是所有參數的總結，其意義為分數1.00表示原發 病患仍然為症狀所苦惱，相對於分數0·00則顯示原發病 35 200900053 患在服用聚葡萄糖之後，沒有另外的症狀。 這些研究得結果呈現於圖5-10中。 【圖式簡單說明】 5 圖1係具有<1%重複beta-l，6-鍵結葡萄糖基單元之 支鏈beta-l，3-聚葡萄糖的1H-NMR圖譜。所觀察到不同 之化學平移如下表1所示： 表1 化學平移 (ppm) 標示 評註 5,00 HI RT(a) 還原端（reducing terminus (RT))之a-端基異構體 (a-anomer)中之HI 4,54 HI BC (1-3)-鍵結之葡萄糖基重 複單元（GRUs)之主鏈中 的H1 4,39 HI NRT + HI RT(P) 還原端（RT)之β-端基異構 體中之非還原端（NRT)中 之Η1 4,27 HI (1-6) SC (1-6)-鍵結之側鏈中之Η1 4,03 H6 (1-6) SC (1-6)-鍵結之側鏈中之Η6 3,72 H6 BC (1-3)-鍵結之葡萄糖基重 複單元（GRUs)之主鏈中 之H6 3,48 H3 BC + H6' BC (1-3)-鍵結之葡萄糖基重 複單元（GRUs)之主鏈中 之H3及 3,30-3,24 H2 BC + H4 BC + H5 BC (1-3)-鍵結之葡萄糖基重 複單元（GRUs)之主鏈中 36 200900053 之 H2、H4及 H5 3,09 H2 NRT 非還原端（NRT)中之H2 3,02 H2 (1-6) SC (1-6)-鍵結之側鏈中之H2 2,54 DMSO 溶劑峰 圖2係聚葡萄糖（BBG)對鼻黏膜之影響圖。 圖3係聚葡萄糖（BBG)隨時間對於血液中IgE量之 影響圖。 5 圖4係聚葡萄糖（BBG)隨時間對皮内反應 (intracutaneous reaction)之效果圖。 圖5係服用聚葡萄糖（NBG)對於鼻黏膜狀況之效果 圖。 圖6係服用聚葡萄糖（NBG)對於打喷嚏頻率之效果 10 圖。 圖7係服用聚葡萄糖（NBG)對於眼部發癢之效果 圖。 圖8係服用聚葡萄糖（NBG)對於鼻部呼吸能力之效 果圖。 15 圖9係服用聚葡萄糖（NBG)對於綜合過敏性鼻炎中 所有四項症狀之總效果圖。此外花粉存在之特定時期有 獲得並包含於圖中。 圖10係對於所有9項主觀症狀調查表之結果圖 (9%無效，49%有效，42%不確定）。 20 圖11係以聚葡萄糖（SBG及NBG)治療之年紀五星 期之AKR老鼠，相對於虛擬治療及未試驗之老鼠，藉由 37 200900053 ELISA所決定之產生各式細胞介素（cytokine)之效果圖。 圖12係以聚葡萄糖（SBG及NBG)治療之年紀五星 期之AKR老鼠，相對於虛擬治療及未試驗之老鼠，藉由 定量即時PCR所決定之各式細胞介素之肺部mRNA程度 5 之效果圖。 圖13係以聚葡萄糖（SBG及NBG)治療之年紀五星 期之AKR老鼠，相對於虛擬治療及未試驗之老鼠，藉由 ELISA所決定之特定OVA血清、IgE、IgGl及IgG2a程 度之效果圖。 10 【主要元件符號說明】 無 38

Claims (1)

1. 200900053 十、申請專利範圍： 1. 一種聚葡萄糖，用以治療動物之氣喘及肺部功 能異常相關疾病，其具有一或多beta_(1,3)側鏈鍵結於一 beta-(l ,3)主鏈。 5 2.如申請專利範圍第1項所述之聚葡萄糖，其中 該聚葡萄糖之來源係選自由酵母、冑、真菌、海藻以及 細菌所組成之群組。 η 3.如申請專利範圍第2項所述之聚葡萄糖，其中 該酵母係為釀酒酵母（Scc/larim}；ees eerevWae)。 10 4·如申請專利範圍第1至3項中任一項所述之聚 葡萄糖，其中該聚葡萄糖係為至少部分分離自其他細胞 壁成分。 5·如申請專利範圍第丨至4項中任一項所述之聚 葡萄糖’其中該聚葡萄糖相較於其自然存在結構，其化 15 學結構已改變。 〃 # * 6·如申凊專利範圍第1至5項中任一項所述之聚 葡萄糖’其中該聚葡萄糖係為未經由化學基團進行衍生 作用（underivatized)。 + + 7·如申凊專利範圍第1至6項中任一項所述之聚 2〇葡萄糖，其中該聚葡萄糖本質上無重複之beta-(l6)_·士 糖基單元。 、，J规、〜 8.如中請專利範圍第項中任—項所述之聚 葡萄糖，其中該聚葡萄糖係為微粒形式。 9·如申請專利範圍第項中任-項所述之聚 39 200900053 葡萄糖，其中該聚葡萄糖是可溶解的。 10.如申請專利範圍第8項所述之聚葡萄糖，其中 該聚葡萄糖之分子量在15〇 kDa至300 kDa之範圍内。 11_如申請專利範圍第9項所述之聚葡萄糖，其中 5 該聚葡萄糖之分子量在6 kDa至30 kDa之範圍内。 12.如申請專利範圍第丨至丨丨項中任一項所述之 聚葡萄糖’其中該動物為人類。 13·如申請專利範圍第1至12項中任一項所述之 聚葡萄糖’其中該聚葡萄糖係口服地給予。 ° 14.如申請專利範圍第13項所述之聚葡萄糖，其 中該聚葡萄糖係提供每日每公斤重人體1〇至5〇〇 mg之 劑量範圍内。 15.如申請專利範圍第1至14項中任一項所述之 聚葡萄糖，其中該氣喘係為支氣管氣喘。 15

   ^ 16.如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之 聚葡萄糖，其中該肺部功能異常相關疾病係選自由過敏 =支氣官肺曲霉病、具過敏元素之慢性支氣管炎以及肺 氣腫所組成之群組。 -種治療動物之氣喘友肺部功能異常相關 病之方法，包括供給該動物一有效劑量之前述主專 範圍中任—項所述之聚葡萄糖。 月 18. 一種套件或服用裝置，其包括前述申請專利 二：：項所述之聚葡萄糖、及描述將該聚葡萄糖施 類或其他動物之資訊材料。 20 200900053 19· 一種吸入器、乾粉裝置之喷霧器，其係包含有 刖述申請專利範圍中任—項所述之聚葡萄糖。 =:二產：’其包括㈤一前述申請專利範圍中任 一用心療氣喘或肺部功 ^異常相關疾病之二次活性劑’其為同時、分開或接】 :用於治療氣喘或肺部功能異常相關疾病中而結合=