TW200844079A - Synthetic ion channels - Google Patents

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200844079 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 Γ Ο 本文中提供的為可形成脂f雙層或細胞膜中之離子通道 之自㈣化合物、包含該等化合物之離子通道形成組合 物包3 β亥等化合物之醫藥組合物及製造及使用該等化合 物及”且D物之方法。本文中亦提供形成脂質雙層或細胞膜 中之合成陰離子通道之方法。本文中進-步提供處理、防 止及/或管理與氯離子通道之功能障礙有關之疾病的方 法及猎由使用本文中所揭示之自組裝化合物調控脂質體 及活細胞之膜上的氣離子之流動之方法。 、 【先前技術】 膜或脂#雙層上之離子輸送為重要的生物過程。選 擇性地調節離子流動之離子通道涉及許多生理過程，兮等 生理過程包括(但不限於)神經元信號傳輸、肌肉收缩、心 也官功能及免疫反應。天然離子通道可為整體的膜蛋白或 更通常地為通過脂質雙層緊密地填充於充水微孔周圍之若 干蛋白質之組裝。天麸離；ϋ ^ 心. U子通道之兩個關鍵性能為離子選 擇性及選通。離子選埋料及 、擇丨生係私通道選擇性地僅准 子物質流過其微孔，而選通伤扣、s * 寸杲二離 係扣通道打開及關閉之機制。 道通U生物膜中之蛋白質微孔，其允許陰離子 /口者其電化學梯度被動脖埤 ^ ^ κ ^雖；、、;、此等通道可傳導諸如碰 離子或硝酸根離子之其他陰離子 /、 氯離子通道，因為氣離子… 4通道“被稱為 此為大多數環境下Q㈣離子且因 127863.doc 200844079 氯離子通道之功能包括（但不限於）離子内平衡、細胞體 積凋即、跨上皮輸送，及電興奮性之調節。因此，氯離子 通道之功能障冑已薇含於與上述所敍述之功能之損傷有關 的一些病症及疾病中。該等人類疾病之一些非限制性實例 ’ 包括囊腫性纖維化、巴特氏（Bartter)綜合症、丹特氏 w (Dem)疾病、遺傳腎結石疾病、先天性肌強直、貝克 (Becker)綜合症、癲癇症、卵黃狀黃斑營養不良、過度驚 〇 嚇症、青少年肌陣攣性癲癇症及骨質石化症。因此，氯離 子通道已變成用於藥物發現之顯著目標。選擇性地調節或 杈擬乳離子通道之功能的小分子潛在地用於諸如上述所敍 述之彼#疾病之人類疾病的處理。在給定氯離子通道之有 效生理值之情況下，需要理解如何調整氣離子通道之功 能。 可杈擬天然離子通道之功能之合成離子通道可用作用於 瞭解天然離子通道之性能之模型。因此，新穎合成離子通

Cj 道之發現可產生用於處理或防止離子輸送起作用之病症及 疾病之新化合物或組合物。此等合成通道可潛在地用於控 . 魅物系統中之離子流動。雖然將許多努力集中於陽離子 通道之模型上，但僅報告了少數合成陰離子通道（尤其係 ^ 氯離子通道）。大多數合成氣離子通道通常具有相對複雜 之結構及高分子量，此兩者可限制其在藥物發現中之應 用因此，仍需要可用於處理或防止與包括氣離子通道之 離子通道之功能障礙有關的病症及疾病之新穎的合成離子 通道化合物。 127863.doc 200844079 【發明内容】

U 匕t文中提供的為在沒有外部源之幫助下可自組裝以形成 脂質雙層或細胞膜中之離子通道之化合物、包含該等化合 物之離子通道組合物，及製造及使用該等化合物及組合物 以用於處理、管理或防止與氣離子通道之功能障礙有關之 疾病的方法。在某些實施例中，該等化合物可在諸如電磁 輪射（例如，X-ray射線、而光、可見光、微波或職 射）、電場、磁場、超音、音訊聲音、熱或壓力之内部或 外部物理學力之幫助下組裝以形成離子通道。在某些實施 例中，該等化合物可在諸如酸、驗及其類似物之極性化合 物、諸如烴及其類似物之非極性化合物之幫助下組裝以形 成離子通道。本文中亦提供具有包含自組裝化合物之合成 陰離子通道之生物及合成膜。在某些實施例中，該等化合 :勿為自組裝以形成脂質雙層或細胞膜中之離子通道之"且 裝化合物。在某些實施例中，離子通道為陰離子通道。進 -步提供帛於料合成離子通道之方法，料方法 過氳鍵自組裝小分子以彤志人& M 3、 衣』刀于以形成合成離子通道之步驟。 在一悲樣中，本文中所提供的為藉 化合物·· 巧精由式⑴表不之自組裝 (I) 、x-hda七 γ 其中X為未經取代或經取代之烴基或雜環基 η為自1至6之整數； Υ為分別精由自未歸跑 > 斗、 ，烷烴、稀 衣丄取代或經取代之烴（例如 127863.doc 200844079 烴及炔烴）、碳環（ ^ .^ ^ ’諸如環己烧之脂肪族碳環，十上 一 (例如，諸如吡啶之雜芳烴）中移除__ 一、二、四、五及人 秒丨示、 久，、個氫原子而形成的一價、二 一 ^[貝、四價、五價或上 貝二 1貝^饧鍵聯基團；且

Hda為一價基’发4 ，、包含通過氫鍵自組裝以形成至少_ 、之至少-氫鍵供體及至少-氫鍵受體。 在一些實施例中，式⑴之hda為具有式（11)之二價基：

Z2_ B2’、D人、B， -k (Π) 其中Z及2中之每一者獨立為〇、S或NR1 ; A、B1、R2、p 3 η 丄 及D中之每一者獨立為鍵、〇、s、nr2 或經取代或未經取代之Cl-1G伸烧基；且 k為自1至2()之整數，其中R1及R2中之每-者獨立為H、 醯基、烴基、碳環基或雜環基且B1及B2之至少一者為 NH 〇 在其他實施例中，藉由式（111)表示式⑴之Hda:

(III) 其中k為自1至20之整數； A為鍵、〇、s、NR2或經取代或未經取代之CuG伸烷 基，其中R2為H、醯基、烴基、碳環基或雜環基； B1為Ο或NH ;且 127863.doc 200844079 D4Cl.3伸烧基或經-或多個 烷基。 次雜缞基取代之匕_3伸 在某些實施例中，藉由式（IV)表示式⑴之Hda: (IV) 其中D為C 1 ·3伸烧基或經一式之 或多個烴基或雜環基取代

Cb3伸烷基。 八义 Ο u 在某些實施例中’藉H(IVB)表示式⑴之Hda: 0 (IVB)， 其中A為鍵、〇、S、NR2或瘦+ i 乂、、二取代或未經取代之CN10伸 烧基’其中R2為Η、醯基、煙基、碳環基或雜環基；且 〇為Cm伸烷基或經一或多個烴基或雜環基取代之a 3伸 烷基。 在-些實施例中，本文中所揭示之自組裝化合物之式⑴ 的η為1。在其他實施例中，11為2或3，且χ- 單元中之 至少兩者相同。在其他實施例中，ng2或3，且χ_ 單 元中之至少兩者不同。 在一些實施例中，本文中所揭示之自組裝化合物之式⑴ 的X為烴基或經取代之烴基。在其他實施例中，χ為包含i 至14個碳原子之烴基或經取代之烴基。在其他實施例中， X為具有1至14個碳原子之烷基或經取代之烷基。仍在其他 實施例中，X為異丁基。 127863.doc -10- 200844079 的Ybf實ί例中’本文中所揭示之自組裝化合物之式⑴ -分別藉由自未經取代或經取代之烧烴、烯烴或快煙 =除兩個或三個氫原子而形成之二價或三價鍵聯基團。 ^他實施例中’ Υ為分別藉由自未經取代或經取代之％ :二烯烴或炔烴中移除兩個或三個氫原子而形成之二價 :-饧鍵聯基團。在其他實施例中’ γ為未經取代或經取 代之丙烯或伸丙烯基。 ο υ 在某二只苑例中’本文中所揭示之自組裝化合物之式⑴ 的Υ為分別藉由自未經取代或經取代之單環、雙環或三環 1族碳環中移除兩個或三個氫原子而形成之二價或三價鍵 ^基團。在其他實施例中，γ為分別藉由自未經取代或經 取=之芳烴（諸如’苯）中移除兩個或三個氫原子而形成之 二價或三價鍵聯基團。 在、二貝轭例中，本文中所揭示之自組裝化合物之式（I) 的：為分別藉由自未經取代或經取代之單環、雙環或三環 雜裱中移除兩個或三個氫原子而形成之二價或三價鍵聯基 團。：其他實施例中’Υ為分別藉由自未經取代或經取代 之雜芳烴（諸如’ °比。定）中移除兩個或三個氫原子而形成之 二價或三價鍵聯基團。 在某些實施例中，本文中所揭示之自組裝化合物之式⑴ 的hda包含至少一第一醯胺基或第二醯胺基。 I在一些實施例中，式（II)、（III)、（IV)或（IVB)iD為經至 少一烷基、芳基、經取代之烷基或經取代之芳基取代的 C】-3伸烷基。纟其他實施例中，〇為經至少一異丁基取代 127863.doc -11- 200844079 D為經異丁基取代之 之Cu伸烷基。仍在其他實施例中 亞甲基。 在某些實施例中，式（11)或⑽之A為鍵；D為亞甲基或 經取代之亞甲基；且k為1。在其他實施例中，式（„)或 (III)之A為Ο ; D為亞甲基或經取代之亞甲基；且_。仍 在其他實施例中’ γ為伸芳基、伸雜芳基、伸烷基或伸烯 基，且每一 X為具有丨至14個碳原子之未經取代或經取代之 ί 烴基。 在一些實施例中，本文中所揭示之自組裝化合物為： ϋ

127863.doc -12- 200844079 Γ

或其鹽、溶劑合物、多晶型物或立體異構體 在其他實施例中，自組裝化合物為

127863.doc -13 - 200844079 或其鹽、溶劑合物、夕a w 、 J 口物夕日日型物或立體異構體。 在另‘悲、樣中，本文中提供的為包含脂質雙層或細胞膜 及本文中所揭示之自組裳化合物之複數個分子的離子通道 組合物’其中該等分子形成跨越該膜之厚度之陰離子= 二=些實施例中’該複數個分子自組裝以形成跨越該 月曰質雙層之厚度之吟離； 、、、、 又心U離子通道。在其他實施例中，陰離子 通道為氣離子、氣離早、、、自 、離子/臭離子、碘離子、硝酸根離子、

亞硝酸根離子、硫酸奸雜工 爪馱根離子、硫酸氫根離子、碳酸根離 子、碳酸氫根離子、磷酸裉雜 r# Λ. ^ L ^ 牛®夂根離子、磷酸氫根離子、磷酸二 氫根離子或贈酸根離早夕、务 夂很離子之通道。仍在其他實施例中， 子通道為氣離子通道。 在另⑯樣中，本文中提供的為—形成脂質雙層或細胞 膜中之合成陰離子通道之方法，該方法包含組合該膜盘本 文中所揭示之自組裝化合物之複數個分子，該複數個分子 自組裝以形成陰離子通道。 “樣中本文中提供的為一調整通過脂質雙層或 細胞膜之陰離子之流動的方法，該方法包含以下步驟曰由 本文中所揭示之自組裝化合物之複數個分子形成膜中之陰 離子通道^及此後施加—陰離子梯度或膜電位。 - 在另〜樣中纟文中提供的為—製造細胞膜中之合 離子通道之方法，該方法包含 G S以下步驟·提供本文中所揭 示之自組裝化合物之複數個分子，·及在膜之橫向方向令形 成分子柱且在任何兩個鄰近分子柱之間通過膜之侧向中之 分子間氫鍵而使該等自組裝。在一些實施例中，本文令所 127863.doc 200844079 揭示之細胞膜包含脂質雙層。 在另一態樣中，本文中提供的為一處理、管理或防止與 氯離子通道之功能障礙有關之疾病的方法，該方法包含向 需要該處理、管理或防止之哺乳動物投與在治療或預防方 面為有效劑量的本文中所揭示之自組襄化合物或其醫藥學 上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構體。 Γ

在另一態樣中，本文中提供的為本文中所揭示之自組裝 化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物或 立體異構體的複數個分子的用途，其用於製造用於對與氯 離子通道之功能障礙有關之疾病進行處理、管理或防止之 藥物。 在一些實施例中，該疾病為囊腫性纖維化、巴特氏 (Bamer)綜合症、丹特氏（Dent)疾病、遺傳腎結石疾病、 先天性肌強直、貝克(Becker)综合症、癲癇症、印黃狀黃 斑營養不良、過度驚嚇症、青少年肌陣攣性癲癇症或骨質 :化：。在其他實施例中，冑自組裝化合物或其醫藥學上 二溶劑合物或立體異構體插入哺乳動物之細胞 之月“雙層中。在其他實施例中，該哺乳動物為人。 :另-態樣中，本文中提供的為醫藥組合物 治療或預防方面為有效劑量的本文中 二3在 物或其醫藥學上可接受之越…二:揭：之自組裝化合 異構體，用於處理物、多晶型物或立體 … 或防止與氯離子通道之功能障礙 =病。在—些實施例中’該醫藥組合物進—力 μ在某些實施例中’該醫藥組合物進_步包含選自由 127863.doc -15- 200844079 以下各物組成之群之至少一 劑、稀釋劑、全屬…… 劍、保濕劑、載 …二 其組合。在其他實施例令， 该西樂組合物為單一單位劑型。 組人物A、态人、 牡“他M W例中，該醫藥 、、、口 :、、、、e於插入哺乳動物細 位劑型。 肥之月曰貝雙層中之單一單

C 在另一態樣中，本文尹提供的為包含本 組裝化合物之複數個分子的離子通道，其 細胞膜中。 ^ 文中所揭示之自 中该離子通道在 其他實施例將為部分顯而易 【實施方式】定義 見且部分在下文中指出的 Ο 下文疋義如本文中所 應瞭解，任何未經定 請案之提交同時代之 為促進瞭解本文中所揭示之標的， 使用之許多術語、縮寫或其他簡寫。 義之術語、縮寫或簡寫具有由與本申 熟習此項技術者使用的一般意義。 >Sn意謂微微西門子。 、M”意謂毫莫耳。 θΜ思谓^¢=微莫耳。 ηΜπ意謂奈莫耳。 陰離子”意謂負電荷離子。 陽離子π意謂正電荷離子。 •雙層膜π或’’脂質雙層”係和 九 ’、日形成環繞真核細胞之滲透性 IV壁且在細胞内間隔、脂質 貝聪及其他細胞器中起類似作用 之雙分子厚組裝。此膜包含大旦 大ΐ兩性脂質分子之任一者但 127863.doc ，16 - 200844079 在細胞中，其主要包含磷脂。 η細胞’’係指原核細胞、酵母細胞 胞 植物 真核細胞、 、人細胞、動物細胞，且在_者 " 胞。 纟““列中，哺乳動物細 ，，膜"係指薄的可半渗透之障壁，其分離可能具有 不同組合物之兩個液相。 同或 ”細胞膜”係指經塗佈蛋白質 層。細胞膜包含細胞之外層。參透之脂質雙 "通道"或，，離子通道"係㈣於膜非通透性化合物之含水 擴散路徑，其通常藉由細胞膜内之微孔形成從而准許中性 或離子物質通過其而自該膜之_側轉移至另一側。 Ο 超分子組裝”係指藉由諸如範德瓦爾斯(va“e W 或氫鍵之非共價鍵固持在一起的分子之良好界定之錯合 物超刀子組裝可包含兩個或兩個以上分子。超分子㈣ 可為任何形式或形狀，諸如，可為實體或中空之球形、、圓 U /碟片或薄片。在一些實施例中，超分子組裝為中空 圓柱㈣式。在其他實施例中，超分子組裝為具有微孔之 通道之形式。超分子組裝之尺寸可在奈米至微米之範圍 中。 、 竑係扣分子在沒有來自外部源之引導或管理之情 況下的組裝。桶舍 \ k书存在兩種類型之自組裝··分子内自組裝 刀子間自組裳。分子内自組裝分子通常為具有自無規線 圈構形組裝成良好界定之穩定結構之能力的複雜聚合物。 刀子間自組裝為分子形成超分子組裝之能力。 127863.doc 200844079 自、、且羞化合物，，或，，自組裝分子，，係指可通過八+ „ 装過程形成超分子組^化合㈣^;7通過刀子間自組 =趙”係指具有至少一氫原子附著於 硫之強負電雜原+ m 见及 ”氫鍵受體”係指強負電雜原子，包 氯及溴。 刊見 &、鼠、 ’’脂質體”係扣A、皮息 係心人造囊，通常為球形，其包含— Ο Ο 多個（多層）鏢爲# 3 (早層）或 、夕層)雙層磷脂膜，其封閉含 擬生物膜。術t 且以有效方式模 "單^ t 時可與”微脂粒，，互換地使用。 0匕含单一層之磷脂脂質體之雙層膜。 夕層#'指包含―個以上心層之結構上類 磷脂脂質體的雙層膜。 、；手悤之 選擇性，，係指_物f優於另_物質之$ 包括陽離子優於险籬早 ^ ^ ^ 、丨之性， 於-不同陽離:優於陽離子、-陽離子優 、不π%離子’或—陰離子優於—不同陰離子。 輸送"係指跨制❹之料或其他㈣ "胺基”係指可視需要而為烴基、經取代之。 之雜原子的第-、第二或第三胺n二或經取代 成員之篦-澎筮- w斤 匕括為雜環之 、一或弟二胺虱原子。具體言之亦包括w 基部分取代之第二或第三胺基。 i括（例如«醯 "烷基，，係指含有碳及氫之完全飽和無環 其可為分支鏈或直鏈。烷基之實例為甲美、土’且 基、第三丁基、正庚基，及異丙基。除非土另朴正丁 本文中所描述之烷基較佳為主鏈中含 "丁否則 有至十個碳原子且 127863.doc -18- 200844079 至多20個碳原子之低級烷基，如藉由甲基、乙基、正丁 基、異丁基、第三丁基、異戊基、正戊（烷）基及異戊（烷） 基所例示的。 n烯基’’係指含有碳及氫之一價或二價不飽和（較佳單不飽 和）自由基，且其可為環鏈、分支鏈或直鏈。除非另外指 示，否則本文中所描述之烯基較佳為主鏈中含有兩個至八 個奴原子且至多20個碳原子之低級烷基，如藉由乙烯基、 丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、己烯基及其類似 物所例示的。 ’’炔基"係指主鏈中含有兩個至八個碳原子且至多2 〇個碳 原子之低級烷基。其可含有直鏈或分支鏈，如藉由乙炔 基、丙炔基、異丙块基、丁炔基、異丁块基、己块基及其 類似物所例示的。 ’芳族”係指芳基或雜芳基。 〇 方基"係指視需要而經取代之碳環耗基，較佳在環部 ;中+含有6至12個碳原子之單環或雙環基，諸如，苯基、 =2、萘基、經取代之苯基、經取代之聯二苯或經取代 *基。苯基及經取代之苯基為更佳之芳基。 ::齒素"或，，齒基"係指氟、氯、漠及碘。 雜原子”將意謂不同於碳及氫之原子。 ”雜環"或，，雜環基，，係指視需要而經 飽和之單環或譬淨沾— 取代之凡全飽和或不 有至少-雜原子且\或非芳族基’其在至少一環中具 族雜環咖 每一環中具有5個或6個原子。芳 基（亦即，雜芳基）較佳在環中具有《或2個氧原子、】 127863.doc -19- 200844079 或2個硫原子，及/或1至4個氮原子，且可通過碳或雜原子 而鍵結至分子之剩餘部分。雜芳基之非限制性實例包括呋 喃基、嗟吩基、11塞峻基、吼u定基、σ惡σ坐基、吨略基、。引巧 基、喹啉基或異喹啉基及其類似物。取代基之非限制性實 例包括以下基團中之一或多者：烴基、經取代之烴基、綱 基、羥基、受保護之羥基、醯基、醯氧基、烷氧基、鏈烯 氧基、炔氧基、芳氧基、鹵素、醯胺基、胺基、确基、& 基、硫醇、縮嗣、縮酸、酯及鱗。 Θ、· ”烴”或，，經基，，係指專Η包含元素碳及氫之有機化合物或 自由基。羥基包括烷基、稀基、炔基，及芳基部分。羥美 亦包括經其他脂肪族、環或芳基烴基（諸如，烷芳基、烯 芳基及炔芳基）取代之烷基、烯基、炔基，及芳基部分。 在一些實施例中，，，烴，，或"烴基，，包含1至2〇個碳原子。 Μ申烴基”為藉由自烴中移除兩個氫原子而形成之二價 基，其游離價數不參與雙鍵，例如，丨，3_伸苯基、丙^ j 1，3-二基，及亞曱基。 如本文中用於描述化合物或化學部分之”經取代"意謂彼 化合物或化學部分之至少一氫原子被第二化學部分置換。 第二化學部分可為不會不利地影響化合物之所要活性之任 何所要的取代基。取代基之實例為本文中所揭示之例示性 化合物及實施例中所發現的彼等取代基，以及_素；严 基；雜烷基；烯基；炔基；芳基、雜芳基、羥基；烷2 基；胺基；硝基；硫醇；硫畴；亞胺；氰基；酸胺基；麟 酸基；膦；羧基；硫羰基；硫醯基；磺醯胺；醛； 127863.doc -20- 200844079 酉旨，氧代；i院基（例如，三氟甲基）；可為單環或稠合或 非稠合多環（例如，環丙基、環丁基、環戊基或環己基）之 碳環環烷基或可為單環或稠合或非稠合多環(例如，：咯 疋基、六氫吡啶基、六氫吡嗪基、嗎啉基或噻嗪基）之雜 . 環烷基；碳環或雜環、單環或稠合或非稠合多環芳基（例 >，苯基、萘基、°比略基、《基、咬喃基"塞吩基、味 唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吡 ζ\ 坐基、吡义基、喹啉基、異喹啉基、吖啶基、吡嗪基、噠 嗪基、嘧啶基、苯幷咪唑基、苯幷噻吩基或苯幷呋喃 基），胺基（第一、第二或第三）；0-低級烷基；〇_芳基、芳 基；芳基-低級烧基；_c〇2CH3 卜C0Nh2 ; ·〇(：Η2€：〇νη2 ; -ΝΗ2 ； -S02NH2 ； -〇CHF2 ； -CFs ； -OCF3 ； -NH(^^); -N(烷基h ; -NH(芳基）；_N(烷基）（芳基）；_N(芳基; _CH〇 ; -CO(烷基）；-CO(芳基）；-C02(烷基）；及<〇2(芳 基）；且該等部分亦可視需要而被稠合環結構或橋取代（例 〇 如，-〇CH2〇-)。此等取代基可視需要而進一步被選自該等 基團之取代基取代。除非另外指定，否則本文中所揭示之 所有化學基團可經取代。舉例而言，本文中所描述之，，經 取代之烷基、烯基、炔基、芳基、烴基或雜環部分為經 、 烴基部分、經取代之烴基部分、雜原子或雜環取代之部 分。另外’取代基可包括碳原子經諸如氮 '氧、矽、填、 硼、硫或i素原子之雜原子取代之部分。此等取代基可包 括鹵素、雜環、烷氧基、鏈烯氧基、炔氧基、芳氧基、羥 基、文保護之羥基、酮基、醯基、醯氧基、硝基、胺基、 127863.doc 21 200844079 醯胺基、氰基、硫醇、縮酮、縮醛、酯及喊。 ”醫藥學上可接受之鹽”包括（但不限於）可存在於本發明 之化合物中的酸或鹼基團之鹽。本發明之本質上鹼性的化 合物能夠與各種無機酸及有機酸形成廣泛種類之鹽。可用 • 於製備該等鹼性化合物之醫藥學上可接受之鹽的酸為可形 成包含藥理學上可接受之陰離子之鹽包括（但不限於）醋酸 鹽、本績酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、酒石酸氫鹽、溴化 ( 物、乙二胺四乙酸（edetate)鈣、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氣 化物、溴化物、碘化物、擰檬酸鹽、二鹽酸鹽、乙二胺四 乙酸鹽、乙二石黃酸鹽、依託酸鹽（est〇late)、乙石黃酸鹽、反 丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽（gluceptate)、葡糖酸鹽、麵胺酸 鹽、乙醇醯基對胺基苯胂酸鹽（arsanilate)、己基間苯二盼 酸鹽（hexylresorxinate)、海卓胺（hydrabamine)、羥基萘甲 酸鹽、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁 烯二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、曱基硫酸鹽、麝香葡萄 CJ (muscate)、萘磺酸鹽、硝酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽/二磷酸 鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水揚酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、 硫酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶鹼鹽（te〇clate)、三 乙碘化物’及雙羥萘酸鹽者。除上述酸之外，本發明之包 • 括一個胺基之化合物亦可與各種胺基酸形成醫藥學上可接 义之鹽。本發明之本質上酸性之化合物能夠與各種藥理學 上可接受之陽離子形成鹼鹽。該等鹽之非限制性實例包括 鹼金屬或鹼土金屬鹽，特別是鈣、鎂、鈉、鋰、鋅、鉀及 鐵鹽。 127863.doc -22- 200844079 立體異構體涵盖本文中所揭示之所有純鏡像異構/立體 異構化合物及富含鏡像異構/立體異構化合物。 ’’純立體異構”或”純鏡像異構”意謂化合物包含一種立體 異構體且大體上沒有其相對立體異構體或鏡像異構體。舉 * 例而a，當化合物含有80%、90°/。或95%或95%以上之一種 • 立體異構體及20❹/°、1〇%或5%或5%以下之相對立體異構體 時，該化合物為純立體異構或鏡像異構。在一些情況下， 虽本發明之化合物為約80% ee(鏡像異構體過量）或80% ee 以上，較佳關於一個特定對掌性中心等於或大於9〇%⑼且 更佳關於一個特定對掌性中心為95% ee時，該化合物被認 為具有光學活性或關於一個對掌性中心為純立體異構/鏡 像異構（亦即，大體上R形態或大體上S形態）。

田含立體異構”或”富含鏡像異構”涵蓋本發明之化合物 之立體異構體的外消旋混合物以及其他混合物（例如，R/S =3〇/7〇、35/65、40/60、45/55、55/45、60/40、65/35 及 I) 70/30)。 ’’水合物”意謂本發明之化合物或其鹽，其進一步包括化 予°十里或非化學計量之量的藉由非共價分子間力結合之 ‘ 水。 ’’溶劑合物”意謂自一或多個溶劑分子之締合形成本發明 之化a物的溶劑合物。術語，，溶劑合物，，包括水合物（例如， 單水口物、二水合物、三水合物、四水合物，及其類似 物）。 夕曰曰型物’’意謂本發明之化合物或其錯合物之固體結晶 127863.doc -23- 200844079 形態。相同化合物之不同多晶型物可展示出不同物理、化 學及/或光譜性能。

本文中提供的為可形成脂質雙層或細胞膜中之離子通道 之自組裝化合物，其藉由式⑴表示： k I (X-HDA七 Y ⑴ 其中X為未經取代或經取代之烴基或雜環基； η為自1至6之整數； Ο ..y γ為分別藉由自未經取代或經取代之煙、碳環或雜環中 移除-、二、三、四、五及六個氫原子而形成之一價、二 價、三價、四價、五價或六價鍵聯基團；且 、 HDA為具有式（II)之二價基： Z1' 、B3 儿'、B2. 'a、d 乂、Br (Π) -k 其中Z1及Z2中之每一者獨立為〇、s*NRl ; A、Bi、B2、B3及D中之每一去倔六〜 τ <母者獨立為鍵、〇、s、nr2 或經取代或未經取代之匕^伸烷基；且 /為自1至20之整數，其中Rlw中之每-者獨立為H、 酉&基、烴基、碳環基或雜環基且B1及B2之至小一 NH。 夕一者為 在一些實施例中，Hda為包含至 ^ ^ 从鍵供體及至少一 虱鍵受體的經取代之伸烴基。在其 ,A 知例中，氫鍵供艚 包含直㈣結至氧、氮或奴氫原子 Λ鍵供體 ft Μ典駚治〆 卜 在"、他貝施例中， 乳鍵又體為氧、氮、硫、氟、氯或溴原子 在某些實施例 127863.doc -24- 200844079 中’式（ι)之hda包含至少一第一醯胺基或第二醯胺基。 在某些實施例中，式（I)之n為1。在其他實施例中，式（I) 之η為2，且兩個X — Hda單元相同或不同。 在一些實施例中，X為含有至多丨8個碳原子之烴基（諸 如’烧基、芳基或芳烷基），其視需要而經含氧、含氮或 含硫之部分取代。在其他實施例中，X為視需要而經含 氧、含氮或含硫之部分取代之雜環部分。在一實施例中， Ο u HDA含有一醯胺且χ為通過氮原子而鏈聯至只〇八單元從而形 成末端異丁基醯胺之異丁基（_CH2CH(CH3)2)。在其他實施 例中式（〗）之X為故基或經取代之烴基。在某些實施例 中，式（ι)之X為包含1至14個碳原子之烴基或經取代之烴 基。在其他實施例中，式⑴之x為具有工至“個碳原子之 烷基或經取代之烷基。在其他實施例中，式⑴之χ為異丁 基0 你示坠貫施例 N7A巧77 π稽田目禾經取代或經 取代之燒烴、㈣或炔烴中移除兩個或三個氫原子而形成 之二價或三價鍵聯基團。在其他實施例中，γ為分別藉由 自未經取代或經取代之C2 i2烷烴、烯烴或炔烴中移除兩個 或三個氫原子而形成之二價或三價鍵聯基團。亦在其他實 施例中’ Y為未經取代或經取代之㈣或伸丙婦基。 ^些實施例中，式⑴之丫為分別藉由自未經取代或瘦 取代之早環、雙環或三㈣族碳環巾移除兩 子而形成之二價或二價 一個風原 山q 飞一⑽％基團。在其他實施例中，芳兹 W為未經取代或經取代之苯。在其他實施例中，Y為分 127863.doc -25- 200844079 別藉由自未經取代之苯中移除兩個或三 二價或三價鍵聯基團。 原子而形成之

在一些實施例中，式（j)《Y 取代之單環、雙環或三環雜環中二：由自未經取代或經 形成之二價或三價鍵聯基團。在^:個或三個氯原子而 經取代或經取代之.比咬。在^T雜％為未 基。 纟其他實施例中，y為亞吡啶 在某些實施例中，式⑴夕v达 H 為伸芳基或伸雜芳基且每一 〜鍵結至丫之―環原子。在—些實施例中，式⑴之YI單 %、雙環或三環伸芳基。在1 為早 且古一〇 U實施例中，式（I)之Υ為僅 、6貝環或7員環之伸芳基或伸雜芳基；且每 一 HDA鍵結至γ之一環原；士廿，

，、子。在某些實施例中，式 Y :苯基、亞㈣基、經取代之伸苯基或經取代…咬 Ο 二：他實施例中，Y為伸芳基或伸雜芳基；每一、鍵 …之一核原子；且每—x為具有1至14個碳原子之未經 取代或經取代之烴基。 =實施例中，HDA可選自含有氯鍵供體與氯鍵受體 =種有機單元。舉例而言，HDA可為經取代之煙基或雜 :土。在不受任何理論限制之情況下，似乎用於化合物之 襄以形成離子通道的驅動力主要源自於大量良好界定 氫鍵結合相互作用，其在低介電常數介質之脂質 曰又支持。在某些實施例中，HDA將為經取代之烴 土，其具有低級烧基喊、酿、硫醋、醯胺、經基、硫醇、 127863.doc -26- 200844079 月女基、偶氮基或鹵基取代基或其他氫鍵供體及氫鍵受體。 在一實施例中，（例如）hda含有兩個醯胺鍵（諸如，叛酿胺 鍵）。在另一實施例中’ Hda為狀。 fl Ο 在其他實施例中’當Y將相同或不同之X — HDA單元鍵聯 在一起時’可提高用於形成離子通道之化合物之自組事效 率，從而允許用於形成三維分子間氫鍵結合網路之較高可 能性。在此等實施例中’單元γ在某些實施例中為岡:：的 而足以在化合物可更有效地自組裝之某些方向上固持X 一 HDA單元。可自多種有機單元中選擇滿足此等設計考慮之 γ單元。-般而言’此等單元為碳環或雜環。亦預期：環 之γ單元。舉例而t ’ γ可為包含碳且視需要而包含氮、 氧或硫環原子之5員環或6員環，其中x_Hda單元共價地 鍵聯至環原子。在一實施例中，γ為伸苯基環。 本文中所提供之化合物可由熟習有機合成技術者藉 知技術以及藉由本文中所揭示之—般合成程序來製^ 合物之設計、合成及特徵在實例中加以詳細描述。 鈿例中，(例如)HDA為肽且因此其可藉由使用標準肽 方法而通過醯胺鍵分別與又及丫單元鍵聯。 口

lDA 在其他實施例中’藉由式⑽表示式⑴之Ηι

k 、Br

凡人D (III) 其中k為1或2 ; A為鍵、Ο、S、NR2或 代或未經取代之C丨-丨。伸烷 127863.doc -27· 200844079 基，其中R2為Η、醯基、 Β1為〇或ΝΗ ;且 烴基、碳環基或雜環基； Γ

D為Cl_3伸烷基或經-或多個烴基或雜烷基。 環基取代之Cu伸 在0某些實施例中’藉由式（IV)表示式⑴之HDA: (IV) 其中D為C丨_3伸烷基或經一或多個 4夕個煙基或雜環基取代之Ci伸烷基。在其他實施例中，藉由式（IVB)表示式⑴之Hda: (IVB) A為鍵、〇、S、NR2或經取代或未經取代之Cl·!。伸烷 基，其中R2為Η、醯基、烴基、碳環基或雜環基；且 〇為Cw伸烷基或經一或多個烴基或雜環基取代之3伸 烷基。 在某些實施例中，式（III)或（IV)之D為經至少一烷基、 芳基、經取代之烷基或經取代之芳基取代的Ci3伸烷基。 在其他實施例中，式（III)或（IV)之D為經至少一異丁基取 代之Cu伸烷基。在其他實施例中，式（ΙΠ)之a為鍵；d為 亞甲基或經取代之亞甲基；且k為1。在其他實施例中，式 (ΠΙ)之A為Ο ; D為亞甲基或經取代之亞甲基；且1^為1。 在一些實施例中，自組裝化合物具有以下式中之一者： 127863.doc -28 - (v)，200844079 (VI)， (VII) ，及 (VIII) ，

其中R3、R4、R5及R6中之每一者為H、醯基、烴基、碳環 基或雜環基。 在某些實施例中，自組裝化合物為以下化合物中之一 者： t；

(實例1)， (實例2)， (實例3)， (實例4)， (實例5)， 127863.doc -29- 200844079

(實例6)， (實例7)， (實例8)， (實例9)， (實例10)， (實例11)， (實例12)，或 (實例13)， 或其鹽、溶劑合物、多晶型物或立體異構體。 127863.doc -30- 200844079 可藉由在細胞膜上構造微孔狀結構而製備合成離子通 道。可基於合成離子通道之結構或"設計，，而將合成離 道進行分類。參相1，合成離子通道之最簡翠之設計包 含具有”單分子”微孔狀結構之長度為約25_40人之巨分子。 肖於製備超分子组裝離子通道之其他設計策略包括線性、 桶板狀早體至”桶-桶板（barrel_stave)"微孔狀結構之自組 裝及巨環桶箍狀單體至"桶_桶箱（barrei_h。。^,,微孔狀 釔構之堆璺。一些較小之巨分子可自組裝成複合的桶-桶 瓣微孔狀結構’該結構可被構想為具有分段桶板之”桶·桶 板”微孔狀結構或具有分段桶箍之"桶_桶箍”微孔狀結構。 至現在為止，所有合成離子通道經設計為藉以使離子輸 送而跨越膜之微孔狀結構。本文中提供的為一用於自組裝 化合物之設計之新策略，該等自組裝化合物之分子可自組 裝成離子通道。在—些實施例中，經設計之分子可通過非 共價相互作用而自組裝以在脂膜之橫向方向中形成分子 C) 才主。在一實施例中’如圖2中所展示的，在兩個平行分子 柱之間’在脂膜之側向中存在分子間氮鍵。當陰離子或陽 料到達該膜時’此等分子間氫鍵可經重新組織。如圖3 中所展不的，當陰離子或陽離子經輸送而跨越脂膜之疏水 • 性區域時，原始的公4 Μ Θ .. 的刀子間虱鍵之供體或受體將分別提供用 於使陰離子或陽離子穩定之連續鍵結位點。在—實施例 中一又冲之自、組裝化合物展示其固態之自组裝結構（如 圖4b至4(1中所展不的）’其具有可用作氯離子通道之通 道0 127863.doc 200844079 在不受任何理論限制之情況下，雖然仍未清楚得知詳细 的機制’但本文中所揭示之自組裝化合物具有分割至脂質 雙層中且在脂質雙層中自組裝成離子通道之能力。認為此 等化合物通過在低介電常數介質之脂質雙層中受支持的良 好界疋之分子間氫鍵結合相互作用而組裝。誘導化合物與 相對親脂性表面組裝之此種氫鍵結合(其慮及脂質雙層在

非極性裱境中之穩定整合及自組裝）可滲透脂質雙層膜之 疏水性區域從而形成離子通道。 許多生物過程中涉及生理上活性之陰離子（諸如，氣離 子）。本質上，氣離子通過細胞膜之輸送係藉由結合蛋白 質之中性陰離子(氣離子通道)來調節。本文中所揭示之自 組裝化合物可分割至生物之脂質雙層中及纟成細胞膜且充 當合成離子通道。I例而言，實例2中所揭示之化合物可 用於製備此種合成氯離子通道。實例2可插入脂質體之脂 質雙層中且自組裝以形成展示出氯離子選㈣及依賴^ 壓之選通的54 pS(微微西門子）氯離子通道。實例2之化人 物亦可有效地形成人胚胎腎（HEK 293)細胞之膜中之氣二 子通道且藉此以50 nM(奈莫耳)之相當低之濃度顯著增加 細胞氣電流。實例2之化合物之離子通道性質證明本文中 所揭示之合成離子通道結構可提供在許多方面盥在天^ 白質通道中所觀察到之渗透性均等的選擇性膜渗透性。 本文中所揭示之自組裝化合物可調整目標陰離子之濃度 以允許研究生理系統或其模型之性質。或者，可藉由自組 裝化合物在治療系統中之應用而改變或調節陰離子濃度， 127863.doc -32- 200844079 以增加或減少陰離子濃度以便抵制或減輕患病病症或非吾 人所樂見之病症。因此，本文中所揭示之自組裝化合物可 用於調整陰離子之流入或流出，陰離子包括（但不限於）諸 如氯離子及演離子之南離子，或進入哺乳動物細胞或其他 . 膜系統（諸如，線粒體、内體、溶酶體、分泌微脂粒、内 冑網、核、高爾基體、細胞内輸送微脂粒、MHC處理微脂 粒由破月細胞再造之波緣膜微脂粒，及具有脂質雙層膜 t其他者）中之其他陰離子（諸如確酸根離子及碳酸氫根離 子）。 在生物及合成系統中，細胞膜之組合物依其在生物系統 中之位置及其在合成系統中之所要功能而改變。因此，所 提供的為膜中合成離子通道之形成而與膜為天然源還是合 成源無關。在某些實施例中，本文中所揭示之自組裝化合 物具有通過生理及非生理系統中之氫鍵而自組裝且形成脂 質雙層或細胞膜中之陰離子通道的能力。 〇 亦提供一使用本文中所提供之化合物及組合物來處理、 防止或改良與細胞氯離子不平衡相關聯之疾病或病症之症 狀的方法。此種疾病或病症之非限制性實例包括囊腫性纖 維化、巴特氏（Bartter)綜合症、丹特氏（Dent)疾病、遺傳 月、、、口石疾病、先天性肌強直、貝克（Becker)綜合症、癲癇 症、卵頁狀黃斑營養不良、過度驚嚇症、青少年肌陣攣性 癲癇症及骨質石化症。在一些實施例中，以由所討論的特 疋化合物、患者概況及疾病之特徵所確定的適當之量及方 式將本文中所揭示之自組裝化合物插入哺乳動物細胞之脂 127863.doc -33 - 200844079 質雙層中。 在某些實施例中，該等化合物及組合物可應用於活體内 之、、且、我’諸如’肺、氣管、皮膚、肌肉、腦、肝、心臟、 脾月知、胸腺、膀胱、淋巴、血液、胰腺、胃、腎、卵 ' 巢、睾九、直腸、周邊或中央神經系統、眼、淋巴器官、 車人月及内皮。在某些實施例中，目標細胞為肌肉細胞（諸 如，骨骼肌細胞、心肌細胞及平滑肌細胞）、神經細胞、 ' 幹、、、田胞神經元、上皮細胞或氣管之細胞。在其他實 祝例中，目標細胞為氣管或肺細胞。在其他實施例中，目 標細胞為呼吸道上皮之細胞。 已展示肺之頂膜之增加的氯離子滲透性減少了與囊腫性 纖維化突變相關聯之病理生理異常。因此，本文中之氣離 子通道形成化合物之應用可准許頂肺上皮細胞之氣離子滲 透性增加且藉此補償囊腫性纖維化突變。 囊腫性纖維化（CF)為高加索人中最常見之普通的致命疾 CJ 病中的一者。囊腫性纖維化跨膜傳導調節因子（CFTR)為位 於上皮細胞之頂膜處之氣離子通道，該氯離子通道之活性 藉由磷酸化作用及細胞内核苷酸來調節。在氣管上皮細胞 中，CFTR為主要氯離子輸送路徑且調節活性離子輸送_經 ， 調控之流體輸送。在CF中，基因編碼CFTR中之突變造成 有缺陷的跨上皮氣離子及流體輸送，結果為氣管黏膜纖毛 清除之受損及鹽-敏感防禦素之殺菌性活性的減少。已提 議：此等不足對CF患者之肺的再生性感染及隨之而來的破 壞負責。 127863.doc -34- 200844079 當前正開發用於CF之處理之若干治療方法。此等方法包 括（1)使用改良加襯在氣管内之黏滯流體之殺菌性活性及黏 度的劑；（2)使用激活替代性氣離子通道以補償CFTR氯離 子通道缺陷之劑；（3)蛋白質及基因增大療法；及（4)使用 援救與CFTR之最常見突變形態相關聯之細胞内交通缺陷 或抑制過早點突變之藥理學劑。因此，合成陰離子通道之 開發在調查細胞陰離子*平衡及調整該等病症方面具有顯 Ο Ο 著效用。 本：中所揭示之自組裝化合物可用作用於治病或預防目 的之樂物。具體言<，自組裝化合物可用於一治療處理方 法中，該方法包含將該化合物引入參與離子輸送之目標細 胞之月日質雙層巾。因而，該化合物可用於製備用於治病或 預防目的之藥物，以意欲用於對人或動物體之處理。 可直接將藥物投予活體内’例如’藉由注入而將藥物投 予肌肉中，藉由氣溶膠及其類似物將藥物投予肺中。亦可 „外方法，該體外方法包含收集來自患者之細胞 (:*幹細胞、周邊血液淋巴細胞、肌肉細胞、神經細 :::疋、上皮細胞及其類似物)，投與化合物及向患 者重新投與細胞。 畠：文：所提供之自組裝化合物可藉由肌肉内、氣管内、 :、1内、胸膜内、瘤内、心臟内、胃内、腹膜内、表 管咬==動脈内路徑而藉由注射器或藉由適合於對氣 處理(諸如’吸入、滴入或氣溶膠化)之任何其 糸統被投予。投藥之其他路徑包括乳劑之應 127863.doc -35- 200844079 1、口服投藥或熟習此項技術者已知的且適用於本文中所 提供之化合物及組合物的任何其他方式。 可藉由多種不同路徑達成投藥。一路徑為諸如藥丸、膠 囊或懸洋液之組合物之口服投藥。該組合物可根據此項技 ’〔丁中已♦之任何方法來製備，且可包含多種非活性成份中 . <任—者。用於在該等組合物内使用之合適之賦形劑包括 插入稀釋劑（其可為固體物質、含水溶液及/或油），諸如， 〇 _、鉀或碳酸納、乳糖、@、卸或填酸納、水、花生油 (arachis oU或peanut 〇il)、液體石蠟或橄欖油；諸如玉米 澱粉、明膠或阿拉伯樹膠之成粒劑及崩解劑；及/或諸如 硬脂酸鎮、硬脂酸或滑石之潤滑劑。可（但不需要）存在之 其他非活性成份包括一或多種懸浮劑（例如，缓甲基纖維 素鈉、甲基纖維素、經基丙基甲基纖維素、海藻酸納、聚 乙稀°比洛㈣、黃著樹膠，及阿拉伯樹膠）、增稠劑(例 如，蜂蠟、石蠟或錄蠟醇）、分散劑或濕潤劑、防腐劑（例 〇 如，諸如抗壞血酸之抗氧化劑）、著色劑、甜味劑及/或調 味劑。 彳與保護活性成份以使其免於自身體快速消除之載劑 (諸如，緩釋調配物或塗層）_起製備醫藥組合物。該等載 劑包括可控之釋放調配物（諸如，但不限於，微膠囊化傳 遞系統），及生物可降解、生物相容聚合物（諸如，乙烯醋 酸乙烯醋、《酐、聚乙醇酸、聚原酸脂、聚乳酸、聚乙 二醇、聚乙二醇醚，及一般熟習此項技術者已知之其他 者）。 127863.doc -36 - 200844079 在其他實施例中’提供的為經由吸 氣溶膠或喰靈M D ^ 士 口物作為加壓 物可含有用ΓΓ 予患者之肺之方法。該等調配 推進劑中之任-者。此外，在具有或沒有共=知= 性劑、穩定劑(例如，抗氧化劑、螯合 :!)之任-者之情況下，水可存在。對於待自：::： 谷：投與之組合物，通常添加抗菌劑。該等組合物亦可經 Ο Ο 過〜及殺菌，且可被凍乾以提供提高的穩定性及改良溶解 度。 可知用對抑制或減輕疾病或病症(諸如，囊腫性纖維化) ;狀及/或ι遲疾病之進程有效之量及頻率投與醫藥組 合物。可根據經驗使用已知之測試協定或藉由測試此項技 術中已知之模型系統中之、组合物且自& _而確定處理之 精確劑量及持續時間。劑量亦可隨著疾病之嚴重程度而改 變。可調配及投與醫藥組合物以發揮在治療上有用之效應 同時將不良副作用降至最低。以下將顯而易見：出於任: 特定原因，可根據個別需要而隨時間調整特殊劑量方案。 如上所敍述，可向哺乳動物投與醫藥組合物以刺激氯離 子輸送，或處理、管理或防止囊腫性纖維化、巴特氏 (Bartter)綜合症、丹特氏（Dent)疾病、遺傳腎結石疾病、 先天性肌強直、貝克（Becker)綜合症、癲癇症、卵黃狀黃 斑營養不良、過度驚嚇症、青少年肌陣攣性癲癇症或骨質 石化症。可得益於本文中所提供之自組裝化合物之投藥的 患者為受囊腫性纖維化、巴特氏（Bartter)綜合症、丹特氏 127863.doc -37- 200844079 (Dent)疾病、遺傳腎結石疾病、先天性肌強直、貝克 (Becker)綜合症、癲癇症、卵黃狀黃斑營養不良、過度驚 嚇症、青少年肌陣攣性癲癇症或骨質石化症折磨之彼等患 者。该等患者可基於此項技術中所熟知之標準準則來識 • 別，標準準則包括汗測試中之異常高之鹽濃度的存在、高 • 的鼻内電位之存在，或與囊腫性纖維化相關聯之突變之存 在。在氣管中展示出異常高之黏液累積的其他疾病（諸 〇 如，氣喘病及慢性支氣管炎）中，氯離子輸送之激活亦可 有益。類似地，便秘可得益於如本文中所提供之氯離子輸 送之激活。 亦提供藉由靜脈内、口服、滴入、吸入、局部、腹膜 内、皮下或肌肉内路徑投與醫藥組合物之方法。可（例如） 以膠囊、粉末、錠劑、液體、溶液及氣溶膠溶液之形式投 與醫藥組合物。亦提供處理哺乳動物體内之引起細胞膜上 之有缺陷陰離子輸送的疾病或其他病症的方法。 U 將閣述本發明之額外特徵及優點’且本發明之額外特徵 及優點將部分地自描述而顯而易見，或可藉由對本發曰 實踐而獲悉。 X 之 所提供之組合物之劑量將依諸如化合物夕坐i 平哀期、化合 • 物或其降級產物之潛在的不利效應、投藥之路π k、患者之 病症及其類似物之因素而改變。該等因音铢 月匕约由熟習此項 技術者來確定。在每日基礎上給定之準破南丨曰 ' 于作釗Ϊ位準當銬音 謂著由内科醫生調適以提供最佳治療反應。 、Μ 實例 127863.doc -38- 200844079 以下實例1至12為製造及使用稭由通式（I)表示之化合物 之方法的詳細描述。可使用程序用為熟習此項技術者所顯 而易見之適當起始物質製備本揭示案之範疇内之其他化合 物。呈現此等實例以僅用於說明性目的且不意欲限制本發 明之範疇。 實例1之製備

流程A 根據上述之流程A製備實例1。根據Yang等人之乂 C/zern (2001，％，7303-73 12)中所描述之程序合成起始物質 D-第三丁基2-鄰笨二醯亞胺基-4-甲基戊酸酯（化合物丨）。 藉由以下資料來特徵化化合物1(白色結晶固體）：111十.92- 93°C ; [a]20D+77·。。（c 1 〇1，CHC13) ; 4 NMR (300 MHz， CDC13) δ 7.85-7.81 (m，2H)、7.78-7.74 (m，2H)、4.74 (dd， J = 8.5，5·4 Hz，1H)、2.05-1.91 (m，2H)、1.72-1.63 (m， 1H) > 1.46 (s5 9H) ^ 1.07 (d? J = 6.3 Hz? 3H) > 1.00 (d5 J = 6·3 Hz，3H) ; % nmR (75 MHz，CDC13) δ 169.13、 163.21、134.50、：128.87、123.53、84.74、83.39、39.89、 127863.doc -39- 200844079 27.82、24.47、22.90、21·96 ; IR (CHC13) 3032、1793、 1 738 cnT丨；LRMS (EI，70 ev) m/z 333 (M+，l)、278 (6)、 232 (17)、164 (15)、148 (100) ; HRMS (El)，對於 C18H23N〇5 (M+):經計算為 333」576，實測為 333.1573。 將 NH2NH2’H20 (900 mg，1 8·0 mmol)添加至化合物 1 (2,〇〇 g，6.0 mmol)之CH3OH (20 mL)溶液中。1小時之後出現白 色沈澱。在室溫下攪拌歷時2·5小時之後，在真空下將反 應混合物濃縮。將殘留物溶解於CH2C12中且用5%之 f'、

NaHC〇3沖洗兩遍並接著用鹽水沖洗。將有機層在無水 Na2S〇4上乾燥且將其濃縮以提供游離胺（化合物2)與為無 色油之鄰苯二甲醯肼的混合物。在沒有進一步純化之情況 下將此混合物直接用於下列肽偶合反應中。 肽偶合反應。在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(80 mL) 添加至含有乾燥化合物2之燒瓶中，繼之添加i-羥基-7-偶 氮苯幷三氮嗤（HOAt，2.11 g，1 5.6 mmol)、間苯二甲酸（498 mg，3.0 mmol)、三乙胺（0.83 mL，6.0 mmol)，及最後 1-乙 基_3-(3·二甲胺基-丙基）-碳化二醯亞胺（EDCI，5.35 g，18,0 mmol)。在整夜授拌之後，用（^2〇：12稀釋反應混合物。用 ' 5%2NaHC〇3及鹽水沖洗有機層，接著將其在無水MgS04 - 上乾燥及濃縮。藉由閃蒸塔層析法將原油純化以提供呈白 色固體的1.32 g(82%之產量）之實例1。藉由以下資料來特 徵化實例 1 : m.p· 57-59 °C ; [〇c]2°D + 78.1。 （c 0.50, CHC13) ; NMR (300 MHz，CDC13) δ 9.86 (br，2H)、8.14 (t，/ = 1·5 Hz，1H)、7·90 (dd，J = 7.8, 1·5 Hz，2H)、7.48 127863.doc -40- 200844079 (t? J = 7.8 Hz? 1H) > 4.53 (dd5 J = 9.0? 4.2 Hz? 2H) ^ 2.01-1.92 (m，2H)、1.77-1.68 (m，2H)、1.60-1.51 (m，2H)、1.46 (s，18H)、1.02 (d，J = 6·5 Hz，12H)、0.96 (d，= 6.5 Hz， 6H) ； 13C NMR (75 MHz，CDC13) δ 171.80 ' 164.58 > 132.18、130.41、128.91、125.58、82.37、82.17、39.86、 27.97、24.60、23.18、23.01、21.79 ; IR (CHC13) 3403、 3019、1730、1688 cm·1 ; LRMS (EI，20 eV) m/z 536 (M+) ; HRMS (EI，20 eV)，對於C28H44N208 (M+) ··計算為 536.3 098，實測為 536.3078 〇 實例2之製備

流程B 根據上述之流程B製備實例2。在室溫下等體積之 CF3COOH(5 mL)經由注射器小心地添加至實例1(537 mg， 1 ·0 mmol)於CH2Ch(5 mL)中之溶液内。在室溫下搜拌3小 時之後，反應混合物在真空下濃縮。殘留物與甲苯共沸兩 次，產生呈白色固體之游離酸化合物3 ’白色固體直接用 於肽偶合中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2Cl2(5〇 mL)添加至含有乾 127863.doc -41 · 200844079 燥游離酸化合物3之燒瓶中，繼之添加HOAt (354 mg，2.6 mm〇1)、異丁胺（0·21 mL，2·1 nimol)，及最後 EDCI (891 mg，3·0 mmol)。在整夜攪拌之後，用ch2c12稀釋反應混合 物。有機層用5% NaHC〇3及鹽水洗，接著在無水％0〇4上 乾燥及濃縮。粗油藉由快速管柱色層分析（flash c〇lumn chromatography)純化，提供呈白色固體的492 mg之實例 2(92%產率）。實例2由以下資料特徵化：m.p. 176_178°c ; [a]20D+67.3 °(c 0.50, CHC13) ； NMR (600 MHz, CDC13) δ 10.43 (s，2H)、8.12 (s，1H)、8.07 (t，5.7 Hz，2H)、8·04 (d，J = 7·8 Hz，2H)、7·57 (t，/ = 7.8 Hz，1H)、4.40 (dd，J =9.5，3.4 Hz，2H)、3.05-3.01 (m，2H)、2.91-2.88 (m， 2H)、1.86 - 1.62 (m，8H)、0.92 (d，J = 6.6 Hz，12H)、0.84 (d? J = 6.7 Hz, 6H) > 0.78 (d5 J = 6.7 Hz, 6H) ； 13C NMR (75 MHz，CDC13) δ 171.89、166.14、131.97、131.30、 129.69、124.93 ' 85.60 ' 46.69 ' 41.15 > 28.29、24.85 > 23.18、21.81、20.04、19.99 ; IR (CHC13) 3332、3185、 1663 cm·1 ; LRMS (EI，20 eV) m/z 534 (M+) ; HRMS (EI， 20 eV)，對於 C28H46N406 (M+):計算為 534.3417，實測為 534.3435 ° 127863.doc -42- 200844079 實例3之製備

h2nc10h21 EDC1, HOAt CH2C12

流程C

Ο 根據上述之流程C製備實例3，除了用癸胺替換異丁胺之 外，流程C類似於用於實例2之流程B。將實例3單離為無 色油。藉由以下資料來特徵化實例3 : [a]2〇D+34.5°(c 1.00, CHC13) ; 1h NMR (400 MHz，CDC13) δ 11.32 (s，2H)、8·28 (br，2Η)、8·19 (s，1Η)、8.05 (d，= 7.5 Ηζ，2Η)、7·52 (t， J = 7·5 Hz，1H)、4.38 (br，2H)、3.13-3.02 (m，4H)、1.82 (m，2H)、1.65-1.55 (m，4H)、1.42 (br，4H)、1.35-1.25 (m， 28H)、0.89-0.85 (m，18H) ; 13C NMR (100 MHz，CDC13) δ 172.30、165.91、132.05、131.29、129.37、124.98、 85.31、41.17、39.47、31.89、29.55、29.53、29.30、 29.12、26.91、24.73、23.18、22.67、21.79、14.10 ； IR (CHC13) 3446 - 1662 cm' 1 ； LRMS (FAB) m/z 704 (M+,l)； HRMS (FAB)，對於 C4〇H71N406 (M+，l) ··經計算為 703.5 3 74，實測為 7Q3 5354。 127863.doc -43 - 200844079 實例4之製備

O

TFA ^γΟγ^Λ^ΟΗ 〇 o o o 化合物3 ί、

>Τ°ϊ °^Ύ^1Γ 'ο ο ο 實例1 h2nc14h29 EDC1, HOAt C14H29〆 CH2C12 流程D 根據上述之流程D製備實例4，除了用十四胺替換異丁胺 之外’流程D類似於用於實例2之流程b。將實例4單離為 黃色油。藉由以下資料來特徵化實例4 : [α]2〇〇 + 52·2。（c 1.00, CHC13) ； ln NMR (400 MHz, CDC13) δ 10.97 (s5 2H)、8.15 (br，3H)、8.05 (d，/ = 7.8 Hz，2H)、7.53 (t，J = 7·8 Hz，1H)、4.3 6 (dd，J = 9.1，3.7 Hz，2H)、3.16-3.06 (m， 4H)、1.80 (m，2H)、1.65-1.55 (m，4H)、1.43 (br，4H)、 1.25-1.17 (m，44H)、0.89-0.85 (m，18H) ; 13C NMR (100 MHz，CDC13) δ 171.96、165.92、132.00、131.26、 129.43、124.93、85.38、41.07、39.39、31.89、29.67、 29.64、29.59、29.53、29.33、29.27、29.14、26.89、 CH2C12

24.72、23.12、22.66、21.77、14.08 ; IR (CHC13) 3441、 3342、1662 cm·1 ; LRMS (FAB) m/z 816 (M+ + 1) ; HRMS (FAB)，對於 C48H87N406 (M+，l):經計算為 815.6626，實測 為 815.6610。 127863.doc • 44- 200844079 實例5之製備

實例1 化合物3 C18H37-

•c18h37 實例5 h2nc18h37 EDCl, HOAt CH2C12

流程E

根據上述之流程E製備實例5，除了用十八胺替換異丁胺 之外，流程E類似於用於實例2之流程b。將實例5單離為白 色固體。藉由以下資料來特徵化實例5 : m.p· 88_90 °C ; [a]20D +43.9。（c 1 ·〇〇，CHC13) ; 4 NMR (300 MHz，CDC13) δ 11.11 (s，2H)、8.18 (br，3H)、8.05 (d，J = 7·7 Hz，2H)、 7.55 (t，= 7.7 Hz，1H)、4.36 (dd，J = 8.8, 3.4 Hz，2H)、 3.15 — 3.05 (m，4H)、1.80 (m，2H)、1·65-1·54 (m，4H)、 1.41 (br，4H)、1 ·30 - 1 · 16 (m，60H)、0_89 - 0.84 (m， 18H) ; 13C NMR (75 MHz，CDC13) δ 172.03、165.89、 131.98、129.37、124.98、85.31、41.06、39.39、31.89、 29.69、29.60、29.53、29.33、29.28、29.12、26.88、 24.68、23.12、22.56、21.74、14.08 ; IR (CHC13) 3444、 3345、1662 cm·1 ; LRMS (FAB) m/z 928 (M+ 1) ; HRMS (MALDI)，對於 C56H1()2N406(M++Na)：經計算為 927.4323，實測為 949.7678 ° 127863.doc -45- 200844079 實例6之製備

化合物1 化合物4 化合物5

流程F Γ

根據上述之流程F製備實例6。在室溫下通過注射器將等 體積之CF3COOH(10 mL)小心地添加至化合物1(1.00 g, 3.0 mmol)之CH2C12(10 mL)溶液中。在室溫下攪拌歷時3小時 之後，在真空下將反應混合物濃縮。將殘留物與甲苯共沸 兩遍以產生呈白色固體之化合物4且將白色固體直接用於 以下的下一步驟中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(80 mL)添加至含有乾 燥化合物4之燒瓶中，繼之添加HOAt(530 mg，3.9 mmol)、 異丁胺（〇·32 mL，3·15 mmol)，及最後EDCI(1.34 g，4·5 mmol)。在整夜攪拌之後，用CH2C12稀釋反應混合物。用 5%之NaHC03及鹽水沖洗有機層，接著將其在無水MgS04 上乾燥及濃縮以提供呈白色固體（化合物5)之化合物5(0.99 g，99%)，在沒有進一步純化之情況下將該化合物5直接用 於下一步驟中。 將 ΝΗ2ΝΗ2·Η2〇(450 mg，9.0 mmol)添加至化合物 5 之 CH3OH(10 mL)溶液中。1小時之後出現白色沈澱。在室溫 127863.doc -46- 200844079 下授掉歷時2 · 5小時之後’在真空下將反應混合物濃縮 將殘留物溶解於CHAh中且用5%之NaHC〇3沖洗兩遍並接 著用鹽水沖洗。將有機層在無水NaSCU上乾燥且將其濃缩 以提供化合物6與為無色油之鄰苯二曱醯肼的混合物。在 . 沒有進一步純化之情況下將此混合物直接用於下一步驟 中。 在氮氣氛下將新近蒸德之CH2C12(50 mL)添加至含有乾 燥化合物6之燒瓶中，繼之添加HOAt(53 0 mg，3.9 mnum、 苯曱酸（366 mg，3.0 mmol)、三乙胺（〇 41 mL，3·〇 mmol)， 及最後EDCI(1.34 g，4.5 mmol)。在整夜攪拌之後，用 CHsCh稀釋反應混合物。用5%之NaHC〇3及鹽水沖洗有機 層，接著將其在無水MgS〇4上乾燥及濃縮。藉由閃蒸塔層 析法將原油純化以提供呈白色固體的實例6(832 mg， 86%)。藉由以下資料來特徵化實例6 : m.p. 13(M32°C ; [a]20D+31.7〇(c 1.00? CHC1S) ； lU NMR (400 MHz, CDC13) δ ◎ 9.98 (br，1H)、8.21 (br，1H)、7·75 (d，J = 7·5 Hz，2H)、 7.52 (t，J = 7·3 Hz，1H)、7·52 (t，= 7.6 Hz，2H)、4.40 (dd，/ = 9.4，3.8 Hz，1H)、3.13-2.97 (m，2H)、1.85-1.61 (m，4H)、0.92-0.85 (m，12H) ; 13C NMR (75 MHz，CDC13) • δ 171.94、167.74、132.41、131.01、128.65、127.27、 85.40、46·61、40.97、28.32、24.71、23.19、21.62、 20.06、19.88 ; IR (CHC13) 3345、1659 cnT 1 ; LRMS (EI， 20 eV) w/z 307 (M+，l) ; HRMS (EI，20 eV)，對於 C17H26N2〇3 (M+):經計算為 306.1943，實測為 306.1923。 127863.doc -47- 200844079 實例7之製備 〇

Ο nh2nh2>h2o ^ MeOH

化合物6 化合物5

Γ 根據上述之流程G製備實例7。將ΝΗ2ΝΗ2·Η2Ο(150 mg， 3·0 mmol)添加至化合物 5(332 mg，1 mmol)之 CH3OH( 1 0 mL)溶液中。1小時之後出現白色沈澱。在室溫下攪拌歷時 2.5小時之後，在真空下將反應混合物濃縮。將殘留物溶 解於CH2C12中且用5%之NaHC03沖洗兩遍並接著用鹽水沖 洗。將有機層在無水Na2S04上乾燥且將其濃縮以提供化合 物6與為無色油之鄰苯二甲醯肼的混合物。在沒有進一步 純化之情況下將此混合物直接用於下一步驟中。

(J 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(50 mL)添加至含有乾 燥化合物6之燒瓶中’繼之添加H〇At(177 mg，1.3 mmol)、 吡啶-2,6-二羧酸（3 66 mg，0·5 mmol)、三乙胺（0.14 mL，1·0 mmol)，及最後EDCI(447 mg，！ 5 mm〇i)。在整夜攪拌之 後，用CHaCb稀釋反應混合物。及鹽水沖 洗有機層，接著將其在無水MgS〇4上乾燥及濃縮。藉由閃 蒸塔層析法將原油純化以提供呈白色固體的實例7(214 mg，80%)。藉由以下資料來特徵化實例7: mp· 175]77 127863.doc •48- 200844079 °C ; [a]20D+117.2° (c 0.50，CHC13); 4 NMR (300 ΜΗζ， CDC13) δ 11.97 (s，2H)、8.31 (d, J = 7.8 Hz，2H)、8·20 (t， J = 5.7 Hz? 2H) ^ 8.10 (t5 J = 7.8 Hz? 1H) > 4.41 (dd5 J = 8.6, 4.2 Hz，2H)、3·05-2·98 (m，4H)、1.81-1.60 (m，8H)、 0.90-0.78 (m，24H) ; 13C NMR (75 MHz，CDC13) δ 171.73、 162.30、147.51、139.20、125.59、85.3 0、46.68、41.12、 28.16、24.65、23.03、21.97、19.99、19.95 ; IR (CHC13)

3321、1673 cm'1 ； LRMS (EI5 20 eV) m/z 535 (M+) ； HRMS (EI，20 eV)，對於 C27H45N506 (M+):經計算為 535.3370, 實測為535.3371。 實例8之製備

流程Η ϋ 根據上述之流程Η製備實例8。在氮氣氛下將TV-第三丁氧 基羰基-L-白胺酸（化合物7)(693 mg，3.0 mmol)溶解於新近 蒸餾之CH2C12(50 mL)中，繼之添加 HOAt(530 mg，3.9 mmol)、異丁胺（0.32 mL，3.15 mmol)，及最後 EDCI( 1 ·34 g，4.5 mmol)。在整夜攪拌之後，用CH2C12稀釋反應混合 物。用5%之NaHC03及鹽水沖洗有機層，接著將其在無水 127863.doc -49- 200844079

MgSCU上乾燥及濃縮以提供呈白色固體之化合物8(85i mg， 99%)，在沒有進一步純化之情況下將該化合物8直接用於 下一步驟中。 在室溫下通過注射器將等體積之CF3COOH(5 mL)小心地 添加至化合物8之CH2C12(5 mL)溶液中。在室溫下攪拌歷 曰守3小時之後’在真空下將反應混合物濃縮。將殘留物溶 解於CHC13中，用K2C03溶液（PH = 12)及鹽水沖洗，將其 在無水NhSCU上乾燥，且將其濃縮以產生呈無色油之游離 胺化合物9，將游離胺化合物9直接用於下一步驟中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(5〇 mL)添加至含有乾 综化合物9之燒瓶中，繼之添加]^〇^(53〇 mg，3 9 mm〇1)、 間苯二甲酸（249 mg，1·5 mmol)、三乙胺（〇·41 mL，3.0 mmol)，及最後EDCI(L34 g，4 5 mm〇1)。在整夜攪拌之 後，用CH2C12稀釋反應混合物。用5%之NaHC〇3及鹽水沖 洗有機層，接著將其在無水Mgso4上乾燥及濃縮。藉由閃 瘵塔層析法將原油純化以提供呈白色固體的實例8(6 J 7 mg ’ 82%)。藉由以下資料來特徵化實例8 : m p· 240-242

C , [a] D 32.1。(c 1.00，CHC13) ; NMR (500 MHz， CDC13) δ 8.20 (s，1H)、7.92 (d，J = 7.8 Hz，2H)、7.48 (t，J =7.8 Hz, 1H) ^ 7.09 (d? J - 8,2 Hz, 2H) ^ 6.35 (t, J = 5.8

Hz，2H)、4.65 (m，2H)、3.15-3.10 (m，2H)、3.05-3.00 (m， 2H)、1.81-1.69 (m，8H)、0.97 (d，j = 6 7 Hz，12H)、〇 9〇 (d，J = 6.7 Hz，12H) ; 13c NMR (125 MHz，CDC13) δ 172.01、166.53、134.19、i3〇 47、128 98、125 53、 127863.doc -50. 200844079 52.48、46.94、41.27、28.45、24.93、22.86、22.31、 20.08、20.06 ; IR (CHC13) 3400 > 1653 cm'1 ； LRMS (EI? 20 eV) m/z 503 (M+) ; HRMS (EI，20 eV)，對於C28H46N404 (M+):經計算為 502.35 19，實測為 502.3486。 實例9之製備

NaN02 h2so4 化合物10 Η2Ν

化合物11 化合物12

Lj

實例9

HOOC

EDC1, HOAt CH2CI2, Et3N

流程I 根據上述之流程I製備實例9。將濃硫酸（0.48 mL)謹慎地 添加至在含有L-白胺酸（化合物10)(787 mg，6.0 mmol)之 1 00 mL之圓底燒瓶中的水（22 mL)中。通過滴液漏斗以使 得反應混合物之溫度不會超過5 °C之此種速率添加 NaN02(1.24 g，18 mmol)之水（40 mL)溶液。在 0°C 下擾拌歷 時1小時之後，將反應混合物緩慢地溫至室溫且攪拌歷時 另外1小時。用乙酸乙酯萃取產物且用鹽水沖洗有機層並 接著將其在無水MgS〇4上乾燥。將有機溶劑蒸發乾以產生 黏性淡黃色油化合物11，將該黏性淡黃色油化合物11直接 用於下一步驟中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(50 mL)添加至含有化 合物11之燒瓶中，繼之添加HOAt(l .06 g，7.8 mmol)、異丁 127863.doc -51 - 200844079 胺（0.63 mL，6.3 mmol)，及最後 EDCI(2.68 g，9.0 mmol) ° 在整夜攪拌之後，用CH2C12稀釋反應混合物。用5%之 NaHC〇3及鹽水沖洗有機層，接著將其在無水MgS04上乾 燥及濃縮以提供呈白色固體之化合物丨2，在沒有進一步純 化之情況下將該化合物12直接用於下一步驟中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(50 mL)添加至含有化 合物12之燒瓶中，繼之添加HOAt( 1.06 g，7.8 mmol)、間苯 二甲酸（5 0〇111§，3 111111〇1)、三乙胺（〇.82 1111^，6.〇111111〇1)，及 最後EDCI(2.6 8 g，9·0 mmol)。在整夜攪拌之後，用CH2C12 稀釋反應混合物。用5%之NaHC03及鹽水沖洗有機層，接 著將其在無水MgS04上乾燥及濃縮。藉由閃蒸塔層析法將 原油純化以提供呈白色固體的實例9(1.02 g，68%)。藉由 以下資料來特徵化實例9 : m.p· 13 7-139°C ; [a]20D + 22.6°(c 1.00, CHC13) ； NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.74 (t5 J = 1.6 Hz，1H)、8·32 (dd，J = 7.8，1.7 Hz，2H)、7.63 (t，J = 7.8 Hz, 1H) > 6.06 (t? J = 5.7 Hz, 2H) > 5.43 (dd, J = 9.4, 3.9 Hz，2H)、3.11 (t，= 6·6 Hz，4H)、1.96-1.75 (m，8H)、 1.00-0.97 (m，12H)、0.90-0.87(m，12H) ; 13C NMR (100 MHz, CDCI3) δ 169.78、164.66、134.48、130.85、 130.08、129.20、74.03、46.50 > 40.78、28.45 > 24.73、 23-13、21.81、19.94 ; IR (CHC13) 3450、1729、1679 cnT1 ; LRMS (EI，20 eV) m/z 504 (M+) ; HRMS (EI，20 eV)，對於 C28H44N2〇6 (M+):經計算為 504.3199，實測為 504.3199。 127863.doc -52- 200844079 用於實例2之替代性製備方法

HOOC

XX

EDC1, HOAt CH2Cl2,Et3N

COOH

ϋ

流程J 亦根據上述之流程J製備實例2，除了用間苯二甲酸替換 吼啶·2,6-二羧酸之外，流程j類似於用於實例7之流程G。 將實例2單離為藉由以下資料來特徵化之白色固體：m p. 176-178〇C ; [a]20D(度 cm3 g-1 (Ιιη’ + όΤΙΟ = 0·01 g cm-3， 在 CHCI3 中），ifl-NMR (600 MHz，CDCI3) δ 10.43 ppm (s， 2H)、8.12 (s，1H)、8.07 (t，= 5.7 Hz，2H)、8.04 (d，J = 7.8 Hz? 2H) > 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 1H) > 4.40 (dd5 J = 9.5, 3.4 Hz，2H)、3.05-3.01 (m，2H)、2.91-2.88 (m，2H)、 1.86 - 1.62 (m，8H)、0.92 (d，J = 6.6 Hz，12H)、0.84 (d，/ =6.7 Hz5 6H) > 0.78 (d5 J = 6.7 Hz, 6H) ； 13C-NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.89、166.14、131-97、131.30、 129.69、124.93、85.60、46.69、41 · 15、28.29、24.85、 23.18、21.81、20.04、19.99 ; IR (CHC13) 3,332 cnT1、 3，185、1，663 (C=0)cm-1 ; LRMS (EI，20 eV) m/z 534 (M+) ; HRMS (EI，20 eV) 〇/z):[M+]，對於C28H46N4〇6，經 計算為534.3417 ;實測為534.3435。 127863.doc -53- 200844079

實例ίο之製備

流程K 根據上述之流程K製備實例10。將ΝΗ2ΝΗ2·Η2Ο(150 mg，

3.0 mmol)添加至化合物 5(332 mg，1 mmol)之 CH3OH( 1 0 mL)溶液中。1小時之後出現白色沈澱。在室溫下攪拌歷時 2.5小時之後，在真空下將反應混合物濃縮。將殘留物溶 解於CH2C12中且用5%之NaHC03沖洗兩遍並接著用鹽水沖 洗。將有機層在無水Na2S04上乾燥且將其濃縮以提供化合 物6與為無色油之鄰苯二曱醯肼的混合物。在沒有進一步 純化之情況下將此混合物直接用於下一步驟中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(50 mL)添加至含有乾 燥化合物6之燒瓶中，繼之添加HOAt(l-羥基-7-偶氮苯幷 三氮唑，CAS 第 39968-33-7 號，177 mg, 1.3 mmol)、對苯 二酸（83 mg，0.5 mmol)、三乙胺（0·14 mL，1·0 mmol)，及 最後EDCI(447 mg，1.5 mmc^)。在整夜攪拌之後，用 CH2C12稀釋反應混合物。用5%之NaHC03及鹽水沖洗有機 127863.doc -54- 200844079 層’接著將其在無水MgSCU上乾燥及濃縮。藉由閃蒸塔層 析法將原油純化以提供呈白色固體的實例1〇(107 mg， 40%)。藉由以下資料來特徵化實例1〇 : iH NMR (300 MHz，DMSO-A) δ 12.03 (s，2H)、8.24 (s，2H)、7·82 (s， 4H)、4.38 (dd，J = 8·5, 4·5 Hz，2H)、2.96 - 2.90 (m，4H)、 1.83_1.50(m，8H)、0·98 (d，J = 6.5 Hz，6H)、0·93 (d，= 6·5 Hz，6H)、0.81(d，J = 6·6 Hz，6H)、0.79(d，/ = 6.6 Hz， 6H) ; 13C NMR (75 MHz，DMSO-d6) δ 170.93、164.99、 135.00、127.79、84.01、46.25、28·42、24·66、23·47、 22.47、20·40、20.16 ; LRMS (ESI) m/z 557 (M+ + Na)。 實例11之製備

流程L 根據上述之流程L製備實例11。將ΝΗ2ΝΗ2·Η2Ο(150 mg， 3.0 mmol)添加至化合物 5(332 mg，1 mmol)之 CH3OH( 1 0 mL)溶液中。1小時之後出現白色沈澱。在室溫下攪拌歷時 2.5小時之後，在真空下將反應混合物濃縮。將殘留物溶 127863.doc -55- 200844079 解於CHAh中且用5%之NaHC〇3沖洗兩遍並接著用鹽水沖 洗。將有機層在無水NaeCU上乾燥且將其濃縮以提供化合 物6與為無色油之鄰苯二曱醯肼的混合物。在沒有進一步 純化之情況下將此混合物直接用於下一步驟中。 在氮氣氛下將新近蒸館之CH2C12(5 0 mL)添加至含有乾 燥化合物6之燒瓶中，繼之添加HOAt( 1 -經基·7_偶氮苯幷 三氮哇，177 mg，1.3 mmol)、苯-1，3,5-三魏酸（105 mg，0.5 mmol)、三乙胺（〇·14 mL，1.0 mmol)，及最後 EDCI(二氯乙 烧，447 mg，1.5 mmol)。在整夜擾拌之後，用CH2C12稀釋 反應混合物。用5%之NaHC03及鹽水沖洗有機層，接著將 其在無水MgS04上乾燥及濃縮。藉由閃蒸塔層析法將原油 純化以提供呈白色固體的實例11(171 mg，45%)。藉由以下 資料來特徵化實例11 : 4 NMR(400 MHz，DMSO-A) δ 12.14 (s，3Η)、8.26 (s，3Η)、8·22 (s，3Η)、4.38 (dd，= 8.4, 4·0 Hz，3H)、3.00-2.89(m，6H)、1·85-1·51(πι，12H)、 0.98 (d，J = 6·5 Hz，9H)、0.93 (d，J = 6.6 Hz，9H)、0·81 (d? J = 7.0 Hz, 9H) > 0.79 (d5 J = 8.0 Hz? 9H) ； 13C NMR (100 MHz，DMSO〇 δ 170.97、164.43、132.80、 129.45、84.19、46.25、28.43、24.69、23.48、22.42、 20.40 ; LRMS (ESI) 762 (M+) 〇 127863.doc -56- 200844079 實例12及13之製備

實例13 流程Μ 根據上述之流程Μ製備實例12及13。將ΝΗ2ΝΗ2·Η2Ο(150 mg，3·0 mmol)添加至化合物 5(332 mg，j 之 CH3〇H(10 mL)溶液中。1小時之後出現白色沈澱。在室溫 下攪拌歷時2·5小時之後，在真空下將反應混合物濃縮。 將殘留物溶解於CHKh中且用5%之NaHC〇3沖洗兩遍並接 著用鹽水沖洗。將有機層在無水Na2S〇4上乾燥且將其濃縮 以提供化合物6與為無色油之鄰苯二甲醯肼的混合物。在 沒有進一步純化之情況下將此混合物直接用於下一步驟 中。 在氮氣氛下將新近蒸餾之CH2C12(50 mL)添加至含有乾 燥化合物6之燒瓶中，繼之添加H〇At(l-羥基-7-偶氮苯幷 一氮嗤，177 mg，1.3 mmol)、戊稀二酸（65 mg，〇·5 mmol)、三乙胺（〇·14 mL，ΐ·〇 mmol)，及最後EDCI(二氣乙 127863.doc -57- 200844079 烷，447 mg，1.5 mmol)。在整夜攪拌之後，用CH2C12稀釋 反應混合物。用5%之NaHC03及鹽水沖洗有機層，接著將 其在無水MgSCU上乾燥及濃縮。藉由閃蒸塔層析法將原油 純化以提供呈白色固體的實例1 2(40 mg，1 6%)。藉由以下 資料來特徵化實例 12 : 士 NMR(300 MHz，CDC13) δ 10.60 (br，1Η)、10.49 (br，1Η)、8·07 (br，1Η)、7.88 (br，1Η)、 6.88 (dt，J = 15.4, 6·9 Hz，1H)、5.89 (d，J = 15 Hz，1H )、 4.28 (d, J = 5.2 Hz, 2H ) > 3.11-2.97 (m, 6H) ^ 1.84-1.60 (m，8H)、0.95-0.87 (m，24H) ; 13C NMR(100 MHz，CDC13) δ 171.97、167.92、137.25、123.45、85.31、85.22、 46·70、46.66、40.98、28.34、24.71、23.16、21.71、 20·07 ; LRMS (ESI) m/z 521 (M+ + Na)。 將實例12(40 mg，〇·〇8 mm〇l)溶解於i mL之MeOH中，將 4 mg之1 0%之Pd/C添加至該混合物，接著整夜在球壓 (balloon pressure)下在室溫下用h2攪拌該混合物。通過矽 藻土過濾反應混合物且將其濃縮以提供實例丨3(4〇 mg ,數 量）。藉由以下資料來特徵化實例13 : NMR(300 MHz， CDC13) δ 7.69 (br，2H)、4.35 (dd，J = 8.6, 3·8 Hz，2H )、 3.29-3.24 (m，2H)、2.87-2.85 (m，2H)、2.18-2.16 (m， 2H)、1.88-1.63 (m，12H)、1·〇〇-〇·92 (m，24H) ; 13C NMR(75 MHz，CDC13) δ 172.72、170.30、86.21、46.59、 40.77、30.58、28.44、24.75、23.04、21.80、20.71、 20.05 ； LRMS (ESI) m/z 523 (M+ + Na) 〇 127863.doc -58 - 200844079 實例14_pH-stat螢光輸送檢定 此實例說明：當將實例2之化合物併入脂質體中時，實 例2之化合物調控氯離子釋放。基於脂質體之pH-stat螢光 檢定為常規用於識別生理上相關之離子載體之檢定，離子 載體揭示於以下文件中：（a)Deng，G、Dewa, T及Regen，S. L.之乂 Am. Chem. Soc (1996，118, 8975) ; (b)Schlesinger， P. H.、Ferdani，R.、Liu，J.、Pajewska，J.、Pajewski，R.、 Saito, M. ^ Shabany, H.AGokel, G. W.^J. Am. Chem. Soc (2002，7以，1848) ; (c)Sidorov，V.、Kotch，F. W.、 Abdrakhmanova, G.、Mizani，R.、Fettinger，J. C.及 Davis， J. T. ^ J. Am· Chem· Soc (2002， 124, 2267) ; (d)Sidorov， V.、Kotch，F. W.、Kuebler，J. L.、Lam，Y.-F·及 Davis，J. T·之 J. dm. C/zem· Soc (2003，725，2840);及（e)Baumeister， B.、Sakai，N.及 Matile，S.之 五义（2000, 39，195 5)，所有該等文件以引用之方式併入本文中。舉例 而言，在此檢定中，將可控量之驗及可能的離子載體添加 至脂質體之含有pH-敏感染料8-羥基芘-1，3,6-三磺酸鹽 (HPTS，螢光黃染料）的懸浮液中。所得的雙層膜上之pH 梯度造成水合氫離子之流出或氫氧離子之流入且形成靜電 位。此電位可藉由陰離子之流出或陽離子之流入來補償 (H+/M+或OH_/A_反向協同運輸及H+/A_或M+/OH_同向協同 運輸機制係可能的）。若相關化合物調控該離子輸送，則 水合氫離子之流出或氫氧離子之流入繼續改變血管内之pH 及報導染料之螢光性。 127863.doc -59- 200844079 如 Sidorov，ν·、Kotch，F. w.、Abdrakhmanova，G·、

Mizani，R·、Fettinger，J· C·及 Davis，J· T·之X jm· C/zem.

Soc· (2002，724，2267)中所報導的，以loo nm平均尺寸之 單層大微脂粒（LUV)確定受實例2調控之氯離子釋放。圖5 展示··實例2之應用產生了囊胞外電解質與囊胞内電解質 之間的快速的、依賴於濃度之交換。重要的是，實例2用 咼的陰離子選擇性調控電解質交換。其在存在氯離子但不 Ο u 存在硫酸鹽之情況下調控電解質交換（見圖6)。與使用

NaCl囊胞外及囊胞内緩衝液之圖6中所展示之結果相比 較，在對稱裝載有NadO4之LUV中未偵測到輸送活性。此 依賴於陰離子之活性為實例2調控雙層上之氣離子輸送之 強有力的證據。圖7展示：除實例2之外，實例丨及實例3至 9亦可以不同效率調控在含有氯離子之脂質體之脂質雙層 上的氣離子輸送。圖12展示：除實例2之外，實例10至13 亦可X不同效率凋控在含有氯離子之脂質體之脂質雙層上 的氣離子輸送。 只 丄j 4 5展示·當實例2之化合物經分割至脂質雙層中 時，貝例2之化合物可充當依賴於電壓之氯離子選擇性通 ^开用膜片钳制技術之單—通道記錄為用於識別離子通 ^膜、甬不同於諸如離子载體之其他離子輸送機制）及量 、、、之離子輸送效率之最賴 技術在巨大脂仗用膜月甜制 體上核驗併入脂質雙層中之實例2之通道 形成活性。杏腚每 〜心 田、只例2應用在電解液中時特徵性單一通道 127863.doc -60- 200844079 2流在對稱的〇·2河之#•甲基·葡糖胺氫氯化物⑺ 溶液中經記錄為具有54 pS之主電導率(圖8)，從而指示實 例2可有效地分割至脂質體之脂質雙層中且藉此形成離子 通道。 離子通道之兩個關鍵性能本質上為離子選擇性（亦即， " 通道僅准許某些離子物質流過其微孔），及關於通道打開 及關閉之機制之選通。藉由實例2形成之離子通道證明為 ❹ 陰離子選擇性及電壓選通式的。當電解液中之NMDG-C1被 氯化鉀（KC1)置換時，電導率或逆轉電位均不存在可量測 之改變，此暗示此等通道不可滲透κ離子。當在生理上相 關之電壓範圍内增加脂質雙層之電壓時，通道打開機率 (Ρ。）及頻率急劇提高，此暗示依賴於電壓之選通（圖8)。 實例16 實例16展示：實例2之化合物分割至人的細胞膜中且顯 著增加細胞氯電流。使用膜片钳制技術之全細胞組態檢驗 (J 人胚胎腎（ΗΕΚ 293)細胞中由實例2誘導的離子電流之電生 理學性能。將最初自美國典型微生物菌種保藏中心 (American Type Culture Collection)所獲得之ΗΕΚ 293細胞 株在增補有10%之FBS及100 IU/ml之盤尼西林g及0.1 • mg/ml之鏈黴素的DMEM中培養。細胞在37 °c下在5%之 C02加濕培育箱中生長。藉由使用電壓钳制模式之epc 9膜 片钳制放大器（HEKA Elektronik，Lambrecht/Pfalz，德國） 在Pulse/PulseFit 8·7軟體（HEKA)之控制下記錄全細胞氣電 流。使膜片吸液管（電阻，3-5 ΜΩ)充滿溶液，吸液管内部 127863.doc -61 - 200844079 之溶液含有 CsCl 140、MgCl2 1、HEPES 10、EGTA 5、 Na2ATP 5(單位為mm〇l/L，以CsOH得到ρΗ7·2)。電解液含 有 NaCl 140、CsCl 5、CaCl2 1、MgCl2 1、HEPES 10(單位 為mmol/L，以CsOH得到pH 7·4)。在獲得千兆歐姆密封之 後，膜在脈衝負壓下破裂。吸液管及膜電容自動獲得補 償。串列電阻通常被補償70%。將細胞固持在〇 mV且以20 mV之階躍遞增量施加在-80至+80 mV之範圍中之電壓階躍 歷時800 ms。將所有宏觀電流以50 kHz取樣且以5 kHz過 濾’並用PulseFit(HEKA)分析資料。在將細胞曝光於含有 50 nM之濃度之實例2的電解液之前及之後，自相同細胞偵 測到C1電流之改變。所有實驗在室溫下執行（22-25°C )。 在50 nM之低濃度下，實例2造成全細胞電流之大增加 (圖9)，此指示實例2可有效地調控HEK 293細胞之細胞膜 上之C1離子輸送。此外，在存在細胞陰離子輸送抑制劑 (諸如，4,4’-二異硫氰基芪_2,2、二磺酸（DIDS))之情況下， Q 經誘導之電流不減少。此性能排除了實例2可藉由激活 HEK 293細胞中之天然氣離子通道而增加全細胞電流且暗 示藉由實例2形成之合成氯離子通道的確說明瞭所觀察到 的電流。 • 實例17 實例1 7展示具有氯離子-敏感螢光指示劑SPQ之脂質體中 的實例2之化合物的氯離子輸送活性。 脂質體製備：將蛋黃L-α-磷脂醯膽鹼（EYPC，91 mg，120 μιηοΐ)溶解於CHCh/MeOH混合物中，在低壓下將溶液蒸發 127863.doc -62- 200844079 且在向真空下將所得的薄膜乾燥歷時3小時。將脂質臈在 1.2 mL之溶液a(200 mM之NaN03，0.5 mM之SPQ)中水合歷 時2小k 在水合作用期間’將懸浮液提交至5次;東融循環 (液氮、室溫下之水）。在室溫下將大的多層脂質體懸浮液 (1 mL)提交至高壓擠壓（通過〇1 ^⑺之聚碳酸酯膜之>21次 擠壓’提供具有丨〇〇 nm之平均直徑的單層大微脂粒（L1JV) 之懸浮液）。藉由尺寸排外層析法（SEC)(固定相··葡聚糖凝 ^ 勝①50，移動相··溶液B : 20 mM之NaN03)將LUV懸浮液 與囊胞外染料分離且用溶液B稀釋以產生具有1〇 mM之脂 質濃度之儲備溶液（假定1 00%之脂質併入脂質體中）。 螢光檢定：通常，將100 之裝載SPQ之微脂粒（儲備溶 液）懸浮於1·9 mL之溶液c(200 mM之NaCl)中且將其置放於 螢光細胞中。用360 nm之激勵波長監視430 nm之SPQ發 射。在100秒時，通過注射埠添加2〇 0的實例2之〇 5 mM 之THF溶液。結果展示於圖丨〇中。 G 實例1 8 實例18展示實例2之X射線結晶分析。實例2之乂射線晶 體釔構展不於圖丨丨中。下列展示另一 χ射線結晶資料及收 集方法。

• 貝存從秦··使用黏著於玻璃纖維上之尺寸為〇·4 Χ 0·35 X 〇·1 mm之晶體以在-2〇。〇下在具有3〇〇影像盤偵測器之 MAR%射w十上使用石墨單色化輻射（λ=〇·7ΐ〇73 a)進 行貝料收集。用2。之φ振盪步長、15分鐘之曝光時間及12〇 mm之掃描距離來進行資料收集。收集到一百個影像。 127863.doc -63 - 200844079 磊邀資存：[C28H46N406];化學式量=534.69、斜方晶、 C 222j > a=7.725(2) A、b= 1 8.967(4) A、c = 21.1 45(4) A、 V = 3098.2(ll) A3、Z=4、Dc=1.146 g cm·3、 （Mo-Ka)= 0.081 mm·1、F(000)=1 160、T=253 K。 表1.用於實例2之晶體資料及結構改進。 C28H46N4O6 534.69 253(2) K 0.71073 A 斜方晶 C 222! a=7.725(2) A a=90。 。 b=18.967(4) A β=90。 。 c=21.145(4) A γ=9〇〇 〇 3098.2(1 1) A3 • 實驗式 化學式量 f、 溫度 波長 晶體糸統 空間群 單位細胞尺寸 體積 1/ z 密度（經計算的） 吸收係數 F(000) 晶體大小 用於資料收集之Θ範圍 索引範圍 所收集之反射 4 1.146 Mg/m3 0.081 mm'1 1160 0.4x0.35x0.1 mm3 1.93 至 25.35 ° 〇 -7<=h<=7, -21<=k<=21，-24<=1<=24 7174 127863.doc -64- 200844079 獨立反射 ㊀完整性=25.35。 吸收校正 改進方法 資料/限制/參數 F2之吻合度 2039[R(int) = 0.0498] 75.2%

Ml F2之全矩陣最小平方 2039/2/185 0.969 最後之 R索引[Ι>2 Σ(Ι)] R1=G.0497, wR2=0.1217 R索引（所有貧料） Rl=0.0707, wR2 = 0.1310 絕對結構參數 1(2) 取大差異峰值及微孔0.365及-0.284 e.A_3 、首士上述所證明的，本文中之實施例提供用於製造離子通 心、u物及包含離子通道組合物之膜的各種自組裝化合 物。雖然已關於有限數目之實施例描述本揭示案，但一實 施例之特殊特徵不應歸因於本發明之其他實施例。單一實 施例並不表示本發明之所有態樣。在-些實施例中，該等 Ο 或方法可包括本文中未敍述之眾多化合物或步驟。 ^ :實施财’該等組合物或方法不包括或大體上沒有 之"二舉之任何化合物或步驟。存在所描述之實施例 二=:舉例而言’本文中所揭示之離子通道組合 不而要僅包含自組裝化合物。 ϋ έθ . ^ 包3通常適合於離子 道、、且合物之任何類型之化合物。應、、主咅，士 ^ 之用於製造及佶用Μ工 μ/ w，本文申所揭示 w及使用離子通道組合物之方法 描述的。可以杯/皮 ’、》考夕驟 …列來實踐此等步驟。可省略或电人— 或夕個步驟但仍達成大 …口- °果。附加申請專利範 127863.doc -65- 200844079 圍意欲覆蓋落在本發明之範轉内之所有該等變化及修改。 本專利說明書中所敍述之所有公開案及專射請案在本 文中以引用之方式併入’其程度如同每一個別公開案或專 利申請案經特別及個別指示而以引用之方式併入本文中一 般。應瞭解，已借助於說明及實例詳細地描述本揭示宰以 便使熟習此項技術者熟悉本發明、本發明之原理及本發明 之實=應用。另外，如所闡述的本文中所提供之特殊實施 Ο Ο 例不意欲為詳盡的成限制太据- 、 者而案，且對於熟習此項技術 述而；夕“、修改及變化將根據前述實例及詳細描 述Γ易見。㈣，本揭示案意欲包含落在以下申請專 利乾圍之精神及範疇内之所有該 妙μ、+、>从 Τ自八修改及變化。雖 Ί述之某些實例及描述包括關於化合物、 可藉以作用夕古4 >甘丨 口 4々叹万/念 彼等“ ，4結論，但纟發明發明者不意欲受 及功能限制，而是根據當前之理解提出彼等結論 及功此來僅作為可能的說明。 【圖式簡單說明】 圖1描纷合成離子通道之基於其結構或"設計 類 ’之一些分 圖2描繪脂質雙層上之八志 鍵且粗f 口 I、，其中虛線表示氫 您且祖只線表不自組裝分 勺八石丨 刀子该專自組裝分子中之每一者 A表示）。 （错由D表不）及至少—氫鍵受體（藉由 圖3描緣圖2之合成離 ^^, 口戍離子通道中可能的陰離子輸 其中圓球表示睁雜工 ^ 』例迗過輊， -’虛線表示氫鍵且粗實線表示自組裝 127863.doc -66 - 200844079 刀子°亥等自組裝分子中之每一者包含至少一氫鍵供體 (藉由、表示）及至父氫鍵受體（藉由Α表示）。當陰離子通 過通道時’其個別地及連續地與沿著合成離子通道之氫鍵 供體中之每一者形成氫鍵。 . 圖牦至圖4d描繪實例2之各種化學表示。圖4a描繪實例2 之化學結構。圖4b以棍表示描繪實例2之晶體結構，其中 石反、虱、氮及氧原子分別藉由灰色、自色、藍色及紅色棍 奢厂:八有2 · 13 Α之鍵長度之兩個八員環分子内氫鍵經展 示為綠色虛線。圖4c及圖4d分別描繪實例2之固態填料之 俯視圖及側視圖。出於清楚起見而省略了圖乜及圖牦中之 CH氫原子。經展示為圖4d中之綠色實線之分子間氫鍵與 鄰近分子一起鍵聯及對準在以形成微孔結構。 圖5自單層大微脂粒（LUV)展示不同濃度下的藉由實例2 調控之氯離子釋放，其中使用NaC1囊胞外及囊胞内緩衝 液。實驗細節在實例14中加以描述。 〇 圖6展不在存在氣離子但不存在硫酸鹽之情況下的藉由 實例2調控之電解質交換。實驗細節在實例14中加以描 述。 圖7以LUV展示自實例1至9導出之不同合成離子通道的 ， 氯離子輸送能力，其中使用NaCl囊胞外及囊胞内緩衝液。 圖8展示單一通道記錄結果，其說明實例2可藉由特徵化 依賴於電壓之選通性能之離子通道機制而調控脂質雙層上 之氯離子輸送。實驗細節在實例15中加以描述。 圖9展示全細胞記錄結果，其說明當實例2經分割至人的 127863.doc -67- 200844079 汽驗細節在實例16 齊JSPQ之脂質體中的 細胞膜中時實例2可增加細胞氯電流 中加以描述。 圖10展不具有氣離子·敏感榮光指不 實例2之氯離子輸送活性。 圖11展示實例2之X射線晶體結構。 圖12以LUV展示自實例2及實例1(M3導出之不同合成離 子通道的氯離子輸送能力，其中使用NaCl囊胞外及囊胞内 緩衝液。 Γ

127863.doc -68 -

Claims (1)

1. 200844079 十、申請專利範圍： 1 · 一種自組裝化合物，其用於脂質雙層或細胞膜中形成離 子通道，具有式（I): (X-hda七 Y ⑴ 或其鹽、溶劑合物、多晶型物或立體異構體， 其中X為未經取代或經取代之烴基或雜環基 η為一個1至6之整數； 其中； 〇 Υ為分別由一個未經取代或經取代之烴、碳環或雜垮 移除一、二、三、四、五及六個氫原子所形成之—個〜 價、二價、三價、四價、五價或六價鍵聯基團；及 HDA為一個具有式（II)之二價基團：

   其中Z及Z各獨立為〇、s或nr1 ; ϋ Α、β1、β2、^及叫獨立為一鍵、0、S、NR1或 經取代或未經取代之Cl，伸烷基；及 固 k為一個！至2〇之整數，其中尺丨及r2各獨立為只、鲈 基、烴基、碳環基或雜環基，及B1及B1之至少一者也 - NH。 音為 其中式（I)之HDA由式（111)表

   127863.doc (III) 1 ·如請求項1之自組裝化合物 示： 200844079 其中k為一個1至20之整數； A為-鍵、〇、S、NR、—個經取代或未經取代之c〜 伸烷基’纟中R2為Η、醯基、烴基、碳環基或雜環基； Β1為〇或ΝΗ ;及 d為c ’ · 3伸烧基或經-或多個烴基或雜環基取代之匚 伸烷基。 K3 Γ: 3·如請求項1之自組裝化合物，其中式⑴之Η不 · S D Η DA由式（IV)表 Ο (IV)， 其中D為C卜3伸院基或經一吱吝袖、咳里 &夕個烴基或雜環基取代 C!-3伸烷基。 4·如請求項1之自組裝化合物，豆φ彳m 一 八中式⑴之HDA由式（ivb) 表不 * X 〇 Η j八〆d\^N\ 0 (IVB)， 其中A為一鍵、〇、s、nr2或一個經取代或未經取代之 伸烷基’其中R2為η、醯基、烴基、碳環基或雜環 基；及 之 I 〇為Ci.3伸㉟基或經-或多㈣烴基或雜環基取代 伸烷基。 5 · 如請求項1至4中任一項之白知壯^ A w 、N只玉τ 唄之自組裝化合物，其中式⑴之η 為1 〇 6 ·如請求項1至4中任一項之自έ奘 ㈢、、且衣化合物，其中式⑴之η 127863.doc 200844079 為2或3，且該等X - HDA單元中之至少兩者相同。 7·如請求項1至4中任一項之自組裝化合物，其中式⑴之n 為2或3，且該等X - HDA單元中之至少兩者不同。 8 ·如明求項1至7中任一項之自組農化合物，其中X為烴基 或經取代之烴基。 9.如請求項8之自組裝化合物，其中X為包含丨至14個碳原 子之烴基或經取代之烴基。 ίο.如請求項9之自組裝化合物，其中x為具有丨至14個碳原 子之烷基或經取代之烷基。 11 ·如請求項1 〇之自組裝化合物，其中X為異丁基。 12.如請求項丨至丨丨中任一項之自組裝化合物，其中γ為分別 由個未經取代或經取代之燒、浠或炔移除兩個或三個 氫原子所形成之一個二價或三價鍵聯基團。 13·如請求項12之自組裝化合物，其中γ為分別由一個未經 取代或經取代之C2·!2烷、烯或炔移除兩個或三個氫原子 所形成之一個二價或三價鍵聯基團。 14·如睛求項13之自組裝化合物，其中γ為未經取代或經取 代之伸丙基或伸丙稀基。 15·如明求項丨至丨丨中任一項之自組裝化合物，其中γ為分別 由一個未經取代或經取代之單環、雙環或三環芳族碳環 移除兩個或二個氫原子所形成之一個二價或三價鍵聯 團。 16·如.月求項15之自組裝化合物，其中γ為分別由一個未經 代或經取代之苯移除兩個或三個氫原子所形成之一個 127863.doc 200844079 二價或三價鍵聯基團。 17. 如請求項1至u中任-項之自組裝化人板 ， 由-個未經取代或經取代之 σ ，其中γ為分別 兩個或三個氫原子所形成之_早個%7或三環雜環移除 18. 如請求項17之自組裝化合物 ^二價鍵聯基困。 取代或經取代〜定移除兩個或三個=別由：個未經 個二價或三價鍵聯基團。 U所形成之-

   ϋ 1 9·如請求項！至j 8中任一 Η ^ 負之自組裝化合物’其中式⑴之 HDA包含至少—個—級醯胺基或二級酿胺基。 2〇.t請求項1至19中任一項之自組裝化合物，其中D為經至 >、一個院基、芳基、經取代之烧基或經取代之芳基取代 的Cw伸烷基。 21.如請求項20之自組裝化合物，其中D為經至少一個異丁 基取代tCw伸烷基。 八 22·如請求項丨至2中任一項之自組裝化合物，其中a為一 鍵；〇為亞甲基或經取代之亞甲基；及k為1。 23_如請求項丨至2中任一項之自組裝化合物，其中a為〇; d 為亞甲基或經取代之亞甲基；及k為1。 24.如睛求項i至2中任一項之自組裝化合物，其中γ為伸芳 基、伸雜芳基、伸烷基或伸烯基；及各X為具有1至14個 石反原子之未經取代或經取代之烴基。 25·如請求項1至24中任一項之自組裝化合物，其中D為經一 個異丁基取代之亞曱基。 26_如請求項1之自組裝化合物，其中該自組裝化合物為： 127863.doc 200844079

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   Ο 或/、〉谷劑合物、多晶型物或立體異構體。 π·如明求項1或26之自組裝化合物，其中該自組裝化合 物為

   u 或其鹽、溶劑合物、多晶型物或立體異構體。 28. —種組合物，其包含一細胞膜及如請求項i至u中任一 項之自組裝化合物的多數分子。 29·如請求項28之組合物，其中該細胞膜包含一脂質雙層。 30.如請求項29之組合物，其中該多數分子自組裝形U一種 陰離子通道跨越該脂質雙層之厚度。 127863.doc 200844079 如β月求項30之組合物，其中該陰 離子、漳雜工 子通道為氟離子、氯 硫酸子，根離子、亞確酸根離子、 子、磷酸氫根離子、碳酸根離子、碳酸氯根離 h根離子、磷酸氫根離子、璘酸 . 冑根離子之通道。 驢離子或酉曰 .32.=請求項3丨之組合物，其中該陰離子通道為氯離子通 ο 33·:=成合成陰離子通道於細胞膜中之方法，該方法包 細胞膜與如請求項1至27中任-項之自組裝化 合物的多數分子的步驟。 34. 如請求項33之方法，其中該細胞膜包含—脂質雙層 35. -種調節離子流經細胞膜之方法，該方法包含：下步 驟：如請求項1至27中任-項之自組裝化合物的多數分 子於該膜中形成一種陰離子通道；及施加跨越該細胞膜 之一離子梯度或一膜電位。 U 36.如請求項35之方法，其中該細胞膜包含—脂質雙層。 37. —種於細胞膜製造合成離子通道之方法該方法S包含以 下步驟： ’ ⑷提供如請求項1至27中任-項之自組裝化合物的多 ， 數分子；及 ⑻由該等分子自組裝在該膜之橫向方向形成分子柱， 且在任何兩個鄰近分子柱之間經由分子間氫鍵在該膜之 側向形成分子柱。 38. 如請求項37之方法，其中該細胞膜包含一脂質雙層。 127863.doc 200844079 3 9 · —種如請求項1至2 7中 ^ , ^ ^ ^ m 一項之自組裝化合物之多數分 樂學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物或立 體異構體的用途，其心製造-種用於㈣、處理或預 防與氣離子通道之功能陸 月匕I早礙有關之疾病之藥物。 40·如請求項39之用途，Α 々甲孩疾病為囊腫性纖維化、巴特 氏（Bartter)綜合症、丹转并 廿特氏（Dent)疾病、遺傳腎結石疾 ::天&肌強直、貝克(Becker)綜合症、癲癇症、卵 K狀汽斑營養不良、過度驚嚇症（hyperekplexia)、青少 年肌陣攣性癲癇症或骨質石化症。 41. 如請求項39之用途，其中將該自組裝化合物或其醫藥學 上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構體插入一種哺乳動 物之細胞之脂質雙層中。 42. 如請求項41之用途，其中該哺乳動物為人。 U 43. —種醫藥組合物，其包含如請求項1至27中任一項之自 組裝化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶 型物或立體異構體，及醫藥學上可接受之載劑。 44. 如請求項43之醫藥組合物，其進—步包含至少一種選自 由以下組成之群之成份：賦形劑、保濕劑、稀釋劑、金 屬硬脂酸鹽及其組合。 45. 如請求項43之醫藥組合物，其為單一單位劑型。 46·如請求項43之醫藥組合物，其為適合於插入哺乳動物細 胞之脂質雙層中之單一單位劑型。 47. —種離子通道，其包含如請求項1至27中任—項之自組 #化5物的多數分子’其中該離子通道在細胞膜中。 127863.doc 200844079 48.如請求項47之離子通道，其中該離子通道為一陰離子通 道。 49·如請求項47至48中任-項之離子通道，其中該細胞膜包 含一脂質雙層。 50. 一種治療、處理或預防與氯離子通道之功能障礙有關之 疾病的方法，該方法包含投與如請求項1至27中任一項 之自組裝化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、 多晶型物或立體異構體的多數分子。 5 1 ·如請求項50之方法，其中該疾病為囊腫性纖維化、巴特 氏（Bartter)綜合症、丹特氏（Dent)疾病、遺傳腎結石疾 病、先天性肌強直、貝克（Becker)綜合症、癲癇症、印 黃狀黃斑營養不良、過度驚嚇症、青少年肌陣攣性癲癇 症或骨質石化症。 52·如請求項5〇之方法，其中將該自組裝化合物或其醫藥學 上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構體插入一種哺乳動 物之細胞之脂質雙層中。 5 3 ·如睛求項5 2之方法，其中該哺乳動物為人。 127863.doc