200837191 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明，是關於組織片夾持裝置及裝設有該組織片夾 持裝置的培養套件者。 【先前技術】 近年來，於再生醫療上，由於不斷利用培養組織或培 養細胞懸濁液，因此正在發展適用於取得培養組織或培養 細胞懸濁液之培養套件的開發。例如，於專利文獻1中， 提案出對於組織片培養，能夠早期且容易地形成較佳培養 狀態之培養套件。該培養套件，是在培養袋之中，配置有 :在培養面與能夠緊貼於該培養面之網目薄片之間夾入組 織片的組織片夾持裝置者。培養袋，爲具有氣體透過性且 是液體非透過性，並具有能夠把液體密封（以下簡稱液密） 地進行閉鎖的開口部，當從開口部的兩端朝向中央施加外 力時，則開口部開放同時培養面與網目薄片之間會打開， 當解除其外力時，開口部藉由本身的復元力而閉鎖，並且 使得網目薄片會緊貼於培養面。因此，在培養組織片時， 首先，從開口部之兩端朝向中央施以外力打開開口部之同 時，亦打開培養面與網目薄片之間，將組織片從開口部置 入並載置於培養面，其次，解除所正施加的外力來閉鎖開 口部之同時使網目薄片緊貼於培養面。藉此，組織片被夾 持在培養面與網目薄片之間。接著，將液體培養基注入於 培養袋內並去除掉培養袋內的氣體。然後，將此培養袋置 -5- 200837191 入於定溫器（incubator)進行組織片的培養。此時，由於培 養袋爲具有氣體透過性，定溫器內的之氣體成分會溶存於 培養袋內的液體培養基中來供給給組織片。又，於專利文 獻2中，爲揭示出旋轉培養法所利用的固定具。此爲，藉 由卡止於玻璃板的叉狀帶板來固定被載置在玻璃板上之組 織片的固定具，以提供給旋轉培養機。 [專利文獻1]日本特開2005-87029 [專利文獻2]日本特開2003-61640 【發明內容】 [發明所要解決之問題] 然而，專利文獻1之培養套件，再將培養面與網目薄 片之間予以打開時必須從培養袋之開口部的兩端朝向中央 施加外力，因此具有操作性不佳的問題。又，專利文獻2 的固定具，雖是使叉狀的帶板嵌入玻璃板之方式進行滑動 式卡止，不過由於該帶板無法擺動，所以難以在叉狀帶板 的前端部下壓制組織片，有操作性上的問題。 本發明係爲了解決如此之問題而硏創，其目的之一在 於提供一種處理組織片或培養組織時具有良好操作性之組 織片夾持裝置。又，另一目的是在於提供一種裝設有如此 之組織片夾持裝置的培養套件。 [發明解決問題之技術手段] 本發明，爲了達成上述目的之至少其一而採取以下手 -6 - 200837191 段。 本發明之組織片夾持裝置’ 是能夠配置在培養室之中的組織片夾持裝置，具備有 基座、臂、以及壓制構件， 該基座具有載置組織片的培養面， 該臂能夠擺動地安裝於上述基座， 該壓制構件是設置在上述臂之中能夠將被載置於上述 培養面的組織片予以壓制的位置。 此種組織片夾持裝置，於培養面載置組織片時，是使 壓制構件從培養面開離之方式來讓臂擺動，在此狀態下將 組織片載置於培養面之中與壓制構件相對向的位置。又， 取出組織片經過培養之後的培養組織時，亦是使壓制構件 以從培養面開離之方式來讓臂擺動，在此狀態下將培養組 織從培養面取出。如此地，要開啓培養面與壓制構件之間 時’只要讓臂擺動即可，故相較於以往要從培養袋之開口 部的兩端朝向中央施加外力之情形，操作性極爲良好。 在此’所g胃培養室（chamber)，是具備培養槽（cavity) ’只要是在該培養槽能夠包含組織片夾持裝置之構成者， 可以是任何形態，例如，可舉：培養皿、燒瓶、培養袋等 。較佳爲具有可撓性之培養袋。作爲培養面者，只要能夠 培養構成組織片的細胞者即可，並無特別特別限定，例如 ’可舉由I本乙細寺合成樹脂所構成者。又，也可以是處 理此等表面來賦予親水性、或是被覆上膠原蛋白、纖維蛋 200837191 白等之細胞黏著性材料者亦可。作爲壓制構件者，只要能 夠壓制組織片即可，雖是無論何種形態及材料皆可，但以 具有細胞難以黏著之表層爲佳。作爲如此之表層者，例如 ，可舉聚乙烯、聚丙烯、氟系樹脂、聚四氟乙烯、聚碳酸 酯、聚酯等。再者，作爲組織片者，爲從生體組織能夠採 取的上皮組織、結合組織、筋組織、神經組織等爲佳，具 體而言，可舉皮膚（表皮、真皮）、軟骨、角膜、網膜、骨 膜、骨、神經、肌肉、黏膜、牙齒組織、血管、脂肪、或 是心臟、肝臟、胰臟、腎臟、或膀胱等之臟器的一部分。 又，培養細胞所取得之細胞薄片、或是將細胞種植於支架 (scaffold)之培養組織等亦可以利用作爲本發明之組織片 。作爲如此之細胞，例如，可舉出從人、小鼠、大白鼠 (rat)、天竹鼠、倉鼠、雞、豬、羊、牛、馬、犬、貓、猴 等溫血動物所採取的各種細胞。作爲此類溫血動物之細胞 者，例如，可舉角質細胞、脾細胞、神經細胞、神經膠細 胞、胰臟/3細胞、膜間細胞（mesangial cell)、蘭格漢氏細 胞（Langerhans cell)、表皮細胞、上皮細胞、內皮細胞、 纖維母細胞（fibroblast)、纖維細胞、肌細胞、脂肪細胞、 滑膜細胞、軟骨細胞、骨細胞、骨膜細胞、骨原細胞、破 骨細胞、乳腺細胞、肝細胞、或是間質細胞、或是此等細 胞的前驅細胞、幹細胞、或具有黏著依賴性的癌細胞。又 ，亦可以使用胚性肝細胞。或是將紅血球生成素、生長荷 爾蒙、顆粒球群落生長因子（Granulocyte Colony-Stimulating Factor，G-CSF)、胰島素、干擾素、血液凝固第VIE因子之 200837191 血液凝固因子、升糖素、組織纖維蛋白溶酶原活化物、多 巴胺、癌基因、癌抑制基因等予以編碼之外來基因導入於 上述細胞，將該等基因使用各種的啓動基因（promoter)在 強制性或是特定的條件下使用基因表現之方式構成的形質 轉換細胞亦可。又，作爲細胞外基質者，例如，可舉細胞 表面整合蛋白（integrin)、膠原蛋白、彈性蛋白、蛋白多 醣、醣胺聚多醣、醣蛋白等。 於本發明之組織片夾持裝置，上述臂，是可以使橫向 寬幅比上述基座的橫向寬幅還小。如此的話，不會造成臂 佔據培養面的上方空間，而可以寬廣地確保在培養室之中 的作業空間。因此，在操作處理組織片或培養組織時的作 業性變得十分良好。 本發明之組織片夾持裝置，亦可以更進一步地具備有 :將上述壓制構件朝向上述培養面彈壓的彈壓構件；以及 上述臂之中，夾隔著當該臂擺動時之擺動軸而設置在與上 述壓制構件爲相反側，藉由外力被按下時可抗過上述彈壓 構件使上述壓制構件從上述培養面開離的臂操作構件。此 情形下，要夾持組織片時，藉由施加外力按下臂操作構件 來讓壓制構件向培養面的上方開離，接著在此一狀態下將 組織片載置於培養面，然後藉由解除正施加於臂操作構件 的外力，利用由彈壓構件所彈壓的壓制構件來壓制被載置 於培養面的組織片。另外，要取出培養組織片後的培養組 織時，亦是藉由施加外力按下臂操作構件來讓壓制構件向 培養面的上方開離，接著在此一狀態下將培養組織取出。 -9 - 200837191 如此地，由於組織片在培養時藉由彈壓構件所彈壓的壓制 構件而使組織片被壓制於培養面，因而使組織片可以容易 黏著於培養面並進行增殖。又，臂的動作可以容易地操作 。特別是，在培養室中使用可撓性的培養袋時，因爲可以 從培養袋的外側來進行操作，所以可以防止污染。於採用 了此形態之本發明的組織片夾持裝置，上述彈壓構件，亦 可以與上述臂一體成形。如此的話，相較於彈壓構件與臂 以各別構件製作可減少零件數目，並使組裝程序簡略化。 本發明之組織片夾持裝置，亦可以具備有：從上述臂 之中之上述壓制構件的位置朝向與該臂擺動時之擺動軸相 反方向延伸而出的延伸構件。如此的話，作業性會變得更 加良好。例如，將組織片夾持裝置配置在可撓性的培養袋 內來使用之情形時，培養袋之中的作業空間，是利用已擺 動成使壓制構件從培養面開離之臂將培養袋的內部撐開來 確保作業空間。在此，壓制構件以從培養面開離之方式使 臂擺動時，由於從擺動軸至延伸構件前端的距離比從擺動 軸至壓制構件的距離還長，就因爲存在有延伸構件，所以 相較於沒有延伸構件之情形時，即使臂操作構件的按下量 相同，作業空間也會更加寬廣，可使作業性更加良好。對 於採用了此形.態之本發明的組織片夾持裝置，上述基座， 亦可以在能夠與上述延伸構件前端側的下面接觸的位置， 具有：用以阻止該延伸構件以上述臂的擺動軸爲中心朝向 下方旋轉預定範圍以上的支撐構件。如此的話，即使不經 意地由上施加了壓按延伸構件的力量時，可以防止臂之壓 -10- 200837191 制構件強力地按壓於培養面。亦即，在基座並不存在有支 撐構件之情形時，當不經意地由上施加了壓按延伸構件的 力量時，則壓制構件強力地按壓於培養面具有對組織片造 成損傷之虞，相對於此，基座具有支撐構件之情形時，由 於支撐構件從下方支撐延伸構件，所以壓制構件不會強力 地按壓於培養面。又，上述支撐構件，是以設置在偏離於 上述壓制構件之正對面的位置爲佳。如此的話，當將組織 片載置於壓制構件的正下方等操作時，支撐構件不會造成 妨礙。再者，在構成上亦可以設置從延伸構件或是臂朝向 下方伸延之支撐構件，藉由使該支撐構件抵接於基座的培 養面，阻止臂更朝向下方之旋轉。 於本發明之組織片夾持裝置，上述壓制構件，係形成 與被載置在上述培養面的組織片點接觸或是線接觸之形狀 亦可。如此的話，相較於壓制構件形成與組織片成面接觸 之形狀時，可以確實地將組織片固定於培養面，使培養基 對組織片有良好的滲透性（滲透到達性）。 於本發明之組織片夾持裝置，上述基座，亦可於上述 培養面之周圍的至少一部分具有突起狀物。如此的話，在 將組織片夾持裝置配置於可撓性的培養袋內來使用之情形 時，當例如進行培養基更換等時，即使將培養基從培養袋 內抽出而使得培養袋扁萎之情況時，藉由突起可以防止培 養袋與組織片接觸之情事。又，突起’例如可以是全部包 圍培養面之周圍的突壁或是突柵，也可以是部分性包圍培 養面之周圍的突壁或是突柵。 -11 - 200837191 於本發明之組織片夾持裝置，壓制構件，爲能夠從上 述基座拆卸地安裝著亦可。如此的話，在製成培養組織等 之後藉由卸下壓制構件，由於可以寬廣地確保培養面上的 作業空間，所以可以容易地操作處理培養組織。 本發明之組織片夾持裝置，亦可以具備有：在上述壓 制構件在壓制著被載置於上述培養面之組織片的狀態時， 用以限制上述壓制構件朝向由上述培養面開離之方向移動 的限制機構。如此的話，即使在培養中不經意地對於壓制 構件作用了由培養面開離方向的力量時’由於限制機構限 制了壓制構件由培養面朝向開離方向移動之動作，使得壓 制構件得以維持壓制住組織片之狀態。因此，使得已黏著 於培養面的組織片不會造成從培養面剝離，而可以順利地 進行組織片的培養。 本發明之培養套件，爲具備有： 具有能夠插入組織片之開口部的培養室；以及 上述任一項之組織片夾持裝置，且該組織片夾持裝置 是使上述臂之中與擺動軸爲相反側的端部是以朝向上述開 口部方向之方式配置在上述培養室內。 尤其是上述之培養套件中，培養室，爲能夠液密地進 行閉鎖之可撓性培養袋爲佳。 此培養套件中，是於培養袋內配置有上述任一項之組 織片夾持裝置，臂之中與擺動軸爲相反側的端部是以朝向 上述開口部方向之方式來配置。因此，藉由已擺動成使壓 制構件從培養面開離之臂將培養袋的內部撐開’而可以確 -12- 200837191 保將組織片載置於培養面、或是將培養組織片之後的培養 組織予以取出時的作業空間，並且可以增大開口部的開口 面積。又，由於培養套件具備有上述任一項之組織片夾持 裝置，故可以取得與以上所述之任一項之組織片夾持裝置 相同的效果。 於本發明之培養套件，上述培養袋，以具有氣體透過 性與液體體非透過性爲佳。如此的話，由於可以使培養袋 內的液體培養基不會漏出地將周圍的氣體成分溶入於培養 袋內，因此可以進行良好的培養。在此，作爲氣體透過性 且液體非透過性之材料者，並沒有特別的限定，可舉聚四 氟乙烯等之氟樹脂或矽氧樹脂等，此等爲充實體亦可，或 是形成有微細孔（例如數// m〜數十// m之孔徑）亦可。 【實施方式】 以下，使用圖面詳細說明本發明。第1圖是從特定方 向觀察培養套件1 0時的槪略立體圖， 第2圖是從特 定方向觀察組織片夾持裝置3 0時的槪略立體圖，第3圖是 從另一方向觀察組織片夾持裝置3 0時的槪略立體圖，第4 圖是從前方觀察組織片夾持裝置3 0時的說明圖，第5圖是 第2圖之A-A斷面圖，第6圖是基座31之背面的槪略立體 圖。 本實施形態之培養套件1 0，如第1圖所示，係具備有 :能夠進行細胞或組織片之培養的培養袋20 ;及配置在該 培養袋2 0之中的組織片夾持裝置3 0。又，於第1圖中，對 -13- 200837191 於組織片夾持裝置3 〇，原本應以虛線（點線）來表示被配置 在培養袋2 0的內部，但在考量方便性上’以實線表示。 培養袋20，是將具有氣體透過性且液體非透過性的白 色半透明氟系樹脂製之下層面2〇a與上層面20b在重疊狀 態下將周圍的三邊予以熱熔著者，並具有藉由拉鏈22能夠 液密地進行閉鎖的開口部24。該培養袋20，係於與開口部 24的相反側具有注射器插入部26。注射器插入部26，是在 連通培養袋20內外的筒狀孔穴，液密地嵌入橡膠栓者，相 對於培養袋20在進行液體培養基之供給或排出時可供注射 器60之針頭62插入。又，插入於注射器插入部26之針頭62 拔出後之孔穴係藉由橡膠的回復力而閉塞，所以注射器插 入部26可以再次維持於液密狀態。又，用以取代由拉鏈22 液密地閉鎖開口部24，或是在其閉鎖後更加上以熱密封等 來進行液密性地封鎖亦可。 組織片夾持裝置3 0，如第2圖〜第5圖所示，係具備有 載置數mm方形組織片T(請參照第2圖）之培養面32的基座 3 1，以及能夠擺動地安裝於該基座3 1的臂40。 基座31，是由半透明的合成樹脂成型爲四角形狀者， 並具備有藉由電漿處理來附加親水性的培養面3 2。藉由如 此地，培養面3 2具備有親水性，故使黏著依賴性細胞或組 織片可容易黏著。又，基座31，在左右兩側具備有作爲圍 住培養面3 2之突起的橫壁3 3。該橫壁3 3，是從內側來撐起 培養袋20的上層面20b，具有用以防止培養袋20接觸到培 養面3 2上的培養組織之作用。再者，基座3 1，係於前方具 -14- 200837191 備前壁3 4 (相當於本發明之支撐構件）並且於後方具備有將 成爲臂40之擺動軸的軸銷42予以保持住的支柱35。更且， 於前壁34的下方，設有能夠與臂40的鉤54卡止的線狀突起 36。另一方面，於基座31的背面，如第6圖所示，設置有 補強用肋3 7。該補強用肋3 7，除了形成在背面的整周之外 ，亦形成在支柱3 5的周圍或是培養面3 2當中之用以補強載 置組織片T的載置區域，在本實施形態中，補強用肋3 7是 在該載置區域之中心C(請參照第2圖及第6圖）的背面側呈 交叉。在此，由於基座31爲白色半透明的合成樹脂製成， 所以從上觀察培養面32時，可透見補強用肋37的交叉位置 。由於該交叉位置可表示爲載置區域的中心C(於培養面 之壓制構件的位置），故在載置組織片T時可成爲參考目 標。 臂40，如第2圖〜第5圖所示，係具有：相當於臂40後 方部分之寬幅較廣的基端部4 1 ;及從該基端部4 1向前方延 伸出之具有中等程度寬幅的中間部48 ;以及從該中間部48 更朝向前方延伸出之寬幅最窄的狹窄延伸部5 2，此等部分 可以藉由聚乙烯、聚丙烯、或是聚碳酸酯等之合成樹脂一 體成形。該臂4 0，無論於任一部分都是左右的寬幅比基座 3 1的寬幅還小。又，在本專利說明書中的「寬幅」，意思 是指第2圖之左右方向的長度。 基端部4 1，係具備有：向左右兩側突出的軸銷4 2 ;及 設在該軸銷4 2後方上側的操作按鈕4 3 (相當於本發明之臂 操作構件以及以於軸銷42後方延伸出去之方式所形成 -15- 200837191 的一對腳部44。其中，軸銷42是由立設於培養面32的支柱 3 5所保持，藉此，臂40以該軸銷42爲軸而能夠擺動。操作 按鈕43，爲操作臂40時供操作者按下之按鈕，並夾隔著軸 銷42設置在壓制部49的相反側。又，一對的腳部44，是夾 介切縫45而連接於操作按鈕43，可藉由使腳部44向內側移 動（壓捏）來使軸銷42從支柱3 5卸下，並使臂4 0可以從基座 3 1拆卸下來。再者，於基端部4 1的大致中央，設有貫通上 下方向的方形穴46。 中間部48，係具有：設置在能夠壓制於被載置於培養 面3 2之組織片T之位置的壓制部49 ;以及通過基端部41的 方形穴46抵接於培養面32的板彈簧50(相當於本發明的彈 壓構件）。其中，壓制部49，係形成：以與組織片T呈點 接觸之方式而朝向下方細且尖的形狀。板彈簧5 0，是與臂 40—體成形，在臂40之軸銷42還沒受支柱35所保持的自由 狀態下，如第5圖之上段所示，板彈簧50是呈山型彎曲之 形狀，不過當軸銷42受到支柱3 5所保持的狀態下，便如第 5圖之下段所示，由於呈山型彎曲之形狀被從上方壓闊開 ’所以會成爲壓制部49朝向培養面32進行彈壓。 延伸部5 2，如第2圖所示，是從中間部4 8的壓制部4 9 附近向斜前方延伸之後筆直地向前方延伸而出，於其前端 52a具有折曲片53。該折曲片53，是藉由使延伸部52向下 方大致呈直角地折曲而形成。又，於折曲片5 3的前端，設 有能夠與設於基座3 1之線狀突起3 6卡止的鉤5 4。並且，當 鉤5 4在卡止於線狀突起3 6之狀態下，是使設於基座3 1之前 -16- 200837191 壁3 4的上端會與延伸部5 2的下面可大致呈接觸。又，組織 片夾持裝置30，如第1圖所示，是使臂40當中的延伸部52 的前端52a以朝向培養袋20之開口部24方向之方式來配置 〇 其次，對於本實施形態之培養套件1 0之使用例，以第 7圖及第8圖來說明。第7圖及第8圖，分別是顯示壓下操作 按鈕43時之情形的縱向斷面圖及橫向斷面圖。 ， 首先，操作者，以使組織片夾持裝置30之基座31大致 成爲水平之方式將第1圖所示之培養套件1 〇放置於作業台 ，在培養袋20之拉鏈22打開狀態下，以一根手指按下臂40 的操作按鈕43。如此一來，如第7圖及第8圖所示，抗過板 . 彈簧50的彈壓力，使臂40作用出擺動的力量，使壓制部49 以軸銷42爲中心從培養面32朝上方向呈開離，延伸部52的 前端52a在抗過板彈簧50之彈壓而上昇至預定位置。該預 定位置，是由操作按鈕43之朝向下方的移動量以及從軸銷 , 42到延伸部52之前端52a爲止之長度所決定的。此時，培 養袋20之下層面20a受到基座31所抵壓住，上層面20b則 受到延伸部52的前端52a而被朝向上方頂舉，所以培養袋 20之開口部24會大大地打開。又，臂40之橫向寬幅比基座 3 1的橫向寬幅還小，所以不會造成臂40佔據培養面32的上 方空間，而可使培養袋20之中的作業空間充分寬廣。 其次，維持操作按鈕43按壓下之狀態，操作者將組織 片T(在此爲數mm方形的骨膜組織片）載置於載置區域的 中心C。此時，基座3 1之補強用肋3 7的交叉位置顯示出載 -17- 200837191 置區域的中心C，由於從基座31上方可透見該交叉位置’ 所以操作者可以確實地將組織片T載置於載置區域的中心 C。又，由於前壁3 4是設置在偏離於組織片載置區域之中 心C的正面，所以在載置組織片Τ時’前壁34不會礙手 〇 接著，操作者解除操作按鈕4 3之按壓。如此動作下’ 藉由板彈簧50的彈壓力’臂40的壓制部49按壓被載置於培 , 養面32的組織片Τ。此時，壓制部49由於形成朝向下方之 細尖形狀，故與組織片Τ成爲點接觸’相較於面接觸之情 形，可牢靠地固定於培養面3 2。然後，操作者以使臂40的 鉤54可卡止於線狀突起36而將延伸部52的前端52a輕輕按 . 壓下（在此，若是藉由板彈簧50之彈壓力而使臂40之鉤54 卡止於線狀突起3 6之情形時，則不需要此項操作）。藉由 如此動作，即使不經意地朝按下操作按鈕43之方向（使壓 制部朝上方移動之方向）施加了些許力量時，由於鉤5 4卡 止於線狀突起36，所以可以阻止壓制部49由培養面32朝向 %. 上方開離而致使組織片剝落。又，即使不經意地朝按下延 伸部52之方向施加了些許力量時，由於前壁34阻止延伸部 52朝向下方移動，所以可以防止壓制部49強力按壓於培養 面32。然後，操作者封閉培養袋20之開口部24的拉鏈22。 如此動作下，培養袋20的內部成爲液密狀態。 接著’操作者將第1圖所示之注射器60的針頭62刺入 注射器插入部2 6，注入足夠量的液體培養基注入。 接著’操作者將注射器60的針頭62從注射器插入部26 -18- 200837191 抽出。如此動作下’注射器插入部26藉由橡膠的回復力使 得針頭62刺入時所產生的孔穴封閉，所以培養袋20的內部 可維持於液密狀態。其後，將該培養袋2 0置入沒有圖示出 的二氧化碳恆定箱，開始進行組織片培養。在二氧化碳恆 定箱內進行成分調整後的氣體，是由於培養袋20具有氣體 透過性而透入於培養袋2〇內部而溶解於液體培養基’再供 給給組織片T。又，組織片T，由於受到壓制部49以點接 觸按壓，所以培養基的滲透良好。於培養中’因應需要得 進行培養基更換，此情形時，使用前揭之注射器60將使用 完畢的液體培養基排出，進行新液體培養基之注入。 培養終了後，使用前揭之注射器60將使用完畢的液體 培養基排出後，打開拉鏈22，從培養袋20將組織片夾持裝 置取出。以洗淨液洗淨之後，藉由壓捏腳部44將臂40從基 座3 1拆卸下。然後，回收培養組織。如此地藉由將臂40從 基座3 1拆卸下，可以容易地對在培養面所形成的培養組織 進行操作，且作業性良好。 又，不用將組織片夾持裝置從培養袋取出，只要打開 培養袋20的拉鏈22，按下操作按鈕43讓壓制部49從培養面 32開離，然後將培養組織從培養面32朝培養袋20外側取出 。此情形下，在培養結束後，使用前揭之注射器60將使用 完畢的液體培養基排出後，同樣地使用注射器60注入洗淨 液。並且在反覆數次洗淨液的排出及注入，在將洗淨液排 出後之狀態下將培養袋20的拉鏈22打開，按下操作按鈕43 使壓制部49從培養面32開離。藉此，由於培養袋20的開口 200837191 部24大大地打開，從培養面32將由組織片T所培養的培養 組織朝培養袋20外側取出。此時，由於臂40的橫向寬幅比 基座31的橫向寬幅還小，所以臂40不會佔據掉培養面32的 上方空間，而可使在培養袋20之中的作業空間充分寬廣。 又，若要回收培養細胞懸濁液體時，遵循以下的步驟 就可以容易地回收。亦即，在培養結束後，使用前揭之注 射器60將使用完畢的液體培養基排出後，同樣地使用注射 器6 0注入洗淨液。並且在反覆數次洗淨液的排出及注入後 ，使用注射器60將細胞分散液注入於培養袋20。經過預定 時間之後，使用注射器60注入細胞分散的停止劑，與此等 溶液一同地將分散後的細胞抽吸到注射器6 0作爲培養細胞 懸濁液來進行回收。 依據以上詳述之本實施形態，要打開培養面32與壓制 部49之間時，由於只要讓臂40擺動即可，故操作性良好。 又，由於臂4 0之橫向寬幅比基座3 1的橫向寬幅還小，所以 在將組織片Τ夾持到組織片夾持裝置3 0、或是將由組織片 Τ所培養之後的培養組織從組織片夾持裝置3 0取出時之作 業空間十分寬廣，作業性變得良好。又，組織片Τ在培養 時由於藉由受到板彈簧5 0所彈壓的壓制部49使得組織片 Τ被壓貼於培養面32，所以組織片Τ黏著於培養面32而容 易增殖。又，可以從培養袋20的外側容易操作臂40的動作 。再者，由於板彈簧5 0是與臂4 0 —體成形，所以相較於將 此等以另外構件來構成，可以減少零件數目，且可以簡略 化組裝程序。更且，在培養中是使壓制部49將組織片Τ強 -20- 200837191 壓於培養面3 2之狀態，此時即使不經意地從上對延伸部5 2 施加一按壓力時，由於前壁34阻止延伸部52向下方移動動 作，所以壓制部49不會過於強行地將組織片T按壓於培養 面32。並且還有，由於前壁34，是被設置在偏離開壓制部 49正對面的位置，所以在壓制部49的正下方載置組織片T 等情形時，前壁34不會礙手。再者，由於壓制部49是與組 織片T點接觸，所以相較於與組織片T形成面接觸之形 狀相比時，可以確實地將組織片T固定於培養面3 2，使培 養基對組織片T之滲透性（滲透到達性）良好。又再者，由 於橫壁33包圍著培養面32的周圍，所以在例如進行培養基 交換等情形時，即使培養基從培養袋20內被抽出而造成培 養袋20扁萎時，藉由橫壁33可以防止培養袋20的上層面 20b與組織片T接觸。 又，本發明對於上述之實施形態並沒有任何限定，只 要是屬於本發明的技術性範圍，當然是能夠以各種形態來 施行。 例如，在上述的實施形態中，臂40雖設有延伸部52， 但省略該延伸部52亦可。於此情形時，由於可以以臂40之 中的壓制部4 9上方來頂起培養袋2 0，相較於上述實施形態 ，所頂起培養袋2 0的上舉量雖較小，但可得到大致與上述 實施形態相同樣的效果。 在上述的實施形態中，板彈簧50雖是使臂40的壓制部 49朝向培養面32彈壓，但如第9圖所示，與臂40 —體成形 的板彈簧150爲使得壓制部49開離於培養面32來進行彈壓 -21 - 200837191 亦可。又，於第9圖中，對於與上述之實施形態相同構成 要素元件標示以相同符號。此時，操作者在還沒有操作操 作按鈕4 3的狀態時，如第9圖的一點鏈線所示，由於壓制 部4 9爲開離於培養面3 2上方，故與上述的實施形態中按下 操作按鈕43的狀態（請參照第7圖）相同，可以大大地開啓 培養袋20的開口部24，所以在將組織片T載置到壓制部49 的正下方、或是將由組織片T所培養之後的培養組織從壓 制部49的正下方取出時，可以取得十分寬廣的作業空間。 另一方面，用以藉由壓制部49將組織片T固定於培養面32 時，操作者可以拉起操作按鈕43、或是藉由壓下中央部48 及延伸部52讓臂40的鉤54卡止於基座31的線狀突起36，便 如第9圖之實線所示地，藉由壓制部49將組織片T壓貼於 培養面3 2。此情形時，線狀突起3 6與鉤5 4之卡止是被設計 成只靠板彈簧1 5 0的彈壓力是無法解除的。又，若要再次 讓壓制部4 9開離於培養面3 2上方時，操作者得按壓下操作 按鈕43、或是把鉤54從線狀突起36卸離。採用如此之第9 圖的構成時，可以得到與上述實施形態大致相同樣的效果 〇 在上述之實施形態中，雖然作爲本發明之卡止構件是 在折曲片5 3設置鉤5 4，作爲被卡止構件是在基座3 1設置線 狀突起36，但是也可以使鉤54勾於基座31底面之方式來省 略線狀突起3 6 ;或者是在折曲片5 3設置大致半球狀的突部 來取代鉤5 4，並在基座3 1設置使該突部嵌入的孔穴來取代 線狀突起3 6亦可；或者是，相反地，亦即在基座3 1設置大 -22- 200837191 致半球狀的突部，在折曲片53設置使該突部嵌入的孔穴亦 可。如此只要是能夠卡合與卸除地進行卡止之構造’可以 是任何構造皆可。 在上述之實施形態中，雖然是使壓制部49以作爲朝向 下方的細尖形狀來使壓制部49與組織片T成爲點接觸之方 式來設計，但也可以使壓制部49與組織片T以成爲線接觸 之形狀，即使是此種情形時，相較形成爲與組織片T成爲 面接觸之形狀時，可以將組織片T確實地固定在培養面3 2 ，對組織片T亦會有良好的培養基滲透性。不過在此，本 發明並不是將壓制部49與組織片T成爲面接觸之形狀排除 在外。 在上述之實施形態中，培養套件10雖是由培養袋20以 及組織片夾持裝置3 0所構成，但也可以在培養套件1 〇之構 成上再加上第1圖之注射器60或是在培養時所必須的液體 培養基。 在上述之實施形態中，雖已說明於培養面32賦予親水 性，但並非限定於此者。例如，由於藉由將磁性微粒子投 入於細胞，於非黏著性的培養面也可以培養黏著依賴性細 胞（請參照日本特開2004-25 45 1 9號公報），培養面並沒有 必要得具備親水性不可。又，亦可以以溫度感應性聚合物 來構成培養面3 2，藉此可以利用溫度控制切換親水性與疏 水性，來控制細胞的黏著性。 本專利申請案，是以2006年11月17日申請日本專利之 特願第2006-312136號，以及2006年11月17日申請日本專 -23- 200837191 利之特願第2006-312137號作爲主張優先權之基礎’本專 利說明書包含並引用其所有內容。 [產業上之可利用性] 本發明，例如是能夠利用於再生醫療之領域。 【圖式簡單說明】 , 第1圖是從特定方向觀察培養套件10時的槪略立體圖 〇 第2圖是從特定方向觀察組織片夾持裝置3 0時的槪略 立體圖。 - 第3圖是從另一方向觀察組織片夾持裝置3 0時的槪略 立體圖。 第4圖是從前方觀察組織片夾持裝置3 0時的說明圖。 第5圖是第2圖之A-A斷面圖。 % 第6圖是基座31之背面的槪略立體圖。 第7圖是顯示培養套件1 〇之使用狀態的縱向斷面圖。 第8圖是顯示培養套件1 〇之使用狀態的橫向斷面圖。 第9圖是另一組織片夾持裝置的縱向斷面圖。 【主要元件符號說明】 1 0 :培養套件 2〇 :培養袋 2〇a :培養袋的下層面 -24- 200837191 20b :培養袋的上層面 2 2 :拉鏈 24 :開口部 26 :注射器插入部 3 0 :組織片夾持裝置 3 1 :基座 3 2 :培養面 3 3 :橫壁 3 4 :前壁（支撐構件） 3 5 :支柱 3 6 :線狀突起 3 7 :補強用肋 40 :臂 41 _·基端部 4 2 :軸銷 43 :操作按鈕（臂操作構件） 44 :腳部 46 :方形穴 4 8 :中間部 4 9 :壓制部 50 :板彈簧（彈壓構件） 5 2 :延伸部 5 2 a :前端 5 3 :折曲片 -25- 200837191 54 :鉤 60 :注射器 6 2 :針頭 C :載置區域的中心 -26