TW200815445A - Pyrazolo[1,5-a]pyrimidines, processes, uses and compositions - Google Patents

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200815445 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於對GABAa受體具有親和力之劑，尤其 為吡唑并[l，5-a]嘧啶，而更尤其為N_{g 2_取代之_5_[經3_ 取代之吡唑并n，5-a]喂啶_7•基]苯基}_N_甲基乙醯胺及N_ {經2-取代之·5_[經3_取代之吡唑并嘧啶_7-基]-苯 基} _Ν-甲基-曱烷磺醯胺。 【先前技術】 GAB Αα文體（γ —胺基丁酸Α)為一種五聚合蛋白質， 其形成膜離子通道。GABAa受體涉及鎮靜、焦慮、肌肉張 力（muscle tone)、癲癇引發活性和記憶功能之調節。這些 作用是由於界定之GABAa受體次單&，特別是^和心一 次單元。 鎮靜係由次單元調節。唾❸旦（z〇lpidem)係以 1又體的回親和力為特徵其且在活體内鎮靜和催眠作 (用係、由這些受體媒介。同樣地，扎來f隆（zaiepi〇n)之 催眠作用也由α 1 一受體媒介。 、苯甲二氮肇(diazepam)之抗焦慮作用是由表現α厂受體 神、、工兀私群中增強❸GABΑ神經傳遞媒介。此點顯示： αγ文體為治療焦慮之高度專一性標的。 /苯曱一氮簞之肌肉放鬆主要由受體媒介。因為這 些党體顯示在脊髓中的高度專一性表現。 一，^甲一氮肇之抗痙攣效果部分是由於—受體。苯曱 氮肇（種會造成記憶損傷之化合物）引發之順行性健 200815445 忘，係由a i -受體媒介。 GABAa受體和其a i-和α 2 —次單元已廣泛地被η·

Mohler 等人（j. Pharmacol. Exp. Ther.，300，2— 8，2002); H. M6hler 等人（Curr Opin· Pharmacol.，1，22—25.2001); U· Rudolph 等人（Nature. 401 ,796-800，1999);和 Dj Nutt 等人（Br· J. Psychiatry.，179，390- 396，2001 )評 論0 苯甲二氮簞和其他種類苯并二氮呼被廣泛地用作抗焦 慮劑、催眠劑、抗痙攣劑和肌肉鬆弛劑。它們的副作用包 括順行性健忘、減少動作活動和強化乙醇作用。 在本文中，本發明化合物為α丨_和α 2一 gabAa受體 之配體’因其於臨床上係應用於睡眠障礙，較佳為失眠症、 焦慮和癲癇症。

失眠是非常普遍的疾病。它的持續性影響_的人 口’而當短暫失眠也估算在内則是3G%。失眠係描述難以 入睡、保持熟睡，及伴隨著隔天宿醉效應，例如疲倦、缺 乏活力、不專心及易怒。此症狀的社交和健康衝擊很重要， 而且會造成明顯的社經影響。 在失眠處理中的藥物治療首先包括巴必妥酸鹽和水合 虱路，但這些藥物會引起报多已知的副作 量毒性、并令球it XI 丫列如藥劑過 ^ I射誘¥及增強的依賴性和耐受性。除“冰， 它們會因為尤其減少REM睡眠階段的持門 影響睡眠的架構。之後，贫成卜 、4和數目而 再之後，本开二氮呼類因為 而意味著重要的、、Λ 匕們的低毒性 ^療進展’但是它們仍然顯示嚴重的依賴 200815445 性、肌肉鬆他作用、記情力泰生 μm u刀長失及中止藥物治療後返回生 眠的問題。 八 取近已知的治療方式一直是採用非苯并二氮呼催眠 藥，例如吼咯并[3,4-b]吼畊類（佐匹克隆（z〇pici〇ne))、 咪唑并[l，2-a]咄啶類（唑吡坦）及最後到吡唑并嘧 啶類（扎來普隆）。之後，有二種新的吡唑并嘧啶， 即印第普隆（indiplon )和奥西普隆（〇cinapl〇n )，已進 (：入開發，後者具有相當的抗焦慮作用。這些化合物都顯示 迅速的睡眠誘導作用，而且相較於苯并二氮呼類有比較少 的隔天宿醉效應、較低的濫用可能性及較低的返回失眠風 險。這些化合物作用的機制是GABAa受體經由其結合至 笨并二氮呼結合部位的異位（al〇steric )活化作用（c F p

George’ The Lancet，358，1623-1626，2001 )。雖然苯并一 氮呼類在GABAa受體結合部位是非特專一性配體，但唾 °比坦和扎來普隆仍顯示出對於α1_次單元較大的選擇性。 《 儘管如此，這些藥物仍然影響睡眠架構，且可能在長期户 療中誘導出依賴性。 各種相關的σ比唑并[1，5-a]嘧啶被揭示在專利公開案 US4178449、US4281000、US4521422 ( 2-吡咬基比 σ定基）°比σ坐弁[l，5_a] ♦。定基]甲酮，奥西普隆 【ocinaplon】）、US4576943、US4626538 ( N-{3-[3-气美 吼唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-乙基乙醯胺，札來普 隆）、US46543 47、US63 99621 ( N-{3-[3-(噻吩-2-幾基）·口比 唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基乙醯胺，印第普隆）、 200815445 W〇2〇()5(m596、W02G()5()14597 及 w〇2嶋i36別中。 對失眠症管理之新活性化合物的研究符合基本健康兩 要，因為甚至最近介紹的催眠藥仍然影響睡眠的架構： 在長期治療中可導致依賴性。 因此想要把焦點集中於開發具有低副作用風險的新穎 催眠劑。 【發明内容】 本發明者發現新穎吡唑并u，5_a]嘧啶，其具有對 GABAa及特別對其α「及α 2_次單元的活性。因此，本發 明的化合物有用於治療及預防所有那些以gabAa受體 及α 2-次單it介導之疾病。該等疾病的非限制性實例為睡 眠P早礙（較佳為失眠症）焦慮症及癲癇症。本發明化合物 的相關適應症的非限制性實例為其中需要誘發睡眠、誘發 鎮靜或誘發肌肉鬆弛的所有那些疾病或症狀，如失眠症或 麻醉。 札來普隆，吼唑并[l，5-a]嘧啶參考化合物為一結構類 似於本發明化合物的化合物。然而，扎來普隆由於酸氧化 酶而展現廣泛的生物轉化（B· G. Lake等人之Metabolism 〇f zaleplon by human liver: evidence for involvement of aldehyde oxidase, Xenobiotica，2002 Oct; 32(10):835-47 ; 及 K. Kawashima 等人之 Aldehyde oxidase-dependent marked species difference in hepatic metabolism of the sedative-hypnotic zaleplon，between monkeys and rats, Drug Metab Dispos· 1999 Mar; 27(3):422-8 )。雖然在本技藝中已知具 200815445 一吡唑并[l，5-a]嘧 的毒物學效果的缺 有比#L來普隆更好的代謝安定性的另 啶，印第普隆，但是該化合物具有較高 點，如細胞存活率實驗所示。 化合物對生物轉化的敏感性與其代謝安定性有 ㈣在身體内的半衰期及其是否形成代謝物有_。這 砰定生物利用率、毒性及藥物_藥物交 疋 工外用的給樂可能柯 的重要參數，其依次為決定其於人類 , 頌使用的可能性的重要

蒼數。關於此點，具有最大代謝容令# /、頁取人代谢女疋性的化合物使藥物_藥 物交互作用的可能性減至最低且不需要頻繁的給藥間隔；、 本發明的化合物顯示意外比其它已知相關的吡唑并 Ή嘧啶更少的生物轉化，即較高的代謝安定性，其改 進樂物動力學分布，以促進藥理效果的維持，並供給意料 外的適應性，以維持完整的夜晚睡眠。該性質與在苯基環 上的取代有關，即取代基&及特別好的是在笨基環 上攜帶拉電子取代基的化合物。 另外’如實例中所述之本發明的化合物也顯示好的活 體内鎮靜/催眠治療活性及低的毒物學效果，如在細胞存 活率實驗中所論證。 因此’本發明係關於式（I)化合物：

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及水合物，其為GABAa受 及R1代表烷基（CVC6)，r2係選自由氰 罗炭基所組成的群組，R3係選自由氫及鹵 、係選自由氫、鹵素、烷基（Ci_C6)及烷 c0)所組成的群組，心係選自由氫及烷基所 係^自由-CO-及-S02-所組成的群組 及其醫藥上可接受之鹽類及水合物。 本發明的另一目的係提供治療或預防焦慮症、癲癇症 及睡眠病症（包括失眠症），且提供誘發鎮靜_催眠、麻醉、 睡眠及肌肉鬆弛的新穎方法，其係藉由投予治療有效量之 該化合物或其醫藥上可接受之鹽及水合物。 【實施方式】 發明詳述 如上所述，本發明係關於式⑴化合物：

及其醫藥上可接受之鹽類及水合物，其中R、、 R3、R4、R5及γ如上所述。 在本文所使用的術語、、醫藥上可接受之鹽〃包含任何 200815445 從有機及無機酸所形成的鹽’如氡溴酸、氬氱酸、填酸、 硝酸、硫酸、乙酸、己二酸、天門冬胺酸、笨磺酸、笨甲 酸、檸檬酸、乙烷磺酸、甲酸、富馬酸、麩胺酸、乳酸、 順丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、曱磺酸、丨，5-萘 二磺酸、草酸、新戊酸、丙酸、對_曱苯磺酸、丁二酸、酒 石酸及類似物。 特定的式⑴化合物係選自由下列者所組成的群組： N-{2-氟基-5-[3-硝基“比唑并π，5外密啶_7_基]-苯基卜 Ν-曱基乙醯胺； Ν_{2-氟基-5-[3-氰基-吡唑并n，5_a]嘧啶_7_基]-苯基卜 N-甲基乙醯胺；

-a]嘧啶_7_基]_苯基L N-{2 -氯基-5-[3-石肖基比峻并[1 Ν-曱基乙醯胺； N- [-{2 -氯基-5- [3_氰基- π比吐并^ 开以，5_a]嘧啶-7-基]苯基}- N-甲基乙醯胺；

N-{2 -氣基- 5-[3·硝基- π比σ坐并「1 $ ] 开以，％a]嘧啶-7-基]•苯基 N-曱基-甲烷磺醯胺； N- {2-氟基-5-[3_鼠基·吼α坐并$ 1开U’5-a]嘴啶_7 N-甲基-曱烷磺醯胺； 1 判嘧啶-7-基]·笨基}_ a]嘧啶基]-苯基}- N-{2_氯基- 5- [3-硝基-0比σ坐并[I。 Ν-曱基-曱烷磺醯胺； Ν-{2 -氯基- 5- [3 -氰基坐并[I。 甲基-甲烷磺醯胺； N♦氣基_5_[3·氰基·2·甲基·㈣并[1叫#7-基]_ 11 •tr 200815445 苯基}-N-甲基-乙醯胺； 基]· N-{2-氯基_5-[3-氰基-2-甲基比唑并[154]嘧啶 苯基卜N-甲基一乙醯胺； 基] N-{2-氟基-5_[3-氰基-2-甲基-吼唑并[15·&]嘧啶 苯基卜N-甲基-甲烷磺醯胺； 基] N- {2-氣基- 5-[3 -氰基-2-曱基-吼唾并心 苯基}-N-甲基-甲烷磺醯胺； N-{2-甲基- 5- [3-(σ塞吩-2 -羧基）_n比〇坐并[1 5_a]六 基]-苯基}-N-曱基-乙醯胺； 定 N-{2 -甲氧基-5_[3-(嗟吩-2-魏基）-吼唾并[15^]资 基]•苯基}-N-曱基-乙醯胺； 4喷·7

N-{2,4-二氟基_5_[3-(噻吩_2_羰基）-吡唑并U 「lD-a]。密岭 7-基]-苯基}-Ν-甲基-乙醯胺；及 Ν-{5_氟基_2_曱氧基_3-[3-(噻吩-2-羰基吡唑并D 5 嘧啶_7_基]-苯基}-N-甲基_乙醯胺。 ， 下列的反應流程說明本發明化合物的製備作用。

流程1 R、Ri、R2、R3、R4、汉5及Υ如上所述，且q為適當的脫 12 200815445 離基’選自由N(二烷基（CVC6))、烷硫基（crc6)及烷氧基 (C^C；6)所組成的群組。較佳地，Q係選自由二甲胺基、甲 硫基或甲氧基所組成的群組。 通式（III)之胺基吼唑與經適當取代之丨_芳基_2_丙

酮（II)的反應係在惰性極性質子性溶劑或非質子性溶劑中， 如冰醋酸、乙醇、甲醇、二甲基甲醯胺或二甲基亞砜中， 及在彳文50至130 C之溫度範圍下進行。在經數小時（反 應時間）之後，移除溶劑，並將所獲得的殘餘物分溶在碳 &L氫鈉水4液與一氯甲烷之間。自蒸發有機層至乾燥所生 成之粗物質可藉由下列方法之一純化··（〇使用乙酸乙_ 或二氯甲烷/曱醇作為溶析劑之矽膠 適合的溶劑（乙酸乙醋、乙醇、曱醇等）中結晶或（ 當Q為二甲胺基時〔中間物（VI)〕，則可依照流程2 中所示之反應順序獲得式（II)中間物，

流程· 2 I及Y如上所述。 其中R、Ri、 當Y為磺醯基時， 則式（IV)中間物可根據 R. H. Uloth 13 200815445 等人（J. Med. Chem. 9, 8 8-96，1966 )所述之方法製備。 造成式（V)中間物的中間物（IV)之烷基化係根據有機化 學專家熟知的方法進行，該烷基化係經由陰離子的形成及 接著與烷基函的反應。 式（V，）及（VI)烯胺_ (enaminone )係根據 J· Μ

Domagala 等人（J· Heterocyclic Chem·，26(4)，1 147-58, 1989 )及 K. Sawada 等人（（3116111.?11&1<111.81111.，49(7)，799- 813，2〇01)所述之稀胺的通用合成步驟製備，該製備係藉 由乙醯苯與N，N-二甲基甲醯胺二甲縮醛（DMFDMA)或白 瑞德瑞克（Bredereck’s )試劑（第三丁氧基雙（二甲胺基） 甲烷）的反應。 當Q為二甲胺基，Y為磺醯基及心為甲基時（νπ)， 則式（II)中間物可另外根據流程3製備，

流程3 其中R、化3及R4如上述所定義。 疋明的形成，且同時造成N-N，N-二甲基甲醯胺二甲縮醛 (IV)轉換成（VII)會造成烯胺酮的形成 甲基磺醯胺的形成，其係利用N，N-二甲』 作為曱基化試劑的性質的結果。 當Q為二甲胺基及Ri為甲基（χ)

當Q 物也可根據流程4製備， 時，則式（II)中間 14 200815445

流程4 其中R、R3、R4及Y如上述所定義。

該方法的優點係以磺醯胺或曱醯胺的形成係在最後所 述之方法中進行的事實為基準。因此，反應步驟的總次數 會在製備大量產物時減少。而且，如流程所示，（νΙΠ)轉 換成（IX)會在一鍋法反應中造成下列三種反應：（a )烯胺 酮的形成；（b )三氟乙醯胺的曱基化；及（c )得到N-曱 基化胺的去醯化。（IX)與對應之磺醯氣（sulf〇nic acid chloride)或魏醯氯（carb〇Xyiic acid chloride)的後續反應會 造成中間物（X)的獲得。 本發明的化合物或其醫藥上可接受之鹽類或水合物可 用於製備供治療或預防在人類或非人類哺乳類中與GABAa 文體調節有關聯的疾病之醫藥劑。更特定言之，與GABAa 叉體調節有關聯的疾病包含與a ^GABAa受體調節及/或 /、〇： 2-GABAa受體調節有關聯的疾病。該疾病的非限制性 名單包含焦慮症、癲癇症、睡眠病症（包括失眠症）及類 15 200815445 似疾病。 兹上可桩：的另—具體貫例係提供本發明的化合物或其醫 :非人Π之鹽類或水合物用於製備供治療或預防在人類 類中的焦慮症之醫藥劑的用途。 雄上可二的另—具體實例係提供本發明的化合物或其醫 :之人之鹽類或水合物用於製備供治療或預防在需要 、s非人類哺礼類中的癲癇症之醫藥劑的用途。 雄 二的另—具體貫例係提供本發明的化合物或其醫 豆σ :又之風頦或水合物用於製備供治療或預防在需要 Ζ、人^或非人類哺乳類中的失眠病症之醫藥劑的用途。 的另具體貫例係提供本發明的化合物或其醫 :上可接受之鹽類或水合物用於製備供治療或預防在需要 、之=或非人類哺乳類中的失眠症之醫㈣的用途。 紘 月的另具體貫例係提供本發明的化合物或其醫 -上可接受之鹽類或水合物用於製備在需要其之人類或非 人類哺乳類中誘發鎮靜_催眠之醫藥劑的用途。 一本明的另—具體實例係提供本發明的化合物或其醫 樂上可接受之鹽類或水合物料製備在需要其之人類或非 人類哺乳類中誘發麻醉之醫藥劑的用途。 ^本發明的另一具體實例係提供本發明的化合物或其醫 樂上可接受之鹽類或水合物用於製備在需要其之人類或非 / f礼#中屑即誘發睡眠所需要的時間及睡眠持續期之 醫藥劑的用途。 本發明的另一具體實例係提供本發明的化合物或其醫

16 200815445 藥上可接受之鹽類或水合物用於製 人類哺S丨朵s山μ 而要，、之人類或非 、礼痛中誘發肌肉鬆弛之醫藥劑的用途。 本發明也關於一種在人類或非 阶、接、☆ Λ 八㉘哺礼類中治療或預 防遭文與GABAa受體調節# M h _ 席飞預 人類哺# p有關聯的疾病所苦的人類或非 人颂南礼類的方法，其包含 十甘較Μ 僚有效Ϊ之本發明化合物 或其百樂上可接受之鹽類或k 物 %},, tt 員4水合物與醫藥上可接受之稀釋 :“編一起投予需要其之該人類或非人類哺乳類。更特 U之，與GABAJ體調節有關聯的疾病包含、 GABAa受體調節及/或盥 Γ 1 广兮广 / t、α 2_GAB〜受體調節有關聯的疾 病。该疾病的非限制性名單包令隹 、 ^ 3焦慮症、癲癇症、睡眠病 症（匕括失眠症）及類似疾病。

如本文所使用的術語、、嗜激翻Λ A 商孔類應指較高等的脊椎動 物的哺乳動物類。術語、\哺乳 网孔鎖包括（但不限於此）人 類。 八 :發明的另一具體實例係提供一種含有本發明的化合 物:U樂上可接受之鹽類或水合物與治療惰性載劑結合 的醫樂組成物。 組成物包括那Jtb適合於 γ + „ 一 於口服、經直腸及非經腸（包括 皮下、肌肉内及靜脈内）心者，雖然最適合的途徑將依 據欲治療之症狀本性及嚴重性而定。本發明最佳的途徑為 口服途徑。組成物可方便以單位劑型呈現，並可以在藥學 技勢中熟知的任何方法製備。 活性化合物可根攄慣用Μ居5 Μ儿人，， 很像用的醫樂化合技術與醫藥载劑組 合。载劑可依據所欲投予之製劑型式’例如，口服或非經 200815445 腸（包括靜脈内注射或灌注）而採用各種廣泛的型式。在 製備口服劑型的組成物時，可使用任何常見的醫藥介質。 常見的醫藥介質包括例如在口服液體製劑（如例懸浮液、 溶液、乳液及酏劑）的例子中的水、乙二醇、油、醇、調 味劑、保存劑、著色劑及類似物；氣溶膠；或在口服固體 製劑（如例藥粉、膠囊及藥片）的例子中的載劑，如澱粉、 :、微結晶纖維素、稀釋劑、成粒劑、潤滑劑、結合劑、 崩散劑及類似物’《口服固體製劑比口服液體製劑更佳。 因為彼等容易投予’所以藥片及膠囊呈現最有利的口 服皁位劑型，在該例子中’使用固體醫藥載劑。如要求時， 可將藥片以標準的水性或非水性技術包膜。 適合使用的劑量範圍係從約001毫克至約1〇〇〇〇毫 克總日劑量需要時，其係以每日投予—次或分次劑量 提供。 本發明的化合物對αι_及心-GABAa受體具有高親和 〇力。這些試管内結果與那些在鎮靜-催眠試驗中所獲得的活 體内結果一致。 本發明化合物的藥理活性已如下所示予以測定。 a) 農試驗化合物對"厂芬t 邀的親和力 使用在實驗時秤出200_25〇公克的sprague_Dawley雄 性大鼠。在動物斬首之後，取出小腦（主要包括ai_GABAA 受體的組織）及脊髓（主要包括&gabaa受體的組織）。 豕 J· Lameh 專人（pr〇g Neuro-Psychopharmacol.Biol. γ 18 200815445 -Psyc-w，24,979-991，2000 )及 H Noguchi 等人（Eur J Pharm, 434，21-28，2002 )的方法略微修改而用於準備薄 膜。組織一經秤重時，將彼等以1:4〇^/〇懸浮在5〇11^ 丁⑴· HC1 ( pH 7.4 )中，或在脊髓的例子中懸浮在〇 32M 庶糖中，均化及接著在7t：下以2〇〇〇〇 g離心1〇分鐘。將 所得小粒在相同的條件下再懸浮及再離心。將小粒最終再 懸浮在最小的體積上及在_8(rc下維持隔夜。在隔天，重複 ( 該方法，直到最終小粒在小腦的例子中以i :丨〇 ( V / V ) 之比再懸浮及在脊髓的例子中以i : 5(v / V)之比再懸浮。 親和力係藉由使用放射標記之福馬西尼（flumazenil) 作為配體的競爭性試驗測定。該試驗係根據s · Arbiiia等 人（Eur. J. Pharmacol·，130，257-263，1986 )及 Υ· Wu 等 人（Eur. J· Pharmacol·，278, 125-132, 1995 )所述之方法使 用96-槽孔微滴定盤進行。培養含有研究受體，福馬西尼 (以1 nM之最終濃度的放射標記）及升高試驗化合物濃 ( 度（在50mM〔 pH 7.4〕Tris.HCl緩衝液中的23〇微升總 體積）的薄膜。同時，薄膜只以放射標記之福馬西尼（總 結合’ 1 〇 〇 % )及在濃度上升的未標記之福馬西尼（非特 異性結合，放射標記之配體的預估％ )存在下培養。反廣 係在加入放射標記之配體開始，接著在4°c下培養60分鐘。 在培養期結束時，將200微升反應物轉移至多重筛選板 (Millipore )，並使用真空歧管過濾及接著以冷試驗緩衝 液清洗三次。多重篩選板配備GF/B過濾器，其保留含有 受體及已與受體結合之放射標記之配體的薄膜。在清洗之 19 200815445 一經乾燥時，加入閃爍液 ’將板使用 Perkin-Elmer 後，將板留置，直到乾燥為止。 體及在攪拌下留置隔夜。在隔天

Microbeta閃爍計數器計數。 一試驗化合物濃度的特 結果分析，如以下方式計算每 異性結合百分比： 特異性結合％ = 其中， Χ·Ν/ Τ·Ν) X 1〇〇 X ··就每一化合物濃度的結合配體量 τ ·總、纟"合，與放射標記之配體的最大結合量 N ·非特異性結合，以非特異性方式結合的放射標記 之配體的量，無關乎所使用的受體。 母化合物》辰度測試三次，並使用彼之平均值測定特 異性結合％相對化合物濃度的實驗值。親和力數據係以在 次單兀而言的1〇-川及1〇-頂濃度下及在a〗次單元而言 的ι〇-5Μ濃度下的抑制％表示。將這些試驗結果分別提供 在表1及2中。 表1 ·對GABAa受體的α 1次單元的親和力 __化合物 10·5Μ之抑制％ 10·7Μ之抑制％ 1備實施例5 98.2 42.3 t備實施例6 98.1 36.4 复1翁實施例11 ~~~~-—---------- 97.7 41.8 ^備實施例13 98.7 39.8 1備實施例14 97.3 31.9 1來普隆 97.2 26.1 20 200815445 表2·對GABAa受體的α 2次單元的親和力 _____________ ___ 化合物 10·5Μ之抑制％ 衣備貫施例5 94.5 製備實施例6 87.5 製備實施例11 95.0 扎來普隆 77.4

b)在體内測定預測的鎮靜-催眼.作q 這些化合物的活體内效果係以在小鼠中預測的鎮靜_催 眠試驗評定（D. J· Sanger 等人之 Eur j pharmac〇1，313, 35-42, 1996 及 G· Griebel 等人之 Psych〇pharmac〇1〇gy，146, 205-213，1999 )。 使用 小鼠。將 %瓊脂中 積投予。 媒劑。使 在腹膜内 鐘間隔的 制組動物 ED53 ° 在试驗時秤出22_26公克的一組5_8隻CD1雄性 試驗化合物以懸浮在具有！滴Tween 8〇之0.25 的單一等分子腹膜内劑量以丨〇毫升/公克之體 每一途徑測試兩種劑量。控制組動物接受單獨的 用 Smart System (西班牙的 paniab· & l )記錄 (ip)給藥之後30分鐘期間内每一隻小鼠以5分 仃走距離’以公分計。計算處理之動物相對於控 的行走距離之抑制ΪΓ八A，F7、 啊刺百刀比（最初5分鐘丟棄）及 將該試驗結果提供在表3及4中。

21 200815445 I 3 ·測定^小鼠中的活體内鎮靜-催眠活性 4匕合物 活動力抑制％ 98微莫耳/公斤 製備實施例5 89.0 製備實施例6 76.3 1備實施例11 83.3 製備實施例13 95.6 製備實施例14 89.6 扎來普隆 84.9 4...4_在小鼠中誘發鎮靜的ed50值 — 化合物 ed50 (微ίη11莫耳/公斤） 製備實施例11 16.9 $0 2005014596 的實施例 2 30.1 WO 2005014596 的實施例 18 19.9 與先别技蟄的其它代表性吡唑并[丨，5_a]嘧啶相比，本 發明的實施例11顯現出無疑較低的ED5Q。這意味著實施 例11在活體内更有效力，其由於需要較低的劑量誘發治療 效果的事實。 c) 類肝細腧的晌皙邱今中的代謝安定迭· 將化合物溶解在二甲基亞砜中，以達成10mM最初濃 度。接著將該貯存溶液以溶劑稀釋及緩衝，獲得5 # Μ最 22 200815445 終分析濃度。化合物係以1 ·〇毫克/毫升之匯聚的人類胞 質（自Xenotech pic獲得）培養的5 # M單一濃度在m 下重複測試。該代謝係在有或沒有共同因子的存在下評 定’並在0、60及120分鐘時間點上以lc/MS分析母體化 合物的損失而測量。接著計算剩餘的母體化合物百分比。 將結果展示在表5中。使用一般的LC法： 移動相： A =在水中的〇 · 1 %甲酸 B =在乙腈中的0.1%甲酸 HPLC管柱： Higgins Clipius C18 5微米，50x3毫米 流速： 2毫升 •分鐘ί 梯度： 時間 %A %B 0.00 95 5 2.00 5 95 2.50 5 95 2.60 95 5 3.00 95 5 表5 .在人類肝細胞的胞質部分中的代°射安疋& 化合物 ι物的％ 60 120分鐘 製備實施例6 S6^—- 81 製備實施例11 --- 82 扎來普隆 68 WO 2005014596 的實施例 18 46 23 200815445 在60及120分鐘的培養期之後，驚訝的是製備實施 例6及1 1的化合物顯示較高的剩餘母體化合物百分比 (10-20%)，其係與扎來普隆及w〇 2〇〇5〇14596的先前 技藝化合物相比。另一方面，扎來普隆在任何時間點上具 有車父低的剩餘母體化合物百分比及從6〇至丨2〇分鐘具有 較高的生物轉化。 d) 1笔l·管-内測定在24」j、時下在HepG2、CHO-K1及 細胞中的細胞毒性

HepG2 (人類肝癌細胞）及CHO-K1 (中國倉鼠印巢 細胞）皆自美國菌種保存中心（ATCC )獲得。HepG2培 養在含有具有1.87mM Glutamax®且以ImM丙S同酸鈉、 O.lmM非必需胺基酸、100000 u/L青黴素、looooo叫几 鏈黴素及10 %胎牛血清補充的伊爾氏（Ear 1，s )鹽溶液的 最低必需培養基（MEM)中培養。CH0-K1維持在含有ImM Glutamax®且以 ImM L-麩醯胺、100000 U/L 青黴素、100000 Kg /L鏈黴素及10%胎牛血清補充的漢姆氏（Ham，s ) F-12 培養基中。Promega CellTiter 96⑧ Aqueous One Solution Cell Viability Assay包括四唑内鹽（MTS)，其為在代謝 活性細胞中發現的脫氫酶酵素，轉入水溶性甲臢 (formazan )產品中。甲腹產品的量與在培養物中的活細 胞數量成直接比例。 將化合物溶解在DMSO中，以達成l〇〇mM最初濃度。 從該貯存溶液製得在DMSO中的系列稀釋液，以達成從50 24 200815445 至0.25mM I農度範圍。接著將貯存溶液及系列稀釋液以 分別的細胞培養基以1 : 1〇〇稀釋。在CH〇_K1的例子中， 吾等獲得 1000、500、250、1〇〇、5〇、25、1〇、5 及 25厂 Μ的9個最終濃度，以評定1〇5〇,反而在Hep(}2的例子中， 吾等測試1000、100、10及1/zM最終濃度，以計算在這 些濃度下的細胞存活百分比。在所有槽孔中的最終DMS0 濃度為1 % v/v。細胞系皆以試驗化合物培養24小時。在 加入MTS染料及再培養i小時之後，在49〇奈米下以分光 光度計測定相對細胞存活率。使用黛莫芬（tam〇xifen)作 為正控制組。 以試驗物件測試的樣品之吸收百分比與未處理之樣品 比杈，以計异控制百分比。使用類似的模式測定在24小 時下在HeLa細胞中的細胞毒性。將結果展示在表6中。 表6·在24小時下在HepG2、CH〇_Kl及細胞中的 細胞毒性 化合物 細胞存活％ IC,〇 在100/z Μ下 在 100 // Μ J u CHO --〜—__ 的 HepG2 下的jieLa 製備實施例11 84.5% 83.9% 1 85.6 // M US6399621的實施例i 70% 67.9% 108.4/z M 第普隆） 這些結果顯示實施例u (84.5%)在以1)(32細胞系中 25 200815445 具有較高的細胞存活百分比’其係與參考化合物印第普隆 (70%)相比’其意指印第普隆顯現出少了 15%的細胞 存或毒性增加。這些結果也在其它兩種分析的細胞系中確 n-{2版基邻秦吼。坐并tl，5·定1 基]-苯基卜N-甲基乙酿胺 將在10毫升冰醋酸中的〇 048公克（〇 38毫莫耳）4 硝基-2H-吡唑-3-基胺與u公克（〇·38毫莫耳）叫: 二甲胺基-丙烯醯基）-2_1笨基]·Ν_甲基乙酿胺之混合物回 流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將丨$毫升二氯

烷及10宅升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物中。將兩 層分開，亚將水層以1 〇毫升二氯甲烷清洗。將有機層以W 毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯曱烷層蒸發至^燥， 得到油，將其使用乙酸乙酯-二氯曱烷作為溶析劑層析：矽 膠），因此供應61毫克（49%產量）相當於N_{2_氟基d [3·石肖基比唾并Π，5外密咬_7_基]_苯基}_N_曱基乙酿胺土 = 體。 U lH NMR (4〇〇MH^ CDC13)： 5 1.97 ( 3H,S), 3.29 (3H5s), 7.29 (lH,d,J=4.4Hz) , 7.45 (lH,t,J=8.4Hz), 7.89-8.02 〇Η ^ 8.07-8.09 (1H，m)，8.83 (1H，S)，9 〇 ㈤乂㈣他）。❿）， MS (ES) m/z = 330 (MH+) HPLC = 95.7% 皇ΐωΐ_1:Ν-{2-氣基 _5-[3_ 氰基♦圭并 n，5_a]t 基]苯基} -N-甲基乙酿胺 26 200815445 將在1〇毫升冰醋酸中的〇.〇4i公克（〇38毫莫耳）5 胺基養°比。坐I甲猜與0·1公克（0.38毫莫耳）N_[5(3 二甲胺基-丙浠酸基)-2·氟苯基]_N_甲基乙酸胺之混合物回 流2.5小時及接著以減壓蒸镏移除溶劑。將：氯甲燒（15 毫升）及石炭酸氫鈉飽和溶液（1〇毫升）加入所得殘餘物 將兩層分開’並將水層以1〇毫升_ ^毛开一虱甲烷清洗。將有機 層以10 «升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲烷層蒗笋 f

至乾燥，得到油’在乙酸乙酿的存在下得到成為固體的、二 毫克N-{2-氟基-M3-氰基_D比嗤并基μ Ν-甲基乙醯胺（81%產量）。 土 ； 'HNMR(400MHz,CDC13):.1.96 ( 3H,s ) , 3.28 (3H,s)} 7 1 8 (1H，cU = 4.4Hz)，7.42 (1H，t，J = 8 8Hz)，7 99 8 〇2 ⑽⑷ 8.09-8.12 (lH，m)，8.42 (1H，S)，8.79 (1H dj=4 4Hz)。 ’ MS (ES) m/z = 3 10 (MH+) HPLC = 97.8% 皇Μ2·氣基_5_[3_硝基4唑并n，5_十密啶·7_ 基l·苯基甲基乙醯胺 將在10毫升冰醋酸中的〇·〇54公克（〇·〇毫莫耳）4_ 石肖基-2H-比嗤-3-基胺與0.120公克（〇·43毫莫耳）n_[5_(3_ 二曱胺基-丙烯醯基）-2-氯苯基]甲基乙醯胺之混合物回 流2 · 5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將二氯甲烧（工5 毫升）及碳酸氫鈉飽和溶液（10毫升）加入所得殘餘物中。 將兩層分開，並將水層以10毫升二氯甲烷清洗。將有機 層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲炫層蒸發 27 200815445 至乾燥，得到油，將其使用乙酸乙n甲院作為溶析劑 層析（矽膠），因此供應35毫克（24%產量）相當於Ν_ρ· 氯基-5-[3-硝基比唑并[l，5-a]嘧啶_7_基]_苯基卜队甲基乙 醯胺的固體。 !H NMR (400MHz5 CDC13)： δ 1.9〇 (3H，s)，3_26 (3H，s)，7·30 (lH，d，J = 4.4Hz)，7·77 (lH，t，J = 8Hz)，7 93 (1H dd J==2 4 及 (1Η，s)，9 · 0 1 (1 ，d，j=4 8 8·4Ηζ)，8.08 (lH，d，J=2Hz)，8.83

Hz)。

MS (ES) m/z == 346 (MH+) HPLC = 91% 例4: N-{2-氣基-5-[3-氰基-吡唑并[Μ。]嘧啶_7 基]-苯基}-N-甲基乙醯胺 將在10毫升冰醋酸中的〇 〇46公克（〇·43毫莫耳）5 胺基-1H-吡唑_4_甲腈（carbonitrile)與0·120公克（〇43毫 莫耳）Ν-[5-(3-二甲胺基-丙烯醯基）_2_氣苯基]_Ν_甲基乙萨 胺之混合物回流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將 15 ι升一氣甲烧及1 〇耄升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘 餘物中。將兩層分開，並將水層以i 〇毫升二氯曱烷清、先。 將有機層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲疒 層蒸發至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得到成為固 體的108毫克N-{2-氯基_5-[3-氰基，唑并tl，5外密咬I 基l·苯基卜N-甲基乙醯胺（77%產量）。 1HNMR(4〇〇MHz5 CDC13)：5 1.90 ( 3H5s ) 5 3 25 Γ3Μ λ ，^H5s)5 7.20 〇H，d，J=4.4Hz)，7 74 (1H t J=8 8Hz)，7 9 ，J〜二4及 28 200815445 8·4Ηζ)，8.10 (iH，d，J=2Hz、s ζη μ Μ、〇 叫，8.43 (lH，s)，8·80 (lH，d，J=4.8

Hz) 〇 MS (ES) m/z - 326 (MH+) HPLC = 97.7% -吡唑并[l，5-a]嘧啶-7- 羞備實施例!: n-{2-氟基·5_[3_硝基 基]-苯基} -N-甲基-甲烷磺醯胺

將在10毫升冰酉告酸中的0.043公克（〇.33毫莫耳）4_ 硝基-2H-対·3_基胺與〇1公克（（)33毫莫耳）N•卜& 二甲胺基-丙烯醯基）-2-氟苯基]_N_曱基_甲烷磺醯胺之混合 物回流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將15毫升二 氯曱烷及10毫升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物中。 將兩層分開，並將水層卩1G毫升二氣甲烧清洗。將有機 層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯曱烷層蒸發 至乾燥，得到油，將其使用乙酸乙0旨_二氯甲烧作為溶析劑 層析（石夕膠），因此供應58毫克（48%產量）相當於n_{2_ 氣基-5-[3-頌基-吼唾并[i，5_a]喷啶_7_基]-苯基卜义甲基-甲 烷磺醯胺的固體。 Ή NMR (400MHz, CDC13): 5 3.02 ( 3H5s), 3.39 (3H,s), 7.29 (lH，dJ=4.4Hz)，7.38-7.42 (1H，m), 8 〇5 8 i3 (2H m), 8 83 (lH，s)，8.98 (lH，d，J=4.4Hz)。 MS (ES) m/z = 366 (MH+) HPLC = 97.6% 碰··6- : N-{2-氟基-5-[3-氰基_吡唑并[ika]嘧啶_7 基l·苯基}-N-甲基-甲烷磺醯胺 29 200815445 將在i〇毫升冰醋酸中的G.G36公克（Q33毫莫耳）5 胺基-mn4_甲腈與μ公克（G33毫莫耳）n _ 二甲胺基-丙烯醯基）-2-氟苯基美

Az_ ^ j Ti·甲烷磺醯胺之混合 物回沭2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將Η毫升二

L 氯甲烧及Π)冑升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物中： 將兩層分開’並將水層卩1G毫升二氣甲燒清洗。將有機 層以10 *升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將m層蒸發 ^乾燥，得到油，在乙酸乙sl的存在下得到成為固體的81 毫克N-{2-a基_5_[3_氰基比峻并π，5外密咬_7_基卜苯基卜 Ν-甲基-甲烷磺醯胺（70%產量）。 Ή NMR (400MHz, CDC13): .5 3.01 ( 3H,s)5 3.38 (3H5s), 7.29 (lH，d，J=4.4Hz)，7.36_7.41 (1H，m)，8 〇8·8 l5 (2H m)，8 42 (lH，s)，8.77 (lH，d，J=4.4Hz)。 MS (ES) m/z = 346 (MH+) HPLC = 99.1% 1備_實板_例？ : N-{2-氯基-5-[3-硝基-吡唑并嘧啶-7 基]-苯基} 甲基-甲烧石黃醯胺 將在12毫升冰醋酸中的0.050公克（〇·39毫莫耳）4-石肖基-211-°比唆-3 -基胺與0.124公克（〇·39毫莫耳）Ν-[5-(3· 二曱胺基-丙烯醯基）-2-氯苯基]曱基-甲烧磺酸胺之混合 物回流1 · 5小時及接著以減壓蒸餘移除溶劑。將1 5毫升二 氯甲烧及10毫升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物中。 將兩層分開，並將水層以1 〇毫升二氯甲燒清洗。將有機 層以1 0毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲烷層蒸發 30 200815445 — 至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得到成為固體的56 宅克N-{2-氣基- 5-[3-硝基比嗤并[i，5-a]n密ϋ定_7_基]-苯基卜 Ν-曱基-甲烷磺醯胺（77%產量）。 NMR (400MHz5 CDC13): 5 3.08 ( 3H)s ) 5 3.3 8 (3H5s)5 7.30 (lH，d，J = 4.4Hz)，7.71 (lH，d，J=8.4Hz)，8·04 (1H，dd J=2& 8.4Hz)，8.14 (lH，d，J=2.4Hz)，8·83 (1H，S)，8·99 (1H d J=4 4

Hz)。 ， MS (ES) m/z = 382 (MH+) HPLC = 98.5% 复廣實施例8 : N-{2-氯基-5_[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7 基]-苯基卜N_甲基-甲烷磺醯胺 將在12毫升冰醋 胺基-1H-吡唑-4-曱腈與0.124公克（〇·39毫莫耳）n_[5_(3

二甲胺基-丙稀酿基）-2_氯苯基]-Ν_曱基_甲烷磺醯胺之混合 物回流1.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將丨5毫升一 氯甲烧及10毫升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物中。 將兩層分開，並將水層以1〇毫升二氯甲烷清洗。將有機 層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲烧層蒸發 至乾燥，得到《由，在乙酸乙酯的存在下得到成為固體的 毫克N-{2-氯基坐并[M外密咬^基卜笨基广 N-甲基-曱烷磺醯胺（70%產量）。 & NMR (400MHz9 CDC13): 5 3.08 ( 3H5s ) 5 3.37 (3H?s)? 7.2〇 (1H，cU = 4.4Hz)，7.69 (lH，dJ=8.8Hz)，8()5 (lHdd>24 及 UHz)，U6 (1Η，Μ=1·6Ηζ)，8·42 (1Hs)，8’78’⑽ 31 200815445 d，J=4.4Hz)。 MS (ES) m/z = 362 (MH+) HPLC = 93.7% 製備實施例9 : N-{2-氟基_5-[3-氰基·2_曱基-吡唑并[i，5-a] 嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基乙醯胺

將在10毫升冰醋酸中的〇·〇46公克（0.38毫莫耳）5-胺基_3_甲基-1Η-吡唑-4-曱腈與0.1公克（〇·38毫莫耳）Ν-[5-(3-二甲胺基-丙烯酸基）-2-氟苯基]甲基乙醯胺之混合 物回流2 ·5小時及接著以減壓蒸餘移除溶劑。將1 5毫升一 氣甲烧及1 0毫升碳酸氫納飽和溶液加入所得殘餘物中 將兩層分開，並將水層以10毫升二氣甲栌、、主、* 、Τ沉π洗。將有機 層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將-备m 了 —虱甲烷層蒸於 至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得至丨丨士 4 " 毫克N-{2-氟基-5-[3-氰基-2-甲基-吼唑并tl，5 苯基}-N-甲基乙醯胺（75%產量） 古 一 ^ J成為固體的92 I 基]- a]嘧唆 (3H，s)，3.3 7.89*8.02 NMR (400MHz? CDC13): δ 1.98 ( 3H5s ) 2 β\ (3H，s)，7·09 (lH，d，J=4Hz)，7.39-7.44 (lH，m)，8.08-8.11 (lH，m)，8.70 (lH，d，J=4.4Hz) MS (ES) m/z = 324 (MH+) HPLC = 98.4% 复i實施例L〇: N_{2·氣基_5-[3-氰基-2-甲a 土 n 比 〇坐 44 r 1 ^ 嘧啶-7-基]-苯基卜N-甲基乙醯胺 开U，5-a] 毫莫耳）5-毫莫耳） 將在12毫升冰醋酸中的〇 〇55公克（〇 胺基_3_甲基-1H-吡唑-仁甲腈與〇12〇公克（〇 q 32 200815445 -N-[5-(3-二甲胺基-丙烯醯基）_2_氯苯基]_Ν_甲基乙醯胺之混 合物回流1.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將15毫升 二氯曱烷及1〇宅升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物中。 將兩層分開，並將水層以10毫升二氣甲烧清洗。將有機 層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲烷層蒸發 至乾燥，得到油，在乙酸乙醋的存在下得到成為固體的106 毫克Ν-{2-氯基-5-[3-氰基-2-曱基·。比唑并n，5_a]嘧啶_7_基]-苯基}-N-甲基乙醯胺（73%產量）。 〇 ΉΝΜΚ(400ΜΗζ,〇〇013):δ1.91 ( 3H,s ) , 2.6 1 (1H s) 3 25 (3H,S), 7,〇 〇H,d,J = 4,Hz) , ,73 〇H,d5j^ (lH，dd，J=2 及 J=8Hz)5 8.08 (lH，d，J=2.4HZ)，8·71 (lH，d，J=4.4

Hz)。 ，， MS (ES) m/z = 340 (MH+) HPLC = 99.6% 噹啶-7-基]-苯基卜N-甲基-曱烧石黃醯胺 將在10毫升冰醋酸中的0 041公克（〇 33毫莫耳）5_ 胺基-3-甲基-ΙΗ-吼。坐_4_甲腈與〇1公克（〇 33毫莫耳）N_ [5-(3-二甲胺基-丙烯醯基）1氟苯基]_n_甲基-甲烷磺酿胺 ，混合物回流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將ι5 *升二氣甲烷及10毫升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物 中。將兩層分開，並將水層以> 儿肘不增Μ 10笔升二氯甲烷清洗。將有 機層毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲炫層蒸發 至乾秌’知到油’在乙酸乙酯的存在下得到成為固體的66 33 200815445 毫克N-{2-氟基-5-[3-氰基_2_甲基比唑并[i，5_a]嘧啶_7_義] 苯基}-N-甲基-甲烧磺醯胺（55%產量）。 1HNMR(400MHz5CDC13)：52.78 ( 3H5s ) ? 3.1 7 (3H5s) 3 (3H，s)，7.24 (lH，d，J=4.4Hz)，7.51-7.56 (lH，m)，8 25_8 3ι (2H，m)，8·84 (lH，d，J=4.4Hz)。 MS (ES) m/z = 360 (MH+) HPLC = 98.9% 統實施111: N-{2-氯基-5-[3_氰基_2_甲基比唑并Uia ϋ密咬-7-基]-笨基卜N-甲基-曱燒石黃醯胺 將在12毫升冰醋酸中的〇·〇48公克（〇·39毫莫耳）$ 胺基-3-甲基-1Η-吡唑-4-曱腈與0124公克（〇·39毫莫耳） Ν-[5-(3-二甲胺基-丙烯醯基）-2-氯苯基]·Ν-甲基_甲燒石兰辦 胺之混合物回流1.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將 1 5宅升一氣曱烧及1 0宅升碳酸氫納飽和溶液加入所ρ聲 餘物中。將兩層分開，並將水層以1 0毫升二氯甲燒^、、主先 將有機層以1 0毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二# 、一氧甲烧層 蒸發至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得到点 J風為固體 的89毫克N_{2-氯基-5-[3-氰基-2-曱基-吡唑并「 l ’D-a]ϋ密唆- 7-基]-苯基}-Ν-曱基·甲烷磺醯胺（60.5%產量）。 'H NMR (400MHz, CDC13)： (5 2.61 ( 3H5s ) 5 3.08 (1H s) 3 66 (3H，s), 7.10 (lH，d，J=4.8Hz )，7-68 (lH，d，J=8.8H2：) 8 04 (lH，dd，J=2.4 及 J=8.8Hz)，8.15 (iH，d J=：2 4Hz) ^ ^ (lH，d，J=4.4Hz)。 MS (ES) m/z = 376 (MH+) 34 200815445 ’ HPLC = 98.1% 直例1 3 : N-{2-甲基-5_[3-(噻吩-2-羰基）-吡唑并[15-a] 唯、σ定-7-基]-笨基} 甲基乙醯胺 將在10毫升冰醋酸中的〇·〇74公克（〇·38毫莫耳）（5 胺基-1Η-°比嗤-4-基）-°塞吩-2-基甲_與ο」公克（ο·%毫莫 耳）Ν-[5_(3-二甲胺基-丙烯醯基）-2_甲苯基μΝ_甲基乙醯胺 之混合物回流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。將工$ ( 笔升二氯甲烷及1 〇耄升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得殘餘物 中。將兩層分開，並將水層以10毫升二氯甲烷清洗。將有 機層以1 0宅升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二氯甲烧層蒸發 至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得到成為固體的132 宅克N-{2-甲基-5-[3-(噻吩-2-羰基吡唑并[u-a]嘧咬_7_ 基]-苯基}-N-甲基乙醯胺（88%產量）。 H NMR (400MHz，CDC13): 5 1.87 ( 3H，s)，2·37 (3H s) 3 25 (3H，s)，7.13 (lH，d，J=4Hz)，7·18_7·2〇(1Ηιη)，7 54 (ih， (d，J==7.6Hz)，7.70 (lH，d，J=5.2Hz)，7.94-7.98 (2H，m)，8.08 (lH，d，J=2.8Hz)，8.71 (lH，s)，8.81 (lH，d，J=4Hz)。 MS (ES) m/z = 391 (MH+) HPLC = 98.3% 實施例14 : N-{2-曱氧基-5-[3-(噻吩-2-羰基）-吡唑并 [l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基乙醯胺 將在10毫升冰醋酸中的0·070公克（〇·36毫莫耳）（5_ 胺基-1Η-吡唑-4-基）-噻吩-2-基曱酮與01公克（〇·38毫莫 耳）N-[5-(3-二曱胺基，丙烯醯基）-2-甲氧基苯基]曱基乙

(.S 35 200815445 S藍胺之混合物回流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶劑。 將15毫升二氯曱烷及10毫升碳酸氫鈉飽和溶液加入所得 殘餘物中。將兩層分開，並將水層以1 〇毫升二氯甲尸&、先 將有機層以10毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將二 Z二 一乳T規層 蒸發至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得到成為固體 的135毫克N-{2-曱氧基噻吩—2一羰基）_吡唑并[^4] 嘧啶-7·基]-苯基}-N-甲基乙醯胺（92%產量）。 ’ C3H5s)3 3.23 (3H5s)5 3.97 7·17-7·21 (2H，m), 7·7〇

JH NMR (400MHz, CDC13)： δ 1.90 (3H，s)，7.12 (lH，d，J=4.8Hz )， (lH，d，J=4.4Hz)，8.02 (1H，s)，8.09 (iH，d，J=4HZ)，8 15 (1H d，J = 8.8Hz)，8.71 (lH，s)，8.79 (lH，d，J=4.4Hz) 〇 MS (ES) m/z = 407 (MH+) HPLC = 100% ^備實施例1 5 : N-{2’4·二氟基-5一[3麵（口塞吩幾美）比 、， [l，5-a]w密σ定_7_基]-本基}_N-甲基乙酸胺 將在10毫升冰醋酸中的0.217公克（i12亳莖 毛果耳）（5- 月女基-1Η-π比峻_4 -基）-σ塞吩-2-基甲綱與〇·3公克（ 、丄.12 梦 耳）Ν-[5·(3-二甲胺基-丙烯醯基）-2,4-二氟苯基]_Ν_甲其、 酸胺之混合物回流2.5小時及接著以減壓蒸餾移除溶兩丨。 將1 5毫升二氯甲烷及1 0毫升破酸氫鈉飽和溶液加入 a 殘餘物中。將兩層分開，並將水層以1 〇毫升二氣甲燒、、主、先于 將有機層以1 0毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。蔣一 & τ 一氣甲烷層 蒸發至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得到成為古_ 的320毫克Ν-{2,4-二氟基-5-[3-(噻吩-2-羱其、 ^ π丞）_ ϋ比唾并

36 200815445 [l，5-a]嘧啶-7_基]-笨基卜N•甲基乙醯胺（69%產量）。 H NMR (250MHz，CDC13):(j ! 82 (3Hs)，3 u (3H s), 6.96-7.06 (3H，m)，7.55 (lH，d，J=4.9Hz)，7·76 (lH，t，J=8.2Hz)， 7.91 (lH，dd，J=l 及 3.6Hz)，8 52 (1H，S)，8 68 (1H d J=4」

Hz)。 MS (ES) m/z = 413 (MH+) HPLC = 99.0% 1.備貫施例1 6. : Ν_{5·氟基_2-甲氧基-3-[3-(噻吩-2-羰基）_ 。比唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基卜甲基乙醯胺 將在10笔升冰醋酸中的〇18〇公克（〇·93毫莫耳）（5_ 胺基-1Η-吡唑-4-基）_噻吩基甲酮與〇·275公克（0.93毫 莫耳）Ν-[3-(3-二甲胺基_丙烯醯基）_5_氟基_2_甲氧基苯基]_ Ν-甲基乙醯胺之混合物回流2 5小時及接著以減壓蒸餾移 除溶劑。將1 5毫升二氯曱烷及丨〇毫升碳酸氫鈉飽和溶液 加入所得殘餘物中。將兩層分開，並將水層以丨〇毫升二氯 甲烷清洗。將有機層以1〇毫升水清洗及經硫酸鎂乾燥。將 二氯曱烷層蒸發至乾燥，得到油，在乙酸乙酯的存在下得 到成為固體的160毫克N_{5_氟基_2_甲氧基-3-[3·(噻吩—2一 幾基）-吼唾并njy嘧啶-7_基]_苯基}_N_甲基乙醯胺（的 %產量）。 WNMR (250MHZ，CDC13): δ 2.04 ( 3H，s)，3.32 (3H，S)，3.56 (3H,s)，7.09-7.25 (3H，m)，7·35 (lH，dd，J=2.2 及 JnHz) 7.72 (lH，d，J=4.9Hz)，8.12 (lH，d，J = 3.8Hz), 8.68 (1H，S)5 8·85 (lH，d，J=4Hz)。 37 200815445 MS (ES) m/z = 425 (MH+) HPLC = 98.4% 組成物實施例1 : 5毫克藥片 活性成分 5.0毫克 膠態二氧化矽 0.6毫克 交聯羧甲基纖維素鈉 12.0毫克 滑石粉 4.0毫克 硬脂酸鎂 1.5毫克 聚山梨醇酯80 1.0毫克 乳糖 75.0毫克 羥丙基甲基纖維素 3.0毫克 聚乙二醇4000 0.5毫克 二氧化鈦Ε171 1.5毫克 微晶纖維素加滿至 125.0毫克 組成物實施例2 : 10毫克膠囊 活性成分 10.0毫克 膠態二氧化矽 0.6毫克 交聯聚維酿I ( crospovidone ) 12.0毫克 滑石粉 4.0毫克 硬脂酸錢 1.5毫克 月桂基硫酸鈉 1.5毫克 乳糖 77.0毫克 * \ •’ 38 200815445 f

白明膠 28.5毫克 二氧化鈦E1 71 1.5毫克 靛藍E132 0.02毫克 微晶纖維素加滿至 155.0毫克 組成物實施例3 : 口服滴劑 活性成分 0.5公克 丙二醇 10.0公克 甘油 5.0公克 糖精鈉 0.1公克 聚山梨醇酯80 1.0公克 檸檬香料 0.2公克 乙醇 25.0毫升 純水加滿至 100.0毫升 組成物實施例4 : 2.5毫克藥片 活性成分 2.5毫克 膠態二氧化矽 0.6毫克 交聯羧曱基纖維素鈉 12.0毫克 滑石粉 4.0毫克 硬脂酸鎂 1.5毫克 聚山梨醇酯80 1.0毫克 乳糖 75.0毫克 羥丙基甲基纖維素 3.0毫克 39 200815445 聚乙二醇4000 0.5毫克 二氧化鈦E 1 71 1.5毫克 微晶纖維素加滿至 125.0毫克 組成物實施例5 : 5毫克膠囊 活性成分 5.0毫克 膠態二氧化矽 0.6毫克 交聯聚維酮 12.0毫克 滑石粉 4.0毫克 硬脂酸鎮 1.5毫克 月桂基硫酸鈉 1.5毫克 乳糖 77.0毫克 白明膠 28.5毫克 二氧化鈦E171 1.5毫克 靛藍E132 0.02毫克 微晶纖維素加滿至 155.0毫克 組成物實施例6 : 口服滴劑 活性成分 0.25公克 丙二醇 10.0公克 甘油 5.0公克 糖精鈉 0.1公克 聚山梨醇酯80 1.0公克 檸檬香料 0.2公克 r '5 40 200815445 乙醇 25.0毫升 純水加滿至 100.0毫升 【圖式簡單說明】(無） 【主要元件符號說明】(無）

i... ；·* 41

Claims (1)

1. 200815445 十、申請專利範圍： 1·-種化合物，其係選自由下列者所組成的群組： a) N-{2_氟基_5_[3_硝基-吡唑并n，5_a]嘧啶_7·美 *}-N-甲基乙醯胺； 土 J本 b) Ν-{2·1基-5-[3-氰基比唾并n，5_a]喷咬_7·基 基} -N-甲基乙醯胺； c) N-{2-氯基-5-[3-硝基比唑并[1)5_a]嘧啶_7_基卜苯 基}-N-甲基乙酿胺；

   d) N-{2-氣基-5-[3-氰基比唑并[154]嘧啶_7•基]苯 基} -N-甲基乙酸胺；

   e) N-{2-氟基·5-[3-硝基比唑并[ita]哺咬 基}_1甲基-曱烷磺醯胺； f) N-{2-氟基-5-[3-氰基-吼唑并嘧啶 基}-1甲基-甲烷磺醯胺； g) N-{2'氣基-5-[3-硝基-u比唑并[154]喷咬 基}-1曱基-甲烷磺醯胺； h) N-{2-氣基-5-[3-氰基-吡唑并[i，5_a]^〇定 基} -N-曱基-甲烧石黃酷胺；Ο N-{2-氟基-5-[3-氰基-2-曱基比唑并p，5_ 基]-苯基}-N-甲基-乙酿胺， j) N-{2 -氣基- 5- [3 -氣基-2-甲基-ϋ比。坐并[i5 基]-苯基}-Ν-曱基-乙醯胺； k) Ν-{2-氟基-5-[3-氰基-2-曱基-吼唑并fl，5_ 基]-苯基卜N-甲基-甲烷磺醯胺； 基l·苯 .7- 基l·苯 基l·笨 基l·笨 .7、 a]嘧啶、7, a]嘧喷 7. 42 200815445 l) N-{2-氯基-5-[3-氰基-2-甲基比 n坐并[i，5-a]^〇定 基]-苯基}-N-曱基-曱烷磺醯胺； m) N-{2_甲基-5-[3-(σ塞吩-2-魏基）-ϋ比唾并[1，5_小密咬_ 7-基]-苯基}-Ν·曱基-乙醯胺； η) Ν-{2-甲氧基-5-[3-(噻吩-2-羰基）_吡唑并[^54]嘴 啶-7-基]-苯基}-N-甲基·乙醯胺； f \ 〇) N-{2,4-二氟基-5_[3-(嗟吩-2-幾基）_。比0坐并[i，5-a], 咬-7-基]-苯基}_N-甲基-乙醯胺；及 P) N-{5-氟基-2-甲氧基-3-[3-(噻吩_2_羰基）^比唑并 [l，5-a]嘧啶_7_基]-苯基卜N-曱基-乙醯胺； 及其醫藥上可接受之鹽類及水合物。 2· —種根據申請專利範圍第丨項之化合物的用途，其 係用於製備供治療或預防在需要其之人類或非人類哺乳類 中與GABAa受體調節有關聯的疾病之藥劑。 3·根據中請專利範圍第2項之用途，其中受體 為a i_GABAa受體。 4·根射請專利範圍第2項之用途，其中gabAa受體 為a 2-GABAa受體。 5. 一種根據申請專利範圍第i項之化合物的用途，其 用於製備供治療或預防在需要其之人類或非人類咕乳類 中的焦慮症之藥劑。 圍第1項之化合物的用途，其 需要其之人類或非人類哺乳類 6 · —種根據申請專利範 係用於製備供治療或預防在 中的癲癇症之藥劑。 43 200815445 7 · —種根據申請專利範圍第1項之化合物的用途，其 係用於製備供治療或預防在需要其之人類或非人類哺乳類 中的睡眠病症之藥劑。 8 _ —種根據申請專利範圍第1項之化合物的用途，其 係用於製備供治療或預防在需要其之人類或非人類哺乳類 中的失眠症之藥劑。 9· 一種根據申請專利範圍第1項之化合物的用途，其

   係用於製備纟需要其之人類或非人類哺等匕類中誘發鎮靜-催 眠之藥劑。 乂 1〇·一種根據申請專利範圍第1項之化合物的用途，其 係用於製備在靈車盆夕λ》 而要〃之人類或非人類哺乳類中誘發麻醉之 藥劑。 ^ 像曱請專利範圍第1項之化合物的用途，其 係用於製備在需要其之人類或非人類哺乳類中調節誘發睡 眠所需要的時間及睡眠持續期之藥劑。 12. —種根據申請專利 係用於製備在需要1之人it 的用途 弛之藥劑。人類或非人類哺乳類中誘發肌肉罄 範圍：.ΐΓ藥組成物，其包含治療有效量之如申請專利 載劑。J、所又義之化合物與-起的適量之醫藥賦形劑或 Η、固式： (無）

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