TR2023003965T2 - Sfi̇ngozi̇n-1-fosfat reseptör agoni̇sti̇ni̇n sentezi̇ i̇çi̇n ara madde hazirlamaya yöneli̇k yöntem - Google Patents

Abstract

Mevcut buluş, sfingozin-1-fosfat reseptör agonistinin sentezinde etkili bir şekilde kullanılabilen kimyasal formül ile ifade edilen bir ara madde üretmeye yönelik yeni bir yöntem ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME SFINGOZIN-l-FOSFAT RESEPTÖR AGONISTININ SENTEZI IÇIN ARA MADDE ILAZIRLAMAYA YÖNELIK YÖNTEM Mevcut bulus, sfigozin-l-fosfat reseptör agonistlerini sentezlenmeye yönelik bir ana ara madde hazirlama yöntemi ile ilgilidir. Daha spesifik olarak, mevcut bulus, asagidaki Formül 53in bir ara madde bilesiginin, hafif kosullar altinda basit bir proses ile yüksek bir verimde büyük ölçekli üretimini gerçeklestirebilen yeni bir hazirlama yöntemi ile ilgilidir: R2 Cl 0 R1 ve R23nin her biri bagimsiz olarak hidrojen, alkil, halojen, haloalkil veya alkoksialkildir. ÖNCEKI TEKNIK Sfingozin-l-fosfat (SlP), seramidin baslangiç malzemesi oldugu bir hücre içi seramid yolagi araciligiyla üretilmektedir. Seramid, birincisi de novo biyosentetik yolak olmak üzere iki yolak araciligiyla üretilmektedir. Seramid ayrica, bir hücre zari yapitasi olan sfingomiyelinin bir hücrede parçalanmasi yoluyla üretilmektedir. Her dokudaki SlP seViyesi, iki biyosentetik sfingozin kinaz (Sthsler) ve iki biyolojik olarak parçalanabilen SlP fosfat (SlP liyaz ve lizofosfolipid fosfatazlar) ile kontrol edilmektedir. Sfingozinin sfingozin kinaz ile fosforilasyonu 17464.37 araciligiyla üretilen SlPsin hücre profilerasyonu, hücre iskeleti organizasyonu ve göçü, yapisma ve siki baglanti mekanizmasi ve morfogenez gibi çesitli hücresel tepkilere aracilik ettigi bilinmektedir. S 1P, dokularda düsük bir seviyede olmakla birlikte yüksek seviyede (100 - albumin ihtiva eden plazma proteini ile birlesik bir formda mevcut bulunmaktadir. SlP, çesitli biyolojik fonksiyonlar göstermek için bir G proteini kenetli reseptör olan SlP reseptörü ile baglanmaktadir. SlPl ila SlP5 simdiye dek SlP reseptörünün alt tipleri olarak bilinmektedir ve sirasiyla endotelyal farklilasma geni (EDG) reseptörleri 1, 5, 3, 6 ve 8 olarak adlandirilmaktadir. SlP reseptörlerinin lökosit devridaimi, nöral hücre proliferasyonu, morfolojik degisiklikler, göç, endotel fonksiyonu, vazoregülasyon ve kardiyovasküler gelisim gibi çesitli biyolojik fonksiyonlarda rol oynadigi bilinmektedir. Son yillarda, birçok çalisma, bu reseptörler araciligiyla SlP sinyalleme prosesinin, enIlamasyon yaniti ve onarim prosesi dahil olmak üzere multipl skleroz ile iliskili bir dizi yanitta önemli bir rol oynadigini bulmustur ve seçici olmayan SlPl agonisti aslinda multipl skleroz için bir terapötik ajan olarak onaylanmistir. SlP reseptörleri, multipl sklerozun indüksiyonu ile iliskili birçok hücrede genis ölçüde ifade edilmektedir. Özellikle, SlPl reseptörü bagisiklik sisteminde büyük bir rol oynamaktadir. SlPl reseptörü esas olarak T hücresi ve B hücresi gibi lenfositlerin yüzeyi üzerinde ifade edilmektedir ve SlP,e yanit vererek lenfositlerin devridaiminde tutuluma yol açmaktadir. Normal durumda, SlP konsantrasyonu vücut sivisinda lenfoid dokusunda oldugundan daha yüksektir ve bu yüzden eferent lenf dolasim yaptiktan sonra lenfositler dolasim yapmak üzere SlP konsantrasyonu farkina göre lenfoid dokusundan ayrilmaktadir. Bununla birlikte, lenfositlerdeki SlPl reseptörü, SlPl agonisti ile asagi regüle edilirse, lenfositlerin lenfoid dokusundan çikisi meydana gelmemekte, bu da merkezi sinir sisteminde (CNS) enIlamasyon ve doku hasarina yol açan otoagresif lenfositlerin infiltrasyonunun azalmasina yol açmaktadir. Sonuç olarak, multipl skleroz üzerinde terapötik bir etki elde edilmektedir. Seçici olmayan bir SlPl agonisti olan Fingolimod, multipl 17464.37 skleroz tedavisine yönelik bir oral ilaç olarak onaylanmistir. Aktive olmak için SlPl reseptörüne baglandiginda, reseptör ironik bir sekilde lenfositlerin yüzeyinden parçalanmis veya içsellesmis hale gelmekte ve böylece fonksiyonel bir S 1P1 antagonizmasi olarak etki etmektedir. Basvurusu Yayininda, bir S 1 P reseptörü agonisti olarak etkili olan asagidaki Formül lsin yeni bilesikleri açiklanmaktadir: X, C veya Nsyi temsil etmektedir, R1, H veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis alkili temsil etmektedir, R2 H, istege bagli olarak sübstitüe edilmis alkil, halojen, CN, CF3 veya COCF3,ü temsil etmektedir, W C, N, C-alkoksi, C-halojen veya C-CNSyi temsil etmektedir, Q, CH20 veya O-N ,i temsil etmektedir, S asagidaki kalintilardan seçilmektedir: 17464.37 mNYHnCOZH R9 R1O R6 R9 R1O R3 ve m ve n bagimsiz olarak 0, 1, 2 veya 3,ü temsil etmektedir, R3~R10 bagimsiz olarak H, alkil, halojen, halojenoalkil veya alkoksialkili temsil etmektedir, 17464.37 R12 OH, NH2, ` , 2 , , ~ ,3 +N:0H T ' 71/ veya ` ,itemsil etmektedir. Yukaridaki dokümanin spesiIik bir örneginde, asagidaki Reaksiyon Semasi lse göre ilmetil]-piperidin-4-karb0ksilik asidin hazirlanmasi açiklanmaktadir (Reaksiyon ifade etmektedir). =` Izopropil iyodur .w »:3 r. H 3 C :0: ':-kil' J 17464.37 Yukaridaki Reaksiyon Semasi lsde, 1-kloro-6-hidroksi-3,4-dihidro-naftalen-2- karbaldehid hazirlama adimlari, asagidaki Reaksiyon Semasi 2 gibi ayrintili olarak açiklanabilmektedir. Toluen, DMF Cl 0 Ilk olarak, 6-metoksi-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-on,un toluen içinde çözündürüldügü bir çözeltiye, N,N-dimetilformamid (DMF) ve fosfor oksiklorür (POCl3) 0°C3de damlatilarak ilave edilmis, ardindan 70°C3de 6 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimi buz içine dökülmüs ve etil asetat ile ekstrakte edilmistir. Organik katman, tuzlu su ile yikanmis, kurutulmus ve konsantre edilmistir ve elde edilen kalinti, silika jel kolon kromatografisi (heksan:etil asetat = naftalenkarbaldehid elde edilmistir. Sonrasinda, alüminyum klorür (AlCl3), 0°C3de diklorometan içinde bir 1-kloro-6- metoksi-3,4-dihidro-2-naftalenkarbaldehid çözeltisine ilave edilmis ve ardindan 50°C3de 6 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimi buz içine dökülmüs ve etil asetat ile ekstrakte edilmistir. Organik katman, kurutulmus ve konsantre edilmistir ve elde edilen kalinti, silika jel kolon kromatografisi (heksan:tetrahidrofuran = 5:1 ila 3:1) ile saflastirilarak 1-kloro-6-hidroksi-3,4- dihidro-2-naftalenkarbaldehid elde edilmistir. Bununla birlikte, 1-kloro-6-metoksi-3,4-dihidro-2-naftalenkarbaldehid elde edilmesi için Vilsmeier-Haack reaksiyonu sirasinda, 70°C gibi yüksek bir sicaklikta reaksiyona girdigi için ekzotermik bir sorun olabilmektedir ve toplam verim %80 oldugu için verimin iyilestirilmesi gerekmektedir. Ek olarak, 1-kloro-6-hidroksi- 17464.37 3,4-dihidro-2-naftalenkarbaldehit elde etme reaksiyonunda AlC13 kullanimi nedeniyle reaktör kontaminasyonu sorunu veya tehlikeli reaktiIlerin kullanimi nedeniyle güvenlik sorunu olabilmektedir. AlCl3 kullanimi sirasinda, reaksiyon durmasi veya yan reaksiyon ilerlemesine göre yigin basarisizliginin meydana gelmesinden dolayi bir stabilite problemi olabilmektedir ve toplam verim %70 oldugu için verimin iyilestirilmesi gerekmektedir. BULUSUN AÇIKLAMASI TEKNIK SORUN Buna uygun olarak, mevcut bulusun teknik sorunu, mükemmel bir sfingozin-l- fosfat reseptör agonisti sentezinde kilit bir ara madde olan Formül 53in bir bilesiginin daha basit bir proses araciligiyla yüksek bir verimde büyük ölçekli üretimine uygun bir yöntemin saglanmasidir. SORUNA YÖNELIK ÇÖZÜM Yukaridaki teknik sorunun çözülmesi için, mevcut bulus, asagidaki Formül 5 ,in bir ara madde bilesigini hazirlamaya yönelik bir yöntem saglamakta olup, asagidaki adimlari içermektedir: i) Formül 23nin bir bilesiginin bir organik çözücü içinde bir asetilleme ajani ve bir baz ile reaksiyona sokulmasi yoluyla Formül 33ün bir bilesiginin hazirlanmasina yönelik bir adim, ii) Formül 33ün bilesiginin Vilsmeier-Haack reaksiyonu yoluyla Formül 43ün bir bilesiginin hazirlanmasina yönelik bir adim ve iii) bir asetil grubunun Formül 43ün bilesiginden uzzaklastirilmasi yoluyla Formül 53in bir bilesiginin hazirlanmasina yönelik bir adim: 17464.37 R2 CI (II) R2 Cl 0 R1 ve R23nin her biri bagimsiz olarak hidrojen, alkil, halojen, haloalkil veya alkoksialkildir. Mevcut bulus bundan sonra ayrintili olarak açiklanmaktadir. Mevcut bulusun bir uygulamasina göre, yukaridaki Formüllerde, R1 ve R23nin her biri bagimsiz olarak hidrojen, C1-C6 alkil, halojen, halo-Ci-C6 alkil veya C1-C6 alkoksi-Ci-C6 alkildir. Mevcut bulusun baska bir uygulamasina göre, yukaridaki Formüllerde, R1 ve 17464.37 R23nin her biri bagimsiz olarak hidrojen veya Ci-C4 alkildir. Mevcut bulusun hazirlama yönteminde, i) adiminda, Formül 33ün bilesigi, Formül 23nin bilesiginin bir organik çözücü içinde bir asetilleme ajani ve bir baz ile reaksiyona sokulmasi yoluyla hazirlanmaktadir. Mevcut bulusun baska bir uygulamasinda, (i) adimindaki organik çözücü, örnegin, diklorometan (DDCM), dikloroetan (DCE), toluen, asetonitril (ACN) ve bunlarin bir karisimindan seçilen biri veya daha fazlasi olabilmektedir. Mevcut bulusa göre baska bir uygulamada, (i) adimindaki asetilleme ajani asetil klorür veya asetik anhidrit olabilmektedir. Mevcut bulusun baska bir uygulamasinda, (i) adimindaki baz trietilamin (TEA), N,N-diizopropiletilamin (DIPEA), , sodyum hidroksit (NaOH), potasyum karbonat (K2C03), sodyum karbonat (Na2C03) ve bunlarin karisimindan seçilen biri veya daha fazlasi olabilmektedir. Mevcut bulusun hazirlama yönteminde, (ii) adiminda, Formül 43ün bilesigi, Formül 3 ,ün bilesiginin Vilsmeier-Haack reaksiyonu yoluyla hazirlanmaktadir. Mevcut bulusa göre baska bir uygulamada, (ii) adimindaki Vilsmeier-Haack reaksiyonu, 30°C veya altindaki bir sicaklikta, daha tercihen 20 ila 25°Cslik bir sicaklikta gerçeklestirilebilmektedir. Mevcut bulusun hazirlama yönteminde, (iii) adiminda, Formül 53in bilesigi, bir asetil grubunun Formül 43ün bilesiginden uzaklastirildigi koruma grubunun kaldirilmasi yoluyla hazirlanmaktadir. Mevcut bulusun baska bir uygulamasinda, asetil grubunun uzaklastirilmasi, örnegin K2C03 ile gerçeklestirilebilmektedir. 17464.37 Mevcut bulusa göre baska bir uygulamada, asetil grubunu uzaklastirmaya yönelik koruma grubunun kaldirma reaksiyonu oda sicakliginda gerçeklestirilmektedir. Mevcut bulusa göre baska bir uygulamada, (iii) adiminda hazirlanan Formül 53in bilesigi, kurutma veya filtrasyon gibi prosesler olmaksizin örnegin hidroklorik asidin (HCl) damlatilarak ilavesi yoluyla dogrudan kristallestirilebilmektedir. BULUSUN ETKILERI Mevcut bulusun hazirlama yönteminde AlC13 gibi bir reaktörü kirletebilecek tehlikeli reaktifler kullanilmamaktadir ve reaksiyonun durmasi veya yan reaksiyonlarin ilerlemesi nedeniyle yigin basarisizligi sorunu yoktur. Sonuç olarak, mevcut bulusun hazirlama yöntemi, güvenlik ve stabilite saglamakla birlikte oda sicakliginda Vilsmeier-Haack reaksiyonu ve koruma grubunu kaldirma reaksiyonu gerçeklestirilerek Formül 53in ara maddesinin hafif kosullar altinda yüksek bir verimde büyük ölçekli üretimini saglayabilmektedir. BULUSA YÖNELIK MOD Bundan sonra, mevcut bulus, asagidaki örneklerle daha ayrintili olarak açiklanacaktir. Bununla birlikte, mevcut bulusun koruma kapsaminin örneklere (DCM, 25,88 kg) bir reaktöre ilave edilmis ve iç sicaklik 0°C'ye sogutulmustur. Asetil klorür (AcCl, 2,08 kg, 26,47 mol) 10°C veya altinda yavasça damlatilarak ilave edilmis ve ilave tamamlandiginda reaksiyona geçilmesi için trietilamin (TEA, 2,92 kg, 28,88 mol) 10°C veya altinda damlatilarak ilave edilmistir. Iç sicaklik oda 17464.37 sicakligina yükseltilmistir ve reaksiyon 1 saat boyunca gerçeklestirilmistir. Iyon- çifti kromatografisi (IPC) HPLC ile gerçeklestirilmis ve reaksiyon tamamlanmistir (6-hidroksi-3,4-dihidro-2H-naftalen-1-on TR TR TR