TR201809183T4 - Bir dişi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek için bir usul. - Google Patents
Bir dişi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek için bir usul. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201809183T4 TR201809183T4 TR2018/09183T TR201809183T TR201809183T4 TR 201809183 T4 TR201809183 T4 TR 201809183T4 TR 2018/09183 T TR2018/09183 T TR 2018/09183T TR 201809183 T TR201809183 T TR 201809183T TR 201809183 T4 TR201809183 T4 TR 201809183T4
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- pro
- enkephalin
- cancer
- level
- risk
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 35
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 24
- 102100038931 Proenkephalin-A Human genes 0.000 claims abstract description 77
- 108010041071 proenkephalin Proteins 0.000 claims abstract description 66
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims abstract 7
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims abstract 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims abstract 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 26
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 26
- 108010054321 proneurotensin Proteins 0.000 claims description 14
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 4
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims 1
- YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N Met-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N 0.000 claims 1
- 240000008881 Oenanthe javanica Species 0.000 claims 1
- 238000012801 analytical assay Methods 0.000 claims 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004044 response Effects 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims 1
- YFGBQHOOROIVKG-BHDDXSALSA-N (2R)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YFGBQHOOROIVKG-BHDDXSALSA-N 0.000 abstract 1
- 108010022337 Leucine Enkephalin Proteins 0.000 abstract 1
- 102400000988 Met-enkephalin Human genes 0.000 abstract 1
- 108010042237 Methionine Enkephalin Proteins 0.000 abstract 1
- 102100024622 Proenkephalin-B Human genes 0.000 abstract 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 abstract 1
- URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N leu-enkephalin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1CC(N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 24
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 7
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N phenyl 10-methylacridin-10-ium-9-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2[N+](C)=C2C=CC=CC2=C1C(=O)OC1=CC=CC=C1 RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- ZDVWPPFTKCGYBB-UHFFFAOYSA-N [4-[3-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-3-oxopropyl]phenyl] 10-methylacridin-10-ium-9-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2[N+](C)=C2C=CC=CC2=C1C(=O)OC(C=C1)=CC=C1CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZDVWPPFTKCGYBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229940093916 potassium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 102000036365 BRCA1 Human genes 0.000 description 1
- 108700020463 BRCA1 Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108010092674 Enkephalins Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N Leu-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101800001814 Neurotensin Proteins 0.000 description 1
- 102400001103 Neurotensin Human genes 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 230000009227 antibody-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-RNFDNDRNSA-M iodine-131(1-) Chemical compound [131I-] XMBWDFGMSWQBCA-RNFDNDRNSA-M 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N neurotensin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57415—Specifically defined cancers of breast
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57423—Specifically defined cancers of lung
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/665—Assays involving proteins derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Mevcut buluşun konusu kanserden muzdarip olmayan bir dişi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek veya alternatif olarak bir dişi sujede kanser teşhisi için, bahsedilen dişi sujeden alınan vücut sıvısında Pro-Enkefalin veya Leu-Enkefalin ve Met-Enkefalin dahil bunun en az 5 amino asit içeren fragmanlarının seviyesinin belirlenmesini ve Pro-Enkefalin veya bunun fragmanlarının bahsedilen seviyesinin bir kansere yakalanma riskiyle ilişkilendirilmesini içeren bir usuldür, burada düşmüş bir seviye bir kansere yakalanma riskini gösterir veya alternatif olarak kanser teşhisi sağlar, burada düşmüş bir seviye kanser teşhisi ile korelasyonludur.
Description
Tarifnamenin konusu ayrica, Pro-Enkefalindeki amino asit 133-140 (LKELLETG, DIZI
baglanan iki baglayici içeren bir numunedeki Pro-Enkefalin ve Pro-Enkefalin
fragmanlarini belirlemek için bir analizdir, burada bahsedilen bölgelerin her biri en az 4
veya 5 amino asit içerir.
Bir numunedeki Pro-Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarinin belirlenmesine
yönelik analizlerin bir yönünde, bahsedilen analizin analiz duyarliligi saglikli
bireylerdeki Pro-Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarmin miktarini belirleyebilir ve
< 15 pmol/l, tercihen < 10 pmol/l ve daha tercihen L < 6 pmol/L'dir.
Bir numunede Pro-Enkefalin veya bunun fragmanlarinin seviyesini belirlenmesine
yönelik analizlerin bir yönünde, bahsedilen baglayici baglanma partnerine en az 107 M4,
tercihen 108 M`1 baglanma afinitesi sergiler, tercih edilen afinite sabiti 109 M'l'den düsük,
en çok tercihen 1010 M'l'den düsüktür. Teknikte uzman kisilerce bilindigi gibi [K1 ], düsük
afinitenin bilesiklerin daha yüksek bir dozunun uygulanmasiyla telafi edilmesi
düsünülebilir ve bu durun bulusun kapsami disinda degildir, baglanma afinitesi yukarida
açiklandigi gibi belirlenebilir.
Mevcut tarifnameye göre bir numunede Pro-Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarinin
belirlenmesine yönelik analizlerin bir yönünde, bu tip bir analiz bir sandviç analizi,
tercihen bir tam otomatik analizdir. Bir tam otomatik veya manüel ELlSA olabilir. Bir
POC-testi (hizmet noktasi) olabilir. Otomatik veya tam otomatik analiz örneklerine
asagidaki sistemlerin biri için kullanilabilen analizler dahildir: Roche Elecsys®, Abbott
Architect®, Siemens Centauer®, Brahms Kryptort®, Biomerieux Vidas®, Alere
Triage®. Test formatlarinin örnekleri yukarida verilmektedir.
Bir numunede Pro-Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarinin belirlenmesine yönelik
analizlerin bir yönünde, bahsedilen iki baglayicinin en az biri tespit edilmek üzere
isaretlenir. Isaret örnekleri yukarida verilmektedir.
Bir numunede Pro-Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarinin belirlenmesine yönelik
analizlerin bir yönünde, bahsedilen iki baglayicinin en az biri bir kati faza baglanir. Kati
fazlarin örnekleri yukarida verilmektedir.
Bir numunede Pro-Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarinin belirlenmesine yönelik
analizlerin bir yönünde, bahsedilen isaret kemilüininesan isaret, enzim isareti, Iloresan
isaret, radyoiyodin isaretinden olusan gruptan seçilir.
Mevcut tarifnamenin bir baska konusu mevcut bulusa göre olan bir analizi içeren bir
kittir, burada bahsedilen analizin bilesenleri bir veya daha fazla kap içinde yer alabilir.
Bulus ayrica Pro-Enkefalindeki amino asit ve
amino asit olan iki farkli bölgeye baglanan iki
baglayici içeren bir numunedeki Pro-Enkefalin ve Pro-Enkefalin fragmanlarini
belirlemek için bir kit saglamaktadir, burada bahsedilen bölgelerin her biri en az 4 veya
amino asit içerir. 20
Örnekler
Antikorlarin Olusturulmasi
Peptidler
Peptidler sentezlenmistir (J PT Technologies, Berlin, Almanya).
Asilama icin peptidler / koniiigw
Peptidlerin büyükbas hayvan serum albüminine (BSA) konjügasyonu için bir ek N-ucu
sistein kalintisi ile asilama için peptidler sentezlenmistir (JPT Technologies, Berlin,
Almanya). Peptidler Sulfo-SMCC (Perbio-science, Bonn, Almanya) kullanilarak
kovalent olarak BSA'ya baglanmistir. Baglama prosedürü Perbio elkitabina göre
gerçeklestirilmistir.
Asilama için peptid Pro-Enkefalin dizisi
Antikorlar asagidaki usule göre olusturulmustur:
Bir BALB/c faresi gün 0 ve 14'te 100 ug (100 ul tam Freund ek maddesi içinde
emülsiyonlastirilmis) ve gün 21 ve 28'de 50 ug (100 ul tam olmayan Freund ek maddesi
içinde) peptid-BSA-konjügesi ile asilanmistir. Birlestirme deneyinden üç gün önce,
hayvana bir intraperitoneal ve bir intravenöz enjeksiyon olarak 100 ul salin içinde
çözülmüs 50 ug konjüge uygulanmistir.
Asilaninis fareden splenositler ve miyelom hücresi hatti SP2/0 hücreleri 30 s 37°C'de
1 ml %50 polietilen glikol ile birlestirilmistir. Yikandiktan sonra, hücreler 96 gözenekli
hücre kültürü plakalarina ekilmistir. Hibrit klonlar HAT ortami [%20 cenin buzagi
serumu ve HAT-takviyesi ile takviye edilmis RPMI 1640 kültür ortami] içinde
büyütülerek seçilmistir. Iki hafta sonra HAT ortami üç geçis boyunca HT ortamiyla
degistirilmis ve ardindan normal hücre kültürü ortamina geri dönülmüstür.
Hücre kültürü üstte kalan fazlari ilk olarak birlesmeden üç hafta sonra antijene özel IgG
antikorlari için taranmistir. Pozitif test edilen mikro-kültürler çogaltma için 24 gözenekli
plakalara aktarilmistir. Tekrar test edildikten sonra, seçilen kültüler klonlanmis ve
sinirlayici seyreltme teknigi kullanilarak tekrar klonlanmis ve izotipler belirlenmistir.
(Lane, R.D. "A short-duration polyethylene glycol fusion technique for increasing
production of monoclonal antibody-secreting hybridomas", J. lmmunol. Meth. 81: 223-
is not detectable on the
surface of rat islet cells examined by cytofluorometry and complement-dependent
antibody-mediated cytotoxicity of monoclonal GAD antibodies", Horin. Metab. Res. 28:
11-15,(l996)).
Monoklonal antikor üretimi:
Antikorlar standart antikor üretme usulleri ile üretilmis (Marx vd., Monoclonal Antibody
Production ( ve Protein A-kromatografisi ile saflastirilniistir.
Antikor safliklari SDS jel elektroforez analizine göre > %95 olmustur.
Antikorlarin isaretlenmesi ve kaplanmasi.
Tüm antikorlar asagidaki prosedüre göre akridinyum esterle isaretlenmistir:
isaretlenmis bilesik (izleyici):
ul Akridinyum NHS-ester (asetonitril içinde 1 mg/ml, InVent GmbH, Almanya) (EP
0353971) ile karistirilmis ve 20 dakika oda sicakliginda enkübe edilmistir. Isaretlenmis
antikor Bio-Sil SEC üzerinde jel-filtreleme
HPLC ile satlastirilmistir. Saflastirilan isaretlenmis antikor (300 mmol/l potasyumfosfat,
seyreltilmistir. Nihai konsantrasyon
isaretlenmis bilesik olmustur (yaklasik 20 ng isaretlenmis antikor). Akridinyumester
kemilüminesani bir AutoLumat LE
kullanilarak ölçülmüstür.
Kati faz antikor (kaplanmis antikor):
Kati faz: Polistiren tüpler (Greiner Bio-One International AG, Avusturya) antikor (1.5 ug
sicakliginda 18 saat). %5 büyükbas hayvan serum albümini ile bloke edildikten sonra,
tüpler PBS, pH 7.4 ile yikanmis ve vakumla kurutulmustur.
Antikor özgünlügü:
Farkli antikorlarin çapraz reaktiviteleri tablo 2'de listelenmektedir.
Asilama için peptid
(C)EEDDSLANSSDLLK
(C)LKELLETG
(C)TGDNRERSHHQDGSDNE
(C)SDNEEEVS
Pre-Pro-Enkefalin-dizisi
119-125
121-134
133-140
139-155
152-159
Antikor çapraz reaktiviteleri asagidaki gibi belirlenmistir:
Antikor adi
NT-MRPENK
NM-MRPENK
MR-MRPENK
MC-MRPENK
CT-MRPENK
300 iil PBS, pH 7,4, içindeki 1 ug peptid pipetle polistiren tüplere aktarilmis ve 1 saat
oda sicakliginda enkübe edilmistir. Enkübasyondan sonra tüpler PBS, pH 7,4, içinde %5
BSA kullanilarak 5 kez (her biri 1 ml) yikanmistir. Isaretlenmis antikorlarin her biri
eklenmis (PBS, pH ve 2 saat oda sicakliginda
enkübe edilmistir. 5 kez yikandiktan sonra (her biri 1 m1 yikama çözeltisi (20 mmol/l
PBS, pH 7.4, %0.] Triton X 100)), kalan lüininesan (isaretlenmis antikor) AutoLumat LE
953 kullanilarak ölçülmüstür. Referans madde olarak MRPENK-peptidi kullanilmistir
(%100).
peplid : NO-Ö)
MRPENK
MRPENK ;
MRPE'NK I
MRPENK
MRPENK
Tüm antikorlar, asilama için kullanilan peptidlere benzer sekilde, MRPENK peptidine
baglanmistir. NT-MRPENK-antikoru hariç (EEDDSLANSSDLLK ile %10 çapraz
tepkime), hiçbir antikor, antikor asilamasi için kullanilmayan MR-PENK peptidleriyle
çapraz tepkime sergilememistir.
Pro-Enkefalin Immünoanalizi:
50 ul numune (veya kalibratör) pipetle kaplanmis tüplere aktarilmis, isaretlenmis antikor
(200 ul) eklendikten sonra, tüpler 2 saat 18-25 °C'de enkübe edilmistir. Baglanmamis
izleyici 5 kez (her biri 1 ml) yikama çözeltisi (20 mmol/l PBS, pH 7.4, %0.1 Triton X-
100) ile yikanarak uzaklastirilmistir. Tüpe-baglanmis isaretlenmis antikor Luminumeter
LE 953 ve 1000 pmol/l'lik sabit bir MRPENK konsantrasyonu kullanilarak ölçülmüstür.
Farkli antikor kombinasyonlarinin sinyal (/gürültü
(MRPENK olmadan RLU) orani tablo 4'te verilmektedir. Tüm antikorlar herhangi bir
baska antikorla bir sandviç kompleksi olusturabilmistir. Sürpriz bir sekilde, en yüksek
sinyal/gürültü orani (en iyi duyarlilik) MR-MRPENK- ve CT-MRPENK antikoru
birlestirilerek elde edilmistir. Ardindan, bu antikor kombinasyonu ek incelemeler için
MRPENK-immünoanalizi gerçeklestirmek için kullanilmistir. MR-MRPENK antikoru
kaplanmis tüp antikoru olarak ve CT-MRPENK antikoru isaretlenmis antikor olarak
kullanilmistir.
Kati faz NT- NM- MR- MC- CT-
antikoru MRPENK MRPENK MRPENK MRPENK MRPENK
Isaretlenmis
antikor
MRPENK
MRPENK
MRPENK
MRPENK
MRPENK
Kalibrasyon:
pH 8.0, içinde seyreltilmis sentetik MRPENK seyreltileri kullanilarak kalibre edilmistir.
Pro-Enkefalin kontrol plazmasi ICI-Diagnostics, Berlin, Almanya'dan temin edilebilir.
Sekil 1, bir tipik Pro-Enkefalin doz/sinyal egrisini göstermektedir. Standart egri Pro-
Enkefalin.
Analiz duyarliligi 20 tespit 0-kalibratör (MRPENK eklenmeden) + 2SD) 5,5 pmol/L
olmustur.
Popülasyon çalismasi
Usuller
1991-1994'te Malmö Diyet ve Kanser Çalismasi baslangiç muayenesi esasli
popülasyonun 2559 kadin katilimcisinin açlik plazmasinda Pro-Enkefalin ölçülmüstür
(yas 58 ± 6 ve %59 kadin). Baslangiç PENK'yi (log-dönüstürülmüs PENK'nin her bir
standart sapma artisi basina tehlike orani) 12 yildan uzun bir orta takip süresi sirasinda
çalisma son noktalarinin her birinin birinci olayi zamaniyla iliskilendirrnek için Çok-
degiskenli ayarlanmis (tüm geleneksel kardiyovasküler risk faktörleri, diyabet risk
faktörleri ve kanser analizinde ayrica kanser kalitimi) Cox orantili tehlike modelleri
kullanilmistir. Son noktalar Isveç Ulusal Hastane Taburcu Kaydi, Isveç Miyokard
Enfarktüsü Kaydi, Malmö Inme Kaydi ve Isveç Kanser Kaydi araciligiyla elde edilmistir.
Bu kayitlar araciligiyla son noktalarin elde edilmesi onaylanmis ve dogru olduklari
bulunmustur (bkz., ayrica Belting Vd. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev; 1-10. .
Calismadaki kadinlarin klinik özellikleri
Tanimlayici Istatistikler
N Ortalama Std. Sapma
Tanimlayici Istatistikler
N Ortalama Std. Sapma
Sekil 2: kadin popülasyonunda Pro Enkefalin frekans dagilimi:
Ortalama deger 47,2 pmol/L, standart sapma: 1.2 pmol/L. X ekseni PENK
konsantrasyonunun dogal logaritmasidir (Logarithmus Naturalis (LN)). Tüm sonuçlar
analiz ölçümü içinde olmus, en düsük PENK konsantrasyonu 9 pmol/L olmustur. Bu
sonuçlar kullanilan analizin uygun oldugunu gösterir (analiz duyarliligi 5.5 pmol/L).
PEN K ve meme kanseri tahmini
Pro-Enkefalin ve meme kanseri arasindaki iliski degerlendirilmistir (Tablo 6). Kadinlarda
Pro-Enkefalin ve meme kanseri arasinda kuvvetli bir iliski olmustur. Tam olarak
ayarlanmis bir modelde, Pro-Enkefalinde her bir SS artisi %28,6'11k bir risk azalmasiyla
iliskilendirilmis veya Pro-Enkefalinde her bir SS azalisi (revPENK) ilerideki meme
kanserinde %40'11k bir risk artisi ile iliskilendirilmistir (tablo 5) ve Pro-Enkefalinin üst ve
alt çeyrekleri meme kanseri riskinde 3-kattan yüksek bir fark göstermistir (bkz., tablo 7
ve sekil 3).
Denklemdeki Degiskenler°
B SE Wald df Sig, Exp(B)
CINSIYET
halihazirda_sigara_içen ,330
HER_CANCER_0 ,034
1,139
2,886
2,127
MEME KANSERI
1 SS P-
basina HR degeri 4
(2140/ 135) 1.6)
1,007
1,027
1,045
1,392
1,035
Çeyrek Çeyrek3 Çeyrek2 Çeyrek] Egilim
Meme kanseri oranina karsi baslangiç Pro-Enkefalin için Çok-degiskenli Cox orantili
Tehlike modelleri.
Sekil 3: Kadinlarda toplam meme kanseri teshisini gösteren Kaplan Meier grafikleri,
pmol/l), çeyrek 4 (54.1 pmol/l'nin üstü). Düsük PENK bir uzun dönemli meme kanseri
olusmasi riskini göstermektedir. Baslangiç gününde (kan numunesi alimi) kanser geçmisi
olan tüm kadinlar dahil edilmediginden, Pro-Enkefalin ileride meme kanseri gelismesi
için yüksek oranda gösterge teskil eder. Genel olarak, Q 1'deki kadinlar Q 4'teki kadinlara
göre 3.6 kat daha artmis meme kanserine yakalanma riski tasimaktadir.
Pro Enkefalin ve Pro Nörotensin Kombinasyonu
Son dönemde artan Pro-Nörotensinin meme kanseri için yüksek oranda gösterge teskil
ettigi gösterilmis oldugundan, meme kanseri tahmini için her iki biyo-isaret
birlestirilmistir.
Örnekler
Pro-Nörotensin analizi
Antikorlar yukarida açiklandigi gibi olusturulmustur. Isaretleme antikoru (LA) P-NT 1-
19'a (H-CSDSEEEMKALEADFLTNMH (DIZI ID NO: 24)) karsi olusturulmus ve kati
faz antikoru (SPA) P-NT 44-62 peptidine (CNLNSPAEETGEVHEEELVA (DIZI ID
NO: 25)) karsi olusturulmustur.
Insan Pro-Nörotensin miktarinin tayini için immünoanaliz
Akridinyum ester isaretlemesine dayanan bir sandviç kaplanmis tüp lüminesan
iininünoanaliz teknolojisi kullanilmistir.
isaretlenmis bilesik (izleyici): 10 nl
Akridinyum NHS-ester (asetonitril içinde lmg/ml, InVent GmbH, Almanya) (EP
0353971) ile karistirilmis ve 20 dakika oda sicakliginda enkübe edilmistir. Isaretlenmis
LA Bio-Sil SEC üzerinde jel-filtreleme HPLC
ile satlastirilmistir. Saflastirilan LA (300 mmol/l potasyumfosfat, 100mm01/1 NaCl,
mmol/L Na-EDTA, 5 g/l büyükbas hayvan serum albümini, pH 7.0) içinde
seyreltilmistir. Nihai konsantrasyon
isaretlenmis bilesik olmustur (yaklasik 20 ng isaretlenmis antikor). Akridinyumester
kemilüminesani bir AutoLumat LE
kullanilarak ölçülmüstür.20
Kati faz: Polistiren tüpler (Greiner Bio-One International AG, Avusturya) SPA (1.5 ug
SPA/ ile kaplanmistir (oda
sicakliginda 18 saat). %5 büyükbas hayvan serum albümini ile bloke edildikten sonra,
tüpler PBS, pH 7.4 ile yikanmis ve vakumla kurutulmustur.
Kalibrasyon:
Analiz Pro-Nörotensin içeren insan serumu seyreltileri kullanilarak kalibre edilmistir.
Yüksek Pro-Nörotensin immünoreaktivitesi olan bir insan serumu havuzu (InVent
Diagostika, Hennigsdorf, Almanya) at serumu (Biochrom AG, Almanya) ile
seyreltilmistir (analiz standartlari).
Standartlar insan Pro-Nörotensin kalibrasyon cihazi (lCI-Diagnostics, Berlin, Almanya)
kullanilarak kalibre edilinistir. Alternatif olarak, analiz sentetik veya rekombinant P-NT
1-117 veya bunun fragmanlariyla kalibre edilebilir (bkz., ayrica Ernst vd., 2006).
ProNT Immünoanalizi:
50 ul numune (veya kalibrasyon maddesi) pipetle SPA kaplanmis tüplere konulmus,
edilmistir. Baglanmamis izleyici 5 kez (her biri 1 ml) yikama çözeltisi (20 mmol/l PBS,
pH 7.4, %0.1 Triton X-lOO) ile yikanarak uzaklastirilmistir. Tüpe-baglanmis LA
Luminumeter LE 953 kullanilarak ölçülinüstür. Sonuçlar kalibrasyon egrisinden
hesaplanmistir.
Kadin popülasyonunda Pro-Enkefalin ve PNT'nin birlesik analizi:
Pro-enkefalin ve Pro-Nörotensin arasinda herhangi bir önemli korelasyon olmamistir
(p=0.56). Her iki biyo-isaretin kullanildigi bir birlesik modelde, her ikisinin de meme
kanseri tahmininde bagimsiz oldugu bulunmustur.
Bir tam olarak ayarlanmis modelde, PNT'de her bir SS artisinin ileride meme kanseri için
eklendikten sonra, PNT olmayan duruma göre PENK daha kuvvetli hale gelmis ve Pro-
Enkefalinde her bir SS artisi için %30,8'lik bir risk azalmasi göstermis veya Pro-
Enkefalindeki her bir SS azalisi (reVPENK) ilerideki meme kanseri için %44,5'1ik bir risk
artisi ile iliskilendirilmistir (tablo 8).
Tablo 8: Meme kanseri tahmini için birlesik PNT ve PENK analizi.
Denklemdeki Degiskenler
B SE Wald df Sig. Exp(B) Exp(B) için
current_smoker0
En düsüge karsi en artmis PNT çeyregi meme kanseri olusmasi için 2.56 katlik bir risk
göstermistir ve en yüksege karsi en düsük PNT üzerinde Pro Enkefalin çeyregi (rev:ters
En düsük PNT ve en yüksek Pro-Enkefalin çeyregine karsi en yüksek PNT çeyregi ve en
düsük Pro-Enkefalin çeyregi kombinasyonu 6.17'lik bir birlesik risk sergilemistir (bkz.,
Tablo 9: Meme kanseri tahmini için birlesik PNT ve PENK analizi.
Denklemdeki Degiskenler
B SE Wald df Sig. Exp(B) %95,0 Cl
Q_PENK_rev 23,361 3 ,000
Sekil 4: Meme kanseri tahmini için Pro-Enkefalinin birlesik analizinin açiklama örnegi:
En düsük Pro-Enkefalin (1.) çeyregi ve en yüksek (4.) Pro-Nörotensin çeyregindeki
kadinlar birlestirilmistir (grup 3). Bu artmis risk grubu içinde kadinlarin yaklasik
Grup 2, 3. Pro-Nörotensin çeyregi ve 2. Pro-Enkefalin çeyregi ve ek olarak 2. Pro-
Nörotensin çeyregi ve 3. Pro-Enkefalin çeyregindeki kadinlarin bir kombinasyonudur. Bu
orta risk grubu içinde kadinlarin yaklasik %7,48'inde müteakip 15 yil içinde meme
kanseri olusmustur.
Grup 1, 1. Pro-Nörotensin çeyregi ve 4. Pro-Enkefalin çeyregindeki kadinlarin bir
koinbinasyonudur. Bu düsük risk grubu içinde kadinlarin yaklasik %3,08'inde müteakip
yil içinde meme kanseri olusmustur. Grup 1 ve grup 3 arasindaki tehlike riski yaklasik
6,17'dir.
Akciger kanseri
Pro-Enkefalin kadinlarda akciger kanserini de tahmin etmektedir.
Gözlem periyodu sirasinda 40 kadinda akciger kanseri olusmustur. Pro-Enkefalin sigara
içen ve içmeyen kadinlarda farkli degildir (p=0.44). Beklendigi gibi, sigara akciger
kanseri için kuvvetli bir risk tahmin isaretidir (p<0.0001). Sürpriz bir sekilde, sigara
içmek denklemin bir parçasi olmasina ragmen, düsük Pro-Enkefalin 3.2 katlik bir akciger
kanseri olusmasi riski göstermistir (tablo 10 a ve 10 b).
Tablo 10a ve 10b: Kadinlarda akciger kanseri tahmininde PENK. Kadinlar üç grup
halinde bölünmüs (bkz, tablo 10 a) ve ardindan akciger kanseri olusumu için analiz
edilmistir (bkz, tablo 10 b). rev = en yüksek grup (tertil 3), rev (1): tertil 2 ve rev(2) =
en düsük grup (tertil 1).
PENK [pmol/L]
PENK Yüzde Dilimi Grubu pmolL Orta Minimum Maksimum
Denklemdeki Degiskenler
B SE Wald df Sig. Exp(B)
Denklemdeki Degiskenler
B SE Wald df Sig. Exp(B)
T_PENK_females_rev 6,698 2 ,035
SEKILLERIN AÇIKLAMASI
Sekil 1: bir tipik Pro-Enkefalin doz/sinyal egrisini göstermektedir. Standart egri Pro-
Enkefalin.
Sekil 2: kadin popülasyonunda Pro Enkefalin frekans dagilimi:
Sekil 3: Kadinlarda toplam meme kanseri teshisini gösteren Kaplan Meier grafikleri,
pmol/l), çeyrek 4 (54.1 pmol/l'nin üstü). Düsük PENK bir uzun dönemli meme kanseri
olusmasi riskini göstermektedir. Baslangiç gününde (kan numunesi alimi) kanser geçmisi
olan tüm kadinlar dahil edilmediginden, Pro-Enkefalin ileride meme kanseri gelismesi
için yüksek oranda gösterge teskil eder. Genel olarak, Q l'deki kadinlar Q 4'teki kadinlara
göre 3.6 kat daha artmis meme kanserine yakalanma riski tasimaktadir.
Sekil 4: Meme kanseri tahmini için Pro-Enkefalinin birlesik analizinin açiklama örnegi:
Claims (1)
- ISTEMLER Kanserden muzdarip olmayan bir disi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek için asagidakileri içeren bir usul olup: - bahsedilen disi sujeden alinan bir vücut sivisinda Pro-Enkefalin veya bunun fragmanlarinin seviyesinin belirlenmesi; ve - Pro-Enkefalin veya bunun fragmanlarinin bahsedilen seviyesinin kanSere yakalanma riskiyle iliskilendirilmesi, burada düsmüs bir seviye artmis bir kansere yakalanma riskinin göstergesidir; burada düsmüs bir seviye belirli bir esik seviyesinin altinda bir seviye anlamina burada bahsedilen Pro-Enkefalin veya bunun fragmani DIZI lD N 0. l, DIZI lD No. ve DIZI ID No. ll'i içeren gruptan seçilir. Istem l'e göre bir usul olup, burada bahsedilen kanser meme kanseri veya akciger kanseridir. Istem 1 ila Z'den herhangi birine göre bir usul olup, burada bahsedilen disi suj eden vücut sivisi numunesinin alindigi zamanda, bahsedilen disi suj e herhangi bir kanser teshisi geçmisine sahip degildir. Istem 1 ila 3'e göre bir usul olup, burada bahsedilen disi sujeden vücut sivisi nuinunesinin alindigi zamanda, bahsedilen disi suje bir kanser teshisi geçmisine sahiptir ve iyilesmistir ve meme kanserinin nüksetme riski belirlenir. Istem 1 ila 4'e göre bir usul olup, burada bahsedilen disi sujeden vücut sivisi nuinunesi alindigi zamanda, bahsedilen disi sujeye bir kardiyovasküler hastalik veya diyabet teshisi konmustur. Istem 1 ila 5'e göre bir usul olup, burada ek olarak müteakiben verilenleri içeren gruptan seçilen en az bir klinik parametre belirlenir: yas, seker hastaligi mevcudiyeti, halihazirda sigara kullanimi. Önceki istemlerden herhangi birine göre bir usul olup, burada Pro-Enkefalin seviyesi bir iinmünoanaliz ile ölçülür.20 Istem 1 ila 7'den herhangi birine göre bir usul olup, burada bahsedilen usul bir disi suj ede meme kanserine yakalanma riskini izlemek veya tedavi sürecini izlemek için birden fazla kez gerçeklestirilir. Istem 8'e göre bir usul olup, burada bahsedilen izleme gerçeklestirilen Önleyici ve/veya terapötik tedbirlere bahsedilen disi sujeyin verdigi cevabi degerlendirmek için gerçeklestirilir. Istem 1 ila 9'dan herhangi birine göre bir usul olup, bahsedilen disi sujelerin risk gruplari halinde siniflandirilmasi içindir. Istem 1 ila 10'dan herhangi birine göre bir usul olup, burada asagidaki asamalari ° bahsedilen disi sujeden alinan bir vücut sivisinda Pro-Nörotensin 1-1 17 (DIZI ° Pro-Enkefalin veya bunun fragmanlarinin ve Pro-Nörotensin l-l l7'nin (DIZI iliskilendirilmesi, burada düsmüs bir Pro-Enkefalin seviyesi artmis bir kansere yakalanina riskini gösterir ve burada yükselmis bir Pro-Nörotensin seviyesi artmis bir kansere yakalanma riskini gösterir. Istem 1-1 1 'den herhangi birine göre bir usul olup, burada Pro-Enkefalin veya bunun fragmanlarinin düsmüs bir seviyesi bir esigin altindaki bir seviyedir, burada bahsedilen esik 100 pmol/l*nin altindadir. Istem 11 ve 12'den herhangi birine göre bir usul olup, burada Pro-Nörotensin veya bunun fragmanlarinin yükselmis bir seviyesi bir esigin üzerindeki bir seviyedir, burada bahsedilen esik 78 pmol/l'nin üzerindedir. Istem 1-13'ten herhangi birine göre bir usul olup, burada Vücut sivisi kan, plazma veya serumdur. Istem 1-14'ten herhangi birine göre bir usul olup, burada MR- Pro-Enkefalin (DIZI Pro-Enkefalindeki amino asit ve amino asit olan iki farkli bölgeye baglanan iki baglayici içeren bir numunedeki Pro-Enkefalin ve Pro-Enkefalin fragmanlarini belirlemek için bir kit olup, burada bahsedilen bölgelerin her biri en az 4 veya 5 amino asit içerir. Istem 16'ya göre bir kit olup, burada bahsedilen kit saglikli bireylerdeki Pro- Enkefalin veya Pro-Enkefalin fragmanlarinin miktarini belirlemek için yeterli duyarliliga sahiptir ve analitik analiz duyarliligi < 15 pmol/l'dür. Istem 16 veya 17'den herhangi birine göre olan bir kitin, kanserden muzdarip olmayan bir disi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek ve/veya bahsedilen disi sujeleri risk gruplari halinde siniflandirmak için istem l - 15,ten herhangi birine göre olan bir usulü içerecek sekilde kullanimi. Istem 16 veya 17'den herhangi birine göre olan bir kitin, kanserden muzdarip olmayan bir disi sujede kansere yakalanma riskini tahinin etmek ve/veya bahsedilen disi sujeleri opioid büyüme faktörü (OGF) terapisi alinasi gereken bir grup halinde siniflandirmak için istem 1 - 15iten herhangi birine göre olan bir usulü içerecek sekilde kullanimi. Istem 16 veya 17'ye göre bir kit olup, burada Pro-Enkefalin ve Pro-Enkefalin fragmanlarinin seviyesi kanserden muzdarip olmayan bir disi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek için kullanilir.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP12187050 | 2012-10-02 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201809183T4 true TR201809183T4 (tr) | 2018-07-23 |
Family
ID=46940411
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2018/09183T TR201809183T4 (tr) | 2012-10-02 | 2013-10-01 | Bir dişi sujede kansere yakalanma riskini tahmin etmek için bir usul. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US9702876B2 (tr) |
| EP (1) | EP2904398B1 (tr) |
| JP (1) | JP6392762B2 (tr) |
| CN (2) | CN104781672B (tr) |
| CA (1) | CA2886814C (tr) |
| DK (1) | DK2904398T3 (tr) |
| ES (1) | ES2676737T3 (tr) |
| HK (1) | HK1212762A1 (tr) |
| PL (1) | PL2904398T3 (tr) |
| RU (3) | RU2671578C2 (tr) |
| TR (1) | TR201809183T4 (tr) |
| WO (1) | WO2014053502A1 (tr) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6317763B2 (ja) * | 2013-01-08 | 2018-04-25 | シュピーンゴテック ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 対象における癌となる危険性を予測し又は癌と診断する方法 |
| US20160097781A1 (en) * | 2014-10-01 | 2016-04-07 | Sphingotec Gmbh | Method for stratifying a female subject for hormone replacement therapy |
| EP3262421B1 (en) * | 2015-02-27 | 2020-02-26 | SphingoTec GmbH | A method for predicting the risk of obesity in a subject |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU634716B2 (en) | 1988-08-01 | 1993-03-04 | Ciba Corning Diagnostics Corp. | Method for detection of an analyte using acridinium esters and liposomes |
| US7713705B2 (en) * | 2002-12-24 | 2010-05-11 | Biosite, Inc. | Markers for differential diagnosis and methods of use thereof |
| AU2002305394A1 (en) * | 2001-05-04 | 2002-11-18 | Biosite, Inc. | Diagnostic markers of acute coronary syndromes and methods of use thereof |
| US20050181375A1 (en) * | 2003-01-10 | 2005-08-18 | Natasha Aziz | Novel methods of diagnosis of metastatic cancer, compositions and methods of screening for modulators of metastatic cancer |
| WO2005114222A1 (en) * | 2004-05-13 | 2005-12-01 | Sphingo Tec Gmbh | Use of precursors of enkephalins and/or their fragments in medical diagnostics |
| US20080160577A1 (en) * | 2005-02-04 | 2008-07-03 | Glaxo Group Limited | Optimization of Heterologous Polypeptide Expression |
| US20080160557A1 (en) * | 2006-09-28 | 2008-07-03 | Cady Roger K | Diagnostic Test for Head and Facial Pain |
| JPWO2009044561A1 (ja) * | 2007-10-03 | 2011-02-03 | 静岡県 | 抗ｐｒｏＮＴ／ＮＭＮモノクローナル抗体 |
| ES2538002T3 (es) * | 2009-01-07 | 2015-06-16 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Métodos para el tratamiento, la evaluación pronóstica y la detección de cáncer de mama |
| EP2233590A1 (en) * | 2009-01-28 | 2010-09-29 | AIT Austrian Institute of Technology GmbH | Methylation assay |
| WO2010128071A1 (en) * | 2009-05-05 | 2010-11-11 | Brahms Ag | Vasoactive hormone-based stratification of patients suffering from diseases related to endothelial function/dysfunction |
| EP2438193B1 (en) * | 2009-06-01 | 2015-07-22 | Genetic Technologies Limited | Methods for breast cancer risk assessment |
| EP2464659A1 (en) * | 2009-08-14 | 2012-06-20 | Allergan, Inc. | Methods of treating cancer using opioid retargeted endpeptidases |
-
2013
- 2013-10-01 RU RU2015116675A patent/RU2671578C2/ru active
- 2013-10-01 ES ES13779755.1T patent/ES2676737T3/es active Active
- 2013-10-01 JP JP2015534992A patent/JP6392762B2/ja active Active
- 2013-10-01 CN CN201380051613.1A patent/CN104781672B/zh active Active
- 2013-10-01 WO PCT/EP2013/070471 patent/WO2014053502A1/en active Application Filing
- 2013-10-01 DK DK13779755.1T patent/DK2904398T3/en active
- 2013-10-01 PL PL13779755T patent/PL2904398T3/pl unknown
- 2013-10-01 US US14/432,808 patent/US9702876B2/en active Active
- 2013-10-01 CN CN201910496671.4A patent/CN110221071A/zh active Pending
- 2013-10-01 TR TR2018/09183T patent/TR201809183T4/tr unknown
- 2013-10-01 EP EP13779755.1A patent/EP2904398B1/en active Active
- 2013-10-01 RU RU2018138055A patent/RU2707755C2/ru active
- 2013-10-01 CA CA2886814A patent/CA2886814C/en active Active
-
2016
- 2016-01-14 HK HK16100382.8A patent/HK1212762A1/zh unknown
-
2017
- 2017-07-05 US US15/641,436 patent/US20170307618A1/en active Pending
-
2019
- 2019-11-22 RU RU2019137669A patent/RU2019137669A/ru unknown
-
2022
- 2022-09-29 US US17/955,765 patent/US20230147663A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2019137669A (ru) | 2021-05-24 |
| ES2676737T3 (es) | 2018-07-24 |
| RU2018138055A (ru) | 2018-11-14 |
| US20170307618A1 (en) | 2017-10-26 |
| US20230147663A1 (en) | 2023-05-11 |
| RU2707755C2 (ru) | 2019-11-29 |
| RU2018138055A3 (tr) | 2019-06-10 |
| CA2886814C (en) | 2021-09-07 |
| PL2904398T3 (pl) | 2018-11-30 |
| RU2671578C2 (ru) | 2018-11-02 |
| EP2904398B1 (en) | 2018-04-11 |
| RU2015116675A (ru) | 2016-11-27 |
| CA2886814A1 (en) | 2014-04-10 |
| RU2019137669A3 (tr) | 2021-05-24 |
| HK1212762A1 (zh) | 2016-06-17 |
| CN110221071A (zh) | 2019-09-10 |
| CN104781672A (zh) | 2015-07-15 |
| EP2904398A1 (en) | 2015-08-12 |
| DK2904398T3 (en) | 2018-07-23 |
| CN104781672B (zh) | 2019-07-05 |
| JP2015532423A (ja) | 2015-11-09 |
| US20150268240A1 (en) | 2015-09-24 |
| WO2014053502A1 (en) | 2014-04-10 |
| JP6392762B2 (ja) | 2018-09-19 |
| US9702876B2 (en) | 2017-07-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20210333292A1 (en) | Method for diagnosing or monitoring kidney function or diagnosing kidney dysfunction | |
| US20210109102A1 (en) | Method for predicting the risk of getting cancer or diagnosing cancer in a female subject | |
| US20230147663A1 (en) | Method for predicting the risk of getting cancer or diagnosing cancer in a female subject | |
| US20200326350A1 (en) | Method for predicting the risk of a subject for contracting diabetes mellitus and/or metabolic syndrome or for diagnosing metabolic syndrome in a subject | |
| EP2823318B1 (en) | A method for predicting the risk of getting a cardiovascular event in a female subject | |
| US10605812B2 (en) | Method for predicting the risk of getting cancer or diagnosing cancer in a subject | |
| US20220196670A1 (en) | Endometrial receptivity determination |