TR201802814T4 - Amiloid betaya karşı insanlaştırılmış antikor. - Google Patents

Amiloid betaya karşı insanlaştırılmış antikor. Download PDF

Info

Publication number
TR201802814T4
TR201802814T4 TR2018/02814T TR201802814T TR201802814T4 TR 201802814 T4 TR201802814 T4 TR 201802814T4 TR 2018/02814 T TR2018/02814 T TR 2018/02814T TR 201802814 T TR201802814 T TR 201802814T TR 201802814 T4 TR201802814 T4 TR 201802814T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
antibody
amino acid
seq
fragment
amyloid
Prior art date
Application number
TR2018/02814T
Other languages
English (en)
Inventor
Pfeifer Andrea
Pihlgren Bosch Maria
Muhs Andreas
Watts Ryan
Original Assignee
Ac Immune Sa
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=49474825&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TR201802814(T4) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ac Immune Sa, Genentech Inc filed Critical Ac Immune Sa
Publication of TR201802814T4 publication Critical patent/TR201802814T4/tr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G01N2333/4701—Details
    • G01N2333/4709—Amyloid plaque core protein
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G01N2800/2821—Alzheimer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/56—Staging of a disease; Further complications associated with the disease

Abstract

Mevcut buluş, mesela Alzheimer hastalığı gibi, amiloid proteini ile bağlantılı bir grup hastalık ve anormallikler olan amiloidozun tedavisi için antikorlar ve kompozisyonlar ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME AMILOID BETAYA KARSI INSANLASTIRILMIS ANTIKOR Mevcut bulus, mesela Alzheimer hastallg l gibi, amiloid proteini ile baglantll lbir grup hastalk ve anormallikler olan amiloidozun teshisi ve tedavisi için antikorlar ve kompozisyonlar ile ilgilidir. Amiloidoz, tek bir hastalfk olusumu degildir, ilerleyici hastalüg süreçlerinin farklE bir grubudur, amiloid adü verilen mumsu, nisasta benzeri bir proteinin, hücre dßj doku çökeltileri ile karakterize edilmektedir ki bu, bir veya daha fazla organda veya gövde sisteminde birikmektedir, Amiloid çökeltileri biriktikçe, bunlar, organ& veya gövde sisteminin normal fonksiyonuna engel olmaya baslamaktad 3. En az 15 farklEamiloidoz türü bulunmaktadß. BaslIia çesitleri, bilinen bir öncülü olmayan birincil amiloidoz, bazjbaska durumlarLtakip eden ikincil amiloidoz ve irsi amiloidozdur. Ikincil amiloidoz, kronik enfeksiyon veya iltihapll lhastal k slitaslnda, mesela tüberküloz, ailevi Akdeniz atesi olarak adlandîllbn bir bakteriyel enfeksiyon, kemik enfeksiyonlar? (osteomiyelit), römatoid artrit, ince bag lisak iltihab ügranülomatoz ileitis), Hodgkin hastalEgj ve cüzzam s &as Eda ortaya ç Rmaktad m. Amiloid çökeltileri, amiloid P (besgen) bileseni (AP), normal serum amiloid P (SAP) ile baglantJJE bir glikoprotein ve sülfatlü glikozaminoglikanlar (GAG), baglantEÜ dokunun kompleks karbohidratlarEn ihtiva etmektedir. Amiloid maddesinin yaklasüî %90" Ela tekabül eden amiloid protein fibrilleri, proteinlerin çesitli türlerini içermektedir. Bu proteinler, amiloid proteininin essiz boyama özellikleri ile neticelenen, Kongo kliimlzllsll &çin baglanma bölgeleri ortaya koyan essiz bir protein yap landlrmasl lolan "beta- klvr mlPl yaprak fibriller seklinde katlanabilme kabiliyetine sahiptir. Ihtiyarlama hastalüllarmîi çogu amiloid-benzeri proteinlere dayanmaktadm veya bunlarla baglantJEE ve kßmen, hastal gß olusumuna, bunun yanIslîa hastalîgß ilerlemesine katk Ela bulunan, amiloid veya amiloid-benzeri maddenin hücre dßj çökeltilerinin olusmasj ile karakterize edilmektedir. Bu hastalEülar, sßßlandîßüûmamak sartßlla, Alzheimer Hastalfgj (AD), Lewy cismi demansÇ Downs sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamasÜ(Hollanda tipi), Guam Parkinson-Bunama kompleksi gibi nörolojik hastalüîlarjihtiva etmektedir. Amiloid-benzeri proteinlere dayanan veya bunlarla baglant ]]Eolan diger hastalEklar, ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastallgd Parkinson hastallgl, HlV- baglantlll bunama, ALS (amyotrofik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet; yaslllk kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon gibi baska hastal klard lü. Bu hastallklarlîrl patojenezi farklFblabilmekle birlikte, bunlar-ri karakteristik çökeltileri, çogu zaman müsterek moleküler bilesenler ihtiva etmektedir. Önemli bir dereceye kadar, bu, proinIlamatuar yollari lokal aktivasyonuna, dolayßýla aktive edilmis tamamlayEÜ bilesenlerin eszamanlübirikmesine, akut faz tepkenlerine, immün modülatörlerine ve diger intlamatuar arac Eara atfolunabilmektedir (McGeer v.d., 1994). Alzheimer HastalEgXAD), birincil olarak, beyin içinde proteinlerin anormal çökeltilerinin bir birikmesi olan amiloid ßlaklarßî sebep oldugu düsünülen bir nörolojik hastalültî. Zarar görmüs bireylerin beyni içinde bulunan amiloidin en slk türü, basl da AB fibrillerden olusmaktadlî. Bilimsel bulgu, plaklarda beta-amiloid proteininin üretimindeki ve birikmesindeki bir artßß, AD gelisimine ve ilerlemesine katkma bulunan sinir hücresi ölümüne sebep oldugunu göstermektedir. Stratejik beyin alanlarßdaki sinir hücrelerinin kaybedilmesi de sinir tasS/B [lhrEida azalmaya ve hafîada bozulmaya sebep olmaktad m. Plak olusumundan öncelikle sorumlu olan proteinler, amiloid öncül proteinini (APP) ve iki presenilini (presenilin I ve presenilin II) ihtiva etmektedir. Çogu hücrede temel olarak ifade edilen ve katabolize edilen, amiloid öncül proteinin (APP), enzimler [3 ve y taraflîidan ardßik bölünmesi, 39 ila 43 amino asitli bir AB peptidin sallnmaslna sebep olmaktadîn. APPlerin parçalanmasl, muhtemelen, bunlarln plaklar içinde kümelenme egilimini arttlrmaktadlr. Özellikle Aß(l-42) fragmanl,l C-ucundaki iki çok hidrofobik amino asit kallntls lsebebiyle, yüksek bir küme yapma egilimine sahiptir. Aß(l -42) fragmanlnln, bu sebeple, AD'de nevritik plak olusumunun baslatllmas lile basllca ilgili ve bundan sorumlu olduguna ve bu sebeple yüksek bir patolojik potansiyele sahip olduguna inanJInaktad B. Bu sebeple, AB`de, amiloid ßlaklarln n olusmas n lönlemek için ve mevcut plaklarln dagtlllmas' liçin ajanlara ihtiyaç ADinin semptomlarü yavas yavas açEga çügmaktadü ve ilk semptom, sadece hafif bir unutkanllk olabilmektedir. Bu asamada, bireyler, yakn geçmisteki olaylarL, aktiviteleri, tanElERL kimselerin veya nesnelerin isimlerini unutabilmekte ve basit matematik problemlerini çözemeyebilmektedir. Hastalüg ilerledikçe, semptomlar& daha kolay farkEia varEhnaktadi ve AD"li insanlaan veya bunlaan ailelerinin, tLbbi yardLm aramasma sebep olacak kadar Ciddilesmektedir. AD,nin orta kademeli semptomlar ,l mesela kisisel bak m gibi basit görevlerin nasll yap lldlglnln unutulmaslnl lihtiva etmektedir ve konusma, anlama, okuma ve yazma ile ilgili problemler ortaya çmmaktadlrl, ileri safhada, AD hastalarlî endiseli ve saldlrgan hale gelebilmekte, evden uzaklasabilmektedir ve en sonunda genel bakma ihtiyaç duymaktad ir. Su anda, ADiyi teshis etmenin tek kesin yolu, bireyin ölümünden sonra bir otopside beyin dokusu içindeki plaklarEve yumaklarEbelirlemektir. Bu sebeple, doktorlar, kisi henüz hayatta iken, sadece bir "muhtemel" AD teshisi yapabilmektedir. Mevcut metotlarü kullanarak, hekimler, "muhtemel" ADlyi teshis etmek için çesitli aletler kullanarak %903a kadar dogru teshis edebilmektedir. Hekimler, kisinin genel saglk durumu, geçmis tEßbi problemleri ve kisinin günlük aktivitelerini gerçeklestirirken karsLlhstgl_ zorluklaan geçmisi hakkLnda sorular sormaktadln. Hat` Za, problem çözme, dikkat, sayma ve dil davranls testleri, zihinsel dejenerasyon hakklnda bilgi vermektedir ve kan, idrar veya omurilik slVls Igibi thbi testler ve beyin taramalarlî baska bazFbilgiler tedarik edebilmektedir. ADinin yönetilmesi, ilaç-bazlüve ilaç bazljolmayan tedavilerden olusmaktadm. HastalEgEi temel seyrini degistirmeyi (ilerlemeyi geciktirmeyi veya ters çevirmeyi) amaçlayan tedaviler, simdiye kadar oldukça basarßâ olmustur. Sinir hücrelerinin (sinir tasS/EIJhrEI kimyasal ulaklarJiçindeki eksikligi (kusuru) veya çal @ma bozuklugunu onaran ilaçlarîl, hususi olarak takrin ve rivastigmin gibi kolinesteraz inhibitörierinin (ChEIler), semptomlarjiyilestirdigi ortaya konmustur. ChEIler, sinir taswoLlaann enzimatik parçalanmasLnUengellemekte, böylece beyin içinde sinir sinyallerini taslmak için mevcut kimyasal ulaklarln miktarln l arttlrmaktadlr. Hastalgß erken ve orta safhalarEidaki baz Ekimseler için, ilaçlar takrin (COGNEX®, Morris Plains, NJ), donepezil (ARICEPT®, Tokyo, JP), rivastigmin (EXELON®, East Hanover, NJ) veya galantamin (REMINYL®, New Brunswick, NJ), simlü bir zaman için bazj semptomlar& kötüye gitmesini önlemeye yard ile Dolabilmektedir. Bir baska ilaç, memantin (NAMENDA®, New York, NY), Ülînljve siddetli arasßdaki AD°nin tedavisi için kabul edilmistir. AD'nin psikiyatrik belirtilerine yönelik ilaçlar da mevcuttur. AyrlZia, bainlaçlar, AD°nin, uykusuzluk, gerginlik, dalg ilk, endise ve depresyon gibi davranßsal semptomlarEiDkontrol etmeye yardEncDolmaktadE. Bu semptomlar& tedavi edilmesi, çogu zaman, hastalarm daha rahat olmasnLJsaglamaktadm ve badeLlar için de bakLmlaanLJdaha kolay hale getirmektedir. Maalesef, bu sln Il ajan 11, bir plasebodan tutarll bir sekilde daha iyi oldugunu gösteren kayda deger tedavi gelismelerine raginen, hastallk, ilerleineye devam etmektedir ve zihinsel isleyis üzerindeki ortalama etki, sadece az bir miktarda olmustur. AD ilaç tedavisinde kullan lan ilaçlar n çogu, inesela ChEller, mide-baglrgsak fonksiyon bozuklugu, karaciger toksisitesi ve kilo kayb ngbi yan etkilere de sahiptir. Amiloid-benzeri proteinin birikmesi ve çökelmesine dayanan ve bununla baglantEEbir baska hastal Ji, maküler dejenerasyondur. Maküler dejenerasyon, retinanîi (Stga duyarlZhücrelerin, beyne görsel sinyalleri gönderdigi, gözün arkasüidaki incecik doku) merkezi alanüolan makülanEl bozulmasßa sebep olan yaygLn bir göz hastalLgLdJi Keskin, net, "dosdogru" görüs, maküla tarafLiidan islenmektedir. Makülann hasar görmesi, kör noktalarln olusmasna ve bozulmus görüse sebep olmaktadir. Yasla baglant Il lmaküler dejenerasyon (AMD), Birlesik Devletlerde görme bozukluklar nin büyük bir sebebidir ve 65 yasîl üzerindeki insanlar için, Kafkasyalllar araslîlda yasal körlügün basta gelen sebebidir. 40 yas ve üzeri yaklasül 1.8 milyon Amerikan, ilerlemis AMD,ye sahiptir ve orta AMD,si olan bir baska 7.3 milyon kisi, ciddi görme kaybjriski tas @aktadß Hükümet, 2020 ymida, ilerlemis AMD'li 2.9 milyon kisi olacagßü hesaplamaktad E. AMD kurbanlarü bu kör edici durumun sebepleri ve tedavisi hakkmda ne kadar az sey bilindigini ögrendiklerinde sas Emakta ve hayal kiüîlîgîia ugramaktad E. Maküler dejenerasyonun iki sekli vardLij: kuru maküler dejenerasyon ve leak maküler dejenerasyon. Maküla hücrelerinin yavas yavas ylkllmaya basladlgl lkuru form, maküler dejenerasyon vakalarlnn yüzde 85"inde teshis edilmektedir. Genellikle her iki göz de kuru AMD"den etkilenmektedir, bununla birlikte, bir göz görme gücünü kaybederken diger göz etkilenmeyebilmektedir. Retinanm altüdaki sarjbirikintiler olan drusen, genel olarak kuru AMD'nin erken isaretleridir. Drusen saylEDve büyüklügü arttügça, ilerlemis kuru AMD veya Elak AMD gelismesi riski artmaktad 3. Kuru AMD7nin ilerlemesi ve hastalEgEi @lak formuna dönüsmeden görme kaybEia sebep olmasEmümkündür; bununla birlikte, erken safhadaki kuru AMD,nin, aniden @lak forma dönüsmesi de mümkündür. Vakalarîl sadece yüzde 15°ine tekabül etmesine ragmen Elak form, yüzde 90 körlük ile neticelenmektedir ve ilerlemis AMD olarak degerlendirilmektedir (Elak AMD'nin erken veya orta sathas EbulunmamaktadE. Islak AMD7den önce, her zaman hastalEgîl kuru formu gelmektedir. Kuru form kötüye gittikçe, bazdinsanlar, makülanln arkasnda ortaya çLkan anormal kan damarlarlna sahip olmaya baslamaktadlr. Bu damarlar, çok klrllgandlr ve aklskan ve kan slzd nacakt 11 (bu sebeple "lslak" maküler dejenerasyon), makülan n hlztll [bir sekilde dejenerasyonuna sebep olacaktlî. AMD,nin kuru formu, baslangg olarak çogu zaman hafifçe bulanlk görüse sebep olmaktad IT. Bundan sonra, hususi olarak görme merkezi, bulanÜî hale gelebilmektedir ve bu bölge, hastalk ilerledikçe genislemektedir. Eger sadece bir göz etkilenmis ise, hiçbir semptomun farküna varüamayabilmektedir. Islak AMD,de, düz çizgiler, dalgalEolarak görülebilmektedir ve merkezi görme kaybjhâljair sekilde ortaya ç Ülabilmektedir. Maküler dej enerasyonun teshisi, tipik olarak, açlnß göz muayenesi, görme keskinligi testini kapsamaktadLr ve AMD°nin teshis edilinesine yardm etmek için fundoskobi adLlverilen bir prosedür kullan larak gözün arkasln n incelenmesi ve -eger lslak AMD7den süphe ediliyorsa- flüoresein anjiyografî da gerçeklestirilebilmektedir. Eger kuru AMD, ilerlemis seviyelere ulaslîsa, görme kaybîilî önlemek için mevcut bir tedavi yoktur. Bununla birlikte, antioksidanlarîi ve çinkonun spesifik bir yüksek dozlu formülü, orta safha AMDînin, ileri safhaya ilerlemesini geciktirebilmekte veya önleyebilmektedir. Macugen® (pegaptanib sodyum enjeksiyonu), lazer fotokoagülasyon ve fotodinamik terapi, makülada anormal kan damarDgelisimini ve kanamayEkontrol edebilmektedir ki bu, Elak AMD`li bazDinsanlarda faydalj olabilmektedir; bununla birlikte, zaten kaybedilmis olan görüs, bu tekniklerle düzeltilememektedir. Eger görüs zaten kaybedilmis ise, hayat kalitesini gelistirebilen düsük görüs yard ünlar Lrnevcuttur. Yasla baglantllll maküler dejenerasyonun (AMD) en erken isaretlerinden biri, retinal pigmentli epitelyumun (RPE) bazal laminasl`lve Bruch membran`l(BM_) araslîida drusen olarak bilinen hücre dßEdepozitlerin birikmesidir. Anderson v.d. taraf îidan yaklîi zamanda yapÜÂan çalsmalar, drusenin, amiloid beta ihtiva ettigini teyit etmistir. (Experimental Eye Yürütülmekte olan arastßma, AMDsye katküyapabilecek çevresel, genetik ve beslenmeyle ilgili faktörleri inceleyen çalgmalarla devam edilebilmektedir. Retinal hücre nakilleri, hastalgß ilerleyisini önleyecek veya yavaslatacak ilaçlar, radyasyon terapisi, gen terapileri, retina içine yerlestirilen, görüsü artt Emaya yardim Eblabilecek bir bilgisayar çipi ve maküla altinda yeni kan damarlarlnm olusumunu önleyecek ajanlar gibi yeni tedavi stratejileri de incelenmektedir. Yeni ilaçlar gelistirilirken dikkate al îimangereken önemli bir faktör, hedef hastalar için kullanin kolayl'gldlr. Hastann rahatlgl lbaklmlndan, oral ilaç teslimi -spesifik olarak tabletler, kapsüller ve yumusak jeller- tüketilen bütün dozaj formlarlîi %70,ine tekabül etmektedir. Ilaç gelistiriciler, hastalarEi, enjeksiyona veya diger daha invazif ilaç uygulama formlarîia maruz kalmak yerine oral teslimi tercih ettiklerini kabul etmektedir. Düsük dozaj arallkllyani günde bir kere veya yavas sal EhmlE) formülasyonlar da tercih edilmektedir. Antibiyotiklerin oral dozaj formlarda verilme kolaylgÇtedavi sias &da hasta uyumunda bir artß ile neticelenmektedir. Amiloidoz ile baglant[llükomplikasyonlarü ikincil amiloidoz ve yasla-baglantlJLamiloidoz dahil olmak üzere amiloid plakolusumu ile baglanttllibir grup hasta] lt ve rahats ztllgln, slnlrllandlr (ll | olmamak sartlyla nörolojik hasta] klar mesela Alzheimer Hastallg I(AD), Lewy cismi demansl,| Downs sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamas`l(Hollanda tipi); Guam Parkinson-Bunama kompleksi; bunun yanFslTa amiloid- benzeri proteinlerle baglantüübaska hastalEklar, inesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastalEgD Parkinson hastalEg] HIV-baglantJJEl bunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yaslEDEk kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon dahil diger hastalmlarüönlemek veya ele almak için etkili metotlara ve kompozisyonlara ihtiyaç vardE. Hususi olarak, amiloid veya amiloid- benzeri peptit fiberlerinin kümelesmesi ile baglantJJE plaklar& olusumu gibi hastalEgß fizyolojik belirtilerini etkisiz hale getirme kabiliyetine sahip aj anlara ihtiyaç vardlr. Freund komple veya noksan adjuvan ile karlStliillm s Aßl-Lu as lamas lile ortaya çlkan anti- amiloid antikorlarlîi, insan Alzheimer hastalgFliçin transgenik farelerde amiloid yükünü azalttgürapor edilmistir (Schenk v.d., 1999). Lipozomlar içinde yeniden yapüandmü'ms tetrapalmitoillenmis Aßi-16"nEi NORBA transgenik farelere intraperitoenal as IanmasÇ anti- amiloid antikorlarEiîl kayda deger titrelerini ortaya çÜlarmEti ki bunlari amiloid fiberleri ve plaklarün vitro ve in vivo olarak çözündürdükleri rapor edilmistir. (Nicolau v.d. 2002). etmektedir ve pozisyonlar 13 ve 28 aras Eida ß-amiloide baglanan antikorlarlîi (mesela 266 ve 4GB), ß-amiloidin çözünebilir formlarßÇ bunlarEi bagljkan içinde, kümelesmis ß-amiloide büyük bir afinite ile baglLolmakszn dolasan formlarndan aertutma kabiliyetine sahip Olduklarim öne sürmektedir. WO 03/070760 A2, amino asit sekanslarTAEFRHDSGY ve VHHQKLVFFAEDVG ile tan mlanan ß-A4 peptit üzerinde bir konformasyonel epitopu tanlyan bir antikor molekülünü aç Flamaktad l?, ve oligomerik ß-amiloid türlerine baglanan fakat ß-amiloid monomerlerine baglan& gibi görünmeyen bir anti-ß-amiloid antikorunu (15Cl l) ifsa etmektedir. Olusan amiloid ßlaklarEiîl ve fiberlerinin çözünmesi için muhtemel bir mekanizma, ilk olarak Bard v.d. (2000) taraf ndan teklif edilmistir, bunlar, antikorlarn, müteakip olarak mikrogli makrofajlarl l tarafindan imha edilen plaklarll opsonize ettigini sonucuna varmlîslardî De Mattos v.d. (2001), ß-amiloidin merkezi bölgesine karsEyönlendirilen bir mAb,nin, plazma amiloide baglanma ve buna tamamen el koyma kabiliyetine sahip oldugunu göstermistir. Dolasßida bu mAb"lerin varlgmm, Aßhü, beyin ve plazma arasEidaki denge durumunu kaydîdgßg beyinde birikmek yerine, periferik temizlik ve katabolizmaya yard [Inc 1)]dugunu öne sürmüslerdir. Kemirgen antikorlarüile uzamS insan tedavisi, verilisten yaklasEk 8-12 gün sonra fark edilebilen ve yaklaslk 20-30 günde zirveye ulasan bir antiglobulin cevabi { ile neticelenebilmektedir. Eger böyle bir antiglobulin cevabl ile karsllasllllrsa, tedavinin 10 günden fazla olmayan bir zaman sonra kesilmesi gerekmektedir ve daha sonraki bir tarihte yeniden tedavi, genel olarak men edilmektedir, çünkü bu, bir ikincil antiglobulin cevablnln hlZll Ibir sekilde baslamaslna sebep olacaktlii. Kemirgen antikorlar|,| insan antikorlarl ile önemli bir derecede sekans korumasEpaylasmakla birlikte, kemirgen ve insan antikorlarj arasEida, kemirgen antikorlarEii, insanlarda bagîslüîlk saglayBDolmas :için yeterli olacak pek çok sekans farklltklarjaulunmaktad 1. Bu problem, antikorlarü dogrudan insanlarda üretmek suretiyle veya "insanlastEJInß" ("yeniden sekillendirilmis" antikorlar olarak da bilinir) antikorlar meydana getirilmesi suretiyle bertaraf edilebilmektedir. Insanlastmmns antikorlar, insan veya insan- benzeri yapj sekanslarüiçine serpistirilen kemirgen-kaynaklECDR'ler ihtiva eden bir degisken bölge amino asit sekansna sahiptir. InsanlastiriLhns antikorun özgünlügü, kemirgen-kaynaklid antikorlar taraf ndan saglandigi için, bunlarin kalintilarinin, sadece, antikorun hedef antijeni için afmitesine ve özgünlüge engel olmayan çok küçük modifikasyonlara izin verilerek, esasen degistirilmeden kullanllnas Tgerekmektedir. Yapi-ikaliîitlarlî herhangi bir primattan veya hususi olarak herhangi bir insan degisken bölgesinden elde edilebilmektedir veya bunlar-ri bir kombinasyonu olabilmektedir ve elde edilen tasarlanmis degisken bölge, yeniden sekillendirilmis olarak degerlendirilecektir. Afinitenin, yeniden sekillendirilmis antikor içinde devam ettirilme ihtimalini maksimize etmek için, yapü bölgesinin dogru bir seçimini yapmak önemlidir. Yapüsekanslariß, CDR'leri, antijen ile etkilesim için dogru uzaysal yönelimlerinde tutmaya hizmet ettikleri ve yapE kaliîltEarElEi, bazen antijen baglamaya istirak bile edebildikleri bilinmektedir. Antikorun, antijeni için afinitesini muhafaza etmek amacgila, kemirgen yap laanLn sekanslarina en çok benzeyen insan yapi isekanslar nin seçilmesi avantaj] lolmaktadlr. Bundan sonra, afinite ile ilgili kayîplar önlemek için, insan yapi sekanslndaki bir veya daha fazla amino asidin, kemirgen yapîm içindeki mütekabil kaliîit`iile degistirilmesi hala gerekli olabilmektedir. Bu yer degistirme için, bilgisayar modellemesinden yardEh al Iiabihriektedir. Mevcut bulus, yeni antikorlar ve oldukça spesifik ve oldukça etkili antikorlar, yani, antikora, bir monomeriki dimerik, trimerik vb. gibi bir polimerik formda, bir küme, fiberler, filamanlar formunda veya bir plagîi yogunlastîümß formunda sunulabilen bir dizi ß-amiloid antij eninden Spesifik epitoplar :ispesifik olarak tan Ena ve bunlara baglanma kabiliyetine sahip olan fragmanlar Jdahil olmak üzere insanlastirhnisi antikorlar içeren kompozisyonlar tedarik etmektedir. Mevcut bulusun ögretisi ile saglanan antikorlar, sin Iilandiiidi iolmainak sartiyla nörolojik hastaliklar, inesela Alzheimer Hastaligi (AD), Lewy cismi demansi, Down,s sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamasH(Hollanda tipi) gibi nörolojik hastalklar; Guam Parkinson-Bunama kompleksi dahil olinak üzere ikincil amiloidoz ve yasla baglantfü amiloidoz dahil olmak üzere amiloid plakolusumu ile baglantEIEbir hastalfk ve rahatsßlfk grubu olan amiloidoz; bunun yanüsEa amiloid-benzeri protienlerin sebep oldugu veya bunlarla baglantüü baska hastalklar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastalfgü amiloidozlu irsi beyin kanamasE Hollanda tipi, Parkinson hastal gü HlV-baglant JJEbunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet; yasl[[]1 kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dej enerasyon gibi baska hastal Elarß tedavisi için hususi olarak faydalElE. Saslrt dl lbir sekilde, bulusa ait antikorlar, ß-amiloide, çözünebilir monomerler, oligomerler ve fibriller dâhil olmak üzere ß-amiloidin çesitli formlarlnda yüksek afinite ile baglanmaktadlrl ve bunlar, monomerlerin, oligomerler/fibriller seklinde kümelesmesini inhibe etmektedir ve oligomerlerin/fibrillerin ayrlSmaslnl desteklemektedir. Bulus bir insanlastEJInß antikor veya bunun fragmanßüsaglamaktad E, burada söz konusu antikor veya bunun fragman Easag Elakileri içermektedir: olarak aynjolan bir amino asit sekansEia sahip bir Agm Zincir Degisken Bölgesi (HCVR), burada HCVR SEK KIM NO: lsde gösterildigi üzere bir aglî zincir tamamlaycdbölgesi 1 (CDR1), SEK KIM NO:2'de gösterildigi üzere bir agLij zincir CDR2"yi, SEK KIM NO:3"te gösterildigi üzere bir agln zincir CDR3"ü içermektedir, ve (ii) SEK KIM NO:4,te gösterildigi üzere bir hafif zincir CDR1 "ini içeren bir hafif zincir degisken bölgesini (LCVR), SEK KIM NO:5,te gösterilen bir hafif` zincir CDR2ayi, SEK KIM NO:6,da gösterilen bir RVSNRF S veya KVSSRF S ve hafif zincir CDR3"ü içermektedir, veya (B) (i) SEK KIM NO:1*de gösterilen bir ag& zincir CDR1 "i içeren bir HCVR, SEK KIM NO:2'de gösterilen bir agi zincir CDR2°sini, SEK KIM No:3 ,te gösterilen ag& burada LCVR SEK KIM NO:4,te gösterilen bir hafif zincir CDR1"i içermektedir, SEK KIM NO:5"te gösterilen bir hafif zincir CDRZiyi içermektedir ve SEK KIM NO:6,da gösterilen RVSNRFS veya KVSSRFS ve hafif zincir CDR3,ü içermektedir, burada söz konusu antikor veya bunun fragmanü özellikle bir ß-amiloid proteinine baglanmaktad B. Bazjyap Iandßmalarda yukarüaki 1 (A) 'da tanEhlanan bulusa ait insanlastilînß antikor veya% 100 özdes bir amino asit dizisine sahip olan LCVR'yi içermektedir. BazJyapLlandemalarda yukarida 1(B)'de tanLmlanan bulusun insanlastnLllnLs antikoru veya özdes bir amino asit dizisine sahip olan HCVR'yi içermektedir. Baz lyapllandlnmalarda, bulusun insanlastlr'llm1s` antikoru veya bunun fragmanl 1asagldakileri içermektedir: i) SEK KIM NO:151in amino asit sekans Ba sahip bir HCVR veya SEK KIM sekansg veya ii) SEK KIM NO: 12'nin amino asit sekans ßa sahip LCVR, veya SEQ KIM NO: bir amino asit sekans iveya SEK KIM NO: 1 5,in ainino asit sekans'na sahip HCVR, ve amino asit sekans :veya SEK KIM NO: 12"nin amino asit sekans Ela sahip LCVR. Bazj yapEIandlImalarda bulusun insanlastßüînîsl antikoru veya bunun bir fragmanj asag Bakileri içermektedir: amino asit sekans n içeren bir agm zincir; veya amino asit sekans ijçeren bir hafif zincir; veya NO:16°ni amino asit sekans ilçeren bir ag& zincir; ve SEK KIM NO: 13,ün amino olan bir amino asit sekans Dveya SEK KIM NO: 13lün amino asit sekanslînüçeren bir hafif zincir. Baz yap land nmalarda bulusun insanlast 11 lrnls antikoru veya bunun fragmanl IgG4 izotiptir. Bazîyapllandlîlmalarda, bulusun insanlastlîlllns antikoru veya bunun fragmanl'ß-amiloid monomerlerinin yüksek moleküler fibrillere agregasyonunu ve önceden olusturulmus polimerik fibriller veya filamenlerin bir birbirinden ayrl'sltlîllllnas@rengelleyebilmektedin Bazjyap [[andîmalara bulusun insanlastmmnß antikoru veya bunun bir fragmanl: bir AB monomerine söz konusu antikor veya bunun fragmanßi baglanma afinitesinden en az 10 kat, en az `15 kat, en az 20 kat, veya en az 25 kat daha yüksek olan bir baglanma afinitesi ile bir Aß fiber, fibril veya filamentine baglanmaktad E. Baz _yap Jland nmalarda, bulusun insanlast n Jin Lsl antikoru veya bunun fragman Lasag Ldakilere sahiptir: (3) Agri zincir degisken bölgesinin çerçeve bölgelerinin Kabat pozisyonu 47lsindeki amino asit, Leu; amino asididir ve/veya (b) Agi zincir degisken bölgesinin çerçeve bölgelerinin Kabat pozisyonu 94lündeki amino asit, Ser; amino asididir ve/veya (c) Agi zincir degisken bölgesinin çerçeve bölgelerinin Kabat pozisyonu 87`sindeki amino asit, Tyr, Phe, Leu, Val, Ile veya Ala amino asididir. Bulus ilave olarak bulusun insanlastlnlhns antikoru veya bunun fragmanndkodlayan bir nükleotit sekans ni içeren bir nükleik asit molekülünü saglamaktad 11. Bulus ilave olarak bulusun nükleik asit molekülünü içeren bir ekspresyon vektörünü saglamaktad E. Bulus ilave olarak bulusun ekspresyon vektörünü içeren bir hücreyi saglamaktad E. Bulus ilave olarak bulusun insanlastlîümß antikoru veya bunun fragmaniîiçeren bir bilesimi ve ilave olarak farmasötik olarak kabul edilebilir tasSIEÇ bir seyreltici ve/veya bir eksipiyanü içeren bir bilesimi saglamaktad LÜ. Bulus ayrda, bulusun isanlastlnllmls antikorunu veya bunun bir fragmannl liçeren ve ayr da biyolojik açFdan aktif bir madde, farmasötik aç lîlan kabul edilmis bir tasýöîbir seyreltici ve /veya bir eksipiyan içeren bir kar srmi Saglamaktadlr. Baz :yap Jhnd Emalarda kar Islßi asagüakileri içermektedir: (i) amiloidozisin tedavisinde kullan Ian bir bilesik olan biyolojik olarak aktif madde, veya (ii) en az idari su bilesiklerden biri: bir anti-oksidatif stres bilesigi; bir anti-apoptotik bilesik; bir metal selatörü; pirenzepin veya metabolitler gibi bir DNA tamir inhibitörü; 3-amino-l- propanesülfonik asit (3 APS); ; or secretaz aktivatörü; Aß- sekretaz inhibitörü; bir y-sekretaz inhibitörü; bir tau proteini; bir nörotransmiter; bir ß-yaprak k rild SJ ;l amiloid beta klerans/ tüketme selüler bilesenlerinin bir atraktan ;l piroglutamated amiloid beta 3-42 gibi birN-terminal kesilmis amiloid betanln inhibitörü; bir anti-enflamatuar molekülü; takrin, rivastigmin, donezepil ve/Veya galantamin gibi bir kolinesteraz inhibitörü (ChEl); bir Ml agonisti; amiloid gibi bir diger ilaç veya bir tau-modifiye edici ilaç veya besin Bulus ilave olarak Istemler l-9°dan herhangi birinde tanßilandEgEsekilde bir insanlastEJIng antikor veya bunun fragmanjlstem 13lte tan Ehlandgigibi bir bilesim, bir memeli veya insan gibi bir hayvanda amiloidozisin etkilerini tedavi etmek veya azaltmak için bir yöntemde kullan ma yönelik Istem 14 veya 155te tan mlandtggibi bir karLslLm. Baz lyaptlandtrmalarda amiloidozis ikincil amiloidozistir, yasla iliskili amiloidozisttrt, bir nörolojik bozukluk, Alzheimer hastalg7(AD), Lewy vücut demanslîl Downas sendromu, ainiloidozise sahip kalElsal serebral hemorajE(Hollanda tipi), Guam Parkinson-Bunama kompleksi; ilerleyici supranükleer felç, multipl skleroz; Creutzfeld Jacob hastalEgÇlParkinson hastalgüHIV-baglantmîbunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yasl JJER kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon. Baz :yap Jhnd imalarda amiloidozis Alzheimer hastal [g El E. Baz @lap Jhnd Emalarda bulusa göre hayvan B tedavisi asag Eiakilere yol açmaktad& i) bilissel haf2±a kapasitesinin artSJve/veya; ii) bilissel hafizta kapasitesinin muhafaza edilmesi; ve/veya iii) bilissel haf zta kapasitesinin eksiksiz olarak restore edilmesi. Bulus ilave olarak asagldakileri içeren bir hastada amiloidozisin teshisine ait yöntemi saglamaktad _rlz i) söz konusu antikor veya bunun fragmanßi amiloid proteinine baglanmaslîla izin veren kosullar altßda bulusun insanlastEEImE antikoru veya bunun bir fragmanßzla bir amiloid proteinini içeren bir numunenin, vücut parçasiß veya vücut alanßm temas ettirilmesi; ve ii) proteine baglanmß olan antikor veya bunun fragmanîlîl tespit edilmesi, burada proteine baglanms olan antikor veya bunun fragmanlîilîi varlEgÜya da yoklugu numunenin, vücut parçasnn veya Vücut alanmn içinde amiloid proteininin varlLgmL veya yoklugunu göstermektedir. Bulus ilave olarak asagîlakileri içeren, bir doku numunesi veya vücut slîtlslînumunesi içerisinde amiloidojenik plaka yükünün miktarlîtît belirlenmesine yönelik yöntemi saglamaktad B: i) bulusun insanlastlîümß antikoru veya bunun bir fragmanglla amiloid proteininin varlgîi'çin bir doku numunesinin veya vücut sîtîlînumunesinin test edilmesi; ii) amiloid proteinine baglE olan antikor veya bunun fragmanEiEi miktarßîl belirlenmesi ve iii) doku numunesi veya vücut s v 3! humunesindeki plak yükünün hesaplanmasi l Bulus ayrîia, amiloid-baglantlthastalklan-!ve durumlarTlsaptamak ve teshis etmek için, bir veya daha fazla kap içinde, bulusa uygun insanlastiülmß antikor veya bunun fragmanßijbir saptaina reaktifi ve antikorlar Ekullanmak için talimatlar içeren bir kiti de kapsamaktad m. Bulus ilave olarak [3- amiloid oligomerlerine maruz kalma sonucunda nöronlarß dejenerasyonunu önleyen bir yöntemde kullanJInak üzere bulusun bir karßliiBE veya bulusun bir bilesimini, veya bulusun insanlastEEûnß antikoru veya fragmanßü saglamaktad E. Bulus ilave olarak ß-amiloidinin baslattgL bozulmadan nöronlarn korunmasLliçin bir yöntemle kullanilmak üzere bulusun bir karlsmnl veya bulusun bir bilesimini, veya bulusun insanlastlr lmls antikoru veya fragman ni Saglamaktad Il. Bulus ilave olarak bulusun insanlast'iillmls' antikoru veya bunun fragmanln n hazlrlanmasl l için bir yöntemi saglamaktad lîl, burada yöntem bulusun hücresinin kültürlenmesini, ve bunun antikoru veya fragman II [îi saflastmlnas [Il Ilçermektedir. BULUSUN KISA AÇIKLAMASI Bir yap Ühnmada, bulus, ß-amiloid protein üzerindeki en az bir ayrk baglanma alanElÇ hususi olarak en az iki aerk baglanma alanLnJve daha hususi olarak en az üç ayrk 'baglanma alan Lnl_ tanlyan ve baglanan bir insanlastlrllmvs antikor veya bunun bir fragmanl lile ilgilidir ki söz konusu bir, söz konusu en az iki ve söz konusu en az üç baglanma alanlnln her biri, antikorun baglanmaslîile agTrlkll'olarak alakasrbulunan en az bir veya iki ardl'sk amino asit kalîlthFl içermektedir. Hususi olarak, burada aç Eklanan insanlastEJInS antikor veya bunun bir fragmanü ß-amiloid proteini üzerinde, en az iki, hususi olarak en az üç ayrER baglanma alanßa baglanmaktadE ki burada üç ayrüg baglanma alanElEi en az ikisi, antikorun baglanmasjile agmlüîlüolarak alakalZblan en az iki ardßk amino asit kal itß :içermektedir ve üç ayrEk baglanma alanEiß en az biri, en az bir amino asit kalmtlsldçennektedir. Antikorun baglanmasl ile aglrl kil .olarak alaka] lolan en az iki ard Slk amino asit kalntls | içeren en az iki ayrfliL baglanma alanîl antijen üzerinde birbirlerine yakm mesafede konumlandîmnaca, antikor baglanmasEile alakalEolmayan veya söz konusu iki ardßü& amino asit kalEitEDile karsüastîmdgmda çok az alakas :Jolan en az bir amino asit kalitßü tarafßdan ayrlmakta veya yanlanmaktadi, böylece bir konformasyonel kesintili epitop olusturulmaktad m. Antikorun baglanmasüile agElÜglüolarak alakalEolan sEasSl'la en az iki ardSIEt amino asit kalEitEDve en az bir amino asit kalitßüiçeren en az üç ayrüî baglanma alanü epitop üzerinde birbirleri ile yakEl mesafede konumlandEEmaca, antikor baglanmasjile alakalj olmayan veya amino asit kal hitLlarLlle kars lastlijldlgmda çok az alakasLolan en az bir amino asit kallntlsl l taraf ndan ayrllmakta veya yanlanmaktad ri, böylece bir konformasyonel kesintili epitop olusturulmaktadln. Hususi olarak, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanl !veya bir insanlastlrllm si antikor veya bunun bir fragmani-ifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde en az bir ayri& baglanma alanEiDhususi olarak en az iki ayrER baglanma alanîiü daha hususi olarak en az üç ayrüg baglanma alanEiDtan Enakta ve baglanmaktad E, söz konusu en az bir veya söz konusu en az iki ayrEk baglanma alanüi her biri, antikorun baglanmas Eda agilüîljolarak alakali olan en az iki ardîslül amino asit kalßtßjiçermektedir, bir birinci baglanma alanßjtemsil eden en az iki ardgü& amino asit kalîltßü asagmaki çekirdek sekans (SEK KIM NO: 9) içinde gömülü olan -Phe- Phe-dir: Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - Xaas - Xaaö, burada Xaag; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve lleiden olusan gruptan seçilen bir amino asit kallîitîlülî; Xaa4; Ala, Val, Leu, Ser ve lle,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Iltlgîli; Xaas; Glu ve Asp,dan olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Iltßim; Xaaaj Glu ve Aspaden olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ßtßîlß ve söz konusu amino asit kallîntlarEXaag, Xaa4, Xaas ve Xaas, antikor baglanmasEile alakalüdegildir veya -Phe- Phe- baglanma alanEile kars [BastEEklEgîlda çok az alakalEIE. Aerca bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanLlveya bir insanlastliillnls antikor veya bunun bir fragmanl ifsa edilmektedir, burada X333; Val veya Leu`dur, fakat hususi olarak VaPdTI; Xaa4; Ala veya Val'd m, fakat hususi olarak Alaidî; X335; Glu veya Asp7dir, fakat hususi olarak Glu"dur; Xaag', Glu veya Asp7dir, fakat hususi olarak Asp,dir. Hususi olarak, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastEEmS antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde, en az bir ayrEk baglanma alanEiDhususi olarak en az iki ayr& baglanma alaniü daha hususi olarak en az üç ayrEk baglanma alanßjtan Biakta ve baglanmaktadß, söz konusu ayrJî baglanma alanlar: antikorun baglanmasdile agiillkldolarak alakalLlolan sLnasgtla en az bir ve en az iki ardLsLk amino asit kalintlsl liçermektedir, bir birinci baglanma alanlnl ltemsil eden en az iki ard Slk amino asit kaltntldl rPhe-Phe"dir ve en az bir amino asit kallnt 9|,| asagldaki çekirdek sekans içinde gömülü -His,dir: -Xaai His - Xaa3 - Xaa4 - Xaas - Xaaö - Phe - Phe - Xaa7 - Xaag - Xaag burada: XaaE His, Asn, Gln, Lys ve Arg,dan olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Iitßîlm; Xaa3; Asn ve Gln,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal &nazim; Xaa4; His, Asn, Gln, Lys ve Arg,dan olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEEIE; Xaa5; Ala, Val, Leu, Ser ve lle°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal itß Ili; Xaaö; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve lle°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Eitêßlî; Xaa7; Ala, Val, Leu ve lle7den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal LntSLdLr; X333; Glu ve Asp°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ntlsdln; Xaag; Glu ve Asp"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kallntlsJ dln ve söz konusu amino asit kal îitllarî XaalI Xaa3; Xaaö, Xaa7, Xaag, Xaag, antikor baglanmasi-me alakaleegildir veya sEas ßlla -His- ve -Phe-Phe- baglanma alanEkars [[astiüldîgßda daha az veya çok daha az alakalmî Ayrßa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastiülmß antikor veya bunun bir fragman [ifsa edilmektedir, burada Xaa3; Gln veya Asn"dir, fakat hususi olarak Gln"dir; Xaa4; Lysidir; Xaas; Leu,dur; Xaaö; Val veya Leu`dur, fakat hususi olarak VaPdTI; Xaay; Ala veya Vardi, fakat hususi olarak Alaidi; Xaag; Glu veya Aspadir, fakat hususi olarak Glu"dur ve Xaag; Asp veya Glusdur, fakat hususi olarak Aspadir. Ayrlga, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastiülmß antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde, en az bir ayrÜEt baglanma alanEiDhususi olarak en az iki ayri baglanma alaniü daha hususi olarak en az üç ayrEk baglanma alanEiDtan Enakta ve baglanmaktadî, söz konusu en az bir veya söz konusu en az iki aerk baglanma alannn her biri, antikorun baglanmas Llile aglrllklLolarak alakali olan en az iki ardlsllk amino asit kal ntisi içermektedir ve ikinci bir baglanma alanln ltemsil eden en az iki ard SIk amino asit kal nt|s|,| asag daki çekirdek sekans (SEK KIM NO: 10) içinde gömülü olan -Lys- Leu9dur: XaaF- Xaag - Lys- Leu - X333 burada XaaE His, Asn, Gln, Lys ve Arg,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Iitßîlm; Xaaz; Asn ve Gln,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal &nazim; Xaag; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve llesden olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EltEEIE ve söz konusu amino asit kal Eit JhrEXaag ve Xaa3, antikor baglanmas :ile alakalj degildir veya -Lys-Leu- baglanma alanEile karsEastEEdgElda daha küçük veya çok daha küçük derecede alakal BE. Ayrica, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanl lveya bir insanlast nlllmls antikor veya bunun bir fragmanl ifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde, en az bir ayrlk baglanma alanlîilîlhususi olarak en az iki ayrlk baglanma alanîilîldaha hususi olarak en az üç ayrEk baglanma alanEijtan Biakta ve baglanmaktadß, söz konusu ayrk baglanma alanlar: antikorun baglanmas :ile agilügljolarak alakalüolan smasßl'la en az bir ve en az iki ardßüî amino asit kalßtßjiçermektedir, antikorun bagalanmas Eile alakalüolmayan veya antikorun baglanmasüile agmlügljolarak alakaljolan amino asit kaliitEDarEile karsEastmEdÇg'ßda çok daha küçük derecede alakalîblan en az bir amino asit kal Eltîslîtaraf îldan ayrEmgsl olan en az bir ve en az iki ardgEk amino asit, sEas Sila asag Baki çekirdek sekans içinde gömülü olan - His- ve -Lys-Leu°dur: His - X332 -Lys - Leu - Xaa3 -Xaa4 - Xaas - Xaaö - Xaa7 - Xaaö- burada X382; Asn ve Gln,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal lîitßî'lm; X333; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve neden olusan gruptan seçilen bir amino asit kalEitEElE; Xaa4; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve lle°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalEitEEllI; X335; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve lle°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEEJII; Xaaö; Ala, Vala Leu, Ser ve Ile"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal &EBE; Xaa7; Glu ve Asp7den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalnttsdlij; Xaag; Glu ve Asp°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ntls dlrl ve söz konusu amino asit kallntllar. |(Xaa2, Xaag, Xaaö, Xaa7, X333), antikor baglanmasl lile alakal`degildir veya slî'lasl'ýla -His- ve -Lys-Leu-baglanma alan Hile karsFlastlTllld'glîlda, daha küçük veya çok daha küçük derecede alakalld'ii. Ayrßa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastimmß antikor veya bunun bir fragman [ifsa edilmektedir, burada X332; Gln veya Asnadir, fakat hususi olarak Gln"dir; X333; Val veya Leu,dur, fakat hususi olarak Val'dî; Xaa4; Phe7dir; Xaa5; Phe"dir; Xaaö; Ala veya Va1"d 11, fakat hususi olaral Ala"d111; Xaa7; Glu veya Aspsdir, hususi olarak Glu9dur ve Xaag; Asp veya Glu"dur, hususi olarak Asp°dir. Ayrßa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastimmß antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde en az iki ayrl baglanma alanßE tanüiakta ve baglanmaktadur, söz konusu en az iki ayri baglanma alanEJîl her biri, antikorun baglanmas :ile agmlü'çliblarak alakalEblan en az iki ardSÜ& amino asit kal EitEJ içermektedir, en az iki ardßEk amino asit, antikor baglanmas: ile alakalE olmayan veya söz konusu iki ardLsLk amino asit kal mtsmdan çok daha küçük bir derecede alakal blan en az bir amino asit kallrltlsll taraf ndan ayr lrnaktadlil, söz konusu ardls k amino asit kal ntllar ,l slrasyla, asagldaki çekirdek sekans içinde gömülü olan bir birinci ve ikinci baglanma alanîlFtemsil eden -Phe- Phe ve -Lys-Leu'dur: Xaai - Xaaz - Lys- Leu - Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - Xaa5 - Xaaö, burada: Xaai; His, Asn, Gln, Lys ve Arg"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEEIE; X332; Asn ve Gln,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal mtßîlm; X333; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve lle°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalEitEmE; Xaa4; Ala, Val, Leu, Ser ve lle"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal itß Ili; X335; Glu ve Asp7den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalîltßüß; Xaaö; Glu ve Asp7den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal LntslLdLr ve söz konusu amino asit kallnt lari (X332, Xaa3, Xaa4, Xaas ve Xaaö), antikor baglanmasl ile alakal ldegildir veya 5 riaslyla -Lys-Leu- ve -Phe-Phe- baglanma alan ile kars lastlr ldlglnda daha küçük veya çok daha küçük bir derecede alakal Fdlî. Ayriîa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanl`|veya bir insanlastîllllmls antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde, en az bir ayrÜî baglanma alanEiDhususi olarak en az iki ayrüg baglanma alaniü daha hususi olarak en az üç ayr& baglanma alanEiEtan Ehakta ve baglanmaktadi, söz konusu ayrE baglanama alanlari antikorun baglanmasjile agîlü'glîolarak alakalDolan sßasßlla en az bir ve en az iki ardßüî amino asit kal Iltß jçermektedir, en az bir ve en az iki ardßk amino asit, antikor baglanmasü ile alakal] olmayan veya antikorun baglanmasE ile aglîllklü olarak alakalEl amino asit kaantlarLile kars UlastLriJldLgnda önemli derecede daha az alakalJolan en az bir amino asit kallntsH ltaraflndan ayrlmaktadn ve söz konusu amino asit kallnt larl, asagldaki çekirdek sekans içinde gömülü olan, slnaslyla -His- ve -Phe- Phe ve -Lys-Leuidur: His - X332 - Lys - Leu - Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - X335 - Xaaö, burada: Xaaz; Asn ve Gln,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal &nazim; Xaag; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve Beden olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEIIlE; Xaa4; Ala, Val, Leu, Ser ve lle"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Et& 33; Xaa5; Glu ve ASp"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEElE; Xaa6,' Glu ve Asp'den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ntLsLde ve söz konusu amino asit kallntllarl |(Xaa2, Xaa3, Xaa4, X335 ve Xaaö), antikor baglanmas lile alakal l degildir veya slras yla -His-, -Lys- Leu- ve -Phe- Phe- baglanma alani ile kars llastlîifld glîida daha küçük veya çok daha küçük bir derecede baglant '1le li. Ayrßa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastiülmß antikor veya bunun bir fragman [ifsa edilmektedir, burada X332; Gln veya Asnadir, fakat hususi olarak Gln°dir; Xaa3; Val veya Leu"dur, fakat hususi olarak Vardi; Xaa4; Ala veya Vardi, fakat hususi olarak Ala°d E; X335; Glu veya Asp"dir, fakat hususi olarak Glu'dur ve Xaaö; Asp veya Glu"dur, fakat hususi olarak Asp7dir. Ayrica, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanl lveya bir insanlast nlllmls antikor veya bunun bir fragmanl'ifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde en az iki ayrlTq* baglanma alanlnl tanimakta ve baglanmaktadlri, söz konusu en az iki ayr lt baglanma alaninin her biri, antikorun baglanmas `lile agîlllklîolarak alakalFolan en az iki ardlêlk amino asit kalEitEDiçermektedir, en az iki ardßEk amino asit, antikor baglanmas Jile alakaljolmayan veya söz konusu ardßEk amino asit kal Eit Jhr Eidan çok daha küçük bir dereceden alakalîblan en az bir amino asit kalßtîütarafâdan ayrJInaktadm, söz konusu ardßl amino asit kalEitjhrE asagBaki çekirdek sekans içinde gömülü olan bir birinci ve ikinci baglanma alanEJZtemsil eden, smas Sila -Phe- Phe- ve -Lys- Leu-"dun Xaal - Xaaz - Lys - Leu - Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - X335 - Xaaö, burada Xaai; His, Asn, Gln, Lys ve Arg"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kallnt sldlr; X332; Asn ve Gln"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal lîltlî Illîl; X333; Val, Ala, Leu, Met, Phe, norlösin ve lleiden olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEElE; Xaa4; Ala, Val, Leu ve Ile'den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalßtßüi; Xaas; Glu ve Asp,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalitßîim; Xaaö; Glu ve Asp°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Eltßîlß ve söz konusu amino asit kalEitJhrE(Xaaz, X383, Xaa4, X335, Xaag), antikor baglanmasüile alakaljdegildir veya sLiiaslyla -Lys-Leu- ve -Phe- Phe- baglanma alanLile karsLlastLnLldtgmda daha küçük veya oldukça daha küçük bir derecede alakalldlii. Ayriîa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanFlveya bir insanlastîilllmls antikor veya bunun bir fragman Üfsa edilmektedir, burada Xaai, His veya Arg"dir, fakat hususi olarak Hisadir; X332; Gln veya Asn°dir, fakat hususi olarak Gln"dir; X333; Val veya Leu,dur, fakat hususi olarak Val'dB; Xaa4; Ala veya Val"di, fakat hususi olarak Ala"d E; Xaa5; Glu veya Asp"dir, fakat hususi olarak Glu"dur ve Xaaö; Asp veya Glu'dur, fakat hususi olarak Asp`dir. Ayrlca, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmani lveya bir insanlast lilllmlsl antikor veya bunun bir fragmanl ifsa edilmektedir ki bu, B-amiloid proteini üzerinde en az iki ayrlk baglanma alanlîn tan înakta ve baglanmaktadî, söz konusu en az iki ayri& baglanma alanlîilîi her biri, antikorun baglanmas lile ag Iillkl' lolarak alakall olan en az iki ardlSlk amino asit kallîitîlîiçermektedir, bunlar, sîlasßrla - Phe - Phe - Ala - Glu, hususi olarak - Phe - Phe - Ala - , fakat özellikle - Phe - Phe - ve -Lys - Leu- dur ve söz konusu en az iki ayrER baglanma alanÇ siasglla, SEK KIM NO: Tde gösterilen - Val - Phe - Phe - Ala - Glu - Asp - amino asit sekansßEve SEK KIM NO: Side gösterilen His - Gln - Lys - Leu - Val - amino asit sekans 3 Ebrtaya koymaktad i. AyrlEa, bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanüveya bir insanlastiülmß antikor veya bunun bir fragmanLifsa edilmektedir ki bu, ß-amiloid proteini üzerinde, en az bir aer baglanma alanlnl,|hususi olarak en az iki ayrlk baglanma alanvn|,|daha hususi olarak en az üç ayrlk baglanma alanlnl ltanlmakta ve baglanmaktadlr', söz konusu en az bir veya söz konusu en az iki ayrlk baglanma alan] antikorun baglanmasîlile aglîlkll'olarak baglantllFlolan smas Bila en az bir ve en az iki ardßîk amino asit kal mtßüçermektedir, bu ardßü& amino asit kalEitJhrÇ siasß/la - Phe - Phe - ve - Lys - Leu - ve - His - dir, söz konusu ayrEk baglanma alanlarjsmas Sila, - Val - Phe - Phe -Ala - Glu- amino asit sekans Elve -His - Gln - Lys - Leu - Val - amino asit sekans Elçinde gömülüdür. Bir baska cephede, kimerik antikor veya bunun bir fragmanEveya bir insanlastßjhiß antikor veya bunun bir fragman; ß-amiloid proteini üzerinde en az iki aerk baglanma alanLnL tanlyan ve baglanan bir antijen tan ma ve baglanma alan liçermektedir, söz konusu en az iki ayrlk baglanma alaninin her biri, slraslýla SEK KIM NOlar: 7 ve 83de verilen amino asit sekans `içinde en iki ardFsk amino asit kal îitlsl'içermektedir, söz konusu ardîl'k amino asit kal Eit Jhrl: hususi olarak -Phe-Phe- ve -Lys-Leu-, ß-amiloid proteininin baglanmas Eile hususi olarak alakal :im Ayrßa, ß-amiloid proteini üzerinde 4 ayrüg baglanma alania baglanan bir antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir, söz konusu 4 ayrk baglanma alan: her biri bir amino asit kalßtßjiçeren 2 baglanma alanüve her biri iki ardgtk amino asit kalEitEüiçeren 2 baglanma alanEihtiva etmektedir, bu kallîltülar, antikorun baglanmasüile agßlklüolarak alakalîlm, söz konusu 4 ayrEk baglanma alan: ß-amiloid proteini üzerinde birbirlerine yakß mesafede konumlandliillmaktadlr ve söz konusu 4 baglanma alanL, antikor baglanmasLile alakal !olmayan veya baglanma ile alaka] !olan fakat 4 ayrlk baglanma alanlnln söz konusu en az bir amino asit kallnt Sl ve söz konusu iki ard Slk amino asit kal ntlsü ile kars llastlîlfldglîida kayda deger bir sekilde daha küçük derecede alaka] Fblan en az bir amino asit kallnt Sl l taraflndan ayrilinaktadln, böylece bir konformasyonel kesintili epitop olusturulmaktad El. Hususi olarak, antikorun baglanmasüile agmlüglüolarak alakaljolan iki ardßEk amino asit kalEitEßdan birincisi, -Lys-Leu°dur ve en az iki ardSEk amino asit kalitßüdan Ikincisi, - Phe-Phe°dir, tekli amino asit kal Eit Jhriiß birincisi, -His-'dir ve tekli amino asit kal ßtüarßii Ikincisi, -Asp-'dir, bunlar, asag Elaki çekirdek sekans içinde gömülüdür: -Xaal - His - Xaaz - Lys - Leu - Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - X335 - Asp - Xaa(i burada Xaai; His, Asn, Gln, Lys ve Arg"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ntISIdln, fakat hususi olarak His°dir; Xaaz; Asn ve Gln,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Iitßüli, fakat hususi olarak Gln,dir; Xaag; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve Ile,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitEIIlE, hususi olarak Val"di; Xaa4; Ala, Val, Leu, Ser ve Beden olusan gruptan seçilmektedir, hususi olarak Ala°dm; Xaa5`, Glu ve Asp7den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalEitEßE, hususi olarak Xaaö; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve Ile'den olusan gruptan seçilmektedir, hususi olarak Vardln ve söz konusu amino asit kal ntllar |(Xaa-|, X832, Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaaö), antikor baglanmasFHle alakali-degildir veya baglanma ile alakalîlii, fakat -His-, -Asp-, Lys- Leu ve -Phe-Phe baglanma alanEile karsIastEJHEglîida çok daha küçük bir derecede Ayrßa, ß-amiloid proteini üzerinde 4 ayrüg baglanma alania baglanan bir antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir, söz konusu 4 ayrk baglanma alanl: her biri bir amino asit kalEJtIslDiçeren iki baglanma alanüve her biri iki ardßk amino asit kalßtßjiçeren iki baglanma alanjihtiva etmektedir, antikorun baglanmas Jile agElERlüolarak alakalEolan iki ardßü& amino asit kalitßEldan birincisi, -Lys-Leu"dur ve en az iki ardgül amino asit kal Lntsmdan Ikincisi, -Phe-Phe'dir, tekli amino asit kal ntLlarnLn birincisi, -His-"dir ve tekli amino asit kallnt larlnln Ikincisi, -Asp-"dir, bunlar, asagldaki çekirdek sekans içinde gömülüdür: -Xaa-i - His - Xaag - Lys - Leu - Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - Xaas - Asp - Xaaö burada Xaai, His, Asn, Gln, Lys ve Arg"den olusan gruptan seçilen bir ainino asit kal Iitßüi, fakat hususi olarak Hisidir; Xaaz; Asn ve Gln"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalitßüi, fakat hususi olarak Gln°dir; X333; Ala, Val, Leu, norlösin, Met, Phe ve Ile"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Eitêßlî, hususi olarak Val"di; Xaa4; Ala, Val, Leu, Ser ve Ileiden olusan gruptan seçilen bir amino asit kal LntSLst, hususi olarak Ala°dlrg Xaas; Glu ve Aspaden olusan gruptan seçilen bir amino asit kalintsldlr, hususi olarak Xaaö Ala, Val, Leu, nolösin, Met, Phe ve Ile'den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalEitEElE, hususi olarak Val'di ve söz konusu amino asit kalitüarü(Xaaü Xaaz, Xaa3, Xaa4, Xaas, Xaag), antikor baglanmasüle alakalEdegildir veya baglanma ile alakalßli, fakat -His-, -Asp-, -Lys-Leu- ve Phe-Phe- baglanma alanEile kars Iastmldtgida çok daha küçük bir derecede alakal Zi 3. Spesifik bir cephede, yukarda belirtilen tanLma ve baglanma alanlar; ß-amiloid proteininin, amino asit kal ntls |12 ila 24 aras ndaki, hususi olarak kallntllar 14 ila 23 arasindaki, daha hususi olarak amino asit kal ntllar. I14 ve 20 arasndaki bir bölgesi içinde lokalize olmus bir konformasyonel kesintili epitop olusturmaktadlî, her biri en az 2 amino asit kal îitTsFiçeren en az iki ayrEIg tanEna ve baglanma alan: sEaslSlla pozisyon 16 ve l7,de ve pozisyon 19 ve "de konumlandiülnaktadî ve en az 1 amino asit kal Iitßüçeren en az bir ayrJI tanlîna ve baglanma alanü pozisyon l4'te konumlandilûnaktadE, bu kalEitEDar, ß-amiloidproteininin baglanmasüile agilüglüolarak alakalmm ve söz konusu ayr& tanEIia ve baglanma alanlarÇ amino asit kal EntÜJarÜtarafEidan, hususi olarak kalßtJlar 21 ve 22 tarafEJdan en az bir yan üzerinde yanlanmaktadß ve pozisyon 15 ve 18"de konumlandîüan bir amino asit kalîltßj taraflîldan ayrEmaktadE, bu amino asit kal itüar] antijenin baglanmas Dile dogrudan alakalj degildir veya en az Eldan oldukça küçük bir derecede alakalüî. Yine bir baska cephede, söz konusu en az üç ayrik tan ma ve baglanma alanl, her iki yan üzerinde, amino asit kallnt larl taraflndan, hususi olarak kallnt lar 12 ve 13 ve kallntllar 21 ve 22 taraflîidan yanlanmaktadlî ve pozisyon 15 ve 18ide konumlandlîllan bir amino asit kallntdl taraflndan ayrllmaktadlrl, bu amino asit kal ntllar|,|antijenin baglanmas ile dogrudan alakal _degildir veya en az îidan oldukça küçük bir derecede alaka] Fri-ri. Spesifik bir cephede, ß-amiloid proteininin baglanmasEile agElRlEolarak alakalEolan söz konusu ardEEk amino asit kalmtllarÇ hususi olarak pozisyon 16 ve 17'de -Lys- Leu- ve pozisyon 19 ve 20,de -Phe-Phe-, asag Elaki çekirdek bölge içinde gömülüdür: Ural_ His- 45- GIF_ Lys- Leu- .'-a Fhe- Fhe- »ka- iSiJ- Asp Bir baska spesifik cephede, ß-amiloid baglanmasl ile agliillkll olarak alakali olan söz konusu ainino asit kalîitllarîl hususi olarak da pozisyon 16 ve 179de -Lys-Leu- ve pozisyon 19 ve 209de -Phe-Phe- ve pozisyon 14,te -His-, asagüaki çekirdek bölge içinde gömülüdür: Val- His- His- Gln- Lys- Leu- Val- Phe- Phe- Ala- ama Asp- 17:11_ Gly~ Bir baska cephede, slnaslyla hafif zincir ve aglii zincir degisken bölge içinde, bir veya daha fazla insan- veya primat-kökenli yapl bölgesi ve istege bagll !olarak bir insan veya primat kaynak antikorundan türetilmis bir sabit bölge içine gömülmüs olan insan-olmayan orijinli en az bir CDR, hususi olarak insan-olmayan orijinli iki CDR, daha hususi olarak insan-olmayan orijinli üç CDR içeren bir insanlastilmg antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki bu insanlastiîmß antikor veya bunun fragmani asagElaki amino asit sekansßüßEK KIM NO: 11) içeren bir epitopta, ß-amiloidproteinini, hususi olarak bir ß-amiloid monomerik peptidi, daha hususi olarak bir ß-amiloid ßolimerik peptidi, hatta daha çok tercihen bir ß-amiloid ßlagEl bir parçasjolarak veya tek bas Ea ß-amiloid fiberleri, fibrilleri veya filamanlarl Spesifik olarak tanlma ve baglanma kabiliyetine sahiptir: Xaal - Xaaz - Lys - Leu - X333 - Phe - Phe - Xaa4 - Xaa5 - Xaas, burada Xaal, His, Asn, Gln"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal LnISLdlr, fakat hususi olarak Xaaz; Asn ve Gln'den olusan gruptan seçilen bir amino asit kallntlslldlii, fakat hususi olarak Glnsdir; Xaag; Val, Leu ve Ileaden olusan gruptan seçilen bir amino asit kallntlslldlrl, fakat hususi olarak Vardi; Xaa4; Ala ve Va17dan olusan gruptan seçilen bir amino asit kalßtßüm fakat hususi olarak Xaas; Glu ve Asp°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalitßüi, fakat hususi olarak Xaaö; Glu ve Asp"den olusan gruptan seçilen bir amino asit kallîltßßlß, fakat hususi olarak Asp, dir. Yine bir baska cephede, slras yla hafif zincir ve aglil zincir degisken bölge içinde, bir veya daha fazla insan- veya primat-kökenli yap lbölgesi ve istege bagl lolarak bir insan veya primat kaynak antikorundan türetilmis bir sabit bölge içine gömülmüs olan insan-olmayan orijinli en az bir CDR, hususi olarak insan-olmayan orijinli iki CDR, daha hususi olarak insan-olmayan orijinli üç CDR içeren bir insanlastiülnß antikor veya bunun bir fragmanE ifsa edilmektedir ki bu insanlastilmß antikor veya bunun fragman: asagüaki amino asit sekansiüiçeren bir epitopta, ß-amiloid proteinini, hususi olarak bir ß-amiloid monomerik peptidi, daha hususi olarak bir ß-amiloid ßolimerik peptidi, hatta daha çok tercihen bir [3- amiloid ßlagi bir parçasE olarak veya tek basBa ß-amiloid fiberleri, fibrilleri veya filamanlarl spesifik olarak tanima ve baglanma kabiliyetine sahiptir: His - X332 - Lys - Leu - X333 - Phe - Phe - Xaa4 - Xaas - Xaaö, burada X382, Asn ve Gln'den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalmtßmm fakat hususi olarak Gln,dir ve Xaag; Val, Leu ve Ile'den olusan gruptan seçilen bir amino asit kalßtßîlî, fakat hususi olarak Vakdlî; Xaa4; Ala ve Val°dan olusan gruptan seçilen bir amino asit kalßtßîlß, fakat hususi olarak Xaa5; Glu ve Asp,den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ntLsLdil, fakat hususi olarak Xaaö; Glu ve Asp7den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal itßßl fakat hususi olarak Glu7dur ve söz konusu amino asit kallntUJarL (Xaaz, X333, Xaa4, Xaa5, Xaaö), antikor baglanmasl lile alakali degildir veya -His- ve -Lys-Leu ve Phe-Phe- baglanma alanl lile karsilastlrtlld glnda daha küçük bir derecede alaka] ldlr. Spesifik bir cephede, insan-olmayan orijinli CDR, söz konusu ayrlk baglanma alanlnl `ihtiva etmeyen bir antijen fragman lila kars _yükseltilen bir donör antikordan, fakat hususi olarak bir murin donör antikordan elde edilmektedir. Epitopik bölgedeki bu kaymaya, mesela polietilen glikol (PEG) gibi bir hidrofilik kßlîn ile modifiye edilmis olan ß-amiloid peptidin, hususi olarak da ß-amiloid peptit Aßi_i(,,nm amino asit sekans ia tekabül eden bir antijenik peptit içeren bir supramoleküler antijenik yapi& kullanEhü en azßdan kßmen sebep olmus olabilmektedir, söz konusu hidrolilik kîslßi, mesela lizin, glutamik asit ve sistein veya hidrofilik kßm] asagüa immünizasyon prosesinde tarif edildigi gibi peptit fragmanßa baglamak için bir baglama cihaz Ugibi hizmet edebilen baska herhangi bir uygun amino asit veya amino asit analogu gibi en az bir, hususi olarak bir veya iki amino asit vas taslyla antijenik peptidin uçlarlnln her birine esdegerli olarak baglanmaktadlr, bir PEG, hidrofilik kßlîn olarak kullanlldglîzaman, serbest PEG uçlarlî mesela, antijenik yapl'yîl burada tarif` edildigi gibi, bir lipozomun çift-katmanjiçine gömmek için, fosfatidiletanolamine veya sabitleme elemanÜ olarak islemek için uygun baska bilesige esdegerlikli olarak baglanmaktad ß. Hususi olarak, insan-olmayan orijinli CDR, ACI-Ol-Ab7C2*nin (basvuru boyunca "mC2" olarak da adlandmlîmaktadß) özelliklerini ortaya koyan bir murin donör antikordan elde edilmektedir (01 December 2005 "Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) in BRaunschweig, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Branuschweig, under the provisions of Budapest Treaty accession no DSM ACC2750). Bulusun bir yapjhnmasEida insan-olmayan orijinli CDR, ACI-Ol-Ab7C23nin (basvuru boyunca "mC2" olarak da adlandîülnaktadi) özelliklerini ortaya koyan bir murin donör antikordan elde edilmektedir (01 December 2005 "Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) in BRaunschweig, Mascheroder Weg `l B, 38124 Branuschweig, under the provisions of Budapest Treaty accession no DSM bir kaymaya katk Ela bulunmus olabilmektedir. Ayrlca, bir insanlast rillmls antikor veya bunun bir fragmani lifsa edilmektedir ki insan- veya primat-kökenli yap [bölgeleri içine entegre edilmis, CDRTyi temsil eden SEK KIM NO: 2 ve Ag? Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR3lünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRl "ini temsil eden SEK KIM NO: 4'ten olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekanslîrla sahip en az bir peptit içermektedir. Ayrlîia, bir insanlastEJInE antikor veya bunun bir fragmanjifsa edilmektedir, söz konusu insanlastEÜInß antikor, insan- veya primat-kökenli ag& zincir yapÜbölgeleri içine entegre edilmis, CDR2*yi temsil eden SEK KIM NO: 2 ve Ag& Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR3`ünü temsil eden SEK KIM NO: 3'ten olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekanslîia sahip en az bir peptit içermektedir. Ayrlîia, bir insanlastlîflhiß antikor veya bunun bir fragman Lifsa edilmektedir, söz konusu insanlastijLllnLs antikor, insan- veya primat- kaynakl lhafif zincir yapl bölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRl ,ini temsil eden bir amino asit sekanslna (SEK KIM NO: 4) sahip bir peptit içermektedir. Ayrßa, insan- veya priinat-kökenli yapEl bölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRYini temsil eden bir amino asit sekans Ba (SEK KIM NO: 4) sahip en az bir peptit içeren bir Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) ifsa edilmektedir. Ayrßa, insan- veya primat-kökenli yap Üaölgeleri içine entegre edilmis, CDR27yi temsil eden SEK KIM NO: 2 ve ve Agir Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO: 33ten olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekans na sahip en az bir peptit içeren bir Agit Zincir Degisken Bölge (HCVR) ifsa edilmektedir. AyrlEa, insan- veya primat-kökenli yap jaölgeleri içine entegre edilmis en az iki peptit içeren bir insanlastmlnß antikor veya bunun bir fragmanjifsa edilmektedir, bu peptitler farklmi ve CDRl"i temsil eden SEK KIM NO:l, CDRTyi temsil eden SEK KIM NO: 2 ve Aglî Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR3,ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ve CDR19i temsil eden SEK KIM NO:4, CDR2lyi temsil eden SEK KIM NO: 5 ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDR3°ünü temsil eden SEK KIM NO: 6"dan olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekans :ortaya koymaktadi, aynjCDR, antikor içinde iki kere mevcut bulunamamaktadE. Hususi olarak, eger mevcut en az iki CDRinin her ikisi de, Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) CDR"si ise, söz konusu CDR°lerin en az birinin, SEK KIM NO:4 taraf ndan temsil edilen CDRl olmasl gerekmektedir. Ayrlîza, insan- veya primat-kökenli agîi zincir yapl'bölgeleri içine entegre edilmis, Agî Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR] ,ini temsil eden SEK KIM No:1, CDR2,sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO:3"ten olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekansüa sahip en az iki peptit içeren bir insanlastîülnß antikor veya bunun bir fragmanjifsa edilmektedir; burada CDR antikor içerisinde iki kere yer alamaz. Ayrßa, insan- veya primat-kökenli ag] zincir yapjbölgeleri içine entegre edilmis, Ag& Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR17ini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDR2,sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO:3"ten olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekansvna sahip en az iki peptit içeren bir Agin Zincir Degisken Bölge (HCVR) ifsa edilmektedir. Ayrßa, insan- veya primat-kökenli hafif zincir yapÜbölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRl,ini teinsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2°sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3iünü temsil eden SEK KIM NO:6"dan olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekanslîia sahip en az iki pepti içeren bir insanlastîmng antikor veya bunun bir fragman :ifsa edilmektedir. Aerca, insan- veya primat-kökenli hafif zincir yapleölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin CDRlini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2°sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3lünü temsil eden SEK KIM NO: 6,dan olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekansîia sahip en az iki peptide sahip bir Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) ifsa edilmektedir, aynjCDR, antikor içinde iki kere mevcut bulunamaz ve hususi olarak, söz konusu CDR"lerin en az biri, SEK KIM NO: 4 taraf ßdan temsil edilen CDRl olmallîli. Ayrlga, insan- veya primat-kökenli ag] zincir yapEbölgeleri içine entegre edilmis, Ag& Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDRl7ini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDR27sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3°ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 amino asit sekans îla, hususi olarak yukarma belirtilen smada sahip olan bir insanlastîlhiß antikor veya bunun bir fragman Lifsa edilmektedir. Ayrlca, insan- veya primat-kökenli ag ii zincir yapl bölgeleri içine entegre edilmis, Aglr Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDRliini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDRTsini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR33ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 amino asit sekans ila, hususi olarak yukarda belirtilen slîa ile sahip olan peptitler içeren bir Agl'rl Zincir Degisken Bölge (HCVR) ifsa edilmektedir. Ayrßa, insan- veya primat-kökenli hafif zincir yapübölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin CDRl ,ini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2,sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO: 6 bir amino asit sekansEla, yukarßa belirtilen slîada sahip olan peptitler içeren bir insanlastßûmß antikor veya bunun bir fragman Lifsa edilmektedir. Ayrlca, insan- veya primat-kökenli hafif zincir yapl lbölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRl ,ini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2"sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3°ünü temsil eden SEK KIM NO: 6°nEi bir amino asit sekans Ba, hususi olarak yukarEla belirtilen smada sahip olan peptitler içeren bir Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) ifsa edilmektedir. Ayrßa, insan- veya primat-kökenli yap üaölgeleri içine entegre edilmis, Agß Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDRl "ini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDR2"sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ve Hafif` Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRl "ini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2°sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO: 6idan olusan sekanslar grubundan seçilen bir ainino asit sekanslîia sahip en az üç peptit içeren bir insanlastlîflmâ antikor veya bunun bir fragman] fakat hususi olarak, ayn IDR'nin, antikor içinde iki kere mevcut bulunamadfglir insanlastîülnß antikor veya bunun bir fragman :ifsa edilmektedir. Ayrßa, bir insanlastEJInß antikor veya bunun bir fragman Difsa edilmektedir ki bu antikor, insan- veya primat-kökenli yap: bölgeleri içine entegre edilmis, Ag& Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR17ini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDR27sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDR17ini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2°sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3"ünü temsil eden SEK KIM NO: 6"dan olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekans na sahip en az dört peptit içermektedir, fakat hususi olarak, aynl lCDRinin, antikor içinde iki kere mevcut bulunamad gl lbir insanlast lillmls antikor veya bunun bir fragman _ifsa edilmektedir. Ayrßa, insan- veya primat-kökenli yap Fbölgeleri içine entegre edilmis, Agil Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDRl ,ini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDRZ'sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR37ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDR1"ini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDR2'sini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR33ünü temsil eden SEK KIM NO: 6Sdan olusan sekanslar grubundan seçilen bir amino asit sekans îla sahip en az bes peptit içeren bir insanlastmtlmß antikor veya bunun bir fragman: fakat hususi olarak, ayn :CDR7nin, antikor içinde iki kere mevcut bulunamadfgjnr insanlastLrLljnLsl antikor veya bunun bir fragman _ifsa edilmektedir. Ayrlca, insan- veya primat-kökenli yap' lbölgeleri içinde entegre edilmis, Agit Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDRl ,ini temsil eden SEK KIM NO: 1, CDR2,sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3,ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRl "ini temsil eden SEK KIM NO: 4, CDRTsini temsil eden SEK KIM NO: 5 ve CDR3,ünü temsil eden SEK KIM NO: @nü bir amino asit sekansßa sahip olan peptitler içeren bir insanlastiüînß antikor veya bunun bir fragman Üfsa edilmektedir. Ayrßa, bir antikor, bir AgE Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir fragmanjifsa edilmektedir ki burada, söz konusu antikor, AgLn Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir antikoru, insan- veya primat-kökenli aglr zincir yap bölgeleri içine entegre edilmis, Aglr Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR2,sini temsil eden SEK KIM NO: 2`nin bir amino asit sekans lîia sahip en az bir peptit içermektedir. Ayrßa, bir insanlastilmß antikor, bir Ag& Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir fragmani ifsa edilmektedir ki burada, söz konusu insanlastimmß antikor, Agm Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir antikoru, insan- veya primat-kökenli agm zincir yapEbölgeleri içine entegre edilmis, Agm Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR3'ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 "ün bir amino asit sekans lîia sahip en az bir peptit içermektedir. Ayrßa, bir antikor, Ag] Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki bu antikor, Agn Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir fragmanL,J insan- veya primat-kökenli agin zincir yapl lbölgeleri içine entegre edilmis, Agit Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR1"ini temsil eden SEK KIM NO: 1 ve CDR2'sini temsil eden SEK KIM NO: 2"nin bir amino asit sekans lîia sahip en az iki peptit içermektedir. Ayrlî:a, bir insanlastîlflmls antikor, bir Aglî Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir fragmanjifsa edilmektedir ki bu antikor, Agm Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun fragman] insan- veya primat-kökenli ag& zincir yapEbölgeleri içine entegre edilmis, Ag& Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDRl"ini temsil eden SEK KIM NO: 1 ve CDR33ünü temsil eden SEK KIM NO: 3 ,ün bir amino asit sekans Ela sahip en az iki peptit içermektedir. AyrlEa, bir insanlastiümß antikor, bir AglI Zincir Degisken Bölge (HCVR) veya bunun bir fragman Jifsa edilmektedir ki bu antikor, AgLr Zincir Degisken Bölge veya bunun fragmanl, insan- veya primat-kökenli agln zincir yapl lbölgeleri içine entegre edilmis, Ag n Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR2"sini temsil eden SEK KIM NO: 2 ve CDR3iünü temsil eden SEK KIM NO: 3iün bir amino asit sekansßa sahip en az iki peptit içermektedir. Ayrßa, bir insanlastßlnß antikor, bir Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) ve bunun bir fragman Jifsa edilmektedir ki bu antikor, Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) veya bunun fragman] insan- veya primat-kökenli agi zincir yap :bölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDRliini temsil eden SEK KIM NO: 4 ve CDR2,sini temsil eden SEK KIM NO: 5°in bir amino asit sekans Ela sahip en az iki peptit içermektedir. Ayrica, bir insanlast lillmls antikor, bir Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) veya bunun bir fragman lifsa edilmektedir ki bu antikor, Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR) veya bunun fragman] insan- veya primat-kökenli agri zincir yapîbölgeleri içine entegre edilmis, Hafif Zincir Degisken Bölgenin CDRliini temsil eden SEK KIM NO: 4 ve CDR3,ünü temsil eden SEK KIM NO: 6,nEi bir amino asit sekans Ila sahip en az iki peptit içermektedir. Ayrßa, bir insanlastlîüîng antikor veya bunun bir fragman :ifsa edilmektedir ki burada fare C2 antikorunun hem Ag] Zincir Degisken Bölgesi (HCVR) hem de Hafif Zincir Degisken Bölgesinin (LCVR) her biri, CDR bölgelerinin en az birini, insanlastüflmß antikorun en az iki CDR bölgesine bagßlamaktadm. Dolayßgtla, neticede elde edilen insanlastEEûnE antikor veya bunun bir fragman ü sunlar üçerebilmektedir: -CDRISI (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 4 amino asit sekansl lile kombinasyon halinde, CDR] ,i (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 1 amino asit sekans|;| -CDRH (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 4 amino asit sekansFlile kombinasyon halinde, CDR2,yi (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 2 amino asit sekans|;' -CDRPI (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 4 amino asit sekansFlile kombinasyon halinde, CDR3,ü (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 3 ainino asit sekansü -CDR2"yi (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 5 amino asit sekansEile kombinasyon halinde, CDRl "i (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 1 amino asit sekansEl -CDR2°yi (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 5 amino asit sekansEile kombinasyon halinde, CDR2°yi (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 2 amino asit sekansE -CDR3"ü (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 6 amino asit sekansjile kombinasyon halinde, CDR2iyi (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 2 amino asit sekansL; -CDR3"ü (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 6 amino asit sekans lile kombinasyon halinde, CDR] ,i (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 1 amino asit sekans|;| -CDRZSyi (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 5 amino asit sekansFile kombinasyon halinde, CDR3,ü (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM NO: 3 amino asit sekansü -CDR3"ü (LCVR) temsil eden bir SEK KIM NO: 6 amino asit sekansjile kombinasyon halinde, CDR3"ü (HCVR) temsil eden en az bir SEK KIM No:3 amino asit sekansü Bulusun insanlastmlmg antikoru insan veya primat kökenli bir hafif zincir ve/veya agi zincir sabit bölgesini içerebilmektedir. Ilave bir yap landlnmada bulus, bir insanlastlnltnlsi antikor veya bunun bir fragmanl ifsa edilmektedir ki burada SEK KIM NOlar l-6ada verildigi gibi hafif zincir ve/veya ag 11 zincir CDR bölgelerinin temsilcisi amino asitlerin en az biri, hususi olarak 5"ten fazla olmamak üzere en az biri, daha hususi olarak 4*ten fazla olinamak üzere en az biri, daha da çok tercihen 3°ten fazla olmamak üzere en az biri, fakat özellikle 2°den fazla olmamak üzere en az biri, antikorun tam islevselligini muhafaza edecegi sekilde bir korunumlu ikame yoluyla degistirilmektedir. Özellikle bulus, bir bir insanlastEJInS antikor veya bunun bir fragmanîiüifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: 5*te verildigi gibi hafif zincir degisken bölgenin (LCVR) CDR2'si içinde, Kabat pozisyonu 507deki Lys yerine, Arg, Gln ve Glusdan olusan gruptan seçilen bir amino asit kalnttsdhususi olarak Arg konulmaktadhi Özellikle bulusta bir hafif zincir degisken bölge (LCVR) ifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: 5"te verildigi gibi CDRZ içinde, Kabat pozisyonu 50'deki Lys yerine, Arg, Gln ve Gluidan olusan gruptan seçilen bir amino asit kalintlsg,lhususi olarak Arg konulmaktadlr. Bulusun bir diger yap land ?mas lîrlda bir insanlastFrlFlmls antikor veya bunun bir fragman Fifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO Site verildigi gibi hafif zincir degisken bölgenin (LCVR) CDR2,si içinde, Kabat pozisyonu 53ideki Ser yerine, Asn veya Thr°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal Btßg fakat hususi olarak Asn konulmaktad m. Özellikle bulusta bir hafif zincir degisken bölge (LCVR) ifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: 57te verildigi gibi CDR2 içinde, Kabat pozisyonu 537deki Ser yerine, Asn veya Thr°den olusan gruptan seçilen bir amino asit kal ntLsLJ fakat hususi olarak Asn konulmaktadlii. Bulusun bir diger yap land ?mas lîida bir insanlastFrlFlmß antikor veya bunun bir fragman Fifsa edilmektedir ki burada Agm Zincir Degisken Bölge (HCVR), smasßila SEK KIM NO: 15 ve 16"da verilen sekansa %90, hususi olarak %95, daha hususi olarak %98 özdes olan bir amino asit sekans Ela sahiptir. Bulusun bir diger yap Jhndîmas Elda bir insanlastmümg antikor veya bunun bir fragman Eifsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR), sßas Sila SEK KIM NO: 12 ve l3"de verilen sekansa %90, hususi olarak %95, daha hususi olarak %98 özdes olan bir amino asit sekanslna sahiptir. Bulusun yine bir diger yapllandlnmaslrida bir insanlast iillmls antikor veya bunun bir fragman? ifsa edilmektedir ki burada Aglî' Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR bölgelerinin en az ikisi, fakat özellikle üçü, SEK KIM NO: l-3"te verildigi gibi mütekabil CDR bölgesine %90, hususi olarak %95, daha hususi olarak %98 özdes olan bir amini asit sekans Ba sahiptir. Bulusun ilave bir yap Iandmmas Eda bir insanlastEEmß antikor veya bunun bir fragman Jifsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDR bölgelerinin en az ikisi, fakat özellikle üçü, SEK KIM NO: 4-6lda verildigi gibi mütekabil CDR bölgesine sahiptir. Bulusun yine bir diger yap landlrmaslnda bulusa göre bir insanlastln lmis antikor veya bunun bir fragman _ifsa edilmektedir ki burada, Aglîl Zincir Degisken Bölge (HCVR), slîlas Fýla SEK veya %99 özdes olan bir amino asit sekans îla sahiptir. Bulusun yine bir diger yap land Emaslîida bulusa göre bir insanlastEJInE antikor veya bunun bir fragmanEifsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölge (LCVR), siasS/la Bulusun yine bir diger yap land LiJnasLnda bulusa göre bir insanlasttijllnts antikor veya bunun bir fragmanl ifsa edilmektedir ki burada Agit Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) CDR bölgelerinin en az biri, hususi olarak en az ikisi, fakat özellikle üçü, SEK KIM NO: 1-3`te veya %99 özdes olan bir amino asit sekans Ba sahiptir. Bulusun yine bir diger yap Iandüîmasßda bulusa göre bir insanlastEJInE antikor veya bunun bir fragman Difsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölgenin CDR bölgelerinin en az biri, hususi olarak en az ikisi, fakat özellikle üçü, SEK KIM NO: 4-6`da verildigi gibi özdes olan bir amino asit sekans Lna sahiptir. Bulusun yine bir diger yap landlrmaslnda mevcut bulusa göre bir insanlastlr lmis antikor ifsa edilmektedir ki burada, silaslýla insan germ hatt`lVH ve VK sekanslarîldan elde edilen akseptör yapüsekansîiii temsilcisi amino asitlerin en az biri, murin antikoru ACI-01- Ab7C27nin mütekabil bölgesinden bir amino aside bir ikame yoluyla veya buna korumalEbir ikame yoluyla degistirilmektedir. Özellikle bulusta siasS/la bir Agß Zincir Degisken Bölge ve bu Agi Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastiümg antikor ifsa edilmektedir ki burada, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIIFün insan germ hattDVH sekanslarEidan elde edilen akseptör yap Esekans [içinde Kabat pozisyonu 47"deki Trp"nin yerine, Leu, norlösin, Ile, Val, Met, Ala ve Phe7den olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat hususi olarak SEK KIM NO: 15"de gösterildigi gibi Leu konulmaktadlri. Bulusta ilave olarak slîas ýla bir Aglî Zincir Degisken Bölge ve bu Agir Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlast rillmls antikor ifsa edilmektedir ki burada, Aglri Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHlll°ün insan gerrn hattTl VH sekanslarlîidan elde edilen akseptör yap Eksekans :içinde Kabat pozisyonu 94'deki Arg"nin yerine, Ser ve Thr7den olusan gruptan seçilen bir amino asit sekansl: fakat özellikle SEK KIM NO. 15ide gösterildigi gibi Ser konulmaktad m. Yine bir diger yapEandimada bulusta, bir Ag] Zincir Degisken Bölge ve bu Agm Bölge Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastlîlhiß antikor ifsa edilmektedir ki burada, Aglî Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIII'ün insan gerrn hattJVH sekanslaandan elde edilen akseptör yapl sekansl liçinde Kabat pozisyonu 47ideki Trpinin yerine, Leu, norlösin, fakat özellikle Leu konulmaktadîl ve Kabat pozisyonu 94'deki Arg"nin yerine, Ser ve Thr,den olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle SEK KIM NO: 15°de gösterildigi Ser konulmaktad m. Bulusta ilave olarak sEasßlla bir Hafif Zincir Degisken Bölge ve bu Hafif Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastEEmS antikor ifsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VKII"nin insan gerrn hattü VK sekanslarEidan elde edilen akseptör yapLsekansUiçinde Kabat pozisyonu 45"deki Gln'nin yerine, Lys, Arg, Gln ve Asn"den olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Lys ve Arg, fakat özellikle Lys konulmaktadlri. Bulusta ilave olarak, sEasgl'la bir Hafif Zincir Degisken Bölge ve bu Hafif Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastlIEmE antikor ifsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölgenin KABAY alt-grubu VKII,nin insan germ hattEl VK sekanslarßdan elde edilen akseptör yapÜsekans :içinde Kabat pozisyonu 877deki Tyr"nin yerine, Phe, Leu, Val, Ile ve Ala7dan olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Leu ve Phe, fakat özellikle Phe konulmaktad E. Bulusta ilave olarak sEas Sila bir Hafif Zincir Degisken Bölge ve bu Hafif Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastLnLlmLs antikor ifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: 127de gösterildigi gibi, bir fare monoklonal antikordan, hususi olarak da murin antikoru ACI- Ol- Ab7C2lden elde edilen CDR2 bölgesi içinde Kabat pozisyonu 509deki Lys9nin yerine, Arg, Gln, His ve Asn,den olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle Arg konulmaktadlii. Yine bir diger yap [land Emada bulusta, sEas Sila bir Hafif Zincir Degisken Bölge ve bu Hafif Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastiülnlîs antikor ifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: l2lde gösterildigi gibi, bir fare monoklonal antikordan, hususi olarak da murin antikoru ACI- Ol-Ab7C2"den elde edilen CDR2 bölgesi içinde Kabat pozisyonu 53'deki Asnlnin yerine, Ala, Val, Leu, Ser ve Ilelden olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle Ser konulmaktad 3. Yine bir diger yap land iimada bulusta bir insanlastlnllm sl antikor ifsa edilmektedir ki burada, Agln Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VnllPün insan germ hattl l VH sekanslarlîidan elde edilen akseptör yapi-Isekans`liçinde Kabat pozisyonu 47'deki Trpinin yerine, Leu, norlösin, Ile, Val, Met, Ala ve Phe,den olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Leu ve Ile, fakat özellikle Leu konulmaktad& ve AglI Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt- grubu VHHFün insan germ hattJVH sekanslarlîidan elde edilen akseptör yap Bekansjiçinde Kabat pozisyonu 94°deki Arg'nin yerine, Ser ve Thr"den olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle SEK KIM NO: 15lde gösterildigi gibi Ser konulmaktadß ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VKII°nin insan germ hattUVK sekanslarmdan elde edilen akseptör yap JsekansUiçinde Kabat pozisyonu 87"deki Tyr"nin yerine, Phe, Leu, Val, Ile ve A1a"dan olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle Phe konulmaktadlrl. Yine bir diger yapEandmmada bulusta, sEas Slla bir AglI Zincir Degisken Bölge ve bu Agi Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastiülnß antikor ifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: 157de gösterildigi gibi, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIII"ün insan germ hattElVH sekanslarEidan elde edilen akseptör yap Esekansüiçinde Kabat pozisyonu 47ldeki Trp"nin yerine, Leu konulmaktad E. Yine bir diger yapEandmmada bulusta, s&asýla bir Ag& Zincir Degisken Bölge ve bu Ag] Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastîmnß antikor ifsa edilmektedir ki burada, SEK KIM NO: 157de gösterildigi gibi, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIII"ün insan germ hatt lVH sekanslar ndan elde edilen akseptör yap] Bekansl içinde Kabat pozisyonu 949deki Arg,nin yerine, Ser konulmaktad 11. Yine bir diger yapllandlrtmada bulusta, slrîasîyla bir Aglr Zincir Degisken Bölge ve bu Ag n Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastîll'lhils antikor ifsa edilmektedir ki burada, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIIPün insan germ hattDVH sekanslarßdan elde edilen akseptör yap :bekans [içinde Kabat pozisyonu 47adeki Trpinin yerine, Leu ve Ile, fakat özellikle Leu konulmaktad] ve Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT` alt-grubu VHIII"ün insan germ hattEVH sekanslar&idan elde edilen akseptör yap &sekans :içinde Kabat pozisyonu 94ldeki Arg°nin yerine, SEK KIM NO: lSlde gösterildigi gibi Ser konulmaktad& Yine bir diger yap LlandLiimada bulusta, sLras yla bir Hafif Zincir Degisken Bölge ve bir Tyr Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastlrtllm s antikor ifsa edilmektedir ki burada, Hafif Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu Vxllinin insan germ hattl lVK sekanslarlndan elde edilen akseptör yapi' sekansTliçinde Kabat pozisyonu 87"deki Tyr'nin yerine, Phe konulmaktad m. Yine bir diger yapEandmmada bulusta, s&as Slla bir Ag& Zincir Degisken Bölge ve bu Agi Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastiülnß antikor ifsa edilmektedir ki burada, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu Vullllün insan germ hattüVH sekanslarßdan elde edilen akseptör yap :sekans Diçinde Kabat pozisyonu 47°deki Trp°nin yerine, Leu ve Ile, fakat özellikle Leu konulmaktadij ve AgLij Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIIIH'in insan germ hattl NH sekanslarlndan elde edilen akseptör yapl sekans içinde Kabat pozisyonu 94°deki Arg"nin yerine, SEK KIM NO: 15`de gösterildigi gibi Ser konulmaktad& ve Hafif Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VKII,nin insan germ hatt`l VK sekanslarßdan elde edilen akseptör yapüsekans :içinde Kabat pozisyonu 87,deki Tyr7nin yerine, Phe konulmaktad &. Yine bir diger yapEandmmada bulusta, s&asgla bir Ag& Zincir Degisken Bölge ve bu Ag] Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastEÜInß antikor ifsa edilmektedir ki burada, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIII7ün insan germ hattDVH sekanslarEldan elde edilen akseptör yapüsekansjiçinde Kabat pozisyonu 47,deki Trp"nin yerine, Leu, norlösin, Ile, Val, Met, Ala ve Phe'den olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Leu ve Ile, fakat özellikle Leu konulmaktadm ve Kabat pozisyonu 947deki Arg7nin yerine, Ser ve Thriden olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle SEK KIM NO: 15'de gösterildigi gibi Ser konulmaktadlr ve bir fare monoklonal antikor, hususi olarak da inurin antikoru ACI-Ol-Ab7C2,den elde edilen CDR2 bölgesi içinde Kabat pozisyonu 50,deki Lysinin yerine, Arg, Gln, His ve Asniden olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle Arg konulmaktad i. Yine bir diger yapûandmmada bulusta, sEas &la bir Ag& Zincir Degisken Bölge ve bu Agi Zincir Degisken Bölgeyi içeren bir insanlastiülnß antikor ifsa edilmektedir ki burada, Ag& Zincir Degisken Bölgenin KABAT alt-grubu VHIII"ün insan germ hattüVH sekanslarßdan elde edilen akseptör yapüsekansîiçinde Kabat pozisyonu 477deki Trp"nin yerine, Leu, norlösin, Ile, Val, Met, Ala ve Phe'den olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Leu ve Ile, fakat özellikle Leu konulmaktadLij ve Kabat pozisyonu 947deki Arg"nin yerine, Ser ve Thriden olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle SEK KIM NO: 15"de gösterildigi gibi Ser konulmaktadlr ve bir fare monoklonal antikorundan, hususi olarak da murin antikoru ACI-Ol-Ab702'den elde edilen CDR2 bölgesi içinde Kabat pozisyonu 53°deki Asninin yerine, Ala, Val, Leu, Ser ve lle'den olusan gruptan seçilen bir amino asit, fakat özellikle Ser konulmaktadm. Burada SEK KIM NO: 12 hafif zincir degisken bölgesi aç [klanmaktad î. Bulusun özel bir yap [Band Emas Eida, SEK KIM NO: 12 hafif zincir degisken bölgesini içeren bir insanlastEJInß antikor saglanmaktad B. Burada SEK KIM NO: 137te gösterildigi gibi sinyal sekanslarîiüihtiva eden hafif` zincir degisken bölge aç Lklarnaktad Ji. Bulusun baska bir spesifik yapilanmaslnda, SEK KIM NO: 13ite gösterildigi gibi sinyal sekanslarlîirihtiva eden bütün hafif zincir degisken bölgeyi içeren bir insanlastîlllinls antikor saglaninaktadm. Bulusun baska bir spesifik yapüanmasüida, SEK KIM NO: 127nin hafif zincir degisken bölgesini ve SEK KIM NO:14sün hafif zincir sabit bölgesini içeren bir insanlastiülnß antikor saglanmaktad E. Bulusun baska bir spesifik yap Ianmas Eda, SEK KIM NO: l3iün bütün hafif zincir degisken bölgesini ve SEK KIM NO: 14'ün hafif zincir sabit bölgesini içeren bir insanlastEEmIsl antikor tedarik edilmektedir. Burada aerda, SEK KIM NO: 15'in agLii zincir degisken bölgesi açlklanmaktadlri. Bulusun baska bir spesifik yapilanmaslîida, SEK KIM NO:15,in aglî zincir degisken bölgesini içeren bir insanlast rilllnls antikor tedarik edilmektedir. Burada SEK KIM NO: 169da gösterilen sinyal sekanslarmlîhtiva eden aglî zincir degisken bölge aç iklanmaktad E. Bulusun bir baska spesifik yapEanmasEida, SEK KIM NO: 16,da gösterilen sinyal sekanslarEjEihtiva eden bütün agE zincir degisken bölgeyi içeren bir insanlastEÜInß antikor tedarik edilmektedir. Bulusun baska bir spesifik yap Eanmas Eda, SEK KIM NO: 15 ,in ag& zincir degisken bölgesini ve SEK KIM NO: 17,nin agE zincir sabit bölgesini içeren bir insanlastEÜinß antikor saglanmaktad E. Bulusun baska bir spesifik yaleanmasEda, SEK KIM NO: 16°nE agij zincir degisken bölgesini ve SEK KIM NO: 173nin agii zincir sabit bölgesini içeren bir insanlastlnlmls antikor saglanmaktad 11. Bir yapilanmada, burada aç Fkandglîsekilde bulusa göre insanlastlEllms antikor, en az 30, hususi olarak en az 35, daha hususi olarak en az 38, daha da hususi olarak en az 40 amino asit kal ntls da sahip bir AB monomerik peptit ile ve/Veya söz konusu Aß monomerik birimlerden çok sayEa içeren bir AB polimerik çözünür amiloid peptit ile, fakat hususi olarak bir Aßi.42 monomerik ve/veya söz konusu Aß monomerik birimlerden çok sayma içeren bir AB polimerik çözünür amiloid peptit ile, hususi olarak antikorun Aßiagiye 121000 araslnda bir molar konsantrasyon oranlnda, daha hususi olarak 1:500, daha hususi olarak konsantrasyon oranLnda, birlikte-inkübasyonu üzerine, Aß monomerlerinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere kümelesinesini inhibe etmektedir. Hususi olarak, bulusa göre antikorun, amiloid monomerik ve/veya polimerik çözünür amiloid peptitleri ile birlikte-inkübasyonu, 24 saat ila 60 saat aras Eda, hususi olarak 30 saat araslnda, hususi olarak 32 °C ve 38 0 aras nda, daha hususi olarak 37 °Cide yürütülmektedir. Spesifik bir yöne göre, amiloid monomerik ve/veya polimerik çözünür amiloid peptitleri ile birlikte-inkübasyon, 37 °C bir sßaklkta 24 saat boyunca gerçeklestirilmektedir. Hususi olarak bulusa göre, insanlastEJInE antikor, ve bunun islevsel parçalar: AB1-42 monomerik peptide ve/veya söz konusu AB 1-42 monomerik birimlerden çok say Ba içeren AB polimerik çözünür amiloid peptide baglanmaktadn ve AB._42 monoinerik peptit ve/veya söz konusu AB1_42 monomerik birimlerden çok sayda içeren AB polimerik çözünür amiloid peptit ile birlikte- inkübasyon üzerine, AB monomerlerinin ve/Veya polimerlerinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere kümelesmesini inhibe etmektedir. Bir yapEanmada, bulusa göre bir antikor veya bunun fonksiyonel parçalarüdâhil olmak üzere, antikor, hususi olarak da burada ifsa edilen insanlastmjlnß antikor, antikorun ABi_ molar konsantrasyon oranüda, fakat özellikle 1:10°luk bir molar konsantrasyon oran md& AB monomerlerinin ve/veya söz konusu AB monomerik biriinlerinden çok sayma içeren AB çözünür polimerierinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere kümelesmesini, tampon içinde inkübe edilmis ilgili amiloid peptit monomerleri ile karsiastßldgßda, en az %50, hususi olarak en az %60, hususi olarak en az %65, daha hususi olarak en az %75, daha da hususi olarak en az %80, fakat özellikle %85-%90 veya daha fazla inhibe etmektedir. Bulusun spesifik bir yapJJanmasElda, bulusa göre bir antikor veya bunun fonksiyonelparçalaru dâhil olmak üzere, antikor, hususi olarak da burada ifsa edilen insanlastîüinß antikor, AB monomerlerinin ve/veya söz konusu AB monomerik birimlerinden çok sayîla içeren AB çözünür polimerierinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere kümelesinesini, antikorun ABi-42"ye 1:100"lük bir molar konsantrasyon oranEida, en az %30 inhibe etmektedir. Bulusun bir spesifik yathnmasîlda, bulusa göre bir antikor veya bunun fonksiyonel parçalarüdâhil olmak üzere, antikor, hususi olarak da burada ifsa edilen insanlastiüinß antikor, AB monomerlerinin ve/veya söz konusu AB monomerik birimlerinden çok sayüa içeren AB çözünür polimerierinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere kümelesmesini, antikorun AB l-42,ye l:10°luk bir molar konsantrasyon oran Elda, en az %80 inhibe etmektedir. Antikorlarlîi bulusa göre, amiloidojenik monomerik ve/veya polimerik peptitlere fakat hususi olarak amiloid forma (1-42) baglanmas: monomerik ve/veya polimerik amiloidojenik peptitlerin, yüksek moleküler fibrillere veya filamanlara kümelesmesinin inhibisyonuna sebep olmaktad n. Amiloidojenik monomerik ve/veya polimerik peptitlerin kümelesmesinin inhibisyonu yoluyla, mevcut bulusa uygun antikorlar, amiloid ßlaklarîilîl, hususi olarak da ikinci] konformasyonun degisimi ile çözünmez hale geldigi ve hasta hayvanlarln ve insanlarin beyinlerindeki amiloid ßlaklarlnn önemli bir bölümünü olusturdugu bilinen amiloid formun (1-42) olusumunu önleyebilmekte veya yavaslatabilmektedir. Bulusa göre antikorun kümelesme inhibisyon potansiyeli, teknikte bilinen herhangi bir uygun metot ile, hususi olarak, önceden olusturulmus bir gradyan üzerinde bir SDS-PAGE sedimentasyonunun takip ettigi yogunluk asamalj ultra-santrifugasyon ile ve/veya bir tiyoflavin T (Th-T) floresan deneyi ile tespit edilebilmektedir. Bir yapllanmada bulusta antikor veya bunun fonksiyonel parçalar ldâhil olinak üzere, bir antikor, hususi olarak burada tarif edildigi gibi bir antikor ifsa edilmektedir ki bu antikor, en az 30, hususi olarak en az 35, daha hususi olarak en az 38, daha da hususi olarak en az 40 amino asit kal ntlsina sahip Aß monomerik peptitlerin ve özellikle Aß1_42 monomerik peptitlerin kümelesmesi suretiyle olusturulan önceden olusmus yüksek moleküler polimerik amiloid fibriller veya filamanlar ile, hususi olarak, 125 ve 121000 araslîida bir molar birlikte-inkübasyon üzerine, önceden olusmus polimerik fibrillerin veya filamanlarln, en az az %40 fakat özellikle %50 veya daha fazla çözüstürme kabiliyetine sahiptir. Bulusun spesifik bir yapühnmasßda, antikorun kümelesme inhibisyonu ve çözüstürme potansiyeli, önceden olusturulmus bir gradyan üzerinde bir SDS-PAGE sedimantasyon analizinin takip ettigi yogunluk asama]Eultra-santrifugasyon ile tespit edilmektedir. Bulusun bir baska spesifik yap Jhnmaslîlda, antikorun kümelesme inhibisyonu ve çözüstürme potansiyeli, tiyoilavin T (Th-T) floresan deneyi ile tespit edilmektedir. Bir baska spesifik yap Ianmada, bulusa göre antikor, amiloid tarafüdan önceden olusturulmus yüksek moleküler polimerik amiloid fibriller veya filamanlar ile, 28 °C ve 40 0C arasLnda, hususi olarak 32 0C ve 38 0C arasLnda bir sdakltha, daha hususi olarak 37 °C"de, 12 saat ila 36 saat aras nda, hususi olarak 18 saat ila 30 saat araslnda, daha hususi olarak 24 saat boyunca birlikte-inkübe edilmektedir. Hususi olarak, önceden olusturulmus yüksek moleküler polimerik amiloid fibriller veya tilamanlar ile birlikte-inkübasyon, 37 °C bir leakl `Rita 24 saat boyunca yap Flmaktad lî. Bulusun spesifik bir yapEanmasEida, bulusa göre insanlastmümg bir antikor veya bunun fonksiyonelparçalarü dâhil olmak üzere, antikor, hususi olarak insanlastiüîns antikor, önceden olusturulmus poliinerik fibrilleri veya filamanlarüantikorun Aß1.42,ye l ;100"lük bir molar konsantrasyon oranEida en az %24 çözüstürme kabiliyetine sahiptir. Bulusun spesifik bir yapll'anmaslnda, bulusa göre insanlastlrllms bir antikor veya bunun fonksiyonelparçalar l dâhil olmak üzere, antikor, hususi olarak burada ifsa edilen insanlastBÜInß antikor, önceden olusturulmus polimerik fibrilleri veya filamanlarjantikorun Aß1_42,ye 1:10"1uk bir inolar konsantrasyon oranlnda en az %32 çözüstürme kabiliyetine sahiptir. Amiloidojenik polimerik fibrillerin veya filamanlari çözüstürülmesi vas Basglla, bulusa göre antikorlar, amiloid ßlaklarßß olusumunu Önleme veya yavaslatma kabiliyetine sahip olmaktadn ki bu da hastalik ile baglantlll lsemptomlarln bir haûflemesine ve hastallgn ilerlemesinin bir gecikmesine veya ters çevrilmesine sebep olmaktadln. Buna göre, bulusun bir baska yap Ianmasü insanlastmühig bir antikor veya bunun fonksiyonel parçalarjdâhil olmak üzere, hususi olarak bir insanlastmlnß antikoru saglamaktadß, bu antikor, beyin içindeki artmls Aß konsantrasyonuna neden olan bir hastallk veya durum çeken bir hayvani, hususi olarak bir memelinin, fakat özellikle bir insani beyni içinde toplam Aß miktariîazaltma kabiliyetine sahiptir. Bir diger yap lanmada bulusta, bulusa göre bir insanlastlrllmls antikor ifsa edilmektedir ki bu antikor, hususi olarak yüksek bir konformasyonel hassasiyetle ele allnan bir kümelesme inhibisyonu özelligi ve bunun yanüsßa bir çözüstürme özelligi ortaya koymasübakiimdan çift-etkilidir. Hususi olarak bulusta, bulusa göre bir insanlastln lms antikor veya bunun bir fragmanl lifsa edilmektedir ki bu antikor, amiloid monomerik ve/veya polimerik çözünür amiloid peptitleri monomerik peptitleri ile ve/veya söz konusu Aß monomerik birimlerinden çok sayEla içeren bir polimerik çözünür ß-amiloid peptit ile, fakat özellikle bir Aß1_42 monomerik ve/Veya söz konusu Aß1.42 monomerik birimlerinden çok sayüa içeren bir AB polimerik çözünür amiloid peptit ile birlikte-inkübasyon üzerine, Aß monomerlerinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere veya Iilamanlara kümelesmesini inhibe etmektedir ve ilave olarak, amiloid monomerik peptitlerin, hususi olarak mesela Aß monomerik peptitleri 1-39; 1-40, l-4l veya 1-42 gibi ß-amiloid monomerik peptitlerin, fakat özellikle Aß1_42 monomerik peptitlerin kümelesmesi suretiyle olusan önceden olusturulmus yüksek moleküler polimerik amiloid fibriller veya filamanlar ile birlikte- inkübasyon üzerine, önceden olusturulmus fibrilleri veya filamanlarEçözüstürme kabiliyetine sahiptir. Bir baska yapEanmada, bulusta, bulusa göre bir insanlastmlmg antikor veya bunun bir fragman :ifsa edilmektedir ki bu antikor, ß-yaprak konformasyonun, bir (x-heliks ve/Veya bir rastgele sarmal konformasyona, fakat hususi olarak bir rastgele sarmal konformasyona, hatta daha hususi olarak molekül içindeki belli bir lokasyonda, özellikle Aß proteininin Tyr 10 ve Val 12 çevresinde bir rastgele sarmal konformasyona dogru bir geçisini indükleme kabiliyetine sahiptir ki bu, rastgele sarmal konformasyonun, ß-yaprak konformasyonu aleyhine bir artßia ve önceden olusturulmus yüksek moleküler polimerik amiloid fibrillerin veya filamanlar n artmls bir çözünürlügüne sebep olmaktadln. Hususi olarak, ß-yaprak konformasyonun azalmasj tampon (kontrol) içinde inkübe edilmis ilgili önceden olusturulmus amiloid ßolimerik fibriller veya filamanlar ile karsEastEilldgEida en az %30, hususi olarak en az %35 ve daha hususi olarak en az %40 ve daha fazla miktarda olmaktad li Antikorun, ikincil yaplya geçisi indükleme potansiyeli, kat [hal 13C NMR spektroskopi ile fakat hususi olarak, Aß [42 içindeki Tyr 10 ve Val 12C ß,nin konformasyonlarßii tümlesik yogunluklarmn ölçülmesi ile belirlenmektedir. Ayrßa, daha önce tarif edildigi gibi, en az bir hafif zincir veya bunun bir fragmanmjveya en az bir ag& zincir veya bunun bir fragman îlE içeren, bir insanlastmümlg antikor veya bunun bir fragmanjsaglanmaktadi, söz konusu antikor veya fragman, en az yaklasEEt 1 x 10'7 M ila en az yaklask 1 x 10'12 M arasßda, hususi olarak en az yaklask 1 x 10'8 M ila 1 x 10'll M aras nda, daha hususi olarak en az yaklas k 1 x 10'9 M ila en az yaklas k 1 X 10'10 M aras nda, daha da hususi olarak en az yaklas k 1 x 10'8 M ila en az yaklaslk 2 x 10'8 M araslnda bir KD ile yüksek bir baglama afinitesi ile bir AB monomerine baglanmaktadLr, fakat tercihen, amiloid öncül proteini (APP) ile herhangi bir kayda deger çapraz reaksiyon göstermemektedir. AyrEa, daha önce tarif edildigi gibi, en az bir hafif zincir veya bunun bir fragmanmjveya en az bir ag& zincir veya bunun bir fragmanßE içeren, bir insanlastilmß antikor veya bunun bir fragmanE saglanmaktadß, söz konusu antikor veya fragman, en az yaklasEk 1 x 10'7 M ila en az arasEida, daha hususi olarak en az yaklasE 1 x 10'9 M ila en az yaklasEk 1 x 10`l° M arasEida, daha da hususi olarak en az yaklasik 2 x 10'9 M ila en az yaklasik 5 x 10'9 M arasEida bir KD ile yüksek bir baglama afînitesi ile bir AB fiberi, fibrili veya filamania baglanmaktadlri, fakat tercihen, amiloid öncül proteini (APP) ile herhangi bir kayda deger çapraz reaksiyon göstermemektedir. Bir baska yap %nmada, bulusa göre daha önce tarif edilen gibi insanlastEJhiß antikor veya bunun bir fragman ,| bir Aß fiberine, fibriline veya filaman ha, bir AB monomerine olan baglama afinitesinden, en az 2 kat, hususi olarak en az 4 kat, hususi olarak en az 10 kat, hususi olarak en az 15 kat, daha hususi olarak en az 20 kat, fakat özellikle en az 25 kat daha yüksek olan bir baglama afinitesi ortaya koymaktad E. Yine bir baska yapllanmada, bulusa göre bir insanlastlii lmls antikor veya bunun bir fragman l burada tarif edilmektedir, bu antikor, memeli beynindeki, hususi olarak insan beynindeki Aß plaklarTdâhil olmak üzere kümelesmis Aß"ya büyük ölçüde baglanmaktadlî fakat tercihen, amiloid öncül proteini (APP) ile kayda deger bir çapraz reaksiyon göstermemektedir. Yine bulusun bir baska yapElanmasEida, kimerik antikor veya bunun bir fragmanü veya bir insanlastîühiß antikor veya bunun bir fragmani] burada tarif edilmektedir, bu antikor, memeli beynindeki, hususi olarak insan beynindeki Aß monomerleri dâhil olmak üzere çözünür polimerik amiloide, hususi olarak amiloid ß (Aß)"ya büyük ölçüde baglanmaktad m, fakat tercihen, amiloid öncül proteini (APP) ile kayda deger bir çapraz reaksiyon göstermemektedir. Ilave olarak burada, bulusa göre bir insanlastßmmß antikor veya bunun bir fragmanüifsa edilmektedir, bu antikor, memeli beynindeki, hususi olarak insan beynindeki Aß plak yükünü önemli ölçüde azaltmaktadlrt Bu, ya antikorun plaga baglanmasl suretiyle ya da çözünmez ve kümelesmis formundaki amiloid, hususi olarak amiloid ß (Aß) denge durumunu, konformasyonda bir degisimi indüklemek ve parçalanmß ve çözünmüs amiloid formlarnln, hususi olarak amiloid [3 (Aß) formlarln ri, doku ve/veya vücut s v'laru hususiyetle beyin içinde baglanmas Elve stabilize edilmesi suretiyle, fiberlerin, çözünür poli- veya monomerik formlara çözüstürülmesi suretiyle bunun çözünür formuna dogru kaydEJInas Dile gerçeklestirilebilmektedir. Bulusa göre antikorun aktivitesi vaslîas Slla, doku ve/veya vücut akßkanlarEiçinde, hususi olarak da beyin içinde birikmek yerine, perfierik temizlik ve katabolizma desteklenmektedir. Bulusa göre antikorun faydaljetkisi, antikor plaga baglanmadan elde edilebilmektedir. Bu stabilizasyon aktivitesi vasltaslyla, bulusa göre antikor, doku ve/veya vücut slv larl içinde hususi olarak [3 (AB) proteini olmak üzere polimerik ve daha az kümelesmis çözünür amiloid proteininin toksik etkilerini nötrlestirebilmektedir. Bulusun spesifik bir yap [[anmas Elda bulusa göre antikor, beyin içinde kümelesmis amiloid betaya mutlaka baglanmasü gerekmeden faydalE etkilerini böylece gerçeklestirebilmektedir. Burada daha önce açEklandgEüzere bir insanlastmüîntg antikor veya bununbir fragmanjsaglanmakta olup; bir fare donörü antikorundan, hususi olarak fare antikoru ACI-01-Ab7C2"den ("mC2" ve basvuru boyunca insanlastßmng C2 antikoru için hC2 olarak isimlendirilmektedir, 01 December 2005 "Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) in Braunschweig, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Braunschweig under accession no DSM ACC2750) elde edilen en az bir hafif zincir veya bunun bir fragmanln lveya en az bir aglî zincir veya bunun bir fragmanlîiîiçeren bir insanlastlîllnlê antikor veya bunun bir fragmanjifsa edilmektedir, söz konusu antikor veya bunun fragmanü AB antijenine, fare donör antikorununkinden en az 5 kat, hususi olarak en az 8 kat, daha hususi olarak en az 10 kat, fakat Özellikle en az 15 kat daha yüksek bir baglama afinitesine sahiptir. Bulusa ait antikor, bir yap Ülanmada, herhangi bir izotip ve alt-tipin (mesela IgM, IgD, IgGl, zincir ve iki tarn uzunluklu agLij zincir) olabilmektedir; fakat özellikle IgG 4 izotipinin bir antikorudur; alternatif olarak, bir baska yapIlanmada, bu, bir bütün antikorun bir antijen- baglayan fragman ümesela Fab, F(ab7)2 ve Ev) olabilmektedir. Bulus, ayrlda, burada tarif edilen antikorlarln antijen-baglayan fragmanlarl lile de ilgilidir. Bulusun bir yapllanmaslnda, fragman, bir Fab fragman ,l bir Fab, fragmanl, bir F(ab)2 fragman _lve bir FV fragman lîidan olusan gruptan seçilmektedir, buna bir Fab immünoglobulin ifade kitapllgl ürünleri ve yukarlda bahsedilen bütün antikorlarln ve fragmanlar n epitop- baglama fragmanlarFdahildir. Bir baska yap Jhnmada, bulusa ait antikor veya antijen-baglama fragmanü polietilen glikole birlesmektedir. Yine bir baska yapüanmada, bulusa ait antikorun sabit bölgesi, modifiye olmam& antikora iliskin olarak en az bir sabit bölge-arac lüîlüaiyolojik efektör fonksiyonunu azaltmak için modifiye edilmektedir. Yine bir baska yap Ianmada, bulusa ait antikor veya antijen-baglama fragman: degistirilmis bir efektör fonksiyonuna sahip bir FC bölgesi içermektedir. Bulu ayrica, bulusa uygun ve daha önce ifsa edildigi gibi bir insanlast'nllmls antikoru veya bunun bir fragmanlîiîkodlayan bir nükleotit sekansT içeren bir nükleotit molekülü ile Hususi olarak bulus, sEasßlla SEK KIM NO: 2 ve 3lte verildigi gibi komsu amino asit moleküllerinin bir parçasîlükodlayan bir nükleotit sekansj veya Ag& Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) Tamamlayßlül Belirleme Bölgeleri (CDRller) 2 ve 3'ü temsil eden tamamlay Zi Esekans üçeren bir nükleotit molekülü ile ilgilidir. Daha hususi olarak, bulus, SEK KIM NO: 4"te verildigi gibi komsu amino asit moleküllerinin bir parçasnl lkodlayan bir nükleotit sekans lveya Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) Tamamlayîllll'k Belirleme Bölgeleri (CDR"ler) l°i temsil eden tamamlay @Esekans Eiçeren bir nükleotit molekülü ile ilgilidir. Bir baska cephede, SEK KIM NO: 18 ve SEK KIM NO: 197da verildigi gibi bir nükleotit sekans Jveya Agm Zincir Degisken Bölgenin (HCVR) sîlasS/la CDR 2 ve CDR 3iün amino asit sekansßE kodlayan tamamlayßü sekansE içeren bir nükleotit molekülü tedarik edilmektedir. Bir baska cephede, SEK KIM NO: 207de verildigi gibi bir nükleotit sekans :lveya Hafif Zincir Degisken Bölgenin (LCVR) CDR Tin nükleotit sekansLnLkodlayan tamamlachU sekans J içeren bir nükleotit molekülü tedarik edilmektedir. Bulusun bir baska yapflanmaslîida, SEK KIM NO: 21 ,in bir nükleotit sekansîi`|veya hafif zincir degisken bölgeyi kodlayan tamamlaylc lsekansl içeren bulusuna göre bir nükleotit Bulusun bir baska yapmanmas Elda, bulusun nükleotit molekülü SEK KIM NO: 22'nin bir nükleotit sekansEiEîveya sinyal sekanlarjdahil olmak üzere tüm hafif zincir degisken bölgeyi kodlayan tamamlay E :sekans jçermektedir. Bulusun bir baska yap Jhnmas îlda, bulusun nükleotit molekülü SEK KIM NO: 227nin hafif zincir degisken bölgesini ve SEK KIM NO: 23°ün `hafif zincir sabit bölgesini kodlayan bir nükleotit sekansln içermektedir. Bulusun bir baska yaplltinmaslîida, bulusun nükleotit molekülü agT zincir degisken bölgeyi kodlayan SEK KIM NO: 24lün nükleotit sekansmüçermektedir. Bulusun bir baska yapElanmaslîlda, bulusun nükleotit molekülü sinyal sekanslarjda dahil olmak üzere tüm ag& zincir degisken bölgeyi kodlayan SEK KIM NO: 25lin bir nükleotit sekans Il Elçermektedir. Bulusun bir baska yapilanmasnda, SEK KIM NO: 25'in agbi zincir degisken bölgesini ve SEK KIM NO: 269n|n agln zincir sabit bölgesini kodlayan bir nükleotit sekansl liçeren bir nükleotit molekülü saglanmaktad n. Bulus ayr da, söz konusu nükleotit molekülünün tamamlayîil'dizisini de içermektedir. Burada ayrBa, bulusa ait yukarîla bahsedilen antikor-kodlayZlEnükleotit sekanslarßdan birine, hususi olarak da bunun tamamlayßEdizisine, ya tek bas îia ya da daha büyük bir nükleotit sekansEi i bir parças Eolarak melezlesen bir nükleotit sekans Ühtiva edilmektedir. Özellikle bulus, geleneksel melezlesme kosullarüaltîlda, hususi olarak skjmelezlesme kosullarü altßda, SEK KIM NOlar: 18-26 ve 29-32lde verilen nükleotit sekanslarlînîl herhangi birine, hususi olarak da bunlar& tamamlayßüdizisine melezlesen bir nükleotit sekans ile ilgilidir. Bulusun bir baska yap lanmas nda, bulusa uygun olan nükleik asit molekülünü içeren bir ifade vektörü tedarik edilmektedir. Bulusun bir baska yapilanmaslîida, bulusa uygun nükleik asidi içeren bir ifade vektörü içeren bir hücre tedarik edilmektedir. Yine bir baska yap flanmada, bulus, bulusa ait bir antikoru, fakat hususi olarak bulusa uygun olan ve burada daha önce tarif edilen bir kimerik antikoru veya bunun bir fragmaniü veya bir insanlastîmnß antikoru veya bunun bir fragmani& fonksiyonelolarak esdeger bütün antikorlar veya bunlari türevleri veya fonksiyonelparçalarEdahil olmak üzere, terapötik olarak etkili bir miktarda içeren bir kompozisyon ile ve hususi olarak istege bagljolarak farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasßißjda içeren bir farmasötik kompozisyon olan bir kompozisyon ile ilgilidir. Bulusun bir baska yapianmasßda, söz konusu bilesim, antikoru, terapötik olarak etkili bir miktarda içermektedir. Bulusta ayrlda, bulusa göre bir insanlastlrllm s antikor veya bunun bir fragmaninl, fonksiyonel parçalarFdahil olmak üzere, terapötik olarak etkili bir miktarda ve istege bagli-l olarak ilave biyolojik olarak aktif bir madde ve/veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasglß Eve/veya seyreltici ve/veya bir eksipiyan içeren bir karßlîn ifsa edilmektedir. Hususi olarak, bulus, ilave biyolojik olarak aktif maddenin, amiloidozun, amiloid veya mesela Alzheimer hastalEgEile alakaljAß proteini gibi amiloid-benzeri protein ile baglantlj bir grup hastall gln ilaçla tedavisinde kullanilan bir bilesik oldugu bir karlsllm ile ilgilidir. Bulusun bir baska yaplllanmasnda, diger biyolojik olarak aktif madde veya bilesik, amiloid ß°nlîl sebep oldugu amiloidozun tedavisinde kullanîlabilen veya diger nörolojik hastalklarß ilaçla tedavisinde kullanEIabilen bir terapötik ajan da olabilmektedir. Diger biyolojik olarak aktif madde veya bilesik, biyolojik etkisini, bulusa uygun antikor ile benzer veya aynübir mekanizma ile veya iliskisiz bir etki mekanizmasEile veya iliskili ve/veya iliskisiz etki mekanizmalariß bir çoklugu ile ortaya koyabilmektedir. Genel olarak, diger biyolojik olarak aktif bilesik sunlardihtiva edebilmektedir: nötron- transmisyon arttmßlar, fizikoterapötik ilaçlar, asetilkolin esteraz inhibitörleri, kalsiyum- kanaljblokerleri, biyojenik aminler, benzodiazepin sakinlestiricileri, asetilkolin sentez, depolama veya salLm arttLrLcllarL, asetilkolin postsinaptik reseptör agonsitleri, monoamin oksidaz-A veya -B inhibitörleri, N-metil-D-aspartat glutamat reseptör antagonsitleri, steroidal olmayan anti-inflamatuar ilaçlar, antioksidanlar ve serotonerjik reseptör antagonsitleri. Daha hususi olarak, bulus, oksidatif strese kars|`|etkili bilesikler, anti-apoptotik bilesikler, metal selatörler, pirenzepin ve metabolitler gibi DNA onarüh inhibitörleri, 3- amino-l- propansülfonik asit (3 APS), , a-sekretaz aktivatörleri, B- ve y-sekretaz inhibitörler, tau proteinleri nörotransmiter, ß-yaprak kEß Iar, amiloid beta temizleyici / tüketici hücresel bilesenler için çekiciler, piroglutamatlEamiloid beta 3-42 dâhil olmak üzere N-terminal kesikli amiloid beta inhibitörleri, anti-inflamatuar moleküller veya kolinesteraz inhibitörleri (ChEIler) mesela takrin, rivastigmin, donepezil ve/Veya galantamin, M1 agonistleri ve amiloid veya tau modifiye ilaçlar dahil olmak üzere baska ilaçlardan ve besin takviyelerinden olusan gruptan seçilen en az bir bilesigi, mevcut bulusa ait bir antikor ile ve istege bagl`blarak farmasötik olarak kabul edilebilir bir taslýlöWe/veya bir seyreltici ve/veya bireksipiyan ile birlikte içeren bir karEEh ile ilgilidir. Bulus ayrEa, bilesigin, bir kolinesteraz inhibitörü (ChEIler) oldugu bir karßüh ile, hususi olarak bilesigin, takrin, rivastigmin, donepezil, galantamin, niasin ve memantinden olusan gruptan seçildigi bir karßîn ile ilgilidir. Bir baska yapdanmada, bulusa uygun karLsmlar, niasin veya memantini, bulusa uygun bir antikor ve istege bagl blarak farmasötik olarak kabul edilebilir bir tas yldl ve/Veya seyreltici ve/Veya eksipiyan ile birlikte içerebilmektedir. Bulusun yine bir baska yapEIanmasEida, halüsinasyonlar, hezeyanlar, düsünce bozukluklarj (belirgin tutars ElEk, yardan çkma, tegetsellik ile aç ga çEkar) ve garip veya karßüêt davranß, bunun yanEsma zevk alamama, basÜllEk duygusu, apati ve sosyal geri çekilme gibi pozitif ve negatif psikotik semptomlarjtedavi etmek için, mesela klozapin, ziprasidon, risperidon, aripiprazol veya olanzapin gibi "atipikal antipsikotikleri", bir antikor ile, hususi olarak bulusa uygun bir monoklonal antikor ile, fakat hususi olarak bulusa uygun olan ve daha önce burada tarif edilen bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanLlveya bir insanlastlnllnls antikor veya bunun bir fragmanjile birlikte ve istege baglDolarak farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasgzßîlve/veya bir seyreltici ve/veya bir eksipiyan ile birlikte içeren kargînlar tedarik edilmektedir. Bulusun spesifik bir yapllanmaslnda, bulusa göre bilesimler ve karlSlmlar, slriaslyla antikoru ve biyolojik olarak aktif maddeyi, terapötik olarak etkili bir miktarda içermektedir. Mevcut bulusa uygun antikor ile kombinasyon halinde karßîhlar içinde elverisli olarak 16 ve l7aye bakmî), terapötik ilaç hedefleri (sayfa 36-39), alkansülfonik asitler ve alkanolsülfürik asitler (sayfalar 39-51), kolinesteraz inhibitörleri (sayfalar 51-56), NMDA reseptör antagonistleri (sayfalar 56-58), östrojenler (sayfalar 58-59), steroidal olmayan anti- inIlamatuar ilaçlar (sayfalar 60- 61), antioksidanlar (sayfalar 61-62), peroksizom çogaltßiar ile aktive edilen reseptör (PPAR) agonistleri (sayfalar 63-67) kolesterol-düsürme ajanlar] (sayfalar 68-75), amiloid inhibitörleri (sayfalar 75-77), amiloid olusum inhibitörleri (sayfalar 82), besin takviyeleri (sayfalar 83-89) ve biyolojik olarak aktif maddelerin beyin içinde kullan hlilfgîi Farttlîan bilesikler (sayfalar 89-93) ve ön-ilaçlar (sayfalar 94 ve 94). Bir baska yapüanmada, bulus, antikoru, hususi olarak bulusa ait bir monoklonal antikoru, fakat hususi olarak bulusa ait olan ve daha burada daha önce tarif edilen bir kimerik antikoru veya bunun bir fragmanlîijveya bir insanlastmümg antikoru veya bunun bir fragmanhîj ve/veya biyolojik olarak aktif maddeyi, terapötik olarak etkili bir miktarda içeren bir karßîn ile ilgilidir. Bulus ayr da, bulusa uygun olan ve burada daha önce tarif edilmis olan bir insanlast Illlmls antikorun veya bunun bir fragmannln ve/veya bunun fonksiyonelbir parçaslnln ve/Veya söz konusu antikoru içeren bir farmasötik kompozisyonun veya karßîhlîi, amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglant ]]Eamiloidoz dahil olinak üzere amiloid plakolusumu ile baglantilj bir grup hastalüî ve rahats âlfglh, sEiElandEBEblmamak sartßlla nörolojik hastalklar mesela Alzheimer Hastalgü(AD), Lewy cismi demansj Down sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamasJ(Hollanda tipi); Guam Parkinson-Bunama kompleksi; bunun yanEsEa amiloid- benzeri proteinlerle baglantüübaska hastalEklar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastalEgÇ Parkinson hastalEgJ HlV-baglantÜJE bunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yaslülfk kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon dahil diger hastalEklarEl tedavi edilmesi veya etkilerinin hafifletilmesi için bir ilaç haz Lnlanmas Liçin kullanhnLile de ilgilidir. Bulusta ayrlca, bulusa göre insanlast nllmls antikorun veya bunun bir fragmanlnln ve/veya bunun fonksiyonelbir parçaslîilîi ve/veya söz konusu antikoru ve/veya bunun fonksiyonelbir parças ni liçeren bir farmasötik kompozisyonun veya bir karls min, amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglant `ll-amiloidoz dahil olmak üzere amiloid plakolusumu ile baglantllî bir grup hastalüî ve rahats âlfglîi, sEiElandEBEblmamak sartßzla nörolojik hastalklar mesela Alzheimer HastalEgJ(AD), Lewy cismi demansü Downs sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamasJ(Hollanda tipi); Guam Parkinson-Bunama kompleksi; bunun yanüsma amiloid- benzeri proteinlerle baglantEDbaska hastalüîlar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastalEgÇ Parkinson hastalEg] HlV-baglantülE bunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yasllllfk kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon dahil diger hastalLklarn önlenmesi, tedavi edilmesi veya etkilerinin hafifletilmesi için, bir antikor, hususi olarak bulusa uygun bir monoklonal antikor, fakat hususi olarak bulusa uygun bir kimerik antikor veya bunun bir fragmanîveya bir insanlastîlfllnFs antikor veya bunun bir fragmanlîllîl farmasötik olarak kabul edilebilir bir formda formüle edilmesini içeren bir metot içinde kullanEnÜiçin, hususi olarak terapötik olarak etkili bir miktarda haz Elanmas Elçin bir metot ifsa edilmektedir. Ayrßa, bulus kapsamlîida amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglantÜJEamiloidoz dahil olmak üzere amiloid plak olusumu ile baglantmj bir grup hastalü& ve rahats Elfgß, sElElandEßZblmamak sartßzla nörolojik hastaltklar mesela Alzheimer HastalfgHAD), Lewy cismi demansd Downs sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamasU(Hollanda tipi); Guam Parkinson-Bunama kompleksi; bunun yanl 5 da amiloid-benzeri proteinlerle baglantll lbaska hasta] klar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastallgl,l Parkinson hastal'gî HIV-baglantfllîbunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yaslflk kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon dahil diger hastalklarüi, böyle bir hastalEktan etkilenmis bir hayvana veya bir insana, bir insanlastmûmg antikorun ve/veya bunun fonksiyonel bir parçasiß veya böyle bir antikoru ve/veya bunun fonksiyonel bir parçasiü içeren bir bilesimin veya karSEnEi verilmesi suretiyle önlenmesi, tedavi edilmesi veya etkilerinin hafifletilmesi için, antikorun terapötik olarak etkili bir miktarda verilmesini içeren bir metot tedarik edilmektedir. Bulusun bir diger amacü amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglantJDamiloidoz dahil olmak üzere amiloid plak olusumu ile baglanttlld bir grup hastalLk ve rahatszltgtn, slnlrlandlrld blmamak sartiyla Alzheimer Hastaligi (AD) gibi nörolojik hastallltlarln, hususi olarak bir bilissel haflzta kapasitesi kayb ile karakterize edilen bir hastal gln veya durumun, bir hayvana, hususi olarak bir memeliye veya bir insana, bulusa uygun ve burada tarif edildigi gibi insanlastnlllmls bir antikorun, hususi olarak bir farmasötik kompozisyonun verilmesi suretiyle tedavi edilmesi için bir metot tedarik etmektir. Spesifik bir yap [Ilanmada, bulus, bulusa göre tarif edilen bir insanlastEHmß antikorun, hususi olarak bir farmasötik kompozisyonun, hafîta bozuklugu çeken bir hayvana, hususi olarak bir memeliye veya bir insana verilmesi suretiyle bir hayvanEi, hususi olarak bir memelinin veya bir insanEi, bilissel hafâa kapasitesini muhafaza etmek veya artmmak, fakat hususi olarak bilissel hafßa kapasitesini restore etmek için bir metot ile ilgilidir. Bulusun bir baska amacü bulusa uygun ve daha önce tarif edildigi gibi bir antikor kullanLlarak, bir terapötik kompozisyon ve amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglant lll lamiloidoz dâhil olmak üzere amiloid plak olusuinu ile baglantll lbir grup hastallk ve rahatslzllgln, s nlrlandlnlcl | olmamak sart-yla Alzheimer HastalFglT(AD) gibi nörolojik hastaltklaril, hususi olarak bir bilissel hafâa kapasitesi kaybüile karakterize edilen bir hastalEgi veya durumun tedavi edilmesi için bir metot tedarik etmektir. Hususi olarak, bulus, bir bilissel hafâa kapasitesi kaybEile karakterize edilen bir amiloid- baglantJJEdurumdan rahatsültk çeken bir hayvanEl, hususi olarak bir memelinin veya bir insanîl tedavisi için bir metotta bulusun insanlastEEmE bir antikorunun kullanEhDile Bulus ilave olarak, bir hastada amiloid-baglantllll bir hastallg n veya durumun teshis edilmesi için, bir antikorun veya bunun aktif bir fragmanlîilîi, bir numune içinde veya in situ olarak, amiloid proteininin bir epitopuna immünospesifik baglanmasîilîi saptanmasüjiçeren bir metot ile ilgilidir, metot su ad Ehlar Eihtiva etmektedir (a) amiloid proteinini ihtiva etmesinden süphe edilen bir numunenin veya bir spesifik beden parçaslîJEl bulusa göre bir insanlastiümß antikor veya bunun bir fragmanüle ve/veya amiloid proteininin epit0puna baglanan antikor ile temasa geçirilmesi; (b) antikorun ve/veya bunun fonksiyonelbir parçasiß, bir immünolojik kompleks olusturmak için, amiloid proteinine baglanmas Era izin verilmesi; (c) immünolojik kompleksin olusumunun saptanmas Lve (d) immünolojik kompleksin varllglnln veya yoklugunun, numune veya spesifik beden parças iveya alanl içinde amiloid proteininin varllgl Veya yoklugu ile iliskilendirilmesi. Bulus ayrlda, bir doku ve/veya Vücut slvllarl liçinde amiloidojenik plak yükünün derecesini saptamak için asaglîiakileri içeren bir metot ile de ilgilidir (a) doku ve/veya vücut sîlßEnumunesinin, amiloid proteini varlgüiçin, bulusa göre insanlastEÜInß antikor veya bunun bir fragmanüve/veya bunun islevsel bir parças Jile test edilmesi; (b) proteine baglanan antikor miktarîlEl tespit edilmesi ve (c) doku veya vücut SEI EEhumunesi içindeki plak yükünün hesaplanmas 1 Hususi olarak, adlm bide, immünolojik kompleksin olusumu, immünolojik kompleksin varllgnln veya yoklugunun, amiloid proteininin varllgl veya yoklugu ile iliskili olacagl | sekilde belirlenmektedir. Bulusun bir baska yap [[anmas Gida, amiioid-baglantEEhastalklarm ve dummlarü saptanmasü ve teshisi için, bulusa uygun insanlastEJInß antikoru veya bunun bir fragmanßüve/veya bunun islevsel bir parçasEtElçeren bir test kiti tedarik edilmektedir. Hususi olarak, bulusv bulusa göre bir veya daha fazla antikoru içeren bir kap ve/veya bunun islevsel parças Jve bir immünolojik kompleks olusturmak için amiloid proteinine baglanmak ve immünolojik kompleksin varll g Iilti veya yoklugunun, amiloid proteininin varllgl veya yoklugu ile iliskili olacagi sekilde immünolojik kompleksin olusumunu saptamak amacyla kullanmak için talimatlar`liçeren amiloid ile iliskili hastall'klarîl tespit edilmesi için bir test kitini içermektedir. Bir baska cephede, SEK KIM NO: 27ade belirtildigi gibi bir degisken bölge içeren bir antikor veya bunun bir varyantEifsa edilmektedir. Bir cephede, antikoru bir hücre çizgisi ifade etmektedir. Bir baska cephede, SEK KIM NO: 29,da tarif edildigi gibi bir antikor geni veya bunun bir varyantZi'fsa edilmektedir. Bir cephede, bir hücre çizgisi, antikoru ifade etmektedir. Bir baska cephede, bulus önceden olusturulmus beta-amiloid fiberlerin çözüstürülmesi için, bir hC2 antikorunun, Önceden olusturulmus beta-amiloid fiberleri ile etkilesmesini içeren bir metot ile ilgilidir. Bir baska cephede, bulusun insanlastlîfllns antikoru veya bunun bir fragmanînöronlarlîl Abeta-uyar Enl Ekümelesmeden kommaktad E. Bir baska cephede, bulus Abeta-uyarEhlEnöron kümelesmesini önlemek için, nöronlarEi, bulusa göre bir insanlastEÜInS antikorun veya bunun bir fragmanßEi etkili bir miktarüile islem görmesini içeren bir metot ile ilgilidir Bir baska cephede, bulus nöronlaan, Abeta oligomerine maruz kaliimasLl üzerine dejenerasyonunu önlemek için, bir ilaç haziilanmasll amac yla, bulusa göre bir insanlastlrlllnlsl antikorun veya bunun bir fragmannln kullanim ile ilgilidir. SEKILLERIN VE SEKANSLARIN KISA AÇIKLAMASI Sekil 1 (Örnek 2): Kimerik Antikorun fare hafif zincir degisken bölgesinin Ekspresyon Kaseti Sekil 2 (Örnek 2): Kimerik Antikorun fare agm zincir degisken bölgesinin Ekspresyon Kaseti Sekil 3 (Örnek 5.2): Fare agi zincir degisken bölgesinin, en yakEl murin germ hattEsekansJ ile kars LlastnLlrmsJ Sekil 4 (Örnek 8): Saflastlrllmls insanlast Illlmls C2 antikorlar nin aktivitesi Sekil 5 (Örnek 9): Geçis transfeksiyon tarafindan olusturulan kimerik antikor C2ChVHAF/ChVK ve saflastîlfllnl's antikor ile kars llastlilldgilda, C2 kimerik agî zincir ile baglantllE olarak C2 modifiyeli CDRL2 yap [[ariEi geçis ekpresyonu taraf Ildan üretilen antikorlarlîi baglanma aktivitesi. Sekil 6 (Örnek 11): Kimerik antikor AF ve insanlastEJInß antikor H4K1 ile Immünohistokimyasal Baglama Deneyinin neticeleri. Sekil 7 (Örnek 12): Amiloid fiberleri üzerinde mC2*nin islevselligi Sekil 8 (Örnek 12): ELISA'da insanlastEJhiS C27nin Baglanma Afinitesi. Sekil 9 (Örnek 14): Amiloid proteininin farklüslîiüllarßa, mC27nin, konformasyon spesiIik baglanmasü Bu Seklin aç Elama yazßîidaki topak preparasyonu, Aß1_42,ye at& yapmaktad& ve üst-faz preparasyonu, amiloid monomerlerine atjîyapmaktad 3. Sekil 10: Murin sekansl lile ve insan akseptör sekanslarl |DPK15 ve .IKI ile karsllastliillan insanlastlrllrnls C2 VK sekanslar l Sekil 1 1: Murin sekansl lile ve insan akseptör sekanslar |DP54 ve JH6 ile karsllastlrlllan insanlast&[1}n@ C2 VH sekanslarj Sekil 12: C2 insanlastiüînß antikorunun (C2HuVK1) hafif zincir degisken bölgesinin komple DNA ve protein sekansl Sekil 13: insanlast&[[m3 C2 antikorunun hafif zincir sabit bölgesinin (insan C Kappa) komple DNA ve protein sekansl Sekil 14: insanlastiülnß C2 antikorunun ag& zincir sabit bölgesinin (insan IgG4 ser228-pr0) komple DNA ve protein sekansl Sekiller 15A-C (Örnek 15): Epitop Haritalama deneylerinin neticeleri Sekil 16 (Örnek 13): Kümelesme analiz deneylerinin neticeleri Sekil 17 (örnek 13): Çözüsme analiz deneylerinin neticeleri Sekil 18 (Örnek 16): Insanlast&[1]n3 antikor C2 ile nöro-koruma deneylerinin neticeleri. SEK KIM NO: 1: C2 HuVH AF 4 insanlastmülmg ag& zincir degisken bölgesinin (CDRl) amino asit sekansE SEK KIM NO: 2: C2 HuVH AF 4 insanlastmmmg ag& zincir degisken bölgesinin (CDR2) amino asit sekans& SEK KIM NO: 3: C2 HuVH AF 4 insanlastßmmß ag& zincir degisken bölgesinin (CDR3) amino asit sekansl : SEK KIM NO: 4: C2 HuVK 1 insanlastlrtllms hafif zincir degisken bölgesinin (CDRl) amino asit sekansl SEK KIM NO: 5: C2 HuVK 1 insanlastlnllms hafif zincir degisken bölgesinin (CDR2) amino asit sekansl SEK KIM NO: 6: C2 HuVK 1 insanlastmEImS hafif zincir degisken bölgesinin (CDR3) amino asit sekansE SEK KIM NO: 7: AB epitop bölgesi 2`nin amino asit sekansE SEK KIM NO: 8: Aß epitop bölgesi lin amino asit sekansü SEK ID NO: 9: Modifiyeli Aß epitop bölgesi 2,nin amino asit sekansE SEK KIM NO: 10: Modifiyeli Aß epitop bölgesi lin amino asit sekansE SEK KIM NO: 11: Komple modifiyeli epitop bölgesinin amino asit sekansE SEK KIM NO: 12: C2 HuVK 1 insanlastßmnß hafif zincir degisken bölgesinin amino asit sekans l 13: C2 insanlastlrllm s hafif zincirin amino asit sekansl ' 14: C2 insanlastlrllm s hafif zincir sabit bölgesinin amino asit sekansl SEK KIM NO: 15: C2 HuVH AF 4 insanlastmllmß agm zincir degisken bölgesinin amino asit sekansE 16: 02 insanlastîtlmg agm zincirin amino asit sekans 3 17: 1G GAMMA-4 ZINCIR C BÖLGESI - modifiyeli amino asit sekansl SEK KIM NO: 18: C2 HuVH AF 4 insanlastmlnß ag& zincir degisken bölgesinin CDR2"Sinin nükleotit sekansl SEK KIM NO: 19: C2 HuVH AF 4 insanlastEJInEs ag& zincir degisken bölgesinin CDR3"ünün nükleotit sekansl 1 SEK KIM NO: 20: C2 HuVK 1 insanlast 11`lrn|s hafif zincir degisken bölgesinin CDRTinin nükleotit sekansl SEK KIM NO: 21: C2 HuVK 1 insanlastEJInB hafif zincir degisken bölgesinin nükleotit SEK KIM NO: 22: C2 insanlastiümß hafif zincirin nükleotit sekans 3 SEK KIM NO: 23: C2 insanlast mü'mß hafif zincir sabit bölgesinin nükleotit sekansü SEK KIM NO: 24: C2 HuVH AF 4 insanlastEJInS aglî zincir degisken bölgesinin nükleotit SEK KIM NO: 25: C2 insanlastîlmß agE zincirin nükleotit sekans :l SEK KIM NO: 26: C2 insanlastiillrnls' aglr zincir sabit bölgesinin nükleotit sekansl | SEK KIM NO: 27: Fare C2 HafifZincir Degisken Bölgesinin amino asit sekans l SEK KIM NO: 28: Fare C2 Ag 11 Zincir Degisken Bölgesinin amino asit sekans l SEK KIM NO: 29: Fare C2 Hafif Zincir Degisken Bölgesinin nükleotit sekans' | SEK KIM NO: 30: Fare C2 HafifZincirin nükleotit sekansl l SEK KIM NO: 31: Fare C2 Agi Zincir Degisken Bölgesinin nükleotit sekansj SEK KIM NO: 32: Fare C2 Agi Zincirin nükleotit sekansü TANIMLAR Burada kullan [Ian geçebilmektedir ve bir peptit bagEile baglanan amino asitlerden olusan bir biyo- molekül anlam Eia gelmektedir. ve rahatslztllklar" ifadesi, S nlriland rildl olinamak sartlyla, monomerik, fibril veya polimerik durumdaki veya bu üçünün herhangi bir kombinasyonundaki amiloid- benzeri proteinlerin varllg nin veya aktivitesinin sebep oldugu hasta] klarl îve rahatslZllklarl ihtiva etmektedir. Bu hasta] klar ve rahats lilllîtlar, slîiîllandlîlöFblmamak sart yla, amiloidoz, endokrin tümörleri ve maküler dej enerasyonu ihtiva etmektedir. amiloid plakolusumu ile baglantEIJE bir grup hastalik ve rahatsâlga atÜi yapmaktadî, sElElandEEîjolmamak sartßtla Alzheimer HastalEg](AD) gibi nörolojik hastalRlar, bilissel haflîa kapasitesinde bir kayit ile karakterize edilen hastalklar ve durumlar, mesela hafif bilissel bozukluk (MCI), Lew cismi demansLJ Down sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamas |(Hollanda tipi); Guam Parkinson-Bunama kompleksi; bunun yanl slra amiloid- benzeri proteinlerin sebep oldugu veya bunlarla baglant lll baska hastaliklar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz, Creutzf'led Jacob hastalfglî Parkinson hastaligm HIV- baglantllEbunaina, ALS (amyotropik lateral skleroz), inklüzyon cisimcigi miyoziti (IBM), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet ve yasl]][k kardiyak amiloidozu ve çesitli göz hastalÜîlarÇ mesela maküler dejenerasyon, drusen-baglantJJEoptik nöropati ve beta-amiloid birikmesi yüzünden katarakt. Burada kullanEan "saptamak" veya "saptanan" terimleri, biyolojik moleküllerin saptanmasü için, immünokimyasal veya histolojik metotlar gibi bilinen tekniklerin kullanLltnas Lanlam Lna gelmektedir ve inceleme alt ndaki biyo-molekülün varllg nin veya konsantrasyonunun nitel veya nicel olarak belirlenmesine atvfl yapmaktadlr. modifiye veya kesik amiloid peptitlerinin veya amiloid peptitlerinin baska türevlerinin, memeli veya insan gövdesi içinde hususi olarak beyin Içinde çözünür oligomerik veya polimerik yapE[ar olusturan çoklu kümelesmis monomerlerine atü'i yapmaktadE, hususi olarak, amiloid ß,nîi (AB) veya modifiye veya kesik amiloid ß (Aß) peptitlerinin veya bunlari türevlerinin, memeli veya insan gövdesi içinde hususi olarak beyin içinde çözünür olan çoklu kümelesmis monomerlerine atEfl yapmaktad E. peptitlerine, amiloid ß öncül proteinine (APP), bunun yanisia bunlarEi modifikasyonlarma, fragmanlarma ve bütün fonksiyonelesdegerlerine atffl yapmaktadn Hususi olarak, burada kullanlan amiloid [3 ile, APP9nin proteolitik parçalanmasl ile üretilen herhangi bir fragman ifade edilmektedir, fakat özellikle, slnlrlandlrlc olmamak sartlyla Aß 1-33, AB 1-39, AB 1.40` Aßi. 41, Aß1-42, Aß1-43 dahil olmak üzere, amiloid ßatolojileri ile alakalEveya baglantüüolan Yukarlîla bahsedilen yapE] ve sekanslar alanda tecrübe sahibi kimseler tarafEidan iyi bilinmektedir ve söz konusu peptitleri üretmek için veya bunlarl beyinden veya baska dokulardan çlkarmak için metotlar, mesela Glenner and Wong, Biochem Biophys Res Comm formlarda ticari olarak da temin edilebilmektedir. muaf olan bir biyolojik molekül kastedilmektedir. Burada kullan lan "antikor" veya "antikorlar" terimleri, alanda bilinen terimlerdir ve bilinen antijenlere, hususi olarak immünoglobulin moleküllerine ve immünoglobulin moleküllerinin immünolojik olarak aktif kLsLmlar Lna baglanan moleküllere veya moleküllerin fragmanlar ma, yani bir antijene spesifik olarak baglanan bir baglanma alanl ihtiva eden moleküllere atlf yapmaktadlrl. Bir immünoglobulin, büyük ölçüde, immünoglobulin kappa ve lambda, alfa, gamma, delta, epsilon ve mu sabit bölge genleri ve bunun yan`| slîa çok sayFda immünoglobulin degisken bölge genleri taraflîidan kodlanan bir veya daha fazla polipeptit içeren bir proteindir. Hafif zincirler, ya kappa ya da lambda olarak 5 Elfflandmmnaktadlî Ag& zincirler, gamma, mu, alfa, delta veya epsilon olarak sEiEfllandEJInaktadm ki bu da slîas Slla alt-süîlarüia bilinmektedir. Mesela, insanlarda IgG agm zincirler, herhangi bir IgGl, IgG 2, molekülünün herhangi bir siijLndan (IgG, IgM, IgD, IgE, IgA ve IgY) veya altsLnLfandan (IgGl, IgG 2, IgG 3 ve IgG 4, IgAl ve IgAZ) olabilmektedir. Burada bir antikora iliskin olarak kullanman "spesifik olarak baglanmaktadî,, antijenin, kendi hedef antijenine, yapSal olarak farklLbir antijene (antijenlere) baglandlglndan daha büyük bir afinite ile baglandlgl anlamina gelmektedir. Tipik bir immünoglobulin yapi-sal biriminin, bir tetramer içerdigi bilinmektedir. Her bir tetramer, iki özdes polipeptit zinciri çiftinden olusmaktadln, her bir çift, bir "hafif (yaklaslk kD) ve bir "agl'rl" zincire (yaklask sahiptir. Her bir zincirin N- ucu, birincil olarak antijen tanünadan sorumlu olan yaklasfk 100 ila 110 aras îida veya daha fazla amino asitten olusan degisken bir bölge belirlemektedir. Degisken hafif zincir (VL) ve degisken ag& zincir (VH) terimleri, sias @la hafif ve agi zincirlere atüiyapmaktadm. Antikorlar, tam boy dokunulmamg antikorlar olarak çesitli peptidazlar veya kimyasallar ile sindirim suretiyle üretilen birkaç iyi-karakterize edilmis fragmanlar olarak mevcuttur. Dolaylslyla, mesela, kendisi, bir disülfit bagLtarafmdan VH-CH1°e birlestirilen bir hafif zincir olan bir Fab dimeri F(ab,)2 üretmek için, pepsin, eklem bölgesi içindeki disülfit baglantlarlnn altlnda bir antikoru sindirmektedir. F(ab°)2, eklem bölgesi içindeki disülfit baglarîilîkîlmak için l'lllînlîkosullar altîida indirgenebilmekte, böylece F(ab')2 dimeri, bir Fab, monomerine dönüstürülmektedir. Fab* monomeri, mentese bölgesinin parças jile aslen bir Fab fragmanüm (diger antikor fragmanlarßß daha detaylüaçfklamasjiçin, bakßâ Fundamenral Immunology W. E. Paul, ed., Raven Press, N. Y. (1993)). Çesitli antikor fragmanlarÇ dokunulmamgg bir antikorun sindirilmesi bakünEidan taniilanmß olmakla birlikte, alanda tecrübe sahibi olan bir kimse, çesitli antikor fragmanlarîlEi herhangi birinin, kimyasal olarak ya da rekombinant DNA metodolojisi kullanjhrak yeniden sentezlenebilecegini anlayacaktLri Dolaylsyla, burada kullanllan antikor terimi, ayni zamanda, ya bütün antikorlarln modifikasyonu ile elde edilen ya da yeniden sentezlenen antikor fragmanlarlnl | ve rekombinant DNA metodolojileri kullanlarak elde edilen fragmanlarîda ihtiva etmektedir. antikorlarlÇkimerik, tek Zincirli, bispesifik, simianize, insan ve insanlastîühiß antikorlar ve bunun yanEsma bunlari fragmanlarßüihtiva etmesi amaçlanmaktadi. Bilinen antijenlere baglanan moleküllerin aktif fragmanlarßlîi örnekleri, bir Fab immünoglobulin ekspresyon kitaplgElü ürünlerini ve yukarEla bahsedilen antikorlarül ve fragmanlarîl hepsinin epitop- baglama fragmanlarjdâhil olmak üzere, ayrülnß hafif ve ag& zincirler Fab, Fab/c, FV, Fab" ve F(ab7)2 fragmanlarîlühtiva etmektedir. Bu aktif fragmanlar, mevcut bulusa ait bir antikordan, birkaç teknik ile türetilebilmektedir. Mesela, monoklonal antikorlar, mesela pepsin gibi enzim ile parçalanabilmekte ve daha sonra HPLC jel filtrasyonuna maruz bîlakllmaktadlîl. Fab fragmanlarlîilîihtiva eden uygun fraksiyon, bundan sonra, membran filtrasyonu Vb. ile toplanabilmekte ve konsantre edilebilmektedir. Antikorlarlîl aktif fragmanlarlîlîi izolasyonu için genel tekniklerin daha Rekombinant olarak yapjhn antikorlar, geleneksel tam boy antikorlar, proteolitik sindirimden bilinen aktif antikor fragmanlar: mesela FV veya tek zincirli FV (scFv) gibi özgün aktif antikor fragmanlar: alan silinmis antikorlar ve benzerleri olabilmektedir. Bir FV antikoru, boyutça yaklasLk 50 Kdidir ve hafif ve agLij zincirin degisken `bölgelerini içermektedir. Bir tek zincirli FV ("scFV") polipeptit, esdegerlikli olarak baglanmlsl bir VHzzVL heterodiinerdir ki bu, ya dogrudan baglanan ya da bir peptit- kodlama baglay'dISI ' taraflîldan baglanan VH- ve VL-kodlama sekanslarlîi Üihtiva eden bir nükleik asitten ifade Dogal olarak kümelesmis, fakat bir antikor V bölgesinden kimyasal olarak ayrEImß hafif ve ag& polipeptit zincirlerinin, bir antijen-baglama alanEiEi yapßîia büyük ölçüde benzeyen üç boyutlu bir yapgza katlanacak olan bir scFV molekülüne dönüstürülmesi için birkaç yapE Birlesme aland bir antikor molekülünün, antijen baglanmaslna istirak eden parçasLiia at& yapmaktadlri. Antijen baglama alan ,| aglr ("H") ve hafif ("L") zincirlerin N-terminal degisken ("V") bölgelerinin amino asit kallntllarl ltaraflndan olusturulmaktadii. Antikor degisken bölgeleri, üç yüksek derecede ayr`lparça içermektedir: "yap`lbölgeleri" (FRler) olarak bilinen daha korumalEyan parçalar arasßa yerlestirilmis olan "hiper- degisken bölgeler" veya "tamamlayBJlEk belirleme bölgeleri" (CDR"ler). Bir antikor molekülü içinde, bir hafif zincirin üç hiper-degisken bölgesi (LCDRl, LCDR2 ve LCDR3) ve bir aglî zincirin (HCDRl, HCDR2 ve HCDR3) üç hiper-degisken bölgesi, bir antijen baglama yüzeyi veya cebi olusturmak için, üç boyutlu uzayda birbirlerine göre tanzim edilmektedir. Bu sebeple, antikor birlesme alanü bir antikorun CDR,lerini olusturan amino asitleri ve baglama alan: cebini olusturan bütün yap :kal mt [Bar 1 lemsil etmektedir. Hususi bir antikor içindeki, birlesme alanniolusturan amino asit kaantLlJarnn özdesligi, teknikte iyi bilinen metotlarla belirlenebilmektedir. Mesela, antikor CDRlleri, orijinal olarak Kabat V.d. taraflndan tanlmlanan hiper-degisken bölgeler olarak belirlenebilmektedir (bakmî, "Sequences of Proteins of lmmunological Interest", E. Kabat V.d. U.S. Department of Health and Human Services; Johnson, G ve Wu, TT Kabat Database and its applications future directions. Nucleic Acids Research, 29: 205-206; http://immuno.bme.nwa,edu). CDR,lerin pozisyonlarE orijinal olarak Chothia V.d. tarafßdan tarif edilen yapßal halka yapElar olarak da tanßilanabilmektedir (bakEiEl Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196, 901 (1990)). Diger metotlar, Kabat ve Chothia arasßda bir fikir birligi olan ve Oxford Molecularss AbM antibody modeling software (simdi Accelrys) kullanEarak elde edilen antigen interactions: contact analysis and binding site topography" J Mol Biol. 1996 Oct 11; 262(5): 732-45) ihtiva etmektedir. Halka Kabat AbM Chothia Kontakt (Kabat Numaralama) (Chothia Numaralama) Bir antikor içindeki CDR"leri sadece sekanstan belirlenebilmesi için genel ilkeler asagîlaki Baslama - Yaklasfk olarak kalhtFîZ4 Önceki kal [Int :her zaman bir Cys"dir. Sonraki kal Eltüher zaman bir Trpidir. Tipik olarak TRP, TYR-GLN ile takip edilmektedir, fakat ayrlda LEU-GLN, PHE-GLN veya TYR-LEU taraf ndan takip edilmektedir. Baslama - Ll in sonundan sonra 16 kal liltlîl Önceki sekans, genel olarak 1LE-TYR"dir, fakat ayrüa VAL-TYR, ILE-LYS veya ILE- PHE de olabilmektedir. Uzunluk genellikle 7 kal Eltîli Baslama - L2'nin sonundan sonra genel olarak 33 kal ENBE. Önceki kal Lnt _bir Cys7dir. Sonraki sekans, PHE-GLY-X-GLY3dir. Uzunluk 7 ila 11 kalntldln. Baslama - yaklasüî olarak kal lîitE26 (bir CYS'den sonra dört kalßt] [Chothia / AmB tanEhEJ Kabat tanEnE 5 kal mt [Sonra baslamaktad 3. Önceki sekans CYS-X-X-X,dir. Sonraki kal EltElar, tipik olarak VAL tarafßdan takip edilen fakat aynEzamanda ILE veya ALA taraflrldan da takip edilen bir TRP'dir. Uzunluk, AbM tanmUaltLnda 10 ila 12 kallntd iken Chothia tanlml, son 4 kallnt yi dlsarlda b nakmaktadln. Baslama - Kabat /AbM CRD-Hl tanEnEilIl sonundan sonra 15 kal Git] Önceki sekans tipik olarak LEU-GLU-TRP-ILE-GLYHir, fakat birkaç varyasyon mümkündür. Sonraki sekans LYS/ARG-LEU/ILE/VAL/PHE/THIUALA-THR/SER/ILE/ALA'dm. Uzunluk, Kabat tanEnE alt îlda 16 ila 19 kal îltElB (AbM tanEnÇ 7 kal ütjdaha erken bitmektedir). Baslama - CDR-H2"nin sonundan sonra 33 kallrtt (bir CYS,den sonra iki kal ntl). Önceki sekans CYS-X-X,dir (tipik olarak CYS-ALA-ARG). Sonraki sekans TRP-GLY-X-GLYHir. Uzunluk 3 ila 25 kal îitlîllîl. Hususi bir antikor içinde, CDRilerin dßida olan, fakat bununla birlikte birlesme alanßm kaplamasßüi bir parçasjbir yan zincire sahip olmak suretiyle birlesme alan iii parçasEiJ olusturan (yani birlesme alanE vasEfasßlla baglantßla müsait) amino asit kal mtJhrEiß özdesligi, mesela moleküler modellerine ve X-SßEkristalografi gibi alanda iyi bilinen Kimerik antikorlar, antikorun bir veya daha fazla bölgesinin bir hayvan türünden ve antikorun bir veya daha fazla bölgesinin farlebir hayvan türünden oldugu antikorlardü. Tercih edilen bir kimerik antikor, bir primat immünoglobulininden bölgeler ihtiva eden bir kimerik antikordur. Insan klinik kullanßiüçin bir kimerik antikorun, tipik olarak, bir insan- olmayan hayvandan mesela bir kemirgenden degisken bölgelere, bir insandan sabit bölgelere sahip oldugu anlas [[maktadm Tersine, bir insanlastmümg antikor, insan olmayan antikordan CDRller kullanmakta, degisken yap :bölgelerinin çogunlugu veya tamamElve sabit bölgelerin tamameir insan immünoglobulininden olmaktadlii Bir insan kimerik antikorunun, tipik olarak, bir kemirgenden degisken bölgelere sahip oldugu anlaslllnaktadlr. Tipik bir insan kimerik antikoru, insan ag 11 zincir sabit bölgelerine ve insan hafif zincir sabit bölgelerine sahiptir, hem aglî hem de hafit` degisken bölgeleri bir kemirgen antikorundan gelmektedir. Bir kimerik antikor, insan sabit bölgelerinin bir dogal amino asit sekansîia ve dogal kemirgen degisken bölge sekansma bazE degisiklikler içerebilmektedir. Kimerik ve insanlastîüînß antikorlar, CDR aslama yaklas Bilarü (bakEiE mesela U.S. Patent (bakmî mesela U.S. Patent No. gibi, alanda iyi bilinen metotlar ile haz Elanabilmektedir. Burada kullan &an bir "insanlastlijtlmsl antikor", iki zincirli bir antikor durumunda, en az bir zincirin insanlastlnllms oldugu bir antikordur, insanlastlnllmlsl bir antikor zinciri, yap | bölgelerinin bir veya daha fazlas nin insan oldugu bir degisken bölgeye sahiptir. Bir tek zincirli olan bir insanlastlîtllnê antikor, yapîaölgelerinin bir veya daha fazlas `insan olan bir degisken bölgeye sahiptir. Insanlastînllmls antikor zincirinin veya bunun bir fragman nin degisken bölgesinin insan-olmayan kîl'rhlarîl tipik olarak kemirgen orijinli bir insan- olmayan kaynaktan, hususi olarak bir Insan-olmayan antikordan türetilmektedir. Insanlastßmn& antikora insan-olmayan katkßj tipik olarak, bir (veya daha fazla) insan immünoglobulininden elde edilen yap :bölgeleri aras &a serpilmis olan en az bir CDR bölgesi olusturmak için tedarik edilmektedir. Ilave olarak, yap& destek kalitüarj baglanma atinitesini korumak için tadil edilebilmektedir. InsanlastLrlhnLs antikor, ayrda, sabit bölgeler (mesela bir hafif zincir durumunda en az bir sabit bölge veya bunun bir klsml .ve bir aglr zincir durumunda tercihen üç sabit bölge). Bir insanlastlrllmls antikorun eger varsa sabit bölgeleri, genel olarak insandlr. Bir "insanlastîülnß antikor", ayr&a, mesela tavsanlar ve fareler gibi hayvanlarda afinite- olgunlasm& insan-benzeri poliklonal antikorlar& üretilmesine imkân veren yeni bir genetik mühendisligi yaklasmJle de elde edilebilmektedir. BakLanl, U.S. Pat. No. 6,632,976. Burada kullanllan sabit bölge (CR) terimi, immünoglobulinin sabit bölge genlerine atlf yapmaktadlrt Sabit bölge genleri, antikor molekülünün, efektör fonksiyonlarl Neren ksmln l kodlamaktad&. Kimerik insan antikorlar`lve insanlast&llm7s antikorlar için, tipik olarak insan-olmayan (inesela murin) sabit bölgeleri yerine, insan sabit bölgeleri konulmaktad& Söz konusu kimerik veya insanlastiüln& antikorlar& sabit bölgeleri, tipik olarak insan immünoglobulininden elde edilmektedir. Ag& zincir sabit bölge, su bes izotipin herhangi birinden seçilebilmektedir: alfa, delta, epsilon, gamma veya mu. Bundan baska, degisken alt- s&[flarda ag& zincirler (mesela ag& zincirlerin IgG altsBEflarj gibi), farkli efektör fonksiyonlar&dan sorumludur ve dolayêßtla arzu edilen ag& zincir sabit bölgesini seçmek suretiyle, arzu edilen efektör fonksiyonuna sahip antikorlar üretilebilmektedir. Mevcut bulusun alanEdâhilinde kullan Jhbilen sabit bölgeler, gamma 1 (IgG 1), hususi olarak gamma l (IgG l) izotipinin bir FC bölgesi, gamma 3 (IgG 3) ve özellikle gamma 4 (IgG 4). Hafif zincir sabit bölgesi, kappa veya lambda tipi, tercihen kappa tipi olabilmektedir. Bir yapllanmada, hafif zincir sabit bölgesi, insan kappa sabit zinciridir (Heiter V.d. (1980) Cell 22: 1 97-207) ve aglî' sabit zincir, insan IgG4 sabit zinciridir. hücresinin ürünü olan bir antikora atîi yapmaktadm. Monoklonal antikorlar, tipik olarak, normal olarak kBa-ömürlü, antikor-üretme B hücresinin, mesela bir kanser hücresi gibi bir hlîtlßbüyüyen hücre (bazen bir "ölümsüz" hücre olarak adlandiüinaktadm) içine kaynastiîmasüsuretiyle yapülnaktadE. Elde edilen hibrit hücre veya hibridom, hBlDbir sekilde üremekte, antikoru üreten bir klon meydana getirmektedir. Mevcut bulusun amac Jdogrultusunda, "monoklonal antikor" aerda, tam monoklonaliteye henüz ulasmamls olan bir anne klon taraflndan da üretilebilecegi anlas lmaktadlrt asagßaki fonksiyonel özelliklerden en az birini paylasan bir antikora atEf yapmaktadî: ß- amiloid proteinine, hususi olarak Aß1_42 proteinine ve daha hususi olarak Aß-proteininin 16- 21 epitop bölgesine baglanma özgünlügü, in vitro immünoreaktiIlik, Aß1_42m0nomerlerinin, yüksek moleküler polimerik fibrillere kümelesmesinin inhibisyonu veya önceden olusturulmus Aß 1-42 polimerik fibrillerin çözüstürülmesi ve/veya bir ß-yaprak kîlma özelligi ve profilaktik olarak veya terapötik olarak verildiginde amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglantJJEamiloidoz dahil olmak üzere amiloid plak olusumu ile baglantEDbir grup hastalk ve rahats Elgm, slIiElandEBD olmamak sartglla nörolojik hastalklar mesela Alzheimer HastalEgJ(AD), Lewy cismi demansü Downs sendroinu, amiloidozlu irsi beyin kanamasj(Hollanda tipi); Guam Parkinson-Bunama kompleksi; bunun yanEsEa amiloid- benzeri proteinlerle baglantüübaska hastalEElar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastalîgü Parkinson hastalEg] HIV-baglantJlE] bunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yaslÜlEk kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon dahil diger hastalklarlîl etkilerinin hafifletilmesi. Antikorlar, mesela IgG, IgM veya IgA vb. gibi herhangi bir sßEf veya hususi olarak IgG4 alt 35111` olmak üzere mesela IgGl, IgGZa Vb. gibi herhangi bir alt-sEiIl veya yukarkla bahsedilen veya alanda bilinen ait-SLnlflar olabilmektedir. Bundan baska, antikorlar, mesela faj gösterme gibi herhangi bir metotla üretilebilmektedir veya insanlastln lmls antikorlar gibi arzu edilen karakteristiklere sahip antikorlarl üreten bakteriler, böcekler, memeliler veya baska tip hücre veya hücre çizgisi gibi herhangi bir organizma veya hücre çizgisi içinde üretilebilmektedir. Antikorlar, farkll türlerden bir Fab klsm ni lve bir PC bölgesini birlestirmek suretiyle de olusturulabilmektedir. Kullan Jhn "hibridize" terimi, geleneksel hibridizasyon kosullarma, tercihen, solüsyon olarak 5xSSPE, %1 SDS, lxDenhardts solüsyonunun kullanmdtgjve hibridizasyon sBaklRlarEii 0C ve 70 °C arasmda oldugu, tercihen 65 °C oldugu hibridizasyon kosullaria atEf yapmaktadm. Hibridizasyondan sonra, yikama, tercihen ilk olarak 2xSSC, %1 SDS ile ve yürütülmektedir (SSPE, SSC ve Denhardts solüsyonunun tanmJiçin, bakmz Sambrook V.d. evvelce bahsedilen eser). Mesela yukarlda ad. lgeçen Sambrook V.d. tarafindan tarif edildigi gibi skl 'hibridizasyon kosullarl,l hususi olarak tercih edilmektedir. Hususi olarak tercih edilen sFlEtFliibridizasyon kosullarlîmesela eger hibridizasyon ve ylkama, yukarRla belirtildigi gibi 65 °Cide gerçeklesirse mevcuttur. Mesela hibiridizasyon ve yEkamanîl 45 °C ve daha düsük sßaklügtta gerçeklestirildigi sEkE olmayan hibridizasyon kosullarj daha az tercih edilmektedir. Iki sekans arasEidaki "homoloji", sekans özdesligi ile belirlenmektedir. Eger birbirleri ile karslIastElIacak olan iki sekans, uzunluk bakîhîldan farkljise, sekans özdesligi tercihen, klea sekansLn, uzun sekansn nükleotit kaantlarLile özdes olan nükleotit kalmtLlarnLn yüzdesi ile iliskilidir. Sekans özdesligi, mesela Besttît programl (Wisconsin Sequence Analysis PAckage, Version 8 for Unix, Genetics Computer Group, University Research Park, 575 Science Drive Madison, W] 5371]) gibi bilgisayar programlarFkullanITarak geleneksel olarak tespit edilebilmektedir. Bestfit, iki sekans araslîidaki en yüksek sekans Özdesligine sahip segmenti bulmak amacßlla Smith and Watermanniîi lokal homoloji bir sekansß, mevcut bulusa ait bir referans sekans ile mesela %95 özdeslige sahip olup olmadEgßEtespit etmek için Bestfit veya baska bir sekans hizalama programjkullanJJdEgJ zaman, tercihen, parametreler, özdeslik yüzdesinin, referans sekansEi bütün uzunlugu boyunca hesaplanacagüve referans sekans içinde nükleotitlerin toplam sayßßß %51ine kadar homoloji bosluklarîia izin verilecegi sekilde ayarlanmaktadm. Bestfit kullanmiken, istege baglLdenilen parametreler, tercihen, önceden belirlenmis ("Varsaytlan") degerlerinde blnakllmaktad ii. Belli bir sekans ve bulusa ait yukar da-tarif edilen sekanslar araslndaki karsilastlnmada ortaya çlkan sapmalara, inesela ilave, ç kartma, ikame, katma ve rekombinasyon sebep olabilmektedir. Böyle bir sekans karsllastîlmaslîl tercihen, R. Pearson and the University of Virginia; aychla bakîlel W.R. Pearson (1990), Methods in Bulusa göre antikor, bir immünoglobulin veya antikor olabilmektedir ki bunun baglanma alanlarIIEl her birinin özdes oldugu (eger çok-degerlikli ise) anlas Bnaktadi veya alternatif Olarak bir "bispesifik" veya "bifonksiyonel antikor" olabilmektedir. Bir "bispesifik" veya "bifonksiyonel antikor", iki farkll lag rVhafif zincir çiftine ve iki farkl | baglanma alan îia sahip olan bir yapay hibrit antikordur. Bispesifik antikorlar, hibridomlarîî kaynasinasüveya F ab, fragmanlarEiEl baglanmasjdahil olmak üzere çesitli metotlar ile üretilebilmektedir. Bakßâ mesela, Songsivilai & Lachmann, Clin. Exp. lmmunol. 79:315-321 antikor veya antikor zincirinden daha az amino asit kalßtßEiçeren bir parçasia veya kleana atLli yapmaktadii Fragmanlar, bir dokunulmamls veya komple antikorun veya antikor zincirinin kimyasal veya enzimatik islemi yoluyla elde edilebilmektedir. Fragmanlar, ayrlca, rekombinant yollarla da elde edilebilmektedir, örnek fragmanlar, Fab, Fab", F(ab")2, Fabc ve/Veya FV fragmanlarlîll'ihtiva etmektedir. "Antijen-baglama fragmani? terimi, bir immünoglobulin veya antikorun, antijene baglanan veya antijen baglama için (yani spesifik baglanma), dokunulmamg antikor ile (yani türetildikleri dokunulmamß antikor ile) rekabet eden bir polipeptit fragman Ba atEEl yapmaktadî. Baglama fragmanlarÇ rekombinant DNA teknikleri ile veya dokunulmamß immünoglobulinlerin enzimatik veya kimyasal bölünmesi ile üretilmektedir. Baglama fragmanlarÇ Fab, Fab', F(ab')2, Fabc, Fv, tek zincirler ve tek-zincir antikorlarEihtiva etmektedir. asit kallnt larln n, en az 10 bitisik amino asit kal ntllarln n, en az 15 bitisik amino asit kallîitlariiîi, en az 20 bitisik ainino asit kallîitTarlîilîi, en az 25 bitisik amino asit kallnt'larln n, en az 40 bitisik ainino asit kallntlhrlnln, en az 50 bitisik amino asit kallîitlarlîiîi, en az 60 bitisik ainino asit kallîitTarlîilrl, en az 70 bitisik amino asit kalEitJhrlîiîi, en az 80 bitisik amino asit kalEitIarEiEl, en az 90 bitisik ainino asit kalßtlarlîii, en az 100 bitisik amino asit kalEttEIarîHIl, en az 125 bitisik amino asit kalEitlarEii, en az 150 bitisik amino asit kalütühriß, en az 175 bitisik amino asit kalEitjhrmîl, en az 200 bitisik amino asit kalmtülariß, en az 250 bitisik amino asit kal Eit JhrEiîl, bir amino asit sekansEiD içeren bir peptit veya polipeptite at Elta bulunmaktad E. Belirli bir yap landijmada, polipeptitin bir fragmanLlpolipeptitin en az bir islevini muhafaza etmektedir. yapmaktad m. Bir immünojen, hususi olarak bir hayvan, daha hususi olarak insan dahil bir memeli olmak üzere bir organizmada, bir immün cevabEortaya çEkarabilen bir antijene atEf yapmaktadm. Antijen terimi, antijenin, bir kßmßta atEf yapan, antijenik determinantlar veya epitoplar olarak bilinen bölgeleri ihtiva etmektedir (bunlar, antijenlikten veya antijenik determinantlardan sorumlu antijen içindeki bir temas alanjile temas etmekte veya bunu desteklemede önemli bir rol oynamaktad E). Burada kullanllan "çözünür" terimi, sulu bir solüsyon içinde klslmen veya tamamen Burada kullanlIan "immünojenik" terimi, antikorlarEi, T-hücrelerin veya immünojenin bir antijenine karsE yönlendirilen diger reaktif immün hücrelerinin üretilmesini saglayan maddelere at Il yapmaktad E. Bir birey, verilen mevcut bulusa ait immünojenik kompozisyonlara karsü tedavi edilecek olan hastalEgjhafitletmek veya yatßtimak için yeterli antikorlar, T-hücreleri veya baska reaktif immün hücreleri ürettigi zaman bir immün cevab Ibrtaya çüîmaktad E. Burada kullanLlan immünojenesite terimi, bir antijenin, bir alLdlya verildigi zaman, bir immün cevabl l(s|V|sal veya hücresel) ortaya çlkarma kabiliyetinin bir ölçüsüne atIl yapmaktadlrl. Mevcut bulus, söz konusu insan kimerik veya insanlastlrlmls antikorlarln immünojenesitesini azaltan yaklas îhlar ile ilgilidir. Azaltlmê immünojenesiteli insanlastlîlllmlg antikor, ana antikora göre, mesela murin antikoruna göre azaltülnî immünojenesite ortaya koyan bir insanlastiflmß antikora atff yapmaktad m. Ana antikorun baglama özelliklerini büyük ölçüde muhafaza eden insanlastmlmg antikor, bu insanlastîmng antikoru üretmek için kullanIan ana antikor tarafßdan tanEian antijene spesifik olarak baglanma kabiliyetini muhafaza eden bir insanlastEEmS antikora atff yapmaktadhi Tercihen, insanlastLijLlmS antikor, ana antikor ile ayn Lveya büyük ölçüde aynJ antijen-baglama aflnitesi ve istegi ortaya koyacaktlr. Ideal olarak, antikorun afinitesi, ana antikor afinitesinin %IO'undan daha az olmayacaktlr, daha çok tercihen yaklaslk %30°undan daha az olmayacaktFr ve en çok tercihen ana antikorun afinitesinin %50,sinden daha az olmayacaktlî. Antijen- baglama afinitesini analiz etmek için metotlar, teknikte iyi bilinmektedir ve yarEn- maksimal baglama deneyleri, rekabet deneyleri ve Scatchard analizini ihtiva etmektedir. Uygun antijen baglama deneyleri, bu basvuruda tarif edilmektedir. Bir "geri mutasyon", bir insanlastiüînß antikoru kodlayan bir nükleotit sekansEliçine katElan bir mutasyondur, mutasyon, ana antikor (mesela donör antikor, mesela bir murin antikoru) içindeki bir amino aside tekabül eden bir amino asit ile neticelenmektedir. Ana antikordan belli yap lkallntllarl,l ana antikorun baglama özelliklerini büyük ölçüde muhafaza etmek amaciyla, bulusa ait antikorlarîi insanlastl'rlflmaslîsmasîida muhafaza edilebilinekte iken, aynE zamanda, neticede elde edilen antikorun potansiyel immünojenetisesini minimize etmektedir. Bulusun bir yap Ühninas [Eda, ana antikor, fare orijinlidir. Mesela, geri mutasyon, bir insan yap] kal [IitEßÇ bir ana murin kal Iltßßa çevirmektedir. Geri mutasyon yap [[abilecek yap Ekalitüariß örnekleri, sEiElandEBDolmamak sartglla, kanonik kal Eit lar, arayüzey paketleme kal Btüarü baglama alan ßa yaki olan smadgj kal ßtüar, "Vernier Bölgesi" (CDRilerin oturdugu bir platformu olusturmaktadü) içindeki kal îltülar (Foote & etmektedir. Burada kullanilan bir "korumal ldegisim", dogal protein ile karsllast nild g nda, slraslyla, mutant polipeptitlerin üçüncül yap sllnda minimal degisimler üreten veya mutant polipeptitlerin antijenik determinantlarîtda minimal degisimler üreten, büyük ölçüde konformasyonel veya antijenik olarak nötr degisikliklere at fl yapmaktadlr, antikorlara veya bulusun antikor fragmanlarlîia at`fl yapTtifgFlzaman, bir kommalîdegisim, antikoru, söz konusu reseptöre baglanmaya kabiliyetsiz hale getirmeyen bir amino asit ikamesi anlamßa gelmektedir. Alanda sßadan tecrübeye sahip olan kimseler, bir yüksek konformasyonel ve antijenik olarak nötr olma ihtimalini muhafaza ederken, hangi amino asit ikamelerinin yap Eabilecegini tahmin edebilecektir. Böyle bir rehberlik, mesela Berzofskyi (1085) Science Konformasyonel ve antijenik nötrlügü muhafaza etme ihtimaline tesir edecegi düsünülen faktörler, snmlandLÜLcJolmamak sartiyla sunlarUi'htiva etmektedir: (a) hidrofobik amino asitlerin ikamesinin, antijenlige tesir etmesi ihtimali daha azdln, çünkü hidrofobik kallnt larln, bir proteinin iç k simlnda yerlesmesi ihtimali daha çoktur; (b) fizyo-kimyasal olarak benzer amino asitlerin ikamesinin, konformasyona tesir etme ihtimali daha azdlî, çünkü ikame edilmis amino asit, dogal amino asidi yapßal olarak taklit etmektedir ve (c) gelisimsel olarak korumalîsekanslarEi degistirilmesi, konformasyona muhtemelen ters yönde tesir etmektedir, bu koruma, amino asit sekanslarEiE fonksiyonel öneme sahip olabilecegini akla getirmektedir. Alanda sßadan tecrübeye sahip olan bir kimse, slîjmlandEBDolmamak sartgila örnek olarak mikro-komplement sabitleme metotlarjgibi (Wasserman v.d. (1961) J. kullanarak ve konfonnasyona-bagLmlLmonoklonal antikorlardkullanan baglama çalLýmalarJ degisimleri degerlendirebilecektir. Bundan baska, "terapötik olarak etkili miktar" terimi, antikorun, bir insana veya hayvana verildiginde, söz konusu insan veya hayvanda terapötik bir etki meydana getirmek için yeterli bir miktarEta atEf yapmaktadE. Etkili miktar, alanda tecrübe sahibi olan bir kimse tarafEldan, rutin prosedürler takip edilerek kolayca belirlenmektedir. Burada kullan Ian "tedavi etmek", "önlemek", "önleme" terimleri, bir hastada bir hastalfgß bir veya daha fazla semptomunun nüksetmesinin veya baslamasîlß, profilaktik veya terapötik ajan Im verilmesinden kaynaklanan önlenmesine atEf yapmaktad m. lnsanlastiühi g Antikorlarîj Yap BD Mevcut bulus yeni kullan îhlarFve bir dizi ß-amiloid antijenlerini spesifik olarak tanlîha ve baglanma kabiliyetine sahip oldukça spesifik ve oldukça etkili antikorlar içeren metotlar ve bilesimleri saglamaktadlî. Mevcut ifsanlîi ögretisi ile saglanan antikorlar, hususi olarak, amiloidozun, ikincil amiloidoz ve yasla-baglantülüamiloidoz dahil olmak üzere amiloid plak olusumu ile baglantmjbir grup hastalk ve rahatslîlEgEi, süilandißE olmamak sartßlla nörolojik hastalüîlar mesela Alzheimer HastalEgJ (AD), Lewy cismi demansl: Downs sendromu, amiloidozlu irsi beyin kanamas3(Hollanda tipi); Guam Parkinson- Bunama kompleksi; bunun yanjsîla amiloid-benzeri proteinlerle baglantJJDbaska hastalüglar, mesela ilerleyici supranükleer felç, çoklu skleroz; Creutzfeld Jacob hastalgÇ Parkinson hastalEgD H'lV-baglantdjunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yaslll k kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon dahil diger hasta] klarln tedavisinde hususi olarak faydalld It Mevcut bulusa göre bulus kapsamEida tamamen insanlastmmng veya yeniden- sekillendirilmis degisken bölge, insan- kaynakljyap Esekanslar :içine gömülmüs olan, insan- olmayan-, hususi olarak kemirgen-kökenli CDRiler, fakat özellikle murin antikoru ACI-01- Ab7C2 (basvuru boyunca "mC2" olarak adlandlîülnaktadi ve Budapeste Anlasmasßi sartlar: altElda "Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) in Braunschweig, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Branuschweig" ile 01 AralEB ihtiva eden bir degisken bölge amino asit sekans nm ilk olarak tasarlanmasl suretiyle meydana getirilebilmektedir. Mevcut bulusun antikorundan elde edilebilen insan olmayan-, hususi olarak kemirgen- kökenli CDR"ler, arzu edilen spesifikligi tedarik etmektedir. Buna göre, bu kallîitl'lar, yeniden sekillendirilmis degisken bölgenin tasarEnEiçinde, esasen degismemis olarak ihtiva edilecektir. DolayEIS/la bütün modifikasyonlar bir minimum ile sîißlandmümalüî ve antikorun spesifikligi ve afinitesindeki degisimler yakEidan izlenmelidir. Diger taraftan, yapü kal Eit IarÇ teoride, herhangi bir insan degisken bölgesinden türetilebilmektedir. Kabul edilebilir ve hatta gelismis bir afinite gösteren yeniden sekillendirilmis bir antikor meydana getirmek amac Ella, yeniden sekillendirilmis bir degisken bölge meydana getirmek ve antikor afinitesini muhafaza etmek için esit sekilde uygun olan bir insan yapüsekansü seçilmelidir. Bu hedefe ulasmak amac yla, en uygun strateji gelistirilmistir. Yapl sekanslarlnln, CDR,leri, antijen ile etkilesim için dogru uzaysal yönelimlerinde tutmaya hizmet ettigi ve yap|_| kallnt'larln n, bazen antijen baglamaslna istirak bile edebildigi bilindigi için, bu strateji, antikor yeniden-sekillendirme için kullanflan insan yapTsekansmlîl, insan- olmayan-, hususi olarak kemirgen-kökenli degisken bölgeye en homolog veya benzer olan insan degisken bölgesinden türetilmesi suretiyle, antikorun üç-boyutlu yapßBEhegatif yönde etkileyebilecek degisiklikleri minimize etmeyi amaçlamaktadm. Bu aynE zamanda, afinitenin, yeniden sekillendirilmis antikor içinde muhafaza edilmesi ihtimalini de maksimize edecektir. En basit seviyesinde, "en uygun" strateji, donör kemirgen V-bölgesinin, bilinen bütün insan V-bölgesi amino asit sekanslari ile karsLlastLijLlmaslnU ve daha sonra, insanlasttrjma egzersizleri için akseptör yap lbölgeleri tedarik etmek için en homolog olanln seçilmesini kapsamaktadlr. Gerçekte, göz önüne allnmasl !gereken ve akseptör yap. [bölgelerinin nihai seçimine tesir edebilecek pek çok baska faktör vardi. Bu baglamda, neticede elde edilen yeniden sekillendirilmis antikorun afinitesini maksimize etmek amacglla, deneysel çalßmadan önce, moleküler modelleme tahminleri kullanEabilmektedir. Esas olarak, modellemenin hedefi, yeniden sekillendirilmis antikorda en iyi afiniteyi elde etmek için, en homolog insan yapßlîii hangi anahtar kalEitIarEi (eger varsa), kemirgende oldugu haliyle b @ak [[mas Egerektigini tahmin etmektir. Bir yapilanmada, CDR'ler, fare monoklonal antikorundan, hususi olarak da 12.12.2005'de dosyalanan, birlikte-bekleyen basvuru EP 05 02 7092.5"de tarif edilen fare monoklonal antikoru ACI-Ol-Ab7C2"den (basvuru boyunca "mC2" olarak adlandlnllmaktadln) elde edilebilmektedir. Fare monoklonal antikoru ACI-Ol-Ab7C2,yi (basvuru boyunca "mC2" ve insanlastmlnß C2 antikoru için hC2 olarak isimlendirilmektedir) üreten hibridom hücreleri, Budapeste Anlasmasßm sartlarjaltßda "Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) in Braunschweig, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Branuschweig" ile 01 ACC2750 erisim numarasüverilmistir. Fare antikoru, mesela palmitik asit gibi bir hidrofobik ktsm ile veya mesela polietilen glokol (PEG) gibi bir hidrofilik kls m ile veya ikisinin bir kombinasyonu ile modifiye edilmis, ß- amiloid peptidin hususi olarak, ß-amiloid peptitAßHâi AßMö ve Aß1'î5m147'in amino asit sekans Ba tekabül eden bir antijenik peptit içeren bir supramoleküler antijenik yap Sia karsü üretilebilmektedir ki burada hidrofobik ve hidrofilik kßîh, sEas Bila, antijenik peptidin uçlarmdan her birine, en az bir, hususi olarak bir veya iki amino asit, mesela lizin, glutamik asit ve sistein vas &as @la veya hidrofobik ve hidrofilik kßm Epeptit fragman Eta baglamak için bir baglantiihaz gibi hizmet edebilen baska herhangi bir uygun amino asit veya amino asit analogu vasttas yla esdegerlikli olarak baglanmaktadlrt Hidrofilik klsm olarak bir PEG kullan ldlgl zaman, serbest PEG uçlari, mesela, antijenik yapty ,tbir lipozomun çift-katmani içine gömmek için, fosfatidiletanolamine veya sabitleme elemanFolarak is görmek için uygun baska herhangi bir elemana esdegerlikli olarak baglanmaktad m. Hususi olarak, bir fare antikoru, mesela polietilen glikol (PEG) gibi bir hidrofilik man ile modifiye edilmis ß-amiloid peptit Aßnignß amino asit sekans Ea tekabül eden bir antijenik peptit içeren bir supramoleküler antijenik yapgza karsüüretilebilmektedir, hidrofilik kßlîn, antijenik peptidin uçlarîldan her birine, en az bir, hususi olarak bir veya iki amino asit, mesela lizin, glutamik asit veya sistein vas Ltas _yla veya hidrofobik ve hidrofilik kLsmLpeptit fragman na baglamak için bir baglant bihazt lgibi hizmet edebilen baska herhangi bir uygun amino asit veya amino asit analogu vasltaslyla esdegerlikli olarak baglanmaktad It Hidrofilik kßlîn olarak bir PEG kullan Tldfgl'zaman, serbest PEG uçlarlî mesela, antijenik yap yü bir lipozoinun çift-katmanüiçine gömmek için, fosfatidiletanolaminie veya sabitleme eleman: olarak is görmek için uygun baska herhangi bir eleinana esdegerlikli olarak baglanmaktad E. Bulusun bir yapEandEmasida, degisken bölge içinde, bir veya daha fazla insan- veya primat- kökenli yap Jbölgesi içine gömülmüs ve bir insan veya primat kaynaklüantikordan elde edilen bir sabit bölge ile birlestirilmis en az bir insan-olmayan orijinli CRD bir insanlastLrLljnLs antikor veya bunun bir fragman Ltedarik edilmektedir ki bu kimerik antikor veya bunun bir fragmani veya bir insanlasttrlltn s antikor veya bunun bir fragmani, ß-amiloid monomerik peptidi spesifik olarak tanima ve buna baglanma kabiliyetine sahiptir. CDR'ler, antijene en çok baglanma ihtimali olan kalitüarüihtiva etmektedir ve yeniden sekillendirilmis antikor içinde muhafaza edilmeleri gerekmektedir. CDRsler, Kabat v.d. Sequence of Proteins of lmmunological Interest, 5th Edition, The United States Department of Health and Human Services, The United States Goverment Printing Office, 1991"e uygun sekans taraflndan belirlenmektedir. CDRiler, anahtar kalintllarln, CDR döngüsünün yapisal konformasyonunu büyük ölçüde belirledigi kanonikal slîiITlarda (Chothia v.d. 1989 Nature, 342, 877-883) yer almaktadn. Bu kallnt lar, yeniden sekillendirilmis antikor içinde neredeyse her zaman muhafaza edilmektedir. Bulusa göre insanlastlIJInE bir antikor hazilama prosesinde, C2 ag& zincir ve hafif zincir degisken bölgelerinin (VH ve VK) amino asit sekanslarüNCBI ve Kabat veri- tabanlaridaki kemirgen antikoru VH ve VK sekanslarjle kars ÜlastEEmaktad E. Bir karsLlasthima, her ikisi de CDRLl içinde konumlandLrLlms iki amino asidin, bu germ hatti lsekanslndan farkllllk gösterdigini ortaya çlkarmaktad ri. Benzer, fakat özdes olmayan sekansl` lolgun murin antikorlar lbulunabilmektedir. Birçogu, bir özdes CDRL2 ve özdes CDRLTe sahiptir, fakat C29nin CDRL19i essiz gibi görünmektedir. Insan germ ham-NK sekanslarüile kars JhstEina, VKll alt-grubundan genlerin, C2 VK ile en iyi eslesme oldugunu göstermektedir (Cox v.d. 1994). Dolayîßl'la C2 VK, Kabat alt-grubu MuVKlISekansEia atanabilmektedir. Insan J bölgesi HuJKl ile birlikte DPKlS, insanlastEEmS VK için akseptör yapEsekanslarßJ tedarik etmek için seçilebilmektedir. Degisken hafif ve ag 11 zincirler aras ndaki arayüzdeki kal ntllar belirlenmistir (Chothia v.d. muhafaza edilmektedir. Fare C2 Vinil 87 pozisyonundaki Phe, arayüzde olagandlâlîllî, VKll alt-grubunda bir Tyr daha olagand E, bu ise bu yap Haliltilßm, antikor aktivitesi için Önemli olabilecegini göstermektedir. Tyr 87, insan germ hattßda ve insanlastEÜInE CZVK içinde mevcuttur. InsanlastEüînß VK sekanslarl; dolayßglla, C2FluVKfin, DPK 15 ve insan JKI°den yap ]]arla fare C2 VK CDR'lerden olusacagj sekilde tasarlanabilmektedir. Bulusun spesifik bir yapEanmasEida, murin kalEJtÜJarü insan yapEbölgesi içinde pozisyonlar 45 ve/veya 87,de ikame edilebilmektedir. Bir fare monoklonal antikorundan, hususi olarak murin antikoru ACI-01-Ab7C27den elde edilen CDR2 bölgesi içinde, amino asit ikameleri, Kabat pozisyonlari |50 ve/veya 53`de yap labilmektedir. Kal ntl l45, CDR'lerin konformasyonunun desteklenmesi ile alakall lolabilmektedir. Kal ntl 87, VH ve VK bölgelerinin arayüzünde konumlandlîlllnaktadîl. Bu sebeple, bu kal îltllar, antikor baglanmaslilii muhafazasi-liçin kritik olabilmektedir. 2000). Insan germ hattJVH sekanslarEile kars Jhstîma, alt-grup VHlllsten genlerin, C2 VH için en iyi eslesme oldugunu göstermektedir. C2 VH AF, Kabat alt- grubu MuVHIIIDiye atanabilmektedir. Insan J bölgesi HuJH6 ile birlikte sekans DP54, insanlastEJInß VH için akseptör yap EsekanslarEiEtedarik etmek için seçilebilmektedir. Kars [[astEma, C2 VH sekanslarüve insan akseptör germ hattEsekans EDP54 ve JH6 aras lida, çogu CDRH2 içinde konumlandLijLlmLs dokuz amino asit farkUbulundugunu göstermektedir. Özdes veya benzer (bir kal ntl ,farkl )| CDRHllli veya benzer (bir kal ntl .farkll)| CDRH2,li olgun murin antikorlar [bulunmaktad 11, fakat hiçbirinde her üç CDR, C2 VH AF"ye özdes degildir. C2 antikorunun CDRH39ü nadiren üç kal lîitdan olusarak klsad î. Bununla birlikte, veri tabanEiçinde bu uzunlukta CDRH3"lü diger antikorlar bulunmaktad m. C2 VH,nin kal Eitj 47"si, daha alßümg olan Trp yerine Leu,dur ve kal EitE94, normal Arg yerine Ser"dir, bu da bu yap lalEit ElhrEii, antikor aktivitesi için önemli olabilecegini göstermektedir. Çesitli insanlastmmng VH sekanslarEtasarlanabilmektedir. C2HuVH1, DP54 ve HuJH6,dan yapEarla C2 VIl AF CDR'lerden olusmaktadm. Bulusun spesifik bir yapianmasîida, murin kaantlarL, insan yapUbölgesi içinde pozisyonlar 47 veya 94'te veya her ikisinde ikame edilebilmektedir. Yapl 2 içindeki kallnt] l47, hem CDRaler ile hem de VK alanl lile temas kurmaktadlrt. Kallnt l 94, CDRalerin konformasyonunun desteklenmesi ile alakal l olabilmektedir. Bu sebeple, bu kallîltllar, antikor baglanmasîllîi muhafaza edilmesi için kritik önemde olabilmektedir. Dogal veya modifiye edilmis insan- veya primat-kökenli yapübölgeleri içine gömülmüs, donör antikordan mesela bir murin antikorundan elde edilebilen CDR'ler içeren farklICVR ve LCVR bölgeleri tasarlanabilmektedir. Modifikasyon, yap Dbölgesi içindeki bir veya daha fazla amino asit kalßtßiß, ilgili alt-gruplar içinde bu pozisyonda daha yaygEi olarak bulunan insan-olmayan kal Iîlt [Dar ile, hususi olarak murin kal [it lar ile veya ilgili alt-gruplar içinde bu pozisyonda daha yaygEl olarak bulunanlara benzer özelliklere sahip kalEltEar ile bir degisimi ile ilgili olabilmektedir. Yapl bölgesinin modifikasyonunda, yapl lsekanslar,| CDR"1eri, antijen ile etkilesim için dogru uzaysal yönelimlerinde tutma isi görmektedir ve yapFkallîltTarlîl bazen, antijen baglamaya istirak bile edebilmektedir. Bulusun bir yap lanmas nda, yeniden sekillendirilmis antikor içinde afinitenin muhafaza edilme ihtimalini maksimize etmek amaciyla, seçilen insan yapüsekanslarüü bunlarükemirgen yap IarEiîi sekanslarEia en benzer hale getirmek için uyarlamak için tedbirler alEimaktad ß. Buna göre, insan yapübölgesi içindeki murin kalütüarj ikame edilebilmektedir, hususi olarak, murin kalßtIarÇ Ag& Zincir Degisken (HCVR) bölgenin insan yapEbölgesi içinde pozisyonlar 47 veya 49°da veya her ikisinde ve Hafif Zincir Degisken (LCVR) bölgenin insan yapleölgesi içinde pozisyonlar 45 ve/veya 877de ikame edilebilmektedir. Bir fare monoklonal antikorundan, hususi olarak murin antikoru ACI- Ol-Ab7C2"den elde edilebilen CDR2 bölgesi içinde, amino asit ikameleri, Kabat pozisyonlarl | 50 ve/veya 53,de yapilabilmektedir. Insan yaplbölgesi içinde yukarlîla belirtilen pozisyonlarda bulunan kalEitIar, ilgili alt- gruplar içinde bu pozisyonda daha yaygß olarak bulunan murin kal lîitmarü ile degistirilebilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: 15,de gösterildigi gibi Ag& Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yap Jbölgesi içinde Kabat pozisyonu 47,deki Trp yerine, bir Leu veya benzer özelliklere sahip olan ve ikamesi, esasen konfonnasyonel Olarak veya antijenik olarak nötr olan degisimlere sebep olan, mutant polipeptitlerin üçüncü] yapls nda minimal degisiklikler üreten veya antijenik determinantlarda minimal degisiklikler üreten bir amino asit kallntlsll koyulabilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: lSlde gösterildigi gibi Agi Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yapi-bölgesi içinde Kabat pozisyonu 47"deki Trp yerine, norlösin, ile, Val, Met, Ala ve Pheiden olusan gruptan seçilen bir amino asit kal EitßÇhususi olarak Ile koyulabilmektedir. Konformasyonel ve antijenik olarak nötr olan alternatif korumalîikameler düsünülebilir. SEK IS NO: l5ide gösterildigi gibi Agm Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat- kökenli yap Ebölgesi içinde Kabat pozisyonu 947teki Arg yerine, Ser veya benzer özelliklere sahip olan ve ikamesi, esasen konfonnasyonel olarak veya antijenik olarak nötr olan degisimlere sebep olan, mutant polipeptitlerin üçüncül yapEßda minimal degisiklikler üreten veya antijenik determinantlarda minimal degisiklikler üreten bir amino asit kalîltßü koyulabilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: 157de gösterildigi gibi Aglr Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yap lbölgesi içinde Kabat pozisyonu 94"deki Ar yerine, alternatif olarak Thr koyulabilmektedir. Bir baska alternatifte, her iki kallntl,linsanlastlrllm s antikor içinde degistirilebilmektedir. SEK KIM NO: 12"de gösterildigi gibi Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat- kökenli yap [bölgesi içinde Kabat pozisyonu 45,deki Gln yerine, Lys veya benzer özelliklere sahip olan ve ikamesi, esasen konforinasyonel olarak veya antijenik olarak nötr olan degisimlere sebep olan, mutant polipeptitlerin üçüncül yapEßda minimal degisiklikler üreten veya antijenik determinantlarda minimal degisiklikler üreten bir amino asit kalitßü koyulabilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: 127de gösterildigi gibi Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yap Elbölgesi içinde Kabat Pozisyonu 45`deki Giy yerine, Arg, Gln ve Asn°den olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Arg koyulabilmektedir. SEK KIM NO: 12"de gösterildigi gibi, Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat- kökenli yap Ebölgesi içinde Kabat pozisyonu 50,deki Leu yerine, Lys veya benzer özelliklere sahip olan ve ikamesi, esasen konforinasyonel olarak veya antijenik olarak nötr olan degisimlere sebep olan, mutant polipeptitlerin üçüncül yapEßda minimal degisiklikler üreten veya antijenik determinantlarda minimal degisiklikler üreten bir amino asit kalitßü koyulabilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: 12"de gösterildigi gibi Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yap jbölgesi içinde Kabat pozisyonu 50`deki Leu yerine, Arg, Gln ve Asn,den olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak da Arg koyulabilmektedir. SEK KIM NO: 12ide gösterildigi gibi Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat- kökenli yapEbölgesi içinde Kabat pozisyonu 53adeki Asn yerine, His ve Gln veya benzer özelliklere sahip olan ve ikamesi, esasen konformasyonel olarak veya antijenik olarak nötr olan degisimlere sebep olan, mutant polipeptitlerin üçüncül yapßîlda minimal degisiklikler üreten veya antijenik determinantlarda minimal degisiklikler üreten bir amino asit kalitßü koyulabilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: 12jde gösterildigi gibi, Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yap :bölgesi içinde Kabat pozisyonu 53°deki Asn yerine, Gln, His, Lys ve Argiden olusan gruptan seçilen bir amino asit koyulabilmektedir. SEK KIM NO: lZide gösterildigi gibi Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat- kökenli yapl bölgesi içinde Kabat pozisyonu 87ideki Thr yerine, Phe veya benzer özelliklere sahip olan ve ikamesi, esasen konformasyonel olarak veya antijenik olarak nötr olan degisimlere sebep olan, mutant polipeptitlerin üçüncül yapsinda minimal degisiklikler üreten veya antijenik determinantlarda minimal degisiklikler üreten bir amino asit kalîlthFl koyulabilmektedir. Hususi olarak, SEK KIM NO: 12,de gösterildigi gibi Hafif Zincir Degisken Bölgenin insan- veya primat-kökenli yap :lbölgesi içinde Kabat pozisyonu 87°deki Tyr yerine, Leu, Val, Ile ve Ala'dan olusan gruptan seçilen bir amino asit, hususi olarak Leu koyulabilmektedir. Bir veya daha fazla insan- veya primat-kökenli yap :bölgesi içinde gömülü insan- olmayan orijinli en az bir CDR içeren bu sekilde elde edilen degisken bölge, bundan sonra, bir insan veya primat kaynakll lantikordan türetilen bir sabit bölge ile, hususi olarak da insan IgG4 veya K sabit bölgeleri ile birlestirilebilmektedir. lgG4 sabit bölgesi, eklem bölgesi içinde pozisyon 228,deki Serinin, Prolin ile degistirilmesi suretiyle modifiye edilebilmektedir (HuIgG 4 Ser-Pro). Bu mutasyon, zincirler aras Edisülfit bagîiüstabilize etmektedir ve dogal insan lgG4 preparasyonlarlîida meydana gelebilen yarin moleküllerin olusumunu engellemektedir. lgG4 sabit bölgesi, SEK KIM NO: 167da gösterildigi gibi pozisyon 439,daki terminal Lys`nin çRart [linasEsuretiyle de modifiye edilebilmektedir. Modifiye edilmis degisken bölgeler, alanda bilinen metotlarla, mesela örtüsen PCR rekombinasyonu ile yaplland nllabilmektedir. Kimerik antikor, C2 ChVHAF ve C2 ChVK için ekspresyon kasetleri, yapl lbölgelerinin istenen sekanslara inutajenezi için sablonlar olarak kullan Tabilmektedir. Mutajenik öncü] çiftlerinin kümeleri, degistirilecek olan bölgeleri kusatarak birlestirilmektedir. Üretilen insanlastmllnß VH ve VK ekspresyon kasetleri, mesela pUCl9 gibi teknikte bilinen uygun klonlama vektörlerine klonlanabilmektedir. Her bir VH ve VK için bütün DNA sekansEiEi dogru oldugu teyit edildikten sonra, modifiye edilmis ag& ve hafif zincir V-bölgesi genleri, klonlama vektöründen ekpresyon kasetleri olarak kesilip al ßabilmektedir. Bunlar, daha sonra, mesela sEas &la insan IgG4 ser-Pro veya K sabit bölgelerini ihtiva eden pSVgpt ve pSVhyg gibi uygun ekspresyon vektörlerine transfer edilebilmektedir. EKSPRESYON VEKTÖRLERI Ekspresyon vektörü pSVgpt, pSVzgpt"yi temel almaktadii (Mulligan and Berg, 1980) ve bakteriyel hücrelerde seleksiyon için ampisiline direnç geni, memeli hücrelerinde seleksiyon için gpt geni, inurin agiii zincir iminünoglobulin arttlr dl [bölge, sabit bölge genini kodlayan genomik sekans ve SV4O poli A sekanslarlîihtiva etmektedir. Ekspresyon için agi? zincir degisken bölge, BamHI fragman Ila bir Hindlll olarak sokulmaktad m. Ekspresyon vektörü pSVhyg, bakteriyel hücrelerde seleksiyon için ampisiline direnç geni, memeli hücrelerinde seleksiyon için hyg geni, murin agi zincir immünpglobulin arttßßü bölge, kappa sabit bölge genini kodlayan ve kappa arttmßüve SV4O poli A sekanslarjihtiva eden genomik sekans Dihtiva etmektedir. Ekpresyon için hafif zincir degisken bölge, HindlII olarak BamHI fragman na sokulmaktad Lii Bundan sonra, DNA sekansnln, ekspresyon vektörleri içindeki insanlast Üllmls VH ve V1( için dogru oldugu teyit edilecektir. Antikor üretimi için, insanlastiühilîs ag& ve hafif zincir ekspresyon vektörleri, mesela NSO hücreleri gibi alanda bilinen uygun üretim hücre çizgileri içine sokulabilmektedir. Ekspresyon vektörlerinin sokulmasÇ elektroporasyon veya alanda bilinen baska uygun transformasyon teknolojisi vasEfasßl'la ko-transfeksiyon ile gerçeklestirilebilmektedir. Antikor üretim hücre çizgileri, bundan sonra seçilebilmekte ve genisletilmekte ve insanlastLrLljnLs antikorlar saflastJjLlinaktadLr. SaflastJjLltnLs antikorlar, bundan sonra, SDS- PAGE gibi standart teknikler ile analiz edilebilmektedir. GELISTIRILMIS AFINITE, SPESIFIKLIK VE STABILITEYE SAHIP ANTIKOR F are C2 antikorunun CDRL2 sekansü ("KVSNRFS"), antikor aktivitesini ters yönde etkilemeksizin hafifçe modifiye edilebilmektedir. Pozisyon 50°de K yerine R ve pozisyon 53ide N yerine S degisimi ile korumalEikameler yaplabilmektedir. Iki alternatif CDRL2 sekans Jbu sebeple siasglla "RVSNRFS" ve "KVSSRFS"dir. Bunlar, sEasStla C2 VK-R ve C2 VK-S olarak, baska degisim olmaksüß murin VK sekans üçine dâhil edilmektedir. Burada daha önce tarif edilen bulusa göre bir antikorun veya bunun bir fragman Ilîi afinitesi, spesifikligi ve stabilitesi, glikosilasyon profilini veya paternini degistirmek suretiyle modifiye edilebilmekte, gelistirilmis terapötik degerlerle neticelenmektedir. Glikosilasyon paterninde bu degisikligi gerçeklestirmek için, konak hücreler, ikiye ayîllîfl GlcNAciyi taslyan kompleks N-bagll loligosakkaritleri arttlran bir glikoprotein- modifiye edici glikosil transferaz aktivitesinin tercih edilen bir aralfglîiîifade edebilecekleri sekilde düzenlenebilmektedir. Bundan baska, glikoproteinlerin modifiye edilmis glikoformlarü mesela bütün antikor molekülleri, antikor fragmanlarüdahil olmak üzere antikorlar veya arttEJInß bir FC-aracEÜîlD hücresel toksisiteye sahip olan, bir immünoglobulinin FC bölgesine esdeger bir bölge ihtiva eden füzyon proteinleri elde edilebilmektedir. Modifiye edilmis glikosilasyon paternine sahip antikorlar elde etme metotlarü teknikte Bioengineering 93(5), 851-861 "de tarif edilmektedir. FARMASÖTIK HAZIRLIK VE UYGULAMA Bulusa göre antikorlar ama özellikle bulusa göre monoklonal antikor fizyolojik olarak kabul edilebilir bir formülasyonda hazElanabilmektedir ve bilinen teknikler kullan Jhrak, farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasßlßg seyreltici ve/veya eksipiyan içerebilmektedir, özellikle monoklonal antikor veya bunun islevsel tüm parçalarü bir terapötik kompozisyon olusturmak için, farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasyLdL, seyreltici ve/veya eksipiyan ile birlestirilmektedir. Uygun farmasötik taslyld lar, seyrelticiler ve/veya eksipiyanlar, teknikte iyi bilinmektedir ve mesela fosfat salin solüsyonlarl,l su, yag/su emülsiyonlar lgibi emülsiyonlar, çesitli tiplerde lêlatma ajanlarCl steril solüsyonlar vb. ihtiva etmektedir. Bulusa uygun farmasötik kompozisyonun formülasyonu, teknikte uzman kisilerin bildigi standart metotlara uygun olarak gerçeklestirilebilmektedir. Mevcut bulusa uygun bilesimler, bir denege, bir katü sSlDveya aerosol formunda, uygun, farmasötik olarak etkili bir dozda verilebilmektedir. KatEkompozisyonlarEi örnekleri, haplar, kremler ve implant edilebilir dozaj birimleri ihtiva etmektedir. Haplar, oral olarak verilebilmektedir. Terapötik kremler, topikal olarak verilebilmektedir. Implant edilebilir dozaj birimler, mesela bir tümör alannda lokal olarak uygulanabilmektedir veya terapötik koinpozisyonun sistematik sallm liçin mesela subkütan olarak implant edilebilmektedir. Slv | kompozisyonlarln örnekleri, intramüsküler olarak, subkütan olarak, intravenöz olarak, intraarteriyel olarak enjeksiyon için uyarlanmlg formülasyonlarlîve topikal ve intraoküler uygulama için formülasyonlarl Äihtiva etmektedir. Aerosol formülasyonlarmln örnekleri, akcigerlere verilmek için inhalerformülasyonlarlîi Fihtiva etmektedir. Kompozisyonlar, standart uygulama rotalarE ile verilebilmektedir. Genel olarak, kompozisyon, topikal, oral, rektal, nasal, interdermal, intraperitoneal veya parenteral (mesela intravenöz, subkütan veya intramüsküler) rotalarla verilebilmektedir. Ilave olarak, kompozisyon, biyolojik olarak parçalanabilen polimerler gibi sürekli sal& matrisleri içine dahil edilebilmektedir, bu polimerler, uygulamani yap ]hiak istendigi civarda, mesela bir tümör bölgesinde implant edilmektedir. Metot, tek bir dozun verilmesini, önceden belirlenmis zaman aralklarlnda tekrarll ldozlarln verilmesini ve önceden belirlenmis bir zaman periyodu boyunca devainll Uygulamayl ihtiva etmektedir. Burada kullantlan bir sürekli sami matrisi, enzimatik ve/veya asit/baz hidrolizi ile veya çözünme ile parçalanabilen malzemelerden, genellikle polimerlerden yapEan bir matristir. Vücut içine sokulunca, matrise, enzimler ve vücut sîlüarjtarafidan etki edilmektedir, sürekli salih matrisi, makul olarak, mesela lipozomlar, polilaktitler (polilaktit asit), poliglikolit (glikolik asidin polimeri), polilaktit ko-glikolit (laktik asidin ve glikolik asidin kopolimerleri), polianhidritler, poli(ort0)esterler, polipeptitler, hiyalüronik asit, kollajen, kondroitin sülfat, karboksilik asitler, yag asitleri, fosfolipitler, polisakkaritler, nükleik asitler, poliamino asitler, fenilalanin, tirosin, izolösin gibi amino asitler, polinükleotitler, polivinil propilen, polivinilpirolidon ve silikon gibi biyolojik olarak parçalanabilir maddeler ile seçilmektedir. Tercih edilen bir biyolojik olarak parçalanabilir matris, ya polilaktit, poliglikolit ya da polilaktit ko-glikolitten birinin matrisidir (laktit asit ve glikolik asit ko- polimerleri). Ilgili teknikte tecrübe sahibi olanlar, kompozisyonun dozaj BEL mesela tedavi edilmekte olan durum, kullan Ian hususi kompozisyon ve hastanß kilosu, boyu, cinsiyeti ve genel saglk durumu, vücut yüzey alanjgibi diger klinik faktörler, verilecek olan hususi bilesik veya kompozisyon, eszamanljolarak verilecek olan diger ilaçlar ve verilis rotasj gibi çesitli faktörlere ba gl :blacag El [iyi bilmektedir. Kompozisyon, biyolojik olarak aktif bir madde veya bilesik, hususi olarak oksidatif stres karslt lbilesikler, anti-apoptotik bilesikler, metal selatörleri, mesela pirenzepin gibi DNA onarin inhibitörleri, metabolitler, 3-amino-l-pr0pansülfonik asit (3APS), 1,3- propandisülfonat (, a-sekretaz aktivatörleri, [3- ve y-sekretaz inhibitörleri, tau proteinleri, nötrotransmiter, ß-yaprak k nldllar, amiloit beta temizleyici / tüketici hücresel bilesenler için çekiciler, piroglutamatlüamiloid beta 3-42 gibi N-terminal kesikli amiloid beta inhibitörleri; anti-inflamatuar moleküller veya klozapin, ziprasidon, aripiprazol veya olanzapin gibi "atipik anti-psikotikler", takrin, rivastigmin, donepezil ve/veya galantamin gibi kolinesteraz inhibitörleri (ChEIler), Ml agonistleri ve amiloid veya tau modifiye ilacj gibi baska ilaçlar ve besin takviyeleri mesela vitamin B 12, sistein, bir asetilkolin öncülü, lesitin, kolin, Ginko biloba, asetil-L-karnitiri, idebenon, propentifilin veya bir ksantin türevinden seçilen en az bir bilesik içeren baska kompozisyonlar ile kombinasyon halinde, bulusa uygun bir antikor ile ve istege bagll .olarak farmasötik olarak kabul edilebilir bir taslýlöîve/veya bir seyreltici ve/veya bir eksipiyan ile birlikte ve hastallllarlîi tedavisi için prosedürlere uygun olarak verilebilmektedir. Proteinli farmasötik olarak aktif madde, her bir doz için 1 ng ve 10 mg aras Elda miktarlarda mevcut bulunabilmektedir. Genel olarak, uygulama rejimi, bulusa uygun antikorun 0.1 ug ve pg aras îldaki aralEgîlda olmali& ve bu aralÜîlar içindeki bütün münferit say ]1ar da bulusun parçasdlii. Eger uygulama sürekli iniî'izyon yoluyla gerçeklesmekte ise, daha uygun bir dozaj, vücut aglnl g nln her bir kilograml için saat basina 0.01 ug ve 10 mg birim aras ndaki aralikta olabilmektedir, bu aralllt içinde kalan bütün münferit sayllar da bulusun parças d ri. Uygulama, genel olarak, parenteral, mesela intravenöz olacaktE. Parenteral uygulama için preparasyonlar, steril sulu veya sulu-olmayan solüsyonlarÇI süspansiyonlarEve emülsiyonlarj ihtiva etmektedir. Sulu-olmayan solventler, sElBlandißEolmamak üzere, propilen glikol, polietilen glikol, mesela zeytinyag ügibi sebze yagEve mesela etil oleat gibi enjekte edilebilir organik esterleri ihtiva etmektedir. Sulu solventler, su, alkol/sulu solüsyonlar, emülsiyonlar veya süspansiyonlardan, mesela salin ve tamponlanmg ortamlardan olusan gruptan seçilebilmektedir. Parenteral tasylddar, sodyum klorit solüsyonu, Ringer"s dekstroz, dekstroz ve sodyum klorit, 1aktat13Ringer°s veya sabit yaglarEihtiva etmektedir. intravenöz tas Mar, akgkan ve besin yenileyiciler (mesela Ringer7s dekstrozu esas alanlar) ve digerlerini ihtiva etmektedir. Mesela antimikrobiyeller, anti-oksidanlar, selatlama ajanlarl, inert gazlarU vb. gibi koruyucularda mevcut bulunabilmektedir. Farmasötik kompozisyon, ayrlîla, mesela serum albümin veya immünoglobulin gibi hususi olarak insan orijinli proteinli taslyld lar içermektedir. Diger biyolojik olarak aktif ajanlar, bulusa ait farmasötik kompozisyon içinde, amaçlanan kullanlîhlîia baglTolarak mevcut bulunabilmektedir. Baglanma hedefi, beyin içinde yer aldEgîlzaman, bulusun belli yap [[anmalarj antikorun veya bunun aktif fragmanßß, kan-beyin bariyerini geçmesini saglamaktadE. Baz Enörodejeneratif hastalRlar, antikorun veya bunun aktif fragmanEiEi, beyine kolayca sokulabilecegi sekilde, kan-beyin bariyerinin geçirgenliginde bir artß ile baglantmîli. Kan-beyin bariyeri dokunulmamts olarak kaldLgJzaman, molekülleri kan-beyin bariyeri boyunca tasLmak için, slnlrlandlrld lolmamak sartlyla fiziksel metotlar, lipit-bazll lmetotlar ve reseptör ve kanal- bazll metotlar dahil olmak üzere teknikte bilinen pek çok yaklas tm mevcuttur. Antikoru veya bunun aktif fragmaniü kan-beyin bariyeri boyunca taslîihak için fiziksel metotlar, sßilandißîolmamak sartßlla kan-beyin bariyerinin tamamen alt edilmesi veya kan-beyin bariyerinde açüglllar meydana getirilmesini ihtiva etmektedir. Alt- etme metotlarü smilandißEolmamak üzere, beyin içine dogrudan enjeksiyon (bakiâ mesela WafersTM, Guildford Pharmaceutical) ihtiva etmektedir, Bariyer içinde aç kldçlar meydana getirme metotlar|,1 sln nland n dl blmamak sart yla ultrason (bakln 21 mesela U.S. Patent Yay 11 (Neuwelt, E. A., lmplication of the Blood-Brain Barrier and its Manipulation, Vols l & 2, Plenum Press, N. Y. (1989)), mesela bradikinin veya geçirgenlestirici A-7 ile ,686,416) ve kan-beyin bariyerini destekleyen nöronlarß, antikoru veya antijen-baglama fragmanIlüçodlayan genleri ihtiva eden vektörler ile transfeksiyonu ihtiva etmektedir. Antikoru veya bunun aktif fragmanEJJ kan-beyin bariyeri boyunca tasEnak için lipit- bazlE metotlar, s&&andîßjolmamak sart ýla, antikorun veya bunun aktif fragmani& kan-beyin bariyerinin vasküler endotelyumu üzerindeki reseptörlere baglanan antikor baglanma fragmanlarma birlestirilen lipozomlar içinde kapsüllenmesi (baklnz, mesela U.S. Patent yogunluklu lipoprotein partikülleri (bakln zt, mesela U.S. Patent Basvuru Yayin No: Antikom veya bunun aktif fragman&Ç kan-beyin bariyeri boyunca tas &lak için reseptör ve kanal-bazlEmetotlar, s&&land&&Eolmamak sartStla, kan-beyin bariyerinin geçirgenligini artt&nak için glukokortikoid blokerlerinin kullan ]1nasE(bak&& mesela U.S. Patent Basvuru tasS/&Jlarlîiîl inhibe edilmesi (bak&&, mesela U.S. Patent Basvuru Yay& No. reseptörünün aktivitesinin modüle edilmesi (baklnlz mesela U.S. Patent Basvuru No. ,004,697) ihtiva etmektedir. SAPTAMA/TESHIS Bir baska yapElanmada, mevcut bulus, amiloid-baglantJJE hastalklar& veya durumlar& saptanmas: ve teshisi için metotlar ve kitler tedarik etmektedir. Bu metotlar ve kitler, maddeleri, biyolojik numuneler içinde veya tabii yerinde saptamak ve miktar& :ölçmek için yaygLn olarak kullan lan bilinen immünolojik metotlarLihtiva etmektedir. Bir hastada, amiloid-baglantll bir hastal gln veya durumun teshisi, bir monoklonal antikorun veya bunun bir aktif fragman&&, bir numune içindeki veya tabii yerindeki amiloidin bir epitopuna immünospesifik baglanmas&& saptanmas :suretiyle gerçeklestirilebilmektedir ki bu, amiloid proteini ihtiva ettiginden süphe edilen bir spesifik beden parças&& veya beden alan&&, amiloid proteininin bir epitopuna baglanan bir antikor ile temasa geçirilmesini, antikorun, bir immünolojik kompleks olusturmak için amiloid proteinine baglanmas &a izin verilmesini, immünoloj ik kompleksin olusumunun saptanmas &Eve immünolojik kompleksin varlEgîl& veya yoklugunun, numune veya spesifik beden parçasEveya alanüiçinde amiloid proteininin varlEgÜveya yoklugu ile iliskilendirilmesini ihtiva etmektedir. Bir amiloid-baglantJJLl hastaldç veya durumun teshisinde kullanLlJabilecek olan biyolojik numuneler, mesela serum, plazma, salya, mide salgllar|,| sümük, beyin-omurilik s vISl, lenf slVlsl lve benzerleri veya nöral, beyin, kardiyak veya vasküler doku gibi bir organizmadan elde edilen doku veya hücre numuneleridir. Bir numune içinde amiloid proteininin varltglîiî veya yoklugunu tespit etmek için, mesela saptama için ikincil reaktifleri kullanan dolayl l saptama metotlarîidan faydalanan deneyler, ELISAlar ve immünopresipitasyon ve aglütinasyon deneyleri gibi alanda shadan tecrübe sahibi olan kimselerin bildigi herhangi bagßklül deneyi kullanEabilmektedir (Baklîiâ Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory verilmektedir. Kendi yerinde teshis için, antikor veya bunun herhangi bir aktif fragmantd teshis edilecek olan organizmaya, teknikte bilinen metotlarla, mesela intravenöz, intranasal, intraperitoneal, intraserebral, intraarteriyal enjeksiyon ile, bulusa uygun antikor ve amiloid proteininin bir eptitopik bölgesi araslîida spesifik bir baglanmanii meydana gelebilecegi sekilde verilebilmektedir. Antikor/antijen kompleksi, antikora veya bunun fonksiyonel bir fragman îia tak Jhn bir etiket vas îas @la saptanabilmektedir. Teshise ait uygulamalarda kullanüan bagßklü& deneyleri, tipik olarak, etiketli antijenlere, antikorlara veya saptama için ikincil reaktitlere dayanmaktad B. Bu proteinler veya reaktitler, enzimler, radyoizotoplar ve mesela koloidal altîl ve lateks boncuklar gibi renkli partiküller ihtiva eden Iloresan, luminesant ve kromojenik maddeler dahil olmak üzere alanda tecrübe sahibi olanlarln genel olarak bildigi bilesikler ile etiketlenebilmektedir. Bunlardan, radyoaktif etiketleme, hemen hemen her çesit deney için ve pek çok varyasyon ile kullan Thbilmektedir. Enzim-konjüge etiketler, radyoaktiviteden kaçîillnasFlgerektigi zaman ve çabuk neticelere ihtiyaç duyuldugu zaman, hususi olarak elverislidir. Kullanlînlarjiçin pahaljekipman gerekmesine ragmen tluorokromlar, çok hassas bir saptama metodu tedarik etmektedir. Bu deneylerde elverisli olan antikorlar, monoklonal antikorlar, poliklonal antikorlar ve atinite satlastmümß poliklonal antikorlarEihtiva etmektedir. Alternatif olarak, antikor, mesela protein A veya G veya ikinci antikorlar gibi immünoglobulin için bir afiniteye sahip olan etiketli maddeler ile reaksiyon vasEasßtla dolayljolarak da etiketlenebilmektedir. Antikor, ikinci bir madde ile konjuge edilebilmekte ve antikore konjuge ikinci madde için bir afiniteye sahip bir etiketli üçüncü madde ile saptanabilmektedir. Mesela antikor, biyotine konjuge edilebilmekte ve antikor-biyotin konjugatl,l etiketli avidin veya streptavidin ile saptanmaktadlii. Benzer sekilde, antikor, bir haptene konjuge edilebilmekte ve antikor-hapten konjugatl, etiketli anti-hapten antikoru kullan Tarak saptanmaktad Ü. Alanda slîadan tecrübeye sahip olanlar, bunlar`l ve mevcut bulusa uygun olarak kullanJhbilecek diger uygun etiketleri bilecektir. Bu etiketlerin antikorlara veya bunlarEi fragmanlarma baglanmasÇ alanda sîadan tecrübeye sahip olan kiinselerin bildigi standart teknikler kullanJlarak gerçeklestirilebilmektedir. Tipik teknikler, Kennedy, J. H. v.d. ,da tarif edilmektedir. ikincisinde bahsedilen baglama teknikleri, glütaraldehit metodu, periyodat metodu, dimaleimit metodu ve digerleridir. Mevcut bag sikl k deneyleri, bir analitin varllglnl !saptamak için bir çift antikor metodu kullanmaktadlri. Antikor, saptanabilir bir antikor ile etiketlenmis olan ikinci bir antikor ile reaktiflik ile dolaylîolarak etiketlenmektedir. Ikinci antikor, tercihen, monoklonal antikorun elde edilmis oldugu hayvani antikorlarîia baglanan bir antikordur. Bir baska deyisle, eger monoklonal antikor, bir fare antikoru ise, 0 zaman, etiketlenmis, ikinci antikor, bir anti-fare antikorudur. Asagîia tarif edilen deneyde kullanJhcak olan monoklonal antikor için, bu etiket, tercihen bir antikor-kaplamalEboncuk, hususi olarak bir manyetik boncuk olmaktadE. Burada tarif edilen baggslüîlüî deneyinde kullanmacak. olan poliklonal antikor için, etiket, tercihen, mesela bir radyoaktif, Iloresan veya bir elektrokemilüminesans madde gibi bir saptanabilir moleküldür. Bir analitin varllglnln hlzlll lbelirlemeleri için uyarlanmls olduklarl .için çogunlukla hlZl l format sistemleri olarak adlandlîl'lan alternatif bir çift antikor sistemi de mevcut bulusun alanE dâhilinde kullanlhbilmektedir. Sistem, antikor ve analit arasEida yüksek afinite gerektirmektedir. Mevcut bulusun bir yapüanmasüia göre, amiloid proteininin varlEgJ her biri amiloid proteini için spesifik olan bir çift antikor kullanührak tespit edilmektedir. Söz konusu antikorlar çiftinden biri, burada bir "detektör antikor" olarak adlandmlmaktadî ve söz konusu antikorlar çiftinden digeri, burada bir "yakalama antikoru" olarak adlandîüînaktadî Mevcut bulusa ait monoklonal antikor, ya bir yakalama antikoru olarak ya da bir detektör antikoru olarak kullanühbilmektedir. Mevcut bulusa ait monoklonal antikor, ayrEla, tek bir deney içinde hem yakalama hem de detektör antikoru olarak kullanilabilmektedir. Dolaysllyla, mevcut bulusun bir yapllanmasd bir biyolojik slyU numunesi içinde amiloid proteinini saptamak için çift antikor sandviç metodunu kullanmaktadln. Bu metotta, analit (amiloid proteini), detektör antikor ve yakalayldl antikor araslîida sandviç edilmekte, yakalama antikoru, bir katl- destek üzerine, ters çevrilemez sekilde immobilize edilmektedir. Detektör antikor, antikor-analit sandviçinin varllgln lve dolaylîýla analitin varlFgFnFbelirtmek amaclýla, saptanabilir bir etiket ihtiva edecektir. Kat faz madde örnekleri, smilandißE olmamak üzere, rayoimmünoassay ve enzim immünoassay alanEida iyi bilinen mikrotitre plakalarüpolistiren, manyetik, plastik veya cam boncuklar ve kütaklarüihtiva etmektedir. Antikorlarg katüfazlara baglamak için metotlar, alanda tecrübe sahibi olanlar tarafßldan iyi bilinmektedir. Yakîi zamanda, birtakEn gözenekli mazlemeler, mesela naylon, nitroselüloz, selüloz asetat, cam fiberler ve diger gözenekli polimerler ve baska gözenekli malzemeler, kat _destekler olarak kullanLIJnStLr. Bulus ayrlda, bir biyolojik nuinune içinde amiloid proteinini saptamak için, yukarida belirtildigi gibi bir kompozisyon içeren teshis kiti de ifsa edilmektedir. Bundan baska, mevcut bulus, yukarîla belirtilen gibi bir kompozisyona ilave olarak, ayrßa yukarEla belirtildigi gibi bir saptama ajan :Jda içeren bir teshis kiti ile ilgilidir. "Teshis kiti" terimi, genel olarak alanda bilinen herhangi bir teshis kitine atîiyapmaktadE. Daha spesifik olarak, ikinci bahsedilen terim, Zrein v.d. (1998)°de tarif edildigi gibi bir teshis kitine atîl yapmaktadm. Bulusun yine bir baska amacL,J amiloid-baglant lJUhastalklaan ve durumlarln saptanmas Lve teshisi için, bulusa göre antikorlar içeren yeni immünoproblarln ve test kitlerinin saglanmasldlr. Immüno-problar için, antikorlar, uygun bir ulak moleküle, mesela bir enzime veya bir radyonüklide dogrudan veya dolayl`|olarak tutturulmaktad î. Test kiti, bulusa göre bir veya daha fazla antikoru tutan bir kap ve bir immünolojik kompleks olusturmak için antikorlarÇ amiloid proteinine baglama ve immünolojik kompleksin varlfgmm veya yoklugunun, amiloid proteininin varlfgjveya yoklugu ile iliskili olacag üsekilde immünolojik kompleksin olusumunu saptama amac Stla kullanmak için talimatlar ihtiva etmektedir. ÖRNEKLER Malzemeler Fare monoklonal antikorun ACI-01-Ab7C2 (basvuru boyunca "mC2" ve insanlastlnlmls antikor için hC2 olarak adlandlrillmaktadlii) gelisimi ve hazliilanmasl, 12.12.2005"de dosyalanan birlikte-bekleyen basvuru EP 05 02 7092.5,de tarif edilmektedir. Fare monoklonal antikoru ACI-01-Ab7C2,yi (basvuru boyunca "mC2" ve insanlastlîilmlê C2 antikoru için hC2 olarak isimlendirilmektedir) üreten hibridom hücreleri FP-12H3-C2, Budapeste Anlasmasim sartlarjaltßda birlikte-bekleyen basvuru No. EP5027092.5,de verilmistir ve DSM ACC2750 erisim numaras Elverilmistir. Hibridom hücreleri, %10 fetal sgLii serumu ve antibiyotikler (Penisilin/Streptomisin) ile takviye edilmis Dulbeccosnun modifiye Eagle Besiyeri (DMEM) içinde kültürlenmistir. Üretilen antikorun izotipi kontrol edilmistir ve beklendigi gibi fare lgG2b/kappa oldugu bulunmustur. Amiloid Betasya baglanmak için bir ELISA, C2 antikorlariEi gücünü ölçmek için güvenilir bir ölçüm saglamßtü. Pozitif kontrol antikorlarjmurin FP-12H3-C2 antikoru (Genovac Lot No: IK379/Ol) ve standart Chemicon antikoru . Klinik antikor aday' liçin immün sistemi rekrutmanl makul olmad gl liçin, ag 11 zincir için seçilen insan sabit bölgesi, eklem bölgesi içinde pozisyon 228,de Serin'i Prolinse degistirmek için modifiye edilmis lgG4 idi. (HuIgG4 Ser-Pro). Bu mutasyon, zincirler arasü disülfit bagEiJ stabilize etmektedir ve dogal insan lgG4 preparasyonlarlîida meydana gelebilecek olan yarlîn moleküllerin olusumunu engellemektedir. Üretim hücre çizgilerinden ifade edilen antikor da terminal lizin çkarümg olacakti. Insan sabit bölgeleri HuIgG4 Ser- Pro'nun ve insan Kappainm sekanslarü s îlas ß/la SEK KIM NO: 17 ve 14,de verilmektedir. Sekans Listesi <110 AC Immune S.A. <110 Genentech, Inc. <120 Insanlastlii Itmls antikor <130 Ml967 EP/A/l BS <160 32 <170 Patentin versiyon 3.3 <2101 <211 10 <212 PRT <213 Mus musculus <220 <400 1 <210 2 <211 `17 <212 PRT <213 Mus musculus <220 <400 2 Ser Ile Asn Ser Asn Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Vai Lys l 5 10 15 <210 3 <21 1 3 <212 PRT <213 Mus musculus <220 <400 3 <2104 <211 16 , <212 PRT <213 Mus musculus <220 <400 4 Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Ty: Ser Asn Gly Asp Thr Tyr Leu His 1 5 10 15 <210 5 <2117 <212 PRT <213 Mus musculus <220 <400 5 <210 6 <21 1 9 <212 PRT <213 Mus musculus <220 <400 6 Ser Gln Ser Thr His Val Pro Trp Thr <210 7 <211 6 <212 PRT <213 Homo sapiens <220 <400 7 <210 8 <211 5 <212 PRT <213 Homo sapiyen <220 <400 8 <2109 <2X16 <212 PRT <2|3 Homo sapiyen <220 <221 çesitli_özellik <222 (1)..(1) <223Xaa burada A1a,Val, Leu, norlösin,Met, Phe, veya Ile olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222(4)..(4) <223Xaa burada Ala, Val, Leu, Ser veya Ile olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222(5)..(5) <223Xaa burada Glu veya Asp olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222(6)..(6) <4009 <210 10 <2115 <212PRT <213 Homo sapiyen <220 <221 çesitli_öze]lik <222 (1)..(1) <223 Xaa burada His,Asn,Gln Lys,veya Arg olabilir <220 <221 çesitliýözellik <222 (2)..(2) <223Xaa burada Asn veya Gln olabilir <220 <221 Ilisc_feature <222(5)..(5) <223Xaa burada Ala, Val, Leu, nörlösin,Met, Phe, veya Ile olabilir <40010 <210 ll <211 10 <212 PRT <2 1 3 Homo sapiyen <220 <221 çesitli_özellik <222 (1)..(1) <223 Xaa burada His, Asn, Gln Lys, veya Arg olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222 (2)..(2) <223 Xaa burada Asn veya Gln olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222 (5)..(5) <223 Xaa burada Ala, Val, Leuv nörlösin, Met, Phe, veya Ile olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222 (8)..(8) <223 Xaa burada Ala, val, Leu, ser veya Ile olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222 (9)..(9) <223 Xaa burada Glu veya Asp olabilir <220 <221 çesitli_özellik <222 (10)..(10) <223 Xaa Glu veya Asp olabilir <400 1 l Xaa Xaa Lys Leu Xaa Phe Phe Xaa Xaa Kan <210 12 <211 112 <212 PRT <213 Yapay sekans <220 <223 yapay insanlastlîmmß C2 HuVK 1 degisken hafif zincir <400 12 Asp Ile Val Met Th: Gln Ser Pro Leu Ser Glu Pro Ala Ser Ile Sar Cys Arg Ser Ser Asn Gly Asp Thr Tyr Leu His Trp Ty: Leu Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asu Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Giy Thr Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Thr Bis Val Pro sz Thr Phe Gly Gln Giy 100 105 <210 13 <211 219 <212PRT <213»yapaysekans <220 <223 yapay insanlastEÜJmS C2 hafif zincir <400 13 <210 14 <211107 <212 PRT <2 l 3 yapay sekans <220 <223 yapay insanlastEÜJmS C2 hafif zincir sabit bölge <400 14 <21015 <211 112 <2l2 PRT <213 yapay sekans <220 <223 yapay insanlastüülmß C2 HuVH AF 4 degisken ag& zincir <400 15 <210 16 <211439 <212 PRT <213 yapay sekans <220 <223 yapay insanlastEÜJmS C2 agî zincir <400 16 <21017 <211326 <212 PRT <213 Homo sapiyen <220 <223 1G GAMMA-4 ZINCIR C BÖLGESI -modifiye <400 17 <210 18 <211 51 <212Z DNA <213 Mus musculus <220 <400 18 <210 19 <2119 <212 DNA <213 Mus musculus <220 <400 19 <210 20 <211 49 <212 DNA <213 Mus musculus <220 <400 20 <21021 <221 336 <212 DNA <213 yapay sekans <220 <223 yapay insanlastiüînß 02 Hu VK l degisken hafif zincir <400 21 <210 22 <211 657 <212 DNA <2 1 3 yapay sekans <220 <223 yapay insanlastlr lmis 02 hafif Zincir <400 22 <210 23 <21 1 321 <212 DNA <213 Homo sapiyen <220 <223 yapay insanlastEJInS C2 hafif zincir sabit bölge <400 23 <210 24 <211336 <212 DNA <213 yapay sekans <220 <223 yapay insanlastEJInß C2 HuVH AF degisken agm zincir <400 24 <210 25 <211 <212 DNA <213»yapaysekans <220 <223 yapay insanlastlrllmls C2 aglr zincir <400 25 <210 26 <211981 <212DNA <213 Homo sapiyen <220 gACCcctgag <223 yapay insanlastlrHtmlS C2 ag Ü Zincir sabit bölge <40026 Cgtgtqgtca <210 <211 112 <212 PRT <213 Mus musculus <400 27 <210 28 <211 112 <212 PRT <213 Mus musculus <400 28 6.111 <21029 <211336 <212 DNA <213 Mus musculus <40029 <21030 <211417 <212 DNA <213 Mus musculus <40030 <21031 <211336 <212 DNA <2l3 Mus musculus <4003 l <2lO32 <211408 <212 DNA <213 Mus musculus <40032 TR

Claims (1)

1.ISTEMLER 1. Bir insanlastmlmts antikor veya bunun fragmanLolup, burada söz konusu antikor veya bunun fragman asag dakileri içermektedir: olarak ayri lolan bir amino asit sekanslna sahip bir Aglii Zincir Degisken Bölgesi (HCVR), burada HCVR SEK KIM NO: l”de gösterildigi üzere bir aglî zincir tamainlayBJbölgesi l (CDRI), SEK KIM NO:2,de gösterildigi üzere bir agm zincir CDR2iyi, SEK KIM NO:3,te gösterildigi üzere bir agm zincir CDR3”ü içermektedir, ve (ii) SEK KIM NO:47te gösterildigi üzere bir hafif zincir CDRlaini, SEK KIM NO:5”te gösterilen bir hafif zincir CDR2'yi, SEK KIM NO:6,da gösterilen bir RVSNRFS veya KVSSRFS ve hafif zincir CDR3°ü içeren bir hafif zincir degisken bölgesini (LCVR) veya (B) (i) SEK KIM NO:1'de gösterilen bir agLrj zincir CDRlsi, SEK KIM NO:2,de gösterilen bir aglr. zincir CDRZsini, SEK KIM NO:3'te gösterilen agn zincir CDR3iünü içeren bir HCVR ve (ii) SEK KIM NO:12lnin amino asit sekanslyla %96, LCVR SEK KIM NO:4,te gösterilen bir hafif zincir CDRIH içermektedir, SEK KIM NO:5”te gösterilen bir hafif zincir CDR2,yi içermektedir ve SEK KIM NO:6,da gösterilen RVSNRF S veya KVSSRFS ve hafif zincir CDR3”ü içermektedir, burada söz konusu antikor veya bunun fragmanü özellikle bir ß-amiloid proteinine baglanmaktad B. özdes bir amino asit sekanslna sahip oldugu Istem l (A)`ya göre insanlastlrllms antikor veya bunun fragmanî özdes bir amino asit sekans Iia sahip oldugu Istem l (B),ye göre insanlastîlmß antikor veya bunun fragman E 4. Asagdßakileri içeren Istemler 1 ila 3”ten herhangi birine göre bir insanlastmüîns antikor veya bunun fragmani i) SEK KIM NO:15”in ainino asit sekanslna sahip bir HCVR veya SEK KIM NO: 1 5,in amino asit sekanslna %97,%98 veya % 99 özdes olan bir amino asit sekans ;l ii) SEK KIM NO: 12'nin amino asit sekanslna sahip LCVR, veya SEQ KIM NO: 12'nin amino asit sekans lîia % 97,% 98, veya % 99 özdes bir amino asit sekanslîveya iii) SEK KIM NO:15iin amino asit sekansEia %97%, %98, veya %99, özdes olan bir amino asit sekansüveya SEK KIM NO:15`in amino asit sekansßa sahip HCVR, ve SEK KIM NO:12,nin amino asit sekansßa %97, %98, veya %99 özdes olan bir amino asitsekans :Veya SEK KIM NO:125nin amino asit sekans îla sahip LCVR. 5. Asag Bakileri içeren Istemler 1 ila 37ten herhangi birine göre insanlastßümß antikor veya bunun fragman L asit sekansîijçeren bir agm zincir; veya asit sekansijçeren bir hafif zincir; veya amino asit sekansnjçeren bir agm zincir; ve SEK KIM NO: 13,ün amino asit amino asit sekans Veya SEK KIM NO:13,ün amino asit sekanslnl içeren bir hafif 6. Antikorun IgG4 izotip oldugu önceki istemlerden herhangi birine göre insanlastEEûnE antikor veya bunun fragmanE 7. Söz konusu insanlastmürng antikor veya bunun fragmanmi ß-amiloid monomerlerinin yüksek moleküler fibrillere agregasyonunu ve önceden olusturulmus polimerik fibriller veya iilamenlerin bir birbirinden ayrßtßüînasijengelleyebilen önceki istemlerden herhangi birine göre bir insanlastEJhi E antikor veya bunun fragman: 8. Söz konusu insanlastliillms antikor veya bunun fragman n 11 bir AB monomerine söz konusu antikor veya bunun fragmanlnln baglanma afinitesinden en az 10 kat, en az 15 kat, en az 20 kat, veya en az 25 kat daha yüksek olan bir baglanma afinitesi ile bir Aß fiber, fibril veya filamentine bagland g lönceki istemlerden herhangi birine göre insanlastlrllllnls antikor veya bunun fragman Il 9. Önceki istemlerden herhangi birine göre bir insanlast n Iimis antikor veya bunun fragmani olup burada, (a) agi zincir degisken bölgesinin çerçeve bölgelerinin Kabat pozisyonu 47°sindeki amino asit, Leu amino asididir ve/veya (b) agm zincir degisken bölgesinin çerçeve bölgelerinin Kabat pozisyonu 94,ündeki amino asit, Ser amino asididir ve/veya (c) ag] zincir degisken bölgesinin çerçeve bölgelerinin Kabat pozisyonu 87”sindeki amino asit, Tyr, Phe, Leu, Val, Ile veya Ala amino asididir. 10. Istemler 1 ila 9idan herhangi birine göre insanlastlrllmls antikor veya bunun fragmanlnl l kodlayan bir nükleotit sekans n içeren bir nükleik asit molekülü. 11. istem lO”un nükleik asit molekülünü içeren bir ekspresyon vektörü. 12. Istem lliin ekspresyon vektörünü içeren bir hücre. 13. Ilave olarak bir farmasötik olarak kabul edilebilir tasSIEE bir seyreltici ve/veya bir eksipiyan jiçeren, ve Isemler 1 ila 9”dan herhangi birine göre insanlastmüînß antikor veya bunun fragmanlnl içeren bir bilesim. 14. Ilave olarak biyolojik aktif bir madde, bir farmasötik olarak kabul edilebilir tas y d ,lbir seyreltici, ve/veya bir eksipiyanj içeren Istemler 1 ila 99dan herhangi birine göre insanlastEEÜnß antikor veya bunun fragmanEijçeren bir karßüi. 15. Istem 14”e göre kargßh olup asaglîlakileri içermektedir: (i) amiloidozisin tedavisinde kullanllan bir bilesik olan biyolojik olarak aktif madde, (ii) en azmdan su bilesiklerden biri: bir anti-oksidatif stres bilesigi; bir anti-apoptotik bilesik; bir metal selatörü; pirenzepin veya metabolitler gibi bir DNA tamir inhibitörü; 3-amin; (x-secretaz aktivatöiü; ß-sekretaz inhibitörü; bir y-sekretaz inhibitön'i; bir tau proteini; bir nörotransmiter; bir ß-yaprak kEEßE amiloid beta klerans/ tüketme selüler bilesenlerinin bir atraktanE piroglutamated amiloid beta 3-42 gibi bir N-terminal kesilmis amiloid betanîl inhibitörü; bir anti-enflamatuar molekülü; takrin, rivastigmin, donezepil ve/veya galantamin gibi bir kolinesteraz inhibitörü (ChEI); bir MI agonisti; amiloid gibi bir diger ilaç veya bir tau-modifiye edici ilaç veya besin katkßE 16. Bir memeli veya insan gibi bir hayvanda amiloidozisin etkilerini tedavi etmek veya azaltmak için kullanllan lstemler 1 ila 9lda tanlmlandlg gibi bir insanlastlnllmls antikor veya bunun fragmani? Istem l3”te tanlînlandfglîgibi bir bilesim ve Istem 14 veya 15°e göre bir karSIn. 17. Amiloidozisin ikincil amiloidozis oldugu, yasla iliskili amiloidozis oldugu, bir nörolojik bozukluk, Alzheimer hastalIgJ(AD), Lewy vücut demansü Downss sendromu, amiloidozise sahip kalEflsal serebral hemorajü (Hollanda tipi), Guam Parkinson-Bunama kompleksi; ilerleyici supranükleer felç, multipl skleroz; Creutzfeld Jacob hastalEgD Parkinson hastalEgD HIV-baglantLlJJunama, ALS (amyotropik lateral skleroz), Yetiskin Yasta Baslayan Diyabet, yaslll k kardiyak amiloidoz; endokrin tümörleri ve maküler dejenerasyon oldugu Istem 16"ya göre kullanlma yönelik insanlastlii lmis antikor veya bunun fragmanl,lkarls.ml lveya bilesiini. 18. Amiloidozisin Alzheimer hastalgj oldugu Istem 17lye göre kullan &ha yönelik insanlastîülnß antikor veya bunun fragmanükarßünüveya bilesimi. insanlastEmnß antikor veya bunun fragman ükarßlînüveya bilesimi i) bilissel hafga kapasitesinin artgjve/veya; ii) bilissel hafla kapasitesinin muhafaza edilmesi; ve/veya iii) bilissel haf2ta kapasitesinin eksiksiz olarak restore edilmesi. 20. Asag dakileri içeren, bir hastada hastada amiloidozisin teshisine ait yöntem: i) istemler 1 ila 9,dan herhangi birine göre antikor veya bunun fragmanlnln ainiloid proteinine baglanmasila izin veren kosullar altinda bulusun insanlastlîflmlê antikoru veya bunun bir fragmangzla bir amiloid proteinini Içeren bir nuinunenin, vücut parçasii veya vücut alaniîl temas ettirilmesi; ve ii) proteine baglanmß olan antikor veya bunun fragmanEiEi tespit edilmesi, burada proteine baglanmß olan antikor veya bunun fragmanlîlß varlîg'ü ya da yoklugu numunenin, vücut parçasEiEi veya vücut alanîlîl içinde amiloid proteininin varlgîijveya yoklugunu göstermektedir. 21. Asag dakileri içeren, bir doku numunesi veya vücut slVlsll | nuinunesi içerisinde amiloidojenik plaka yükünün miktarîiîi belirlenmesine yönelik yöntem: i) Istemler 1 ila Wdanherhangi birine göre insanlastminß antikor veya bunun bir fragman Stla amiloid proteininin varlgüçin bir doku numunesinin veya vücut sßlßü numunesinin test edilmesi; ii) amiloid proteinine baglîblan antikor veya bunun fragmanßîl miktarîlm belirlenmesi ve iii) doku numunesi veya vücut sysmumunesindeki plak yükünün hesaplanmasLl 22. Istemler 1 ila 9`dan herhangi birine göre bir insanlastlrtllmls antikor veyabununfragmanilîiçeren amiloid-baglantlll'hastall'klar ve durumlarl'saptamak ve teshis etmek için kit olup, burada sözkonusu kit, Istemler 1 ila 9idan herhangi birine göre insanlastîüinß antikor veya bunun fragmanüijsaklamak için bir kabEiçermektedir ve bu antikor veya bunlar& fragmanlar& :kullanmak için talimatlar jçermektedir. 23. 13- amiloid oligomerlerine maruz kalma sonucunda nöronlarEi dejenerasyonunu önlemek üzere, veya ß-amiloidinin baslattEgEbozulmadan nöronlarEl korunmasüiçin bir yöntemde kullan Jlnak üzere Istemler 1 ila `l9”dan herhangi birine göre bir insanlastilînß antikor veya bunun fragmanÇIstem 137te tanEnlandEgEgibi bir bilesim, veya Istem 14 veya 15°teki gibi bir 24. Istemler 1 ila 95dan herhangi birinde tanlmlandigi üzere bir insanlastlrlltnls antikor veya bunun fragmanlîilîi hazlîllanmasîiçin yöntem olup burada yöntem Istem 123nin hücresinin kültürlenmesini içermektedir, ve antikor veya bunun fragmanlnln saflastlnllrnasln l içermektedir. TR
TR2018/02814T 2006-07-14 2007-07-13 Amiloid betaya karşı insanlaştırılmış antikor. TR201802814T4 (tr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06014730 2006-07-14
EP06020765 2006-10-02
US94328907P 2007-06-11 2007-06-11
US94349907P 2007-06-12 2007-06-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201802814T4 true TR201802814T4 (tr) 2018-03-21

Family

ID=49474825

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/02814T TR201802814T4 (tr) 2006-07-14 2007-07-13 Amiloid betaya karşı insanlaştırılmış antikor.

Country Status (21)

Country Link
US (2) US20160272699A1 (tr)
EP (1) EP3309172B1 (tr)
KR (6) KR20170098978A (tr)
CN (3) CN106831983B (tr)
CR (1) CR20140496A (tr)
CY (1) CY1114604T1 (tr)
DK (2) DK2468770T3 (tr)
ES (2) ES2436112T3 (tr)
HU (1) HUE038438T2 (tr)
IL (1) IL254065B (tr)
LT (1) LT2468770T (tr)
ME (2) ME01075B (tr)
MY (2) MY165105A (tr)
NZ (1) NZ607881A (tr)
PH (1) PH12012501882A1 (tr)
PT (2) PT2468770T (tr)
RS (2) RS53160B (tr)
RU (1) RU2668161C2 (tr)
SI (2) SI2468770T1 (tr)
TR (1) TR201802814T4 (tr)
TW (2) TWI608014B (tr)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103179981B (zh) * 2010-07-30 2017-02-08 Ac免疫有限公司 安全和功能性的人源化抗β‑淀粉样蛋白抗体
JO3537B1 (ar) * 2014-07-10 2020-07-05 Bioarctic Neuroscience Ab أجسام مضادة لييفية أولية لاميلويد بيتا الببتيد ab المحسنة
IL263433B2 (en) * 2016-06-07 2024-03-01 Biogen Int Neuroscience Gmbh Methods for treating Alzheimer's disease
CN110062885A (zh) 2016-11-01 2019-07-26 安奈普泰斯生物有限公司 针对t细胞免疫球蛋白和粘蛋白3（tim-3）的抗体
KR20190098263A (ko) 2017-01-09 2019-08-21 테사로, 인코포레이티드 항tim-3 항체로 암을 치료하는 방법

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5132405A (en) 1987-05-21 1992-07-21 Creative Biomolecules, Inc. Biosynthetic antibody binding sites
US5091513A (en) 1987-05-21 1992-02-25 Creative Biomolecules, Inc. Biosynthetic antibody binding sites
JPS6412935A (en) 1987-07-02 1989-01-17 Mitsubishi Electric Corp Constant-speed travel device for vehicle
US5004697A (en) 1987-08-17 1991-04-02 Univ. Of Ca Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier
US5843708A (en) 1988-01-05 1998-12-01 Ciba-Geigy Corporation Chimeric antibodies
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5112596A (en) 1990-04-23 1992-05-12 Alkermes, Inc. Method for increasing blood-brain barrier permeability by administering a bradykinin agonist of blood-brain barrier permeability
US5268164A (en) 1990-04-23 1993-12-07 Alkermes, Inc. Increasing blood-brain barrier permeability with permeabilizer peptides
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
DE69328430T2 (de) 1992-07-27 2001-01-25 Us Health Zielgerichte liposome zur blut-hirne schranke
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
EP1076092A3 (en) 1994-10-21 2001-03-28 Innogenetics N.V. Sequences of hepatitis C virus type10 and their use as prophylactic, therapeutic and diagnostic agents
US5756662A (en) 1995-03-14 1998-05-26 Corixa Corporation Compounds and methods for the detection of T. cruzi infection
US6632976B1 (en) 1995-08-29 2003-10-14 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Chimeric mice that are produced by microcell mediated chromosome transfer and that retain a human antibody gene
ATE205086T1 (de) * 1996-08-13 2001-09-15 Gerolymatos P N Sa Verwendung von dem chelatbildner clioquinol zur herstellung eines arzneimittelszur behandlung von alzheimerschen krankheit
US7964192B1 (en) * 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US7179892B2 (en) * 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
DE69942021D1 (de) 1998-04-20 2010-04-01 Glycart Biotechnology Ag Glykosylierungs-engineering von antikörpern zur verbesserung der antikörperabhängigen zellvermittelten zytotoxizität
AU784312B2 (en) * 1999-11-29 2006-03-09 Bellus Health (International) Limited Vaccine for the prevention and treatment of alzheimer's and amyloid related diseases
US20020094335A1 (en) * 1999-11-29 2002-07-18 Robert Chalifour Vaccine for the prevention and treatment of alzheimer's and amyloid related diseases
CZ306683B6 (cs) * 2000-02-24 2017-05-03 Washington University Léčivo pro prevenci nebo léčení preklinické nebo klinické Alzheimerovy nemoci
US6514221B2 (en) 2000-07-27 2003-02-04 Brigham And Women's Hospital, Inc. Blood-brain barrier opening
AU2001286930A1 (en) 2000-08-30 2002-03-13 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
US7034036B2 (en) 2000-10-30 2006-04-25 Pain Therapeutics, Inc. Inhibitors of ABC drug transporters at the blood-brain barrier
US20030083299A1 (en) 2000-11-04 2003-05-01 Ferguson Ian A. Non-invasive delivery of polypeptides through the blood-brain barrier
DE10121982B4 (de) 2001-05-05 2008-01-24 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Nanopartikel aus Protein mit gekoppeltem Apolipoprotein E zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke und Verfahren zu ihrer Herstellung
US20030129186A1 (en) 2001-07-25 2003-07-10 Biomarin Pharmaceutical Inc. Compositions and methods for modulating blood-brain barrier transport
EP1423510A4 (en) 2001-08-03 2005-06-01 Glycart Biotechnology Ag ANTIBODY GLYCOSYLATION VARIANTS WITH INCREASED CELL CYTOTOXICITY DEPENDENT OF ANTIBODIES
CN100488982C (zh) * 2001-11-02 2009-05-20 迪尔基因国际有限公司 与β-淀粉样蛋白结合并引起蛋白质构象转变的单克隆抗体的制备方法
AR038568A1 (es) * 2002-02-20 2005-01-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-a beta y su uso
US20030162695A1 (en) 2002-02-27 2003-08-28 Schatzberg Alan F. Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
CA2791165C (en) 2002-12-03 2015-02-24 Blanchette Rockefeller Neurosciences Institute A conjugate comprising cholesterol linked to tetracycline
BR0317747A (pt) 2002-12-24 2005-11-22 Neurochem Int Ltd Método de tratamento terapêutico concomitante de um indivìduo, composição farmacêutica, kit, uso de um primeiro agente e um segundo agente, e, métodos de prevenir ou tratar uma doença relacionada com amilóide-b, doença de alzheimer e insuficiência cognitiva suave
ES2344645T3 (es) * 2003-02-10 2010-09-02 Applied Molecular Evolution, Inc. Moleculas de union al abeta.
EP1663239A4 (en) 2003-09-10 2008-07-23 Cedars Sinai Medical Center KALIUM CHANNEL-MEDIATED FEEDING OF MEDICINES BY THE BLOOD BRAIN BARRIER
KR20070094890A (ko) * 2004-10-25 2007-09-27 머크 앤드 캄파니 인코포레이티드 안티 ａｄｄｌ 항체 및 그 용도
CA2790433A1 (en) * 2004-10-25 2006-05-26 Northwestern University Anti-addl antibodies and uses thereof
TW200635608A (en) * 2004-12-15 2006-10-16 Neuralab Ltd Aβ antibodies for use in improving cognition
EP1976877B2 (en) * 2005-11-30 2016-10-05 AbbVie Inc. Monoclonal antibodies against amyloid beta protein and uses thereof
MX358175B (es) * 2005-12-12 2018-08-08 Ac Immune Sa Anticuerpos monoclonales especificos 1-42 beta con propiedades terapeuticas.
CN101058608B (zh) * 2006-04-21 2011-02-23 杜如昱 人类抗Aβ1-32淀粉样蛋白抗体、其纯化方法及用途

Also Published As

Publication number Publication date
TW201527319A (zh) 2015-07-16
CN106831983A (zh) 2017-06-13
CN101516911A (zh) 2009-08-26
MY165105A (en) 2018-02-28
TWI608014B (zh) 2017-12-11
PH12012501882B1 (en) 2014-09-08
KR20160049045A (ko) 2016-05-04
BRPI0714713A2 (pt) 2014-10-29
IL254065B (en) 2020-07-30
ES2436112T3 (es) 2013-12-27
ME01758B (me) 2014-09-20
SI2046833T1 (sl) 2013-12-31
DK2046833T5 (en) 2014-03-24
KR20170098978A (ko) 2017-08-30
US20220227847A1 (en) 2022-07-21
PH12012501882A1 (en) 2014-09-08
CN103524617A (zh) 2014-01-22
RU2013115283A (ru) 2014-10-10
DK2468770T3 (en) 2018-03-12
CN101516911B (zh) 2016-11-16
NZ607881A (en) 2014-11-28
CR20140496A (es) 2014-12-01
DK2046833T3 (da) 2013-10-28
PT2468770T (pt) 2018-03-09
SI2468770T1 (en) 2018-05-31
CN106831983B (zh) 2021-11-30
TW201815827A (zh) 2018-05-01
HUE038438T2 (hu) 2018-10-29
EP3309172B1 (en) 2021-09-29
EP3309172A1 (en) 2018-04-18
MY153248A (en) 2015-01-29
KR20150087435A (ko) 2015-07-29
RS53160B (en) 2014-06-30
ES2661562T3 (es) 2018-04-02
KR20190003862A (ko) 2019-01-09
RS56986B1 (sr) 2018-05-31
CY1114604T1 (el) 2016-10-05
LT2468770T (lt) 2018-05-25
US20160272699A1 (en) 2016-09-22
ES2436112T9 (es) 2014-06-04
PT2046833E (pt) 2013-11-27
KR20180043854A (ko) 2018-04-30
KR20160147066A (ko) 2016-12-21
CN103524617B (zh) 2016-12-28
RU2668161C2 (ru) 2018-09-26
ME01075B (me) 2012-10-20
IL254065A0 (en) 2017-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2468770B1 (en) Humanized antibody against amyloid beta.
ES2640095T3 (es) Anticuerpo humanizado contra beta-amiloide
ES2529174T3 (es) Anticuerpos humanizados para amiloide beta
AU2015200844B2 (en) Humanized antibody
RU2542967C2 (ru) Применение антитела против амилоида бета при глазных заболеваниях
US20220227847A1 (en) Humanized antibody
US20200055928A1 (en) Humanized antibody
JP2022070853A (ja) アミロイドβに対するヒト化抗体
JP2021006025A (ja) アミロイドβに対するヒト化抗体
EP3988566A1 (en) Humanized antibody against amyloid beta
BRPI0714713B1 (pt) Anticorpo humanizado ou um fragmento ativo do mesmo, composição farmacêutica, molécula de ácido nucléico, vetor de expressão, microrganismo transgênico não animal nem vegetal, composição, mistura, uso do anticorpo humanizado ou fragmento ativo do mesmo, método para produzir um anticorpo humanizado ou fragmento ativo do mesmo, método in vitro para detecção de amiloidose, método in vitro para determinar o grau da carga de placa amiloidogênica
AU2016204956A1 (en) Humanized antibody against amyloid beta
AU2013202799A1 (en) Humanized antibody against amyloid beta