TH9858B - กระบวนการผลิตสาร planuotol โดยใช้เอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase - Google Patents
กระบวนการผลิตสาร planuotol โดยใช้เอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylaseInfo
- Publication number
- TH9858B TH9858B TH9701000269A TH9701000269A TH9858B TH 9858 B TH9858 B TH 9858B TH 9701000269 A TH9701000269 A TH 9701000269A TH 9701000269 A TH9701000269 A TH 9701000269A TH 9858 B TH9858 B TH 9858B
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- enzyme
- hydroxylase
- geranylgeraniol
- geraniol
- leaves
- Prior art date
Links
- 108030000620 Geranylgeraniol 18-hydroxylases Proteins 0.000 title claims abstract 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract 17
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract 17
- OJISWRZIEWCUBN-QIRCYJPOSA-N (E,E,E)-geranylgeraniol Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CO OJISWRZIEWCUBN-QIRCYJPOSA-N 0.000 claims abstract 5
- XWRJRXQNOHXIOX-UHFFFAOYSA-N geranylgeraniol Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCOCC=C(C)CCC=C(C)C XWRJRXQNOHXIOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 5
- OJISWRZIEWCUBN-UHFFFAOYSA-N geranylnerol Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCO OJISWRZIEWCUBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 4
- SUWYPNNPLSRNPS-UNTSEYQFSA-N plaunotol Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(CO)=C\CC\C(C)=C\CO SUWYPNNPLSRNPS-UNTSEYQFSA-N 0.000 claims abstract 4
- 229950009291 plaunotol Drugs 0.000 claims abstract 4
- SUWYPNNPLSRNPS-UHFFFAOYSA-N plaunotol Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(CO)=CCCC(C)=CCO SUWYPNNPLSRNPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract 3
- GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N Geraniol Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCO GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims 3
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 claims 3
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 claims 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000005792 Geraniol Substances 0.000 claims 2
- GLZPCOQZEFWAFX-YFHOEESVSA-N Geraniol Natural products CC(C)=CCC\C(C)=C/CO GLZPCOQZEFWAFX-YFHOEESVSA-N 0.000 claims 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 2
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 2
- 229940113087 geraniol Drugs 0.000 claims 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 2
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 241001529550 Croton sublyratus Species 0.000 claims 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 claims 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 claims 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241001448862 Croton Species 0.000 abstract 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 abstract 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract 2
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 abstract 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
Abstract
DC60 (27/01/40) การประดิษฐ์เป็นการผลิตสาร plaunotol ซึ่งมีคุณค่าในทางยาจากสารตั้งต้น geranylgeraniol ซึ่งเป็นสารที่มีราคาถูกและสังเคราะห์ได้ง่าย โดยใช้เอนไซม์ geranyl- geraniol-18-hydroxylase เอนไซม์นี้เป็นเอนไซม์ที่พบในการประดิษฐ์นี้เป็นครั้งแรกในใบ ของต้นเปล้าน้อยซึ่งเป็นพืชที่พบได้ในประเทศไทย การพบเอนไซม์นี้ทำให้นำไปสู่แนวทาง ใหม่ในการที่จะให้ได้มาซึ่งสาร plaunotol โดยใช้วิธี enzymatic conversion การประดิษฐ์นี้ได้ ศึกษาคุณสมบัติบางอย่างของเอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase ซึ่งพบว่าเป็น เอนไซม์ที่อยู่ใน 20,000 g microsomal fraction ที่มีความคงทนต่อความร้อนสูง มีประสิทธิ ภาพในการเร่งปฏิกริยาได้ดีที่ pH 5 และมีความจำเพาะเจาะจงสูงต่อสารตั้งต้น geranyl- geraniol การประดิษฐ์เป็นการผลิตสาร plaunotol ซึ่งมีคุณค่าในทางยาจากสารตั้งต้น geranylgeraniol ซึ่งเป็นสารที่มีราคาถูกและสังเคราะห์ได้ง่าย โดยใช้เอนไซม์ geranyl- geraniol-18-hydroxylase เอนไซม์นี้เป็นเอนไซม์ที่พบในการประดิษฐ์นี้เป็นครั้งแรกในใบ ของต้นเปล้าน้อยซึ่งเป็นพืชที่พบได้ในประเทศไทย การพบเอนไซม์นี้ทำให้นำไปสู่แนวทาง ใหม่ในการที่จะให้ได้มาซึ่งสาร plaunotol โดยใช้วิธี enzymatic conversion การประดิษฐ์นี้ได้ ศึกษาคุณสมบัติบางอย่างของเอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase ซึ่งพบว่าเป็น เอนไซม์ที่อยู่ใน 20,000 g microsomal fraction ที่มีความคงทนต่อความร้อนสูง มีประสิทธิ ภาพในการเร่งปฏิกริยาได้ดีที่ pH 5 และมีความจำเพาะเจาะจงสูงต่อสารตั้งต้น geranyl- geraniol สิทธิบัตรยา
Claims (6)
1. กระบวนการเตรียม เอนไซม์เจรานิออล-สิบแปด-ไฮดรอกซิเลส (geranylgeraniol-18-hydroxylase) ที่มีความจำเพาะต่อการทำไฮดรอกซิเลชั้นเจรานิลเจรานิออลที่คาร์บอนตำแหน่งสิบแปดเพื่อให้ได้สาร เปลาโนทอล (plaunotol) โดยที่กระบวนการดังกล่าวประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้ 1.1 การสกัดสารสกัดของเอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase จากใบของต้นเปลาน้อย (Croton sublyratus) ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่มีวิธีการสกัดด้วยการเติมสารละลายบัฟเฟอร์สำหรับใช้ ในการสกัดลงในผงของใบเปล้าน้อยที่ได้จากการบดในเปล้าน้อยซึ่งถูกทำให้เย็นจัดด้วยไนโตรเจน เหลว และคนได้เป็นสารละลายแขวนลอย (suspension) ที่เมื่อนำไปกรองก็จะได้สารสกัดของเอนไซม์ ดังกล่าว 1.2 การแยกเอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase จากสารสกัดที่ได้จาก 1.1 ด้วยความ แตกต่างของแรงหมุนเหวี่ยง (different centrifugation) กล่าวคือ หมุนเหวี่ยงสารสกัดที่ได้นั้นที่ความ แรงครั้งแรก 3000 g เพื่อให้ได้ชั้นของเหลว (liquid supernatant) ที่เมื่อนำไปหมุนเหวี่ยงครั้งที่สองที่ ความแรง 20,000 g ให้ส่วนตะกอน (pellet) ที่เรียกว่าสวนเอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase ที่บริสุทธิ์ ขึ้นก่อนได้รับการกระตุ้นด้วยการนำไปต้มที่อุณหภูมิ 100 ํ ซ. เป็นเวลา 30 นาที
2. กระบวนการตามข้อถือสิทธิ 1 สารละลายบัฟเฟอร์ที่ใช้สกัดมีองค์ประกอบดังนี้ 2.1 ไตรซีน-โซเดียมไฮดรอกไซด์ ที่ pH 7.8 2.2 เบต้า-เมอร์แคปโทเอธานอล 2.3 ซูโครส 2.4 อีดีทีเอ (EDTA 2.5 ดีทีที (DTT) 2.6 แมกนีเซียมคลอไรด์ 2.7 บีเอสเอ (BSA)
3. เอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase ที่บริสุทธิ์ขึ้นที่ได้จากกระบวนการตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งมีลักษณะเป็นอนุภาค (particle) ขนาดเล็กเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 20 ถึง 40 นาโนเมตร ที่มี ไฮดรอกซิแอคคิวิตี้สูงสุดที่ pH 5 มีความจำเพาะต่อการทำไฮดรอกซิเลชั่น goranylgoraniol ที่ คาร์บอนตำแหน่ง 18 ให้สารเปลาโนทอล และทำให้มีแอคคิวิตี้สูงขึ้นได้ด้วยการใช้เอนไซม์ร่วม (coenzyme)
4. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 3 สามารถถูกระตุ้น (activate) ได้ด้วยการใช้ความร้อนที่ อุณหภูมิ 100 ํ ซ. เป็นเวลา 30 นาที
5. กระบวนการผลิตสารปลาโนทอลที่มีการใช้เอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase ตามข้อถือ สิทธิ 3 เติมหมู่ไฮดรอกซิลที่คาร์บอนตำแหน่ง 18 ของสารตั้งต้น geranylgeraniol ในสภาวะที่ กระบวนการผลิตดำเนินไปที่ pH 5 มีการใช้เอนไซม์ร่วม และมีการกระตุ้นเอนไซม์ที่นำมาใช้ด้วย การทำให้ร้อน ณ อุณหภูมิ 100 ํ ซ. เป็นเวลา 30 นาที ก่อนการทำไฮดรอกซิเลชั่น
6. กระบวนการผลิตสารเปลาโนทอลตามข้อถือสิทธิ 5 เอนไซม์ร่วมที่ใช้คือ เอนเอดีพีเอช (NADPH)
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH25674A TH25674A (th) | 1997-06-24 |
| TH9858B true TH9858B (th) | 2000-09-28 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2016368075B2 (en) | Microbacterium SP. Strain and method for producing Psicose by using same | |
| CN101857887B (zh) | 一种利用重组菌无细胞提取物催化不对称转化制备光学纯芳基醇的方法 | |
| JP6934066B2 (ja) | マイクロバクテリウム属菌株およびこれを用いたプシコース生産方法 | |
| CN105112303A (zh) | 一种产酒用复合酶的黑曲霉菌株 | |
| CN115044627A (zh) | 高效生产l-高苯丙氨酸的方法及一种产l-高苯丙氨酸的菌株 | |
| CN103820375B (zh) | 一种生物法生产阿魏酸工程菌株及其构建方法 | |
| Nakagawa et al. | α-Anomer-selective glucosylation of menthol with high yield through a crystal accumulation reaction using lyophilized cells of Xanthomonas campestris WU-9701 | |
| TH9858B (th) | กระบวนการผลิตสาร planuotol โดยใช้เอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase | |
| CN108588152A (zh) | 聚唾液酸发酵培养基、聚唾液酸的生产方法和聚唾液酸制品 | |
| JP5457159B2 (ja) | 新規セスキテルペン合成酵素遺伝子及びそれを利用したセスキテルペンの製造方法 | |
| CN107354118A (zh) | 一种具有γ‑松油烯合成能力的基因工程菌及其构建方法与应用 | |
| JP2022540791A (ja) | ロスマリン酸を産生するための株および方法 | |
| Giovannini et al. | Bacillus stearothermophilus acetylacetoin synthase: A new catalyst for C–C bond formation | |
| TH25674A (th) | กระบวนการผลิตสาร planuotol โดยใช้เอนไซม์ geranylgeraniol-18-hydroxylase | |
| CN108220358A (zh) | 一种(s)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的制备方法 | |
| Akacha et al. | Enzymatic synthesis of green notes with hydroperoxide-lyase from olive leaves and alcohol-dehydrogenase from yeast in liquid/gas reactor | |
| CN107586809A (zh) | 一种生物催化合成大豆低聚糖的方法 | |
| KR102054961B1 (ko) | 마이크로박테리움 속 균주 및 이를 이용한 사이코스 생산방법 | |
| CN103436479B (zh) | 一种高产3-羟基丁酮的基因工程菌及其构建方法和应用 | |
| CN118109429A (zh) | 天然覆盆子酮合成的催化蛋白组合物、菌株及其使用方法 | |
| Li et al. | (R)-Oxynitrilase-catalysed synthesis of chiral silicon-containing aliphatic (R)-ketone-cyanohydrins | |
| KR100720658B1 (ko) | 슈도모나스 에어루지노사에 의한 팔미토레산으로부터하이드록시 지방산의 제조방법 | |
| RS49702B (sr) | Stereoselektivna mikrobska redukcija racemskog tetralona | |
| KR101210454B1 (ko) | 고온성 베타-글리코시다제 효소 및 그 효소를 이용한 컴파운드 케이와 어글리콘 프로토파낙사디올 생산 | |
| KR101540634B1 (ko) | 랄스토니아 피케티 ＬＳＡ７１ 균주 및 이를 이용한 진세노사이드 Ｒｂ１을 진세노사이드 Ｆ２로의 생물 전환 방법 |