TH82740A

TH82740A - วิธีการสำหรับการผลิตสารเป้าหมายโดยการหมัก

Info

Publication number: TH82740A
Application number: TH301002567A
Authority: TH
Inventors: อิชิคาวา นางสาวยูกิโกะ; มัททสึอิ นายคาซูฮิโร; อิมาอิซูมิ นายอาคิระ; โคจิมะ นายฮิโรยูกิ
Original assignee: นางสาวปัณณพัฒน์ เหลืองธาตุทอง; นายชาญชัย ศุภดิลกลักษณ์; นายทวีพูล ศรีหงส์; อายิโนะโมะโตะ โค
Filing date: 2003-07-10
Publication date: 2007-02-01

Abstract

DC60 (29/08/46) ในวิธีการสำหรับการผลิตสารเป้าหมายโดยการใช้จุลินทรีย์, ที่ซึ่งประกอบด้วยการเพาะเลี้ยง แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียมในตัวกลางเพื่อผลิต และ สะสมสารเป้าหมายในตัวกลาง หรือ เซลล์ และ การ เก็บรวมสารเป้าหมายนั้น มีการใช้สายพันธุ์ที่ซึ่งโปรตีน ArcA ไม่ทำหน้าที่อย่างปกติในเซลล์โดยวิธีการ ตัวอย่างเช่น การทำให้ยีน arcA บนโครโมโซมแตกออก

Claims

แก้ไข 1 ตค. 61 ข้อถือสิทธิ 1. วิธีการสำหรับการผลิตสารเป้าหมายซึ่งถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย แอล-ไลซีน, แอล-ทรีโอนีน, แอล-ไอโซลูซีน, กรดแอล-กลูตามิก, แอล-กลูตามีน, แอล-อาร์จีนีน, แอล-โฮโมเซอรีน และกรดซัคซินิค ซึ่งประกอบด้วยการเพาะเลี้ยง (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมในตัวกลาง ภายใต้สภาวะแบบใช้อากาศเพื่อผลิต และสะสมสารเป้าหมายในตัวกลางนั้น หรือเซลล์ และการ สะสมสารเป้าหมายจากตัวกลางหรือเซลล์โดยที่ (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมที่มีความสามารถเพื่อผลิต สารเป้าหมายได้ถูกดัดแปลงเพื่อให้การผลิตของโปรตีน ArcA ถูกทำให้ลดลง หรือถูกทำให้หมดไป และโดยที่โปรตีน ArcA เป็น (A) หรือ (B) ต่อไปนี้: (A) โปรตีนที่มีลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 32; (B) โปรตีนที่มีลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 32 ที่รวมถึงการแทนที่, การ หักออก, การเติมใส่ หรือการเพิ่มของ 2 ถึง 20 กรดอะมิโน และการปรับปรุงความสามารถของ (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมเพื่อให้สารเป้าหมายเมื่อการผลิตของโปรตีนนั้นถูกทำให้ลดลง หรือ ถูกทำให้ หมดไปใน (สูตร)-โปรตีโอแบคทีเรียมเมื่อเทียบกับสารพันธุ์ดั้งเดิมหรือสารพันธุ์ที่มิได้ถูกดัดแปลง ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ ------01/12/2560------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. วิธีการสำหรับการผลิตสารเป้าหมายซึ่งถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย แอล-ไลซีน, แอล- ทรีโอนีน, แอล-ไอโซลูซีน, กรดแอล-กลูตามิก, แอล-กลูตามีน, แอล-อาร์จีนีน, แอล-โฮโมเซอรีน และ กรดซัคซินิค ซึ่งประกอบด้วยการเพาะเลี้ยง (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมในตัวกลาง ภายใต้สภาวะแบบใช้ อากาศเพื่อผลิต และสะสมสารเป้าหมายในตัวกลางนั้น หรือเซลล์ และการละสมสารเป้าหมายจากตัว กลางหรือเซลล์โดยที่ (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมที่มีความสามารถเพื่อผลิตสารเป้าหมายได้ถูกดัดแปลง เพื่อให้การผลิตของโปรตีน ArcA ถูกทำให้ลดลง หรือถูกทำให้หมดไป และโดยที่โปรตีน ArcA เป็น (A) หรือ (B) ต่อไปนี้: (A) โปรตีนที่มีลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 32; (B) โปรตีนที่มีลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 32 ที่รวมถึงการแทนที่, การหัก ออก, การเติมใส่ หรือการเพิ่มของ 1 ถึง 20 กรดอะมิโน และการปรับปรุงความสามารถของ (สูตร)-โปรทีโอ แบคทีเรียมเพื่อให้สารเป้าหมายเมื่อการผลิตของโปรตีนนั้นถูกทำให้ลดลง หรือ ถูกทำให้หมดไปใน (สูตร)- โปรทีโอแบคทีเรียมเมื่อเทียบกับสารพันธุ์ดั้งเดิมหรือสารพันธุ์ที่มิได้ถูกดัดแปลง 2. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1, ที่ซึ่งโปรตีน ArcA ซึ่งถูกนิยามไว้ใน (B) คือโปรตีนที่มี 90% หรือ มากกว่าของความเหมือนกันกับลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO:32 และการปรับปรุง ความสามารถของ (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมเพื่อผลิตสารเป้าหมาย เมื่อการผลิตของโปรตีนนั้นถูกทำให้ ลดลง หรือทำให้หมดไปใน (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมเมื่อเทียบกับสารพันธุ์ดั้งเดิมหรือสารพันธุ์ที่มิได้ถูกดัด แปลง 3. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 2, ที่ซึ่งการผลิตของโปรตีน ArcA ถูกทำให้ลดลง หรือทำให้ หมดไปโดยวิถีของการขัดขวางของยีน arcA บนโครโมโซม และโดยที่ยีน arcA คือ ดีเอ็นเอซึ่งถูกนิยาม ไว้ใน (a) หรือ (b) ต่อไปนี้: (a) ดีเอ็นเอที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของหมายเลขนิวคลีโอไทด์ 101 ถึง 817 ของ SEQ ID NO: 31; (b) ดีเอ็นเอที่สามารถจับคู่ได้กับลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของหมายเลขนิวคลีโอไทด์ 101 ถึง 817 ของ SEQ ID NO: 31 หรือตัวติดตามที่สามารถถูกผลิตขึ้นได้จากลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอ ไทด์ภายใต้สภาวะเข้มงวด และการถอดรหัสสำหรับโปรตีนที่ปรับปรุงความสามารถของ (สูตร)-โปรทีโอ แบคทีเรียมเพื่อผลิตสารเป้าหมายเมื่อการผลิตของโปรตีนถูกทำให้ลดลง หรือกำจัดไปใน (สูตร)-โปรทีโอ หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า แบคทีเรียมเมื่อเทียบกับสารพันธุ์ดั้งเดิมหรือสารพันธุ์ที่มิได้ถูกดัดแปลง โดยที่สภาวะเข้มงวดดังกล่าว คือ 1 X SSC, 0.1% SDS ที่ 60 องศาเซลเซียส 4.วิธีการตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อที่ 1 ถึง 3,ที่ซึ่ง (สูตร)-โปรทีโอแบคทีเรียมคือ แบคทีเรียมที่เป็นแบคทีเรียของสกุล Escherichia หรือ Pantoea ------------

1. แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียม ที่มีความสามารถผลิตสารเป้าหมาย และ ถูกดัดแปลงเพื่อให้โปรตีน ArcA ไม่ทำหน้าที่อย่างปกติ

2. แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อถือสิทธิข้อ 1 โดยที่โปรตีน ArcA ที่ทำหน้าที่อย่างปกติ เป็น โปรตีนที่กำหนดไว้ใน (A) หรือ (B) ต่อไปนี้: (A) โปรตีนที่มีการเรียงตัวกรดอะมิโนของการเรียงตัวที่: 32 (B) โปรตีนที่มีการเรียงตัวกรดอะมิโนของการเรียงตัวที่: 32, ที่รวมถึง การแทนที่, การหักออก, การเติมใส่ หรือ การเพิ่ม ของกรดอะมิโนตัวหนึ่ง หรือ หลายตัว และ ทำให้ความสามารถที่ผลิตสารเป้า หมายดีขึ้นเมื่อโปรตีนนั้นไม่ทำหน้าที่อย่างปกติในแกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียม เมื่อเปรียบเทียบกับกรณีที่ซึ่ง โปรตีนทำหน้าที่อย่างปกติ

3. แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อถือสิทธิข้อ 1 โดยที่โปรตีน ArcA ที่ทำหน้าที่อย่างปกติ เป็น โปรตีนที่มีความเหมือน 70%หรือ มากกว่า กับ การเรียงตัวกรดอะมิโนของการเรียงตัวที่: 32 และ ทำ ให้ความสามารถที่ผลิตสารเป้าหมายดีขึ้นเมื่อโปรตีนนั้นไม่ทำหน้าที่อย่างปกติใน แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียม เมื่อเปรียบเทียบกับกรณีที่ซึ่งโปรตีนทำหน้าที่อย่างปกติ

4. แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อถือสิทธิข้อ 1 โดยที่โปรตีน ArcA ที่ทำหน้าที่อย่างปกติ เป็น โปรตีนที่มีการเรียงตัวกรดอะมิโนของการเรียงตัวที่ 32, ที่รวมถึง การแทนที่, การหักออก, การเติมใส่ หรือ การเพิ่ม ของกรดอะมิโน 2 ถึง 20 ตัว และ ทำให้ความสามารถที่ผลิตสารเป้าหมายดีขึ้นเมื่อ โปรตีนนั้นไม่ทำหน้าที่อย่างปกติในแกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียม เมื่อเปรียบเทียบกับกรณีที่ซึ่งโปรตีนทำหน้าที่ อย่างปกติ

5. แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อใดๆของข้อถือสิทธิข้อ 1 ถึง 4 โดยที่โปรตีน ArcA ไม่ทำหน้าที่ อย่างปกติโดยวิธีการของการทำให้แตกออกของยีน arcA บนโครโมโซม

6. แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อถือสิทธิข้อ 5 โดยที่ยีน arcA เป็น DNA ที่กำหนดไว้ใน (a) หรือ (b) ต่อไปนี้; (a) DNA ที่มีการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของนิวคลีโอไทด์เลขที่ 101 ถึง 817 ของการเรียงตัวที่: 31 (b) DNA ที่สามารถจับคู่ผสมได้กับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของนิวคลีโอไทด์เลขที่ 101 ถึง 817 ของการเรียงตัวที่: 31หรือ ตัวทดสอบที่สามารถถูกผลิตจากนิวคลีโอไทด์นั้นภายใต้สภาวะเข้ม งวด และ ถอดรหัสสำหรับโปรตีนที่ทำให้ความสามารถที่ผลิตสารเป้าหมายดีขึ้นเมื่อโปรตีนนั้นไม่ทำ หน้าที่อย่างปกติใน แกมมา-โปรตีโอแบคทีเรียม เมื่อเปรียบเทียบกับกรณีทีซึ่งโปรตีนทำหน้าที่อย่างปกติ

7. แกมมา- โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อใดๆ ของข้อถือสิทธิข้อ 1 ถึง 6 ที่ซึ่งแบคทีเรียเป็นของตระกูล Escherichia

8. แกมมา- โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อใดๆ ของข้อถือสิทธิข้อ 1 ถึง 7 โดยที่สารเป้าหมายเป็นกรด แอล-อะมิโน

9. แกมมา- โปรตีโอแบคทีเรียมตามข้อถือสิทธิข้อ 8 โดยที่กรดแอล-อะมิโนถูกเลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วย แอล-ไลซีน, กรดแอล-กลูตามิก และแอล-อาร์จินีน

10. วิธีการสำหรับการผลิตสารเป้าหมาย ที่ซึ่งประกอบด้วยการเพาะเลี้ยง แกมมา-โปรตีโอ แบคทีเรียมตามข้อใดๆของข้อถือสิทธิที่ 1 ถึง 9 ในตัวกลางเพื่อผลิต และ สะสมสารเป้าหมายในตัว กลาง หรือ เซลล์ และ การเก็บรวมสารเป้าหมายจากตัวกลาง หรือ เซลล์นั้น