TH5601A - อัลคาไลน์เซลลูเลสชนิดใหม่และจุลินทรีย์สำหรับ?ผลิตเอนไซม์เหล่านี้ - Google Patents

Abstract

การเตรียมอัลคาไลน์เซลลูเลส K CMC เอส I และ CMC เอส IIทำได้โดยการแยกเอนไซม์เหล่านี้ออกมาจากผลผลิตของการเลี้ยงเชื้อ Bacillus sp. KSM-635 เอนไซม์เหล่านี้ทำงานได้อย่างมีความเสถียรในช่วงกว้างที่รวมถึงทางด้านที่เป็นด่างด้วยและออกฤทธิ์ได้แม้แต่ในสภาพที่มีอุณหภูมิต่ำ นอกจากนี้เอนไซม์เหล่านี้ยังมีความต้านทานเป็นอย่างมากต่อสารลดแรงตึงผิว สารคีเลทและโปรตีนเนสดังนั้นจึงอาจนำเอาสารเหล่านี้มาใช้ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ไม่เพียงแต่เป็นสารปรุงแต่งของสารซักฟอกเสื้อผ้าเท่านั้นแต่ยังใช้เป็นสารทางด้านมวลชีวภาพและในสายงานอื่นได้อีกด้วย

Claims (8)

1.สารอัลคาไลเซลลูเลส K ที่บริสุทธิ์ ซึ่งมีคุณสมบัติทางเคมี และฟิสิกส์ดังต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ (1a) มีการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ Cx ซึ่งสามารถออกฤทธิ์กับคาร์บอกซีเมธทิลเซลลูโลส (1b) การออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ C1 อย่างอ่อน และ (1c) การออกฤทธิ์เป็น เบตา-กลูโคสิเดสอย่างอ่อน (2) ความจำเพาะต่อสับสเตท สามารถออกฤทธิ์กับคาร์บอกซีเมทธิลเซลลูโลส (CMC) เซลลูโลสที่เป็นผลึก, เซลลูโลสที่เป็นผลึกขนาดเล็ก, เซลโลไบโอส, และพารา-ไนโตรเฟนนิลเซลโลไบโอไซด์ (PNPC) (3) pH ที่ทำงาน และ pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด: มี pH ที่ทำงานได้ในช่วง 4 ถึง 12 (4) pH ที่มีความเสถียร: มีค่า pH ที่มีความเสถียรในช่วง 4.5 ถึง 10.5 และ 6.8 ถึง 10 เมื่อปล่อยให้อยู่ที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและ 30 นาที ตามลำดับ (5) ช่วงอุณหภูมิที่ทำงาน และอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุด : มีช่วงอุณหภูมิที่ทำงานได้ตั้งแต่ 10 ถึง 65 องศาเซลเซียส โดยอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุดประมาณ 40 องศาเซลเซียส (6) อิทธิพลของสารคีเลท : มีการออกฤทธิ์ที่ไม่ถูกยับยั้งโดย เอทธิลลีนไดอามีนเตตราอาซีติคแอซิด(EDTA),เอทธิลลีนไกลคอล-บิส-(เบตา-อมิโนเอทธิลอีเธอร์)N,N,N',N"-เตตราอาซีติคแอซิด(EGTA)N,N-บิส-(คาร์บอกซีเมทธิล)ไกลซีน(ไนตริลโลไตรอาซีติคแอซิด)(NTA),โซเดียมไตรโพลีฟอสเฟส(STPP)หรือ ซีโอไลท์ (7) อิทธิพลของสารลดแรงตึงผิว : การออกฤทธิ์ถูกยับยั้งเพียงเล็กน้อยโดย โซเดียมลิเนียร์อัลคิลเบนซีนซัลโฟเนท(LAS),โซเดียมอัลคิลซัลเฟต(AS),โซเดียมโพลีออกซีเอทธิลลีนอัลคิลซัลเฟต(ES),โซเดียมอัลฟาโอลีฟินซัลโฟเนท(AOS),โซเดียมอาลิแฟติคแอซิดเอสเทอร์ที่เติมหมู่ซัลโฟเนทแล้วที่ตำแหน่งอัลฟา(อัลฟา-SFE),โซเดียมอัลคิลซัลโฟเนท(SAS),โพลีออกซีเอทธิลลีนเซคคันดารีอัลคิลอีเธอร์,เกลือของกรดไขมัน(เกลือโซเดียม),หรือไดเมทธิลไดอัลคิลแอมโมเนียมคลอไรด์, (8) อิทธิพลของโปรตีนเนส : มีความต้านทานต่อโปรตีนเนส (9) น้ำหนักโมเลกุล (สามารถหาได้โดยเจลโครมาโตรกราฟฟี) : มีค่าพีคสูงสุดที่ 180,000+- 10,000

2. อัลคาไลน์เซลลูเลส K ตามข้อถือสิทธิ 1 สามารถเตรียมได้โดยการแยกจากผลผลิตของการเลี้ยงเชื้อ Bacillus sp KSM-635

3. วิธีการผลิตอัลคาไลน์เซลลูเลส K ซึ่งประกอบด้วยการเลี้ยงเชื้อ สปีชี Bacillus ชนิด KSM-635 และแยกเอาอัลคาไลน์เซลลูเลส K ออกจากผลผลิตของการเลี้ยงเชื้อที่ได้

4. CMC เอส I ที่จัดว่าบริสุทธิ์ มีคุณสมบัติทางเคมีเชิงฟิสิกส์ดังต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์: มีการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ Cx มีการการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ C1 อย่างอ่อน และ มีการออกฤทธิ์เป็นเบตา-กลูโคสิเดสอย่างอ่อน (2) ความจำเพาะต่อสับสเตรท : ออกฤทธิ์กับคาร์บอกซีเมทธิลเซลลูโลส (CMC) เซลลูโลสที่เป็นผลึก, เซลลูโลสที่เป็นผลึกขนาดเล็ก, เซลโลไบโอส, และพารา-ไนโตรเฟนนิลเซลโลไบโอไซด์(PNPC) (3) pH ที่ทำงาน และ pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด: มี pH ที่ทำงานตั้งแต่ 3 ถึง 12.5 และช่วง pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด 6 ถึง 11.5 (4) pH ที่มีความเสถียร: ไม่ถูกทำให้เสื่อมฤทธิ์ที่ pH ถึง 12 เมื่อปล่อยให้อยู่ในสภาพนั้นที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง (5) ช่วงอุณหภูมิที่ทำงาน และอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุด : มีช่วงอุณหภูมิที่ทำงานได้ตั้งแต่ 10 ถึง 60 องศาเซลเซียส โดยอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุดคือ 22 ถึง 53 องศาเซลเซียส (6) อิทธิพลของสารคีเลท: มีการออกฤทธิ์ที่ไม่ถูกยับยั้งโดย เอทธิลลีนไดอามีนเตตราอาซีติคแอซิด เอทธิลลีนไกลคอล-บิส-(เบตา-อมิโนเอทธิลอีเธอร์)N,N,N',N"-เตตราอาซีติคแอซิด,N,N-บิส-(คาร์บอกซีเมทธิล)ไกลซีน(ไนตริลโลไตรอาซีติคแอซิด),โซเดียมไตรโพลีฟอสเฟส หรือ ซีโอไลท์ (7) อิทธิพลของสารลดแรงตึงผิว : การออกฤทธิ์ถูกยับยั้งเพียงเล็กน้อยโดย โซเดียมลิเนียร์อัลคิลเบนซีนซัลโฟเนท,โซเดียมอัลคิลซัลเฟต,โซเดียมโพลีออกซีเอทธิลลีนอัลคิลซัลเฟต,โซเดียมอัลฟาโอลีฟินซัลโฟเนท,โซเดียมอาลิแฟติคแอซิดเอสเทอร์ที่เติมหมู่ซัลโฟเนทแล้วที่ตำแหน่งอัลฟา,โซเดียมอัลคิลซัลโฟเนท,โพลีออกซีเอทธิลลีนเซคคันดารีอัลคิลอีเธอร์,เกลือของกรดไขมัน(เกลือโซเดียม),ไดเมทธิลไดอัลคิลแอมโมเนียคลอไรด์,และกรดเทาโรโคลิค (8) ความต้านทานของโปรตีนเนส : มีความต้านทานต่อโปรตีนเนส (9) น้ำหนักโมเลกุล ที่สามารถหาได้โดยเจลโครมาโตรกราฟฟี : มีน้ำหนักโมเลกุล 145,000+- 10,000 (10) การดูดแสงอุลตราไวโอเลทที่มีความยาวคลื่นต่างๆ : มีการดูดแสงสูงสุดที่ 280 นาโนเมตร และ มีการดูดแสงที่เป็นไหล่ของพีคที่ 290 นาโนเมตร

5. CMC เอส I ตามข้อถือสิทธิ 4 เตรียมได้โดยการแยกออกจากผลผลิตของการเลี้ยงเชื้อ Bacillus sp KSM-635

6. CMC เอส II ที่จัดว่าบริสุทธิ์มีคุณสมบัติทางเคมีเชิงฟิสิกส์ดังต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์: มีการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ Cx มีการการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ C1 อย่างอ่อน และ มีการออกฤทธิ์เป็นเบตา-กลูโคสิเดสอย่างอ่อน (2) ความจำเพาะต่อสับสเตรท : ออกฤทธิ์กับคาร์บอกซีเมทธิลเซลลูโลส (CMC) เซลลูโลสที่เป็นผลึก, เซลลูโลสที่เป็นผลึกขนาดเล็ก, เซลโลไบโอส, และพารา-ไนโตรเฟนนิลเซลโลไบโอไซด์(PNPC) (3) pH ที่ทำงาน และ pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด: มี pH ที่ทำงานตั้งแต่ 3 ถึง 12 และช่วง pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด 6 ถึง 11.5 (4) pH ที่มีความเสถียร: ไม่ถูกทำให้เสื่อมฤทธิ์ที่ pH ถึง 12 เมื่อปล่อยให้อยู่ในสภาพนั้นที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง (5) ช่วงอุณหภูมิที่ทำงาน และอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุด : มีช่วงอุณหภูมิที่ทำงานได้ตั้งแต่ 5 ถึง 58 องศาเซลเซียสโดยอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุดคือ 14 ถึง 45 องศาเซลเซียส (6) อิทธิพลของสารคีเลท: มีการออกฤทธิ์ที่ไม่ถูกยับยั้งโดย เอทธิลลีนไดอามีนเตตราอาซีติคแอซิด เอทธิลลีนไกลคอล-บิส-(เบตา-อมิโนเอทธิลอีเธอร์)N,N,N',N"-เตตราอาซีติคแอซิด,N,N-บิส-(คาร์บอกซีเมทธิล)ไกลซีน(ไนตริลโลไตรอาซีติคแอซิด),โซเดียมไตรโพลีฟอสเฟส และ ซีโอไลท์ (7) อิทธิพลของสารลดแรงตึงผิว : การออกฤทธิ์ถูกยับยั้งเพียงเล็กน้อยโดย โซเดียมลิเนียร์อัลคิลเบนซีนซัลโฟเนท,โซเดียมอัลคิลซัลเฟต,โซเดียมโพลีออกซีเอทธิลลีนอัลคิลซัลเฟต,โซเดียมอัลฟาโอลีฟินซัลโฟเนท,โซเดียมอาลิแฟติคแอซิดเอสเทอร์ที่เติมหมู่ซัลโฟเนทแล้วที่ตำแหน่งอัลฟา,โซเดียมอัลคิลซัลโฟเนท,โพลีออกซีเอทธิลลีนเซคคันดารีอัลคิลอีเธอร์,เกลือของกรดไขมัน(เกลือโซเดียม),ไดเมทธิลไดอัลคิลแอมโมเนียคลอไรด์ (8) ความต้านทานของโปรตีนเนส : มีความต้านทานต่อโปรตีนเนส (9) น้ำหนักโมเลกุล ที่สามารถหาได้โดยเจลโครมาโตรกราฟฟี : มีน้ำหนักโมเลกุล 170,000+- 20,000 (10) การดูดแสงอุลตราไวโอเลทที่มีความยาวคลื่นต่างๆ : มีการดูดแสงสูงสุดที่ 280 นาโนเมตร และ มีการดูดแสงที่เป็นไหล่ของพีคที่ 290 นาโนเมตร

7. CMC เอส I ตามข้อถือสิทธิ 6 เตรียมได้โดยการแยกออกจากผลผลิตของการเลี้ยงเชื้อ Bacillus sp KSM-635

8. แบคทีเรีย Bacillus ชนิด KSM-635 ที่มีเชื้อสายพันธุ์ทางชีววิทยาที่บริสุทธิ์ ซึ่งมีความสามารถในการผลิตอัลคาไลน์เซลลูเลส K, และมีคุณสมบัติทางเอนไซม์ต่อไปนี้: (1) การออกฤทธิ์: มีการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ Cx มีการการออกฤทธิ์เป็นเอนไซม์ C1 อย่างอ่อน และ มีการออกฤทธิ์เป็นเบตา-กลูโคสิเดสอย่างอ่อน (2) ความจำเพาะต่อสับสเตรท : ออกฤทธิ์กับคาร์บอกซีเมทธิลเซลลูโลส (CMC) เซลลูโลสที่เป็นผลึก, เซลลูโลสที่เป็นผลึกขนาดเล็ก, เซลโลไบโอส, และพารา-ไนโตรเฟนนิลเซลโลไบโอไซด์(PNPC) (3) pH ที่ทำงาน และ pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด: มี pH ที่ทำงานตั้งแต่ 4 ถึง 12 และช่วง pH ที่ทำงานได้ดีที่สุด 9 ถึง 10 (4) pH ที่มีความเสถียร: มีค่า pH ที่มีความเสถียรในช่วง 4.5 ถึง 10.5 และ 6.8 ถึง 10 เมื่อปล่อยให้อยู่ที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและ 30 นาที ตามลำดับ (5) ช่วงอุณหภูมิที่ทำงาน และอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุด : มีช่วงอุณหภูมิที่ทำงานได้ตั้งแต่ 5 ถึง 58 องศาเซลเซียสโดยอุณหภูมิที่ทำงานได้ดีที่สุดคือ 14 ถึง 45 องศาเซลเซียส (6) อิทธิพลของสารคีเลท: มีการออกฤทธิ์ที่ไม่ถูกยับยั้งโดย เอทธิลลีนไดอามีนเตตราอาซีติคแอซิด เอทธิลลีนไกลคอล-บิส-(เบตา-อมิโนเอทธิลอีเธอร์)N,N,N',N"-เตตราอาซีติคแอซิด,N,N-บิส-(คาร์บอกซีเมทธิล)ไกลซีน(ไนตริลโลไตรอาซีติคแอซิด),โซเดียมไตรโพลีฟอสเฟส และ ซีโอไลท์ (7) อิทธิพลของสารลดแรงตึงผิว : การออกฤทธิ์ถูกยับยั้งเพียงเล็กน้อยโดย โซเดียมลิเนียร์อัลคิลเบนซีนซัลโฟเนท,โซเดียมอัลคิลซัลเฟต,โซเดียมโพลีออกซีเอทธิลลีนอัลคิลซัลเฟต,โซเดียมอัลฟาโอลีฟินซัลโฟเนท,โซเดียมอาลิแฟติคแอซิดเอสเทอร์ที่เติมหมู่ซัลโฟเนทแล้วที่ตำแหน่งอัลฟา,โซเดียมอัลคิลซัลโฟเนท,โพลีออกซีเอทธิลลีนเซคคันดารีอัลคิลอีเธอร์,เกลือของกรดไขมัน(เกลือโซเดียม),ไดเมทธิลไดอัลคิลแอมโมเนียคลอไรด์,และกรดเทาโรโคลิค (8) ความต้านทานของโปรตีนเนส : มีความต้านทานต่อโปรตีนเนสได้เป็นอย่างดี (9) น้ำหนักโมเลกุล ที่สามารถหาได้โดยเจลโครมาโตรกราฟฟี : มีน้ำหนักโมเลกุล 180,000+- 10,000