TH51201B - จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์และวิธีการสำหรับการผลิตโพลี-แกมมา-กลูตามิกแอซิด - Google Patents

Abstract

DC60 (04/06/52) จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ ซึ่งมีความสามารถในการผลิต โพลี-แกมมา-กลูตามิกแอซิด, ที่ถูก จัดเตรียมขึ้นโดยการนำยีน pgsB ของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่ เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC ของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่า กับมัน, ในกลุ่มของยีนซึ่งเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ โพลี-แกมมา-กลูตามิกแอซิด, เข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน, ที่ซึ่งไม่มียีน pgsA ของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน ถูกนำเข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน; และวิธีการในการผลิตโพลี-แกมมา-กลูตามิกแอซิด โดยใช้จุลินทรีย์ รีคอมบิแนนท์ จุลินทรย์คอมบินแนนท์ ซึ่งมีความ สามารถในการผลิต โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, ที่ถูก จัดเตรียมขึ้นโดยการนำยีน pgsB ของบาซิลลัส ซัลทิลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่ เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC ของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่า กับมัน, ในกลุ่มของยืนซึ่งเกี่ยวกับการสังเคราะห์ โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, เข้าสู่จุลินทรีย์เข้าบ้าน, ที่ซึ่งไม่มียีน pgsA ของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacullus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน ถูกนำเข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน; และวิธีการในการผลิตโพลี-y-กลูตามิกแอซิด โดยใช้จิลินทรีย์ รีคอมบิแนนท์

Claims (6)

1. จุลิทรีย์คอมบิแนนท์ซึ่งมีความสามารถในการผลิต โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, โดยที่, จุลินทรีย์คอมบิแนนท์จะถูกจัดเตรียมโดยการนำยีน pgsB ของบาซิลลัสซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC ของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, ในกลุ่มของยีนซึ่งเกี่ยวข้องกับ การสังเคราะห์ โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, เข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน, และ โดยที่ไม่มียีน pgsA ของบาซิลลัสของบาซิลลัส ซับทิลิส (Bacillus subtilis) หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่า กับมันถูกนำเข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน 2. จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิ 1, โดยที่ ยีน pgsB คือยีนซึ่งถอดรหัสให้โปรตีน (a) หรือ (b); ต่อไปนี้; (a) โปรตีนซึ่งมีสายลำดับกรดอะมิโนที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:2; และ (b) โปรตีนซึ่งมีสายลำดับกรดอะมิโน, ที่ซึ่งหนึ่งกรดอะมิโนหรือมากกว่า จะถูกลบออก, ถูกแทนที่, ถูกเพิ่ม หรือถูกสอดแทรก ในสายลำดับกรดอะมิโนที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:2, และ ซึ่งมีฤทธิ์อะมิโด-ไลเกส 3. จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2, โดยที่ ยีน pgsC คือยีนซึ่งถอดรหัสให้ โปรตีน (c) หรือ (d); ต่อไปนี้; (c) โปรตีนซึ่งมีสายลำดับกรดอะมิโนที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:2; และ (b) โปรตีนซึ่งมีสายลำดับกรดอะมิโน, ที่ซึ่งหนึ่งกรดอะมิโนหรือมากกว่า จะถูกลบออก, ถูกแทนที่, ถูกเพิ่ม หรือถูกสอดแทรก ในสายลำดับกรดอะมิโนที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:2, และ ซึ่งมีหน้าที่ในการผลิตโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ในการมีอยู่ของ pgsB โปรตีนที่ถูกถอดรหัสโดย ยีน pgsB 4. จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 3, โดยที่ ยีน pgsB หรือ ยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, จะถูกรวมเข้าไว้ ในพลาสมิดซึ่งสามารถถ่ายแบบเพิ่มจำนวนตัวเองได้ในเซลล์ของจุลินทรีย์เจ้าบ้าน 5. จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 4, โดยที่ ยีน pgsB หรือ ยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, จะมีบริเวณ ควบคุมการเริ่มต้นการถอดรหัส และ/หรือบริเวณควบคุมการเริ่มต้นการแปลรหัส ซึ่งแต่ละอย่างจะ ทำหน้าที่ในจุลินทรีย์ที่ตำแหน่งจำเพาะอัพสตรีของยีน 6. จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 3, โดยที่ จุลินทรีย์เจ้าบ้าน คือ จุลินทรีย์ บาซิลลัส 7. จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิ 6, โดยที่จุลินทรีย์บาซิลลัส คือ บาซิลลัส ซับทิลิส 8. วิธีการในการผลิต โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของ; การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์คอมบิแนนท์ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 7, และ การเก็บรวบรวมโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ที่ถูกผลิตขึ้น 9. วิธีการในการปรับปรุงความสามารถเชิงการผลิต โพลี-y-กลูตามิกแอซิล, ซึ่งประกอบรวม ด้วยการใช้จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ ซึ่งได้มาโดยการนำยีน phsB ของบาซิลลัส ซับทิลิส หรือยีนซึ่ง ทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC ของบาซิลลัส ซับทิลิส หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, ในกลุ่มของยีนซึ่งเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, เข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน 1 0. วิธีการในการปรับปรุงความสามารถเชิงการผลิต โพลี-y-กลูตามิกแอซิด ตามข้อถือสิทธิ 9, โดยที่จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ คือจุลินทรีย์คอมบิแนนท์ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 7 1

1. วิธีการในการปรับน้ำหนักโมเลกุลของโพลี-y-กลูตามิกแอซิด, ซึ่งประกอบรวมด้วยการใช้ จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ ซึ่งได้มาโดยการนำยีน pgsB ของบาซิลลัส ซับทิลิส หรือยีนซึ่งทำหน้าที่ เทียบเท่ากับมัน, และยีน pgsC ของบาซิลลัสซับทิลิส หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, ในกลุ่ม ของยีนซึ่งเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, เข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน 1

2. วิธีการในการปรับน้ำหนักโมเลกุลของโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ตามข้อถือสิทธิ 11, โดยที่ จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์คือจุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 7 1

3. วิธีการในการผลิตโพลี-y-กลูตามิกแอซิดน้ำหนักโมเลกุลสูง, ซึ่งประกอบรวมด้วยการใช้ วิธีการในการปรับน้ำหนักโมเลกุลของโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ตามข้อถือสิทธิ 11 หรือ 12 1

4. วิธีการในการปรับความบริสุทธิ์เชิงออปติกของโพลี-y-กลูตามิกแอซิด, โดยที่อัตราส่วน L-ไอโซเมอร์ของโพลี-y-กลูตามิกแอซิดที่ผลิตขึ้นจะถูกควบคุมโดยการใชจุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ ซึ่งได้มาโดยการนำยีน pgsB ของบาซิลลัส ซับทิลิส หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, และ ยีน pgsC ของบาซิลลัส ซับทิลิส หรือยีนซึ่งทำหน้าที่เทียบเท่ากับมัน, ในกลุ่มของยีนซึ่งเกี่ยวข้องกับ การสังเคราะห์ โพลี-y-กลูตามิกแอซิด, เข้าสู่จุลินทรีย์เจ้าบ้าน 1

5. วิธีการในการปรับความบริสุทธิ์เชิงออปติกของโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ตามข้อถือสิทธิ 14, โดยที่จุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ คือจุลินทรีย์รีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิ 1 ถึง 7 1

6. วิธีการในการผลิตโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ซึ่งมีอัตราส่วน L-ไอโซเมอร์ที่สูง, ซึ่งประกอบ รวมด้วยการใช้วิธีการในการปรับความบริสุทธิ์เชิงออปติกของโพลี-y-กลูตามิกแอซิด ตาม ข้อภือสิทธิ 14 หรือ 15