TH24888U - ชุดทดสอบการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู (SARS-CoV-2) ชนิดไอจีเอ็มและไอจีจีและกรรมวิธีการผลิต - Google Patents

Abstract

ชุดทดสอบการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู (SARS-CoV-2) ชนิดไอจีเอ็มและไอจีจีและกรรมวิธีการผลิตประกอบด้วยสารละลายบัฟเฟอร์สำเร็จรูป และตลับทดสอบซึ่งบรรจุแผ่นทดสอบอยู่ภายใน โดยแผ่นทดสอบประกอบด้วยกระดาษ ทดสอบ 5 ชนิด ซึ่งกระดาษชนิดไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนจะรองรับแอนติบอดีของหนู ที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ (anti human IgM) และแอนติบอดี ของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ (anti human IgG) ตรงตำแหน่ง เอ็ม” และ จี” ตามลำดับ และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก (FLAG) ตรงตำแหน่ง ซี” เขียนไว้บนตลับทดสอบ เมื่อประกอบรวมกับกระดาษส่วน อื่นๆ ทำเป็นแผ่นทดสอบสำเร็จรูปที่บรรจุในตลับทดสอบ นำไปใช้ประโยชน์ในการ ตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู เบื้องต้นอย่าง รวดเร็ว ไม่ต้องทำในห้อง ปฏิบัติการที่ใช้เครื่องมือเฉพาะ และนำไปสู่การช่วยควบคุมและป้องกันโรคที่มี ประสิทธิภาพยิ่งขึ้น

Claims (2)

------11/02/2565------(OCR) 1. ชุดทดสอบการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู ชนิดไอจีเอ็มและไอจีจี ประกอบด้วย 1.1 ตลับพลาสติกสำหรับบรรจุแผ่นทดสอบ มีขนาดกว้าง x ยาว 20 มิลลิเมตรคูณ 90 มิลลิเมตร ที่มีลักษณะคือชิ้นพลาสติกด้านล่างมีแป้นสำหรับวางแผ่นทดสอบอยู่ตรงกลาง ส่วนพลาสติกด้านบน ช่องเปิดปลายสุดลักษณะเป็นหลุมรูกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟเฟอร์ มีตัวอักษร บี” พิมพ์นูนกำกับ ถัดไปเป็นช่องเปิดสี่เหลี่ยมขนาดสำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ มีตัวอักษร เอส” พิมพ์นูนกำกับ และช่องเปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้าตามแนวสี่ยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบมีตัวอักษร เอ็ม” จี” และ ซี” พิมพ์กำกับ ถัดไปท้ายสุดเป็นช่องเปิดรูเล็กๆเรียงตัวเป็นสี่เหลี่ยมจำนวน 20 ช่อง ซึ่งภายในบรรจุกระดาษทดสอบ 5 ชนิด คือ - กระดาษชนิดที่ 1 เป็นกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนมีขนาดกว้างคูณยาว4 มิลลิเมตรคูณ 25 มิลลิเมตร ปิดทับตรงส่วนกลางของแผ่นโพลีสไตรีน มีขนาดของรูพรุน 8 ไมโครเมตร ทำหน้าที่เป็นส่วนแสดงผล จะรองรับแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ (anti human IgM) และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ (anti human IgG) ตรงตำแหน่งเอ็ม” และ จี” ตามลำดับ และแอนติบอดีของหนูที่จำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก(FLAG) ตรงตำแหน่ง ซี” เขียนไว้บนตลับทดสอบ - กระดาษชนิดที่ 2 เป็นกระดาษใยแก้ว มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 8มิลลิเมตร ทำหน้าที่เป็นแผ่นซับคอนจูเกตของรีคอมบิแนนท์นิวคลีโอแคปซิดโปรตีน(Nucleocapsid Protein; NP) ของเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู ซึ่งมีการเชื่อมต่อกับโพลีเปปไตด์แฟลกปิดทับ เหลื่อมซ้อนบนกระดาษชนิดที่ 1 2-3 มิลลิเมตร - กระดาษชนิดที่ 3 เป็นกระดาษใยแก้วละเอียด (microglassfiber) มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 10 มิลลิเมตร เป็นส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลายปิดทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษกระดาษชนิดที่ 2 2-4 มิลลิเมตร - กระดาษชนิดที่ 4 เป็นกระดาษใยฝ้าย มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 22มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับนํ้า 31 มิลลิกรัมต่อหนึ่งตารางเซนติเมตร เป็นส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลาย ปิดทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษชนิดที่ 32-4 มิลลิเมตร โดยติดขอบปลายล่างสุดของแผ่นทดสอบ - กระดาษชนิดที่ 5 เป็นกระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ มีขนาดกว้าง 4 มิลลิเมตรคูณยาว 22 มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับนํ้า 128 มิลลิกรัมต่อตารางเซนติเมตร ปิดทับที่ส่วนปลายบนสุดของแผ่นทดสอบและเหลื่อมทับส่วนของกระดาษชนิดที่ 1 2-3 มิลลิเมตร ทำหน้าที่ดูดซับตัวอย่างและสารละลายทั้งหมด 1.2 สารละลายทัพเฟอร์สำเร็จรูป ประกอบด้วยทิสเบส 0.3 เปอร์เซนด์เคซีน 0.5เปอร์เซนต์โซเดียมเอไซด์ 0.1 เปอร์เซ็นต์ บรรจุในขวดพลาสติก2. กรรมวิธีการผลิตชุดทดสอบตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู ชนิดไอจีเค็มและไอจีจีมี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งมีขั้นตอนดังต่อไปนี้ 2.1 การเตรียมแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) - เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ตำแหน่ง เอ็ม” - เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ความเข้มข้น 0.8 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง จี” - เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก ความเข้มข้น0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง ซี” 2.2 การพ่นแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) โดยลอกกระดาษกาวซึ่งอยู่ตรงส่วนกลางของแผ่นโพลีสไตรีน ที่มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร ออกหลังจากนั้นปิดทับด้วยแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ขนาดกว้าง 25 มิลลิเมตรคูณยาว300 มิลลิเมตร ในลักษณะเส้นตรงตามความยาวของแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนจากนั้นพ่นปริมาณสาร 1 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ ที่ตำแหน่ง เอ็ม” แอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ที่ตำแหน่ง จี” และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก ที่ตำแหน่ง ซี” ดังกล่าวที่พิมพ์ไว้บนตลับพลาสติก จากนั้นนำแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่พ่นแล้ว ไปอบแห้ง 2 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส แล้วเก็บที่อุณหภูมิห้องในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.3 การเตรียมโปรตีนนิวคลีโอแคปซิดคอนจูเกตและการเตรียมกระดาษใยแก้ว - เตรียมนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม ในสารละลายบอเรตบัฟเฟอร์ 100ไมโครลิตร - เตรียมโกลด์คอลลอยด์ (colloidal gold) มีค่าดูดกลืนแสง(OD) ที่ความยาวคลื่น525 นาโนเมตร เท่ากับ 1.0 จำนวนบวกหรือจำนวนลบ 0.1 โดยปรับความเป็นกรด-ด่าง (pH) ให้เท่ากับ 9.00 จำนวนบวกหรือจำนวนลบ 0.1 - การคอนจูเกต นำนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน 100ไมโครลิตร เติมลงในโกลด์คอลลอยด์ ปริมาตร 1,000 ไมโครลิตร ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 นาที หยุดปฏิกิริยาโดยการเติม 10 เปอร์เซ็นต์บีเอสเอ ให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1 เปอร์เซ็นต์ ปั่นตกตะกอนที่ 12000g เวลา 30 นาที 4 องศาเซลเซียส เก็บส่วนตะกอนมาละลายด้วยสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ มีค่าดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตรเท่ากับ 19 จำนวนบวกหรือจำนวนลบ 1 - การเตรียมกระดาษใยแก้ว ซึ่งมีขนาดกว้างคูณยาว 100 มิลลิเมตร คูณ 300มิลลิเมตร โดยแช่ในสารละลายบอเรตบัฟเฟอร์ จากนั้นนำไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 37องศาเซลเซียส เวลา 3 ชั่วโมง 2.4 การพ่นโปรตีนคอนจูเกตลงบนกระดาษใยแก้วที่เตรียมไว้ ด้วย เครื่องพ่นสารที่ปริมาณ 10 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยพ่นให้แต่ละเส้นยาว 300 มิลลิเมตร นำไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นใช้ใบมีดกรีดตัดตามแนวของคอนจูเกตในแต่ละแถว ให้มีขนาด 8 มิลลิเมตร คูณ 300 มิลลิเมตร แล้วเก็บที่อุณหภูมิห้อง ในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.5 การประกอบส่วนต่างๆ ของชุดทดสอบ - นำกระดาษที่ใช้ในการผลิตชุดทดสอบทั้งหมดที่เตรียมไว้ข้างต้นปิดทับกันดังนี้แผ่นโพลีสไตรีนมีกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่เคลือบด้วยแอนติบอดีชนิดต่างๆแปะอยู่กึ่งกลาง ปลายด้านหนึ่งของกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ถูกซ้อนทับด้วยกระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ ส่วนปลายอีกด้านหนึ่งซ้อนทับด้วยกระดาษใยแก้วที่เคลือบด้วยนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ตามด้วยกระดาษใยแก้วละเอียด และติดขอบปลายล่างสุดด้วยกระดาษใยฝ้าย กระดาษแต่ละชนิดซ้อนทับกัน 2-3 มิลลิเมตร แผ่นโพลีสไตรีน 1 แผ่น มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร - ตัดแผ่นทดสอบตามแนวกว้างเป็นชิ้นเล็ก ๆ ด้วยเครื่องตัดให้มีความกว้าง 4มิลลิเมตร จะได้แผ่นทดสอบที่มีขนาดสำหรับประกอบเป็นชุดทดสอบกว้าง 4 มิลลิเมตรคูณยาว 80 มิลลิเมตร จากนั้นนำแผ่นทดสอบที่ตัดแล้ว บรรจุในตลับทดสอบในตำแหน่งที่กำหนด โดยตลับพลาสติกชิ้นล่าง สำหรับวางแผ่นทดสอบและชิ้นพลาสติกบนซึ่งมีรูเปิดตำแหน่งต่างๆ คือปลายสุดลักษณะรูเปิดเป็นหลุมกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟเฟอร์ ถัดไปเป็นรูเปิดสี่เหลี่ยม สำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ และช่องเปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้าตามแนวยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบ มีตัวอักษร เอ็ม”จี” และ ซี” พิมพ์กำกับ เก็บรักษาในซองอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท ------------

1. ส่วนประกอบของชุดทดสอบตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู ชนิด ไอจีเอ็มและไอจีจี ประกอบด้วย 1.1 ตลับพลาสติก สำหรับบรรจุแผ่นทดสอบ มีขนาดกว้าง x ยาว ประมาณ 20 มิลลิเมตรคูณ 90 มิลลิเมตร ที่มีลักษณะคือชิ้นพลาสติกด้านล่างมีแป้นสำหรับวางแผ่น ทดสอบอยู่ตรงกลาง ส่วนพลาสติกด้านบน ช่องเปิดปลายสุดลักษณะเป็นหลุมรูกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟเฟอร์ มีตัวอักษร บี” พิมพ์นูนกำกับ ถัดไปเป็นช่องเปิด สี่เหลี่ยมขนาด สำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ มีตัวอักษร เอส” พิมพ์นูนกำกับ และช่อง เปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้าตามแนวยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบ มีตัวอักษร เอ็ม” จี” และ ซี” พิมพ์กำกับ ถัดไปท้ายสุดเป็นช่องเปิดรูเล็กๆเรียงตัว เป็นสี่เหลี่ยมจำนวน 20 ช่อง ซึ่งภายในบรรจุกระดาษทดสอบ 5 ชนิด คือ - กระดาษชนิดที่ 1 เป็นกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนมีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 25 มิลลิเมตร ปิดทับตรงส่วนกลางของแผ่นโพลีสไตรน มีขนาดของ รูพรุน 8 ไมโครเมตร ทำหน้าที่เป็นส่วนแสดงผล จะรองรับแอนติบอดีของหนูที่จับ จำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเค็มของมนุษย์ (anti human IgM) และแอนติบอดีของ หนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์(anti human IgG) ตรงตำแหน่ง เอ็ม” และ จี” ตามลำดับ และแอนติบอดีของหนูที่จำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก (FLAG) ตรงตำแหน่ง ซี” เขียนไว้บนตลับทดสอบ - กระดาษชนิดที่ 2 เป็นกระดาษใยแก้ว มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 8 มิลลิเมตร ทำหน้าที่เป็นแผ่นซับคอนจูเกตของรีคอมบิแนนท์นิวคลีโอแคปซิดโปรตีน (Nucleocapsid Protein; NP) ของเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู ซึ่งมีการเชื่อมต่อกับโพลีเปป ไตด์แฟลก ปิดทับ เหลื่อมซ้อนบนกระดาษชนิดที่ 1 ประมาณ 2-3 มิลลิเมตร - กระดาษชนิดที่ 3 เป็นกระดาษใยแก้วละเอียด (microglassfiber) มีขนาดกว้าง คูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 10 มิลลิเมตร เป็นส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลาย ปิด ทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษกระดาษชนิดที่ 2 ประมาณ 2-4 มิลลิเมตร - กระดาษชนิดที่ 4 เป็นกระดาษใยฝ้าย มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 22 มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับน้ำ 31 มิลลิกรัมต่อหนึ่งตารางเซนติเมตร เป็น ส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลาย ปิดทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษชนิดที่ 3 ประมาณ 2-4 มิลลิเมตร โดยติดขอบปลายล่างสุดของแผ่นทดสอบ - กระดาษชนิดที่ 5 เป็นกระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ มีขนาดกว้าง 4 มิลลิเมตร คูณยาว 22 มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับน้ำ 128 มิลลิกรัมต่อตารางเซนติ เมตร ปิดทับที่ส่วนปลายบนสุดของแผ่นทดสอบและเหลื่อมทับส่วนของกระดาษชนิด ที่ 1 ประมาณ 2-3 มิลลิเมตร ทำหน้าที่ดูดซับตัวอย่างและสารละลายทั้งหมด 1.2 สารละลายบัพเฟอร์สำเร็จรูป ประกอบด้วยทิสเบส 0.3 เปอร์เซนด์ เคซีน 0.5 เปอร์เซนต์ โซเดียมเอไซด์ 0.1 เปอร์เซ็นต์ บรรจุในขวดพลาสติก

2. กรรมวิธีการผลิตชุดทดสอบตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู ชนิด ไอจีเค็มและไอจีจีมี ขั้นตอนดังต่อไปนี้ 2.1 การเตรียมแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) - เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ตำแหน่ง เอ็ม” - เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ ความเข้มข้น 0.8 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง จี” - เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก ความเข้มข้น 0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง ซี” 2.2 การพ่นแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) โดยลอกกระดาษกาวซึ่งอยู่ตรงส่วน กลางของแผ่นโพลีสไตรีน ที่มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร ออก หลังจากนั้นปิดทับด้วยแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ขนาดกว้าง 25 มิลลิเมตรคูณยาว 300 มิลลิเมตร ในลักษณะเส้นตรงตามความยาวของแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน จากนั้นพ่นปริมาณสาร 1 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะ กับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ที่ตำแหน่ง เอ็ม” แอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะ กับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ ที่ตำแหน่ง จี” และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะ กับโพลีเปปไตด์แฟลก ที่ตำแหน่ง ซี” ดังกล่าวที่พิมพ์ไว้บนตลับพลาสติก จากนั้นนำ แผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่พ่นแล้ว ไปอบแห้ง 2 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซล เซียส แล้วเก็บที่อุณหภูมิห้องในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.3 การเตรียมโปรตีนนิวคลีโอแคปซิดคอนจูเกตและการเตรียมกระดาษใยแก้ว - เตรียมนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม ในสารละลาย บอเรตบัฟเฟอร์ 100 ไมโครลิตร - เตรียมโกลด์คอลลอยด์ (colloidal gold) มีค่าดูดกลืนแสง(OD) ที่ความยาวคลื่น 525 นาโนเมตรเท่ากับ 1.0 (สัญลักษณ์) 0.1โดยปรับความเป็นกรด-ด่าง (pH) ให้เท่ากับ9.00 (สัญลักษณ์) 0.1 - การคอนจูเกต นำนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน 100 ไมโครลิตร เติมลงในโกลด์ คอลลอยด์ ปริมาตร 1,000 ไมโครลิตร ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 นาที หยุดปฏิกิริยา โดยการเติม 10 เปอร์เซ็นต์ บีเอสเอ ให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1 เปอร์เซ็นต์ ปั่นตก ตะกอนที่ 12000g เวลา 30 นาที 4 องศาเซลเซียส เก็บส่วนตะกอนมาละลายด้วยสาร ละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ มีค่าดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตรเท่ากับ 19 (สัญลักษณ์) 1 -การเตรียมกระดาษใยแก้ว ซึ่งมีขนาดกว้างคูณยาว 100 มิลลิเมตรคูณ 300 มิลลิเมตร โดยแช่ในสารละลายบอเรตบัฟเฟอร์ จากนั้นนำไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เวลา 3 ชั่วโมง 2.4 การพ่นโปรตีนคอนจูเกตลงบนกระดาษใยแล้วที่เตรียมไว้ ด้วย เครื่องพ่นสาร ที่ปริมาณ 10 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยพ่นให้แต่ละเส้นยาว 300 มิลลิเมตร นำไป อบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นใช้ใบมีดกรีดตัดตามแนว ของคอนจูเกตในแต่ละแถว ให้มีขนาด 8 มิลลิเมตร คูณ 300 มิลลิเมตร แล้วเก็บที่ อุณหภูมิห้อง ในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.5 การประกอบส่วนต่างๆ ของชุดทดสอบ - นำกระดาษที่ใช้ในการผลิตชุดทดสอบทั้งหมดที่เตรียมไว้ข้างต้นปิดทับกันดังนี้ แผ่นโพลีสไตรนมีกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่เคลือบด้วยแอนติบอดีชนิดต่างๆ แปะอยู่กึ่งกลาง ปลายด้านหนึ่งของกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ถูกซ้อนทับด้วย กระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ ส่วนปลายอีกด้านหนึ่งซ้อนทับด้วยกระดาษใยแก้วที่ เคลือบด้วยนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ตามด้วยกระดาษใยแก้วละเอียด และติดขอบปลาย ล่างสุดด้วยกระดาษใยฝ้าย กระดาษแต่ละชนิดซ้อนทับกัน 2-3 มิลลิเมตร แผ่นโพลี สไตรีน 1 แผ่น มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร - ตัดแผ่นทดสอบตามแนวกว้างเป็นชิ้นเล็กๆ ด้วยเครื่องตัดให้มีความกว้าง 4 มิลลิเมตร จะได้แผ่นทดสอบที่มีขนาดสำหรับประกอบเป็นชุดทดสอบกว้าง 4 มิลลิเมตร คูณยาว 80 มิลลิเมตร จากนั้นนำแผ่นทดสอบที่ตัดแล้ว บรรจุในตลับทดสอบในตำแหน่ง ที่กำหนด โดยตลับพลาสติกชิ้นล่าง สำหรับวางแผ่นทดสอบและชิ้นพลาสติกบนซึ่งมีรู เปิดตำแหน่งต่างๆ คือปลายสุดลักษณะรูเปิดเป็นหลุมกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟ เฟอร์ ถัดไปเป็นรูเปิดสี่เหลี่ยม สำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ และช่องเปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้า ตามแนวยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบ มีตัวอักษร เอ็ม” จี”และซี” พิมพ์กำกับ เก็บรักษาในซองอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและ ปิดสนิท