SU960260A1

SU960260A1 - Штамм рSеUDомоNаS acRUGINoSa 590,1650-продуцент алкалоида фенилтиазолового р да

Info

Publication number: SU960260A1
Application number: SU802966198A
Authority: SU
Inventors: Дарья Кисеновна Огай; Шанияз Мусаев; Вера Константиновна Щербакова; Анвар Зуннунджанов; Эргаш Нуримов
Original assignee: Институт Микробиологии Ан Узсср
Priority date: 1980-07-17
Filing date: 1980-07-17
Publication date: 1982-09-23

Description

Изобретение относится к микробиологии и касается получения штаммов Pseudomonas aeruginosa - продуцентов алкалоидов. е

Известен штамм Pseudomonas aeruginosa - поодуцент- алкалоидов хинолинового ояда.

Однако известный штамм не продуцирует алкалоиды фенилтиазолового ряда.

Целью изобретения является получение штамма Pseudomonas aeruginosa - продуцента алкалоида фенилтиазолового ряда,

Штамм Pseudomonas aeruginosa 590 15 выделен путем обработки нитрозогуани*мидином .прототрофной культуры дикого типа Pseudomonas aeruginosa шт. А-197. После повторной обработки нитрозогуанидином триптофаннедостаточ- < 70 ного мутанта 736'выДелен рёвертант 590 .

Штамм Pseudomonas aeruginosa 590, 1650 - продуцент алкалоида фенилтиазолового ряда хранится в коллекции культур микроорганизмов ВНИИА. 25

Морфология. Палочки с ровными краями, длина клеток 1,5-3 мкм, ширина 0,6-0,8 мкм. Окрашивается по Грамму отрицательно, подвижен, спор не образует. Размножается делением. ^w

Физиологические признаки. Аэроб. Оптимальная температура роста 32-37°С, максимальная 42, 5°С, pH среды 7,0-7,8. ' .

Культуральные признаки.

Колонии на мясо-пептонном агаре (поверхностные) круглые, размером 2,5-3 мм. Край зубчатый, поверхность шероховатая, колонии плоские с зернистой структурой, эеленбватожелтого цвета,.

На пептонно-кукурузном агаре колонии поверхностные, круглые, размером 2,5-5,0 мм, край ризоидный с шероховатой поверхностью, выпуклый (конусовидный) с мелкозернистой структурой молочного цвета. .

Йясо-пептонный бульон. Поверхностный рост. Кольцеобразная пленка. Муть сильная, однородная. Осадок средний, хлопьевидный, образует желто-зеленый флюоресцирующий пигмент.

Среда Люкнера. Поверхностный рост. Пленки нет. Муть сильная/ равномерная. Осадок средний, хлопьевидный. При выращивании без встряхиваний цвет светло-коричневый, при ферментации на качалке - синевато-зеленый.

Отношение к углеводам. Сбраживает глюкозу, галактозу, левулезу. Усваивает слабо сахарозу, хорошо - маннит, мальтозу, глицерин. Крахмал не гидролизует, клетчатку не разлагает. Желатину разжижает послойно через 7 сут. На картофеле рост обильный, пигментация зеленовато-синяя.

Молоко пептонизирует полностью без изменения реакций среды.

Сероводород и индол на белковых средах не образует.

' Нитраты восстанавливает.

Культура образует новый алкалоид, обладающий биологической активностью..

C--N 1 I \ НС-СНаОН

П р и м. е р 1. Суточную культуру,, выращенную на скошенном мясо-пептонном или пептонно-кукурузном агаре пересевают петлей в пробирку с жидкой питательной средой того же состава. Через 16-18 ч роста культуру используют для тельной среды, Эрленмейера на

Питательная ...

щий состав, г/л; лактат аммония (40%) 19,0) КН^РО₄1,0) MgSO₄ 0,5; кукурузный экстракт 2,0; глюкоза в виде . 40%-ного раствора 100 мл) вода дистиллированная 900 мл, pH 7,0-7,1.

Культуру встряхивают при 35+1^еС в течение 7 дней на круговой качалке при 150 об/мин. 100 мл культуры подщелачивают 10%-ным аммиаком до pH 8-9 и экстрагируют хлороформом прививки 100 мл питапомещенной в колбу 500 мл.

среда имеет следую1в соотношении с фильтратом ίι3. Хлороформенные экстракты наносят для разделения натколонку с силикагелем марки ЛС 100/160 м в соотношении 1:50. Элюируют алкалоид из колонки этилацетатом.

Вещество кристаллизуют в гексане. Количество выделяемого алкалоида определяют весовым методом. Полное содержание алкалоида в культуре составляет 50-100 мг/л.

П р и м е р 2. Штамм и жидкая питательная среда те же, что в примере 1.

Из пробирки культуру используют для прививки шести колб Эрленмейера на 750 мл, содержащих по 20 мл питательной среды Люкнера с кукурузным экстрактом. Культуру выращивают 24 ч на круговой качалке. После этого 1,2л полученного таким образом материала используют для инокуляции 40 л питательной среды, помещенной в 100-литровый ферментер. Ферментацию культуры проводят в течение 72 ч при 35+1^вС при перемешивав нии 400 об/мин и насыщении воздухом со' скоростью. 2 л/мин. Содержание сухой биомассы достигает 5-6 г/л. Количество алкалоида в культуре 10-20 мг/л.

Предложенный штамм позволяет продуцировать новые алкалоиды фенилтиазо. лового ряда, обладающие биологической активностью.

Claims

Отношение к углеводам. Сбраживае глюкозу, галактозу, левулезу. Усваивает слабо сахарозу, хорошо - манн мальтозу, глицерин. Крахмал не гидролизует ,клетчатку не разлагает. Же латину разжижает послойно через 7 сут. На картофеле рост обильный, пигментаци зеленовато-син . Молоко пептонизирует полностью без изменени реакций среды. Сероводород и индол на белковых средах не образует. Нитраты восстанавливает. Культура образует новый алкалоид обладающий биологической активность ис-снаОН П р и м. е р 1. Суточную культуру выращенную на скошенном м со-пептон ном или nenTOHHo-KyKypy3HONr агаре пересевают петлей в пробирку с жид .кой питательной средой того же состава . Через 16-18 ч роста культуру используют дл прививки 100 мл пита тельной среды, помещенной в колбу Эрленмейера на 500 мл. Питательна среда имеет следующий состав, г/л: лактат аммони (40 19,0) .1,0; MgSOij. 0,5; кукуруз ный экстракт 2,Ь, глюкоза в виде 40%-ного раствора 100 мл , вода дистиллированна 900 мл, рН 7,0-7,1. Культуру встр хивают при в течение 7 дней на круговой качалке при 150 об/мин. 100 мл культу ры подщелачивают 10%-ным аммиаком до рН 8-9 и экстрагируют хлороформом IB соотношении с фильтратом . Хлороформенные зкстракты нанос т дл разделени нат-колонку с силикагелём марки ЛС 100/160 м в соотношении Ii50. Элюируют алкалоид из колонки зти адетатом. Вещество кристаллизуют в гексане. Количество выдел емого алкалоида определ ют весовым методом. Полное содержание алкалоида в культуре составл ет 50-100 мг/л. П р и м е р
2. Штамм и жидка питательна среда те же, что в примере 1. Из пробирки культуру используют дл прививки шести колб Эрленмейера на 750 мл, содержащих по 20 мл питательной среды Люкнера с кукурузным экстрактом. Культуру выращивают 24 ч на круговой качалке. После этого 1,2л полученного таким образом материала используют дл инокул ции 40 л питательоюй среды, помещенной в 100-литровый ферментер. Ферментацию культуры провод т в течение 72 ч при при перемешивании 400 об/мин и насыщении воздухом СО скоростью. 2 л/мин. Содержание сухой биомассы достигает 5-6 г/л. Количество алкалоида в культуре 10-20 мг/л. Предложенный штамм позвол ет продуцировать новые алкалоиды фенилтиазо. лового р да, обладающие биологической активностью. Формула изобретени Штамм Pseudomonas aeruginosa 590, 1650 (коллекци культур микроорганизмов ВНИИА) - продуцент алкалоида фенилтиазолового р да;