SU872547A1 - Способ культивировани клеток - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК

1

Изобретение относитс  к технике культивировани  тканевых клеток животных и человека и может найти применение в медицине, сельском хоз йстве, вирусологии, онкологии дл  получени  клеточной биомассы в производстве биологически активных препаратов, вакцин и сывороток.

Известен способ культивировани  клеток с помощью микроносителей на ос-.. нове полимерного материала UJ.

Однако высокие концентрации микроносител  ингибируют рост клеток и способ не обеспечивает высокого выхода целевого продукта.U

Целью изобретени   вл етс  повышение выхода целевого продукта.

Цель достигаетс  тем, что согласно способу культивировани  клеток с помощью микроносителей, в качестве микроносителей используют частицы сополимера стирола с дивинилбенЭОЛОМ, рокрытые коллагеном.

П р и м е р. Дл  опыта используют клетки ВМК-21 (культура клеток из почек однодневных сирийских хом ков). В качестве микроносителей дл  культивировани  используют сополимер стирола с 8%-ным дивинилбензолом. Микроносители диаметром 0,1-0,8 мм дважды кип т т в бидистилл те. После этого выдерживают в течение 5-10 мин в 1Х-ном растворе коллагена; удалив излишек раствора коллагена, провод т полимеризацию покрыти  в течение 2 ч при комнатной температуре и затем автоклавируют в растворе Хенкса при 0,5 атм в течение 1 ч. Дл  культивировани  клеток используют среду Игла с 10% бычьей сыворотки. В чашки Карелл  внос т 15 мл питательной среды и 1 г микроносител . Посевна  концентраци  клеток составл ет 500 тыс. клеток на 15 мл питательной среды. Услови  культивировани : рН среды 7,0; Т 37 С. Общий выход клеток через 6 дней составл ет 70 млн.

При использовании в качестве микро носителей частиц сополимера стирола с 8%-ным дивинилбенэолом, покрытых коллагеном возможно культивирование клеток при концентрации 1 г микроносителей на 15 мл питательной среды.

При использовании микроносителей типа Cytodex с концентрацией 1 Микроносител  на 200-500 мл питательной среды выход культивируемых клеток составл ет 210, при этом поверхность i на которой закрепл ютс  клетки j составл ет 0,6 повышение концентрации микроносителей инги1бирует рост клеток. При использовании сополимера стирола с 8%-ным дивинилбенэолом S том же объеме питательной среды (200-500. мл) выход культивируемых клеток составл ет 6-10, ,что в раза выше, чем при культивирова- . НИИ на микроносител х типа Cytodex,

а поверхность, на которой закрепл ютс  клетки, составл ет 1,8 м.

Предложенный способ позвол ет значительно увеличить выход целевого продукта.

Claims (1)

1. Формула изовретени 

   Способ культивировани  клеток с помощью микроносителей, отличающийс  тем, что, с целью пвышени  выхода целевого продукта, в качестве микроносителей используют частицы сополимера стирола с дивинилбензолом , покрытые коллагеном.

   Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе

   I, Levlne D.W. et all. Homogenius Guttlvatlon of anfmal cells for the production of virus and virus produc Biotechnology and Bloengineering, N II, 1969 pp. 875-885.