CN110358685A - 一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用，具体涉及微生物环境保护领域，具体包括以下步骤：步骤一、底泥采集与分类：从需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，采集时需要采集表层的底泥、中层的底泥以及底层的底泥，表层的底泥采集的深度设置为3‑5cm，采集量设置为50‑70g，中层的底泥采集的深度为设置7‑9cm，采集量为设置50‑70g。本发明通过对不同深度和温度的底泥进行氮转化微生物的培养，同时检测出其在不同环境下对河道的治理效果，有效的提升了培养土著氮转化微生物的质量和效率，提升了对水体氨氮污染的治理效果，根据该河道的实际环境因素培养出相适应的土著氮转化微生物，进行对应性治理。

Description

一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用
技术领域
本发明涉及微生物环境保护技术领域，更具体地说，本发明涉及一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用。
背景技术
工农业生产和生活向水体排放大量的营养盐，从而导致水体富营养化。这是我国水环境面临的最严峻问题之一。
专利申请公布号CN104862257B的发明专利公开了一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用，属于环境微生物学和环境保护领域。从需要治理的水体中采集环境样品，用特定的富集培养基进行培养得到土著氮转化微生物富集培养物种子；将富集培养物种子、富集培养基加入到原位水样中进行扩大培养，再将扩大培养的富集培养物种子施用到水体，以治理水体氨氮污染。该发明通过对原位样品进行富集放大的方法获得高效土著氮转化微生物，比一般商品菌剂更具有针对性，也避免了外来菌剂对该水体的适应性及生态安全隐患。该发明通过人工可控的条件进行富集，保证了高效土著氮转化微生物的快速生长，比直接向水体添加促生剂效果更为稳定，也没有二次污染的风险。
但是上述技术方案在实际运用时，仍旧存在较多缺点，如该发明在使用过程中没有了解到不同环境影响土著氮转化微生物的培养，进而影响培养的质量和效率。
发明内容
为了克服现有技术的上述缺陷，本发明的实施例提供一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用，通过将需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，同时对河道底层的温度进行检测，然后进行混合处理，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，之后进行3-5次的转接培养获得转化基体，可以对不同深度和温度的底泥进行氮转化微生物的培养，同时检测出其在不同环境下对河道的治理效果，有效的提升了培养土著氮转化微生物的质量和效率，提升了对水体氨氮污染的治理效果，根据该河道的实际环境因素培养出相适应的土著氮转化微生物，进行对应性治理。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种土著氮转化微生物富集培养的方法，具体包括以下步骤：
步骤一、底泥采集与分类：从需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，采集时需要采集表层的底泥、中层的底泥以及底层的底泥，表层的底泥采集的深度设置为3-5cm，采集量设置为50-70g，中层的底泥采集的深度为设置7-9cm，采集量为设置50-70g，底层的底泥采集的深度设置为11-13cm，采集量设置为50-70g，同时对河道底层的温度进行检测；
步骤二、底泥存储：分别将步骤一中采集的底泥放入试管中，添加治理河道的水，之后放入到存放箱内部进行存储，存放箱内部的温度与河道底层温度相同；
步骤三、培养物的测试：将步骤二中的各个试管中的底泥分被提取10-12g，水量提取20g中，分成四组进行试验，对试验的各个底泥和水中的氨氮含量进行检测，将检测数据存档，之后将试验的底泥和水放入到培养管中，添加微生物制剂制得一定量氮转化微生物，然后将培养管放入到离心机内部进行混合处理；
步骤四、微生物环境控制：之后将试验的试管放入到培养箱中，对培养箱内部的温度和湿度进行环境控制，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，将此次检测数据与原始检测数据进行对比，从而对不同环境下的氮转化微生物对不同深度下和不同位置的底泥和水的氨氮转化率；
步骤五、富集培养：之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，之后放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度控制为17-19℃，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，继续放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度同样控制为17-19℃，之后进行3-5次的转接培养获得转化基体；
步骤六、提升培养量：将步骤五中的转化基体放入到培养罐中，添加相应的营养盐和微生物促生剂，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，通过调节培养罐内部的温度、湿度、营养盐浓度、氧气浓度和微生物促生剂浓度，采用精细化处理，培养土著氮转化微生物，之后对产生的二次污染进行处理，之后将培养出的土著氮转化微生物投放到采集的治理河道河水中进行测试。
在一个优选地实施方式中，所述步骤一中对河道底层的温度24小时的全天候监测，通过对河道的水流速度和内部的其他污染物进行有效的检测，从而测试出该河道对氮转化微生物的影响因素。
在一个优选地实施方式中，所述步骤二中添加治理河道的水，每个试管内部分别添加100g的河水。
在一个优选地实施方式中，所述步骤三中培养管放入到离心机内部进行混合处理的时间设置为15-18s。
在一个优选地实施方式中，所述步骤五中进行测试时，对不同温度的河水进行氮转化率检测，从而检测出在适应的投放时间。
一种土著氮转化微生物富集培养得到的富集培物在氨氮治理中的应用，具体步骤如下：
步骤一、采集0.1g土著氮转化微生物投放在治理河水的水中，之后增加水量，之后对氮含量进行检测，从而测试出氮转化率，继而测试出适宜的投放比例；
步骤二、按照步骤一中的投放比例相应量的经过培养罐中大规模的培养的土著氮转化微生物在经过检测的适应的投放时间投放在需要治理的河道中即可
在一个优选地实施方式中，所述步骤一中对氮含量进行检测时，每添加50kg的水，检测一次氮含量，从而检测出土著氮转化微生物的转化率。
本发明的技术效果和优点：
1、通过将需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，同时对河道底层的温度进行检测，对试验的各个底泥和水中的氨氮含量进行检测，添加微生物制剂制得一定量氮转化微生物，然后进行混合处理，之后将试验的试管放入到培养箱中进行环境控制，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，之后放入到离心机内部进行混合处理，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，之后进行3-5次的转接培养获得转化基体，可以对不同深度和温度的底泥进行氮转化微生物的培养，同时检测出其在不同环境下对河道的治理效果，有效的提升了培养土著氮转化微生物的质量和效率，提升了对水体氨氮污染的治理效果，根据该河道的实际环境因素培养出相适应的土著氮转化微生物，进行对应性治理；
2、将转化基体放入到培养罐中，添加相应的营养盐和微生物促生剂，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，通过调节培养罐内部的温度、湿度、营养盐浓度、氧气浓度和微生物促生剂浓度，采用精细化处理，培养土著氮转化微生物，之后对产生的二次污染进行处理，之后将培养板出的土著氮转化微生物投放到采集的治理河道河水中进行测试，进行测试时，对不同温度的河水进行氮转化率检测，从而检测出在适应的投放时间，有效的提升了大规模培养土著氮转化微生物的培养效率，同时进行小规模试验，对转化率进行检测，有效提升了土著氮转化微生物治理水体氨氮污染的安全性。
具体实施方式
下面将结合本发明中的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种土著氮转化微生物富集培养的方法，具体包括以下步骤：
步骤一、底泥采集与分类：从需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，采集时需要采集表层的底泥、中层的底泥以及底层的底泥，表层的底泥采集的深度设置为3cm，采集量设置为50g，中层的底泥采集的深度为设置7cm，采集量为设置50g，底层的底泥采集的深度设置为11cm，采集量设置为50g，同时对河道底层的温度进行检测；
步骤二、底泥存储：分别将步骤一中采集的底泥放入试管中，添加治理河道的水，之后放入到存放箱内部进行存储，存放箱内部的温度与河道底层温度相同；
步骤三、培养物的测试：将步骤二中的各个试管中的底泥分被提取10g，水量提取20g中，分成四组进行试验，对试验的各个底泥和水中的氨氮含量进行检测，将检测数据存档，之后将试验的底泥和水放入到培养管中，添加微生物制剂制得一定量氮转化微生物，然后将培养管放入到离心机内部进行混合处理；
步骤四、微生物环境控制：之后将试验的试管放入到培养箱中，对培养箱内部的温度和湿度进行环境控制，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，将此次检测数据与原始检测数据进行对比，从而对不同环境下的氮转化微生物对不同深度下和不同位置的底泥和水的氨氮转化率；
步骤五、富集培养：之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，之后放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度控制为17℃，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，继续放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度同样控制为17℃，之后进行3次的转接培养获得转化基体；
步骤六、提升培养量：将步骤五中的转化基体放入到培养罐中，添加相应的营养盐和微生物促生剂，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，通过调节培养罐内部的温度、湿度、营养盐浓度、氧气浓度和微生物促生剂浓度，采用精细化处理，培养土著氮转化微生物，之后对产生的二次污染进行处理，之后将培养出的土著氮转化微生物投放到采集的治理河道河水中进行测试。
实施例2：
一种土著氮转化微生物富集培养的方法，具体包括以下步骤：
步骤一、底泥采集与分类：从需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，采集时需要采集表层的底泥、中层的底泥以及底层的底泥，表层的底泥采集的深度设置为4cm，采集量设置为60g，中层的底泥采集的深度为设置8cm，采集量为设置60g，底层的底泥采集的深度设置为12cm，采集量设置为60g，同时对河道底层的温度进行检测；
步骤二、底泥存储：分别将步骤一中采集的底泥放入试管中，添加治理河道的水，之后放入到存放箱内部进行存储，存放箱内部的温度与河道底层温度相同；
步骤三、培养物的测试：将步骤二中的各个试管中的底泥分被提取11g，水量提取20g中，分成四组进行试验，对试验的各个底泥和水中的氨氮含量进行检测，将检测数据存档，之后将试验的底泥和水放入到培养管中，添加微生物制剂制得一定量氮转化微生物，然后将培养管放入到离心机内部进行混合处理；
步骤四、微生物环境控制：之后将试验的试管放入到培养箱中，对培养箱内部的温度和湿度进行环境控制，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，将此次检测数据与原始检测数据进行对比，从而对不同环境下的氮转化微生物对不同深度下和不同位置的底泥和水的氨氮转化率；
步骤五、富集培养：之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，之后放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度控制为18℃，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，继续放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度同样控制为18℃，之后进行4次的转接培养获得转化基体；
步骤六、提升培养量：将步骤五中的转化基体放入到培养罐中，添加相应的营养盐和微生物促生剂，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，通过调节培养罐内部的温度、湿度、营养盐浓度、氧气浓度和微生物促生剂浓度，采用精细化处理，培养土著氮转化微生物，之后对产生的二次污染进行处理，之后将培养出的土著氮转化微生物投放到采集的治理河道河水中进行测试。
实施例3：
一种土著氮转化微生物富集培养的方法，具体包括以下步骤：
步骤一、底泥采集与分类：从需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，采集时需要采集表层的底泥、中层的底泥以及底层的底泥，表层的底泥采集的深度设置为5cm，采集量设置为70g，中层的底泥采集的深度为设置9cm，采集量为设置70g，底层的底泥采集的深度设置为13cm，采集量设置为70g，同时对河道底层的温度进行检测；
步骤二、底泥存储：分别将步骤一中采集的底泥放入试管中，添加治理河道的水，之后放入到存放箱内部进行存储，存放箱内部的温度与河道底层温度相同；
步骤三、培养物的测试：将步骤二中的各个试管中的底泥分被提取12g，水量提取20g中，分成四组进行试验，对试验的各个底泥和水中的氨氮含量进行检测，将检测数据存档，之后将试验的底泥和水放入到培养管中，添加微生物制剂制得一定量氮转化微生物，然后将培养管放入到离心机内部进行混合处理；
步骤四、微生物环境控制：之后将试验的试管放入到培养箱中，对培养箱内部的温度和湿度进行环境控制，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，将此次检测数据与原始检测数据进行对比，从而对不同环境下的氮转化微生物对不同深度下和不同位置的底泥和水的氨氮转化率；
步骤五、富集培养：之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，之后放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度控制为19℃，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，继续放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度同样控制为19℃，之后进行5次的转接培养获得转化基体；
步骤六、提升培养量：将步骤五中的转化基体放入到培养罐中，添加相应的营养盐和微生物促生剂，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，通过调节培养罐内部的温度、湿度、营养盐浓度、氧气浓度和微生物促生剂浓度，采用精细化处理，培养土著氮转化微生物，之后对产生的二次污染进行处理，之后将培养出的土著氮转化微生物投放到采集的治理河道河水中进行测试。
实施例4：
一种土著氮转化微生物富集培物在氨氮治理中的应用，具体步骤如下：
步骤一、采集0.1g土著氮转化微生物投放在治理河水的水中，之后增加水量，之后对氮含量进行检测，从而测试出氮转化率，继而测试出适宜的投放比例；
步骤二、按照步骤一中的投放比例相应量的经过培养罐中大规模的培养的土著氮转化微生物在经过检测的适应的投放时间投放在需要治理的河道中即可。
实施例5：
分别取上述实施例1-3所制得的土著氮转化微生物投放在需要治理的河道内部，使用3天后，得到以下数据：
由上表可知，实施例2中的氮转化微生物治理效果较好，速度较多，通过将需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，同时对河道底层的温度进行检测，然后进行混合处理，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，之后进行3-5次的转接培养获得转化基体，可以对不同深度和温度的底泥进行氮转化微生物的培养，同时检测出其在不同环境下对河道的治理效果，有效的提升了培养土著氮转化微生物的质量和效率，提升了对水体氨氮污染的治理效果，根据该河道的实际环境因素培养出相适应的土著氮转化微生物，进行对应性治理。
最后：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种土著氮转化微生物富集培养的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
步骤一、底泥采集与分类：从需要治理河道的水体中分别对中部和两侧位置进行底泥采集，采集时需要采集表层的底泥、中层的底泥以及底层的底泥，表层的底泥采集的深度设置为3-5cm，采集量设置为50-70g，中层的底泥采集的深度为设置7-9cm，采集量为设置50-70g，底层的底泥采集的深度设置为11-13cm，采集量设置为50-70g，同时对河道底层的温度进行检测；
步骤二、底泥存储：分别将步骤一中采集的底泥放入试管中，添加治理河道的水，之后放入到存放箱内部进行存储，存放箱内部的温度与河道底层温度相同；
步骤三、培养物的测试：将步骤二中的各个试管中的底泥分被提取10-12g，水量提取20g中，分成四组进行试验，对试验的各个底泥和水中的氨氮含量进行检测，将检测数据存档，之后将试验的底泥和水放入到培养管中，添加微生物制剂制得一定量氮转化微生物，然后将培养管放入到离心机内部进行混合处理；
步骤四、微生物环境控制：之后将试验的试管放入到培养箱中，对培养箱内部的温度和湿度进行环境控制，之后对试管内部的底泥和水进行二次氨氮检测，将此次检测数据与原始检测数据进行对比，从而对不同环境下的氮转化微生物对不同深度下和不同位置的底泥和水的氨氮转化率；
步骤五、富集培养：之后分别提取试管内部的底泥，然后将其转接到氮转化微生物的富集培养基中，之后放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度控制为17-19℃，然后将培养物转接到新鲜的富集培养基中，继续放入到离心机内部进行混合处理，同时对离心时的温度进行有效控制，温度同样控制为17-19℃，之后进行3-5次的转接培养获得转化基体；
步骤六、提升培养量：将步骤五中的转化基体放入到培养罐中，添加相应的营养盐和微生物促生剂，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，通过调节培养罐内部的温度、湿度、营养盐浓度、氧气浓度和微生物促生剂浓度，采用精细化处理，培养土著氮转化微生物，之后对产生的二次污染进行处理，之后将培养出的土著氮转化微生物投放到采集的治理河道河水中进行测试。
2.根据权利要求1所述的一种土著氮转化微生物富集培养的方法，其特征在于：所述步骤一中对河道底层的温度24小时的全天候监测，通过对河道的水流速度和内部的其他污染物进行有效的检测，从而测试出该河道对氮转化微生物的影响因素。
3.根据权利要求1所述的一种土著氮转化微生物富集培养的方法，其特征在于：所述步骤二中添加治理河道的水，每个试管内部分别添加100g的河水。
4.根据权利要求1所述的一种土著氮转化微生物富集培养的方法，其特征在于：所述步骤三中培养管放入到离心机内部进行混合处理的时间设置为15-18s。
5.根据权利要求1所述的一种土著氮转化微生物富集培养的方法，其特征在于：所述步骤五中进行测试时，对不同温度的河水进行氮转化率检测，从而检测出在适应的投放时间。
6.使用权利要求1-5任意一项所述的土著氮转化微生物富集培养得到的富集培物在氨氮治理中的应用，其特征在于：具体步骤如下：
步骤一、采集0.1g土著氮转化微生物投放在治理河水的水中，之后增加水量，之后对氮含量进行检测，从而测试出氮转化率，继而测试出适宜的投放比例；
步骤二、按照步骤一中的投放比例相应量的经过培养罐中大规模的培养的土著氮转化微生物在经过检测的适应的投放时间投放在需要治理的河道中即可。
7.根据权利要求6所述的一种土著氮转化微生物富集培物在氨氮治理中的应用，其特征在于：所述步骤一中对氮含量进行检测时，每添加50kg的水，检测一次氮含量，从而检测出土著氮转化微生物的转化率。
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