SU854936A1

SU854936A1 - Способ получени агарозы

Info

Publication number: SU854936A1
Application number: SU792782436A
Authority: SU
Inventors: Юрис Петрович Эглитис; Ивар Исакович Брод; Игорь Константинович Шнитко; Сергей Михайлович Малей; Мара Артуровна Силе
Original assignee: Предприятие П/Я Г-4740
Priority date: 1979-06-19
Filing date: 1979-06-19
Publication date: 1981-08-15

Description

1

Изобретение относитс к химической технологии, в частности к получению агарозы, наход щей широкое применение в биохимической и микробиологической промышленности, и в виде гел в научных исследовани х в об ласти генетики, биологии, микробиологии , биохимии, медицине. Б промыш- . ленности агароза примен етс в качестве матрицы дл получени ионооб 4енных материалов и сорбентов.

Известен способ получени агарощы осаждением агаропектина алкилполиэтиленгликольаминами 13

Недостатком данного способа вл етс низкий выход целевого продукта .

Наиболее близким к предлагаемому вл етс способ получени агарозы, включающий разделение агарозы и агаропектина адсорбцией последнего нерастворимыми адсорбентами. Способ позвол ет получить наиболее высокий выход агарозы - 60%.

Агарозу получают следующим образом . .100 г агара раствор ют при кип чении и перемешивании в деминерализованной воде до концентрации агара 1,5%. К прозрачному гор чему раствору агара добавл ют гель

Гидроокиси алюмини . Объемное соотношени гель гидроокиси алюмини : раствор агара 1,0:4,0. Суспензию перемешивают по крайней мере в течение 10 мин. Гель гидроокиси алюмини отдел ют от гор чего раствора центрифугированием на лабораторной стаканчиковой центрифуге при числе оборотов ротора 2500 об/мин, что

10 соответствует фактору разделени 1100. Прозрачный фугат сливают с осадка гел гидроокиси алюмини и охлаждают; При этом образуетс гель агароэы. Гель агарозы промывают и

15 сушат ацетоном. Получают 60 г .Агарозы . Выход агарозы 60%. Относительный электроосмос агарозы 0,15 ,

Недостатком этого способа вл 20 етс низкий выход агарозы - 60% от количества агара, так как часть , макромолекул агарозы при адеорб-ции агаропектина на геле гидроокиси алюмини св зываетс с части25 цами гел силами адгезии и уиоситс с адсорбентом при разделении суспензии . Нар ду с этим часть макромолекул подвергаетс деструкции (механический разрыв) и при цент30 рифугировании с фактором разделени выше 1000 и не выдел етс в виде целевого, продукта.

Цель изобретени - повышение выхода целевого продукта.

Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу получени агарозы из водного раствора агара адсорбцией агаропектина на геле гидроокиси алюмини с последующим разделением суспензии адсорбата центрифугированием и выделением агарозы, адсорбцию агаропектина провод т на смеси двуокиси кремни с размером частиц 5-100 мкм и гел гидроокиси алюмини при весовом соотношении О,2-1,Oil,0-1,4 соответственно , а центрифугирование провод т с фактором разделени 700-900

Адсорбцию провод т при объемном соотношении смеси двуокиси кремни и гел гидроокиси алюгда ни и раствора агара 1,0-1,2:2,8-3,2 соответственно .

Объемное соотношение.смеси гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни : раствор агарозы 1,0-1,2:2,8-3,2 дает возможность осуществить селективную адсорбцию агаропектина по всему объему раствора. Деструкци макромолекул агарозы в растворе при разделении суспензии адсорбента исключаетс за счет проведени центрифугировани при факторе разделени 700-900. При этом факторе..образуетс ламинарный поток фугата относительно осадка. Ламинарным потоком устран етс образование сильных гидродинамических сдвигов, привд щих к деструкции макромолекулы агарозы. Таким образом, способ заключаетс в том, что 100 г агара раствор ют при -кип чении и перемешивании в деминерализованной воде до концентрации агара 1,5%. К прозрачному гор чему раствору агара добавлют гомогенизированную, при механическом перемешивании, смесь гел гидроокиси алюмини и двуокиси крем ни . Весовые соотношени двуокись кремни :гель, гидроокиси алюмини 0,,0:1, 0-1,4, Объемные соотношени смесь двуокиси кремни и гел гидроокиси алюмини :раствор агара 1,0-1,2:2,8-3,Т. Размер частиц двуокиси кремни 5-100 мкм. Суспензию смеси гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни в растворе агарозы перемешивают в течение 10 мин. Смесь гел гидроокиси алюмини и двокиси кремни отдел ют от гор чего раствора агарозы центрифугированием в осадительном режиме. Фактор разделени при центрифугировании 700900 , Прозрачный фугат сливают с осадка смеси гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни и охлаждаю При этом образуетс гель агарозы.. Гель агарозы промывают и сушат ацетоном . Получают агарозы 85 г. Выход

агарозы 85%. Относительный электроосмос агарозы 0,15.

.Пример 1.. 100 г агара загружают в 30-ти литровую эмалированную емкость, заливают 14 л деминерализованной воды и нагревают п перемешивании механической мешалкой на вод ной бане до полного растворени агара (1 ч при нагреваний до 80-85°с).,- После этого к раствору при перемешивании добавл ют 5 л смеси гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни . Весовые соотношени двуокись кремни :гель гидроокиси алюмини 0,2:1,0. Размер частиц .двуокиси кремни 60-100 мкм. Смесь добавл ют таким образом, чтобы температура суспензии не опускалась ниже 65-70°С. После добавлени - всего количества смеси довод т темпера/туру до и инкубируют при этой температуре в течение 10 мин. Смесь гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни с адсорбированным агаропектином (адсорбат) отдел ют от раствора агарозы центрифугированием в осадительном режиме при факторе рделени 900.. Прозрачный фугат сливают с осадка смеси гел гидроокиси :алюмини и двуокиси кремни с адсорбированным агаропектином и охлаждают . При этом образуетс агарозы . Агарозу прО1УЫвают деминерализованной водой. После этого целевой продукт сушат ацетоном. Получают 17 агарозы, выход 85%. Относительный электроосмос агарозы 0,15.

Пример 2. 200 г агара загружают в 30-ти литровую эмалированную емкость, заливают 14 л деминерализованной воды и нагревают при перемешивании механической мешалкой на вод ной бане до полного растворени аПгара (1 ч при нагревании до 80-85С). После этого к раствору при перемешивании добавл ют 4,8л смеси гел гидроокиси алюмини и двуок-иси кремни . Весовые соотношени двуокись кремни :гель гидроокиси алюмини 1,0:1,0. Размер чатиц двуокиси кремни 5-100мкм. После добавлени смеси довод т температуру до 80°С и инкубируют при .этой температуре в течение 10 мин. Смесь гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни с адсорбированным агаропектином {адсорбат) отдел ют от раствора агарозы центрифугированием при факторе разделени 700.

Прозрачный фугат сливают с осадка адсорбата и охлаждают. При этом образуетс гель агарозы. Агарозу промывают деминерализованной водой сушат ацетоном Получают 167 г агарозы , выход 83,5%. относительный электроосмос агарозы 0,15

Claims

Пример 3. 100 г агара раствор ют при нагревании до 80-85 С в 14 л воды. К раствору при перемешивании добавл ют 5 л смеси гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремНИН . Весовые соотношени двуокись кремни :гель гидроокиси алюмини 0,2:1,4. Объемные соотношени смесь двуокиси кремни и гел гидроокиси алюмини :раствор агара 1,0:2,8. Размер частиц двуокиси кремни 60-100 мкм. Смесь добавл ют при тем пературе не ниже 65-70 С. После добавлени инкубируют смесь при в течение 10 мин. Смесь гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни с адсорбированным агропектином отдел ют от раствора агарозы центрифугированием в осадительном режиме .при факторе разделени 900. Прозрачный фугат сливают с осадка гел гидроокиси алюмини и двуокиси кремни с адсорбированным агаропектином и охлаждают. При этом образуетс гель агарозы. Агарозу сушат ац тоном. Получают 166 г агарозы, выхо 83%. Относительный электроосмос ага розы 0,15. Пример 4. 100 г агара раст вор ют при нагревании до 80-85°С в 14 л воды. К-раствору при перемеши вании добавл ют 5,2 л смеси гел гидроокиси алюмини и двуокиси крем ни . Весовые соотношени двуокись кремни :гель гидроокиси алюмини 0,2:1,0. Объемные (соотношени смесь .двуокиси кремни и гел гидроокиси алюмини :раствор агара 1,2:3,2. Раз 1мер частиц двуокиси кремни бО-100м Смесь инкубируют при ВОС в течение 10 мин и отдел ют адсорбат на центрифуге при факторе разделени 900. Фугат сливают и охлаждают дл образовани гел агарозы. Агарозу промывают водой и сушат ацетоном. Полу чают 160 г агарозы, выход 80%. Относительный электроосмос агарозы 0,15. Пример 5. 100 г агара загружают в емкость и раствор ют при нагревании до 80-85 С в 14 л воды.. К раствору при перемешивании добавл ют 5,2л смеси гел гидроокиси ал мини и двуокиси кремни . Объемные соотношени смеси и раствора aqaра 1,2:3,2, Весовые соотношени двуокись кремни :гель гидроокиси алюмини 0,2:1,0. Размер частиц двуокиси кремни 110-600 мкм. Смесь инкубируют при 80С в течение. 10 мин и отдел ют адсорбат на центрифуге при факторе разделени 900. Фугат сливают и охлаждают дл выделени агарозы..Агарозу промывают водой и . сушат ацетоном. Получают .130 г агарозы , выход 65%. Относительный электроосмос агарозы 0,14. Предлагаемый способ дает возможность значительно повысить выход агарозы из агара - с 60% по известному способу до 85% по предлагаемому, обеспечива тем самлм рациональное использование сырь и рабочей силы. Формула изобретени 1.Способ получени агарозы из ВОДНОГО раствора агара адсорбцией агаропектина на геле гидроокиси алюмини с последующим разделением суспензии центрифугированием и выделением агарозы, отличающийс тем, что, с целью повышени выхода целевого продукта, адсорбцию агаропектина провод т на смеси двуокиси кремни с размером частиц 5-100 мкм и гел гидроокиси алюмини при весовом .сЬотноше- НИИ 0,2-1,0:0,1-1,4 соответственно, а центрифугирование провод т с фактором разделени 700-900. 2.Способ ПОП.1, отличающийс тем, что, адсорбцию провод т при объемном соотношении смеси двуокиси кремни и гел гидроокиси алюмини и раствора агара 1,01 ,2:2,8-3,2 соответственно. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1.Патент Чехословакии № 154513, кл. С 07 С, опублик. 1974.
2.S.J. Bartellng. Удобный метод приготовлени агарозы.- ChemIcat Chemistry, 1969, т. 15, 10, с. 1002-1004 (прототип).