SU810718A1 - Способ получени иммобилизованныхфЕРМЕНТНыХ пРЕпАРАТОВ - Google Patents

Description

пнрролидона (ВТП) и аллилтиоглицидилового эфира (АТГЭ) варьируют в широких пределах (т : п) от 1 : 9 до 9 : 1 и таким образом измен ют число групп, способных св зыватьс  с ферментами. Например, смешивают 9,52 г Л-ВТП и 3,25 г аллилтиоглипидилового эфира и к смеси добавл ют 0,055 г динитрила азобисизомасл ной кислоты, растворенные в 1 мл хлороформа, и нагревают 30 час при 65°С. Полученный гелеобразный продукт разбавл ют 25 мл хлороформа и осажда)от добавлением п тикратного количества диэтиЛОИ01-0 эфп|)а. Образовавшийс  осадок высупшвают в вакуумсушильном шкафу. Выход составл ет 65,6%. Анализ на содержание .мономеров в полученном сополимере составл ет ВТП 72,7, АТГЭ 27,3%. Пример 1. К г сополимера ВТП - АТГЭ .юбаьл ют 50 мл ферментного растBOjia (амплоризина Г 10 X), который получают предварительпым растворением 500 мг амилоризина (135 мг по белку) в 50 мл 0,1 М универсал1)ного буфера (М,ВО.,, 11зРО4, СПзСООН, КаОП) при рП 3-4. Смесь тщательно перемешивают и оставл ют ири 4°С в течение 6 час. Полученный целевой продукт отмывают от несв завшегос  белка и продуктов реакции 0,1 М универсальным буферным раствором с рН 8,8. Каждую фракцию исследуют иа иоглошение при 645 им на СФ-16 и па амилолитическую активность (ГОСТ 20264.4-74). Определ ют количество песв завшегос  белка. Затем иммобилизованиый амилоризин Г 10 X п)омывают водой до иолпого исчезновени  оптической плотности в промывной воде. Удельна  активность иммобилизованного ферментного препарата составл ет 10,0 ед/г. Пример 2. К 800 мг сополимера ВТП - АТГЭ .чобавл ют 200 мг амилоризина Г 10 X, предварительно растворенного в 50 мл. буфера. Смееь неремешивают и оставл ют при 4С в течение 6 час. Остальные нроцессы нровод т аналогично примеру 1. У.чельпа  активность иммобилизованного фермента составл ет -7,2 ед/г. Пример 3. К навеске сополимера 1 г добавл ют 50 мл ферментного раствора при рП 5,0, содержащего трипсин (125мг). Смесь тщательно перемешивают и оставл ют при 4°С в течение 12 час. Остальиые операции провод т, как в примере 1. дёльна  активность иммобилизованного трппсина составл ет 16 ед/г. Врем  полуинактивации при 50°С 210 мии. В табл. Г приведены результаты оиисывас гого сиособа и известного ири получении иммобилизованного ферментноГО препарата иа основе амилоризина Г 10 X. обработка дл  активации носителей фС1)МеНТО 5. Например, ири прочих равных услови х стеиспь гидролиза крахмала при 30°С в течение 30 мин составл ет но предлагаемому способу 70%, по известному способу 25%. О преимуществах примененн  иммобилизованных ферментов в конкретных процессах (гидролиз крах.ала, гидролиз нищевого белка) и данные о применении иммобилнзованного амилоризина дл  осахаривани  и иммобилизованного трипснна дл  получени  гидролизата пищевого белка из щрота хлопчатника приведены в табл. 3. Ф о ) м у л а изобретен и   1. Способ получени  нммобилизованныч ферментных препаратов на основе ферментов или ферментных препаратов св зывашкм lix с полимером на основе производного -ги1нилпирролидона и эфнра глици .чплового спирта при ионижеиной температуре II оптпмальном значении рЫ среды, о т .1 и ч а ю щ и и с   тем, что, с целью увеличени  активности и новыщени  стабильности препарата, в качестве полимера используют сополимер М-винилтионнр|юлндона и аллилтиоглицидилового эфира, а св зывание провод т при 4-б°С. 2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю ш и и с   тем, что св зывание провод т прн весовом соотношении фер:,1ент или ферментный препарат :нолимер, равном 1 : (2-8). 3.Снособ но п. 1, отличающийс  тем, что в качестве фермента используют трипсин, а св зывание ведут при рН 4,9-5,1. 4.Способ по п. 1, отличаю щ и и с   тем, что в качестве ферментного препарата используют амилоризин Г 10 X, а св зывание провод т при рН 3-4. Источники информации, прин тые во вннмание при эксиертизе 1. Таджиев М. X., Ибрагимов Ф.. Хасанов X. Т., Джанбаева И. Р. и Рахимов М. М. Иммобилизаци  i; стабилизаци  ферментов полимерами с функциональными эноксигруппами. «Ирикладна  биохими  и микробиологи -, М.. «Наука, т. XIV, вып. 5, 1978, с. 703-708 (прототип).

Claims (5)

1. Формула изобретен и я

   1. Способ получения иммобилизованных 2. ферментных препаратов на основе ферментов или ферментных препаратов связыванием их с полимером на основе производного Х’-винилпирролидона и эфира глицидилового спирта при пониженной темпера- 3 туре и оптимальном значении pH среды, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью уве6 личения активности и повышения стабильности препарата, в качестве полимера используют сополимер N-винилтиопирролидона и аллилтиоглицидилового эфира, а свя5 зывание проводят при 4—6°С.
2. 2. Способ по π. 1, отличающийся тем, что связывание проводят при весовом соотношении фермент или ферментный препарат :полимер, равном 1 : (2—8).

   О
3. 3. Способ по π. 1, отличающийся тем, что в качестве фермента используют трипсин, а связывание ведут при pH 4,9-5,1.
4. 4. Способ по π. 1, отличающийся
5. 5 тем, что в качестве ферментного препарата используют амнлорнзип Г 10 X, а связывание проводят при pH 3—4.