SU663714A1

SU663714A1 - Способ получени анатоксина

Info

Publication number: SU663714A1
Application number: SU782574683A
Authority: SU
Inventors: Нина Павловна Ефимова; Алевтина Максимовна Николаева
Original assignee: Пермский Ордена Трудового Красного Знамени Научно-Исследовательский Институт Вакции И Сывороток
Priority date: 1978-01-05
Filing date: 1978-01-05
Publication date: 1979-05-25

Description

I

Изобретение относитс к области ми робиологии и может быть использовано в медицине при получении очшиенного анатоксина .

Известен способ получени анатокси- 5 на путем выращивани культуры СЕвь1гНйИ- , urn p r f ingens на питательной среде, отделени биомассы и стерилизации полученного фильтрата культурал ьной жидкости с последующим осаждением целевого продукта, ю его элюцией, очисткой, обезвреживанием формалином в присутствии U - лизину f сорбцией на гидроокиси алюмини ij.

Однако такой способ не обеспечивает высокой иммуногенной. активности анаток- 15 сина.

Целью изобретени вл етс повышение иммунногенной активности айатоксина.

Это достигаетс тем, что культуру вырашивают на казеиново.41анкреатической то среде, целевой продукт осаждают из фипы рат кУйьТ Шьной жидкое тк coiiaM« jaio рис того натри и цинка и обезвреживание ведут 0,07 ,1253 ным раствором формалина в присутствии О,О125-О,05 М раствора L - лизина.

Способ осуществл ют следуж шим o6U разом.

К стерильному фильтрату культурчы )оегЧmng ensдобавл ют 2О% сухого химически чистого хлористого натри при непдерывном перемешивании раствора. Послеполного растворени соли добавл ют хлористый цинк в виде насыщенного раствора дл того, чтобы конечна концентраци хлористого цинка в центрнфугате со5тавл5й1а 0,4-1%. Осажденный токсин оставл ют на 16-18 час при температуре 4- 1О С. Образовавшийс осадок отдел ют сепарнрованием от маточного раст- Ьора и элюируют 3-4%-ным раствором двухзамевденного фосфата натри . Смесь снова сепарируют, нерастворившуюс часть отбрасывают и елюат фильтруют через колонки с гелем сефааекса Г-75, уравновешен нЬт:-6борно-боратным буфером рН7,1, элюцию активного белка с колонок провод т этим же буфером.

После этого активные фракции объеци н пог, добавл ют L - лизшг в количестве 0,0125 М, формалин в концентрации .0,1%, коррегируют рИ до 7,2-7,3 и провод т обезвреживание при 37°С в течение 20-25 суток. После обезвреживани анатоксин сорбируют на гидроокиси anioмини и используют по известным схемам. Использование предлагаемого способа обеспечивает получение высоксиммуноген ных препаратов, обладающих высокой удель ной активностью. Полученные препараты в 2-3 раза превосход т по удельной и иммуногенной активност м анатоксины, полученные известным способом.

ФopVyлa изобретени

Способ получени анатоксина путем вырашивани культуры CEnStrid-iurn |oerfiHfl fns на питательной среде, отделени биомассы и стерилизации полученного фильтрата культуральной жидкости с .последующим осаждением целевого продукта, , его элюпией, очисткой, обезвреживанием формалином в присутствии Ь -лизина и сорбцией на гидроокиси алюмини , отличающийс тем, что, с целью повышени иммуногенной активности анатоксина , культуру выращивают на казеиновопанкреатической среде, целевой продукт осажда1Ьт из фильтрата культуральной жид-, кости сол ми хлористого натри и цинка и обезвреживание ведут 0,075-0,125%ным раствором формалина в присутствии 0,0125-0,005 М раствора L - лизина.

Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 20 1. дьрап з.месИЫпе бвепсе 21, 1968, с. 379-391.