SU618958A1

SU618958A1 - Способ получени стафилококкового анатоксина

Info

Publication number: SU618958A1
Application number: SU772462395A
Authority: SU
Inventors: Н.П. Ефимова; М.А. Каменева; А.М. Николаева
Original assignee: Пермский Ордена Трудового Красного Знамени Научно-Исследовательский Институт Вакцин И Сывороток
Priority date: 1977-03-14
Filing date: 1977-03-14
Publication date: 1979-03-15

Description

I

Изобретение относитс к области микробиологии и может быть использовано в медицине при получении очищенного сорбированного стафилококкового анатоксина.

Известен способ получени стафилококкового анатоксина путем выращивани продуцента токсина на питательной среде с последующим отделением культуральной жидкости, содержащей токсин, обезвреживанием его формалином и сорбцией целевого продукта на гель гидрата окиси алюмини 1.

Однако известный способ не позвол ет получить препарат с вьтсокой удельной активностью.

,

Цель изобретени - повышение удельной активности анатоксина.

Это достигаетс тем, что культуральную жидкость перед обезвреживанием токсина обрабатывают сол ми хлористого натри и цинка, полученный осадок элюируют раствором двузамешенного фосфата натри , затем элюат фильтруют через гел

сефадекса, а обезвреживание токсина формалином ведут в присутствии L -лизина.

Кроме того, обезвреживание токсина ведут О,О5-.0, раствором формалина в присутствии О;О125 ML -лизина.

Способ осуществл ют следующим образом .

К центрифугату культуры стафилококка добавл ют 2О% сухого химически чистого хлористого натри при непрерывном перемешивании раствора. После полного растворени соли добавл ют хлористый цинк в виде насыщенного раствора с тем, что1бы конечна концентраци хлористого цинка в центрифугате составл ла 0,4-1%. Осажденный токсин оставл ют на 16- 8 ч при 4-10 С. Образовавшийс осадок отдел ют сепарированием от маточного раствора и элюируют 3-4%-ным раствором двузамешенного фосфата натри . Смесь снова сепарируют, нерастворившуюс часть отбрасывают и элюат фильтруют через колонки с гелем сефадекса 6-75, уравновешенного борно-боратным буфером

йИ 7,1, в ю нйэ активного белка с колонок ЕгроЕОД т 9ТНМ же буфером. После ssOi активные фракции обьедин ют, добаш1эк т -Ь .-ЛИЗИН в количестве 0,0125М формалЕН в концёН1рации Oj05- 0,1%, в еависймостн от специфической активности очищевного токсйпа, коррегнруют рН ас -7j2-.7s4 и провод т обезвреживание при 37°С в течение 1О-20 cyroic.

После обезвреживани анагоксин сорШруюу на гидроокись алюмнни и исполь аушт ио известным схемам.

Использование предлагаемого способа обеспечивает получение высокоиммуноген йых препаратов, обладагрщих высокой

удельной активностью. Полученные препараты имеют среднюю удельную активность на 1 мг белкового аэота сред НИИ титр антитоксина в сыворотках иммунизированных кроликов составл ет 7,

Claims

Формула изобретени

1, Способ получени стафилококкового анатоксина путем выращивани продуцента токсина на питательной среде с последующим отделением культуральной жидкости , содержащей токсин, обезвреживанием его формалином и сорбшей целевого ггродукта на гель гидрата окиси алюмини , отличающийс тем, что, с целью повышени удельной активности I анатоксина, культуральную жидкость перед обезвреживанием токсина обрабатывают сол ми хлористого натри л цинка, полученный осадок элюируют раствором двузамещенного фосфата натри , затем элкэат фильтруют через гель сефадекса, а обезвреживание токсина формалином ведут в присутствии L -лизина.
2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и-й с тем, что обезвреживание токсина ведут 0,05-0,1%-ным раствором фopмa шнa в присутствии 0,0125MLлизина ,

Источники информации, прин тые во внимание при Экспертизе

1. Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов. Под ред. С, Г. Дзагурова и Ф. Ф. Резепоча М,, Медицина, 1975, с, 161-163.